Ελμινθολογικές μέθοδοι. Βασικές μέθοδοι μελέτης πρωτοζώων

Τα πρωτόζωα χωρίζονται σε 4 κατηγορίες:

Όταν εγκυστώνεται, ο μικροοργανισμός αποκτά στρογγυλεμένο σχήμακαι καλυμμένο με προστατευτικό κέλυφος. Με τη μορφή κύστης, τα πρωτόζωα γίνονται λιγότερο ευαίσθητα δυσμενείς παράγοντεςπεριβάλλον.

Τα ακόλουθα μπορεί να αποτελέσουν αντικείμενο έρευνας:

Σημείωση:Υπάρχουν πολλοί τύποι διαγνωστικών, θα εξετάσουμε τους τύπους που είναι πιο συνηθισμένοι στην κλινική εργαστηριακή πρακτική.

Ιδιωτικοί τύποι διαγνωστικών

Σε κάθε συγκεκριμένη περίπτωση, ο εργαστηριακός βοηθός είναι επιφορτισμένος με την εύρεση ενός συγκεκριμένου παθογόνου· μερικές φορές ανακαλύπτονται και άλλα μαζί με το κύριο.

Υπάρχουν 6 είδη αυτού του μικροοργανισμού ικανά να ζουν στο ανθρώπινο έντερο. Κλινική σημασίαΜόνο η δυσεντερική αμοιβάδα, που εμφανίζεται σε βλαστική μορφή και με τη μορφή κύστεων, έχει.

Επιπλέον, χρησιμοποιούνται ανοσολογικές μέθοδοι:

• Έμμεσος ανοσοφθορισμός;
• έμμεση συγκόλληση (INA);
• ακτινική ανοσοδιάχυση.

Σημείωση: ορολογικές μεθόδουςείναι μη ενημερωτικές και χρησιμοποιούνται μόνο ως προσθήκη στα κύρια σε αμφίβολες περιπτώσεις.

Διαγνωστικά βλεφαρίδων (βλεφαρίδων)

Η παθογόνος μορφή των μικροοργανισμών αυτού του γένους είναι το balantidium. Πρόκειται για ένα μικρόβιο που προκαλεί βαλαντιδίαση, μια ασθένεια που συνοδεύεται από ελκώδη διαδικασία του παχέος εντέρου. Το παθογόνο ανιχνεύεται στο εγγενές επίχρισμα με τη μορφή βλαστικής μορφής και κύστης. Το υλικό για το επίχρισμα (περιττώματα και βλέννα) λαμβάνεται κατά τη διάρκεια σιγμοειδοσκόπησης και σπέρνεται σε ειδικά μέσα.

Διάγνωση μαστιγωτών (Leishmania, Giardia, Trypanosomes, Trichomonas)

Η λεϊσμανία, τα τρυπανοσώματα, η λάμβλια και η τριχομονάδα είναι επικίνδυνα για τον άνθρωπο.

Leishmania- μικρόβια, προκαλώντας λεϊσμανίαση, εξετάζονται σε επιχρίσματα αίματος, υλικά μυελός των οστών, ξύσεις από διηθήσεις δέρματος. Σε ορισμένες περιπτώσεις, κατά τη διάγνωση της λεϊσμανίας, χρησιμοποιείται καλλιέργεια σε θρεπτικά μέσα.

Τρυπανοσώματα– παθογόνα ασθένεια του ύπνου(Αμερικανική/Αφρικανική τρυπανοσωμίαση ή νόσος Chagas).

Η αφρικανική παραλλαγή ορίζεται στο αρχική περίοδοκατά τη διάρκεια της έρευνας περιφερικό αίμα. Καθώς η ασθένεια εξελίσσεται, παθολογικά μικρόβια βρίσκονται στο υλικό των παρακεντήσεων των λεμφαδένων και σε προχωρημένα στάδια - στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό.

Για τη διάγνωση των τρυπανοσωμάτων εάν υπάρχει υποψία για τη νόσο του Chagas, το υλικό που εξετάζεται εξετάζεται κάτω από μικροσκόπιο σε χαμηλή μεγέθυνση. Σε αυτή την περίπτωση, οι κηλίδες και η παχιά σταγόνα είναι προχρωματισμένα.

Τριχομονάς(εντερικά, στοματικά) ανιχνεύονται με μικροσκοπία υλικών που λαμβάνονται από τους προσβεβλημένους βλεννογόνους.

Αναγνώριση σπορόζωων (πλασμώδιο ελονοσίας, αιτιολογικός παράγοντας κοκκίδωσης κ.λπ.)

Το πιο κοινό και επικίνδυνο είδος για τον άνθρωπο είναι το πλασμώδιο της ελονοσίας, το οποίο έχει 4 κύριους τύπους παθογόνων: παθογόνο τριτογενής ελονοσία, τετραήμερη ελονοσία, τροπική ελονοσίακαι ελονοσία οβάλ.

Η σεξουαλική ανάπτυξη του Plasmodium (σπορογονία) λαμβάνει χώρα στα κουνούπια Anopheles. Άφυλη (σχιζογονία ιστών και ερυθροκυττάρων) - σε ανθρώπινο ηπατικό ιστό και ερυθροκύτταρα. Αυτά τα χαρακτηριστικά κύκλος ζωήςπρέπει να λαμβάνεται υπόψη κατά τη διάγνωση του πλασμωδίου της ελονοσίας.

Έτσι, στο αίμα ενός πρόσφατα άρρωστου ασθενούς, μπορούν να ανιχνευθούν γεννητικά κύτταρα του κύκλου σπορογονίας. Αλλά στο αποκορύφωμα των κρίσεων ελονοσίας, οι σχιζόντες εμφανίζονται σε μεγάλους αριθμούς στο αίμα.

Επιπλέον, σε διαφορετικές φάσεις ελονοσιακός πυρετόςεμφανίζομαι διάφορα σχήματαπλασμώδιο:

• Κατά τη διάρκεια της περιόδου ψύξης, το αίμα γεμίζει με μεροζωίτες, έναν τύπο σχιζόντων.
• σε υψηλές θερμοκρασίες, τροφοζωίτες σε σχήμα δακτυλίου συσσωρεύονται στα ερυθροκύτταρα.
• Η μείωση της θερμοκρασίας χαρακτηρίζεται από την επικράτηση τροφοζωιτών που μοιάζουν με αμοιβάδες.
• κατά τις περιόδους κανονική κατάστασητο αίμα περιέχει ενήλικες μορφές σχιζόντων.

Η μελέτη του αιτιολογικού παράγοντα της ελονοσίας (πλασμώδιο ελονοσίας) πραγματοποιείται σε επίχρισμα και σε παχιά σταγόνα.

Σημείωση:Η διάγνωση της ελονοσίας με εξέταση επιχρισμάτων και παχύρρευστων σταγόνων αίματος είναι μερικές φορές λανθασμένη. Τα αιμοπετάλια του αίματος σε ορισμένες περιπτώσεις μπορεί λανθασμένα να αποδοθούν στο παθογόνο της ελονοσίας. Επίσης μερικές φορές θραύσματα λευκοκυττάρων και άλλων κυττάρων προσομοιώνουν το πλασμώδιο.

Βασικές μέθοδοι μελέτης πρωτοζώων

Ας δούμε συνοπτικά τις πιο κοινές μεθόδους έρευνας για την παρουσία πρωτοζώων.

Διάγνωση πρωτόζωων με χρήση φυσικού επιχρίσματος και επίχρισμα βαμμένου με διάλυμα Lugol (στα κόπρανα)

Το φάρμακο παρασκευάζεται από γαλάκτωμα περιττωμάτων σε ισοτονικό διάλυμα. Δύο σταγόνες χλωρίου νατρίου και διαλύματος Lugol εφαρμόζονται σε μια γυάλινη πλάκα. Το υλικό δοκιμής προστίθεται και στις δύο συνθέσεις με ένα ξύλινο ραβδί και, αφού καλυφθεί με γυαλί, παρατηρείται σε διαφορετικές αναλύσεις μικροσκοπίου.

