anaerobni mikrobi. Aerobne i anaerobne bakterije

1. Genetski i biokemijski mehanizmi rezistencije na lijekove. Način prevladavanja otpornosti bakterija na lijekove.
2. Razumijevanje “infekcije”, “zaraznog procesa”, “zarazne bolesti”. Uvjeti za nastanak zarazne bolesti.
1. Racionalna antibiotska terapija. Nuspojave antibiotika na ljudski organizam i mikroorganizme. Stvaranje oblika bakterija otpornih na antibiotike i antibiotika ovisnih.
2. Reakcija taloženja i njezine vrste. Mehanizam i metode postavljanja, praktična primjena.
1. Metode za određivanje osjetljivosti bakterija na antibiotike. Određivanje koncentracije antibiotika u urinu, krvi.
2. Glavne stanice imunološkog sustava: t, b-limfociti, makrofagi, subpopulacije t-stanica, njihove karakteristike i funkcije.
1. Mehanizmi djelovanja antibiotika na mikrobnu stanicu. Baktericidno i bakteriostatsko djelovanje antibiotika. Mjerne jedinice antimikrobnog djelovanja antibiotika.
2. Reakcija imunološke lize kao jedan od mehanizama uništavanja mikroba, komponente reakcije, praktična primjena.
3. Uzročnik sifilisa, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti. Epidemologija i patogeneza. Mikrobiološka dijagnostika.
1. Metode uzgoja bakteriofaga, njihova titracija (prema Grazia i Appelmanu).
2. Stanična suradnja t, b-limfocita i makrofaga u procesu humoralnog i staničnog imunološkog odgovora.
1.Disanje bakterija. Aerobni i anaerobni tipovi biološke oksidacije. Aerobi, anaerobi, fakultativni anaerobi, mikroaerofili.
1. Djelovanje na mikroorganizme bioloških čimbenika. Antagonizam u mikrobnim biocenozama, bakteriocini.
3. Bordetella. Taksonomija, karakterizacija bioloških svojstava, faktori patogenosti. Bolesti uzrokovane Bordetellom. patogeneza hripavca. Laboratorijska dijagnostika, specifična profilaksa.
1. Pojam bakterija. Autotrofi i heterotrofi. Holofitni način ishrane bakterija. Mehanizmi prijenosa hranjivih tvari u bakterijskoj stanici.
2. Antigenska struktura bakterijske stanice. Glavna svojstva mikrobnih antigena su lokalizacija, kemijski sastav i specifičnost antigena bakterija, toksina, enzima.
1. Antibiotici. Povijest otkrića. Podjela antibiotika prema načinu dobivanja, podrijetlu, kemijskoj strukturi, mehanizmu djelovanja, spektru antimikrobnog djelovanja.
3. Virusi influence, taksonomija, opće karakteristike, antigeni, tipovi varijabilnosti. Epidemiologija i patogeneza gripe, laboratorijska dijagnostika. Specifična profilaksa i terapija gripe.
2. Serološka metoda za dijagnosticiranje zaraznih bolesti, njezina procjena.
3. Dijareogene ešerihije, njihove vrste, faktori patogenosti, bolesti uzrokovane njima, laboratorijska dijagnostika.
1. Opće karakteristike gljiva, njihova klasifikacija. ulogu u ljudskoj patologiji. Primijenjeni aspekti studija.
3. Escherichia, njihova uloga kao normalnog stanovnika crijeva. Sanitarno-indikativne vrijednosti ešerihije za vodu i tlo. Escherichia kao etiološki čimbenik gnojno-upalnih bolesti u ljudi.
1. Primjena bakteriofaga u mikrobiologiji i medicini za dijagnostiku, prevenciju i liječenje zaraznih bolesti.
2. Toksini Bakterije: endotoksin i egzotoksin. Podjela egzotoksina, kemijski sastav, svojstva, mehanizam djelovanja. Razlike između endotoksina i egzotoksina.
3. Mikoplazme, taksonomija, vrste patogene za čovjeka. Karakterizacija njihovih bioloških svojstava, faktori patogenosti. patogeneza i imunitet. Laboratorijska dijagnostika. Prevencija i terapija.
1. Laboratorijska dijagnoza disbioze. Lijekovi koji se koriste za prevenciju i liječenje disbakterioze.
2. Imunofluorescencija u dijagnostici zaraznih bolesti. Izravne i neizravne metode. Potrebni lijekovi.
3. Virus krpeljnog encefalitisa, taksonomija, opće karakteristike. Epidemiologija i patogeneza, laboratorijska dijagnostika, specifična prevencija krpeljnog encefalitisa.
1. Značajke strukture rikecije, mikoplazme i klamidije. Metode njihovog uzgoja.
2. Biološki proizvodi za specifičnu prevenciju i liječenje zaraznih bolesti: cjepiva.
3. Salmonela, taksonomija. Uzročnik tifusa i paratifusa. Epidemiologija patogeneze trbušnog tifusa. Laboratorijska dijagnostika. specifična profilaksa.
2. Antigenska struktura toksina, virusa, enzima: lokalizacija, kemijski sastav i specifičnost. Anatoksini.
3. Virusi-uzročnici akutnih respiratornih bolesti. Paramiksovirusi, opće karakteristike obitelji, uzročnici bolesti. Patogeneza ospica, specifična prevencija.
1. Razmnožavanje virusa (disjunktivno razmnožavanje). Glavne faze interakcije virusa sa stanicom domaćina u produktivnom tipu infekcije. Značajke reprodukcije virusa koji sadrže DNA i RNA.
2. Pojam rane, respiratorne, crijevne, krvi i urogenitalne infekcije. Antroponoza i zoonoza. Mehanizmi prijenosa infekcije.
3. Clostridium tetanus, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti. Epidemiologija i patogeneza tetanusa. Laboratorijska dijagnostika, specifična terapija i prevencija.
1. Mikroflora kože, usne šupljine zdrave osobe. Mikroflora sluznice respiratornog trakta, genitourinarnog trakta i očiju. Njihov smisao u životu.
2. Intrauterine infekcije. Etiologija, načini prijenosa infekcije na fetus. Laboratorijska dijagnostika, preventivne mjere.
1. Tipovi interakcije virusa sa stanicom: integrativni i autonomni.
2. Sustav komplementa, klasični i alternativni način aktivacije komplementa. Metode određivanja komplementa u krvnom serumu.
3. Hrana bakterijska intoksikacija stafilokokne prirode. Patogeneza, značajke laboratorijske dijagnostike.
1. Djelovanje kemijskih čimbenika na mikroorganizme. Asepsa i dezinfekcija. Mehanizam djelovanja različitih skupina antiseptika.
2. Cjepiva živa ubijena, kemijska, toksoidna, sintetička, moderna. Principi dobivanja, mehanizmi stvaranja imuniteta. adjuvansi u cjepivima.
3. Klebsiela, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti, uloga u humanoj patologiji. Laboratorijska dijagnostika.
1. Dysbacteriosis, uzroci, čimbenici njegovog formiranja. faze disbakterioze. Laboratorijska dijagnostika, specifična prevencija i terapija.
2. Uloga neutralizacije toksina toksoidom. Praktična upotreba.
3. Pikornovirusi, klasifikacija, karakteristike virusa poliomijelitisa. Epidemiologija i patogeneza, imunitet. Laboratorijska dijagnostika, specifična profilaksa.
1. Tipovi varijabilnosti kod bakterija: modifikacijska i genotipska varijabilnost. Mutacije, vrste mutacija, mehanizmi nastanka mutacija, mutageni.
2. Lokalni antiinfektivni imunitet. Uloga sekretornih protutijela.
3. Bakterijske toksične infekcije uzrokovane hranom uzrokovane Eschirichijom, Proteusom, Staphylococcusom, anaerobnim bakterijama. Patogeneza, laboratorijska dijagnostika.
2. Središnji i periferni organi imunološkog sustava. Dobne značajke imunološkog sustava.
1. Citoplazmatska membrana bakterija, njena građa, funkcije.
2. Nespecifični čimbenici antivirusne imunosti: antivirusni inhibitori, interferoni (vrste, mehanizam djelovanja).
1. Protoplasti, sferoplasti, l-oblici bakterija.
2. Stanični imunološki odgovor u antiinfektivnoj obrani. Interakcija između t-limfocita i makrofaga tijekom imunološkog odgovora. Načini otkrivanja. Alergijska dijagnostička metoda.
3. Hepatitis a virus, taksonomija, karakterizacija bioloških svojstava. Epidemiologija i patogeneza Botkinove bolesti. Laboratorijska dijagnostika. specifična profilaksa.
2. Antitijela, glavne klase imunoglobulina, njihove strukturne i funkcionalne značajke. Zaštitna uloga protutijela u antiinfektivnom imunitetu.
3. Virusi hepatitisa C i E, taksonomija, karakterizacija bioloških svojstava. Epidemiologija i patogeneza, laboratorijska dijagnostika.
1. Spore, kapsule, resice, flagele. Njihova struktura, kemijski sastav, funkcije, metode detekcije.
2. Potpuna i nepotpuna antitijela, autoantitijela. Pojam monoklonskih protutijela, hibridoma.
1. Morfologija bakterija. Osnovni oblici bakterija. Građa i kemijski sastav različitih struktura bakterijske stanice: nukleotid, mezosomi, ribosomi, citoplazmatske inkluzije, njihove funkcije.
2. Patogenetske značajke virusnih infekcija. Infektivna svojstva virusa. Akutna i dugotrajna virusna infekcija.
1. Prokarioti i eukarioti, njihove razlike u građi, kemijskom sastavu i funkciji.
3. Togavirusi, njihova klasifikacija. Virus rubeole, njegove karakteristike, patogeneza bolesti u trudnica. Laboratorijska dijagnostika.
1. Plazmidi bakterija, vrste plazmida, njihova uloga u određivanju patogenih svojstava i otpornosti bakterija na lijekove.
2. Dinamika stvaranja protutijela, primarni i sekundarni imunološki odgovor.
3. Candida gljivice slične kvascima, njihova svojstva, razlikovna svojstva, vrste gljivica Candida. ulogu u ljudskoj patologiji. Uvjeti pogodni za pojavu kandidijaze. Laboratorijska dijagnostika.
1.Osnovni principi sistematike mikroorganizama. Taksonomski kriteriji: carstvo, odjel, porodica, rod vrsta. Pojam soja, klona, populacije.
2. Pojam imuniteta. Klasifikacija različitih oblika imuniteta.
3. Proteus, taksonomija, svojstva proteusa, faktori patogenosti. ulogu u ljudskoj patologiji. Laboratorijska dijagnostika. Specifična imunoterapija, fagoterapija.
1. Mikroflora novorođenčadi, njeno formiranje tijekom prve godine života. Utjecaj dojenja i umjetne prehrane na sastav mikroflore djeteta.
2. Interferoni kao čimbenici antivirusne imunosti. Vrste interferona, metode dobivanja interferona i praktična primjena.
3. Streptococcus pneumoniae (pneumokok), taksonomija, biološka svojstva, faktori patogenosti, uloga u ljudskoj patologiji. Laboratorijska dijagnostika.
1. Značajke strukture aktinomiceta, spiroheta. Metode za njihovu detekciju.
2. Značajke antivirusnog imuniteta. Kongenitalna i stečena imunost. Stanični i humoralni mehanizmi urođene i stečene imunosti.
3. Enterobakterije, podjela, opće karakteristike bioloških svojstava. Antigenska struktura, ekologija.
1. Metode uzgoja virusa: u kulturama stanica, pilećim embrijima, u životinjama. Njihova procjena.
2. Reakcija aglutinacije u dijagnostici infekcija. Mehanizmi, dijagnostička vrijednost. Aglutinirajući serumi (kompleksni i monoreceptorski), dijagnostikumi. Reakcije opterećenja imunološkog sustava.
3. Campylobacter, taksonomija, opće karakteristike, uzročnici bolesti, njihova patogeneza, epidemiologija, laboratorijska dijagnostika, prevencija.
1. Bakteriološka metoda za dijagnosticiranje zaraznih bolesti, stadiji.
3. Onkogeni DNA virusi. Opća karakteristika. Virogenetska teorija nastanka tumora L.A. Zilber. Moderna teorija karcinogeneze.
1. Osnovni principi i metode uzgoja bakterija. Hranjive podloge i njihova klasifikacija. Kolonije u raznim vrstama bakterija, svojstva kulture.
2. Enzimski imunološki test. Komponente reakcije, varijante njezine primjene u laboratorijskoj dijagnostici zaraznih bolesti.
3. HIV virusi. Povijest otkrića. Opće karakteristike virusa. Epidemiologija i patogeneza bolesti, klinika. Metode laboratorijske dijagnostike. Problem je specifična prevencija.
1. Organizacija genetskog materijala bakterijske stanice: bakterijski kromosom, plazmidi, transpozoni. Genotip i fenotip bakterija.
2. Reakcija neutralizacije virusa. Mogućnosti neutralizacije virusa, opseg.
3. Yersinia, taksonomija. Obilježja uzročnika kuge, čimbenici patogenosti. Epidemiologija i patogeneza kuge. Metode laboratorijske dijagnostike, specifične prevencije i terapije.
1. Rast i razmnožavanje bakterija. Faze razmnožavanja bakterijskih populacija u tekućem hranjivom mediju u stacionarnim uvjetima.
2. Seroterapija i seroprofilaksa. Karakterizacija anatotoksičnih i antimikrobnih seruma, imunoglobulina. Njihova priprema i titracija.
3. Rotavirusi, klasifikacija, opće karakteristike obitelji. Uloga rotavirusa u crijevnoj patologiji odraslih i djece. Patogeneza, laboratorijska dijagnostika.
2. Reakcija vezanja komplementa u dijagnostici zaraznih bolesti. Reakcijske komponente, praktična primjena.
3. Virus hepatitisa b i d, delta virusi, taksonomija. Opće karakteristike virusa. Epidemiologija i patogeneza hepatitisa B i dr. Laboratorijska dijagnostika, specifična prevencija.
1. Genetske rekombinacije: transformacija, transdukcija, konjugacija. Od vrsta i mehanizama.
2. Putevi prodiranja mikroba u tijelo. Kritične doze mikroba koji uzrokuju zaraznu bolest. Ulazna vrata infekcije. Načini distribucije mikroba i toksina u tijelu.
3. Virus bjesnoće. Taksonomija, opće karakteristike. Epidemiologija i patogeneza virusa bjesnoće.
1. Mikroflora ljudskog tijela. Njegova uloga u normalnim fiziološkim procesima i patologiji. Crijevna mikroflora.
2. Indikacija mikrobnih antigena u patološkom materijalu pomoću imunoloških reakcija.
3. Pikornavirusi, taksonomija, opće karakteristike porodice. Bolesti uzrokovane virusima Coxsackie i Echo. Laboratorijska dijagnostika.
1. Mikroflora atmosferskog zraka, stambenih prostorija i bolnica. Sanitarno-indikativni mikroorganizmi zraka. Načini ulaska i preživljavanja mikroba u zraku.
2. Stanični nespecifični čimbenici zaštite: nereaktivnost stanica i tkiva, fagocitoza, prirodni ubojice.
3. Yersinia pseudotuberculosis i enterokolitis, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti. Epidemiologija i patogeneza pseudotube
1. Virusi: morfologija i struktura virusa, njihov kemijski sastav. Načela klasifikacije virusa, značaj u humanoj patologiji.
3. Leptospira, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti. Patogeneza leptospiroze. Laboratorijska dijagnostika.
1. Umjereni bakteriofagi, njihova interakcija s bakterijskom stanicom. Fenomen lizogenije, fagna konverzija, značaj ovih pojava.

1.Disanje bakterija. Aerobni i anaerobni tipovi biološke oksidacije. Aerobi, anaerobi, fakultativni anaerobi, mikroaerofili.

Prema vrsti disanja dijelimo ih u nekoliko skupina

1) aerobi, za koje je potreban molekularni kisik

2) obligatni aerobi nisu sposobni rasti u nedostatku kisika, jer ga koriste kao akceptor elektrona.

3). mikroaerofili - sposobni rasti u prisutnosti male koncentracije O2 (do 2%) 4) anaerobi ne trebaju slobodni kisik, potrebni E dobivaju cijepanjem in-in, sadrže veliku zalihu latentnog E

5) obligatni anaerobi - ne podnose ni malu količinu kisika (klostridija)

6) fakultativni anaerobi - prilagodili su se postojanju iu uvjetima koji sadrže kisik iu anoksičnim uvjetima. Proces disanja kod mikroba je fosforilacija ili fermentacija supstrata: glikoliza, fosfoglikonatni put i ketodeoksifosfoglikonatni put. Vrste vrenja: mliječno kiselo (bifidobakterije), mravlja kiselina (enterobakterije), maslačno kiselo (klostridije), propionsko kiselo (propionobakterije),

2. Antigeni, definicija, uvjeti antigenosti. Antigene determinante, njihova struktura. Imunokemijska specifičnost antigena: vrsta, skupina, tip, organ, heterospecifični. Potpuni antigeni, hapteni, njihova svojstva.

