Kariotipizacija limfocita periferne krvi para. Kako i zašto se provodi kariotipizacija budućih majki i očeva - mehanizam pregleda

Kariotip odražava skup ljudskih kromosoma. Normalno, osoba ima 46 kromosoma ili 23 para. 23. par - spolni kromosomi - XX u žene, XY u muškarca. Analiza kariotipa provodi se za djecu i odrasle. Kariotip djeteta omogućuje isključivanje nekih genetskih bolesti. Kariotipizacija supružnika pomaže u utvrđivanju genetskog uzroka neplodnosti i pobačaja, kao i prognozi zdravog potomstva.

Što je kariotip?

kariotip- kompletan set kromosoma u ljudskim stanicama. Norma za sadržaj kromosoma u somatskim (neembrionalnim) ljudskim stanicama je 46 kromosoma, organiziranih u 23 para. Svaki par se sastoji od jednog kromosoma od majke i jednog od oca. Za proučavanje ljudskog kariotipa krv se uzima iz vene. U Laboratoriju CIR kariotipizacija se provodi citogenetskim i molekularno genetičkim metodama. Postoji i FISH-analiza kariotipa, koja vam omogućuje analizu kromosoma pomoću fluorescentnih boja.

Laboratorij CIR obavlja sljedeće pretrage kariotipizacije:

Prve tri analize rade se citogenetičkom metodom. XMA je molekularna genetička analiza kariotipa.

Razgovarajmo o citogenetskoj metodi za provođenje analize kariotipa.
Izgled kromosoma značajno se mijenja tijekom staničnog ciklusa: tijekom interfaze kromosomi su lokalizirani u jezgri, u pravilu, despiralizirani i teško uočljivi, stoga se stanice u jednoj od faza svoje diobe, metafazi mitoze, koristi se za određivanje kariotipa. Kromosomi u svjetlosnom mikroskopu u fazi metafaze su molekule DNK upakirane uz pomoć posebnih proteina u guste, supersmotane strukture u obliku štapića. Dakle, veliki broj kromosoma upakiran je u mali volumen i smješten u relativno mali volumen stanične jezgre. Lokacija kromosoma, vidljiva pod mikroskopom, fotografira se i sistematizirani kariotip se prikuplja iz nekoliko fotografija - numerirani skup kromosomskih parova homolognih kromosoma. U ovom slučaju, slike kromosoma su usmjerene okomito, s kratkim kracima prema gore, a njihovo numeriranje se provodi silaznim redoslijedom veličine. Par spolnih kromosoma (X i Y za muškarca, X i X za ženu) nalazi se na samom kraju slike seta kromosoma.

Kada se daje krv za kariotip?

Pregled kariotipa je nerutinska analiza za koju postoje indikacije.

Razlozi zbog kojih liječnik može predložiti testiranje mogu uključivati:

• rođenje djeteta s genetskom patologijom ili prisutnost kromosomske patologije u rodbini jednog od supružnika;
• neplodnost u obitelji;
• uobičajeni pobačaj i/ili spontani pobačaj u prvih 12 tjedana trudnoće;
• izloženost zračenju, štetna proizvodnja na radu i dr.

Što proći analizu kariotipa?

Analiza kariotipa može se provesti na dva načina: kariotipizacija bez aberacija i kariotipizacija s aberacijama. Prva analiza pokazuje genetski sklop osobe - broj kromosoma i velike promjene svih kromosoma dobivenih od roditelja. Kariotipizacija s aberacijama pokazuje promjene koje se događaju u kromosomima tijekom života čovjeka pod utjecajem različitih štetnih čimbenika okoliša. Analiza kariotipa metodom CMA daje se u rijetkim slučajevima sa zastojem u rastu kod djece, autizmom, sumnjom na sindrom mikrodelecije.

Analiza kariotipa bračnog para (kariotipizacija supružnika)

Kako bi se utvrdio mogući uzrok neplodnosti u obitelji, liječnik može propisati kariotipizaciju supružnika. Supružnici mogu polagati test u različito vrijeme, to ne utječe na tumačenje. Ako postoji pretpostavka o genetskoj prirodi neplodnosti, analiza kariotipa može se dodijeliti jednom od supružnika. .

Kako napraviti test kariotipa? Gdje mogu napraviti test kariotipa?

Kariotip: cijena analize

Cijenu analize kariotipa saznajte u našem cjeniku,.

Analiza kariotipa: kako se provodi studija kariotipa kod ljudi?

Svaki se kromosom sastoji od specijaliziranih struktura – centromera i dva telomera. Centromera (cen) ili primarni estrih dijeli kromosom na dva dijela – dugi (q) i kratki (p) krak i odgovoran je za odvajanje kromosoma tijekom stanične diobe. Prije stanične diobe, kromosom se sastoji od jedne kromatide. Nakon duplikacije DNA – od dvije kromatide, dok se ne razdvoje u dvije nove stanice.

Za postupak određivanja kariotipa citogenetička metoda može se koristiti bilo koja populacija stanica koje se dijele. Za određivanje ljudskog kariotipa u pravilu se koriste limfociti periferne krvi. Za analizu kariotipa krv se uzima iz vene u sterilnu epruvetu. Nema uvjeta za uzimanje analize, možete doručkovati prije odlaska u laboratorij.

Prijelaz limfocita iz stadija mirovanja G0 u proliferaciju izaziva se dodatkom stimulatora stanične diobe - fitohemaglutinina. Za određivanje kariotipa također se mogu koristiti stanice koštane srži ili primarna kultura fibroblasta kože. Kako bi se povećao broj stanica u fazi metafaze, neposredno prije fiksacije, u staničnu kulturu dodaju se kolhicin ili nokadazol koji blokiraju stvaranje mikrotubula, čime se sprječava širenje kromatida na polove stanične diobe i završetak mitoze.

Nakon fiksacije preparati metafaznih kromosoma se boje i pregledavaju pod mikroskopom.

