बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला अध्ययन। बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला - प्रयोगशालाएँ, पैराक्लिनिक्स

परिचय

किसी भी अन्य विज्ञान के सामान्य भाग की तरह, सामान्य जीवाणु विज्ञान विशिष्ट प्रश्नों (उदाहरण के लिए, बैक्टीरिया की व्यक्तिगत प्रजातियों की पहचान) से संबंधित नहीं है, लेकिन सामान्य रूप से समस्याओं के साथ; इसकी कार्यप्रणाली बुनियादी प्रक्रियाओं को शामिल करती है जो व्यापक रूप से प्रयोगशाला अध्ययनों की एक विस्तृत विविधता में उपयोग की जाती हैं। इस अध्ययन गाइड का उद्देश्य सूक्ष्मजीवों के किसी भी समूह की पहचान करना नहीं है। यह निम्नलिखित प्रकाशनों का कार्य है - निजी और सैनिटरी माइक्रोबायोलॉजी पर। हालाँकि, इसमें प्रस्तुत विधियाँ किसी भी क्षेत्र में उपयोगी हो सकती हैं जहाँ बैक्टीरिया से निपटा जाना है, और व्यावहारिक समस्याओं पर लागू किया जा सकता है, जिसमें बैक्टीरिया का अलगाव और टाइपिफिकेशन शामिल है।

अद्वितीय तकनीकों के विकसित होने के बाद ही जीवाणु विज्ञान एक विज्ञान बन गया, जो विज्ञान के बाद के उभरते हुए क्षेत्रों जैसे कि वायरोलॉजी, इम्यूनोलॉजी और आणविक जीव विज्ञान को प्रभावित और घुसपैठ करना जारी रखता है। आर. कोच द्वारा विकसित शुद्ध संस्कृतियों का उपयोग करने की तकनीक और एल. पाश्चर द्वारा प्रतिपादित प्रतिरक्षात्मक प्रतिक्रियाओं और रासायनिक विश्लेषण ने अब भी अपना महत्व नहीं खोया है।

सामान्य बैक्टीरियोलॉजी की कार्यप्रणाली इस संस्करण में ऐसे निर्माण की मदद से परिलक्षित होती है, जो इस अनुशासन में मानक पाठ्यपुस्तकों के लिए विशिष्ट है। हालांकि, विश्वविद्यालयों के लिए सूक्ष्म जीव विज्ञान के पाठ्यक्रम पर प्रयोगशाला कार्यशालाओं के विपरीत, इसे कुछ वर्गों में अधिक विस्तार से प्रस्तुत किया जाता है और यह केवल संदर्भ के लिए है। यह संरचना बैक्टीरियोलॉजिस्ट और पशु चिकित्सा स्वच्छता विशेषज्ञों के प्रशिक्षण और विशेषज्ञता की ख़ासियत को ध्यान में रखती है। अक्सर सामग्री को मनमाने ढंग से प्रस्तुत किया जाता है, इसलिए उनके संबंध को प्रदर्शित करने की इच्छा के कारण कुछ तरीकों का कई बार उल्लेख किया जाता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला

संरचनात्मक इकाइयों के रूप में बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाओं को क्षेत्रीय, जिला, अंतर-जिला पशु चिकित्सा प्रयोगशालाओं के साथ-साथ क्षेत्रीय पशु चिकित्सा प्रयोगशालाओं की संरचना में व्यवस्थित किया जाता है। वे संक्रामक रोगों के अस्पतालों, सामान्य अस्पतालों, कुछ विशेष अस्पतालों (उदाहरण के लिए, तपेदिक, संधिविज्ञान, त्वचाविज्ञान), और पॉलीक्लिनिक में सैनिटरी और महामारी विज्ञान निगरानी के केंद्रों में भी आयोजित किए जाते हैं। बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाएँ विशेष अनुसंधान संस्थानों का हिस्सा हैं। ईएसएस के अनुसार मांस की खाद्य उपयुक्तता रेटिंग की पुष्टि करने या स्थापित करने के लिए बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाओं का लगातार उपयोग किया जा रहा है।

बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाओं में अध्ययन की वस्तुएं हैं:

1. शरीर से डिस्चार्ज: मूत्र, मल, थूक, मवाद, साथ ही रक्त, पैथोलॉजिकल और कैडेवरिक सामग्री।

2. बाहरी पर्यावरण की वस्तुएं: कृषि पशुओं के वध से प्राप्त जल, वायु, मिट्टी, इन्वेंट्री आइटम से वॉशआउट, फ़ीड, तकनीकी कच्चे माल।

3. खाद्य उत्पाद, मांस और मांस उत्पादों के नमूने, दूध और डेयरी उत्पाद, जिनका खाद्य उद्देश्यों के लिए उपयुक्तता के लिए मूल्यांकन किया जाना चाहिए।

बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला कक्ष और कार्यस्थल उपकरण

सूक्ष्मजीवविज्ञानी कार्य की विशिष्टता के लिए आवश्यक है कि प्रयोगशाला के लिए आवंटित कमरे को रहने वाले कमरे, भोजन ब्लॉक और अन्य गैर-प्रमुख औद्योगिक परिसरों से अलग किया जाए।

बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला में शामिल हैं: बैक्टीरियोलॉजिकल रिसर्च और यूटिलिटी रूम के लिए प्रयोगशाला कमरे; अपशिष्ट सामग्री और दूषित बर्तनों के परिशोधन के लिए आटोक्लेव या नसबंदी; धुलाई, बर्तन धोने के लिए सुसज्जित; बैक्टीरियोलॉजिकल किचन - पोषक मीडिया की तैयारी, बॉटलिंग, नसबंदी और भंडारण के लिए; प्रायोगिक पशुओं को रखने के लिए मछली पालने का बाड़ा; अतिरिक्त अभिकर्मकों, बर्तनों, उपकरणों और घरेलू उपकरणों के भंडारण के लिए सामग्री।

सूचीबद्ध उपयोगिता कमरे, स्वतंत्र संरचनात्मक इकाइयों के रूप में, बड़ी बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाओं का हिस्सा हैं। छोटी प्रयोगशालाओं में, बैक्टीरियोलॉजिकल किचन और नसबंदी किचन को एक कमरे में संयोजित किया जाता है; प्रायोगिक जानवरों को रखने के लिए कोई विशेष कमरा नहीं है।

कर्मियों के लिए खतरे की डिग्री के अनुसार, सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशालाओं के परिसर को 2 क्षेत्रों में विभाजित किया गया है:

I. "संक्रामक" क्षेत्र - प्रयोगशाला में एक कमरा या कमरों का एक समूह जहां रोगजनक जैविक एजेंटों को संभाला और संग्रहीत किया जाता है, कर्मियों को उपयुक्त प्रकार के सुरक्षात्मक कपड़े पहनाए जाते हैं।

द्वितीय। "स्वच्छ" क्षेत्र - परिसर जहां जैविक सामग्री के साथ काम नहीं किया जाता है, कर्मियों को व्यक्तिगत कपड़े पहनाए जाते हैं।

प्रयोगशाला के कमरों के तहत, जिसमें सभी बैक्टीरियोलॉजिकल अध्ययन किए जाते हैं, सबसे हल्के, विशाल कमरे आवंटित किए जाते हैं। फर्श से 170 सेमी की ऊंचाई पर स्थित इन कमरों की दीवारों को हल्के रंगों में ऑइल पेंट से रंगा जाता है या टाइल्स से ढक दिया जाता है। फर्श रिलिन या लिनोलियम से ढका हुआ है। इस तरह की फिनिश आपको कमरे की सफाई करते समय कीटाणुनाशक घोल का उपयोग करने की अनुमति देती है।

प्रत्येक कमरे में नलसाजी के साथ एक सिंक और कीटाणुनाशक समाधान की एक बोतल के लिए एक शेल्फ होना चाहिए।

कमरों में से एक में, एक चमकता हुआ बॉक्स सुसज्जित है - सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में काम करने के लिए एक वेस्टिबुल (प्री-बॉक्स) वाला एक अलग कमरा। बॉक्स में, वे फसलों के लिए एक टेबल डालते हैं, कार्यस्थल के ऊपर एक स्टूल, जीवाणुनाशक लैंप लगाए जाते हैं। बाँझ सामग्री के भंडारण के लिए एक कैबिनेट को सामने के कमरे में रखा जाता है। "संक्रामक" क्षेत्र के परिसर के विंडोज और दरवाजे वायुरोधी होने चाहिए। "संक्रामक" क्षेत्र से मौजूदा निकास वेंटिलेशन को अन्य वेंटिलेशन सिस्टम से अलग किया जाना चाहिए और ठीक एयर फिल्टर से सुसज्जित होना चाहिए।

प्रयोगशाला का कमरा काम के लिए आवश्यक उपकरण, बर्तन, पेंट और अभिकर्मकों के भंडारण के लिए प्रयोगशाला-प्रकार की मेज, अलमारियाँ और अलमारियों से सुसज्जित है।

काम के लिए एक बैक्टीरियोलॉजिस्ट और प्रयोगशाला सहायक के कार्यस्थल का सही संगठन बहुत महत्वपूर्ण है। खिड़कियों के पास प्रयोगशाला टेबल स्थापित हैं। उन्हें रखते समय, आपको यह सुनिश्चित करने का प्रयास करने की आवश्यकता है कि प्रकाश कार्यकर्ता के सामने या पक्ष में हो, अधिमानतः बाईं ओर, लेकिन पीछे से किसी भी मामले में नहीं। यह वांछनीय है कि विश्लेषण के लिए कमरे, विशेष रूप से माइक्रोस्कोपी के लिए, खिड़कियां उत्तर या उत्तर-पश्चिम की ओर उन्मुख हों, क्योंकि काम के लिए विसरित प्रकाश की भी आवश्यकता होती है। काम के लिए टेबल की सतह की रोशनी 500 लक्स होनी चाहिए। कीटाणुशोधन की सुविधा के लिए, प्रयोगशाला तालिकाओं की सतह को प्लास्टिक से ढक दिया जाता है या लोहे से ढक दिया जाता है। प्रत्येक प्रयोगशाला कर्मचारी को 150x60 सेमी मापने वाला एक अलग कार्यस्थल सौंपा गया है।

सभी कार्यस्थल दैनिक बैक्टीरियोलॉजिकल कार्य के लिए आवश्यक वस्तुओं से सुसज्जित हैं, जिसकी सूची तालिका 1 में दी गई है।

तालिका एक।

बैक्टीरियोलॉजिकल कार्य के लिए आवश्यक वस्तुएं

वस्तु का नाम	अनुमानित मात्रा
1. रंग भरने के लिए पेंट और अभिकर्मकों का एक सेट
2. स्लाइड्स	25-50
3. चश्मा ढक दें	25-50
4. छेद वाला चश्मा	5-10
5. टेस्ट ट्यूब रैक
6. बैक्टीरियल लूप
7. ग्लास स्पैटुला
8. धातु स्थान
9. रुई का डिब्बा
10. पिपेट स्नातक 1, 2, 5, 10 मिली	प्रत्येक मात्रा का 25
11. पाश्चर पिपेट	25-50
12. चिमटी, कैंची, छुरी	1 द्वारा
13. कीटाणुनाशक घोल वाले कंटेनर
14. रोशनी के साथ माइक्रोस्कोप
15. आवर्धक कांच 5 ´
16. विसर्जन तेल के साथ बटर डिश
17. फिल्टर पेपर	3-5 चादरें
18. पिपेट के लिए कीटाणुनाशक घोल का एक जार
19. शराब या गैस बर्नर
20. रंग की तैयारी के लिए स्थापना
21. आवरग्लास 1 या 2 मिनट के लिए	1 द्वारा
22. रबर ट्यूब के साथ नाशपाती
23. कांच पर पेंसिल
24. शराब का एक जार
25. आवश्यक बाँझ व्यंजन	-

