Diagnosticum Salmonella eritrocit vi antigenska tekućina. Diagnosticum eritrocita Salmonella V-antigenic

Set reagensa Diagnosticum Salmonella VI-antigenic namijenjen je detekciji u ljudskom krvnom serumu specifičnih protutijela na V-antigen Salmonella typhoid u reakciji pasivne hemaglutinacije (RPHA).

1. KARAKTERISTIKE KOMPLETA

2.1. Princip metode.

Aktivni princip Diagnosticum Salmonella VI-antigenic je V-antigen fiksiran na površini eritrocita. U interakciji sa serumima koji sadrže antitijela na Vee antigen, opaža se fenomen aglutinacije eritrocita.

2.2. SASTAV KOMPLETA

Reagensi	Količina
Diagnosticum eritrocitna Salmonella V-antigenska tekućina- predstavlja 1% suspenziju formaliniziranih i senzibiliziranih Vi-antigenom eritrocita tifusa Salmonele ovaca u otopini fosfatnog pufera (pH 7,2). + 0,2; koncentracija 0,06 mol/l). Homogena suspenzija smeđe boje bez pahuljica; prilikom taloženja nastaju 2 sloja: gusti smeđi sediment eritrocita i prozirni žućkasti supernatant	1 bočica - 6 ml
Serumski dijagnostički adsorbirani receptor salmonele Vee dry — homogena masa od bijele sa smećkastom nijansom do bež	1 bočica - od 0,1 ml
1% suspenzija formaliziranih, nesenzibiliziranih ovčjih eritrocita- homogena suspenzija smeđe boje bez pahuljica; prilikom taloženja nastaju 2 sloja: gusti smeđi sediment eritrocita i prozirni žućkasti supernatant	1 bočica -
Otopina za razrjeđivanje seruma i postavljanje RPHA - 0,9% otopina natrijevog klorida je bistra, bezbojna tekućina, pH 6,5 do 7,5	2 bočice - svaka po 8 ml
Ploča s okruglim dnom za imunološke reakcije za jednokratnu upotrebu — sastoji se od 8 redova, od kojih svaki uključuje 12 rupa s prozirnim, bezbojnim, okruglim dnom	1 kom

1. ANALITIČKE I DIJAGNOSTIČKE ZNAČAJKE.

3.1. Diagnostikum treba aglutinirati u RPHA sa suhim serumom dijagnostičkog receptora B adsorbiranog Salmonella u razrjeđenju od najmanje 1:160.

Uvjetnom razinom dijagnostičkih karakteristika krvnog seruma zdravih ljudi treba smatrati razrjeđenje seruma ne veće od 1:20.

3.2. Vrijeme analize je 2 sata.

3.3. Set je dizajniran za 8 definicija.

1. MJERE OPREZA

Pri radu s kompletom treba se pridržavati "Pravila za dizajn, sigurnosne mjere opreza, industrijsku sanitariju, protuepidemijski režim i osobnu higijenu pri radu u laboratorijima (odjelima, odjelima) sanitarnih i epidemioloških ustanova sustava Ministarstva Zdravlje SSSR-a (M., 1981).

Analizirane serume, kao i reagense koji su s njima u kontaktu, treba smatrati potencijalno infektivnima, sposobnima zadržati ili prenijeti HIV, virus hepatitisa ili bilo koji drugi uzročnik virusne infekcije kroz dulje vrijeme i s njima treba pažljivo postupati:

• raditi u gumenim rukavicama;
• kod pipetiranja potrebno je koristiti automatske pipete;
• na kraju rada, analizirane serume i reagense u kontaktu s njima, instrumente, treba tretirati otopinom za dezinfekciju
• Opremu prije i poslije rada obrišite 70% etilnim alkoholom.

Analizirani serumi moraju biti inaktivirani na 56 0 C tijekom 30 minuta.

Suhi inaktivirani serum Vee za dijagnostiku adsorbiranog receptora salmonele uključen je u komplet.

Objektivni rezultati analize zajamčeni su pod sljedećim uvjetima:

• skladištenje svih reagensa kompleta treba provoditi na temperaturi od 2 do 8 0 C;
• nemojte koristiti reagense kojima je istekao rok trajanja;
• nemojte koristiti reagense iz kompleta ako nisu odgovarajuće označeni na pakiranju;
• za RPHA, koristite reagense uključene samo u ovaj komplet.

Vi-Diagnosticum

Diagnosticum Vee

Vi-antigeni

Dobro proveden krvni test pomaže u otkrivanju uzročnika različitih složenih bolesti u tijelu u ranim fazama njihovog razvoja, a ponekad čak i prije pojave kliničkih simptoma bolesti. Vrlo često liječnici pacijentima propisuju analizu za reakciju aglutinacije. Zatim ćemo se pozabaviti činjenicom da je ovo RPHA krvni test, kada se koristi i o čemu može govoriti?

