Diagnosticum Salmonella erythrocyte vi antigén folyadék. Diagnosticum erythrocyte Salmonella V-antigén

A Diagnosticum Salmonella VI-antigenic reagenskészlet a Salmonella tífusz V-antigénje elleni specifikus antitestek kimutatására szolgál emberi vérszérumban a passzív hemagglutináció (RPHA) reakciójában.

1. A KÉSZLET JELLEMZŐI

2.1. A módszer elve.

A Diagnosticum Salmonella VI-antigenic hatóanyaga a V-antigén, amely az eritrociták felszínén rögzül. A Vee antigén elleni antitesteket tartalmazó szérumokkal való kölcsönhatás során az eritrocita agglutináció jelensége figyelhető meg.

2.2. A KÉSZLET ÖSSZETÉTELE

Reagensek	Mennyiség
Diagnosticum erythrocytic Salmonella V-antigén folyadék- Vi-antigén Salmonella tífusz birka eritrociták formalinizált és szenzitizált 1%-os szuszpenziója foszfát pufferoldatban (pH 7,2) + 0,2; koncentráció 0,06 mol/l). Barna színű homogén szuszpenzió pelyhek nélkül; ülepedéskor 2 réteg képződik: sűrű, barna vörösvértest-üledék és átlátszó sárgás felülúszó	1 üveg - 6 ml
A szérum diagnosztikai szalmonella adszorbeált Vee receptora száraz — homogén massza a barnás árnyalatú fehértől a bézsig	1 üveg - 0,1 ml-től
1%-os formalizált, nem szenzitizált birka vörösvértestek szuszpenziója- barna színű homogén szuszpenzió pelyhek nélkül; ülepedéskor 2 réteg képződik: sűrű, barna vörösvértest-üledék és átlátszó sárgás felülúszó	1 fiola -
Oldat a szérum hígításához és az RPHA beállításához - A 0,9%-os nátrium-klorid oldat tiszta, színtelen folyadék, pH 6,5-7,5	2 palack - egyenként 8 ml
Kerek fenekű lemez az egyszeri immunológiai reakciókhoz — 8 sorból áll, amelyek mindegyike 12 lyukat tartalmaz átlátszó, színtelen, kerek aljú	1 db PC

1. ELEMZÉSI ÉS DIAGNOSZTIKAI JELLEMZŐK.

3.1. A Diagnosticumot RPHA-ban kell agglutinálni a Salmonella diagnosztikai adszorbeált receptor B száraz szérumával, legalább 1:160 hígításban.

Az egészséges emberek vérszérumának diagnosztikai jellemzőinek feltételes szintjét a szérum 1:20-nál nem magasabb hígításának kell tekinteni.

3.2. Az elemzés ideje 2 óra.

3.3. A készlet 8 definícióra készült.

1. ELŐVIGYÁZATOSSÁGI INTÉZKEDÉSEK

A készlettel végzett munka során be kell tartania a „A tervezésre, a biztonsági óvintézkedésekre, az ipari higiéniára, a járványellenes rendszerre és a személyes higiéniára vonatkozó szabályokat, amikor a minisztérium egészségügyi és járványügyi intézményeinek laboratóriumaiban (osztályaiban, osztályaiban) dolgozik. A Szovjetunió egészsége (M., 1981).

Az elemzett szérumokat, valamint a velük érintkező reagenseket potenciálisan fertőzőnek kell tekinteni, amely képes a HIV, hepatitis vírus vagy bármely más vírusfertőzést okozó kórokozó hosszú távú tárolására vagy átvitelére - óvatosan kell kezelni :

• gumikesztyűben dolgozni;
• pipettázáskor automatikus pipetták használata szükséges;
• a munka végén a vizsgált szérumokat és a velük érintkező reagenseket, a műszereket fertőtlenítő oldattal kell kezelni
• Törölje le a berendezést munka előtt és után 70%-os etil-alkohollal.

Az elemzett szérumokat 56 0 C-on 30 percig inaktiválni kell.

A diagnosztikai szalmonella adszorbeált Vee receptort tartalmazó száraz inaktivált szérum a készletben.

Az objektív elemzési eredmények a következő feltételek mellett garantáltak:

• a készlet összes reagensét 2 és 8 0 С közötti hőmérsékleten kell tárolni;
• ne használjon lejárt reagenseket;
• ne használja a készlet reagenseit, ha nincsenek megfelelően felcímkézve a csomagolásukon;
• RPHA esetén csak a készletben található reagenseket használja.

Vi-Diagnosticum

Diagnosticum Vee

Vi-antigén

A jól elvégzett vérvizsgálat segít kimutatni a szervezetben a különböző komplex betegségek kórokozóit a fejlődés korai szakaszában, sőt esetenként még a betegség klinikai tüneteinek megjelenése előtt is. Nagyon gyakran az orvosok előírják a betegeknek az agglutinációs reakció elemzését. A következőkben azzal foglalkozunk, hogy ez egy RPHA vérvizsgálat, mikor használják és miről árulkodhat?

