डायग्नोस्टिकम vi और एंटीजेनिक एरिथ्रोसाइट। डायग्नोस्टिकम एरिथ्रोसाइट साल्मोनेला ओ
पंजीकरण प्रमाणपत्र संख्या आरजेडएन 2016/3905 दिनांक 04.04.2016
उद्देश्य
अभिकर्मक किट "आरपीएचए के लिए डायग्नोस्टिकम एरिथ्रोसाइट साल्मोनेला वी-एंटीजेनिक" (एसईडी-वीआई) को निष्क्रिय रक्तगुल्म परीक्षण (आरपीएचए) द्वारा मानव रक्त सीरम में टाइफाइड बुखार के प्रेरक एजेंट के वी-एंटीजन का पता लगाने के लिए डिज़ाइन किया गया है।
विशेषता सेट करें
परिचालन सिद्धांत
टाइफाइड बुखार के प्रेरक एजेंट के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति में, वी-एंटीजन के साथ संवेदनशील चिकन एरिथ्रोसाइट्स का रक्तगुल्म देखा जाता है, जिससे प्लेट के यू-आकार के कुओं के तल पर बसे हुए एरिथ्रोसाइट्स के "छाता" का निर्माण होता है। . टाइफाइड बुखार के प्रेरक एजेंट के प्रति एंटीबॉडी की अनुपस्थिति में, बसे हुए एरिथ्रोसाइट्स एक "बिंदु" बनाते हैं।
रचना सेट करें
| अभिकर्मक का नाम | विवरण | सेट में मात्रा |
|---|---|---|
| डायग्नोस्टिकम एरिथ्रोसाइट साल्मोनेला वी-एंटीजेनिक, सूखा 6% (एसईडी) | औपचारिक चिकन एरिथ्रोसाइट्स को S.typhi Vi एंटीजन के साथ संवेदनशील बनाया गया। भूरे रंग का शुष्क हीड्रोस्कोपिक द्रव्यमान। विघटन के बाद - लाल-भूरे रंग का निलंबन। | 1 शीशी, 0.6 मिली . से |
| सीरम डायग्नोस्टिक साल्मोनेला adsorbed, Vi रिसेप्टर, सूखा (पतला 1:20, (K+)) | साल्मोनेला ने खरगोश सीरम, वीआई रिसेप्टर, पतला 1:20 को सोख लिया। सफेद रंग का सूखा हीड्रोस्कोपिक झरझरा द्रव्यमान। विघटन के बाद, यह एक स्पष्ट पीला या रंगहीन तरल है। | 1 शीशी, 0.3 मिली . से |
| नमूना मंदक (आरआईडी) | नीला-बैंगनी तरल साफ़ करें। | 1 शीशी, 10 मिली |
| फॉस्फेट बफर समाधान (पीबीएस) | पारदर्शी रंगहीन तरल। | 1 शीशी, 10 मिली |
| प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं के लिए एकल उपयोग बहुलक प्लेट | पारदर्शी रंगहीन पॉलीस्टाइनिन से बनी प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं के लिए एकल-उपयोग बहुलक प्लेट। | 1 पीसी। |
नैदानिक विशेषताएं
डायग्नोस्टिकम को आरपीएचए में डायग्नोस्टिक साल्मोनेला adsorbed सीरम, वीआई रिसेप्टर, ड्राई (1:20 के कमजोर पड़ने पर) के साथ सीरम लेबल पर इंगित टिटर के साथ जोड़ा जाना चाहिए। स्वस्थ लोगों के रक्त सीरम की नैदानिक विशेषताओं के सशर्त स्तर को सीरम का पतलापन 1:20 से अधिक नहीं माना जाना चाहिए। विश्लेषण का समय 3040 मिनट है। किट को स्क्रीनिंग विकल्प में 42 रक्त सीरा या अनुमापन विकल्प में 10 रक्त सीरा के अध्ययन के लिए डिज़ाइन किया गया है।
एहतियाती उपाय
किट केवल इन विट्रो डायग्नोस्टिक उपयोग के लिए है। किट घटकों में शामिल पदार्थ निष्क्रिय और सुरक्षित हैं। किट के साथ काम करते समय SP 1.3.2322-08 और SanPiN 2.1.7.2790-10 का पालन करना चाहिए।
अतिरिक्त उपकरण और सामग्री
उपकरण, सामग्री, समाधान:
- चर खुराक मात्रा 5-40 μl के साथ 1-चैनल पिपेट डिस्पेंसर; 40 - 200 μl; 200 - 1000 μl और 1000 - 5000 μl;
- पिपेट डिस्पेंसर 8- या 12-चैनल चर खुराक मात्रा 5-40 μl और 40-200 μl के साथ;
- आसुत जल (GOST 6709-72)।
विश्लेषण किए गए नमूने
अध्ययन किए गए रक्त सीरम के नमूने रक्त के नमूने के क्षण से 3 दिनों से अधिक समय तक 2 से 8 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर संग्रहीत किए जाते हैं। इसे जमे हुए अवस्था में माइनस 18 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं के तापमान पर 1 वर्ष से अधिक नहीं रखने की अनुमति है। उपयोग करने से पहले, नमूनों को 16 से 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पिघलाया जाता है और मिलाते हुए मिलाया जाता है। पुन: ठंड की अनुमति नहीं है। जीवाणु वृद्धि और हेमोलिसिस वाले नमूनों का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए। प्रतिक्रिया स्थापित करने से पहले, परीक्षण सीरा को 30 मिनट के लिए 56 डिग्री सेल्सियस पर गरम किया जाता है।
विश्लेषण का संचालन
नियंत्रण नैदानिक सीरम (K+) की तैयारी
डायग्नोस्टिक साल्मोनेला adsorbed सीरम, वीआई रिसेप्टर, 0.3 मिलीलीटर (के +) से सूखा (पतला 1:20) का एक कार्यशील समाधान तैयार करें। ऐसा करने के लिए, के + के साथ शीशी की सामग्री में 0.3 मिलीलीटर फॉस्फेट बफर समाधान (पीबीएस) जोड़ा जाता है। सीरम की शेष मात्रा को 6 महीने से अधिक के लिए शून्य से 18 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं के तापमान पर जमे हुए और संग्रहीत किया जा सकता है।