Princip rada

Reakcija neizravne hemaglutinacije (također nazvana reakcija pasivne hemaglutinacije, poznata i kao RPHA, RNHA) događa se kada su eritrociti koji adsorbiraju antigen izloženi imunološkom serumu koji odgovara tom antigenu.

Istraživanja su pokazala da je ova metoda znatno superiornija u odnosu na druge serološke testove u specifičnosti i osjetljivosti. Stoga se često koristi za otkrivanje bolesti uzrokovanih bakterijama ili rikecijama. Kao antigeni za takvu analizu mogu poslužiti bakterijski ekstrakti, pročišćeni antigeni raznih mikroba, komponente bakterijskih cjepiva.

Nakon što patogena bakterija uđe u ljudsko tijelo, u njemu se počinju proizvoditi specifična i nespecifična protutijela, tvoreći određeni imunološki odgovor. U slučaju sifilisa, za koji se smatra da ga uzrokuje blijeda treponema, u ljudskoj krvi stvaraju se gram-negativna spiroheta, netreponemska ili treponemska protutijela. Na njihovom otkrivanju temelje se laboratorijske dijagnostičke studije koje bi trebale potvrditi ili opovrgnuti prisutnost uzročnika virusa u tijelu.

S RPHA, eritrociti, čija je površina adsorbirala antigene blijede treponeme, u slučaju dodatka seruma s antitijelima na treponemu iz materijala osobe zaražene sifilisom, međusobno se lijepe, odnosno dolazi do njihove aglutinacije.

Pouzdanost studije

Važno je zapamtiti da se antitijela na spirochete pallidum počinju pojavljivati ​​u tijelu zaraženih ljudi 2-4 tjedna nakon infekcije, au nekim slučajevima to se razdoblje može produljiti i do 6 tjedana.

Iz tog razloga, osjetljivost analize za RPHA u primarnoj fazi razvoja bolesti je oko 86%, što je značajno inferiorno u odnosu na točnost dijagnosticiranja pacijenata u sljedeće dvije faze. Osjetljivost analize za takve pacijente, kao i za nositelje latentnog sifilisa, doseže 99-100%.

Međutim, reakcija pasivne hemaglutinacije ima vrlo visoku specifičnost, koja doseže razinu od 96-100%.

To omogućuje korištenje ovog pregleda za potvrdu dijagnoze u slučaju pozitivne reakcije preliminarne ne-treponemske studije, na primjer, reakcija mikroprecipitacije raka mokraćnog mjehura.

S obzirom na to da osjetljivost treponemskih testova, pa tako i TPHA, znatno premašuje osjetljivost netreponemskih metoda, takvi se testovi sve češće propisuju za testove probira na sifilis. Međutim, kada se dobije pozitivna reakcija probira, potrebna je još jedna specifična (treponemska) analiza za razjašnjenje dijagnoze, ali ne i TPHA.

Dešifriranje analize

Kada se reagensu s kojim se provodi studija doda serum s antitijelima na treponemu iz materijala osobe zaražene sifilisom, dolazi do aglutinacije eritrocita, zbog čega se oni talože.

Na broj slijepljenih eritrocita utječe razina antitijela u serumu. Stoga pasivna hemaglutinacija ne samo da pokazuje prisutnost protutijela, već vam također omogućuje postavljanje njihovog broja. Rezultat studije predstavljen je razinom titra antitijela.

Pozitivna reakcija ukazuje na prisutnost patogena u tijelu pacijenta. Međutim, tijekom dijagnostičkog procesa može doći do lažno pozitivnih reakcija, čiji broj statistički ne prelazi razinu od 0,05-2,5% od ukupnog broja istraživanja.

Pozitivna reakcija TPHA kod ljudi koji nisu zaraženi sifilisom može se pojaviti ako postoji:

• sistemske bolesti vezivnog tkiva,
• u krvi pacijenta antitijela na patogene slične blijedom treponemu,
• fiziološke patologije, kao što je infarkt miokarda,
• hepatitis B ili C
• onkološke bolesti,
• tifus, leptospiroza, tuberkuloza,
• HIV infekcija
• borelioza etiologije koju prenose krpelji,
• opsežne ozljede ili prijelomi,
• trudnoća,
• u slučaju injekcija lijekova.

U većini slučajeva lažno pozitivne reakcije popraćene su niskim titrom. Visoki titri tipični su za sekundarni stadij bolesti i prethodno latentni sifilis. No, mogu se pojaviti i s lažno pozitivnom reakcijom u bolesnika s malignim novotvorinama.

U osoba koje su barem jednom imale sifilis, reakcija RPHA ostaje pozitivna do kraja života.