Működési elve

A közvetett hemagglutinációs reakció (más néven passzív hemagglutinációs reakció, más néven RPHA, RNHA) akkor következik be, amikor az antigént adszorbeáló eritrociták az ennek az antigénnek megfelelő immunszérumnak vannak kitéve.

Tanulmányok kimutatták, hogy ez a módszer szignifikánsan felülmúlja a specifitást és az érzékenységet más szerológiai teszteknél. Ezért gyakran használják baktériumok vagy rickettsiák által okozott betegségek kimutatására. Bakteriális kivonatok, különféle mikrobák tisztított antigénjei, bakteriális vakcinák komponensei szolgálhatnak antigénként egy ilyen elemzéshez.

Miután egy kórokozó baktérium bejut az emberi szervezetbe, specifikus és nem specifikus antitestek kezdenek termelődni benne, amelyek egy bizonyos immunválaszt képeznek. A feltételezések szerint a treponema pallidum okozta szifilisz esetében Gram-negatív spirocheta, nem treponemális vagy treponemális antitestek képződnek az emberi vérben. A laboratóriumi diagnosztikai vizsgálatok azok kimutatásán alapulnak, amelyek megerősítik vagy cáfolják a vírus kórokozójának jelenlétét a szervezetben.

Az RPHA-val az eritrociták, amelyek felületén a halvány treponema antigénjeit adszorbeálták, ha a szifiliszben fertőzött személy anyagából a treponema elleni antitesteket tartalmazó szérumot adják hozzá, összetapadnak, azaz agglutinációjuk következik be.

A tanulmány megbízhatósága

Fontos megjegyezni, hogy a pallidum spirocheta elleni antitestek a fertőzött emberek szervezetében a fertőzés után 2-4 héttel kezdenek megjelenni, és bizonyos esetekben ez az időszak akár 6 hétig is meghosszabbítható.

Emiatt az RPHA-elemzés érzékenysége a betegség kialakulásának elsődleges szakaszában körülbelül 86%, ami jelentősen elmarad a betegek diagnosztizálásának pontosságától a következő két szakaszban. Az elemzés érzékenysége az ilyen betegeknél, valamint a látens szifilisz hordozóinál eléri a 99-100% -ot.

A passzív hemagglutináció reakciója azonban nagyon magas specificitású, amely eléri a 96-100%-ot.

Ez lehetővé teszi ennek a vizsgálatnak a felhasználását a diagnózis megerősítésére egy előzetes nem-treponemális vizsgálat pozitív reakciója esetén, például a hólyagrák mikroprecipitációjának reakciója esetén.

Tekintettel arra, hogy a treponemális tesztek, beleértve a TPHA-t is, szenzitivitása jelentősen meghaladja a nem treponemális módszerek érzékenységét, az ilyen teszteket egyre gyakrabban írják elő a szifilisz szűrővizsgálatai során. Ha azonban pozitív szűrési reakciót kapunk, egy másik specifikus (treponemális) elemzésre van szükség a diagnózis tisztázásához, de nem a TPHA-ra.

Az elemzés megfejtése

Ha a szifiliszben fertőzött személy anyagából származó, treponema elleni antitestekkel rendelkező szérumot adnak a reagenshez, amellyel a vizsgálatot végzik, vörösvértest-agglutináció következik be, amelynek eredményeként kicsapódnak.

A tapadó eritrociták számát a szérumban lévő antitestek szintje befolyásolja. Ezért a passzív hemagglutináció nemcsak az antitestek jelenlétét mutatja, hanem lehetővé teszi számuk beállítását is. A vizsgálat eredményét az antitest-titer szintje képviseli.

A pozitív reakció a kórokozó jelenlétét jelzi a beteg szervezetében. A diagnosztikai folyamat során azonban előfordulhatnak álpozitív reakciók, amelyek száma statisztikailag nem haladja meg az összes vizsgálat 0,05-2,5%-át.

A TPHA pozitív reakciója szifiliszben nem fertőzött embereknél fordulhat elő, ha:

• szisztémás kötőszöveti betegségek,
• a beteg vérében a sápadt treponemához hasonló kórokozókkal szembeni antitestek,
• fiziológiás patológiák, például szívinfarktus,
• hepatitis B vagy C
• onkológiai betegségek,
• tífusz, leptospirózis, tuberkulózis,
• HIV fertőzés
• borreliosis kullancs által terjesztett etiológiája,
• kiterjedt sérülések vagy törések,
• terhesség,
• gyógyszerinjekciók esetén.

A legtöbb esetben a hamis pozitív reakciókat alacsony titer kíséri. A magas titer a betegség másodlagos stádiumára és a korábban látens szifiliszre jellemző. Azonban rosszindulatú daganatos betegeknél hamis pozitív reakcióval is megjelenhetnek.

Azoknál az embereknél, akiknek legalább egyszer volt szifilisze, az RPHA reakciója életük végéig pozitív marad.