एरिथ्रोसाइट साल्मोनेला (एसईडी) के लिए निदान की तैयारी
साल्मोनेला एरिथ्रोसाइट डायग्नोस्टिकम के निलंबन का एक कामकाजी कमजोर पड़ने के लिए, 0.6 मिलीलीटर आसुत जल को सूखी 6% एसईडी के साथ एक शीशी की सामग्री में जोड़ा जाता है और 16 से 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 2 घंटे के लिए जलयोजन के लिए छोड़ दिया जाता है। फिर समाधान में 2.4 मिलीलीटर फॉस्फेट बफर समाधान (पीबीएस) जोड़ा जाता है। काम कर रहे समाधान को 2 से 8 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 1 महीने से अधिक समय तक संग्रहीत नहीं किया जाता है। ठंड की अनुमति नहीं है।
रक्त सीरा की जांच के दौरान RPHA का विवरण
स्क्रीनिंग सीरा को प्लेट के कुओं में निम्न प्रकार से पतला किया जाता है:
- टैबलेट के पहले कुओं में 1:20 के प्रारंभिक कमजोर पड़ने को तैयार किया जाता है, पहले उनमें आरआईपी समाधान के 190 μl, फिर अध्ययन किए गए सीरा के 10 μl को जोड़ा जाता है। प्रत्येक सीरम को एक अलग टिप के साथ जोड़ा जाता है और सावधानी से पिपेट किया जाता है (इस मामले में, कुओं में घोल का रंग सीरा डालने के बाद नीले-बैंगनी से हरे रंग में बदलना चाहिए);
- दूसरे कुओं में 1:40 की स्क्रीनिंग कमजोरियां तैयार की जाती हैं, पहले उनमें पीबीएस समाधान के 25 μl पेश किए जाते हैं, और फिर 25 μl पूर्व-पतला सीरा और सावधानी से pipetting।
RPHA की प्रत्येक सेटिंग के साथ, K + अनुमापांक का नियंत्रण निर्धारण करना आवश्यक है। ऐसा करने के लिए, पीबीएस समाधान के 50 μl लंबी पंक्ति के 8 कुओं में जोड़े जाते हैं। फिर, K + वर्किंग सॉल्यूशन (1:20) के 50 μl को पहले कुएं में जोड़ा जाता है, ध्यान से पिपेट किया जाता है और अगले कुओं में स्थानांतरित किया जाता है, प्रत्येक 50 μl, 1:40 से 1:5120 तक 2 गुना कमजोर पड़ने वाला होता है। एक और 4 कुओं में, सहज रक्तगुल्म की अनुपस्थिति के लिए एसईडी को नियंत्रित करने के लिए पीबीएस समाधान के 50 μl जोड़ा जाता है।
अध्ययन किए गए सीरा (पहले युक्त आरआईपी को छोड़कर) और नियंत्रण के स्क्रीनिंग कमजोर पड़ने के साथ टैबलेट के सभी कुओं में, एसईडी के 25 μl जोड़ें। उपयोग करने से पहले एक बोतल या स्नान में SED निलंबन को हिलाएं!टैबलेट को अच्छी तरह से हिलाया जाता है और नियंत्रण में एरिथ्रोसाइट्स के पूर्ण अवसादन तक 30 से 40 मिनट के लिए 16 से 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर छोड़ दिया जाता है।
अध्ययन किए गए रक्त सीरम के अनुमापन के दौरान RPHA का विवरण
प्लेट की छोटी पंक्तियों में अध्ययन किए गए सीरा और K+ कार्यशील घोल का अनुमापन किया जाता है। ईडीएस के सहज रक्तगुल्म की अनुपस्थिति को नियंत्रित करने के लिए एक और छोटी पंक्ति का उपयोग किया जाता है।
परीक्षण सीरम के अनुमापन के लिए छोटी पंक्तियों के पहले कुओं में, RIP समाधान का 180 μl जोड़ा जाता है। अन्य सभी कुओं पीबीएस समाधान के 50 μl से भरे हुए हैं।
परीक्षण सीरा के 20 μl आरआईपी समाधान के साथ कुओं में जोड़े जाते हैं (एक 1:10 कमजोर पड़ने प्राप्त होता है)। प्रत्येक सीरम को उसके सिरे से जोड़ा जाता है और सावधानी से पिपेट किया जाता है (कुओं में घोल का रंग नीले-बैंगनी से हरे रंग में बदलना चाहिए)। फिर, 50 μl को पहले कुओं से पंक्तियों के अगले कुओं में स्थानांतरित किया जाता है, 1:20 से 1:1280 तक दो गुना कमजोर पड़ने वाला होता है। अनुमापन के अंत में, अंतिम कुओं से 50 μl समाधान हटा दिए जाते हैं।
RPHA की प्रत्येक सेटिंग के साथ, K + अनुमापांक का नियंत्रण निर्धारण करना आवश्यक है। ऐसा करने के लिए, पीबीएस समाधान के 50 μl लंबी पंक्ति के 8 कुओं में जोड़े जाते हैं। फिर, K + वर्किंग सॉल्यूशन (1:20) के 50 μl को पहले कुएं में जोड़ा जाता है, ध्यान से पिपेट किया जाता है और अगले कुओं में स्थानांतरित किया जाता है, प्रत्येक 50 μl, 1:40 से 1:5120 तक 2 गुना कमजोर पड़ने वाला होता है।
सहज रक्तगुल्म की अनुपस्थिति के लिए निदान को नियंत्रित करने के लिए, पीबीएस समाधान के 50 μl को एक छोटी पंक्ति के सभी कुओं में जोड़ा जाता है।
