Taksonomia, pneumokoku, metodat laboratorike të gripit

MINISTRIA E SHËNDETËSISË E FEDERATËS RUSE DEPARTAMENTI I MIKROBILOGJISË UNIVERSITETI SHTETËROR MJEKËSOR I KAZANIT

PNEUMOKOKE

Kazan 1999

UDC 576.851.21(07)

Publikuar me vendim të Këshillit Qendror Koordinues dhe Metodologjik të Universitetit Shtetëror të Mjekësisë Kazan.

Përpiluar nga:

(Shef i Departamentit të Mikrobiologjisë, Doktor i Shkencave Mjekësore, Profesor O.K. Pozdeev, asistent i Departamentit të Mikrobiologjisë, Ph.D., E.R. Fedorova.

Rishikuesit:

Shefi i Departamentit të Epidemiologjisë, Universiteti Shtetëror Mjekësor Kazan, Doktor i Shkencave Mjekësore, Profesor i Asociuar M.Sh. Shafeev, Shef i Departamentit të Epidemiologjisë të Akademisë Mjekësore Shtetërore të Kazanit, Doktor i Shkencave Mjekësore, Profesor V.E. Grigoriev.

Pneumokoket /O.K. Pozdeev, E.R. Fedorov-Kazan: KSMU, 1999. - 14 s.

Duke kopjuar, shpërndarë, publikuar tekstin ose një pjesë të tij në burimet tuaja, ju merrni përgjegjësinë në përputhje me legjislacionin në fuqi.

Ekskluzivisht për përdorimin e veprës për qëllime personale (neni 18, neni 26 i Ligjit të Federatës Ruse "Për të drejtat e autorit dhe të drejtat e afërta"). Riprodhimi komercial është i ndaluar.

Universiteti Mjekësor Shtetëror Kazan, 1999

Pneumokoku (Streptococcus pneumoniae) u identifikua për herë të parë nga Pasteur (1881) ndërsa punonte në një vaksinë kundër tërbimit dhe fillimisht e konsideroi atë si agjentin shkaktar të tërbimit. Roli etiologjik i mikroorganizmit në zhvillimin e pneumonisë tek njerëzit u vërtetua nga Frenkel dhe Weichselbaum (1884). Bakteret kolonizojnë organizmat e njeriut dhe të kafshëve dhe përfshihen në grupin e të ashtuquajturve streptokoke "orale". Ata janë shkaktarët kryesorë të pneumonisë, mund të shkaktojnë gjithashtu pleurit, meningjit, ulçera rrëshqitëse të kornesë, inflamacion purulent të veshit të mesëm, gjendje septike dhe sëmundje të tjera. Në edicionin IX të Burgey Bacteria Key (1994), pneumokokët përfshihen në grupin e 17-të "koke gram-pozitive".

Epidemiologjia e lezioneve. Pneumokoku është një nga shkaktarët kryesorë të pneumonisë bakteriale të regjistruar jashtë spitaleve (2-4 raste për 1000 persona); Të paktën 500,000 raste të pneumonisë pneumokokale vërehen çdo vit në botë (vlera reale është shumë më e lartë). Fëmijët dhe të moshuarit janë më të ndjeshëm ndaj infeksionit. Rezervuari i infeksionit janë pacientët dhe bartësit (20-50% e fëmijëve parashkollorë dhe 20-25% e të rriturve); rruga kryesore e transmetimit është kontakti; gjatë shpërthimeve edhe ajrore. Incidenca kulmore ndodh në sezonin e ftohtë. Në shumicën dërrmuese të rasteve, format klinike të infeksionit zhvillohen kur rezistenca e trupit është e dëmtuar (përfshirë për shkak të stresit të ftohtë), si dhe në sfondin e patologjive të tjera (anemia drapërocitare, sëmundja Hodgkin, infeksioni HIV, mieloma, diabeti mellitus. , gjendjet pas splenektomisë etj.) ose me alkoolizëm. Variantet 1, 2 dhe 3 luajnë rëndësinë më të madhe epidemiologjike në patologjinë tek të rriturit; tek fëmijët - 1, 2, 3 dhe 14 opsione. Virulenca e serovarëve në rend zbritës - 3, 1, 2, 5, 7 dhe 8 opsione. Minjtë e bardhë janë të ndjeshëm ndaj pneumokokut (kur infektohen, ata vdesin nga septicemia brenda një dite), viçat, qengjat, derrat, qentë dhe majmunët.

Morfologjia. Pneumokokët janë të palëvizshëm, nuk formojnë spore, kanë një formë pak të zgjatur, që i ngjan kontureve të flakës së qiririt. Në njolla nga materiali klinik, ato janë të renditura në çifte, secila prej të cilave është e rrethuar nga një kapsulë e trashë. Në njollat ​​nga mjediset e kulturës, ato mund të vendosen në zinxhirë të shkurtër dhe të jenë më të rrumbullakosura. Në media të thjeshta, ato formojnë një kapsulë të hollë; zhvillimi i tij stimulohet nga futja e gjakut, serumit ose lëngut ascitik. Formimi i kapsulës është më i theksuar në bakteret e tipit III. Kur vendoset në zinxhirë, kapsula mund të jetë e zakonshme.

pronat kulturore. Pneumokoket aerobe ose anaerobe fakultative; gjatë kultivimit preferohen kushtet kapnofilike (5-10% CO2). Kimioorganografi dhe rritet mirë në median e gjakut ose serumit, të plotësuar me shtimin e glukozës 0,1%. Ata mund të rriten në intervalin e temperaturës 28-42 °C, optimale është 37 °C. PH optimal -7,6-7,8. Në media të dendura, ato formojnë koloni delikate të tejdukshme, të përcaktuara mirë me një diametër prej rreth 1 mm. Ndonjëherë ato mund të jenë të sheshta me një dhëmbëzim qendror; si streptokokët e tjerë, kolonitë nuk bashkohen kurrë

mes tyre. Në agarin e gjakut, ato formojnë koloni të vogla të tejdukshme me ngjyrë të gjelbër-gri. Qendra e kolonive është më e errët, periferia është më e lehtë. Nën koloninë dhe përgjatë periferisë së saj, një zonë e hemolizës është e dukshme në formën e një zone të zbardhur të gjelbër (për shkak të kalimit të hemoglobinës në methemoglobinë). Kolonitë e pneumokokut të tipit III shpesh kanë një konsistencë mukoze, madhësia e tyre është deri në 2 mm. Ato janë të paqarta, unë mund të shkrihem me njëri-tjetrin. Ata formojnë forma S dhe R të kolonive. Gjatë kalimit nga forma S- në R-formë, ata humbasin aftësinë për të sintetizuar një kapsulë. Në media të lëngshme me serum dhe 0,2% glukozë japin një turbullirë uniforme dhe një precipitat të vogël flokulent. Me kultivim të zgjatur, sedimenti rritet.

Qëndrueshmëria. Pneumokokët i përkasin grupit të mikroorganizmave të paqëndrueshëm. Në sputum të thatë, ato vazhdojnë deri në dy muaj. Mund të ruhet për një kohë të gjatë në temperatura të ulëta; në një temperaturë prej 60 ° C, ata vdesin brenda 3-5 minutash. Një zgjidhje 3% e acidit karbolik i vret ato në 1-2 minuta. Optochin (në një përqendrim 1:100,000) dhe biliare janë të dëmshme për pneumokokët, i cili përdoret për të identifikuar bakteret.

Pneumokokët ndryshojnë nga mikroorganizmat e tjerë në një numër karakteristikash (Tabela 1).

Tabela 1 Vetitë biokimike të pneumokokut

Nënshtresa e provës	Rezultati	Nënshtresa e provës	Rezultati
Rritja në 100°C
		Rafinoza
E mesme me 6,5% Nad
a-hemoliza
B-hemoliza		Trehaloza
		Fosfataza
hipurate		β-galaktozidaza
Glicerina
Emërtimet: "+" - 90% ose më shumë shtame janë pozitive; (+) - 80-89% e shtameve janë pozitive; d - 21-79% e shtameve janë pozitive; (-) - 11-20% e shtameve janë pozitive; “- - 90% ose më shumë e shtameve janë negative.

Struktura antigjenike. Disa lloje të antigjeneve janë gjetur në pneumokok: një polisaharid, antigjen 0-somatik i vendosur në murin qelizor; K-antigjenet kapsulare polisakaride dhe proteina M. Antigjeni somatik i polisakaridit është i ngjashëm me substancën C të streptokokëve të tjerë. Marrëdhënia përcakton ngjashmërinë e strukturës kimike të acideve ributeikoike të lidhura me fosfatin e kolinës. Antigjenet kapsulare kanë gjithashtu një natyrë polisakaride, të përbërë nga monosakaride të përsëritura në kombinime të ndryshme: D-glukozë, D-galaktozë dhe L-ramnozë. Sipas strukturës së antigjeneve kapsulare, pneumokoket ndahen në 84 serovarë. Duhet mbajtur mend se antigjenet kapsulare reagojnë kryq me antisera ndaj antigjeneve streptokokale të grupit A dhe B, si dhe me serumet ndaj antigjeneve Klebsiella dhe Escherichia. Gjatë kalimit nga forma S në R, antigjenet kapsulare humbasin. Për serotipizimin e pneumokokut, prodhohen serumet e grupit, të treguara me shkronja latine (A, B, C, D, etj.) dhe serovarian, të treguar me numra romakë. Serumi III aglutinues nuk përfshihet në përzierjet e serumit. Lëshohet veçmas dhe nuk mund të edukohet. Tek njerëzit, pneumokoket e serotipeve I, II dhe III janë më shpesh të izoluara. Ata janë më virulentët për njerëzit, kështu që reaksioni i aglutinimit vendoset fillimisht duke përdorur antisera për këto variante. Nëse rezultati është negativ, reaksioni i aglutinimit vihet me një përzierje të serumeve A, B, C, etj. (derisa të merret një rezultat pozitiv), dhe më pas me antisera të veçantë. Për identifikimin më të shpejtë të serovarëve, përdoret reaksioni Neufeld (ënjtje imune e kapsulës). Metoda bazohet në aftësinë e kapsulave pneumokokale për të rritur volumin në prani të antiserumit homolog, i cili regjistrohet me mikroskop dritë-optik. Polisakaridet kapsulare kanë veti sensibilizuese, të manifestuara në zhvillimin e një reaksioni të mbindjeshmërisë së tipit të vonuar, të zbuluar duke përdorur teste të lëkurës.

faktorët e patogjenitetit. Faktori kryesor është kapsula, e cila mbron bakteret nga potenciali mikrobicid i fagociteve dhe i largon ato nga veprimi i opsoninave. Llojet jo të kapsuluara janë praktikisht jovirulente dhe janë të rralla. Shumica e grupit të AT-ve anti-pneumokokale janë kapsula AT në Ag. Një funksion i rëndësishëm i kapsulës dhe proteinës M është gjithashtu të sigurojë ngjitjen në mukozën. Substanca-C, e cila ndërvepron në mënyrë specifike me proteinën C-reaktive, është thelbësore. Pasoja e një përgjigjeje të tillë është aktivizimi i kaskadës komplementare dhe çlirimi i ndërmjetësve të fazës akute të inflamacionit; grumbullimi i tyre në indin e mushkërive stimulon migrimin e fagociteve polimorfonukleare. Formimi i infiltrateve të fuqishme inflamatore shoqërohet me një shkelje të homeostazës së indit të mushkërive dhe hepatizimit të tij. Pneumokokët prodhojnë endotoksina, a- dhe b-hemolizina (pneumolizina), leukocidinë. a-pneumolizina është një proteinë termolabile e aftë për të neutralizuar 0-streptolizinën,

substancë eritrogjene, neuraminidazë. Pneumokokët sintetizojnë gjithashtu një numër enzimash që kontribuojnë në patogjenezën e lezioneve - muramidaza, hialuronidaza (promovon përhapjen e mikroorganizmave në inde), peptidazën (shkëput IgA).

Patogjeneza e lezioneve. Biotopi i pneumokokut është trakti i sipërm respirator. Patogjeneza e shumicës së pneumonive përfshin aspirimin e pështymës që përmban S. pneumoniae dhe hyrjen e baktereve në rrugët e poshtme të frymëmarrjes. Shkelja e mekanizmave mbrojtës të kullimit - shoku i kollës dhe pastrimi mukociliar është thelbësor. Tek të rriturit vërehen më shpesh lezione lobare të mushkërive, tek fëmijët dhe të moshuarit dominojnë lezionet peribronkiale ose fokale. Formimi i infiltrateve të fuqishme inflamatore shoqërohet me një shkelje të homeostazës së indit të mushkërive dhe hepatizimit të tij. Infeksionet me serovarin 3 më virulent mund të shoqërohen me formimin e kaviteteve në parenkimën e mushkërive. Nga fokusi parësor, patogjeni mund të depërtojë në zgavrën pleurale dhe në perikardium ose të shpërndahet hematogjenisht dhe të shkaktojë meningjit, endokardit dhe lezione artikulare.