Ritka kivételek azok a helyzetek, amikor a betegséget a fejlődés korai szakaszában észlelték, majd intenzív és hatékony terápiát végeztek. Ezért a TPHA elemzése nem használható fel a gyógyulás dinamikájának vagy a betegség korai vagy késői stádiumának összehasonlító diagnosztizálására.

Pozitív reakció után meg kell vizsgálni a beteg családtagjait és azokat, akik szexuális kapcsolatban álltak vele.

Negatív reakció a következő esetekben fordulhat elő:

• az embernek nincs szifilisze,
• helytelenül vett vért kutatáshoz,
• 2-4 hét telt el a fertőzés óta, és az antitestek termelése még nem kezdődött el.

Mindenesetre a vizsgálat eredményét további laboratóriumi és anamnesztikus mutatókkal együtt kell értékelni.

Kinek mutatják meg az elemzést?

Az orvos az alábbi esetekben irányíthat véradást az RPHA-ban szenvedő betegek számára:

• szifilisz klinikai megnyilvánulásai esetén: fekélyes kiütések, megnagyobbodott nyirokcsomók, diffúz alopecia és mások,
• ha fertőzésre gyanakszik, ha már beteg emberekkel érintkezik,
• véradásra hajlandó donorok,
• olyan személyek, akik évente megelőző vizsgálaton esnek át vagy egészségügyi könyveket készítenek,
• pozitív szűrővizsgálattal rendelkező betegek,
• kórházi felvétel előtt,
• a preoperatív vizsgálat során
• szalmonellózis, diftéria, vérhas kórokozóinak kimutatására RPHA levezetéses módszerével a megfelelő diagnosztikával.

Kutatási eljárás

A páciens által leadott vénás vérmintát vizsgálatra küldik. Annak érdekében, hogy ne lehessen téves következtetést levonni, a páciensnek kell felelnie az elemzés előkészítéséért. Annak érdekében, hogy a vizsgálati eredmények megbízhatóak legyenek, a következő ajánlásokat kell követni:

• Az elemzést csak üres gyomorra szabad elvégezni.
• Az elemzés napján minimális mennyiségben ihat ásványvizet gáz nélkül.
• A vizsgálat előtt legalább 30 percig nem szabad dohányozni, de jobb ezt az időt több órára növelni.
• Az alkoholtartalmú italok fogyasztására közvetlen tilalom vonatkozik.
• Azoknak a betegeknek, akiknek rendszeresen kell valamilyen gyógyszert szedniük, erről feltétlenül tájékoztatniuk kell a beutaló orvost.
• Ha rosszul érzi magát, vagy rosszul érzi magát, értesítse a vérmintát vevő ápolónőt vagy a vizsgálatot elrendelő ambulancián lévő orvost.

Legyen felelős ne csak a teszt helyének kérdéséért, hanem a vizsgára való felkészülésért is.

Egyéb fertőző betegségek diagnosztizálása

Nem szabad azt gondolni, hogy egy ilyen vizsgálatot, mint az RPGA, csak a szifilisz kórokozójának azonosítására lehet elvégezni a szervezetben.

A szalmonella diagnosztikával végzett elemzés lehetővé teszi az emésztőrendszer fertőzésének - a szalmonella - jelenlétének azonosítását. A fertőzést követő negyedik naptól kezdve a szervezet a Salmonella antigénekkel szembeni antitesteket termel, amelyek RPGA módszerrel kimutathatók. A negatív eredmény a fertőzés hiányát jelzi, és a pozitív titer, amely 1:200-ról 1:800-ra nő az akut fázisban, jelzi a jelenlétét.

Az RPHA diftéria markerrel történő végrehajtásának módszere lehetővé teszi a diftéria diagnosztizálását és az immunitás felmérését a vakcinázás után. Az immunrendszer már a fertőzést követő napon elkezd antitesteket termelni, és néhány hétig a szervezetben marad. Ennek az elemzésnek az érzékenysége meghaladja a bakteriológiai kutatási módszert. Az 1:80 titer megerősíti a diftéria jelenlétét a szervezetben.

Az RPHA-ban található vérhasmarker a legpontosabban kimutatja a shigellosist (baciláris vérhas), még akkor is, ha összehasonlítjuk a bakteriális tenyésztéssel végzett laboratóriumi diagnosztikai módszerrel. Ha a beteg nem részesül magas színvonalú kezelésben, akkor a betegség krónikus folyamatba kerül, amelyben gyakran előfordulnak visszaesések. Az elemzés lehetővé teszi a hasmenés akut és krónikus fázisának diagnosztizálását, a vérhas kórokozójának azonosítását, a bakteriális shigellosis és a vastagbélrák, az endokrin rendellenességek vagy a vastagbélgyulladás megkülönböztetését. A negatív reakció a bacilus hiányát jelzi, és megerősíti annak jelenlétét 1:80 titerrel csecsemőknél vagy 1:320 felnőtteknél.