कीटाणुशोधन

कीटाणुशोधन पर्यावरणीय वस्तुओं में सूक्ष्मजीवों का विनाश है।

सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशालाओं में, कीटाणुशोधन उपायों का बहुत व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। संक्रामक सामग्री के साथ काम खत्म करते समय, बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाओं के कर्मचारी हाथों और कार्यस्थल की निवारक कीटाणुशोधन करते हैं।

खर्च की गई पैथोलॉजिकल सामग्री (मल, मूत्र, थूक, विभिन्न प्रकार के तरल, रक्त) को सीवर में फेंकने से पहले कीटाणुशोधन के अधीन किया जाता है।

स्नातक और पाश्चर पिपेट, ग्लास स्पैटुला और धातु के उपकरण जो रोग संबंधी सामग्री या रोगाणुओं की संस्कृति से दूषित होते हैं, उनके उपयोग के तुरंत बाद प्रत्येक कार्यस्थल पर टेबल पर स्थित कीटाणुनाशक समाधान के साथ ग्लास जार में उतारे जाते हैं।

कार्य में उपयोग की जाने वाली स्लाइड और कवरस्लिप भी अनिवार्य कीटाणुशोधन के अधीन हैं, क्योंकि एक निश्चित और दाग वाले स्मीयर में भी कभी-कभी व्यवहार्य सूक्ष्मजीव रहते हैं, जो अंतःप्रयोगशाला संदूषण का स्रोत हो सकता है। केवल वे व्यंजन जिनमें सूक्ष्मजीव उगाए गए थे, उन्हें कीटाणुनाशक से उपचारित नहीं किया जाता है। इसे धातु के टैंकों या बक्सों में मोड़ा जाता है, सील किया जाता है और आटोक्लेव करने के लिए सौंप दिया जाता है।

एक कीटाणुनाशक की पसंद, इसके समाधान की एकाग्रता, कीटाणुनाशक की मात्रा और कीटाणुरहित होने वाली सामग्री के बीच का अनुपात, साथ ही कीटाणुशोधन अवधि की अवधि, विशिष्ट परिस्थितियों के आधार पर निर्धारित की जाती है, पहले सबसे बढ़कर, विसंक्रमित किए जाने वाले रोगाणुओं की स्थिरता, अपेक्षित संदूषण की मात्रा, उस सामग्री की संरचना और स्थिरता जिसमें वे स्थित हैं।

संक्रामक सामग्री के साथ काम करने के बाद और त्वचा के संपर्क में आने पर हाथों की कीटाणुशोधन।संक्रामक सामग्री के साथ काम के अंत में, हाथों को रोगनिरोधी रूप से कीटाणुरहित किया जाता है। एक कपास की गेंद या धुंध के कपड़े को क्लोरैमाइन के 1% घोल से सिक्त किया जाता है, पहले बाएं और फिर दाहिने हाथ को निम्नलिखित क्रम में पोंछा जाता है: हाथ का पिछला भाग, पामर सतह, इंटरडिजिटल स्पेस, नेल बेड। इस प्रकार, कम से कम दूषित क्षेत्रों का पहले उपचार किया जाता है, फिर वे त्वचा के सबसे भारी दूषित क्षेत्रों में चले जाते हैं। 2 मिनट के लिए हाथों को लगातार दो बार पोंछे। जब हाथ एक रोगजनक सूक्ष्म जीव या रोग संबंधी सामग्री की संस्कृति से दूषित होते हैं, तो त्वचा के दूषित क्षेत्रों को पहले कीटाणुरहित किया जाता है। इसके लिए, उन्हें 3-5 मिनट के लिए क्लोरैमाइन के 1% घोल से सिक्त रूई से ढक दिया जाता है, फिर कपास को बेकार सामग्री के साथ एक टैंक या बाल्टी में फेंक दिया जाता है, और हाथों को उसी में दूसरे झाड़ू से उपचारित किया जाता है। जिस तरह से निवारक कीटाणुशोधन के दौरान। क्लोरैमाइन से उपचार के बाद हाथों को गर्म पानी और साबुन से धोया जाता है। बीजाणु बनाने वाले जीवाणुओं के साथ काम करते समय, हाथों को 1% सक्रिय क्लोरैमाइन के साथ उपचारित किया जाता है। यदि संक्रामक सामग्री हाथों पर लग जाती है, तो कीटाणुनाशक का संपर्क 5 मिनट तक बढ़ जाता है।

बंध्याकरण

नसबंदी, कीटाणुशोधन के विपरीत, निष्फल वस्तु में सभी वनस्पति और बीजाणु, रोगजनक और गैर-रोगजनक सूक्ष्मजीवों का विनाश शामिल है। नसबंदी विभिन्न तरीकों से की जाती है: भाप, सूखी गर्म हवा, उबलना, छानना, आदि। एक या दूसरी नसबंदी विधि का चुनाव वस्तु के माइक्रोफ्लोरा की गुणवत्ता और गुणों से निर्धारित होता है।

प्रयोगशाला उपकरणों की तैयारी और नसबंदी

नसबंदी से पहले, प्रयोगशाला के कांच के बने पदार्थ धोए और सुखाए जाते हैं। टेस्ट ट्यूब, बोतलें, बोतलें, गद्दे और फ्लास्क कपास-धुंध स्टॉपर्स के साथ बंद हैं। प्रत्येक बर्तन पर ओवर स्टॉपर्स (परखनली को छोड़कर) कागज के ढक्कन पर रखे जाते हैं।

रबर, कॉर्क और ग्लास स्टॉपर्स को डिश की गर्दन से बंधे एक अलग बैग में निष्फल किया जाता है। पेट्री डिश को कागज में लपेटकर निष्फल किया जाता है, प्रत्येक 1-10 टुकड़े। पाश्चर पिपेट, 3-15 पीसी। रैपिंग पेपर में लपेटा हुआ। सामग्री को पर्यावरण में प्रवेश करने से रोकने के लिए प्रत्येक पिपेट के ऊपरी भाग में रूई का एक टुकड़ा रखा जाता है। पिपेट लपेटते समय, केशिकाओं के सीलबंद सिरों को तोड़ने के लिए बहुत सावधानी बरतनी चाहिए। ऑपरेशन के दौरान, पिपेट को ऊपरी सिरे से पैकेज से हटा दिया जाता है।

पाश्चर पिपेट के रूप में स्नातक पिपेट के ऊपरी हिस्से में सुरक्षा कपास ऊन डाली जाती है, और फिर मोटे कागज में लपेटा जाता है, 2-2.5 सेमी चौड़ा और 50-70 सेमी लंबा स्ट्रिप्स में प्री-कट किया जाता है। पट्टी मेज पर रखी जाती है , इसके बाएँ सिरे को मोड़कर पिपेट की नोक से लपेट दिया जाता है, फिर, पिपेट को घुमाते हुए, इसके चारों ओर कागज का एक टेप लपेट दिया जाता है। कागज़ को सामने आने से रोकने के लिए, विपरीत सिरे को मोड़ा या चिपकाया जाता है। लिपटे पिपेट की मात्रा कागज पर लिखी जाती है। यदि मामले हैं, तो स्नातक किए गए पिपेट उनमें निष्फल होते हैं।

प्रयोगशाला कांच के बने पदार्थ को जीवाणुरहित करें

a) क्रमशः 1 घंटे और 150 मिनट के लिए 180°C और 160°C पर शुष्क ताप।

बी) 1.5 एटीएम के दबाव में एक आटोक्लेव में। 60 मिनट के भीतर, बीजाणु माइक्रोफ्लोरा के विनाश के लिए - 90 मिनट 2 बजे।

सीरिंज की नसबंदी। सीरिंज को निष्फल किया जाता है: अलग से सिलेंडर और पिस्टन को 2% सोडियम बाइकार्बोनेट घोल में 30 मिनट के लिए रखा जाता है। बीजाणु-असर वाले माइक्रोफ्लोरा के साथ काम करते समय, नसबंदी एक आटोक्लेव में 132±2°C (2 atm.) पर 20 मिनट के लिए, 126±2°C (1.5 atm.) - 30 मिनट पर किया जाता है। निष्फल सिरिंज को ठंडा होने के बाद एकत्र किया जाता है, सिलेंडर में एक पिस्टन डाला जाता है, उसमें से खराद निकालने के बाद एक सुई लगाई जाती है। सुई, सिलेंडर और पिस्टन चिमटी के साथ लिया जाता है, जो एक सिरिंज के साथ एक साथ निर्जलित होते हैं।

धातु उपकरणों का कीटाणुशोधन। धातु के उपकरण (कैंची, स्केलपेल, चिमटी, आदि) को 2% सोडियम बाइकार्बोनेट घोल में निष्फल किया जाता है, जो जंग और तीक्ष्णता के नुकसान को रोकता है। समाधान में विसर्जन से पहले स्केलपेल और कैंची के ब्लेड को सूती ऊन के साथ लपेटने की सिफारिश की जाती है।

बैक्टीरियल लूप की नसबंदी। प्लेटिनम या निक्रोम तार से बने बैक्टीरियल लूप को अल्कोहल या गैस बर्नर की लौ में निष्फल किया जाता है। नसबंदी की इस विधि को कैल्सीनेशन या फ्लेमिंग कहा जाता है।

एक क्षैतिज स्थिति में लूप को बर्नर लौ के निचले, सबसे ठंडे हिस्से में लाया जाता है ताकि दहनशील रोगजनक सामग्री छींटे न पड़े। इसके जलने के बाद, लूप को एक ऊर्ध्वाधर स्थिति में स्थानांतरित किया जाता है, पहले निचला, फिर तार के ऊपरी हिस्से को लाल-गर्म गर्म किया जाता है और लूप धारक को जला दिया जाता है। संपूर्ण रूप से प्रज्वलन में 5-7 s लगते हैं।

कागज, धुंध और कपास की नसबंदी और नसबंदी की तैयारी। रूई, धुंध, फिल्टर पेपर को 160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक सूखे-गर्मी ओवन में एक घंटे के लिए निष्फल कर दिया जाता है, जिस क्षण से तापमान को थर्मामीटर या आटोक्लेव में 1 एटीएम के दबाव में इंगित किया जाता है। 30 मिनट के भीतर।

नसबंदी से पहले, कागज और धुंध को टुकड़ों में काट दिया जाता है, और कपास ऊन को वांछित आकार के गेंदों या स्वैब के रूप में रोल किया जाता है। उसके बाद, प्रत्येक प्रकार की सामग्री को व्यक्तिगत रूप से, एक या अधिक टुकड़ों में, मोटे कागज में लपेटा जाता है। यदि पैकेज टूट गया है, तो निष्फल सामग्री को फिर से निष्फल किया जाना चाहिए, क्योंकि इसकी बाँझपन का उल्लंघन होता है।

दस्ताने और अन्य रबर उत्पादों का कीटाणुशोधन। रोगाणुओं के वानस्पतिक रूप से दूषित रबर उत्पादों (दस्ताने, ट्यूब, आदि) को 2% सोडियम बाइकार्बोनेट घोल में उबालकर या 30 मिनट के लिए भाप प्रवाहित करके निष्फल कर दिया जाता है; 1.5-2 एटीएम के दबाव में एक आटोक्लेव में बीजाणु-असर वाले माइक्रोफ्लोरा से दूषित होने पर। 30 या 20 मिनट के भीतर। नसबंदी से पहले, रबर के दस्ताने को चिपकने से बचाने के लिए टैल्क के साथ अंदर और बाहर छिड़का जाता है। दस्ताने के बीच धुंध रखी जाती है। प्रत्येक जोड़ी दस्ताने को अलग से धुंध में लपेटा जाता है और इस रूप में बाइक में रखा जाता है।