Τα πρωτόζωα που βρέθηκαν καταγράφονται με βάση ορισμένα χαρακτηριστικά. Για ακρίβεια ετοιμάστε 2-3 παρασκευάσματα από το ίδιο υλικό. Σε αμφίβολες περιπτώσεις, η ανάλυση επαναλαμβάνεται πολλές φορές σε διάστημα 2-3 εβδομάδων.

Η μέθοδος μπορεί να ανιχνεύσει φυτικές και κυστικές μορφές:

• Λάμπια?
• Balantidium;
• δυσεντερική αμοιβάδα.

Μαζί με τις παθογόνες μορφές, εντοπίζονται και μη παθογόνα πρωτόζωα. Επίσης υγιείς φορείςυπάρχουν αυλικές και κυστικές μορφές.

Σπουδαίος:Η έρευνα θα πρέπει να διεξάγεται επανειλημμένα για να αποφευχθούν ανακρίβειες και λάθη.

Το αποτέλεσμα της διάγνωσης των πρωτοζώων με τη χρήση της μεθόδου αυτοφυούς και χρωματισμένου επιχρίσματος πρέπει να περιέχει περιγραφή της μορφής του παθογόνου (αυλός, κύστη, ιστός).

Απαιτήσεις έρευνας:

• το υλικό που λαμβάνεται για ανάλυση (υγρά κόπρανα) εξετάζεται το αργότερο 30 λεπτά μετά την αφόδευση.
• Τα επίσημα κόπρανα πρέπει να διαγνωστούν εντός 2 ωρών μετά την αφόδευση.
• το υλικό δεν πρέπει να περιέχει ακαθαρσίες ( απολυμαντικά, νερό, ούρα);
• για να εργαστείτε με το υλικό, χρησιμοποιήστε μόνο ξύλινα ραβδιά, τα γυάλινα δεν είναι κατάλληλα λόγω της ολίσθησης της βλέννας.
• Τα ραβδιά πρέπει να καίγονται αμέσως μετά τη χρήση.

Μέθοδος συντήρησης (εξέταση κοπράνων) για τη διάγνωση πρωτοζώων

Η μελέτη πραγματοποιείται με στερέωση πρωτόζωων με συντηρητικό. Η διαφορά μεταξύ αυτής της μεθόδου και της προηγούμενης είναι ότι τα συντηρητικά σας επιτρέπουν να διατηρήσετε το φάρμακο για μεγάλο χρονικό διάστημα.

Συντηρητικά που χρησιμοποιούνται:

• Χειράμαξα. Περιέχει συντηρητικά συστατικά: 0,7 ml χλωριούχο νάτριο, 5 ml φορμαλίνη, 12,5 ml αλκοόλη 96%, 2 g φαινόλη και 100 ml απεσταγμένο νερό. Σύνθεση χρωματισμού: 0,01% διάλυμα θειονίνης (αζούρα).
• Η λύση του Safarliev. Συστατικά: 1,65 g θειικός ψευδάργυρος, 10 ml φορμαλίνη, 2,5 g κρυσταλλική φαινόλη, 5 ml οξικό οξύ, 0,2 g κυανού του μεθυλενίου, 100 ml νερού. Αυτό το συντηρητικό χρησιμοποιείται σε περιπτώσεις όπου το υλικό πρέπει να αποθηκευτεί για περισσότερο από ένα μήνα.

Τα άδεια μπουκάλια γεμίζονται με ένα συντηρητικό, το υλικό μεταφέρεται σε αυτά σε αναλογία 3:1 και στη συνέχεια προστίθεται βαφή εάν είναι απαραίτητο. Τα αποτελέσματα αξιολογούνται με τη μελέτη 2-3 φαρμάκων.

Μέθοδος εμπλουτισμού φορμαλίνης-αιθέρα (ανάλυση για την παρουσία πρωτοζώων στα κόπρανα)

Αυτή η διαγνωστική μέθοδος σας επιτρέπει να διαχωρίσετε και να συγκεντρώσετε κύστεις πρωτόζωων. Για την ανάλυση απαιτούνται τα ακόλουθα συστατικά: φορμαλδεΰδη (10 ml), 0,85 g ισοτονικού διαλύματος, απεσταγμένο νερό, θειικός αιθέρας, λύση Lugol.

Το μείγμα του βιοϋλικού με τα αναγραφόμενα υγρά αναμειγνύεται και φυγοκεντρείται. Το ίζημα που λαμβάνεται στον πυθμένα του δοκιμαστικού σωλήνα χρωματίζεται με διάλυμα Lugol και εξετάζεται για την παρουσία κύστεων και βλαστικών μορφών.

Μέθοδος ανίχνευσης Leishmania (επιχρίσματα μυελού των οστών)

Για τη διάγνωση της λεϊσμανίασης χρησιμοποιούνται τα ακόλουθα αντιδραστήρια: Μίγμα Nikiforov (θειικός αιθέρας και αιθανόλη), ρυθμιστικό φωσφορικών, Azur-eosin κατά Romanovsky.

Η ουσία του μυελού των οστών τοποθετείται πολύ προσεκτικά σε μια γυάλινη πλάκα μετά ειδική εκπαίδευση. Χρησιμοποιείται μικροσκόπιο με σύστημα εμβάπτισης.

ΣΕ οξεία περίοδοςοι ασθένειες ανιχνεύονται στη στίξη ένας μεγάλος αριθμός απόλεϊσμανία.

Σημείωση:Ωρες ωρες κύτταρα του αίματοςμπορεί να μοιάζει με επεξεργασμένη Leishmania, επομένως είναι πολύ σημαντικό για τον τεχνικό εργαστηρίου να είναι προσεκτικός και να έχει επαρκή εμπειρία για τη διεξαγωγή ανεξάρτητης έρευνας.

Μέθοδος ανίχνευσης λεϊσμανίας σε επίχρισμα από διήθηση δέρματος

Τα απαιτούμενα αντιδραστήρια είναι παρόμοια με την προηγούμενη ανάλυση.

Το υλικό δοκιμής λαμβάνεται από το υπάρχον φυματικό ή ελκώδες περιεχόμενο. Εάν υπάρχει υποψία λεϊσμανίασης, η απόξεση γίνεται πολύ προσεκτικά με νυστέρι, χωρίς αίμα. Στη συνέχεια το παρασκεύασμα παρασκευάζεται σε γυαλί. Για να εξασφαλιστεί η ακρίβεια των αποτελεσμάτων που λαμβάνονται, εξετάζονται ταυτόχρονα διάφορα παρασκευάσματα.

Παρουσία της νόσου, η λεϊσμανία ανιχνεύεται επίσης μεταξύ των μακροφάγων, των ινοβλαστών και των λεμφικών κυττάρων που υπάρχουν στο υλικό δοκιμής.

Μέθοδος απομόνωσης καθαρής καλλιέργειας Leishmania που λαμβάνεται με απόξεση παθολογικών ιστών

Με αυτή τη μέθοδο διάγνωσης των πρωτοζώων, οι ξύσεις ιστών τοποθετούνται σε ειδικό θρεπτικό μέσο, στην οποία εμφανίζεται ενεργή αναπαραγωγή της Leishmania.

