Εργαστηριακές μέθοδοι ταξινόμησης, πνευμονιόκοκκου, γρίπης

ΥΠΟΥΡΓΕΙΟ ΥΓΕΙΑΣ ΤΗΣ ΡΩΣΙΚΗΣ ΟΜΟΣΠΟΝΔΙΑΣ ΚΡΑΤΙΚΟ ΙΑΤΡΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΑΖΑΝ ΤΜΗΜΑ ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΑΣ

ΠΝΕΥΜΟΚΟΚΚΙΑ

Καζάν 1999

UDC 576.851.21(07)

Δημοσιεύθηκε με απόφαση του Κεντρικού Συντονιστικού και Μεθοδολογικού Συμβουλίου του Κρατικού Ιατρικού Πανεπιστημίου του Καζάν.

Συντάχθηκε από:

(Προϊστάμενος του Τμήματος Μικροβιολογίας, Διδάκτωρ Ιατρικών Επιστημών, Καθηγητής O.K. Pozdeev, βοηθός του Τμήματος Μικροβιολογίας, Ph.D., E.R. Fedorova.

Αξιολογητές:

Επικεφαλής του Τμήματος Επιδημιολογίας του Κρατικού Ιατρικού Πανεπιστημίου του Καζάν, Διδάκτωρ Ιατρικών Επιστημών, Αναπληρωτής Καθηγητής M.Sh. Shafeev, Επικεφαλής του Τμήματος Επιδημιολογίας της Κρατικής Ιατρικής Ακαδημίας του Καζάν, Διδάκτωρ Ιατρικών Επιστημών, Καθηγητής V.E. Γκριγκόριεφ.

Πνευμονιόκοκκοι /Ο.Κ. Pozdeev, E.R. Fedorov-Kazan: KSMU, 1999. - 14 δευτ.

Με την αντιγραφή, τη διανομή, τη δημοσίευση του κειμένου ή μέρους του στους πόρους σας, αναλαμβάνετε την ευθύνη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία.

Αποκλειστικά για τη χρήση του έργου για προσωπικούς σκοπούς (άρθρο 18, άρθρο 26 του νόμου της Ρωσικής Ομοσπονδίας «Περί πνευματικής ιδιοκτησίας και συγγενικών δικαιωμάτων»). Απαγορεύεται η εμπορική αναπαραγωγή.

Κρατικό Ιατρικό Πανεπιστήμιο του Καζάν, 1999

Ο πνευμονιόκοκκος (Streptococcus pneumoniae) εντοπίστηκε για πρώτη φορά από τον Pasteur (1881) ενώ εργαζόταν σε ένα εμβόλιο κατά της λύσσας και αρχικά τον θεωρούσε ως αιτιολογικό παράγοντα της λύσσας. Ο αιτιολογικός ρόλος του μικροοργανισμού στην ανάπτυξη πνευμονίας στον άνθρωπο αποδείχθηκε από τους Frenkel και Weichselbaum (1884). Τα βακτήρια αποικίζουν ανθρώπινους και ζωικούς οργανισμούς και περιλαμβάνονται στην ομάδα των λεγόμενων «στοματικών» στρεπτόκοκκων. Είναι οι κύριοι αιτιολογικοί παράγοντες της πνευμονίας, μπορούν επίσης να προκαλέσουν πλευρίτιδα, μηνιγγίτιδα, έρποντα έλκη κερατοειδούς, πυώδη φλεγμονή του μέσου ωτός, σηπτικές καταστάσεις και άλλες ασθένειες. Στην IX έκδοση του Burgey Bacteria Key (1994), οι πνευμονιόκοκκοι περιλαμβάνονται στην 17η ομάδα "Gram-θετικοί κόκκοι".

Επιδημιολογία βλαβών. Ο πνευμονιόκοκκος είναι ένας από τους κύριους αιτιολογικούς παράγοντες της βακτηριακής πνευμονίας που καταγράφεται εκτός νοσοκομείων (2-4 περιπτώσεις ανά 1000 άτομα). Τουλάχιστον 500.000 περιπτώσεις πνευμονιοκοκκικής πνευμονίας παρατηρούνται ετησίως στον κόσμο (η πραγματική τιμή είναι πολύ μεγαλύτερη). Τα παιδιά και οι ηλικιωμένοι είναι πιο ευαίσθητοι στη μόλυνση. Η δεξαμενή μόλυνσης είναι ασθενείς και φορείς (20-50% των παιδιών προσχολικής ηλικίας και 20-25% των ενηλίκων). η κύρια οδός μετάδοσης είναι η επαφή. κατά τα κρούσματα και αερομεταφερόμενα. Η κορυφαία επίπτωση εμφανίζεται την ψυχρή περίοδο. Στη συντριπτική πλειονότητα των περιπτώσεων, κλινικές μορφές λοίμωξης αναπτύσσονται όταν η αντίσταση του σώματος είναι μειωμένη (συμπεριλαμβανομένου του ψυχρού στρες), καθώς και στο πλαίσιο άλλων παθολογιών (δρεπανοκυτταρική αναιμία, νόσος Hodgkin, λοίμωξη HIV, μυέλωμα, σακχαρώδης διαβήτης , καταστάσεις μετά από σπληνεκτομή κ.λπ.) ή με αλκοολισμό. Οι παραλλαγές 1, 2 και 3 παίζουν τη μεγαλύτερη επιδημιολογική σημασία στην παθολογία σε ενήλικες. σε παιδιά - 1, 2, 3 και 14 επιλογές. Μολυσματικότητας οροφόρων με φθίνουσα σειρά - 3, 1, 2, 5, 7 και 8 επιλογές. Τα λευκά ποντίκια είναι ευαίσθητα σε πνευμονιόκοκκους (όταν μολυνθούν, πεθαίνουν από σηψαιμία μέσα σε μια μέρα), μοσχάρια, αρνιά, χοιρίδια, σκύλους και πιθήκους.

Μορφολογία. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι ακίνητοι, δεν σχηματίζουν σπόρια, έχουν ελαφρώς επίμηκες σχήμα, που μοιάζει με το περίγραμμα μιας φλόγας κεριού. Σε επιχρίσματα από κλινικό υλικό, διατάσσονται σε ζεύγη, καθένα από τα οποία περιβάλλεται από μια παχιά κάψουλα. Σε επιχρίσματα από μέσα καλλιέργειας, μπορούν να εντοπίζονται σε κοντές αλυσίδες και να είναι πιο στρογγυλεμένα. Σε απλά μέσα, σχηματίζουν μια λεπτή κάψουλα. Η ανάπτυξή του διεγείρεται από την εισαγωγή αίματος, ορού ή ασκητικού υγρού. Ο σχηματισμός κάψουλας είναι πιο έντονος στα βακτήρια τύπου III. Όταν είναι διατεταγμένη σε αλυσίδες, η κάψουλα μπορεί να είναι κοινή.

πολιτιστικές ιδιότητες. Αερόβια πνευμονιόκοκκοι ή προαιρετικά αναερόβια. κατά την καλλιέργεια, προτιμώνται οι καπνοφιλικές συνθήκες (5-10% CO2). Χημειοοργανογροφία και αναπτύσσεται καλά σε μέσα αίματος ή ορού, συμπληρωμένα με την προσθήκη 0,1% γλυκόζης. Μπορούν να αναπτυχθούν στο εύρος θερμοκρασίας 28-42 °C, η βέλτιστη είναι 37 °C. Βέλτιστο pH -7,6-7,8. Σε πυκνά μέσα, σχηματίζουν λεπτές ημιδιαφανείς, καλά καθορισμένες αποικίες με διάμετρο περίπου 1 mm. Μερικές φορές μπορεί να είναι επίπεδα με κεντρική εσοχή. όπως και άλλοι στρεπτόκοκκοι, οι αποικίες δεν συγχωνεύονται ποτέ

μεταξύ τους. Στο άγαρ αίματος σχηματίζουν μικρές ημιδιαφανείς αποικίες ενός πρασινογκρι χρώματος. Το κέντρο των αποικιών είναι πιο σκούρο, η περιφέρεια είναι πιο ανοιχτόχρωμη. Κάτω από την αποικία και κατά μήκος της περιφέρειάς της, μια ζώνη α-αιμόλυσης είναι ορατή με τη μορφή μιας πρασινωπής αποχρωματισμένης ζώνης (λόγω της μετάβασης της αιμοσφαιρίνης σε μεθαιμοσφαιρίνη). Οι αποικίες του πνευμονιόκοκκου τύπου III έχουν συχνά βλεννώδη σύσταση, το μέγεθός τους είναι μέχρι 2 mm. Δεν είναι ξεκάθαρα, μπορώ να συγχωνευτώ μεταξύ τους. Σχηματίζουν S- και R-μορφές αποικιών. Κατά τη μετάβαση από την S- στην R-μορφή, χάνουν την ικανότητα να συνθέσουν μια κάψουλα. Σε υγρά μέσα με ορό και 0,2% γλυκόζη δίνεται ομοιόμορφη θολότητα και μικρό κροκιδωτικό ίζημα. Με παρατεταμένη καλλιέργεια, το ίζημα αυξάνεται.

Βιωσιμότητα. Οι πνευμονιόκοκκοι ανήκουν στην ομάδα των ασταθών μικροοργανισμών. Στα ξηρά πτύελα επιμένουν έως και δύο μήνες. Μπορεί να αποθηκευτεί για μεγάλο χρονικό διάστημα σε χαμηλές θερμοκρασίες. σε θερμοκρασία 60 ° C, πεθαίνουν μέσα σε 3-5 λεπτά. Ένα διάλυμα 3% καρβολικού οξέος τα σκοτώνει σε 1-2 λεπτά. Η οπτοχίνη (σε συγκέντρωση 1:100.000) και η χολή είναι επιζήμια για τον πνευμονιόκοκκο, ο οποίος χρησιμοποιείται για την αναγνώριση βακτηρίων.

Οι πνευμονιόκοκκοι διαφέρουν από άλλους μικροοργανισμούς σε μια σειρά από ιδιότητες (Πίνακας 1).

Πίνακας 1 Βιοχημικές ιδιότητες του πνευμονιόκοκκου

Δοκιμαστικό υπόστρωμα	Αποτέλεσμα	Δοκιμαστικό υπόστρωμα	Αποτέλεσμα
Ανάπτυξη στους 100°C
		Ραφινόζη
Μεσαίο με 6,5% Nad
α-αιμόλυση
Β-αιμόλυση		Τρεχαλόζη
		Φωσφατάση
ιππουρικός		β-γαλακτοσιδάση
Γλυκερίνη
Ονομασίες: "+" - 90% ή περισσότερα στελέχη είναι θετικά. (+) - 80-89% των στελεχών είναι θετικά. d - 21-79% των στελεχών είναι θετικά. (-) - 11-20% των στελεχών είναι θετικά. «- - 90% ή περισσότερα από τα στελέχη είναι αρνητικά.

Αντιγονική δομή. Αρκετοί τύποι αντιγόνων έχουν βρεθεί στους πνευμονιόκοκκους: ένας πολυσακχαρίτης, 0-σωματικό αντιγόνο που βρίσκεται στο κυτταρικό τοίχωμα. πολυσακχαριτικά καψικά Κ-αντιγόνα και Μ-πρωτεΐνη. Το σωματικό αντιγόνο πολυσακχαρίτη είναι παρόμοιο με την ουσία C άλλων στρεπτόκοκκων. Η σχέση καθορίζει την ομοιότητα της χημικής δομής των ριβουτεϊχοϊκών οξέων που σχετίζονται με τη φωσφορική χολίνη. Τα καψικά αντιγόνα έχουν επίσης πολυσακχαριδική φύση, που αποτελούνται από μονοσακχαρίτες που επαναλαμβάνονται σε διάφορους συνδυασμούς: D-γλυκόζη, D-γαλακτόζη και L-ραμνόζη. Σύμφωνα με τη δομή των καψικών αντιγόνων, οι πνευμονιόκοκκοι χωρίζονται σε 84 ορούς. Θα πρέπει να θυμόμαστε ότι τα καψικά αντιγόνα αντιδρούν διασταυρούμενα με τους αντιορούς στα στρεπτοκοκκικά αντιγόνα της ομάδας Α και Β, καθώς και με τους ορούς των αντιγόνων Klebsiella και Escherichia. Κατά τη μετάβαση από τη μορφή S στη μορφή R, τα καψικά αντιγόνα χάνονται. Για τον ορότυπο του πνευμονιόκοκκου, παράγονται ομαδικοί οροί, που υποδεικνύονται με λατινικά γράμματα (A, B, C, D, κ.λπ.) και οροπαραγωγοί, που υποδεικνύονται με λατινικούς αριθμούς. Ο ορός συγκόλλησης III δεν περιλαμβάνεται στα μείγματα ορού. Απελευθερώνεται χωριστά και δεν μπορεί να εκτραφεί. Στους ανθρώπους, οι πνευμονιόκοκκοι των οροτύπων I, II και III απομονώνονται συχνότερα. Είναι τα πιο μολυσματικά για τον άνθρωπο, επομένως η αντίδραση συγκόλλησης ρυθμίζεται αρχικά χρησιμοποιώντας αντιορούς για αυτές τις παραλλαγές. Εάν το αποτέλεσμα είναι αρνητικό, η αντίδραση συγκόλλησης τοποθετείται με ένα μείγμα ορών Α, Β, Γ κ.λπ. (μέχρι να ληφθεί θετικό αποτέλεσμα), και στη συνέχεια με ξεχωριστούς αντιορούς. Για την ταχύτερη ταυτοποίηση των οροπαραγωγών, χρησιμοποιείται η αντίδραση Neufeld (ανοσολογική διόγκωση της κάψουλας). Η μέθοδος βασίζεται στην ικανότητα των πνευμονιοκοκκικών καψουλών να αυξάνουν τον όγκο τους παρουσία ομόλογου αντιορού, ο οποίος καταγράφεται με οπτικό μικροσκόπιο. Οι καψικοί πολυσακχαρίτες έχουν ευαισθητοποιητικές ιδιότητες, οι οποίες εκδηλώνονται με την ανάπτυξη αντίδρασης υπερευαισθησίας καθυστερημένου τύπου, που ανιχνεύεται με δερματικές δοκιμές.

παράγοντες παθογένειας. Ο κύριος παράγοντας είναι η κάψουλα, η οποία προστατεύει τα βακτήρια από το μικροβιοκτόνο δυναμικό των φαγοκυττάρων και τα απομακρύνει από τη δράση των οψονινών. Τα μη ενθυλακωμένα στελέχη είναι πρακτικά μη λοιμώδη και είναι σπάνια. Το μεγαλύτερο μέρος της δεξαμενής αντιπνευμονιοκοκκικών ΑΤ είναι κάψουλες AT σε Ag. Μια σημαντική λειτουργία της κάψουλας και της Μ-πρωτεΐνης είναι επίσης να παρέχει πρόσφυση στον βλεννογόνο. Η ουσία C, η οποία αλληλεπιδρά ειδικά με την C-αντιδρώσα πρωτεΐνη, είναι απαραίτητη. Η συνέπεια μιας τέτοιας απόκρισης είναι η ενεργοποίηση του συμπληρωματικού καταρράκτη και η απελευθέρωση μεσολαβητών της οξείας φάσης της φλεγμονής. Η συσσώρευσή τους στον πνευμονικό ιστό διεγείρει τη μετανάστευση των πολυμορφοπυρηνικών φαγοκυττάρων. Ο σχηματισμός ισχυρών φλεγμονωδών διηθημάτων συνοδεύεται από παραβίαση της ομοιόστασης του πνευμονικού ιστού και την ηπατοποίησή του. Οι πνευμονιόκοκκοι παράγουν ενδοτοξίνη, α- και β-αιμολυσίνες (πνευμονολυσίνες), λευκοσιδίνη. Η α-πνευμολυσίνη είναι μια θερμοευαίσθητη πρωτεΐνη ικανή να εξουδετερώνει την 0-στρεπτολυσίνη,

ερυθρογενής ουσία, νευραμινιδάση. Οι πνευμονιόκοκκοι συνθέτουν επίσης έναν αριθμό ενζύμων που συμβάλλουν στην παθογένεση των βλαβών - μουραμιδάση, υαλουρονιδάση (προωθεί την εξάπλωση μικροοργανισμών στους ιστούς), πεπτιδάση (διασπά το IgA).

Η παθογένεια των βλαβών. Ο βιότοπος του πνευμονιόκοκκου είναι η ανώτερη αναπνευστική οδός. Η παθογένεση των περισσότερων πνευμονιών περιλαμβάνει αναρρόφηση σάλιου που περιέχει S. pneumoniae και είσοδο βακτηρίων στους κατώτερους αεραγωγούς. Παραβίαση των προστατευτικών μηχανισμών παροχέτευσης - καταπληξία βήχα και κάθαρση του βλεννογόνου είναι απαραίτητη. Στους ενήλικες παρατηρούνται συχνότερα λοβώδεις βλάβες των πνευμόνων, σε παιδιά και ηλικιωμένους κυριαρχούν οι περιβρογχικές ή εστιακές βλάβες. Ο σχηματισμός ισχυρών φλεγμονωδών διηθημάτων συνοδεύεται από παραβίαση της ομοιόστασης του πνευμονικού ιστού και την ηπατοποίησή του. Οι λοιμώξεις με τον πιο μολυσματικό ορόβολο 3 μπορεί να συνοδεύονται από σχηματισμό κοιλοτήτων στο πνευμονικό παρέγχυμα. Από την κύρια εστίαση, το παθογόνο μπορεί να διεισδύσει στην υπεζωκοτική κοιλότητα και στο περικάρδιο ή να διαδοθεί αιματογενώς και να προκαλέσει μηνιγγίτιδα, ενδοκαρδίτιδα και αρθρικές βλάβες.