रोगाणुओं की रोगजनक संस्कृतियों का बंध्याकरण। माइक्रोबियल कल्चर वाले टेस्ट ट्यूब और कप जिन्हें आगे के काम के लिए जरूरी नहीं है, धातु के टैंक में रखा जाता है, ढक्कन को सील कर दिया जाता है और नसबंदी के लिए सौंप दिया जाता है। 1 एटीएम के दबाव में 30 मिनट के लिए एक आटोक्लेव में रोगजनक रोगाणुओं, वनस्पति रूपों की संस्कृतियों को मार दिया जाता है। आटोक्लेव में नसबंदी के लिए टैंकों की डिलीवरी रसीद के बदले विशेष रूप से नामित व्यक्ति द्वारा की जाती है। नसबंदी मोड एक विशेष पत्रिका में दर्ज किया गया है। रोगजनकता के समूह I और II के रोगाणुओं की संस्कृतियों को नष्ट करते समय, साथ ही इन समूहों को सौंपे गए रोगजनकों द्वारा संक्रमित या संक्रमित होने का संदेह होने पर, अपशिष्ट सामग्री वाले टैंकों को एक साथ आने वाले व्यक्ति की उपस्थिति में उच्च पक्षों के साथ धातु ट्रे पर स्थानांतरित किया जाता है। संक्रामक सामग्री के साथ काम करने की अनुमति है।

नसबंदी के प्रकार

उबाल कर कीटाणुशोधन। एक स्टेरलाइज़र में उबालकर नसबंदी की जाती है। आसुत जल को स्टरलाइज़र में डाला जाता है, क्योंकि नल का पानी स्केल बनाता है। (कांच की वस्तुओं को ठंडे, धातु की वस्तुओं को सोडियम बाइकार्बोनेट के साथ गर्म पानी में डुबोया जाता है)। विसंक्रमित वस्तुओं को 30-60 मिनट के लिए धीमी आँच पर उबाला जाता है। नसबंदी की शुरुआत को स्टरलाइज़र में उबलते पानी का क्षण माना जाता है। उबलने के अंत में, उपकरणों को बाँझ चिमटी के साथ लिया जाता है, जिसे बाकी वस्तुओं के साथ उबाला जाता है।

सूखी गर्मी नसबंदी। पाश्चर ओवन में शुष्क ताप द्वारा बंध्याकरण किया जाता है। नसबंदी के लिए तैयार सामग्री को अलमारियों पर रखा जाता है ताकि यह दीवारों के संपर्क में न आए। कोठरी बंद है और उसके बाद हीटिंग चालू है। 150 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर नसबंदी की अवधि 2 घंटे, 165 डिग्री सेल्सियस पर - 1 घंटा, 180 डिग्री सेल्सियस पर - 40 मिनट, 200 डिग्री सेल्सियस पर - 10-15 मिनट (170 डिग्री सेल्सियस पर कागज और कपास ऊन बारी) पीला, और उच्च तापमान पर जले हुए)। नसबंदी की शुरुआत वह क्षण है जब ओवन में तापमान वांछित ऊंचाई तक पहुंच जाता है। नसबंदी अवधि के अंत में, ओवन को बंद कर दिया जाता है, लेकिन कैबिनेट के दरवाजे पूरी तरह से ठंडा होने तक नहीं खोले जाते हैं, क्योंकि कैबिनेट में प्रवेश करने वाली ठंडी हवा गर्म व्यंजनों में दरारें पैदा कर सकती है।

दबाव में भाप नसबंदी। आटोक्लेव में दबाव में भाप की नसबंदी की जाती है। आटोक्लेव में दो बॉयलर होते हैं जो एक दूसरे में डाले जाते हैं, एक आवरण और एक आवरण। बाहरी बॉयलर को जल-वाष्प कक्ष कहा जाता है, आंतरिक को नसबंदी कक्ष कहा जाता है। स्टीम बॉयलर में भाप का उत्पादन होता है। विसंक्रमित की जाने वाली सामग्री को भीतरी कड़ाही में रखा जाता है। नसबंदी केतली के ऊपरी हिस्से में छोटे-छोटे छेद होते हैं जिनके माध्यम से भाप कक्ष से भाप गुजरती है। आटोक्लेव के ढक्कन को आवरण के साथ भली भांति बंद कर दिया जाता है। सूचीबद्ध मुख्य भागों के अलावा, आटोक्लेव में कई भाग होते हैं जो इसके संचालन को नियंत्रित करते हैं: एक दबाव नापने का यंत्र, एक पानी का गेज ग्लास, एक सुरक्षा वाल्व, निकास, हवा और घनीभूत लंड। प्रेशर गेज का उपयोग नसबंदी कक्ष में बनने वाले दबाव को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। सामान्य वायुमंडलीय दबाव (760 मिमी एचजी। कला।) को शून्य के रूप में लिया जाता है, इसलिए, एक निष्क्रिय आटोक्लेव में, दबाव गेज सुई शून्य पर होती है। प्रेशर गेज रीडिंग और तापमान (तालिका 2) के बीच एक निश्चित संबंध है।

तालिका 2।

प्रेशर गेज रीडिंग और पानी के क्वथनांक का अनुपात

गेज स्केल पर लाल रेखा आटोक्लेव में अनुमत अधिकतम कार्य दबाव को इंगित करती है। सुरक्षा वाल्व अत्यधिक दबाव बिल्डअप से बचाने का काम करता है। यह एक पूर्व निर्धारित दबाव पर सेट होता है, यानी वह दबाव जिस पर नसबंदी की जानी है, जब दबाव गेज तीर लाइन से आगे जाता है, तो आटोक्लेव वाल्व स्वचालित रूप से खुलता है और अतिरिक्त भाप छोड़ता है, जिससे दबाव में और वृद्धि धीमी हो जाती है .

आटोक्लेव की साइड की दीवार पर स्टीम बॉयलर में पानी के स्तर को दर्शाने वाला गेज ग्लास होता है। वॉटर गेज ग्लास की ट्यूब पर, दो क्षैतिज रेखाएँ लगाई जाती हैं - निचली और ऊपरी, जो क्रमशः जल-वाष्प कक्ष में अनुमेय निचले और ऊपरी जल स्तर को दर्शाती हैं। एयर कॉक को नसबंदी की शुरुआत में नसबंदी और पानी-भाप कक्षों से हवा निकालने के लिए डिज़ाइन किया गया है, क्योंकि हवा, एक खराब गर्मी संवाहक होने के कारण, नसबंदी शासन का उल्लंघन करती है। आटोक्लेव के तल पर निष्फल सामग्री के ताप के दौरान बनने वाले संघनन से नसबंदी कक्ष को मुक्त करने के लिए एक संघनक मुर्गा होता है।

आटोक्लेव नियम। काम शुरू करने से पहले, आटोक्लेव और इंस्ट्रूमेंटेशन का निरीक्षण करें। स्वचालित भाप नियंत्रण के साथ आटोक्लेव में, जल वाष्प कक्ष के इलेक्ट्रोवैक्यूम मैनोमीटर पर तीरों को नसबंदी मोड के अनुसार सेट किया जाता है: निचला तीर 0.1 एटीएम पर सेट होता है। निचला, ऊपरी - 0.1 एटीएम। काम के दबाव के ऊपर, पानी-वाष्प कक्ष मापने वाले गिलास के ऊपरी निशान तक पानी से भर जाता है। पानी भरने की अवधि के दौरान, पाइप पर वाल्व जिसके माध्यम से भाप कक्ष में प्रवेश करती है, बॉयलर से बाहर निकलने के लिए मुक्त हवा के लिए खुला रखा जाता है। आटोक्लेव के नसबंदी कक्ष को निष्फल होने वाली सामग्री से भरा जाता है। उसके बाद, आटोक्लेव का ढक्कन (या दरवाजा) बंद कर दिया जाता है, केंद्रीय लॉक या बोल्ट के साथ कसकर बांधा जाता है; विरूपण से बचने के लिए, बोल्टों को क्रॉसवर्ड (व्यास में) खराब कर दिया जाता है। फिर हीटिंग स्रोत (विद्युत प्रवाह, भाप) चालू करें, भाप स्रोत को नसबंदी कक्ष से जोड़ने वाले पाइप पर वाल्व को बंद करें। वाष्पीकरण की शुरुआत और जल-वाष्प कक्ष में दबाव के निर्माण के साथ, एक पर्ज किया जाता है (नसबंदी बॉयलर से हवा को हटा दिया जाता है)। हवा निकालने की विधि आटोक्लेव के डिजाइन द्वारा निर्धारित की जाती है। सबसे पहले, हवा अलग-अलग हिस्सों में निकलती है, फिर भाप की एक सतत धारा दिखाई देती है, यह दर्शाता है कि हवा पूरी तरह से नसबंदी कक्ष से बाहर निकाल दी गई है। हवा निकालने के बाद, वाल्व बंद हो जाता है, और नसबंदी कक्ष में दबाव में धीरे-धीरे वृद्धि शुरू होती है।

नसबंदी की शुरुआत वह क्षण होता है जब दबाव गेज सेट दबाव को इंगित करता है। उसके बाद, हीटिंग की तीव्रता कम हो जाती है ताकि आटोक्लेव में दबाव आवश्यक समय के लिए समान स्तर पर बना रहे। नसबंदी समय के अंत में, हीटिंग बंद कर दिया जाता है। नसबंदी कक्ष में भाप की आपूर्ति करने वाली पाइप लाइन में वाल्व बंद करें और कक्ष में भाप के दबाव को कम करने के लिए घनीभूत (नीचे की ओर) पाइप पर वाल्व खोलें। प्रेशर गेज सुई के शून्य हो जाने के बाद, धीरे-धीरे क्लैम्पिंग उपकरणों को ढीला करें और आटोक्लेव का ढक्कन खोलें।

नसबंदी का तापमान और अवधि निष्फल होने वाली सामग्री की गुणवत्ता और सूक्ष्मजीवों के गुणों से निर्धारित होती है जिससे यह संक्रमित होता है।

नसबंदी कक्ष में तापमान नियंत्रण समय-समय पर बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षणों का उपयोग करके किया जाता है। केंद्रीय महामारी विज्ञान सेवा के बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाओं द्वारा बायोटेस्ट का उत्पादन किया जाता है। यदि ये परीक्षण विफल हो जाते हैं, तो आटोक्लेव की तकनीकी स्थिति की जाँच की जाती है।

भाप नसबंदी। तरल भाप के साथ नसबंदी एक कोच द्रव भाप उपकरण में या एक आटोक्लेव में एक बिना ढके ढक्कन और एक खुले आउटलेट कॉक के साथ किया जाता है। कोच उपकरण एक डबल तल के साथ एक धातु का खोखला सिलेंडर है। ऊपरी और निचली निचली प्लेटों के बीच की जगह को 2/3 पानी से भर दिया जाता है (नसबंदी के बाद बचे पानी को निकालने के लिए एक नल है)। उपकरण के ढक्कन में थर्मामीटर के लिए केंद्र में एक छेद होता है और भाप से बचने के लिए कई छोटे छेद होते हैं। विसंक्रमित की जाने वाली सामग्री को उपकरण के कक्ष में शिथिल रूप से लोड किया जाता है ताकि भाप के साथ इसके सबसे बड़े संपर्क की संभावना प्रदान की जा सके। नसबंदी की शुरुआत उस समय से होती है जब पानी उबलता है और भाप नसबंदी कक्ष में प्रवेश करती है। एक द्रव भाप उपकरण में, मुख्य रूप से पोषक मीडिया को निष्फल किया जाता है, जिसके गुण 100 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर बदलते हैं। बहने वाली भाप के साथ नसबंदी को दोहराया जाना चाहिए, क्योंकि 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक ही हीटिंग पूर्ण कीटाणुशोधन प्रदान नहीं करता है। इस विधि को फ्रैक्शनल नसबंदी कहा जाता है: स्टरलाइज्ड सामग्री का प्रवाहित भाप के साथ उपचार 30 मिनट के लिए प्रतिदिन 3 दिनों तक किया जाता है। नसबंदी के बीच के अंतराल में, बीजाणुओं को वनस्पति रूपों में अंकुरित करने के लिए सामग्री को कमरे के तापमान पर रखा जाता है, जो बाद में हीटिंग के दौरान मर जाते हैं।