Πριν από τη λήψη της απόξεσης, το δέρμα επεξεργάζεται επιμελώς με οινόπνευμα, στη συνέχεια γίνεται μια τομή στο φυμάτιο, από το κάτω μέρος του οποίου αφαιρείται το περιεχόμενο και τοποθετείται σε δοκιμαστικό σωλήνα με μέσο. Το υλικό λαμβάνεται πολλές φορές και στη συνέχεια τοποθετείται σε διαφορετικούς δοκιμαστικούς σωλήνες. Στη συνέχεια η καλλιέργεια γίνεται σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία 22-24 βαθμών. Τα αποτελέσματα αξιολογούνται σε μικροσκόπιο. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται όταν άλλα, φθηνότερα και γρήγορους τρόπουςΗ διάγνωση των πρωτόζωων είναι αναποτελεσματική.

Μπορείτε να δείτε πώς αποκρυπτογραφούνται στην πράξη οι δοκιμές για την παρουσία πρωτοζώων χρησιμοποιώντας μια σταγόνα αίματος παρακολουθώντας την ανασκόπηση βίντεο:

Lotin Alexander, ιατρικός αρθρογράφος

Τα κόπρανα εξετάζονται με δύο μεθόδους:

1. Μακροσκοπικό – ανίχνευση ελμινθών, κεφαλών, τμημάτων, θραυσμάτων στροβιλών. Μικρές μερίδες περιττωμάτων αναμιγνύονται με νερό σε ένα επίπεδο λουτρό ή τρυβλίο Petri και βλέπονται σε καλό φως. σκούρο φόντο, χρησιμοποιώντας μεγεθυντικό φακό εάν χρειάζεται. Όλοι οι ύποπτοι σχηματισμοί μεταφέρονται με τσιμπιδάκια σε ένα άλλο φλιτζάνι με νερό ή σε μια γυάλινη πλάκα σε μια σταγόνα αραιωμένης γλυκερίνης.

Με τη μέθοδο υπερασπιζόμενοςΤο τμήμα δοκιμής των κοπράνων αναμειγνύεται με νερό σε γυάλινο κύλινδρο και, αφού καθιζάνει, στραγγίζεται ανώτερο στρώμανερό. Αυτό επαναλαμβάνεται αρκετές φορές. Όταν το υγρό γίνει διαφανές, στραγγίζεται και το ίζημα εξετάζεται σε ένα τρυβλίο Petri.

2. Μικροσκοπικό – για την ανίχνευση αυγών και προνυμφών ελμινθών. Υπάρχουν πολλές μέθοδοι έρευνας.

1). Εγγενές επίχρισμα – η πιο κοινή και τεχνικά προσβάσιμη μέθοδος έρευνας. Μπορούν να ανιχνευθούν αυγά και προνύμφες όλων των ελμινθών. Ωστόσο, με μικρό αριθμό αυγών δεν είναι πάντα δυνατό να τα βρούμε. Ως εκ τούτου, χρησιμοποιείται η μέθοδος εμπλουτισμού.

1). Μέθοδος Fülleborg – αυτή είναι μια μέθοδος εμπλουτισμού που βασίζεται στην επίπλευση αυγών ελμινθίασης σε κορεσμένο διάλυμα NaCl (1,2 – πυκνότητα, 400 g NaCl ανά 1 λίτρο νερού, διάλυμα NaCl 40%). Η μέθοδος είναι πιο αποτελεσματική από το εγγενές επίχρισμα. 2-5 g περιττωμάτων τοποθετούνται σε γυάλινα βάζα και γεμίζονται με διάλυμα NaCl, αναδεύονται και μετά από 45 λεπτά, αφαιρούμε την προκύπτουσα μεμβράνη με μεταλλικό βρόχο, τοποθετούμε μια σταγόνα γλυκερίνης σε μια γυάλινη πλάκα. Εξετάστε στο μικροσκόπιο. Το μειονέκτημα της μεθόδου είναι η αργή εμφάνιση αυγών διαφόρων ελμίνθων, νάνος ταινίας - μετά από 15-20 λεπτά, στρογγυλός σκώληκας - 1,5 ώρα, μαστίγιος - 2-3 ώρες.

2) Μέθοδος Καλανταριάν – επίσης μέθοδος εμπλουτισμού, αλλά χρησιμοποιείται κορεσμένο διάλυμα NaNO 3 (πυκνότητα 1,38). Τα περισσότερα αυγά επιπλέουν· δεν απαιτείται δοκιμή ιζήματος. Το μειονέκτημα είναι ότι η διατήρηση των αυγών σε διάλυμα για μεγάλο χρονικό διάστημα οδηγεί στο γεγονός ότι ορισμένα αυγά αρχίζουν να διογκώνονται και να κατακάθονται στον πυθμένα, εξαφανίζοντας από την επιφανειακή μεμβράνη.

3. Μέθοδος Γκοριάτσεφ – με βάση την αρχή της εναπόθεσης ωαρίων, ανίχνευσης μικρά αυγάτρηματώδεις. Ως διάλυμα χρησιμοποιείται κορεσμένο διάλυμα NaCl και από πάνω επιστρώνονται προσεκτικά 3-4 ml διαλύματος περιττωμάτων. Μετά από 15-20 ώρες, τα αυγά τρηματωδών εγκαθίστανται στον πυθμένα. Το υγρό στραγγίζεται και το ίζημα τοποθετείται σε γυάλινη πλάκα και σε μικροσκόπιο.

4. Μέθοδος συστροφής Shulman – για την ανίχνευση προνυμφών ελμινθών στα κόπρανα. Εξετάζονται μόνο τα πρόσφατα εκκρινόμενα κόπρανα. 2-3 g τοποθετούνται σε ένα γυάλινο βάζο και προστίθεται μια πενταπλάσια ποσότητα νερού, ανακατεύεται γρήγορα με ένα ραβδί χωρίς να αγγίζει τα τοιχώματα του βάζου - 20-30 λεπτά, στη συνέχεια το ραβδί αφαιρείται γρήγορα και μια σταγόνα υγρό στο τέλος μεταφέρεται σε γυάλινη πλάκα και μικροσκοπείται.

5. Μέθοδος Berman – βασίζεται στην ικανότητα των προνυμφών ελμινθών να μεταναστεύουν προς τη θερμότητα και χρησιμεύει για την αναγνώρισή τους στα κόπρανα.

6. Μέθοδος Harada και Mori (μέθοδος εκτροφής προνυμφών) και συνιστάται για έλεγχο για λοιμώξεις από αγκυλόστομα. Η μέθοδος βασίζεται στο γεγονός ότι στη θερμότητα και σε υγρό φιλτραρισμένο χαρτί, τα αυγά αγκυλόστομων αναπτύσσονται σε νηματώδεις προνύμφες, οι οποίες μπορούν εύκολα να ανιχνευθούν. Στη μέση μιας λωρίδας φιλτραρισμένου χαρτιού τοποθετούνται 15 γραμμάρια περιττωμάτων· το χαρτί με τα περιττώματα τοποθετείται σε βάζο έτσι ώστε το κάτω άκρο να βυθίζεται σε νερό και το πάνω άκρο να στερεώνεται με πώμα. Το βάζο διατηρείται σε θερμοστάτη στους 28 0 C για 5-6 ημέρες. Κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου αναπτύσσονται φιλαρόμορφες προνύμφες και κατεβαίνουν στο νερό. Το υγρό εξετάζεται κάτω από μεγεθυντικό φακό. Εάν είναι δύσκολο να εντοπιστεί, το υγρό φυγοκεντρείται, αφού πρώτα σκοτώσει τις προνύμφες με θέρμανση στους 60 0. Ο βοηθός εργαστηρίου πρέπει να φορά γάντια.

7. Μέθοδοι για εντεροβίαση – ανίχνευση αυγών σκώληκα και ταινία ταύρου.

