Diagnosticum vi vi eritrocitos antigénicos. Diagnosticum eritrocitos salmonella o

Certificado de registro No. RZN 2016/3905 del 04/04/2016

Objetivo

El conjunto de reactivos "Diagnosticum eritrocitos salmonella Vi-antígeno para RPHA" (ED-Vi) está destinado a la detección de anticuerpos contra el antígeno Vi del agente causante de la fiebre tifoidea en sueros sanguíneos humanos mediante la reacción de hemaglutinación pasiva (RPHA ).

Características del conjunto

Principio de operación

En presencia de anticuerpos contra el agente causante de la fiebre tifoidea, se observa hemaglutinación de eritrocitos de pollo sensibilizados con el antígeno Vi, lo que conduce a la formación de un "paraguas" de eritrocitos sedimentados en el fondo de los pocillos en forma de U de la placa. . En ausencia de anticuerpos contra el agente causante de la fiebre tifoidea, los glóbulos rojos sedimentados forman un "punto".

Establecer contenidos

Nombre del reactivo	Descripción	Cantidad en juego
Antígeno Vi de eritrocitos de salmonella de Diagnosticum, seco 6% (EDS)	Eritrocitos de pollo formalizados sensibilizados con el antígeno Vi de S. typhi. Masa higroscópica seca de color marrón. Después de la disolución, la suspensión adquiere un color marrón rojizo.	1 fl., desde 0,6 ml
Suero de diagnóstico de Salmonella adsorbido, receptor Vi, seco (diluido 1:20, (K+))	Suero de conejo Salmonella adsorbida, receptor Vi, diluido 1:20. Masa porosa higroscópica seca de color blanco. Después de la disolución, es un líquido transparente amarillento o incoloro.	1 fl., desde 0,3 ml
Diluyente de muestra de prueba (RSD)	Líquido transparente de color azul violeta.	1 fl., 10ml
Solución tampón de fosfato (PBS)	Líquido transparente incoloro.	1 fl., 10ml
Tableta polimérica de un solo uso para reacciones inmunológicas.	Comprimido polimérico de un solo uso para reacciones inmunológicas fabricado en poliestireno transparente incoloro.	1 PC.

Características diagnósticas

El diagnóstico debe aglutinarse en RPHA con suero de diagnóstico de salmonella adsorbido, receptor Vi, seco (dilución 1:20), hasta el título indicado en la etiqueta del suero. El nivel condicional de las características diagnósticas del suero sanguíneo de personas sanas debe considerarse una dilución de suero no superior a 1:20. El tiempo de análisis es de 3040 minutos. El kit está diseñado para analizar 42 sueros sanguíneos en la opción de detección o 10 sueros sanguíneos en la opción de titulación.

Medidas de precaución

El kit está destinado únicamente para uso de diagnóstico in vitro. Las sustancias incluidas en el kit están inactivadas y son seguras. Cuando trabaje con el kit, debe cumplir con SP 1.3.2322-08 y SanPiN 2.1.7.2790-10.

Equipos y materiales adicionales.

Equipos, materiales, soluciones:

• Dispensadores de pipetas de 1 canal con volumen de dosificación variable de 5 a 40 µl; 40 - 200 µl; 200 - 1000 µl y 1000 - 5000 µl;
• Dispensadores de pipetas de 8 o 12 canales con volúmenes de dosificación variables de 5 a 40 µl y de 40 a 200 µl;
• agua destilada (GOST 6709-72).

Muestras analizadas

Las muestras de suero sanguíneo en estudio se almacenan a una temperatura de 2 a 8 °C durante no más de 3 días desde el momento de la extracción de sangre. El suero se puede almacenar congelado a una temperatura no superior a -18 °C durante no más de 1 año. Antes de su uso, las muestras se descongelan a una temperatura de 16 a 25 °C y se mezclan mediante agitación. No se permite volver a congelar. No se deben utilizar muestras con crecimiento bacteriano y hemólisis. Antes de realizar la reacción, los sueros problema se calientan a 56 °C durante 30 minutos.

