Diagnosticum Salmonella eritrocite vi lëngu antigjenik. Diagnosticum eritrociti Salmonella V-antigjenik

Një grup reagentësh Diagnosticum Salmonella VI-antigjenik është menduar për zbulimin në serumin e gjakut të njeriut të antitrupave specifikë ndaj antigjenit V të tifos Salmonella në reagimin e hemaglutinimit pasiv (RPHA).

1. TIPARET E KIT

2.1. Parimi i metodës.

Parimi aktiv i Diagnosticum Salmonella VI-antigjenik është antigjeni V i fiksuar në sipërfaqen e eritrociteve. Kur ndërveprohet me serumet që përmbajnë antitrupa ndaj antigjenit Vee, vërehet fenomeni i aglutinimit të eritrociteve.

2.2. PËRBËRJA E SETIT

1. KARAKTERISTIKAT ANALITIKE DHE DIAGNOSTIKE.

3.1. Diagnosticum duhet të aglutinohet në RPHA me serumin e receptorit B diagnostikues të adsorbuar nga Salmonella të thatë në një hollim prej të paktën 1:160.

Niveli i kushtëzuar i karakteristikave diagnostike të serumit të gjakut të njerëzve të shëndetshëm duhet të konsiderohet një hollim i serumit jo më i lartë se 1:20.

3.2. Koha e analizës është 2 orë.

3.3. Kompleti është krijuar për 8 përkufizime.

1. MASAT PARANDALUESE

Kur punoni me kompletin, duhet të ndiqni "Rregullat për dizajnin, masat paraprake të sigurisë, kanalizimet industriale, regjimin anti-epidemik dhe higjienën personale kur punoni në laboratorë (departamente, departamente) të institucioneve sanitare dhe epidemiologjike të sistemit të Ministrisë së Shëndeti i BRSS (M., 1981).

Serumet e analizuara, si dhe reagentët në kontakt me to, duhet të konsiderohen si potencialisht infektues, të aftë për ruajtjen ose transmetimin afatgjatë të HIV-it, virusit të hepatitit ose ndonjë agjenti tjetër shkaktar të një infeksioni viral - ato duhet të trajtohen me kujdes. :

• punë në doreza gome;
• gjatë tubimit është e nevojshme të përdoren pipeta automatike;
• në fund të punës, serumet e analizuara dhe reagentët në kontakt me to, instrumentet, duhet të trajtohen me tretësirë ​​dezinfektuese.
• Fshini pajisjet para dhe pas punës me alkool etilik 70%.

Serumet e analizuara duhet të çaktivizohen në 56 0 C për 30 minuta.

Serumi i thatë i inaktivizuar me receptorin diagnostikues të salmonelës Vee i përfshirë në komplet.

Rezultatet e analizës objektive garantohen në kushtet e mëposhtme:

• ruajtja e të gjithë reagentëve të kompletit duhet të kryhet në një temperaturë prej 2 deri në 8 0 C;
• mos përdorni reagentë të skaduar;
• mos përdorni reagentët e kompletit nëse nuk janë etiketuar në përputhje me rrethanat në paketimin e tyre;
• për RPHA, përdorni reagentë të përfshirë vetëm në këtë komplet.

Vi-Diagnosticum

Diagnosticum Vee

Vi-antigjenik

Një test gjaku i kryer mirë ndihmon në zbulimin e patogjenëve të sëmundjeve të ndryshme komplekse në trup në fazat e hershme të zhvillimit të tyre, dhe ndonjëherë edhe para fillimit të simptomave klinike të sëmundjes. Shumë shpesh, mjekët u përshkruajnë pacientëve një analizë për një reaksion aglutinimi. Më pas do të merremi me faktin se ky është një test gjaku RPHA, kur përdoret dhe për çfarë mund të tregojë?

Parimi i funksionimit

Reaksioni indirekt i hemaglutinimit (i quajtur edhe reaksioni i hemaglutinimit pasiv, i njohur gjithashtu si RPHA, RNHA) ndodh kur eritrocitet që thithin antigjenin ekspozohen ndaj serumit imunitar që korrespondon me këtë antigjen.

Studimet kanë treguar se kjo metodë është dukshëm më e lartë se testet e tjera serologjike për nga specifika dhe ndjeshmëria. Prandaj, shpesh përdoret për të zbuluar sëmundjet e shkaktuara nga bakteret ose rikecitë. Ekstraktet bakteriale, antigjenet e pastruar të mikrobeve të ndryshme, përbërësit e vaksinave bakteriale mund të shërbejnë si antigjene për një analizë të tillë.

Pasi një bakter patogjen hyn në trupin e njeriut, në të fillojnë të prodhohen antitrupa specifikë dhe jospecifik, duke formuar një përgjigje të caktuar imune. Në rastin e sifilizit, i cili mendohet se shkaktohet nga treponema e zbehtë, në gjakun e njeriut prodhohen një spiroket gram-negative, antitrupa jo treponemikë ose treponemalë. Studimet diagnostike laboratorike bazohen në zbulimin e tyre, të cilat duhet të konfirmojnë ose hedhin poshtë praninë e agjentit shkaktar të virusit në trup.