Κλινικές ΕΚΔΗΛΩΣΕΙΣ. Η κλασική πνευμονιοκοκκική πνευμονία ξεκινά ξαφνικά. Σημειώστε την αύξηση της θερμοκρασίας του σώματος, τον παραγωγικό βήχα και τον πόνο στο στήθος. Σε εξασθενημένα άτομα και ηλικιωμένους, η νόσος αναπτύσσεται αργά, με ελαφρύ πυρετό, μειωμένη συνείδηση ​​και σημεία πνευμονικής καρδιακής ανεπάρκειας. Η στρεπτοκοκκική μηνιγγίτιδα καταγράφεται σε όλες τις ηλικιακές ομάδες. χαρακτηρίζονται από βίαιη έναρξη με αύξηση της θερμοκρασίας του σώματος, δυσκαμψία των μυών του αυχένα, πονοκέφαλο, ναυτία και έμετο. Οι μηνιγγικές αγγειακές βλάβες συχνά συνοδεύονται από απώλεια συνείδησης. μεταξύ των παιδιών και σε μεγάλη ηλικία, η θνησιμότητα μπορεί να φτάσει το 80%. Οι αιματογενείς πνευμονιοκοκκικές βλάβες, καθώς και η ιγμορίτιδα, η μαστοειδίτιδα, η μέση ωτίτιδα, η ενδοκαρδίτιδα και η περιτονίτιδα, είναι αρκετά συχνές σε ανοσοκατεσταλμένα άτομα (π.χ. μολυσμένα με HIV) ή σε ασθενείς με σπληνεκτομή. Μετά την ασθένεια, αναπτύσσεται ασταθής ανοσία, η οποία είναι τυπο-ειδική στη φύση και οφείλεται στην εμφάνιση αντισωμάτων κατά του τυπικού πολυσακχαρίτη της κάψας.

Θεραπευτική αγωγή. Η βάση της θεραπείας για πνευμονιοκοκκική λοίμωξη είναι τα αντιβιοτικά - πενικιλλίνη, τετρακυκλίνη, λεβομυκετίνη, βανκομυκίνη, ριφαμπικίνη, κεφτριαξόνη.

Πρόληψη. Η μη ειδική πρόληψη των πνευμονιοκοκκικών λοιμώξεων στοχεύει στον εντοπισμό ασθενών και φορέων με την επακόλουθη θεραπεία τους. Για ειδική πρόληψη της λοίμωξης, παιδιά άνω των δύο ετών, ενήλικες σε κίνδυνο, καθώς και υγιή άτομα κατά τη διάρκεια της εκδήλωσης της νόσου εμβολιάζονται με το πολυδύναμο πολυσακχαριδικό εμβόλιο Pneumovex 23. Το φάρμακο περιέχει 23 αντιγόνα πνευμονιοκοκκικής κάψας πολυσακχαριτών (1, 2, 3, 4, 5, 6B 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 1-9,2F, 22F, 23F, 33F). Αντιγόνα

Οι πνευμονιόκοκκοι ελήφθησαν από το 90% των στελεχών που απομονώθηκαν από το αίμα ασθενών με διηθητική πνευμονιοκοκκική λοίμωξη στις ΗΠΑ και αντιστοιχούν στα στελέχη που συναντώνται στη Ρωσία. Η ανοσοποίηση πραγματοποιείται δύο φορές με μεσοδιάστημα 5-8 ετών.

Μετά τον εμβολιασμό δημιουργείται τεχνητή, ενεργή, τυποειδική ανοσία.

Εργαστηριακή διάγνωση. Το «χρυσό πρότυπο» είναι η απομόνωση του παθογόνου. Θα πρέπει να θυμόμαστε ότι το υλικό πρέπει να εξεταστεί γρήγορα, γιατί. Τα βακτήρια είναι επιρρεπή σε ταχεία αυτόλυση λόγω της δραστηριότητας των ενδοκυτταρικών ενζύμων. Το υλικό για τη μελέτη είναι πτύελα, υπεζωκοτική συλλογή και άλλα εξιδρώματα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, αίμα, βλέννα από τη μύτη και το λαιμό, εκκρίσεις από οφθαλμικά έλκη, έκκριμα από το αυτί, ούρα, κομμάτια οργάνων (σε περίπτωση θανάτου του ασθενούς) . Μια απάντηση σήματος σε πνευμονιοκοκκική λοίμωξη μπορεί να εκδοθεί εάν ανιχνευθούν ουδετερόφιλα και θετικοί κατά Gram λογχοειδή διπλόκοκκοι σε επιχρίσματα πτυέλων (τουλάχιστον 10 ανά οπτικό πεδίο). Διαφορετικά, καταφύγετε στην απομόνωση του παθογόνου.

Το πρώτο στάδιο της μελέτης.Το παθολογικό υλικό υποβάλλεται σε προκαταρκτική βακτηριοσκόπηση (εκτός αίματος). Τα πτύελα τοποθετούνται σε αποστειρωμένο τρυβλίο Petri, πλένονται, ένα πυώδες-βλεννώδες κομμάτι συλλαμβάνεται με βρόχο, τρίβεται σε γυάλινη πλάκα, στεγνώνει και χρωματίζεται σύμφωνα με το Gram. Στο επίχρισμα εντοπίζονται θετικοί κατά Gram λογχοειδή ή ωοειδής κόκκοι που περιβάλλονται από κάψουλα (σχηματισμός κάψουλας παρατηρείται μόνο σε πνευμονιόκοκκους που έχουν απομονωθεί από άρρωστα και μολυσμένα ζώα). Η αναγνώριση των πνευμονιοκοκκικών καψουλών μπορεί να πραγματοποιηθεί χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Burri-Gins. Ο εμβολιασμός του παθολογικού υλικού πραγματοποιείται σε 5-10% άγαρ αίματος ή ορού και μέσο εμπλουτισμού (8-10% ζωμός ορού). Εάν υπάρχει υποψία πνευμονιοκοκκικής σήψης, 5-10 ml αίματος του ασθενούς εμβολιάζονται σε 45-90 ml ζωμού ορού. Το εγκεφαλονωτιαίο υγρό, εάν είναι διαυγές, φυγοκεντρείται και μερικές σταγόνες από το ίζημα εμβολιάζονται σε θρεπτικά μέσα. Ως μέσο εμπλουτισμού χρησιμοποιείται ημι-υγρό άγαρ ορού. Οι καλλιέργειες επωάζονται στους 37°C για 24 ώρες. Η καλύτερη μέθοδος για την απομόνωση μιας καθαρής καλλιέργειας πνευμονιόκοκκων είναι η μόλυνση λευκών ποντικών με παθολογικό υλικό. Τα πτύελα, πλυμένα σε τρυβλίο Petri με αποστειρωμένο φυσιολογικό ορό, αλέθονται σε αποστειρωμένο γουδί με αποστειρωμένο γουδοχέρι ή σπασμένο γυαλί με προσθήκη φυσιολογικού ορού σε αναλογία 1:2-1:5. Το εναιώρημα καθιζάνει, το υπερκείμενο σε ποσότητα 0,5-1 ml χορηγείται σε λευκά ποντίκια ενδοπεριτοναϊκά. Με την παρουσία πνευμονιόκοκκων στο υλικό, τα ποντίκια πεθαίνουν μέσα σε 72 ώρες. Σε επιχρίσματα από όργανα και αίμα, εντοπίζονται τυπικοί πνευμονόκοκκοι. Τα όργανα και το αίμα καλλιεργούνται επίσης σε ζωμό ορού και σε τρυβλία Petri με αίμα ή άγαρ ορού.

Το δεύτερο στάδιο της μελέτης.Μελετήστε τη φύση της ανάπτυξης σε θρεπτικά μέσα. Στο άγαρ αίματος, οι πνευμονιοκοκκικές αποικίες είναι μικρές, στρογγυλές, με λείες

άκρες, τρυφερές, που περιβάλλονται από μια ζώνη πρασίνου του περιβάλλοντος (που θυμίζει πολύ την ανάπτυξη πράσινων στρεπτόκοκκων). Στο άγαρ ορού, οι αποικίες είναι τρυφερές, ημιδιαφανείς και διαφανείς. Με βακτηριοσκόπηση επιχρισμάτων χρωματισμένων κατά Gram. βρείτε θετικούς κατά Gram διπλόκοκκους χωρίς κάψουλες. Μετά τη βακτηριοσκόπηση, οι αποικίες για τις οποίες υπάρχει υποψία για πνευμονιόκοκκο υποκαλλιεργούνται σε λοξό ορό ή αιματόαγαρ ή σε ζωμό ορού. Η μικροσκόπηση των επιχρισμάτων από το μέσο εμπλουτισμού, μαζί με διάφορες μικροχλωρίδες, μπορεί να αποκαλύψει θετικούς κατά Gram κόκκους διατεταγμένους σε ζεύγη ή κοντές αλυσίδες. Το υλικό από το μέσο εμπλουτισμού μεταφέρεται σε στερεά θρεπτικά μέσα. Οι καλλιέργειες επωάζονται στους 37°C για 24 ώρες.

Το τρίτο στάδιο της μελέτης.Στην κλίση του αιματού άγαρ, οι πνευμονιόκοκκοι σχηματίζουν μια λεπτή, λεπτή, ημιδιαφανή επικάλυψη. Στο ζωμό ορού γάλακτος, οι πνευμονιόκοκκοι προκαλούν θολότητα και ελαφρύ ίζημα. Σε επιχρίσματα από στερεά μέσα καλλιέργειας, ο πνευμονιόκοκκος μπορεί να έχει διαφορετική εμφάνιση. Μαζί με διπλόκοκκους επιμήκους σχήματος με μυτερά εξωτερικά άκρα που μοιάζουν με φλόγα κεριού, υπάρχουν κύτταρα με το σωστό οβάλ και στρογγυλό σχήμα. Στην καλλιέργεια ζωμού, οι πνευμονιόκοκκοι είναι συχνά διατεταγμένοι σε αλυσίδες. Με βάση τις μορφολογικές και πολιτιστικές ιδιότητες των πνευμονόκοκκων, είναι δύσκολο να γίνει διάκριση από τους παθογόνους στρεπτόκοκκους, επομένως, έχει προταθεί ένα σύνολο ειδικών δοκιμών για τη διαφοροποίησή τους:

Διαλυτότητα στη χολή (δοκιμή δεοξυχολικών).

Η ικανότητα αποσύνθεσης της ινουλίνης.

Ευαισθησία στην οπτοχίνη.

Αντίδραση συγκόλλησης με ειδικούς αντιπνευμονιοκοκκικούς ορούς.

Ικανότητα αποικοδόμησης γλυκόζης, μαλτόζης, σακχαρόζης, λακτόζης, μαννιτόλης, σορβιτόλης και σαλικίνης.

Οι πιο προσιτές μέθοδοι που διαφοροποιούν τους πνευμονιόκοκκους από άλλους στρεπτόκοκκους είναι μια δοκιμή με οπτοχίνη (αναστέλλει την ανάπτυξή τους). από τους πράσινους στρεπτόκοκκους διακρίνονται από την ικανότητα ζύμωσης της ινουλίνης, καθώς και από την ευαισθησία στη χολή.

Δοκιμή δεοξυχολικού. Μετά από μια προκαταρκτική βακτηριοσκόπηση, 10 σταγόνες απομονωμένης καθαρής καλλιέργειας (κατά προτίμηση ζωμού) προστίθενται σε δοκιμαστικό σωλήνα με 5 σταγόνες αποστειρωμένης χολής βοοειδών. Ο έλεγχος είναι μια καλλιέργεια που εισάγεται σε δοκιμαστικό σωλήνα με 5 σταγόνες φυσιολογικού ορού. Μετά από 30-60 λεπτά επώασης στους 37 °C, παρατηρείται πλήρης λύση της καλλιέργειας με τη μορφή καθαρισμού στο δοκιμαστικό σωλήνα με χολή, το μείγμα παραμένει θολό στον σωλήνα ελέγχου. Θα πρέπει να θυμόμαστε ότι οι μη λοιμώδεις καλλιέργειες πνευμονιόκοκκου είναι ανθεκτικές στη χολή.

Η αντοχή στη χολή μπορεί επίσης να ελεγχθεί με ενοφθαλμισμό σε ζωμό χολής 10%. Το υλικό δοκιμής προστίθεται στο μέσο, ​​ενώ ο ζωμός γίνεται θολό. Μετά από 24ωρη επώαση στους 37°C, η παρουσία πνευμονιόκοκκων θα υποδειχθεί με καθαρισμό του ζωμού ως αποτέλεσμα βακτηριακής λύσης.

Μπορείτε επίσης να χρησιμοποιήσετε δίσκους εμποτισμένους σε διάλυμα χολής 20%. Οι δίσκοι τοποθετούνται στην αναπτυσσόμενη καλλιέργεια στο τρυβλίο και επωάζονται για 1-2 ώρες στους 37°C. Παρουσία πνευμονιόκοκκων, οι αποικίες λύονται γύρω από το δίσκο σε απόσταση 1-2 mm.

Τεστ ινουλίνης. Η καλλιέργεια του πνευμονιόκοκκου εμβολιάζεται στο μέσο με ινουλίνη. Για να γίνει αυτό, 200 ml αποστειρωμένου απεσταγμένου νερού, 18 ml βάμματος λακκούβας και 3 g ινουλίνης προστίθενται σε 100 ml βόειου ορού που θερμαίνεται στους 56 ° C για 30 λεπτά, αποστειρώνεται με ρέον ατμό για 30 λεπτά. Οι καλλιέργειες επωάζονται στους 37°C για 24 ώρες. Ο πνευμονιόκοκκος αποσυνθέτει την ινουλίνη, με αποτέλεσμα το μέσο να γίνει κόκκινο. Ο πράσινος στρεπτόκοκκος δεν προκαλεί κοκκίνισμα του μέσου.

Δοκιμή με οπτοχίνη. Η δοκιμαστική πνευμονιοκοκκική καλλιέργεια εμβολιάζεται σε ζωμό ορού με οπτοχίνη σε αραίωση 1:100.000 ή 1:200.000. Ο πνευμονιόκοκκος δεν αναπτύσσεται σε ένα τέτοιο περιβάλλον. Είναι επίσης δυνατός ο προσδιορισμός της ευαισθησίας στην οπτοχίνη με ενοφθαλμισμό σε άγαρ αίματος 10% που περιέχει οπτοχίνη σε αραίωση 1:50.000. Ο έλεγχος είναι καλλιέργεια σε άγαρ αίματος. Οι πνευμονιόκοκκοι δεν αναπτύσσονται στο μέσο με το Optochin· η ανάπτυξη πνευμονόκοκκων παρατηρείται στο μέσο ελέγχου. Μπορείτε να χρησιμοποιήσετε δίσκους εμποτισμένους με 6 μg οπτοχίνης, οι οποίοι εφαρμόζονται μετά τον ενοφθαλμισμό στην επιφάνεια του μέσου. Στους πνευμονιόκοκκους, γύρω από τον δίσκο σχηματίζεται μια ζώνη αναστολής ανάπτυξης διαμέτρου τουλάχιστον 18 mm.

Τεστ μολυσματικότητας. Η καθημερινή καλλιέργεια του πνευμονιόκοκκου που αναπτύσσεται σε ζωμό ορού γάλακτος αραιώνεται με 1% αποστειρωμένο νερό πεπτόνης (pH - 7,6) ή ελαφρώς αλκαλικό ζωμό σε 1:10. Η αραιωμένη καλλιέργεια χορηγείται ενδοπεριτοναϊκά σε λευκά ποντίκια βάρους 16-20 g σε όγκο 0,5 ml και παρατηρείται για 72 ώρες. Από τα όργανα του νεκρού ποντικού γίνονται εμβολιασμοί σε θρεπτικά μέσα και εξετάζονται μικροσκοπικά επιχρίσματα-αποτυπώματα. Οι καλλιέργειες υψηλής μολυσματικής δράσης περιλαμβάνουν πνευμονιόκοκκους, οι οποίοι προκαλούν το θάνατο ποντικών μετά την εισαγωγή της καλλιέργειας σε αραίωση 1:10. Οι μη λοιμώδεις καλλιέργειες δεν προκαλούν θάνατο σε ποντίκια.

Οροτυποποίηση πνευμονιόκοκκων. Η καλλιέργεια 18 ωρών ελέγχεται στην αντίδραση μικροσυγκόλλησης Sabin. 4 σταγόνες πνευμονιοκοκκικής καλλιέργειας εφαρμόζονται σε μια γυάλινη πλάκα. Σε 1 σταγόνα προσθέστε μια σταγόνα αντιπνευμονιοκοκκικού ορού τύπου 1, στον 2ο - ορό τύπου II, στην 3η - ορό - 111, στην 4η - μια σταγόνα φυσιολογικού ορού. Τα μείγματα στο γυαλί αναμειγνύονται με βρόχο και εξετάζονται κάτω από μεγεθυντικό φακό ή κάτω από μικροσκόπιο σε χαμηλή μεγέθυνση. Σε θετική περίπτωση, η συγκόλληση παρατηρείται σε μία από τις τρεις πρώτες σταγόνες. Ο τύπος του πνευμονιόκοκκου προσδιορίζεται στην αντίδραση συγκόλλησης με συγκεκριμένους ορούς συγκόλλησης των τριών πρώτων σταθερών τύπων. Οι καλλιέργειες που δεν συγκολλούνται με αυτούς τους τύπους ορών εκχωρούνται στην ομάδα Χ. Η αντίδραση ρυθμίζεται ως εξής. Χύστε την καλλιέργεια ζωμού 18 ωρών σε 0,5 ml σε δοκιμαστικούς σωλήνες. Στη συνέχεια προσθέστε σε ίσο όγκο ορού, αραιωμένο με φυσιολογικό ορό σε αναλογία 1:5. Οι έλεγχοι είναι 2 δοκιμαστικοί σωλήνες, ένας από τους οποίους περιέχει τη δοκιμαστική καλλιέργεια αναμεμειγμένη

κανονικό ορό κουνελιού, και το άλλο - μόνο η καλλιέργεια δοκιμής. Τα περιεχόμενα των δοκιμαστικών σωλήνων ανακινούνται καλά και τοποθετούνται για 2 ώρες σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία 37 °C, μετά τον οποίο πραγματοποιείται ένας προκαταρκτικός υπολογισμός της αντίδρασης. Τα τελικά αποτελέσματα σημειώνονται μετά από επιπλέον επώαση σε θερμοκρασία δωματίου για 20 ώρες. Η συγκόλληση βαθμολογείται με τέσσερα + εάν το περιεχόμενο των σωλήνων είναι εντελώς διαυγές και η καλλιέργεια συγκόλλησης είναι ένα πυκνό φιλμ που δεν σπάει όταν ανακινείται. κατά τρία πλεονεκτήματα εάν, με πλήρη διαύγαση του περιεχομένου του σωλήνα, η συγκολλητική καλλιέργεια σπάσει εύκολα σε κομμάτια. δύο πλεονεκτήματα - εάν δεν εμφανιστεί φώτιση, τα σωματίδια μιας συγκολλημένης καλλιέργειας είναι σαφώς ορατά με γυμνό μάτι στο θολό περιεχόμενο του σωλήνα. με συγκόλληση κατά ένα συν σε δοκιμαστικό σωλήνα, εντοπίζεται λεπτόκοκκο μείγμα κολλημένων πνευμονόκοκκων. Με μια αρνητική αντίδραση ορατή στο μάτι, δεν παρατηρείται συγκόλληση.