सभी कुओं में (रिप युक्त अध्ययन सीरा के लिए प्रत्येक पंक्ति के पहले कुओं को छोड़कर) SED के 25 μl जोड़ें। उपयोग करने से पहले एक बोतल या स्नान में SED निलंबन को हिलाएं! टैबलेट को अच्छी तरह से हिलाया जाता है और नियंत्रण में एरिथ्रोसाइट्स के पूर्ण अवसादन तक 30 - 40 मिनट के लिए 16 से 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर छोड़ दिया जाता है।
लेखांकन और परिणामों की व्याख्या
रक्त सीरम की जांच में परिणामों के लिए लेखांकन
परिणामों के लिए लेखांकन चार पार के सशर्त पैमाने पर किया जाता है। सीरम टिटर इसका कमजोर पड़ना है, जो कम से कम 3 (+++) क्रॉस द्वारा रक्तगुल्म देता है।
- ++++ (4+) - एग्लूटीनेटेड एरिथ्रोसाइट्स छेद के नीचे एक उल्टा "छतरी" बनाते हैं, इसके किनारे गिर जाते हैं;
- +++ (3+) - एग्लूटीनेटेड एरिथ्रोसाइट्स छेद के नीचे एक उल्टा "छतरी" बनाते हैं, इसके किनारे सम होते हैं;
- ++ (2+) - एग्लूटिनेटेड एरिथ्रोसाइट्स के साथ, छेद के तल पर गैर-एग्लूटिनेटेड एरिथ्रोसाइट्स की एक छोटी "रिंग" के रूप में एक तलछट होती है;
- + (1+) - अधिकांश एरिथ्रोसाइट्स एग्लूटीनेटेड नहीं होते हैं और एक छोटी "रिंग" के रूप में बस जाते हैं;
- (-) - गैर-एग्लूटिनेटेड एरिथ्रोसाइट्स कुएं के तल पर एक "बिंदु" बनाते हैं।
एक सकारात्मक परिणाम को कम से कम 3 क्रॉस (+++) द्वारा वी-एंटीजन से भरी हुई एरिथ्रोसाइट्स का रक्तगुल्म माना जाता है।
डायग्नोस्टिकम का गुणवत्ता नियंत्रण नियंत्रण पंक्ति के 4 कुएं हैं, जिसमें केवल पीबीएस समाधान और एसईडी जोड़ा गया था। इन कुओं में कोई सहज रक्तगुल्म नहीं होना चाहिए - प्रतिक्रिया नकारात्मक (-) है। अन्यथा, अध्ययन दोहराया जाना चाहिए। यदि पुन: मंचन के दौरान रक्तगुल्म दिखाई देता है, तो दवा का उपयोग नहीं किया जाता है।
नकारात्मक परिणाम वाले सीरा को 1:40 और उससे कम के डायग्नोस्टिक टिटर में वीआई एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी युक्त नहीं माना जाना चाहिए।
सीरम जो 1:40 के कमजोर पड़ने पर सकारात्मक परिणाम देते हैं, उनके टिटर को स्थापित करने के लिए सीरम अनुमापन के साथ फिर से जांच की जानी चाहिए।
रक्त सीरम का अनुमापन करते समय परिणामों के लिए लेखांकन
सीरम टिटर इसका कमजोर पड़ना है, जो कम से कम 3 (+++) क्रॉस द्वारा रक्तगुल्म देता है।
निदान का गुणवत्ता नियंत्रण एसईडी के नियंत्रण के लिए पंक्ति के कुएं हैं। इन कुओं में कोई सहज रक्तगुल्म नहीं होना चाहिए - प्रतिक्रिया नकारात्मक (-) है। अन्यथा, अध्ययन दोहराया जाना चाहिए। यदि पुन: मंचन के दौरान रक्तगुल्म दिखाई देता है, तो दवा का उपयोग नहीं किया जाता है।
अभिकर्मकों का एक सेट डायग्नोस्टिकम साल्मोनेला VI-एंटीजेनिक निष्क्रिय रक्तगुल्म (आरपीएचए) की प्रतिक्रिया में साल्मोनेला टाइफाइड के वी-एंटीजन के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के मानव रक्त सीरम में पता लगाने के लिए है।
किट की विशेषताएं
2.1. विधि का सिद्धांत।
डायग्नोस्टिकम साल्मोनेला VI-एंटीजेनिक का सक्रिय सिद्धांत एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर तय किया गया वी-एंटीजन है। वी एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी युक्त सीरा के साथ बातचीत करते समय, एरिथ्रोसाइट एग्लूटिनेशन की घटना देखी जाती है।
2.2. सेट की संरचना
| अभिकर्मकों | मात्रा |
| डायग्नोस्टिकम एरिथ्रोसाइटिक साल्मोनेला वी-एंटीजेनिक तरल- फॉस्फेट बफर सॉल्यूशन (पीएच 7.2) में वी-एंटीजन साल्मोनेला टाइफाइड भेड़ एरिथ्रोसाइट्स के साथ औपचारिक और संवेदनशील के 1% निलंबन का प्रतिनिधित्व करता है + 0.2; एकाग्रता 0.06 मोल/ली)। गुच्छे के बिना भूरे रंग का सजातीय निलंबन; बसने पर, 2 परतें बनती हैं: एरिथ्रोसाइट्स की एक घनी भूरी तलछट और एक पारदर्शी पीले रंग की सतह पर तैरनेवाला | 1 बोतल - 3 मिली |
| सीरम डायग्नोस्टिक साल्मोनेला adsorbed रिसेप्टर वी ड्राई -सजातीय द्रव्यमान सफेद से भूरे रंग के साथ बेज तक | 1 बोतल - 0.1 मिली . से |
| औपचारिक, गैर-संवेदी भेड़ एरिथ्रोसाइट्स का 1% निलंबन- गुच्छे के बिना भूरे रंग का सजातीय निलंबन; बसने पर, 2 परतें बनती हैं: एरिथ्रोसाइट्स की एक घनी भूरी तलछट और एक पारदर्शी पीले रंग की सतह पर तैरनेवाला | 1 शीशी - |
| सीरम के तनुकरण और RPHA की स्थापना के लिए समाधान - 0.9% सोडियम क्लोराइड समाधान एक स्पष्ट, रंगहीन तरल है, पीएच 6.5 से 7.5 | 2 बोतलें - 8 मिली प्रत्येक |