Manifestimet klinike. Pneumonia klasike pneumokokale fillon papritmas; vini re rritjen e temperaturës së trupit, kollën produktive dhe dhimbjen e gjoksit. Në individët e dobësuar dhe të moshuarit, sëmundja zhvillohet ngadalë, me temperaturë të lehtë, dëmtim të vetëdijes dhe shenja të dështimit pulmonar të zemrës. Meningjiti streptokoksik regjistrohet në të gjitha grupmoshat; ato karakterizohen nga një fillim i dhunshëm me rritje të temperaturës së trupit, ngurtësim të muskujve të qafës, dhimbje koke, të përziera dhe të vjella. Lezionet vaskulare meningeale shoqërohen shpesh me humbje të vetëdijes; ndër fëmijët dhe në pleqëri, vdekshmëria mund të arrijë në 80%. Lezionet hematogjene pneumokokale, si dhe sinusiti, mastoiditi, otiti media, endokarditi dhe peritoniti, janë mjaft të zakonshme tek individët me imunitet të kompromentuar (p.sh., të infektuar me HIV) ose pacientë me splenektomi. Pas sëmundjes, zhvillohet imuniteti i paqëndrueshëm, i cili është tip-specifik në natyrë dhe për shkak të shfaqjes së antitrupave kundër polisaharidit tipik kapsular.

Mjekimi. Baza e terapisë për infeksionin pneumokokal është antibiotikët - penicilina, tetraciklina, levomicetina, vankomicina, rifampicina, ceftriaksoni.

Parandalimi. Parandalimi jospecifik i infeksioneve pneumokokale ka për qëllim identifikimin e pacientëve dhe bartësve me trajtimin e tyre të mëvonshëm. Për parandalimin specifik të infeksionit, fëmijët mbi dy vjeç, të rriturit në rrezik, si dhe individë të shëndetshëm gjatë shpërthimit të sëmundjes vaksinohen me vaksinën polisakaride polivalente Pneumovex 23. Ilaçi përmban 23 antigjene polisaharide kapsulare pneumokokale (1, 2, 3, 4, 5, 6B 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 1-9,2F, 22F, 23F, 33F). Antigjenet

pneumokokët janë marrë nga 90% e shtameve të izoluara nga gjaku i pacientëve me infeksion pneumokoku invaziv në SHBA dhe që korrespondojnë me shtamet e hasura në Rusi. Imunizimi kryhet dy herë me një interval prej 5-8 vjetësh.

Pas vaksinimit krijohet imunitet artificial, aktiv, tip specifik.

Diagnostifikimi laboratorik. "Standardi i artë" është izolimi i patogjenit. Duhet mbajtur mend se materiali duhet të ekzaminohet shpejt, sepse. bakteret janë të prirura për autolizë të shpejtë për shkak të aktivitetit të enzimeve ndërqelizore. Materiali për studimin është sputum, derdhje pleural dhe eksudate të tjera, lëngu cerebrospinal, gjak, mukozë nga hunda dhe fyti, shkarkimi nga ulçera e syrit, shkarkimi nga veshi, urina, pjesët e organeve (në rast vdekjeje të pacientit) . Një përgjigje sinjalistike ndaj infeksionit pneumokokal mund të lëshohet nëse neutrofile dhe diplokokë heshtak gram-pozitiv zbulohen në njollat ​​e pështymës (të paktën 10 për fushë shikimi). Përndryshe, drejtohuni në izolimin e patogjenit.

Faza e parë e studimit. Materiali patologjik i nënshtrohet bakteroskopisë paraprake (përveç gjakut). Pështyma vendoset në një enë Petri sterile, lahet, kapet një gungë purulente-mukoze me një lak, fërkohet në një rrëshqitje qelqi, thahet dhe njolloset sipas Gramit. Në njollë gjenden koke heshtak ose në formë ovale gram-pozitive të rrethuara nga një kapsulë (formimi i kapsulës vërehet vetëm në pneumokoket e izoluar nga kafshët e sëmura dhe të infektuara). Identifikimi i kapsulave pneumokokale mund të kryhet duke përdorur metodën Burri-Gins. Inokulimi i materialit patologjik kryhet në 5-10% gjak ose serum agar dhe mjedis pasurues (8-10% supë serumi). Nëse dyshohet për sepsë pneumokokale, 5-10 ml gjak të pacientit inokulohet në 45-90 ml supë serumi. Lëngu cerebrospinal, nëse është i qartë, centrifugohet dhe disa pika nga sedimenti inokulohen në mjedise ushqyese. Agari i serumit gjysmë i lëngshëm përdoret si mjet pasurues. Kulturat inkubohen në 37°C për 24 orë. Metoda më e mirë për izolimin e një kulture të pastër të pneumokokut është infektimi i minjve të bardhë me material patologjik. Pështyma, e larë në një enë Petri me kripë sterile, bluhet në një llaç steril me një shtypës steril ose gotë të thyer me shtimin e kripës në një raport 1:2-1:5. Suspensioni vendoset, supernatanti në sasi prej 0,5-1 ml u jepet minjve të bardhë në mënyrë intraperitoneale. Në prani të pneumokokut në material, minjtë vdesin brenda 72 orëve. Në njolla nga organet dhe gjaku, gjenden pneumokoket tipike. Organet dhe gjaku kultivohen gjithashtu në lëngun e serumit dhe në enët Petri me gjak ose agar serum.

Faza e dytë e studimit. Studioni natyrën e rritjes në mjediset ushqyese. Në agarin e gjakut, kolonitë pneumokokale janë të vogla, të rrumbullakëta, të lëmuara

skajet, të buta, të rrethuara nga një zonë e gjelbërimit të mjedisit (që të kujton shumë rritjen e streptokokëve të gjelbër). Në serum agar, kolonitë janë të buta, të tejdukshme dhe transparente. Me bakteroskopi të njollave të ngjyrosura nga Gram. gjeni diplokoke gram-pozitive pa kapsula. Pas bakteroskopisë, kolonitë e dyshuara për pneumokok nënkulturohen në serum të pjerrët ose në agar të gjakut ose në supë serumi. Mikroskopi i njollave nga mjedisi pasurues, së bashku me mikroflora të ndryshme, mund të zbulojë koke gram-pozitive të renditura në çifte ose zinxhirë të shkurtër. Materiali nga mjedisi pasurues transferohet në mjedise të ngurta ushqyese. Të mbjellat inkubohen në 37°C për 24 orë.

Faza e tretë e studimit. Në pjerrësinë e agarit të gjakut, pneumokokët formojnë një shtresë delikate, të hollë dhe të tejdukshme. Në lëngun e hirrës, pneumokokët shkaktojnë turbullirë dhe sediment të lehtë. Në njollat ​​nga mjediset e kulturës së ngurtë, pneumokokët mund të kenë një pamje të ndryshme. Së bashku me diplokokët e një forme të zgjatur me skajet e jashtme të theksuara që ngjajnë me një flakë qiri, ka qeliza të formës së saktë ovale dhe të rrumbullakët. Në kulturën e supës, pneumokokët shpesh vendosen në zinxhirë. Bazuar në vetitë morfologjike dhe kulturore të pneumokokut, është e vështirë të dallosh nga streptokokët viridescent, prandaj është propozuar një grup testesh speciale për diferencimin e tyre:

Tretshmëria në biliare (testi i deoksikolatit);

Aftësia për të dekompozuar inulinën;

Ndjeshmëria ndaj optokinës;

Reaksioni i aglutinimit me serum specifik anti-pneumokoks;

Aftësia për të degraduar glukozën, maltozën, saharozën, laktozën, manitolin, sorbitolin dhe salicinën.

Metodat më të arritshme që dallojnë pneumokokët nga streptokokët e tjerë janë një test me optokin (frenon rritjen e tyre); nga streptokokët e gjelbër dallohen nga aftësia për të fermentuar inulinën, si dhe ndjeshmëria ndaj biliare.

Testi i deoksikolatit. Pas një bakteroskopie paraprake, 10 pika të kulturës së pastër të izoluar (mundësisht lëng mishi) shtohen në një epruvetë me 5 pika biliare sterile të gjedhit. Kontrolli është një kulturë e futur në një epruvetë me 5 pika kripë. Pas 30-60 minutash inkubacion në 37°C, vërehet lizë e plotë e kulturës në formë pastrimi në epruvetën me biliare, përzierja mbetet e turbullt në epruvetën e kontrollit. Duhet mbajtur mend se kulturat avirulente të pneumokokut janë rezistente ndaj biliare.

Rezistenca biliare mund të testohet edhe me inokulim në supë biliare 10%. Materiali i provës i shtohet mediumit, ndërkohë që lëngu bëhet i turbullt. Pas një inkubimi 24-orësh në 37°C, prania e pneumokokeve do të tregohet duke pastruar lëngun si rezultat i lizës bakteriale.

Ju gjithashtu mund të përdorni disqe të njomur në një tretësirë ​​biliare 20%. Disqet vendosen në kulturën e rritur në enë dhe inkubohen për 1-2 orë në 37°C. Në prani të pneumokokut, kolonitë lizohen rreth diskut në një distancë prej 1-2 mm.

Testi i inulinës. Kultura e pneumokokut mbillet në mjedis me inulinë. Për ta bërë këtë, 200 ml ujë të distiluar steril, 18 ml tretësirë ​​lakmusi dhe 3 g inulinë shtohen në 100 ml serum gjedhi të ngrohur në 56 ° C për 30 minuta, sterilizuar me avull të rrjedhshëm për 30 minuta. Kulturat inkubohen në 37°C për 24 orë. Pneumokoku dekompozon inulinën, duke bërë që mediumi të kthehet në të kuqe. Streptokoku i gjelbër nuk shkakton skuqje të mjedisit.

Provoni me optokin. Kultura pneumokokale e provës inokulohet në lëngun e serumit me optokinë në një hollim prej 1:100,000 ose 1:200,000. Pneumokoku nuk rritet në një mjedis të tillë. Është gjithashtu e mundur të përcaktohet ndjeshmëria ndaj optokinës me inokulim në agar gjaku 10% që përmban optokin në një hollim prej 1:50,000. Kontrolli është kultura në agar të gjakut. Pneumokokët nuk rriten në mjedis me Optochin; rritja e pneumokokut vërehet në mjedisin e kontrollit. Mund të përdorni disqe të ngopura me 6 μg optokin, të cilat aplikohen pas inokulimit në sipërfaqen e mediumit. Në pneumokoket, rreth diskut formohet një zonë e frenimit të rritjes prej të paktën 18 mm në diametër.

Testi i virulencës. Kultura ditore e pneumokokut të rritur në lëngun e hirrës hollohet me 1% ujë pepton steril (pH - 7,6) ose supë pak alkaline në 1:10. Kultura e holluar administrohet në mënyrë intraperitoneale te minjtë e bardhë me peshë 16-20 g në një vëllim prej 0,5 ml dhe vëzhgohet për 72 orë. Nga organet e miut të ngordhur, inokulimet bëhen në media ushqyese dhe njolla-mbresat ekzaminohen mikroskopikisht. Kulturat shumë virulente përfshijnë pneumokokët, të cilët shkaktojnë vdekjen e minjve pas futjes së kulturës në një hollim prej 1:10. Kulturat avirulente nuk shkaktojnë vdekjen e minjve.

Serotipizimi i pneumokokut. Kultura 18-orëshe testohet në testin e mikroaglutinimit Sabin. 4 pika të kulturës pneumokokale aplikohen në një rrëshqitje xhami. Në 1 pikë shtoni një pikë të serumit antipneumokok të tipit 1, në serumin e dytë - të tipit II, në të tretën - serumin - 111, në të 4-tën - një pikë serum normal. Përzierjet në xhami përzihen me një lak dhe ekzaminohen nën një xham zmadhues ose nën një mikroskop me zmadhim të ulët. Në një rast pozitiv, aglutinimi vërehet në një nga tre pikat e para. Lloji i pneumokokut përcaktohet në reaksionin e aglutinimit me serumet aglutinuese specifike të tre llojeve të para fikse. Kulturat që nuk aglutinohen me këto lloj serumesh i caktohen grupit X. Reagimi është vendosur si më poshtë. Hidhni kulturën e lëngut 18-orësh në 0,5 ml në epruveta. Më pas shtoni në një vëllim të barabartë serum, të holluar me kripë në një raport 1:5. Kontrollet janë 2 epruveta, njëra prej të cilave përmban kulturën e provës të përzier me të

serum normal lepuri, dhe tjetri - vetëm kulturën e testit. Përmbajtja e tubave të provës tundet tërësisht dhe vendoset për 2 orë në një termostat në një temperaturë prej 37 °C, pas së cilës kryhet një llogaritje paraprake e reagimit. Rezultatet përfundimtare vihen re pas një inkubimi shtesë në temperaturën e dhomës për 20 orë. Aglutinimi vlerësohet me katër plus nëse përmbajtja e tubave është plotësisht e qartë dhe kultura e aglutinimit është një shtresë e dendur që nuk thyhet kur tundet; me tre pluse nëse, me sqarim të plotë të përmbajtjes së tubit, kultura aglutinuese thyhet lehtësisht në copa; dy pluse - nëse ndriçimi nuk ndodh, grimcat e një kulture të aglutinuar janë qartë të dukshme me sy të lirë në përmbajtjen e turbullt të tubit; me aglutinim me një plus në një epruvetë, gjendet një përzierje e grimcuar e imët e pneumokokëve të ngjitur. Me një reagim negativ të dukshëm për syrin, aglutinimi nuk vërehet;

përmbajtja e provëzave pas lëkundjes është një turbullirë uniforme.