το περιεχόμενο των δοκιμαστικών σωλήνων μετά την ανακίνηση είναι ομοιόμορφη θολότητα.

Ο τύπος των πνευμονιόκοκκων της ομάδας Χ πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας ομάδα

ορούς που περιέχουν ένα μείγμα τυπικών ορών συγκόλλησης που λαμβάνονται

σε ίσους όγκους. Οι ακόλουθοι οροί ομάδας παρασκευάζονται από

ανάμιξη ίσων όγκων μη αραιωμένου τυπικού διαγνωστικού

sera (Lund, I960):

A -1, II, IV, V, XVIII οροί.

B - VI, VIII, XIX ορόοι.

C - VII, XX. XXIV, XXXI, XL οροί.

Δ - IX, XI, XVI, XXXVI. Οροί XXXVII;

Ε - Χ, ΧΧΙ. Οροί XXXIII, XXXIX.

F-XII. XVII. Οροί XXII, XXXVII, XXXII, XLI.

G - XIII, XXV. Οροί XXIX, XXXIV, XXXV, XXXVIII, XLII, XLVII.

J-XLIII. Ορομετρητές XLIV, XLV, XLVI.

Ο ορός συγκόλλησης τύπου III χρησιμοποιείται από μόνος του (χωρίς ανάμειξη με άλλους τυπικούς ορούς) λόγω της δυσκολίας λήψης του σε επαρκώς υψηλό τίτλο. Η τυποποίηση πραγματοποιείται σε δύο στάδια: πρώτα με τη βοήθεια ομαδικών ορών και στη συνέχεια με μεμονωμένους ορούς της ομάδας με την οποία ελήφθη θετική αντίδραση. Ο ορότυπος του πνευμονιόκοκκου χρησιμοποιείται κυρίως για επιδημιολογικές μελέτες των αποτελεσμάτων ειδικής οροθεραπείας και οροπροφύλαξης.

Η μικροσυγκόλληση των πνευμονιόκοκκων με τη μέθοδο Sabin μπορεί να επιτευχθεί με ανάμιξη αντιπνευμονιοκοκκικών ορών με εξίδρωμα από την κοιλιακή κοιλότητα ενός ποντικού που έχει μολυνθεί από τα πτύελα του ασθενούς. Ήδη τέσσερις ώρες μετά τη μόλυνση, μια καθαρή καλλιέργεια πνευμονιόκοκκου βρίσκεται στο εξίδρωμα, δίνοντας θετική συγκόλληση Sabin.

Επιταχυνόμενες μέθοδοι ανίχνευσης και τυποποίησης πνευμονιόκοκκων. 1. Μέθοδος Neufeld ή το φαινόμενο της διόγκωσης της πνευμονιοκοκκικής κάψουλας. Ένα κομμάτι πρόσφατα απομονωθέντων πτυέλων του ασθενούς εφαρμόζεται σε τρία

καλυπτρίδες, σε καθένα από αυτά προσθέστε μια σταγόνα μη αραιωμένου ειδικού αντιπνευμονιοκοκκικού ορού (τύποι 1, II, III) και μια σταγόνα Loeffler's blue. Οι σταγόνες αναμειγνύονται καλά, καλύπτονται με μια γυάλινη πλάκα με μια τρύπα αλειμμένη γύρω από τις άκρες με βαζελίνη. Μετά από δύο λεπτά, οι κρεμαστές σταγόνες εξετάζονται σε μικροσκόπιο με σύστημα εμβάπτισης. Σε μια θετική περίπτωση, παρατηρείται απότομη αύξηση των πνευμονιοκοκκικών καψουλών. Με αρνητικό αποτέλεσμα, οι κάψουλες δύσκολα αγαπιούνται. Η αντίδραση διόγκωσης είναι ειδική και δεν δίνει θετικό αποτέλεσμα με άλλα καψικά βακτήρια. Δεν το χρησιμοποιώ για τη μελέτη των πτυέλων από ασθενείς που λαμβάνουν θεραπεία με σουλφοναμίδια και αντιβιοτικά, tk. Σε αυτή την περίπτωση, οι καψικοί πνευμονιόκοκκοι μπορούν να απομονωθούν.

2. Μέθοδος καθίζησης. 5-10 ml πτυέλων βράζονται σε υδατόλουτρο μέχρι να δημιουργηθεί ένας πυκνός θρόμβος. Ο θρόμβος λειοτριβείται και προστίθεται μικρή ποσότητα φυσιολογικού ορού, βράζεται ξανά για αρκετά λεπτά για να εξαχθεί ο συγκεκριμένος πολυσακχαρίτης από τους πνευμονιόκοκκους. Το εναιώρημα φυγοκεντρείται, με το προκύπτον διαυγές υγρό και συγκεκριμένους τυπικούς ορούς σε σωλήνες καθίζησης, πραγματοποιείται αντίδραση κατακρήμνισης δακτυλίου. Η εμφάνιση ενός δακτυλίου στη διεπιφάνεια μεταξύ υγρών υποδηλώνει θετικό αποτέλεσμα.

3. Προσδιορισμός πνευμονιοκοκκικών καψουλών κατά Burri. Μια σταγόνα από το υλικό δοκιμής και μια σταγόνα μελάνης εφαρμόζονται στο άκρο της γυάλινης πλάκας. Το μείγμα αναδεύεται και γίνεται ένα επίχρισμα, ξηραίνεται στον αέρα και, χωρίς στερέωση, μικροσκοπικά. Το υπόβαθρο του φαρμάκου είναι σκούρο καπνιστό, τα μικροβιακά σώματα και οι κάψουλές τους δεν έχουν λεκιαστεί. Το παρασκεύασμα που παρασκευάζεται σύμφωνα με το Burri μπορεί να σταθεροποιηθεί με το μείγμα του Nikiforov, να πλυθεί με νερό, να χρωματιστεί με Tsilya fuchsin, να αραιωθεί 1:3 για 3-5 λεπτά. Στο σκούρο φόντο του επιχρίσματος ξεχωρίζουν οι μη λεκιασμένες κάψουλες, στο εσωτερικό των οποίων υπάρχουν βακτήρια φωτεινού κατακόκκινου χρώματος (μέθοδος Gins).

οστρακιάπροκαλούν διάφορους ορότυπους βήτα-αιμολυτικού στρεπτόκοκκου με Μ-αντιγόνο και παράγοντα ερυθρογενίνη (τοξιγονικοί στρεπτόκοκκοι της οροομάδας Α) - (Streptococcus pyogenes). Ελλείψει αντιτοξικής ανοσίας, εμφανίζεται οστρακιά, παρουσία στηθάγχης.

Κλινική εικόνα

 Μέθη - πυρετός, γενική κακουχία, πονοκέφαλοι.

 Εξάνθημα Scarlatina - λεπτόκοκκο, με μέτρια πίεση με γυάλινη σπάτουλα, οι κηλίδες είναι πιο ευδιάκριτες. Όταν πιέζεται πιο δυνατά, το εξάνθημα δίνει τη θέση του σε έναν χρυσοκίτρινο τόνο δέρματος. Εμφανίζεται την 1-3η ημέρα της νόσου και εντοπίζεται κυρίως στα μάγουλα, στη βουβωνική χώρα, στα πλαϊνά του σώματος. Το δέρμα του ρινοχειλικού τριγώνου παραμένει χλωμό και χωρίς εξανθήματα. Το εξάνθημα διαρκεί συνήθως 3-7 ημέρες, στη συνέχεια εξαφανίζεται, χωρίς να αφήνει μελάγχρωση. Χαρακτηρίζεται από πάχυνση του εξανθήματος στις πτυχές των άκρων - μασχαλιαία, αγκώνα, ιγνυακές περιοχές.

 Κόκκινη γλώσσα - τη 2-4η ημέρα της ασθένειας, η γλώσσα του ασθενούς γίνεται έντονη κοκκώδης, έντονο κόκκινο, η λεγόμενη «βυσσινί» γλώσσα.

 Η στηθάγχη είναι ένα σταθερό σύμπτωμα της οστρακιάς. Μπορεί να είναι πιο σοβαρός από τον συνηθισμένο πονόλαιμο.

 Ξεφλούδισμα του δέρματος - εμφανίζεται μετά την εξαφάνιση του εξανθήματος (14 ημέρες μετά την εμφάνιση της νόσου): στην περιοχή των παλάμες και τα πόδια είναι μεγάλου ελατηρίου, ξεκινώντας από τα άκρα των δακτύλων. στον κορμό, το λαιμό, τα αυτιά φολιδωτό ξεφλούδισμα.

Πνευμονιόκοκκοι, ταξινόμηση. Ιδιότητες. Ορολογικές ομάδες. Διακριτικά χαρακτηριστικά από άλλους στρεπτόκοκκους. Προκαλούμενες ασθένειες. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης.

Μορφολογία και βιολογικές ιδιότητες. Οι πνευμονιόκοκκοι (Streptococcus pneumoniae) είναι ζευγαρωμένοι κόκκοι ωοειδούς, ελαφρώς επιμήκους λογχοειδούς σχήματος, που μοιάζει με φλόγα κεριού. Μπορούν επίσης να βρίσκονται σε κοντές αλυσίδες, που μοιάζουν με στρεπτόκοκκους. Είναι μη κινητικά, δεν σχηματίζουν σπόρια και είναι θετικά κατά Gram.
Αναπτύσσονται σε μέσα με προσθήκη πρωτεΐνης: αίμα, ορός, με ασκιτικό υγρό. Στο άγαρ αίματος, οι πνευμονιοκοκκικές αποικίες είναι μικρές, μοιάζουν με σταγόνες δροσοσταλίδας, διαφανείς στο μεταδιδόμενο φως, με ένα πιεσμένο κέντρο, που περιβάλλεται από μια ζώνη ατελούς αιμόλυσης, μια πρασινωπή απόχρωση, παρόμοια με τις αποικίες του ζωογόνου στρεπτόκοκκου. Σε υγρά μέσα, δίνουν μια ήπια θολότητα, μερικές φορές σχηματίζοντας ένα ίζημα. Είναι αρκετά ενεργά βιοχημικά: αποσυνθέτουν τη γλυκόζη, τη λακτόζη, τη μαλτόζη, την ινουλίνη και άλλους υδατάνθρακες με το σχηματισμό οξέος, δεν υγροποιούν τη ζελατίνη, δεν σχηματίζουν ινδόλη. Ο διαχωρισμός της ινουλίνης είναι ένα διαφορικό διαγνωστικό χαρακτηριστικό που βοηθά στη διάκριση του πνευμονιόκοκκου από τους στρεπτόκοκκους, οι οποίοι δεν αποσυνθέτουν την ινουλίνη. Ένα σημαντικό χαρακτηριστικό γνώρισμα είναι η ικανότητα των πνευμονόκοκκων να διαλύονται στη χολή, ενώ οι στρεπτόκοκκοι διατηρούνται καλά σε αυτήν.

Παθογένεια και κλινική. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι οι αιτιολογικοί παράγοντες της λοβιακής πνευμονίας στον άνθρωπο. Μπορούν επίσης να προκαλέσουν έρποντα έλκη κερατοειδούς, καταρροές του ανώτερου αναπνευστικού, μηνιγγίτιδα, ενδοκαρδίτιδα, βλάβη των αρθρώσεων και άλλες ασθένειες.

Μετά τη νόσο, η ανοσία είναι χαμηλής τάσης, βραχυπρόθεσμης, τυποειδούς.
Μικροβιολογική διάγνωση. Το υλικό για τη μελέτη είναι πτύελα, αίμα, λάρυγγα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό. Λόγω του γεγονότος ότι ο πνευμονιόκοκκος πεθαίνει γρήγορα, το παθολογικό υλικό πρέπει να παραδοθεί στο εργαστήριο το συντομότερο δυνατό για έρευνα.

Μηνιγγιτιδόκοκκος. Ταξινόμηση, ιδιότητες. Αντιγονική δομή μηνιγγιτιδόκοκκων, ταξινόμηση. Παθογένεια μηνιγγιτιδοκοκκικής λοίμωξης, κλινικές εκδηλώσεις. Αρχές και μέθοδοι μικροβιολογικής διάγνωσης. Διαφοροποίηση του αιτιολογικού παράγοντα της μηνιγγιτιδοκοκκικής λοίμωξης και άλλων μηνιγγιτιδόκοκκων. ειδική προφύλαξη.

N. meningitidis (μηνιγγιτιδόκοκκοι).

Ο μηνιγγιτιδόκοκκος είναι ο αιτιολογικός παράγοντας της μηνιγγιτιδοκοκκικής λοίμωξης - μια σοβαρή ανθρωπόπτωση με αερομεταφερόμενη μετάδοση σταγονιδίων του παθογόνου. Η κύρια πηγή είναι οι μεταφορείς. Η φυσική δεξαμενή είναι ο ανθρώπινος ρινοφάρυγγας. Μορφολογικές, πολιτιστικές και βιοχημικές ιδιότητες είναι παρόμοιες με τον γονόκοκκο. Διαφορές - ζυμώνουν όχι μόνο τη γλυκόζη, αλλά και τη μαλτόζη, παράγουν αιμολυσίνη.Έχουν μια κάψουλα που είναι μεγαλύτερη και έχει διαφορετική δομή από αυτή του γονόκοκκου.

αντιγονική σύνθεση.Έχουν τέσσερα κύρια αντιγονικά συστήματα.

1. Αντιγόνα πολυσακχαριτών ειδικών για την καψική ομάδα. Τα στελέχη της οροομάδας Α προκαλούν συχνότερα επιδημικά ξεσπάσματα.

2. Πρωτεϊνικά αντιγόνα της εξωτερικής μεμβράνης. Σύμφωνα με αυτά τα αντιγόνα, οι μηνιγγιτιδόκοκκοι των οροομάδων Β και Γ χωρίζονται σε τάξεις και ορότυπους.

3. Αντιγόνα ειδικά για το γένος και το είδος.

4. Λιποπολυσακχαριτικά αντιγόνα (8 τύποι). Έχουν υψηλή τοξικότητα, προκαλούν πυρετογόνο αποτέλεσμα.

παράγοντες παθογένειας.Παράγοντες προσκόλλησης και αποικισμός - πυλώνες και πρωτεΐνες εξωτερικής μεμβράνης. Παράγοντες εισβολής - υαλουρονιδάση και άλλα παραγόμενα ένζυμα (νεουραμινιδάση, πρωτεάσες, ινωδολυσίνη). Μεγάλη σημασία έχουν τα καψικά πολυσακχαριδικά αντιγόνα που προστατεύουν τους μικροοργανισμούς από τη φαγοκυττάρωση.

Ασυλία, ανοσίαανθεκτικό, αντιμικροβιακό.

Εργαστηριακή διάγνωσημε βάση τη βακτηριοσκόπηση, την απομόνωση της καλλιέργειας και τη βιοχημική της ταυτοποίηση, ορολογικές διαγνωστικές μεθόδους. Ο εμβολιασμός του υλικού πραγματοποιείται σε στερεά και ημι-υγρά θρεπτικά μέσα που περιέχουν αίμα, ασκιτικό υγρό και ορό αίματος.

Οι καλλιέργειες θετικές για οξειδάση θεωρείται ότι ανήκουν στο γένος Neisseria. Ο μηνιγγιτιδόκοκκος χαρακτηρίζεται από τη ζύμωση γλυκόζης και μαλτόζης. Το ότι ανήκει στην οροομάδα προσδιορίζεται στη δοκιμή συγκόλλησης (RA).

Γονόκοκκος. Ταξινόμηση, ιδιότητες. Παθογένεια γονοκοκκικής λοίμωξης, χαρακτηριστικά ανοσίας. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης οξείας και χρόνιας γονόρροιας, βλεννόρροιας. RSK Borde-Zhangu, σκοπός, μηχανισμός, λογιστική απάντησης. Πρόληψη της βλεννόρροιας στα νεογνά. Πρόληψη και θεραπεία γονόρροιας. ειδική θεραπεία.

N.gonorrheae (γονόκοκκος).

Ο γονόκοκκος είναι ο αιτιολογικός παράγοντας της γονόρροιας, μιας σεξουαλικά μεταδιδόμενης ασθένειας με φλεγμονώδεις εκδηλώσεις στο ουροποιητικό σύστημα. Το υπόστρωμα για τον αποικισμό είναι το επιθήλιο της ουρήθρας, του ορθού, του επιπεφυκότα του οφθαλμού, του φάρυγγα, του τραχήλου της μήτρας, των σαλπίγγων και της ωοθήκης.

Οι διπλόκοκκοι βάφονται καλά με μπλε του μεθυλενίου και άλλες βαφές ανιλίνης, πλειόμορφες (πολυμορφισμός). Πολύ ιδιότροπο για τις συνθήκες καλλιέργειας και θρεπτικά μέσα. Από τους υδατάνθρακες ζυμώνεται μόνο η γλυκόζη.

Αντιγονική δομήπολύ μεταβλητή - χαρακτηρίζεται από διακυμάνσεις φάσης (εξαφάνιση αντιγονικών καθοριστικών παραγόντων) και αντιγονικές παραλλαγές (αλλαγές στους αντιγονικούς καθοριστικούς παράγοντες).

παράγοντες παθογένειας.Οι κύριοι παράγοντες είναι έπινε, με τη βοήθεια των οποίων οι γονόκοκκοι πραγματοποιούν προσκόλληση και αποικισμό των επιθηλιακών κυττάρων της βλεννογόνου μεμβράνης του ουροποιητικού συστήματος, και λιποπολυσακχαρίτης(ενδοτοξίνη, που απελευθερώνεται κατά την καταστροφή των γονόκοκκων). Οι γονόκοκκοι συνθέτουν την IgAI, μια πρωτεάση που διασπά την IgA.

Εργαστηριακή διάγνωση.Η βακτηριοσκοπική διάγνωση περιλαμβάνει χρώση Gram και μπλε του μεθυλενίου. Τυπικά σημεία του γονόκοκκου είναι η gram-αρνητική χρώση, οι διπλόκοκκοι σε σχήμα φασολιού, ο ενδοκυτταρικός εντοπισμός.

Η σπορά πραγματοποιείται σε ειδικά μέσα (KDS-MPA από κρέας κουνελιού ή καρδιά βοοειδών με ορό, ασκίτη-άγαρ, άγαρ αίματος).