Antigeni su spojevi velike molekulske mase.

Kada se progutaju, izazivaju imunološku reakciju i stupaju u interakciju s produktima te reakcije.

Kasifikacija antigena. 1. Po porijeklu:

prirodni (proteini, ugljikohidrati, nukleinske kiseline, bakterijski egzo- i endotoksini, antigeni tkiva i krvnih stanica);

umjetni (dinitrofenilirani proteini i ugljikohidrati);

sintetski (sintetizirane poliaminokiseline).

2. Po kemijskoj prirodi:

proteini (hormoni, enzimi itd.);

ugljikohidrati (dekstran);

nukleinske kiseline (DNA, RNA);

konjugirani antigeni;

polipeptidi (polimeri a-aminokiselina);

lipidi (kolesterol, lecitin).

3. Po genetskom srodstvu:

autoantigeni (iz tkiva vlastitog tijela);

izoantigeni (od genetski identičnog donora);

aloantigeni od nesrodnog donora iste vrste)

4. Po prirodi imunološkog odgovora:

1) ksenoantigeni (od donora druge vrste). antigeni ovisni o timusu;

2) antigeni neovisni o timusu.

Tu su i:

vanjski antigeni (ulaze u tijelo izvana);

unutarnji antigeni; proizlaze iz oštećenih tjelesnih molekula koje se prepoznaju kao strane

skriveni antigeni – specifični antigeni

(npr. živčano tkivo, proteini leće i spermatozoidi); anatomski odvojen od imunološkog sustava histohematskim barijerama tijekom embriogeneze.

Hapteni su tvari niske molekularne težine koje u normalnim uvjetima ne izazivaju imunološki odgovor, ali kada se vežu za molekule velike molekularne težine, postaju imunogeni.

Infektivni antigeni su antigeni bakterija, virusa, gljivica, proteja.

Vrste bakterijskih antigena:

specifično za skupinu;

specifično za vrstu;

tipski specifičan.

Prema lokalizaciji u bakterijskoj stanici razlikuju se:

O - AG - polisaharid (dio stanične stijenke bakterija);

lipidA - heterodimer; sadrži glukozamin i masne kiseline;

H - AG; dio je bakterijskih flagela;

K - AG - heterogena skupina površinskih, kapsularnih antigena bakterija;

toksini, nukleoproteini, ribosomi i bakterijski enzimi.

3. Streptokoki, taksonomija, klasifikacija po Lanefieldu. Karakterizacija bioloških svojstava, faktori patogenosti streptokoka. Uloga streptokoka skupine A u ljudskoj patologiji. Značajke imuniteta. Laboratorijska dijagnostika streptokokne infekcije.

Obitelj Streptococcacea

Rod Streptococcus

Prema Lesfieldu (klasa se temelji na različitim tipovima hemolize): gr.A (Str. Pyogenes) gr.B (Str. Agalactiae-postporođajne i urogenitalne infekcije, mastitis, vaginitis, sepsa i meningitis u novorođenčadi.), skupina C (Str. Equisimilis), skupina D (Enterococcus, Str. Fecalis). Gr.A - akutni infektivni proces s alergijskom komponentom (šarlah, erizipel, miokarditis), grB - glavni patogen kod životinja, uzrokuje sepsu kod djece. GrS-har-n in-hemoliza (uzrokuje patologiju repar. trakta) GrD-obv. sve vrste hemolize, kao normalan stanovnik ljudskog crijeva. To su sferne stanice raspoređene u parovima gr +, kemoorganotrofi, zahtjevni za prehranu. Srijedom, razm-Xia na krvi ili sah. agar, male kolonije se stvaraju na čvrstom mediju, rast pri dnu na tekućem, ostavljajući medij prozirnim. Po har-ru rast na krvnom agaru: alfa hemoliza (malo područje hemolize zeleno-sive boje), beta-hem (prozirno), nehemol. Aerobi ne stvaraju katalazu.

F-ry pat-tee 1) razreda zid – neki imaju kapsulu.

2) f-r prianjanje-teihoy na-ti

3) protein M-protektivan, sprječava fagocitozu

4) niz toksina: eritrogeno-šarlah, O-streptolizin = hemolizin, leukocidin 5) citotoksini.

dijagnoza: 1) b / l: gnoj, sluz iz ždrijela - sjetva na krovu. agar (prisutnost / odsutnost zone hemolize), identifikacija po Ag sv-you 2)b / s - razmazi po Gramu 3) s / l - tražiti Ab prema O-streptolizinu u RSK ili r-ii prec.

Liječenje:β-laktam a/b. Gr.A izazivanje gnojne upale, upale, popraćene obilnim gnojnim stvaranjem, sepsa.

Anaerobi(grč. negativni prefiks an- + aē r zrak + b život) - mikroorganizmi koji se razvijaju u nedostatku slobodnog kisika u svojoj okolini. Nalaze se u gotovo svim uzorcima patološkog materijala u različitim gnojno-upalnim bolestima, uvjetno su patogeni, ponekad patogeni. Razlikujemo fakultativne i obligatne A. Fakultativne A. mogu postojati i razmnožavati se iu kisiku iu sredini bez kisika. Tu spadaju E. coli, Yersinia, te Streptococcus, Shigella i drugi bakterije.

Obligate A. umiru u prisutnosti slobodnog kisika u okolišu. Dijele se u dvije skupine: bakterije koje tvore spore ili klostridije i bakterije koje ne tvore spore ili tzv. neklostridijski anaerobi. Među klostridijama razlikuju se uzročnici anaerobnih klostridijskih infekcija - a, klostridijska infekcija rane, a. U neklostridijske A. spadaju gram-negativne i gram-pozitivne štapićaste ili kuglaste bakterije: bakteroidi, fuzobakterije, veillonella, peptokoki, peptostreptokoki, propionske bakterije, eubakterije itd. Neklostridijske A. sastavni su dio normalne mikroflore ljudi i životinja, ali istodobno igraju veliku ulogu u razvoju takvih gnojno-upalnih procesa kao što su peritonitis, pluća i mozak, pleura, flegmona maksilofacijalne regije itd. Većina anaerobne infekcije, uzrokovan ne-klostridijskim anaerobima, odnosi se na endogene i razvija se uglavnom sa smanjenjem otpora tijela kao rezultat traume, operacije, hlađenja, oslabljenog imuniteta.

Glavni dio klinički značajnih A. su bakteroidi i fusobakterije, peptostreptokoki i spore Gram-pozitivne šipke. Bakteroidi čine oko polovicu gnojno-upalnih procesa uzrokovanih anaerobnim bakterijama.

Bacteroides (Bacteroides) - rod gram-negativnih obveznih anaerobnih bakterija iz obitelji Bacteroidaceae, štapići s bipolarnim bojanjem, veličine 0,5-1,5´ 1-15 mikron, nepokretni ili se kreću uz pomoć peritrihous flagella, često imaju polisaharidnu kapsulu, koja je faktor virulencije. Oni proizvode različite toksine i enzime koji djeluju kao faktori virulencije. Oni su heterogeni u osjetljivosti na antibiotike: bakteroidi, na primjer, skupina B. fragilis, otporni su na benzilpenicilin. Bakteroidi otporni na b-laktamske antibiotike proizvode b-laktamaze (penicilinaze i cefalosporinaze) koje uništavaju penicilin i cefalosporine. Bakteroidi su osjetljivi na neke derivate imidazola - metronidazol (trihopol,

flagil), tinidazol, ornidazol - lijekovi učinkoviti protiv različitih skupina anaerobnih bakterija, kao i kloramfenikol i eritromicin. Bakteroidi su otporni na aminoglikozide - gentamicin, kanamicin, streptomicin, polimiksin, oleandomicin. Značajan dio bakteroida otporan je na tetracikline.

Fusobacteria (Fusobacterium) - rod gram-negativnih štapićastih obveznih anaerobnih bakterija; žive na sluznici usta i crijeva, nepokretni su ili pokretni, sadrže snažan endotoksin. Najčešće se u patološkom materijalu nalaze F. nucleatum i F. necrophorum. Većina fuzobakterija je osjetljiva na b-laktamske antibiotike, ali postoje sojevi otporni na penicilin. Fuzobakterije, s iznimkom F. varium, osjetljive su na klindamicin.

Peptostreptokok (Peptostreptococcus) je rod Gram-pozitivnih kuglastih bakterija; raspoređeni u parovima, tetradama, u obliku nepravilnih nakupina ili lanaca. Nemaju flagele, ne stvaraju spore. Osjetljiv na penicilin, karbenicilin, cefalosporine, kloramfenikol, otporan na metronidazol.

Peptococcus (Peptococcus) je rod gram-pozitivnih kuglastih bakterija, predstavljenih jednom vrstom P. niger. Javljaju se pojedinačno, u parovima, ponekad u grozdovima. Flagele i spore se ne stvaraju.

Osjetljivost na penicilin, karbenicilin, eritromicin, klindamicin, kloramfenikol. Relativno otporan na metronidazol.

Veillonella - rod gram-negativnih anaerobnih diplokoka; raspoređeni u kratke lance, nepokretni, ne stvaraju spore. Osjetljiv na penicilin, kloramfenikol, tetraciklin, polimiksin, eritromicin, otporan na streptomicin, neomicin, vankomicin.

Od ostalih neklostridijskih anaerobnih bakterija izoliranih iz patološkog materijala bolesnika treba spomenuti gram-pozitivne propionske bakterije, gram-negativne volinele i druge, čije je značenje manje proučavano.

Clostridium je rod Gram-pozitivnih anaerobnih bakterija u obliku štapića koje stvaraju spore. Klostridije su široko rasprostranjene u prirodi, osobito u tlu, a žive i u probavnom traktu ljudi i životinja. Oko deset vrsta klostridija patogeno je za ljude i životinje: C. perfringens, C. novyii, C. septicum, C. ramosum, C. botulirnim, C. tetani, C. difficile itd. Ove bakterije stvaraju egzotoksine specifične za svaku vrstu visoke biološke aktivnosti na koju su osjetljivi ljudi i mnoge životinjske vrste. C. difficile su pokretne bakterije s peritrihalnim bičevima. Prema nizu istraživača, ove bakterije, nakon iracionalne antimikrobne terapije, množeći se, mogu izazvati pseudomembranozu. C. difficile su osjetljive na penicilin, ampicilin, vankomicin, rifampicin,

metronidazol; otporan na aminoglikozide.

Uzročnik anaerobne infekcije može biti bilo koja vrsta bakterije, no češće su te infekcije uzrokovane različitim asocijacijama mikroba: anaerobno-anaerobnim (bakteroidi i fuzobakterije); anaerobno-aerobni (bakteroidi i

Bakterije su prisutne posvuda u našem svijetu. Ima ih posvuda i posvuda, a broj njihovih sorti jednostavno je nevjerojatan.

Ovisno o potrebi prisutnosti kisika u hranjivom mediju za provedbu vitalne aktivnosti, mikroorganizmi se dijele na sljedeće vrste.

Obligate aerobne bakterije, koje se skupljaju u gornjem dijelu hranjivog medija, flore sadrže maksimalnu količinu kisika.
Obligate anaerobne bakterije, koje se nalaze u donjem dijelu okoliša, što dalje od kisika.
Fakultativne bakterije uglavnom žive u gornjem dijelu, ali se mogu rasporediti po cijelom okolišu jer ne ovise o kisiku.
Mikroaerofili preferiraju nisku koncentraciju kisika, iako se okupljaju u gornjem dijelu okoliša.
Aerotolerantni anaerobi ravnomjerno su raspoređeni u hranjivoj podlozi, neosjetljivi na prisutnost ili odsutnost kisika.

Pojam anaerobnih bakterija i njihova klasifikacija

Pojam "anaerobi" pojavio se 1861. godine zahvaljujući radu Louisa Pasteura.

Anaerobne bakterije su mikroorganizmi koji se razvijaju bez obzira na prisutnost kisika u hranjivoj podlozi. Oni dobivaju energiju fosforilacijom supstrata. Postoje fakultativni i obligatni aerobi, kao i druge vrste.

Najznačajniji anaerobi su bakteroidi

Najvažniji aerobi su bakteroidi. Približno pedeset posto svih gnojno-upalnih procesa, čiji uzročnici mogu biti anaerobne bakterije, su bakteroidi.

Bacteroides su rod Gram-negativnih obveznih anaerobnih bakterija. To su šipke bipolarne boje, čija veličina ne prelazi 0,5-1,5 do 15 mikrona. Oni proizvode toksine i enzime koji mogu uzrokovati virulentnost. Različiti bakteroidi imaju različitu otpornost na antibiotike: postoje i otporni i osjetljivi na antibiotike.

Proizvodnja energije u ljudskim tkivima

Neka tkiva živih organizama imaju povećanu otpornost na nizak sadržaj kisika. U standardnim uvjetima sinteza adenozin trifosfata odvija se aerobno, ali kod povećanog tjelesnog napora i upalnih reakcija dolazi do izražaja anaerobni mehanizam.

Adenozin trifosfat (ATP) To je kiselina koja ima važnu ulogu u proizvodnji energije u tijelu. Postoji nekoliko mogućnosti za sintezu ove tvari: jedna aerobna i čak tri anaerobne.

Anaerobni mehanizmi sinteze ATP-a uključuju:

refosforilacija između kreatin fosfata i ADP;
reakcija transfosforilacije dviju molekula ADP;
anaerobna razgradnja zaliha glukoze ili glikogena u krvi.

Uzgoj anaerobnih organizama

Postoje posebne metode za uzgoj anaeroba. Sastoje se u zamjeni zraka plinskim smjesama u zatvorenim termostatima.

Drugi način je uzgoj mikroorganizama u hranjivoj podlozi kojoj se dodaju redukcijske tvari.

Podloge za uzgoj anaerobnih organizama

Postoje uobičajeni hranjivi mediji i diferencijalno dijagnostičke hranjive podloge. Uobičajeni uključuju Wilson-Blair medij i Kitt-Tarozzi medij. Za diferencijalnu dijagnostiku - medij Hiss, medij Ressel, medij Endo, medij Ploskirev i bizmut-sulfitni agar.

Osnova za Wilson-Blair medij je agar-agar s dodatkom glukoze, natrijevog sulfita i željeznog diklorida. Crne kolonije anaeroba formiraju se uglavnom u dubini stupca agara.

Resselov (Russell) medij koristi se u proučavanju biokemijskih svojstava bakterija kao što su Shigella i Salmonella. Također sadrži agar-agar i glukozu.

Srijeda Ploskirev inhibira rast mnogih mikroorganizama pa se koristi u diferencijalnodijagnostičke svrhe. U takvom okruženju dobro se razvijaju uzročnici trbušnog tifusa, dizenterije i druge patogene bakterije.

Glavna svrha bizmut sulfit agara je izolacija salmonele u čistom obliku. Ovo okruženje temelji se na sposobnosti Salmonella da proizvodi sumporovodik. Ovaj medij je sličan Wilson-Blair mediju u korištenoj tehnici.

Anaerobne infekcije

Većina anaerobnih bakterija koje žive u tijelu čovjeka ili životinje mogu uzrokovati razne infekcije. U pravilu, infekcija se javlja tijekom razdoblja oslabljenog imuniteta ili kršenja opće mikroflore tijela. Također postoji mogućnost zaraze uzročnicima iz vanjske sredine, osobito u kasnu jesen i zimi.

Infekcije uzrokovane anaerobnim bakterijama obično su povezane s florom ljudske sluznice, odnosno s glavnim staništima anaeroba. Tipično, ove infekcije više okidača odjednom(do 10).

Točan broj bolesti uzrokovanih anaerobima gotovo je nemoguće utvrditi zbog poteškoća u prikupljanju materijala za analizu, transportu uzoraka i uzgoju samih bakterija. Najčešće se ova vrsta bakterija nalazi u kroničnim bolestima.

Anaerobne infekcije pogađaju ljude svih dobnih skupina. Istovremeno je veća razina zaraznih bolesti kod djece.