Za dobivanje klasičnog kariotipa koristi se bojanje kromosoma različitim bojama ili njihovim mješavinama: zbog razlika u vezanju boje na različite dijelove kromosoma, bojanje se javlja neravnomjerno i karakteristična trakasta struktura (kompleks poprečnih oznaka, engleski banding ) nastaje, odražavajući linearnu heterogenost kromosoma i specifične za homologne parove kromosoma i njihove dijelove (s izuzetkom polimorfnih regija, različite alelne varijante gena su lokalizirane). Prvu metodu bojenja kromosoma za dobivanje tako vrlo detaljnih slika razvio je švedski citolog Kaspersson (Q-bojenje). \\Koriste se i druge boje, takve se tehnike zajednički nazivaju diferencijalno bojenje kromosoma.

Vrste diferencijalnog bojenja kromosoma

G-bojanje- modificirano bojenje po Romanovsky - Giemsa. Osjetljivost je veća od Q-bojanja, stoga se koristi kao standardna metoda za citogenetsku analizu. Koristi se za otkrivanje malih aberacija i kromosoma markera (segmentiranih drugačije od normalnih homolognih kromosoma).

Q-bojanje- bojenje prema Kasperssonu s akrihin senfom uz studiju pod fluorescentnim mikroskopom. Najčešće se koristi za proučavanje Y kromosoma (brzo određivanje genetskog spola, identifikacija translokacija između X i Y kromosoma ili između Y kromosoma i autosoma, probir mozaicizma koji uključuje Y kromosome).

R-bojenje- koriste se akridin narančasta i slična bojila, pri bojenju dijelova kromosoma koji su neosjetljivi na G-bojanje. Koristi se za otkrivanje pojedinosti o homolognim G- ili Q-negativnim regijama sestrinskih kromatida ili homolognih kromosoma.

C-bojanje- koristi se za analizu centromernih regija kromosoma koji sadrže konstitutivni heterokromatin i varijabilni distalni dio Y kromosoma.

T-bojenje- koristi se za analizu telomernih regija kromosoma.

Analiza kromosomskih mikronizova (CMA)

Modernija tehnologija za proučavanje kariotipa. Analiza kariotipa provodi se molekularno genetičkom metodom aCGH (comparative microarray genomic hybridization) koja za razliku od klasične citogenetičke metode ima visoku rezoluciju koja omogućuje otkrivanje manjih strukturnih promjena kariotipa.

Fluorescencija in situ hibridizacija Fluorescencija in situ hibridizacija, FISH

Otkrivanje aneuploidije - kršenje broja kromosoma. Na slici zelena boja odgovara kromosomu 13, a crvena kromosomu 21, što ukazuje na prisutnost triploidije na kromosomu 21 u ovom uzorku.

U novije vrijeme koristi se tehnika tzv. spektralne kariotipizacije (fluorescence in situ hybridization, eng. Fluorescence in situ hybridization, FISH) koja se sastoji u bojenju kromosoma setom fluorescentnih boja koje se vežu na određene regije kromosoma. Kao rezultat takvog bojenja, homologni parovi kromosoma poprimaju identične spektralne karakteristike, što ne samo da uvelike olakšava identifikaciju takvih parova, već i olakšava detekciju interkromosomskih translokacija, odnosno pomicanja dijelova između kromosoma - translocirani dijelovi imaju spektar koji se razlikuje od spektra ostatka kromosoma.

Povrede u strukturi kromosoma možda se neće manifestirati ni na koji način tijekom života. Ali kada se jajna stanica i spermija spoje, susreću se dva genetska skupa, a tada neuspješno podudaranje gena može uzrokovati pobačaj ili stvaranje kongenitalne patologije u fetusu. Kariotipizacija supružnika pomaže identificirati abnormalnosti u strukturi i broju kromosoma, kao i vjerojatnost određenog odstupanja.

Pregled kariotipa je izborna analiza. Postupak ima svoje indikacije, uključujući pobačaje i propuštenu trudnoću u povijesti. Reproduktivni problemi povezani s osobitostima genetike prilično su rijetki.

Kariotipizacija je dijagnostički postupak kojim se otkrivaju abnormalnosti u građi i broju kromosoma. Takva odstupanja mogu uzrokovati nasljedne patologije kod djeteta i neplodnost supružnika.

Svaka osoba ima svoj specifičan skup gena, koji se naziva kariotip. Kromosomi su raspoređeni u parove: 22 para autosoma i 1 par spolnih kromosoma, koji su u ženskom tijelu predstavljeni kao XX, au muškom XY. Sastoje se od gena - dijelova koji su odgovorni za manifestaciju određene osobine.

Kariotipizacija otkriva bolesti koje su izravno povezane s promjenama u DNK. Defekt može biti u bilo kojem genu, u strukturi kromosoma ili njihovom broju. Najpoznatiji primjer je Downov sindrom, koji se naziva i trisomija 21.

Kariotipizacija supružnika (citogenetička analiza) proučavanje je kromosoma krvnih stanica. Postupkom se otkrivaju uzroci pobačaja ili neplodnosti kod parova kada su drugi čimbenici već isključeni (hormonalni, imunološki, infektivni). Ako se otkrije povećana nestabilnost genoma, uporaba antioksidansa i imunomodulatora pomoći će smanjiti rizik od neuspjeha začeća.

Kojim parovima je indicirana kariotipizacija?

Kao što je već navedeno, kariotipizacija supružnika nije uključena u popis obveznih dijagnostičkih postupaka. Prikazuje se u sljedećim slučajevima:

1. Jedan ili oba roditelja stariji su od 35 godina.
2. Neplodnost, čiji se uzroci ne mogu utvrditi drugim metodama.
3. Nekoliko neuspješnih IVF postupaka.
4. Život u područjima s lošim ekološkim uvjetima, rad u opasnim industrijama, kontakt s opasnim kemikalijama.
5. Pušenje, zlouporaba alkohola, uzimanje droga, određenih lijekova.
6. Prethodni pobačaji, pobačaji, prijevremeni porodi.
7. Supružnici su u krvnom srodstvu.
8. Prethodno rođena djeca s genetskim bolestima.