Realización de análisis

Preparación de suero de control diagnóstico (K+)

Preparar una solución de trabajo de suero diagnóstico de Salmonella adsorbido, receptor Vi, seco (dilución 1:20) a partir de 0,3 ml (K+). Para ello, añadir 0,3 ml de solución tampón fosfato (PBS) al contenido del frasco con K+. La cantidad restante de suero se puede dividir en alícuotas y almacenar congelada a una temperatura que no exceda los -18 ° C durante no más de 6 meses.

Preparación de Salmonella eritrocitos diagnosticum (SED)

Para preparar una dilución de trabajo de la suspensión de diagnóstico de eritrocitos de Salmonella, se añaden 0,6 ml de agua destilada al contenido del frasco con SED seco al 6 % y se deja hidratar durante 2 horas a una temperatura de 16 a 25 °C. Luego se añaden a la solución 2,4 ml de solución tampón fosfato (PBS). La solución de trabajo se almacena a una temperatura de 2 a 8 °C durante no más de 1 mes. No se permite la congelación.

Declaración de RPGA durante el cribado de sueros sanguíneos.

Los sueros sanguíneos para estudios de detección se diluyen en los pocillos de la tableta de la siguiente manera:

• En los primeros pocillos de la placa se preparan diluciones preliminares de 1:20, añadiéndoles primero 190 µl de solución RIP y luego 10 µl de suero problema. Cada suero se agrega con una punta separada y se pipetea con cuidado (el color de la solución en los pocillos después de agregar los sueros debe cambiar de azul violeta a verde);
• Se preparan diluciones de detección de 1:40 en los segundos pocillos añadiendo primero 25 µl de solución de PBS y luego 25 µl de sueros prediluidos y pipeteando con cuidado.

Cada vez que se realiza RPGA es necesario realizar una determinación de control del título de K+. Para ello, agregue 50 l de solución de PBS a 8 pocillos en una fila larga. Luego agregue 50 l de solución de trabajo de K+ (1:20) al primer pocillo, pipetee con cuidado y transfiera 50 l a los siguientes pocillos, obteniendo diluciones dobles de 1:40 a 1:5120. Se añaden 50 µl de solución de PBS a otros 4 pocillos para controlar la EDS en busca de ausencia de hemaglutinación espontánea.

Se añaden 25 µl de SED a todos los pocillos de la placa con diluciones de detección de los sueros problema (excepto los primeros que contienen RIP) y controles. ¡Agite la suspensión de SED en un biberón o baño antes de usarla! La tableta se agita bien y se deja a una temperatura de 16 a 25 ° C durante 30 a 40 minutos hasta que los eritrocitos del control se asienten por completo.

Declaración de RPGA durante la titulación de sueros sanguíneos de prueba

La titulación de los sueros problema y de la solución de trabajo de K+ se realiza en hileras cortas de la placa. Se utiliza otra fila corta para controlar la ausencia de hemaglutinación espontánea de EDS.

Se añaden 180 µl de solución RIP a los primeros pocillos de las filas cortas para la titulación del suero problema. Agregue 50 l de solución de PBS a todos los demás pocillos.

Se añaden 20 µl de suero problema a los pocillos con la solución RIP (se obtiene una dilución de 1:10). Cada suero se añade con su propia punta y se pipetea con cuidado (el color de la solución en los pocillos debe cambiar de azul violeta a verde). Luego, se transfieren 50 μl de los primeros pocillos a los siguientes pocillos de las filas, obteniendo diluciones dobles de 1:20 a 1:1280. Al final de la titulación se retiran de los últimos pocillos soluciones en un volumen de 50 µl.

Cada vez que se realiza RPGA es necesario realizar una determinación de control del título de K+. Para ello, agregue 50 l de solución de PBS a 8 pocillos en una fila larga. Luego agregue 50 l de solución de trabajo de K+ (1:20) al primer pocillo, pipetee con cuidado y transfiera 50 l a los siguientes pocillos, obteniendo diluciones dobles de 1:40 a 1:5120.

Para controlar el diagnóstico de ausencia de hemaglutinación espontánea, se añaden 50 µl de solución de PBS a todos los pocillos de una fila corta.