Anaerobne bakterije mogu izazvati razne intrakranijalne bolesti (meningitis, apscesi i dr.). Distribucija se, u pravilu, događa s krvotokom. U kroničnim bolestima, anaerobi mogu uzrokovati patologije u glavi i vratu: otitis media, limfadenitis, apscesi. Ove bakterije su opasne i za gastrointestinalni trakt i za pluća. Uz razne bolesti urogenitalnog ženskog sustava, također postoji rizik od razvoja anaerobnih infekcija. Razne bolesti zglobova i kože mogu biti posljedica razvoja anaerobnih bakterija.

Uzroci anaerobnih infekcija i njihovi simptomi

Infekcije su uzrokovane svim procesima tijekom kojih aktivne anaerobne bakterije ulaze u tkiva. Također, razvoj infekcija može uzrokovati poremećenu opskrbu krvlju i nekrozu tkiva (razne ozljede, tumori, edemi, vaskularne bolesti). Infekcije usta, ugrizi životinja, plućne bolesti, upalne bolesti zdjelice i mnoge druge bolesti također mogu biti uzrokovane anaerobi.

U različitim organizmima infekcija se razvija na različite načine. Na to utječe vrsta patogena i stanje ljudskog zdravlja. Zbog poteškoća povezanih s dijagnosticiranjem anaerobnih infekcija, zaključak se često temelji na pretpostavkama. Razlikuju se u nekim značajkama infekcije uzrokovane neklostridijski anaerobi.

Prvi znakovi infekcije tkiva aerobi su gnojenje, tromboflebitis, stvaranje plina. Neki tumori i neoplazme (crijevni, maternični i drugi) također su popraćeni razvojem anaerobnih mikroorganizama. Kod anaerobnih infekcija može se pojaviti neugodan miris, ali njegov izostanak ne isključuje anaerobe kao uzročnike infekcije.

Značajke uzimanja i transporta uzoraka

Prva studija u određivanju infekcija uzrokovanih anaerobima je vizualni pregled. Razne kožne lezije česta su komplikacija. Također, dokaz vitalne aktivnosti bakterija bit će prisutnost plina u zaraženim tkivima.

Za laboratorijsko istraživanje i uspostavljanje točne dijagnoze, prije svega, potrebno je kompetentno uzeti uzorak materije iz zahvaćenog područja. Za to se koristi posebna tehnika, zahvaljujući kojoj normalna flora ne ulazi u uzorke. Najbolja metoda je aspiracija ravnom iglom. Uzimanje laboratorijskog materijala brisevima nije preporučljivo, ali je moguće.

Uzorci koji nisu prikladni za daljnju analizu uključuju:

sputum dobiven samoizlučivanjem;
uzorci dobiveni tijekom bronhoskopije;
razmazi iz vaginalnih svodova;
urin sa slobodnim mokrenjem;
izmet.

Za istraživanje se može koristiti:

krv;
pleuralna tekućina;
transtrahealni aspirati;
gnoj dobiven iz šupljine apscesa;
cerebrospinalna tekućina;
punkcije pluća.

Transportni uzorci potrebno je što je prije moguće u posebnu posudu ili plastičnu vrećicu u anaerobnim uvjetima, jer čak i kratkotrajna interakcija s kisikom može uzrokovati smrt bakterija. Tekući uzorci transportiraju se u epruveti ili u špricama. Brisevi s uzorcima transportiraju se u epruvetama s ugljičnim dioksidom ili unaprijed pripremljenim medijima.

Liječenje anaerobne infekcije

U slučaju dijagnosticiranja anaerobne infekcije za adekvatno liječenje potrebno je pridržavati se sljedećih načela:

toksini koje proizvode anaerobi moraju se neutralizirati;
treba promijeniti stanište bakterija;
širenje anaeroba mora biti lokalizirano.

U skladu s ovim načelima u liječenju se koriste antibiotici, koji pogađaju i anaerobne i aerobne organizme, jer je često flora kod anaerobnih infekcija miješana. Istodobno, pri propisivanju lijekova liječnik mora procijeniti kvalitativni i kvantitativni sastav mikroflore. Sredstva koja djeluju protiv anaerobnih patogena su: penicilini, cefalosporini, šamfenikol, fluorokinolo, metranidazol, karbapenemi i drugi. Neki lijekovi imaju ograničen učinak.

Za kontrolu staništa bakterija u većini slučajeva koristi se kirurška intervencija, koja se izražava u liječenju zahvaćenih tkiva, drenaži apscesa i osiguravanju normalne cirkulacije krvi. Kirurške metode ne smiju se zanemariti zbog rizika od komplikacija opasnih po život.

Ponekad se koristi pomoćne terapije, a također i zbog poteškoća povezanih s točnim određivanjem uzročnika infekcije, koristi se empirijsko liječenje.

S razvojem anaerobnih infekcija u usnoj šupljini također se preporuča dodati što više svježeg voća i povrća u prehranu. Najkorisnije su jabuke i naranče. Ograničenje je podvrgnuto mesnoj hrani i brzoj hrani.

anaerobna infekcija

Etiologija, patogeneza, antibiotska terapija.

Predgovor ................................................. ............... ................................... .. 1

Uvod ................................................. .............................................. 2

1.1 Definicija i karakterizacija .............................................. ............ .... 2

1.2 Sastav mikroflore glavnih ljudskih biotopa 5

2. Čimbenici patogenosti anaerobnih mikroorganizama .......... 6

2.1. Uloga anaerobne endogene mikroflore u patologiji

osoba ................................................ .................................................… ……. 8

3. Glavni oblici anaerobne infekcije .............................………...... 10

3.1. Pleuropulmonalna infekcija ................................................. .................................. 10

3.2. Infekcija dijabetičkog stopala ................................................. ................................. . 10

3.3. Bakteriemija i sepsa ................................................. ................ ................. jedanaest

3.4. Tetanus................................................. ................................. jedanaest

3.5. Proljev................................................. ............................................ 12

3.6. Kirurške infekcije rana i mekih tkiva .................. 12

3.7. Infekcija mekih tkiva koja stvara plinove .............................................. ... 12

3.8. Klostridijalna mionekroza ................................................. .................. ... 12

3.9. Polako se razvija nekrotična infekcija rane...13

3.10. Intraperitonealna infekcija ..................................................... ………….. 13

3.11. Karakteristike eksperimentalnih anaerobnih apscesa ..... 13

3.12. Pseudomembranozni kolitis..................................................... .................. ..........14

3.13. Obstetričke i ginekološke infekcije .............................................. .........14

3.14. Anaerobna infekcija u bolesnika s rakom……………..15

4. Laboratorijska dijagnostika............................................. ................. ................15

4.1. Istraživački materijal ................................................. .................. .....................15

4.2. Faze istraživanja materijala u laboratoriju............................................. ....16

4.3. Izravno proučavanje materijala ................................................. ................. .......16

4.4. Metode i sustavi za stvaranje anaerobnih uvjeta.....................................16

4.5. Hranjive podloge i uzgoj .............................................. 17

5. Antibiotska terapija anaerobne infekcije .................................................. ... 21

5.1. Karakteristike glavnih antimikrobnih lijekova,

koristi se u liječenju anaerobnih infekcija ............................................21

5.2. Kombinacija beta-laktamskih lijekova i inhibitora

beta-laktamaze ................................................. ................ ................................. ..24

5.3. Klinički značaj ispitivanja anaerobne osjetljivosti

mikroorganizama na antimikrobne lijekove.......…………...24

6. Korekcija crijevne mikroflore ................................…………….26

Zaključak................................................. ............................................27
Autori………………………………………………………………….27

Predgovor

Posljednje godine obilježene su ubrzanim razvojem mnogih područja opće i kliničke mikrobiologije, što je vjerojatno posljedica kako našeg boljeg razumijevanja uloge mikroorganizama u razvoju bolesti, tako i potrebe liječnika za stalnim korištenjem informacija o etiologiji bolesti, svojstva uzročnika s ciljem uspješnog liječenja bolesnika i postizanja zadovoljavajućih ishoda kemoterapije ili kemoprofilakse. Jedno od takvih područja mikrobiologije koja se brzo razvija je klinička anaerobna bakteriologija. U mnogim zemljama svijeta ovom se dijelu mikrobiologije posvećuje značajna pozornost. Sekcije posvećene anaerobima i anaerobnim infekcijama uključene su u programe izobrazbe za liječnike različitih specijalnosti. Nažalost, u našoj zemlji ovom dijelu mikrobiologije, kako u smislu izobrazbe specijalista, tako i u dijagnostičkom aspektu rada bakterioloških laboratorija, posvećuje se nedovoljno pažnje. Metodološki priručnik "Anaerobna infekcija" pokriva glavne dijelove ove problematike - definiciju i klasifikaciju, karakteristike anaerobnih mikroorganizama, glavne biotope anaerobnih infekcija u tijelu, karakteristike oblika anaerobne infekcije, smjerove i metode laboratorijske dijagnostika, kao i kompleksna antibakterijska terapija (antimikrobna sredstva, rezistencija/osjetljivost mikroba, metode njezinog određivanja i prevladavanja). Naravno, priručnik nema za cilj dati detaljne odgovore na sve aspekte anaerobne infekcije. Sasvim je jasno da mikrobiolozi koji žele raditi u području anaerobne bakteriologije moraju proći kroz poseban ciklus usavršavanja, potpunije ovladati problematikom mikrobiologije, laboratorijske opreme, metoda indikacije, uzgoja i identifikacije anaeroba. Osim toga, dobra iskustva se stječu sudjelovanjem na posebnim seminarima i simpozijima o anaerobnim infekcijama na nacionalnoj i međunarodnoj razini. Ove metodološke preporuke upućene su bakteriolozima, liječnicima različitih specijalnosti (kirurzima, terapeutima, endokrinolozima, opstetričarima-ginekolozima, pedijatrima), studentima medicinskih i bioloških fakulteta, nastavnicima medicinskih sveučilišta i medicinskih škola.

Uvod

Prve ideje o ulozi anaerobnih mikroorganizama u ljudskoj patologiji pojavile su se prije mnogo stoljeća. Još u 4. stoljeću prije Krista Hipokrat je detaljno opisao kliniku tetanusa, au 4. stoljeću nove ere Ksenofont je opisao slučajeve akutnog nekrotizirajućeg ulceroznog gingivitisa kod grčkih vojnika. Kliničku sliku aktinomikoze opisao je Langenbeck 1845. godine. Međutim, u to vrijeme nije bilo jasno koji mikroorganizmi uzrokuju ove bolesti, koja su njihova svojstva, kao što je koncept anaerobioze bio odsutan sve do 1861. godine, kada je Louis Pasteur objavio klasično djelo o proučavanju Vibrioa. butirig a organizme koji žive u nedostatku zraka nazivaju "anaerobima" (17). Kasnije je Louis Pasteur (1877.) izolirao i uzgojio Clostridium septicum , i Izrael 1878. opisao je aktinomicete. Uzročnik tetanusa je Clostridium tetani - identificirao 1883. N. D. Monastyrsky, a 1884. A. Nikolayer. Prve studije pacijenata s kliničkom anaerobnom infekcijom proveo je Levy 1891. godine. Ulogu anaeroba u razvoju raznih medicinskih patologija prvi je opisao i argumentirao Veiloon. i Zuber godine 1893-1898. Opisali su različite vrste teških infekcija uzrokovanih anaerobnim mikroorganizmima (gangrena pluća, upala slijepog crijeva, apscesi pluća, mozga, zdjelice, meningitis, mastoiditis, kronična upala srednjeg uha, bakterijemija, parametritis, bartolinitis, gnojni artritis). Osim toga, razvili su mnoge metodološke pristupe izolaciji i uzgoju anaeroba (14). Tako su do početka 20. stoljeća mnogi anaerobni mikroorganizmi postali poznati, stvorena je ideja o njihovom kliničkom značaju te je stvorena odgovarajuća tehnika za uzgoj i izolaciju anaerobnih mikroorganizama. Od 60-ih godina prošlog stoljeća pa do danas, hitnost problema anaerobnih infekcija i dalje raste. To je zbog etiološke uloge anaerobnih mikroorganizama u patogenezi bolesti i razvoja rezistencije na široko korištene antibakterijske lijekove, kao i teškog tijeka i visoke smrtnosti bolesti koje uzrokuju.

1.1. Definicija i karakterizacija

U kliničkoj mikrobiologiji mikroorganizmi se obično klasificiraju na temelju njihovog odnosa s atmosferskim kisikom i ugljikovim dioksidom. To je lako provjeriti pri inkubaciji mikroorganizama na krvnom agaru u različitim uvjetima: a) na normalnom zraku (21% kisika); b) u uvjetima CO 2 inkubatora (15% kisika); c) u mikroaerofilnim uvjetima (5% kisika) d) anaerobnim uvjetima (0% kisika). Ovim pristupom bakterije se mogu podijeliti u 6 skupina: obligatni aerobi, mikroaerofilni aerobi, fakultativni anaerobi, aerotolerantni anaerobi, mikroaerotolerantni anaerobi, obligatni anaerobi. Ove informacije korisne su za primarnu identifikaciju i aeroba i anaeroba.

Aerobi. Za rast i razmnožavanje obvezni aerobi trebaju atmosferu koja sadrži molekularni kisik u koncentraciji od 15-21% ili CO; inkubator. Mikobakterije, Vibrio cholerae i neke gljive primjeri su obveznih aeroba. Ovi mikroorganizmi većinu svoje energije dobivaju procesom disanja.

mikroaerofili(mikroaerofilni aerobi). Oni također trebaju kisik za reprodukciju, ali u koncentracijama nižim od onih prisutnih u atmosferi prostorije. Gonococci i Campylobacter su primjeri mikroaerofilnih bakterija i preferiraju atmosferu s udjelom O2 od oko 5%.

mikroaerofilni anaerobi. Bakterije sposobne za rast u anaerobnim i mikroaerofilnim uvjetima, ali ne mogu rasti u CO2 inkubatoru ili zračnom okruženju.

Anaerobi. Anaerobi su mikroorganizmi kojima za život i razmnožavanje nije potreban kisik. Obligatni anaerobi su bakterije koje rastu samo u anaerobnim uvjetima, tj. u atmosferi bez kisika.

Aerotolerantni mikroorganizmi. Mogu rasti u atmosferi koja sadrži molekularni kisik (zrak, CO2 inkubator), ali najbolje rastu u anaerobnim uvjetima.

Fakultativni anaerobi(fakultativni aerobi). Sposoban preživjeti u prisutnosti ili odsutnosti kisika. Mnoge bakterije izolirane iz bolesnika su fakultativni anaerobi (enterobakterije, streptokoki, stafilokoki).

kapnofili. Niz bakterija koje bolje rastu u prisutnosti povišenih koncentracija CO 2 nazivaju se kapnofili ili kapnofilni organizmi. Bacteroides, fusobacteria, hemoglobinofilne bakterije su kapnofili, jer bolje rastu u atmosferi koja sadrži 3-5% CO 2 (2,

19,21,26,27,32,36).

Glavne skupine anaerobnih mikroorganizama prikazane su u tablici 1. (42, 43, 44).

Stolja. Najvažniji anaerobni mikroorganizmi

Rod	Vrste		kratak opis
*Bakteroidi*	U. fragilis U. vulgatus U. distansonis U. eggerthii		Gram-negativne spore koje ne stvaraju štapiće
*Prevotella*	P. melaninogenicus P. bivija P. buccalis P. denticola P. intermedia
*Porfiromonas*	P. asaccharolyticum P. endodontalis P. gingivalis			Gram-negativne spore koje ne stvaraju štapiće
*Ctostridium*	C. perfringens C. ramosum C. septicum C. novyi C. sporogenes C. sordelii C. tetani C. botulinum C. difficile		Gram-pozitivni štapići ili bacili koji stvaraju spore
*Actinomyces*	A. Izrael A. bovis
*Pseudoramibacter* *	P. alactolyticum		Gram-pozitivne šipke koje ne stvaraju spore
		E. lentum E.rectale E. limosum	Gram-pozitivne šipke koje ne stvaraju spore
*Bifidobakterija*		B. eriksonii B. adolescentis B.breve	Gram-pozitivni štapići
*Propionobacterium*		P. akne P. avidum P. granulosum P.propionica**	Gram-pozitivan. štapići koji ne stvaraju spore
*Lactobacillus*		L. catenaforme L. acidophilus	Gram-pozitivni štapići
*Peptococcus*		P. magnus P. sacharolyticus P. asaccharolyticus
*Peptostreptokok*		P. anaerobius P. intermedius P.micros P. produkt	Gram-pozitivni kokci koji ne stvaraju spore
*Veilonella*		V. parvula	Gram-negativne koke koje ne stvaraju spore
*Fusobacterium*		F. nucleatum F. necrophorum F. varium F. mortiferum	Fusiform štapići
*kampilobakter*		C. fetus C.jejuni	Gram-negativne, tanke, spiralne šipke koje ne stvaraju spore

* Eubacterium alaclolyticum reklasificirano kao Pseudoramibacter alactolyticum (43,44)

** ranije Arahnija propionska (44)

*** sinonimi F. pseudonecrophorum, F. necrophorum biovar S(42,44)

1.2. Sastav mikroflore glavnih ljudskih biotopa

Etiologija zaraznih bolesti posljednjih je desetljeća doživjela značajne promjene. Kao što je poznato, ranije su glavnu opasnost za ljudsko zdravlje predstavljale akutne zarazne infekcije: trbušni tifus, dizenterija, salmoneloza, tuberkuloza i mnoge druge, koje su se prenosile uglavnom egzogenim putem. Iako su ove infekcije i dalje društveno važne i sada ponovno raste njihov medicinski značaj, općenito se njihova uloga znatno smanjila. Istodobno se povećava uloga oportunističkih mikroorganizama, predstavnika normalne mikroflore ljudskog tijela. Sastav normalne ljudske mikroflore uključuje više od 500 vrsta mikroorganizama. Normalna mikroflora koja živi u ljudskom tijelu uglavnom je predstavljena anaerobima (tablica 2).