Me RPHA, eritrocitet, sipërfaqja e të cilave përthithin antigjenet e treponemës së zbehtë, në rastin e shtimit të serumit me antitrupa në treponemë nga materiali i një personi të infektuar me sifiliz, ngjiten së bashku, domethënë ndodh aglutinimi i tyre.

Besueshmëria e studimit

Është e rëndësishme të mbani mend se antitrupat ndaj spiroketës së zbehtë fillojnë të shfaqen në trupin e personave të infektuar 2-4 javë pas infektimit dhe në disa raste kjo periudhë mund të zgjatet deri në 6 javë.

Për këtë arsye, ndjeshmëria e analizës për RPHA në fazën parësore të zhvillimit të sëmundjes është rreth 86%, e cila është dukshëm inferiore ndaj saktësisë së diagnostikimit të pacientëve në dy fazat e ardhshme. Ndjeshmëria e analizës për pacientë të tillë, si dhe për bartësit e sifilizit latent, arrin 99-100%.

Megjithatë, reaksioni i hemaglutinimit pasiv ka një specifikë shumë të lartë, e cila arrin në nivelin 96-100%.

Kjo bën të mundur përdorimin e këtij ekzaminimi për të konfirmuar diagnozën në rast të një reagimi pozitiv të një studimi paraprak jo-treponemal, për shembull, reagimi i mikroprecipitimit të kancerit të fshikëzës.

Duke qenë se ndjeshmëria e testeve treponemale, përfshirë TPHA, tejkalon ndjeshëm ndjeshmërinë e metodave jo-treponemale, teste të tilla janë bërë gjithnjë e më shumë të përshkruara për testet e shqyrtimit për sifilizin. Megjithatë, kur merret një reaksion pozitiv i shqyrtimit, kërkohet një tjetër analizë specifike (treponemale) për të sqaruar diagnozën, por jo TPHA.

Deshifrimi i analizës

Kur serumit me antitrupa ndaj treponemës nga materiali i një personi të infektuar me sifiliz i shtohet reagentit me të cilin kryhet studimi, ndodh aglutinimi i eritrociteve, si rezultat i të cilit ato precipitojnë.

Numri i eritrociteve ngjitëse ndikohet nga niveli i antitrupave në serum. Prandaj, hemaglutinimi pasiv jo vetëm që tregon praninë e antitrupave, por gjithashtu ju lejon të vendosni numrin e tyre. Rezultati i studimit përfaqësohet nga niveli i titrit të antitrupave.

Një reagim pozitiv tregon praninë e patogjenit në trupin e pacientit. Megjithatë, gjatë procesit diagnostik mund të shfaqen reaksione false pozitive, numri i të cilave statistikisht nuk e kalon nivelin 0,05-2,5% të numrit të përgjithshëm të studimeve.

Një reagim pozitiv i TPHA tek njerëzit që nuk janë të infektuar me sifilis mund të ndodhë nëse ka:

• sëmundjet sistemike të indit lidhor,
• në gjakun e pacientit antitrupat ndaj patogjenëve të ngjashëm me treponemën e zbehtë,
• patologjitë fiziologjike, të tilla si infarkti i miokardit,
• hepatiti B ose C
• sëmundjet onkologjike,
• tifoja, leptospiroza, tuberkulozi,
• Infeksioni HIV
• etiologjia e borreliozës e lindur nga rriqrat,
• lëndime të gjera ose fraktura,
• shtatzënia,
• në rastin e injeksioneve të drogës.

Në shumicën e rasteve, reagimet false pozitive shoqërohen me një titër të ulët. Titrat e lartë janë tipikë për fazën dytësore të sëmundjes dhe sifilizin latent më parë. Megjithatë mund të shfaqen edhe me reaksion pozitiv fals te pacientët me neoplazi malinje.

Tek personat që kanë pasur sifiliz të paktën një herë, reagimi i RPHA mbetet pozitiv deri në fund të jetës së tyre.

Përjashtime të rralla janë ato situata kur sëmundja u zbulua në një fazë të hershme të zhvillimit, pas së cilës u krye terapi intensive dhe efektive. Prandaj, analiza e TPHA nuk mund të përdoret për të vlerësuar dinamikën e rikuperimit ose diagnostikimin krahasues të fazave të hershme ose të vonshme të sëmundjes.

Pas marrjes së një reagimi pozitiv, është e nevojshme të ekzaminohen familjarët e të sëmurit dhe personat që kanë pasur kontakt seksual me të.

Një reagim negativ mund të merret në rastet e mëposhtme:

• personi nuk ka sifiliz,
• gjak i marrë gabimisht për kërkime,
• Kanë kaluar 2-4 javë nga infektimi dhe ende nuk ka filluar prodhimi i antitrupave.

Në çdo rast, rezultati i studimit duhet të vlerësohet në kombinim me tregues shtesë laboratorikë dhe anamnestikë.