Priprema za ispitni postupak

Analiza se radi u laboratoriju i ne predstavlja nikakvu opasnost za zdravlje supružnika. 2 tjedna prije zahvata morate prestati piti alkohol, duhanske proizvode i lijekove. Ako se uzimanje bilo kojeg lijeka ne može otkazati, laboratorijski pomoćnik mora biti upozoren na to.

Uzorkovanje krvi provodi se na puni želudac, posljednji obrok trebao bi se dogoditi 1-2 sata prije analize. Prije samog zahvata potrebno je ispuniti poseban upitnik ili ga ponijeti sa sobom (u nekim slučajevima popunjava ga liječnik unaprijed). Ako se kariotipizacija supružnika vremenski poklopila s pogoršanjem ili akutnim tijekom zarazne bolesti kod jednog ili oba para, tada bi studiju trebalo ponovno zakazati.

Provođenje analize

Kod kariotipizacije krv se uzima iz vene. Laborant njime napuni epruvetu i pusti bolesnika. Obično je potrebno oko 5 dana za genetsku analizu i pripremu rezultata.

Za daljnja istraživanja potreban je samo dio materijala – limfociti. Izoliraju se iz krvi tijekom razdoblja diobe. Kako bi se izazvala aktivnost ovog procesa, dodaju se posebni lijekovi (Colchicine, Nocazadol). Tijekom sljedeća tri dana analiziraju se značajke reprodukcije stanica. Na temelju dobivenih rezultata donosi se zaključak o mogućim patologijama i rizicima pobačaja.

Suvremene tehnologije omogućuju kariotipizaciju pomoću samo 15 stanica i posebnih pripravaka. Stoga je jedno vađenje krvi dovoljno da se dobiju točni i potpuni podaci o kromosomima i genima.

Što će dati rezultat?

Tumačenje analize za kariotipizaciju supružnika provodi genetičar. Normalni rezultat za žene je 46XX, za muškarce - 46XY. Znači da je pronađeno ukupno 46 kromosoma, od kojih je posljednji par spolni. Kada se otkrije genetska patologija, ova se formula mijenja. Na primjer, s Downovim sindromom (trisomija na 21. kromosomu) izgleda kao 46XX21+.

Rezultat kariotipizacije pomaže u određivanju sljedećih patologija:

1. Trisomija je prisutnost dodatnog trećeg kromosoma u paru. Trisomija na 21. kromosomu - Downov sindrom, na 16. - spontani pobačaj u 1. tromjesečju, na 13. - Patauov sindrom, na 18. - Edwardsov sindrom. Od njih, jedina moguća opcija je Downov sindrom.
2. Monosomija je odsutnost jednog kromosoma u paru. Monosomija bilo kojeg autosomnog kromosoma dovodi do rane smrti embrija. Slična patologija u paru XX kod žena očituje se Shereshevsky-Turnerovim sindromom.
3. Delecija je odsutnost dijela kromosoma. Ako se izgube velike površine, dolazi do rane smrti embrija. U drugim slučajevima mogu se razviti genetske patologije (na primjer, sindrom plačuće mačke s brisanjem 5. kromosoma) ili pozitivan učinak na održivost (na primjer, otpornost na HIV). Delecija spolnog kromosoma kod muškaraca uzrok je poremećene spermatogeneze i dovodi do neplodnosti.
4. Duplikacija je prisutnost dupliciranog fragmenta kromosoma. Funkcije izvornih gena nisu pogođene.
5. Inverzija je rotacija dijela kromosoma za 180°. Neke od tih promjena su normalne, dok druge dovode do smrti zametnih stanica i stvaranja neuravnoteženog materijala u njima. Rezultat je smanjena plodnost, povećan rizik od pobačaja i abnormalnosti fetusa.
6. Translokacija je pomicanje segmenta kromosoma. Neke od tih promjena ni na koji način ne utječu na osobu, druge dovode do pobačaja, kongenitalnih fetalnih anomalija (Robertsonove translokacije).

U obrazac za rezultate bilježe se promjene u strukturi kromosoma. Dugo rame je označeno slovom "q", kratko - "t". Na primjer, sindrom mačjeg plača (delecija na 5. kromosomu) piše se na sljedeći način: 46XX5t ili 46XY5t.

Druga stvar koja se otkriva tijekom kariotipizacije su promjene u genima. Može se identificirati:

1. Mutacije gena koje utječu na zgrušavanje krvi. Povećano stvaranje tromba može uzrokovati pobačaj, neplodnost ili nemogućnost implantacije oplođenog jajašca.
2. Mutacija gena u kromosomu Y uzrok je muške neplodnosti, što zahtijeva korištenje sperme donora.
3. Mutacije gena koje smanjuju sposobnost tijela da se detoksifikuje – riješi se štetnih tvari dobivenih iz vanjske sredine.
4. Promjene u genu za cističnu fibrozu, dovode do pojave ove bolesti kod djeteta.

Identificirana odstupanja od norme: što učiniti?

Za dobivanje potpunih informacija o rezultatima kariotipizacije supružnici trebaju doći na konzultacije s genetičarom. On će vam detaljno reći o mogućim rizicima i vjerojatnosti razvoja određenog kršenja.

Kariotipizacija je jedna od novih metoda citogenetskih istraživanja, kojom se proučavaju skupovi ljudskih kromosoma (tzv. kariotip). Znanstvenici, vodeći svoje studije, mogu odrediti strukturu kromosoma i, ako je to slučaj, kršenje njihove strukture. Kariotipizaciju kromosoma dovoljno je provesti jednom u životu - rezultati studije određuju genom muških i ženskih pojedinaca za međusobno dopisivanje. Drugim riječima, zahvaljujući takvim analizama moguće je provjeriti podudaraju li se muškarac i žena na razini gena, mogu li imati djecu i hoće li njihova beba biti zdrava.

Metoda kariotipizacije je najnoviji prijedlog u medicini, koji, međutim, svake godine postaje sve popularniji među mladim (i ne baš mladim) supružnicima.

