Markery powierzchniowe komórek CD: leukocyty: wprowadzenie. Ludzki system markerów antygenów CD (Cluster of Differentiation) Markery monocytów i makrofagów

Markery i receptory są analizatorami środowiska zewnętrznego, na powierzchni komórki może ich być 100 - 10 000 lub więcej, są niezbędne do kontaktów „komórka-cząsteczka-komórka” i są AG - specyficzne, AG - niespecyficzne, dla cytokin, dla hormonów itp. Markery błonowe (antygeny) dzielą się na różnicowanie (CD-AG), HLA, związane z głównym kompleksem zgodności tkankowej i determinantę. Cząsteczki specyficznej odpowiedzi immunologicznej są unikalne dla każdego klonu i każdego indywidualnego procesu: receptory immunoglobulin rozpoznające antygen limfocytów B (BCR), receptory rozpoznające antygen limfocytów T (TCR), cząsteczki prezentujące antygen. Antygeny te mogą służyć badaczom jako markery immunobiologiczne. O odporności transplantacyjnej decyduje obecność markerów transplantacyjnych – antygenów:

Antygeny MHC.

Antygeny erytrocytów układu AB0 i Rh.

Mały kompleks antygenu zgodności tkankowej kodowany przez chromosom Y.

Leukocyty posiadają na swojej powierzchni dużą liczbę receptorów i antygenów, co jest istotne, ponieważ można je wykorzystać do identyfikacji komórek różnych subpopulacji. Receptory i antygeny znajdują się w pozycji mobilnej, „pływającej” i są uwalniane dość szybko. Mobilność receptorów umożliwia im koncentrację na jednym obszarze błony, co pomaga wzmocnić kontakty między komórkami, a szybkie wydalanie receptorów i antygenów oznacza ich ciągłe tworzenie się nowych w komórce.

Antygeny różnicujące limfocytów T.

W praktyce klinicznej ogromne znaczenie ma oznaczanie różnych markerów limfocytów. Podstawowa koncepcja różnicowania leukocytów opiera się na istnieniu specyficznych receptorów błonowych.

Ponieważ takie cząsteczki receptora mogą działać jak antygeny, możliwe jest ich wykrycie za pomocą specyficznych przeciwciał, które reagują tylko z jednym antygenem błony komórkowej. Obecnie istnieje ogromna liczba rodzajów przeciwciał monoklonalnych przeciwko antygenom różnicowania ludzkich leukocytów.

Ze względu na ich znaczenie i poprawę diagnostyki konieczna jest standaryzacja specyficzności różnicowania antygenów.

W 1986 roku zaproponowano nomenklaturę antygenów różnicowania ludzkich leukocytów. To jest nomenklatura CD (klaster zróżnicowania – klaster zróżnicowania). Opiera się na zdolności przeciwciał monoklonalnych do reagowania z określonymi antygenami różnicującymi. Grupy płyt CD są ponumerowane.

Obecnie istnieją przeciwciała monoklonalne przeciwko szeregowi antygenów różnicujących ludzkie limfocyty T.

Do określenia całkowitej populacji limfocytów T stosuje się przeciwciała monoklonalne o swoistości dla T2DM, 3, 5, 6 i 7.

T2DM. przeciwciała monoklonalne o specyficzności T2DM są skierowane przeciwko antygenowi identycznemu z „receptorem czerwonych krwinek owiec”. Zdolność limfocytów T do tworzenia rozet z czerwonymi krwinkami błonowymi pozwala na prostą i niezawodną identyfikację tych komórek. T2DM stwierdza się we wszystkich dojrzałych obwodowych limfocytach T, na większości płytek krwi, a także w niektórych populacjach komórek – limfocytach O (ani limfocytów T, ani B).

CD3. przeciwciała monoklonalne tej klasy reagują z trójcząsteczkowym kompleksem białkowym, który jest związany ze swoistym dla antygenu receptorem komórek T, będącym głównym markerem funkcjonalnym tej populacji. CD3 służy do identyfikacji dojrzałych limfocytów T.

CD5 . antygen jest glikoproteiną występującą na wszystkich dojrzałych limfocytach T. Określany na późnych etapach różnicowania komórek w grasicy. Często marker wykrywa się na komórkach pacjentów z przewlekłą białaczką limfatyczną typu B.

CD6. Przeciwciała specyficzne dla CD6 reagują z glikoproteiną o dużej masie cząsteczkowej obecną na błonie wszystkich dojrzałych komórek T. Antygen jest również wykrywany na niewielkiej części obwodowych komórek B i jest obecny w większości komórek białaczkowych typu B przewlekłej białaczki limfatycznej.

CD7. wykryty w 85% dojrzałych limfocytów T. Obecny także na tymocytach. Uważa się, że jest to najbardziej wiarygodne kryterium rozpoznania ostrej białaczki T-komórkowej.

Oprócz tych głównych markerów komórek T znane są inne antygeny różnicowania komórek T, które są charakterystyczne albo dla pewnych etapów ontogenezy, albo dla subpopulacji różniących się funkcją. Wśród nich najbardziej rozpowszechnione są CD4 i CD8.

CD4 . dojrzałe limfocyty T CD4+ obejmują limfocyty T z aktywnością pomocniczą i induktorami. Szczególnie ważne jest to, że CD4 wiąże się z wirusem AIDS, co prowadzi do penetracji wirusa do komórek tej subpopulacji.

CD8. Subpopulacja limfocytów T CD8+ obejmuje limfocyty T cytotoksyczne i supresorowe.

Markery i receptory komórek immunokompetentnych .

Receptory limfocytów.

Na powierzchni limfocytu B znajduje się wiele receptorów.

1) Receptory specyficzne dla antygenu lub Ig na powierzchni komórki (sIg). Są one reprezentowane głównie przez IgM i IgD w postaci monomerów.

Wiązanie antygenu ze swoistymi dla antygenu receptorami komórek B powoduje różnicowanie limfocytów B, co prowadzi do powstania komórek wytwarzających przeciwciała i limfocytów B pamięci immunologicznej.

2) Receptory czynników wzrostu i różnicowania. Ta grupa receptorów powoduje, że komórki B dzielą się i wydzielają immunoglobuliny.

3) Receptory Fc – specyficznie rozpoznające determinanty zlokalizowane we fragmencie Fc immunoglobuliny i wiążące te Ig. Receptory Fc odgrywają znaczącą rolę w regulacji odpowiedzi immunologicznej.

4) Receptory dopełniacza – odgrywają ważną rolę w aktywacji limfocytów B, wywoływaniu tolerancji, wzmacnianiu współpracy komórkowej i ułatwianiu interakcji międzykomórkowych.

Limfocyty T mają na swojej powierzchni specyficzne receptory rozpoznające antygeny. Receptor jest heterodimerem składającym się z łańcuchów polipeptydowych, z których każdy zawiera region zmienny i stały. Region zmienny wiąże się z antygenami i cząsteczkami MHC. W szpiku kostnym pod wpływem mikrośrodowiska następuje różnicowanie macierzystego limfocytu B w limfocyt pre-B. W cytoplazmie tej komórki następuje synteza łańcuchów ciężkich IgM, a poprzez szereg podziałów łańcuchów lekkich immunoglobulin. Równolegle na powierzchni komórek pojawiają się cząsteczki immunoglobulin. Następnie, w miarę dojrzewania limfocytów B, wzrasta liczba cząsteczek immunoglobulin na powierzchni błony komórkowej. Wraz ze wzrostem głównych receptorów (dla fragmentów Fc immunoglobulin i składnika C3 dopełniacza) pojawia się IgD, a następnie niektóre komórki przechodzą na produkcję IgG, IgA lub IgE (lub jednocześnie cząsteczek kilku typów). Cykl różnicowania limfocytów B w szpiku kostnym trwa 4-5 dni.

Pod wpływem antygenu i przy pomocy limfocytów T i makrofagów dojrzała komórka B, posiadająca receptory dla tego antygenu, ulega aktywacji i przekształca się w limfoblast, który dzieli się 4 razy i zamienia się w młodą komórkę plazmatyczną, która po serii podziałów zamienia się w dojrzałą komórkę plazmatyczną, umierającą po 24-48 godzinach pracy.

Równolegle z tworzeniem się komórek plazmatycznych pod wpływem antygenu, niektóre limfocyty B specyficzne dla tego antygenu po aktywacji zamieniają się w limfoblasty, a następnie w duże i małe limfocyty, które zachowują specyficzność. Są to immunologiczne komórki pamięci – długo żyjące limfocyty, które krążąc w krwiobiegu zasiedlają wszystkie obwodowe narządy limfatyczne. Komórki te mają możliwość szybszej aktywacji przez antygen o określonej swoistości, co warunkuje większą szybkość wtórnej odpowiedzi immunologicznej.

Dojrzały limfocyt B posiada na swojej powierzchni pewien zestaw receptorów, dzięki którym oddziałuje z antygenem, innymi komórkami limfoidalnymi oraz różnymi substancjami stymulującymi aktywację i różnicowanie limfocytów B. Głównymi receptorami błony komórkowej limfocytów B są determinanty immunoglobulin, za pomocą których komórka wiąże się z określonym antygenem i ulega stymulacji. Równolegle ten sam antygen stymuluje specyficzny limfocyt T. Do rozpoznawania aktywowanych limfocytów T przez limfocyty B wykorzystuje się antygeny Ia (antygeny HLA-DR). Ponadto na powierzchni limfocytu B znajdują się receptory bezpośrednio dla specyficznych antygenów limfocytów T, za pomocą których odbywa się specyficzny kontakt między limfocytami T i B. Komórki pomocnicze T w wyniku kontaktu przekazują szereg czynników stymulujących limfocytom B; Dla każdego z tych czynników na powierzchni limfocytu B znajduje się odpowiedni receptor (dla czynnika wzrostu limfocytów B, interleukiny-2, czynnika różnicowania komórek B, czynnika pomocniczego specyficznego dla antygenu itp.).

Najważniejszym receptorem limfocytu B jest receptor dla fragmentu Fc immunoglobulin, dzięki któremu komórka wiąże na swojej powierzchni cząsteczki immunoglobulin o różnej swoistości. Ta właściwość komórki B decyduje o jej swoistości zależnej od przeciwciał, która pojawia się tylko wtedy, gdy komórka ma na swojej powierzchni specyficznie lub nieswoiście zaadsorbowane immunoglobuliny. Efekt cytotoksyczności komórkowej zależnej od przeciwciał wymaga obecności dopełniacza; Odpowiednio, na powierzchni limfocytu B znajduje się receptor dla składnika C3 dopełniacza.