Se añaden 25 µl de SED a todos los pocillos (excepto los primeros pocillos de cada fila para los sueros problema que contienen RIP). ¡Agite la suspensión de SED en un biberón o baño antes de usarla! La tableta se agita bien y se deja a una temperatura de 16 a 25 ° C durante 30 a 40 minutos hasta que los eritrocitos del control se asienten por completo.

Contabilidad e interpretación de resultados.

Contabilización de resultados al analizar el suero sanguíneo.

Los resultados se tienen en cuenta en una escala convencional de cuatro cruces. Se considera título sérico su dilución, que produce hemaglutinación mediante al menos 3 (+++) cruces.

• ++++ (4+): los eritrocitos aglutinados forman un "paraguas" invertido en el fondo del agujero, sus bordes se caen;
• +++ (3+): los eritrocitos aglutinados forman un "paraguas" invertido en el fondo del agujero, sus bordes son lisos;
• ++ (2+) - junto con los eritrocitos aglutinados, en el fondo del pozo hay un sedimento en forma de un pequeño "anillo" de eritrocitos no aglutinados;
• + (1+) - la mayoría de los glóbulos rojos no se aglutinan y se asientan en forma de un pequeño "anillo";
• (-) - los glóbulos rojos no aglutinados forman un "punto" en el fondo del pocillo.

Se considera resultado positivo la hemaglutinación de eritrocitos cargados con antígeno Vi mediante al menos 3 cruces (+++).

El control de calidad del diagnóstico lo proporcionan 4 pocillos de la fila de control, a los que sólo se añadieron PBS y solución SED. En estos pocillos no debería haber hemaglutinación espontánea; la reacción es negativa (-). En caso contrario, se deberá repetir el estudio. Si aparece hemaglutinación al volver a estadificar, no se usa el medicamento.

Se debe considerar que los sueros con un resultado negativo no contienen anticuerpos contra el antígeno Vi con un título de diagnóstico de 1:40 o inferior.

Los sueros que den un resultado positivo a una dilución de 1:40 deben volver a analizarse con titulación del suero para establecer su título.

Contabilización de resultados al titular el suero sanguíneo.

Se considera título sérico su dilución, que da hemaglutinación de al menos 3 (+++) cruces.

El control de calidad del diagnóstico lo proporcionan los pocillos de la fila para controlar EDS. En estos pocillos no debería haber hemaglutinación espontánea; la reacción es negativa (-). En caso contrario, se deberá repetir el estudio. Si aparece hemaglutinación al volver a estadificar, no se usa el medicamento.

El kit de reactivos del antígeno Diagnosticum Salmonella VI está diseñado para la detección en suero sanguíneo humano de anticuerpos específicos contra el antígeno VI de Salmonella typhus en una reacción de hemaglutinación pasiva (RPHA).

1. CARACTERÍSTICAS DEL CONJUNTO

2.1. Principio del método.

El principio activo del antígeno VI de Diagnosticum Salmonella es el antígeno Vi fijado en la superficie de los glóbulos rojos. Al interactuar con sueros que contienen anticuerpos contra el antígeno Vi, se observa el fenómeno de aglutinación de eritrocitos.

2.2. ESTABLECER CONTENIDO

reactivos	Cantidad
Diagnosticum eritrocitos salmonella Vi-líquido antigénico- es una suspensión al 1% de eritrocitos de oveja Salmonella Typhoid formolizados y sensibilizados con antígeno B en una solución tampón fosfato (pH 7,2 + 0,2; concentración 0,06 mol/l). Suspensión homogénea de color marrón sin escamas; al sedimentar se forman 2 capas: un denso sedimento marrón de eritrocitos y un líquido sobrenadante amarillento transparente	1 botella - 3ml
Suero diagnóstico de Salmonella receptor B adsorbido seco - masa homogénea de blanco con un tinte marrón a beige	1 botella – 0,1 ml
Suspensión al 1% de eritrocitos de oveja no sensibilizados y formalinizados— suspensión homogénea de color marrón sin escamas; al sedimentar se forman 2 capas: un denso sedimento marrón de eritrocitos y un líquido sobrenadante amarillento transparente	1 botella –
Solución para diluir suero y estadificar RPGA - Solución de cloruro de sodio al 0,9%: líquido transparente e incoloro, pH de 6,5 a 7,5	2 botellas de 8 ml cada una
Placa de fondo redondo de un solo uso para reacciones inmunológicas - consta de 8 filas, cada una de las cuales incluye 12 orificios con un fondo redondo, transparente e incoloro	1 PC