A kanyaró markerrel végzett vizsgálat lehetővé teszi a kanyaró betegségének meghatározását. Egy ilyen vizsgálat alternatívája lehet a gyakran végzett HI-analízisnek a kanyaró diagnosztizálására.

Szóval, RPHA vérvizsgálat - mi ez? Összefoglalva, nyugodtan kijelenthetjük, hogy ez egy modern, rendkívül érzékeny és megbízható módszer a különféle bakteriológiai etiológiájú betegségek diagnosztizálására.

Kapcsolatban áll

RZN 2016/3905 számú regisztrációs bizonyítvány 2016.04.04.

Célja

A "Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigenic for RPHA" (SED-Vi) reagenskészletet a tífusz kórokozójának Vi-antigénje elleni antitestek kimutatására tervezték emberi vérszérumban a passzív hemagglutinációs teszt (RPHA) segítségével.

Jellemző beállítása

Működési elve

A tífusz kórokozója elleni antitestek jelenlétében a Vi-antigénnel érzékenyített csirke eritrociták hemagglutinációja figyelhető meg, ami a lemez U-alakú üregeinek alján a leülepedett eritrociták "ernyőjének" kialakulásához vezet. . A tífusz kórokozója elleni antitestek hiányában a leülepedett eritrociták "pontot" alkotnak.

Állítsa be a kompozíciót

Reagens neve	Leírás	Mennyiség a készletben
Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigén, száraz 6% (SED)	S.typhi Vi antigénnel érzékenyített, formalizált csirke eritrociták. Barna színű, száraz higroszkópos tömeg. Feloldódás után - vörös-barna színű szuszpenzió.	1 fiola, 0,6 ml-től
Szérum diagnosztikai szalmonella adszorbeált, Vi receptor, száraz (1:20 hígítás, (K+))	Salmonella adszorbeált nyúlszérum, Vi receptor, 1:20 arányban hígítva. Száraz, higroszkópos, porózus fehér színű tömeg. Feloldódás után tiszta, sárgás vagy színtelen folyadék.	1 fiola, 0,3 ml-től
Minta hígító (RID)	Tiszta kék-lila folyadék.	1 fiola, 10 ml
Foszfát pufferoldat (PBS)	Átlátszó színtelen folyadék.	1 fiola, 10 ml
Egyszer használatos polimer lemez immunológiai reakciókhoz	Egyszer használatos polimer lemez immunológiai reakciókhoz, átlátszó színtelen polisztirolból.	1 db PC.

Diagnosztikai jellemzők

A Diagnosticumot szárazon (1:20-as hígítással) a szalmonella diagnosztikai adszorbeált szérummal, Vi receptorral agglutinálni kell RPHA-ban a szérum címkéjén feltüntetett titerig. Az egészséges emberek vérszérumának diagnosztikai jellemzőinek feltételes szintjét a szérum 1:20-nál nem magasabb hígításának kell tekinteni. Az elemzés ideje 3040 perc. A készletet 42 vérszérum vizsgálatára tervezték a szűrési opcióban vagy 10 vérszérumot a titrálási opcióban.

Elővigyázatossági intézkedések

A készlet csak in vitro diagnosztikai használatra szolgál. A készlet összetevőiben lévő anyagok inaktiváltak és biztonságosak. A készlettel végzett munka során be kell tartani az SP 1.3.2322-08 és a SanPiN 2.1.7.2790-10 szabványokat.

Kiegészítő felszerelések és anyagok

Berendezések, anyagok, megoldások:

• 1-csatornás pipetta-adagolók változó adagolási térfogattal 5-40 µl; 40-200 µl; 200-1000 µl és 1000-5000 µl;
• 8 vagy 12 csatornás pipettaadagolók, változó adagolási térfogattal 5-40 µl és 40-200 µl között;
• desztillált víz (GOST 6709-72).

Elemzett minták

A vizsgált vérszérummintákat 2-8 °C hőmérsékleten tároljuk a vérvételtől számított legfeljebb 3 napig. A tejsavót fagyasztott állapotban, mínusz 18 ° C-ot meg nem haladó hőmérsékleten, legfeljebb 1 évig lehet tárolni. Felhasználás előtt a mintákat 16-25 °C hőmérsékleten felolvasztják, és rázatással összekeverik. Az újrafagyasztás nem megengedett. Bakteriális növekedéssel és hemolízissel járó minták nem használhatók. A reakció beállítása előtt a tesztszérumokat 56 °C-on 30 percig melegítjük.

Elemzés lefolytatása

Kontroll diagnosztikai szérum (K+) készítése

0,3 ml-ből (K+) készítsünk száraz (1:20 hígítású) diagnosztikai szalmonellával adszorbeált szérum, Vi receptor munkaoldatot. Ehhez 0,3 ml foszfát pufferoldatot (PBS) adunk a K+-os fiola tartalmához. A fennmaradó mennyiségű szérum aliquot részekre osztható és fagyasztva, mínusz 18 °C-ot meg nem haladó hőmérsékleten tárolható legfeljebb 6 hónapig.