Kariotip je kompletan skup kromosoma, štoviše, s opisom određenih značajki - bilo da se radi o veličini, obliku, količini. Kod ljudi, kao što je poznato iz tečaja elementarne biologije, u genomu postoji 46 kromosoma - ukupno 23 para. U isto vrijeme, 44 kromosoma su autosomna: oni su odgovorni za prijenos podataka koji označavaju nasljedne osobine ove ili one vrste. To uključuje boju i vrstu dlake, strukturu ušiju, kvalitetu vida itd. Ali jedan par kromosoma je odgovoran za spolne karakteristike - ona je ta koja daje ženski ("XX") ili muški ("XY") kariotip.

Zahvaljujući dekodiranju kromosoma, njihovoj usporedbi i povezivanju, znanstvenici mogu s točnošću od 99% reći kolika je vjerojatnost rođenja hendikepirane ili bolesne bebe.

Molekularna kariotipizacija: indikacije

Naravno, bilo bi apsolutno ispravno da apsolutno svi roditelji provedu kariotipizaciju prije nego što dobiju djecu. Štoviše, bez obzira na to propisuju li liječnici takvu analizu ili ne. Možda će u budućnosti takve analize biti obvezne, ali ne danas. Do sada se šalju na kariotipizaciju samo ako za to postoje dobri razlozi.

Brojne nasljedne bolesti koje su se pojavile u rodu kod određene osobe ponekad se pojavljuju sasvim neočekivano (iako predvidljivo). Nekoliko generacija može biti apsolutno zdravo, a onda se iznenada pojavi neka bolest. Kariotipizacija može otkriti samu patologiju u nerođenog djeteta i unaprijed izračunati sve rizike.

Analiza je potrebna ako:

1. Jedan ili oba supružnika koji se odluče na dijete stariji su od 35 godina.
2. Žena dugo ne može zatrudnjeti, a liječnici ne mogu utvrditi podrijetlo neplodnosti.
3. Bilo je više pokušaja umjetne oplodnje, ali svi su bili neuspješni.
4. Jedan od supružnika u obitelji imao je neke nasljedne bolesti.
5. Žena ima neke poremećaje, neravnotežu hormona u tijelu.
6. Muškarac ima povijest poremećene spermatogeneze, a uzrok poremećenog stvaranja spermija nije utvrđen.
7. Jedan od supružnika bio je u kontaktu s opasnim kemikalijama.
8. Jedan od supružnika bio je izložen radioaktivnosti.
9. Supružnici žive u nepovoljnom ekološkom okruženju.
10. U prošlosti je bilo trenutaka koji su mogli negativno utjecati na dijete. Na primjer, ranije su žena ili muškarac pušili, pili alkohol ili droge, uzimali mnogo lijekova.
11. Žena je imala tri ili više spontano prekinutih trudnoća (spontani pobačaj, spontani pobačaj, prijevremeni porod).
12. Muškarac i žena su blisko povezani.
13. Supružnici već imaju dijete s nekom vrstom urođene patologije i malformacije.

Najbolje je proći kariotipizaciju tijekom planiranja trudnoće. Ali sada postoji prilika da se ispita kariotip bebe koju žena nosi - provodi se takozvana prenatalna kariotipizacija.

Kariotipizacija: priprema za analizu

Za određivanje kariotipa potrebne su krvne stanice. Kako bi analiza bila točnija i kvalitetnija potrebno je učiniti sve kako bi se isključili čimbenici koji otežavaju rast stanica. Zato priprema za kariotipizaciju često traje dva ili više tjedana.

Ako se odlučite provjeriti kariotip, potrebno vam je najmanje 14 dana:

1. Nemojte pušiti.
2. Nemojte piti alkoholna pića.
3. Nemojte uzimati lijekove (to se prije svega odnosi na antibiotike).
4. Nemojte se razboljeti (ovo se odnosi i na zarazne prehlade i na pogoršanja raznih kroničnih bolesti).

Kariotipizacija: kako uzeti

1. Za identifikaciju kariotipa osobe potrebna je venska krv koja se uzima od muškarca i žene (vrlo je važno da su oba supružnika spremna za testiranje).
2. Nakon primljene venske krvi, limfociti se odstranjuju u laboratoriju (tek su u fazi diobe (faza mitoze)).
3. Za provođenje kvalitativne analize sasvim je dovoljno od 12 do 15 limfocita - to je dovoljno za prepoznavanje kvantitativnih i kvalitativnih neusklađenosti kromosoma - oni su ti koji ukazuju na prisutnost bilo koje genetske nasljedne bolesti.
4. Tri dana se prate stanice limfocita – analizira se njihova dioba, rast i razmnožavanje.
5. Za poticanje faze mitoze, stanice limfocita se tretiraju posebnim spojem - mitogenom.
6. Kada dođe do izravnog procesa diobe, znanstvenici proučavaju kromosome - u ovom slučaju mitozu treba zaustaviti posebnim tretmanom.
7. Nakon što znanstvenici prikupe dovoljno podataka, pripremaju posebne preparate za proučavanje kromosoma na staklu.
8. Kako bi struktura kromosoma bila jasnija, moguće je dodati boju koja omogućuje da genom dobije boju. Budući da kromosomi imaju individualnost, nakon bojenja mogu postati još uočljiviji.
9. U završnoj fazi analiziraju se obojeni razmazi, koji mogu odrediti ne samo ukupan broj kromosoma, već i strukturu svakog zasebno.
10. Uspoređujući uparene kromosome i njihovu ispruganost, znanstvenici provjeravaju rezultat svojom tablicom, gdje su napisane norme citogenetskih shema kromosoma.

Kariotipizacija: rezultati

Analizu za proučavanje kariotipa mora uzeti genetičar u specijaliziranoj klinici. Ako vam se ponudi da se podvrgnete testovima u redovnoj bolnici, tada postoji rizik da će analiza biti nepouzdana, jer najčešće u običnim medicinskim ustanovama nema kvalificiranih liječnika i uređaja za izvođenje samog procesa.

Ako je analiza normalna, trebala bi izgledati kao "46XX" (ženski) ili "46XY" (muški). U slučaju da stručnjaci iznenada otkriju genetski poremećaj, evidencija će biti kompliciranija. Na primjer, "46XY21+" znači da muškarac ima patologiju u obliku viška kromosoma (štoviše, 21 znači da 21 par ima treći kromosom).