1. CARACTERÍSTICAS ANALÍTICAS Y DIAGNÓSTICAS.

3.1. El diagnosticum debe ser aglutinado en la RPHA con el suero diagnóstico de Salmonella adsorbido por el receptor B seco en una dilución no menor a 1:160.

El nivel condicional de las características diagnósticas del suero sanguíneo de personas sanas debe considerarse una dilución de suero no superior a 1:20.

3.2. Tiempo de análisis: 2 horas.

3.3. El conjunto contiene 8 definiciones.

1. MEDIDAS DE PRECAUCIÓN

Al trabajar con el kit, se deben observar las “Reglas de diseño, medidas de seguridad, saneamiento industrial, régimen antiepidémico e higiene personal cuando se trabaja en laboratorios (departamentos, departamentos) de instituciones sanitarias y epidemiológicas del Ministerio de Salud de la URSS ( M., 1981).

Los sueros analizados, así como los reactivos que entran en contacto con ellos, deben considerarse potencialmente infectados, capaces de conservar o transmitir a largo plazo el VIH, el virus de la hepatitis o cualquier otro agente causante de una infección viral; deben manipularse con cuidado:

• trabajar con guantes de goma;
• al pipetear es necesario utilizar dispensadores automáticos;
• al finalizar el trabajo, trate los sueros analizados y los reactivos e instrumentos en contacto con ellos con una solución desinfectante
• Limpie el equipo con alcohol etílico al 70% antes y después de su uso.

Los sueros analizados deben inactivarse a una temperatura de 56 0 C durante 30 minutos.

El suero diagnóstico de Salmonella adsorbido por el receptor B, incluido en el kit, está seco e inactivado.

Los resultados del análisis objetivo están garantizados si se cumplen las siguientes condiciones:

• Todos los reactivos del kit deben almacenarse a temperaturas de 2 a 8 0 C;
• no utilice reactivos caducados;
• no utilice los reactivos del kit si no hay una marca adecuada en su embalaje;
• Para realizar RPHA, utilice reactivos incluidos únicamente en este kit.

2.diagnóstico

4.de microbios destruidos (aislamiento de un Ag específico)

Diagnóstico de HBs de eritrocitos

2.diagnóstico

4. Suspensión de ovejas aéreas tratadas con tanino y precipitadas en HBs.

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Diagnóstico gp120

2.diagnóstico

4.separar un\g ej. VIH

5. para la detección del VIH

Diagnóstico de eritrocitos del tétanos

2.diagnóstico

4. Suspensión de er.ram, tratada con tanino y ag de tétanos.

5. para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo (contra el tétanos

Antígeno de cardiolipina para microprecipitación.

2.diagnóstico

4.fracciones de lípidos extraídas del corazón de un toro sano

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Antígeno treponémico ultrasónico

2.diagnóstico

4. de muertos exc. sífilis

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Diagnóstico de tularemia corpuscular

2.diagnóstico

4.de partículas patógenas individuales

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Diagnóstico de disentería

2.diagnóstico

4. suspensión de animales sacrificados

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo del paciente

Diagnóstico de eritrocitos de Shigella Sonne

2.diagnóstico

4.suspensión de er.ram, tratada con tonina

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Diagnóstico de Salmonella typhimurium

2.diagnóstico

4. de muertos exc. salmonela

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Sueros

Suero de caballo antigangrenoso 5000 UI

2.suero

4.del suero sanguíneo de caballos con hiperimmia con anatoxina de gangrena gaseosa excitadora

6. por vía parenteral, tras una prueba con globulina 1:100

Inmunoglobulina humana normal

2.suero

4.de suero sanguíneo de donante

5. pase formulario-e. específico comprado letras soy

6.parenteral

Suero precipitante de ántrax

2.suero

4. Del suero sanguíneo de animales hiperinmunizados a\g exc.sib. úlceras

6.reacción de precipitación (RP)