Vörösvérsejt szalmonella (SED) diagnosztikájának elkészítése

A Salmonella erythrocyte diagnosticum szuszpenziójának munkahígításának elkészítéséhez 0,6 ml desztillált vizet adunk egy 6%-os száraz SED-t tartalmazó fiola tartalmához, és 2 órán át 16-25 °C-on hidratáljuk. Ezután 2,4 ml foszfát pufferoldatot (PBS) adunk az oldathoz. A munkaoldatot 2 és 8 °C közötti hőmérsékleten tároljuk legfeljebb 1 hónapig. A fagyasztás nem megengedett.

Az RPHA kimutatása a vérszérumok szűrése során

A szűrőszérumokat a lemez üregeiben a következőképpen hígítjuk:

• 1:20-as előzetes hígításokat készítünk a tabletta első üregeiben, először 190 μl RIP oldatot, majd 10 μl vizsgált szérumot adva hozzájuk. Mindegyik szérumot külön hegyével adjuk hozzá, és óvatosan pipettázzuk (ebben az esetben a lyukakban lévő oldat színének kékesliláról zöldre kell változnia a szérum hozzáadása után);
• 1:40 arányú szűrési hígításokat készítünk a második üregekben, először 25 µl PBS-oldatot, majd 25 µl előre hígított szérumot viszünk be és óvatosan pipettázunk.

Az RPHA minden egyes beállításánál el kell végezni a K + titer kontroll meghatározását. Ehhez 50 μl PBS-oldatot adunk egy hosszú sor 8 üregébe. Ezután 50 µl K+ munkaoldatot (1:20) adunk az első mérőhelyhez, óvatosan pipettázzuk, és átvisszük a következő üregekbe, mindegyik 50 µl-re, 1:40-től 1:5120-ig kétszeres hígítással. További 4 lyukba 50 μl PBS-oldatot adunk, hogy ellenőrizzük az SED-t a spontán hemagglutináció hiányára.

Adjon 25 μl SED-t a vizsgált szérum (kivéve az első RIP-et tartalmazó) és a kontrollok szűrési hígításait tartalmazó tabletta minden üregébe. Használat előtt keverje fel a SED szuszpenziót üvegben vagy fürdőben! A tablettát alaposan felrázzuk, és 16–25 °C hőmérsékleten 30–40 percig hagyjuk, amíg a kontrollban a vörösvértestek teljes leülepedése meg nem történik.

Az RPHA kimutatása a vizsgált vérszérumok titrálása során

A vizsgált szérum és a K+ munkaoldat titrálását a tabletta rövid soraiban végezzük. Egy másik rövid sort az EDS spontán hemagglutinációjának hiányának szabályozására használunk.

A tesztszérum titrálására szolgáló rövid sorok első mérőhelyeibe 180 μl RIP-oldatot adunk. Az összes többi üreget megtöltjük 50 µl PBS-oldattal.

A tesztszérumból 20 μl-t adunk a RIP-oldattal ellátott üregekbe (1:10-es hígítást kapunk). Mindegyik szérumot a hegyével adjuk hozzá, és óvatosan pipettázzuk (az oldat színe a lyukakban kékesliláról zöldre változik). Ezután 50 μl-t viszünk át az első üregekből a sorok következő üregeibe, és kétszeres hígítást kapunk 1:20-tól 1:1280-ig. A titrálás végén az utolsó üregekből 50 μl oldatot veszünk ki.

Az RPHA minden egyes beállításánál el kell végezni a K + titer kontroll meghatározását. Ehhez 50 μl PBS-oldatot adunk egy hosszú sor 8 üregébe. Ezután 50 µl K+ munkaoldatot (1:20) adunk az első mérőhelyhez, óvatosan pipettázzuk, és átvisszük a következő üregekbe, mindegyik 50 µl-re, 1:40-től 1:5120-ig kétszeres hígítással.

A spontán hemagglutináció hiányának diagnosztizálására 50 μl PBS-oldatot adunk egy rövid sor összes üregébe.

Minden lyukba (kivéve minden sor első mérőhelyét a vizsgált RIP-et tartalmazó szérumok esetében) adjon hozzá 25 µl SED-et. Használat előtt keverje fel a SED szuszpenziót üvegben vagy fürdőben! A tablettát alaposan felrázzuk, és 16-25 °C hőmérsékleten 30-40 percig hagyjuk, amíg a kontrollban a vörösvértestek teljes leülepedése meg nem történik.

Az eredmények elszámolása és értelmezése

A vérszérumok szűrésének eredményeinek elszámolása

Az eredmények elszámolása négy keresztes feltételes skálán történik. A szérumtiter annak hígítása, amely legalább 3 (+++) keresztezéssel hemagglutinációt ad.