Zahvaljujući kariotipizaciji, patologije kao što su:

• trisomija - prisutnost trećeg dodatnog kromosoma u paru (vjerojatno Downov sindrom);
• monosomija - odsutnost jednog kromosoma u paru;
• delecija - gubitak nekog dijela kromosoma;
• duplikacija - udvostručenje jednog od fragmenata kromosoma;
• inverzija - netočan zaokret nekog dijela kromosoma;
• translokacija - rokada određenih dijelova kromosoma.

Ako se u Y kromosomu pronađe delecija, to najvjerojatnije ukazuje na kršenje spermatogeneze i, kao rezultat, neplodnost kod muškarca. Osim toga, upravo je brisanje najčešće uzrok kongenitalne patologije kod djeteta.

Da bi bilo zgodno, ako postoje bilo kakve povrede u strukturi kromosoma, znanstvenici bilježe rezultate analiza latiničnim slovima. Na primjer: dugo rame označeno je "q", kratko - "t". Ako žena ima povijest gubitka fragmenta, recimo, kratkog kraka petog kromosoma, tada će unos biti ovakav - "46XX5t". Ovo genetsko odstupanje naziva se "mačji plač" - beba rođena od takvog para vjerojatno će imati urođene poremećaje, također će plakati bez razloga.

Zahvaljujući kariotipizaciji moguće je procijeniti stanje gena, jer je moguće identificirati:

1. Mutacija gena koja utječe na krvne ugruške - to značajno remeti protok krvi i može uzrokovati pobačaj ili čak neplodnost.
2. Genska mutacija Y-kromosoma - trudnoća je moguća, ali samo ako postoji drugi spermij (kod donora).
3. Mutacija gena koji su odgovorni za detoksikaciju - to ukazuje na to da tijelo ima nisku sposobnost dekontaminacije toksičnih čimbenika.
4. Mutacija gena koja se izražava u cističnoj fibrozi, koja će pomoći u potpunom uklanjanju rizika od razvoja ove bolesti.

Suvremena oprema također omogućuje prepoznavanje predispozicije za takve bolesti koje nemaju tako upečatljivu genetsku karakteristiku: srčani udar ili dijabetes, hipertenzija ili patologija zglobova itd.

Kariotipizacija: što dalje

1. Ako su tijekom kariotipizacije pronađene bilo kakve abnormalnosti, liječnik će o tome odmah obavijestiti supružnike. Nije bitno radi li se o mutaciji gena ili kromosomskoj aberaciji, za jednog ili oba supružnika odjednom, genetičar će sve detaljno objasniti i razjasniti koji su rizici za nerođeno dijete, kolika je vjerojatnost rođenja bolesnog djeteta. .
2. Treba odmah napomenuti da je genetska patologija neizlječiva, ako postoje poremećaji kromosoma, tada supružnici moraju donijeti vrlo važnu i odgovornu odluku: ipak roditi svoje dijete (na vlastitu odgovornost i rizik), koristiti spermu donora ( jaje), privući surogat majku, ne da ima bebu, već da usvoji bebu.
3. Ako su liječnici otkrili kromosomske abnormalnosti kod žene tijekom trudnoće, liječnici objašnjavaju da postoji mogućnost bolesnog djeteta i savjetuju prekid trudnoće. Ali na budućim roditeljima je odluka hoće li pobaciti ili ne. Nitko nema pravo inzistirati na prekidu trudnoće – ni liječnik, ni genetičar, niti bilo tko od rodbine.
4. U slučaju da postoji sumnja na anomaliju broja kromosoma ili njezina prisutnost daje nizak postotak rođenja bolesne bebe, tada liječnici propisuju tečaj vitamina koji smanjuju vjerojatnost da se dijete rodi s patologijama ili abnormalnostima.

Fetalni kariotip: što je to?

Ako iz više razloga roditelji nisu izvršili kariotipizaciju tijekom planiranja trudnoće, a pod srcem žene već sazrijeva novi život, tada se može provesti perinatalna kariotipizacija. Ova metoda pomoći će identificirati prisutnost kromosomskih patologija u fetusu već u prvom tromjesečju trudnoće. Ova će studija identificirati sve abnormalnosti i uputiti liječnike za liječenje, prilagodbu ili druge nepopularne radnje potrebne tijekom trudnoće.

Zahvaljujući ovoj metodi moguće je isključiti sindrom Down, Patau, Turner, Edwards i Klinefelter, kao i polisomiju X-kromosoma.

Kariotipizacija fetusa: metode

Trenutno postoje dvije metode koje se koriste za provođenje studije fetusa.

1. neinvazivna metoda. Potpuno siguran i za mamu i za bebu. Za ovu studiju dovoljno je provesti ultrazvučni pregled, na kojem će se izvršiti mjerenja fetusa, kao i studija biokemijske analize trudnice kako bi se identificirali posebni markeri.
2. invazivna metoda. Ozbiljnija metoda, budući da se manipulacije moraju provesti izravno u maternici kako bi se otkrila patologija. Liječnik uzima ili stanice iz koriona ili stanice iz placente za analizu, kao i krv iz pupkovine i uzorak amnionske tekućine. Ova analiza je preciznija. Zahvaljujući biopsiji gore navedenih materijala, liječnici mogu dobiti dovoljno informacija o zdravlju djeteta. Cijeli postupak se provodi na potpuno isti način kao što je gore opisano - ljudski kariotip se određuje proučavanjem kromosomskog skupa.

Kariotipizacija fetusa: komplikacije

Prije prakticiranja invazivne metode kariotipizacije fetusa, liječnik mora izvijestiti da postoji mali (ne više od 2-3%) rizik od komplikacija nakon studija. U najgorem slučaju moguć je pobačaj, može se otvoriti krvarenje ili početi curiti amnionska tekućina.

Zato je prije nego što se odlučite na ovaj zahvat potrebno odvagnuti sve za i protiv i tek onda dati pristanak. Ako samo želite saznati spol djeteta u ranoj fazi (a ovom metodom to je sasvim moguće), bolje je odbiti invazivnu kariotipizaciju fetusa. Sasvim je drugo pitanje postoji li rizik od rođenja djeteta s genetskim abnormalnostima ili anomalijama.