Kujt i tregohet analiza?

Mjeku mund të drejtojë dhurimin e gjakut për pacientët me RPHA në rastet e mëposhtme:

• në prani të manifestimeve klinike të sifilizit: skuqje ulcerative, nyje limfatike të zgjeruara, alopecia difuze dhe të tjera,
• nëse dyshoni për një infeksion të mundshëm në rast kontakti me njerëz tashmë të sëmurë,
• donatorë të gatshëm për të dhuruar gjak,
• personat që i nënshtrohen ekzaminimeve parandaluese vjetore ose hartojnë libra sanitare,
• pacientët me test pozitiv depistues,
• para shtrimit në spital,
• gjatë ekzaminimit paraoperativ
• për zbulimin e patogjenëve të salmonelozës, difterisë, dizenterisë me metodën e kryerjes së RPHA me diagnozën e duhur.

Procedura e hulumtimit

Një mostër e gjakut venoz të paraqitur nga pacienti dërgohet për ekzaminim. Për të mos marrë një përfundim të gabuar, pacienti duhet të jetë përgjegjës për përgatitjen e analizës. Në mënyrë që rezultatet e testit të jenë të besueshme, duhet të ndiqen rekomandimet e mëposhtme:

• Analiza duhet të bëhet vetëm në stomak bosh.
• Në ditën e analizës, mund të pini ujë mineral pa gaz në sasi minimale.
• Nuk duhet të pini duhan për të paktën 30 minuta para testit, por është më mirë që kjo kohë të rritet në disa orë.
• Ndalohet drejtpërdrejt konsumimi i pijeve alkoolike.
• Pacientët që duhet të përdorin rregullisht ndonjë medikament duhet patjetër të informojnë mjekun referues për këtë.
• Nëse nuk ndiheni mirë ose nuk ndiheni mirë, duhet të njoftoni infermieren që merr mostrën e gjakut ose mjekun në klinikën ambulatore ku duhet të bëni analizën.

Jini përgjegjës jo vetëm për pyetjen se ku të bëni testin, por edhe për përgatitjen për provimin.

Diagnoza e sëmundjeve të tjera infektive

Nuk duhet menduar se një studim i tillë si RPGA mund të kryhet vetëm për të identifikuar agjentin shkaktar të sifilizit në trup.

Një analizë me një salmonella diagnosticum ju lejon të identifikoni praninë e një infeksioni në sistemin e tretjes - salmonelë. Duke filluar nga dita e katërt pas infektimit, trupi prodhon antitrupa ndaj antigjeneve Salmonella, të cilat mund të zbulohen me metodën RPGA. Një rezultat negativ tregon mungesën e infeksionit, dhe një titër pozitiv, duke u rritur nga 1:200 në 1:800 në fazën akute, do të tregojë praninë e tij.

Metoda e kryerjes së RPHA me një shënues të difterisë lejon diagnostikimin e difterisë dhe vlerësimin e imunitetit pas vaksinimit. Antitrupat fillojnë të prodhohen nga sistemi imunitar që të nesërmen pas infektimit dhe qëndrojnë në trup për disa javë. Ndjeshmëria e kësaj analize tejkalon metodën bakteriologjike të hulumtimit. Titri 1:80 konfirmon praninë e difterisë në trup.

Markeri i dizenterisë në RPHA zbulon më saktë shigelozën (dizenteria bacilare), edhe kur krahasohet me metodën diagnostikuese laboratorike përmes kulturës bakteriale. Nëse pacienti nuk merr trajtim cilësor, atëherë sëmundja rrjedh në një proces kronik, në të cilin shpesh ndodhin rikthime. Analiza lejon diagnostikimin e fazës akute dhe kronike të diarresë, identifikimin e agjentit shkaktar të dizenterisë, dallimin e shigelozës bakteriale nga kanceri kolorektal, çrregullimet endokrine ose inflamacionin e zorrës së trashë. Një reagim negativ tregon mungesën e një bacil, dhe konfirmon praninë e tij me një titër 1:80 për foshnjat ose 1:320 për të rriturit.

Kryerja e një studimi me një shënues të fruthit ju lejon të përcaktoni sëmundjen me fruthin. Një ekzaminim i tillë mund të jetë një alternativë ndaj analizave HI të kryera shpesh për diagnostikimin e fruthit.

Pra, testi i gjakut RPHA - çfarë është? Duke përmbledhur, mund të themi me siguri se kjo është një metodë moderne, shumë e ndjeshme dhe e besueshme për diagnostikimin e sëmundjeve të ndryshme të etiologjisë bakteriologjike.

Në kontakt me

Certifikata e regjistrimit nr RZN 2016/3905 dat 04.04.2016

Qëllimi

Kompleti i reagentëve "Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigenic for RPHA" (SED-Vi) është krijuar për të zbuluar antitrupat ndaj antigjenit Vi të agjentit shkaktar të etheve tifoide në serumet e gjakut të njeriut me anë të testit të hemaglutinimit pasiv (RPHA).

