Diagnosticum Salmonella erytrocyt vi antigénna kvapalina. Diagnosticum erytrocyt Salmonella V-antigénny

Sada reagencií Diagnosticum Salmonella VI-antigenic je určená na detekciu špecifických protilátok proti V-antigénu Salmonella týfusu v ľudskom krvnom sére v reakcii pasívnej hemaglutinácie (RPHA).

1. VLASTNOSTI SÚPRAVY

2.1. Princíp metódy.

Aktívnou zložkou Diagnosticum Salmonella VI-antigén je V-antigén fixovaný na povrchu erytrocytov. Pri interakcii so sérami obsahujúcimi protilátky proti antigénu Vee sa pozoruje fenomén aglutinácie erytrocytov.

2.2. ZLOŽENIE SÚPRAVY

1. ANALYTICKÉ A DIAGNOSTICKÉ CHARAKTERISTIKY.

3.1. Diagnosticum by sa malo aglutinovať v RPHA so sérom diagnostického receptora B adsorbovaného na Salmonella suché v riedení aspoň 1:160.

Podmienená úroveň diagnostických charakteristík krvného séra zdravých ľudí by sa mala považovať za zriedenie séra nie vyššie ako 1:20.

3.2. Čas analýzy je 2 hodiny.

3.3. Sada je určená pre 8 definícií.

1. PREVENTÍVNE OPATRENIA

Pri práci so súpravou by ste mali dodržiavať „Pravidlá pre dizajn, bezpečnostné opatrenia, priemyselnú sanitáciu, protiepidemický režim a osobnú hygienu pri práci v laboratóriách (oddeleniach, oddeleniach) hygienických a epidemiologických zariadení systému ministerstva Zdravie ZSSR (M., 1981).

Analyzované séra, ako aj činidlá, ktoré sú s nimi v kontakte, by sa mali považovať za potenciálne infekčné, schopné dlhodobého skladovania alebo prenosu HIV, vírusu hepatitídy alebo akéhokoľvek iného pôvodcu vírusovej infekcie – treba s nimi zaobchádzať opatrne :

• pracovať v gumených rukaviciach;
• pri pipetovaní je potrebné používať automatické pipety;
• na konci práce by sa analyzované séra a reagencie, ktoré sú s nimi v kontakte, nástroje, mali ošetriť dezinfekčným roztokom
• Utrite zariadenie pred a po práci 70% etylalkoholom.

Analyzované séra sa musia inaktivovať pri 56 °C počas 30 minút.

Diagnostické suché inaktivované sérum Vee adsorbovaného na salmonelu, ktoré je súčasťou súpravy.

Objektívne výsledky analýzy sú zaručené za nasledujúcich podmienok:

• skladovanie všetkých činidiel súpravy by sa malo vykonávať pri teplote 2 až 8 0 С;
• nepoužívajte reagencie po expirácii;
• nepoužívajte činidlá zo súpravy, ak nie sú na obale príslušne označené;
• pre RPHA používajte reagencie len v tejto súprave.

Vi-Diagnosticum

Diagnosticum Vee

Vi-antigénny

Dobre vykonaný krvný test pomáha odhaliť patogény rôznych komplexných ochorení v tele v počiatočných štádiách ich vývoja a niekedy ešte pred nástupom klinických príznakov ochorenia. Veľmi často lekári predpisujú pacientom analýzu aglutinačnej reakcie. Ďalej sa budeme zaoberať tým, že ide o krvný test RPHA, kedy sa používa a o čom môže vypovedať?

Princíp fungovania

Nepriama hemaglutinačná reakcia (tiež nazývaná pasívna hemaglutinačná reakcia, tiež známa ako RPHA, RNHA) nastáva, keď sú erytrocyty adsorbujúce antigén vystavené imunitnému séru, ktoré zodpovedá tomuto antigénu.

Štúdie ukázali, že táto metóda je výrazne lepšia ako iné sérologické testy v špecifickosti a citlivosti. Preto sa často používa na detekciu chorôb spôsobených baktériami alebo rickettsiae. Ako antigény pre takúto analýzu môžu slúžiť bakteriálne extrakty, purifikované antigény rôznych mikróbov, zložky bakteriálnych vakcín.

Po vstupe patogénnej baktérie do ľudského tela sa v nej začnú vytvárať špecifické a nešpecifické protilátky, ktoré tvoria určitú imunitnú odpoveď. V prípade syfilisu, o ktorom sa predpokladá, že je spôsobený treponema pallidum, sa v ľudskej krvi tvoria gramnegatívne spirochéty, netreponémové alebo treponémové protilátky. Na ich detekcii sú založené laboratórne diagnostické štúdie, ktoré by mali potvrdiť alebo vyvrátiť prítomnosť pôvodcu vírusu v organizme.

