सिफलिस का प्रेरक एजेंट। वर्गीकरण

क्रमांक 23 सिफलिस का प्रेरक एजेंट। वर्गीकरण। विशेषता. सूक्ष्मजैविक निदान. इलाज।
ट्रेपोनेमा पैलेडियम; टी. एंटरिकम
आकृति विज्ञान: 8-12 भंवरों के साथ विशिष्ट ट्रेपोनेम्स, मोटर उपकरण - प्रत्येक कोशिका ध्रुव पर 3 पेरिप्लास्मिक फ्लैगेल्ला। ग्राम दाग का पता नहीं चलता; रोमानोव्स्की-गिम्सा दाग हल्का गुलाबी होता है, जो चांदी के संसेचन से प्रकट होता है।
सांस्कृतिक गुण: गड्ढे पर विषैला तनाव। वातावरण में नहीं बढ़ता है, संस्कृति का संचय अंडकोष में खरगोश के संक्रमण के माध्यम से होता है। विषैले उपभेदों को मस्तिष्क और गुर्दे के ऊतकों वाले मीडिया पर संवर्धित किया जाता है।
जैवरासायनिक गुण: माइक्रोएरोफाइल
एंटीजेनिक संरचना:जटिल, इसमें विशिष्ट प्रोटीन और लिपोइड एंटीजन होते हैं, बाद वाला संरचना में गोजातीय हृदय से निकाले गए कार्डियोलिपिन (डिपॉस्फ़ैडिलग्लिसरॉल) के समान होता है।
रोगजनकता कारक: चिपकने वाले लगाव प्रक्रिया में शामिल होते हैं, लिपोप्रोटीन इम्यूनोपैथोलॉजिकल प्रक्रियाओं के विकास में शामिल होते हैं।
प्रतिरोध: सूखने, धूप के प्रति संवेदनशील, सूखने तक वस्तुओं पर बना रहता है। प्रतिकूल परिस्थितियों में, यह एल-रूपों में बदल जाता है और सिस्ट बनाता है।
रोगजनन: सिफलिस का कारण बनता है। प्रवेश द्वार से, ट्रेपोनेम्स क्षेत्रीय लिम्फ नोड्स में प्रवेश करते हैं, जहां वे गुणा करते हैं। इसके बाद, टी. रक्तप्रवाह में प्रवेश करता है, जहां यह एंडोथेलियल कोशिकाओं से जुड़ जाता है, जिससे एंडारटेराइटिस होता है, जिससे वास्कुलिटिस और ऊतक परिगलन होता है। रक्त के साथ, टी. पूरे शरीर में फैलता है, अंगों को विकसित करता है: यकृत, गुर्दे, हड्डी, हृदय और तंत्रिका तंत्र।
रोग प्रतिरोधक क्षमता: सुरक्षात्मक प्रतिरक्षा विकसित नहीं होती है। रोगज़नक़ एंटीजन के जवाब में, एचआरटी और ऑटोइम्यून प्रक्रियाएं विकसित होती हैं। ह्यूमोरल इम्युनिटी टी. लिपोइड एंटीजन की प्रतिक्रिया में विकसित होती है और आईजीए और आईजीएम का एक अनुमापांक है।
सूक्ष्मदर्शी द्वारा परीक्षण. चेंक्र की उपस्थिति के दौरान प्राथमिक सिफलिस के लिए करें। अनुसंधान के लिए सामग्री: चेंक्र डिस्चार्ज, क्षेत्रीय लिम्फ नोड्स की सामग्री, जिसमें से एक "कुचल" बूंद तैयार की जाती है और एक अंधेरे क्षेत्र में जांच की जाती है। यदि परिणाम सकारात्मक है, तो 6-14 माइक्रोन लंबे पतले सिकुड़े हुए धागे दिखाई देते हैं, जिनमें नियमित आकार के 10-12 समान छोटे कर्ल होते हैं। ट्रेपोनेमा पैलिडम की विशेषता पेंडुलम-जैसी और ट्रांसलेशनल-फ्लेक्सन मूवमेंट है। माध्यमिक सिफलिस के दौरान मौखिक श्लेष्मा पर घावों के विकास के साथ-साथ मौखिक गुहा में चैंक्रॉइड के स्थानीयकरण के साथ, ट्रेपोनेमा पैलिडम को सैप्रोफाइटिक ट्रेपोनेमा से अलग करना आवश्यक है, जो सामान्य माइक्रोफ्लोरा के प्रतिनिधि हैं। इस मामले में, क्षेत्रीय लिम्फ नोड्स के बिंदु में विशिष्ट ट्रेपोनेमा का पता लगाना निर्णायक नैदानिक ​​​​महत्व का है।