Fetalni kariotip: indikacije

Intervencija tijekom trudnoće za provođenje invazivne kariotipizacije fetusa provodi se samo iz medicinskih razloga. Ovaj postupak se preporučuje ako:

1. Trudna je više od 35 godina i ovo joj je prvo dijete.
2. Ultrazvučni pregled pokazao je prisutnost patologije u fetusu.
3. U krvi trudnice dramatično su se promijenili biokemijski parametri - krvni markeri (AFP, hCG, PPAR).
4. U obitelji postoji bolest koja se prenosi samo po spolu (npr. hemofilija - ova će se bolest sa žene prenijeti na sina, a ne na kćer).
5. U obitelji već postoji dijete s patologijom ili malformacijom, ili s genetskom bolešću.
6. Žena ima pobačaje u dugim razdobljima, budući da fetus razvija razvojnu anomaliju koja nije kompatibilna sa životom.
7. Roditelji djeteta bili su ozračeni ili su dugo radili (rade) u opasnoj industriji.
8. Trudnica je u prvom tromjesečju bolovala od virusne bolesti.
9. Jedan ili oba roditelja su koristili droge.

Što je kariotipizacija. Video

Analiza kariotipa je suvremeni laboratorijski test koji vam omogućuje prepoznavanje mogućih patoloških poremećaja na genetskoj razini, utvrđivanje uzroka neplodnosti i čak utvrđivanje hoće li nerođeno dijete biti zdravo. U dobivenom rezultatu bilježe se promjene u skupu kromosoma. Dijagnostički postupak trenutno je vrlo tražen jer omogućuje utvrditi razinu genetske podudarnosti muškaraca i žena.

Kariotip - kromosomski set odlikuju se određenim karakteristikama. Norma je prisutnost 46 kromosoma:

• 44 - odgovoran za sličnost s roditeljima (boja očiju, kosa, itd.).
• 2 - označavaju spol.

Analiza za kariotipizaciju neophodna je za utvrđivanje patoloških poremećaja koji se javljaju u tijelu. Laboratorijska dijagnostika je nezamjenjiva za utvrđivanje uzroka neplodnosti i prisutnosti kongenitalnih patologija koje se mogu naslijediti.

Redoslijed kariotipizacije:

1. Uzimanje uzoraka venske krvi i probir jednojezgrenih leukocita u laboratoriju.
2. Stavljanje biološkog materijala u medij s PHA (fitohemaglutinin) i početak uzgoja stanica (mitotska dioba).
3. Prestanak mitoze nakon postizanja faze metafaze, koja se provodi uz pomoć kolhicina.
4. Liječenje hipotoničnom otopinom i priprema mikropreparata.
5. Proučavanje i fotografiranje formiranih stanica posebnim mikroskopom.

Tek nakon 2 tjedna stručnjaci u laboratoriju dobivaju rezultat studije. Obrazac sadrži podatke o ukupnom broju kromosoma, a evidentiraju se i postojeće povrede genetskog koda.

Za procjenu reproduktivnih funkcija para koji planira djecu propisana je genetska studija. Za postavljanje dijagnoze potrebna je potpuna slika genetskih značajki. Na temelju dobivenih rezultata moguće je tražiti načine rješavanja postojećeg problema, ukoliko postoji. Kariotipizacija ima za cilj određivanje broja, oblika i veličine kromosoma u biološkom uzorku.

Ako postoje bilo kakva kršenja, postoje problemi iz unutarnjih sustava i organa. U nekim slučajevima, potpuno zdravi ljudi su nositelji genetske mutacije. Vizualno to nije moguće utvrditi. Kao rezultat toga, problemi s koncepcijom, malformacijama ili rođenjem nezdravog djeteta.

Postoje sljedeće medicinske indikacije za kariotipizaciju:

• dobna granica od 35 godina i više;
• pobačaj i neplodnost;
• hormonalni poremećaji u ženskom tijelu;
• izloženost ili trovanje kemikalijama;
• zagađen okoliš i prisutnost loših navika;
• nasljedna predispozicija i krvni brakovi;
• prisutnost mutacije kromosoma u prethodnoj djeci.

Krvni test za kariotip treba napraviti jednom, jer se te karakteristike ne mijenjaju s godinama. Apsolutna indikacija za kariotipizaciju je problem začeća i nemogućnost podnošenja trudnoće. Posljednjih godina sve više mladih parova podvrgava se ovoj analizi kako bi bili sigurni da će se roditi zdrava djeca. Laboratorijska dijagnostika omogućuje procjenu vjerojatnosti rođenja djeteta s abnormalnostima uzrokovanim kršenjem kromosoma i utvrđivanje pravog uzroka neplodnosti.

Priprema za kariotipizaciju

Krvne stanice koriste se za kariotipizaciju, stoga se prije prolaska analize morate pripremiti, eliminirajući utjecaj čimbenika trećih strana koji kompliciraju njihov rast. Inače će studija biti nisko informativna.

Pripreme moraju započeti 2 tjedna unaprijed:

1. Izbjegavajte alkohol, pušenje i nezdravu hranu.
2. Razgovarajte sa svojim liječnikom o prestanku uzimanja lijekova.
3. 9-11 sati prije uzorkovanja biološkog materijala isključiti obroke.
4. Nemojte piti tekućinu 2-3 sata prije laboratorijske pretrage.

Darivanje krvi za kariotip provodi se ujutro na prazan želudac. U slučaju pogoršanja zdravstvenog stanja, zarazne bolesti ili pogoršanja kroničnih bolesti, studija se odgađa dok se pacijent ne oporavi.

• Aneuploidija (promjena količine). S biološkim materijalom loše kvalitete mogu se pojaviti poteškoće u dijagnostičkom procesu.
• Strukturalna odstupanja - povezane kombinacije nakon razdvajanja. Studija otkriva velika kršenja. Kako bi se identificirala manja odstupanja, propisana je mikronizna kromosomska analiza.