टिंडलाइजेशन। Tyndall द्वारा प्रस्तावित 100 ° C से नीचे के तापमान का उपयोग करके टिंडलाइज़ेशन आंशिक नसबंदी है। कीटाणुरहित की जाने वाली सामग्री को 5 दिनों के लिए 60-65 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक घंटे के लिए या 3 दिनों के लिए 70-80 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टैट से लैस पानी के स्नान में गर्म किया जाता है। गर्म करने के बीच, संसाधित सामग्री को 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर रखा जाता है ताकि बीजाणुओं को वानस्पतिक रूपों में अंकुरित किया जा सके, जो बाद के तापों के दौरान मर जाते हैं। टाइन्डलाइज़ेशन का उपयोग प्रोटीन युक्त पोषक मीडिया को निर्जलित करने के लिए किया जाता है।

बैक्टीरियल अल्ट्राफिल्टर के साथ यांत्रिक नसबंदी. बैक्टीरियल फिल्टर का उपयोग तरल को बैक्टीरिया से मुक्त करने के लिए किया जाता है, साथ ही बैक्टीरिया को वायरस, फेज और एक्सोटॉक्सिन से अलग करने के लिए भी किया जाता है। बैक्टीरिया फिल्टर द्वारा वायरस को बनाए नहीं रखा जाता है, और इसलिए शब्द के स्वीकृत अर्थों में अल्ट्राफिल्ट्रेशन को नसबंदी नहीं माना जा सकता है। अल्ट्राफिल्टर के निर्माण के लिए सूक्ष्म झरझरा सामग्री (काओलिन, अभ्रक, नाइट्रोसेल्यूलोज, आदि) का उपयोग किया जाता है जो बैक्टीरिया को फंसा सकता है।

एस्बेस्टस फिल्टर (सीट्ज़ फिल्टर) छोटे और बड़े तरल पदार्थ को छानने के लिए 3-5 मिमी मोटी और 35 और 140 मिमी व्यास की एस्बेस्टस प्लेटें हैं। हमारे देश में, एस्बेस्टस फिल्टर दो ग्रेड में निर्मित होते हैं: "एफ" (फ़िल्टरिंग), निलंबित कणों को बनाए रखना, लेकिन बैक्टीरिया को पास करना, और "एसएफ" (स्टरलाइज़ करना), सघन, बैक्टीरिया को बनाए रखना। उपयोग करने से पहले, एस्बेस्टस फिल्टर को फिल्टर उपकरण में लगाया जाता है और एक आटोक्लेव में उनके साथ निष्फल किया जाता है। अभ्रक फिल्टर एक बार उपयोग किया जाता है। मेम्ब्रेन अल्ट्राफिल्टर नाइट्रोसेल्युलोज से बने होते हैं और 35 मिमी के व्यास और 0.1 मिमी की मोटाई के साथ सफेद डिस्क होते हैं।

बैक्टीरियल फिल्टर ताकना आकार में भिन्न होते हैं और सीरियल नंबर (तालिका 3) द्वारा निर्दिष्ट होते हैं।

टेबल तीन

बैक्टीरियल फिल्टर

मेम्ब्रेन फिल्टर उपयोग से तुरंत पहले उबाल कर निष्फल होते हैं। फिल्टर को आसुत जल में 50-60 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर गर्म किया जाता है ताकि उन्हें मुड़ने से रोका जा सके, 30 मिनट के लिए कम गर्मी पर उबाला जाता है, पानी को 2-3 बार बदल दिया जाता है। क्षति से बचने के लिए स्मूथ टिप वाले फ्लेम्बेड और कूल्ड चिमटी के साथ स्टेरेलाइज़र से स्टेरलाइज़ किए गए फ़िल्टर हटा दिए जाते हैं।

तरल पदार्थों को फ़िल्टर करने के लिए, विशेष फ़िल्टर उपकरणों में, विशेष रूप से सेट्ज़ फ़िल्टर में बैक्टीरिया फ़िल्टर लगाए जाते हैं।

इसमें 2 भाग होते हैं: ऊपरी, एक सिलेंडर या फ़नल के आकार का, और उपकरण का निचला सहायक भाग, धातु की जाली या एक साफ सिरेमिक प्लेट से बने तथाकथित फ़िल्टर टेबल के साथ, जिस पर एक झिल्ली या एस्बेस्टस फ़िल्टर होता है। स्थापित है। उपकरण के सहायक भाग में एक फ़नल का आकार होता है, जिसका पतला हिस्सा बन्सेन फ्लास्क की गर्दन के रबर डाट में स्थित होता है। काम करने की स्थिति में, डिवाइस के ऊपरी हिस्से को शिकंजा के साथ निचले हिस्से में तय किया जाता है। निस्पंदन शुरू करने से पहले, जकड़न पैदा करने के लिए स्थापना के विभिन्न हिस्सों के जंक्शनों को पैराफिन से भर दिया जाता है। फ्लास्क की आउटलेट ट्यूब एक मोटी दीवार वाली रबर ट्यूब से पानी के जेट, तेल या साइकिल पंप से जुड़ी होती है। उसके बाद, फ़िल्टर किए गए तरल को उपकरण के सिलेंडर या फ़नल में डाला जाता है और पंप को चालू कर दिया जाता है, जिससे प्राप्त बर्तन में एक वैक्यूम बन जाता है। परिणामी दबाव अंतर के परिणामस्वरूप, फ़िल्टर्ड तरल फिल्टर के छिद्रों से रिसीवर में गुजरता है। सूक्ष्मजीव फिल्टर सतह पर रहते हैं।

स्मीयरों की तैयारी

रंगीन रूप में सूक्ष्मजीवों का अध्ययन करने के लिए, एक कांच की स्लाइड पर एक धब्बा बनाया जाता है, सुखाया जाता है, तय किया जाता है और फिर दाग दिया जाता है।

परीक्षण सामग्री एक अच्छी तरह से विक्षेपित ग्लास स्लाइड की सतह पर एक पतली परत में फैली हुई है।

स्मीयरों को रोगाणुओं, रोग संबंधी सामग्री (थूक, मवाद, मूत्र, रक्त, आदि) और लाशों के अंगों से तैयार किया जाता है।

स्मीयरों को तैयार करने की तकनीक अध्ययन की जा रही सामग्री की प्रकृति से निर्धारित होती है।

एक तरल पोषक माध्यम के साथ और तरल रोग सामग्री (मूत्र, मस्तिष्कमेरु द्रव, आदि) से माइक्रोबियल संस्कृतियों से स्मीयरों की तैयारी। टेस्ट लिक्विड की एक छोटी बूंद को एक ग्लास स्लाइड पर बैक्टीरियल लूप के साथ लगाया जाता है और लूप को एक सिक्के के व्यास के साथ एक सर्कल के रूप में एक समान परत में एक गोलाकार गति में वितरित किया जाता है।

रक्त स्मीयरों की तैयारी। इसके एक सिरे के करीब, कांच की स्लाइड पर रक्त की एक बूंद डाली जाती है। दूसरा - पॉलिश - ग्लास, जो ऑब्जेक्ट ग्लास की तुलना में संकरा होना चाहिए, पहले वाले पर 45 ° के कोण पर रखा जाता है और इसके संपर्क में आने तक रक्त की बूंद तक लाया जाता है। रक्त के पॉलिश किए हुए किनारे पर फैलने के बाद, कांच को दाएं से बाएं ओर सरकाया जाता है, समान रूप से रक्त को कांच की पूरी सतह पर एक पतली परत में वितरित किया जाता है। स्ट्रोक की मोटाई चश्मे के बीच के कोण पर निर्भर करती है: कोण जितना तेज होगा, स्ट्रोक उतना ही पतला होगा। ठीक से तैयार किए गए स्मीयर में हल्का गुलाबी रंग होता है और पूरे में समान मोटाई होती है।

मोटी बूंद की तैयारी। पाश्चर पिपेट के साथ कांच की स्लाइड के बीच में रक्त की एक बूंद लगाई जाती है या कांच सीधे रक्त की उभरी हुई बूंद पर लगाया जाता है। कांच पर लगाए गए रक्त को एक जीवाणु लूप के साथ सूंघा जाता है ताकि परिणामी स्मीयर का व्यास एक पैसे के सिक्के के आकार से मेल खाता हो। रक्त सूखने तक कांच को क्षैतिज स्थिति में छोड़ दिया जाता है। "मोटी बूंद" में रक्त असमान रूप से वितरित किया जाता है, जिससे असमान किनारा बनता है।

चिपचिपी सामग्री (थूक, मवाद) से स्मीयर तैयार करना। संकीर्ण किनारे के करीब एक कांच की स्लाइड पर जमा थूक या मवाद को दूसरी कांच की स्लाइड से ढक दिया जाता है। चश्मा एक दूसरे के खिलाफ थोड़ा दबाया जाता है।

उसके बाद, चश्मे के मुक्त सिरों को दोनों हाथों की 1 और 2 अंगुलियों द्वारा पकड़ लिया जाता है और विपरीत दिशाओं में फैला दिया जाता है, ताकि चलते समय दोनों गिलास एक-दूसरे के खिलाफ अच्छी तरह से फिट हो जाएं। स्मीयरों को समान रूप से वितरित सामग्री से प्राप्त किया जाता है, जो एक बड़े क्षेत्र पर कब्जा कर लेता है।

सघन पोषक माध्यम वाले कल्चर से स्मीयर तैयार करना। एक साफ, अच्छी तरह से वसा रहित कांच की स्लाइड के बीच में पानी की एक बूंद डाली जाती है, अध्ययन के तहत माइक्रोबियल कल्चर की थोड़ी मात्रा के साथ एक जीवाणु लूप पेश किया जाता है, ताकि तरल की बूंद थोड़ी बादलदार हो जाए। उसके बाद, लूप पर अतिरिक्त माइक्रोबियल सामग्री को ज्वाला में जलाया जाता है और उपरोक्त विधि के अनुसार स्मीयर तैयार किया जाता है।

अंगों और ऊतकों से स्मीयर तैयार करना। कीटाणुशोधन के उद्देश्य से, अंग की सतह को चिमटी की गर्म शाखाओं से दागा जाता है, इस स्थान पर एक चीरा लगाया जाता है, और नुकीली कैंची से गहराई से ऊतक का एक छोटा टुकड़ा काटा जाता है, जिसे दो कांच की स्लाइडों के बीच रखा जाता है। . फिर मवाद और थूक से स्मीयर तैयार करते समय उसी तरह आगे बढ़ें। यदि अंग का ऊतक घना है, तो स्केलपेल के साथ चीरे की गहराई से एक खुरचनी बनाई जाती है। स्क्रैपिंग द्वारा प्राप्त सामग्री कांच की सतह पर एक स्केलपेल या बैक्टीरियल लूप के साथ एक पतली परत में फैली हुई है।

ऊतक के तत्वों और उसमें मौजूद सूक्ष्मजीवों की सापेक्ष स्थिति का अध्ययन करने के लिए स्मीयर बनाए जाते हैं। ऐसा करने के लिए, अंग के बीच से काटे गए ऊतक के एक छोटे टुकड़े को चिमटी से पकड़ा जाता है और कटी हुई सतह के साथ कांच की स्लाइड पर क्रमिक रूप से कई बार लगाया जाता है, इस प्रकार स्मीयरों-छापों की एक श्रृंखला प्राप्त होती है।

स्मीयरों को सुखाना और लगाना। एक कांच की स्लाइड पर तैयार एक स्मीयर को हवा में सुखाया जाता है और पूरी तरह सूखने के बाद स्थिर किया जाता है। फिक्सिंग करते समय, स्मीयर ग्लास स्लाइड की सतह पर तय किया जाता है, और इसलिए, तैयारी के बाद के धुंधला होने के दौरान, माइक्रोबियल कोशिकाओं को धोया नहीं जाता है। इसके अलावा, मारे गए माइक्रोबियल कोशिकाएं जीवित लोगों की तुलना में बेहतर होती हैं।