Tipo de suero botulínico – A 400 UI

2.suero

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba

6.reacción de neutralización (RN)

Globulina anti-ántrax

2.suero

4.del suero sanguíneo de animales hiperinmunizados y/o exc. ántrax

5. pase formulario-e. específico comprado letras soy

6.parenteral

suero hemolítico

2.suero

4.del suero de animales hiperinmunizados con eritrocitos de animales de otro tipo

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba

Suero aglutinante del cólera Ogawa

2.suero

4.de suero sanguíneo de animales hiperinmunizados

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba

Suero luminiscente de tularemia

2.suero

4.del suero sanguíneo de animales hiperinmunizados y exc.tulares.

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba

Inmunoglobulina contra la encefalitis humana transmitida por garrapatas

2.suero

4.de suero sanguíneo de donante

5. pase formulario-e. específico comprado letras soy

6.parenteral

Suero diagnóstico ESNO

2.suero

4.del suero sanguíneo de animales hiperinmunizados con virus ESNO

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba

Inmunoglobulina humana contra la hepatitis B

2.suero

4.del suero sanguíneo de un donante vacunado contra la hepatitis B

5. pase formulario-e. específico comprado letras soy

6.parenteral

Suero antiglobulina marcado con peroxidasa

2.suero

4.de suero sanguíneo de animales hiperinmunizados

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba (VIH)

Inmunoglobulina antirrábica

2.suero

4.de suero sanguíneo de donante

5. pase formulario-e. específico comprado letras soy

Certificado de registro No. RZN 2016/3905 del 04/04/2016

Objetivo

El conjunto de reactivos "Diagnosticum eritrocitos salmonella Vi-antígeno para RPHA" (ED-Vi) está destinado a la detección de anticuerpos contra el antígeno Vi del agente causante de la fiebre tifoidea en sueros sanguíneos humanos mediante la reacción de hemaglutinación pasiva (RPHA ).

Características del conjunto

Principio de operación

En presencia de anticuerpos contra el agente causante de la fiebre tifoidea, se observa hemaglutinación de eritrocitos de pollo sensibilizados con el antígeno Vi, lo que conduce a la formación de un "paraguas" de eritrocitos sedimentados en el fondo de los pocillos en forma de U de la placa. . En ausencia de anticuerpos contra el agente causante de la fiebre tifoidea, los glóbulos rojos sedimentados forman un "punto".

Establecer contenidos

Nombre del reactivo	Descripción	Cantidad en juego
Antígeno Vi de eritrocitos de salmonella de Diagnosticum, seco 6% (EDS)	Eritrocitos de pollo formalizados sensibilizados con el antígeno Vi de S. typhi. Masa higroscópica seca de color marrón. Después de la disolución, la suspensión adquiere un color marrón rojizo.	1 fl., desde 0,6 ml
Suero de diagnóstico de Salmonella adsorbido, receptor Vi, seco (diluido 1:20, (K+))	Suero de conejo Salmonella adsorbida, receptor Vi, diluido 1:20. Masa porosa higroscópica seca de color blanco. Después de la disolución, es un líquido transparente amarillento o incoloro.	1 fl., desde 0,3 ml
Diluyente de muestra de prueba (RSD)	Líquido transparente de color azul violeta.	1 fl., 10ml
Solución tampón de fosfato (PBS)	Líquido transparente incoloro.	1 fl., 10ml
Tableta polimérica de un solo uso para reacciones inmunológicas.	Comprimido polimérico de un solo uso para reacciones inmunológicas fabricado en poliestireno transparente incoloro.	1 PC.

Características diagnósticas

El diagnóstico debe aglutinarse en RPHA con suero de diagnóstico de salmonella adsorbido, receptor Vi, seco (dilución 1:20), hasta el título indicado en la etiqueta del suero. El nivel condicional de las características diagnósticas del suero sanguíneo de personas sanas debe considerarse una dilución de suero no superior a 1:20. El tiempo de análisis es de 3040 minutos. El kit está diseñado para analizar 42 sueros sanguíneos en la opción de detección o 10 sueros sanguíneos en la opción de titulación.