Antygeny różnicujące limfocytów T wykrywa się za pomocą cytometrii przepływowej, immunofluorescencji pośredniej i testu limfotoksyczności. Aby wykonać te metody, wymagane są przeciwciała MAb przeciwko antygenom różnicującym limfocyty T. Za pomocą powierzchniowych markerów antygenowych można określić populację i subpopulację komórek, etap ich różnicowania i aktywacji. Najbardziej dostępna metoda immunofluorescencji opiera się na zdolności monoprzeciwciał do wiązania się na powierzchni żywych komórek i pozwala na identyfikację specyficznych determinant antygenowych: CD3, CD4, CD8 itp. po dodatkowym traktowaniu limfocytów antyimmunoglobulinami znakowanymi FITC . Oznaczanie liczby limfocytów B. Metody opierają się na fakcie, że na powierzchni limfocytów B znajdują się receptory dla fragmentu Fc immunoglobulin, dla trzeciego składnika dopełniacza (C3), dla mysich erytrocytów i determinantów immunoglobulin. Najważniejszymi markerami powierzchniowymi limfocytów B są receptory CD19, CD20, CD22, oznaczane metodą MAT metodą cytometrii przepływowej. Oznaczenie limfocytów B i stopnia ich dojrzałości jest istotne w przypadku pierwotnych humoralnych niedoborów odporności, gdy konieczne jest rozróżnienie między agammoglobulinemią z limfocytami B i bez nich. Krew obwodowa zawiera tzw. limfocyty zerowe – są to komórki, które nie mają cech limfocytów T i B, gdyż nie mają receptorów antygenowych lub mają zablokowane receptory. Jest prawdopodobne, że niedojrzałe limfocyty lub stare komórki, które utraciły receptory, lub komórki uszkodzone przez toksyny, działają immunosupresyjnie. 70% ludzi ma 8-25% zerowych limfocytów. W wielu chorobach liczba takich komórek wzrasta albo z powodu uszkodzenia komórek, albo z powodu uwolnienia niedojrzałych lub wadliwych komórek. Ich liczbę określa się odejmując limfocyty T i B od całkowitej zawartości limfocytów.

Zastosowanie specyficznych markerów w połączeniu z mikroskopią elektronową umożliwia wiarygodną identyfikację i ocenę udziału fagocytów jednojądrzastych w określonych procesach. Jednym z najbardziej wiarygodnych markerów identyfikacji fagocytów jednojądrzastych ludzi i zwierząt jest enzym esteraza, oznaczany histochemicznie, gdy jako substrat stosuje się maślan alfa-naftylu lub octan alfa-naftylu. W tym przypadku zabarwieniu ulegają prawie wszystkie monocyty i makrofagi, chociaż intensywność reakcji histochemicznej może się różnić w zależności od rodzaju i stanu funkcjonalnego monocytów, a także warunków hodowli komórkowej. W fagocytach jednojądrzastych enzym jest zlokalizowany rozproszonie, natomiast w limfocytach T jest wykrywany w postaci 1-2 punktowych ziarnistości.

Innym wiarygodnym markerem jest enzym lizozym wydzielany przez makrofagi, który można wykryć metodą immunofluorescencji przy użyciu przeciwciał przeciwko lizozymowi.

Zidentyfikuj różne etapy różnicowania m.f. peroksydaza pozwala. Granulki zawierające enzym barwią dodatnio jedynie monoblasty, promonocyty, monocyty i makrofagi wysięku. Rezydujące (tj. stale obecne w normalnych tkankach) makrofagi nie są wybarwione.

5-nukleotydaza, aminopeptydaza leucynowa i fosfodiesteraza 1, które są zlokalizowane w błonie komórkowej, są również stosowane jako enzymy markerowe dla fagocytów jednojądrzastych. Aktywność tych enzymów określa się w homogenatach komórkowych lub cytochemicznie. Wykrycie 5-nukleotydazy pozwala na odróżnienie makrofagów prawidłowych od makrofagów aktywowanych (aktywność tego enzymu jest w pierwszym przypadku wysoka, w drugim niska). Przeciwnie, aktywność aminopeptydazy leucynowej i fosfodiesterazy wzrasta wraz z aktywacją makrofagów.

Markerami mogą być również składniki dopełniacza, w szczególności C3, ponieważ białko to jest syntetyzowane wyłącznie przez monocyty i makrofagi. Można go wykryć w cytoplazmie metodami immunocytochemicznymi; Składniki dopełniacza różnią się właściwościami antygenowymi u różnych gatunków zwierząt.

Bardzo typowe dla m.f. obecność receptorów immunologicznych dla fragmentu Fc immunoglobuliny G i składnika dopełniacza C3. Jednojądrzaste fagocyty niosą te receptory na wszystkich etapach rozwoju, ale wśród niedojrzałych komórek liczba m.f. z receptorami niższymi niż u dojrzałych (monocytów i makrofagów). M.f. mają zdolność do endocytozy. Dlatego też pochłonięcie opsonizowanych bakterii lub erytrocytów opłaszczonych immunoglobuliną G (fagocytoza immunologiczna) jest ważnym kryterium klasyfikacji komórki jako c.m.f., jednakże wychwyt erytrocytów opłaszczonych dopełniaczem nie zachodzi, jeśli m.f. nie zostały wcześniej aktywowane. Z wyjątkiem fagocytozy, wszystkie m.f. charakteryzuje się intensywną pinocytozą. W makrofagach dominuje makropinocytoza, która leży u podstaw wchłaniania wszystkich roztworów; Pęcherzyki powstają w wyniku internalizacji substancji transportujących błonę na zewnątrz komórki. Pinocytozę obserwowano także w innych komórkach, ale w słabszym stopniu. Nietoksyczne barwniki witalne i węgiel koloidalny nie nadają się do charakteryzowania aktywności endocytotycznej mf, ponieważ są one również wchłaniane przez inne typy komórek.

Aby zidentyfikować konkretny m.f. antygeny, można zastosować surowice odpornościowe.

Na poziomie komórkowym zdolność komórek do podziału ocenia się na podstawie włączenia znakowanego prekursora DNA 3H-tymidyny lub na podstawie zawartości DNA w jądrach. Ocena fagocytozy krwi obwodowej. Zaproponowano system kompleksowego badania aktywności funkcjonalnej fagocytarnych komórek krwi obwodowej, pozwalający na badanie parametrów, których zmiany mogą wskazywać na naruszenie tolerancji na zakażenie. Początkowym etapem interakcji między fagocytem a antygenem jest ruch fagocytów, dla których bodźcem są chemoatraktanty. Następnie następuje etap adhezji, za który odpowiedzialne są receptory powierzchniowe: selektyny i integryny (CD18, CD11a, CD11b, CD11c, CD62L, CD62E), które oznacza się za pomocą MAT metodą immunofluorescencji.

Spis treści tematu "Czynniki nieswoistej oporności organizmu. Interferon (ifn). Układ odpornościowy. Komórki układu odpornościowego.":

Limfocyt T S ( Komórki T) pełnią różne funkcje, dlatego dzieli się je na subpopulacje. Komórki T rozpoznają Ag, w tym te przetwarzane przez komórki prezentujące Ag i zapewniają realizację komórkowych reakcji immunologicznych. Oprócz, Limfocyty T oddziałują z limfocytami B podczas rozwoju humoralnych reakcji immunologicznych. Aktywacja limfocytów T następuje pod wpływem makrofagów.

Dojrzewanie komórek T

Prekursory komórek T (tymocyty) dojrzewają w grasicy. Ich różnicowanie jest regulowane przez interakcje z komórkami nabłonkowymi i dendrytycznymi zrębu grasicy, a także hormonopodobnymi czynnikami polipeptydowymi komórek nabłonka grasicy (na przykład tymozyny, tymopoetyny).

Tabela 10-7. Główne cytokiny odpowiedzi immunologicznej

Markery komórek T

Komórki T posiadają markery - specyficzne cząsteczki białek powierzchniowych właściwe dla jednej lub drugiej subpopulacji tych komórek.

Markery CD limfocytów T.

Podczas różnicowania limfocytów T Specyficzne Ag pojawiają się na ich plazmalemie, działając jako markery. Te tzw klastry różnicujące I" - Markery CD[z angielskiego klaster różnicowania] - wskazują zdolności funkcjonalne limfocytów i niektórych innych komórek. Markery CD zidentyfikowany za pomocą monoklonalnego AT. Gdy dojrzałe komórki opuszczą grasicę, wyrażają CD4 lub CD8, a także CD3. W przypadku niektórych niedoborów odporności wykrywa się zaburzenia normalnej zawartości komórek z tym lub innym markerem (na przykład komórki CD4+ w AIDS). Komórki T podzielone na subpopulacje ze względu na ich funkcję i profil markerów błonowych, w szczególności CD-Ag.

Metoda oznaczania Immunofenotypowanie (cytofluorymetria przepływowa, technologia no-wash)

Materiał w trakcie badań Krew pełna (z EDTA)

Możliwość wizyty domowej

W profilu znajdują się następujące wskaźniki:

• Limfocyty, wartość bezwzględna,
• Limfocyty T (CD3+),
• komórki pomocnicze T (CD3+CD4+),
• Limfocyty T-cytotoksyczne (CD3+CD8+),
• Indeks immunoregulacyjny (CD3+CD4+/CD3+CD8+),
• Limfocyty B (CD19+),
• komórki NK (CD3-CD16+CD56+),
• Komórki T-NK (CD3+CD16+CD56+).

Limfocyty wyrażają szereg antygenów powierzchniowych i cytoplazmatycznych, charakterystycznych dla ich subpopulacji i etapu rozwojowego. Ich fizjologiczna rola może być inna. Struktury te są celem immunofenotypowania limfocytów jako markerów antygenowych różnych subpopulacji, których obecność określa się za pomocą znakowanych przeciwciał monoklonalnych. Powierzchniowe struktury antygenowe na komórkach wykrywane przez przeciwciała monoklonalne nazywane są klastrami różnicowania (CD, klastry różnicowania). Klastom zróżnicowania przypisuje się określone numery w celach normalizacyjnych. Stosując przeciwciała monoklonalne znakowane fluorochromem, które wiążą się z określonymi CD, można zliczyć zawartość limfocytów należących do subpopulacji o różnych funkcjach lub stadiach rozwojowych. Pozwala to zrozumieć charakter niektórych chorób, ocenić stan pacjenta, monitorować przebieg i przewidzieć dalszy rozwój choroby.

Główne subpopulacje limfocytów

Limfocyty T to limfocyty dojrzewające w grasicy (stąd ich nazwa). Biorą udział w zapewnieniu komórkowej odpowiedzi odpornościowej oraz kontrolują pracę limfocytów B odpowiedzialnych za powstawanie przeciwciał, czyli za humoralną odpowiedź immunologiczną.

Pomocnicy T (od angielskiego „pomoc” – pomagać) to rodzaj limfocytów T, które posiadają na swojej powierzchni struktury ułatwiające rozpoznawanie antygenów prezentowanych przez komórki pomocnicze i uczestniczące w regulacji odpowiedzi immunologicznej, wytwarzając różne cytokiny.

Limfocyty T cytotoksyczne - rozpoznają fragmenty antygenu na powierzchni komórek docelowych, orientują swoje granulki w kierunku celu i uwalniają swoją zawartość w obszarze kontaktu z nim. Ponadto niektóre cytokiny są sygnałem śmierci (typu apoptozy) dla komórek docelowych.

Limfocyty B (od łacińskiego „bursa” - kaletka, od nazwy kaletki Fabriciusa, w której te limfocyty dojrzewają u ptaków) - rozwijają się w węzłach chłonnych i innych narządach obwodowych układu limfatycznego. Na powierzchni komórki te zawierają immunoglobuliny, które działają jako receptory antygenów. W odpowiedzi na interakcję z antygenem limfocyty B reagują dzieląc się i różnicując w komórki plazmatyczne wytwarzające przeciwciała, dzięki którym zapewniana jest odporność humoralna.

Komórki NK (komórki NK lub komórki NK) to komórki wykazujące naturalną, nieimmunologiczną aktywność cytotoksyczną wobec zmienionych nowotworowo komórek docelowych. Komórki NK nie są ani dojrzałymi limfocytami T, B, ani monocytami.

Komórki T-NK (ECT) to komórki o naturalnym, nieimmunologicznym działaniu zabójczym, posiadające cechy limfocytów T.

Klastry różnicowania antygenów

CD3 jest markerem powierzchniowym specyficznym dla wszystkich komórek subpopulacji limfocytów T. Funkcjonalnie należy do rodziny białek tworzących kompleks przekazywania sygnału błonowego związany z receptorem komórek T.