α) ξύσιμο από τις περιπρωκτικές πτυχές – με μια μπατονέτα σφιχτά τυλιγμένη σε ξύλινο ραβδί και εμποτισμένη με διάλυμα γλυκερίνης 50%. Στο εργαστήριο, το στυλεό ξεπλένεται με 1-2 σταγόνες υδατικού διαλύματος γλυκερίνης 50%.

β) μέθοδος με κολλώδη ακάρεα (μέθοδος Graham)

Η κολλητική ταινία εφαρμόζεται στις περιπρωκτικές πτυχές, στη συνέχεια το συγκολλητικό στρώμα εφαρμόζεται σε μια γυάλινη πλάκα και εξετάζεται σε μικροσκόπιο.

Γ) απόξεση με τη χρήση οφθαλμικών ράβδων (μέθοδος Rabinovich). Για την περιπρωκτική απόξεση, χρησιμοποιούνται γυάλινες ράβδοι ματιών, το φαρδύ μέρος των οποίων καλύπτεται με ειδική κόλλα, η οποία επιτρέπει τη συγκράτηση των αυγών των σκουληκιών.

Εξέταση αίματος, χολής, πτυέλων και μυών

Η μικροσκοπία αίματος αποκαλύπτει προνύμφες filaria.

Εξέταση πτυέλων - αυγών paraganim, προνύμφες στρογγυλών σκουληκιών, necator, strongyloid, στοιχεία εχινόκοκκου κύστης.

Μυϊκή εξέταση - εάν υπάρχει υποψία τριχίνωσης, εξετάζονται οι μύες του ασθενούς ή του πτώματος, καθώς και το κρέας που πιθανώς προκάλεσε τη μόλυνση του ατόμου. Για τους σκοπούς της τριχινοσκόπησης, ο μυς κόβεται σε μικρά κομμάτια και τοποθετείται σε συμπιεστή, αυτά είναι δύο φαρδιά, παχιά ποτήρια που συνθλίβουν τους μύες και οι προνύμφες Trichinella βρίσκονται σε μορφή κάψουλας - μέθοδος συμπίεσης.

Μέθοδος πέψης - οι μύες γεμίζουν με τεχνητό γαστρικό υγρό (διάλυμα του υδροχλωρικού οξέοςκαι πεψίνη). Οι μύες πέπτονται και οι προνύμφες αναγνωρίζονται εύκολα. Προσδιορισμός της έντασης της εισβολής: αριθμός προνυμφών έως 200 ανά 1 g μυϊκός ιστός– μέτρια ένταση εισβολής. έως 500 – έντονο. πάνω από 500 – υπερ-εντατική εισβολή.

Ορολογικές μέθοδοι

Ελμινθολογικές μέθοδοι έρευνας. Οι μέθοδοι για τη διάγνωση των ελμινθικών λοιμώξεων χωρίζονται σε άμεσες, με βάση την άμεση ανίχνευση των ίδιων των ελμινθών ή των θραυσμάτων τους, καθώς και των προνυμφών και των αυγών ελμινθών (μέθοδοι για την εξέταση περιττωμάτων, ούρων, χολής και δωδεκαδακτύλου, πτυέλων, αίματος και ιστών, υλικό που λαμβάνονται με απόξεση από την περιπρωκτική περιοχή και τους υπογλώσσιους χώρους), και έμμεσα, με τη βοήθεια των οποίων αποκαλύπτονται δευτερογενείς αλλαγές, που προκύπτουν στο ανθρώπινο σώμα ως αποτέλεσμα της ζωτικής δραστηριότητας των ελμινθών (μελέτες της μορφολογικής σύνθεσης του αίματος, ανοσολογικές μέθοδοι για τη διάγνωση λοιμώξεων από ελμίνθους, ακτινολογικές μελέτεςκαι τα λοιπά.). Από τις άμεσες μεθόδους, οι πιο συνηθισμένες είναι οι σκατολογικές, οι οποίες χωρίζονται σε μακρο- και μικροελμινθοσκοπικές. Σε ορισμένες περιπτώσεις, χρησιμοποιούνται ειδικές μέθοδοι.

Μακροελμιτοσκοπικές μέθοδοι έρευναςπου στοχεύει στην αναζήτηση ελμινθών ή θραυσμάτων τους (scolex, τμήματα, τμήματα του strobila των κεστωδών). Χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση εκείνων των ελμινθίασης στις οποίες τα αυγά δεν απεκκρίνονται στα περιττώματα του ασθενούς ή απεκκρίνονται σε μικρές ποσότητες και όχι πάντα (για παράδειγμα, με εντεροβίαση, εντοπίζονται σκουλήκια στα κόπρανα, με ταενίαση - τμήματα).

Για την ανίχνευση σκουληκιών ή τμημάτων κεστοδών στα κόπρανα, τα κόπρανα εξετάζονται με γυμνό μάτι. Για διαφορική διάγνωσηΤαενίαση, συνιστάται η προβολή περιττωμάτων αραιωμένων με νερό σε ξεχωριστές μικρές μερίδες σε μαύρες φωτογραφικές κυψέλες ή σε πιάτα Petri σε σκούρο φόντο. Μεγάλοι σχηματισμοί ύποπτοι για θραύσματα ελμινθών εξετάζονται κάτω από μεγεθυντικό φακό ανάμεσα σε δύο διαφάνειες. Αν από κλινικές ενδείξειςπροτείνουν την ανίχνευση μικρών ελμίνθων ή κεφαλών κεστόδων μετά τη θεραπεία, στη συνέχεια τα ύποπτα σωματίδια εξετάζονται κάτω από μεγεθυντικό φακό σε μια σταγόνα γλυκερίνης και, εάν είναι απαραίτητο, κάτω από μικροσκόπιο.

Μικροελμινθοσκοπικές μέθοδοι έρευνας(ποιοτικά) στοχεύουν στον εντοπισμό αυγών και προνυμφών ελμινθών. Χρησιμοποιείται η μέθοδος παχιάς επάλειψης με πλάκα κάλυψης σελοφάν κατά Kato. Το μείγμα Κάτω αποτελείται από 6 ml 3% υδατικό διάλυμα πράσινου μαλαχίτη, 500 mlγλυκερίνη και 500 mlΔιάλυμα φαινόλης 6%. Πιάτα Κάτο (το υδρόφιλο σελοφάν κόβεται σε κομμάτια διαστάσεων 20΄40 mm) βυθισμένο για 24 ηστο μείγμα Κάτω έτσι ώστε να είναι γειτονικά το ένα με το άλλο (3-5 mlΚάτω διάλυμα ανά 100 πλάκες). 100 mgΤα κόπρανα εφαρμόζονται σε μια γυάλινη πλάκα, καλύπτονται με μια πλάκα κάλυψης σελοφάν σύμφωνα με το Kato και πιέζονται προς τα κάτω έτσι ώστε τα κόπρανα να αλείφονται στη γυάλινη πλάκα εντός των ορίων της πλάκας σελοφάν. Το επίχρισμα αφήνεται σε θερμοκρασία δωματίου για να ελαφρύνει κατά 40-50 min,και στη συνέχεια εξετάστηκε στο μικροσκόπιο. Στη ζεστή εποχή, για να μην στεγνώσει το παρασκεύασμα, τοποθετήστε ένα υγρό σφουγγάρι στο πιάτο του παρασκευασμένου σκευάσματος.

Για την πλήρη ανίχνευση ελμίνθων όλων των τύπων, πρέπει να χρησιμοποιείται η μέθοδος παχύρρευστης επίχρισης Kato με πλάκα κάλυψης σελοφάν σε συνδυασμό με μία από τις μεθόδους εμπλουτισμού. Οι πιο συνηθισμένες από αυτές είναι η μέθοδος Kalantaryan και η μέθοδος Fulleborn.