Vendosni karakteristikë

Parimi i funksionimit

Në prani të antitrupave ndaj agjentit shkaktar të etheve tifoide, vërehet hemaglutinimi i eritrociteve të pulës të sensibilizuar me antigjenin Vi, i cili çon në formimin e një "ombrelle" eritrocitesh të vendosura në fund të puseve në formë U të pjatë. Në mungesë të antitrupave ndaj agjentit shkaktar të etheve tifoide, eritrocitet e vendosura formojnë një "pikë".

Përbërja e vendosur

Emri i reagentit	Përshkrim	Sasia në komplet
Diagnosticum eritrociti Salmonella Vi-antigjenik, i thatë 6% (SED)	Eritrocitet e pulës të formalizuara të sensibilizuara me antigjenin S.typhi Vi. Masa e thatë higroskopike me ngjyrë kafe. Pas shpërbërjes - një pezullim me ngjyrë të kuqe-kafe.	1 shishkë, nga 0,6 ml
Salmonela diagnostikuese e serumit e absorbuar, receptor Vi, e thatë (e holluar 1:20, (K+))	Serum lepuri i adsorbuar nga salmonela, receptor Vi, i holluar 1:20. Masa poroze e thatë higroskopike me ngjyrë të bardhë. Pas tretjes, është një lëng i qartë i verdhë ose i pangjyrë.	1 shishkë, nga 0,3 ml
Diluent mostër (RID)	Lëng i pastër blu-vjollcë.	1 flakon, 10 ml
Zgjidhje tampon fosfati (PBS)	Lëng transparent pa ngjyrë.	1 flakon, 10 ml
Pllakë polimer me përdorim të vetëm për reaksione imunologjike	Pllakë polimer me përdorim të vetëm për reaksione imunologjike e bërë nga polistireni transparent pa ngjyrë.	1 PC.

Karakteristikat diagnostike

Diagnosticum duhet të aglutinohet në RPHA me serumin diagnostikues të salmonelës të adsorbuar, receptorin Vi, i thatë (në një hollim 1:20), deri në titrin e treguar në etiketën e serumit. Niveli i kushtëzuar i karakteristikave diagnostike të serumit të gjakut të njerëzve të shëndetshëm duhet të konsiderohet një hollim i serumit jo më i lartë se 1:20. Koha e analizës është 3040 minuta. Kompleti është projektuar për studimin e 42 serumeve të gjakut në opsionin e shqyrtimit ose 10 serumeve të gjakut në opsionin e titrimit.

Masat paraprake

Kompleti është vetëm për përdorim diagnostik in vitro. Substancat e përfshira në komponentët e kompletit janë të çaktivizuara dhe të sigurta. Kur punoni me kompletin, duhet të respektoni SP 1.3.2322-08 dhe SanPiN 2.1.7.2790-10.

Pajisje dhe materiale shtesë

Pajisjet, materialet, zgjidhjet:

• Dispenzues me pipetë 1-kanalësh me volum dozimi të ndryshueshëm 5-40 µl; 40 - 200 µl; 200 - 1000 µl dhe 1000 - 5000 µl;
• dispenzues pipetash 8- ose 12-kanalëshe me volum dozimi të ndryshueshëm 5-40 µl dhe 40-200 µl;
• ujë i distiluar (GOST 6709-72).

Mostrat e analizuara

Mostrat e serumit të gjakut të studiuara ruhen në një temperaturë prej 2 deri në 8 °C për jo më shumë se 3 ditë nga momenti i marrjes së mostrës së gjakut. Lejohet të ruhet hirra në gjendje të ngrirë në një temperaturë që nuk kalon minus 18 ° C për jo më shumë se 1 vit. Para përdorimit, mostrat shkrihen në një temperaturë prej 16 deri në 25 °C dhe përzihen duke tundur. Ri-ngrirja nuk lejohet. Mostrat me rritje bakteriale dhe hemolizë nuk duhet të përdoren. Para vendosjes së reaksionit, serumet e provës nxehen në 56 °C për 30 minuta.

Kryerja e një analize

Përgatitja e serumit të kontrollit diagnostikues (K+)

Përgatitni një tretësirë ​​pune të serumit të adsorbuar nga salmonela diagnostike, receptor Vi, i thatë (i holluar 1:20) nga 0,3 ml (K+). Për ta bërë këtë, 0,3 ml tretësirë ​​tampon fosfati (PBS) i shtohet përmbajtjes së shishkës me K+. Sasia e mbetur e serumit mund të ndahet dhe të ruhet e ngrirë në një temperaturë që nuk kalon minus 18 ° C për jo më shumë se 6 muaj.

Përgatitja e një diagnoze për salmonelën eritrocitare (SED)

Për të përgatitur një hollim pune të një suspensioni të salmonelës eritrocitore diagnosticum, 0,6 ml ujë të distiluar i shtohet përmbajtjes së një shishe me SED të thatë 6% dhe lihet për hidratim për 2 orë në një temperaturë prej 16 deri në 25 °C. Më pas tretësirës i shtohen 2,4 ml tretësirë ​​tampon fosfati (PBS). Tretësira e punës ruhet në një temperaturë prej 2 deri në 8 °C jo më shumë se 1 muaj. Ngrirja nuk lejohet.