Medidas de precaución

El kit está destinado únicamente para uso de diagnóstico in vitro. Las sustancias incluidas en el kit están inactivadas y son seguras. Cuando trabaje con el kit, debe cumplir con SP 1.3.2322-08 y SanPiN 2.1.7.2790-10.

Equipos y materiales adicionales.

Equipos, materiales, soluciones:

• Dispensadores de pipetas de 1 canal con volumen de dosificación variable de 5 a 40 µl; 40 - 200 µl; 200 - 1000 µl y 1000 - 5000 µl;
• Dispensadores de pipetas de 8 o 12 canales con volúmenes de dosificación variables de 5 a 40 µl y de 40 a 200 µl;
• agua destilada (GOST 6709-72).

Muestras analizadas

Las muestras de suero sanguíneo en estudio se almacenan a una temperatura de 2 a 8 °C durante no más de 3 días desde el momento de la extracción de sangre. El suero se puede almacenar congelado a una temperatura no superior a -18 °C durante no más de 1 año. Antes de su uso, las muestras se descongelan a una temperatura de 16 a 25 °C y se mezclan mediante agitación. No se permite volver a congelar. No se deben utilizar muestras con crecimiento bacteriano y hemólisis. Antes de realizar la reacción, los sueros problema se calientan a 56 °C durante 30 minutos.

Realización de análisis

Preparación de suero de control diagnóstico (K+)

Preparar una solución de trabajo de suero diagnóstico de Salmonella adsorbido, receptor Vi, seco (dilución 1:20) a partir de 0,3 ml (K+). Para ello, añadir 0,3 ml de solución tampón fosfato (PBS) al contenido del frasco con K+. La cantidad restante de suero se puede dividir en alícuotas y almacenar congelada a una temperatura que no exceda los -18 ° C durante no más de 6 meses.

Preparación de Salmonella eritrocitos diagnosticum (SED)

Para preparar una dilución de trabajo de la suspensión de diagnóstico de eritrocitos de Salmonella, se añaden 0,6 ml de agua destilada al contenido del frasco con SED seco al 6 % y se deja hidratar durante 2 horas a una temperatura de 16 a 25 °C. Luego se añaden a la solución 2,4 ml de solución tampón fosfato (PBS). La solución de trabajo se almacena a una temperatura de 2 a 8 °C durante no más de 1 mes. No se permite la congelación.

Declaración de RPGA durante el cribado de sueros sanguíneos.

Los sueros sanguíneos para estudios de detección se diluyen en los pocillos de la tableta de la siguiente manera:

• En los primeros pocillos de la placa se preparan diluciones preliminares de 1:20, añadiéndoles primero 190 µl de solución RIP y luego 10 µl de suero problema. Cada suero se agrega con una punta separada y se pipetea con cuidado (el color de la solución en los pocillos después de agregar los sueros debe cambiar de azul violeta a verde);
• Se preparan diluciones de detección de 1:40 en los segundos pocillos añadiendo primero 25 µl de solución de PBS y luego 25 µl de sueros prediluidos y pipeteando con cuidado.

Cada vez que se realiza RPGA es necesario realizar una determinación de control del título de K+. Para ello, agregue 50 l de solución de PBS a 8 pocillos en una fila larga. Luego agregue 50 l de solución de trabajo de K+ (1:20) al primer pocillo, pipetee con cuidado y transfiera 50 l a los siguientes pocillos, obteniendo diluciones dobles de 1:40 a 1:5120. Se añaden 50 µl de solución de PBS a otros 4 pocillos para controlar la EDS en busca de ausencia de hemaglutinación espontánea.

Se añaden 25 µl de SED a todos los pocillos de la placa con diluciones de detección de los sueros problema (excepto los primeros que contienen RIP) y controles. ¡Agite la suspensión de SED en un biberón o baño antes de usarla! La tableta se agita bien y se deja a una temperatura de 16 a 25 ° C durante 30 a 40 minutos hasta que los eritrocitos del control se asienten por completo.