Lloji i pneumokokeve të grupit X kryhet duke përdorur grupin

serumet që përmbajnë një përzierje të serumeve tipike aglutinuese të marra

në vëllime të barabarta. Serumet e grupit të mëposhtëm përgatiten nga

përzierjen e vëllimeve të barabarta të diagnostikimit standard të paholluar

sera (Lund, I960):

A -1, II, IV, V, XVIII serovarë;

Serovarët B - VI, VIII, XIX;

C - VII, XX. Serovarë XXIV, XXXI, XL;

D - IX, XI, XVI, XXXVI. Serovarët XXXVII;

E - X, XXI. Serovarët XXXIII, XXXIX;

F-XII. XVII. Serovarët XXII, XXXVII, XXXII, XLI;

G - XIII, XXV. Serovarët XXIX, XXXIV, XXXV, XXXVIII, XLII, XLVII;

J-XLIII. Serovarët XLIV, XLV, XLVI.

Serumi aglutinues i tipit III përdoret në vetvete (pa u përzier me serumet e tjera tipike) për shkak të vështirësisë së marrjes së tij në një titër mjaftueshëm të lartë. Shtypja kryhet në dy hapa: fillimisht me ndihmën e serumeve grupore, dhe më pas me serumet individuale të grupit me të cilin është marrë një reagim pozitiv. Serotipizimi i pneumokokut përdoret kryesisht për studime epidemiologjike të rezultateve të seroterapisë specifike dhe seroprofilaksisë.

Mikroaglutinimi i pneumokokeve me metodën Sabin mund të arrihet duke përzier serumet anti-pneumokokale me eksudat nga zgavra e barkut të një miu të infektuar me sputumin e pacientit. Tashmë katër orë pas infektimit, në eksudat gjendet një kulturë e pastër pneumokokesh, e cila jep aglutinim pozitiv të Sabinit.

Metoda të përshpejtuara për zbulimin dhe shtypjen e pneumokokut. 1. Metoda Neufeld ose dukuria e ënjtjes së kapsulës pneumokokale. Një gungë e pështymës së sapoizoluar të pacientit aplikohet në tre

mbulesa, secilës prej tyre shtoni një pikë serum specifik antipneumokokal të paholluar (llojet 1, II, III) dhe një pikë blu Loeffler's. Pikat janë të përziera tërësisht, të mbuluara me një rrëshqitje xhami me një vrimë të lyer rreth skajeve me vazelinë. Pas dy minutash, pikat e varura ekzaminohen nën një mikroskop me një sistem zhytjeje. Në një rast pozitiv, vërehet një rritje e mprehtë e kapsulave pneumokokale. Me një rezultat negativ, kapsulat vështirë se vlerësohen. Reagimi i ënjtjes është specifik dhe nuk jep rezultat pozitiv me bakteret e tjera kapsulare. Unë nuk e përdor atë për studimin e pështymës nga pacientët e trajtuar me sulfonamide dhe antibiotikë, tk. në këtë rast mund të izolohen pneumokoket kapsulare.

2. Metoda e reshjeve. 5-10 ml pështymë zihet në një banjë uji derisa të krijohet një mpiksje e dendur. Mpiksja triturohet dhe shtohet një sasi e vogël kripur, zihet sërish për disa minuta për të nxjerrë polisaharidin specifik nga pneumokokët. Pezullimi centrifugohet, me lëngun e pastër që rezulton dhe serumin tipik specifik në tubat e precipitimit, kryhet një reaksion precipitimi unazor. Shfaqja e një unaze në ndërfaqen midis lëngjeve tregon një rezultat pozitiv.

3. Përcaktimi i kapsulave pneumokokale sipas Burrit. Një pikë e materialit testues dhe një pikë boje aplikohen në fund të rrëshqitjes së xhamit. Përzierja përzihet dhe bëhet një njollë, thahet në ajër dhe pa fiksim mikroskopikisht. Sfondi i ilaçit është i errët me tym, trupat mikrobikë dhe kapsulat e tyre nuk janë të njollosura. Përgatitja e bërë sipas Burri mund të fiksohet me përzierjen e Nikiforov, të lahet me ujë, të lyhet me Tsilya fuchsin, të holluar 1:3 për 3-5 minuta. Në sfondin e errët të njollosjes, dallohen kapsulat e panjollosura, brenda të cilave ka baktere me ngjyrë të kuqe të ndezur (metoda Gins).

fruth i keq shkaktojnë serotipe të ndryshme të streptokokeve beta-hemolitike me antigjen M dhe prodhojnë eritrogjeninë (streptokoke toksigjene të serogrupit A) - (Streptococcus pyogenes). Në mungesë të imunitetit antitoksik, shfaqet skarlatina, në prani të anginës.

Pamja klinike

 Intoksikim - ethe, keqtrajtim i përgjithshëm, dhimbje koke.

 Skuqja e Skarlatinës - me pika të imta, me presion të moderuar me shpatull xhami, njollat ​​duken më qartë. Kur shtypet më fort, skuqja i jep vendin një ngjyre lëkure të verdhë-artë. Shfaqet në ditën e 1-3 të sëmundjes dhe lokalizohet kryesisht në faqe, në ijë, në faqet anësore të trupit. Lëkura e trekëndëshit nasolabial mbetet e zbehtë dhe pa skuqje. Skuqja zakonisht zgjat 3-7 ditë, pastaj zbehet, duke mos lënë pigmentim. Karakterizohet nga një trashje e skuqjes në palosjet e gjymtyrëve - zonat axillare, bërryl, popliteale.

 Gjuha e kuqe e ndezur - në ditën e 2-4 të sëmundjes, gjuha e pacientit bëhet e theksuar kokrra, e kuqe e ndezur, e ashtuquajtura gjuha "e kuq".

 Angina është një simptomë konstante e skarlatinës. Mund të jetë më e rëndë se dhimbja e zakonshme e fytit.

 Qërimi i lëkurës - ndodh pas zhdukjes së skuqjes (14 ditë pas fillimit të sëmundjes): në zonën e shuplakave dhe këmbëve është lamelare, duke filluar nga majat e gishtave; në trung, qafë, auricles lëkurë me luspa.

Pneumokoket, taksonomia. Vetitë. Grupet serologjike. Tipare dalluese nga streptokokët e tjerë. Sëmundjet e shkaktuara. Parimet dhe metodat e diagnostikimit laboratorik.

Morfologjia dhe vetitë biologjike. Pneumokokët (Streptococcus pneumoniae) janë koke të çiftëzuara të një forme heshtak ovale, pak të zgjatur, që i ngjan flakës së qiririt. Ato gjithashtu mund të vendosen në zinxhirë të shkurtër, të ngjashëm me streptokoket. Ato janë jolëvizëse, nuk formojnë spore dhe janë gram-pozitive.
Rriten në media me shtimin e proteinave: gjak, serum, me lëng ascitik. Në agarin e gjakut, kolonitë pneumokokale janë të vogla, të ngjashme me pikat e vesës, transparente në dritën e transmetuar, me një qendër të dëshpëruar, të rrethuar nga një zonë e hemolizës jo të plotë, një nuancë jeshile, e ngjashme me kolonitë e streptokokut viridescent. Në media të lëngshme, ato japin një turbullirë të butë, ndonjëherë duke formuar një precipitat. Ata janë mjaft aktivë biokimikisht: zbërthejnë glukozën, laktozën, maltozën, inulinën dhe karbohidratet e tjera me formimin e acidit, nuk lëngëzojnë xhelatinën, nuk formojnë indol. Ndarja e inulinës është një veçori diagnostike diferenciale që ndihmon në dallimin e pneumokokeve nga streptokokët, të cilët nuk e zbërthejnë inulinën. Një tipar i rëndësishëm dallues është aftësia e pneumokokeve për t'u tretur në biliare, ndërsa streptokoket ruhen mirë në të.

Patogjeneza dhe klinika. Pneumokokët janë agjentët shkaktarë të pneumonisë lobare te njerëzit. Ato gjithashtu mund të shkaktojnë ulçera rrëshqitëse të kornesë, katara të rrugëve të sipërme të frymëmarrjes, meningjit, endokardit, dëmtime të kyçeve dhe sëmundje të tjera.

Pas sëmundjes, imuniteti është i tensionuar i ulët, afatshkurtër, tip specifik.
Diagnostifikimi mikrobiologjik. Materiali për studimin është sputum, gjak, shtupë fyti, lëng cerebrospinal. Për shkak të faktit se pneumokoku vdes shpejt, materiali patologjik duhet të dorëzohet në laborator sa më shpejt të jetë e mundur për kërkime.

Meningokoku. Taksonomia, vetitë. Struktura antigjenike e meningokokut, klasifikimi. Patogjeneza e infeksionit meningokokal, manifestimet klinike. Parimet dhe metodat e diagnostikimit mikrobiologjik. Diferencimi i agjentit shkaktar të infeksionit meningokokal dhe meningokokëve të tjerë. profilaksë specifike.

N. meningitidis (meningokokët).

Meningokoku është agjenti shkaktar i infeksionit meningokokal - një antroponozë e rëndë me transmetimin e pikave ajrore të patogjenit. Burimi kryesor janë transportuesit. Rezervuari natyror është nazofaringu i njeriut. Vetitë morfologjike, kulturore dhe biokimike janë të ngjashme me gonokokun. Dallimet - ata fermentojnë jo vetëm glukozën, por edhe maltozën, prodhojnë hemolizinë. Ata kanë një kapsulë që është më e madhe dhe ka një strukturë të ndryshme nga ajo e gonokokut.

përbërje antigjenike. Ata kanë katër sisteme kryesore antigjenike.

1. Antigjene polisakaride specifike të grupit kapsulor. Llojet e serogrupit A shkaktojnë më së shpeshti shpërthime epidemike.

2. Antigjenet proteinike të membranës së jashtme. Sipas këtyre antigjeneve, meningokoket e serogrupeve B dhe C ndahen në klasa dhe serotipe.

3. Antigjenet specifike për gjini dhe specie.

4. Antigjenet lipopolisakaride (8 lloje). Ata kanë një toksicitet të lartë, shkaktojnë një efekt pirogjenik.

faktorët e patogjenitetit. Faktorët e ngjitjes dhe kolonizimi - pili dhe proteinat e membranës së jashtme. Faktorët e invazivitetit - hialuronidaza dhe enzimat e tjera të prodhuara (neuraminidaza, proteazat, fibrinolizina). Me rëndësi të madhe janë antigjenet polisakaride kapsulare që mbrojnë mikroorganizmat nga fagocitoza.

Imuniteti rezistent, antimikrobik.

Diagnostifikimi laboratorik në bazë të bakteroskopisë, izolimit të kulturës dhe identifikimit biokimik të saj, metodave diagnostikuese serologjike. Inokulimi i materialit kryhet në mjedise ushqyese të ngurta dhe gjysmë të lëngshme që përmbajnë gjak, lëng ascitik dhe serum gjaku.

Kulturat me oksidazë pozitive konsiderohen se i përkasin gjinisë Neisseria. Meningokoku karakterizohet nga fermentimi i glukozës dhe maltozës. Përkatësia në serogrup përcaktohet në testin e aglutinimit (RA).

Gonokoku. Taksonomia, vetitë. Patogjeneza e infeksionit gonokokal, veçoritë e imunitetit. Parimet dhe metodat e diagnostikimit laboratorik të gonorresë akute dhe kronike, blenorresë. RSK Borde-Zhangu, qëllimi, mekanizmi, kontabiliteti i përgjigjes. Parandalimi i blennorresë tek të porsalindurit. Parandalimi dhe trajtimi i gonorresë. terapi specifike.

N.gonorrheae (gonokok).

Gonokoku është agjenti shkaktar i gonorresë, një sëmundje seksualisht e transmetueshme me manifestime inflamatore në traktin urinar. Substrati për kolonizim është epiteli i uretrës, rektumit, konjuktivës së syrit, faringut, qafës së mitrës, tubave fallopiane dhe vezores.

Diplokokët njollosen mirë me blu metilen dhe ngjyra të tjera aniline, pleomorfe (polimorfizëm). Shumë çuditshëm për kushtet e kultivimit dhe mjediset ushqyese. Nga karbohidratet, vetëm glukoza fermentohet.

Struktura antigjenike shumë e ndryshueshme - karakterizohet nga variacione fazore (zhdukja e përcaktuesve antigjenikë) dhe variacione antigjenike (ndryshime në përcaktuesit antigjenikë).

faktorët e patogjenitetit. Faktorët kryesorë janë piu, me ndihmën e të cilave gonokoket kryejnë ngjitjen dhe kolonizimin e qelizave epiteliale të mukozës së traktit urinar, dhe lipopolisakaridi(endotoksina, e çliruar gjatë shkatërrimit të gonokokëve). Gonokokët sintetizojnë IgAI, një proteazë që copëton IgA.

Diagnostifikimi laboratorik. Diagnoza bakterioskopike përfshin ngjyrosjen Gram dhe blu metilen. Shenjat tipike të gonokokut janë ngjyrosja gram-negative, diplokokët në formë fasule, lokalizimi brendaqelizor.

Mbjellja kryhet në media speciale (KDS-MPA nga mishi i lepurit ose zemra e gjedhit me serum, ascit-agar, agar gjaku).

Agjentët shkaktarë të infeksionit anaerobik të gaztë. Taksonomia. Vetitë. karakteristikat e toksinave. Patogjeneza, format klinike. Parimet dhe metodat e diagnostikimit laboratorik, barnat për parandalimin dhe trajtimin specifik.

Gangrena e gazit është një infeksion anaerobik poliklostridial (d.m.th. i shkaktuar nga lloje të ndryshme të klostrideve) plagë (traumatike). Rëndësi parësore ka C.perfringens, më rrallë C.novyi, si dhe lloje të tjera të klostrideve në lidhje të vazhdueshme me njëra-tjetrën, koket piogjene aerobe dhe bakteret anaerobe putrefaktive.