Μέθοδος Kalantaryan: σε φιάλες με πλατύ στόμα με όγκο 100 mlανακατεύουμε καλά με μια γυάλινη ράβδο 5 σολκόπρανα, προσθέτοντας σταδιακά κορεσμένο διάλυμα νιτρικού νατρίου (1 κιλόνιτρικό νάτριο ανά 1 μεγάλονερό όταν βράζει) μέχρι την άκρη του ποτηριού. Τα μεγάλα σωματίδια που επιπλέουν στην επιφάνεια αφαιρούνται με μια σέσουλα χαρτιού. Μια γυάλινη αντικειμενοφόρος πλάκα εφαρμόζεται στην επιφάνεια του αλατούχου διαλύματος (το αλατούχο διάλυμα προστίθεται μέχρι το μείγμα να έρθει σε πλήρη επαφή με τη γυάλινη πλάκα). Μετά το 20-30 ελάχη αντικειμενοφόρος πλάκα αφαιρείται και το φιλμ εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Ελλείψει αυτού του αλατιού, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε ένα κορεσμένο διάλυμα επιτραπέζιου αλατιού σύμφωνα με το Fholleborn (400 σολαλάτι σε 1 μεγάλοβραστό νερό).

Λόγω του γεγονότος ότι τα αυγά έχουν μεγάλο ειδικό βάρος(μη γονιμοποιημένα αυγά στρογγυλών σκουληκιών, αυγά τρεματωδών και μεγάλων κεστωδών) δεν επιπλέουν, εκτός από την εξέταση του επιφανειακού στρώματος του υγρού, όταν χρησιμοποιείτε τη μέθοδο Fulleborn, είναι απαραίτητο να εξεταστούν 2-4 παρασκευάσματα από το ίζημα στο μικροσκόπιο.

Ειδικές εργαστηριακές μέθοδοι για τον έλεγχο διαφόρων ελμινθιών.

Για την ανίχνευση θραυσμάτων ελμινθών, τα κόπρανα εξετάζονται με γυμνό μάτι, στη συνέχεια αναμιγνύονται με νερό και εξετάζονται σε μικρές μερίδες σε ένα πιάτο Petri σε σκούρο φόντο. Όλα τα ύποπτα σωματίδια τοποθετούνται σε μια γυάλινη διαφάνεια σε μια σταγόνα νερού και εξετάζονται κάτω από ένα μεγεθυντικό φακό. Μπορείτε να τοποθετήσετε μια ημερήσια μερίδα σε έναν κύλινδρο με προσθήκη 5-10 φορές μεγαλύτερη ποσότητα νερού. Μετά την ανάδευση, το δοχείο αφήνεται μέχρι να κατακαθίσουν τελείως τα αιωρούμενα σωματίδια. Επιφανειακό στρώματα υγρά στραγγίζονται και χύνονται καθαρό νερό. Το πλυμένο ίζημα εξετάζεται σε μικρές μερίδες με γυμνό μάτι ή κάτω από μεγεθυντικό φακό. Για την ανίχνευση αυγών χρησιμοποιούνται μικροσκοπικές μέθοδοι εξέτασης.

Μητρική μέθοδος επιχρίσματος. Μικρή ποσότητα κοπράνων από διαφορετικούς τόπουςτο τμήμα δοκιμής λειοτριβείται σε γυάλινη αντικειμενοφόρο πλάκα σε μια σταγόνα διαλύματος γλυκερίνης 50%, ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου ή νερό. Το μείγμα καλύπτεται με καλυπτρίδα και παρατηρείται κάτω από μικροσκόπιο.

Η αιωρούμενη μέθοδος του Fülleborn. Ένα μέρος των κοπράνων αναμιγνύεται με 20 μέρη κορεσμένου διαλύματος χλωριούχου νατρίου (ειδικό βάρος 1,18), που προστίθενται σε μικρές μερίδες. Τα μεγάλα σωματίδια που επιπλέουν στην επιφάνεια αφαιρούνται αμέσως και το μείγμα αφήνεται για 45 λεπτά. Κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου, τα αυγά ελμινθών, με χαμηλότερο ειδικό βάρος από το διάλυμα χλωριούχου νατρίου, επιπλέουν στην επιφάνεια. Το επιφανειακό φιλμ αφαιρείται με συρμάτινο βρόχο διαμέτρου περίπου 1 cm και μεταφέρεται σε γυάλινη πλάκα για εξέταση στο μικροσκόπιο.

μέθοδος Kalantaryan. Η αποτελεσματικότητα της μεθόδου επίπλευσης αυξάνεται κατά την αντικατάσταση του χλωριούχου νατρίου με ένα κορεσμένο διάλυμα νιτρικού νατρίου. Σε αυτή την περίπτωση, το μείγμα διατηρείται για 10-15 λεπτά.

Η επιφανειακή μεμβράνη που σχηματίζεται μετά την καθίζηση ενός μείγματος περιττωμάτων με διάλυμα χλωριούχου νατρίου ή νιτρικού νατρίου μπορεί επίσης να αφαιρεθεί με μια γυάλινη πλάκα. Για το σκοπό αυτό, ένα βάζο γεμάτο μέχρι το χείλος με μείγμα περιττωμάτων και διάλυμα αλατιού καλύπτεται με μια γυάλινη πλάκα έτσι ώστε η κάτω επιφάνειά του να έρθει σε επαφή με το υγρό. Μετά την καθίζηση, το γυαλί αφαιρείται και, γυρίζοντας γρήγορα προς τα πάνω με την επιφάνεια στην οποία βρίσκεται το φιλμ, εξετάζεται στο μικροσκόπιο.

Η απόξεση των σπειροειδών πτυχών (για τον εντοπισμό αυγών καρφίτσας και ογκόσφαιρων ταινίας βοοειδών) γίνεται το πρωί πριν την τουαλέτα. Χρησιμοποιώντας μια ξύλινη σπάτουλα βουτηγμένη σε νερό ή ένα διάλυμα γλυκερίνης 50%, ξύστε γύρω πρωκτός. Το προκύπτον υλικό μεταφέρεται σε μια γυάλινη αντικειμενοφόρο πλάκα σε μια σταγόνα νερού ή διάλυμα γλυκερίνης 50% και εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Η σπάτουλα μπορεί να αντικατασταθεί με μια βρεγμένη μπατονέτα, η οποία χρησιμοποιείται για να σκουπίσει την περιπρωκτική περιοχή και στη συνέχεια ξεπλύνετε καλά με νερό. Το νερό φυγοκεντρείται και το ίζημα εξετάζεται με μικροσκόπιο.

Μέθοδος Behrmann (για αναγνώριση προνυμφών). Ένα μεταλλικό πλέγμα με 5-6 g περιττωμάτων που εφαρμόζονται σε αυτό στερεώνεται σε μια γυάλινη χοάνη που εισάγεται σε ένα τρίποδο. Ένας ελαστικός σωλήνας με σφιγκτήρα τοποθετείται στο κάτω άκρο της χοάνης. Το χωνί γεμίζει με νερό που έχει θερμανθεί στους 50°, έτσι ώστε Κάτω μέροςτο πλέγμα που περιείχε τα κόπρανα ήρθε σε επαφή με το νερό. Οι προνύμφες κινούνται ενεργά στο νερό και συσσωρεύονται στο κάτω μέρος του ελαστικού σωλήνα. Μετά από 4 ώρες, το υγρό στραγγίζεται σε φυγοκεντρικούς σωλήνες, φυγοκεντρείται και το ίζημα εξετάζεται σε μικροσκόπιο.