Vrste dijagnostike

Kariotipizacija se provodi na nekoliko načina, koji se razlikuju u pristupu istraživanju i izvorima biološkog materijala:

1. Klasična- za istraživanje se uzima venska krv (10-20 ml). Kod trudnica može biti potrebno uzimanje uzorka amnionske tekućine za dijagnozu. U nekim slučajevima stanice se uzimaju iz koštane srži. Kromosomi se boje i ispituju svjetlosnim mikroskopom.
2. NEBO (spektralno)- nova tehnika, koja se smatra najučinkovitijom, jer vam omogućuje vizualno i brzo prepoznavanje kršenja. U ovom slučaju, dijelovi kromosoma se otkrivaju pomoću fluorescentnih oznaka bez stanične kulture. Koristi se kada standardna kariotipizacija nije uspjela.
3. FISH analiza (fluorescentna hibridizacija)- studija se provodi na poseban način i uključuje specifično vezanje određenih dijelova kromosoma i fluorescentnih oznaka. Za laboratorijsku dijagnostiku uzimaju se embrionalne stanice ili ejakulat.

Da bi se dobio najtočniji rezultat, krvni test se provodi zajedno s drugim, ne manje informativnim, genetskim testovima.

Kako dešifrirati

Genetičar se bavi postavljanjem dijagnoze na temelju rezultata kariotipizacije. Specijalist provodi temeljitu analizu i donosi zaključak u kojem ukazuje na uzroke kršenja reproduktivnih funkcija ili rođenja nezdravog djeteta.

Dešifriranje analize omogućuje vam određivanje sljedećih genetskih poremećaja:

• prisutnost genetski različitih stanica;
• kretanje dijelova genetskog koda;
• preokret ili duplikacija kromosoma;
• odsutnost jednog fragmenta ili prisutnost dodatnog.

Uz pomoć kariotipizacije moguće je utvrditi predispoziciju za razvoj hipertenzije, artritisa, infarkta miokarda, moždanog udara i dijabetes melitusa. Zahvaljujući ovoj analizi tisuće parova otkrilo je uzrok neplodnosti i uspješno izliječilo postojeće poremećaje u organizmu.

Odstupanja su moguća i sa strane muškog i sa strane ženskog tijela. Normalni pokazatelji:

• kod muškaraca - 46XY;
• kod žena - 46XX.

U djece se uočavaju sljedeća kršenja genetskog koda:

1. 47XX + 21 ili 47XY + 21 - Downov sindrom (prisutnost dodatnog kromosoma).
2. 47XX + 13 ili 47XY + 13 - Patauov sindrom.

Postoje i druga odstupanja od norme, koja su manje opasna. Samo genetičar može objasniti rizike nezdravog djeteta za svaki pojedinačni slučaj. Ako su tijekom kariotipizacije pronađeni opasni poremećaji ili mutacije, liječnik preporučuje prekid trudnoće.

Kariotipizacija daje procjenu ne samo broja, već i stanja gena:

• Mutacije koje uzrokuju stvaranje tromba, ometajući prehranu malih krvnih žila u vrijeme formiranja posteljice, što je uzrok pobačaja.
• Patologije iz gena cistične fibroze, kako bi se isključila vjerojatnost razvoja određene bolesti kod djeteta.
• Poremećaji gena iz Y-kromosoma.
• Odstupanja od gena koji su odgovorni za sposobnost dekontaminacije toksičnih čimbenika.

Kada se otkrije delecija (gubitak mjesta) u Y kromosomu, govorimo o muškoj neplodnosti zbog poremećene spermatogeneze. To je uzrok nasljednih bolesti.

Što učiniti ako se pronađu odstupanja

Kako bi se isključila mogućnost genetskih abnormalnosti u djeteta, potrebno je provjeriti kariotip oba roditelja čak i prije začeća. U prisutnosti genetskih poremećaja, liječnik će objasniti moguće rizike. Nemojte paničariti pri otkrivanju kromosomskih mutacija. Čak iu ovom slučaju moguće je izdržati trudnoću i roditi zdravo dijete ako se dijete pronađe, slijedeći preporuke liječnika.

Planiranje djeteta omogućuje vam da pripremite tijelo majke i oca za rođenje zdravog potomstva i odredite rizike od nezdrave djece. Čak i nakon što žena ostane trudna, kariotipizacija se može napraviti u prvom tjednu kako bi se procijenili mogući rizici, što omogućuje pravovremeno poduzimanje mjera za sprječavanje pobačaja. U prisustvu ozbiljnih genetskih mutacija, odluku o prekidu trudnoće donosi par. Liječnik samo ukazuje na moguće posljedice i daje preporuke ako je prekid potreban.

Zaključak

Genetika je danas posrnula razvijena znanstvena grana. Uz pomoć suvremenih dijagnostičkih testova moguće je identificirati stalna odstupanja u početnim oblicima progresije i poduzeti mjere za borbu protiv njih. Zahvaljujući kariotipizaciji moguće je izliječiti neplodnost, spriječiti ponovljene pobačaje i isključiti mogućnost rađanja djece s genetskom mutacijom. Prilikom planiranja obitelji, neće biti suvišno provjeriti genetsku kompatibilnost.

Često su odstupanja u razvoju i poteškoće sa začećem djeteta povezane s poremećajima koji su naslijeđeni. Ako jedan od roditelja ima rođake koji pate od genetskih bolesti, ili je on sam nositelj, preporučljivo je proći pregled prije planiranja rođenja djeteta. Liječnici uzimaju analizu kariotipa ako sumnjaju na patologiju kromosoma ili DNA molekula. Za studiju se krv uzima od pacijenta i tretira sastavom za bojanje. Nakon obrade pod mikroskopom proučava se veličina, oblik i broj kromosoma.

Definicija

Kariotip je pojedinačni skup kromosoma koji ima svoje karakteristike za svaku specifičnu biološku vrstu i jedinku. Osoba ima samo 23 para kromosoma, odnosno ukupno 46. Od dvadeset i tri para samo jedan određuje spol, a ostali nemaju razlike u strukturi. Genetska analiza kariotipa omogućuje vam prepoznavanje odstupanja u sastavu ili strukturi kromosoma. Zahvaljujući ovoj studiji, liječnici mogu pravovremeno poduzeti mjere kako patologija ne bi izazvala ozbiljne komplikacije, sve do smrti fetusa.