फिक्सेशन की एक भौतिक विधि के बीच एक अंतर किया जाता है, जो एक माइक्रोबियल सेल पर उच्च तापमान के प्रभाव पर आधारित होता है, और रासायनिक विधियों में प्रोटीन जमावट का कारण बनने वाले एजेंटों का उपयोग शामिल होता है। लौ के ऊपर रोगज़नक़ी के I-II समूहों के रोगजनकों वाले स्मीयरों को ठीक करना असंभव है।

फिक्सिंग का भौतिक तरीका। तैयारी के साथ कांच की स्लाइड चिमटी या दाहिने हाथ की I और II उंगलियों के साथ पसलियों के पीछे एक स्ट्रोक के साथ और बर्नर की लौ के ऊपरी भाग पर 2-3 बार एक चिकनी गति के साथ ली जाती है। संपूर्ण निर्धारण प्रक्रिया में 2 s से अधिक समय नहीं लगना चाहिए। फिक्सेशन की विश्वसनीयता निम्नलिखित सरल तकनीक द्वारा जाँची जाती है: स्मीयर से मुक्त ग्लास स्लाइड की सतह को बाएं हाथ की पिछली सतह पर लगाया जाता है। स्मीयर के उचित निर्धारण के साथ, ग्लास गर्म होना चाहिए, लेकिन जलन का कारण नहीं बनना चाहिए।

रासायनिक निर्धारण। तालिका 4 में दिखाए गए रसायनों और यौगिकों का उपयोग स्मीयरों को ठीक करने के लिए भी किया जाता है।

तालिका 4

रासायनिक निर्धारण के लिए पदार्थ

सूखे स्मियर वाली स्लाइड को फिक्सिंग एजेंट वाली बोतल में डुबोया जाता है और फिर हवा में सुखाया जाता है।

रंग स्ट्रोक

स्मीयर धुंधला करने की तकनीक। स्मीयरों को रंगने के लिए, पेंट सॉल्यूशन या कलरिंग पेपर का उपयोग किया जाता है, जिसे ए.आई. द्वारा प्रस्तावित किया गया था। नीला। तैयारी में आसानी, उपयोग में आसानी, साथ ही रंग भरने वाले कागज को अनिश्चित काल तक संग्रहीत करने की संभावना, रंग भरने के विभिन्न तरीकों में उनके व्यापक उपयोग का आधार थी।

रंग के कागज के साथ रंग स्ट्रोक। पानी की कुछ बूंदों को सूखे और स्थिर तैयारी के लिए लागू किया जाता है, रंगीन कागज 2x2 सेमी आकार में रखे जाते हैं।पूरे धुंधला होने के समय के दौरान, कागज को नम रहना चाहिए और कांच की सतह के खिलाफ अच्छी तरह से फिट होना चाहिए। सूखने पर कागज को पानी से भी गीला कर दिया जाता है। स्मियर स्टेनिंग की अवधि स्टेनिंग विधि द्वारा निर्धारित की जाती है। धुंधला होने के अंत में, कागज को चिमटी से सावधानीपूर्वक हटा दिया जाता है, और धब्बा को नल के पानी से धोया जाता है और हवा या फिल्टर पेपर में सुखाया जाता है।

डाई के घोल से स्मीयरों को धुंधला करना। एक डाई को पिपेट के साथ सूखे और निश्चित तैयारी पर इतनी मात्रा में लगाया जाता है कि यह पूरे स्मीयर को कवर करता है। डाई के सान्द्र विलयनों (ज़िहल कार्बोलिक फुकसीन, कार्बोलिक जेंटियन या क्रिस्टल वायलेट) के साथ धुंधला हो जाने पर, स्टेनिंग फिल्टर पेपर के माध्यम से किया जाता है जो डाई कणों को बनाए रखता है: फिल्टर पेपर की एक पट्टी को एक निश्चित स्मीयर पर रखा जाता है और एक डाई समाधान डाला जाता है। यह।

सूक्ष्म परीक्षण के लिए तैयार स्मीयरों को सुखाया और स्थिर किया जाता है। रंग सरल और जटिल है। साधारण रंगाई में एक निश्चित अवधि के लिए किसी एक पेंट को स्मीयर पर लगाना शामिल है। अक्सर, अल्कोहल-पानी (1:10) फ़िफ़र फुकसीन, लेफ़लर की मेथिलीन ब्लू और सफ़्रैनिन का उपयोग साधारण रंग के लिए किया जाता है। ईोसिन, एक अम्लीय डाई के रूप में, केवल कोशिकाओं के साइटोप्लाज्म को धुंधला करने और पृष्ठभूमि को रंगने के लिए उपयोग किया जाता है। बैक्टीरिया को धुंधला करने के लिए एसिड फुकसिन पूरी तरह से अनुपयुक्त है।

फोटो lentachel.ru से

ठीक सौ साल पहले, वैज्ञानिक अनुसंधान के दौरान संक्रमण को लगभग अपरिहार्य माना जाता था। कई वैज्ञानिकों ने रोगाणुओं और जीवाणुओं का अध्ययन करके अपने शरीर को मृत्यु के खतरे में डाल दिया, जिसकी प्रकृति बहुत कम ज्ञात थी। आज, हमारे आस-पास के अधिकांश खतरनाक सूक्ष्मजीवों का वर्णन और अध्ययन किया गया है, इसके अलावा, बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाओं के लिए विशेष चिकित्सा उपकरण हैं, जिनमें से 99% संभावना के साथ शोधकर्ताओं को किसी भी पेशेवर जोखिम से बचाता है।

सभी वस्तुएं जिनके साथ बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला के कर्मचारी रोगजनक माइक्रोफ्लोरा से संतृप्त हैं। कमरे में एक स्वस्थ वातावरण बनाए रखने के लिए, संदूषित सामग्री के सीधे संपर्क से बचने के लिए, बेहतर बाधा और रोगाणुरोधी गुणों वाले फर्नीचर, कपड़े और बर्तनों का उपयोग किया जाता है।

हर्मेटिक रूप से सील किए गए ग्लेज़ेड और धातु के अलमारियाँ और बक्से, कीटाणुशोधन, नसबंदी और आटोक्लेव उपकरण के लिए सुविधाजनक प्रयोगशाला टेबल, और एक लॉक करने योग्य रेफ्रिजरेटर ऐसी वस्तुएं हैं जो संक्रमित नमूनों पर शोध करने वाले लोगों की सुरक्षा सुनिश्चित करती हैं।

नमूनों को संग्रहित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले सभी बर्तन: फ्लास्क, स्नातक किए हुए बीकर, प्रयोगशाला की हवा में कीटाणुओं के प्रसार से बचने के लिए भली भांति बंद करके सील किए जाते हैं।

कंटेनरों के निर्माण के लिए, विशेष अटूट कांच या उच्च शक्ति वाले प्लास्टिक का उपयोग किया जाता है। डबल दीवारें, एक विशेष स्थिर तल आकार, ढक्कन, ट्रे और क्युवेट पर रबर तत्व मेनिंगोकोकी, स्ट्रेप्टोकोकी, स्टेफिलोकोसी, बेसिली और क्लोस्ट्रीडिया जैसे खतरनाक पड़ोसियों को अलग करने के लिए सर्वोत्तम स्थिति बनाते हैं।

अनुसंधान शुरू करने से पहले, कर्मचारी विशेष कपड़े पहनते हैं: एक सुरक्षात्मक गाउन, मुखौटा, चश्मा। बहुत खतरनाक पदार्थों के साथ काम करने के लिए, रबरयुक्त एप्रन या जल-विकर्षक संसेचन वाले विशेष गाउन का उपयोग किया जाता है।

पराबैंगनी विकिरण और जीवाणुनाशक लैंप के साथ उचित समय पर वायु उपचार, सिद्ध धुलाई संशोधनों का उपयोग, सुरक्षात्मक कपड़ों के एक पूरे सेट के साथ सभी कर्मचारियों की आपूर्ति एक आम तौर पर स्वीकृत मानक है, जिससे विचलन प्रशासनिक रूप से होता है, और गंभीर परिणामों के मामले में, आपराधिक रूप से दंडनीय।

एकीकृत उपकरण और सभी एहतियाती उपायों के कार्यान्वयन से कर्मचारियों के स्वास्थ्य को बनाए रखने, व्यावसायिक रुग्णता को कम करने और उच्च अनुसंधान दक्षता सुनिश्चित करने में मदद मिलती है: यह देखा गया है कि विश्वसनीय, सिद्ध सुरक्षात्मक उपकरणों का उपयोग चिंता को कम करता है, तेजी से और अधिक प्रभावी कार्यों को बढ़ावा देता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला

बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला को 1996 में एक स्वतंत्र उपखंड के रूप में अलग किया गया था।

प्रमुख - चिकित्सा विज्ञान के उम्मीदवार, उच्चतम श्रेणी के जीवाणुविज्ञानी पोलिकारपोवा स्वेतलाना वेनीमिनोव्ना

गतिविधि के प्राथमिकता वाले क्षेत्र

निम्नलिखित प्रकार के विश्लेषण बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला में किए जाते हैं:

रक्त (हेमोकल्चर) और मस्तिष्कमेरु द्रव की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा;
- थूक, श्वासनली महाप्राण, ब्रोन्कियल धुलाई की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा;
- विभिन्न foci से छुट्टी दे दी सूजन की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा: टॉन्सिलो-ग्रसनीशोथ, ओटिटिस मीडिया, साइनसाइटिस, आदि;
- विराम चिह्नों, बहावों, स्रावों की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा;
- सशर्त रूप से रोगजनक माइक्रोफ्लोरा के लिए ग्रसनी और नाक के श्लेष्म झिल्ली की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा;
- बैक्टीरियुरिया की डिग्री के निर्धारण के साथ मूत्र की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा;
- सशर्त रूप से रोगजनक माइक्रोफ्लोरा के लिए जननांगों के निर्वहन की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा;
- वियोज्य कंजाक्तिवा की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा;
- रोगजनक आंतों के वनस्पतियों के लिए मल की परीक्षा;
- डिस्बैक्टीरियोसिस के लिए मल की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा;
- स्तन के दूध की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा;
- समूह बी स्ट्रेप्टोकोक्की के प्रतिजन का गुणात्मक निर्धारण;
- प्रतिजन का गुणात्मक निर्धारण हैलीकॉप्टर पायलॉरी मानव मल में;
- विषाक्त पदार्थों ए और बी के प्रतिजन का गुणात्मक निर्धारण क्लोस्ट्रीडियम बेलगाम मानव मल में;
- एंटीबायोटिक दवाओं के लिए पृथक सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता / प्रतिरोध का आकलन।

उपलब्धियों

बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला में, विभिन्न बायोमैटिरियल्स से पृथक रोगजनक और सशर्त रूप से रोगजनक सूक्ष्मजीवों के एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति संवेदनशीलता को अलग करने, पहचानने और निर्धारित करने के लिए अध्ययन किया जाता है।

शास्त्रीय नैदानिक ​​सूक्ष्म जीव विज्ञान के सिद्धांतों के आधार पर, प्रयोगशाला ने आणविक आनुवंशिक प्रौद्योगिकियों में नवीनतम प्रगति के आधार पर नई शोध विधियों की शुरुआत की है।

बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला सूक्ष्मजैविक अध्ययन करती है जो आधुनिक रूसी और अंतरराष्ट्रीय मानकों को पूरा करती है।

हर साल, प्रयोगशाला कर्मचारी अस्पताल के विभागों में अस्पताल में भर्ती 10,000 से अधिक रोगियों, प्रसूति अस्पताल के 6,000 रोगियों और नवजात शिशुओं, सीडीसी और ईएओ पॉलीक्लिनिक्स के 5,000 से अधिक रोगियों, प्रति वर्ष 45,000 से अधिक सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण करते हैं।

