Diagnostifikimi PCR i maceve. Diagnoza e infeksionit me koronavirus me reaksion zinxhir polimerazë (PCR)

I. Çfarë analizash duhen bërë për një mace ose një mace që kapet në rrugë?

Në mënyrë të rreptë, mjeku që merr pjesë duhet të përshkruajë studime në varësi të gjendjes së kafshës, por një specialist kompetent do të përshkruajë akoma një kombinim nga lista e mëposhtme. Unë rekomandoj të bëni teste edhe për kafshët me pamje krejtësisht të shëndetshme. Pse, do të bëhet e qartë ndërsa lexoni këtë artikull. Por në kotele deri në 2 muaj, nuk ka kuptim të merret gjak për analiza, përfshirë kontrollin për infeksione.

Organizoni analizat sipas përparësisë:

1. Për panleukopeni (metoda PCR).
2. Për infeksionet virale të ngadalta (me PCR).
3. Testi i përgjithshëm klinik i gjakut (kërkohet agjërimi 4 orë para dhurimit)
4. Testi biokimik i gjakut (kërkohet agjërimi 8-12 orë para dhurimit).
5. Analiza e urinës. (klinik i përgjithshëm, si dhe raporti protein-kreatininë).

Le të hedhim një vështrim më të afërt:

1. Panleukopenia ose sëmundje e maceve (infeksion parvovirus). Sëmundja më ngjitëse dhe më vdekjeprurëse tek macet. Nuk transmetohet te njerëzit dhe speciet e tjera të kafshëve. Nëse nuk trajtohet, shpesh çon në vdekje, veçanërisht në kotele. Vaksinimi me një preparat të importuar, i kryer çdo vit sipas të gjitha rregullave (me deworming të dyfishtë) mbron efektivisht nga kjo sëmundje. Prandaj, nëse keni mace të pavaksinuara në shtëpi, atëherë analiza është jashtëzakonisht e rëndësishme. Por edhe nëse nuk keni mace të tjera në shtëpi ose ato janë të vaksinuara, unë përsëri rekomandoj fuqimisht që ta bëni këtë test.

Edhe një kafshë me pamje krejtësisht të shëndetshme mund të jetë bartës i këtij virusi më të rrezikshëm (periudha e inkubacionit është nga 4 deri në 21 ditë) dhe nëse analiza zbulon virusin, mjekët mund të marrin masat e duhura për të zbutur rrjedhën e sëmundjes. Derisa të merret rezultati, unë rekomandoj të vëzhgoni.

1. Testet për infeksione të ngadalta. 4 infeksionet më të zakonshme janë leuçemia virale e maces, imunodefiçenca e maces, peritoniti viral i maces (FIP) dhe koronavirusi (enteriti viral). Nuk transmetohet te njerëzit dhe speciet e tjera të kafshëve. Testimi është thelbësor nëse keni macet tuaja (dhe nuk ka rëndësi nëse ato janë të vaksinuara apo jo, sepse nuk ka vaksina efektive kundër këtyre viruseve). Nëse nuk ka mace të tjera në apartament, atëherë është ende e dëshirueshme të dini për praninë e virusit në trupin e kafshës. këto infeksione mund të "dremitin" për vite pa asnjë manifestim të dukshëm, por bëhen më aktive në rast të një efekti stresues në trup (nga një ilaç i fortë antihelmintik deri tek anestezia gjatë operacionit) dhe kalojnë në një fazë akute. Nuk ka trajtim efektiv për leuçeminë, mungesën e imunitetit dhe FIP akute. Ekziston terapi mbështetëse, por jo gjithmonë është efektive. Derisa të merret rezultati, unë rekomandoj të vëzhgoni.

Kostoja e analizës me PCR (Unë rekomandoj vetëm këtë metodë) është 300-600 rubla, duke përjashtuar koston e marrjes së mostrave të gjakut për secilën (njollosje rektale), në varësi të laboratorit ose klinikës. Rezultati është në 1-3 ditë, gjithashtu në varësi të laboratorit. Disa laboratorë i kombinojnë këto analiza në një të ashtuquajtur. profil për të kursyer para. Për shembull, laboratori Nucleom, përmes klinikës veterinare të Akademisë Zoo, ofron një mundësi për të marrë teste për infeksione të ngadalta duke përdorur metodën PCR si pjesë e profilit për 900 rubla (dhe NUK përfshin koronavirusin, i cili rekomandohet të merret për 300 rubla shtesë, por përfshihet panleukopenia (!) dhe shtohet hemobartoneloza). Deri më sot, ky është më fitimprurës nga propozimet e njohura për mua në Moskë. Në laboratorët e tjerë dhe klinikat veterinare, një studim i tillë mund të kushtojë 2 herë më shumë.

1. Testi i përgjithshëm klinik i gjakut. Agjërimi për 4 orë kërkohet para lindjes. Shumë informuese për mjekët. Ai do të flasë për gjendjet akute, për shembull, proceset inflamatore në trup dhe do të ndihmojë mjekun të zgjedhë barnat e duhura për trajtim, nëse është e nevojshme. Konfirmoni ose hidhni poshtë rezultatet e studimeve nr. 1-2. Në të njëjtën kohë, kushton lira 300-600 rubla (duke përjashtuar koston e marrjes së mostrave të gjakut), prandaj rekomandohet rreptësisht për shpërndarje, për çdo mostër gjaku, për shembull, për studimet nr. 1-2.

1. Studimi biokimik i gjakut. Para lindjes, agjërimi për 8-12 orë është i nevojshëm. Do të tregojë gjendjen e organeve të brendshme dhe do të ndihmojë mjekun të përshkruajë trajtimin e duhur nëse është e nevojshme. Si dhe studimi #3, analiza mund të ndihmojë në konfirmimin e rezultateve të studimit #2. Është një grup treguesish, kështu që kostoja ndryshon në varësi të numrit të tyre dhe në laborator. Si rregull, nuk ka nevojë të pyesni se cilët tregues duhet të merrni. çdo laborator i kombinon ato në profile të veçanta. Ju mund të merrni standardin ose të zgjatur. Kostoja ndryshon në varësi të klinikës dhe laboratorit. Një profil standard kushton nga 900 rubla, një profil i zgjatur nga 1200 rubla pa marrë parasysh koston e marrjes së mostrave të gjakut.