C.perfringens është një banor normal i zorrëve të njerëzve dhe kafshëve, ai hyn në tokë me jashtëqitje. Është agjenti shkaktar i infeksionit të plagës - shkakton sëmundje kur patogjeni hyn në plagë në kushte anaerobe. Është shumë invaziv dhe toksigjen. Invaziviteti shoqërohet me prodhimin e hialuronidazës dhe enzimave të tjera që kanë një efekt shkatërrues në muskuj dhe indet lidhëse. Kryesor faktori i patogjenitetit - ekzotoksina, e cila ka efekte hemo-, nekro-, neuro-, leukotoksike dhe vdekjeprurëse. Në përputhje me specifikën antigjenike të ekzotoksinave, ato izolohen serotipet patogjen. Së bashku me gangrenën me gaz, C. perfringens shkakton helmim ushqimor (bazohen në veprimin e enterotoksinave dhe nekrotoksinave).

Karakteristikat e patogjenezës. Në ndryshim nga sëmundjet purulente të shkaktuara nga aerobet, infeksioni anaerobik nuk dominohet nga inflamacioni, por nekrozë, edemë, formim gazi në inde, helmim me toksina dhe produkte të kalbjes së indeve.

Imuniteti- kryesisht antitoksike.

Diagnostifikimi laboratorik përfshin bakteroskopinë e shkarkimit të plagës, izolimin dhe identifikimin e patogjenit, zbulimin dhe identifikimin e toksinës në analizat biologjike duke përdorur një reaksion neutralizimi me antitrupa specifikë antitoksikë.

Parandalimi dhe trajtimi. Parandalimi i gangrenës së gazit bazohet në trajtimin kirurgjik në kohë dhe korrekt të plagëve. Në rast të plagëve të rënda, serumet antitoksike administrohen kundër llojeve kryesore të klostridiumit, 10 mijë IU secili, për qëllime mjekësore - 50 mijë IU secili.

Clostridia tetanus. Taksonomia. Vetitë, karakteristikat e toksinave. Patogjeneza e sëmundjes. Tetanus zbritës. Klinika. Parimet dhe metodat e diagnostikimit laboratorik. Qëllimi i hulumtimit bakteriologjik, përgatitjet për parandalim dhe trajtim specifik.

Tetanusi është një infeksion akut i plagës i karakterizuar nga lezione neurotoksina qelizat motorike të palcës kurrizore dhe trurit, që manifestohet në formën e spazmave të muskujve të strijuar. Njerëzit dhe kafshët e fermës sëmuren. Toka, veçanërisht e kontaminuar me feçe të njerëzve dhe kafshëve, është një burim i vazhdueshëm i infeksionit të tetanozit.

Patogjen - C.tetani - bacil i madh gram-pozitiv që formon spore. Sporet janë të vendosura terminale (një lloj daulleje), të lëvizshme për shkak të flagjelave - peritrikoze. Anaerobe e detyrueshme. Sporet janë shumë rezistente.

vetitë antigjenike. Agjenti shkaktar ka antigjene O- dhe H-.

faktorët e patogjenitetit. Faktori kryesor është ekzotoksina më e fortë. Dallohen dy fraksionet kryesore të saj - tetanospasmina (neurotoksina) dhe tetanolizina (hemolizina). Neurotoksina në sistemin nervor qendror depërton në zonën e sinapsave mioneurale, transmetohet nga neuroni në neuron në zonën e sinapave, grumbullohet në zonat motorike të shtyllës kurrizore dhe trurit, bllokon transmetimin sinaptik. Vdekja ndodh nga paraliza e qendrës së frymëmarrjes, asfiksia (dëmtimi i muskujve të laringut, diafragma, muskujt ndër brinjë) ose paraliza e zemrës.

Diagnostifikimi laboratorik. Diagnostifikimi mikrobiologjik përfshin bakterioskopinë e lëndëve të para, kulturën për izolimin e patogjenit dhe identifikimin e tij, zbulimin e toksinës së tetanozit.

Izolimi i patogjenit kryhet sipas skemës standarde për anaerobet, duke përdorur media të ndryshme të dendura dhe të lëngshme (medium Kitt-Tarozzi), identifikimi bazohet në vetitë morfologjike, kulturore, biokimike dhe toksigjene.

Metoda më e thjeshtë dhe më efektive e diagnostikimit mikrobiologjik është një analizë biologjike në minjtë e bardhë. Njëri grup është i infektuar me materialin e testimit, i dyti (kontrolli) - pas përzierjes së mostrave me serum antitoksik tetanusi. Në prani të toksinës së tetanozit, grupi eksperimental i minjve vdes, ndërsa grupi i kontrollit mbetet i gjallë.

Trajtimi dhe parandalimi emergjent. Përdoren imunoglobulina tetanozit të donatorëve (antitoksinë), serumi antitoksik (350 IU/kg), antibiotikët (penicilinat, cefalosporinat). Për të krijuar imunitet të vaksinës, përdoret toksoidi i tetanozit, më shpesh si pjesë e vaksinës DTP (toksoidet e tetanozit, difteria dhe kolla e vrarë).

Clostridia botulinum. Taksonomia. Vetitë. Karakteristikat e toksinave, ndryshimi nga ekzotoksinat e patogjenëve të infeksioneve të tjera ushqimore. Parimet dhe metodat e diagnostikimit laboratorik. Barna për parandalim dhe trajtim specifik.

Botulizmi është një helmim i rëndë ushqimor i shoqëruar me përdorimin e produkteve të kontaminuara me C.botulinum dhe karakterizohet nga një lezion specifik i sistemit nervor qendror. Emrin e ka marrë nga lat. botulus - sallam.

Karakteristikat e ngacmuesit. Shufra të mëdha polimorfike gram-pozitive, të lëvizshme, kanë flagjela peritrikoze. Sporet janë ovale, të vendosura në fund (raketa tenisi). Formohen tetë lloje toksinash, të ndryshme në specifikat antigjenike, dhe, në përputhje me rrethanat, izolohen 8 lloje të patogjenit. Ndër karakteristikat më të rëndësishme është prania ose mungesa e vetive proteolitike (hidroliza e kazeinës, prodhimi i sulfurit të hidrogjenit).

Toksina ka një efekt neurotoksik. Toksina hyn në trup me ushqim, megjithëse ndoshta mund të grumbullohet kur patogjeni shumëfishohet në indet e trupit. Toksina është termolabile, edhe pse zierja deri në 20 minuta është e nevojshme për inaktivizimin e plotë. Toksina absorbohet me shpejtësi në traktin gastrointestinal, depërton në gjak, vepron në mënyrë selektive në bërthamat e palcës së zgjatur dhe qelizat ganglionale të palcës kurrizore. Zhvillohen dukuritë neuroparalitike - çrregullimet e gëlltitjes, afonia, disfagjia, sindroma oftalmo-plegjike (strabizmi, shikimi i dyfishtë, rënia e qepallave), paraliza dhe pareza e muskujve të faringut dhe laringut, ndalimi i frymëmarrjes dhe i zemrës.

Diagnostifikimi laboratorik. Parimet janë të përbashkëta për clostridia.

Trajtimi dhe parandalimi. Baza është përdorimi i hershëm i serumeve antitoksike (polivalente ose, kur përcaktohet lloji, homolog). Parandalimi bazohet në regjimin sanitar dhe higjienik në përpunimin e produkteve ushqimore. Kërpudhat e konservuara në shtëpi dhe produktet e tjera të ruajtura në kushte anaerobe janë veçanërisht të rrezikshme.

11. Pseudomonas aeruginosa. Taksonomia. Vetitë. Sëmundjet e shkaktuara.
Roli në infeksionet spitalore. Parimet dhe metodat e diagnostikimit laboratorik.

Gjinia pseudomonas, P. aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa) është një nga shkaktarët kryesorë të proceseve purulente-inflamatore lokale dhe sistemike në spitalet mjekësore.

Patogjeni është i kudondodhur (ujë, tokë, bimë, kafshë), shfaqet normalisht te njerëzit (më shpesh në zorrët, në lëkurë dhe në mukozën). Morfologjia- Shufra gram-negative e drejtë ose pak e lakuar, e lëvizshme, e vendosur në njolla të vetme, në çifte ose në zinxhirë të shkurtër. Sintetizon mukozën (substanca kapsulare), veçanërisht shtamet mukoide më virulente.

pronat kulturore.Është aerobe dhe ka një grup enzimash që i përgjigjen llojit të frymëmarrjes (citokrome, citokrom oksidazë, dehidraza).Në mjediset e lëngëta formon një shtresë gri-argjendi.Në mjediset e dendura vërehet shpesh dukuria e lizës së ylbertë. fundi i ditës për shkak të sintezës së pigmentit piocianin shfaqet një ngjyrë blu-jeshile e kulturës.

vetitë biokimike. Pseudomonas aeruginosa karakterizohet nga aktivitet i ulët sakarolitik (oksidon vetëm glukozën), aktivitet të lartë proteolitik dhe formimi i një zone beta-hemolize në agarin e gjakut. Sintetizon trimetilaminë, e cila u jep të korrave një erë të këndshme jasemini. Prodhon prodhimin e bakteriocinave - piocinat.

Vetitë antigjenike dhe patogjene. Antigjenet kryesore të Pseudomonas aeruginosa janë një O-antigjen somatik i grupit specifik dhe një antigjen H flagjelar i tipit specifik. Kompleksi O-antigjenik - një agregat i LPS me proteina dhe lipide të murit qelizor, ka vetitë e endotoksinës, është një nga faktorët kryesorë të patogjenitetit. Pseudomonas aeruginosa ka një grup të madh faktorësh patogjeniteti - endotoksina (LPS, e ngjashme me bakteret e tjera gram-negative), një numër ekzotoksinash - citotoksina, ekzoenzima S, hemolizina, ekzotoksina A (më e rëndësishmja, i ngjan ekzotoksinës së difterisë), enzimat (kolagjenaza). , neuraminidaza, proteaza).

Diagnostifikimi laboratorik. P.aeruginisa mori emrin e saj për ngjyrosjen kaltërosh - jeshile të plagëve dhe veshjeve të shkëputura. Metoda kryesore diagnostike është bakteriologjike. I rëndësishëm është zbulimi i pigmentit piocianin. Trajtimi dhe parandalimi specifik. Nuk ka asnjë parandalim specifik. Me helmimin nga ushqimi dhe disbakteriozën e zorrëve të shkaktuar nga Pseudomonas aeruginosa, një zorrë komplekse - bakteriofag, i cili përfshin pseudomonas fagun, është efektiv. Nga barnat antibakteriale, më shpesh përdoren aminoglikozidet, cefalosporinat dhe kinolonet.

Bakteret gram-negative me kusht patogjene - agjentë shkaktarë të proceseve purulente-inflamatore (Proteus, Klebsiella, shufra e mrekullueshme, etj.), Taksonomia. Karakteristikat e përgjithshme të enterobaktereve. Parimet dhe metodat e diagnostikimit laboratorik.

Gjinia Klebsiella.

Gjinia Klebsiella i përket familjes Enterobacteriaceae. Një tipar i përfaqësuesve të gjinisë është aftësia për të formuar një kapsulë. Lloji kryesor është K. Pneumoniae. Shkakton lezione oportuniste - pneumoni nozokomiale, infeksione të traktit urinar, diarre tek të porsalindurit. Klebsiella shkaktojnë mastitë, septicemi dhe pneumoni te kafshët, gjenden vazhdimisht në lëkurën dhe mukozën e njerëzve dhe kafshëve. Klebsiella - shkopinj të drejtë, të palëvizshëm të madhësive të ndryshme. anaerobe fakultative. Oksidaza - negative, katalaza - pozitive.

faktorët e patogjenitetit. Këto përfshijnë një kapsulë polisakaridi (antigjen K), endotoksina, fimbria, sistemi siderofor (lidh jonet hekuri dhe zvogëlon përmbajtjen e tyre në inde), ekzotoksina termolabile dhe të qëndrueshme termike.

Manifestimet klinike. K.pneumoniae (subsp. pneumoniae) karakterizohet nga bronkit dhe bronkopneumoni spitalore, pneumoni lobare, infeksione të traktit urinar, lezione të meningjeve, kyçeve, shtyllës kurrizore, syve, si dhe bakteremi dhe septikopemi. Nëngrupi ozaenae shkakton një formë të veçantë të rinitit atrofik kronik - liqeni.

Diagnostifikimi laboratorik. Metoda kryesore është bakteriologjike. Mjekimi. Një nga veçoritë e Klebsiella është rezistenca e tyre me shumë ilaçe dhe zhvillimi i lezioneve në sfondin e uljes së rezistencës së trupit. Antibiotikët përdoren për format kronike të përgjithësuara dhe të ngadalta të Klebsiellesis, zakonisht në kombinim me ilaçe që stimulojnë sistemin imunitar.

Gjinia Proteus.

Gjinia Proteus i përket familjes Enterobacteriaceae. Gjinia u emërua për nder të djalit të Poseidon Proteus, i aftë për të ndryshuar pamjen e tij. Përfaqësuesit e gjinisë janë në gjendje të ndryshojnë manifestimet e jashtme të rritjes në media të dendura ushqyese, dhe gjithashtu dallohen nga pleomorfizmi më i madh (ndryshueshmëria morfologjike) në krahasim me Enterobakteret e tjera.