प्रयोगशाला के आधार पर, "एक माइक्रोबायोलॉजिस्ट, एपिडेमियोलॉजिस्ट और केमोथेरेपिस्ट का स्वचालित कार्यस्थल" विकसित किया गया है और लगातार आधुनिकीकरण किया जा रहा है, जिसमें दो कार्यक्रम शामिल हैं: माइक्रोबायोलॉजिकल मॉनिटरिंग सिस्टम "माइक्रोब" (एसएमएम)। कार्यक्रम अस्पताल की सूक्ष्मजीवविज्ञानी सेवा के मुख्य कार्यों को हल करने की अनुमति देते हैं: माइक्रोबियल परिदृश्य की निरंतर निगरानी और इसके एंटीबायोटिक प्रतिरोध के स्तर को पर्याप्त एंटीबायोटिक चिकित्सा और स्वास्थ्य संबंधी संक्रमणों (एचएआई) के मामलों का समय पर पता लगाने के लिए।

सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन की उचित गुणवत्ता सुनिश्चित करने के लिए, प्रयोगशाला के काम में निम्नलिखित को शामिल किया गया है:

• मानक के अनुसार गुणवत्ता प्रबंधन प्रणाली गोस्ट आर आईएसओ 15189-15

चिकित्सा प्रयोगशालाएँ। गुणवत्ता और क्षमता के लिए विशेष आवश्यकताएं";

• मूल बातें दुबलाप्रौद्योगिकियां (लीन उत्पादन) - नुकसान को कम करके काम की गुणवत्ता में सुधार लाने के उद्देश्य से प्रयोगशाला प्रबंधन के दृष्टिकोण: सामग्री, वित्तीय, अस्थायी;
• व्यवस्था 5एस- दुबले उत्पादन का एक उपकरण - संचालन करने, व्यवस्था बनाए रखने, सफाई, सटीकता, समय और ऊर्जा की बचत के लिए इष्टतम स्थिति बनाने के लिए कार्यक्षेत्र का संगठन।

2014 से, प्रयोगशाला मध्य एशिया और पूर्वी यूरोप के देशों में एंटीबायोटिक प्रतिरोध के नियंत्रण के लिए अंतर्राष्ट्रीय कार्यक्रम में भाग ले रही है, जिसका आयोजन किया गया है। WHO(यूके एनईक्यूएएस)। प्रयोगशाला "क्लिनिकल माइक्रोबायोलॉजी" (एफएसवीओके) खंड में एक विशेषज्ञ प्रयोगशाला के रूप में प्रयोगशाला अनुसंधान के बाहरी गुणवत्ता मूल्यांकन में भाग लेती है।

कई वर्षों से, मास्को स्वास्थ्य देखभाल सुविधा में माध्यमिक चिकित्सा शिक्षा वाले कर्मचारियों के लिए अस्पताल के आधार पर बैक्टीरियोलॉजिस्ट सुधार के प्रमाणन चक्र "क्लिनिकल माइक्रोबायोलॉजी में आधुनिक अनुसंधान के तरीके" का संचालन कर रहे हैं।

हाई टेक

• संक्रामक रोगों के निदान में आणविक आनुवंशिक विधियों की शुरूआत - "वास्तविक समय में" पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) की विधि;

• फेनोटाइपिक और जीनोटाइपिक विधियों द्वारा जीवाणुरोधी दवाओं के विकास और जीवाणु प्रतिरोध के प्रसार के मुख्य तंत्र का निर्धारण;

• संक्रामक और भड़काऊ रोगों के रोगजनकों के एटियलॉजिकल निदान के लिए इम्यूनोक्रोमैटोग्राफिक एक्सप्रेस विधियों (आईएमसीटी) का उपयोग;

• रोगाणुरोधी दवाओं के लिए सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता का निर्धारण करने और प्रतिरोध तंत्र की पहचान करने के परिणामों की व्याख्या करने के लिए बैक्टीरियोलॉजिस्ट, उपस्थित चिकित्सकों, नैदानिक ​​​​फार्माकोलॉजिस्ट के लिए विशेषज्ञ राय के एक इलेक्ट्रॉनिक मॉड्यूल का निर्माण और कार्यान्वयन।

वैज्ञानिक गतिविधि

इकाई के अस्तित्व के दौरान प्रयोगशाला में 2 पीएच.डी शोध प्रबंध पूरे किए गए। डिवीजन के कर्मचारी नियमित रूप से अंतरराष्ट्रीय, अखिल रूसी, शहर कांग्रेस, सम्मेलनों, संगोष्ठियों और संगोष्ठियों में प्रस्तुतियां देते हैं, नियमित रूप से वैज्ञानिक और व्यावहारिक प्रकाशनों में प्रकाशित होते हैं।

बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला इसके साथ सहयोग करती है:

• महामारी विज्ञान और सूक्ष्म जीव विज्ञान के लिए FSBI फेडरल रिसर्च सेंटर

उन्हें। MZRF के मानद शिक्षाविद एन.एफ. गामालेया";

• रूसी संघ के स्वास्थ्य मंत्रालय का FGAU "बच्चों के स्वास्थ्य के लिए वैज्ञानिक केंद्र";
• रूसी एकेडमी ऑफ मेडिकल साइंसेज के संघीय राज्य बजट वैज्ञानिक संस्थान "मेडिकल जेनेटिक रिसर्च सेंटर";
• Rospotrebnadzor की महामारी विज्ञान का FBUN सेंट्रल रिसर्च इंस्टीट्यूट;
• FBUN मॉस्को रिसर्च इंस्टीट्यूट ऑफ एपिडेमियोलॉजी एंड माइक्रोबायोलॉजी। जीएन गैब्रीचेव्स्की रोस्पोट्रेबनादज़ोर;
• प्रजनन चिकित्सा और सर्जरी विभाग, मॉस्को स्टेट यूनिवर्सिटी ऑफ़ मेडिसिन एंड डेंटिस्ट्री का नाम एआई एव्डोकिमोव (एमजीएमएसयू) के नाम पर रखा गया;

निम्नलिखित क्षेत्रों में वैज्ञानिक कार्य किया जाता है:

• माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स और हेल्थकेयर से जुड़े संक्रमणों (HAIs) की रोकथाम। स्वास्थ्य देखभाल सुविधाओं में माइक्रोबियल पारिस्थितिकी।
• सिस्टिक फाइब्रोसिस वाले रोगियों में निचले श्वसन पथ के संक्रमण के सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान की विशेषताएं;
• रोगाणुरोधी दवाओं के लिए एंटरोबैक्टीरिया के प्रतिरोध के तंत्र का अध्ययन;
• गर्भवती महिलाओं और नवजात शिशुओं में समूह बी स्ट्रेप्टोकोकी की गाड़ी के निदान के लिए एल्गोरिदम का विकास।

लेख, सम्मेलन

2016

प्रयोगशाला के उपकरण

वर्तमान में, बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला आधुनिक उपकरणों से सुसज्जित है:

• स्वचालित रक्त संस्कृति विश्लेषक वर्साट्रेक(ट्रेक डायग्नोस्टिक सिस्टम) - जल्द से जल्द सेप्सिस का निदान करने की क्षमता - 90% सकारात्मक परिणाम पहले दिन के भीतर पता चल जाते हैं। अधिकतम अनुसंधान प्रोटोकॉल समय 5 है
• सूक्ष्मजीवों की पहचान और संवेदनशीलता परीक्षण के लिए बैक्टीरियोलॉजिकल विश्लेषक फीनिक्स 100(बीडी) - एक पहचान परिणाम प्राप्त करने का औसत समय 6-8 घंटे है, एक रोगाणुरोधी संवेदनशीलता परिणाम प्राप्त करने का औसत समय 12-16 घंटे है।
• अर्ध-स्वचालित विश्लेषक आईईएमरीडर(थर्मोलैबसिस्टम्स), जो न केवल सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता को पहचानने और निर्धारित करने के लिए संभव बनाता है, बल्कि कई व्यावहारिक और वैज्ञानिक समस्याओं को भी हल करता है: मूत्र और अन्य जैव सामग्री के माइक्रोबियल संदूषण का निर्धारण, एंटीबायोटिक चिकित्सा की प्रभावशीलता का प्रयोगशाला नियंत्रण, मूल्यांकन रक्त सीरम की जीवाणुनाशक गतिविधि, और सूक्ष्मजीव विकास के गतिज मॉडल की जांच करने के लिए भी।

सूचना प्रयोगशाला प्रणाली "एलिसा" को प्रयोगशाला के काम में पेश किया गया है, एक बैक्टीरियोलॉजिस्ट का प्रत्येक कार्यस्थल कम्प्यूटरीकृत है।

टीम

पिवकिना नादेज़्दा वासिलिवना

उच्चतम श्रेणी के डॉक्टर-बैक्टीरियोलॉजिस्ट के पास "बैक्टीरियोलॉजी" विशेषता में पेशेवर पुन: प्रशिक्षण है। इंटरनेशनल एसोसिएशन ऑफ़ क्लिनिकल माइक्रोबायोलॉजिस्ट एंड एंटीमाइक्रोबियल कीमोथेरेपिस्ट (IACMAC) के सदस्य, फेडरेशन ऑफ़ लेबोरेटरी मेडिसिन (FLM) के सदस्य। वह क्लिनिकल माइक्रोबायोलॉजी की समस्याओं पर कई वैज्ञानिक लेखों के सह-लेखक हैं। 1992 से विशेषता में कार्य अनुभव।

टिमोफीवा ओल्गा गेनाडिएवना

उच्चतम श्रेणी के डॉक्टर-बैक्टीरियोलॉजिस्ट ने "बैक्टीरियोलॉजी" विशेषता में इंटर्नशिप पूरी की, "नैदानिक ​​​​नैदानिक ​​​​प्रयोगशालाओं में पीसीआर विश्लेषण" विषय पर एक योग्यता सुधार पाठ्यक्रम पारित किया। फेडरेशन ऑफ लेबोरेटरी मेडिसिन (एफएलएम) के सदस्य। वह वर्तमान में अपनी पीएचडी थीसिस पर काम कर रही है। क्लिनिकल माइक्रोबायोलॉजी की समस्याओं पर प्रकाशन हैं। 1996 से विशेषता में कार्य अनुभव।

बोंडारेंको नताल्या अलेक्जेंड्रोवना

पहली श्रेणी के डॉक्टर-बैक्टीरियोलॉजिस्ट, फेडरेशन ऑफ लेबोरेटरी मेडिसिन (एफएलएम) के सदस्य। वह क्लिनिकल माइक्रोबायोलॉजी की समस्याओं पर कई वैज्ञानिक लेखों के सह-लेखक हैं। 1988 से विशेषता में कार्य अनुभव।

बालिना वेलेरिया व्लादिमीरोवाना

डॉक्टर-बैक्टीरियोलॉजिस्ट, नैदानिक ​​​​प्रयोगशाला निदान के डॉक्टर। उन्होंने विशेषता "क्लिनिकल लेबोरेटरी डायग्नोस्टिक्स" में इंटर्नशिप पूरी की है, विशेषता "बैक्टीरियोलॉजी" में पेशेवर रिट्रेनिंग है। "संक्रामक रोगों के निदान में आणविक आनुवंशिक तरीके" विषय पर उत्तीर्ण योग्यता सुधार। फेडरेशन ऑफ लेबोरेटरी मेडिसिन (एफएलएम) के सदस्य। 2013 से विशेषता में कार्य अनुभव।

परिचर्या कर्मचारी

प्रयोगशाला में कार्य:

• 1 मेडिकल टेक्नोलॉजिस्ट
• 1 चिकित्सा प्रयोगशाला तकनीशियन
• 5 प्रयोगशाला पैरामेडिक्स
• 1 प्रयोगशाला सहायक
• सभी कर्मचारियों के पास उच्चतम योग्यता श्रेणी है।