Pri RPHA sa erytrocyty, ktorých povrch adsorbovali antigény bledého treponému, v prípade pridania séra s protilátkami proti treponému z materiálu človeka infikovaného syfilisom zlepia, čiže dôjde k ich aglutinácii.

Spoľahlivosť štúdie

Je dôležité mať na pamäti, že protilátky proti pallidum spirochete sa v tele infikovaných ľudí začínajú objavovať 2-4 týždne po infekcii a v niektorých prípadoch sa toto obdobie môže predĺžiť až na 6 týždňov.

Z tohto dôvodu je citlivosť analýzy na RPHA v primárnom štádiu vývoja ochorenia asi 86 %, čo je výrazne horšie ako presnosť diagnostiky pacientov v nasledujúcich dvoch štádiách. Citlivosť analýzy u takýchto pacientov, ako aj u nosičov latentného syfilisu, dosahuje 99-100%.

Reakcia pasívnej hemaglutinácie má však veľmi vysokú špecificitu, ktorá dosahuje úroveň 96 – 100 %.

To umožňuje použiť toto vyšetrenie na potvrdenie diagnózy v prípade pozitívnej reakcie predbežnej netreponémovej štúdie, napríklad reakcie mikroprecipitácie rakoviny močového mechúra.

Vzhľadom na to, že citlivosť treponemálnych testov, vrátane TPHA, výrazne prevyšuje citlivosť netreponemálnych metód, takéto testy sa čoraz častejšie predpisujú na skríningové testy na syfilis. Keď sa však získa pozitívna skríningová reakcia, na objasnenie diagnózy je potrebná ďalšia špecifická (treponémová) analýza, ale nie TPHA.

Dešifrovanie analýzy

Keď sa sérum s protilátkami proti treponému z materiálu osoby infikovanej syfilisom pridá k činidlu, s ktorým sa štúdia uskutočňuje, dôjde k aglutinácii erytrocytov, v dôsledku čoho sa vyzrážajú.

Počet adherentných erytrocytov je ovplyvnený hladinou protilátok v sére. Preto pasívna hemaglutinácia ukazuje nielen prítomnosť protilátok, ale umožňuje aj nastavenie ich počtu. Výsledok štúdie predstavuje hladina titra protilátok.

Pozitívna reakcia naznačuje prítomnosť patogénu v tele pacienta. Počas diagnostického procesu sa však môžu vyskytnúť falošne pozitívne reakcie, ktorých počet štatisticky nepresahuje úroveň 0,05-2,5 % z celkového počtu štúdií.

Pozitívna reakcia TPHA u ľudí, ktorí nie sú infikovaní syfilisom, sa môže vyskytnúť, ak existuje:

• systémové ochorenia spojivového tkaniva,
• v krvných protilátkach pacienta proti patogénom podobným bledému treponému,
• fyziologické patológie, ako je infarkt myokardu,
• hepatitídu B alebo C
• onkologické ochorenia,
• týfus, leptospiróza, tuberkulóza,
• HIV infekcia
• borelióza prenášaná kliešťami,
• rozsiahle zranenia alebo zlomeniny,
• tehotenstvo,
• v prípade injekcií liekov.

Vo väčšine prípadov sú falošne pozitívne reakcie sprevádzané nízkym titrom. Vysoké titre sú typické pre sekundárne štádium ochorenia a predtým latentný syfilis. Môžu sa však objaviť aj s falošne pozitívnou reakciou u pacientov so zhubnými novotvarmi.

U ľudí, ktorí mali syfilis aspoň raz, zostáva reakcia RPHA pozitívna až do konca ich života.

Zriedkavými výnimkami sú situácie, keď bola choroba zistená v počiatočnom štádiu vývoja, po ktorom sa uskutočnila intenzívna a účinná liečba. Analýza TPHA sa preto nemôže použiť na posúdenie dynamiky zotavenia alebo na komparatívnu diagnostiku skorých alebo neskorých štádií ochorenia.

Po prijatí pozitívnej reakcie je potrebné vyšetriť rodinných príslušníkov chorého a ľudí, ktorí s ním mali sexuálny kontakt.

Negatívnu reakciu možno dosiahnuť v nasledujúcich prípadoch:

• osoba nemá syfilis,
• nesprávne odobratá krv na výskum,
• Od nákazy prešli 2-4 týždne a tvorba protilátok ešte nezačala.

V každom prípade musí byť výsledok štúdie hodnotený v kombinácii s ďalšími laboratórnymi a anamnestickými ukazovateľmi.

Komu sa zobrazí analýza?