Shënim i rëndësishëm. Nuk ka kuptim dhurimi i biokimisë së gjakut: a) gra shtatzëna, b) kotele deri në 4 muajsh, c) më herët se një muaj pas operacionit me anestezi! Rezultati do të jetë shumë i shtrembëruar dhe mund të mashtrojë mjekun, i cili do të përshkruajë trajtim të panevojshëm.

1. Analiza e urinës. 5.1. Klinike e përgjithshme. 5.2. Raporti proteinë/kreatininë.

Hulumtimi më i vështirë për sa i përket marrjes së materialit. Por për ta mbledhur atë, nuk keni nevojë ta çoni kafshën në klinikë. Një studim shumë i rëndësishëm që mund të zbulojë problemet e veshkave apo shenjat e urolithiasis në një fazë të hershme, të cilat studimi #3 nuk do të jetë në gjendje të tregojë kurrë. Në të njëjtën kohë, ai nuk ka të njëjtën urgjencë si në studimet #1-3. Urina duhet të mblidhet në një tabaka të pastër (!). Mund të përdorni një çantë speciale për grumbullimin e urinës (kushton 300-400 rubla), e cila është një kokrrizë që nuk thith lëngje, dhe një enë për urinë. Ju gjithashtu mund të përdorni një shiringë të zakonshme (20 ml) pa gjilpërë për të mbledhur urinën nga tabaka. Gjithashtu mund të transportohet në një laborator ose klinikë veterinare. Duhet të plotësohen disa kushte. Analiza nuk duhet të ruhet për më shumë se 5 orë nga momenti i grumbullimit deri në momentin e vendosjes në pajisje laboratorike. Duhet të ruhet dhe transportohet në të ftohtë. Gjatë transportit, unë rekomandoj përdorimin e një qese termike dhe ftohës. Nëse nuk keni një ftohës, atëherë mund të përdorni perime të ngrira J. Kostoja mesatare është rreth 600 rubla.

II. Ku të bëni teste?

A) Është e mundur në klinikë, e kombinuar me takimin fillestar me mjekun. Në çdo rast, do të duhet të shkoni te mjeku me rezultatet e analizave, sepse. interpretimi i analizave nr. 3-5 kërkon kualifikim mjekësor.

B) Direkt në laboratorë të specializuar. Në këtë rast, do të duhet të vendosni vetë se çfarë të dorëzoni dhe çfarë jo.

Në të njëjtën kohë, shumë klinika veterinare kanë laboratorët e tyre të aftë për të kryer kërkime nr.3-5, ndërsa kërkimet për viruset kërkojnë pajisje më të shtrenjta, ndaj klinikat, pa e pasur atë, materialin e grumbulluar e dërgojnë në laboratorë të specializuar me të cilët bashkëpunojnë. Laboratorët më të famshëm në Moskë (sipas rendit alfabetik): Vettest, Neovet, Nucleom, Pasteur, TsMD (autostrada Zvenigorod), Chance bio (rrjet). Me cilat laboratorë bashkëpunon një klinikë e veçantë veterinare (është e dëshirueshme që të ketë më shumë se një), si dhe koston e analizave, ju rekomandoj që ta zbuloni paraprakisht. Si rregull, të gjithë laboratorët kanë pajisje me cilësi të lartë, por cilësia e rezultateve të marra, për fat të keq, varet shumë nga faktori njerëzor. Pra, kjo është deri diku një llotari, dhe ndonjëherë ju duhet të rimerrni teste në laboratorë të ndryshëm për të konfirmuar ose hedhur poshtë këtë apo atë rezultat.

Lexoni rreth rregullave në një artikull të veçantë.

Reaksioni zinxhir i polimerazës (PCR) është një metodë e diagnostikimit molekular që është bërë "standardi i artë" për shumë infeksione, i testuar me kohë dhe i testuar tërësisht klinikisht. Ndjeshmëria dhe specifika e lartë e metodës bëjnë të mundur zbulimin e besueshëm të patogjenëve të vetëm në materialin biologjik bazuar në informacionin e tyre gjenetik. Ndjeshmëria analitike e PCR për shumicën e viruseve dhe baktereve është 1000 mikroorganizma për 1 ml kampion. Specifikimi i PCR për infeksionet virale, klamidiale, mikoplazmale dhe shumicën e infeksioneve të tjera bakteriale arrin 100%.

Metoda PCR u zhvillua relativisht kohët e fundit, por deri më tani ajo ka arritur të zërë një pozicion udhëheqës në diagnostikimin laboratorik mjekësor dhe veterinar të sëmundjeve infektive dhe parazitare. Parimet bazë të PCR u zbuluan në vitin 1983 nga kimisti amerikan Cary B. Mullis, për të cilin u nderua me çmimin Nobel.

Analiza PCR përbëhet nga disa faza. Faza e parë - përgatitja e mostrës - konsiston në përpunimin e materialit testues (përgatitja e një pezullimi, centrifugimi). Në fazën e dytë, materiali trashëgues - ADN ose ARN - izolohet nga qelizat. Në këtë rast, pas lizës së qelizave dhe shkatërrimit të kompleksit ADN-proteinë, ADN ose ARN depozitohet në sorbent, e ndjekur nga transferimi i tyre në tampon elucioni. Në fazën e tretë, kryhet amplifikimi, domethënë shumëzimi i numrit të seksioneve specifike të ADN-së. Për këtë përdoren sisteme testimi, të cilat përfshijnë abetare - oligonukleotide, të cilat janë specifike për secilin patogjen. Mostrat dhe kontrollet i shtohen përzierjes PCR të derdhur në mikrotuba, të cilët vendosen në një amplifikues ose ciklues termik - një termostat i programueshëm me shpejtësi të lartë dhe saktësi të temperaturës së caktuar. Procesi i amplifikimit përfshin tre faza: denatyrim, pjekje dhe zgjatim. Kur viruset e ARN-së zbulohen në ekzemplarët klinikë, amplifikimi paraprihet nga një hap i transkriptimit të kundërt, në të cilin ARN konvertohet në ADN duke përdorur enzimën reverse transkriptazë ose reversetazë. Faza e katërt e diagnostikimit të PCR është zbulimi elektroforetik i produkteve PCR - amplicons. Në këtë rast, produktet PCR vendosen në puset e një xheli agaroze dhe i nënshtrohen një rryme elektrike konstante, si rezultat i së cilës një molekulë e ADN-së e ngarkuar negativisht lëviz në elektrodën pozitive. Xhel përmban bromid etidium, i cili, duke formuar një kompleks të qëndrueshëm me ADN-në, i bën këto breza qartësisht të dukshme kur shikohen nën rrezatim ultravjollcë (Fig. 1).