Važno! Budućim roditeljima dovoljno je napraviti kariotipizaciju jednom u životu kako bi se uvjerili da nema ili postoji patologija.

Kada napraviti test

Analiza je relevantna za ljude bilo koje dobi, jer nisu svi bili pregledani od strane genetičara od ranog djetinjstva. Nema kontraindikacija za trudnice i dojilje. Ali prije svega, potrebna su istraživanja za novorođenčad, za koje će rana dijagnoza pomoći u prepoznavanju opasnih genetskih bolesti koje utječu na očekivani životni vijek. Analiza kariotipa supružnika u bolnici često se provodi prema propisu liječnika, ali ne znaju svi kakav je to pregled. Za parove koji žele imati dijete pregled je indiciran u sljedećim slučajevima:

• Nakon opetovanih neuspješnih pokušaja začeća.
• Povreda menstrualnog ciklusa.
• Ako je prije bilo pobačaja ili su rođena mrtva djeca.
• U djece rođene ranije zabilježeno je zaostajanje u mentalnom ili tjelesnom razvoju.
• Već u fazi trudnoće fetus ima poremećaje u razvoju.
• Ako su buduća majka i otac bliski rođaci.
• Ako jedan od roditelja ima loše navike.
• Život u regiji s nepovoljnim ekološkim uvjetima ili rad u opasnoj industriji.
• Planiranje prve trudnoće nakon 35 godina - razlog leži u činjenici da se s godinama kromosomi mogu promijeniti.
• Ako roditelji imaju genetske bolesti, čak i ako su prije rođena zdrava djeca.

Pažnja! Moderni liječnici savjetuju svim parovima da se testiraju, jer nema svaki nositelj patologije, pa mnogi čak i ne sumnjaju na njih.

Problemi, sve do neplodnosti, otkrivaju se kada osoba odluči imati dijete.

Kako se studija radi

Analiza se provodi tijekom razdoblja metafaze, čije je trajanje od dvije do deset minuta. Tu je najlakše vidjeti kromosome pod mikroskopom. Postoje tri načina otkrivanja anomalija – molekularni, citogenetski i molekularno ciljani. Liječnik bi trebao odabrati jednu ili drugu metodu. Prije analize kariotipa potrebno je pripremiti:

• Da biste izliječili prehladu, ako je osoba bolesna, tada možete uzeti analizu najranije dva tjedna nakon oporavka.
• 30 dana prije odlaska u bolnicu odbijte uzimanje antibiotika ili smanjite njihovu potrošnju prema uputama liječnika.
• Nemojte piti alkohol tri dana prije testiranja.
• Na dan testa morate imati obilan doručak.

Za analizu se uzima venska krv. Materijal dobiven od pacijenta tretira se bojom kako bi se otkrili kromosomi. Zatim liječnik uzima nekoliko slika koje vam omogućuju određivanje broja molekula DNK i patoloških promjena.

Važno. Molekularna metoda je neophodna za otkrivanje malih područja strukturnih anomalija kromosoma manjih od 5 milijuna nukleotida.

Za detaljniju dijagnostiku koristi se proširena ili ciljana molekularna metoda.

Kako dešifrirati

Za predstavnike jačeg spola normalni rezultati analize kariotipa su 46, XY, a za žene - 46, XX. Broj 46 označava broj kromosoma u normi, a X i Y na kraju označavaju oblik, strukturu i veličinu zdrave osobe - za muškarce i žene ti se pokazatelji razlikuju. Na temelju rezultata pretraga liječnik će napraviti nekoliko oznaka na obrascu. Razumijevanje medicinskih pojmova pomoći će u njihovom dešifriranju:

1. Translokacija - došlo je do preuređivanja kromosoma. Ako pacijent ima uravnoteženu translokaciju, tada se najvjerojatnije neće manifestirati. Ako je neuravnotežen, moguća su ozbiljna odstupanja.
2. Mozaicizam - Pronađene su stanice s genetskim svojstvima koja se razlikuju od normalnih.
3. Trisomija - ova se patologija javlja najčešće, kod pacijenta se otkriva dodatni kromosom. Najčešća pojava je pojava kopije 21. kromosoma, što dovodi do bolesti kao što je Downov sindrom.
4. Inverzija - dio kromosoma je zakrenut za 180 stupnjeva.
5. Monosomija - u genotipu samo jedan od parova homolognih kromosoma.
6. Delecija – izgubljen je fragment kromosoma.

Što učiniti ako se pronađu odstupanja

Ne biste trebali pretpostaviti da anomalije u analizi karinotipa uvijek ukazuju na to da će bračni par imati bolesno dijete ili da će biti potpuno bez djece. Na primjer, roditelji s uravnoteženom translokacijom mogu imati zdravu bebu koja nema kromosomske abnormalnosti. Čak i ako su cijene analize kariotipa visoke i počinju od tri tisuće rubalja, nepoželjno je odbiti. Možda će vam liječnik na temelju rezultata savjetovati da se podvrgnete liječenju i tek tada planirate trudnoću.

Pažnja! Ako žena zna da će imati dijete s patologijama, mora obratiti pozornost na zdrav način života i slijediti preporuke liječnika.

Genetske abnormalnosti mogu se odvijati na različite načine. S trisomijom trinaestog i osamnaestog kromosoma djeca umiru u prvoj godini života. Osobe s Downovim sindromom su mentalno retardirane, ali je stopa smrtnosti znatno niža nego kod sličnih bolesti. Anomalije spolnih kromosoma, kao što je Shereshevsky-Turnerov sindrom, često dovode do neplodnosti, ali osoba s ovim poremećajima može doživjeti duboku starost. A s monosomijom X, oko 5% žena ima priliku roditi dijete. Važno je konzultirati genetičara koji će točno dijagnosticirati. Genetska bolest se ne može u potpunosti izliječiti, ali ako se redovito liječi, kvaliteta života će se poboljšati.