Ανάλυση πτυέλων, ρινικής βλέννας και κολπική έκκρισηγια την αναγνώριση αυγών του πνευμονικού trematode paragonimus, προνύμφες στρογγυλού σκώληκα και αγκυλόστομου, αυγών σκουληκιών και θραυσμάτων εχινόκοκκου κύστης. Το τμήμα της βλέννας (εκκένωσης) που εξετάζεται επαλείφεται σε γυαλί και παρατηρείται μακροσκοπικά σε ασπρόμαυρο φόντο και στη συνέχεια κάτω από μικροσκόπιο. Μπορείτε να προσθέσετε ένα διάλυμα αντιφορμίνης 25% στο υλικό δοκιμής, να ανακινήσετε καλά και να αφήσετε για 1-1,5 ώρα για να διαλυθεί η βλέννα. Το μίγμα φυγοκεντρείται και το ίζημα εξετάζεται σε μικροσκόπιο.

Ανάλυση δωδεκαδακτύλου και γαστρικό υγρόγια τον εντοπισμό αυγών ηπατικών ραβδώσεων, αγκυλόστομων, προνυμφών Strongyloides. Και τα τρία μέρη του περιεχομένου του δωδεκαδακτύλου που λαμβάνονται με φυγοκεντρούνται και το ίζημα εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Ερευνούν και αυτοί.

Έρευνα ιστών. Για να αναγνωριστούν οι προνύμφες Trichinella, κομμάτια μυών που έχουν υποβληθεί σε βιοψία χωρίζονται προσεκτικά σε ίνες, συμπιέζονται ανάμεσα σε γυαλιά συμπιεστή (χοντρά γυαλιά με βίδες) και εξετάζονται σε μικροσκόπιο με σκοτεινό φως. Για τον εντοπισμό των κυστικέρων, οι μύες ανατέμνονται με βελόνες ανατομής, το απομονωμένο κυστίδιο καθαρίζεται από τον περιβάλλοντα ιστό, συμπιέζεται ανάμεσα σε δύο γυάλινες πλάκες και εξετάζεται με μεγεθυντικό φακό.

Εξέταση αίματος (για την ανίχνευση προνυμφών filaria). Εξετάστε την κρεμασμένη σταγόνα σε γυαλί καλύμματος με βαζελίνη. Μπορείτε να αναμίξετε 0,3 ml αίματος με 10πλάσια ποσότητα διαλύματος 3%. Το μίγμα φυγοκεντρείται και το ίζημα εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Για εμπλουτισμό φαρμάκων σε 1 ml φλεβικό αίμαπροσθέστε 3 ml διαλύματος φορμαλίνης 2% ή 5 φορές την ποσότητα υγρού που αποτελείται από 95 ml διαλύματος φορμαλίνης 5%, 5 ml οξικού οξέος και 2 ml πυκνού διάλυμα αλκοόληςαιματοξυλίνη. Το μίγμα φυγοκεντρείται, το ίζημα πλένεται με απεσταγμένο νερό και εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Για διαφοροποίηση ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΟΙ ΤΥΠΟΙΤα filariae εξετάζονται με επιχρίσματα που χρωματίζονται με τη μέθοδο Giemsa-Romanovsky.

Μέθοδοι ανοσολογική διάγνωση. Χρησιμοποιούνται επίσης αλλεργικές διαγνωστικές εξετάσεις (βλ.) με τον αντίστοιχο τύπο ελμινθίου (συγκόλληση, στερέωση συμπληρώματος).

Ελμινθολογικές μέθοδοι έρευνας. Ρύζι. Αυγά ελμινθίου. 1-10 - αυγά στρογγυλά σκουλήκια(νηματώδεις): 1 - 3 - στρογγυλοί σκώληκες (1 - γονιμοποιημένο αυγό, 2 - γονιμοποιημένο αυγό χωρίς λεύκωμα, 3 - μη γονιμοποιημένο αυγό). 4 - στρογγυλά σκουλήκια γάτας. 5 - σαρκοφάγα στρογγυλά σκουλήκια. 5 - pinworms? 7 - whipworm? 8 - tominx; 9 - αγκυλόστομος? 10 - trichostrongylid. 11-15 - αυγά ταινίας(κεστόδες): 11 - ταινία βοοειδών. 12 - νάνος ταινία? 13 - ταινία αρουραίων? 14 - ταινία κολοκύθας? 15 φαρδιά ταινία. 16 - 24 - αυγά φουσκωτών (τρεματωδών): 16 - τρεματώδη (σχιστοσώματα) Ιαπωνικά. 17 - τρεματώδη (σχιστοσώματα) ούρα - σεξουαλική. 18 - τρηματώδεις (σχιστοσώματα) Munson; 19 - τρεματώδη (παρογώνυμα) πνευμονικά. 20 - trematodes (opisthorchis) Siberian (αιλουροειδές). 21 - trematodes (clonorchis) chinensis; 22 - εντερικοί τρηματώδεις (metagonimus); 23 - τρηματώδεις (fasciolas) του ήπατος. 24 - λογχοειδή τρεματώδη (δικροκήλιο).

Μια αποτελεσματική και βολική μέθοδος ελμινθολογικής έρευνας είναι μελέτη παχύρρευστου κατά Κάτω, η ουσία του οποίου είναι η ανίχνευση αυγών ελμινθών σε ένα παχύ επίχρισμα κοπράνων, καθαρισμένο με γλυκερίνη και βαμμένο με πράσινο μαλαχίτη. Η σύνθεση του μείγματος Kato είναι 6 ml υδατικού διαλύματος πράσινου μαλαχίτη 3%, 500 ml γλυκερίνης, 500 ml διαλύματος φαινόλης 6%. Το διάλυμα είναι σταθερό και μπορεί να αποθηκευτεί σε θερμοκρασία δωματίου. Για την παρασκευή των παρασκευασμάτων, κομμάτια περιττωμάτων σε μέγεθος μπιζελιού εφαρμόζονται σε μια γυάλινη πλάκα, καλύπτονται με μια μεμβράνη υδρόφιλου σελοφάν που διατηρείται στο μείγμα Kato για 24 ώρες και πιέζονται πάνω στο ποτήρι για να ομοιόμορφη κατανομήυλικό. Τα επιχρίσματα που καθαρίζονται για 40-60 λεπτά εξετάζονται σε μικροσκόπιο. Τα ανιχνευμένα ωάρια ελμινθών μετρώνται και μορφολογικά χαρακτηριστικάκαθορίσει το είδος τους. Η μέθοδος σάς επιτρέπει να αναγνωρίσετε αυγά στρογγυλών σκουληκιών, μαστιγίων, κεστωδών, τρεματωδών και, σε μικρότερο βαθμό, αγκυλόστομων και νάνων ταινίας.