Proteinat shpërbëjnë tirozinën, rivendosin nitratet, oksidaza është negative, katalaza është pozitive. Ata jetojnë në zorrët e shumë llojeve të vertebrorëve dhe jovertebrorëve, në tokë, ujëra të zeza dhe mbetje organike të kalbura. Mund të shkaktojë infeksione të traktit urinar te njerëzit, si dhe lezione septike te pacientët me djegie dhe pas operacionit. Shumë shpesh ato shkaktojnë edhe helmim nga ushqimi. P.vulgaris dhe P.mirabilis kanë rolin më të zakonshëm në patologji.

pronat kulturore. Proteat rriten në media të thjeshta në një gamë të gjerë temperaturash. PH optimale është 7.2-7.4, temperatura është nga +35 në 37 gradë Celsius. Kolonitë e Proteusit në formën O janë të rrumbullakosura, gjysmë transparente dhe konvekse, format H japin rritje të vazhdueshme. Rritja e proteinave shoqërohet me një erë të kalbur. Fenomeni i grumbullimit është karakteristik, format H i japin MPA një rritje karakteristike zvarritëse në formën e një velloje delikate të kaltërosh-tymuese. Kur mbillet sipas metodës Shushkevich në lagështinë e kondensimit të MPA të sapoprerë, kultura ngrihet gradualisht në formën e një velloje lart në sipërfaqen e agarit. Në BCH vërehet turbullira difuze e mediumit me një sediment të bardhë të trashë në fund.

faktorët e patogjenitetit. Këto përfshijnë LPS të murit qelizor, aftësinë për të "grupuar", fimbria, proteazat dhe ureaza, hemolizinat dhe hemaglutininat.

Diagnostifikimi laboratorik. Metoda kryesore është bakteriologjike. Mjetet diagnostike diferenciale (Ploskirev), mjetet e pasurimit dhe MPA përdoren sipas metodës Shushkevich. Mjekimi. Në rast të dysbakteriozës së zorrëve të shoqëruar me protea (kolit), është e mundur të përdoret proteus fag dhe preparatet që e përmbajnë atë (intestifag, coliproteus bakteriofag).

"Shkop i mrekullueshëm" (Serratia marcescens), lloji i baktereve nga mikroorganizmat e pigmentit. Shufra gram-negative lëvizëse (peritrike) jo spore. Sipas llojit të shkëmbimit - anaerobe fakultative. Në sipërfaqen e agarit formohen koloni të lëmuara ose të grimcuara të kuqe të errëta dhe të ndezura me një shkëlqim metalik. Jeton në tokë, ujë, ushqim. Duke u zhvilluar në bukë (me lagështi të lartë), në qumësht, i ngjyros me të kuqe; produkte të tilla nuk lejohen të shiten. Kushtisht patogjene për kafshët dhe njerëzit; mund të shkaktojë mbytje.

13. Escherichia. Taksonomia. Sëmundjet e shkaktuara nga Escherichia coli. Variantet patogjene të Escherichia diarregjenike. Struktura antigjenike, klasifikimi. Karakteristikat e diagnostikimit mikrobiologjik. Diferencimi i Escherichia diarregjenike nga patogjene me kusht.

Escherichia janë bakteret më të zakonshme aerobike të zorrëve që, në kushte të caktuara, mund të shkaktojnë një grup të gjerë sëmundjesh tek njerëzit, si lokalizimin intestinal (diarre) ashtu edhe jashtëintestinal (bakteremi, infeksione urinare, etj.). Llojet kryesore - E. coli (E. coli) - agjenti shkaktar më i zakonshëm i sëmundjeve infektive të shkaktuara nga enterobakteret. Ky patogjen është një tregues i ndotjes fekale, veçanërisht ujit.

pronat kulturore. Në mjediset e lëngëta, E. coli jep turbullirë difuze, në media të dendura formon S- dhe R-forma të kolonive. Në mjedisin Endo për Escherichia, Escherichia coli që fermenton laktozë formon koloni intensive të kuqe me një shkëlqim metalik, koloni jofermentuese - rozë e zbehtë ose pa ngjyrë me një qendër më të errët, në mediumin e Ploskirev - e kuqe me një nuancë të verdhë, në mesataren e Levin - e errët blu me një shkëlqim metalik.

vetitë biokimike. Escherichia coli në shumicën e rasteve fermenton karbohidratet (glukozë, laktozë, manitol, arabinozë, galaktozë etj.) me formimin e acidit dhe gazit, formon indol, por nuk formon sulfid hidrogjeni dhe nuk lëngëzon xhelatinën.

Faktorët kryesorë të patogjenitetit të E.coli diarreike.

1. Faktorët e ngjitjes, kolonizimit dhe invazionit të shoqëruar me pili, strukturat fimbriale, proteinat e membranës së jashtme. Ato janë të koduara nga gjenet plazmide dhe nxisin kolonizimin e pjesës së poshtme të zorrës së hollë.

2. Ekzotoksinat: citotoninat (stimulojnë hipersekretimin e lëngjeve nga qelizat e zorrëve, prishin metabolizmin e kripës së ujit dhe kontribuojnë në zhvillimin e diarresë) dhe enterocitotoksina (veprojnë në qelizat e murit të zorrëve dhe endotelit kapilar).

3. Endotoksina (lipopolisakaridi).

Në varësi të pranisë së faktorëve të ndryshëm të patogjenitetit, Escherichia coli diarregjenike ndahet në pesë lloje kryesore: enterotoksigjen, enteroinvaziv, enteropatogjen, enterohemorragjik, enteroadheziv.

4. E. coli patogjene karakterizohet nga prodhimi i bakteriocinave (kolicinave).

E. coli enterotoksigjene kanë një toksinë termolabile me peshë të lartë molekulare, të ngjashme në veprim me kolerën, shkaktojnë diarre të ngjashme me kolerën (gastroenterit tek fëmijët e vegjël, diarre udhëtarësh etj.).

Escherichia coli Enteroinvazive në gjendje të depërtojnë dhe të shumohen në qelizat e epitelit të zorrëve. Ata shkaktojnë diarre të bollshme me një përzierje gjaku dhe një numër të madh leukocitesh (një tregues i një procesi invaziv) në jashtëqitje. Klinikisht i ngjan dizenterisë. Llojet kanë disa ngjashmëri me Shigella (jo lëvizëse, nuk fermentojnë laktozë, kanë veti të larta enteroinvazive).

Enteropatogjene E.coli- Agjentët kryesorë shkaktarë të diarresë tek fëmijët. Në zemër të lezioneve është ngjitja e baktereve në epitelin e zorrëve me dëmtim të mikrovileve. Karakterizohet nga diarre ujore dhe dehidrim i rëndë.

Escherichia coli enterohemorragjike shkaktojnë diarre të përzier me gjak (kolit hemorragjik), sindromë hemolitiko-uremike (anemi hemolitike në kombinim me insuficiencë renale). Serotipi më i zakonshëm i Escherichia coli enterohemorragjike është O157:H7.

Entero ngjitëse E.coli nuk formojnë citotoksina, janë studiuar dobët.

Diagnostifikimi laboratorik. Qasja kryesore është izolimi i një kulture të pastër në mediat diagnostike diferenciale dhe identifikimi i saj nga vetitë antigjenike. Ata vendosën RA me një grup serumesh polivalente OK (në O- dhe K-antigjene).

Ndër streptokoket patogjene vend të veçantë zë S.pneumoniae (pneumococcus). Ai luan një rol shumë të rëndësishëm në patologjinë infektive njerëzore. Kjo specie është një nga shkaktarët kryesorë të pneumonisë lobare. Sipas të dhënave jo të plota, ka më shumë se 500,000 raste të pneumonisë çdo vit në botë të shkaktuara nga pneumokokët, veçanërisht tek fëmijët dhe të moshuarit. Përveç inflamacionit të mushkërive, ky mikrob shkakton meningjit, endokardit, peritonit, otitis media, rinitit, sinusit, sepsë, ulçerë rrëshqitëse të kornesë dhe një sërë sëmundjesh të tjera. Për diagnostikimin laboratorik përdoren metoda bakterioskopike, bakteriologjike dhe biologjike. Material për studimin e pështymës, qelbës, gjakut, lëngut cerebrospinal, mukusit nga orofaringu dhe nazofaringu, shkarkimi nga sinusi maksilar, sytë dhe veshët. Është e rëndësishme të dërgoni menjëherë materialin në laborator dhe ta analizoni atë shumë shpejt, pasi pneumokokët janë të ndjeshëm ndaj autolizës.

Ekzaminimi bakterioskopik

Ekzaminimi bakterioskopik i materialit (përveç gjakut) reduktohet në prodhimin e dy njollave. Njëra prej tyre është njollosur nga Gram, e dyta - nga Burri-Gins, gjë që bën të mundur identifikimin e kapsulës. Pneumokoket lokalizohen ne forme diplokokesh heshtak, te rrethuar nga nje kapsule e zakonshme. Nëse zbulohen 10 ose më shumë diplokoke tipike në fushën e shikimit, ka shumë të ngjarë që S.pneumoniae të jetë i pranishëm. Sidoqoftë, mikroskopi parësor nuk jep të drejtën për të bërë një diagnozë përfundimtare, pasi njollat ​​mund të përmbajnë diplokoke kapsulare jo patogjene - përfaqësues të mikroflorës normale. Prandaj, është e nevojshme të kryhet mbjellja e materialit klinik dhe të izolohet një kulturë e pastër.

Hulumtimi bakteriologjik

Në rast sepsis, 10 ml gjak inokulohet pranë shtratit të pacientit në një shishkë që përmban 100 ml supë serumi ose sheqeri, inkubohet për 18-20 orë në 37 ° C, më pas mbillet në agar gjaku, izolohet një kulturë e pastër dhe identifikuar. Me meningjitin, lëngu cerebrospinal centrifugohet dhe sedimenti kultivohet në agar të gjakut. Mbi të, pneumokokët rriten në formën e kolonive të vogla të rrumbullakëta të rrethuara nga një zonë e gjelbër; një depresion karakteristik është i dukshëm në qendër të kolonisë. Mbjellja e pështymës ose qelbit në mjedise ushqyese nuk këshillohet, pasi prania e mikroflorës saprofitike pengon rritjen e S.pneumoniae. Është më mirë të futni materialin e provës në zgavrën e barkut të minjve të bardhë. Bioassay është një metodë e shpejtë, e besueshme dhe e saktë për izolimin e një kulture të pastër pneumokokale. Minjtë e bardhë janë shumë të ndjeshëm ndaj këtyre baktereve dhe brenda 10-12 orëve pas infektimit, pneumokoket depërtojnë në gjak dhe në organet parenkimale, duke shkaktuar sepsë. Kultura e gjakut nga zemra ose pjesë e organeve të brendshme gjatë autopsisë së kafshëve ju lejon të izoloni një kulturë të pastër të patogjenit. Për të identifikuar pneumokokët, përdoren vetitë e tyre. Ndryshe nga llojet e tjera të streptokokëve, S.pneumoniae nuk rritet në një mjedis me optokinë, inulina fermentohet dhe është shumë e ndjeshme ndaj veprimit të biliare (testi i deoksikolatit). Liza e shpejtë e pneumokokut nën veprimin e biliare mund të zbulohet nëse në 1 ml të kulturës së lëngut i shtohet 0,5 ml biliare. Pas 15-20 minutash qëndrimi në termostat, ndodh liza e plotë e qelizave bakteriale. Për të përcaktuar serovaret e pneumokokëve (tani janë 85 të tillë), përdoret një reaksion aglutinimi në xhami me serum tipik ose fenomeni i "ënjtjes së kapsulës". Në prani të serumit homolog, kapsula pneumokokale fryhet fort. Akoma më mirë, serotipizimi bëhet me aglutinim të lateksit komercial ose reagentë koaglutinimi që shfaqin antigjene kapsulare. Ndër streptokokët, rëndësi ka edhe gjinia Enterococcus, speciet më domethënëse të të cilave janë E.faecalis, E.faecium dhe E.durans. Ato janë mjaft të përhapura në natyrë. Nisha e tyre kryesore ekologjike janë zorrët e njerëzve dhe kafshëve, por ato gjenden gjithashtu në mikroflora normale të lëkurës së perineumit, organeve gjenitourinar, orofaringut dhe nazofaringit. Ato mund të shkaktojnë mbytje të plagëve, bakteremi, dëmtim të sistemit urogjenital, veçanërisht në pacientët me kateterë me funksion afatgjatë, helmim nga ushqimi, disbakteriozë të zorrëve, më rrallë endokardit. Në njolla nga materiali testues, enterokoket janë të renditur në çifte, zinxhirë të shkurtër ose në formë grupesh, gram-pozitive. Diagnoza bakteriologjike e infeksioneve enterokokale kryhet pa asnjë vështirësi, pasi këto baktere rriten mirë në media të thjeshta. Agar dif-3 është selektiv për ta (deri në 600 ml 3% MPA shtoni 400 ml biliare 40%). Pas 24 orësh inkubimi, kolonitë që janë rritur kanë një madhësi prej 0,4-1,0 mm të një ngjyre gri. Në agarin e gjakut, hemoliza jo e plotë ose e plotë ndodh rreth kolonive. Ndryshe nga streptokokët viridescent, enterokokët mund të rriten në MPA me 6.5% NaCl, duke reduktuar qumështin me blu metilen në 37°C pas 4-6 orësh. Identifikimi i kulturave të izoluara kryhet sipas karakteristikave morfologjike, kulturore dhe biokimike.