Anaerobne bakterije koje nastanjuju ljudsku kožu i sluznicu, vršeći mikrobnu transformaciju supstrata egzogenog i endogenog podrijetla, proizvode širok spektar raznih enzima, toksina, hormona i drugih biološki aktivnih spojeva koji se apsorbiraju i vežu na komplementarne receptore te utječu na funkcija stanica i organa. Poznavanje sastava specifične normalne mikroflore pojedinih anatomskih regija korisno je za razumijevanje etiologije infektivnih procesa. Ukupnost vrsta mikroorganizama koje nastanjuju određeno anatomsko područje naziva se autohtona mikroflora. Štoviše, detekcija specifičnih mikroorganizama u značajnoj količini na daljinu ili na neuobičajenom mjestu za stanovanje samo naglašava njihovo sudjelovanje u razvoju infektivnog procesa (11, 17, 18, 38).

Dišni put. Mikroflora gornjih dišnih putova vrlo je raznolika i uključuje više od 200 vrsta mikroorganizama koji su dio 21 roda. 90% bakterija u slini su anaerobi (10, 23). Većina ovih mikroorganizama nije klasificirana modernim metodama taksonomije i nisu značajni za patologiju. Dišni putevi zdravih ljudi najčešće su kolonizirani sljedećim mikroorganizmima: Streptococcus pneumoniae- 25-70%; H aemophilus influenzae- 25-85%; Streptococcus pyogenes- 5-10%; Neisseria meningitis- 5-15%. Anaerobni mikroorganizmi kao što su Fusobacterium, Bakteroidi spiralis, Peptostreptokok, Peptococcus, Veilonella i neke vrste Actinomyces naći u gotovo svih zdravih ljudi. Koliformne bakterije nalaze se u respiratornom traktu kod 3-10% zdravih ljudi. Pojačana kolonizacija dišnog trakta ovim mikroorganizmima utvrđena je kod alkoholičara, osoba s teškim tijekom bolesti, kod pacijenata koji primaju antibakterijsku terapiju koja suprimira normalnu mikrofloru, kao i kod osoba s oštećenim funkcijama imunološkog sustava.

Tablica 2. Kvantitativni sadržaj mikroorganizama u biotopima

normalno ljudsko tijelo

Populacije mikroorganizama u respiratornom traktu prilagođavaju se određenim ekološkim nišama (nos, ždrijelo, jezik, gingivalne pukotine). Prilagodba mikroorganizama na te biotope određena je afinitetom bakterija za pojedine vrste stanica ili površina, odnosno određena je staničnim ili tkivnim tropizmom. Na primjer, Streptococcus salivarius dobro pričvršćen za epitel obraza i dominira u sastavu bukalne sluznice. prianjanje bakterija

riy također može objasniti patogenezu određenih bolesti. Streptococcus pyogenes dobro prianja uz epitel ždrijela i često uzrokuje faringitis, E. coli ima afinitet prema epitelu mokraćnog mjehura i stoga uzrokuje cistitis.

Koža. Autohtona mikroflora kože predstavljena je uglavnom bakterijama sljedećih rodova: Stafilokok, Mikrokok, Corinobakterija, Propionobacterium, Brevibacterium I Acinetobacter. Također su često prisutni kvasci roda Pityrosporium. Anaerobi su uglavnom zastupljeni gram-pozitivnim bakterijama roda propi- onobakterija (obično Propionobacterium akne). Gram-pozitivni koki (Peptostreptokok spp.) I Gram-pozitivne bakterije roda Eubacterium prisutan kod nekih pojedinaca.

Uretra. Bakterije koje koloniziraju distalni dio uretre su stafilokoki, nehemolitički streptokoki, difteroidi, au manjem broju slučajeva i razni članovi obitelji Enterobacteriaceae. Anaerobi su u većoj mjeri zastupljeni gram-negativnim bakterijama - BakteroidiIFusobacterium spp..

Vagina. Oko 50% bakterija iz sekreta cerviksa i rodnice su anaerobi. Većina anaeroba su laktobacili i peptostreptokoki. Prevo-tells se često nalaze - P. bivija I P. disiens. Osim toga, Gram-pozitivne bakterije roda Mobiluncus I Clostridium.

Crijeva. Od 500 vrsta koje nastanjuju ljudsko tijelo, otprilike 300 do 400 vrsta živi u crijevima. Sljedeće anaerobne bakterije nalaze se u najvećem broju u crijevima - Bakteroidi, Bifidobakterija, Clostridium, Eubacterium, LactobacillusIPeptostrepto- kokus. Bakteroidi su dominantni mikroorganizmi. Utvrđeno je da na jednu stanicu Escherichie coli dolazi tisuću stanica bakteroida.

2. Čimbenici patogenosti anaerobnih mikroorganizama

Patogenost mikroorganizama označava njihovu potencijalnu sposobnost izazivanja bolesti. Pojava patogenosti kod mikroba povezana je s njihovim stjecanjem niza svojstava koja osiguravaju sposobnost pričvršćivanja, prodiranja i širenja u tijelu domaćina, otpora njegovim obrambenim mehanizmima i oštećenja vitalnih organa i sustava. Istodobno, poznato je da je virulencija mikroorganizama polideterminno svojstvo, koje se u potpunosti ostvaruje samo u organizmu domaćina osjetljivog na uzročnika.

Trenutno se razlikuje nekoliko skupina faktora patogenosti:

a) adhezini ili faktori pričvršćivanja;

b) čimbenici prilagodbe;

c) invazivne, odnosno penetracijske faktore

d) kapsula;

e) citotoksini;

f) endotoksini;

g) egzotoksini;

h) enzimi toksini;

i) faktori modulacije imunološkog sustava;

j) superantigeni;

k) proteini toplinskog šoka (2, 8, 15, 26, 30).

Faze i mehanizmi, raspon reakcija, interakcija i odnosa na molekularnoj, staničnoj i organskoj razini između mikroorganizama i organizma domaćina vrlo su složeni i raznoliki. Poznavanje čimbenika patogenosti anaerobnih mikroorganizama i njihova praktična primjena u prevenciji bolesti još nije dovoljno. Tablica 3 prikazuje glavne skupine patogenih čimbenika anaerobnih bakterija.

Tablica 3. Čimbenici patogenosti anaerobnih mikroorganizama

Faza interakcije		Faktor		Vrste
Prianjanje		Fimbrija kapsularni polisaharidi Hemaglutinini
Invazija		Fosfolipaza C Proteaze
Šteta tkanine	Egzotoksini Hemolizini Proteaze kolagenaza fibrinolizin Neuraminidaza Heparinaza Hondriitin sulfat glukuronidaza N-acetil-glukozaminidaza Citotoksini Enterotoksini neurotoksini		P. melaninogenica P. melaninogenica
Čimbenici koji potiskuju imunološki sustav	Metabolički produkti Lipopolisaharidi (O-antigen) Imunoglobulinske proteaze (G, A, M) C 3 i C 5 konvertaza Proteaza a 2 -mikroglobulin Metabolički produkti Masne kiseline anaeroba Spojevi sumpora Oksidoreduktaza Beta-laktamaze		Većina anaeroba
Aktivatori faktora oštećenja	Lipopolisaharidi (O-antigen) Površinske strukture

Sada je utvrđeno da su faktori patogenosti anaerobnih mikroorganizama genetski određeni. Identificirani su kromosomski i plazmidni geni, kao i transpozoni koji kodiraju različite faktore patogenosti. Proučavanje funkcija ovih gena, mehanizama i obrazaca ekspresije, prijenosa i cirkulacije u populaciji mikroorganizama vrlo je važan problem.

2.1. Uloga anaerobne endogene mikroflore u ljudskoj patologiji

Anaerobni mikroorganizmi normalne mikroflore vrlo često postaju uzročnici infektivnih procesa lokaliziranih u različitim anatomskim dijelovima tijela. Tablica 4 prikazuje učestalost anaerobne mikroflore u razvoju patologije. (2, 7, 11, 12, 18, 24, 27).

Moguće je formulirati niz važnih generalizacija o etiologiji i patogenezi većine tipova anaerobnih infekcija: 1) izvor anaerobnih mikroorganizama je normalna mikroflora bolesnika iz vlastitog gastrointestinalnog, dišnog ili urogenitalnog trakta; 2) promjene svojstava tkiva uslijed traume i/ili hipoksije stvaraju odgovarajuće uvjete za razvoj sekundarne ili oportunističke anaerobne infekcije; 3) anaerobne infekcije u pravilu su polimikrobne i često su uzrokovane mješavinom više vrsta anaerobnih i aerobnih mikroorganizama, koji sinergistički djeluju štetno; 4) infekcija je praćena stvaranjem i oslobađanjem jakog mirisa u oko 50% slučajeva (anaerobi koji ne stvaraju spore sintetiziraju hlapljive masne kiseline koje uzrokuju ovaj miris); 5) infekcija je karakterizirana stvaranjem plinova, nekrozom tkiva, razvojem apscesa i gangrene; 6) infekcija se razvija tijekom liječenja aminoglikozidnim antibioticima (bakteroidi su otporni na njih); 7) opaža se crno bojenje eksudata (porphyromonas i prevotella proizvode tamnosmeđi ili crni pigment); 8) infekcija ima dugotrajan, spor, često subklinički tijek; 9) postoje opsežne nekrotične promjene tkiva, nesklad između težine kliničkih simptoma i volumena destruktivnih promjena, slabo krvarenje na rezu.

Iako anaerobne bakterije mogu uzrokovati ozbiljne i smrtonosne infekcije, početak infekcije općenito ovisi o stanju tjelesnih obrambenih čimbenika, tj. funkcije imunološkog sustava (2, 5, 11). Načela liječenja takvih infekcija uključuju uklanjanje mrtvog tkiva, drenažu, uspostavljanje adekvatne cirkulacije krvi, uklanjanje stranih tvari i primjenu aktivne antimikrobne terapije primjerene uzročniku, u odgovarajućoj dozi i trajanju.

Tablica 4. Etiološka uloga anaerobne mikroflore

u razvoju bolesti

bolesti	Broj pregledanih	Učestalost izolacije anaeroba
Glava i vrat Netraumatski apscesi glave Kronični sinusitis Infekcije perimandibularnog prostora
Prsni koš Aspiracijska pneumonija apsces pluća
Trbuh Apscesi ili peritonitis Upala slijepog crijeva apsces jetre
ženski genitalni trakt mješoviti tipovi Apscesi zdjelice Upalni procesi			33 (100%) 22 (88%)
mekih tkiva infekcija rane Kožni apscesi Dijabetički ulkusi udova Neklostridijalni celulitis
bakterijemija Sve kulture Intraabdominalna sepsa Septički pobačaj

3. Glavni oblici anaerobne infekcije

3.1. Pleuropulmonalna infekcija

Etiološki značajni anaerobni mikroorganizmi u ovoj patologiji predstavnici su normalne mikroflore usne šupljine i gornjih dišnih puteva. Oni su uzročnici raznih infekcija, uključujući aspiracijsku pneumoniju, nekrotizirajuću pneumoniju, aktinomikozu i apsces pluća. Glavni uzročnici pleuropulmonalnih bolesti prikazani su u tablici 5.

Tablica 5. Anaerobne bakterije koje uzrokuju

pleuropulmonalni infekcija

Čimbenici koji pridonose razvoju anaerobne pleuropulmonalne infekcije u bolesnika uključuju aspiraciju normalne mikroflore (kao rezultat gubitka svijesti, disfagije, prisutnosti mehaničkih predmeta, opstrukcije, loše oralne higijene, nekrotizacije plućnog tkiva) i hematogeno širenje mikroorganizama. Kao što se može vidjeti iz tablice 5, aspiracijsku pneumoniju najčešće uzrokuju organizmi koji su se ranije nazivali vrstama "oralnih bakteroida" (trenutno vrste Prevotella i Porphyromonas), Fusobacterium i Peptostreptococcus. Spektar bakterija izoliranih iz anaerobnog empijema i plućnog apscesa gotovo je isti.

3.2. Infekcija dijabetičkog stopala

Među više od 14 milijuna dijabetičara u Sjedinjenim Državama, neugodan miris stopala je najčešći zarazni uzrok hospitalizacije. Ovu vrstu infekcije bolesnici u početnom stadiju često ignoriraju, a ponekad je liječnici i neadekvatno liječe. Općenito, pacijenti ne nastoje pažljivo i redovito pregledavati donje ekstremitete i ne slijede preporuke liječnika za njegu i režim hodanja. Uloga anaeroba u razvoju infekcija stopala kod dijabetičara utvrđena je prije mnogo godina. Glavni tipovi mikroorganizama koji uzrokuju ovu vrstu infekcije prikazani su u tablici 6.

Tablica 6. Aerobni i anaerobni mikroorganizmi koji uzrokuju

infekcija stopala kod dijabetičara

Aerobi	Anaerobi
Proteus mirabili	Bacteroides fragilis
Pseudomonas aeruginosa	druge vrste skupine B. fragilis
Enterobacter aerogenes	Prevotella melaninogenica
Escherichia coli	druge vrste Prevotella\ Porphyromonas
Klebsiella pneumonija	Fusobacterium nucleatum
	druge fuzobakterije
	Peptostreptokok
Staphylococcus aureus	druge vrste klostridija

Utvrđeno je da 18-20% dijabetičara ima mješovitu aerobno-anaerobnu infekciju. U prosjeku je u jednog bolesnika detektirano 3,2 aerobnih i 2,6 anaerobnih vrsta mikroorganizama, a od anaerobnih bakterija dominantni su peptostreptokoki. Često su otkriveni i bakteroidi, prevotele i klostridije. Iz dubokih rana udruženje bakterija izolirano je u 78% slučajeva. Gram-pozitivna aerobna mikroflora (stafilokoki i streptokoki) otkrivena je u 25% bolesnika, a gram-negativna štapićasta aerobna mikroflora otkrivena je u približno 25% bolesnika. Oko 50% anaerobnih infekcija su mješovite. Te su infekcije teže i najčešće zahtijevaju amputaciju zahvaćenog ekstremiteta.

3.3. bakterijemije i sepse

Udio anaerobnih mikroorganizama u razvoju bakterijemije kreće se od 10 do 25%. Većina studija to pokazuje U.fragilis i druge vrste ove skupine, kao i Bakteroidi thetaiotaomicron najčešći su uzrok bakterijemije. Klostridije su sljedeće po učestalosti (osobito Clostridium perfringens) i peptostreptokoke. Često su izolirani u čistoj kulturi ili u udruženjima. Posljednjih desetljeća u mnogim zemljama svijeta bilježi se porast učestalosti anaerobne sepse (s 0,67 na 1,25 slučajeva na 1000 primljenih u bolnicu). Smrtnost bolesnika sa sepsom uzrokovanom anaerobnim mikroorganizmima je 38-50%.

3.4. Tetanus

Tetanus je dobro poznata ozbiljna i često smrtonosna infekcija još od vremena Hipokrata. Stoljećima je ova bolest bila hitan problem povezan s ranama od vatrenog oružja, opeklinama i traumatskim ranama. polemika Clostridium tetani nalaze se u ljudskom i životinjskom izmetu i široko su rasprostranjeni u okolišu. Ramon i kolege 1927. uspješno su predložili imunizaciju toksoidom za prevenciju tetanusa. Rizik od razvoja tetanusa veći je u osoba starijih od 60 godina zbog smanjenja učinkovitosti / gubitka zaštitne postcijepne antitoksične imunosti. Terapija uključuje davanje imunoglobulina, debridman rane, antimikrobnu i antitoksičnu terapiju, stalnu njegu, sedative i analgetike. Trenutačno se posebna pažnja posvećuje neonatalnom tetanusu.