Lekár môže riadiť darovanie krvi pre pacientov s RPHA v nasledujúcich prípadoch:

• v prítomnosti klinických prejavov syfilisu: ulcerózne vyrážky, zväčšené lymfatické uzliny, difúzna alopécia a iné,
• ak máte podozrenie na možnú infekciu v prípade kontaktu s už chorými ľuďmi,
• darcovia ochotní darovať krv,
• ľudia, ktorí každoročne podstupujú preventívne prehliadky alebo vypracúvajú hygienické knihy,
• pacienti s pozitívnym skríningovým testom,
• pred prijatím do nemocnice,
• pri predoperačnom vyšetrení
• na detekciu patogénov salmonelózy, záškrtu, dyzentérie metódou vedenia RPHA s príslušným diagnostikom.

Postup výskumu

Pacientom odoslaná vzorka žilovej krvi sa posiela na vyšetrenie. Aby nedošlo k chybnému záveru, pacient by mal byť zodpovedný za prípravu na analýzu. Aby boli výsledky testu spoľahlivé, mali by sa dodržiavať nasledujúce odporúčania:

• Analýza by sa mala vykonávať iba na prázdny žalúdok.
• V deň analýzy môžete piť minerálnu vodu bez plynu v minimálnych množstvách.
• Pred testom by ste nemali fajčiť aspoň 30 minút, ale je lepšie tento čas predĺžiť na niekoľko hodín.
• Platí priamy zákaz požívania alkoholických nápojov.
• Pacienti, ktorí potrebujú pravidelne užívať akékoľvek lieky, by o tom mali určite informovať ošetrujúceho lekára.
• Ak sa necítite dobre alebo sa necítite dobre, mali by ste to oznámiť sestre, ktorá odber krvi odoberá, alebo lekárovi v ambulancii, kde je potrebné vyšetrenie vykonať.

Buďte zodpovední nielen k otázke, kde urobiť test, ale aj k príprave na skúšku.

Diagnóza iných infekčných chorôb

Nemali by sme si myslieť, že taká štúdia, ako je RPGA, môže byť vykonaná iba na identifikáciu pôvodcu syfilisu v tele.

Rozbor s salmonella diagnosticum umožňuje identifikovať prítomnosť infekcie v tráviacom systéme - salmonely. Od štvrtého dňa po infekcii telo produkuje protilátky proti antigénom Salmonella, ktoré je možné detegovať metódou RPGA. Negatívny výsledok indikuje neprítomnosť infekcie a pozitívny titer, zvyšujúci sa z 1:200 na 1:800 v akútnej fáze, bude indikovať jej prítomnosť.

Spôsob vykonania RPHA s markerom záškrtu umožňuje diagnostikovať záškrt a posúdiť imunitu po očkovaní. Protilátky sa začnú produkovať imunitným systémom hneď na druhý deň po infekcii a zostávajú v tele niekoľko týždňov. Citlivosť tejto analýzy prevyšuje bakteriologickú metódu výskumu. Titer 1:80 potvrdzuje prítomnosť záškrtu v tele.

Marker dyzentérie v RPHA najpresnejšie deteguje shigelózu (bacilárnu dyzentériu), a to aj v porovnaní s laboratórnou diagnostickou metódou prostredníctvom bakteriálnej kultivácie. Ak pacient nedostane kvalitnú liečbu, potom choroba prechádza do chronického procesu, v ktorom často dochádza k relapsom. Analýza umožňuje diagnostikovať akútnu a chronickú fázu hnačky, identifikovať pôvodcu dyzentérie, odlíšiť bakteriálnu šigelózu od kolorektálneho karcinómu, endokrinných porúch či zápalu hrubého čreva. Negatívna reakcia naznačuje neprítomnosť bacila a potvrdzuje jeho prítomnosť s titrom 1:80 pre dojčatá alebo 1:320 pre dospelých.

Uskutočnenie štúdie s markerom osýpok vám umožňuje určiť ochorenie s osýpkami. Takéto vyšetrenie môže byť alternatívou k často vykonávanej HI analýze na diagnostiku osýpok.

Takže krvný test RPHA - čo to je? Ak to zhrnieme, môžeme s istotou povedať, že ide o modernú, vysoko citlivú a spoľahlivú metódu diagnostiky rôznych ochorení bakteriologickej etiológie.

V kontakte s

Osvedčenie o evidencii č. RZN 2016/3905 zo dňa 04.04.2016

Účel

Reagenčná súprava „Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigenic for RPHA“ (SED-Vi) je určená na detekciu protilátok proti Vi-antigénu pôvodcu brušného týfusu v ľudských krvných sérach pasívnym hemaglutinačným testom (RPHA).

Nastaviť charakteristiku

Princíp fungovania

V prítomnosti protilátok proti pôvodcovi brušného týfusu sa pozoruje hemaglutinácia kuracích erytrocytov senzibilizovaných Vi-antigénom, čo vedie k vytvoreniu „dáždnika“ usadených erytrocytov na dne jamiek doštičky v tvare U. . Pri absencii protilátok proti pôvodcovi brušného týfusu tvoria usadené erytrocyty „bod“.