Faqe 40 nga 91

Agjenti shkaktar i pneumonisë lobare (pneumonia) është pneumococcus - Diplococcus pneumoniae, i zbuluar për herë të parë nga Pasteur në pështymën e një njeriu që vdiq nga tërbimi (1881).
Morfologjia dhe vetitë tintoriale. Pneumokokët (Fig. 67 dhe 68 në insert) janë koke të çiftëzuara që kanë një formë të zgjatur si një heshtje. Prandaj quhen ndryshe diplokoke heshtak. Duke formuar zinxhirë të shkurtër, pneumokokët bëhen të ngjashëm me streptokoket, dhe për këtë arsye II. F. Gamaleya i quajti Streptococcus lanceolatus. Madhësia e qelizës varion nga 0,5X0,75 deri në 1X1,5 mikron. Ata nuk kanë spore apo flagjela. Një tipar dallues i pneumokokut është formimi i një kapsule, e cila shprehet mirë në materialet patologjike (sputum, gjak, etj.). Kur kultivohet në mjedise ushqyese, kapsula humbet. Pneumokokët i perceptojnë lehtësisht ngjyrat aniline dhe njollosen pozitivisht sipas Gramit.
Vetitë kulturore dhe biokimike.

Oriz. 68. Pneumokoket në njollosjen e pështymës.

Pneumokoket janë aerobe dhe anaerobe fakultative. Temperatura optimale është rreth 37°. Rriteni në media që përmbajnë proteina shtazore (agar gjaku ose serumi, ascitagar).
Në sipërfaqen e agarit, pas 24 orësh, formohen koloni të vogla, të ngjashme me streptokoke, por më të vogla dhe më transparente.
Në agar të pjerrët, me inokulim të bollshëm, përftohet një shtresë transparente shumë delikate, e përbërë nga kolonitë më të vogla, jo të bashkuara, në supë - një turbullirë e lehtë dhe një precipitat i vogël i krisur.
Llojet e reja të izoluara nuk rriten në xhelatinë. Llojet e vjetra laboratorike të pneumokokëve mund të prodhojnë koloni të vogla të bardha tashmë në 18-22°C. Xhelatina nuk është e lëngshme.
Ata rriten mirë në qumësht, duke e ngurtësuar atë me formimin e acidit.
Në agarin e gjakut, rreth kolonive formohet një zonë e hemolizës jo të plotë me një ngjyrosje të gjelbër-kafe të mediumit.

Oriz. 67. Pneumokoket ne kulture te paster nga supa.

Pneumokokët dekompozojnë saharozën, rafinozën dhe laktozën. Karakteristika më e rëndësishme është dekompozimi i inulinës. Shumica e streptokokëve nuk e kanë këtë veti. Pneumokoket virulente janë të tretshme në biliare.
Struktura antigjenike dhe llojet serologjike të pneumokokëve. Citoplazma e pneumokokut përmban një antigjen proteinik të përbashkët për të gjithë pneumokokët. Ky antigjen përcakton specifikën e specieve të tyre. Kapsula përmban antigjene polisakaride specifike (hapten), të cilët ndryshojnë në përbërjen e tyre kimike në pneumokokë të ndryshëm (antigjene tipike). Bazuar në këto antigjene tipike, të gjithë pneumokokët ndahen në tre grupe kryesore (I, II, III) dhe një grup i katërt i kombinuar (grupi X) duke përdorur reaksionin e aglutinimit dhe precipitimit. Grupi X përfshin më shumë se 70 lloje.
rezistencës. Në mjediset ushqyese artificiale, pneumokokët vdesin shpejt (4-7 ditë). Nën një shtresë vaji vazelinë në media të lëngshme dhe gjysmë të lëngshme që përmbajnë proteina, ato mbeten të qëndrueshme për 3-12 muaj.
Pneumokoket e tolerojnë tharjen mirë: në pështymë të thatë në dritë të shpërndarë, ato vazhdojnë deri në 2 muaj. Kur nxehen në 52-55 °, ata vdesin në 10 minuta, në 60 ° - edhe më shpejt. Në një zgjidhje të acidit karbolik (3%), pneumokokët vdesin në 1-2 minuta.
Pneumokokët janë veçanërisht të ndjeshëm ndaj optokinës. Nën ndikimin e kësaj të fundit, ata vdesin në një përqendrim prej 1: 1,000,000.
Formimi i toksinave dhe patogjeniteti për kafshët. Helmi i pneumokokut është një endotoksin. Nga kafshët laboratorike, minjtë e bardhë dhe lepujt janë më të ndjeshëm ndaj pneumokokut. Administrimi parenteral i pneumokokut virulent pas 24-48 orësh shkakton vdekjen e kafshëve me sepsë. Në autopsi në vendin e injektimit, zbulohet eksudati fibrinoz; shpretka është e zmadhuar dhe hiperemike.
Patogjeneza dhe sëmundjet tek njerëzit. Porta hyrëse e infeksionit është zakonisht mukoza e faringut. Futja e pneumokokeve në trup dhe depërtimi i tyre në indet e mushkërive, me sa duket, mund të ndodhë si përmes sistemit limfatik dhe atij të qarkullimit të gjakut, ashtu edhe drejtpërdrejt përmes degëzimit të bronkeve. Sëmundja më e shpeshtë është pneumonia krupoze, e cila karakterizohet me fillim të papritur, temperaturë të lartë, ndonjëherë me të dridhura, dhimbje anash gjatë frymëmarrjes, dhimbje koke, ndonjëherë humbje të vetëdijes, delirium, zgjim të fortë. Në të ardhmen, ka një kollë me një pështymë karakteristike të ndryshkur-të kuqe. Në mushkëri, ekziston një proces që kap më shpesh një, më rrallë - dy ose tre lobe.
Burimet e infeksionit janë një person i sëmurë dhe një bartës i baktereve. Infeksioni nga jashtë ndodh si aerogjenikisht - nga pikat nga transportuesi, dhe përmes infeksionit të pluhurit. Pneumokoket mund të vazhdojnë në pështymë të tharë për një kohë të gjatë (rreth 2 muaj) dhe të hyjnë në ajër me pluhur.
Gjatë ekzaminimit të njerëzve të shëndetshëm, pneumokoket patogjene gjenden shpesh në nazofaringë, kështu që nuk përjashtohet mundësia e autoinfeksionit dhe një rol të rëndësishëm luajnë faktorët që dobësojnë rezistencën e trupit, si hipotermia.
Përveç pneumonisë krupoze, pneumokoket shkaktojnë inflamacion të veshit të mesëm, meningjit (meningjitit), si dhe mukozës së hundës dhe sinuseve, dhimbje të fytit, ulçerë rrëshqitëse të kornesë dhe inflamacion të qeskës lakrimal.
Imuniteti. Pneumonia e transferuar nuk jep imunitet. Sëmundja mund të përsëritet më shumë se një herë. Kjo është për shkak të pranisë së shumë llojeve të pneumokokëve dhe faktit që pneumonia e kaluar rrit ndjeshmërinë e trupit ndaj pneumokokëve.
Serumi i pacientëve të shëruar përmban antitrupa (aglutinina, etj.).
Në kohën e krizës në pneumoni, përqendrimi i antitrupave në gjak arrin një titër domethënës dhe fagocitoza rritet në mënyrë dramatike (I. Ya. Chistovich). Bazuar në këto të dhëna, imuniteti në pneumoni duhet të konsiderohet kryesisht si fagocitar, në të cilin antitrupat (bakteriotropinat) luajnë një rol të rëndësishëm.
Diagnostifikimi mikrobiologjik. Materialet për hulumtime në sëmundjet pneumokokale janë pështyma, gjaku dhe qelbi i marrë nga lezione të ndryshme, më rrallë lëngu cerebrospinal.
Materiali patologjik (me përjashtim të gjakut) ekzaminohet bakterioskopikisht, bakteriologjikisht dhe duke infektuar minjtë e bardhë. Metoda e fundit duhet të përdoret, sepse materiali burimor, veçanërisht pështyma, zakonisht përmban mikroflora të bollshme të jashtme, e cila, kur materiali mbillet drejtpërdrejt në mjediset ushqyese, e bën të vështirë izolimin e pneumokokut.
Njollat ​​nga sputum, qelb etj. janë të ngjyrosura me gram. Në mikroskop gjenden diplokoke heshtak, të ngjyrosura me gram pozitiv të rrethuar nga një kapsulë.
Kulturat izolohen në agar të gjakut ose në agar ascig. Pas 24-48 orësh rritjeje në 37°, shfaqen koloni karakteristike nëse ka pneumokok. Kolonitë vendosen në serum të pjerrët ose agar ascit dhe kultura e izoluar kontrollohet për tretshmërinë në biliare dhe për aftësinë për të degraduar inulinën.
Infeksioni i një miu të bardhë është mënyra më e sigurt për të izoluar një kulturë të pneumokokut. Materiali i pacientit ose i kufomës (sputum, qelb, një pjesë e një organi etj.) vendoset në një filxhan steril, më pas bluhet në një llaç steril, me 1-2 ml lëng mishi steril dhe 0,5 ml nga ky suspension. injektuar në mënyrë intraperitoneale te një mi i bardhë. Pas vdekjes së miut, e cila ndodh brenda 12-48 orëve, merren gjakderdhje nga zemra dhe pothuajse në të gjitha rastet merret një kulturë e pastër e pneumokokut.
Nëse dyshohet për sepsë, 10-20 ml gjak inokulohet në supë ascitike ose serum. Pas pasurimit nga lëngu, bëhen inokulime në agar të gjakut dhe kultura e pastër e izoluar identifikohet nga karakteristikat morfologjike dhe biokimike.
terapi specifike dhe kimioterapi. Aktualisht, preparatet sulfanilamide dhe antibiotikët (penicilina, biomicina, tetraciklina etj.) përdoren me shumë sukses për trajtimin e pneumonisë lobare.

Gjinia Streptococcus përfshin: Streptococcus pyogenes (hemolitik) dhe Streptococcus pneumoniae (pneumococcus). Streptokokët u zbuluan për herë të parë nga Billroth (1874), L. Pasteur (1879). Ato u studiuan nga E. Rosenbach (1884).

Streptococcus pyogenes (hemolitik)

Morfologjia. Streptokokët janë koke që kanë formë sferike. Diametri i secilit coccus është mesatarisht 0,6-1 μm, megjithatë, ato karakterizohen nga polimorfizëm: ka koke të vogla dhe të mëdha, rreptësisht sferike dhe ovale. Streptokokët janë të rregulluar në një zinxhir, i cili është rezultat i ndarjes së tyre në të njëjtin plan. Gjatësia e zinxhirit ndryshon. Në një mjedis të dendur ushqyes, zinxhirët janë zakonisht të shkurtër; në ato të lëngshme, ato janë të gjata. Streptokokët janë të palëvizshëm, nuk kanë spore (shih Fig. 4) Kulturat e sapoizoluara ndonjëherë formojnë një kapsulë. Në seksionet ultra të hollë, është e dukshme një mikrokapsulë, nën të ka një mur qelizor me tre shtresa dhe një membranë citoplazmike me tre shtresa. Gram-pozitive.

kultivimi. Streptokoket janë anaerobe fakultative. Rriteni në një temperaturë prej 37 ° C dhe pH 7.6-7.8. Mjetet optimale për kultivimin e tyre janë media që përmbajnë gjak ose serum gjaku. Në mjedise të dendura ushqyese, kolonitë streptokoke janë të vogla, të sheshta, me re, me ngjyrë gri. Në agarin e gjakut, disa lloje streptokokesh formojnë hemolizë. Streptokoket β-hemolitike formojnë një zonë të qartë të hemolizës, streptokoket α-hemolitike formojnë një zonë të vogël të gjelbër (rezultat i kalimit të hemoglobinës në methemoglobinë). Ka streptokoke që nuk japin hemolizë.

Në lëngun e sheqerit, streptokokët rriten me formimin e sedimentit parietal dhe afërsisht të grimcuar, ndërsa lëngu mbetet transparent.

Vetitë enzimatike. Streptokokët kanë veti sakarolitike. Ato zbërthejnë glukozën, laktozën, saharozën, manitolin (jo gjithmonë) dhe maltozën për të formuar acid. Vetitë e tyre proteolitike janë të shprehura dobët. Ata mpiksin qumështin, xhelatina nuk lëngëzohet.

formimi i toksinave. Streptokokët formojnë një numër ekzotoksinash: 1) streptolizinat - shkatërrojnë qelizat e kuqe të gjakut (O-streptolizina ka një efekt kardiotoksik); 2) leukocidina - shkatërron leukocitet (të formuara nga shtame shumë virulente); 3) toksina eritrogjenike (skarlatina) - shkakton pasqyrën klinike të skarlatinës - dehje, reaksione vaskulare, skuqje etj. Sinteza e toksinës eritrogjenike përcaktohet nga profagu; 4) citotoksinat - kanë aftësinë të shkaktojnë glomerulonefrit.

Streptokokët kanë antigjene të ndryshme. Citoplazma e qelizës përmban një antigjen të një natyre specifike nukleoproteinike - e njëjta gjë për të gjithë streptokokët. Antigjenet e tipit proteinik ndodhen në sipërfaqen e murit qelizor. Një antigjen i grupit polisakarid u gjet në murin qelizor të streptokokut.