3.5. Proljev

Postoji niz anaerobnih bakterija koje uzrokuju proljev. Anaerobiospirillum proizvođači jantarne kiseline- pokretne bakterije spiralnog oblika s bipolarnim flagelama. Uzročnik se izlučuje izmetom pasa i mačaka s asimptomatskim infekcijama, kao i osoba s proljevom. Enterotoksigeni sojevi U.fragilis. Godine 1984. Mayer je pokazao ulogu sojeva koji proizvode toksine U.fragilis u patogenezi proljeva. Toksigeni sojevi ovog patogena izolirani su iz proljeva kod ljudi i životinja. Ne mogu se razlikovati od uobičajenih sojeva biokemijskim i serološkim metodama. U pokusu uzrokuju proljev i karakteristične lezije debelog crijeva i distalnog tankog crijeva s hiperplazijom kripte. Enterotoksin ima molekulsku masu 19,5 kD i termolabilan je. Patogeneza, spektar i učestalost incidencije, kao ni optimalna terapija još uvijek nisu dovoljno razrađeni.

3.6. Kirurška anaerobna infekcija rana i mekih tkiva

Uzročnici infekcije izolirani iz kirurških rana uvelike ovise o vrsti kirurškog zahvata. Uzrok gnojenja kod čistih kirurških zahvata koji nisu popraćeni otvaranjem gastrointestinalnog, urogenitalnog ili dišnog trakta u pravilu je Sv. aureus. U drugim vrstama gnojenja rane (čisto onečišćene, onečišćene i prljave) najčešće se izolira miješana polimikrobna mikroflora kirurški reseciranih organa. Posljednjih godina bilježi se porast uloge oportunističke mikroflore u razvoju takvih komplikacija. Većina površinskih rana dijagnosticira se kasnije između osmog i devetog dana nakon operacije. Ako se infekcija razvije ranije - unutar prvih 48 sati nakon operacije, to je tipično za gangrenoznu infekciju uzrokovanu određenim vrstama klostridija ili beta-hemolitičkog streptokoka. U ovim slučajeva postoji dramatično povećanje ozbiljnosti bolesti, izražena toksikoza, brzi lokalni razvoj infekcije uz uključivanje svih slojeva tjelesnih tkiva u proces.

3.7. Stvaranje plina infekcija mekih tkiva

Prisutnost plina u inficiranim tkivima zlokoban je klinički znak, au prošlosti su liječnici ovu infekciju najčešće povezivali s prisutnošću uzročnika klostridijske plinske gangrene. Sada je poznato da je infekcija koja stvara plinove kod kirurških pacijenata uzrokovana mješavinom anaerobnih mikroorganizama kao što su Clostridium, Peptostreptokok ili Bakteroidi, ili jedna od vrsta aerobnih koliformnih bakterija. Predisponirajući čimbenici za razvoj ovog oblika infekcije su vaskularne bolesti donjih ekstremiteta, dijabetes, trauma.

3.8. Klostridijalna mionekroza

Plinska gangrena je destruktivni proces mišićnog tkiva povezan s lokalnom krepitacijom, teškom sustavnom intoksikacijom uzrokovanom anaerobnim klostridijama koje stvaraju plin. Klostridije su gram-pozitivni obvezni anaerobi koji su široko rasprostranjeni u tlu kontaminiranom životinjskim izlučevinama. Kod ljudi su inače stanovnici probavnog i ženskog spolnog trakta. Ponekad se mogu naći na koži iu usnoj šupljini. Najznačajnija vrsta od 60 poznatih je Clostridium perfringens. Ovaj mikroorganizam je tolerantniji na atmosferski kisik i brzo raste. Riječ je o alfa toksinu, fosfolipazi C (lecitinazi), koja razgrađuje lecitin na fosforilkolin i digliceride, te kolagenazu i proteazu, koje uzrokuju razaranje tkiva. Proizvodnja alfa-toksina povezana je s visokom smrtnošću kod plinske gangrene. Ima hemolitička svojstva, uništava krvne pločice, uzrokuje intenzivno oštećenje kapilara i sekundarnu destrukciju tkiva. U 80% slučajeva nastaje mionekroza S.perfringens. Osim toga, uključena je i etiologija ove bolesti S.novyi, S. septicum, SA.bifer- mentas. Druge vrste Clostridium C. histolitikum, SA.sporogenes, SA.padati, SA.tercij su niskog etiološkog značaja.

3.9. Spororastuća infekcija nekrotične rane

Agresivna infekcija rane opasna po život Može se pojaviti i do 2 tjedna nakon infekcije, osobito kod dijabetičara

bolestan. Obično su to mješovite ili monomikrobne fascijalne infekcije. Monomikrobne infekcije su relativno rijetke. u oko 10% slučajeva i obično se opažaju u djece. Uzročnici su streptokoki skupine A, Staphylococcus aureus i anaerobni streptokoki (Peptostreptococci). Stafilokok i hemolitički streptokok izoliraju se jednakom učestalošću u oko 30% bolesnika. Većina ih se zarazi izvan bolnice. Većina odraslih ima nekrotizirajući fascilitis ekstremiteta (u 2/3 slučajeva zahvaćeni su ekstremiteti). U djece su češće zahvaćeni trup i prepone. Polimikrobna infekcija uključuje niz procesa uzrokovanih anaerobnom mikroflorom. U prosjeku se od rana razlikuje oko 5 glavnih vrsta. Smrtnost u takvim bolestima ostaje visoka (oko 50% među pacijentima s teškim oblicima). Stariji ljudi obično imaju lošu prognozu. Smrtnost kod osoba starijih od 50 godina je više od 50%, a kod bolesnika s dijabetesom - više od 80%.

3.10. intraperitonealna infekcija

Intraabdominalne infekcije najteže su za rano dijagnosticiranje i učinkovito liječenje. Uspješan ishod prvenstveno ovisi o ranoj dijagnozi, brzoj i adekvatnoj kirurškoj intervenciji te primjeni učinkovitog antimikrobnog režima. Polimikrobna priroda bakterijske mikroflore uključene u razvoj peritonitisa kao posljedice perforacije kod akutnog apendicitisa prvi put je prikazana 1938. Altemeier. Broj aerobnih i anaerobnih mikroorganizama izoliranih iz mjesta intraabdominalne sepse ovisi o prirodi mikroflore ili ozlijeđenog organa. Generalizirani podaci pokazuju da se prosječan broj bakterijskih vrsta izoliranih iz žarišta infekcije kreće od 2,5 do 5. Za aerobne mikroorganizme ti su podaci 1,4–2,0 vrste i 2,4–3,0 vrste anaerobnih mikroorganizama. Najmanje 1 vrsta anaeroba otkriva se u 65-94% bolesnika. Od aerobnih mikroorganizama najčešće se otkrivaju Escherichia coli, Klebsiella, Streptococcus, Proteus, Enterobacter, a od anaerobnih mikroorganizama Bacteroides, Peptostreptococci, Clostridia. Bacteroides čine 30% do 60% svih izoliranih sojeva anaerobnih mikroorganizama. Prema rezultatima brojnih studija, 15% infekcija uzrokovano je anaerobnom, a 10% aerobnom mikroflorom, a prema tome 75% infekcija uzrokovano je asocijacijama. Najznačajniji od njih- E.coli I U.fragilis. Prema N. S. Bogomolovoj i L. V. Bolshakovu (1996.), anaerobna infekcija

bio je uzrok razvoja odontogenih bolesti u 72,2% slučajeva, apendikularni peritonitis - u 62,92% slučajeva, peritonitis zbog ginekoloških bolesti - u 45,45% pacijenata, kolangitis - u 70,2%. Anaerobna mikroflora najčešće je izolirana kod teškog peritonitisa u toksičnom i terminalnom stadiju bolesti.

3.11. Karakterizacija eksperimentalnih anaerobnih apscesa

U eksperimentu U.fragilis inicira razvoj potkožnog apscesa. Početni događaji su migracija polimorfonuklearnih leukocita i razvoj edema tkiva. Nakon 6 dana jasno se identificiraju 3 zone: unutarnja - sastoji se od nekrotičnih masa i degenerativno promijenjenih upalnih stanica i bakterija; srednja je formirana od leukocitne osovine, a vanjska zona je predstavljena slojem kolagena i fibroznog tkiva. Koncentracija bakterija kreće se od 10 8 do 10 9 u 1 ml gnoja. Apsces karakterizira nizak redoks potencijal. Vrlo je teško liječiti, jer postoji uništavanje antimikrobnih lijekova od strane bakterija, kao i bijeg od obrambenih faktora domaćina.

3.12. Pseudomembranozni kolitis

Pseudomembranozni kolitis (PMC) je ozbiljna gastrointestinalna bolest koju karakteriziraju eksudativni plakovi na sluznici debelog crijeva. Ova je bolest prvi put opisana 1893. godine, mnogo prije pojave antimikrobnih lijekova i njihove upotrebe u medicinske svrhe. Sada je utvrđeno da je etiološki faktor ove bolesti Clostridium difficile. Kršenje mikroekologije crijeva zbog uporabe antibiotika uzrok je razvoja MVP-a i širokog širenja infekcija uzrokovanih S.difficile, čiji klinički spektar manifestacija vrlo varira - od nosivosti i kratkotrajnog, spontano prolaznog proljeva do razvoja MVP-a. Broj bolesnika s kolitisom uzrokovanim C. difficile, među ambulantnim pacijentima 1-3 na 100.000, a među hospitaliziranim pacijentima 1 na 100-1000.

Patogeneza. Kolonizacija ljudskog crijeva toksigenim sojevima S,difficile važan je čimbenik u razvoju PMC-a. Međutim, asimptomatsko nositeljstvo javlja se u otprilike 3-6% odraslih i 14-15% djece. Normalna crijevna mikroflora služi kao pouzdana prepreka kolonizaciji patogenih mikroorganizama. Lako se poremeti antibioticima i vrlo se teško oporavi. Najizraženiji učinak na anaerobnu mikrofloru imaju cefalosporini 3. generacije, klindamicin (skupina linkomicina) i ampicilin. U pravilu svi bolesnici s MVP-om pate od proljeva. Istodobno, stolica je tekuća s nečistoćama krvi i sluzi. Postoji hiperemija i otok crijevne sluznice. Često se primjećuje ulcerozni kolitis ili proktitis, karakteriziran granulacijama, hemoragičnom sluznicom. Većina bolesnika s ovom bolešću ima vrućicu, leukocitozu i napetost u trbuhu. Nakon toga se mogu razviti ozbiljne komplikacije, uključujući opću i lokalnu intoksikaciju, hipoalbuminemiju. Simptomi proljeva uzrokovanog uzimanjem antibiotika počinju 4-5 dana antibiotske terapije. U stolici takvih bolesnika S. difficile u 94% slučajeva, dok se u zdravih odraslih osoba ovaj mikroorganizam izolira samo u 0,3% slučajeva.

S.difficile proizvodi dvije vrste vrlo aktivnih egzotoksina - A i B. Toksin A je enterotoksin koji uzrokuje hipersekreciju i nakupljanje tekućine u crijevima, kao i upalnu reakciju s hemoragičnim sindromom. Toksin B je citotoksin. Neutralizira se polivalentnim antigangrenoznim serumom. Ovaj citotoksin nalazi se u približno 50% bolesnika s kolitisom uzrokovanim primjenom antibiotika bez pseudomembranozne tvorbe i u 15% bolesnika s proljevom uzrokovanim primjenom antibiotika s normalnim nalazima sigmoidoskopije. Njegovo citotoksično djelovanje temelji se na depolimerizaciji mikrofilamentnog aktina i oštećenju citoskeleta enterocita. U posljednje vrijeme pojavljuje se sve više podataka o S.difficile kao nozokomijalni uzročnik infekcije. S tim u vezi, poželjno je izolirati kirurške bolesnike, nositelje ovog mikroorganizma, kako bi se izbjeglo širenje infekcije u bolnici. S.difficile najosjetljiviji na vankomicin, metronidazol i bacitracin. Dakle, ova opažanja potvrđuju da sojevi koji proizvode toksine S.difficile uzrokuju širok raspon bolesti, uključujući proljev, kolitis i MVP.

3.13. Obstetričko-ginekološke infekcije

Razumijevanje obrazaca razvoja infekcija ženskih spolnih organa moguće je na temelju dubinskog proučavanja mikrobiocenoze vagine. Normalna mikroflora vagine mora se promatrati kao zaštitna barijera protiv najčešćih patogena.

Disbiotski procesi doprinose nastanku bakterijske vaginoze (BV). BV je povezan s razvojem komplikacija kao što su anaerobne postoperativne infekcije mekog tkiva, postpartalni i postabortivni endometritis, prijevremeni pobačaj, intraamnionska infekcija (10). Opstetričko-ginekološka infekcija je polimikrobne prirode. Prije svega, želim istaknuti sve veću ulogu anaeroba u razvoju akutnih upalnih procesa zdjeličnih organa - akutne upale privjesaka maternice, postporođajni endometritis, osobito nakon operativnog poroda, postoperativne komplikacije u ginekologiji (perikultitis, apscesi, infekcija rane) (5 ). Mikroorganizmi koji se najčešće izoliraju iz infekcija ženskog genitalnog trakta uključuju Baktemidi fragilis, kao i vrste Peptococcus I Peptostreptokok. Streptokoki skupine A ne nalaze se često u infekcijama zdjelice. Streptokoki skupine B često uzrokuju sepsu u opstetričkih bolesnica kojima su ulazna vrata genitalni trakt. Posljednjih godina, s opstetričkim i ginekološkim infekcijama, izdvaja se sve više S.trachomatis. Među najčešćim infektivnim procesima urogenitalnog trakta su pelvioperitonitis, endometritis nakon carskog reza, infekcije vaginalne manšete nakon histerektomije, infekcije zdjelice nakon septičkog pobačaja. Učinkovitost klindamicina u ovim infekcijama kreće se od 87% do 100% (10).

3.14. Anaerobna infekcija u bolesnika s rakom

Rizik od infekcije kod bolesnika s rakom neusporedivo je veći nego kod ostalih kirurških bolesnika. Ova se značajka objašnjava nizom čimbenika - ozbiljnošću osnovne bolesti, imunodeficijencijom, velikim brojem invazivnih dijagnostičkih i terapijskih postupaka, velikim volumenom i traumatizmom kirurških intervencija, primjenom vrlo agresivnih metoda liječenja - radio i kemoterapije. . U bolesnika operiranih zbog tumora gastrointestinalnog trakta u postoperativnom razdoblju nastaju subdijafragmalni, subhepatični i intraperitonealni apscesi anaerobne etiologije. Dominantni patogeni Bakteroidi fragi- lis, Prevotella spp.. Fusobacterium spp., gram pozitivne koke. Posljednjih godina sve je više izvještaja o važnoj ulozi nesporogenih anaeroba u razvoju septičkih stanja i njihovoj izolaciji iz krvi tijekom bakterijemije (3).

4. Laboratorijska dijagnostika

4.1. Materijal koji se proučava

Laboratorijska dijagnoza anaerobne infekcije prilično je težak zadatak. Vrijeme istraživanja od trenutka dostave patološkog materijala s klinike u mikrobiološki laboratorij do dobivanja potpunog detaljnog odgovora je od 7 do 10 dana, što ne može zadovoljiti kliničare. Često rezultat bakteriološke analize postaje poznat do trenutka otpuštanja pacijenta. U početku treba odgovoriti na pitanje: jesu li u materijalu prisutni anaerobi. Važno je zapamtiti da su anaerobi glavna komponenta lokalne mikroflore kože i sluznice te da se, štoviše, njihova izolacija i identifikacija mora provesti u odgovarajućim uvjetima. Uspješan početak istraživanja kliničke mikrobiologije anaerobnih infekcija ovisi o pravilnom prikupljanju odgovarajućeg kliničkog materijala.

U normalnoj laboratorijskoj praksi najčešće se koriste sljedeći materijali: 1) inficirane lezije iz gastrointestinalnog trakta ili ženskog spolnog trakta; 2) materijal iz trbušne šupljine s peritonitisom i apscesima; 3) krv septičkih bolesnika; 4) iscjedak kod kroničnih upalnih bolesti respiratornog trakta (sinusitis, otitis media, mastoiditis); 5) materijal iz donjih dijelova respiratornog trakta kod aspiracijske pneumonije; 6) cerebrospinalna tekućina kod meningitisa; 7) sadržaj apscesa mozga; 8) lokalni materijal za bolesti zuba; 9) sadržaj površinskih apscesa: 10) sadržaj površinskih rana; 11) materijal inficiranih rana (kirurških i traumatskih); 12) biopsije (19, 21, 29, 31, 32, 36, 38).