Nastavte zloženie

Názov činidla	Popis	Množstvo v súprave
Diagnosticum erytrocyt Salmonella Vi-antigénny, suchý 6% (SED)	Formalizované kuracie erytrocyty senzibilizované antigénom S. typhi Vi. Suchá hygroskopická hmota hnedej farby. Po rozpustení - suspenzia červeno-hnedej farby.	1 injekčná liekovka, od 0,6 ml
Diagnostické sérum salmonely adsorbované, Vi receptor, suché (riedené 1:20, (K+))	Salmonella adsorbované králičie sérum, Vi receptor, zriedené 1:20. Suchá hygroskopická porézna hmota bielej farby. Po rozpustení je to číra žltkastá alebo bezfarebná kvapalina.	1 injekčná liekovka, od 0,3 ml
Rozpúšťadlo vzoriek (RID)	Číra modrofialová kvapalina.	1 injekčná liekovka, 10 ml
Fosfátový tlmivý roztok (PBS)	Priehľadná bezfarebná kvapalina.	1 injekčná liekovka, 10 ml
Jednorazová polymérová platňa na imunologické reakcie	Jednorazová polymérová platňa pre imunologické reakcie vyrobená z transparentného bezfarebného polystyrénu.	1 PC.

Diagnostické charakteristiky

Diagnosticum by sa malo aglutinovať v RPHA s diagnostickým sérom adsorbovaným na salmonelu, Vi receptor, suché (pri riedení 1:20), na titer uvedený na štítku séra. Podmienená úroveň diagnostických charakteristík krvného séra zdravých ľudí by sa mala považovať za zriedenie séra nie vyššie ako 1:20. Čas analýzy je 3040 minút. Súprava je určená na štúdium 42 krvných sér pri skríningovej možnosti alebo 10 krvných sér pri možnosti titrácie.

Preventívne opatrenia

Súprava je určená len na diagnostické použitie in vitro. Látky obsiahnuté v komponentoch súpravy sú inaktivované a bezpečné. Pri práci so súpravou je potrebné dodržiavať SP 1.3.2322-08 a SanPiN 2.1.7.2790-10.

Dodatočné vybavenie a materiály

Vybavenie, materiály, riešenia:

• 1-kanálové pipetové dávkovače s variabilným dávkovacím objemom 5-40 µl; 40 - 200 ul; 200 - 1000 ul a 1000 - 5000 ul;
• 8- alebo 12-kanálové pipetové dávkovače s variabilným dávkovacím objemom 5-40 µl a 40-200 µl;
• destilovaná voda (GOST 6709-72).

Analyzované vzorky

Študované vzorky krvného séra sa uchovávajú pri teplote 2 až 8 °C maximálne 3 dni od momentu odberu krvi. Je povolené skladovať srvátku v zmrazenom stave pri teplote nepresahujúcej mínus 18 ° C najviac 1 rok. Pred použitím sa vzorky rozmrazia pri teplote 16 až 25 °C a premiešajú sa pretrepaním. Opätovné zmrazenie nie je povolené. Vzorky s rastom baktérií a hemolýzou by sa nemali používať. Pred nastavením reakcie sa testovacie séra zahrievajú na 56 °C počas 30 minút.

Analýza

Príprava kontrolného diagnostického séra (K+)

Pripravte pracovný roztok diagnostického séra adsorbovaného na salmonelu, Vi receptor, suchý (riedený 1:20) z 0,3 ml (K+). Na tento účel sa k obsahu liekovky s K+ pridá 0,3 ml roztoku fosfátového pufra (PBS). Zostávajúce množstvo séra sa môže rozdeliť na alikvóty a uchovávať zmrazené pri teplote nepresahujúcej mínus 18 °C najviac 6 mesiacov.

Príprava diagnostiky na salmonelu erytrocytov (SED)

Na prípravu pracovného riedenia suspenzie salmonella erythrocyte diagnosticum sa k obsahu liekovky so suchým 6 % SED pridá 0,6 ml destilovanej vody a nechá sa hydratovať 2 hodiny pri teplote 16 až 25 °C. Potom sa k roztoku pridá 2,4 ml fosfátového tlmivého roztoku (PBS). Pracovný roztok sa uchováva pri teplote 2 až 8 °C najviac 1 mesiac. Zmrazovanie nie je povolené.