| सिंगल-यूज इम्यूनोलॉजिकल रिएक्शन के लिए राउंड-बॉटम प्लेट —इसमें 8 पंक्तियाँ होती हैं, जिनमें से प्रत्येक में पारदर्शी, रंगहीन, गोल तल के साथ 12 छेद होते हैं | 1 पीसी |
विश्लेषणात्मक और नैदानिक विशेषताएं।
3.1. डायग्नोस्टिकम को आरपीएचए में डायग्नोस्टिक साल्मोनेला सोखने वाले रिसेप्टर बी के सीरम के साथ कम से कम 1:160 के कमजोर पड़ने पर एग्लूटीन किया जाना चाहिए।
स्वस्थ लोगों के रक्त सीरम की नैदानिक विशेषताओं के सशर्त स्तर को सीरम का पतलापन 1:20 से अधिक नहीं माना जाना चाहिए।
3.2. विश्लेषण का समय 2 घंटे है।
3.3. सेट को 8 परिभाषाओं के लिए डिज़ाइन किया गया है।
एहतियाती उपाय
किट के साथ काम करते समय, आपको मंत्रालय की प्रणाली के स्वच्छता और महामारी विज्ञान संस्थानों की प्रयोगशालाओं (विभागों, विभागों) में काम करते समय "डिजाइन, सुरक्षा सावधानियों, औद्योगिक स्वच्छता, महामारी-विरोधी शासन और व्यक्तिगत स्वच्छता के नियमों का पालन करना चाहिए। यूएसएसआर का स्वास्थ्य (एम।, 1981)।
विश्लेषण किए गए सीरा, साथ ही उनके संपर्क में अभिकर्मकों को संभावित रूप से संक्रामक माना जाना चाहिए, एचआईवी, हेपेटाइटिस वायरस या वायरल संक्रमण के किसी अन्य कारक एजेंट के दीर्घकालिक भंडारण या संचरण में सक्षम - उन्हें सावधानी से संभाला जाना चाहिए :
- रबर के दस्ताने में काम करें;
- पिपेट करते समय स्वचालित पिपेट का उपयोग करना आवश्यक है;
- काम के अंत में, विश्लेषण किए गए सीरा और उनके संपर्क में अभिकर्मकों, उपकरणों को एक निस्संक्रामक समाधान के साथ इलाज किया जाना चाहिए
- 70% एथिल अल्कोहल के साथ काम करने से पहले और बाद में उपकरण को पोंछ लें।
विश्लेषित सीरा 30 मिनट के लिए 56 0 सी पर निष्क्रिय होना चाहिए।
डायग्नोस्टिक साल्मोनेला adsorbed रिसेप्टर Vee ड्राई इनएक्टिवेटेड सीरम किट में शामिल है।
उद्देश्य विश्लेषण के परिणाम निम्नलिखित शर्तों के तहत गारंटीकृत हैं:
- किट के सभी अभिकर्मकों का भंडारण 2 से 8 0 के तापमान पर किया जाना चाहिए;
- कालबाह्य अभिकर्मकों का उपयोग न करें;
- किट के अभिकर्मकों का उपयोग न करें यदि उन्हें उनकी पैकेजिंग के अनुसार लेबल नहीं किया गया है;
- RPHA के लिए, केवल इस किट में शामिल अभिकर्मकों का उपयोग करें।
2. डायग्नोस्टिकम
4. नष्ट किए गए रोगाणुओं से (विशिष्ट एजी का अलगाव)
एरिथ्रोसाइट एचबी डायग्नोस्टिकम
2. डायग्नोस्टिकम
4. टैनिन से उपचारित एर.भेड़ का निलंबन और अवक्षेपित a\g HBs
5. रक्त सीरम में विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए
डायग्नोस्टिकम gp120
2. डायग्नोस्टिकम
4.अलग a\g उत्तेजना। HIV
5. एचआईवी का पता लगाने के लिए
टेटनस एरिथ्रोसाइट डायग्नोस्टिकम
2. डायग्नोस्टिकम
4. टेटनस के ए\जी उत्तेजना के साथ टैनिन के साथ इलाज किए गए एर.भेड़ का निलंबन
5. रक्त सीरम में विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए (टेटनस उत्तेजना के लिए)
माइक्रोप्रेजर्वेशन के लिए एंटीजन कार्डियोलिपिन
2. डायग्नोस्टिकम
4. स्वस्थ बैल के हृदय से लिपिड अंशों का निष्कर्षण
5. रक्त सीरम में विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए
अल्ट्रासोनीफाइड ट्रेपोनेमल एंटीजन
2. डायग्नोस्टिकम
4. मृत पूर्व से बाहर। उपदंश
5. रक्त सीरम में विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए
कॉर्पसकुलर टुलारेमिया डायग्नोस्टिकम
2. डायग्नोस्टिकम
4. व्यक्तिगत रोगज़नक़ कणों का
5. रक्त सीरम में विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए
पेचिश निदान
2. डायग्नोस्टिकम
4. मारे गए मी \ o . से निलंबन
5. रोगी के सीरम में विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए
शिगेला सोने से एरिथ्रोसाइट डायग्नोस्टिकम
2. डायग्नोस्टिकम
4. एर भेड़ का निलंबन, टोनिन के साथ इलाज किया गया
5. रक्त सीरम में विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए
साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम से डायग्नोस्टिकम
2. डायग्नोस्टिकम
4. मृत पूर्व से बाहर। साल्मोनेला
5. रक्त सीरम में विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए
सीरम
एंटीगैंग्रीनस हॉर्स सीरम 5000 IU
2. सीरम
4. हाइपरिमम के रक्त सीरम से। उत्तेजक गैस गैंग्रीन टॉक्सोइड के साथ घोड़े