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माइक्रोबायोलॉजिकल रिसर्च के लिए अस्पतालों और पॉलीक्लिनिक में या उनसे स्वतंत्र रूप से बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाएं मौजूद हैं। वे अनुसंधान के लिए बीमार लोगों (थूक, मूत्र, मवाद, मल, रक्त, मस्तिष्कमेरु द्रव, आदि) से प्राप्त विभिन्न सामग्री प्राप्त करते हैं। इसके अलावा, स्वच्छता और बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाएँ भी हैं जिनमें पानी, हवा और खाद्य उत्पादों को बैक्टीरियोलॉजिकल नियंत्रण के अधीन किया जाता है।
संक्रामक रोगों की रोकथाम में बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाओं की भूमिका भी महान है। कुछ लोग एक संक्रामक बीमारी (टाइफाइड बुखार, पेचिश, डिप्थीरिया, आदि) से पीड़ित होने के बाद भी रोगजनक (रोगजनक) रोगाणुओं को वातावरण में छोड़ते रहते हैं। ये तथाकथित जीवाणु वाहक हैं। स्वस्थ लोगों में बैक्टीरिया के वाहक भी होते हैं। ऐसे जीवाणु वाहकों की पहचान करके, बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाएँ स्वास्थ्य अधिकारियों को कई निवारक उपाय करने में मदद करती हैं।
रोगजनक सूक्ष्मजीवों से दूषित पानी और खाद्य उत्पाद टाइफाइड बुखार, हैजा आदि की महामारी (सामूहिक रोग) पैदा कर सकते हैं, यही कारण है कि पीने के पानी, दूध और अन्य उत्पादों की अच्छी गुणवत्ता पर दैनिक सैनिटरी और बैक्टीरियोलॉजिकल नियंत्रण इतना महत्वपूर्ण है।
एक बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला में कम से कम तीन कमरे होने चाहिए: 1) एक छोटा कमरा - परीक्षण प्राप्त करने और जारी करने के लिए एक रिसेप्शन डेस्क; 2) माध्यम और धुलाई - पोषक मीडिया और बर्तन धोने की तैयारी के लिए; 3) बैक्टीरियोलॉजिकल रिसर्च के उत्पादन के लिए एक प्रयोगशाला। प्रायोगिक जानवरों (विवरियम) को रखने के लिए एक कमरा होना वांछनीय है। प्रत्येक कमरे में उपयुक्त फर्नीचर (रसोई और प्रयोगशाला टेबल, विभिन्न अलमारियाँ, मल, आदि) होना चाहिए।
निम्नलिखित दैनिक प्रयोगशाला कार्य के लिए आवश्यक सबसे महत्वपूर्ण वस्तुओं की सूची है। उनके उपयोग का उद्देश्य, उन्हें कैसे संभालना है, साथ ही डिवाइस के सिद्धांत को पाठ्यक्रम के प्रासंगिक खंडों में वर्णित किया गया है।
ऑप्टिकल उपकरण। विसर्जन प्रणाली, आवर्धक, एग्लूटिनोस्कोप के साथ जैविक माइक्रोस्कोप।
नसबंदी और हीटिंग के लिए उपकरण। उपकरणों के लिए आटोक्लेव, द्रव भाप उपकरण, ओवन, सेट्ज़ फिल्टर, थर्मोस्टैट्स, स्टेरलाइज़र।
खाना पकाने के वातावरण के लिए उपकरण। गर्म निस्पंदन के लिए फ़नल, मीडिया डालने के लिए फ़नल, पानी के स्नान, विभिन्न आकारों के सॉसपैन, वज़न के साथ कैलिब्रेट किए गए तराजू, फ़िल्टर करने के लिए मांस की चक्की, धातु और लकड़ी के स्टैंड।
औजार। विभिन्न आकृतियों और आकारों के स्कैलपेल्स: मास्क, सीधे, घुमावदार, कुंद, आंत, शारीरिक, सर्जिकल चिमटी, सीरिंज।
कांच की वस्तुएं। ग्लास स्लाइड, एक छेद के साथ ग्लास स्लाइड, कवरस्लिप, बैक्टीरियोलॉजिकल टेस्ट ट्यूब, सीरोलॉजिकल रिएक्शन (एग्लूटिनेशन) के लिए शॉर्ट टेस्ट ट्यूब, सेंट्रीफ्यूज, हीडेप्रिच कप *, ग्लास ट्यूब और रॉड, 1, 2, 5, 10 मिली, पाश्चर पिपेट के लिए स्नातक किए गए पिपेट , पिपेट के साथ पेंट के लिए कांच की बोतलें, कांच के बीकर और विभिन्न आकारों के फ्लास्क, विभिन्न आकारों के सिलेंडर, छानने के लिए फ़नल आदि।

* आज तक, अधिकांश सूक्ष्म जीवविज्ञानी और पाठ्यपुस्तकों में, रोगाणुओं की पृथक कॉलोनियों को प्राप्त करने के लिए व्यंजनों को पेट्री डिश कहा जाता है, न कि हेडेनरिच व्यंजन, जो मामलों की सही स्थिति के अनुरूप नहीं है। कप को पहली बार रूसी सूक्ष्म जीवविज्ञानी हेडेनरिच द्वारा प्रयोगशाला अभ्यास में पेश किया गया था।

विविध आइटम। बैक्टीरियल लूप, प्लेटिनम तार, रबर ट्यूब, वजन के साथ हाथ से पकड़े जाने वाले हॉर्न स्केल, टेस्ट ट्यूब के लिए स्टैंड (लकड़ी, धातु), जानवरों के लिए थर्मामीटर, पिंजरे, जानवरों को ठीक करने के लिए उपकरण, सेंट्रीफ्यूज।
रसायन, पेंट, मीडिया के लिए सामग्री, आदि अगर-अगर, जिलेटिन, चादरों में सफेद, विसर्जन तेल, फिल्टर पेपर, शोषक और सादे कपास ऊन, धुंध, एथिल अल्कोहल, एनिलिन डाई (मैजेंटा, जेंटियन और क्रिस्टल वायलेट, वेसुवाइन, मेथिलीन) नीला, न्यूट्रलरोट, सफ्रानिन, आदि), गिमेसा पेंट, एसिड (नाइट्रिक, हाइड्रोक्लोरिक, सल्फ्यूरिक, कार्बोलिक, फॉस्फोरिक, पिक्रिक, ऑक्सालिक, आदि), क्षार (पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड, सोडियम हाइड्रॉक्साइड, अमोनिया, सोडा), लवण (पोटेशियम नाइट्रेट) , पोटेशियम परमैंगनेट पोटेशियम, सोडियम सल्फाइट, सोडियम क्लोराइड, आदि)।

प्रयोगशाला तालिका

एक सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन करने के लिए, एक प्रयोगशाला सहायक के पास उचित रूप से सुसज्जित कार्यस्थल होना चाहिए। प्रयोगशाला की मेज की एक निश्चित ऊँचाई होनी चाहिए ताकि उस पर बैठकर सूक्ष्मदर्शी बनाना आसान हो (चित्र 9)। यदि संभव हो, तो टेबल को लिनोलियम से ढका जाना चाहिए, और प्रत्येक कार्यस्थल को गैल्वनाइज्ड ट्रे या मिरर ग्लास से कवर किया जाना चाहिए। कार्यस्थल को एक माइक्रोस्कोप, टेस्ट ट्यूब और पेंट के लिए रैक, एक प्लेटिनम लूप और संस्कृतियों के लिए एक सुई, तैयारी के लिए एक पुल के साथ एक कप, एक वॉशर, एक घंटे का चश्मा, स्लाइड और कवरस्लिप, पिपेट, पेंट का एक सेट से सुसज्जित होना चाहिए। फिल्टर पेपर, एक अल्कोहल या गैस बर्नर और एक कीटाणुनाशक घोल (लाइसोल, कार्बोलिक एसिड, सब्लिमेट, क्लोरैमाइन या लाइसोफॉर्म) के साथ एक जार, जहां इस्तेमाल की गई स्लाइड और कवरस्लिप, पिपेट, कांच की छड़ आदि को कीटाणुशोधन के लिए डुबोया जाता है। व्यंजन जिसमें रोगाणुओं उगाए जाते हैं जिन्हें रसायनों से कीटाणुरहित नहीं किया जा सकता है। ऐसे व्यंजनों पर कीटाणुनाशकों के निशान उन्हें सूक्ष्मजीवों के विकास और प्रजनन के लिए अनुपयुक्त बनाते हैं। उपयोग के बाद, बर्तनों को धातु के टैंकों या बाल्टी में ढक्कन के साथ रखा जाता है, एक आटोक्लेव में सील और निष्फल किया जाता है। उपयोग के बाद छोटे उपकरण (चिमटी, स्केलपेल, कैंची) को एक स्टेरलाइज़र में रखा जाता है और 30-60 मिनट के लिए उबाला जाता है या 30-60 मिनट के लिए क्लोरैमाइन के 3-5% साबुन-कार्बोलिक घोल में डुबोया जाता है।

चावल। 9. बैक्टीरियोलॉजिकल ऑब्जेक्ट्स की माइक्रोस्कोपी की तकनीक।

कार्यस्थल को बिल्कुल साफ रखना चाहिए। यह अस्वीकार्य है कि तालिका जांच की गई संक्रामक सामग्री (मूत्र, मल, मवाद, आदि) से दूषित हो। बाद के मामले में, मेज से संक्रामक सामग्री अन्य आसपास की वस्तुओं पर मिल सकती है, और फिर अंतःप्रयोगशाला संक्रमण संभव है। काम खत्म करने के बाद, प्रयोगशाला सहायक को कार्यस्थल को उस क्रम में रखना चाहिए जिसके लिए वह जिम्मेदार है, और रोकथाम के उद्देश्य के लिए, कार्यस्थल पर कांच को रूई के टुकड़े से पोंछकर कार्बोलिक एसिड या क्लोरैमाइन के 5% घोल से गीला कर दें।

प्रयोगशाला में काम और व्यवहार के नियम

संक्रामक सामग्री के साथ काम करते समय, प्रयोगशाला कर्मियों को स्वयं संक्रमित होने की संभावना के बारे में पता होना चाहिए और एक संक्रामक रोग को एक परिवार, अपार्टमेंट, आदि में स्थानांतरित करना चाहिए। इसलिए, उन्हें अपने काम में चौकस, सावधान, सुव्यवस्थित और पांडित्यपूर्ण होना चाहिए।
प्रयोगशालाओं में काम करते समय, निम्नलिखित नियमों का पालन करना चाहिए:

1. प्रयोगशाला में होने के लिए, और इससे भी ज्यादा इसमें काम करने के लिए, एक ड्रेसिंग गाउन और एक स्कार्फ या टोपी पहनना जरूरी है।
2. अनावश्यक रूप से, एक प्रयोगशाला कक्ष से दूसरे कक्ष में न जाएँ और केवल निर्दिष्ट कार्यस्थल और उपकरणों का ही उपयोग करें।
3. प्रयोगशाला में खाना या धूम्रपान न करें।
4. संक्रामक सामग्री और जीवित संस्कृतियों के साथ काम करते समय, उपयुक्त उपकरणों का उपयोग करें: चिमटी, हुक, स्पैटुला और अन्य वस्तुएं जो उनके उपयोग के बाद नष्ट या बेअसर हो जाती हैं (बर्नर की लौ पर जलना, उबालना, आदि)। सक्शन तरल संक्रामक सामग्री पिपेट में मुंह से नहीं, बल्कि सिलेंडर, नाशपाती की मदद से, किसी भी रिसीवर (ट्रे, बेसिन) पर एक बर्तन से दूसरे बर्तन में संक्रामक सामग्री के साथ तरल डालें, जिसमें कीटाणुनाशक तरल डाला जाता है (कार्बोलिक का घोल) एसिड, लाइसोल)। एक बर्नर की लौ पर परखनली, स्पैचुला, प्लेटिनम लूप, पिपेट आदि को जलाकर टीका और उपसंस्कृति की जानी चाहिए।
5. यदि व्यंजन टूट गए हैं या संक्रामक सामग्री युक्त तरल या जीवित संस्कृतियां गिर गई हैं, तो दूषित कार्यस्थल, पोशाक और हाथों को तुरंत पूरी तरह से कीटाणुरहित करें। यह सब उपस्थिति में या प्रयोगशाला के प्रमुख की देखरेख में किया जाना चाहिए, जिसे तुरंत दुर्घटना की सूचना दी जानी चाहिए।
6. यदि संभव हो तो सभी उपयोग की गई और अनावश्यक वस्तुओं और सामग्रियों को नष्ट कर दिया जाना चाहिए (भस्मीकरण द्वारा सर्वोत्तम या स्टरलाइज़र या कीटाणुनाशक तरल पदार्थों में सावधानीपूर्वक निपटान)।