Stanovenie RPHA počas skríningu krvných sér

Skríningové séra sa zriedia v jamkách platne nasledovne:

• v prvých jamkách tablety sa pripravia predbežné riedenia 1:20, do ktorých sa najskôr pridá 190 μl RIP roztoku, potom 10 μl študovaného séra. Každé sérum sa pridáva samostatnou špičkou a opatrne sa pipetuje (v tomto prípade by sa farba roztoku v jamkách mala po pridaní séra zmeniť z modrofialovej na zelenú);
• v druhých jamkách sa pripravia skríningové riedenia 1:40, najprv sa do nich zavedie 25 ul roztoku PBS a potom 25 ul predriedeného séra a opatrne sa pipetuje.

Pri každom nastavení RPHA je potrebné vykonať kontrolné stanovenie titra K +. Na tento účel sa do 8 jamiek dlhého radu pridá 50 ul roztoku PBS. Potom sa do prvej jamky pridá 50 ul pracovného roztoku K+ (1:20), opatrne sa odpipetuje a prenesie do ďalších jamiek, každá po 50 ul, pričom sa získajú dvojnásobné riedenia od 1:40 do 1:5120. Do ďalších 4 jamiek sa pridá 50 ul roztoku PBS na kontrolu SED na neprítomnosť spontánnej hemaglutinácie.

Do všetkých jamiek tablety so skríningovými riedeniami študovaného séra (okrem prvého obsahujúceho RIP) a kontrol pridajte 25 μl SED. Suspenziu SED pred použitím premiešajte vo fľaši alebo kúpeli! Tableta sa dôkladne pretrepe a nechá sa pri teplote 16 až 25 °C 30 až 40 minút až do úplnej sedimentácie erytrocytov v kontrole.

Stanovenie RPHA počas titrácie študovaného krvného séra

Titrácia študovaného séra a pracovného roztoku K+ sa uskutočňuje v krátkych radoch platne. Ďalší krátky rad sa používa na kontrolu absencie spontánnej hemaglutinácie EDS.

Do prvých jamiek krátkych radov na titráciu testovacieho séra sa pridá 180 μl RIP roztoku. Všetky ostatné jamky sa naplnia 50 ul roztoku PBS.

Do jamiek s RIP roztokom sa pridá 20 μl testovacieho séra (získa sa riedenie 1:10). Každé sérum sa pridá špičkou a opatrne sa odpipetuje (farba roztoku v jamkách by sa mala zmeniť z modrofialovej na zelenú). Potom sa 50 μl prenesie z prvých jamiek do ďalších jamiek v radoch, pričom sa získajú dvojnásobné riedenia od 1:20 do 1:1280. Na konci titrácie sa z posledných jamiek odoberie 50 μl roztokov.

Pri každom nastavení RPHA je potrebné vykonať kontrolné stanovenie titra K +. Na tento účel sa do 8 jamiek dlhého radu pridá 50 ul roztoku PBS. Potom sa do prvej jamky pridá 50 ul pracovného roztoku K+ (1:20), opatrne sa odpipetuje a prenesie do ďalších jamiek, každá po 50 ul, pričom sa získajú dvojnásobné riedenia od 1:40 do 1:5120.

Na kontrolu diagnostiky na absenciu spontánnej hemaglutinácie sa do všetkých jamiek krátkeho radu pridá 50 ul roztoku PBS.

Do všetkých jamiek (okrem prvých jamiek každého radu pre študované séra obsahujúce RIP) pridajte 25 µl SED. Suspenziu SED pred použitím premiešajte vo fľaši alebo kúpeli! Tableta sa dôkladne pretrepe a nechá sa pri teplote 16 až 25 °C 30 - 40 minút až do úplnej sedimentácie erytrocytov v kontrole.

Účtovanie a interpretácia výsledkov

Účtovanie výsledkov pri skríningu krvných sér

Účtovanie výsledkov sa vykonáva na podmienenej stupnici štyroch krížikov. Sérový titer je jeho riedenie, ktoré poskytuje hemaglutináciu najmenej 3 (+++) kríženiami.

• ++++ (4+) - aglutinované erytrocyty tvoria na dne otvoru obrátený "dáždnik", jeho okraje odpadávajú;
• +++ (3+) - aglutinované erytrocyty tvoria na dne otvoru obrátený "dáždnik", jeho okraje sú rovné;
• ++ (2+) - spolu s aglutinovanými erytrocytmi je na dne otvoru sediment vo forme malého "prstence" neaglutinovaných erytrocytov;
• + (1+) - väčšina erytrocytov nie je aglutinovaná a usadzuje sa vo forme malého "krúžku";
• (-) - neaglutinované erytrocyty tvoria „bod“ na dne jamky.

Za pozitívny výsledok sa považuje hemaglutinácia erytrocytov zaťažených Vi-antigénom aspoň 3 kríženiami (+++).