Oriz. 1. Hapat e PCR

Duhet të theksohet se për të marrë një rezultat të besueshëm të analizës PCR, një kusht i domosdoshëm është respektimi i rregullave për përzgjedhjen, ruajtjen dhe transportin e materialit klinik. Edhe pse PCR është një metodë shumë e ndjeshme, është e dëshirueshme që të ketë një sasi të caktuar të patogjenit në mostër.

Marrja e materialit për hulumtime PCR duhet të kryhet në doreza të njëpërdorshme jo-talk (pasi talku pengon PCR). Gjatë marrjes së gërvishtjeve dhe larjeve, duhet të përdoren sonda sterile të disponueshme me adsorbim të shtuar (duke pasur një furçë në fund), pasi ato zgjedhin sasinë optimale të materialit.

Scrapings dhe flushes Nga mukozat e hundës, zgavra me gojë, vagina, konjuktiva, ato merren në mikrotuba plastike të disponueshme - eppendorfs - me një vëllim prej 1,5 ml, në të cilat derdhen 0,5 ml kripë sterile. Këshillohet që të mos përdorni sonda me majë pambuku. Thyerja e majës së sondës në tubin e kripës duhet gjithashtu të shmanget, pasi kjo e bën të vështirë përpunimin e mëtejshëm dhe rrit rrezikun e kontaminimit të mostrës. Për të marrë sasinë e nevojshme të materialit, mjafton të rrotulloni sondën në provëz për 1-2 minuta, duke shmangur spërkatjen e lëngjeve. Mostra duhet të jetë e turbullt në pamje dhe në qëndrim duhet të formojë një precipitat të vogël.

Marrja e mostrave të gjakut kryhet me një gjilpërë të disponueshme në një shiringë të disponueshme ose në një tub qelqi pa antikoagulant. Kur merret në një shiringë, gjaku prej tij transferohet me kujdes (pa shkumë) në një tub qelqi të disponueshëm. Është e mundur të përdoren sisteme vakum ("Vacuette") për marrjen e mostrave të gjakut. Serumi i gjakut mund të sigurohet për kërkime: epruvetat me gjak lihen në temperaturën e dhomës për 30 minuta derisa të formohet plotësisht një mpiksje, pastaj centrifugohen me 3 mijë rpm për 10 minuta dhe transferohen në një sasi prej të paktën 1 ml në eppendorf sterile me një vëllim prej 1,5 ml.

spermatozoidet të mbledhura në epruveta ose shishe sterile të disponueshme.

Urina. Pjesa e parë e urinës së mëngjesit merret në një sasi prej të paktën 20-40 ml në një shishkë sterile të thatë ose epruvetë.

Feces. Mostrat me peshë 1-3 gram merren nga një tabaka e para-dezinfektuar dhe e larë, transferohen me spatula të disponueshme në një shishkë sterile.

Pjesë të organeve të prekura nga kafshët e ngordhura merren në enë sterile të disponueshme ose në enë të pastër qelqi ose plastike.

Regjimet e temperaturës së ruajtjes dhe transportit të materialit të zgjedhur duhet të respektohen rreptësisht. Transporti kryhet në një enë termike me elementë ftohës ose në një termos me akull. Kur ruhet materiali për më shumë se një ditë, ai duhet të ngrihet në T minus 20°C.

Sëmundjet më të zakonshme te macet dhe qentë janë konjuktiviti, rinotrakeiti dhe enteriti. Për të zbuluar etiologjinë e sëmundjes, kërkohet kryerja e diagnostifikimit laboratorik me cilësi të lartë.

Konjuktiviti ose infeksionet e traktit të sipërm respirator te macet mund të shkaktohen nga infeksioni me mikroorganizmat e mëposhtëm: herpesvirus tip 1 (FHV1), kalicivirus i maces, Chlamediapcittaci. Mycoplasma felis, Bordetella bronchiseptica, reovirus i maces, Staphylococuc aureus, Brohaemolytic streptococcic dhe Salmonella tephimurium.

Shkaktarët më të zakonshëm, sipas autorëve të ndryshëm dhe metodave të kërkimit, janë virusi herpes i tipit FHY1 (nga 10% në 34%) dhe kalicivirusi i maces (nga 20% në 53%). Chlamydia pcittaci (10% deri në 35%).

Infeksioni me virusin herpes e shoqëruar me abort, vdekshmëri të lartë neonatale (infeksion në pothuajse 60% të rasteve) me shenja të pneumonisë intersticiale.
Calicivirus - i rëndë në kotele, në të njëjtën kohë, 25-80% e kafshëve të rritura të sëmura bëhen bartëse dhe janë burim infeksioni, duke e transmetuar virusin përmes pështymës.

Panleukopenia- një sëmundje virale ngjitëse e maceve, e karakterizuar nga një rënie e mprehtë e nivelit të leukociteve, gastroenteritit, rinitit me konjuktivit, vdekshmërisë së lartë (30-90% e koteleve të sëmura).

Plaga e vërtetë për çerdhet është peritoniti infektiv i maces- një sëmundje serioze, agjenti shkaktar i së cilës është një virus shumë patogjen që përmban ARN. Virusi përsëritet në bajamet dhe enterocitet e zorrëve të vogla, duke u shpërndarë në të gjithë trupin përmes makrofagëve dhe monociteve. Koronaviruset me virulencë të ulët shkaktojnë enterit të moderuar, më së shpeshti te kotelet pas shkëputjes nga gjiri. Koronavirusi shumë virulent mund të çojë në zhvillimin e peritonitit të thatë ose të derdhur. Peritoniti shoqërohet shpesh me insuficiencë renale, simptoma hepatike dhe neurologjike.

Kur infektohen adenoviruset si llojet ashtu edhe viruset murtaja mishngrënëse qentë shfaqin një sërë simptomash të zakonshme: ethe, konjuktivit dhe rinotrakeit, shqetësim gastrointestinal dhe dëmtim të sistemit nervor.

Në murtaja e mishngrënësve Shenjat klinike mund të përfshijnë rrjedhje seromukozale nga hunda dhe konjuktiva, kollë, dispne, pneumoni, të vjella dhe diarre, si dhe ethe dhe hiperkeratozë.