Sipas përbërjes së fraksionit të antigjenit specifik për grupin polisakarid, të gjithë streptokokët ndahen në grupe, të shënuara me germa të mëdha latine A, B, C, D etj. deri në S. Përveç grupeve, streptokokët ndahen në lloje serologjike , të cilat tregohen me numra arabë.

Grupi A përfshin 70 lloje. Ky grup përfshin shumicën e streptokokëve që shkaktojnë sëmundje të ndryshme tek njerëzit. Grupi B përfshin kryesisht streptokoket njerëzore oportuniste. Grupi C përfshin streptokoke patogjene për njerëzit dhe kafshët. Grupi D përbëhet nga streptokokë që nuk janë patogjenë për njerëzit, por në këtë grup bëjnë pjesë enterokoket, të cilët janë banorë të traktit intestinal të njerëzve dhe kafshëve. Duke hyrë në organe të tjera, ato shkaktojnë procese inflamatore: kolecistit, pielit, etj. Kështu, ato mund t'i atribuohen mikrobeve patogjene me kusht.

Përkatësia e kulturave të izoluara në një nga grupet serologjike përcaktohet duke përdorur një reaksion precipitimi me serumet e grupit. Për përcaktimin e llojeve serologjike, përdoret një reaksion aglutinimi me serume tipike.

Streptokokët janë mjaft të qëndrueshëm në mjedis. Në një temperaturë prej 60 ° C, ata vdesin pas 30 minutash.

Në qelb dhe sputum të tharë, ato vazhdojnë për muaj të tërë. Përqendrimet e zakonshme të dezinfektuesve i shkatërrojnë ato në 15-20 minuta. Enterokokët janë shumë më rezistent, solucionet dezinfektuese i vrasin vetëm pas 50-60 minutash.

Ndjeshmëria e kafshëve. Gjedhët, kuajt, qentë dhe zogjtë janë të ndjeshëm ndaj streptokokëve patogjenë. Nga kafshët laboratorike, lepujt dhe minjtë e bardhë janë të ndjeshëm. Sidoqoftë, streptokokët patogjenë për njerëzit nuk janë gjithmonë patogjenë për kafshët eksperimentale.

Burimet e infeksionit. Njerëzit (të sëmurë dhe mbartës), më rrallë kafshë ose produkte të infektuara.

Rrugët e transmetimit. Pluhuri ajror dhe ajror, ndonjëherë ushqimi, kontakti-familjare është i mundur.

Sëmundjet mund të ndodhin si rezultat i infeksionit ekzogjen, si dhe në mënyrë endogjene - me aktivizimin e streptokokëve oportunistë që jetojnë në mukozën e faringut, nazofaringut dhe vaginës. Ulja e rezistencës së trupit (ftohje, uria, puna e tepërt, etj.) mund të çojë në autoinfeksione.

Me rëndësi të madhe në patogjenezën e infeksioneve streptokoksike është sensibilizimi paraprak - si rezultat i një sëmundjeje të etiologjisë streptokoksike të transferuar më parë.

Kur depërtojnë në qarkullimin e gjakut, streptokokët shkaktojnë një proces të rëndë septik.

Sëmundjet tek njerëzit më shpesh shkaktojnë streptokoke β-hemolitike të grupit serologjik A. Ato prodhojnë enzima patogjeniteti: hialuronidaza, fibrinolizina (streptokinaza), deoksiribonukleaza etj. Përveç kësaj, tek streptokoket gjendet një kapsulë, proteina M, të cilat kanë veti antifagocitare.

Streptokokët shkaktojnë infeksione të ndryshme akute dhe kronike te njerëzit, si me formimin e qelbit ashtu edhe jo suppurativ, të ndryshëm në pamjen klinike dhe patogjenezë. Supurative - gëlbazë, abscese, infeksione të plagëve, jo suppurative - infeksione akute të rrugëve të sipërme të frymëmarrjes, erizipelë, skarlatinë, reumatizma etj.

Streptokokët shpesh shkaktojnë infeksione dytësore në gripin, fruthin, kollën e mirë dhe sëmundje të tjera dhe shpesh komplikojnë infeksionet e plagëve.

Imuniteti. Nga natyra, imuniteti është antitoksik dhe antibakterial. Imuniteti antimikrobik postinfektiv është i dobët. Kjo është për shkak të imunogjenitetit të dobët të streptokokëve dhe një numri të madh serovarësh që nuk japin imunitet të kryqëzuar. Përveç kësaj, me sëmundjet streptokoksike, vërehet një alergji e trupit, gjë që shpjegon tendencën për rikthim.

Parandalimi. Bëhet fjalë për masat sanitare dhe higjienike, duke forcuar rezistencën e përgjithshme të trupit. Profilaksia specifike nuk është zhvilluar.

Mjekimi. Aplikoni antibiotikë. Më shpesh përdoret penicilina, ndaj së cilës streptokokët nuk kanë fituar rezistencë, si dhe eritromicina dhe tetraciklina.

Vlera e streptokokut në etiologjinë e sëmundjes reumatike të zemrës. Patogjeneza e sëmundjes reumatike të zemrës nuk është kuptuar mirë. Por një sërë faktesh flasin në favor të rolit të streptokokut në zhvillimin e kësaj sëmundjeje:

1. Te pacientët me sëmundje reumatike të zemrës, streptokoku B-hemolitik mbillet nga faringu.

2. Reumatizma shfaqet shpesh pas vuajtjes së dhimbjes së fytit, bajameve, faringjitit, sensibilizimit të organizmit.

3. Antistreptolizina, antistreptohialuronidaza - në serumin e gjakut të pacientëve gjenden antitrupa ndaj enzimave streptokoke, toksina.

4. Konfirmimi indirekt i rolit të streptokokut është trajtimi i suksesshëm me penicilinë.

Kohët e fundit, formave L të streptokokut i është kushtuar rëndësi në shfaqjen e formave kronike të sëmundjeve reumatike të zemrës.

Parandalimi i përkeqësimeve të sëmundjeve reumatike të zemrës zvogëlohet në parandalimin e sëmundjeve streptokoksike (për shembull, në pranverë dhe në vjeshtë, kryhet një kurs profilaktik i administrimit të penicilinës). Trajtimi reduktohet në përdorimin e barnave antibakteriale - penicilinë.

Vlera e streptokokut në etiologjinë e etheve të kuqe të ndezur. G. N. Gabrichevsky (1902) ishte i pari që sugjeroi se streptokoku hemolitik është agjenti shkaktar i etheve të kuqe. Por meqenëse streptokokët e izoluar në sëmundje të tjera nuk ndryshonin nga agjentët shkaktarë të etheve të kuqe, ky mendim nuk u nda nga të gjithë. Tani është vërtetuar se skarlatina shkaktohet nga streptokokët e grupit A që prodhojnë toksina eritrogjene.

Në ata që kanë qenë të sëmurë, lind imuniteti - i vazhdueshëm, antitoksik. Tensioni i tij përcaktohet duke vendosur reaksionin Dick - injeksion intradermal i toksinës eritrogjenike. Tek ata që nuk janë të sëmurë rreth vendit të injektimit, shfaqet hiperemia dhe edema, e cila karakterizohet si një reagim pozitiv (mungesë e antitoksinës në serumin e gjakut). Tek ata që kanë qenë të sëmurë, një reagim i tillë mungon, pasi antitoksina e formuar në to neutralizon toksinën eritrogjene.

Parandalimi. Izolimi, shtrimi në spital. Fëmijëve në kontakt, të dobësuar u jepet gama globulin. Profilaksia specifike nuk është zhvilluar.

Mjekimi. Përdorni penicilinë, tetraciklinë. Në raste të rënda, administrohet serumi antitoksik.

Qëllimi i studimit: zbulimi i streptokokut dhe përcaktimi i serovarit të tij.

Materiali kërkimor

1. Mukozë nga fyti (tonsiliti, skarlatina).

2. Kërvitje nga zona e prekur e lëkurës (erizipela, streptoderma).

3. Qelb (abscesi).

4. Urina (nefriti).

5. Gjak (dyshohet sepsis; endokardit).

Metodat bazë të kërkimit

1. Bakteriologjike.

2. Mikroskopik.

Përparimi i kërkimit

Dita e dytë e hulumtimit

Hiqni gotat nga termostati dhe kontrolloni. Në prani të kolonive të dyshimta, nga një pjesë e tyre bëhen njolla, të ngjyrosura sipas Gramit dhe mikroskopikisht. Nëse gjenden streptokokë në njollë, një pjesë e kolonisë së mbetur nënkulturohet në epruveta në agar me serum për të izoluar një kulturë të pastër dhe në supë me gjak në epruveta. Deri në fund të ditës, një kulturë 5-6-orëshe nga lëngu ose agari nënkulturohet në lëngun e Martenit me 0,25% glukozë për të përcaktuar grupin serologjik në reaksionin e reshjeve Lensfield. Provëzat dhe flakonet vendosen në një termostat dhe lihen deri të nesërmen.

Dita e tretë e hulumtimit

Kulturat hiqen nga furra, kontrollohet pastërtia e kulturës në pjerrësinë e agarit, bëhen njolla, ngjyroset me gram dhe mikroskopi. Në prani të një kulture të pastër streptokoku, ato mbillen në media Hiss (laktozë, glukozë, maltozë, saharozë dhe manitol), qumësht, xhelatinë, biliare 40% dhe futen në një termostat.

Shikoni lëngun e Martinit. Në prani të rritjes specifike, kryhet një test i reshjeve Lensfield për të përcaktuar grupin serologjik.

Vendosja e reaksionit të reshjeve sipas Lensfield. Kultura ditore e rritur në lëngun e Martinit derdhet në disa tuba centrifugash, të centrifuguara për 10-15 minuta (3000 rpm).

Supernatanti derdhet në një kavanoz me një solucion dezinfektues, dhe precipitati derdhet në një tretësirë ​​sterile izotonike të klorurit të natriumit dhe centrifugohet përsëri. Në precipitatin e mbledhur nga të gjithë tubat e centrifugës, shtoni 0,4 ml acid klorhidrik 0,2%. Më pas tubi vendoset në një banjë me ujë dhe zihet për 15 minuta, duke u tundur herë pas here. Pas zierjes, suspensioni që rezulton centrifugohet përsëri. Më pas, antigjeni nxirret në supernatant, i cili derdhet në një tub të pastër dhe neutralizohet me tretësirë ​​0,2% hidroksid natriumi në pH 7,0-7,2. Si tregues shtohet bromothimol blu (0,01 ml tretësirë ​​0,04%). Me këtë reagim, ngjyra ndryshon nga e verdha e kashtës në blu.

Më pas, 0,5 ml serume të grupit antistreptokok, të cilat përgatiten duke imunizuar lepujt, derdhen në 5 tuba precipitimi (shih kapitullin 19). Serumi A futet në tubin e parë, serumi B në tubin e dytë, serumi C në të 3-tin, serumi D në tubin e katërt, tretësira izotonike e klorurit të natriumit (kontrolli) në të 5-tin. Pas kësaj, me një pipetë Pasteur, ekstrakti që rezulton (antigjeni) vendoset me kujdes përgjatë murit në të gjitha epruvetat.

Me një reaksion pozitiv në një epruvetë me serum homolog, në kufirin e ekstraktit me serumin formohet një unazë e hollë në ngjyrë të bardhë qumështi (Fig. 38).

Dita e katërt e hulumtimit

Rezultatet regjistrohen (Tabela 25).

Aktualisht, po përcaktohet deoksiribonukleaza, si dhe antistreptohialuronidaza, antistreptolizin-O.

Pyetje kontrolli

1. Cilat janë metodat kryesore të kërkimit laboratorik për zbulimin e streptokokëve a dini?

2. Për çfarë shërben reaksioni i reshjeve të Lensfield?

3. Pse antigjeni duhet të jetë transparent gjatë këtij reaksioni? Përshkruani teknikën e organizimit të këtij reaksioni.

Merrni serumin antistreptokok A, B, C, D dhe solucionin izotonik të klorurit të natriumit nga mësuesi. Vendosni reagimin e reshjeve, tregojini rezultatet mësuesit dhe vizatoni.

Media ushqyese

agar me gjak(shih kapitullin 7).

Serum agar(shih kapitullin 7).

Mediat e tij(e thatë).

Xhelatinë me pepton mishi (MPG). Në 100 ml MPB shtoni 10-15 g xhelatinë të grirë imët. Xhelatina duhet të fryhet kur nxehet ngadalë në një banjë uji (në një temperaturë prej 40-50 ° C). Një zgjidhje 10% e karbonatit të natriumit (sodë buke) i shtohet xhelatinës së shkrirë dhe pH rregullohet në 7.0. Më pas filtrohet menjëherë përmes një filtri të palosur. Filtrimi është i ngadalshëm. Për të përshpejtuar procesin, filtrimi mund të bëhet në një autoklave të nxehtë. Mjeti i filtruar hidhet në epruveta 6-8 ml dhe sterilizohet. Sterilizimi kryhet ose pjesërisht në një temperaturë prej 100 ° C për 3 ditë rresht, ose njëkohësisht në 110 ° C për 20 minuta në një autoklave. Ftohja e mediumit kryhet në epruveta të vendosura vertikalisht.

Përgatitja e qumështit. Qumështi i freskët vihet në valë, vendoset në një vend të freskët për një ditë, lirohet nga kremi, zihet përsëri. Lëreni për një ditë dhe hiqni shtresën e sipërme. Qumështi i skremuar filtrohet përmes një shtrese leshi pambuku, më pas alkalizohet me tretësirë ​​10% karbonat natriumi në pH 7,2 dhe derdhet në epruveta 5-6 ml.