Rijetke iznimke su situacije kada je bolest otkrivena u ranoj fazi razvoja, nakon čega je provedena intenzivna i učinkovita terapija. Stoga se analiza TPHA ne može koristiti za procjenu dinamike oporavka ili komparativnu dijagnozu ranih ili kasnih stadija bolesti.

Po primitku pozitivne reakcije potrebno je pregledati članove obitelji oboljele osobe i osobe koje su imale spolni kontakt s njim.

Negativna reakcija može se dobiti u sljedećim slučajevima:

• osoba nema sifilis,
• pogrešno uzeta krv za istraživanje,
• Prošla su 2-4 tjedna od infekcije, a proizvodnja antitijela još nije počela.

U svakom slučaju, rezultat studije mora se procijeniti u kombinaciji s dodatnim laboratorijskim i anamnestičkim pokazateljima.

Kome se pokazuje analiza?

Liječnik može uputiti davanje krvi za pacijente s RPHA u sljedećim slučajevima:

• u prisutnosti kliničkih manifestacija sifilisa: ulcerativni osip, povećani limfni čvorovi, difuzna alopecija i drugi,
• ako sumnjate na moguću infekciju u slučaju kontakta s već oboljelim osobama,
• darivatelji voljni darovati krv,
• osobe koje prolaze godišnje preventivne preglede ili sastavljaju sanitarne knjižice,
• pacijenti s pozitivnim testom probira,
• prije prijema u bolnicu,
• tijekom prijeoperativnog pregleda
• za otkrivanje uzročnika salmoneloze, difterije, dizenterije metodom provođenja RPHA s odgovarajućim dijagnostikumom.

Postupak istraživanja

Na pregled se šalje uzorak venske krvi koji pacijent preda. Kako ne biste dobili pogrešan zaključak, pacijent bi trebao biti odgovoran za pripremu analize. Kako bi rezultati ispitivanja bili pouzdani, potrebno je pridržavati se sljedećih preporuka:

• Analizu treba uzeti samo na prazan želudac.
• Na dan analize možete piti mineralnu vodu bez plina u minimalnim količinama.
• Ne smijete pušiti najmanje 30 minuta prije testa, ali je bolje to vrijeme produžiti na nekoliko sati.
• Uvedena je izravna zabrana konzumacije alkoholnih pića.
• Pacijenti koji trebaju redovito uzimati bilo kakve lijekove trebaju o tome svakako obavijestiti svog liječnika.
• Ako se ne osjećate dobro ili se ne osjećate dobro, trebate obavijestiti medicinsku sestru koja vadi krv ili liječnika u ambulanti u kojoj trebate obaviti pretragu.

Budite odgovorni ne samo prema pitanju gdje polagati ispit, već i prema pripremi za ispit.

Dijagnostika drugih zaraznih bolesti

Ne treba misliti da se takva studija kao RPGA može provesti samo za identifikaciju uzročnika sifilisa u tijelu.

Analiza s dijagnostikumom salmonele omogućuje vam prepoznavanje prisutnosti infekcije u probavnom sustavu - salmonele. Počevši od četvrtog dana nakon infekcije, tijelo proizvodi antitijela na antigene salmonele, koja se mogu otkriti metodom RPGA. Negativan rezultat ukazuje na odsutnost infekcije, a pozitivan titar, koji se povećava od 1:200 do 1:800 u akutnoj fazi, ukazuje na njezinu prisutnost.

Metoda provođenja RPHA s markerom difterije omogućuje dijagnosticiranje difterije i procjenu imuniteta nakon cijepljenja. Protutijela imunološki sustav počinje proizvoditi već sljedeći dan nakon infekcije, a u tijelu ostaju nekoliko tjedana. Osjetljivost ove analize premašuje bakteriološku metodu istraživanja. Titar 1:80 potvrđuje prisutnost difterije u tijelu.

Dizenterični marker u RPHA najpreciznije otkriva šigelozu (bacilarnu dizenteriju), čak i u usporedbi s laboratorijskom dijagnostičkom metodom bakterijskom kulturom. Ako pacijent ne dobije visokokvalitetno liječenje, tada bolest prelazi u kronični proces, u kojem se često javljaju recidivi. Analiza omogućuje dijagnosticiranje akutne i kronične faze proljeva, prepoznavanje uzročnika dizenterije, razlikovanje bakterijske šigeloze od kolorektalnog karcinoma, endokrinih poremećaja ili upale debelog crijeva. Negativna reakcija ukazuje na odsutnost bacila, a potvrđuje njegovu prisutnost titrom 1:80 za bebe ili 1:320 za odrasle.

Provođenje studije s markerom za ospice omogućuje određivanje bolesti s ospicama. Takav pregled može biti alternativa često rađenoj HI analizi za dijagnozu ospica.

Dakle, RPHA krvni test - što je to? Ukratko, možemo sa sigurnošću reći da je ovo moderna, vrlo osjetljiva i pouzdana metoda za dijagnosticiranje različitih bolesti bakteriološke etiologije.