Αιτιακοί παράγοντες αέριας αναερόβιας μόλυνσης. Ταξονομία. Ιδιότητες. χαρακτηριστικά των τοξινών. Παθογένεση, κλινικές μορφές. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης, φάρμακα ειδικής πρόληψης και θεραπείας.

Η αέρια γάγγραινα είναι μια αναερόβια πολυκλωστριδιακή (δηλαδή που προκαλείται από διάφορους τύπους κλωστριδίων) τραύμα (τραυματική) λοίμωξη. Πρωταρχικής σημασίας είναι το C.perfringens, λιγότερο συχνά το C.novyi, καθώς και άλλοι τύποι κλωστριδίων σε επίμονες συσχετίσεις μεταξύ τους, αερόβιοι πυογόνοι κόκκοι και σήψη αναερόβια βακτήρια.

Το C.perfringens είναι κανονικός κάτοικος των εντέρων των ανθρώπων και των ζώων, εισέρχεται στο έδαφος με κόπρανα. Είναι ο αιτιολογικός παράγοντας της μόλυνσης του τραύματος - προκαλεί ασθένεια όταν το παθογόνο εισέρχεται στην πληγή υπό αναερόβιες συνθήκες. Είναι εξαιρετικά επεμβατικό και τοξικογόνο. Η επεμβατικότητα σχετίζεται με την παραγωγή υαλουρονιδάσης και άλλων ενζύμων που έχουν καταστροφική επίδραση στους μυς και τους συνδετικούς ιστούς. Κύριος παράγοντας παθογένειας - εξωτοξίνη, το οποίο έχει αιμο-, νεκρο-, νευρο-, λευκοτοξικές και θανατηφόρες επιδράσεις. Σύμφωνα με την αντιγονική ειδικότητα των εξωτοξινών, απομονώνονται ορότυπουςπαθογόνο. Μαζί με την αέρια γάγγραινα, το C. perfringens προκαλεί τροφική δηλητηρίαση (βασίζονται στη δράση των εντεροτοξινών και των νεκροτοξινών).

Χαρακτηριστικά της παθογένειας.Σε αντίθεση με τις πυώδεις ασθένειες που προκαλούνται από αερόβια, η αναερόβια μόλυνση δεν κυριαρχείται από φλεγμονή, αλλά νέκρωση, οίδημα, σχηματισμός αερίων στους ιστούς, δηλητηρίαση με τοξίνες και προϊόντα αποσύνθεσης των ιστών.

Ασυλία, ανοσία- κυρίως αντιτοξικό.

Εργαστηριακή διάγνωσηπεριλαμβάνει βακτηριοσκόπηση της έκκρισης του τραύματος, απομόνωση και ταυτοποίηση του παθογόνου, ανίχνευση και ταυτοποίηση τοξίνης σε βιοπροσδιορισμούς χρησιμοποιώντας αντίδραση εξουδετέρωσης με ειδικά αντιτοξικά αντισώματα.

Πρόληψη και θεραπεία.Η πρόληψη της αέριας γάγγραινας βασίζεται στην έγκαιρη και σωστή χειρουργική αντιμετώπιση των πληγών. Σε περίπτωση σοβαρών τραυμάτων, χορηγούνται αντιτοξικοί οροί έναντι των κύριων τύπων κλωστριδίου, 10 χιλιάδες IU έκαστος, για ιατρικούς σκοπούς - 50 χιλιάδες IU έκαστος.

Clostridia tetanus. Ταξονομία. Ιδιότητες, χαρακτηριστικά τοξινών. Η παθογένεια της νόσου. Φθίνουσα τέτανος. Κλινική. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης. Σκοπός της βακτηριολογικής έρευνας, σκευάσματα για ειδική πρόληψη και θεραπεία.

Ο τέτανος είναι μια οξεία λοίμωξη του τραύματος που χαρακτηρίζεται από βλάβες νευροτοξίνηκινητικά κύτταρα του νωτιαίου μυελού και του εγκεφάλου, που εκδηλώνεται με τη μορφή σπασμών των γραμμωτών μυών. Οι άνθρωποι και τα ζώα της φάρμας αρρωσταίνουν. Το έδαφος, ιδιαίτερα μολυσμένο με περιττώματα ανθρώπων και ζώων, αποτελεί σταθερή πηγή μόλυνσης από τέτανο.

Παθογόνο - C.tetani - ένας μεγάλος gram-θετικός βάκιλος που σχηματίζει σπόρους. Τα σπόρια εντοπίζονται τερματικά (είδος τυμπάνου), κινητά λόγω μαστιγών - περιτριχώδους. Υποχρεωτικά αναερόβια. Τα σπόρια είναι πολύ ανθεκτικά.

αντιγονικές ιδιότητες.Ο αιτιολογικός παράγοντας έχει Ο- και Η- αντιγόνα.

παράγοντες παθογένειας.Ο κύριος παράγοντας είναι η ισχυρότερη εξωτοξίνη. Τα δύο κύρια κλάσματά του διακρίνονται - η τετανοσπασμίνη (νευροτοξίνη) και η τετανολυσίνη (αιμολυσίνη). Η νευροτοξίνη στο κεντρικό νευρικό σύστημα διεισδύει στην περιοχή των μυονευρικών συνάψεων, μεταδίδεται από νευρώνα σε νευρώνα στην περιοχή των συνάψεων, συσσωρεύεται στις κινητικές περιοχές της σπονδυλικής στήλης και του εγκεφάλου, εμποδίζει τη συναπτική μετάδοση. Ο θάνατος επέρχεται από παράλυση του αναπνευστικού κέντρου, ασφυξία (βλάβη των μυών του λάρυγγα, του διαφράγματος, των μεσοπλεύριων μυών) ή παράλυση της καρδιάς.

Εργαστηριακή διάγνωση.Η μικροβιολογική διάγνωση περιλαμβάνει βακτηριοσκόπηση πρώτων υλών, καλλιέργεια για απομόνωση του παθογόνου και ταυτοποίησή του, ανίχνευση τοξίνης τετάνου.

Η απομόνωση του παθογόνου πραγματοποιείται σύμφωνα με το τυπικό σχήμα για τα αναερόβια, χρησιμοποιώντας διάφορα πυκνά και υγρά (μέσο Kitt-Tarozzi) μέσα, η ταυτοποίηση βασίζεται σε μορφολογικές, πολιτιστικές, βιοχημικές και τοξικογόνες ιδιότητες.

Η απλούστερη και πιο αποτελεσματική μέθοδος μικροβιολογικής διάγνωσης είναι η βιοδοκιμασία σε λευκά ποντίκια. Η μία ομάδα μολύνεται με το υλικό δοκιμής, η δεύτερη (μάρτυρας) - μετά την ανάμειξη των δειγμάτων με αντιτοξικό ορό τετάνου. Παρουσία της τοξίνης του τετάνου, η πειραματική ομάδα των ποντικών πεθαίνει, ενώ η ομάδα ελέγχου παραμένει ζωντανή.

Θεραπεία και πρόληψη έκτακτης ανάγκης.Χρησιμοποιείται ανοσοσφαιρίνη τετάνου (αντιτοξίνη), αντιτοξικός ορός (350 IU/kg), αντιβιοτικά (πενικιλίνες, κεφαλοσπορίνες). Για τη δημιουργία ανοσίας του εμβολίου, χρησιμοποιείται τοξοειδές τετάνου, πιο συχνά ως μέρος του εμβολίου DTP (τοξοειδή τετάνου, διφθερίτιδα και σκοτωμένος κοκκύτης).

Clostridia botulinum. Ταξονομία. Ιδιότητες. Χαρακτηριστικά των τοξινών, διαφορά από τις εξωτοξίνες παθογόνων άλλων τροφιμογενών λοιμώξεων. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης. Φάρμακα για ειδική πρόληψη και θεραπεία.

Η αλλαντίαση είναι μια σοβαρή τροφική δηλητηρίαση που σχετίζεται με τη χρήση προϊόντων μολυσμένων με C.botulinum και χαρακτηρίζεται από μια συγκεκριμένη βλάβη του κεντρικού νευρικού συστήματος. Πήρε το όνομά του από το λατ. αλλαντίαση - λουκάνικο.

Ιδιότητες διεγέρτη.Μεγάλες πολυμορφικές gram-θετικές ράβδοι, κινητές, έχουν περιτριχώδη μαστίγια. Τα σπόρια είναι ωοειδή, τοποθετημένα υποτερμάτινα (ρακέτα τένις). Σχηματίζονται οκτώ τύποι τοξινών, που διαφέρουν ως προς την αντιγονική ειδικότητα και, κατά συνέπεια, απομονώνονται 8 τύποι παθογόνων. Μεταξύ των σημαντικότερων χαρακτηριστικών είναι η παρουσία ή απουσία πρωτεολυτικών ιδιοτήτων (υδρόλυση καζεΐνης, παραγωγή υδρόθειου).

Η τοξίνη έχει νευροτοξική δράση. Η τοξίνη εισέρχεται στο σώμα με την τροφή, αν και πιθανότατα μπορεί να συσσωρευτεί όταν το παθογόνο πολλαπλασιάζεται στους ιστούς του σώματος. Η τοξίνη είναι θερμοευαίσθητη, αν και ο βρασμός για έως και 20 λεπτά είναι απαραίτητος για την πλήρη αδρανοποίηση. Η τοξίνη απορροφάται γρήγορα στο γαστρεντερικό σωλήνα, διεισδύει στο αίμα, δρα επιλεκτικά στους πυρήνες του προμήκη μυελού και στα γαγγλιακά κύτταρα του νωτιαίου μυελού. Αναπτύσσονται νευροπαραλυτικά φαινόμενα - διαταραχές κατάποσης, αφωνία, δυσφαγία, οφθαλμοπληγικό σύνδρομο (στραβισμός, διπλή όραση, βλεφαρόπτωση), παράλυση και πάρεση των μυών του φάρυγγα και του λάρυγγα, αναπνευστική και καρδιακή ανακοπή.

Εργαστηριακή διάγνωση.Οι αρχές είναι κοινές στα κλωστρίδια.

Θεραπεία και πρόληψη.Η βάση είναι η πρώιμη χρήση αντιτοξικών ορών (πολυσθενών ή, όταν διαπιστωθεί ο τύπος, ομόλογων). Η πρόληψη βασίζεται στο υγειονομικό και υγιεινό καθεστώς στην επεξεργασία των προϊόντων διατροφής. Τα σπιτικά κονσερβοποιημένα μανιτάρια και άλλα προϊόντα που αποθηκεύονται σε αναερόβιες συνθήκες είναι ιδιαίτερα επικίνδυνα.

11. Pseudomonas aeruginosa. Ταξονομία. Ιδιότητες. Προκαλούμενες ασθένειες.
Ρόλος στις νοσοκομειακές λοιμώξεις. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης.

Το γένος pseudomonas, P. aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa) είναι ένας από τους κύριους αιτιολογικούς παράγοντες των τοπικών και συστηματικών πυωδών-φλεγμονωδών διεργασιών στα ιατρικά νοσοκομεία.

Το παθογόνο είναι πανταχού παρόν (νερό, έδαφος, φυτά, ζώα), εμφανίζεται φυσιολογικά στον άνθρωπο (συχνότερα στα έντερα, στο δέρμα και στους βλεννογόνους). Μορφολογία- Αρνητική κατά Gram ίσια ή ελαφρώς κυρτή ράβδος, κινητή, τοποθετημένη σε κηλίδες μεμονωμένα, σε ζευγάρια ή σε κοντές αλυσίδες. Συνθέτει βλέννα (καψική ουσία), ιδιαίτερα πιο λοιμώδη βλεννοειδή στελέχη.

πολιτιστικές ιδιότητες.Είναι αερόβιο και έχει ένα σύνολο ενζύμων που αντιστοιχούν στον τύπο της αναπνοής (κυτοχρώματα, οξειδάση κυτοχρώματος, αφυδράσες). το τέλος της ημέρας λόγω σύνθεσης χρωστικής πυοκυανίνηεμφανίζεται ένα γαλαζοπράσινο χρώμα του πολιτισμού.

βιοχημικές ιδιότητες.Το Pseudomonas aeruginosa χαρακτηρίζεται από χαμηλή σακχαρολυτική δράση (οξειδώνει μόνο τη γλυκόζη), υψηλή πρωτεολυτική δραστηριότητα και σχηματισμό ζώνης βήτα-αιμόλυσης στο άγαρ αίματος. Συνθέτει τριμεθυλαμίνη, η οποία δίνει στις καλλιέργειες μια ευχάριστη μυρωδιά γιασεμιού. Παράγει την παραγωγή βακτηριοκινών - πυοκίνες.

Αντιγονικές και παθογόνες ιδιότητες.Τα κύρια αντιγόνα του Pseudomonas aeruginosa είναι ένα ειδικό για την ομάδα σωματικό Ο-αντιγόνο και ένα τυποειδικό μαστιγιακό Η-αντιγόνο. Ο-αντιγονικό σύμπλεγμα - ένα συσσωμάτωμα LPS με πρωτεΐνες και λιπίδια του κυτταρικού τοιχώματος, έχει τις ιδιότητες της ενδοτοξίνης, είναι ένας από τους κύριους παράγοντες παθογένειας. Το Pseudomonas aeruginosa έχει ένα μεγάλο σύνολο παραγόντων παθογένειας - ενδοτοξίνη (LPS, παρόμοια με άλλα gram-αρνητικά βακτήρια), μια σειρά από εξωτοξίνες - κυτταροτοξίνη, εξωένζυμο S, αιμολυσίνες, εξωτοξίνη Α (ο πιο σημαντικός, μοιάζει με εξωτοξίνη διφθερίτιδας), ένζυμα (κολλαγενάση). νευραμινιδάση, πρωτεάσες).

Εργαστηριακή διάγνωση.Το P.aeruginisa έλαβε το όνομά του για τη γαλαζοπράσινη χρώση των αποσπώμενων πληγών και επιδέσμων. Η κύρια διαγνωστική μέθοδος είναι βακτηριολογική. Σημαντική είναι η ανίχνευση της χρωστικής πυοκυανίνης. Θεραπεία και ειδική πρόληψη.Δεν υπάρχει συγκεκριμένη πρόληψη. Με την τροφική δηλητηρίαση και την εντερική δυσβακτηρίωση που προκαλείται από Pseudomonas aeruginosa, είναι αποτελεσματικός ένας πολύπλοκος βακτηριοφάγος του εντέρου, ο οποίος περιλαμβάνει τον φάγο ψευδομονάδας. Από τα αντιβακτηριακά φάρμακα, χρησιμοποιούνται συχνότερα αμινογλυκοσίδες, κεφαλοσπορίνες και κινολόνες.

Υπό όρους παθογόνα gram-αρνητικά βακτήρια - αιτιολογικοί παράγοντες πυώδους-φλεγμονώδους διεργασιών (Proteus, Klebsiella, θαυματουργή ράβδος κ.λπ.), ταξινόμηση. Γενικά χαρακτηριστικά των εντεροβακτηρίων. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης.

Γένος Klebsiella.

Το γένος Klebsiella ανήκει στην οικογένεια των Enterobacteriaceae. Ένα χαρακτηριστικό των εκπροσώπων του γένους είναι η ικανότητα σχηματισμού κάψουλας. Το κύριο είδος είναι το K. Pneumoniae. Προκαλούν ευκαιριακές βλάβες - νοσοκομειακή πνευμονία, ουρολοιμώξεις, διάρροια στα νεογνά. Οι κλεμπσιέλλες προκαλούν μαστίτιδα, σηψαιμία και πνευμονία στα ζώα, βρίσκονται συνεχώς στο δέρμα και στους βλεννογόνους ανθρώπων και ζώων. Klebsiella - ίσια, ακίνητα ραβδιά διαφόρων μεγεθών. προαιρετικά αναερόβια. Οξειδάση - αρνητική, καταλάση - θετική.

παράγοντες παθογένειας.Αυτά περιλαμβάνουν μια κάψουλα πολυσακχαρίτη (αντιγόνο Κ), ενδοτοξίνη, κροσσούς, σύστημα σιδηροφόρων (δεσμεύει ιόντα σιδήρου και μειώνει την περιεκτικότητά τους στους ιστούς), θερμοευαίσθητες και θερμοσταθερές εξωτοξίνες.

Κλινικές ΕΚΔΗΛΩΣΕΙΣ.Το K.pneumoniae (subsp. pneumoniae) χαρακτηρίζεται από νοσοκομειακή βρογχίτιδα και βρογχοπνευμονία, λοβιακή πνευμονία, ουρολοιμώξεις, βλάβες των μηνίγγων, των αρθρώσεων, της σπονδυλικής στήλης, των ματιών, καθώς και βακτηριαιμία και σηψαιμία. Το υποείδος ozaenae προκαλεί μια ειδική μορφή χρόνιας ατροφικής ρινίτιδας - λίμνη.

Εργαστηριακή διάγνωση.Η κύρια μέθοδος είναι βακτηριολογική. Θεραπευτική αγωγή.Ένα από τα χαρακτηριστικά της Klebsiella είναι η αντοχή τους σε πολλά φάρμακα και η ανάπτυξη βλαβών σε φόντο μείωσης της αντίστασης του σώματος. Τα αντιβιοτικά χρησιμοποιούνται για γενικευμένες και υποτονικές χρόνιες μορφές της Klebsiellesis, συνήθως σε συνδυασμό με φάρμακα που διεγείρουν το ανοσοποιητικό σύστημα.

Γένος Πρωτεύς.

Το γένος Proteus ανήκει στην οικογένεια των Enterobacteriaceae. Το γένος ονομάστηκε προς τιμήν του γιου του Ποσειδώνα Πρωτέα, ικανού να αλλάξει την εμφάνισή του. Οι εκπρόσωποι του γένους είναι σε θέση να αλλάξουν τις εξωτερικές εκδηλώσεις ανάπτυξης σε πυκνά θρεπτικά μέσα και διακρίνονται επίσης από τον μεγαλύτερο πλειομορφισμό (μεταβλητότητα μορφολογίας) σε σύγκριση με άλλα Εντεροβακτήρια.