CD4 – charakterystyczne dla limfocytów T pomocniczych; występuje także na monocytach, makrofagach i komórkach dendrytycznych. Wiąże się z cząsteczkami MHC klasy II ulegającymi ekspresji na komórkach prezentujących antygen, ułatwiając rozpoznawanie antygenów peptydowych.

CD8 jest charakterystyczne dla supresorowych i/lub cytotoksycznych limfocytów T, komórek NK i większości tymocytów. Jest to receptor aktywacji komórek T, który ułatwia rozpoznawanie związanych z komórkami antygenów MHC klasy I (głównego kompleksu zgodności tkankowej).

CD16 – używany razem z CD56, głównie do identyfikacji komórek NK. Obecny także na makrofagach, komórkach tucznych, neutrofilach i niektórych limfocytach T. Jest składnikiem receptorów sprzężonych z IgG, które pośredniczą w fagocytozie, wytwarzaniu cytokin i cytotoksyczności komórkowej zależnej od przeciwciał.

CD19 – obecny na limfocytach B, ich prekursorach, pęcherzykowych komórkach dendrytycznych, uważany jest za najwcześniejszy marker różnicowania limfocytów B. Reguluje rozwój, różnicowanie i aktywację komórek B.

CD56 jest prototypowym markerem komórek NK. Oprócz komórek NK jest obecny na komórkach embrionalnych, mięśniowych, nerwowych, nabłonkowych i niektórych aktywowanych limfocytach T. Guzy hematologiczne CD56-dodatnie, takie jak chłoniak z komórek NK lub T-komórek, chłoniak anaplastyczny z dużych komórek, szpiczak plazmocytowy (białaczka plazmatyczna jest CD56-ujemna). Są to cząsteczki adhezyjne na powierzchni komórki, które ułatwiają adhezję homofilną i biorą udział w hamowaniu wzrostu kontaktowego, cytotoksyczności komórek NK i rozwoju komórek nerwowych.

Literatura

1. Zurochka A.V., Khaidukov S.V. i inne - Cytometria przepływowa w medycynie i biologii. - Jekaterynburg: RIO Ural Oddział Rosyjskiej Akademii Nauk, 2013. – 552 s.
2. Immunologia kliniczna i alergologia / Wyd. Lawlor Jr. G., Fisher T., D. Adelman D../: Trans. z angielskiego - M.: Praktika, 2000. - 806 s.
3. Kliniczna diagnostyka laboratoryjna. Przywództwo narodowe. Tom 2./wyd. Dołgow V.V., Menshikov V.V./ – M., GEOTAR-Media, 2012 – 808 s.
4. Praktyczny przewodnik po chorobach wieku dziecięcego. Tom 8 Immunologia dzieciństwa. /wyd. A.Yu.Scherbina, E.D.Pashanov/ - Moskwa: PRAKTYKA MEDYCZNA, 2006 - 432 s.
5. Royt A., Brostoff D., Dale D. Immunologia. - M.: Mir, 2000 - 592 s.
6. Yarilin A. A. Immunologia. – M.: GEOTAR-Media. 2010 - 752 s.
7. Leach M., Drummond M., Doig A. Praktyczna cytometria przepływowa w diagnostyce hematologicznej, oprawa twarda. – WILEY-BLACKWELL, 2013.
8. Przewodnik kliniczny Tietz po testach laboratoryjnych. 4. wyd. wyd. Wu A.N.B. – USA: W.B Sounders Company, 2006 – 1798 s.

Państwowa Instytucja Edukacyjna Wyższego Kształcenia Zawodowego Twer Państwowa Akademia Medyczna Ministerstwa Zdrowia Rosji

ODPORNOŚĆ KOMÓRKOWA. RODZAJE CYTOTOKSYCZNOŚCI KOMÓRKOWEJ.

RECEPTORÓW I MARKERÓW, SUBOPOPULACJE LIMFOCYTÓW.

Podręcznik edukacyjno-metodologiczny dotyczący immunologii ogólnej. Twer 2008.

Podręcznik dydaktyczno-metodyczny do zajęć praktycznych z immunologii ogólnej dla studentów V roku kierunków lekarskich i pediatrycznych, a także dla rezydentów klinicznych i lekarzy zainteresowanych zagadnieniami immunologii.

Opracowano przez profesora nadzwyczajnego Katedry Immunologii Klinicznej z Alergologią Yu.I. Budchanov.

© Yu.I. Budchanov 2008

LISTA SKRÓTÓW

MHC – główny kompleks zgodności tkankowej; IL1 – IL18 – interleukiny 1-18;

TCR - receptor komórek T (patrz angielski TcR - receptor komórek T); CD – klastry zróżnicowania;

CTL – cytotoksyczne limfocyty T (synonim: efektorowe limfocyty T); FcγR – receptor dla fragmentu Fc immunoglobuliny G;

HLA – (angielski: Human Leukocyte Antigens) ludzki antygen leukocytowy; IgG - immunoglobulina G;

NK – naturalni zabójcy

TcR – (eng. receptor komórek T) receptor komórek T; Th1 – pomocnik T typu 1;

Th2 – pomocnicy T drugiego typu;

ODPORNOŚĆ KOMÓRKOWA

Układ odpornościowy ssaków zapewnia ochronę organizmu za pomocą dwóch specyficznych dla mięsa

sposoby. Po pierwsze,

edukacja konkretna

przeciwciała

Po drugie,

Edukacja

funkcjonowanie komórek

czynniki

nabyty

odporność, nie

dostarczanie

SKUTECZNE DZIAŁANIE (zniszczenie komórek docelowych: nowotworowych, zmutowanych,

itp.), ale także

przeprowadzanie REGULACJI odpowiedzi immunologicznej. A więc

uczestniczyć w

tworzenie

pamięć immunologiczna, rozpoznawanie antygenów i indukcja odpowiedzi immunologicznej. Komórki, które działają

tak różnorodne

funkcje są w środku

przede wszystkim T-LIMFOCYTY.

I wśród

Istnieją subpopulacje limfocytów T, z których głównymi są T-

pomocników i efektorów T

(cytotoksyczne

limfocyty T). Nabywanie przez nie określonych funkcji następuje w centralnym narządzie układu odpornościowego – grasicy.

funkcja

Limfocyty T

Jest

umiejętność

tylko rozpoznać

antygeny

przedstawione(przedstawiony) na

powierzchnie

pomocniczy

prezentujące antygen

(dendrytyczne, makrofagi lub limfocyty B) w połączeniu z ich własnymi antygenami zgodności tkankowej.

GRASICA jest ważnym narządem limfopoetycznym i endokrynnym. Główną funkcją grasicy jest regulacja

wpływ na immunogenezę limfocytów T. Hematopoetyczne

komórki macierzyste (prekursory – T

limfocyty) migrują ze szpiku kostnego przez krwioobieg do grasicy. Ustalono, że hormony grasicy i

dokładniej czynniki rozpuszczalne

grasica, stwórz

humorystyczny

tymika mikrośrodowiska

limfocyty

(te ostatnie nazywane są tymocytami). Znacząca rola w

wewnątrzgrasiczny rozwój limfocytów T

mają komórki nabłonkowe grasicy i komórki dendrytyczne

komórki grasicy Interakcje międzykomórkowe

tymocyty wraz z nimi zapewniają dojrzewanie i selekcję limfocytów T. Wpływ hormonów grasicy na immunogenezę

zachodzi nie tylko w procesie wewnątrzgrasicznego różnicowania limfocytów, ale także na odległość,

wchodząc do krwi, wpływają na swoich poprzedników

limfocyty

szpik kostny

obiegowy

limfocyty. W grasicy

się dzieje

podstawowy

wstępny

różnicowanie

Limfocyty T (tymocyty), z

późniejszy

paragon

limfocyty

krew wśród

limfocyty nie powinny być autoreaktywne – zdolne do interakcji z autologicznymi antygenami organizmu.

Należy zaznaczyć, że biologiczna rola substancji hormonalnych grasicy nie została dotychczas ostatecznie ustalona. Ich działanie nie ogranicza się do limfopoezy, wpływają na metabolizm wapnia i fosforu, metabolizm i wykorzystanie glukozy, napięcie mięśni, wzrost i dojrzewanie, działają przeciwbólowo i wpływają na metabolizm pigmentu.

Różnicowanie limfocytów T.

W procesie różnicowania Limfocyty T istnieją dwa główne etapy(jak pamiętacie, w procesie różnicowania limfocytów B rozróżnia się te same dwa etapy):

1. Antygen nie jest zróżnicowanie zależne- występuje stale w grasicy.

2. Różnicowanie zależne od antygenu– zachodzi w obwodowych narządach układu odpornościowego tylko wtedy, gdy limfocyt T wchodzi w kontakt z antygenem.

NIEZALEŻNE OD ANTYGENÓW RÓŻNICOWANIE LIMFOCYTÓW T

Komórką macierzystą limfocytów T, podobnie jak wszystkich komórek krwi, jest pluripotencjalna komórka macierzysta

komórka krwiotwórcza. Jego znacznikiem jest CD 34. Podstawowe informacje na temat CD można znaleźć na końcu zaleceń edukacyjnych i metodologicznych.

Wcześni poprzednicy

Miejsce wiązania antygenu

α β

Limfocyty T migrują z kości					mózg, grasica, gdzie występuje
niezależny od antygenu		różnicowanie				Limfocyty T pod			wpływ
„komórki pielęgniarskie”, komórki nabłonka grasicy, a także hormony grasicy
(α- i β-tymozyny, tymulina /czynnik grasicy w surowicy/, tymopoetyna,
tymiankowy	humorystyczny		czynnik). Najbardziej					znaczniki
tymocyty	są CD7,							Limfocyty T
zróżnicowane na		immunokompetentny							nabywać
ważna zdolność rozpoznawania antygenu. NA								na wolnym powietrzu
membrana	pojawia się specjalny (wyraża)						receptor -
komórkowy	Receptor p (TCR, angielski -						chwytnik)
antygen.	Ponadto dla każdego antygenu (epitopu)							ciało
oddzielny limfocyt lub jego							klonalny			spółki zależne
limfocyty potomne					konkretny		antygen TcR.
Tymocyty	jednocześnie				proces		różnicowanie

nabywają CD3, który jest ściśle związany z receptorem komórek T. CD3 jest wymagany do przekazywania sygnału z TCR ​​do cytoplazmy. Cząsteczki CD8 i CD4 pojawiają się także na powierzchni tymocytów. Są to komórki podwójnie dodatnie, tj. ich fenotyp (TCR+, CD3+, CD4+, CD8+) i oni

Czy młode tymocyty.

Cząsteczki TcR (TCR) swoją budową przypominają immunoglobuliny (fragment Fab) i składają się z: łańcuchy alfa i beta(TcR αβ stanowi zdecydowaną większość) lub łańcuchy gamma i delta (TcR γδ). Formy αβ- i γδ TcR mają bardzo podobną strukturę. Każdy łańcuch TCR składa się z dwóch regionów (domen): zmiennej zewnętrznej (V) i drugiej stałej (C). Poszczególne geny kodujące cały region zmienny (V) łańcuchów α i β TcR są nieobecne. Fragmenty domen zmiennych kodowane są przez trzy grupy genów oznaczone V, D, J. W genomie komórkowym geny kodujące segmenty V, J i D regionu zmiennego prezentowane są w postaci licznych wariantów. To różne kombinacje segmentów V, J i D regionu V, powstałe w procesie rearanżacji genów, zwanej rearanżacją, zapewniają różnorodność cząsteczek TCR.