Kontrolou kvality diagnostika sú 4 jamky kontrolného radu, do ktorých bol pridaný len roztok PBS a SED. V týchto jamkách by nemalo dôjsť k spontánnej hemaglutinácii - reakcia je negatívna (-). V opačnom prípade by sa štúdia mala zopakovať. Ak sa počas re-stagingu objaví hemaglutinácia, potom sa liek nepoužíva.

Séra s negatívnym výsledkom by sa mali považovať za neobsahujúce protilátky proti antigénu Vi s diagnostickým titrom 1:40 a nižším.

Séra, ktoré dávajú pozitívny výsledok pri riedení 1:40, by sa mali znovu vyšetriť vo variante s titráciou séra, aby sa stanovil jeho titer.

Zohľadnenie výsledkov pri titrácii krvných sér

Sérový titer je jeho riedenie, ktoré poskytuje hemaglutináciu najmenej 3 (+++) kríženiami.

Kontrolou kvality diagnostika sú jamky radu na kontrolu SED. V týchto jamkách by nemalo dôjsť k spontánnej hemaglutinácii - reakcia je negatívna (-). V opačnom prípade by sa štúdia mala zopakovať. Ak sa počas re-stagingu objaví hemaglutinácia, potom sa liek nepoužíva.

Aktívnym začiatkom diagnostiky je V-antigén fixovaný na povrchu erytrocytov. Pri interakcii so sérami obsahujúcimi protilátky proti antigénu Vee sa pozoruje fenomén aglutinácie erytrocytov.

Formulár na uvoľnenie

Vyrába sa v súprave 1 fľaštička s diagnostikom - 3 ml, diagnostické sérum salmonely adsorbovaný receptor Vee Dry vo forme lyofilizátu od 0,1 ml 1 fľaša; 0,9% roztok chloridu sodného - 2 fľaše po 8 ml; tableta na imunologické reakcie na jedno použitie - 1 ks.

Zlúčenina

Množstvo činidiel:

Diagnosticum erytrocytová salmonella V-antigénna, čo je 0,75% suspenzia formalizovaných a senzibilizovaných V-antigénom ľudských erytrocytov O (I) krvnej skupiny vo fosfátovom tlmivom roztoku (pH-7,2 ± 0,2; koncentrácia - 0,06 mol/l) . Konzervačná látka - formalín. Homogénna suspenzia hnedej farby bez vločiek; pri usadzovaní sa vytvoria 2 vrstvy: hustý hnedý sediment erytrocytov a priehľadná žltkastá supernatantová kvapalina 1 fľaštička-3 ml.

Sérum diagnostický salmonela adsorbovaný receptor Vee suchý - homogénna hmota od bielej s hnedastým odtieňom až po béžovú. 1 fľaša - od 0,1 ml.

Udržiavací roztok - 0,9% roztok chloridu sodného - číra, bezfarebná kvapalina, pH 6,5 až 7,5. 2 fľaše - 8 ml.

Jednorazová platnička s okrúhlym dnom na imunologické reakcie – pozostáva z 8 radov, z ktorých každá obsahuje 12 jamiek s priehľadným, bezfarebným, okrúhlym dnom. 1 PC.

Diagnosticum by sa malo aglutinovať v RPHA so sérom diagnostického receptora B adsorbovaného na salmonelu suchým v zriedení nie nižšom ako 1/2 ich titra, ale nie menšom ako 1/160. Diagnosticum by sa nemalo aglutinovať diagnostickými suchými adsorbovanými sérami salmonely na RA: O receptor 9 - pri riedení 1:40 a viac, H receptor d - pri riedení 1:10 a viac.


Indikácie na použitie

Navrhnuté na detekciu špecifických protilátok proti V-antigénu Salmonella týfusu v ľudskom krvnom sére v reakcii pasívnej hemaglutinácie (RPHA).

Dávkovací režim a spôsob aplikácie

Vzorky ľudského krvného séra sa používajú ako analyzované vzorky.
Analyzovaná vzorka sa uchováva za podmienok, ktoré zabraňujú rastu baktérií pri teplote 2 až 8 °C najviac 72 hodín. Zmrazovanie je povolené, zmrazené analyzované vzorky by sa mali pred testovaním rozmraziť pri izbovej teplote.
Analýza vzoriek s ťažkou hemolýzou, bakteriálnym rastom, ako aj vzoriek skladovaných dlhší čas bez zmrazenia alebo opätovného zmrazenia nie je povolená.