Οι πρωτεΐνες διασπούν την τυροσίνη, αποκαθιστούν τα νιτρικά, η οξειδάση είναι αρνητική, η καταλάση είναι θετική. Ζουν στα έντερα πολλών ειδών σπονδυλωτών και ασπόνδυλων, στο έδαφος, στα λύματα και σε οργανικά υπολείμματα σε αποσύνθεση. Μπορεί να προκαλέσει ουρολοιμώξεις στον άνθρωπο, καθώς και σηπτικές βλάβες σε ασθενείς με εγκαύματα και μετά από χειρουργική επέμβαση. Αρκετά συχνά προκαλούν και τροφική δηλητηρίαση. Το P.vulgaris και το P.mirabilis έχουν τον πιο κοινό ρόλο στην παθολογία.

πολιτιστικές ιδιότητες.Οι πρωτεΐνες αναπτύσσονται σε απλά μέσα σε ένα ευρύ φάσμα θερμοκρασιών. Το βέλτιστο pH είναι 7,2-7,4, η θερμοκρασία είναι από +35 έως 37 βαθμούς Κελσίου. Οι αποικίες του Πρωτέα σε μορφή Ο είναι στρογγυλεμένες, ημιδιαφανείς και κυρτές, οι μορφές Η δίνουν συνεχή ανάπτυξη. Η ανάπτυξη των πρωτεϊνών συνοδεύεται από μια σάπια οσμή. Το φαινόμενο της σμηνουργίας είναι χαρακτηριστικό, οι μορφές Η δίνουν στο MPA μια χαρακτηριστική έρπουσα ανάπτυξη με τη μορφή ενός γαλαζωπό-καπνού λεπτού πέπλου. Κατά τη σπορά σύμφωνα με τη μέθοδο Shushkevich στην υγρασία συμπύκνωσης του φρεσκοκομμένου MPA, η καλλιέργεια ανεβαίνει σταδιακά με τη μορφή πέπλου επάνω στην επιφάνεια του άγαρ. Διάχυτη θολότητα του μέσου με παχύρρευστο λευκό ίζημα στο κάτω μέρος σημειώνεται στο BCH.

παράγοντες παθογένειας.Αυτά περιλαμβάνουν το LPS του κυτταρικού τοιχώματος, την ικανότητα «σμήνους», κροσσούς, πρωτεάσες και ουρεάση, αιμολυσίνες και αιμοσυγκολλητίνες.

Εργαστηριακή διάγνωση.Η κύρια μέθοδος είναι βακτηριολογική. Τα διαφορικά διαγνωστικά μέσα (Ploskirev), τα μέσα εμπλουτισμού και το MPA χρησιμοποιούνται σύμφωνα με τη μέθοδο Shushkevich. Θεραπευτική αγωγή. Σε περίπτωση εντερικής δυσβακτηρίωσης που σχετίζεται με πρωτεΐνες (κολίτιδα), είναι δυνατή η χρήση πρωτεϊνικού φάγου και σκευασμάτων που τον περιέχουν (εντερικό, βακτηριοφάγος coliproteus).

"Υπέροχο ραβδί" (Serratia marcescens), τύπος βακτηρίων από τους μικροοργανισμούς χρωστικών. Gram-αρνητικές κινητές (περιτριχώδεις) μη σποριοφόροι ράβδοι. Ανά τύπο ανταλλαγής - προαιρετικό αναερόβιο. Στην επιφάνεια του άγαρ σχηματίζονται λείες ή κοκκώδεις σκούρες και φωτεινές κόκκινες αποικίες με μεταλλική λάμψη. Ζει σε χώμα, νερό, τροφή. Αναπτύσσεται στο ψωμί (σε υψηλή υγρασία), στο γάλα, τα χρωματίζει κόκκινο. τέτοια προϊόντα δεν επιτρέπεται να πωλούνται. Υπό όρους παθογόνο για ζώα και ανθρώπους. μπορεί να προκαλέσει εξίδρωση.

13. Escherichia. Ταξονομία. Ασθένειες που προκαλούνται από Escherichia coli. Παθογόνες παραλλαγές της διαρροϊκής Escherichia. Αντιγονική δομή, ταξινόμηση. Χαρακτηριστικά της μικροβιολογικής διάγνωσης. Διαφοροποίηση της διαρροϊκής Escherichia από την υπό όρους παθογόνο.

Η Escherichia είναι τα πιο κοινά αερόβια εντερικά βακτήρια που, υπό ορισμένες συνθήκες, μπορούν να προκαλέσουν μια ευρεία ομάδα ανθρώπινων ασθενειών, τόσο εντερική (διάρροια) όσο και εξωεντερική (βακτηριαιμία, ουρολοιμώξεις κ.λπ.). Το κύριο είδος - E. coli (E. coli) - ο πιο κοινός αιτιολογικός παράγοντας μολυσματικών ασθενειών που προκαλούνται από εντεροβακτήρια. Αυτό το παθογόνο είναι ένας δείκτης μόλυνσης των κοπράνων, ιδιαίτερα του νερού.

πολιτιστικές ιδιότητες.Σε υγρά μέσα, το E. coli δίνει διάχυτη θολότητα, σε πυκνά μέσα σχηματίζει S- και R-μορφές αποικιών. Στο μέσο Endo για Escherichia, το Escherichia coli που ζυμώνει λακτόζη σχηματίζει έντονα κόκκινες αποικίες με μεταλλική γυαλάδα, μη ζυμώσιμες - απαλό ροζ ή άχρωμες αποικίες με πιο σκούρο κέντρο, στο μέσο Ploskirev - κόκκινο με κιτρινωπή απόχρωση, στο Levin's medium - σκούρο μπλε με μεταλλική γυαλάδα.

βιοχημικές ιδιότητες.Το Escherichia coli στις περισσότερες περιπτώσεις ζυμώνει υδατάνθρακες (γλυκόζη, λακτόζη, μαννιτόλη, αραβινόζη, γαλακτόζη κ.λπ.) με το σχηματισμό οξέος και αερίου, σχηματίζει ινδόλη, αλλά δεν σχηματίζει υδρόθειο και δεν υγροποιεί τη ζελατίνη.

Οι κύριοι παράγοντες παθογένειας του διαρροϊκού E.coli.

1. Παράγοντες προσκόλλησης, αποικισμού και εισβολής που σχετίζονται με πασσάλους, κροσσικές δομές, πρωτεΐνες της εξωτερικής μεμβράνης. Κωδικοποιούνται από πλασμιδικά γονίδια και προάγουν τον αποικισμό του κατώτερου λεπτού εντέρου.

2. Εξωτοξίνες: κυτοτονίνες (διεγείρουν την υπερέκκριση υγρού από τα κύτταρα του εντέρου, διαταράσσουν τον μεταβολισμό νερού-αλατιού και συμβάλλουν στην ανάπτυξη διάρροιας) και εντεροκυτταροτοξίνες (δρούν στα κύτταρα του εντερικού τοιχώματος και του τριχοειδούς ενδοθηλίου).

3. Ενδοτοξίνη (λιποπολυσακχαρίτης).

Ανάλογα με την παρουσία διαφόρων παραγόντων παθογένειας, η διαρροϊκή Escherichia coli χωρίζεται σε πέντε κύριους τύπους: εντεροτοξιγονικό, εντεροεπεμβατικό, εντεροπαθογόνο, εντεροαιμορραγικό, εντεροσυγκολλητικό.

4. Το παθογόνο E. coli χαρακτηρίζεται από την παραγωγή βακτηριοσινών (κολικινών).

Εντεροτοξιγονικό Ε. coliέχουν θερμοευαίσθητη τοξίνη υψηλού μοριακού βάρους, παρόμοια σε δράση με τη χολέρα, προκαλούν διάρροια που μοιάζει με χολέρα (γαστρεντερίτιδα σε μικρά παιδιά, διάρροια ταξιδιωτών κ.λπ.).

Εντεροδιηθητικό Escherichia coliικανό να διεισδύσει και να πολλαπλασιαστεί στα κύτταρα του εντερικού επιθηλίου. Προκαλούν άφθονη διάρροια με ανάμειξη αίματος και μεγάλο αριθμό λευκοκυττάρων (δείκτης μιας επεμβατικής διαδικασίας) στα κόπρανα. Κλινικά μοιάζει με δυσεντερία. Τα στελέχη έχουν κάποιες ομοιότητες με το Shigella (μη κινητικά, δεν ζυμώνουν τη λακτόζη, έχουν υψηλές εντεροεπεμβατικές ιδιότητες).

Εντεροπαθογόνο E.coli- οι κύριοι αιτιολογικοί παράγοντες της διάρροιας στα παιδιά. Στο επίκεντρο των βλαβών βρίσκεται η προσκόλληση βακτηρίων στο εντερικό επιθήλιο με βλάβη στις μικρολάχνες. Χαρακτηρίζεται από υδαρή διάρροια και σοβαρή αφυδάτωση.

Εντεροαιμορραγική Escherichia coliπροκαλούν διάρροια ανάμικτη με αίμα (αιμορραγική κολίτιδα), αιμολυτικό-ουραιμικό σύνδρομο (αιμολυτική αναιμία σε συνδυασμό με νεφρική ανεπάρκεια). Ο πιο κοινός ορότυπος της εντεροαιμορραγικής Escherichia coli είναι ο O157:H7.

Εντεροσυγκολλητικό E.coliδεν σχηματίζουν κυτταροτοξίνες, έχουν μελετηθεί ελάχιστα.

Εργαστηριακή διάγνωση.Η κύρια προσέγγιση είναι η απομόνωση μιας καθαρής καλλιέργειας σε διαφορικά διαγνωστικά μέσα και η ταυτοποίησή της με αντιγονικές ιδιότητες. Έβαλαν RA με ένα σετ πολυσθενών ορών ΟΚ (σε Ο- και Κ-αντιγόνα).

Μεταξύ των παθογόνων στρεπτόκοκκων ιδιαίτερη θέση κατέχει ο S.pneumoniae (πνευμονόκοκκος). Παίζει πολύ σημαντικό ρόλο στην ανθρώπινη λοιμώδη παθολογία. Αυτό το είδος είναι ένας από τους κύριους αιτιολογικούς παράγοντες της λοβιακής πνευμονίας. Σύμφωνα με κάθε άλλο παρά πλήρη στοιχεία, υπάρχουν περισσότερα από 500.000 περιστατικά πνευμονίας κάθε χρόνο στον κόσμο που προκαλούνται από πνευμονιόκοκκο, ειδικά σε παιδιά και ηλικιωμένους. Εκτός από τη φλεγμονή των πνευμόνων, αυτό το μικρόβιο προκαλεί μηνιγγίτιδα, ενδοκαρδίτιδα, περιτονίτιδα, μέση ωτίτιδα, ρινίτιδα, ιγμορίτιδα, σηψαιμία, έλκος κερατοειδούς και μια σειρά από άλλες ασθένειες. Για εργαστηριακή διάγνωση, χρησιμοποιούνται βακτηριοσκοπικές, βακτηριολογικές και βιολογικές μέθοδοι. Υλικό για τη μελέτη πτυέλων, πύου, αίματος, εγκεφαλονωτιαίου υγρού, βλέννας από στοματοφάρυγγα και ρινοφάρυγγα, εκκρίσεις από τον άνω γνάθο κόλπο, τα μάτια και τα αυτιά. Είναι σημαντικό να στείλετε αμέσως το υλικό στο εργαστήριο και να το αναλύσετε πολύ γρήγορα, αφού οι πνευμονιόκοκκοι είναι ευαίσθητοι σε αυτόλυση.

Βακτηριοσκοπική εξέταση

Η βακτηριοσκοπική εξέταση του υλικού (εκτός του αίματος) περιορίζεται στην κατασκευή δύο επιχρισμάτων. Ένα από αυτά χρωματίζεται με Gram, το δεύτερο - από Burri-Gins, γεγονός που καθιστά δυνατή την αναγνώριση της κάψουλας. Οι πνευμονιόκοκκοι εντοπίζονται με τη μορφή λογχοειδή διπλόκοκκων, που περιβάλλονται από μια κοινή κάψουλα. Εάν ανιχνευθούν 10 ή περισσότεροι τυπικοί διπλόκοκκοι στο οπτικό πεδίο, είναι πολύ πιθανό να υπάρχει S.pneumoniae. Ωστόσο, η πρωτογενής μικροσκόπηση δεν δίνει το δικαίωμα τελικής διάγνωσης, καθώς τα επιχρίσματα μπορεί να περιέχουν καψικούς μη παθογόνους διπλόκοκκους - αντιπροσώπους της φυσιολογικής μικροχλωρίδας. Ως εκ τούτου, είναι απαραίτητο να πραγματοποιηθεί σπορά κλινικού υλικού και να απομονωθεί μια καθαρή καλλιέργεια.

Βακτηριολογική έρευνα

Σε περίπτωση σήψης, 10 ml αίματος εμβολιάζονται στο κρεβάτι του ασθενούς σε ένα φιαλίδιο που περιέχει 100 ml ζωμού ορού ή ζάχαρης, επωάζεται για 18-20 ώρες στους 37 ° C, στη συνέχεια σπέρνεται σε άγαρ αίματος, απομονώνεται καθαρή καλλιέργεια και αναγνωρισθείς. Με τη μηνιγγίτιδα, το εγκεφαλονωτιαίο υγρό φυγοκεντρείται και το ίζημα καλλιεργείται σε άγαρ αίματος. Σε αυτό, οι πνευμονιόκοκκοι αναπτύσσονται με τη μορφή μικρών στρογγυλών αποικιών που περιβάλλονται από μια πράσινη ζώνη· μια χαρακτηριστική κοιλότητα είναι ορατή στο κέντρο της αποικίας. Η σπορά πτυέλων ή πύου σε θρεπτικά μέσα δεν συνιστάται, καθώς η παρουσία σαπροφυτικής μικροχλωρίδας αναστέλλει την ανάπτυξη του S.pneumoniae. Είναι καλύτερα να εισάγετε το υλικό δοκιμής στην κοιλιακή κοιλότητα των λευκών ποντικών. Η βιοδοκιμασία είναι μια γρήγορη, αξιόπιστη και ακριβής μέθοδος για την απομόνωση μιας καθαρής πνευμονιοκοκκικής καλλιέργειας. Τα λευκά ποντίκια είναι πολύ ευαίσθητα σε αυτά τα βακτήρια και μέσα σε 10-12 ώρες μετά τη μόλυνση, οι πνευμονιόκοκκοι διεισδύουν στο αίμα και στα παρεγχυματικά όργανα, προκαλώντας σήψη. Η καλλιέργεια αίματος από την καρδιά ή κομμάτια εσωτερικών οργάνων κατά τη διάρκεια της αυτοψίας των ζώων σας επιτρέπει να απομονώσετε μια καθαρή καλλιέργεια του παθογόνου. Για τον εντοπισμό των πνευμονιόκοκκων, χρησιμοποιούνται οι ιδιότητές τους. Σε αντίθεση με άλλους τύπους στρεπτόκοκκων, ο S.pneumoniae δεν αναπτύσσεται σε μέσο με οπτοχίνη, η ινουλίνη ζυμώνεται και είναι πολύ ευαίσθητη στη δράση της χολής (δοκιμή δεοξυχολικού). Η ταχεία λύση των πνευμονιόκοκκων υπό τη δράση της χολής μπορεί να ανιχνευθεί εάν προστεθούν 0,5 ml χολής σε 1 ml καλλιέργειας ζωμού. Μετά από 15-20 λεπτά παραμονής στον θερμοστάτη, λαμβάνει χώρα πλήρης λύση των βακτηριακών κυττάρων. Για τον προσδιορισμό των οροειδών πνευμονιόκοκκων (τώρα υπάρχουν 85 από αυτούς), χρησιμοποιείται μια αντίδραση συγκόλλησης σε γυαλί με τυπικούς ορούς ή το φαινόμενο της «διόγκωσης κάψουλας». Παρουσία ομόλογου ορού, η πνευμονιοκοκκική κάψουλα διογκώνεται έντονα. Ακόμη καλύτερα, ο ορότυπος γίνεται με εμπορικά αντιδραστήρια συγκόλλησης λατέξ ή πήξης που εμφανίζουν καψικά αντιγόνα. Μεταξύ των στρεπτόκοκκων σημαντικό είναι και το γένος Enterococcus, τα πιο σημαντικά είδη του οποίου είναι τα E.faecalis, E.faecium και E.durans. Είναι αρκετά διαδεδομένα στη φύση. Η κύρια οικολογική τους θέση είναι τα έντερα των ανθρώπων και των ζώων, αλλά βρίσκονται επίσης στη φυσιολογική μικροχλωρίδα του δέρματος του περίνεου, των ουρογεννητικών οργάνων, του στοματοφάρυγγα και του ρινοφάρυγγα. Μπορούν να προκαλέσουν διαπύηση τραυμάτων, βακτηριαιμία, βλάβες στο ουρογεννητικό σύστημα, ιδιαίτερα σε ασθενείς με μακροχρόνια λειτουργία καθετήρες, τροφική δηλητηρίαση, εντερική δυσβακτηρίωση, σπανιότερα ενδοκαρδίτιδα. Σε επιχρίσματα από το υλικό δοκιμής, οι εντερόκοκκοι διατάσσονται σε ζεύγη, κοντές αλυσίδες ή με τη μορφή συστάδων, θετικών κατά Gram. Η βακτηριολογική διάγνωση των εντεροκοκκικών λοιμώξεων πραγματοποιείται χωρίς δυσκολίες, καθώς αυτά τα βακτήρια αναπτύσσονται καλά σε απλά μέσα. Το άγαρ dif-3 είναι εκλεκτικό για αυτά (έως 600 ml 3% MPA προσθέτουν 400 ml χολής 40%). Μετά από 24 ώρες επώασης, οι αποικίες που έχουν αναπτυχθεί έχουν μέγεθος 0,4-1,0 mm γκριζωπό χρώμα. Στο άγαρ αίματος, λαμβάνει χώρα ατελής ή πλήρης αιμόλυση γύρω από τις αποικίες. Σε αντίθεση με τους παθογόνους στρεπτόκοκκους, οι εντερόκοκκοι μπορούν να αναπτυχθούν σε MPA με 6,5% NaCl, μειώνοντας το γάλα με μπλε του μεθυλενίου στους 37°C μετά από 4-6 ώρες. Η αναγνώριση των απομονωμένων καλλιεργειών πραγματοποιείται σύμφωνα με μορφολογικά, πολιτιστικά και βιοχημικά χαρακτηριστικά.