U kontaktu s

Potvrda o registraciji broj RZN 2016/3905 od 04.04.2016.

Svrha

Komplet reagensa "Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigenic for RPHA" (SED-Vi) dizajniran je za otkrivanje protutijela na Vi-antigen uzročnika trbušnog tifusa u ljudskim krvnim serumima testom pasivne hemaglutinacije (RPHA).

Postavite karakteristiku

Princip rada

U prisutnosti protutijela na uzročnika trbušnog tifusa uočava se hemaglutinacija pilećih eritrocita senzibiliziranih Vi-antigenom, što dovodi do stvaranja "kišobrana" nataloženih eritrocita na dnu jažica u obliku slova U. tableta. U nedostatku protutijela na uzročnika trbušnog tifusa, nataloženi eritrociti čine "točku".

Postavite sastav

Naziv reagensa	Opis	Količina u setu
Dijagnostikum eritrocita Salmonella Vi-antigenski, suhi 6% (SED)	Formalizirani kokošji eritrociti senzibilizirani antigenom S.typhi Vi. Suha higroskopna masa smeđe boje. Nakon otapanja - suspenzija crveno-smeđe boje.	1 bočica, od 0,6 ml
Adsorbirana dijagnostička salmonela u serumu, Vi receptor, suhi (razrijeđen 1:20, (K+))	Salmonella adsorbirani zečji serum, Vi receptor, razrijeđen 1:20. Suha higroskopna porozna masa bijele boje. Nakon otapanja, to je bistra žućkasta ili bezbojna tekućina.	1 bočica, od 0,3 ml
Razrjeđivač uzorka (RID)	Bistra plavo-ljubičasta tekućina.	1 bočica, 10 ml
Otopina fosfatnog pufera (PBS)	Prozirna bezbojna tekućina.	1 bočica, 10 ml
Polimerna ploča za jednokratnu upotrebu za imunološke reakcije	Jednokratna polimerna ploča za imunološke reakcije od prozirnog bezbojnog polistirena.	1 kom.

Dijagnostičke karakteristike

Diagnostikum treba aglutinirati u RPHA s dijagnostičkim adsorbiranim serumom salmonele, Vi receptor, suhim (u razrjeđenju 1:20), do titra naznačenog na etiketi seruma. Uvjetnom razinom dijagnostičkih karakteristika krvnog seruma zdravih ljudi treba smatrati razrjeđenje seruma ne veće od 1:20. Vrijeme analize je 3040 minuta. Komplet je dizajniran za proučavanje 42 krvna seruma u opciji probira ili 10 krvnih seruma u opciji titracije.

Mjere opreza

Komplet je samo za in vitro dijagnostičku upotrebu. Tvari uključene u komponente kompleta su inaktivirane i sigurne. Pri radu s kompletom treba se pridržavati SP 1.3.2322-08 i SanPiN 2.1.7.2790-10.

Dodatna oprema i materijali

Oprema, materijali, rješenja:

• 1-kanalni dozatori za pipete s promjenjivim volumenom doziranja 5-40 µl; 40 - 200 µl; 200 - 1000 µl i 1000 - 5000 µl;
• dozatori za pipete 8- ili 12-kanalni s promjenjivim volumenom doziranja 5-40 µl i 40-200 µl;
• destilirana voda (GOST 6709-72).

Analizirani uzorci

Ispitivani uzorci krvnog seruma čuvaju se na temperaturi od 2 do 8 °C najdulje 3 dana od trenutka uzimanja krvi. Dopušteno je čuvati sirutku u smrznutom stanju na temperaturi ne višoj od minus 18 ° C ne više od 1 godine. Prije upotrebe uzorci se odmrzavaju na temperaturi od 16 do 25 °C i miješaju mućkanjem. Ponovno zamrzavanje nije dopušteno. Ne smiju se koristiti uzorci s bakterijskim rastom i hemolizom. Prije postavljanja reakcije, ispitni se serumi zagrijavaju na 56 °C 30 minuta.

Provođenje analize

Izrada kontrolnog dijagnostičkog seruma (K+)

Pripremite radnu otopinu dijagnostičkog adsorbiranog seruma za salmonele, Vi receptor, suhi (razrijeđen 1:20) od 0,3 ml (K+). U tu svrhu dodaje se 0,3 ml otopine fosfatnog pufera (PBS) u sadržaj bočice s K+. Preostala količina seruma može se alikvotirati i čuvati zamrznuta na temperaturi ne višoj od minus 18 °C ne dulje od 6 mjeseci.