Zatem ograniczona liczba genów (około 400) może kodować receptory dla niemal nieskończonej liczby antygenów (wiele milionów). Co więcej, różne kombinacje genów segmentów V, D, J to tylko jeden ze sposobów osiągnięcia różnorodności receptorów antygenowych limfocytów T.

Na jednym limfocycie T występuje tylko jeden wariant receptora i tylko dla jednego antygenu.

TcR jest ściśle związany z CD3.

Główną funkcją dojrzałych limfocytów T jest rozpoznawanie obcych peptydów antygenowych w połączeniu z antygenami własnymi głównego kompleksu zgodności tkankowej (MHC) na powierzchni komórek prezentujących antygen lub na powierzchni dowolnych komórek docelowych organizmu. Aby pełnić tę funkcję, limfocyty T muszą być w stanie rozpoznać własne antygeny MHC. Jednocześnie komórki T nie powinny rozpoznawać własnych autoantygenów organizmu związanych z własnymi antygenami MHC.

Pod tym względem w grasicy młode tymocyty podlegają selekcji („selekcji”), której TcR odpowiada powyższym warunkom.

Istota selekcji pozytywnej i negatywnej jest następująca (patrz rysunek na stronie tytułowej): Pozytywna selekcja. Limfocyty T, których TCR ma zdolność rozpoznawania HLA

(cząsteczki MHC) komórek zrębowych grasicy przeżywają, a jeśli nie, umierają w wyniku apoptozy. Selekcja pozytywna – wsparcie selektywnego przetrwania. Zatem przeżywają tylko limfocyty zdolne do rozpoznania własnego HLA! I ta zdolność jest później ważna w funkcjonowaniu limfocytów T.

Ponadto autoreaktywne limfocyty (limfocyty posiadające TCR w stosunku do determinant antygenowych własnych tkanek) umierają w grasicy w wyniku apoptozy. Ważne jest, aby w kontakcie z komórkami nabłonkowymi grasicy limfocyty T reagujące na „ja” uległy zniszczeniu poprzez wywołanie apoptozy ( programowana śmierć komórki po aktywacji przez receptor CD95 – Fas). Ten selekcja negatywna. W końcu,

Autoreaktywne klony komórkowe znikają i pojawia się tolerancja (brak reakcji) na „swoje”. W grasicy około 95–97% limfocytów umiera w wyniku procesu selekcji.

Następnie jedna z cząsteczek CD4 lub CD8 zostaje utracona, a komórki stają się dojrzałe. Komórki, które zachowują CD4, są komórkami pomocniczymi T (Th), a ich TCR rozpoznaje HLA klasy II, a komórki, które zachowują CD8, są cytotoksyczne Limfocyty T i ich TCR mają zdolność rozpoznawania HLA klasy I. Z grasicy

		Zakład Immunologii Klinicznej z Alergologią
migrują do obwodowych narządów limfatycznych, gdzie zasiedlają głównie strefy T-zależne. W
szczególnie w węzłach chłonnych - parakortykalnych. Dojrzałe limfocyty krążą ponownie.
Zatem ZALEŻNY OD ANTYGENU				różnicowanie		Limfocyty T	zawiera
proliferacja, nabywanie specyficznych markerów przez limfocyty T i tworzenie zróżnicowanych,
dojrzałe subpopulacje zdolne do realizacji danej cechy							subpopulacje
(wprowadzenie	odporny	odpowiedź, jego	rozporządzenie,	cytotoksyczność).		proces	niezależny od antygenu

różnicowaniu powstają limfocyty, które są genetycznie zdeterminowane do interakcji z określonym antygenem i odpowiedzi immunologicznej na ten antygen.

ZALEŻNE OD ANTYGENU RÓŻNICOWANIE LIMFOCYTÓW T Zależne od antygenu różnicowanie zachodzi w narządach obwodowych układu odpornościowego, jeśli T-

w stosunku do antygenu i innych komórek immunokompetentnych, które oddziałują z antygenem. Co więcej, limfocyty pomocnicze i cytotoksyczne rozpoznają antygen w różny sposób.

POMOCY (komórki CD4) rozpoznają ANTYGEN w kompleksie z HLA KLASY II, KILLERS (komórki CD8) - w kompleksie antygenu z HLA KLASY 1. Rozpoznawanie antygenu Pomocnik T

jest centralnym procesem zarówno w humoralnej odpowiedzi immunologicznej, jak i we wzmacnianiu komórkowej formy odpowiedzi immunologicznej.

Swoistymi MARKERAMI dla CAŁEJ POPULACJI LIMFOCYTÓW T są antygeny CD 3 obecne na zewnętrznej błonie tych komórek (wcześniej stosowano marker CD 2 - receptor dla erytrocytów owiec, co nie jest do końca prawidłowe. Dla parametrów CD antygeny, patrz dodatek.)

Marker limfocytów T to struktura charakterystyczna tylko dla limfocytów T (wszystkich subpopulacji limfocytów T) – CD3.

		CD4+	Na pomocnikach T
limfocyty
CD3+
		CD8+	O T-cytotoksyczności

Receptory dla antygenów IL-2, HLA-DR pojawiają się na aktywowanych limfocytach T, receptor transferyny (CD71).

U zdrowych ludzi limfocyty T (CD3+) stanowią 60–80% wszystkich limfocytów we krwi.

SUPOPOPULACJE LIMFOCYTÓW:

Limfocyty Th. Około połowa krążących limfocytów T ma na swojej powierzchni antygen CD4. Te limfocyty T pełnią funkcję POMOCNIKÓW, to znaczy pomocników (od angielskiego do

pomóc - pomóc), „angażując” populację limfocytów B w proces produkcji przeciwciał i efektorów T w realizację odporności komórkowej. Komórki pomocnicze T pośredniczą w swojej funkcji przez czynniki humoralne, cytokiny, które są syntetyzowane przez te limfocyty w odpowiedzi na bodziec antygenowy.

Niedostateczna funkcja pomocnicza limfocytów T, obserwowana w zespole nabytego niedoboru odporności (AIDS; jednym z najważniejszych celów HIV są pomocnicze limfocyty T), prowadzi do „braku reakcji” organizmu na stymulację antygenową, co ostatecznie przyczynia się do utrzymywanie się mikroorganizmów w organizmie człowieka, rozwój nowotworów złośliwych i powoduje śmierć.

Komórki pomocnicze T (Th) – stymulują proliferację i różnicowanie limfocytów T, T i B poprzez uwalnianie cytokin. W zależności od tego, jakie cytokiny wytwarzają (w zależności od profilu cytokin), wyróżnia się:

Th1 (komórki pomocnicze T pierwszego typu), wydzielają IL-2 i γ-interferon i ostatecznie zapewniają reakcje odpornościowe limfocytów T - stymulują odpowiedź immunologiczną przeciwko bakteriom wewnątrzkomórkowym, mają działanie przeciwwirusowe, przeciwnowotworowe, odporność po przeszczepieniu.

Th2 (komórki pomocnicze T drugiego typu), wydzielają IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13 i stymulują syntezę przeciwciał, promują rozwój humoralnej odpowiedzi immunologicznej przeciwko bakteriom zewnątrzkomórkowym , ich toksyny, a także powstawanie przeciwciał IgE

Istnieje antagonizm między Th1 i Th2: gdy aktywność jednego wzrasta, funkcja drugiego zostaje zahamowana. W rezultacie limfocyty T (zabójcy Th1Ř T) lub komórki B (limfocyty B Th2ŘŘ

przeciwciała) odporność, która w dużej mierze zależy od rodzaju antygenu. Zatem komórki pomocnicze T pełnią pomocniczą funkcję regulacyjną w interakcji komórek immunokompetentnych, mającą na celu rozwinięcie fazy efektorowej odpowiedzi immunologicznej. To Th decyduje o tym, czy dominować będzie humoralna czy komórkowa odpowiedź immunologiczna.

Forma odpowiedzi immunologicznej zależy od typu Th (od cytokin wytwarzanych przez limfocyty Th)

Tk.

Wśród subpopulacji limfocytów T wyróżnia się komórki efektorowe. Z uwagi na to, że te

efektor

zdolny

konkretnie

zniszczyć

nazywane są ich komórki docelowe

CYTOTOKSYCZNE T-LIMFCYTY lub T-KILLERS - zabójcy (od angielskiego zabijać - zabijać).

T-killer jest jedną z głównych komórek efektorowych odporności komórkowej, która wraz z

inne komórki są w stanie wykonać liza komórek docelowych y. Rola T-zabójców jest bardzo ważna we wdrażaniu

odporność transplantacyjna, rozwój chorób autoimmunologicznych, ochrona przeciwnowotworowa. Tk-

limfocyty (CD8+

komórki) stanowią około 20–25% liczby krążących limfocytów T (bezwzględnej

ilość -

500 – 1200 w 1 mm3 (µl)), oni

niosą antygen markerowy CD8. Służy makrocząsteczka CD8

koreceptor dla antygenów głównego kompleksu zgodności tkankowej klasy I (MHC-1).

Komórki cytotoksyczne aktywowane antygenem – T-

komórki zabójcze wiążą się z antygenami

powierzchnie komórek,

wydzielanie białka na rforynę,

zniszczyć

Jednocześnie T-zabójca

pozostaje żywotny i może zniszczyć następną komórkę.

Działanie perforyny jest podobne do MAC układu dopełniacza. Białko

tworzy się perforyna, polimeryzująca w błonie komórki docelowej

pory stanowią kanały, powodując w ten sposób jego lizę osmotyczną. Z wyjątkiem

cytotoksyczne

Limfocyt T

uformował się czas

perforyna w komórce docelowej, uwalnia granzymy (enzymy –

seryna

proteazy),

początek

program

apoptoza.

Zainstalowany

również to

jego działanie cytotoksyczne T-

limfocyty mogą realizować poprzez ekspresję FasL i wraz z nią

pomagają indukować apoptozę docelową za pośrednictwem Fas.

„Naiwne” limfocyty T to te limfocyty, które nie zetknęły się z antygenem i stanowią je

część całkowitej puli krążących limfocytów T.

immunologiczny

pamięć-

długowieczny

limfocyty, potomkowie

napotykają antygeny i zatrzymują dla nich receptory. Immunologiczne limfocyty T

PAMIĘĆ – po pobudzeniu antygenem są w stanie zachować informację o nim nawet przez 10-15 lat i przekazać ją

inne komórki. Komórki te są chronione przed apoptozą. Dzięki obecności w organizmie limfocytów T pamięci

przyspieszona odpowiedź immunologiczna typu wtórnego jest zapewniona po wielokrotnym narażeniu na ten antygen

w ciało.

Wyjaśnia to przyspieszoną dynamikę wtórnej odpowiedzi odpornościowej przez marker T

Limfocyty pamięci są antygenem błonowym CD45RO.

błędnie wyizolowali subpopulację supresorów T, za które uznano, że są odpowiedzialne

supresja immunologiczna

niezależna subpopulacja

czas teraźniejszy

pokazano, to

tłumiki

ucisk, ucisk

odporny

decydujący

oznaczający

stymulowane limfocyty, a także cytokiny - transformujący czynnik wzrostu β.

Około 10% limfocytów nie ma ani markerów T, ani B; nie są to limfocyty T ani B i wcześniej nazywano je limfocytami ZERO LIMFOCYTÓW. Ta zróżnicowana populacja limfocytów, w zależności od ich cech morfofunkcjonalnych, dzieli się na:

NATURALNE KOMÓRKI ZABÓJCÓW(w skrócie EKK=EK=komórki NK) i

KOMÓRKI ZABÓJCZE(Komórki K).

funkcja

Jest

umiejętność

liza

komórki docelowe

wstępne uczulenie, które jest niezbędne dla limfocytów T zabójczych. Morfologicznie są to limfocyty

duże rozmiary z ziarnistą cytoplazmą.