4.2. Faze istraživanja materijala u laboratoriju

Uspješno dijagnosticiranje i liječenje anaerobne infekcije moguće je samo uz zainteresiranu suradnju mikrobiologa i kliničara odgovarajućeg profila. Pribavljanje odgovarajućih uzoraka za mikrobiološka ispitivanja je od ključne važnosti. Metode uzimanja materijala ovise o mjestu i vrsti patološkog procesa. Laboratorijska istraživanja temelje se na indikaciji i naknadnoj identifikaciji vrste anaerobnih i aerobnih mikroorganizama sadržanih u ispitivanom materijalu tradicionalnim i ekspresnim metodama, kao i na određivanju osjetljivosti izoliranih mikroorganizama na antimikrobne kemoterapijske lijekove (2).

4.3. Izravno ispitivanje materijala

Postoje mnogi brzi izravni testovi koji snažno ukazuju na prisutnost anaeroba u velikom broju u ispitnom materijalu. Neki od njih su prilično jednostavni i jeftini i stoga imaju prednosti pred mnogim skupim laboratorijskim testovima.

1. 3 a p a x. Smrdljivi materijali uvijek sadrže anaerobe, samo nekoliko njih je bez mirisa.

2. Plinska tekućinska kromatografija (GLC). Odnosi se na broj ekspresnih dijagnostičkih metoda. GLC vam omogućuje određivanje u gnoju kratkolančanih masnih kiselina (octena, propionska, izovalerijanska, izokaproična, kapronska), koje uzrokuju miris. Uz pomoć GLC-a, prema spektru hlapivih masnih kiselina, moguće je izvršiti identifikaciju vrsta mikroorganizama prisutnih u njemu.

3. Fluorescencija. Proučavanje materijala (gnoj, tkiva) u ultraljubičastom svjetlu na valnoj duljini od 365 nm otkriva intenzivnu crvenu fluorescenciju, što se objašnjava prisutnošću crno pigmentiranih bakterija iz skupine Basteroides i Porphyromonas, a što ukazuje na prisutnost anaeroba.

4. Bakterioskopija. U proučavanju mnogih pripravaka obojenih metodom po Gramu, bris otkriva prisutnost stanica upalnog fokusa, mikroorganizama, posebno polimorfnih gram-negativnih šipki, malih gram-pozitivnih kokija ili gram-pozitivnih bacila.

5. Imunofluorescencija. Izravna i neizravna imunofluorescencija su ekspresne metode i omogućuju otkrivanje anaerobnih mikroorganizama u ispitivanom materijalu.

6. ELISA metoda. ELISA omogućuje određivanje prisutnosti strukturnih antigena ili egzotoksina anaerobnih mikroorganizama.

7. Molekularno biološke metode. Najveću rasprostranjenost, osjetljivost i specifičnost posljednjih godina pokazala je lančana reakcija polimerazom (CPR). Koristi se kako za otkrivanje bakterija izravno u materijalu, tako i za identifikaciju.

4.4. Metode i sustavi za stvaranje anaerobnih uvjeta

Materijal uzet iz odgovarajućih izvora iu prikladnim spremnicima ili transportnom mediju za tu svrhu treba odmah dostaviti u laboratorij. Međutim, postoje dokazi da klinički značajni anaerobi u velikim količinama gnoja ili u anaerobnom transportnom mediju prežive 24 sata. Važno je da se inokulirani medij inkubira u anaerobnim uvjetima ili da se stavi u posudu ispunjenu CO2 i pohrani do prijenosa u poseban sustav inkubacije. Postoje tri vrste anaerobnih sustava koji se obično koriste u kliničkim laboratorijima. Više korišteni sustavi su mikroanaerostati tipa (GasPark, BBL, Cockeysville), koji se već dugi niz godina koriste u laboratorijima, posebno u malim laboratorijima, i daju zadovoljavajuće rezultate. Petrijeve zdjelice s inokulacijom anaerobnih bakterija stavljaju se u posudu istovremeno s posebnom vrećicom za stvaranje plina i indikatorom. U vrećicu se dodaje voda, posuda se hermetički zatvori, CO2 i H2 se oslobađaju iz vrećice u prisustvu katalizatora (obično paladija). U prisutnosti katalizatora, H2 reagira s O2 stvarajući vodu. CO2 je bitan za rast anaeroba, jer su oni kapnofili. Dodaje se metilensko modrilo kao indikator anaerobnih uvjeta. Ako sustav za stvaranje plina i katalizator rade učinkovito, tada će indikator izgubiti boju. Većina anaeroba zahtijeva najmanje 48 sati kulture. Nakon toga se otvori komora i prvi put se pregledaju čašice, što nije baš zgodno, budući da su anaerobi osjetljivi na kisik i brzo gube sposobnost preživljavanja.

Nedavno su u praksi ušli jednostavniji anaerobni sustavi - anaerobne vrećice. Jedna ili dvije zasađene posude s vrećicom za stvaranje plina stavljaju se u prozirnu, hermetički zatvorenu polietilensku vrećicu i inkubiraju u termostatskim uvjetima. Prozirnost polietilenskih vrećica olakšava povremeno praćenje rasta mikroorganizama.

Treći sustav za uzgoj anaerobnih mikroorganizama je automatski zatvorena komora sa staklenom prednjom stijenkom (anaerobna stanica) s gumenim rukavicama i automatskim dovodom mješavine plinova bez kisika (N2, H2, CO2). Materijali, čašice, epruvete, tablete za biokemijsku identifikaciju i osjetljivost na antibiotike stavljat će se u ovaj ormar kroz poseban otvor. Sve manipulacije obavlja bakteriolog u gumenim rukavicama. Materijal i posude u ovom sustavu mogu se pregledavati svakodnevno, a usjevi se mogu inkubirati od 7-10 dana.

Ova tri sustava imaju svoje prednosti i nedostatke, ali su učinkoviti za izolaciju anaeroba i trebali bi biti u svakom bakteriološkom laboratoriju. Često se koriste istovremeno, ali najveću pouzdanost ima metoda uzgoja u anaerobnoj stanici.

4.5. Hranjive podloge i uzgoj

Proučavanje anaerobnih mikroorganizama provodi se u nekoliko faza. Opća shema za izolaciju i identifikaciju anaeroba prikazana je na slici 1.

Važan čimbenik u razvoju anaerobne bakteriologije je dostupnost zbirke tipičnih bakterijskih sojeva, uključujući referentne sojeve iz kolekcija ATCC, CDC i VPI. Ovo je posebno važno za praćenje hranjivih podloga, za biokemijsku identifikaciju čistih kultura i za procjenu djelovanja antibakterijskih lijekova. Postoji širok raspon osnovnih medija koji se koriste za pripremu posebnih anaerobnih medija za kulturu.

Hranjive podloge za anaerobe moraju ispunjavati sljedeće osnovne zahtjeve: 1) zadovoljavati prehrambene potrebe; 2) osigurati brz rast mikroorganizama; 3) biti primjereno smanjen. Primarna inokulacija materijala provodi se na pločicama s krvnim agarom ili izbornim podlogama prikazanima u tablici 7.

Izolacija obligatnih anaeroba iz kliničkog materijala sve se češće provodi na podlogama koje sadrže selektivne tvari u određenoj koncentraciji, što omogućuje izolaciju određenih skupina anaeroba (20, 23) (tablica 8).

Trajanje inkubacije i učestalost pregleda inokuliranih pločica ovisi o ispitivanom materijalu i sastavu mikroflore (tablica 9).

Materijal koji se proučava

rane koje se mogu odvojiti,

sadržaj apscesa,

Traheobronhonski aspirat itd.

Prijevoz u laboratorij: u čempresu, u posebnom transportnom mediju (trenutno stavljanje materijala u medij)

Mikroskopija materijala

Bojenje po Gramu

Uzgoj i izolacija

čista kultura

Čašice za aerobik za

35±2°C u usporedbi s

18-28 sati anaerobi

5-10% S0 2

1. krvni agar mikroaerostat

Gaz-Pak

(H 2 + C0 2)

35±2°C

od 48 sati do 7 dana

2. Schaedler krvni agar

35±2°C

od 48 sati do 7 dana

3. Selektivni medij za identifikaciju

anaerobi

od 48 sati do 2 tjedna

4. Tekući medij (tioglikol)

Identifikacija.Čiste kulture iz izoliranih kolonija

1. Boja po Gramu i Orzeszku za otkrivanje spora

2. Morfologija kolonija

3. Odnos vrste kolonije s kisikom

4. Preliminarna diferencijacija prema osjetljivosti na antimikrobne lijekove

5.Biokemijske pretrage

Određivanje osjetljivosti na antibiotike

1. Metoda razrjeđivanja u agaru ili bujonu

2. Metoda papirnog diska (difuzija)

Riža. 1. Izolacija i identifikacija anaerobnih mikroorganizama

anaerobni mikroorganizmi

srijeda	Svrha
Brucella krvni agar (CDC anaerobni krvni agar, Shadler krvni agar) (BRU agar)	Neselektivno, za izolaciju anaeroba prisutnih u materijalu
Žučni eskulinski agar za bakteroide(WWE agar)	Selektivno i diferencijalno; za izolaciju bakterija iz skupine Bacteroides fragilis
Kanamicin-vankomicin krvni agar(KVLB)	Selektivan za većinu onih koji ne stvaraju spore Gram-negativne bakterije
Fenil Etil Agar(GRAŠAK)	Inhibira rast Proteusa i drugih enterobakterija; stimulira rast gram-pozitivnih i gram-negativnih anaeroba
Tioglikolni bujon(THIO)	Za posebne situacije
agar od žumanjaka(EYA)	Za izolaciju klostridije
Cikloserin-cefoksitin-fruktozni agar(CCFA) ili cikloserin manit agar (CMA) ili cikloserin manit krvni agar (CMBA)	Selektivan za C. difficile
Crystal-violet-eritromicin-novi agar(CVEB)	Za izolaciju Fusobacterium nucleatum i Leptotrichia buccalis
Bacteroid gingivalis agar(BGA)	Za izolaciju Porphyromonas gingivalis

Tablica 8. Selektivni agensi za obligatne anaerobe

organizmi	Selektivna sredstva
Obligate anaerobi iz kliničkog materijala	neomicin (70mg/l) nalidiksična kiselina (10 mg/l)
Actinomyces spp.	metronidazol (5 mg/l)
Bacteroides spp. Fusobacterium spp.	nalidiksična kiselina (10 mg/l) + vankomicin (2,5 mg/l)
Bacteroides urealytica	nalidiksična kiselina (10 mg/l) teikoplanin (20 mg/l)
Clostridium difficile	cikloserin (250 mg/l) cefoksitin (8 mg/l)
Fusobacterium	rifampicin (50 mg/l) neomicin (100 mg/l) vankomicin (5 mg/l)

Obračunavanje rezultata provodi se opisom svojstava kulture uzgojenih mikroorganizama, pigmentacije kolonija, fluorescencije, hemolize. Potom se iz kolonija priprema bris, boji po Gramu i tako se otkrivaju Gram-negativne i Gram-pozitivne bakterije, mikroskopski i opisuju morfološka svojstva. Nakon toga se mikroorganizmi svake vrste kolonija supkultiviraju i kultiviraju u tioglikolnoj juhi uz dodatak hemina i vitamina K. Morfologija kolonija, prisutnost pigmenta, hemolitička svojstva i karakteristike bakterija u bojama po Gramu omogućuju preliminarno identificirati i razlikovati anaerobe. Kao rezultat toga, svi anaerobni mikroorganizmi mogu se podijeliti u 4 skupine: 1) Gr + cocci; 2) Gr+ bacili ili kokobacili: 3) Gr- koki; 4) Gr-bacili ili kokobacili (20, 22, 32).

Tablica 9. Trajanje inkubacije i učestalost istraživanja

kulture anaerobnih bakterija

Vrsta usjeva	Vrijeme inkubacije*	Učestalost proučavanja
Krv		Svaki dan do 7. i poslije 14
Tekućine		Dnevno
Apscesi, rane		Dnevno
Zračni putovi Sputum Transtrahealni aspirat Bronhijalni iscjedak		Dnevno jednom Dnevno Dnevno
Urogenitalni trakt Vagina, maternica, prostata		Dnevno Dnevno Dnevno jednom
Izmet		Dnevno
Anaerobi Brucela aktinomicete		Dnevno 3 puta tjedno 1 puta tjedno

*do dobivanja negativnog rezultata

U trećoj fazi istraživanja provodi se duža identifikacija. Konačna identifikacija temelji se na određivanju biokemijskih svojstava, fizioloških i genetskih karakteristika, faktora patogenosti u testu neutralizacije toksina. Iako potpunost identifikacije anaeroba može jako varirati, neki jednostavni testovi s velikom vjerojatnošću omogućuju identifikaciju čistih kultura anaerobnih bakterija – bojanje po Gramu, pokretljivost, osjetljivost na pojedine antibiotike pomoću papirnatih diskova i biokemijska svojstva.

5. Antibakterijska terapija anaerobne infekcije

Sojevi mikroorganizama otporni na antibiotike pojavili su se i počeli širiti odmah nakon širokog uvođenja antibiotika u kliničku praksu. Mehanizmi nastanka rezistencije mikroorganizama na antibiotike su složeni i raznoliki. Dijele se na primarne i stečene. Stečena rezistencija nastaje pod utjecajem lijekova. Glavni načini njegovog stvaranja su sljedeći: a) inaktivacija i modifikacija lijeka enzimskim sustavima bakterija i njegov prijenos u neaktivni oblik; b) smanjenje propusnosti površinskih struktura bakterijske stanice; c) kršenje mehanizama transporta u stanicu; d) promjena funkcionalnog značaja mete za lijek. Mehanizmi stečene rezistencije mikroorganizama povezani su s promjenama na genetskoj razini: 1) mutacije; 2) genetske rekombinacije. Mehanizmi intra- i interspecifičnog prijenosa ekstrakromosomskih čimbenika nasljeđa - plazmida i transpozona, koji kontroliraju rezistenciju mikroorganizama na antibiotike i druge kemoterapijske lijekove - imaju iznimno važnu ulogu (13, 20, 23, 33, 39). Podaci o rezistenciji anaerobnih mikroorganizama na antibiotike dobiveni su epidemiološkim i genetskim/molekularnim studijama. Epidemiološki podaci pokazuju da je od otprilike 1977. došlo do porasta rezistencije anaerobnih bakterija na nekoliko antibiotika: tetraciklin, eritromicin, penicilin, ampicilin, amoksicilin, tikarcilin, imipenem, metronidazol, kloramfenikol itd. Otprilike 50% bakteroida je otporno na penicilin G i tetraciklin.

Kod propisivanja antibiotske terapije mješovite aerobno-anaerobne infekcije potrebno je odgovoriti na niz pitanja: a) gdje je infekcija lokalizirana?; b) koji mikroorganizmi najčešće uzrokuju infekcije u ovom području?; c) koja je težina bolesti?; d) koje su kliničke indikacije za primjenu antibiotika?; e) kakva je sigurnost primjene ovog antibiotika?; e) koliki je njegov trošak?; g) koje je njegovo antibakterijsko svojstvo?; h) koliko je prosječno trajanje uzimanja lijeka do izlječenja?; i) prolazi li krvno-moždanu barijeru?; j) kako djeluje na normalnu mikrofloru?; k) Jesu li za liječenje ovog procesa potrebni dodatni antimikrobni lijekovi?

5.1. Značajke glavnih antimikrobnih lijekova koji se koriste u liječenju anaerobnih infekcija

P e n i c i l l i n s. Povijesno gledano, penicilin G se naširoko koristio za liječenje miješanih infekcija. Međutim, anaerobi, posebice bakterije iz skupine Bacteroides fragilis, imaju sposobnost stvaranja beta-laktamaze i uništavanja penicilina, što smanjuje njegovu terapijsku učinkovitost. Ima nisku do umjerenu toksičnost, mali učinak na normalnu mikrofloru, ali ima malo djelovanja protiv anaeroba koji proizvode beta-laktamazu i ograničeno je protiv aerobnih mikroorganizama. Polusintetski penicilini (naflacin, oksacilin, kloksacilin i dikloksacilin) su manje aktivni i neadekvatni za liječenje anaerobnih infekcija. Usporedna randomizirana studija kliničke učinkovitosti penicilina i klindamicina za liječenje plućnih apscesa pokazala je da je primjena klindamicina u bolesnika smanjila razdoblje vrućice i produkcije sputuma na 4,4 naspram 7,6 dana odnosno na 4,2 naspram 8 dana. Prosječno je izliječeno 8 (53%) od 15 bolesnika liječenih penicilinom, dok je svih 13 bolesnika (100%) liječenih klindamicinom izliječeno. Klindamicin je učinkovitiji od penicilina u liječenju bolesnika s anaerobnim apscesom pluća. U prosjeku, učinkovitost penicilina bila je oko 50-55%, a klindamicin - 94-95%. Istodobno je u materijalu zabilježena prisutnost mikroorganizama rezistentnih na penicilin, što je uzrokovalo čest razlog neučinkovitosti penicilina, a ujedno pokazalo da je klindamicin lijek izbora za terapiju na početku liječenja.