Declaración de RPGA durante la titulación de sueros sanguíneos de prueba

La titulación de los sueros problema y de la solución de trabajo de K+ se realiza en hileras cortas de la placa. Se utiliza otra fila corta para controlar la ausencia de hemaglutinación espontánea de EDS.

Se añaden 180 µl de solución RIP a los primeros pocillos de las filas cortas para la titulación del suero problema. Agregue 50 l de solución de PBS a todos los demás pocillos.

Se añaden 20 µl de suero problema a los pocillos con la solución RIP (se obtiene una dilución de 1:10). Cada suero se añade con su propia punta y se pipetea con cuidado (el color de la solución en los pocillos debe cambiar de azul violeta a verde). Luego, se transfieren 50 μl de los primeros pocillos a los siguientes pocillos de las filas, obteniendo diluciones dobles de 1:20 a 1:1280. Al final de la titulación se retiran de los últimos pocillos soluciones en un volumen de 50 µl.

Cada vez que se realiza RPGA es necesario realizar una determinación de control del título de K+. Para ello, agregue 50 l de solución de PBS a 8 pocillos en una fila larga. Luego agregue 50 l de solución de trabajo de K+ (1:20) al primer pocillo, pipetee con cuidado y transfiera 50 l a los siguientes pocillos, obteniendo diluciones dobles de 1:40 a 1:5120.

Para controlar el diagnóstico de ausencia de hemaglutinación espontánea, se añaden 50 µl de solución de PBS a todos los pocillos de una fila corta.

Se añaden 25 µl de SED a todos los pocillos (excepto los primeros pocillos de cada fila para los sueros problema que contienen RIP). ¡Agite la suspensión de SED en un biberón o baño antes de usarla! La tableta se agita bien y se deja a una temperatura de 16 a 25 ° C durante 30 a 40 minutos hasta que los eritrocitos del control se asienten por completo.

Contabilidad e interpretación de resultados.

Contabilización de resultados al analizar el suero sanguíneo.

Los resultados se tienen en cuenta en una escala convencional de cuatro cruces. Se considera título sérico su dilución, que produce hemaglutinación mediante al menos 3 (+++) cruces.

• ++++ (4+): los eritrocitos aglutinados forman un "paraguas" invertido en el fondo del agujero, sus bordes se caen;
• +++ (3+): los eritrocitos aglutinados forman un "paraguas" invertido en el fondo del agujero, sus bordes son lisos;
• ++ (2+) - junto con los eritrocitos aglutinados, en el fondo del pozo hay un sedimento en forma de un pequeño "anillo" de eritrocitos no aglutinados;
• + (1+) - la mayoría de los glóbulos rojos no se aglutinan y se asientan en forma de un pequeño "anillo";
• (-) - los glóbulos rojos no aglutinados forman un "punto" en el fondo del pocillo.

Se considera resultado positivo la hemaglutinación de eritrocitos cargados con antígeno Vi mediante al menos 3 cruces (+++).

El control de calidad del diagnóstico lo proporcionan 4 pocillos de la fila de control, a los que sólo se añadieron PBS y solución SED. En estos pocillos no debería haber hemaglutinación espontánea; la reacción es negativa (-). En caso contrario, se deberá repetir el estudio. Si aparece hemaglutinación al volver a estadificar, no se usa el medicamento.

Se debe considerar que los sueros con un resultado negativo no contienen anticuerpos contra el antígeno Vi con un título de diagnóstico de 1:40 o inferior.

Los sueros que den un resultado positivo a una dilución de 1:40 deben volver a analizarse con titulación del suero para establecer su título.

Contabilización de resultados al titular el suero sanguíneo.

Se considera título sérico su dilución, que da hemaglutinación de al menos 3 (+++) cruces.

El control de calidad del diagnóstico lo proporcionan los pocillos de la fila para controlar EDS. En estos pocillos no debería haber hemaglutinación espontánea; la reacción es negativa (-). En caso contrario, se deberá repetir el estudio. Si aparece hemaglutinación al volver a estadificar, no se usa el medicamento.