Zróżnicowany

poprzednik

limfocyty (LSC).

Naturalne komórki zabójców ich rozwój nie zależy od grasicy. Ekspresuj samodzielnie

powierzchnie

receptory dla

interferon-γ

i interleukina-2 (IL

Funkcjonalnie

oni są

cytotoksyczne komórki zabójcze, ale komórki NK nie mają receptorów rozpoznających antygen, które są koniecznie

obecne na limfocytach T zabójczych. Komórki NK są indukowane przez przeciwciała IgG specyficzne dla komórki docelowej.

antygeny błonowe komórki docelowej. Przeciwciała początkowo wiążą się z antygenem na komórce, a następnie z antygenem

Receptor IgG Fc

NK przyłącza się do kompleksu komórek docelowych AT-AG.

Komórki NK w organizmie są

ochrona przed

rozwój

nowotwory, wirusy

Główne

Zakład Immunologii Klinicznej z Alergologią

markerami są CD16 i CD56. (FcγRIII zgodnie z nomenklaturą CD

CD16).Zniszczenie komórki docelowej

realizuje z

za pomocą perforyny. Zawartość NK (komórki CD16+) u osób zdrowych

osób – 8 – 22%.

Komórki K to heterogenna grupa komórek, które przenoszą swoje komórki

powierzchnie

receptory dla fragmentu Fc

Ig G i są w stanie

zależne od przeciwciał

komórkowy

cytotoksyczność. DO

odnieść się

monocyty,

neutrofile,

makrofagi,

eozynofile,

Niektóre

limfocyty. Zależne od przeciwciał

za pośrednictwem komórek

cytotoksyczność (ADCC)

Jest

unikalne odzwierciedlenie związku między humorem i komórką

spinki do mankietów

odporny

systemy. Przeciwciała

dokonywać

„przewodnikami” komórek efektorowych

niosące komórki docelowe

obce antygeny.

limfocyty (T-,

Komórki K) mają

zdolność do

migracja

recykling (patrz

metodologiczny

zalecenie na pierwszą lekcję), co zapewnia powszechną kontrolę nad proliferacją komórek własnego ciała, a wraz z przenikaniem obcego antygenu, uogólnioną odpowiedzią immunologiczną i zachowaniem pamięci immunologicznej antygenu.

MARKERY LIMFOCYTOWE

Perforyna

Granzymy

Oznaczanie względnej i bezwzględnej liczby limfocytów T w teście

spontaniczne tworzenie rozet z erytrocytami owiec.

Zasada metody: Limfocyty T zależne od grasicy posiadają receptory dla erytrocytów owiec (antygen CD2), które pełnią zatem rolę markera ich rozpoznawania.

POSTĘP PRACY: Do probówki z heparyną dodaje się krew pobraną z żyły. Etap I. Heparynizowaną krew rozcieńcza się buforem fosforanowym o pH 7,4 w stosunku 1:2. Tę mieszaninę ostrożnie nakłada się warstwami na roztwórficoll-verographinao gęstości 1,077 g/ml. Probówkę wiruje się przez 30 minut. Po odwirowaniu warstwę limfocytów ostrożnie usuwa się pipetą z interfazy i przemywa dwukrotnie roztworem buforowym. Po ostatnim przemyciu do osadu dodać 0,3-0,5 ml pożywki 199. W opracowaniu metodologicznym nr 1 wskazano metody izolacji limfocytów, a w szczególności metodę separacji komórek w gradiencie gęstości. To jest pierwszy etap.

Etap II. Aby wywołać reakcję rozetową, należy pobrać 0,1 ml zawiesiny limfocytów i dodać 0,1 ml zawiesiny erytrocytów owczych. (Patrz tabela na mównicy). Równe objętości zawiesiny miesza się i odwirowuje przez 5 minut. i włożyć do lodówki na 30 minut. Następnie do probówki dodaje się 50 µl 3% aldehydu glutarowego i pozostawia na stole na 20 minut. Następnie dodać 2 ml wody destylowanej. i 2 ml roztworu soli.

Zawiesić ponownie. Wirować przez 5 minut, następnie zawiesinę możliwie dokładnie odsączyć i delikatnie ponownie zawiesić. Następnie wykonuje się rozmaz (utrwalanie, barwienie według Romanovsky-Giemsa) i liczy się liczbę rozet. Przy obliczaniu ROC uwzględnia się limfocyty, które przylegają do 3 lub więcej czerwonych krwinek. Zwykle powinno powstać 40-90% rozet. (Komórki tworzące rozetę ROC).

Szkic E-ROK

ZNACZENIE KLINICZNE. Badanie limfocytów T jest bezwzględnie wskazane w przypadku pierwotnych i wtórnych niedoborów odporności. Badania limfocytów mają wartość diagnostyczną w

procesy limfoproliferacyjne,			reumatoidalny	zapalenie stawów, u niektórych	choroby nerek, z
amyloidozę i wiele innych chorób.
Należy jednak pamiętać, że może również powstać pewna liczba komórek, w szczególności komórek NK
rozety z czerwonymi krwinkami owiec (E-ROC) w związku z obecnością antygenu CD2 (patrz podstawowe informacje w
aplikacja). To determinuje ograniczona wartość metoda tworzenia rozety E, dzięki wykryciu nie-
	Limfocyty T.			tworzenie rozetek	przyznał się do tego, co lokalne

cytofluorometria, który jest obecnie rozpoznawany na całym świecie, a markerem wszystkich limfocytów T jest antygen CD3, obecny na limfocytach, które uległy różnicowaniu w grasicy.

CYTOFLUOROMETR PRZEPŁYWOWY pozwala na oznaczenie przeciwciał monoklonalnych,

Zasada cytofluorometrii przepływowej. Interesująca komórka, wyznakowana fluorescencyjnymi przeciwciałami monoklonalnymi, przechodzi przez przepływ płynu w kapilarze. Przepływ płynu jest przerywany wiązką lasera i

urządzenie rejestruje sygnał odbity od powierzchni komórki zgodnie z zasadą tak/nie (jest komórka lub) Nie. Obecność na komórce znakowanych fluorochromem przeciwciał monoklonalnych związanych z jej antygenami różnicującymi wskazuje, że komórka należy do pewna subpopulacja.

Oznaczenie komórek CD3 (limfocyty T), CD19 (limfocyty B) we krwi ma wartość diagnostyczną w przypadku pierwotnych i wtórnych niedoborów odporności. Ważna rola

	Pisanie na płycie CD
	choroby limfoproliferacyjne (białaczka limfatyczna),
	reakcje odrzucenia przeszczepu i GVHD (reakcje
	przeszczep przeciwko gospodarzowi), wirusowe i bakteryjne
	infekcje.
	Oznaczanie CD4-
	limfocyty					niedobory odporności, np
	humorystyczny,				za pośrednictwem komórek
	odporność. Niezbędny			podkreślić,		jaka ilość

Komórki CD4 są decydującym wskaźnikiem pozwalającym przewidzieć rozwój AIDS u osób zakażonych wirusem HIV. W przypadku zakażenia wirusem HIV ważne jest określenie wskaźnika CD4/CD8 (stosunku liczby komórek pomocniczych do efektorów), tzw. wskaźnika regulacji. Zatem spadek CD4 do 500/μl i

poniżej uważa się za kliniczny standard rozpoczęcia terapii przeciwretrowirusowej, a zmniejszenie ich liczby do 200/μl i poniżej służy do rozpoczęcia terapii zapobiegawczej w przypadku zakażeń oportunistycznych.

8 Zakład Immunologii Klinicznej z Alergologią Zalecenia edukacyjno-metodologiczne dotyczące immunologii ogólnej. Temat 4.

Aplikacja.

SKUPIENIA RÓŻNICOWANIA (antygeny CD) LEUKOCYTÓW

W procesie różnicowania na błonach komórek układu odpornościowego pojawiają się makrocząsteczki – markery odpowiadające określonemu etapowi rozwoju i zróżnicowania morfologicznego komórki. Nazywa się je antygenami CD (z angielskiego - klastry różnicowania - klastry różnicowania). Obecnie

Znanych było wówczas ponad 200 z nich.

Wykorzystując powierzchniowe markery antygenowe (antygeny różnicowania, CD) można określić kierunek rozwoju, stopień dojrzałości komórek, populację i subpopulację komórek, etap ich różnicowania i aktywacji. Antygeny różnicujące służą zatem jako specyficzne markery. W szczególności dzięki takim antygenom różnicowane są subpopulacje limfocytów i innych komórek immunokompetentnych.

(Przedstawiamy parametry antygenów CD. Jest to informacja podstawowa, która będzie pomocna podczas czytania literatury z zakresu immunologii, immunopatologii, hematologii. Oznaczono istotne antygeny CD. Spotkałeś je na poprzednich zajęciach, zostaną omówione w teraźniejszości i przyszłości te.)

CD1 - a, b, c; jest przenoszony przez tymocyty korowe, subpopulacje komórek B, komórki Langerhansa, jest powszechnym antygenem tymocytów, białkiem podobnym do antygenów klasy zgodności tkankowej 1, MW 49 KD.

· v CD2 – marker wszystkich limfocytów T, posiada także większość (~75%) komórek NK, znane są trzy epitopy cząsteczki,

z których jeden wiąże czerwone krwinki ram a (receptor E); jest cząsteczką adhezyjną wiążącą się z CD58 (LFA III), LFA IV, przekazuje sygnały przezbłonowe po aktywacji limfocytów T; Płyta MM50. Antygen ten można wykryć poprzez reakcję tworzenia rozety. Reakcja Tworzenie gniazd elektrycznychjest wskaźnikiem kwoty komórki (T-1, NK, LAK) niosące klaster CD2. Zatem antygen CD2 nie jest absolutnym markerem limfocytów T, ponieważ występuje także na innych komórkach.

v CD3 – noszone przez wszystkich dojrzałych Limfocyty T, zapewniają transmisję sygnału z receptora specyficznego dla antygenu komórek T (TCR) do cytoplazmy, składają się z pięciu łańcuchów polipeptydowych (γ, δ, ε, ι, ξ).

MM – 25 CD; Przeciwciała przeciwko niemu wzmacniają lub hamują funkcję komórek T. Ważny znacznik T-

limfocyty.

· v CD4 – marker komórek pomocniczych T, receptor ludzkiego wirusa niedoboru odporności (HIV), dostępny na stronie

niektóre monocyty, komórki glejowe; glikoproteina transbłonowa, uczestniczy w rozpoznawaniu antygenów związanych z cząsteczkami II klasy zgodności tkankowej (HLA-DR), MW 59 KD. (Receptor dla antygenów MHC klasy II).

· v CD5 – posiadają dojrzałe i niedojrzałe limfocyty T, glikoproteinę transbłonową, należącą do rodziny receptorów

– „zmiatacze”, podobnie jak CD6, są ligandami dla CD72 na limfocytach B i biorą udział w proliferacji limfocytów T. CD5 zawiera również limfocyty B-1 – subpopulację komórek B, z dominującą lokalizacją w jamie brzusznej i opłucnej. Płyta MM67.

· CD6 – przenoszony przez dojrzałe komórki T i częściowo komórki B, wszystkie komórki T i tymocyty, niektóre komórki B; dołączony

V rodzina „śmieciarzy”, MM 120 CD.