Adenovirus mishngrënës. Agjenti shkaktar është një adenovirus mishngrënës që përmban ADN i llojit të parë (shkakton hepatitin infektiv te mishngrënësit) dhe i llojit të dytë (shkakton adenovirus tek qentë). Vihet re ethe, apati, anoreksi, etje, të vjella dhe diarre, ndjeshmëri e murit të barkut në palpim. Ndonjëherë zhvillohet konjuktiviti, keratiti, fotofobia. Mund të ketë hemorragji të theksuara në mukozën dhe lëkurën. Çrregullime neurologjike vërehen rrallë.

Të gjitha këto sëmundje kanë një indeks të lartë ngjitësie dhe shoqërohen me vdekshmëri të lartë tek këlyshët, 10-50% e këlyshëve të sëmurë vdesin nga enteriti parvovirus, kur këlyshët e pavaksinuar infektohen me virusin e sëmundjes së qenit, vdekshmëria arrin në 100%.

Toksoplazmoza. Agjenti shkaktar është protozoari Toxoplasma gondii. Riprodhimi i patogjenit ndodh tek macet në muret e zorrëve. Me feces, ata sekretojnë oociste në mjedisin e jashtëm.

Kistet e indeve mund të shkaktojnë anoreksi, depresion, keratit, verdhëz, të vjella, diarre dhe simptoma neurologjike në varësi të organeve të prekura. Tek qentë, simptomat klinike varen nga organet e prekura: mund të vërehen çrregullime neurologjike (dridhje, ataksi, paralizë) ose mioziti toksoplazmatik (çrregullim në ecje, atrofi muskulore, ngurtësi), si dhe miokarditi dhe hepatiti.

Klamidia dhe ornitoza. Patogjenët në macet - Chlamydophila feels, në qen - Chlamydophila abortus, Ch. pecorum, në të dyja rastet sëmundja mund të shkaktohet nga Ch. psittaci. Në zogj - Ch. psittaci.
Tek macet, sëmundja manifestohet kryesisht në formën e konjuktivitit purulent dhe jo-purulent dhe mund të vërehen gjithashtu keratiti, riniti, pneumonia, vaginiti, abortet dhe infertiliteti. Konjuktiviti klamidial neonatal shfaqet tek kotelet. Tek qentë simptomat janë të ndryshme dhe manifestohen me sëmundje inflamatore të konjuktivës, organeve gjenitale, gastrit, artrit, abort dhe infertilitet. Ka dëshmi të një roli të klamidias në patogjenezën e aterosklerozës tek qentë.

Mikoplazmoza. Agjentët shkaktarë janë mikroorganizmat e gjinisë Mycoplasma. Vazhdon me shenja të bronkopneumonisë, keratokonjuktivitit dhe keratitit.

Virus mungesa e imunitetit të përgjumur në macet. Mungesa e imunitetit të maceve është një sëmundje e rëndë e shkaktuar nga një virus nga familja Retrovoridae, gjinia Lentivirus. Virusi sulmon sistemin imunitar dhe nervor. Ka një tropizëm për limfocitet T. Si rezultat i imunosupresionit, trupi bëhet i pambrojtur ndaj baktereve, kërpudhave, viruseve dhe vdes nga një infeksion dytësor.
Shenjat klinike zhvillohen ngadalë dhe sëmundja është më e zakonshme tek macet e moshës 6-10 vjeç.

Ka edhe sëmundje të tilla tek kafshët shtëpiake si: leptospiroza e qenve, listerioza e maceve dhe qenve, yersinioza e këlyshëve, bruceloza, enteriti rotovirus, tërbimi.

Korrektësia e analizës PCR dhe izolimi cilësor i infeksionit varet, para së gjithash, nga korrektësia e marrjes së materialit, dhe së dyti, nga pajtueshmëria me regjimin e temperaturës së ruajtjes dhe transportit të mostrave. Mostra e marrë në laborator regjistrohet, kalon në të gjitha fazat e PCR, i nënshtrohet zbulimit elektroforetik me nxjerrjen e mëvonshme të rezultatit përfundimtar.

Kështu, ndjeshmëria dhe specifika e lartë e metodës PCR bën të mundur zbulimin e besueshëm të patogjenëve të vetëm në materialin biologjik në një periudhë të shkurtër kohore, gjë që bën të mundur vendosjen e një diagnoze të saktë, përshkrimin e trajtimit adekuat dhe zhvillimin e masave parandaluese.

ATA. Donnik, Anëtar korrespondues i Akademisë Ruse të Shkencave Bujqësore, Doktor i Shkencave Biologjike, Profesor, N.A. Pelevin, studiues i ri, O.G. Bodrova, studiues i ri,
Institucioni Shkencor Shtetëror Instituti i Kërkimeve Veterinare Shtetërore Ural i Akademisë Ruse të Shkencave Bujqësore

Çdo vit, falë përparimit shkencor, shfaqen metoda dhe diagnostikime të reja moderne, moderne të sëmundjeve të kafshëve. Tani, pothuajse në çdo klinikë veterinare, Diagnoza PCR e infeksioneve ndonjë kafshë shtëpiake. Klinika “Paws-scratches” ka një laborator të veçantë ku mund të kryeni analiza të ndryshme.

Falë këtyre zhvillimeve inovative, ne mund të diagnostikojmë saktë çdo sëmundje infektive te kafshët shtëpiake në kohën e duhur. Kjo është veçanërisht e rëndësishme për sëmundjet e rënda që duhet të zbulohen në fazat e hershme dhe të cilat nuk mund të përcaktohen gjithmonë nga teste të tjera klinike ose ultratinguj. Preaksioni zinxhir i polimerazës(PCR)është një metodë diagnostike e domosdoshme për kërkime të rëndësishme veterinare, dhe përdoret paralelisht me metodat bakteriologjike dhe imunokimike.

Në klinikën "Paws-gërvishtjet" ekziston një speciale laborator për diagnostikimin PCR infeksionet e kafshëve. Ne ofrojmë shërbime në rajonin e Leningradit dhe Shën Petersburg. Një tipar dallues i shërbimeve tona është marrja e mostrave në shtëpinë tuaj dhe një shërbim korrier falas.