El kit de reactivos del antígeno Diagnosticum Salmonella VI está diseñado para la detección en suero sanguíneo humano de anticuerpos específicos contra el antígeno VI de Salmonella typhus en una reacción de hemaglutinación pasiva (RPHA).

1. CARACTERÍSTICAS DEL CONJUNTO

2.1. Principio del método.

El principio activo del antígeno VI de Diagnosticum Salmonella es el antígeno Vi fijado en la superficie de los glóbulos rojos. Al interactuar con sueros que contienen anticuerpos contra el antígeno Vi, se observa el fenómeno de aglutinación de eritrocitos.

2.2. ESTABLECER CONTENIDO

reactivos	Cantidad
Diagnosticum eritrocitos salmonella Vi-líquido antigénico- es una suspensión al 1% de eritrocitos de oveja Salmonella Typhoid formolizados y sensibilizados con antígeno B en una solución tampón fosfato (pH 7,2 + 0,2; concentración 0,06 mol/l). Suspensión homogénea de color marrón sin escamas; al sedimentar se forman 2 capas: un denso sedimento marrón de eritrocitos y un líquido sobrenadante amarillento transparente	1 botella - 6ml
Suero diagnóstico de Salmonella receptor B adsorbido seco - masa homogénea de blanco con un tinte marrón a beige	1 botella – 0,1 ml
Suspensión al 1% de eritrocitos de oveja no sensibilizados y formalinizados— suspensión homogénea de color marrón sin escamas; al sedimentar se forman 2 capas: un denso sedimento marrón de eritrocitos y un líquido sobrenadante amarillento transparente	1 botella –
Solución para diluir suero y estadificar RPGA - Solución de cloruro de sodio al 0,9%: líquido transparente e incoloro, pH de 6,5 a 7,5	2 botellas de 8 ml cada una
Placa de fondo redondo de un solo uso para reacciones inmunológicas - consta de 8 filas, cada una de las cuales incluye 12 orificios con un fondo redondo, transparente e incoloro	1 PC

1. CARACTERÍSTICAS ANALÍTICAS Y DIAGNÓSTICAS.

3.1. El diagnosticum debe ser aglutinado en la RPHA con el suero diagnóstico de Salmonella adsorbido por el receptor B seco en una dilución no menor a 1:160.

El nivel condicional de las características diagnósticas del suero sanguíneo de personas sanas debe considerarse una dilución de suero no superior a 1:20.

3.2. Tiempo de análisis: 2 horas.

3.3. El conjunto contiene 8 definiciones.

1. MEDIDAS DE PRECAUCIÓN

Al trabajar con el kit, se deben observar las “Reglas de diseño, medidas de seguridad, saneamiento industrial, régimen antiepidémico e higiene personal cuando se trabaja en laboratorios (departamentos, departamentos) de instituciones sanitarias y epidemiológicas del Ministerio de Salud de la URSS ( M., 1981).

Los sueros analizados, así como los reactivos que entran en contacto con ellos, deben considerarse potencialmente infectados, capaces de conservar o transmitir a largo plazo el VIH, el virus de la hepatitis o cualquier otro agente causante de una infección viral; deben manipularse con cuidado:

• trabajar con guantes de goma;
• al pipetear es necesario utilizar dispensadores automáticos;
• al finalizar el trabajo, trate los sueros analizados y los reactivos e instrumentos en contacto con ellos con una solución desinfectante
• Limpie el equipo con alcohol etílico al 70% antes y después de su uso.

Los sueros analizados deben inactivarse a una temperatura de 56 0 C durante 30 minutos.

El suero diagnóstico de Salmonella adsorbido por el receptor B, incluido en el kit, está seco e inactivado.

Los resultados del análisis objetivo están garantizados si se cumplen las siguientes condiciones:

• Todos los reactivos del kit deben almacenarse a temperaturas de 2 a 8 0 C;
• no utilice reactivos caducados;
• no utilice los reactivos del kit si no hay una marca adecuada en su embalaje;
• Para realizar RPHA, utilice reactivos incluidos únicamente en este kit.

Vi-Diagnóstico

Diagnóstico VI

Vi-antigénico