· CD7 – posiadają limfocyty T, NK (receptor Fc μ IgM); Płyta MM40.

v CD8 – marker cytotoksyczny Limfocyty T mają pewną część struktury adhezyjnej NK

V rozpoznawanie antygenów z udziałem cząsteczek klasy zgodności tkankowej 1, składa się z dwóchŁańcuchy SS, MM 32 CD. (Coreceptor dla kompleksu AG + MHC klasy I).

· CD9 – przenoszony przez monocyty, płytki krwi, granulocyty, komórki B ośrodków pęcherzykowych, eozynofile, bazofile, śródbłonek, MW 24 CD.

· CD10- posiadają niedojrzałe limfocyty B (GALLA – antygen komórki białaczkowej), część tymocytów, granulocyty; endopeptydaza, MW 100 KD.

· CD11a – przenoszony przez wszystkie leukocyty, cząsteczka cytoadhezyjna, łańcuch αL integryny LFA-1, związany z CD18;

receptor dla ligandów: cząsteczki CD15 (ICAM-1), CD102 (ICAM-2) i CD50 (ICAM-3); nieobecny u pacjentów z zespołem LAD-1 (zespół niedoboru cząsteczki adhezyjnej), MM 180 CD.

· v CD11b – (CR3 - lub c3bi-receptor) – przenoszony przez monocyty, granulocyty, łańcuch integrynowy NK, αM, związany z cząsteczką CD18; receptor dla ligandów: CD54 (ICAM-1), składnika dopełniacza C3bi (receptor CR3) i fibrynogenu; nieobecny w zespole LAD-1: MM 165 CD.

· v CD11c (receptor CR4) – posiadają monocyty, granulocyty, NK, aktywowane limfocyty T i B, αX

łańcuch integryny (związany z CD18, jest czwartym typem receptora (CR4) dla składników dopełniacza C3bi, C3dg; jego ligandami są CD54 (ICAM-1), fibrynogen; MW 95/150 kDa.

· CD13 – posiadają wszystkie komórki mieloidalne, dendrytyczne i śródbłonkowe, aminopeptydazę N, receptor dla koronaawirusa, MW 150 CD.

· v CD14 – posiadają monocyty/makrofagi, granulocyty, receptor dla kompleksów LPS z LPS-

białko wiążące i dla cząsteczek PI płytek krwi; nieobecny u pacjentów z napadową nocą t hemoglobinuria(PNH), przeciwciała przeciwko niemu mogą powodować wybuch oksydacyjny w monocytach, MW 55 KD.

· CD15 – (Lewis) – zawiera granulocyty, ulega słabej ekspresji w monocytach, niektóre przeciwciała przeciwko niemu hamują fagocytozę.

· CD15 – (sialil-Lewis) – posiadają komórki szpikowe, ligand dla CD62P (selektyna P), CD62E (selektyna E), CD62L (selektyna L), nieobecny u pacjentów z LAD-2.

· v CD16 – przenoszony przez NK, neutrofile, niektóre monocyty (receptor Fc o niskim powinowactwie do IgG), integralne białko błonowe (Fcγ RIIIA) na NK i makrofagach, forma wiążąca PI (Fcγ RIIIB) na neutrofilach, nieobecna u pacjentów z PNH – napadowa nocna hemoglobinuria.

· CD18 – posiadają większość komórek limfoidalnych i szpikowych, cząsteczkę adhezyjną, łańcuch β2 integryny LFA, związany z αCD11 a, b, c, nieobecny w zespole LAD-1, MM 95 CD.

· v CD19 – (B4) – posiadają komórki pre-B i B, część ich kompleksu receptorowego bierze udział w ich aktywacji (sygnał transdukcyjny, związany z CD21 (CR2); MW 95 CD. Ważny marker limfocytów B.

· v CD20 – (B1) – przenoszony przez wszystkie komórki B i komórki dendrytyczne w pęcherzykach, uczestniczy w aktywacji poprzez kanały wapniowe komórek, MW 35 kDa.

· v CD21 – (receptor CR2, B2) – posiadają subpopulacje limfocytów B, część tymocytów, limfocytów T, receptor dla składnika C3d dopełniacza oraz dla wirusa Epsteina-Barra, bierze udział w regulacji aktywacji dopełniacza (RCA) wraz z CD35, CD46, CD55 oraz w aktywacji limfocytów B.

Pełniejsze informacje na temat skupień zróżnicowania można znaleźć w podręcznikach 1 i 2 bibliografii do samodzielnego studiowania na s. 16.

Wskaźniki zawartości limfocytów u osób zdrowych

Populacje		T-imfoci-	Komórki pomocnicze T	Limfo-T-cytotok-B-		Naturalny
limfocyty i				syczalny		żadnych zabójców
Odsetek
Absolutny
ilość w 1 µl

Wskaźnik regulacji CD4/CD8 wynosi 1,2-2,5. * µl = 1 mm3.

MATERIAŁY EDUKACYJNE I METODOLOGICZNE ZAJĘĆ

Motywacja

Wiedza na temat odporności komórkowej jest ważna, ponieważ dokładnie w jaki sposób zapewnia ona ochronę przed infekcjami wirusowymi, przed szeregiem wewnątrzkomórkowych infekcji bakteryjnych i odgrywa wiodącą rolę w odrzuceniu

Cel lekcji

1. Uczeń musi wiedzieć:

A. Rozwój limfocytów, charakterystyka głównych skupisk różnicowania. B. Zależny od grasicy szlak rozwoju limfocytów, receptory limfocytów T.

B. Subpopulacje limfocytów T, ich główne cechy, markery i receptory.

D. Apoptoza komórek układu odpornościowego i jej znaczenie w funkcjonowaniu komórek układu odpornościowego. D. Rodzaje cytotoksyczności komórkowej. Metody oceny odporności komórkowej.

10 Zakład Immunologii Klinicznej z Alergologią Zalecenia dydaktyczne i metodyczne z zakresu immunologii ogólnej. Temat 4.

2. Uczeń musi potrafić:

Zastosuj zdobytą wiedzę w praktyce klinicznej; ocenić stan odporności komórkowej.

Aby opanować temat, musisz pamiętać i powtarzać:

1. Histologia pokazuje rozwój limfocytów.

2. W mikrobiologii - rola limfocytów w odporności przeciwinfekcyjnej.

Pytania do samodzielnej nauki na temat lekcji:

1. Limfocyt jest centralną postacią układu odpornościowego. Współczesne pomysły na rozwój limfocytów. Ontogeneza i filogeneza układu odpornościowego.

2. Charakterystyka głównych skupień różnicowania (CD), znaczenie dla analizy etapu rozwoju komórek układu odpornościowego, ocena poszczególnych etapów funkcjonowania.

3. Koncepcja pluripotencjalnej macierzystej (przodkowej) komórki krwiotwórczej. Pochodzenie komórki macierzystej, jej charakterystyka, markery. Czynniki regulujące rozwój komórek macierzystych (mikrośrodowisko, cytokiny). Krążenie komórek macierzystych.

		kość			odporny	Koncepcja systemu		rodowy
prekursory limfocytów T i B, ich charakterystyka, identyfikacja. Ścieżka rozwoju zależna od grasicy
limfocyty (komórki T). Grasica jest centralnym narządem w rozwoju limfocytów T. Ontogeneza i filogeneza grasicy.
Główne etapy rozwoju limfocytów T w grasicy, znaczenie elementów zrębowych, komórek „niani”, nabłonka
komórki, ciała Hassalla. Tymektomia, zwierzęta bezgrasiczne.
	Komórka T	receptory,	Struktura,	rolę w rozwoju limfocytów T. Pozytywny i negatywny
wybór	w grasicy. Różnicowanie pozatymiczne					Limfocyty T. Funkcja endokrynologiczna

czynniki humoralne grasicy. Migracja i osadzanie się limfocytów T w organizmie. Strefy zależne od grasicy obwodowych części układu odpornościowego (śledziona, węzły chłonne itp.).

6. Pojęcie subpopulacji T- i Limfocyty B. Główna charakterystyka, markery i receptory, rola w procesach odpornościowych. Subpopulacje limfocytów T CD3+ i CD4+, charakterystyka, rozwój, rola w procesach odpornościowych. Charakter i właściwości pomocniczych T typów 1 (Th1) i 2 (Th2). Podzbiory limfocytów T CD8+.

7. Programowana śmierć (apoptoza) komórek układu odpornościowego, mechanizmy, czynniki ją stymulujące i hamujące. Różnica od martwicy. Aktywacja komórek i apoptoza. Znaczenie apoptozy w rozwoju i funkcjonowaniu komórek układu odpornościowego.

8. Komórki NK (komórki NK) - limfocyty wielkoziarniste, charakterystyka, pochodzenie, drogi różnicowania, rola cytokin, markerów i receptorów.

9. Receptory i markery komórek układu odpornościowego. Receptory antygenowo-swoiste i nieswoiste dla antygenu limfocytów T i B, budowa fizykochemiczna, metody identyfikacji. Immunoglobuliny i inne receptory komórek B, budowa. Receptor komórek T dla antygenu. Łańcuchy alfa/beta i gamma/delta kompleksu receptora komórek T. Pojęcie koreceptorów. Receptory fragmentu Fc immunoglobuliny, dopełniacz, identyfikacja, rola w reakcjach immunologicznych. Receptory hormonów, cytokin. Zastosowanie przeciwciał monoklonalnych do identyfikacji limfocytów ludzkich i zwierzęcych. Metody identyfikacji markerów i receptorów. Immunofenotypowanie, zasada. Zjawisko powstawania rozet w immunologii.

LITERATURA DO SAMODZIELNEGO PRZYGOTOWANIA

1. Khaitov R.M. Immunologia: podręcznik dla studentów medycyny. - M.: GEOTAR-Media, 2006. – 320 s.

- [Z. 84 – 94].

2. Khaitov R.M., Ignatieva G.A., Sidorovich I.G. Immunologia. Norma i patologia. Podręcznik. – wyd. 3, M.,

Medycyna, 2010. – 752 s. - [Z. 215 - 240].

3. J. Playfair. Immunologia wzrokowa. M., 1999.

4. ROZWÓJ METODOLOGICZNY. 5. WYKŁADY.

LITERATURA DODATKOWA

1. Royt A., Brostoff J., Meil ​​D. IMMUNOLOGIA. M., Mir. 2000.

2. Yarilin AA Podstawy immunologii. M., 1999, s. 13. 31-54, 75-88.

3. Strona główna Immunology Link – http://www.ImmunologyLink.com

4. http://immunology.ru

CZY MOŻESZ ODPOWIEDZIEĆ?

(Wpisz w domu. Samokontrola pozwoli Ci zidentyfikować trudne pytania do dyskusji. Na zajęciach sprawdzisz poprawność odpowiedzi, uzupełnisz je. Spróbuj sam znaleźć odpowiedzi i

pokaż, że możesz to zrobić.)

(25 głosów)

Różnicowanie i interakcja komórek układu odpornościowego ze sobą, a także z komórkami innych układów organizmu, odbywa się za pomocą cząsteczek regulatorowych - cytokin. Cytokiny wydzielane głównie przez komórki układu odpornościowego nazywane są interleukinami (IL) – czynnikami interakcji międzyleukocytami. Wszystkie są glikoproteinami o masie cząsteczkowej (MW) od 15 do 60 KDa. Są uwalniane przez leukocyty, gdy są stymulowane przez produkty mikrobiologiczne i inne antygeny.