Diagnostifikimi PCR i infeksioneve është mënyra më e saktë, moderne, më e shpejtë e kërkimit në virologjinë veterinare dhe mikrobiologjinë, e cila lejon jo vetëm identifikimin e sëmundjeve, por edhe përcaktimin e ARN-së, ADN-së së virusit dhe antitrupave ndaj tij.

Përparësitë e diagnostikimit PCR:

Aftësia për të zbuluar infeksionin në rastet kur është e pamundur të përcaktohet me metoda të tjera

Shpejtësia e hulumtimit, e cila shpjegohet me faktin se nuk kërkon shumë kohë për t'u rritur dhe për të përcaktuar patogjenët

Procesi është plotësisht i automatizuar dhe i standardizuar, gjë që eliminon edhe gabimet më të vogla, ndryshe nga kërkimi manual.

Rezultati i hulumtimit është gati brenda 12 orëve

Diagnostifikimi - universal, pasi ndihmon në identifikimin e patogjenëve në lëngje të ndryshme dhe inde biologjike

Vlera të mëdha Diagnostifikimi PCR i kafshëve ka në fazat e hershme të sëmundjeve si bruceloza, klamidia, leucemia, leptospiroza, listerioza e shumë të tjera. Përdorimi i kësaj metode bëri të mundur zhvillimin e programeve unike për shërimin e suksesshëm të shumicës së sëmundjeve infektive dhe virale te kafshët shtëpiake.

Përdoreni këtë metodë unike diagnostikuese nëse dëshironi që kafsha juaj të jetë e shëndetshme dhe t'ju kënaqë për shumë vite! Diagnoza PCR e infeksioneve është shpesh mundësia e vetme për të shpëtuar një jetë! Për çdo pyetje që mund të keni, specialistët e klinikës Lapki-Scratchy do t'ju përgjigjen me detaje online ose me telefon. Na kontaktoni, ne do ju vijmë gjithmonë në ndihmë kafshëve tuaja shtëpiake!

Peritoniti infektiv i maces- një sëmundje virale sistemike (Coronavirus), e cila prek shumë inde të trupit. Janë identifikuar dy forma të sëmundjes: e lagësht dhe e thatë. Në formën e lagësht, lëngu inflamator grumbullohet në zgavrën e barkut. Në formë të thatë, virusi sulmon organe të ndryshme si veshkat dhe shpretkën. Nuk ka kurë për këtë sëmundje dhe rezultati është pothuajse gjithmonë fatal. FIP më së shpeshti diagnostikohet te kotelet dhe macet e rritura nën 3 vjeç. Macet në kafaze ose në familje me shumë kafshë shtëpiake janë në rrezikun më të lartë të zhvillimit të sëmundjes.

informacion shtese
FIP është një sëmundje virale sistemike e karakterizuar nga një fillim latent, temperaturë të përsëritur të pakontrolluar, reaksion piogranulomatoz, akumulim të eksudatit në zgavrat e trupit dhe vdekshmëri të lartë.

Patofiziologjia
Virusi FPV replikohet lokalisht në qelizat epiteliale të traktit respirator ose orofaringut. Trupat viralë fillojnë të prodhohen dhe virusi absorbohet nga makrofagët. Virusi transportohet nga makrofagët/monocitet në të gjithë trupin, duke u lokalizuar në muret e venave të ndryshme dhe hapësirën perivaskulare. Replikimi lokal perivascular i virusit dhe reaksioni pasues piogranulomatoz nga indet formon një pamje karakteristike të lezionit në FIP.

Sistemet e prekura

• Shumësistemike - lezione piogranulomatoze ose granulomatoze ndodhin në omentum, në membranat seroze të organeve të barkut si mëlçia, veshkat, zorrët, në nyjet limfatike të barkut dhe në submukozën e zorrëve.
• Respiratore - lezione në sipërfaqen e mushkërive, derdhje pleural me një formë të lagësht të IPC.
• Lezionet nervore - vaskulare shfaqen në të gjithë SNQ, veçanërisht në membranat
• Oftalmike - dëmtimi mund të manifestohet me uveit dhe koreoretinit.

predispozicion gjenetik
Nr.

Prevalenca
Prevalenca e antitrupave kundër koronavirusit të maces (virusi FPK, FCoV, FCoV) është i lartë në shumicën e popullatave, veçanërisht aty ku shumë mace mbahen së bashku. Incidenca e sëmundjes klinike është e ulët në shumicën e popullatave, veçanërisht në macet që mbahen vetëm. Për shkak të vështirësisë në diagnostikim, kontroll dhe parandalim, një shpërthim i FPV në hotelet e maceve mund të jetë katastrofik.

shenjat peritoniti infektiv, viral i maceve (IPK, FIP, FIP)

Macet shtëpiake dhe macet ekzotike janë të ndjeshme ndaj infeksionit FPV.

Predispozicion race
Disa familje ose lloje macesh tregojnë një predispozitë më të madhe për të zhvilluar formën klinike të sëmundjes pas infeksionit FPV. Midis maceve ekzotike, cheetah janë veçanërisht të prirur për të zhvilluar FIP fatale.

Mosha mesatare dhe diapazoni
Një prevalencë e lartë e FIP ndodh tek kotelet në moshën 3 muajshe. deri në 3 vjet. Prevalenca zvogëlohet pasi macja mbush moshën 3 vjeç.

Predispozicion seksual
Nr

Anamneza
Komentet e Përgjithshme
Një gamë e gjerë karakteristikash mund të shfaqen në varësi të virulencës dhe patogjenitetit të llojit të virusit të përfshirë, efektivitetit të sistemit imunitar të bujtësit dhe sistemeve të prekura. Ekzistojnë dy forma klasike të sëmundjes, e lagësht, me derdhje eksudatesh në zgavrën e trupit dhe e thatë, e cila prek organe të ndryshme.
Anamneza

1. Ka një fillim të fshehur
2. Zhdukje graduale humbje e oreksit
3. ngecja
4. Rritja graduale e volumit të barkut, zhvillimi i pikëllimit, ascitit, pamja e kafshës me bark në tenxhere.
5. Ethe e vazhdueshme pa përgjigje ndaj antibiotikëve

Rezultatet e ekzaminimit fizik

• depresioni, shtat i shkurtër
• Gjendje e keqe e përgjithshme - humbje peshe dhe gjendje e keqe e veshjes
• Efuzionet abdominale dhe pleurale
• Palpimi mund të zbulojë masa abdominale (granuloma ose piogranuloma) në omentum, në sipërfaqen e organeve të brendshme, veçanërisht të veshkave dhe në muret e zorrëve. Nyjet limfatike mezenterike mund të zmadhohen.
• Sytë: , çngjyrosje e irisit, formë e çrregullt e bebëzës.
• Shenjat neurologjike mund të përfshijnë opsione të ndryshme.