Bouillon Martin. Një sasi e barabartë pepton marten (mish i grirë nga stomaku i derrit të ekspozuar ndaj acidit klorhidrik) shtohet në ujin e mishit. Përzierja që rezulton zihet për 10 minuta, alkalizohet me tretësirë ​​10% hidroksid natriumi në pH 8,0, shtohet 0,5 acetat natriumi, zihet përsëri dhe derdhet në enë sterile. Lëngut të Martinit i shtohet 0,25% glukozë.

E mërkurë Kit - Tarozzi(shih kapitullin 34).

Streptococcus pneumoniae (pneumokok)

Pneumokokët u përshkruan për herë të parë nga R. Koch (1871).

Morfologjia. Pneumokokët janë diplokokë në të cilët anët e qelizave përballë njëra-tjetrës janë të rrafshuara dhe anët e kundërta janë të zgjatura, pra kanë një formë heshtak që i ngjan flakës së qiririt (shih Fig. 4). Madhësia e pneumokokut është 0,75-0,5 × 0,5-1 μm, ato janë të rregulluara në çifte. Në mjediset ushqyese të lëngëta, ato shpesh formojnë zinxhirë të shkurtër, të ngjashëm me streptokoket. Prevmokokët janë të palëvizshëm, nuk kanë spore, formojnë një kapsulë në trup që i rrethon të dy koket. Kapsula përmban një substancë antifagin rezistente ndaj nxehtësisë (e cila mbron pneumokokun nga fagocitoza dhe veprimi i antitrupave). Kur rriten në lëndë ushqyese artificiale, pneumokoket humbasin kapsulën e tyre. Pneumokokët janë gram pozitiv. Bakteret gram-negative gjenden në kulturat e vjetra.

kultivimi. Pneumokoket janë anaerobe fakultative. Rriteni në një temperaturë prej 36-37 ° C dhe një pH prej 7.2-7.4. Ata janë kërkues ndaj mediave, pasi nuk mund të sintetizojnë shumë aminoacide, prandaj rriten vetëm në media me shtimin e proteinave vendase (gjak ose serum). Në agar me serum formohen koloni të vogla, delikate, mjaft transparente. Në agar me gjak, rriten koloni me lagështi të gjelbër-gri, të rrethuara nga një zonë e gjelbër, e cila është rezultat i shndërrimit të hemoglobinës në methemoglobinë. Pneumokokët rriten mirë në supë me shtimin e 0,2% glukozë dhe në supë me hirrë. Rritja në media të lëngshme karakterizohet nga turbullira e përhapur dhe sedimenti pluhur në fund.

Vetitë enzimatike. Pneumokokët kanë një aktivitet sakarolitik mjaft të theksuar. Ato zbërthehen: laktoza, glukoza, saharoza, maltoza, inulina me formimin e acidit. Mos fermentoni manitol. Vetitë e tyre proteolitike janë të shprehura dobët: ato mpiksin qumështin, nuk lëngëzojnë xhelatinën dhe nuk formojnë indol. Pneumokoket treten në biliare. Ndarja e inulinës dhe shpërbërja në biliare është një veçori e rëndësishme diagnostike që dallon Streptococcus pneumoniae nga Streptococcus pyogenes.

faktorët e patogjenitetit. Pneumokoket prodhojnë hialuronidazë, fibrinolizinë etj.

formimi i toksinave. Pneumokokët prodhojnë endotoksina, hemolizinë, leukocidinë. Virulenca e pneumokokut shoqërohet edhe me praninë e antifaginës në kapsulë.

Struktura dhe klasifikimi antigjenik. Në citoplazmën e pneumokokut ka një antigjen proteinik të përbashkët për të gjithë grupin, dhe në kapsulë ka një antigjen polisaharid. Sipas antigjenit polisakarid, të gjithë pneumokokët ndahen në 84 serovarë. Serovaret I, II, III janë patogjenët më të zakonshëm për njerëzit.

Rezistenca mjedisore. Pneumokokët i përkasin grupit të mikroorganizmave të paqëndrueshëm. Një temperaturë prej 60 ° C i shkatërron ato në 3-5 minuta. Janë mjaft rezistente ndaj temperaturave të ulëta dhe tharjes. Në sputum të tharë, ato mbeten të qëndrueshme deri në 2 muaj. Në një medium ushqyes, ato mbeten jo më shumë se 5-6 ditë. Prandaj, gjatë kultivimit, është e nevojshme të bëhet rimbjellja çdo 2-3 ditë. Zgjidhjet konvencionale të dezinfektuesve: 3% fenol, sublimohen në një hollim 1:1000 i shkatërrojnë ato në pak minuta.

Pneumokokët janë veçanërisht të ndjeshëm ndaj optokinës, e cila i vret ato në një hollim prej 1:100,000.

Ndjeshmëria e kafshëve. Njerëzit janë nikoqiri natyror i pneumokokut. Megjithatë, pneumokokët mund të shkaktojnë sëmundje tek viçat, qengja, derrat, qentë dhe majmunët. Nga kafshët eksperimentale, minjtë e bardhë janë shumë të ndjeshëm ndaj pneumokokut.

Burimet e infeksionit. Një person i sëmurë dhe një bartës bakterie.

Rrugët e transmetimit. Ajrore, mund të jetë ajrore.

porta e hyrjes. Membrana mukoze e traktit të sipërm respirator, syve dhe veshit.

Sëmundjet tek njerëzit. Pneumokoket mund të shkaktojnë sëmundje purulente-inflamatore të lokalizimit të ndryshëm. Specifike për pneumokokët janë:

1) pneumonia lobare;

2) ulçera zvarritëse e kornesë;

Sëmundja më e zakonshme është pneumonia krupoze, e cila prek një, më rrallë dy ose tre lobe të mushkërive. Sëmundja është akute, e shoqëruar me temperaturë të lartë, kollë. Zakonisht përfundon në mënyrë kritike.

Imuniteti. Pas sëmundjes, imuniteti i paqëndrueshëm mbetet, pasi pneumonia karakterizohet nga rikthime.

Parandalimi. Bëhet fjalë për masat sanitare dhe parandaluese. Profilaksia specifike nuk është zhvilluar.

Mjekimi. Përdoren antibiotikët - penicilina, tetraciklina, etj.

Pyetje kontrolli

1. Morfologjia e pneumokokeve. Vetitë kultivuese dhe enzimatike.

2. Cilët faktorë e përcaktojnë patogjenitetin e pneumokokeve dhe çfarë i mbron pneumokokët nga fagocitoza?

3. Cilat janë portat kryesore të infeksionit pneumokokal. Cilat sëmundje shkaktohen nga pneumokoket?

Hulumtimi mikrobiologjik

Qëllimi i studimit: zbulimi i pneumokokut.

Materiali kërkimor

1. Gëlbazë (pneumoni).

2. Mukus nga faringu (tonsiliti).

3. Shkarkimi nga ulçera (ulçera rrëshqitëse e kornesë).

4. Shkarkimi nga veshi (otitis media).

5. Qelb (abscesi).

6. Punktati pleural (pleuriti).

7. Gjak (dyshohet sepsis).

1 (Është më mirë të merret sputum në mëngjes (me pneumoni specifike, sputum ka një ngjyrë të ndryshkur).)

Metodat bazë të kërkimit

1. Mikroskopik.

2. Mikrobiologjike.

3. Biologjike.

Përparimi i kërkimit

mostër biologjike. Pak (3-5 ml pështymë) emulsohet në një supë sterile, 0,5 ml e kësaj përzierje injektohet në mënyrë intraperitoneale në një mi të bardhë. Pas 6-8 orësh, minjtë shfaqin shenja të sëmundjes. Në këtë kohë, pneumokoku tashmë mund të zbulohet në eksudatin e zgavrës së barkut. Eksudati merret me një shiringë sterile. Prej tij bëhen njolla, të ngjyrosura sipas Gramit dhe të mikroskopuar. Për të izoluar një kulturë të pastër, eksudati inokulohet në agar me serum. Nëse miu vdes ose sëmuret, gjaku kultivohet nga zemra në serum agar për të izoluar një kulturë të pastër. Të lashtat vendosen në një termostat.

Një metodë e përshpejtuar për përcaktimin e llojit të pneumokokut(reagimi i mikroaglutinimit). 4 pika eksudati nga zgavra e barkut të një miu të infektuar aplikohen në një rrëshqitje xhami. Serumi aglutinues i tipit I shtohet në pikën e parë, serumi i tipit II në të dytën, tipi III në të tretën dhe tretësira izotonike e klorurit të natriumit (kontrolli) në të katërtën.

Serumet e tipit I dhe II janë holluar paraprakisht në një raport 1:10, dhe serumi i tipit III - 1:5. Të gjitha pikat përzihen, thahen, fiksohen dhe ngjyrosen me magenta të holluar. Me një rezultat pozitiv në njërën nga pikat, vërehet grumbullimi mikrobik (aglutinimi).

Dita e dytë e hulumtimit

Kulturat hiqen nga termostati, ekzaminohen dhe bëhen njolla nga kolonitë e dyshimta. Në prani të diplokokeve heshtak gram-pozitive në njolla, 2-3 koloni izolohen në një pjerrësi të agarit me serum për të marrë një kulturë të pastër. Të lashtat vendosen në një termostat. Njollat ​​bëhen nga lëngu i mishit, të ngjyrosura me gram dhe të mikroskopuar.

Dita e tretë e hulumtimit

Të lashtat hiqen nga termostati. Kontrolloni pastërtinë e kulturës - bëni njolla, ngjyrosje Gram dhe mikroskop. Nëse në kulturën e izoluar ka diplokoke heshtak gram-pozitive, kultura e izoluar identifikohet me inokulim:

1) në median Hiss (laktozë, glukozë, saharozë, maltozë), mbjellja kryhet në mënyrën e zakonshme - me injeksion në medium;

2) në medium me inulin;

3) në medium me optokin;

4) vendosni një mostër me biliare.

Testi i inulinës. Kultura e studiuar mbillet në një mjedis ushqyes që përmban inulin dhe tretësirë ​​lakmusi dhe vendoset në një termostat. Pas 18-24 orësh, të korrat hiqen nga termostati. Në prani të pneumokokut, mediumi bëhet i kuq (streptokokët nuk e ndryshojnë konsistencën dhe ngjyrën e mediumit).

Përcaktimi i ndjeshmërisë ndaj optokinës. Kultura e izoluar mbillet në agar gjaku 10% që përmban optokin 1:50,000. Pneumokokët, ndryshe nga streptokokët, nuk rriten në media që përmbajnë optokin.

Testi i biliare. 1 ml e kulturës së supës së studiuar derdhet në tuba aglutinimi. Njërës prej tyre i shtohet një pikë biliare lepuri, provëza e dytë shërben si kontroll. Të dy epruvetat vendosen në një termostat. Pas 18-24 orësh, ndodh liza e pneumokokut, e cila shprehet në pastrimin e një lëngu të turbullt. Në komandë, pezullimi mbetet i turbullt.

Një mostër me biliare mund të vendoset në një medium të dendur ushqyes. Për ta bërë këtë, një kokërr biliare e thatë aplikohet në një koloni pneumokokësh të rritur në agar dhe pllakat e serumit - kolonia shpërndahet - zhduket.

Dita e katërt e hulumtimit

Rezultatet regjistrohen (Tabela 26).

Shënim. tek - zbërthimi i karbohidrateve me formimin e acidit.

Aktualisht, metodat e kërkimit serologjik (RSK dhe RIGA) përdoren gjerësisht për të përcaktuar antitrupat streptokoksikë. Përcaktimi i grupit dhe serovarit të kulturës së izoluar kryhet duke përdorur antitrupa fluoreshente.

Përcaktimi i virulencës pneumokokale. Kultura ditore e supës së pneumokokut hollohet me 1% ujë pepton nga 10 -2 në 10 -8, 0,5 ml nga çdo hollim u jepet dy minjsh të bardhë. Kultura që shkaktoi vdekjen e minjve në një hollim 10 -7 vlerësohet si virulente, në një hollim prej 10 -4 -10 -6 konsiderohet mesatarisht virulente. Kultura që nuk shkaktoi vdekjen e minjve është jovirulente.

Pyetje kontrolli

1. Cilat metoda të izolimit të një kulture të pastër të pneumokokëve dini?

2. Cila kafshë është më e ndjeshme ndaj pneumokokut?

3. Çfarë reaksionesh vihen me eksudatin e një miu të infektuar dhe për çfarë qëllimi?

4. Nga cilët përfaqësues të kokëve piogjenë duhet të diferencohet pneumokoku dhe me çfarë testi?

5. Si të përcaktohet virulenca e pneumokokut?

Ushtrimi

Hartoni një skemë të ekzaminimit të pështymës, duke treguar fazat e saj në ditë.

Media ushqyese

Serum agar(shih kapitullin 7).

Supë me hirrë(shih kapitullin 7).

agar me gjak(shih kapitullin 7).

Mediat e tij(e thatë).

Mjeti i testimit të inulinës. Në 200 ml ujë të distiluar shtoni 10 ml serum gjedhi të inaktivizuar, 18 ml tretësirë ​​lakmusi dhe 3 g inulinë. Sterilizoni me avull të rrjedhshëm në 100°C për 3 ditë rresht. Supë biliare (shih kapitullin 7).