ANALÝZA
Príprava roztokov pre RPHA.
Vysušte otvorené fľaštičky so sérom diagnostického receptora V adsorbovaného na salmonelu a pridajte 1 ml pripojeného 0,9 % roztoku chloridu sodného, ​​čím získate riedenie 1:10, čo je pracovné riedenie.
Otvorená liekovka so sérom diagnostického Salmonella adsorbovaného receptora V suchá v riedení 1:10 v uzavretej forme sa môže skladovať pri teplote 2 až 8 °C po dobu jedného mesiaca.
Diagnosticum je pripravené na použitie. Pred otvorením injekčnej liekovky s diagnostikom jemne pretrepte, kým nevznikne homogénna suspenzia. Počas prevádzky sa odporúča pretrepávanie opakovať.
Otvorená liekovka s diagnostikom v uzavretej forme sa môže skladovať pri teplote 2 až 8 ° C počas jedného mesiaca.
0,9% roztok chloridu sodného. Pripravené na použitie.

Vedenie RPGA.
Pri kontrole ľubovoľného počtu analyzovaných sér je povinné nastaviť 1. rad aglutinácie so sérom diagnostického receptora B adsorbovaného na Salmonella suché.
Na výrobu RPHA sa používa tableta na imunologické reakcie na jedno použitie. Dvojnásobné sériové riedenia analyzovaných sér sa pripravia v 0,05 ml dodaného 0,9 % roztoku chloridu sodného počínajúc od 1:10 do 1:2560 a 1 séria dvojnásobných sériových riedení séra diagnostického receptora Wi Salmonella adsorbovaného suché, počínajúc riedením 1:10, až do dvojnásobku titra uvedeného na štítku liekoviek tohto séra.
Do každej jamky so zriedeným sérom sa pridá 0,025 ml diagnostica.

Povinné kontroly sú:
1. Kontrola séra diagnostického receptora adsorbovaného na salmonelu
Suché a analyzované sérum, ktoré v riedení 1:10 v objeme 0,05 ml prispieva
v dvoch kontrolných jamkách.
2. Kontrola neprítomnosti spontánnej aglutinácie diagnostika, na čo sa 0,025 ml diagnostika pridá do dvoch jamiek obsahujúcich 0,05 ml 0,9 % roztoku chloridu sodného.
Tableta sa pretrepe a umiestni na 1,5-2,0 hodiny do termostatu pri teplote (37+1) °C.

ÚČTOVNÍCTVO VÝSLEDKOV
Reakcia sa berie do úvahy podľa štvorkrížového systému:
4+ - všetky erytrocyty sú aglutinované a rovnomerne pokrývajú dno otvoru;
3+ - takmer všetky erytrocyty sú aglutinované. Na ich pozadí je nenápadný prstenec usadených neaglutinovaných erytrocytov;
3+ - spolu s rovnomerným aglutinátom na dne otvoru je sediment neaglutinovaných erytrocytov vo forme malého "krúžku" alebo "gombíka";
1+ - väčšina erytrocytov nie je aglutinovaná a usadená vo forme malého "prstenka" s hladkými okrajmi alebo "gombíkmi" v strede dna jamky.
(-) - nie sú žiadne známky aglutinácie. Erytrocyty sa usadili vo forme malého „krúžku“ s hladkými okrajmi alebo gombíkmi v strede jamky alebo na dne skúmavky.
Reakcia aspoň 3+ sa považuje za pozitívnu.
Výsledky získané v RPHA možno považovať za spoľahlivé, ak sérum diagnostického salmonely adsorbovaného receptora B suché 1:10 získalo pozitívny výsledok v zriedení najmenej 14 ich titrov a v 2 jamkách s analyzovaným sérom a sérum diagnostického salmonely adsorbovaného receptora B suché v riedení 1:10 by nemali byť žiadne vločky a sediment; v jamkách s 0,9% roztokom chloridu sodného a diagnosticum - reakcia je negatívna.
Protilátkový titer analyzovaného séra sa považuje za posledné riedenie séra, ktoré stále poskytuje pozitívnu aglutináciu erytrocytov.
Interpretácia výsledkov.
Osoby, ktoré majú protilátky proti V-antigénu v riedení 1:40 a viac, sa považujú za podozrivé z chronického bakterionosiča týfusu. Avšak vzhľadom na to, že diagnózu nemožno stanoviť len na základe sérologického vyšetrenia, je potrebné hĺbkové bakteriologické vyšetrenie.

Bezpečnostné opatrenia pri používaní

Diagnostický sérový receptor Vee adsorbovaný na Salmonella, ktorý je súčasťou súpravy, je suchý inaktivovaný.
Séra, ktoré sa majú analyzovať, sa musia inaktivovať pri 56 °C počas 30 minút.
Séra, ktoré sa majú analyzovať, ako aj činidlá, vybavenie a nástroje, ktoré sú s nimi v kontakte, môžu byť potenciálne infekčným materiálom a malo by sa s nimi zaobchádzať opatrne:
- pracovať v gumených rukaviciach;
- pri pipetovaní je potrebné používať automatické zariadenia;
- na konci práce by sa analyzované séra a reagencie, ktoré sú s nimi v kontakte, nástroje mali ošetriť dezinfekčným roztokom;
- Pred a po práci utrite zariadenie 96% etylalkoholom.