Shkaqet
FPV shkaktohet nga një nga dy llojet e koronavirusit të maces. Shumica e infeksioneve, ndoshta 85%, shkaktohen nga virusi i tipit 1 (FCoV-1), pjesa tjetër nga tipi 2 (FCoV-2). Është shumë e rëndësishme të bëhet dallimi midis dy biotipeve të virusit, specieve më pak virulente dhe jovirulente të virusit enterik (koronavirusi enterik i maces ose virusi enterik i maces) dhe specieve virulente që shkaktojnë FIPV. Në fakt, PVVV dhe FIPV mund të bëhen ose të tipit 1 ose të tipit 2. Në secilin lloj ekziston një spektër virulence i viruseve jovirulente që shkaktojnë infeksione asimptomatike dhe infeksion fatal FIPV.

Faktoret e rrezikut

• Hyrja e një maceje me antitrupa FCoV pozitive në një popullatë macesh negative ndaj antitrupave FCoV (të pambrojtura nga antitrupat anti-FPV)
• Macet mbahen në grupe

Diagnostifikimi FIP

Forma e lagësht e FIPS mund të identifikohet lehtësisht klinikisht, ndërsa forma e thatë është e vështirë për t'u diagnostikuar me saktësi. Nuk ka asnjë test të vetëm laboratorik për diagnozën e FIPS sepse sëmundja ndryshon nga rasti në rast.

Diagnoza diferenciale

• Ethet me origjinë të panjohur. Kjo diagnozë mund të bëhet kur të gjitha shkaqet e tjera të mundshme të hipertermisë janë refuzuar.
• Sëmundjet e zemrës që shkaktojnë derdhje pleural. Ky derdhje do të ketë një densitet dhe numër qelizash relative të ulët në krahasim me densitetin e lartë dhe numrin e lartë të qelizave të një derdhjeje FIPS.
• Lezionet e limfomës, veçanërisht të veshkave, mund të jenë të ngjashme me FIP në palpim. Tumoret e SNQ mund të shfaqin shenja të ngjashme me ato që shihen në FIP. Shumica e maceve me një test pozitiv për antigjenin FIPK. Në macet me rezultat negativ të testit, biopsitë e lezioneve (nëse është e mundur) duhet t'i nënshtrohen analizës histopatologjike ose imunokimike për antigjenin FIPK.
• Sëmundjet e frymëmarrjes të shkaktuara nga kalicivirusi i maces dhe herpesvirusi i maces, klamidia ose bakteret e ndryshme.
• Pansteatiti (sëmundja e yndyrës së verdhë). Dhimbje në prekje të barkut dhe një dietë me vetëm peshk.
• Panleukopenia që shkakton enterit. Numri i qelizave të bardha të gjakut duhet të jetë i ulët.
  Diagnoza
• Kjo sëmundje dyshohet në mungesë të përgjigjes së temperaturës ndaj antibiotikëve, pranisë së eksudateve në gjoks dhe në zgavrat peritoneale pa agjentë infektivë të dukshëm, hiperglobulinemi dhe rritje të përmbajtjes së proteinave në efuzion kur laget.
• Dështimi i zemrës, limfosarkoma dhe këputja e kanaleve limfatike etj. sëmundjet me shenja të efuzionit të gjoksit dhe abdominal duhet të monitorohen dhe monitorohen me kujdes, si dhe leuçemia e maces, virusi i mungesës së imunitetit të maces dhe panleukopenia e maces.
• Për arsye të ndryshme, izolimi i virusit nuk është praktik.
• Procedurat serologjike: Disa laboratorë diagnostikues nuk janë në gjendje të testojnë për FIPS për shkak të vështirësisë në interpretimin e rezultateve. Një analizë e imunofluoreshencës pozitive FIPK (ELISA) tregon vetëm se kafsha është ekspozuar ndaj virusit, duke mos konfirmuar praninë e virusit. Megjithatë, ka disa prova që shumë mace serologjikisht pozitive e kanë pastruar koronavirusin, ndoshta në traktin respirator ose gastrointestinal. Testet pozitive duke përdorur ELISA ose ELISA nuk japin një diagnozë të garantuar të FIP.
• Një rezultat pozitiv i testit ELISA për FIP (titri 1:50 deri në 1:6000), së bashku me shenjat klinike të FIP, tregojnë manifestimin e saktë të FIP. Edhe pse e pazakontë, disa mace që shfaqin shenja të FIPS janë serologjikisht negative.

ELISA (analizim imunosorbent i lidhur me enzimën) preferohet nga shumë laboratorë diagnostikues sesaELISA.

• Kompletet diagnostikuese për diagnostikimin ELISA dhe ELISA janë të disponueshme për përdorim në koronavirusin e maces, por rezultatet duhet të interpretohen me kujdes.
• Proteina totale, e përcaktuar me elektroforezë, është rritur ndjeshëm.
• Një ngjyrosje pozitive e mostrave (nga mushkëritë, mëlçia, veshkat, nyjet limfatike mezenterike dhe pleurale) me antitrupa specifikë fluoreshentë për FIP konsiderohet një diagnozë përfundimtare. Koronavirusi enterik reagon ndaj testit FIPS.
• Gjatë jetës, kafshët në gjak mund të zbulojnë anemi të rëndë, neutrofili dhe leukopeni.
• Një analizë PCR është gjithashtu e disponueshme në treg për të ndihmuar në identifikimin e virusit në inde të ndryshme.

Testet e gjakut dhe urinës

• Macet me FIP priren të zhvillojnë leukopeni në fillim të rrjedhës së infeksionit, por më vonë zhvillojnë leukocitozë me neutrofili dhe limfopeni.
• Anemia me ashpërsi të ndryshme mund të zbulohet - nga e moderuar në të rëndë.
• Zakonisht vërehet një rritje në nivelin e globulinës totale të plazmës.
• Hiperbilirubiuria është shpesh e pranishme.