IL-1 wydzielana jest przez makrofagi, jest pirogenem (powoduje wzrost temperatury), pobudza i aktywuje komórki macierzyste, limfocyty T i B, neutrofile, bierze udział w rozwoju stanów zapalnych. Występuje w dwóch postaciach - IL-1a i IL-1b.

IL-2 jest wydzielana przez komórki pomocnicze T i stymuluje proliferację i różnicowanie limfocytów T i B, komórek NK i monocytów. Wiąże się z receptorem IL-2, składającym się z 2 podjednostek: a-55 kDa o niskim powinowactwie, który pojawia się po aktywacji komórki i po uwolnieniu z niego staje się rozpuszczalną formą receptora IL-2; Podjednostka b o masie cząsteczkowej 70 kDa, stabilny łańcuch receptora, jest stale obecna. Pełny receptor dla IL-2 pojawia się po aktywacji limfocytów T i B.

IL-3 jest głównym czynnikiem krwiotwórczym, stymuluje proliferację i różnicowanie wczesnych prekursorów krwiotwórczych, makrofagów i fagocytozy.

IL-4 - czynnik wzrostu limfocytów B, stymuluje ich proliferację na wczesnym etapie różnicowania, syntezę przeciwciał IgE, IgG4; wydzielany przez limfocyty T typu 2 i bazofile, indukuje transformację „naiwnych” limfocytów T CD4 w Tx typu 2.

IL-5 stymuluje dojrzewanie eozynofili, bazofilów oraz syntezę immunoglobulin przez limfocyty B i jest wytwarzana przez limfocyty T pod wpływem antygenów.

IL-6 jest wydzielana przez limfocyty T i makrofagi, stymuluje dojrzewanie limfocytów B do komórek plazmatycznych, limfocytów T i hematopoezę oraz hamuje proliferację monocytów.

IL-7 - limfopoetyna-1, aktywuje proliferację prekursorów limfocytów i różnicowanie limfocytów T na komórki T pomocnicze i limfocyty T supresorowe, stymulując dojrzałe limfocyty T i monocyty, i jest tworzona przez komórki zrębowe, keratocyty, hepatocyty i komórki nerek.

IL-8 jest regulatorem chemotaksji neutrofilów i komórek T; wydzielany przez limfocyty T, monocyty, śródbłonek. Aktywuje neutrofile, powoduje ich ukierunkowaną migrację, adhezję, uwalnianie enzymów i reaktywnych form tlenu, stymuluje chemotaksję limfocytów T, degranulację bazofilów, adhezję makrofagów, angiogenezę.

IL-9 jest czynnikiem wzrostu limfocytów T i bazofilów, powstającym w wyniku stymulacji komórek T przez antygeny i mitogeny.

IL-10 - wydzielana przez komórki T i B, makrofagi, keratocyty, stymuluje monocyty i NK, komórki tuczne, hamuje powstawanie IL-1, IL-2, IL-6, TNF, wzmaga syntezę IgA, hamuje aktywację typu 1 tys.

IL-11 – wytwarzana przez komórki zrębowe fibroblastów szpiku kostnego, działa podobnie do IL-6, ale receptory na komórkach są inne, stymuluje hematopoezę, prekursory makrofagów i tworzenie kolonii przez megakariocyty.

IL-12, źródło - limfocyty B i monocyty-makrofagi, powoduje proliferację aktywowanych limfocytów T i komórek NK, nasila działanie IL-2, stymuluje komórki pomocnicze T typu 1 i produkcję interferonu-α, hamuje syntezę IgE.

IL-13 - wydzielana przez limfocyty T, indukuje różnicowanie komórek B, ekspresję CD23, wydzielanie IgM, IgE, IgG4, hamuje uwalnianie IL-1, TNF przez makrofagi.

IL-15 - wydzielana przez makrofagi, aktywuje proliferację limfocytów T, pomocnika T typu 1, ich różnicowanie w komórki zabójcze, aktywuje NK.

IL-16 jest kationowym homotetramerem, składa się ze 130 aminokwasów, masa cząsteczkowa 14 KDa, jest ligandem, czynnikiem chemotaktycznym i aktywującym limfocyty T CD4+, eozynofile CD4+ i monocyty CD4+, stymuluje ich migrację i ekspresję receptorów IL2 (CD25) na limfocytach . Uwalniany jest pod wpływem antygenu przez limfocyty T CD8+ i CD4+, a także przez nabłonek oskrzeli i eozynofile pod wpływem histaminy. Występuje w płynie oskrzelowo-pęcherzykowym w atopowej astmie oskrzelowej oraz w chorobach, którym towarzyszy naciek tkanek przez limfocyty T CD4+.

GM-CSF jest czynnikiem stymulującym tworzenie kolonii granulocytów i monocytów, tworzonym przez limfocyty typu T i B, makrofagi i inne leukocyty, który wzmaga proliferację prekursorów granulocytów, makrofagów i ich funkcje.

TNF? - kacheksja, czynnik martwicy nowotworu, wydzielany przez makrofagi, limfocyty T i B, neutrofile, stymuluje stan zapalny, aktywuje i uszkadza komórki, powoduje gorączkę (pirogen).

TNF? (limfotoksyna) – wydzielana przez limfocyty T i B, mediator stanu zapalnego, uszkadza komórki.

Interferon?/? - wydzielają limfocyty, makrofagi, fibroblasty, niektóre komórki nabłonkowe, działa przeciwwirusowo i przeciwnowotworowo, stymuluje makrofagi i NK, moduluje ekspresję antygenów MHC klasy I.

Interferon? - wydziela komórki T i komórki NK, uczestniczy w regulacji odpowiedzi immunologicznej, wzmacnia działanie przeciwwirusowe i przeciwnowotworowe interferonów Cx/R.

Interferon? - wydzielają leukocyty po stymulacji, stanowią 10-15% wszystkich interferonów, działają przeciwwirusowo i przeciwnowotworowo, zmieniają ekspresję antygenów HLA klasy I; wiąże się z błonami komórkowymi iw połączeniu z interferonem? 2 z receptorami typu I.

W przypadku wszystkich IL komórki mają receptory, które je wiążą.

W procesie różnicowania na błonach komórek układu odpornościowego pojawiają się makrocząsteczki – markery odpowiadające określonemu etapowi rozwoju. Nazywa się je antygenami CD (z angielskiego - klastry różnicowania - klastry różnicowania). Obecnie znanych jest ponad 200 z nich.

CD1 - a, b, c; jest przenoszony przez tymocyty korowe, subpopulacje komórek B, komórki Langerhansa, jest powszechnym antygenem tymocytów, białkiem podobnym do antygenów I klasy zgodności tkankowej, MW 49 kDa.

CD2 jest markerem wszystkich limfocytów T, występuje także większość komórek NK, znane są trzy epitopy cząsteczki, z których jeden wiąże erytrocyty owcy; jest cząsteczką adhezyjną, wiąże się z CD58 (LFA3), LFA4, przekazuje sygnały przezbłonowe po aktywacji limfocytów T; MM 50 kDa.

CD3 - niesiony przez wszystkie dojrzałe limfocyty T, niedojrzały w cytoplazmie, zapewnia transmisję sygnału z receptora specyficznego dla antygenu limfocytów T (TCR) do cytoplazmy, składa się z pięciu łańcuchów polipeptydowych. MM - 25 kDa; Przeciwciała przeciwko niemu wzmacniają lub hamują funkcję komórek T.

CD4 jest markerem pomocniczym T, receptorem ludzkiego wirusa niedoboru odporności (HIV), obecnym na niektórych monocytach, plemnikach, komórkach glejowych, transbłonowej glikoproteinie, zaangażowanej w rozpoznawanie antygenów związanych z cząsteczkami II klasy zgodności tkankowej, MW 59 kDa.

CD5 - mają dojrzałe i niedojrzałe komórki T, autoreaktywne komórki B, glikoproteinę transbłonową, członek rodziny receptorów zmiatających, podobnie jak CD6, jest ligandem dla CD72 na komórkach B, bierze udział w proliferacji komórek T, MW 67 kDa.

CD6 – przenoszony przez dojrzałe limfocyty T i częściowo komórki B, posiadają wszystkie komórki T i tymocyty, niektóre komórki B; część rodziny „zmiataczy”, MM 120 kDa.

CD7 - mają limfocyty T, NK (receptor Fcy IgM); MM 40 kDa.

CD8 jest markerem supresorów T i limfocytów cytotoksycznych, część NK ma strukturę adhezyjną, bierze udział w rozpoznawaniu antygenu przy udziale cząsteczek zgodności tkankowej klasy I, składa się z dwóch łańcuchów S-S, MW 32 kDa.

CD9 - przenoszony przez monocyty, płytki krwi, granulocyty, komórki B ośrodków pęcherzykowych, eozynofile, bazofile, śródbłonek, MW 24 kDa.

CD10 - mają niedojrzałe komórki B (GALLA - antygen komórek białaczkowych), część tymocytów, granulocyty; endopeptydaza, masa cząsteczkowa 100 KDa.

CD11a - przenoszony przez wszystkie leukocyty, cząsteczka cytoadhezyjna, łańcuch ΔL integryny LFA-1, związany z CD18; receptor dla ligandów: cząsteczki CD15 (ICAM-1), CD102 (ICAM-2) i CD50 (ICAM-3); nieobecny u pacjentów z zespołem LAD-1 (zespół niedoboru cząsteczki adhezyjnej), MW 180 kDa.

CD11b (receptor CR3 lub c3bi) - przenoszony przez monocyty, granulocyty, NK; Łańcuch ΔM integryny, związany z cząsteczką CD18; receptor dla ligandów.

CD54 (ICAM-1), składnik C3bi dopełniacza (receptor CP3) i fibrynogen; nieobecny w zespole LAD-1; MM 165 kDa.

CD11c (receptor CR4) - zawiera monocyty, granulocyty, NK, aktywowane limfocyty T i B oraz łańcuch integryny X (związany z CD18, jest czwartym typem receptora (CR4) dla składników C3bi, C3dg dopełniacza; jego ligandy są CD54 (ICAM-1), fibrynogen, masa cząsteczkowa 95/150 kDa.

CD13 - posiadają wszystkie komórki mieloidalne, dendrytyczne i śródbłonkowe, aminopeptydazę N, receptor dla koronaawirusa, MM 150 kDa.

CD14 - mają monocyty-makrofagi, granulocyty, receptor dla kompleksów LPS z białkiem wiążącym LPS i dla cząsteczek PI płytek krwi; nieobecny u pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią (PNH), przeciwciała przeciwko niej mogą powodować wybuch oksydacyjny w monocytach, MW 55 kDa.

CD15 (Lewisx) - mają granulocyty, słabo wyrażają monocyty, niektóre przeciwciała przeciwko niemu hamują fagocytozę.

CD 15 (sialil-Lewisx) - posiadają komórki mieloidalne, ligand dla CD62P (selektyna P), CD62E (selektyna E), CD62L (selektyna L), nieobecne u pacjentów z LAD-2.

CD16 - przenoszony przez neutrofile, NK (monocyty słabo, receptor Fc o niskim powinowactwie do IgG, integralne białko błonowe (Fc? RIIIA) na NK i makrofagach, forma wiążąca PI (Fc? RIIIB) na neutrofilach, nieobecne u pacjentów z PNH .

CD18 - mają większość komórek limfoidalnych i szpikowych, cząsteczkę adhezyjną, łańcuch β2 integryny LFA, związany z łańcuchem α CD 11 a, b, c, nieobecny w zespole LAD-1, MW 95 kDa.