6. माता-पिता के रूप में, ग्लोब्युलिन 1:100 . के साथ एक परीक्षण के बाद
सामान्य मानव इम्युनोग्लोबुलिन
2. सीरम
4. डोनर ब्लड सीरम से
5.फॉर्म-ई पास। विशिष्ट खरीदा कला। इम
6. पैरेन्टेरली
अवक्षेपण एंथ्रेक्स सीरम
2. सीरम
4. हाइपरइम्यूनाइज्ड जानवरों के रक्त सीरम से a\g excit.sib। अल्सर
6.वर्षा प्रतिक्रिया (आरपी)
बोटुलिनम सीरम प्रकार - ए 400 आईयू
2. सीरम
5. परीक्षण सामग्री में एक विशिष्ट प्रतिजन का पता लगाने के लिए
6. न्यूट्रलाइजेशन रिएक्शन (आरएन)
एंथ्रेक्स ग्लोब्युलिन
2. सीरम
4. हाइपरइम्यूनाइज्ड जानवरों के रक्त सीरम से a\g उत्तेजक अल्सर
5.फॉर्म-ई पास। विशिष्ट खरीदा कला। इम
6. पैरेन्टेरली
हेमोलिटिक सीरम
2. सीरम
4. किसी अन्य प्रजाति के जानवरों के एरिथ्रोसाइट्स वाले हाइपरइम्यूनाइज्ड जानवरों के सीरम से
5. परीक्षण सामग्री में एक विशिष्ट प्रतिजन का पता लगाने के लिए
हैजा एग्लूटीनेटिंग सीरम ओगावा
2. सीरम
4. अतिप्रतिरक्षित पशुओं के रक्त सीरम से
5. परीक्षण सामग्री में एक विशिष्ट प्रतिजन का पता लगाने के लिए
चमकदार तुलारेमिया सीरम
2. सीरम
4. हाइपरइम्यूनाइज्ड जानवरों के रक्त सीरम से a\g उत्तेजक ट्यूलर।
5. परीक्षण सामग्री में एक विशिष्ट प्रतिजन का पता लगाने के लिए
मानव टिक-जनित एन्सेफलाइटिस के खिलाफ इम्युनोग्लोबुलिन
2. सीरम
4. डोनर ब्लड सीरम से
5.फॉर्म-ई पास। विशिष्ट खरीदा कला। इम
6. पैरेन्टेरली
ESNO डायग्नोस्टिक सीरम
2. सीरम
4. ESNO वायरस वाले अतिप्रतिरक्षित पशुओं के रक्त सीरम से
5. परीक्षण सामग्री में एक विशिष्ट प्रतिजन का पता लगाने के लिए
हेपेटाइटिस बी के खिलाफ मानव इम्युनोग्लोबुलिन
2. सीरम
4. हेपेटाइटिस बी के खिलाफ टीका लगाए गए दाता के रक्त सीरम से
5.फॉर्म-ई पास। विशिष्ट खरीदा कला। इम
6. पैरेन्टेरली
एंटीग्लोबुलिन सीरम परकोक्सीडेज के साथ लेबल किया गया
2. सीरम
4. अतिप्रतिरक्षित पशुओं के रक्त सीरम से
5. परीक्षण सामग्री (एचआईवी) में एक विशिष्ट प्रतिजन का पता लगाने के लिए
रेबीज इम्युनोग्लोबुलिन
2. सीरम
4. डोनर ब्लड सीरम से
5.फॉर्म-ई पास। विशिष्ट खरीदा कला। इम
पंजीकरण प्रमाणपत्र संख्या आरजेडएन 2016/3905 दिनांक 04.04.2016
उद्देश्य
अभिकर्मक किट "आरपीएचए के लिए डायग्नोस्टिकम एरिथ्रोसाइट साल्मोनेला वी-एंटीजेनिक" (एसईडी-वीआई) को निष्क्रिय रक्तगुल्म परीक्षण (आरपीएचए) द्वारा मानव रक्त सीरम में टाइफाइड बुखार के प्रेरक एजेंट के वी-एंटीजन का पता लगाने के लिए डिज़ाइन किया गया है।
विशेषता सेट करें
परिचालन सिद्धांत
टाइफाइड बुखार के प्रेरक एजेंट के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति में, वी-एंटीजन के साथ संवेदनशील चिकन एरिथ्रोसाइट्स का रक्तगुल्म देखा जाता है, जिससे प्लेट के यू-आकार के कुओं के तल पर बसे हुए एरिथ्रोसाइट्स के "छाता" का निर्माण होता है। . टाइफाइड बुखार के प्रेरक एजेंट के प्रति एंटीबॉडी की अनुपस्थिति में, बसे हुए एरिथ्रोसाइट्स एक "बिंदु" बनाते हैं।
रचना सेट करें
| अभिकर्मक का नाम | विवरण | सेट में मात्रा |
|---|---|---|
| डायग्नोस्टिकम एरिथ्रोसाइट साल्मोनेला वी-एंटीजेनिक, सूखा 6% (एसईडी) | औपचारिक चिकन एरिथ्रोसाइट्स को S.typhi Vi एंटीजन के साथ संवेदनशील बनाया गया। भूरे रंग का शुष्क हीड्रोस्कोपिक द्रव्यमान। विघटन के बाद - लाल-भूरे रंग का निलंबन। | 1 शीशी, 0.6 मिली . से |
| सीरम डायग्नोस्टिक साल्मोनेला adsorbed, Vi रिसेप्टर, सूखा (पतला 1:20, (K+)) | साल्मोनेला ने खरगोश सीरम, वीआई रिसेप्टर, पतला 1:20 को सोख लिया। सफेद रंग का सूखा हीड्रोस्कोपिक झरझरा द्रव्यमान। विघटन के बाद, यह एक स्पष्ट पीला या रंगहीन तरल है। | 1 शीशी, 0.3 मिली . से |
| नमूना मंदक (आरआईडी) | नीला-बैंगनी तरल साफ़ करें। | 1 शीशी, 10 मिली |
| फॉस्फेट बफर समाधान (पीबीएस) | पारदर्शी रंगहीन तरल। | 1 शीशी, 10 मिली |
| प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं के लिए एकल उपयोग बहुलक प्लेट | पारदर्शी रंगहीन पॉलीस्टाइनिन से बनी प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं के लिए एकल-उपयोग बहुलक प्लेट। | 1 पीसी। |
नैदानिक विशेषताएं