Testet laboratorike

• Testi i antitrupave në serum zbulon antitrupa kundër koronaviruseve të maces. Një rezultat pozitiv është jo diagnostikues dhe mundësisht tregon një infeksion të mëparshëm FPV. Lidhja midis vlerës së titrit të sipërm dhe konfirmimit të mundshëm të FIPS nuk është e fortë.
• PCR (reaksioni zinxhir i polimerazës) ju lejon të përcaktoni antigjenin viral. Saktësia e një testi pozitiv lidhet me manifestimin klinik të sëmundjes.
• Imunohistokimia (imunoperoksidaza) është e disponueshme për të përcaktuar antigjenin FIPK në qeliza të caktuara në ekzemplarët histopatologjikë nga macet në ekzaminimin pas vdekjes me sëmundje fatale dhe ekzemplarë të biopsisë. Ky test është i shkëlqyer për të konfirmuar FIP.

Metodat e diagnostikimit vizual zakonisht nuk kërkohet, por mund të ndihmojë në zbulimin e efuzioneve abdominale dhe pleurale dhe lezioneve piogranulomatoze.
Lëngu në formën e lagësht të FIP mund të gjendet edhe në zgavrën e barkut (ascit).
Ekografia jep informacion shtesë që nuk mund të merret me rreze x. Në këtë rast, nyjet limfatike të zgjeruara në qendër të zorrëve.

Rrezet X: 1 . Opacifikimi difuz në pjesën e poshtme të gjoksit për shkak të rrjedhjes pleural, për shkak të të cilit kufijtë e zemrës 2 jo e dukshme, por e lehtë 4 i zhvendosur në shtyllën kurrizore dhe pak i ajrosur, 3 - trake, 5 - mëlçi, 6 - stomaku, 7 - zorrët

Procedura të tjera diagnostikuese

• Lëngu i përftuar nga kavitetet e kraharorit dhe të barkut është i zbehtë ose në ngjyrë kashte, viskoz, shpesh i ndërthurur me fibrinë dhe pasi vendoset, mpiksjet vendosen në të. Dendësia specifike e një lëngu të tillë është zakonisht e lartë (1.030-1.040).
• Laparoskopia mund të jetë e dobishme në zbulimin e lezioneve specifike në zgavrën e barkut dhe marrjen e mostrave të indeve për konfirmim histopatologjik dhe imunokimik.
• Një laparotomi eksploruese mund të zbulojë të vërtetën nëse ka vështirësi në vendosjen e një diagnoze dhe nëse laparoskopia nuk është e disponueshme.

Ndryshimet e jashtme dhe histopatologjike

Monitorimi i pacientit
Në një mace me FIP, është e nevojshme të kontrollohet akumulimi i eksudatit në zgavrën pleurale.

Parandalimi

• Ekziston një vaksinë FIPV intranazale MLV e disponueshme në treg. Megjithatë, efikasiteti i kësaj vaksine është i ulët dhe për këtë arsye nuk mund të mbështetet plotësisht për të kontrolluar FPV.
• Mënyra kryesore e transmetimit të FPV është nga macet bartëse asimptomatike te kotelet në moshën 5-7 javë, kur imuniteti kolosral fillon të zbehet. Prandaj, shkëputja e hershme e koteleve në moshën 4-5 javëshe dhe rritja e koteleve të izoluara nga kontakti i drejtpërdrejtë me macet e tjera, duke përfshirë edhe nënat, do të ndërpresë ciklin e transmetimit të virusit nga nëna tek pasardhësit.
• Dezinfektimi rutinë i habitatit të maces dhe produktet e kujdesit dhe ushqimit do të çaktivizojnë me shpejtësi virusin dhe do të zvogëlojnë rrezikun e transmetimit nga macja në mace.
• Vetëm macet negative ndaj antitrupave FCoV duhet të futen në një kasolle ose koloni për të siguruar që trupi të jetë i lirë nga virusi. Vaksinimi mund t'i bëjë macet antitrupa pozitive dhe mund ta vështirësojë kontrollin e virusit në popullatë.

Komplikimet e mundshme
Efuzioni pleural kërkon torakocentezën si trajtim.

Kursi dhe parashikimi i pritshëm
FIP mund të fillojë të shfaqë shenja klinike brenda disa ditësh ose disa muajsh. Prognoza është fatale pas shfaqjes së shenjave tipike të infeksionit FPV, duke arritur në vdekshmërinë 100%.

Karakteristikat klinike zakonisht lidhen me këtë sëmundje.

• Ulje e tensionit në EKG, dobësim i komplekseve dhe amplitudë e ulët.
• Tingujt e mbytur të zemrës
• Takikardi, rritje e rrahjeve të zemrës
• Shtrirja e barkut
• Anoreksi, reduktim ose humbje oreksi
• Ascitet
• Ulje e volumit fekal, kapsllëk, pa feces
• Diarreja
• Disfagia
• Hepatosplenomegalia, splenomegalia, hepatomegalia
• Polifagia, oreksi i tepruar
• Pozicionimi jonormal proprioceptiv
• Ataksi, moskoordinim, rënie
• Cianoza
• Dehidratim
• Dismetria, hipermetria, hipometria
• intoleranca ndaj ushtrimeve
• Ethe
• Çalimi i gjymtyrëve të përparme
• Diagnoza e Përgjithshme
• Dobësi e përgjithësuar
• Dobësi në kokë, qafë, parezë, paralizë
• Hemipareza
• Çalimi i gjymtyrëve të pasme
• Masat në bark
• mungesa e rritjes
• Limfadenopatia
• Opisthotonus
• Lëkura e zbehtë dhe mukoza
• Polydipsia
• Ënjtje në prepucë, testikuj, penis, skrotum
• Tetrapareza, dobësi, paralizë e 4 gjymtyrëve
• Dridhje, dridhje, fascikulim
• Humbje peshe
• Sjellje jonormale, agresion, ndryshim në zakone
• Reflekset jonormale të gjymtyrëve të përparme, të rritura ose të pakësuara
• Reflekset jonormale të gjymtyrëve të pasme, të rritura ose të pakësuara
• duke qarkulluar
• Çorientim, humbje memorie
• Marrëzi, depresion, letargji
• Delirium, delirium, mani, agjitacion
• Hipoestezia e gjymtyrëve të përparme, anestezi
• animi i kokës