Σελίδα 40 από 91

Ο αιτιολογικός παράγοντας της λοβιακής πνευμονίας (πνευμονία) είναι ο πνευμονιόκοκκος - Diplococcus pneumoniae, που ανακαλύφθηκε για πρώτη φορά από τον Παστέρ στο σάλιο ενός άνδρα που πέθανε από λύσσα (1881).
Μορφολογία και χρωστικές ιδιότητες. Οι πνευμονιόκοκκοι (Εικ. 67 και 68 στο ένθετο) είναι ζευγαρωμένοι κόκκοι που έχουν επίμηκες σχήμα σαν νυστέρι. Ως εκ τούτου, ονομάζονται αλλιώς λογχοειδή διπλόκοκκοι. Σχηματίζοντας κοντές αλυσίδες, οι πνευμονιόκοκκοι γίνονται παρόμοιοι με τους στρεπτόκοκκους, και επομένως II. Ο F. Gamaleya τους ονόμασε Streptococcus lanceolatus. Το μέγεθος της κυψέλης κυμαίνεται από 0,5Χ0,75 έως 1Χ1,5 μικρά. Δεν έχουν σπόρια ή μαστίγια. Ένα χαρακτηριστικό γνώρισμα του πνευμονιόκοκκου είναι ο σχηματισμός μιας κάψουλας, η οποία εκφράζεται καλά σε παθολογικά υλικά (πτύελα, αίμα κ.λπ.). Όταν καλλιεργείται σε θρεπτικά μέσα, η κάψουλα χάνεται. Οι πνευμονιόκοκκοι αντιλαμβάνονται εύκολα τις βαφές ανιλίνης και βάφονται θετικά σύμφωνα με το Gram.
Πολιτιστικές και βιοχημικές ιδιότητες.

Ρύζι. 68. Πνευμονιόκοκκοι σε επίχρισμα πτυέλων.

Οι πνευμονιόκοκκοι είναι αερόβιοι και προαιρετικοί αναερόβιοι. Η βέλτιστη θερμοκρασία είναι περίπου 37°. Αναπτύσσεται σε μέσα που περιέχουν ζωική πρωτεΐνη (άγαρ αίματος ή ορού, ασκιτάγαρ).
Στην επιφάνεια του άγαρ, μετά από 24 ώρες, σχηματίζονται μικρές αποικίες, που μοιάζουν με στρεπτόκοκκο, αλλά μικρότερες και πιο διαφανείς.
Σε λοξό άγαρ, με άφθονο ενοφθαλμισμό, λαμβάνεται μια πολύ λεπτή διαφανής επικάλυψη, αποτελούμενη από τις μικρότερες, μη συγχωνευόμενες αποικίες, σε ζωμό - μια ελαφρά θολότητα και ένα μικρό νιφάδες ίζημα.
Τα πρόσφατα απομονωμένα στελέχη δεν αναπτύσσονται στη ζελατίνη. Παλιά εργαστηριακά στελέχη πνευμονιόκοκκων μπορούν να παράγουν μικρές υπόλευκες αποικίες ήδη στους 18-22°C. Η ζελατίνη δεν υγροποιείται.
Αναπτύσσονται καλά στο γάλα, πηγάζοντας το με το σχηματισμό οξέος.
Στο άγαρ αίματος, μια ζώνη ατελούς αιμόλυσης με πρασινο-καφέ χρώση του μέσου σχηματίζεται γύρω από τις αποικίες.

Ρύζι. 67. Πνευμονιόκοκκοι σε καθαρή καλλιέργεια από ζωμό.

Οι πνευμονιόκοκκοι αποσυνθέτουν σακχαρόζη, ραφινόζη και λακτόζη. Το πιο σημαντικό χαρακτηριστικό είναι η αποσύνθεση της ινουλίνης. Οι περισσότεροι στρεπτόκοκκοι δεν έχουν αυτή την ιδιότητα. Οι λοιμώδεις πνευμονιόκοκκοι είναι διαλυτοί στη χολή.
Αντιγονική δομή και ορολογικοί τύποι πνευμονιόκοκκων. Το κυτταρόπλασμα του πνευμονιόκοκκου περιέχει ένα πρωτεϊνικό αντιγόνο κοινό σε όλους τους πνευμονιόκοκκους. Αυτό το αντιγόνο καθορίζει την ειδικότητα του είδους τους. Η κάψουλα περιέχει ειδικά πολυσακχαριδικά αντιγόνα (hapten), τα οποία διαφέρουν ως προς τη χημική τους σύνθεση σε διαφορετικούς πνευμονιόκοκκους (τυπικά αντιγόνα). Με βάση αυτά τα τυπικά αντιγόνα, όλοι οι πνευμονιόκοκκοι χωρίζονται σε τρεις κύριες ομάδες (I, II, III) και σε μια τέταρτη συνδυασμένη ομάδα (Χ-ομάδα) χρησιμοποιώντας την αντίδραση συγκόλλησης και καθίζησης. Το X-group περιλαμβάνει περισσότερους από 70 τύπους.
αντίσταση. Σε τεχνητά θρεπτικά μέσα, οι πνευμονιόκοκκοι πεθαίνουν γρήγορα (4-7 ημέρες). Κάτω από ένα στρώμα ελαίου βαζελίνης σε υγρό και ημί-υγρό μέσο που περιέχει πρωτεΐνη, παραμένουν βιώσιμα για 3-12 μήνες.
Οι πνευμονιόκοκκοι ανέχονται καλά το στέγνωμα: σε ξηρά πτύελα σε διάχυτο φως, επιμένουν έως και 2 μήνες. Όταν θερμαίνονται στους 52-55 °, πεθαίνουν σε 10 λεπτά, στους 60 ° - ακόμα πιο γρήγορα. Σε διάλυμα καρβολικού οξέος (3%), οι πνευμονιόκοκκοι πεθαίνουν σε 1-2 λεπτά.
Οι πνευμονιόκοκκοι είναι ιδιαίτερα ευαίσθητοι στην οπτοχίνη. Υπό την επίδραση του τελευταίου, πεθαίνουν σε συγκέντρωση 1: 1.000.000.
Σχηματισμός τοξινών και παθογένεια για τα ζώα. Το δηλητήριο του πνευμονιόκοκκου είναι μια ενδοτοξίνη. Από τα πειραματόζωα, τα λευκά ποντίκια και τα κουνέλια είναι πιο ευαίσθητα στον πνευμονιόκοκκο. Η παρεντερική χορήγηση λοιμογόνου πνευμονιόκοκκου μετά από 24-48 ώρες προκαλεί το θάνατο των ζώων με σήψη. Στην αυτοψία στο σημείο της ένεσης, ανιχνεύεται ινώδες εξίδρωμα, ο σπλήνας είναι διευρυμένος και υπεραιμικός.
Παθογένεση και ασθένειες στον άνθρωπο. Η πύλη εισόδου της μόλυνσης είναι συνήθως η βλεννογόνος μεμβράνη του φάρυγγα. Η εισαγωγή πνευμονιόκοκκων στο σώμα και η διείσδυσή τους στον ιστό του πνεύμονα μπορεί, προφανώς, να συμβεί τόσο μέσω του λεμφικού και του κυκλοφορικού συστήματος όσο και απευθείας μέσω της διακλάδωσης των βρόγχων. Η πιο συχνή πάθηση είναι η κρουπώδης πνευμονία, η οποία χαρακτηρίζεται από ξαφνική έναρξη, υψηλό πυρετό, μερικές φορές με ρίγη, πόνο στο πλάι κατά την αναπνοή, πονοκέφαλο, μερικές φορές απώλεια συνείδησης, παραλήρημα, έντονη διέγερση. Στο μέλλον, υπάρχει βήχας με χαρακτηριστικά σκουριασμένα-κόκκινα πτύελα. Στους πνεύμονες, υπάρχει μια διαδικασία που συλλαμβάνει πιο συχνά έναν, λιγότερο συχνά - δύο ή τρεις λοβούς.
Πηγές μόλυνσης είναι ένα άρρωστο άτομο και ένας βακτηριοφορέας. Η μόλυνση από το εξωτερικό συμβαίνει τόσο αερογενώς - με σταγονίδια από τον φορέα, όσο και μέσω μόλυνσης από σκόνη. Οι πνευμονιόκοκκοι μπορούν να επιμείνουν στα αποξηραμένα πτύελα για μεγάλο χρονικό διάστημα (περίπου 2 μήνες) και να εισέλθουν στον αέρα με σκόνη.
Κατά την εξέταση υγιών ατόμων, συχνά εντοπίζονται παθογόνοι πνευμονιόκοκκοι στο ρινοφάρυγγα, επομένως δεν αποκλείεται η πιθανότητα αυτομόλυνσης και σημαντικό ρόλο παίζουν παράγοντες που αποδυναμώνουν την αντίσταση του οργανισμού, όπως η υποθερμία.
Εκτός από τη κρουπώδη πνευμονία, οι πνευμονιόκοκκοι προκαλούν φλεγμονή του μέσου ωτός, των μηνιγγίων (μηνιγγίτιδα), καθώς και του βλεννογόνου της μύτης και των κόλπων, πονόλαιμο, έρπον έλκος του κερατοειδούς και φλεγμονή του δακρυϊκού σάκου.
Ασυλία, ανοσία. Η μεταφερόμενη πνευμονία δεν προσδίδει ανοσία. Η ασθένεια μπορεί να υποτροπιάσει περισσότερες από μία φορές. Αυτό οφείλεται στην παρουσία πολλών τύπων πνευμονόκοκκων και στο γεγονός ότι η πνευμονία στο παρελθόν αυξάνει την ευαισθησία του οργανισμού στους πνευμονιόκοκκους.
Ο ορός των αναρρωμένων ασθενών περιέχει αντισώματα (συγκολλητίνες κ.λπ.).
Μέχρι τη στιγμή της κρίσης στην πνευμονία, η συγκέντρωση των αντισωμάτων στο αίμα φτάνει σε σημαντικό τίτλο και η φαγοκυττάρωση αυξάνεται δραματικά (I. Ya. Chistovich). Με βάση αυτά τα δεδομένα, η ανοσία στην πνευμονία θα πρέπει να θεωρείται κυρίως ως φαγοκυτταρική, στην οποία τα αντισώματα (βακτηριοτροπίνες) παίζουν σημαντικό ρόλο.
Μικροβιολογική διάγνωση. Υλικά για έρευνα στις πνευμονιοκοκκικές παθήσεις είναι τα πτύελα, το αίμα και το πύον που λαμβάνονται από διάφορες βλάβες, σπανιότερα εγκεφαλονωτιαίο υγρό.
Το παθολογικό υλικό (εκτός του αίματος) εξετάζεται βακτηριοσκοπικά, βακτηριολογικά και με μόλυνση λευκών ποντικών. Πρέπει να καταφύγουμε στην τελευταία μέθοδο επειδή το αρχικό υλικό, ειδικά τα πτύελα, περιέχει συνήθως άφθονη ξένη μικροχλωρίδα, η οποία, όταν το υλικό σπέρνεται απευθείας σε θρεπτικά μέσα, καθιστά δύσκολη την απομόνωση του πνευμονιόκοκκου.
Τα επιχρίσματα από πτύελα, πύον κ.λπ. είναι βαμμένα με Gram. Στο μικροσκόπιο εντοπίζονται λογχοειδή διπλόκοκκοι, βαμμένοι με Gram θετικά που περιβάλλονται από κάψουλα.
Οι καλλιέργειες απομονώνονται σε άγαρ αίματος ή άγαρ ασκίγκ. Μετά από 24-48 ώρες ανάπτυξης στους 37°, εμφανίζονται χαρακτηριστικές αποικίες εάν υπάρχει πνευμονιόκοκκος. Οι αποικίες απλώνονται σε κεκλιμένο ορό ή άγαρ ασκίτη και η απομονωμένη καλλιέργεια ελέγχεται για διαλυτότητα στη χολή και για ικανότητα αποικοδόμησης της ινουλίνης.
Η μόλυνση ενός λευκού ποντικιού είναι ο πιο σίγουρος τρόπος για να απομονωθεί μια καλλιέργεια πνευμονιόκοκκου. Υλικό από ασθενή ή πτώμα (πτύελα, πύον, κομμάτι οργάνου κ.λπ.) τοποθετείται σε αποστειρωμένο κύπελλο, στη συνέχεια αλέθεται σε αποστειρωμένο γουδί, με 1-2 ml αποστειρωμένου ζωμού και 0,5 ml αυτού του εναιωρήματος ενίεται ενδοπεριτοναϊκά σε λευκό ποντίκι. Μετά τον θάνατο του ποντικιού, ο οποίος επέρχεται εντός 12-48 ωρών, λαμβάνονται αιμοκαλλιέργειες από την καρδιά και σχεδόν σε όλες τις περιπτώσεις λαμβάνεται καθαρή καλλιέργεια πνευμονιόκοκκου.
Εάν υπάρχει υποψία σήψης, 10-20 ml αίματος εμβολιάζονται σε ζωμό ασκιτικού ή ορού. Μετά τον εμπλουτισμό από τον ζωμό, γίνονται εμβολιασμοί σε αιμοσφαιρίνη και η απομονωμένη καθαρή καλλιέργεια αναγνωρίζεται από μορφολογικά και βιοχημικά χαρακτηριστικά.
ειδική θεραπεία και χημειοθεραπεία. Επί του παρόντος, τα σκευάσματα σουλφανιλαμίδης και τα αντιβιοτικά (πενικιλλίνη, βιομυκίνη, τετρακυκλίνη κ.λπ.) χρησιμοποιούνται με μεγάλη επιτυχία για τη θεραπεία της λοβιακής πνευμονίας.

Το γένος Streptococcus περιλαμβάνει: Streptococcus pyogenes (αιμολυτικό) και Streptococcus pneumoniae (πνευμονιόκοκκος). Οι στρεπτόκοκκοι ανακαλύφθηκαν για πρώτη φορά από τους Billroth (1874), L. Pasteur (1879). Μελετήθηκαν από τον E. Rosenbach (1884).

Streptococcus pyogenes (αιμολυτικό)

Μορφολογία. Οι στρεπτόκοκκοι είναι κόκκοι που έχουν σφαιρικό σχήμα. Η διάμετρος κάθε κόκκου είναι κατά μέσο όρο 0,6-1 μm, ωστόσο, χαρακτηρίζονται από πολυμορφισμό: υπάρχουν μικροί και μεγάλοι κόκκοι, αυστηρά σφαιρικοί και οβάλ. Οι στρεπτόκοκκοι είναι διατεταγμένοι σε μια αλυσίδα, η οποία είναι το αποτέλεσμα της διαίρεσης τους στο ίδιο επίπεδο. Τα μήκη της αλυσίδας ποικίλλουν. Σε ένα πυκνό θρεπτικό υλικό, οι αλυσίδες είναι συνήθως μικρές, ενώ σε υγρές είναι μακριές. Οι στρεπτόκοκκοι είναι ακίνητοι, δεν έχουν σπόρια (βλ. Εικ. 4) Οι πρόσφατα απομονωμένες καλλιέργειες σχηματίζουν μερικές φορές μια κάψουλα. Σε εξαιρετικά λεπτά τμήματα, είναι ορατή μια μικροκάψουλα, κάτω από αυτήν υπάρχει ένα κυτταρικό τοίχωμα τριών στρωμάτων και μια κυτταροπλασματική μεμβράνη τριών στρωμάτων. Gram-θετικό.

καλλιέργεια. Οι στρεπτόκοκκοι είναι προαιρετικά αναερόβια. Αναπτύσσεται σε θερμοκρασία 37 ° C και pH 7,6-7,8. Τα βέλτιστα μέσα για την καλλιέργειά τους είναι μέσα που περιέχουν αίμα ή ορό αίματος. Σε πυκνά θρεπτικά μέσα, οι στρεπτοκοκκικές αποικίες είναι μικρές, επίπεδες, θολό, γκριζωπό χρώμα. Στο άγαρ αίματος, ορισμένες ποικιλίες στρεπτόκοκκων σχηματίζουν αιμόλυση. Οι β-αιμολυτικοί στρεπτόκοκκοι σχηματίζουν μια καθαρή ζώνη αιμόλυσης, οι α-αιμολυτικοί στρεπτόκοκκοι σχηματίζουν μια μικρή πρασινωπή ζώνη (το αποτέλεσμα της μετάβασης της αιμοσφαιρίνης στη μεθαιμοσφαιρίνη). Υπάρχουν στρεπτόκοκκοι που δεν δίνουν αιμόλυση.

Στον ζωμό ζάχαρης, οι στρεπτόκοκκοι αναπτύσσονται με το σχηματισμό βρεγματικού και σχεδόν βυθού λεπτόκοκκου ιζήματος, ενώ ο ζωμός παραμένει διαφανής.

Ενζυματικές ιδιότητες. Οι στρεπτόκοκκοι έχουν σακχαρολυτικές ιδιότητες. Διασπούν τη γλυκόζη, τη λακτόζη, τη σακχαρόζη, τη μαννιτόλη (όχι πάντα) και τη μαλτόζη για να σχηματίσουν οξύ. Οι πρωτεολυτικές τους ιδιότητες εκφράζονται ελάχιστα. Πήζουν το γάλα, η ζελατίνη δεν υγροποιείται.

σχηματισμός τοξινών. Οι στρεπτόκοκκοι σχηματίζουν έναν αριθμό εξωτοξινών: 1) στρεπτολυσίνες - καταστρέφουν τα ερυθρά αιμοσφαίρια (Η Ο-στρεπτολυσίνη έχει καρδιοτοξική δράση). 2) λευκοσιδίνη - καταστρέφει τα λευκοκύτταρα (που σχηματίζονται από στελέχη με υψηλή μολυσματικότητα). 3) ερυθρογενής (οστρακιά) τοξίνη - προκαλεί την κλινική εικόνα της οστρακιάς - δηλητηρίαση, αγγειακές αντιδράσεις, εξάνθημα κ.λπ. Η σύνθεση της ερυθρογενούς τοξίνης προσδιορίζεται από τον προφάγο. 4) κυτταροτοξίνες - έχουν την ικανότητα να προκαλούν σπειραματονεφρίτιδα.

Οι στρεπτόκοκκοι έχουν διάφορα αντιγόνα. Το κυτταρόπλασμα του κυττάρου περιέχει ένα αντιγόνο συγκεκριμένης νουκλεοπρωτεϊνικής φύσης - το ίδιο για όλους τους στρεπτόκοκκους. Τα αντιγόνα τύπου πρωτεΐνης βρίσκονται στην επιφάνεια του κυτταρικού τοιχώματος. Στο κυτταρικό τοίχωμα των στρεπτόκοκκων βρέθηκε αντιγόνο ομάδας πολυσακχαρίτη.