Izrada dijagnostikuma za eritrocitne salmonele (SED)

Za pripremu radnog razrjeđenja suspenzije dijagnostikuma eritrocita salmonele u sadržaj bočice sa suhim 6% SED-om doda se 0,6 ml destilirane vode i ostavi hidratizirati 2 sata na temperaturi od 16 do 25 °C. Zatim se u otopinu doda 2,4 ml otopine fosfatnog pufera (PBS). Radna otopina se čuva na temperaturi od 2 do 8 °C ne dulje od 1 mjeseca. Zamrzavanje nije dopušteno.

Izjava RPHA tijekom probira krvnih seruma

Serumi za probir razrjeđuju se u jažicama ploče na sljedeći način:

• preliminarna razrjeđenja od 1:20 pripremaju se u prvim jažicama tablete, prvo im se dodaje 190 μl RIP otopine, a zatim 10 μl proučavanih seruma. Svaki se serum dodaje posebnim vrhom i pažljivo pipetira (u ovom slučaju, boja otopine u jažicama nakon dodavanja seruma trebala bi se promijeniti iz plavo-ljubičaste u zelenu);
• u drugim jažicama pripremaju se probirna razrjeđenja od 1:40, prvo se u njih unosi 25 µl otopine PBS-a, a zatim 25 µl prethodno razrijeđenog seruma i pažljivo se pipetira.

Uz svaku postavku RPHA potrebno je provesti kontrolno određivanje K + titra. Da biste to učinili, 50 μl PBS otopine doda se u 8 jažica dugog reda. Zatim se u prvu jažicu doda 50 µl K+ radne otopine (1:20), pažljivo se pipetira i prenese u sljedeću jažicu, po 50 µl svaku, dobivši dvostruka razrjeđenja od 1:40 do 1:5120. U druge 4 jažice dodano je 50 μl otopine PBS-a za kontrolu SED-a na odsutnost spontane hemaglutinacije.

U sve jažice tablete s probirnim razrjeđenjima proučavanih seruma (osim prve koja sadrži RIP) i kontrole dodajte 25 μl SED. SED suspenziju prije upotrebe promiješajte u bočici ili kadi! Tableta se dobro protrese i ostavi na temperaturi od 16 do 25°C 30 do 40 minuta do potpune sedimentacije eritrocita u kontroli.

Izjava RPHA tijekom titracije proučavanih krvnih seruma

Titracija ispitivanih seruma i K+ radne otopine provodi se u kratkim redovima ploče. Drugi kratki red koristi se za kontrolu odsutnosti spontane hemaglutinacije EDS-a.

U prve jažice kratkih redova za titraciju ispitivanog seruma dodaje se 180 μl RIP otopine. Sve ostale jažice napunjene su s 50 µl PBS otopine.

U jažice s RIP otopinom doda se 20 μl testnih seruma (dobije se razrjeđenje 1:10). Svaki serum dodaje se vrhom i pažljivo se pipetira (boja otopine u jažicama trebala bi se promijeniti iz plavoljubičaste u zelenu). Zatim se 50 μl prenese iz prve jažice u sljedeću jažicu redaka, dobivajući dvostruka razrjeđenja od 1:20 do 1:1280. Na kraju titracije, 50 μl otopina se ukloni iz zadnjih jažica.

Uz svaku postavku RPHA potrebno je provesti kontrolno određivanje K + titra. Da biste to učinili, 50 μl PBS otopine doda se u 8 jažica dugog reda. Zatim se u prvu jažicu doda 50 µl K+ radne otopine (1:20), pažljivo se pipetira i prenese u sljedeću jažicu, po 50 µl svaku, dobivši dvostruka razrjeđenja od 1:40 do 1:5120.

Za kontrolu dijagnostikuma za odsutnost spontane hemaglutinacije, 50 μl PBS otopine se doda u sve jažice kratkog reda.

U sve jažice (osim prve jažice svakog reda za proučavane serume koji sadrže RIP) dodajte 25 µl SED. SED suspenziju prije upotrebe promiješajte u bočici ili kadi! Tableta se dobro protrese i ostavi na temperaturi od 16 do 25°C 30 - 40 minuta do potpune sedimentacije eritrocita u kontroli.

Računovodstvo i interpretacija rezultata

Obračunavanje rezultata u probiru krvnih seruma

Računovodstvo za rezultate provodi se na uvjetnoj ljestvici od četiri križa. Titar seruma je njegovo razrjeđenje, koje daje hemaglutinaciju s najmanje 3 (+++) križanja.

• ++++ (4+) - aglutinirani eritrociti tvore obrnuti "kišobran" na dnu rupice, rubovi mu otpadaju;
• +++ (3+) - aglutinirani eritrociti tvore obrnuti "kišobran" na dnu rupice, rubovi su mu ravni;
• ++ (2+) - uz aglutinirane eritrocite na dnu rupice nalazi se i sediment u obliku malog "prstena" neaglutiniranih eritrocita;
• + (1+) - većina eritrocita nije aglutinirana i taloži se u obliku malog "prstena";
• (-) - neaglutinirani eritrociti formiraju "točku" na dnu jažice.