T e tra c i c lin y. Tetracikline također karakterizira niska

koja toksičnost i minimalan učinak na normalnu mikrofloru. Tetraciklini su također ranije bili lijekovi izbora, jer su gotovo svi anaerobi bili osjetljivi na njih, ali od 1955. godine dolazi do porasta rezistencije na njih. Doksiciklin i monociklin su aktivniji od njih, ali značajan broj anaeroba također je otporan na njih.

Kl o r a m f e n i k o l. Kloramfenikol ima značajan učinak na normalnu mikrofloru. Ovaj lijek je izuzetno učinkovit protiv bakterija iz skupine B. fragilis, dobro prodire u tjelesne tekućine i tkiva, a ima prosječnu aktivnost protiv drugih anaeroba. U tom smislu koristi se kao lijek izbora u liječenju po život opasnih bolesti, posebice onih koje zahvaćaju središnji živčani sustav, budući da lako prodire kroz krvno-moždanu barijeru. Nažalost, kloramfenikol ima niz nedostataka (inhibicija hematopoeze ovisna o dozi). Osim toga, može izazvati idiosenkratičnu aplastičnu anemiju neovisnu o dozi. Neki sojevi C. perfringens i B. fragilis mogu reducirati p-nitro skupinu kloramfenikola i selektivno je inaktivirati. Neki sojevi B. fragilis vrlo su otporni na kloramfenikol jer proizvode acetiltransferazu. Trenutačno je upotreba kloramfenikola za liječenje anaerobnih infekcija značajno smanjena kako zbog straha od razvoja nuspojava hematoloških učinaka, tako i zbog pojave mnogih novih, učinkovitih lijekova.

K l i n d a m i c i n. Klindamicin je 7(S)-kloro-7-deoksi derivat linkomicina. Kemijska modifikacija molekule linkomicina rezultirala je s nekoliko prednosti: boljom apsorpcijom iz gastrointestinalnog trakta, osmerostrukim povećanjem aktivnosti protiv aerobnih gram-pozitivnih koka, proširenjem spektra djelovanja protiv mnogih gram-pozitivnih i gram-negativnih anaerobnih bakterija, kao i protozoe (Toxoplasma i Plasmodium). Terapijske indikacije za primjenu klindamicina dosta su široke (Tablica 10).

Gram-pozitivne bakterije. Rast više od 90% sojeva S. aureus je inhibiran u prisutnosti klindamicina u koncentraciji od 0,1 µg/ml. U koncentracijama koje se lako mogu postići u serumu, klindamicin je aktivan protiv Str. pyogenes, Str. upala pluća, Str. viridans. Većina sojeva bacila difterije također je osjetljiva na klindamicin. U odnosu na gram-negativne aerobne bakterije Klebsiella, Escherichia coli, Proteus, Enterobacter, Shigella, Serratia, Pseudomonas, ovaj antibiotik je neaktivan. Gram-pozitivni anaerobni koki, uključujući sve vrste peptokoka, peptostreptokoka, kao i propionobakterije, bifidumbakterije i laktobacile, općenito su vrlo osjetljivi na klindamicin. Na njega su osjetljive i klinički značajne klostridije - C. perfringens, C. tetani, kao i druge klostridije, koje se često nalaze u intraperitonealnim i pelvičnim infekcijama.

Tablica 10. Indikacije za primjenu klindamicina

Biotop	Bolest
gornjih dišnih puteva	Tonsilitis, faringitis, sinusitis, otitis media, šarlah
donji respiratorni trakt	Bronhitis, upala pluća, empijem, apsces pluća
Koža i meka tkiva	Piodermija, čirevi, celulitis, impetigo, apscesi, rane
Kosti i zglobovi	Osteomijelitis, septički artritis
Organi zdjelice	Endometritis, celulitis, infekcije vaginalne manžete, tubo-ovarijski apscesi
Usne šupljine	parodontni apsces, parodontitis
Septikemija, endokarditis

Gram-negativni anaerobi - bakteroidi, fusobacteria i veillonella - vrlo su osjetljivi na klindamicin. Dobro je raspoređen u mnogim tkivima i biološkim tekućinama, tako da se u većini njih postižu značajne terapijske koncentracije, ali ne prolazi krvno-moždanu barijeru. Posebno su zanimljive koncentracije lijeka u tonzilama, plućnom tkivu, slijepom crijevu, jajovodima, mišićima, koži, kostima, sinovijalnoj tekućini. Klindamicin se koncentrira u neutrofilima i makrofagima. Alveolarni makrofagi koncentriraju klindamicin intracelularno (30 minuta nakon primjene, koncentracija premašuje izvanstaničnu koncentraciju 50 puta). Povećava fagocitnu aktivnost neutrofila i makrofaga, stimulira kemotaksiju, inhibira proizvodnju određenih bakterijskih toksina.

M e t r o n i d a z o l. Ovaj kemoterapijski lijek karakterizira vrlo niska toksičnost, baktericidan je protiv anaeroba i ne inaktiviraju ga bakteroidne beta-laktamaze. Bakteroidi su vrlo osjetljivi na njega, ali određeni anaerobni koki i anaerobni Gram-pozitivni bacili mogu biti otporni. Metronidazol je neaktivan na aerobnu mikrofloru iu liječenju intraabdominalne sepse mora se kombinirati s gentamicinom ili nekim aminoglikozidima. Može uzrokovati prolaznu neutropeniju. Kombinacije metronidazol-gentamicin i klindamicin-gentamicin ne razlikuju se u učinkovitosti u liječenju ozbiljnih intraabdominalnih infekcija.

C e f o k s i t i n. Ovaj antibiotik pripada cefalosporinima, ima nisku i umjerenu toksičnost i, u pravilu, nije inaktiviran bakteroidnom beta-laktamazom. Iako postoje izvješća o slučajevima izolacije rezistentnih sojeva anaerobnih bakterija zbog prisutnosti proteina koji vežu antibiotike koji smanjuju transport lijeka u bakterijsku stanicu. Otpornost bakterije B. fragilis na cefoksitin kreće se od 2 do 13%. Preporučuje se za liječenje umjerenih abdominalnih infekcija.

C e f o t e t a n. Ovaj lijek je aktivniji protiv gram-negativnih anaerobnih mikroorganizama u usporedbi s cefoksitinom. Međutim, približno 8% do 25% sojeva B. fragilis pokazalo se otpornim na njega. Djelotvoran je u liječenju ginekoloških i abdominalnih infekcija (apscesi, upala slijepog crijeva).

C e f met a z o l. Po spektru je sličan cefoksitinu i cefotetanu (aktivniji od cefoksitina, ali manje aktivan od cefotetana). Može se koristiti za liječenje blagih do umjerenih infekcija.

C e f a pera z o n. Karakterizira ga niska toksičnost, veća aktivnost u usporedbi s gornja tri lijeka, ali je na njega identificirano od 15 do 28% rezistentnih sojeva anaerobnih bakterija. Jasno je da to nije lijek izbora za liječenje anaerobne infekcije.

C e f t i z o k c i m. To je siguran i učinkovit lijek u liječenju infekcija nogu u bolesnika s dijabetesom, traumatskim peritonitisom, upalom slijepog crijeva.

M e r o p e n e m. Meropenem, novi karbapenem metiliran na poziciji 1, otporan je na djelovanje renalne dehidrogenaze 1, koja ga razgrađuje. Oko 2-4 puta je aktivniji od imipenema protiv aerobnih gram-negativnih mikroorganizama, uključujući predstavnike enterobakterija, hemofilusa, pseudomonasa, neisseria, ali ima nešto manje djelovanja protiv stafilokoka, nekih streptokoka i enterokoka. Njegovo djelovanje protiv gram-pozitivnih anaerobnih bakterija slično je djelovanju imipenema.

5.2. Kombinacije beta-laktamskih lijekova i inhibitora beta-laktamaze

Razvoj inhibitora beta-laktamaza (klavulanat, sulbaktam, tazobaktam) je perspektivan smjer i omogućuje korištenje novih beta-laktamskih sredstava zaštićenih od hidrolize uz njihovu istovremenu primjenu: a) amoksicilin - klavulanska kiselina - ima širi spektar antimikrobnog djelovanja nego sam amoksicilin i blizak je učinkovitosti kombinaciji antibiotika - penicilin-kloksacilin; b) tikarcilin-klavulanska kiselina - proširuje spektar antimikrobnog djelovanja antibiotika protiv bakterija koje proizvode beta-lakgamazu kao što su stafilokoki, hemofilus, Klebsiella i anaerobi, uključujući bakteroide. Minimalna inhibitorna koncentracija ove smjese bila je 16 puta niža od koncentracije tikarcilina; c) ampicilin-sulbaktam - kada se kombiniraju u omjeru 1:2, njihov se spektar značajno proširuje i uključuje stafilokoke, hemofilus, klebsielu i većinu anaerobnih bakterija. Samo 1% bakteroida je otporno na ovu kombinaciju; d) cefaperazon-sulbaktam - u omjeru 1:2 također značajno proširuje spektar antibakterijskog djelovanja; e) piperacilin-tazobaktam. Tazobaktam je novi beta-laktamski inhibitor koji djeluje na mnoge beta-laktamaze. Stabilniji je od klavulanske kiseline. Ova se kombinacija može smatrati lijekom za empirijsku monoterapiju teških polimikrobnih infekcija kao što su pneumonija, intraabdominalna sepsa, nekrotizirajuće infekcije mekog tkiva, ginekološke infekcije; f) imipenem-cilastatin - imipenem je član nove klase antibiotika poznatih kao karbapenemi. Koristi se u kombinaciji sa cilastatinom u omjeru 1:1. Njihova je učinkovitost slična klindamicin-aminoglikozidima u liječenju miješane anaerobne kirurške infekcije.

5.3. Klinički značaj određivanja osjetljivosti anaerobnih mikroorganizama na antimikrobne lijekove

Rastuća rezistencija mnogih anaerobnih bakterija na antimikrobna sredstva postavlja pitanje kako i kada je opravdano određivanje osjetljivosti na antibiotike. Trošak ovog testiranja i vrijeme potrebno za dobivanje konačnog rezultata dodatno povećavaju važnost ovog pitanja. Jasno je da početna terapija anaerobnih i miješanih infekcija treba biti empirijska. Temelji se na specifičnosti infekcije i određenom spektru bakterijske mikroflore u pojedinoj infekciji. Treba uzeti u obzir patofiziološko stanje i prethodnu upotrebu antimikrobnih sredstava koja su mogla promijeniti normalnu mikrobiotu i mikrobiotu lezije, kao i rezultate bojenja po Gramu. Sljedeći korak trebao bi biti rana identifikacija dominantne mikroflore. Podaci o spektru specifične antibakterijske osjetljivosti dominantne mikroflore. Podaci o spektru antibakterijske osjetljivosti vrste dominantne mikroflore omogućit će nam procjenu primjerenosti inicijalno odabranog režima liječenja. U liječenju, ako je tijek infekcije nepovoljan, potrebno je koristiti određivanje osjetljivosti čiste kulture na antibiotike. Godine 1988. ad hoc radna skupina za anaerobe pregledala je preporuke i indikacije za ispitivanje osjetljivosti anaeroba na antimikrobna sredstva.

Određivanje osjetljivosti anaeroba preporučuje se u sljedećim slučajevima: a) potrebno je ustanoviti promjene u osjetljivosti anaeroba na određene lijekove; b) potreba utvrđivanja spektra djelovanja novih lijekova; c) u slučajevima osiguranja bakteriološkog praćenja pojedinog bolesnika. Osim toga, određene kliničke situacije također mogu diktirati potrebu za njegovom provedbom: 1) u slučaju neuspješno odabranog početnog antimikrobnog režima i perzistencije infekcije; 2) kada odabir učinkovitog antimikrobnog lijeka ima ključnu ulogu u ishodu bolesti; .3) kada je izbor lijeka u konkretnom slučaju otežan.

Treba imati na umu da, s kliničkog gledišta, postoje i druge točke: a) povećanje rezistencije anaerobnih bakterija na antimikrobne lijekove veliki je klinički problem; b) postoji neslaganje među kliničarima o kliničkoj učinkovitosti određenih lijekova protiv anaerobnih infekcija; c) postoje odstupanja u rezultatima osjetljivosti mikroorganizama na lijekove in vitro i njihove učinkovitosti in vivo; r) Tumačenje rezultata koje je prihvatljivo za aerobe ne mora se uvijek odnositi na anaerobe. Promatranjem osjetljivosti/rezistentnosti 1200 sojeva bakterija izoliranih iz različitih biotopa pokazalo se da je značajan dio njih visoko rezistentan na najčešće korištene lijekove (Tablica 11).

Tablica 11. Otpornost anaerobnih bakterija na

često korišteni antibiotici

bakterije	Antibiotici	Postotak rezistentnih oblika
Peptostreptokok	Penicilin Eritromicin Klindamicin
Clostridium perfringens	Penicilin Cefoksitin Metronidazol Eritromicin Klindamicin
Bacteroides fragilis	cefoksitin metronidazol eritromicin klindamicin
Veilonella	penicilin metronidazol eritromicin

Istodobno, brojnim studijama utvrđene su minimalne inhibitorne koncentracije najčešćih lijekova koje su primjerene za liječenje anaerobnih infekcija (Tablica 12).

Tablica 12 Minimalne inhibitorne koncentracije

antibiotici za anaerobne mikroorganizme

Minimalna inhibitorna koncentracija (MIC) je najniža koncentracija antibiotika koja u potpunosti inhibira rast mikroorganizama. Vrlo važan problem je standardizacija i kontrola kvalitete određivanja osjetljivosti mikroorganizama na antibiotike (korišteni testovi, njihova standardizacija, priprema medija, reagensa, obuka osoblja koje provodi ovaj test, korištenje referentnih kultura: B. fragilis-ATCC 25285; B. thetaiotaomicron - ATCC 29741; C. perfringens-ATCC 13124; E. lentum-ATCC 43055).

U opstetriciji i ginekologiji za liječenje anaerobnih infekcija koriste se penicilin, neki cefalosporini 3-4 generacije, linkomicin, kloramfenikol. Međutim, najučinkovitiji antianaerobni lijekovi su predstavnici skupine 5-nitroimidazola - metronidazol, tinidazol, ornidazol i klindamicin. Učinkovitost liječenja samim metronidazolom je 76-87%, ovisno o bolesti, a 78-91% tinidazolom. Kombinacija imidazola s aminoglikozidima, cefalosporinima 1.-2.generacije povećava uspješnost liječenja do 90-95%. Značajnu ulogu u liječenju anaerobnih infekcija ima klindamicin. Kombinacija klindamicina s gentamicinom je referentna metoda za liječenje gnojno-upalnih bolesti ženskih spolnih organa, osobito u slučajevima miješanih infekcija.

6. Korekcija crijevne mikroflore

Tijekom prošlog stoljeća, normalna ljudska crijevna mikroflora bila je predmet aktivnih istraživanja. Brojnim istraživanjima utvrđeno je da autohtona mikroflora gastrointestinalnog trakta ima značajnu ulogu u osiguravanju zdravlja organizma domaćina, igrajući važnu ulogu u sazrijevanju i održavanju funkcije imunološkog sustava, kao i u osiguravanju niza metabolički procesi. Polazna točka za razvoj disbiotičkih manifestacija u crijevu je suzbijanje autohtone anaerobne mikroflore - bifidobakterija i laktobacila, kao i poticanje razmnožavanja oportunističke mikroflore - enterobakterija, stafilokoka, streptokoka, klostridije, kandide. I. I. Mechnikov formulirao je glavne znanstvene odredbe o ulozi autohtone mikroflore crijeva, njegovoj ekologiji i iznio ideju zamjene štetne mikroflore korisnom kako bi se smanjila intoksikacija tijela i produžio ljudski život. Ideja I. I. Mečnikova dalje je razvijena u razvoju niza bakterijskih pripravaka koji se koriste za korekciju ili "normalizaciju" ljudske mikroflore. Zovu se "eubiotici", odnosno "probiotici", a sadrže žive odn

osušene bakterije iz roda Bifidobacterium i Lactobacillus. Pokazano je imunomodulatorno djelovanje niza eubiotika (primjećuje se stimulacija proizvodnje protutijela, aktivnost peritonealnih makrofaga). Također je važno da sojevi eubiotskih bakterija imaju kromosomsku rezistenciju na antibiotike, a njihova kombinirana primjena povećava stopu preživljavanja životinja. Najrašireniji fermentirani mliječni oblici laktobakterina i bifidumbakterina (4).