Επίσης χρησιμοποιείται ευρέως μεθόδους εμπλουτισμού. Η αρχή των μεθόδων επίπλευσης είναι η εναιώρηση των κοπράνων σε αλατούχο διάλυμα, το οποίο έχει μεγαλύτερη σχετική πυκνότητα σε σύγκριση με τα αυγά ελμινθών, με αποτέλεσμα να επιπλέουν στην επιφάνεια. Τα περιεχόμενα της επιφανειακής μεμβράνης εξετάζονται σε μικροσκόπιο. Ως μίγματα εμπλουτισμού χρησιμοποιούνται τα ακόλουθα διαλύματα: επιτραπέζιο αλάτι- 400 g σε 1 λίτρο νερού (σχετική πυκνότητα σύμφωνα με το Fulleborn -1,18). νιτρικό νάτριο - 1 kg σε 1 λίτρο νερού (σχετική πυκνότητα σύμφωνα με το "Kalantaryan-1.38), νιτρικό νάτριο - 900 g και νιτρικό κάλιο - 400 g σε 1 λίτρο νερού (σχετική πυκνότητα σύμφωνα με Brudastov και Krasnos-1,48). τα διαλύματα βράζονται και ψύχονται.
Για έρευνα, προσθέστε 5-10 g περιττωμάτων σε ένα ποτήρι ή πήλινο ποτήρι, προσθέστε 100-200 ml αλατούχου διαλύματος σε αυτό και ανακατέψτε καλά. Στη συνέχεια αφαιρούνται τα επιπλέοντα μεγάλα σωματίδια με μια ξύλινη σπάτουλα ή μια σέσουλα από χαρτί ή χαρτόνι και αμέσως εφαρμόζεται μια ευρεία πλάκα στην επιφανειακή μεμβράνη έτσι ώστε το αλατούχο διάλυμα και η αντικειμενοφόρος πλάκα να έρχονται σε πλήρη επαφή. Αφού αφήσετε το μείγμα να καθίσει για 30-40 λεπτά, αφαιρείται η αντικειμενοφόρος πλάκα, τοποθετείται στο μικροσκόπιο με το φιλμ στραμμένο προς τα επάνω και εξετάζεται προσεκτικά ολόκληρη η επιφάνεια. Για να αποφύγετε το στέγνωμα, μπορείτε να προσθέσετε 2-3 σταγόνες από ένα διάλυμα γλυκερίνης 50%. Το επιφανειακό φιλμ μπορεί επίσης να αφαιρεθεί με συρμάτινο βρόχο. Η αποτελεσματικότητα των μεθόδων επίπλευσης αυξάνεται όσο αυξάνεται η σχετική πυκνότητα αλατούχα διαλύματα. Χρησιμοποιώντας αυτές τις μεθόδους, είναι δυνατός ο εντοπισμός αυγών νηματωδών, κεστωδών και τρεματωδών.

Για την ανίχνευση αυγών στα κόπρανα, χρησιμοποιείται η μέθοδος καθίζησης Krasilnikov. Τα κόπρανα αναμιγνύονται με διάλυμα απορρυπαντικού 1% ( σκόνη πλυσίματος“Lotus” κ.λπ.) σε αναλογία 1:10 μέχρι να σχηματιστεί ανάρτηση. Υπό την επίδραση του απορρυπαντικού διαλύονται διάφορα συστατικά των περιττωμάτων (πρωτεΐνες, λίπη, στοιχεία ιστού). Μετά από 30 λεπτά, τα περιεχόμενα του σωλήνα ανακινούνται για 1-2 λεπτά και στη συνέχεια φυγοκεντρούνται για 5 λεπτά. Τα παρασκευάσματα παρασκευάζονται από το ίζημα και εξετάζονται σε μικροσκόπιο.
ΣΕ συνθήκες πεδίου, καθώς και κατά τις μαζικές εξετάσεις του πληθυσμού για προσβολή από ελμινθικά, βολεύει η χρήση της μεθόδου του παχύρρευστου επιχρίσματος Κάτω. ΣΕ στάσιμες συνθήκεςΚατά την εξέταση ασθενών, είναι προτιμότερο να χρησιμοποιούνται οι πιο αποτελεσματικές μέθοδοι επίπλευσης. Όταν χρησιμοποιείτε αυτές τις μεθόδους κατά τη διάρκεια της μικροσκοπίας, συνιστάται να μετράτε τα αυγά που βρίσκονται στο παρασκεύασμα. Εάν το δείγμα ή ο όγκος που λαμβάνεται για τη μελέτη των κοπράνων είναι τυποποιημένος (για παράδειγμα, 1 κουταλάκι του γλυκού ή κουταλιά της σούπας) και ένας σταθερός ομοιόμορφος όγκος αλατούχων διαλυμάτων, μπορεί κανείς να κρίνει χονδρικά την ένταση των εισβολών. Αυτή η ποσοτική λογιστική μπορεί να είναι χρήσιμη για την αιτιολόγηση της συνταγογραφούμενης θεραπείας και την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της αποπαρασίτωσης. Επιπλέον, άλλες πιο ακριβείς μέθοδοι μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον προσδιορισμό της έντασης της μόλυνσης. ποσοτικές μεθόδους, ιδίως τη μέθοδο Stoll.

Για τη διάγνωση της τενιαρύγνωσης και της εντεροβίασηςΧρησιμοποιείται η μέθοδος μελέτης των περιπρωκτικών-ορθικών ξύσεων. Χρησιμοποιώντας μια ξύλινη σπάτουλα εμποτισμένη σε διάλυμα γλυκερίνης 50%, ξύστε τις περιπρωκτικές πτυχές το πρωί πριν την αφόδευση στην περιφέρεια πρωκτόςΚαι κατώτερα τμήματαπρωκτός. Το προκύπτον υλικό, καθαρισμένο από μια σπάτουλα με την άκρη ενός γυαλιού κάλυψης, τοποθετείται σε μια γυάλινη πλάκα σε μια σταγόνα διαλύματος γλυκερίνης 50%, καλύπτεται με γυαλί κάλυψης και εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Μπορείτε επίσης να εξετάσετε μια λωρίδα ταινίας κυτταρίνης, η οποία πιέζεται πρώτα με την κολλητική πλευρά στις περιρινικές πτυχές, στη συνέχεια τοποθετείται σε γυάλινη πλάκα και εξετάζεται μικροσκοπικά.

Ανίχνευση προνυμφών νηματωδών στα κόπρανα με τη μέθοδο Berman. Η μέθοδος βασίζεται στη θερμοτροπική ιδιότητα των προνυμφών. Για έρευνα, πάρτε 1 κουταλιά της σούπας περιττώματα και τοποθετήστε το σε ένα μεταλλικό πλέγμα ή ένα πλέγμα από πολλά στρώματα γάζας σε ένα συρμάτινο πλαίσιο. Το πλέγμα εγκαθίσταται σε ένα χωνί τοποθετημένο σε τρίποδο. Ένας ελαστικός σωλήνας με σφιγκτήρα είναι προσαρτημένος στη χοάνη. Έχοντας σηκώσει το πλέγμα, το χωνί γεμίζει με νερό (θερμοκρασία +40°...+50°C) ώστε το κάτω μέρος του πλέγματος να βυθιστεί σε νερό. Οι προνύμφες από τα κόπρανα μεταναστεύουν ενεργά σε ζεστό νερόκαι, καθιζάνοντας, συσσωρεύονται στο κάτω μέρος της χοάνης. Μετά από 2-4 ώρες, ο σφιγκτήρας ανοίγει, το νερό αποστραγγίζεται σε σωλήνα φυγοκέντρησης και φυγοκεντρείται για 2-3 λεπτά. Στη συνέχεια το υπερκείμενο υγρό στραγγίζεται, το ίζημα μεταφέρεται σε γυάλινη αντικειμενοφόρο πλάκα και εξετάζεται στο μικροσκόπιο, όπου βρίσκονται κινητές προνύμφες του αιτιολογικού παράγοντα της ισχυροειδίασης.