Σύμφωνα με τη σύσταση του κλάσματος αντιγόνου ειδικού για την ομάδα πολυσακχαριτών, όλοι οι στρεπτόκοκκοι χωρίζονται σε ομάδες, που υποδηλώνονται με κεφαλαία λατινικά γράμματα A, B, C, D κ.λπ. έως και S. Εκτός από τις ομάδες, οι στρεπτόκοκκοι χωρίζονται σε ορολογικούς τύπους , τα οποία υποδεικνύονται με αραβικούς αριθμούς.

Η ομάδα Α περιλαμβάνει 70 τύπους. Αυτή η ομάδα περιλαμβάνει τους περισσότερους στρεπτόκοκκους που προκαλούν διάφορες ασθένειες στον άνθρωπο. Η ομάδα Β περιλαμβάνει κυρίως ευκαιριακούς ανθρώπινους στρεπτόκοκκους. Η ομάδα Γ περιλαμβάνει στρεπτόκοκκους παθογόνους για τον άνθρωπο και τα ζώα. Η ομάδα Δ αποτελείται από στρεπτόκοκκους που δεν είναι παθογόνοι για τον άνθρωπο, αλλά αυτή η ομάδα περιλαμβάνει εντερόκοκκους, που είναι κάτοικοι του εντερικού σωλήνα του ανθρώπου και των ζώων. Μπαίνοντας σε άλλα όργανα, προκαλούν φλεγμονώδεις διεργασίες: χολοκυστίτιδα, πυελίτιδα κ.λπ. Έτσι, μπορούν να αποδοθούν σε υπό όρους παθογόνα μικρόβια.

Η αναγωγή των απομονωμένων καλλιεργειών σε μία από τις ορολογικές ομάδες προσδιορίζεται χρησιμοποιώντας μια αντίδραση καταβύθισης με ορούς ομάδας. Για τον προσδιορισμό των ορολογικών τύπων, χρησιμοποιείται μια αντίδραση συγκόλλησης με τυποειδικούς ορούς.

Οι στρεπτόκοκκοι είναι αρκετά σταθεροί στο περιβάλλον. Σε θερμοκρασία 60 ° C, πεθαίνουν μετά από 30 λεπτά.

Σε ξεραμένο πύον και πτύελα επιμένουν για μήνες. Οι συνήθεις συγκεντρώσεις απολυμαντικών τα καταστρέφουν σε 15-20 λεπτά. Οι εντερόκοκκοι είναι πολύ πιο ανθεκτικοί, τα απολυμαντικά διαλύματα τους σκοτώνουν μόνο μετά από 50-60 λεπτά.

Ευαισθησία των ζώων. Τα βοοειδή, τα άλογα, οι σκύλοι και τα πουλιά είναι ευαίσθητα σε παθογόνους στρεπτόκοκκους. Από πειραματόζωα τα κουνέλια και τα λευκά ποντίκια είναι ευαίσθητα. Ωστόσο, οι παθογόνοι για τον άνθρωπο στρεπτόκοκκοι δεν είναι πάντα παθογόνοι για πειραματόζωα.

Πηγές μόλυνσης. Άνθρωποι (άρρωστοι και φορείς), λιγότερο συχνά ζώα ή μολυσμένα προϊόντα.

Διαδρομές μετάδοσης. Είναι δυνατή η αερομεταφερόμενη και αερομεταφερόμενη σκόνη, μερικές φορές τρόφιμα, επαφή-νοικοκυριό.

Οι ασθένειες μπορεί να εμφανιστούν ως αποτέλεσμα εξωγενούς μόλυνσης, καθώς και ενδογενώς - με την ενεργοποίηση ευκαιριακών στρεπτόκοκκων που ζουν στους βλεννογόνους του φάρυγγα, του ρινοφάρυγγα και του κόλπου. Η μείωση της αντίστασης του οργανισμού (ψύξη, ασιτία, υπερκόπωση κ.λπ.) μπορεί να οδηγήσει σε αυτολοιμώξεις.

Μεγάλη σημασία στην παθογένεση των στρεπτοκοκκικών λοιμώξεων είναι η προκαταρκτική ευαισθητοποίηση - ως αποτέλεσμα μιας προηγουμένως μεταφερθείσας ασθένειας στρεπτοκοκκικής αιτιολογίας.

Όταν διεισδύουν στην κυκλοφορία του αίματος, οι στρεπτόκοκκοι προκαλούν μια σοβαρή σηπτική διαδικασία.

Ασθένειες στον άνθρωποΣυχνότερα προκαλούν β-αιμολυτικούς στρεπτόκοκκους της ορολογικής ομάδας Α. Παράγουν ένζυμα παθογένειας: υαλουρονιδάση, ινωδολυσίνη (στρεπτοκινάση), δεοξυριβονουκλεάση κ.λπ. Επιπλέον, μια κάψουλα, η πρωτεΐνη Μ, που έχει αντιφαγοκυτταρικές ιδιότητες, βρίσκεται στους στρεπτόκοκκους.

Οι στρεπτόκοκκοι προκαλούν διάφορες οξείες και χρόνιες λοιμώξεις στον άνθρωπο, τόσο με σχηματισμό πύου όσο και μη πυώδεις, που διαφέρουν ως προς την κλινική εικόνα και την παθογένεια. Πυώδεις - φλέγματα, αποστήματα, λοιμώξεις τραυμάτων, μη πυώδεις - οξείες λοιμώξεις του ανώτερου αναπνευστικού, ερυσίπελας, οστρακιά, ρευματισμοί κ.λπ.

Οι στρεπτόκοκκοι συχνά προκαλούν δευτερογενείς λοιμώξεις στη γρίπη, την ιλαρά, τον κοκκύτη και άλλες ασθένειες και συχνά περιπλέκουν τις μολύνσεις του τραύματος.

Ασυλία, ανοσία. Από τη φύση της, η ανοσία είναι αντιτοξική και αντιβακτηριδιακή. Η μεταμολυσματική αντιμικροβιακή ανοσία είναι ασθενής. Αυτό οφείλεται στην ασθενή ανοσογονικότητα των στρεπτόκοκκων και σε μεγάλο αριθμό οροειδών που δεν δίνουν διασταυρούμενη ανοσία. Επιπλέον, με στρεπτοκοκκικές ασθένειες, παρατηρείται αλλεργία του σώματος, γεγονός που εξηγεί την τάση για υποτροπή.

Πρόληψη. Ανήκει σε μέτρα υγιεινής και υγιεινής, ενισχύοντας τη συνολική αντίσταση του σώματος. Δεν έχει αναπτυχθεί ειδική προφύλαξη.

Θεραπευτική αγωγή. Εφαρμόστε αντιβιοτικά. Συχνότερα, χρησιμοποιείται πενικιλλίνη, στην οποία οι στρεπτόκοκκοι δεν έχουν αποκτήσει αντίσταση, καθώς και ερυθρομυκίνη και τετρακυκλίνη.

Η αξία του στρεπτόκοκκου στην αιτιολογία της ρευματικής καρδιοπάθειας. Η παθογένεια της ρευματικής καρδιοπάθειας δεν είναι καλά κατανοητή. Αλλά μια σειρά από γεγονότα μιλούν υπέρ του ρόλου του στρεπτόκοκκου στην ανάπτυξη αυτής της ασθένειας:

1. Σε ασθενείς με ρευματική καρδιοπάθεια, ο Β-αιμολυτικός στρεπτόκοκκος σπέρνεται από τον φάρυγγα.

2. Οι ρευματισμοί εμφανίζονται συχνά μετά από πονόλαιμο, αμυγδαλίτιδα, φαρυγγίτιδα, ευαισθητοποιώντας τον οργανισμό.

3. Αντιστρεπτολυσίνη, αντιστρεπτοϋαλουρονιδάση - στον ορό του αίματος των ασθενών βρίσκονται αντισώματα στα στρεπτοκοκκικά ένζυμα, τοξίνες.

4. Έμμεση επιβεβαίωση του ρόλου του στρεπτόκοκκου είναι η επιτυχημένη θεραπεία με πενικιλίνη.

Πρόσφατα, οι L-μορφές του στρεπτόκοκκου έχουν δοθεί σημασία στην εμφάνιση χρόνιων μορφών ρευματικής καρδιοπάθειας.

Η πρόληψη των παροξύνσεων της ρευματικής καρδιοπάθειας περιορίζεται στην πρόληψη των στρεπτοκοκκικών ασθενειών (για παράδειγμα, την άνοιξη και το φθινόπωρο, πραγματοποιείται μια προφυλακτική πορεία χορήγησης πενικιλίνης). Η θεραπεία μειώνεται στη χρήση αντιβακτηριακών φαρμάκων - πενικιλίνης.

Η αξία του στρεπτόκοκκου στην αιτιολογία της οστρακιάς. Ο G. N. Gabrichevsky (1902) ήταν ο πρώτος που πρότεινε ότι ο αιμολυτικός στρεπτόκοκκος είναι ο αιτιολογικός παράγοντας της οστρακιάς. Όμως, δεδομένου ότι οι στρεπτόκοκκοι που απομονώθηκαν σε άλλες ασθένειες δεν διέφεραν από τους αιτιολογικούς παράγοντες της οστρακιάς, αυτή η γνώμη δεν ήταν κοινή από όλους. Είναι πλέον αποδεδειγμένο ότι η οστρακιά προκαλείται από στρεπτόκοκκους της ομάδας Α που παράγουν ερυθρογενή τοξίνη.

Σε όσους έχουν αρρωστήσει, εμφανίζεται ανοσία - επίμονη, αντιτοξική. Η τάση του προσδιορίζεται με τη ρύθμιση της αντίδρασης Dick - ενδοδερμική έγχυση ερυθρογενούς τοξίνης. Σε όσους δεν είναι άρρωστοι γύρω από το σημείο της ένεσης, εμφανίζεται υπεραιμία και οίδημα, το οποίο χαρακτηρίζεται ως θετική αντίδραση (έλλειψη αντιτοξίνης στον ορό του αίματος). Σε όσους έχουν νοσήσει, μια τέτοια αντίδραση απουσιάζει, αφού η αντιτοξίνη που σχηματίζεται σε αυτά εξουδετερώνει την ερυθρογενή τοξίνη.

Πρόληψη. Απομόνωση, νοσηλεία. Τα παιδιά επαφής, εξασθενημένα, λαμβάνουν γ-σφαιρίνη. Δεν έχει αναπτυχθεί ειδική προφύλαξη.

Θεραπευτική αγωγή. Χρησιμοποιήστε πενικιλίνη, τετρακυκλίνη. Σε σοβαρές περιπτώσεις, χορηγείται αντιτοξικός ορός.

Σκοπός της μελέτης: ανίχνευση στρεπτόκοκκου και προσδιορισμός του οροειδούς του.

Ερευνητικό υλικό

1. Βλέννη από το λαιμό (αμυγδαλίτιδα, οστρακιά).

2. Απόξεση από την πληγείσα περιοχή του δέρματος (ερυσίπελας, στρεπτόδερμα).

3. Πύον (απόστημα).

4. Ούρα (νεφρίτιδα).

5. Αίμα (ύποπτη σήψη, ενδοκαρδίτιδα).

Βασικές μέθοδοι έρευνας

1. Βακτηριολογικό.

2. Μικροσκοπικό.

Ερευνητική πρόοδος

Δεύτερη ημέρα έρευνας

Βγάλτε τα κύπελλα από τον θερμοστάτη και επιθεωρήστε. Παρουσία ύποπτων αποικιών, γίνονται επιχρίσματα από ένα μέρος τους, χρωματισμένα κατά Gram και μικροσκοπικά. Εάν βρεθούν στρεπτόκοκκοι στο επίχρισμα, μέρος της υπόλοιπης αποικίας υποκαλλιεργείται σε δοκιμαστικούς σωλήνες σε άγαρ με ορό για να απομονωθεί μια καθαρή καλλιέργεια και σε ζωμό με αίμα σε δοκιμαστικούς σωλήνες. Μέχρι το τέλος της ημέρας, μια καλλιέργεια 5-6 ωρών από ζωμό ή άγαρ υποκαλλιεργείται σε ζωμό Marten με 0,25% γλυκόζη για να προσδιοριστεί η ορολογική ομάδα στην αντίδραση κατακρήμνισης Lensfield. Οι δοκιμαστικοί σωλήνες και τα φιαλίδια τοποθετούνται σε θερμοστάτη και αφήνονται μέχρι την επόμενη μέρα.

Τρίτη ημέρα έρευνας

Οι καλλιέργειες αφαιρούνται από τον φούρνο, ελέγχεται η καθαρότητα της καλλιέργειας στην κλίση του άγαρ, γίνονται επιχρίσματα, χρωματίζονται με Gram και μικροσκοπούνται. Με την παρουσία καθαρής καλλιέργειας στρεπτόκοκκου, σπέρνονται σε μέσα Hiss (λακτόζη, γλυκόζη, μαλτόζη, σακχαρόζη και μαννιτόλη), γάλα, ζελατίνη, 40% χολή και τοποθετούνται σε θερμοστάτη.

Κοιτάξτε τον ζωμό του Μάρτιν. Παρουσία ειδικής ανάπτυξης, πραγματοποιείται δοκιμή κατακρήμνισης Lensfield για τον προσδιορισμό της ορολογικής ομάδας.

Ρύθμιση της αντίδρασης καθίζησης σύμφωνα με το Lensfield. Η ημερήσια καλλιέργεια που αναπτύσσεται στον ζωμό Martin χύνεται σε πολλούς σωλήνες φυγοκέντρησης, φυγοκεντρούνται για 10-15 λεπτά (3000 rpm).

Το υπερκείμενο χύνεται σε βάζο με απολυμαντικό διάλυμα και το ίζημα χύνεται σε στείρο ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου και φυγοκεντρείται ξανά. Στο ίζημα που συλλέγεται από όλους τους σωλήνες φυγοκέντρησης, προσθέστε 0,4 ml υδροχλωρικού οξέος 0,2%. Στη συνέχεια ο σωλήνας τοποθετείται σε λουτρό νερού και βράζεται για 15 λεπτά, ανακινώντας περιστασιακά. Μετά τον βρασμό, το προκύπτον εναιώρημα φυγοκεντρείται και πάλι. Στη συνέχεια το αντιγόνο εκχυλίζεται στο υπερκείμενο, το οποίο χύνεται σε καθαρό σωλήνα και εξουδετερώνεται με διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου 0,2% σε ρΗ 7,0-7,2. Προστίθεται μπλε βρωμοθυμόλης (0,01 ml διαλύματος 0,04%) ως δείκτης. Με αυτή την αντίδραση, το χρώμα αλλάζει από αχυροκίτρινο σε μπλε.

Στη συνέχεια, 0,5 ml ορών αντιστρεπτοκοκκικής ομάδας, οι οποίοι παρασκευάζονται με ανοσοποίηση κουνελιών, χύνονται σε 5 σωλήνες καθίζησης (βλ. Κεφάλαιο 19). Ο ορός Α εισάγεται στον 1ο σωλήνα, ο ορός Β στον 2ο, ο ορός C στον 3ο, ο ορός D στον 4ο, ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου (έλεγχος) στον 5ο. Μετά από αυτό, με μια πιπέτα Pasteur, το προκύπτον εκχύλισμα (αντιγόνο) τοποθετείται προσεκτικά κατά μήκος του τοιχώματος σε όλους τους δοκιμαστικούς σωλήνες.

Με θετική αντίδραση σε δοκιμαστικό σωλήνα με ομόλογο ορό, σχηματίζεται ένας λεπτός γαλακτόλευκος δακτύλιος στο όριο του εκχυλίσματος με τον ορό (Εικ. 38).

Τέταρτη μέρα έρευνας

Τα αποτελέσματα καταγράφονται (Πίνακας 25).

Επί του παρόντος, προσδιορίζεται η δεοξυριβονουκλεάση, καθώς και η αντιστρεπτοϋαλουρονιδάση, η αντιστρεπτολυσίνη-Ο.

ερωτήσεις δοκιμής

1. Ποιες είναι οι βασικές μέθοδοι εργαστηριακής έρευνας για την ανίχνευση στρεπτόκοκκων γνωρίζετε;

2. Σε τι χρησιμεύει η αντίδραση καθίζησης Lensfield;

3. Γιατί το αντιγόνο πρέπει να είναι διαφανές κατά τη διάρκεια αυτής της αντίδρασης; Περιγράψτε την τεχνική για τη σταδιοποίηση αυτής της αντίδρασης.

Πάρτε αντιστρεπτόκοκκο ορό A, B, C, D και ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου από τον δάσκαλο. Ρυθμίστε την αντίδραση κατακρήμνισης, δείξτε τα αποτελέσματα στον δάσκαλο και σχεδιάστε.

Θρεπτικά μέσα

άγαρ με αίμα(βλ. κεφάλαιο 7).

Άγαρ ορού(βλ. κεφάλαιο 7).

Hiss media(στεγνός).

Ζελατίνη πεπτόνης κρέατος (MPG). Σε 100 ml MPB προσθέστε 10-15 g ψιλοκομμένη ζελατίνη. Η ζελατίνη πρέπει να διογκωθεί όταν θερμαίνεται αργά σε λουτρό νερού (σε θερμοκρασία 40-50 ° C). Ένα διάλυμα 10% ανθρακικού νατρίου (μαγειρική σόδα) προστίθεται στη λιωμένη ζελατίνη και το pH ρυθμίζεται στο 7,0. Στη συνέχεια διηθείται αμέσως μέσω πτυχωμένου φίλτρου. Το φιλτράρισμα είναι αργό. Για να επιταχυνθεί η διαδικασία, η διήθηση μπορεί να γίνει σε καυτό αυτόκλειστο. Το διηθημένο μέσο χύνεται σε δοκιμαστικούς σωλήνες των 6-8 ml και αποστειρώνεται. Η αποστείρωση πραγματοποιείται είτε κλασματικά σε θερμοκρασία 100 ° C για 3 συνεχόμενες ημέρες, είτε ταυτόχρονα στους 110 ° C για 20 λεπτά σε αυτόκλειστο. Η ψύξη του μέσου πραγματοποιείται σε δοκιμαστικούς σωλήνες τοποθετημένους κάθετα.

Παρασκευή γάλακτος. Το φρέσκο ​​γάλα φέρεται σε βρασμό, τοποθετείται σε δροσερό μέρος για μια μέρα, απαλλαγμένο από κρέμα, βράζεται ξανά. Αφήστε για μια μέρα και αφαιρέστε το πάνω στρώμα. Το αποβουτυρωμένο γάλα διηθείται μέσω ενός στρώματος βαμβακιού, στη συνέχεια αλκαλοποιείται με διάλυμα ανθρακικού νατρίου 10% σε pH 7,2 και χύνεται σε δοκιμαστικούς σωλήνες των 5-6 ml.