CD19 (B4) - posiadają komórki pre-B i B, będące częścią ich kompleksu receptorowego, biorą udział w ich aktywacji (sygnał transdukcyjny, związany z CD21 (CR2); MW 95 kDa.

CD20 (B1) - przenoszony przez wszystkie komórki B i komórki dendrytyczne w pęcherzykach, uczestniczy w aktywacji komórek poprzez kanały wapniowe, MW 35 kDa.

CD21 (receptor CR2, B2) - zawierają subpopulacje komórek B, niektórych tymocytów, limfocytów T, receptor dla składnika C3d dopełniacza i wirusa Epsteina-Barra, bierze udział w regulacji aktywacji dopełniacza (RCA) wraz z CD35 , CD46, CD55 oraz w aktywacji limfocytów B.

CD22 - obecna w cytoplazmie prekursorów limfocytów B i na błonie niektórych ich subpopulacji cząsteczka adhezyjna, należąca do rodziny siloadezyn, wzmaga aktywację limfocytów B indukowaną przez anty-Ig, MW 135 kDa.

CD23 (receptor FcγRII) jest glikoproteiną błonową, receptorem o niskim powinowactwie dla IgE; FcyIIA jest obecny w subpopulacji limfocytów B i komórek przewlekłej białaczki limfatycznej, a Fcs RIIB na monocytach, eozynofilach i innych komórkach B, przeciwreceptor dla CD21, MW 45-50 kDa.

CD25 - obecny na aktywowanych limfocytach T i B oraz makrofagach, łańcuch α receptora IL2 o niskim powinowactwie, uczestniczy w tworzeniu receptora o wysokim powinowactwie po połączeniu z łańcuchem β (CD 122) i/lub β- łańcuch; uwalniany z aktywowanych limfocytów, MW 55 kDa.

CD26 - dipetydylopeptydaza IV aktywowanych limfocytów T i B, makrofagi, glikoproteina transbłonowa, egzopeptydaza typu serynowego MM 120 kDa.

CD27 – niesiony przez dojrzałe i aktywowane limfocyty T, obecny w cytoplazmie subpopulacji limfocytów B, należy do rodziny czynników wzrostu nerwów (NGF) / czynnika martwicy nowotworu (TNF), receptora dla CD70.

CD28 - wyraża subpopulacje limfocytów T (komórki T supresorowe cytotoksyczne), cząsteczka należy do nadrodziny immunoglobulin, przeciwreceptora dla CD80, CD86 i B7-3, wzmaga proliferację limfocytów T, MW 90 kDa.

CD29 jest podjednostką integryny β1 na spoczynkowych i aktywowanych leukocytach, na limfocytach T CD45RO+, związaną z CD49 (VLA - łańcuchy β).

CD30 (Ki-1) - występuje w subpopulacjach aktywowanych limfocytów, komórek Reeda-Sternberga, antygen aktywacyjny typu TH1 i TH2, członek rodziny NGF/TNF.

CD32 (FcyRII) - mają monocyty, granulocyty, eozynofile, komórki B; Receptor Fc o średnim powinowactwie do IgG, masa cząsteczkowa 40 kDa.

CD34 - zawiera wszystkie prekursory układu krwiotwórczego i śródbłonek, marker komórek macierzystych i adhezynę.

CD35 (receptor CR1) – występuje na limfocytach B, monocytach, granulocytach, erytrocytach, niektórych limfocytach T, NK; jest receptorem dla składników dopełniacza C3b, C3s, C41 i iC3b, członkiem rodziny jego regulatorów, MW 160-250.

CD36 - mają płytki krwi, monocyty, prekursory komórek erytrocytroidowych, limfocyty B, receptor trombospondyny, powinowactwo do kolagenu typu I i IV, bierze udział w interakcji komórek z płytkami krwi; MM 90 kDa.

CD38 - aktywują limfocyty T i B, niektóre limfocyty B, transbłonową glipoproteinę, egzoenzym plejotropowy, wzmaga proliferację komórek B.

CD40 - posiadają dojrzałe limfocyty B, ulegają słabej ekspresji na monocytach, uczestniczą w interakcji z limfocytami T, wiążąc się z nimi CD40L (ligand), należą do rodziny NGF/TNF, nie występują w zespole hiper-IgM, MW 50 kDa.

CD41 - obecny na płytkach krwi, zależny od aktywacji receptor dla fibrynogenu, czynnik von Willibanda, nieobecny w trombastenii Glanzmanna, MW 140.

CD42 a, b, c - podjednostki receptorów adhezji płytek krwi do śródbłonka i podśródbłonkowej tkanki łącznej, są nieobecne w zespole Bernarda-Solera.

CD43 – posiada wszystkie leukocyty z wyjątkiem spoczynkowych limfocytów B, glikozylowane białko – mucyna, bierze udział w zjawisku „homingu” limfocytów, wadliwego w zespole Wiskotta-Aldricha, MW 95-115 kDa.

CD44R – przenoszony przez aktywowane limfocyty T, izoforma adhezyny CD44, bierze udział w zjawisku „homingu”.

CD45 - występuje na wszystkich leukocytach, fosfataza tyrozynowa, bierze udział w aktywacji limfocytów, występuje w 5 izoformach, MW 18-220 kDa.

CD45RO - występuje na aktywowanych limfocytach T, głównie komórkach pamięci, tymocytach, w niewielkiej ilości na monocytach i granulocytach, uczestniczy w aktywacji komórek, MW 180.

CD45RA - mają „naiwne” komórki T, komórki B, monocyty, granulocyty, izoformę CD45, MW 220 KDa.

CD45RB, CD45RC - izoforma CD45 na subpopulacjach T i B, monocytach.

CD49 a, b, c, d, e, f - VLA-1, VLA-2 ... 3, 4, 5, 6 - warianty łańcucha β integryn, cząsteczek adhezyjnych, związanych z CD29, spotykane na wszystkich leukocyty.

CD50 (ICAM-3) - cząsteczka adhezji międzykomórkowej leukocytów 3, ligand dla LFA-1 (CD11a/CD18).

CD54 (ICAM-1) - ligand adhezyjny monocytów, limfocytów (dla CD11a/CD18), liczba wzrasta po aktywacji, receptor dla rinowirusa, MW 90 kDa.

CD58 (LFA-3) jest ligandem CD2 (LFA-2) na leukocytach, erytrocytach.

CD62 - С062Р-płytka, CD62E (ELAM-1) - śródbłonek, CD62L (LECAM) - cząsteczki adhezyjne limfo- i leukocytów-selektyny, uczestniczą w adhezji leukocytów, płytek krwi i śródbłonka, MW 75-150 kDa.

CD64 (FcyR1) jest receptorem o wysokim powinowactwie dla IgG na monocytach, aktywowanych granulocytach, MW 75 kDa.

CD66 a, b, c, d, e - cząsteczki adhezyjne na granulocytach, wiążą bakterie, w szczególności CD66c wiąże fimbrie E. coli, nie występują w napadowej nocnej hemoglobinurii;

CD69 jest glikoproteiną wczesnej aktywacji limfocytów T i B, o masie cząsteczkowej 28-34 kDa.

CD71 jest receptorem transferyny, pośredniczy we włączaniu żelaza do komórki, reguluje wzrost komórek, występuje na komórkach proliferujących, aktywowanych komórkach T i B, makrofagach, MW 95/190 kDa.

CD72 - ma prekursory i dojrzałe komórki B, członek nadrodziny lektyn zależnych od Ca++ (typu C), ligand dla CD5.

CD74 jest niezmiennym łańcuchem związanym z antygenami zgodności tkankowej klasy II i bierze udział w ekspresji tego ostatniego na monocytach-makrofagach.

CD89 (Fc?R) Fc - receptor dla IgA na neutrofilach, monocytach, eozynofilach, subpopulacjach limfocytów T i B, wyzwalacz fagocytozy i wybuchu oddechowego, MW 55-70 kDa.

CD91 to receptor lipoprotein o małej gęstości na monocytach, α2-makroglobulina, składający się z? I? łańcuchy, mm 85/515 kDa.

CD95 (Fas) – występuje w subpopulacjach tymocytów, aktywowanych limfocytach T i B, członek rodziny NGF, integralne białka błonowe typu 1 (patrz CD27, 30, 40, 120a), receptor TNF; Przeciwciała Fas18 indukują apoptozę, przeciwciała Fas19 ją hamują, MW 42 kDa

CD96 - posiadają aktywowane limfocyty T, w fazie późnej NK, MW 160 kDa.

CD102 jest glikoproteiną adhezyjną, przeciwreceptorem dla LFA-1 (CD11a/CD18) na monocytach, limfocytach i śródbłonku.

CD106 jest glikoproteiną występującą na monocytach, aktywowanym śródbłonku i wiąże się z integrynami (CD49 itp.).

Grupa receptorów cytokin.

CD115 - pierwszy receptor czynnika stymulującego tworzenie kolonii makrofagów (M-CSF), bierze udział w proliferacji monocytów-makrofagów, MW 150 kDa.

CD116 jest receptorem z rodziny cytokin krwiotwórczych, łańcuchem β receptora czynnika stymulującego tworzenie kolonii granulocytów i makrofagów (receptor GM-CSF), o wysokim powinowactwie, jeśli jest związany z łańcuchem β; ulega ekspresji na monocytach, neutrofilach, eozynofilach, śródbłonku, komórkach progenitorowych, MW 75-85 kDa.

CD117 jest receptorem czynnika komórek macierzystych, ma aktywność kinazy tyrozynowej, ulega ekspresji na prekursorach osteoklastów, komórkach tucznych i prekursorach układu krwiotwórczego CD34+.

CDw119 - receptor interferonu γ, integralne białko błonowe typu 1 na makrofagach, granulocytach, komórkach T i B, nabłonku, śródbłonku, MW 90 kDa.

CD120a – receptor typu 1 dla TNF? i TNF? na wielu tkankach, w tym na leukocytach, integralne białko błonowe typu 1, członek rodziny receptorów NGF/TNF (patrz CD27, CD30, CD40, CD95), MW 55 kDa.

CD120b – receptor TNF typu 2? i TNF? na wszystkich leukocytach i wielu tkankach.

CDw121a - receptor typu 1 dla interleukiny - 1?/1? na limfocytach T, fibroblastach, śródbłonku, MW 80 (R) kDa.

CDw121b – receptor typu 2 o wysokim powinowactwie do IL-1? i IL-1? na komórkach T, monocytach, niektórych komórkach B, MW 68 kDa.

CDw122 jest łańcuchem β receptora dla IL-2, gdy jest związany z łańcuchem β (CD25), tworzy receptor IL2 o wysokim powinowactwie, członek rodziny receptorów cytokin, obecny na aktywowanych limfocytach T, monocytach, NK, MW 75 kDa.

CDw123 - receptor łańcucha α dla IL-3 (występuje łańcuch α) na komórkach krwiotwórczych, neutrofilach, monocytach, bazofilach, eozynofilach, MW 70 kDa.

CDw124 jest receptorem dla IL-4 na dojrzałych limfocytach T i B, komórkach progenitorowych układu krwiotwórczego, śródbłonku i fibroblastach, masa cząsteczkowa 140 kDa.

CD125 jest receptorem łańcucha α dla IL-5 na eozynofilach i bazofilach; kompletny receptor obejmuje również łańcuch β, taki sam jak w przypadku receptora GM-CSF (CD116) i receptora ILZ (CD123).

CD126 jest receptorem dla IL-6 na aktywowanych limfocytach B, osoczu, ulega słabej ekspresji na leukocytach, nabłonku i fibroblastach, MW 80 kDa.

CDw127 - receptor IL-7 na limfoidalnych komórkach progenitorowych