Pozitivnim rezultatom smatra se hemaglutinacija eritrocita opterećenih Vi-antigenom najmanje 3 križanja (+++).

Kontrola kvalitete dijagnostikuma su 4 jažice kontrolnog reda, u koje su dodane samo PBS otopina i SED. U ovim jažicama ne bi trebalo biti spontane hemaglutinacije – reakcija je negativna (-). U suprotnom, studiju treba ponoviti. Ako se hemaglutinacija pojavi tijekom restaginga, tada se lijek ne koristi.

Za serume s negativnim rezultatom treba smatrati da ne sadrže protutijela na Vi antigen u dijagnostičkom titru od 1:40 i nižem.

Serume koji daju pozitivan rezultat u razrjeđenju 1:40 potrebno je ponovno ispitati u varijanti s titracijom seruma kako bi se utvrdio njegov titar.

Računanje rezultata pri titraciji krvnog seruma

Titar seruma je njegovo razrjeđenje, koje daje hemaglutinaciju s najmanje 3 (+++) križanja.

Kontrola kvalitete dijagnostikuma su jažice reda za kontrolu SED. U ovim jažicama ne bi trebalo biti spontane hemaglutinacije – reakcija je negativna (-). U suprotnom, studiju treba ponoviti. Ako se hemaglutinacija pojavi tijekom restaginga, tada se lijek ne koristi.

Aktivni početak dijagnostikuma je V-antigen fiksiran na površini eritrocita. U interakciji sa serumima koji sadrže antitijela na Vee antigen, opaža se fenomen aglutinacije eritrocita.

Obrazac za otpuštanje

Proizvedeno u setu 1 bočica s dijagnostikumom - 3 ml, dijagnostički serumski adsorbirani receptor salmonele Vee Dry u obliku liofilizata od 0,1 ml 1 bočica; 0,9% otopina natrijevog klorida - 2 boce od 8 ml; tableta za imunološke reakcije za jednokratnu upotrebu - 1 kom.

Spoj

Količina reagensa:

Dijagnostikum eritrocitne salmoneloze V-antigenski, koji je 0,75% suspenzija formaliziranih i senzibiliziranih V-antigenom ljudskih eritrocita O (I) krvne grupe u otopini fosfatnog pufera (pH-7,2 ± 0,2; koncentracija - 0,06 mol/l) . Konzervans - formalin. Homogena suspenzija smeđe boje bez pahuljica; kada se taloži, formiraju se 2 sloja: gusti smeđi sediment eritrocita i prozirna žućkasta supernatantna tekućina 1 bočica-3 ml.

Serumski dijagnostički receptor za salmonelu adsorbirani Vee dry - homogena masa od bijele sa smećkastom bojom do bež. 1 bočica - od 0,1 ml.

Otopina za održavanje - 0,9% otopina natrijevog klorida - bistra, bezbojna tekućina, pH 6,5 do 7,5. 2 bočice - 8 ml.

Ploča s okruglim dnom za jednokratnu imunološku reakciju - sastoji se od 8 redova, od kojih svaki uključuje 12 jažica s prozirnim, bezbojnim, okruglim dnom. 1 kom.

Diagnostikum treba aglutinirati u RPHA sa suhim serumom dijagnostičkih salmonela adsorbiranih receptora B u razrjeđenju ne nižem od 1/2 njihovog titra, ali ne manje od 1/160. Diagnostikum se ne smije aglutinirati suhim adsorbiranim dijagnostičkim serumima salmonele za RA: O receptor 9 - u razrjeđenju 1:40 i više, H receptor d - u razrjeđenju 1:10 i više.


Indikacije za upotrebu

Namijenjen je detekciji u ljudskom krvnom serumu specifičnih antitijela na V-antigen salmonele tifusa u reakciji pasivne hemaglutinacije (RPHA).

Režim doziranja i način primjene

Kao analizirani uzorci koriste se uzorci seruma ljudske krvi.
Analizirani uzorak čuva se u uvjetima koji sprječavaju razvoj bakterija na temperaturi od 2 do 8 °C ne dulje od 72 sata. Zamrzavanje je dopušteno, smrznute analizirane uzorke treba otopiti na sobnoj temperaturi prije testiranja.
Nije dopuštena analiza uzoraka s izraženom hemolizom, bakterijskim rastom, kao i onih koji su pohranjeni dulje vrijeme bez zamrzavanja ili ponovnog zamrzavanja.