Deklarata e RPHA gjatë ekzaminimit të serumeve të gjakut

Serumet e skanimit hollohen në pusetat e pllakës si më poshtë:

• Hollimet paraprake 1:20 përgatiten në pusetat e para të tabletës, duke u shtuar fillimisht 190 μl tretësirë ​​RIP, më pas 10 μl serum të studiuar. Çdo serum shtohet me një majë të veçantë dhe pipet me kujdes (në këtë rast, ngjyra e tretësirës në puse duhet të ndryshojë nga blu-vjollcë në jeshile pas shtimit të serumit);
• Në pusetat e dyta përgatiten hollimet e skanimit prej 1:40, duke futur fillimisht 25 µl tretësirë ​​PBS në to, dhe më pas 25 µl serum të holluar paraprakisht dhe duke nxjerrë me kujdes pipetën.

Me çdo vendosje të RPHA, është e nevojshme të kryhet një përcaktim kontrolli i titrit K +. Për ta bërë këtë, 50 μl zgjidhje PBS shtohen në 8 puse të një rreshti të gjatë. Më pas, 50 µl tretësirë ​​pune K+ (1:20) shtohen në pusin e parë, pipet me kujdes dhe transferohet në puset vijuese, 50 µl secili, duke marrë hollime 2-fish nga 1:40 deri në 1:5120. Në 4 puse të tjera, 50 μl tretësirë ​​PBS shtohen për të kontrolluar SED për mungesën e hemaglutinimit spontan.

Në të gjitha pusetat e tabletës me hollime skanuese të serumit të studiuar (përveç të parës që përmban RIP) dhe kontrolleve, shtoni 25 μl SED. Përziejeni suspensionin SED në një shishe ose banjë përpara përdorimit! Tableta tundet tërësisht dhe lihet në një temperaturë prej 16 deri në 25 ° C për 30 deri në 40 minuta deri në sedimentimin e plotë të eritrociteve në kontroll.

Deklarata e RPHA gjatë titrimit të serumeve të gjakut të studiuar

Titrimi i serumit të studiuar dhe tretësirës së punës K+ kryhet në rreshta të shkurtër të pllakës. Një rresht tjetër i shkurtër përdoret për të kontrolluar mungesën e hemaglutinimit spontan të EDS.

Në pusetat e para të rreshtave të shkurtër për titrimin e serumit të provës shtohen 180 μl tretësirë ​​RIP. Të gjitha puset e tjera mbushen me 50 µl tretësirë ​​PBS.

20 μl të serumeve të provës shtohen në puset me tretësirën RIP (përftohet një hollim 1:10). Çdo serum shtohet me majën e tij dhe pipet me kujdes (ngjyra e tretësirës në puse duhet të ndryshojë nga blu-vjollcë në jeshile). Më pas, 50 μl transferohen nga puset e para në puset e radhës, duke marrë hollime të dyfishta nga 1:20 deri në 1:1280. Në fund të titrimit hiqen 50 μl tretësirë ​​nga pusetat e fundit.

Me çdo vendosje të RPHA, është e nevojshme të kryhet një përcaktim kontrolli i titrit K +. Për ta bërë këtë, 50 μl zgjidhje PBS shtohen në 8 puse të një rreshti të gjatë. Më pas, 50 µl tretësirë ​​pune K+ (1:20) shtohen në pusin e parë, pipet me kujdes dhe transferohet në puset vijuese, 50 µl secili, duke marrë hollime 2-fish nga 1:40 deri në 1:5120.

Për të kontrolluar diagnostifikimin për mungesën e hemaglutinimit spontan, në të gjitha pusetat e një rreshti të shkurtër shtohen 50 μl tretësirë ​​PBS.

Në të gjitha pusetat (përveç puseve të para të çdo rreshti për serumet e studiuara që përmbajnë RIP) shtoni 25 µl SED. Përziejeni suspensionin SED në një shishe ose banjë përpara përdorimit! Tableta tundet tërësisht dhe lihet në një temperaturë prej 16 deri në 25 ° C për 30 - 40 minuta deri në sedimentimin e plotë të eritrociteve në kontroll.

Kontabiliteti dhe interpretimi i rezultateve

Kontabilizimi i rezultateve në depistimin e serumeve të gjakut

Kontabilizimi i rezultateve kryhet në një shkallë të kushtëzuar prej katër kryqëzimesh. Titri i serumit është hollimi i tij, i cili jep hemaglutinim me të paktën 3 (+++) kryqe.