• ++++ (4+) - az agglutinált eritrociták a lyuk alján fordított "esernyőt" alkotnak, szélei leesnek;
• +++ (3+) - az agglutinált eritrociták a lyuk alján fordított "ernyőt" alkotnak, szélei egyenletesek;
• ++ (2+) - az agglutinált eritrociták mellett a lyuk alján egy üledék van, amely nem agglutinált vörösvértestekből álló kis "gyűrű" formájában van jelen;
• + (1+) - a legtöbb eritrocita nem agglutinálódik, és kis "gyűrű" formájában ülepedik;
• (-) - a nem agglutinált eritrociták „pontot” alkotnak a lyuk alján.

Pozitív eredménynek minősül a Vi-antigénnel feltöltött eritrociták legalább 3 keresztezéssel történő hemagglutinációja (+++).

A Diagnosztika minőségellenőrzése a kontrollsor 4 kútja, melybe csak a PBS oldat és a SED került. Ezekben a kutakban nem lehet spontán hemagglutináció - a reakció negatív (-). Ellenkező esetben a vizsgálatot meg kell ismételni. Ha hemagglutináció jelenik meg a re-staging során, akkor a gyógyszert nem használják.

A negatív eredménnyel rendelkező szérumokat úgy kell tekinteni, mint amelyek nem tartalmaznak Vi-antigén elleni antitesteket 1:40-es vagy az alatti diagnosztikai titerben.

Az 1:40-es hígításnál pozitív eredményt adó szérumokat a titer meghatározásához szérumtitrálással újra meg kell vizsgálni.

A vérszérum titrálásakor kapott eredmények figyelembevétele

A szérumtiter annak hígítása, amely legalább 3 (+++) keresztezéssel hemagglutinációt ad.

A diagnosztika minőségellenőrzése a SED ellenőrzési sor kútjai. Ezekben a kutakban nem lehet spontán hemagglutináció - a reakció negatív (-). Ellenkező esetben a vizsgálatot meg kell ismételni. Ha hemagglutináció jelenik meg a re-staging során, akkor a gyógyszert nem használják.

A diagnosztika aktív kezdete az eritrociták felszínén rögzített V-antigén. A Vee antigén elleni antitesteket tartalmazó szérumokkal való kölcsönhatás során az eritrocita agglutináció jelensége figyelhető meg.

Kiadási űrlap

Készült készletben 1 palack diagnosztikai - 3 ml, diagnosztikai szalmonella szérum adszorbeált receptor Vee Dry liofilizátum formájában 0,1 ml-ből 1 flakon; 0,9% -os nátrium-klorid oldat - 2 üveg 8 ml-es; tabletta egyszer használatos immunológiai reakciókhoz - 1 db.

Összetett

Reagensek mennyisége:

Diagnosticum erythrocyte salmonella V-antigenic, amely a vércsoport formalizált és V-antigénnel szenzitizált humán eritrocitáinak O (I) 0,75%-os szuszpenziója foszfát pufferoldatban (pH-7,2 ± 0,2; koncentráció - 0,06 mol/l) . Tartósítószer - formalin. Barna színű homogén szuszpenzió pelyhek nélkül; ülepedéskor 2 réteg képződik: sűrű barna vörösvértest üledék és átlátszó sárgás felülúszó folyadék 1 fiola-3 ml.

Szérum diagnosztikai szalmonella adszorbeált receptor Vee száraz - homogén massza fehértől barnás árnyalattal a bézsig. 1 üveg - 0,1 ml-től.

Fenntartó oldat - 0,9%-os nátrium-klorid oldat - tiszta, színtelen folyadék, pH 6,5-7,5. 2 üveg - 8 ml.

Egyszer használatos kerek fenéklemez immunológiai reakciókhoz - 8 sorból áll, amelyek mindegyike 12 átlátszó, színtelen, kerek aljú lyukat tartalmaz. 1 db PC.

A Diagnosticumot RPHA-ban a diagnosztikai szalmonella B receptorral adszorbeált száraz szérummal kell agglutinálni, titerük legalább 1/2-ánál, de legalább 1/160-nál. A Diagnosticumot nem szabad agglutinálni diagnosztikai szalmonellával szárazon adszorbeált szérumokkal az RA-hoz: O-receptor 9 - 1:40-es és nagyobb hígításban, H-receptor d - 1:10-es és nagyobb hígításban.


Használati javallatok

A passzív hemagglutináció (RPHA) reakciójában a Salmonella tífusz V-antigénje elleni specifikus antitestek kimutatására tervezték emberi vérszérumban.

Adagolási rend és alkalmazási mód

A humán vérszérum mintákat elemzett mintákként használják.
Az elemzett mintát olyan körülmények között kell tárolni, amelyek megakadályozzák a baktériumok szaporodását, 2–8 °C hőmérsékleten legfeljebb 72 órán keresztül. A fagyasztás megengedett, a fagyasztott elemzett mintákat a vizsgálat előtt szobahőmérsékleten fel kell olvasztani.
Súlyos hemolízissel, bakteriális szaporodással járó, valamint hosszú ideig fagyasztás vagy újrafagyasztás nélkül tárolt minták elemzése nem megengedett.