डायग्नोस्टिकम को आरपीएचए में डायग्नोस्टिक साल्मोनेला adsorbed सीरम, वीआई रिसेप्टर, ड्राई (1:20 के कमजोर पड़ने पर) के साथ सीरम लेबल पर इंगित टिटर के साथ जोड़ा जाना चाहिए। स्वस्थ लोगों के रक्त सीरम की नैदानिक विशेषताओं के सशर्त स्तर को सीरम का पतलापन 1:20 से अधिक नहीं माना जाना चाहिए। विश्लेषण का समय 3040 मिनट है। किट को स्क्रीनिंग विकल्प में 42 रक्त सीरा या अनुमापन विकल्प में 10 रक्त सीरा के अध्ययन के लिए डिज़ाइन किया गया है।
एहतियाती उपाय
किट केवल इन विट्रो डायग्नोस्टिक उपयोग के लिए है। किट घटकों में शामिल पदार्थ निष्क्रिय और सुरक्षित हैं। किट के साथ काम करते समय SP 1.3.2322-08 और SanPiN 2.1.7.2790-10 का पालन करना चाहिए।
अतिरिक्त उपकरण और सामग्री
उपकरण, सामग्री, समाधान:
- चर खुराक मात्रा 5-40 μl के साथ 1-चैनल पिपेट डिस्पेंसर; 40 - 200 μl; 200 - 1000 μl और 1000 - 5000 μl;
- पिपेट डिस्पेंसर 8- या 12-चैनल चर खुराक मात्रा 5-40 μl और 40-200 μl के साथ;
- आसुत जल (GOST 6709-72)।
विश्लेषण किए गए नमूने
अध्ययन किए गए रक्त सीरम के नमूने रक्त के नमूने के क्षण से 3 दिनों से अधिक समय तक 2 से 8 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर संग्रहीत किए जाते हैं। इसे जमे हुए अवस्था में माइनस 18 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं के तापमान पर 1 वर्ष से अधिक नहीं रखने की अनुमति है। उपयोग करने से पहले, नमूनों को 16 से 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पिघलाया जाता है और मिलाते हुए मिलाया जाता है। पुन: ठंड की अनुमति नहीं है। जीवाणु वृद्धि और हेमोलिसिस वाले नमूनों का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए। प्रतिक्रिया स्थापित करने से पहले, परीक्षण सीरा को 30 मिनट के लिए 56 डिग्री सेल्सियस पर गरम किया जाता है।
विश्लेषण का संचालन
नियंत्रण नैदानिक सीरम (K+) की तैयारी
डायग्नोस्टिक साल्मोनेला adsorbed सीरम, वीआई रिसेप्टर, 0.3 मिलीलीटर (के +) से सूखा (पतला 1:20) का एक कार्यशील समाधान तैयार करें। ऐसा करने के लिए, के + के साथ शीशी की सामग्री में 0.3 मिलीलीटर फॉस्फेट बफर समाधान (पीबीएस) जोड़ा जाता है। सीरम की शेष मात्रा को 6 महीने से अधिक के लिए शून्य से 18 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं के तापमान पर जमे हुए और संग्रहीत किया जा सकता है।
एरिथ्रोसाइट साल्मोनेला (एसईडी) के लिए निदान की तैयारी
साल्मोनेला एरिथ्रोसाइट डायग्नोस्टिकम के निलंबन का एक कामकाजी कमजोर पड़ने के लिए, 0.6 मिलीलीटर आसुत जल को सूखी 6% एसईडी के साथ एक शीशी की सामग्री में जोड़ा जाता है और 16 से 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 2 घंटे के लिए जलयोजन के लिए छोड़ दिया जाता है। फिर समाधान में 2.4 मिलीलीटर फॉस्फेट बफर समाधान (पीबीएस) जोड़ा जाता है। काम कर रहे समाधान को 2 से 8 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 1 महीने से अधिक समय तक संग्रहीत नहीं किया जाता है। ठंड की अनुमति नहीं है।
रक्त सीरा की जांच के दौरान RPHA का विवरण
स्क्रीनिंग सीरा को प्लेट के कुओं में निम्न प्रकार से पतला किया जाता है:
- टैबलेट के पहले कुओं में 1:20 के प्रारंभिक कमजोर पड़ने को तैयार किया जाता है, पहले उनमें आरआईपी समाधान के 190 μl, फिर अध्ययन किए गए सीरा के 10 μl को जोड़ा जाता है। प्रत्येक सीरम को एक अलग टिप के साथ जोड़ा जाता है और सावधानी से पिपेट किया जाता है (इस मामले में, कुओं में घोल का रंग सीरा डालने के बाद नीले-बैंगनी से हरे रंग में बदलना चाहिए);
- दूसरे कुओं में 1:40 की स्क्रीनिंग कमजोरियां तैयार की जाती हैं, पहले उनमें पीबीएस समाधान के 25 μl पेश किए जाते हैं, और फिर 25 μl पूर्व-पतला सीरा और सावधानी से pipetting।
RPHA की प्रत्येक सेटिंग के साथ, K + अनुमापांक का नियंत्रण निर्धारण करना आवश्यक है। ऐसा करने के लिए, पीबीएस समाधान के 50 μl लंबी पंक्ति के 8 कुओं में जोड़े जाते हैं। फिर, K + वर्किंग सॉल्यूशन (1:20) के 50 μl को पहले कुएं में जोड़ा जाता है, ध्यान से पिपेट किया जाता है और अगले कुओं में स्थानांतरित किया जाता है, प्रत्येक 50 μl, 1:40 से 1:5120 तक 2 गुना कमजोर पड़ने वाला होता है। एक और 4 कुओं में, सहज रक्तगुल्म की अनुपस्थिति के लिए एसईडी को नियंत्रित करने के लिए पीबीएस समाधान के 50 μl जोड़ा जाता है।