• ++++ (4+) - eritrocitet e aglutinuara formojnë një "ombrellë" të përmbysur në fund të vrimës, skajet e saj bien;
• +++ (3+) - eritrocitet e aglutinuar formojnë një "ombrellë" të përmbysur në fund të vrimës, skajet e saj janë të njëtrajtshme;
• ++ (2+) - së bashku me eritrocitet e aglutinuara, ka një sediment në formën e një "unaze" të vogël eritrocitesh jo të aglutinuara në fund të vrimës;
• + (1+) - shumica e eritrociteve nuk aglutinohen dhe vendosen në formën e një "unaze" të vogël;
• (-) - eritrocitet jo të aglutinuara formojnë një "pikë" në fund të pusit.

Rezultat pozitiv konsiderohet të jetë hemaglutinimi i eritrociteve të ngarkuara me antigjen Vi me të paktën 3 kryqëzime (+++).

Kontrolli i cilësisë së diagnostifikimit është 4 puse të rreshtit të kontrollit, në të cilat janë shtuar vetëm solucioni PBS dhe SED. Nuk duhet të ketë hemaglutinim spontan në këto puse - reagimi është negativ (-). Përndryshe, studimi duhet të përsëritet. Nëse hemaglutinimi shfaqet gjatë ri-stadimit, atëherë ilaçi nuk përdoret.

Serumet me rezultat negativ duhet të konsiderohen se nuk përmbajnë antitrupa ndaj antigjenit Vi në një titër diagnostik prej 1:40 dhe më poshtë.

Serumet që japin një rezultat pozitiv në një hollim 1:40 duhet të riekzaminohen në variantin me titrimin e serumit për të vendosur titrin e tij.

Kontabilizimi i rezultateve kur titroni serumet e gjakut

Titri i serumit është hollimi i tij, i cili jep hemaglutinim me të paktën 3 (+++) kryqe.

Kontrolli i cilësisë së diagnostifikimit është puset e rreshtit për kontrollin e SED. Nuk duhet të ketë hemaglutinim spontan në këto puse - reagimi është negativ (-). Përndryshe, studimi duhet të përsëritet. Nëse hemaglutinimi shfaqet gjatë ri-stadimit, atëherë ilaçi nuk përdoret.

Fillimi aktiv i diagnostifikimit është antigjeni V i fiksuar në sipërfaqen e eritrociteve. Kur ndërveprohet me serumet që përmbajnë antitrupa ndaj antigjenit Vee, vërehet fenomeni i aglutinimit të eritrociteve.

Formulari i lëshimit

Prodhuar në një grup 1 shishe me një diagnosticum - 3 ml, receptor i adsorbuar i serumit të salmonelës diagnostike Vee Dry në formën e një liofilizati nga 0,1 ml 1 shishe; Zgjidhje 0,9% klorur natriumi - 2 shishe 8 ml; tabletë për reaksione imunologjike të përdorimit të vetëm - 1 pc.

Kompleksi

Sasia e reagentëve:

Salmonella V-antigjenik i eritrociteve Diagnosticum, i cili është një suspension 0,75% i eritrociteve njerëzore të formalizuar dhe të sensibilizuar me antigjenin V të eritrociteve O (I) të grupit të gjakut në një tretësirë ​​tampon fosfati (pH-7,2 ± 0,2; përqendrimi - 0,06 mol/l) . Konservues - formalinë. Pezullim homogjen i ngjyrës kafe pa thekon; kur vendoset, formohen 2 shtresa: një sediment i dendur kafe i eritrociteve dhe një lëng supernatant transparent në të verdhë 1 shishkë-3 ml.

Receptori i adsorbuar i salmonelës në serum Vee dry - një masë homogjene nga e bardha me një nuancë kafe në bezhë. 1 shishe - nga 0,1 ml.

Tretësirë ​​mirëmbajtjeje - tretësirë ​​0,9% klorur natriumi - një lëng i pastër, pa ngjyrë, pH 6,5 deri në 7,5. 2 shishe - 8 ml.

Pllakë me fund të rrumbullakët me përdorim të vetëm për reaksione imunologjike - përbëhet nga 8 rreshta, secila prej të cilave përfshin 12 puse me një fund transparent, të pangjyrë dhe të rrumbullakët. 1 PC.

Diagnosticum duhet të aglutinohet në RPHA me serumin e receptorit B të absorbuar nga salmonela diagnostike të thatë në një hollim jo më të ulët se 1/2 e titrit të tyre, por jo më pak se 1/160. Diagnosticum nuk duhet të aglutinohet nga serumet diagnostikuese të salmonelës të adsorbuara të thata për RA: receptori 9 - në një hollim 1:40 dhe më lart, receptori H d - në një hollim 1:10 dhe më lart.


Indikacionet për përdorim

Projektuar për të zbuluar në serumin e gjakut të njeriut antitrupa specifikë ndaj antigjenit V të tifos Salmonella në reagimin e hemaglutinimit pasiv (RPHA).