ANALIZA
Priprema otopina za RPHA.
Osušite otvorene bočice sa serumom dijagnostičkog receptora V adsorbiranog Salmonella i dodajte 1 ml priložene 0,9% otopine natrijevog klorida, čime se dobije razrjeđenje 1:10, što je radno razrjeđenje.
Otvorena bočica sa serumom dijagnostičkog adsorbiranog receptora V salmonele suha u razrjeđenju 1:10 u zatvorenom obliku može se čuvati na temperaturi od 2 do 8 ° C mjesec dana.
Diagnosticum je spreman za upotrebu. Prije otvaranja bočice s dijagnostikumom lagano protresite dok se ne dobije homogena suspenzija. Preporuča se ponoviti protresanje tijekom rada.
Otvorena bočica s dijagnostikumom u zatvorenom obliku može se čuvati na temperaturi od 2 do 8 ° C mjesec dana.
0,9% otopina natrijeva klorida. Spremno za upotrebu.

Provođenje RPGA.
Kod kontrole bilo kojeg broja analiziranih seruma obvezno je postaviti 1. red aglutinacije sa serumom dijagnostičkog Salmonella adsorbiranog receptora B suhog.
Za izradu RPHA koristi se tableta za imunološke reakcije za jednokratnu upotrebu. Dvostruka serijska razrjeđenja analiziranih seruma pripremaju se u 0,05 ml priložene 0,9% otopine natrijevog klorida počevši od 1:10 do 1:2560 i 1 serija dvostrukih serijskih razrjeđenja seruma dijagnostičkog salmoneloznog adsorbiranog receptora Wi suho, počevši od razrjeđenja 1:10, do dvostrukog titra navedenog na naljepnici bočica ovog seruma.
U svaku jažicu s razrijeđenim serumom doda se 0,025 ml dijagnostikuma.

Obavezne kontrole su:
1. Serumska kontrola dijagnostičkog adsorbiranog receptora salmonele
Sušimo i analiziramo serum koji u razrjeđenju 1:10 u volumenu od 0,05 ml doprin.
u dvije kontrolne bušotine.
2. Provjera odsutnosti spontane aglutinacije dijagnostikuma, za što se doda 0,025 ml dijagnostikuma u dvije jažice koje sadrže 0,05 ml 0,9% otopine natrijevog klorida.
Tableta se protrese i stavi 1,5-2,0 sata u termostat na temperaturu (37+1) °C.

RAČUNOVODSTVO ZA REZULTATE
Reakcija se uzima u obzir prema sustavu četiri križa:
4+ - svi eritrociti su aglutinirani i ravnomjerno pokrivaju dno rupice;
3+ - gotovo svi eritrociti su aglutinirani. Na njihovoj pozadini nalazi se neupadljiv prsten nataloženih neaglutiniranih eritrocita;
3+ - uz uniformni aglutinat na dnu rupice nalazi se sediment neaglutiniranih eritrocita u obliku malog "prstena" ili "gumbića";
1+ - većina eritrocita nije aglutinirana i smještena je u obliku malog "prstena" s glatkim rubovima ili "gumbima" u središtu dna rupice.
(-) - nema znakova aglutinacije. Eritrociti su se smjestili u obliku malog "prstena" s glatkim rubovima ili gumbima u središtu jamice ili na dnu cijevi.
Reakcija od najmanje 3+ smatra se pozitivnom.
Rezultati dobiveni u RPGA mogu se smatrati pouzdanima ako je serum dijagnostičkog Salmonella adsorbiranog receptora B suhi 1:10 dobio pozitivan rezultat u razrjeđenju od najmanje 14 njihovih titara, au 2 jažice s analiziranim serumom i sa serumom dijagnostičkog adsorbiranog receptora B za salmonelu suho u razrjeđenju 1:10 ne smije biti ljuskica i sedimenta; u jažicama s 0,9% otopinom natrijevog klorida i dijagnostikumom - reakcija je negativna.
Titar antitijela analiziranog seruma je zadnje razrjeđenje seruma, koje još daje pozitivnu aglutinaciju eritrocita.
Interpretacija rezultata.
Osobe koje imaju antitijela na V-antigen u razrjeđenju od 1:40 i više smatraju se sumnjivim na kroničnog tifusnog bakteriokartoniju. Međutim, zbog činjenice da se dijagnoza ne može postaviti samo na temelju serološke studije, potrebno je dubinsko bakteriološko ispitivanje.

Mjere opreza pri uporabi

Serum za dijagnostiku salmonele adsorbiranog receptora Vee uključenog u komplet je suho inaktiviran.
Serumi koji se analiziraju moraju biti inaktivirani na 56°C 30 minuta.
Serumi koji se analiziraju, kao i reagensi, oprema i instrumenti koji su u kontaktu s njima, mogu biti potencijalno infektivni materijal i njima treba pažljivo rukovati:
- raditi u gumenim rukavicama;
- kod pipetiranja potrebno je koristiti automatske uređaje;
- na kraju rada analizirane serume i reagense u kontaktu s njima, instrumente, treba tretirati otopinom za dezinfekciju;
- Opremu prije i poslije rada prebrisati 96% etilnim alkoholom.