7. Zaključak

Anaerobna infekcija jedan je od neriješenih problema moderne medicine (osobito kirurgije, ginekologije, terapije, stomatologije). Dijagnostičke poteškoće, pogrešna procjena kliničkih podataka, pogreške u liječenju, antibiotskoj terapiji itd. dovode do visoke smrtnosti u bolesnika s anaerobnim i miješanim infekcijama. Sve ovo ukazuje na potrebu brzog otklanjanja kako postojećeg nedostatka znanja u ovoj oblasti bakteriologije, tako i značajnih nedostataka u dijagnostici i terapiji.

anaerobni organizmi

Aerobne i anaerobne bakterije preliminarno se identificiraju u tekućem hranjivom mediju prema koncentracijskom gradijentu O2:
1. Obavezan aerobik(kisik zahtjevne) bakterije uglavnom skupljaju se na vrhu cijevi kako bi apsorbirali maksimalnu količinu kisika. (Iznimka: mikobakterije - rast filma na površini zbog voštano-lipidne membrane.)
2. Obligatni anaerobni bakterije se skupljaju na dnu kako bi izbjegle kisik (ili ne bi rasle).
3. Neobavezno bakterije se skupljaju uglavnom na vrhu (što je povoljnije od glikolize), ali se mogu naći u cijelom mediju, budući da ne ovise o O 2 .
4. Mikroaerofili skupljaju se u gornjem dijelu cijevi, ali njihov optimum je niska koncentracija kisika.
5. Aerotolerantan anaerobi ne reagiraju na koncentracije kisika i ravnomjerno su raspoređeni po epruveti.

Anaerobi- organizmi koji dobivaju energiju u odsutnosti pristupa kisiku fosforilacijom supstrata, krajnji produkti nepotpune oksidacije supstrata mogu se oksidirati kako bi proizveli više energije u obliku ATP-a u prisutnosti konačnog akceptora protona organizmima koji provode oksidaciju fosforilacija.

Anaerobi su opsežna skupina organizama, kako na mikro tako i na makro razini:

anaerobni mikroorganizmi- opsežna skupina prokariota i nekih protozoa.
makroorganizmi - gljive, alge, biljke i neke životinje (klasa foraminifera, većina helminta (klasa metilja, trakavice, valjkasti crvi (na primjer, ascaris)).

Osim toga, anaerobna oksidacija glukoze igra važnu ulogu u radu poprečno-prugaste muskulature životinja i ljudi (osobito u stanju hipoksije tkiva).

Klasifikacija anaeroba

Prema klasifikaciji utvrđenoj u mikrobiologiji postoje:

Fakultativni anaerobi
Kapneistički anaerobi i mikroaerofili
Aerotolerantni anaerobi
Umjereno strogi anaerobi
obvezni anaerobi

Ako se organizam može prebaciti s jednog metaboličkog puta na drugi (na primjer, s anaerobnog disanja na aerobno disanje i obrnuto), tada se uvjetno naziva tzv. fakultativni anaerobi .

Do 1991. godine izdvojen je razred mikrobiologije kapneistički anaerobi, koji zahtijevaju nisku koncentraciju kisika i povećanu koncentraciju ugljičnog dioksida (Brucella bovine tip - B. abortus)

Umjereno strogi anaerobni organizam preživljava u okolišu s molekularnim O 2 ali se ne razmnožava. Mikroaerofili mogu preživjeti i razmnožavati se u okruženju s niskim parcijalnim tlakom O 2 .

Ako organizam nije u stanju "preći" s anaerobnog na aerobno disanje, ali ne umire u prisutnosti molekularnog kisika, tada pripada skupini aerotolerantni anaerobi. Na primjer, mliječna kiselina i mnoge maslačne bakterije

obavezan anaerobi u prisutnosti molekularnog kisika O 2 umiru - na primjer, predstavnici roda bakterija i arheja: Bakteroidi, Fusobacterium, Butyrivibrio, Methanobacterium). Takvi anaerobi stalno žive u okruženju bez kisika. Obligate anaerobe uključuju neke bakterije, kvasce, bičaše i trepljače.

Toksičnost kisika i njegovih oblika za anaerobne organizme

Okolina bogata kisikom agresivna je prema organskim oblicima života. To je zbog stvaranja reaktivnih spojeva kisika tijekom života ili pod utjecajem raznih oblika ionizirajućeg zračenja, koji su mnogo toksičniji od molekularnog kisika O 2 . Čimbenik koji određuje održivost organizma u kisikovoj sredini je prisutnost funkcionalnog antioksidativnog sustava sposobnog eliminirati: superoksidni anion (O 2 -), vodikov peroksid (H 2 O 2), singletni kisik (O .) i također i molekularni kisik (O 2) iz unutarnjeg okoliša tijela. Najčešće takvu zaštitu osigurava jedan ili više enzima:

superoksid dismutaza eliminirajući superoksidni anion (O 2 -) bez energetskih dobrobiti za tijelo
katalaza, eliminacija vodikovog peroksida (H 2 O 2) bez energetskih dobrobiti za tijelo
citokrom- enzim odgovoran za prijenos elektrona od NAD H do O 2. Ovaj proces daje značajnu energetsku korist tijelu.

Aerobni organizmi najčešće sadrže tri citokroma, fakultativni anaerobi - jedan ili dva, obvezni anaerobi ne sadrže citokrome.

Anaerobni mikroorganizmi mogu aktivno utjecati na okoliš stvarajući odgovarajući redoks potencijal okoliša (npr. Cl.perfringens). Neke zasijane kulture anaerobnih mikroorganizama, prije nego što se počnu razmnožavati, snižavaju pH 2 0 s vrijednosti na , štiteći se redukcijskom barijerom, druge - aerotolerantne - tijekom svoje vitalne aktivnosti proizvode vodikov peroksid, povećavajući pH 2 0.

Istodobno, glikoliza je karakteristična samo za anaerobe, koji se, ovisno o konačnim produktima reakcije, dijele na nekoliko vrsta fermentacije:

mliječno kiselo vrenje Lactobacillus ,Streptococcus , Bifidobakterija, kao i neka tkiva višestaničnih životinja i ljudi.
alkoholno vrenje - saharomicete, kandida (organizmi iz carstva gljiva)
mravlja kiselina - obitelj enterobakterija
maslačna - neke vrste klostridije
propionska kiselina - propionobakterije (npr. Propionibacterium acnes)
fermentacija s oslobađanjem molekularnog vodika - neke vrste Clostridium, Sticklandova fermentacija
metanska fermentacija – npr. Methanobacterium

Kao rezultat razgradnje glukoze troše se 2 molekule, a sintetiziraju se 4 molekule ATP-a. Dakle, ukupni prinos ATP-a je 2 molekule ATP-a i 2 molekule NAD·H 2 . Piruvat dobiven tijekom reakcije stanica koristi na različite načine, ovisno o vrsti fermentacije.

Antagonizam fermentacije i raspadanja

U procesu evolucije formiran je i učvršćen biološki antagonizam fermentativne i truležne mikroflore:

Razgradnju ugljikohidrata mikroorganizmima prati značajno smanjenje okoliša, dok razgradnju bjelančevina i aminokiselina prati povećanje (alkalinizacija). Prilagodba svakog od organizama na određenu reakciju okoline igra važnu ulogu u prirodi i ljudskom životu, primjerice, zbog procesa fermentacije sprječava se truljenje silaže, fermentiranog povrća i mliječnih proizvoda.

Uzgoj anaerobnih organizama

Izolacija čiste kulture anaeroba shematski

Uzgoj anaerobnih organizama uglavnom je zadatak mikrobiologije.

Za uzgoj anaeroba koriste se posebne metode, čija je suština uklanjanje zraka ili njegova zamjena specijaliziranom mješavinom plinova (ili inertnih plinova) u zatvorenim termostatima. - anaerostati .

Drugi način uzgoja anaeroba (najčešće mikroorganizama) na hranjivim podlogama je dodavanje reducirajućih tvari (glukoza, natrij mravlja kiselina i dr.) koje smanjuju redoks potencijal.

Uobičajeni medij za rast anaerobnih organizama

Za opće okruženje Wilson - Blair baza je agar-agar s dodatkom glukoze, natrijevog sulfita i željeznog klorida. Klostridije stvaraju crne kolonije na ovom mediju redukcijom sulfita u sulfidni anion, koji se spaja s kationima željeza (II) dajući crnu sol. U pravilu se na ovoj podlozi u dubini stupca agara pojavljuju crne kolonije.

srijeda Kitta - Tarozzi sastoji se od mesno-peptonske juhe, 0,5% glukoze i komada jetre ili mljevenog mesa za apsorbiranje kisika iz okoline. Prije sjetve, medij se zagrijava u kipućoj vodenoj kupelji 20-30 minuta kako bi se uklonio zrak iz medija. Nakon sjetve, hranjivi medij se odmah napuni slojem parafina ili parafinskog ulja kako bi se izolirao od pristupa kisiku.

Metode opće kulture anaerobnih organizama

Gaspack- sustav kemijski osigurava postojanost plinske smjese prihvatljivu za rast većine anaerobnih mikroorganizama. U zatvorenoj posudi, voda reagira s tabletama natrijevog borhidrida i natrijevog bikarbonata i stvara vodik i ugljični dioksid. Vodik zatim reagira s kisikom iz plinske smjese na paladijevom katalizatoru da nastane voda, koja već ponovno reagira hidrolizom borohidrida.

Ovu su metodu predložili Brewer i Olgaer 1965. Programeri su predstavili jednokratnu vrećicu za generiranje vodika, koja je kasnije nadograđena u vrećice za generiranje ugljičnog dioksida koje sadrže unutarnji katalizator.

Zeisslerova metoda koristi se za izolaciju čistih kultura anaeroba koji stvaraju spore. Da biste to učinili, inokulirajte na Kitt-Tarozzi medij, zagrijavajte ga 20 minuta na 80 °C (da uništite vegetativni oblik), napunite medij vazelinskim uljem i inkubirajte 24 sata u termostatu. Zatim se provodi sijanje na šećerno-krvni agar kako bi se dobile čiste kulture. Nakon 24-satnog uzgoja proučavaju se kolonije od interesa - potkulturiraju se na Kitt-Tarozzi mediju (uz naknadnu kontrolu čistoće izolirane kulture).

Fortnerova metoda

Fortnerova metoda- inokulacije se rade na Petrijevoj zdjelici sa zadebljanim slojem podloge, podijeljenom na pola uskim utorom izrezanim u agaru. Jedna polovica je zasijana kulturom aerobnih bakterija, druga polovica je inokulirana anaerobnim bakterijama. Rubovi čašice se napune parafinom i inkubiraju u termostatu. U početku se uočava rast aerobne mikroflore, a zatim (nakon apsorpcije kisika) rast aerobne mikroflore naglo prestaje i počinje rast anaerobne mikroflore.

Weinbergova metoda koristi se za dobivanje čistih kultura obveznih anaeroba. Kulture uzgojene na mediju Kitta-Tarozzi prenose se u šećernu juhu. Zatim se jednokratnom Pasteur-ovom pipetom materijal prenosi u uske epruvete (Vignalove epruvete) sa šećernim mesno-peptonskim agarom, uranjajući pipetu do dna epruvete. Inokulirane epruvete se brzo hlade, što omogućuje fiksiranje bakterijskog materijala u debljini stvrdnutog agara. Epruvete se inkubiraju u termostatu, a zatim se proučavaju izrasle kolonije. Kada se pronađe kolonija od interesa, na njenom mjestu se napravi rez, materijal se brzo uzme i inokulira na Kitta-Tarozzi medij (uz naknadnu kontrolu čistoće izolirane kulture).

Peretzova metoda

Peretzova metoda- u otopljeni i ohlađeni šećerni agar-agar unese se kultura bakterija i izlije pod staklo postavljeno na plutene štapiće (ili komadiće šibica) u Petrijevu zdjelicu. Metoda je najmanje pouzdana od svih, ali je vrlo jednostavna za korištenje.

Diferencijalno - dijagnostičke hranjive podloge

okruženja gissa("šareni red")
srijeda Ressel(Russell)
srijeda Ploskireva ili baktoagar "Zh"
Bizmut sulfit agar

Njegovi mediji: U 1% peptonsku vodu dodati 0,5% otopinu određenog ugljikohidrata (glukoza, laktoza, maltoza, manitol, saharoza itd.) i Andredeov acidobazni indikator, uliti u epruvete u koje je stavljen plovak za hvatanje plina. produkti koji nastaju tijekom razgradnje ugljikovodika.

Ressel srijeda(Russell) koristi se za proučavanje biokemijskih svojstava enterobakterija (Shigella, Salmonella). Sadrži hranjivi agar-agar, laktozu, glukozu i indikator (bromtimol plavo). Boja medija je travnato zelena. Obično se priprema u tubama od 5 ml s ukošenom površinom. Sjetva se izvodi injekcijom u dubinu stupa i potezom po zakošenoj površini.

Srijeda Ploskirev(Bactoagar Zh) je diferencijalno dijagnostički i selektivni medij, jer inhibira rast mnogih mikroorganizama i potiče rast patogenih bakterija (uzročnika tifusa, paratifusa, dizenterije). Laktoza-negativne bakterije stvaraju bezbojne kolonije na ovoj podlozi, dok laktoza-pozitivne bakterije stvaraju crvene kolonije. Medij sadrži agar, laktozu, briljantno zeleno, žučne soli, mineralne soli, indikator (neutralno crveno).

Bizmut sulfit agar Osmišljen je za izolaciju salmonele u čistom obliku iz zaraženog materijala. Sadrži triptični digest, glukozu, faktore rasta salmonele, briljantno zeleno i agar. Diferencijalna svojstva medija temelje se na sposobnosti Salmonella da proizvodi sumporovodik, na njihovoj otpornosti na prisutnost sulfida, briljantnog zelenog i bizmut citrata. Kolonije su označene crnom bojom bizmut sulfida (tehnika je slična podlozi Wilson - Blair).

Metabolizam anaerobnih organizama

Metabolizam anaerobnih organizama ima nekoliko različitih podskupina:

Anaerobni energetski metabolizam u tkivima ljudski I životinje

Anaerobna i aerobna proizvodnja energije u ljudskim tkivima

Neka tkiva životinja i ljudi karakterizira povećana otpornost na hipoksiju (osobito mišićno tkivo). U normalnim uvjetima sinteza ATP-a odvija se aerobno, a tijekom intenzivne mišićne aktivnosti, kada je dostava kisika u mišiće otežana, u stanju hipoksije, kao i tijekom upalnih reakcija u tkivima, dominiraju anaerobni mehanizmi regeneracije ATP-a. U skeletnim mišićima identificirana su 3 tipa anaerobnog i samo jedan aerobni put regeneracije ATP-a.

3 tipa anaerobnog puta sinteze ATP-a

Anaerobni uključuju:

Mehanizam kreatin fosfataze (fosfogen ili alaktat) - refosforilacija između kreatin fosfata i ADP
Miokinaza - sinteza (inače resinteza) ATP u reakciji transfosforilacije 2 molekule ADP (adenilatne ciklaze)
Glikolitička - anaerobna razgradnja zaliha glukoze ili glikogena u krvi, koja završava stvaranjem

KATEGORIJE

Probir

Ultrazvuk ekstremiteta

Vrste ultrazvuka

ultrazvuk abdomena

ultrazvuk prsnog koša

POPULARNI ČLANCI

	Negacija ne s glagolima (u osobnom obliku, u infinitivu, u obliku gerunda) piše se odvojeno: ne uzimaj, nije, ne znajući, polako
	Izlaganje, referat glavne značajke filozofije renesanse
	Stil fikcije
	Djeca zemlje Prezentacija mi smo djeca zemlje za vrt
	Prezentacija na temu Prepreke u komunikaciji, rad su radili učenici Bez komunikacije se zaključavamo.

2023 "kingad.ru" - ultrazvučni pregled ljudskih organa