• hiperestezia, hiperaktiviteti
• Hipertensioni muskulor, miotonia
• Hipotensioni muskulor
• Propulsion, fermentim pa qëllim
• Konvulsione ose të fikët, konvulsione, kolaps
• Dridhja
• Refleks jonormal i pupilës ndaj dritës
• Reflektim jonormal i retinës
• Madhësia jonormale e enëve të retinës
• Anisokoria
• Blefarospazma
• Verbëri
• Kemoza, edema e konjuktivës, kornea
• Vaskularizimi jonormal i konjuktivës dhe kornesë
• Skuqje e konjuktivës, kornesë
• Edema e kornesë
• Pannus
• Hifema, "sy i zi"
• Hipopion
• lakrimim
• Mioza, tkurrja e bebëzës
• Mydriasis, zgjerim i bebëzës
• nistagmus
• Errësim i trupit qelqor
• Atrofia e nervit optik, zvogëlimi i madhësisë së nervit optik
• Shkarkim purulent nga sytë
• Shkëputja e fibrave
• Paloset dhe gunga në retinë
• Hemorragjitë e retinës
• Synechia
• dhimbje shpine
• dhimbje qafe
• Dhimbje nga presioni i jashtëm në bark
• Madhësia jonormale e testisit
• Kollë
• Zbutja e tingujve të mushkërive
• Dispnea
• Takipnea
• Shkarkimet mukoze të hundës, seroze, ujore
• Shkarkim purulent nga hunda
• Vrazhdësi dhe parregullsi e leshit
• Glukozuria
• Ketonuria
• Polyuria

Mjekimi

Në varësi të ashpërsisë së rrjedhës së sëmundjes, kafsha duhet të trajtohet ose spitalore ose ambulatore, dëshira dhe aftësia e pronarëve për të ofruar kujdes të mirë mbështetës.

Aktiviteti
Aktiviteti i kafshës duhet të reduktohet për të zvogëluar përhapjen e virusit te macet e tjera.

Dieta
Anoreksia dhe humbja e peshës janë problemet kryesore në FIP. Çdo dietë që inkurajon kafshën për të ngrënë është e mirëpritur.

Trajnimi i pronarëve
Diskutoni aspekte të ndryshme të WIPC. Përfshirë një prognozë fatale në diagnozën përfundimtare.

Aspektet kirurgjikale
Nr

Medikamentet

• Nuk ka ilaçe për trajtimin efektiv të FIPV. Macet me infeksion të përgjithësuar FPV pothuajse gjithmonë vdesin.
• Barnat imunosupresive si prednizoni dhe ciklofosfamidi janë përdorur me sukses të kufizuar. Kortikosteroidet si injeksione subkonjuktivale janë efektive vetëm në manifestimin okulistik të sëmundjes.
• Interferonet, edhe pse efektive in vitro, kanë pasur sukses të kufizuar në trajtimin e FILI. Interferoni rekombinant është vlerësuar të ketë pasur njëfarë suksesi në trajtimin e FILI në Japoni.
• Antibiotikët nuk janë efektiv sepse infeksionet bakteriale dytësore nuk janë pjesë e manifestimit klinik të sëmundjes.

Kundërindikimet
Nr

Kujdeset
Nr

Ndërveprimet e mundshme
Nr

Droga alternative
Nuk ka barna efektive antivirale për FIPV.

Parashikim
FIPS zgjidhet klinikisht brenda disa ditësh deri në disa muaj. Prognoza është fatale me shfaqjen e shenjave karakteristike klinike, vdekshmëria është 100%.

PCR është një reaksion zinxhir polimerazë i bazuar në parimin e kopjimit të një seksioni specifik të një vargu të ADN-së. Për shkak të rritjes së përsëritur të vëllimit të materialit të ADN-së, bëhet i mundur zbulimi i baktereve të dëshiruara në mikroskop. Avantazhi i PCR është:

• ndjeshmëri e lartë;
• specifikë e lartë;
• zbulimi i infeksioneve akute dhe latente;
• aftësia për të identifikuar ndonjë nga patogjenët e njohur aktualisht.

PCR në mjekësinë veterinare

Aktualisht, metoda e diagnostikimit PCR ka gjetur aplikim të gjerë në mjekësinë veterinare. Kjo metodë kërkimore ju lejon të merrni një përgjigje të besueshme në një kohë të shkurtër. Përveç kësaj, ajo kërkon një sasi shumë të vogël të materialit biologjik, ndryshe nga, për shembull, një test i përgjithshëm i gjakut, i cili thjeshton shumë punën e veterinerëve. Si te njerëzit ashtu edhe te kafshët, materiali për PCR mund të jetë:

• gjaku dhe përbërësit e tij;
• urinë;
• biopsia e stomakut;
• pështymë;
• gërvishtjet e qelizave epiteliale.

Diagnostifikimi PCR për macet

Gjatë ekzaminimit të një maceje nga një veteriner, për të konfirmuar ose hedhur poshtë diagnozën e supozuar, mund të jetë e nevojshme të bëhet një test PCR në mace. Arsyeja e caktimit të një studimi të tillë mund të jetë sëmundjet më të zakonshme dhe në të njëjtën kohë të vështira për t'u diagnostikuar, si peritoniti, rinotrakeiti, koronavirusi, toksoplazmoza etj.

Një sëmundje veçanërisht serioze në të cilën kërkohet metoda PCR është imunodefiçenca virale tek macet. Ky virus ndikon jo vetëm në sistemin imunitar, por edhe në sistemin nervor të kafshës. Trupi i maces dobësohet dhe bëhet i pambrojtur ndaj baktereve dhe viruseve, si rezultat i të cilave kafsha vdes nga infeksionet dytësore. Dhe për të përjashtuar praninë e këtij virusi, veterineri rekomandon kryerjen e një reaksioni zinxhir polimerazë te mace.

Kjo metodë, përveç shumëllojshmërisë së avantazheve, ka një sërë disavantazhesh. Të gjitha pajisjet për diagnostikimin PCR janë shumë të ndjeshme, dhe për këtë arsye ndotja më e vogël mund të japë një përgjigje të rreme pozitive. Kostoja e lartë e pajisjeve dhe reagentëve konsiderohet gjithashtu jo e parëndësishme, kështu që jo çdo klinikë veterinare në Moskë mund ta blejë atë. Sidoqoftë, diagnoza e sëmundjeve pa këtë metodë po bëhet gjithnjë e më e vështirë, prandaj analiza PCR në macet në Moskë mund të bëhet në klinikën tonë duke kontaktuar numrat e kontaktit ose duke lënë një kërkesë në faqen e internetit.