ELEMZÉS
Oldatok készítése RPHA-hoz.
Szárítsa meg a felnyitott fiolákat az V. diagnosztikai szalmonella adszorbeált receptor szérumával, és adjon hozzá 1 ml-t a csatolt 0,9%-os nátrium-klorid-oldatból, így 1:10-es hígítást kapunk, ami munkahígítás.
A diagnosztikai Salmonella V receptor adszorbeált receptor V száraz szérummal ellátott, 1:10 hígítású, nyitott injekciós üveget zárt formában 2-8 °C hőmérsékleten egy hónapig lehet tárolni.
A Diagnosticum használatra kész. Mielőtt kinyitná a diagnosztikát tartalmazó injekciós üveget, óvatosan rázza fel, amíg homogén szuszpenziót nem kap. Működés közben ajánlatos megismételni a rázást.
A zárt formában lévő diagnosztizált injekciós üveg 2 és 8 ° C közötti hőmérsékleten egy hónapig tárolható.
0,9%-os nátrium-klorid oldat. Használatra kész.

RPGA vezetése.
Tetszőleges számú elemzett szérum kontrollálásakor kötelező az 1. agglutinációs sort felállítani a diagnosztikus Salmonella B receptor B száraz szérummal.
Az RPHA előállításához egyszer használatos immunológiai reakciók kezelésére szolgáló tablettát használnak. Az elemzett szérumokból kétszeres sorozathígításokat készítünk a mellékelt 0,9%-os nátrium-klorid oldat 0,05 ml-ében 1:10-től 1:2560-ig kezdődően, és 1 sorozat kétszeres sorozathígítást a Wi diagnosztikai Salmonella adszorbeált receptor szérumából. száraz, 1:10 hígítástól kezdve, a szérum fioláin feltüntetett titer kétszereséig.
A szérumhígítású üregek mindegyikébe 0,025 ml diagnosticumot adunk.

A kötelező ellenőrzések a következők:
1. A diagnosztikai szalmonella adszorbeált receptor szérum kontrollja
Száraz és elemzett szérum, amely 1:10 hígításban 0,05 ml térfogatban hozzájárul
két kontrollkútban.
2. A diagnosztikum spontán agglutinációjának hiányának ellenőrzése, amelyhez 0,025 ml diagnosztizált anyagot adunk két 0,05 ml 0,9%-os nátrium-klorid oldatot tartalmazó üregbe.
A tablettát felrázzuk és 1,5-2,0 órára termosztátba helyezzük (37+1) °C hőmérsékleten.

AZ EREDMÉNYEK ELSZÁMOLÁSA
A reakciót a négykeresztes rendszer szerint vesszük figyelembe:
4+ - minden eritrocita agglutinálódik és egyenletesen fedi a lyuk alját;
3+ - szinte minden eritrocita agglutinálódik. A hátterükben egy nem feltűnő gyűrű található, ahol a leülepedett, nem agglutinált eritrociták vannak;
3+ - a lyuk alján egyenletes agglutinátummal együtt nem agglutinált eritrociták üledéke van kis "gyűrű" vagy "gomb" formájában;
1+ - a vörösvértestek többsége nem agglutinálódik, és kis "gyűrű" formájában telepszik le, sima élekkel vagy "gombokkal" a lyuk aljának közepén.
(-) - nincs agglutinációra utaló jel. Az eritrociták kis "gyűrű" formájában telepedtek le, sima élekkel vagy gombokkal a lyuk közepén vagy a cső alján.
A legalább 3+ reakció pozitívnak minősül.
Az RPHA-ban kapott eredmények akkor tekinthetők megbízhatónak, ha a diagnosztikus szalmonella B receptor B-receptor 1:10 arányban adszorbeált széruma titerük legalább 14-es hígításában pozitív eredményt ad, valamint 2 lyukban a vizsgált szérummal és a a diagnosztikai szalmonella B receptor adszorbeált széruma száraz 1:10 hígításban, nem lehet pelyhek és üledék; 0,9%-os nátrium-klorid oldattal és diagnosztizáló kutakban - a reakció negatív.
Az elemzett szérum antitest-titerét a szérum utolsó hígításának tekintik, amely még mindig pozitív eritrocita-agglutinációt ad.
Az eredmények értelmezése.
Azok a személyek, akiknél a V-antigén elleni antitestek 1:40-es vagy nagyobb hígításban vannak, krónikus tífusz-bakteriohordozó gyanúsnak tekinthetők. Tekintettel azonban arra, hogy a diagnózist csak szerológiai vizsgálat alapján nem lehet felállítani, alapos bakteriológiai vizsgálat szükséges.