Bouillon Martin. Στο νερό του κρέατος προστίθεται ίση ποσότητα πεπτόνης Marten (κιμάς από στομάχια χοιρινού κρέατος που εκτίθενται σε υδροχλωρικό οξύ). Το προκύπτον μίγμα βράζεται για 10 λεπτά, αλκαλοποιείται με διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου 10% σε ρΗ 8,0, προστίθεται 0,5 οξικό νάτριο, βράζεται ξανά και χύνεται σε αποστειρωμένα πιάτα. Στον ζωμό Martin προστίθεται 0,25% γλυκόζη.

Τετάρτη Kitt - Tarozzi(βλ. κεφάλαιο 34).

Streptococcus pneumoniae (πνευμονιόκοκκος)

Οι πνευμονιόκοκκοι περιγράφηκαν για πρώτη φορά από τον R. Koch (1871).

Μορφολογία. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι διπλόκοκκοι στους οποίους οι πλευρές των κυττάρων που βρίσκονται αντικριστά είναι πεπλατυσμένες και οι απέναντι πλευρές είναι επιμήκεις, οπότε έχουν λογχοειδή σχήμα που μοιάζει με φλόγα κεριού (βλ. Εικ. 4). Το μέγεθος των πνευμονιόκοκκων είναι 0,75-0,5 × 0,5-1 μm, είναι διατεταγμένα σε ζεύγη. Σε υγρά θρεπτικά μέσα, συχνά σχηματίζουν μικρές αλυσίδες, που μοιάζουν με στρεπτόκοκκους. Οι πρεβμόκοκκοι είναι ακίνητοι, δεν έχουν σπόρια, σχηματίζουν μια κάψουλα στο σώμα που περιβάλλει και τους δύο κόκκους. Η κάψουλα περιέχει μια ανθεκτική στη θερμότητα ουσία αντιφαγίνη (η οποία προστατεύει τον πνευμονιόκοκκο από τη φαγοκυττάρωση και τη δράση των αντισωμάτων). Όταν αναπτύσσονται σε τεχνητά θρεπτικά μέσα, οι πνευμονιόκοκκοι χάνουν την κάψουλα τους. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι gram θετικοί. Τα Gram-αρνητικά βακτήρια βρίσκονται σε παλιές καλλιέργειες.

καλλιέργεια. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι προαιρετικά αναερόβια. Αναπτύσσεται σε θερμοκρασία 36-37 ° C και pH 7,2-7,4. Είναι απαιτητικά για τα μέσα, αφού δεν μπορούν να συνθέσουν πολλά αμινοξέα, επομένως αναπτύσσονται μόνο σε μέσα με την προσθήκη φυσικής πρωτεΐνης (αίματος ή ορού). Σε άγαρ με ορό σχηματίστε μικρές, ευαίσθητες, αρκετά διαφανείς αποικίες. Σε άγαρ με αίμα, αναπτύσσονται υγρές πρασινωπό-γκρι αποικίες, που περιβάλλονται από μια πράσινη ζώνη, η οποία είναι το αποτέλεσμα της μετατροπής της αιμοσφαιρίνης σε μεθαιμοσφαιρίνη. Οι πνευμονιόκοκκοι αναπτύσσονται καλά σε ζωμό με προσθήκη 0,2% γλυκόζης και σε ζωμό με ορό γάλακτος. Η ανάπτυξη σε υγρά μέσα χαρακτηρίζεται από διάχυτη θολότητα και σκονισμένο ίζημα στο κάτω μέρος.

Ενζυματικές ιδιότητες. Οι πνευμονιόκοκκοι έχουν μια αρκετά έντονη σακχαρολυτική δράση. Διασπώνται: λακτόζη, γλυκόζη, σακχαρόζη, μαλτόζη, ινουλίνη με το σχηματισμό οξέος. Μην ζυμώνετε μαννιτόλη. Οι πρωτεολυτικές τους ιδιότητες εκφράζονται ελάχιστα: πήζουν το γάλα, δεν υγροποιούν τη ζελατίνη και δεν σχηματίζουν ινδόλη. Οι πνευμονιόκοκκοι διαλύονται στη χολή. Η διάσπαση της ινουλίνης και η διάλυση στη χολή είναι ένα σημαντικό διαγνωστικό χαρακτηριστικό που διακρίνει τον Streptococcus pneumoniae από τον Streptococcus pyogenes.

παράγοντες παθογένειας. Οι πνευμονιόκοκκοι παράγουν υαλουρονιδάση, ινωδολυσίνη κ.λπ.

σχηματισμός τοξινών. Οι πνευμονιόκοκκοι παράγουν ενδοτοξίνη, αιμολυσίνη, λευκοσιδίνη. Η μολυσματικότητα του πνευμονιόκοκκου σχετίζεται επίσης με την παρουσία αντιφαγίνης στην κάψουλα.

Αντιγονική δομή και ταξινόμηση. Στο κυτταρόπλασμα των πνευμονιόκοκκων υπάρχει ένα πρωτεϊνικό αντιγόνο κοινό για ολόκληρη την ομάδα και στην κάψουλα υπάρχει ένα πολυσακχαριδικό αντιγόνο. Σύμφωνα με το πολυσακχαριδικό αντιγόνο, όλοι οι πνευμονιόκοκκοι χωρίζονται σε 84 ορούς. Οι οροί I, II, III είναι τα πιο κοινά παθογόνα για τον άνθρωπο.

Περιβαλλοντική αντίσταση. Οι πνευμονιόκοκκοι ανήκουν στην ομάδα των ασταθών μικροοργανισμών. Μια θερμοκρασία 60 ° C τα καταστρέφει σε 3-5 λεπτά. Είναι αρκετά ανθεκτικά στις χαμηλές θερμοκρασίες και στο στέγνωμα. Στα αποξηραμένα πτύελα παραμένουν βιώσιμα έως και 2 μήνες. Σε ένα θρεπτικό μέσο, ​​δεν παραμένουν περισσότερο από 5-6 ημέρες. Επομένως, κατά την καλλιέργεια, είναι απαραίτητο να γίνεται επανασπορά κάθε 2-3 ημέρες. Συμβατικά διαλύματα απολυμαντικών: 3% φαινόλη, εξάχνωση σε αραίωση 1:1000 τα καταστρέφουν σε λίγα λεπτά.

Οι πνευμονιόκοκκοι είναι ιδιαίτερα ευαίσθητοι στην οπτοχίνη, η οποία τους σκοτώνει σε αραίωση 1:100.000.

Ευαισθησία των ζώων. Οι άνθρωποι είναι ο φυσικός ξενιστής του πνευμονιόκοκκου. Ωστόσο, ο πνευμονιόκοκκος μπορεί να προκαλέσει ασθένεια σε μοσχάρια, αρνιά, χοιρίδια, σκύλους και πιθήκους. Από τα πειραματόζωα, τα λευκά ποντίκια είναι ιδιαίτερα ευαίσθητα στον πνευμονιόκοκκο.

Πηγές μόλυνσης. Ένας άρρωστος και ένας βακτηριοφορέας.

Διαδρομές μετάδοσης. Αερομεταφερόμενος, μπορεί να είναι αερομεταφερόμενος.

πύλη εισόδου. Η βλεννογόνος μεμβράνη της ανώτερης αναπνευστικής οδού, των ματιών και του αυτιού.

Ασθένειες στον άνθρωπο. Ο πνευμονιόκοκκος μπορεί να προκαλέσει πυώδεις-φλεγμονώδεις ασθένειες διαφορετικού εντοπισμού. Ειδικά για τον πνευμονιόκοκκο είναι:

1) λοβιακή πνευμονία.

2) ερπυστικό έλκος του κερατοειδούς.

Η πιο συχνή νόσος είναι η κρανιοειδούς πνευμονίας, η οποία προσβάλλει έναν, λιγότερο συχνά δύο ή τρεις λοβούς του πνεύμονα. Η ασθένεια είναι οξεία, συνοδεύεται από υψηλό πυρετό, βήχα. Συνήθως τελειώνει κριτικά.

Ασυλία, ανοσία. Μετά την ασθένεια, παραμένει ασταθής ανοσία, αφού η πνευμονία χαρακτηρίζεται από υποτροπές.

Πρόληψη. Ανήκει σε υγειονομικά και προληπτικά μέτρα. Δεν έχει αναπτυχθεί ειδική προφύλαξη.

Θεραπευτική αγωγή. Χρησιμοποιούνται αντιβιοτικά - πενικιλίνη, τετρακυκλίνη κ.λπ.

ερωτήσεις δοκιμής

1. Μορφολογία πνευμονιόκοκκων. Καλλιεργητικές και ενζυματικές ιδιότητες.

2. Ποιοι παράγοντες καθορίζουν την παθογένεια των πνευμονόκοκκων και τι προστατεύει τους πνευμονιόκοκκους από τη φαγοκυττάρωση;

3. Ποιες είναι οι κύριες πύλες της πνευμονιοκοκκικής λοίμωξης. Ποιες ασθένειες προκαλούνται από τον πνευμονιόκοκκο;

Μικροβιολογική έρευνα

Σκοπός της μελέτης: ανίχνευση πνευμονιόκοκκου.

Ερευνητικό υλικό

1. Φλέγμα (πνευμονία).

2. Βλέννη από το φάρυγγα (αμυγδαλίτιδα).

3. Έκκριμα από το έλκος (έρπουσα έλκος κερατοειδούς).

4. Έκκριση από το αυτί (μέση ωτίτιδα).

5. Πύον (απόστημα).

6. Υπεζωκοτική στίξη (πλευρίτιδα).

7. Αίμα (ύποπτη σήψη).

1 (Είναι καλύτερα να λαμβάνετε πρωινά πτύελα (με συγκεκριμένη πνευμονία, τα πτύελα έχουν σκουριασμένο χρώμα).)

Βασικές μέθοδοι έρευνας

1. Μικροσκοπικό.

2. Μικροβιολογική.

3. Βιολογικά.

Ερευνητική πρόοδος

βιολογικό δείγμα. Λίγο (3-5 ml πτυέλων) γαλακτωματοποιείται σε αποστειρωμένο ζωμό, 0,5 ml από αυτό το μείγμα εγχέεται ενδοπεριτοναϊκά σε ένα λευκό ποντίκι. Μετά από 6-8 ώρες, τα ποντίκια εμφανίζουν σημάδια της νόσου. Αυτή τη στιγμή, ο πνευμονιόκοκκος μπορεί ήδη να ανιχνευθεί στο εξίδρωμα της κοιλιακής κοιλότητας. Το εξίδρωμα λαμβάνεται με αποστειρωμένη σύριγγα. Γίνονται επιχρίσματα από αυτό, χρωματίζονται κατά Gram και μικροσκοπούνται. Για να απομονωθεί μια καθαρή καλλιέργεια, το εξίδρωμα εμβολιάζεται σε άγαρ με ορό. Εάν το ποντίκι πεθάνει ή αρρωστήσει, καλλιεργείται αίμα από την καρδιά σε άγαρ ορού για να απομονωθεί μια καθαρή καλλιέργεια. Οι καλλιέργειες τοποθετούνται σε θερμοστάτη.

Μια ταχεία μέθοδος για τον προσδιορισμό του τύπου του πνευμονιόκοκκου(αντίδραση μικροσυγκόλλησης). 4 σταγόνες εξιδρώματος από την κοιλιακή κοιλότητα ενός μολυσμένου ποντικού εφαρμόζονται σε μια γυάλινη πλάκα. Ο ορός συγκόλλησης τύπου Ι προστίθεται στην πρώτη σταγόνα, ορός τύπου II στη δεύτερη, τύπος III στην τρίτη και ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου (μάρτυρας) στην τέταρτη.

Οι οροί τύπου Ι και ΙΙ προ-αραιώνονται σε αναλογία 1:10 και ο ορός τύπου III - 1:5. Όλες οι σταγόνες αναδεύονται, ξηραίνονται, στερεώνονται και βάφονται με αραιωμένο ματζέντα. Με θετικό αποτέλεσμα σε μία από τις σταγόνες, σημειώνεται μικροβιακή συσσώρευση (συγκόλληση).

Δεύτερη ημέρα έρευνας

Οι καλλιέργειες αφαιρούνται από τον θερμοστάτη, εξετάζονται και γίνονται επιχρίσματα από ύποπτες αποικίες. Παρουσία Gram-θετικών λογχαλικών διπλόκοκκων σε επιχρίσματα, απομονώνονται 2-3 αποικίες σε μια κλίση άγαρ με ορό για να ληφθεί μια καθαρή καλλιέργεια. Οι καλλιέργειες τοποθετούνται σε θερμοστάτη. Τα επιχρίσματα γίνονται από τον ζωμό, βάφονται με Gram και υποβάλλονται σε μικροσκόπιο.

Τρίτη ημέρα έρευνας

Οι καλλιέργειες αφαιρούνται από τον θερμοστάτη. Ελέγξτε την καθαρότητα της καλλιέργειας - κάντε επιχρίσματα, χρώση κατά Gram και μικροσκόπιο. Εάν υπάρχουν θετικοί κατά Gram λογχοειδή διπλόκοκκοι στην απομονωμένη καλλιέργεια, η απομονωμένη καλλιέργεια αναγνωρίζεται με ενοφθαλμισμό:

1) στα μέσα Hiss (λακτόζη, γλυκόζη, σακχαρόζη, μαλτόζη), η σπορά πραγματοποιείται με τον συνήθη τρόπο - με ένεση στο μέσο.

2) στο μέσο με ινουλίνη?

3) στο μέσο με οπτοχίνη?

4) Βάλτε δείγμα με χολή.

Τεστ ινουλίνης. Η καλλιέργεια που μελετήθηκε σπέρνεται σε θρεπτικό μέσο που περιέχει ινουλίνη και βάμμα λακκούβας και τοποθετείται σε θερμοστάτη. Μετά από 18-24 ώρες, οι καλλιέργειες αφαιρούνται από τον θερμοστάτη. Με την παρουσία πνευμονιόκοκκων, το μέσο γίνεται κόκκινο (οι στρεπτόκοκκοι δεν αλλάζουν τη συνοχή και το χρώμα του μέσου).

Προσδιορισμός ευαισθησίας στην οπτοχίνη. Η απομονωμένη καλλιέργεια εμβολιάζεται σε άγαρ αίματος 10% που περιέχει οπτοχίνη 1:50.000. Οι πνευμονιόκοκκοι, σε αντίθεση με τους στρεπτόκοκκους, δεν αναπτύσσονται σε μέσα που περιέχουν οπτοχίνη.

Τεστ χολής. 1 ml της μελετημένης καλλιέργειας ζωμού χύνεται σε σωληνάρια συγκόλλησης. Σε ένα από αυτά προστίθεται μια σταγόνα χολής κουνελιού, ο δεύτερος δοκιμαστικός σωλήνας χρησιμεύει ως έλεγχος. Και οι δύο δοκιμαστικοί σωλήνες τοποθετούνται σε θερμοστάτη. Μετά από 18-24 ώρες, λαμβάνει χώρα λύση των πνευμονιόκοκκων, η οποία εκφράζεται με το καθάρισμα ενός θολού ζωμού. Στο χειριστήριο η ανάρτηση παραμένει θολή.

Ένα δείγμα με χολή μπορεί να τοποθετηθεί σε ένα πυκνό θρεπτικό μέσο. Για να γίνει αυτό, ένας κόκκος ξηρής χολής εφαρμόζεται σε μια αποικία πνευμονιόκοκκων που αναπτύσσεται σε άγαρ και οι πλάκες ορού - η αποικία διαλύεται - εξαφανίζεται.

Τέταρτη μέρα έρευνας

Τα αποτελέσματα καταγράφονται (Πίνακας 26).

Σημείωση. έως - η διάσπαση των υδατανθράκων με το σχηματισμό οξέος.

Επί του παρόντος, οι μέθοδοι ορολογικής έρευνας (RSK και RIGA) χρησιμοποιούνται ευρέως για τον προσδιορισμό των στρεπτοκοκκικών αντισωμάτων. Ο προσδιορισμός της ομάδας και του ορού της απομονωμένης καλλιέργειας πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας φθορίζοντα αντισώματα.

Προσδιορισμός της πνευμονιοκοκκικής μολυσματικότητας. Η καθημερινή καλλιέργεια ζωμού πνευμονιόκοκκου αραιώνεται με 1% πεπτονόνερο από 10-2 έως 10-8 μm, 0,5 ml από κάθε αραίωση χορηγείται σε δύο λευκά ποντίκια. Η καλλιέργεια που προκάλεσε το θάνατο ποντικών σε αραίωση 10 -7 αξιολογείται ως μολυσματική, σε αραίωση 10 -4 -10 -6 θεωρείται μέτρια λοιμογόνος. Η καλλιέργεια που δεν προκάλεσε τον θάνατο των ποντικών είναι μη λοιμογόνος.

ερωτήσεις δοκιμής

1. Ποιες μεθόδους απομόνωσης μιας καθαρής καλλιέργειας πνευμονιόκοκκων γνωρίζετε;

2. Ποιο ζώο είναι πιο ευαίσθητο στον πνευμονιόκοκκο;

3. Ποιες αντιδράσεις γίνονται με το εξίδρωμα ενός μολυσμένου ποντικού και για ποιο σκοπό;

4. Από ποιους εκπροσώπους των πυογόνων κόκκων πρέπει να διαφοροποιείται ο πνευμονιόκοκκος και με ποια εξέταση;

5. Πώς προσδιορίζεται η λοιμογόνος δύναμη του πνευμονιόκοκκου;

Ασκηση

Σχεδιάστε ένα σχέδιο εξέτασης πτυέλων, υποδεικνύοντας τα στάδιά του ανά ημέρα.

Θρεπτικά μέσα

Άγαρ ορού(βλ. κεφάλαιο 7).

Ζωμός ορού γάλακτος(βλ. κεφάλαιο 7).

άγαρ με αίμα(βλ. κεφάλαιο 7).

Hiss media(στεγνός).

Μέσο δοκιμής ινουλίνης. Σε 200 ml απεσταγμένου νερού προσθέστε 10 ml αδρανοποιημένου βόειου ορού, 18 ml βάμματος λακκούβας και 3 g ινουλίνης. Αποστειρώστε με ρέοντα ατμό στους 100°C για 3 συνεχόμενες ημέρες. Ζωμός χολής (βλ. κεφάλαιο 7).