Η μέθοδος Harada και Το Mori καθιστά δυνατή τη διάκριση μεταξύ των προνυμφών αγκυλόστομου και νέκτορα. Οι προνύμφες αγκυλόστομων καλλιεργούνται σε διηθητικό χαρτί. Για το σκοπό αυτό, 0,5 g φρέσκων περιττωμάτων, που λαμβάνονται από τον ασθενή το αργότερο 1 ώρα μετά την αφόδευση, εφαρμόζονται σε λωρίδες διηθητικού χαρτιού διαστάσεων 12Χ1,5 cm, αφήνοντας και τα δύο άκρα της ταινίας καθαρά. Το ένα άκρο της ταινίας βυθίζεται σε δοκιμαστικό σωλήνα, το ένα τέταρτο του οποίου είναι γεμάτο με νερό και το άλλο σφίγγεται με πώμα. Οι δοκιμαστικοί σωλήνες τοποθετούνται σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία +26... + 28°C. Οι προνύμφες που αναπτύσσονται από τα αυγά κατεβαίνουν μέσω του διηθητικού χαρτιού και κατακάθονται στον πυθμένα του δοκιμαστικού σωλήνα. Μετά από 5-6 ημέρες, η λωρίδα χαρτιού αφαιρείται και το υγρό που παραμένει στον δοκιμαστικό σωλήνα εξετάζεται με μεγεθυντικό φακό ή φυγοκεντρείται. Το ίζημα που σχηματίζεται κατά τη φυγοκέντρηση εξετάζεται σε μικροσκόπιο φωτός. Όταν χρησιμοποιείται αντί για τετραεδρικούς σωλήνες γυάλινα βάζα(μέγεθος 15ХХХ7 cm), στους τοίχους των οποίων είναι προσαρτημένες 4 λωρίδες χαρτιού, η αποτελεσματικότητα των αναλύσεων αυξάνεται (G. M. Maruashvili et al., 1966).

Μέθοδοι εξέτασης για σχιστοσωμίαση . Εξέταση κοπράνων - ένα μέρος των κοπράνων αναμιγνύεται με 250 ml νερού, φιλτράρεται μέσω 3 στρώσεων γάζας σε ένα κωνικό δοχείο, το οποίο γεμίζει μέχρι την κορυφή με νερό. Μετά από 30 λεπτά, το υγρό στρώμα στραγγίζεται και ένα φρέσκο ​​μέρος νερού προστίθεται στο ίζημα. Το ίζημα πλένεται έως ότου ληφθεί ένα διαυγές υπερκείμενο και εξετάζεται υπό μικροσκόπιο.

Μέθοδος προνυμφοσκόπησης - 20-25 g περιττωμάτων τοποθετούνται σε μια φιάλη Erlenmeyer με ένα γυάλινο σωλήνα συγκολλημένο στο πλάι, στραμμένο προς τα πάνω και πλένονται νερό βρύσης. Στη συνέχεια, η φιάλη καλύπτεται με σκούρο χαρτί, αφήνοντας ένα συγκολλημένο γυάλινο σωλήνα στο φως σε θερμοκρασία +25...+30°C. Τα εκκολαφθέντα miracidia συγκεντρώνονται στον μηνίσκο στον πλευρικό σωλήνα, όπου φαίνονται με μεγεθυντικό φακό ή με γυμνό μάτι. Εξέταση ούρων - 100 ml ούρων που συλλέγονται μεταξύ 10 π.μ. και 2 μ.μ., ή μια ημερήσια δόση, καθιζάνουν και στη συνέχεια φυγοκεντρούνται στις 1500 rpm. Το προκύπτον ίζημα εφαρμόζεται* σε μια γυάλινη πλάκα και εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Ο ΠΟΥ συνιστά μια μέθοδο φιλτραρίσματος ολόκληρου του δείγματος ούρων. Μετά τη διήθηση, τα φίλτρα υποβάλλονται σε επεξεργασία με φορμαλδεΰδη ή θερμαίνονται (για να σκοτωθούν τα αυγά) και στη συνέχεια υγραίνονται υδατικό διάλυμανινυδρίνη. Σε αποξηραμένα παρασκευάσματα, τα έμβρυα αυγών αποκτούν μωβ χρώμα.

Εφαρμογή ανοσολογικών Οι μέθοδοι έρευνας για τη διάγνωση της σχιστοσωμίασης σχετίζονται με δυσκολίες, καθώς τα ενήλικα σχιστοσωμάτια και τα αυγά τους περιέχουν μεγάλο αριθμό αντιγόνων που προκαλούν ανοσολογικές αντιδράσεις, τα οποία δεν είναι ειδικά για τα είδη (D. Bradley, 1979).

Στη χώρα μας για παραγωγή ανοσολογικές αντιδράσειςγια την ελμινθίαση απελευθερώνεται ολόκληρη γραμμήτυπικά διαγνωστικά. Πρακτική χρήσηέχουν αλλεργία δερματικό τεστγια εχινοκοκκίαση και κυψελιδική, RLA με αντιγόνο εχινόκοκκου, RSC στο κρύο, αντίδραση κατακρήμνισης στο κρύο σε διάφορες τροποποιήσεις (κατακρήμνιση δακτυλίου, κατακρήμνιση σε δοκιμαστικούς σωλήνες ή τριχοειδή αγγεία, που τοποθετούνται με αντιγόνα τριχίνωσης, κυστεκέρκωσης και ημικροασκαρίασης). Τα τυπικά διαγνωστικά κιτ για την εκτέλεση των προαναφερθέντων ορολογικών αντιδράσεων παράγονται από επιχειρήσεις που παράγουν βακτηριακά σκευάσματα. Ο κατασκευαστής περιλαμβάνει με τα διαγνωστικά κιτ που παράγονται αναλυτικές οδηγίεςσχετικά με τους κανόνες αποθήκευσης, τη διάρκεια ζωής του φαρμάκου και οδηγίες για τη χρήση των σχετικών αντιγόνων με την τεχνική της σταδιοποίησης της αντίδρασης.

ΣΕ τα τελευταία χρόνιαο κατάλογος των ορολογικών εξετάσεων που χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση των ελμινθασών έχει διευρυνθεί σημαντικά. Για το σκοπό αυτό, χρησιμοποιούνται οι ακόλουθες αντιδράσεις: RIGA, έμμεσος ανοσοφθορισμός (RIF), ανοσοδιάχυση γέλης (RID), αντιανοσοηλεκτροφόρηση (VIEF), REAMA. Αυτές οι αντιδράσεις μπορούν να χρησιμοποιηθούν για ασκαρίαση, τοξοκαρίαση, τριχίνωση, λοιμώξεις από αγκυλόστομα, φιλαρίαση, εχινοκοκκίαση και κυψελιδική, οπισθορχίαση, σχιστοσωμίαση, παραγονιμίαση. Ωστόσο, για αυτές τις αντιδράσεις στη χώρα μας δεν εκδίδονται τυπικά διαγνωστικά και δεν ρυθμίζεται η τεχνική ρύθμισης τους. Ξεχωριστά εργαστήρια, ως επί το πλείστον επιστημονικά, παρασκευάζουν τα δικά τους ειδικά αντιγόνα και τα χρησιμοποιούν σε διάφορες τροποποιήσεις. Η περιγραφή αυτών των μεθόδων παρουσιάζεται ευρέως στη βιβλιογραφία και δεν είναι αυστηρά ενοποιημένη. Η ερμηνεία των ανοσολογικών δεδομένων θα πρέπει να βασίζεται στη μελέτη της δυναμικής της ανοσολογικής απόκρισης, λαμβάνοντας υπόψη το επίπεδο ειδικότητας και ευαισθησίας κάθε εφαρμοζόμενης ορολογική αντίδραση. Ως εκ τούτου, κατά τη διάγνωση, καθώς και κατά τη διάρκεια οροεπιδημιολογικών ερευνών του πληθυσμού, συνιστάται η χρήση πολλών από τις πιο ευαίσθητες αντιδράσεις. Από αυτή την άποψη, οι αντιδράσεις VIEF και REMA, που διαφέρουν υψηλή ευαισθησίακαι αρκετά υψηλή ειδικότητα (P. Ambroise-Thomas, 1978, I. E. Ballad, 1979, G. M. Negryanu, 1980, A. M. Ponomareva, 1981, A. Ya. Lysenko, 1978, κ.λπ.). Η αποτελεσματικότητα του REAMA έχει δοκιμαστεί στην αμεβίαση, τη λεϊσμανίαση, την τρυπανοσωμίαση και την τοξοπλάσμωση (GA Ermolin, 1980).