Regjimi i dozimit dhe mënyra e aplikimit

Mostrat e serumit të gjakut të njeriut përdoren si mostra të analizuara.
Mostra e analizuar ruhet në kushte që parandalojnë rritjen e baktereve në një temperaturë prej 2 deri në 8 °C për jo më shumë se 72 orë. Ngrirja lejohet, mostrat e analizuara të ngrira duhet të shkrihen në temperaturën e dhomës përpara testimit.
Nuk lejohet analiza e mostrave me hemolizë të rëndë, rritje bakteriale, si dhe të atyre të ruajtura për një kohë të gjatë pa ngrirje ose të ngrirë përsëri.

ANALIZA
Përgatitja e solucioneve për RPHA.
Thajini flakonet e hapura me serumin e receptorit V të adsorbuar nga salmonela diagnostike dhe shtoni 1 ml tretësirë ​​të bashkangjitur 0,9% të klorurit të natriumit, duke përftuar kështu një hollim 1:10, që është një hollim funksional.
Një shishkë e hapur me serum të receptorit V të adsorbuar nga Salmonella diagnostike e thatë në një hollim 1:10 në formë të mbyllur mund të ruhet në një temperaturë prej 2 deri në 8 ° C për një muaj.
Diagnosticum është gati për përdorim. Përpara hapjes së shishkës me diagnosticum, tundeni butësisht derisa të merret një suspension homogjen. Rekomandohet të përsëritet tundja gjatë operimit.
Një shishkë e hapur me një diagnozë në formë të mbyllur mund të ruhet në një temperaturë prej 2 deri në 8 ° C për një muaj.
Tretësirë ​​0,9% klorur natriumi. Gati për përdorim.

Kryerja e RPHA.
Kur kontrollohet çdo numër i serumeve të analizuara, është e detyrueshme të vendoset rreshti i parë i aglutinimit me serumin e receptorit B të adsorbuar diagnostikues të Salmonellës.
Për prodhimin e RPHA, përdoret një tabletë për reaksione imunologjike të një përdorimi të vetëm. Hollimet serike të dyfishta të serumeve të analizuara përgatiten në 0,05 ml të solucionit të furnizuar të klorurit 0,9% duke filluar nga 1:10 deri në 1:2560 dhe 1 seri hollimesh serike dyfish të serumit të receptorit diagnostik të adsorbuar nga Salmonella Wi. thatë, duke filluar nga një hollim 1:10, deri në dyfishin e titrit të treguar në etiketën e flakonëve të këtij serumi.
0,025 ml diagnosticum i shtohet secilit nga puset me hollime serumi.

Kontrollet e detyrueshme janë:
1. Kontrolli i Serumit të Receptorit të Adsorbuar të Salmonelës Diagnostike
Serum i tharë dhe i analizuar, i cili në një hollim 1:10 në një vëllim prej 0,05 ml kontribuon
në dy puse kontrolli.
2. Kontrollimi i mungesës së aglutinimit spontan të diagnosticum, për të cilin 0,025 ml diagnosticum shtohen në dy puse që përmbajnë 0,05 ml tretësirë ​​klorur natriumi 0,9%.
Tableta tundet dhe vendoset për 1,5-2,0 orë në një termostat në temperaturën (37+1) °C.

KONTABILITET PËR REZULTATET
Reagimi merret parasysh sipas sistemit me katër kryq:
4+ - të gjitha eritrocitet janë aglutinuar dhe mbulojnë në mënyrë të barabartë pjesën e poshtme të vrimës;
3+ - pothuajse të gjitha eritrocitet janë të aglutinuara. Në sfondin e tyre ka një unazë që nuk bie në sy të eritrociteve të vendosura jo të aglutinuara;
3+ - së bashku me aglutinatin uniform në fund të vrimës ka një sediment eritrocitesh jo të aglutinuar në formën e një "unaze" ose "butoni" të vogël;
1+ - shumica e eritrociteve nuk aglutinohen dhe vendosen në formën e një "unaze" të vogël me skaje të lëmuara ose "butona" në qendër të pjesës së poshtme të vrimës.
(-) - nuk ka shenja të aglutinimit. Eritrocitet vendosen në formën e një "unaze" të vogël me skaje të lëmuara ose butona në qendër të pusit ose në fund të tubit.
Një reagim prej të paktën 3+ konsiderohet pozitiv.
Rezultatet e marra në RPHA mund të konsiderohen të besueshme nëse serumi i receptorit B të përthithur diagnostikues të salmonelës 1:10 ka marrë një rezultat pozitiv në një hollim jo më pak se 14 të titrave të tyre, dhe në 2 puse me serumin e analizuar dhe me serumi i receptorit B të adsorbuar të salmonelës diagnostikuese thahet në hollime 1:10 nuk duhet të ketë thekon dhe sediment; në puse me tretësirë ​​0,9% klorur natriumi dhe diagnosticum - reagimi është negativ.
Titri i antitrupave të serumit të analizuar konsiderohet të jetë hollimi i fundit i serumit, i cili ende jep aglutinim pozitiv të eritrociteve.
Interpretimi i rezultateve.
Personat që kanë antitrupa ndaj antigjenit V në një hollim 1:40 dhe më lart konsiderohen të dyshimtë për bartës kronik të tifos. Megjithatë, për faktin se diagnoza nuk mund të bëhet vetëm në bazë të një studimi serologjik, është i nevojshëm një ekzaminim i thelluar bakteriologjik.