Objektívne výsledky analýzy sú zaručené za nasledujúcich podmienok:
- skladovanie všetkých činidiel súpravy by sa malo vykonávať pri teplote 2 až 8 °C;
- nepoužívajte reagencie po expirácii;
- nepoužívajte činidlá zo súpravy, ak na ich obale nie je zodpovedajúce označenie;
- pre RPHA použite reagencie obsiahnuté len v tejto súprave.

2. diagnostika

4.od zničených mikróbov (izolácia špecifického Ag)

Diagnostika HBs erytrocytov

2. diagnostika

4.suspenzia er.oviec ošetrených tanínom a vyzrážaných a\g HBs

5. Na zistenie špecifických protilátok v krvnom sére

Diagnostika gp120

2. diagnostika

4.oddeľte a\g excit. HIV

5. Na detekciu HIV

Diagnostika tetanových erytrocytov

2. diagnostika

4.suspenzia er.ovca lieceneho taninom s a\g excitaciou tetanu

5. na detekciu špecifických protilátok v krvnom sére (proti tetanovej excitácii

Antigén kardiolipín pre mikroprecipitáciu

2. diagnostika

4.extrakcia lipidových frakcií zo srdca zdravého býka

5. Na zistenie špecifických protilátok v krvnom sére

Ultrasonifikovaný treponémový antigén

2. diagnostika

4.z mŕtvych ex. syfilis

5. Na zistenie špecifických protilátok v krvnom sére

Diagnostika korpuskulárnej tularémie

2. diagnostika

4.jednotlivých častíc patogénu

5. Na zistenie špecifických protilátok v krvnom sére

Diagnostika úplavice

2. diagnostika

4. suspenzia zo zabitých m \ o

5. Na zistenie špecifických protilátok v sére pacienta

Diagnostika erytrocytov od Shigella Sonne

2. diagnostika

4. suspenzia er.oviec, ošetrená tonínom

5. Na zistenie špecifických protilátok v krvnom sére

Diagnostika zo salmonely typhimurium

2. diagnostika

4.z mŕtvych ex. salmonely

5. Na zistenie špecifických protilátok v krvnom sére

Séra

Antigangrénne konské sérum 5000 IU

2.sérum

4. z krvného séra hyperimm.koní s excitačným plynom gangréna toxoid

6.parenterálne, po teste globulínom 1:100

normálny ľudský imunoglobulín

2.sérum

4. z darcovského krvného séra

5.form-e prejsť. špecifické zakúpené umenia. imm

6. parenterálne

precipitujúce antraxové sérum

2.sérum

4. z krvného séra hyperimunizovaných zvierat a\g excit.sib. vredy

6.zrážacia reakcia (RP)

Botulínové sérum typu - A 400 IU

2.sérum

5. na zistenie špecifického antigénu v testovanom materiáli

6.neutralizačná reakcia (RN)

Antraxový globulín

2.sérum

4. z krvného séra hyperimunizovaných zvierat a\g dráždivé vredy

5.form-e prejsť. špecifické zakúpené umenia. imm

6. parenterálne

Hemolytické sérum

2.sérum

4. zo séra hyperimunizovaných zvierat s erytrocytmi zvierat iného druhu

5. na zistenie špecifického antigénu v testovanom materiáli

Cholerové aglutinačné sérum Ogawa

2.sérum

4. z krvného séra hyperimunizovaných zvierat

5. na zistenie špecifického antigénu v testovanom materiáli

Sérum svetelnej tularémie

2.sérum

4. z krvného séra hyperimunizovaných zvierat a\g excitabilný tulár.

5. na zistenie špecifického antigénu v testovanom materiáli

Imunoglobulín proti ľudskej kliešťovej encefalitíde

2.sérum

4. z darcovského krvného séra

5.form-e prejsť. špecifické zakúpené umenia. imm

6. parenterálne

ESNO diagnostické sérum

2.sérum

4. z krvného séra hyperimunizovaných zvierat s ESNO vírusmi

5. na zistenie špecifického antigénu v testovanom materiáli

Ľudský imunoglobulín proti hepatitíde B

2.sérum

4. z krvného séra darcu očkovaného proti hepatitíde B

5.form-e prejsť. špecifické zakúpené umenia. imm

6. parenterálne

Antiglobulínové sérum označené peroxidázou

2.sérum

4. z krvného séra hyperimunizovaných zvierat

5. na zistenie špecifického antigénu v testovacom materiáli (HIV)

Imunoglobulín proti besnote

2.sérum

4. z darcovského krvného séra

5.form-e prejsť. špecifické zakúpené umenia. imm