अध्ययन किए गए सीरा (पहले युक्त आरआईपी को छोड़कर) और नियंत्रण के स्क्रीनिंग कमजोर पड़ने के साथ टैबलेट के सभी कुओं में, एसईडी के 25 μl जोड़ें। उपयोग करने से पहले एक बोतल या स्नान में SED निलंबन को हिलाएं!टैबलेट को अच्छी तरह से हिलाया जाता है और नियंत्रण में एरिथ्रोसाइट्स के पूर्ण अवसादन तक 30 से 40 मिनट के लिए 16 से 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर छोड़ दिया जाता है।
अध्ययन किए गए रक्त सीरम के अनुमापन के दौरान RPHA का विवरण
प्लेट की छोटी पंक्तियों में अध्ययन किए गए सीरा और K+ कार्यशील घोल का अनुमापन किया जाता है। ईडीएस के सहज रक्तगुल्म की अनुपस्थिति को नियंत्रित करने के लिए एक और छोटी पंक्ति का उपयोग किया जाता है।
परीक्षण सीरम के अनुमापन के लिए छोटी पंक्तियों के पहले कुओं में, RIP समाधान का 180 μl जोड़ा जाता है। अन्य सभी कुओं पीबीएस समाधान के 50 μl से भरे हुए हैं।
परीक्षण सीरा के 20 μl आरआईपी समाधान के साथ कुओं में जोड़े जाते हैं (एक 1:10 कमजोर पड़ने प्राप्त होता है)। प्रत्येक सीरम को उसके सिरे से जोड़ा जाता है और सावधानी से पिपेट किया जाता है (कुओं में घोल का रंग नीले-बैंगनी से हरे रंग में बदलना चाहिए)। फिर, 50 μl को पहले कुओं से पंक्तियों के अगले कुओं में स्थानांतरित किया जाता है, 1:20 से 1:1280 तक दो गुना कमजोर पड़ने वाला होता है। अनुमापन के अंत में, अंतिम कुओं से 50 μl समाधान हटा दिए जाते हैं।
RPHA की प्रत्येक सेटिंग के साथ, K + अनुमापांक का नियंत्रण निर्धारण करना आवश्यक है। ऐसा करने के लिए, पीबीएस समाधान के 50 μl लंबी पंक्ति के 8 कुओं में जोड़े जाते हैं। फिर, K + वर्किंग सॉल्यूशन (1:20) के 50 μl को पहले कुएं में जोड़ा जाता है, ध्यान से पिपेट किया जाता है और अगले कुओं में स्थानांतरित किया जाता है, प्रत्येक 50 μl, 1:40 से 1:5120 तक 2 गुना कमजोर पड़ने वाला होता है।
सहज रक्तगुल्म की अनुपस्थिति के लिए निदान को नियंत्रित करने के लिए, पीबीएस समाधान के 50 μl को एक छोटी पंक्ति के सभी कुओं में जोड़ा जाता है।
सभी कुओं में (रिप युक्त अध्ययन सीरा के लिए प्रत्येक पंक्ति के पहले कुओं को छोड़कर) SED के 25 μl जोड़ें। उपयोग करने से पहले एक बोतल या स्नान में SED निलंबन को हिलाएं! टैबलेट को अच्छी तरह से हिलाया जाता है और नियंत्रण में एरिथ्रोसाइट्स के पूर्ण अवसादन तक 30 - 40 मिनट के लिए 16 से 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर छोड़ दिया जाता है।
लेखांकन और परिणामों की व्याख्या
रक्त सीरम की जांच में परिणामों के लिए लेखांकन
परिणामों के लिए लेखांकन चार पार के सशर्त पैमाने पर किया जाता है। सीरम टिटर इसका कमजोर पड़ना है, जो कम से कम 3 (+++) क्रॉस द्वारा रक्तगुल्म देता है।
- ++++ (4+) - एग्लूटीनेटेड एरिथ्रोसाइट्स छेद के नीचे एक उल्टा "छतरी" बनाते हैं, इसके किनारे गिर जाते हैं;
- +++ (3+) - एग्लूटीनेटेड एरिथ्रोसाइट्स छेद के नीचे एक उल्टा "छतरी" बनाते हैं, इसके किनारे सम होते हैं;
- ++ (2+) - एग्लूटिनेटेड एरिथ्रोसाइट्स के साथ, छेद के तल पर गैर-एग्लूटिनेटेड एरिथ्रोसाइट्स की एक छोटी "रिंग" के रूप में एक तलछट होती है;
- + (1+) - अधिकांश एरिथ्रोसाइट्स एग्लूटीनेटेड नहीं होते हैं और एक छोटी "रिंग" के रूप में बस जाते हैं;
- (-) - गैर-एग्लूटिनेटेड एरिथ्रोसाइट्स कुएं के तल पर एक "बिंदु" बनाते हैं।
एक सकारात्मक परिणाम को कम से कम 3 क्रॉस (+++) द्वारा वी-एंटीजन से भरी हुई एरिथ्रोसाइट्स का रक्तगुल्म माना जाता है।
डायग्नोस्टिकम का गुणवत्ता नियंत्रण नियंत्रण पंक्ति के 4 कुएं हैं, जिसमें केवल पीबीएस समाधान और एसईडी जोड़ा गया था। इन कुओं में कोई सहज रक्तगुल्म नहीं होना चाहिए - प्रतिक्रिया नकारात्मक (-) है। अन्यथा, अध्ययन दोहराया जाना चाहिए। यदि पुन: मंचन के दौरान रक्तगुल्म दिखाई देता है, तो दवा का उपयोग नहीं किया जाता है।
नकारात्मक परिणाम वाले सीरा को 1:40 और उससे कम के डायग्नोस्टिक टिटर में वीआई एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी युक्त नहीं माना जाना चाहिए।
सीरम जो 1:40 के कमजोर पड़ने पर सकारात्मक परिणाम देते हैं, उनके टिटर को स्थापित करने के लिए सीरम अनुमापन के साथ फिर से जांच की जानी चाहिए।
रक्त सीरम का अनुमापन करते समय परिणामों के लिए लेखांकन
सीरम टिटर इसका कमजोर पड़ना है, जो कम से कम 3 (+++) क्रॉस द्वारा रक्तगुल्म देता है।