Masat paraprake për përdorim

Receptori Vee i adsorbuar i salmonelës diagnostikues i serumit i përfshirë në komplet është i çaktivizuar në mënyrë të thatë.
Serumet që do të analizohen duhet të çaktivizohen në 56°C për 30 minuta.
Serumet që do të analizohen, si dhe reagentët, pajisjet dhe instrumentet në kontakt me to, mund të jenë materiale potencialisht infektive dhe duhet të trajtohen me kujdes:
- punë me doreza gome;
- gjatë pipetimit është e nevojshme të përdoren pajisje automatike;
- në fund të punës, serumet e analizuara dhe reagentët në kontakt me to, instrumentet, duhet të trajtohen me tretësirë ​​dezinfektuese;
- Fshini pajisjet para dhe pas punës me alkool etilik 96%.

Rezultatet e analizës objektive garantohen në kushtet e mëposhtme:
- ruajtja e të gjithë reagentëve të kompletit duhet të kryhet në një temperaturë prej 2 deri në 8 °C;
- mos përdorni reagentë të skaduar;
- mos përdorni reagentët e kompletit nëse nuk ka shënim përkatës në paketimin e tyre;
- për RPHA përdorni reagentë të përfshirë vetëm në këtë komplet.

2. diagnostike

4.nga mikrobet e shkatërruara (izolimi i Ag specifik)

Diagnostikimi i eritrociteve HBs

2. diagnostike

4. suspension i er. deleve të trajtuara me taninë dhe të precipituara a\g HBs

5. Për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut

Diagnosticum gp120

2. diagnostike

4.veç një\g ngacmoj. HIV

5. Për të zbuluar një për HIV

Diagnostikimi i eritrociteve tetanoz

2. diagnostike

4.pezullimi i er.deleve të trajtuara me taninë me një ngacmim të tetanozit

5. për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut (për ngacmimin e tetanozit

Antigjen kardiolipinë për mikroprecipitim

2. diagnostike

4.nxjerrja e fraksioneve lipidike nga zemra e një demi të shëndetshëm

5. Për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut

Antigjeni treponemal i ultrasonifikuar

2. diagnostike

4.nga ish i vdekur. sifilizit

5. Për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut

Diagnostikimi i tularemisë korpuskulare

2. diagnostike

4.e grimcave individuale patogjene

5. Për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut

Diagnoza e dizenterisë

2. diagnostike

4. pezullim nga i vrarë m \ o

5. Për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e pacientit

Diagnostikimi i eritrociteve nga Shigella Sonne

2. diagnostike

4. suspension i deleve er., i trajtuar me tonin

5. Për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut

Diagnostikimi nga salmonella typhimurium

2. diagnostike

4.nga ish i vdekur. salmonelën

5. Për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut

Serumet

Serum kuajsh antigangrenoz 5000 IU

2.serum

4. nga serumi i gjakut i hiperimm.kuajve me toksoid gangrene gazi ngacmues

6.parenteralisht, pas testit me globulinë 1:100

imunoglobulina normale njerëzore

2.serum

4. nga serumi i gjakut të dhuruesve

5.form-e kalojë. specifike blerë artet. imm

6. parenteralisht

serum precipitues i antraksit

2.serum

4. nga serumi i gjakut te kafsheve te hiperimunizuara a\g ngacmohet.sib. ulcerat

6. Reaksioni i reshjeve (RP)

Lloji i serumit botulinum - A 400 IU

2.serum

5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit

6. Reaksioni i neutralizimit (RN)

Globulina e antraksit

2.serum

4. nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuara a\g ulçera ngacmuese

5.form-e kalojë. specifike blerë artet. imm

6. parenteralisht

Serum hemolitik

2.serum

4. nga serumi i kafshëve të hiperimunizuara me eritrocite të kafshëve të një lloji tjetër

5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit

Serum aglutinues i kolerës Ogawa

2.serum

4. nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuara

5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit

Serum ndriçues i tularemisë

2.serum

4. nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuara a\g tular ngacmues.

5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit

Imunoglobulina kundër encefalitit të lindur nga rriqrat

2.serum

4. nga serumi i gjakut të dhuruesve

5.form-e kalojë. specifike blerë artet. imm

6. parenteralisht

Serum diagnostikues ESNO

2.serum

4. nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuara me viruse ESNO

5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit

Imunoglobulina njerëzore kundër hepatitit B

2.serum

4. Nga serumi i gjakut i një dhuruesi të vaksinuar kundër hepatitit B

5.form-e kalojë. specifike blerë artet. imm

6. parenteralisht

Serum antiglobulin i etiketuar me perkoksidazë

2.serum

4. nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuara

5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit (HIV)

Imunoglobulina e tërbimit

2.serum

4. nga serumi i gjakut të dhuruesve

5.form-e kalojë. specifike blerë artet. imm