Objektivni rezultati analize zajamčeni su pod sljedećim uvjetima:
- pohranjivanje svih reagensa kita treba provoditi na temperaturi od 2 do 8 °C;
- nemojte koristiti reagense kojima je istekao rok trajanja;
- nemojte koristiti reagense iz kompleta ako na pakiranju nema odgovarajuće oznake;
- za RPHA koristite reagense uključene samo u ovaj komplet.

2. dijagnostikum

4.od uništenih mikroba (izolacija specifičnog Ag)

Eritrocitni HBs dijagnostikum

2. dijagnostikum

4.suspenzija er.ovce tretirane taninom i istaloženim a\g HBs

5. Za otkrivanje specifičnih protutijela u krvnom serumu

Diagnosticum gp120

2. dijagnostikum

4.razdvojiti a\g ekst. HIV

5. Za otkrivanje HIV-a

Eritrocitni dijagnostikum tetanusa

2. dijagnostikum

4.suspenzija er.ovce tretirane taninom uz pobuđivanje tetanusa

5. za otkrivanje specifičnih antitijela u krvnom serumu (na ekscitaciju tetanusa

Antigen kardiolipin za mikroprecipitaciju

2. dijagnostikum

4.ekstrakcija lipidnih frakcija iz srca zdravog bika

5. Za otkrivanje specifičnih protutijela u krvnom serumu

Ultrazvučni treponemski antigen

2. dijagnostikum

4.out of dead ex. sifilis

5. Za otkrivanje specifičnih protutijela u krvnom serumu

Dijagnostikum korpuskularne tularemije

2. dijagnostikum

4.pojedinih čestica patogena

5. Za otkrivanje specifičnih protutijela u krvnom serumu

Diagnostikum dizenterije

2. dijagnostikum

4. suspenzija od ubijenih m \ o

5. Za otkrivanje specifičnih protutijela u serumu bolesnika

Eritrocitni dijagnostikum iz Shigella Sonne

2. dijagnostikum

4. suspenzija er.ovce, tretirana toninom

5. Za otkrivanje specifičnih protutijela u krvnom serumu

Diagnosticum iz Salmonella typhimurium

2. dijagnostikum

4.out of dead ex. salmonela

5. Za otkrivanje specifičnih protutijela u krvnom serumu

Serumi

Antigangrenozni konjski serum 5000 IU

2.serum

4. iz krvnog seruma hiperimm.konja s toksoidom ekscitacijske plinske gangrene.

6.parenteralno, nakon testa globulinom 1:100

normalni humani imunoglobulin

2.serum

4. iz krvnog seruma davatelja

5.form-e pass. specifično kupljeno umjetnosti. imm

6. parenteralno

taloženje seruma antraksa

2.serum

4. iz krvnog seruma hiperimuniziranih životinja a\g ekscit.sib. čirevi

6.reakcija taloženja (RP)

Botulinum serum tip - A 400 IU

2.serum

5. za otkrivanje specifičnog antigena u ispitivanom materijalu

6.reakcija neutralizacije (RN)

antraks globulin

2.serum

4. iz krvnog seruma hiperimuniziranih životinja a\g ekscitabilnih ulkusa

5.form-e pass. specifično kupljeno umjetnosti. imm

6. parenteralno

Hemolitički serum

2.serum

4. iz seruma hiperimuniziranih životinja s eritrocitima životinja druge vrste

5. za otkrivanje specifičnog antigena u ispitivanom materijalu

Aglutinirajući serum protiv kolere Ogawa

2.serum

4. iz krvnog seruma hiperimuniziranih životinja

5. za otkrivanje specifičnog antigena u ispitivanom materijalu

Svjetleći serum protiv tularemije

2.serum

4. iz krvnog seruma hiperimuniziranih životinja a\g ekscitabilni tular.

5. za otkrivanje specifičnog antigena u ispitivanom materijalu

Imunoglobulin protiv krpeljnog encefalitisa kod ljudi

2.serum

4. iz krvnog seruma davatelja

5.form-e pass. specifično kupljeno umjetnosti. imm

6. parenteralno

ESNO dijagnostički serum

2.serum

4. iz krvnog seruma hiperimuniziranih životinja s ESNO virusima

5. za otkrivanje specifičnog antigena u ispitivanom materijalu

Ljudski imunoglobulin protiv hepatitisa B

2.serum

4. iz krvnog seruma davatelja cijepljenog protiv hepatitisa B

5.form-e pass. specifično kupljeno umjetnosti. imm

6. parenteralno

Antiglobulinski serum obilježen perkoksidazom

2.serum

4. iz krvnog seruma hiperimuniziranih životinja

5. za otkrivanje specifičnog antigena u ispitivanom materijalu (HIV)

Imunoglobulin protiv bjesnoće

2.serum

4. iz krvnog seruma davatelja

5.form-e pass. specifično kupljeno umjetnosti. imm