निदान का गुणवत्ता नियंत्रण एसईडी के नियंत्रण के लिए पंक्ति के कुएं हैं। इन कुओं में कोई सहज रक्तगुल्म नहीं होना चाहिए - प्रतिक्रिया नकारात्मक (-) है। अन्यथा, अध्ययन दोहराया जाना चाहिए। यदि पुन: मंचन के दौरान रक्तगुल्म दिखाई देता है, तो दवा का उपयोग नहीं किया जाता है।
अभिकर्मकों का एक सेट डायग्नोस्टिकम साल्मोनेला VI-एंटीजेनिक निष्क्रिय रक्तगुल्म (आरपीएचए) की प्रतिक्रिया में साल्मोनेला टाइफाइड के वी-एंटीजन के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के मानव रक्त सीरम में पता लगाने के लिए है।
किट की विशेषताएं
2.1. विधि का सिद्धांत।
डायग्नोस्टिकम साल्मोनेला VI-एंटीजेनिक का सक्रिय सिद्धांत एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर तय किया गया वी-एंटीजन है। वी एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी युक्त सीरा के साथ बातचीत करते समय, एरिथ्रोसाइट एग्लूटिनेशन की घटना देखी जाती है।
2.2. सेट की संरचना
| अभिकर्मकों | मात्रा |
| डायग्नोस्टिकम एरिथ्रोसाइटिक साल्मोनेला वी-एंटीजेनिक तरल- फॉस्फेट बफर सॉल्यूशन (पीएच 7.2) में वी-एंटीजन साल्मोनेला टाइफाइड भेड़ एरिथ्रोसाइट्स के साथ औपचारिक और संवेदनशील के 1% निलंबन का प्रतिनिधित्व करता है + 0.2; एकाग्रता 0.06 मोल/ली)। गुच्छे के बिना भूरे रंग का सजातीय निलंबन; बसने पर, 2 परतें बनती हैं: एरिथ्रोसाइट्स की एक घनी भूरी तलछट और एक पारदर्शी पीले रंग की सतह पर तैरनेवाला | 1 बोतल - 6 मिली |
| सीरम डायग्नोस्टिक साल्मोनेला adsorbed रिसेप्टर वी ड्राई -सजातीय द्रव्यमान सफेद से भूरे रंग के साथ बेज तक | 1 बोतल - 0.1 मिली . से |
| औपचारिक, गैर-संवेदी भेड़ एरिथ्रोसाइट्स का 1% निलंबन- गुच्छे के बिना भूरे रंग का सजातीय निलंबन; बसने पर, 2 परतें बनती हैं: एरिथ्रोसाइट्स की एक घनी भूरी तलछट और एक पारदर्शी पीले रंग की सतह पर तैरनेवाला | 1 शीशी - |
| सीरम के तनुकरण और RPHA की स्थापना के लिए समाधान - 0.9% सोडियम क्लोराइड समाधान एक स्पष्ट, रंगहीन तरल है, पीएच 6.5 से 7.5 | 2 बोतलें - 8 मिली प्रत्येक |
| सिंगल-यूज इम्यूनोलॉजिकल रिएक्शन के लिए राउंड-बॉटम प्लेट —इसमें 8 पंक्तियाँ होती हैं, जिनमें से प्रत्येक में पारदर्शी, रंगहीन, गोल तल के साथ 12 छेद होते हैं | 1 पीसी |
विश्लेषणात्मक और नैदानिक विशेषताएं।
3.1. डायग्नोस्टिकम को आरपीएचए में डायग्नोस्टिक साल्मोनेला सोखने वाले रिसेप्टर बी के सीरम के साथ कम से कम 1:160 के कमजोर पड़ने पर एग्लूटीन किया जाना चाहिए।
स्वस्थ लोगों के रक्त सीरम की नैदानिक विशेषताओं के सशर्त स्तर को सीरम का पतलापन 1:20 से अधिक नहीं माना जाना चाहिए।
3.2. विश्लेषण का समय 2 घंटे है।
3.3. सेट को 8 परिभाषाओं के लिए डिज़ाइन किया गया है।
एहतियाती उपाय
किट के साथ काम करते समय, आपको मंत्रालय की प्रणाली के स्वच्छता और महामारी विज्ञान संस्थानों की प्रयोगशालाओं (विभागों, विभागों) में काम करते समय "डिजाइन, सुरक्षा सावधानियों, औद्योगिक स्वच्छता, महामारी-विरोधी शासन और व्यक्तिगत स्वच्छता के नियमों का पालन करना चाहिए। यूएसएसआर का स्वास्थ्य (एम।, 1981)।
विश्लेषण किए गए सीरा, साथ ही उनके संपर्क में अभिकर्मकों को संभावित रूप से संक्रामक माना जाना चाहिए, एचआईवी, हेपेटाइटिस वायरस या वायरल संक्रमण के किसी अन्य कारक एजेंट के दीर्घकालिक भंडारण या संचरण में सक्षम - उन्हें सावधानी से संभाला जाना चाहिए :
- रबर के दस्ताने में काम करें;
- पिपेट करते समय स्वचालित पिपेट का उपयोग करना आवश्यक है;
- काम के अंत में, विश्लेषण किए गए सीरा और उनके संपर्क में अभिकर्मकों, उपकरणों को एक निस्संक्रामक समाधान के साथ इलाज किया जाना चाहिए
- 70% एथिल अल्कोहल के साथ काम करने से पहले और बाद में उपकरण को पोंछ लें।
विश्लेषित सीरा 30 मिनट के लिए 56 0 सी पर निष्क्रिय होना चाहिए।
डायग्नोस्टिक साल्मोनेला adsorbed रिसेप्टर Vee ड्राई इनएक्टिवेटेड सीरम किट में शामिल है।
उद्देश्य विश्लेषण के परिणाम निम्नलिखित शर्तों के तहत गारंटीकृत हैं:
- किट के सभी अभिकर्मकों का भंडारण 2 से 8 0 के तापमान पर किया जाना चाहिए;
- कालबाह्य अभिकर्मकों का उपयोग न करें;
- किट के अभिकर्मकों का उपयोग न करें यदि उन्हें उनकी पैकेजिंग के अनुसार लेबल नहीं किया गया है;
- RPHA के लिए, केवल इस किट में शामिल अभिकर्मकों का उपयोग करें।
वी-डायग्नोस्टिकम
डायग्नोस्टिकम वी
वी-एंटीजेनिक