Használati óvintézkedések

Szérumdiagnosztikai Salmonella adszorbeált receptor A készletben található Vee szárazon inaktivált.
Az elemezni kívánt szérumot 56°C-on 30 percig inaktiválni kell.
Az elemezni kívánt szérum, valamint a velük érintkező reagensek, berendezések és műszerek potenciálisan fertőző anyagok lehetnek, ezért óvatosan kell bánni velük:
- gumikesztyűben dolgozni;
- pipettázáskor automata eszközök használata szükséges;
- a munka végén a vizsgált szérumokat és a velük érintkező reagenseket, a műszereket fertőtlenítő oldattal kell kezelni;
- Törölje le a berendezést munka előtt és után 96%-os etil-alkohollal.

Az objektív elemzési eredmények a következő feltételek mellett garantáltak:
- a készlet összes reagensét 2 és 8 °C közötti hőmérsékleten kell tárolni;
- ne használjon lejárt reagenseket;
- ne használja a készlet reagenseit, ha nincs megfelelő jelölés a csomagolásukon;
- RPHA esetén csak a készletben található reagenseket használja.

2. diagnosticum

4.elpusztult mikrobáktól (specifikus Ag izolálása)

Eritrocita HBs diagnosztika

2. diagnosticum

4.tanninnal kezelt er.birkák szuszpenziója és kicsapott a\g HBs

5. Specifikus antitestek kimutatására a vérszérumban

Diagnosticum gp120

2. diagnosticum

4.külön a\g gerjeszt. HIV

5. A HIV kimutatására

Tetanus eritrocita diagnosztika

2. diagnosticum

4.tanninnal kezelt juhok szuszpenziója tetanusz gerjesztésével

5. specifikus antitestek kimutatására a vérszérumban (tetanusz gerjesztés

Kardiolipin antigén a mikroprecipitációhoz

2. diagnosticum

4. lipidfrakciók kinyerése egészséges bika szívéből

5. Specifikus antitestek kimutatására a vérszérumban

Ultrahangos treponemális antigén

2. diagnosticum

4.halottból ex. szifilisz

5. Specifikus antitestek kimutatására a vérszérumban

Corpuscularis tularemia diagnosticum

2. diagnosticum

4.egyedi kórokozó részecskéinek

5. Specifikus antitestek kimutatására a vérszérumban

Dizentéria diagnosztika

2. diagnosticum

4. felfüggesztés a megölt m \ o-ból

5. Specifikus antitestek kimutatása a páciens szérumában

Vörösvérsejt-diagnosztika a Shigella Sonne-tól

2. diagnosticum

4. toninnal kezelt juhok szuszpenziója

5. Specifikus antitestek kimutatására a vérszérumban

Diagnosticum a salmonella typhimuriumból

2. diagnosticum

4.halottból ex. szalmonella

5. Specifikus antitestek kimutatására a vérszérumban

Szérumok

Antigangrénás lószérum 5000 NE

2.szérum

4. a hyperimm vérszérumából.lovak serkentőgáz gangréna toxoid

6.parenterálisan, globulinnal végzett vizsgálat után 1:100

normál humán immunglobulin

2.szérum

4. donor vérszérumból

5.form-e pass. különleges vásárolt művészetek. imm

6. parenterálisan

kicsapó lépfene szérum

2.szérum

4. hiperimmunizált állatok vérszérumából a\g excit.sib. fekélyek

6. kicsapási reakció (RP)

Botulinum szérum típus - A 400 NE

2.szérum

5. specifikus antigén kimutatására a vizsgált anyagban

6. semlegesítési reakció (RN)

Anthrax globulin

2.szérum

4. hiperimmunizált állatok vérszérumából a\g ingerlékeny fekélyek

5.form-e pass. különleges vásárolt művészetek. imm

6. parenterálisan

Hemolitikus szérum

2.szérum

4. hiperimmunizált állatok szérumából más fajba tartozó állatok eritrocitáival

5. specifikus antigén kimutatására a vizsgált anyagban

Kolera agglutináló szérum Ogawa

2.szérum

4. hiperimmunizált állatok vérszérumából

5. specifikus antigén kimutatására a vizsgált anyagban

Luminous tularemia szérum

2.szérum

4. hiperimmunizált állatok vérszérumából a\g ingerelhető tular.

5. specifikus antigén kimutatására a vizsgált anyagban

Immunglobulin emberi kullancsencephalitis ellen

2.szérum

4. donor vérszérumból

5.form-e pass. különleges vásárolt művészetek. imm

6. parenterálisan

ESNO diagnosztikai szérum

2.szérum

4. ESNO vírusokkal rendelkező hiperimmunizált állatok vérszérumából

5. specifikus antigén kimutatására a vizsgált anyagban

Humán immunglobulin hepatitis B ellen

2.szérum

4. hepatitis B ellen beoltott donor vérszérumából

5.form-e pass. különleges vásárolt művészetek. imm

6. parenterálisan

Perkoxidázzal jelölt antiglobulin szérum

2.szérum

4. hiperimmunizált állatok vérszérumából

5. specifikus antigén kimutatása a vizsgált anyagban (HIV)

Veszettség immunglobulin

2.szérum

4. donor vérszérumból

5.form-e pass. különleges vásárolt művészetek. imm