प्रयोगशाला के भीतर विसंक्रमित होने वाली सभी वस्तुओं को विशेष रिसीवरों, टैंकों, ढक्कनों वाली बाल्टियों आदि में एकत्र करें, उन्हें आटोक्लेव में बंद करके स्थानांतरित करें, जहां उन्हें उसी दिन विसंक्रमित किया जा सके। आटोक्लेव में संक्रामक सामग्री की डिलीवरी और इसके नसबंदी की निगरानी विशेष रूप से नामित जिम्मेदार प्रयोगशाला कर्मचारियों द्वारा की जानी चाहिए।

1. साफ-सफाई और साफ-सफाई का विशेष ध्यान रखें। कार्य दिवस के दौरान और काम के बाद जितनी बार संभव हो हाथों को कीटाणुरहित करें और धोएं।
2. प्रयोगशाला कार्यकर्ता प्रमुख संक्रामक रोगों (मुख्य रूप से आंतों के खिलाफ) के खिलाफ अनिवार्य टीकाकरण के अधीन हैं।
3. विशेष पत्रिकाओं और लेखा पुस्तकों में एक प्रविष्टि के साथ सभी जीवित संस्कृतियों और संक्रमित जानवरों का दैनिक मात्रात्मक लेखा-जोखा करना अनिवार्य है।
4. काम के बाद, आगे के काम के लिए आवश्यक सभी सामग्री और संस्कृतियों को एक लॉक करने योग्य रेफ्रिजरेटर या तिजोरी में छोड़ दिया जाना चाहिए, और कार्यस्थल को पूर्ण क्रम में रखा जाना चाहिए।
5. प्रयोगशाला परिसर की दैनिक पूरी तरह से सफाई एक कीटाणुनाशक तरल का उपयोग करके गीली विधि से की जानी चाहिए।

आंतों में विभिन्न जीवाणुओं की उपस्थिति सामान्य मानी जाती है। ये जीवाणु प्रसंस्करण की प्रक्रियाओं के साथ-साथ भोजन के अवशोषण में भी भाग लेते हैं। आंतों के उचित पाचन और कार्यप्रणाली को मल द्वारा प्रमाणित किया जाता है, जिसमें छोटे संरचनाहीन कण होते हैं, जिन्हें डिटरिटस कहा जाता है।

मल की माइक्रोबियल संरचना का अध्ययन करने के लिए, एक टैंक विश्लेषण किया जाता है। यदि बैक्टीरिया की संख्या बढ़ जाती है, तो एक व्यक्ति को आंतों की विकृति होती है, एक अलग प्रकृति का पेट दर्द होता है, मल में अपचित भोजन के टुकड़े दिखाई देते हैं। यह अध्ययन आपको कई बीमारियों के प्रेरक एजेंटों की पहचान करने की अनुमति देता है।

आंतों के बैक्टीरिया का वर्गीकरण

हालाँकि, विस्तृत अध्ययन पर, उन्हें निम्नलिखित समूहों में वर्गीकृत किया गया है:

1. स्वस्थ बैक्टीरिया: लैक्टो- और बिफीडोबैक्टीरिया, एस्चेचेरिया। ये सूक्ष्मजीव आंतों के कामकाज को सक्रिय करते हैं।
2. सशर्त रूप से रोगजनक: एंटरोकोकी, कैंडिडा, क्लोस्ट्रीडिया, स्टेफिलोकोसी। ये सूक्ष्मजीव कुछ परिस्थितियों के परिणामस्वरूप रोगजनक बन जाते हैं और विभिन्न विकृति के विकास को भड़काने में सक्षम होते हैं।
3. रोगजनक: कोलाई, क्लेबसिएला, प्रोटीस, साल्मोनेला, शिंजेला, सार्सिन। बैक्टीरिया का यह समूह गंभीर बीमारियों के विकास को भड़काता है।

मल की जांच के लिए कई तरीके हैं। सबसे आम तरीकों में से एक है बकानालिसिस।

मल विश्लेषण टैंक क्या है?

मल की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा आपको इसकी माइक्रोबियल संरचना का अध्ययन करने के साथ-साथ बाद की बीमारियों के रोगजनकों की उपस्थिति का निर्धारण करने की अनुमति देती है:

• शिगेलोसिस;
• पेचिश;
• साल्मोनेलोसिस;
• टाइफाइड ज्वर;
• हैजा और अन्य रोग।

एक टैंक मल विश्लेषण में काफी लंबा समय लगता है। अध्ययन एंटीबायोटिक चिकित्सा की नियुक्ति से पहले किया जाता है।

अनुसंधान के लिए संकेत

स्टूल विश्लेषण देने के मुख्य कारणों पर प्रकाश डाला जाना चाहिए:

कॉपोलॉजिकल अध्ययन आंतों की गुहा में होने वाली विकृतियों की पहचान करने की अनुमति देते हैं:

पाचन अंगों के विकृति के निदान के लिए टैंक का विश्लेषण भी निर्धारित है।

फेकल विश्लेषण कैसे लिया जाता है?

अध्ययन शुरू करने से पहले, रोगी को कई दिनों तक विशेष प्रशिक्षण से गुजरना चाहिए।

• साग;
• चुकंदर;
• लाल मछली;
• टमाटर।

इसके अलावा, मांस उत्पादों से अध्ययन के परिणाम प्रभावित हो सकते हैं।

परीक्षण की तैयारी में, एंटीबायोटिक्स, विरोधी भड़काऊ दवाएं और एंजाइम और आयरन युक्त दवाएं लेना बंद करना आवश्यक है।

शोध के लिए सामग्री का संग्रह सुबह के समय किया जाना चाहिए। मल एकत्र करने के लिए, एक बाँझ कंटेनर का उपयोग करें, जिसे फार्मेसी में खरीदा जा सकता है। रेफ्रिजरेटर में बायोमटेरियल के भंडारण की अवधि 10 घंटे से अधिक नहीं है।

शोध कैसे किया जाता है?

मल की बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा आपको सामग्री की भौतिक और रासायनिक संरचना, इसके गुणों, पैथोलॉजी की उपस्थिति का निर्धारण करने की अनुमति देती है। यह अध्ययन शरीर में बैक्टीरिया, बायोबैलेंस में बदलाव का पता लगाने में मदद करता है।

अनुपूरक बकानालिजा मल का स्कैटोलॉजिकल विश्लेषण है। यह अध्ययन आपको मल की एक विशिष्ट गंध, इसकी स्थिरता और घनत्व, सामान्य उपस्थिति, सूक्ष्मजीवों की उपस्थिति या अनुपस्थिति की उपस्थिति का आकलन करने की अनुमति देता है।

अध्ययन में 2 चरण शामिल हैं:

1. मैक्रोस्कोपिक विश्लेषण।
2. सूक्ष्म।

सूक्ष्म परीक्षा से मल में बलगम, प्रोटीन, बिलीरुबिन के ऊंचे स्तर, रक्त के थक्के, आयोडोफिलिक वनस्पतियों का पता चलता है। उत्तरार्द्ध सक्रिय पदार्थों के कारण बनता है जो स्टार्च को ग्लूकोज में परिवर्तित करते हैं। आयोडोफिलिक वनस्पतियों का पता लगाना सभी मामलों में संक्रमण का संकेत नहीं देता है। किण्वन के कारण आयोडीन बैक्टीरिया का संचय रोग के विकास की गवाही देता है।

चूंकि बच्चों का शरीर रोगजनकों से अच्छी तरह से नहीं लड़ता है, इसलिए अक्सर ऐसे बैक्टीरिया का निदान बच्चों के मल में किया जाता है।

आज, कुछ शर्तों के साथ एक विशेष वातावरण में अध्ययन किए गए बायोमटेरियल को बोने की विधि का उपयोग किया जाता है। विशेषज्ञ जीवाणुओं की गुणा करने और उपनिवेश बनाने की क्षमता निर्धारित करते हैं। सटीक परिणाम प्राप्त करने के लिए, उपयोग किए जाने वाले सभी उपकरण, साथ ही एकत्रित बायोमटेरियल वाले व्यंजन, बाँझ होना चाहिए।

विभिन्न जीवाणुरोधी दवाओं के प्रति संवेदनशीलता के लिए रोगजनक सूक्ष्मजीवों का अध्ययन किया जा रहा है। अध्ययन को परिणामों की उच्च सटीकता की विशेषता है, जिसके अनुसार चिकित्सक दवा लिख ​​​​सकता है।

परीक्षण सामग्री की कुल मात्रा का केवल 10% रोगजनक माइक्रोफ्लोरा हो सकता है।

परिणामों की व्याख्या करना

मल की जांच से आप पहचान कर सकते हैं, साथ ही किसी बैक्टीरिया की संख्या भी स्थापित कर सकते हैं। प्राप्त परिणामों के आधार पर, चिकित्सक एक निदान स्थापित करता है और उपचार निर्धारित करता है।

मल में पाए जाने वाले रोगजनक माइक्रोफ्लोरा की किस्में:

1. इशरीकिया कोली. वे कैल्शियम, साथ ही लोहे के शरीर के अवशोषण में हस्तक्षेप करते हैं, और आमतौर पर कीड़े की उपस्थिति का संकेत देते हैं।
2. एंटरोबैक्टीरिया. सबसे अधिक बार, ये बैक्टीरिया पेचिश और आंतों के संक्रमण के विकास का कारण बनते हैं।
3. Escherichia कोलाई, कम एंजाइमेटिक गतिविधि के साथ, डिस्बैक्टीरियोसिस के गठन का संकेत मिलता है।
4. लैक्टोज-नकारात्मक बैक्टीरिया। वे पाचन प्रक्रिया में गड़बड़ी पैदा करते हैं और पेट फूलना, नाराज़गी, तेजी से पेट फूलना और भारीपन की भावना का कारण बनते हैं।
5. हेमोलिटिक बैक्टीरिया. वे विषाक्त पदार्थ बनाते हैं जो तंत्रिका तंत्र, साथ ही आंतों को नकारात्मक रूप से प्रभावित करते हैं। इनसे एलर्जी होती है।
6. खमीर जैसी फफूंदथ्रश के विकास को भड़काएं।
7. क्लेबसिएला, गैस्ट्रोएंटरोलॉजिकल पैथोलॉजी के गठन को भड़काता है।
8. Enterococci, जननांग अंगों, उत्सर्जन पथ और जननांग प्रणाली के संक्रामक विकृति की घटना को भड़काते हैं।

विश्लेषण टैंक के डिकोडिंग को रूपों पर इंगित किया गया है, जो बैक्टीरिया के सामान्य संकेतकों को भी इंगित करता है।

आंतों के डिस्बैक्टीरियोसिस एक बहुत ही खतरनाक विकृति है जो स्वस्थ माइक्रोफ्लोरा को नष्ट कर देती है। यह स्थिति पेचिश और स्टेफिलोकोकस ऑरियस के विकास की ओर ले जाती है। इससे बचने के लिए, साल में कम से कम एक बार आंतों के बायोबैलेंस को नियंत्रित करने के लिए मल विश्लेषण करने की सिफारिश की जाती है।

बक विश्लेषण एक विश्वसनीय अध्ययन माना जाता है जो इसके महत्वपूर्ण आंतरिक अंगों: आंतों और पेट के कामकाज के बारे में जानकारी प्रदान करता है। अध्ययन आपको रोगजनक सूक्ष्मजीवों की समय पर पहचान करने की अनुमति देता है जो सामान्य माइक्रोफ्लोरा को प्रभावित करते हैं। यह वयस्कों और बच्चों दोनों के लिए निर्धारित है।