सेरोडायग्नोसिस। वासरमैन प्रतिक्रिया 2 एंटीजन के साथ एक साथ की जाती है: 1) विशिष्ट, जिसमें रोगज़नक़ का एंटीजन होता है - अल्ट्रासाउंड द्वारा नष्ट किए गए ट्रेपोनेम्स; 2) निरर्थक - कार्डियोलिपिन। परीक्षण सीरम को 1:5 के अनुपात में पतला किया जाता है और आरएससी को आम तौर पर स्वीकृत विधि के अनुसार रखा जाता है। सकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, हेमोलिसिस में देरी देखी जाती है, नकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, लाल रक्त कोशिकाओं का हेमोलिसिस होता है; प्रतिक्रिया की तीव्रता का आकलन (+ + + +) से (-) के अनुसार किया जाता है। सिफलिस की पहली अवधि सेरोनिगेटिव होती है और इसकी विशेषता नकारात्मक वासरमैन प्रतिक्रिया होती है। 50% रोगियों में, चेंकेर की उपस्थिति के 2-3 सप्ताह से पहले प्रतिक्रिया सकारात्मक नहीं हो जाती है। सिफलिस की दूसरी और तीसरी अवधि में, सकारात्मक प्रतिक्रियाओं की आवृत्ति 75-90% तक पहुंच जाती है। उपचार के दौरान, वासरमैन की प्रतिक्रिया नकारात्मक हो जाती है। वास्सर्मन प्रतिक्रिया के समानांतर, एक गैर-विशिष्ट कार्डियोलिपिन एंटीजन और परीक्षण निष्क्रिय रक्त सीरम या प्लाज्मा के साथ एक माइक्रोप्रिसिपिटेशन प्रतिक्रिया की जाती है। सीरम की 3 बूंदें एक प्लेक्सीग्लास प्लेट (या नियमित ग्लास) पर एक कुएं में लगाई जाती हैं और कार्डियोलिपिन एंटीजन की 1 बूंद डाली जाती है। मिश्रण को अच्छी तरह मिलाया जाता है और परिणामों को ध्यान में रखा जाता है। सिफलिस वाले रोगी के रक्त सीरम के साथ एक सकारात्मक प्रतिक्रिया विभिन्न आकारों के गुच्छे के गठन और हानि की विशेषता है; नकारात्मक परिणाम के साथ, एकसमान प्रकाश ओपेलेसेंस देखा जाता है।
आरआईएफ - अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया - सिफलिस के निदान के लिए विशिष्ट है। ऊतक ट्रेपोनेम के निलंबन का उपयोग एंटीजन के रूप में किया जाता है। प्रतिक्रिया RIF_200 का उपयोग किया जाता है। रोगी के सीरम को वासरमैन प्रतिक्रिया की तरह ही निष्क्रिय किया जाता है और 1:200 के अनुपात में पतला किया जाता है। एंटीजन की बूंदों को कांच की स्लाइडों पर लगाया जाता है, सुखाया जाता है और 5 मिनट के लिए एसीटोन में स्थिर किया जाता है। फिर रोगी के सीरम को तैयारी पर लगाया जाता है, 30 मिनट के बाद इसे धोया और सुखाया जाता है। अगला कदम मानव ग्लोब्युलिन के विरुद्ध फ्लोरोसेंट सीरम के साथ दवा का उपचार करना है। तैयारी का अध्ययन फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप का उपयोग करके किया जाता है, जिसमें ट्रेपोनेम्स की चमक की डिग्री को नोट किया जाता है।
ट्रेपोनेम्स के स्थिरीकरण की आरआईटी प्रतिक्रिया भी विशिष्ट है। खरगोश के अंडकोष में इसे विकसित करके ट्रेपोनेमा की एक जीवित संस्कृति प्राप्त की जाती है। अंडकोष को एक विशेष माध्यम में कुचल दिया जाता है जिसमें ट्रेपोनेम गतिशील रहते हैं। प्रतिक्रिया निम्नानुसार स्थापित की गई है: ऊतक (चलता-फिरता) ट्रेपोनेम्स का एक निलंबन परीक्षण सीरम के साथ एक टेस्ट ट्यूब में जोड़ा जाता है और ताजा पूरक जोड़ा जाता है। एक नियंत्रण ट्यूब में, परीक्षण सीरम के बजाय, एक स्वस्थ व्यक्ति का सीरम जोड़ा जाता है, दूसरे में, ताजा पूरक के बजाय, निष्क्रिय - निष्क्रिय - जोड़ा जाता है। अवायवीय परिस्थितियों (एनेरोस्टेट) के तहत 35 डिग्री सेल्सियस पर रखने के बाद, सभी परीक्षण ट्यूबों से एक "कुचल" बूंद तैयार की जाती है और एक अंधेरे क्षेत्र में मोबाइल और स्थिर ट्रेपोनेम की संख्या निर्धारित की जाती है।
उपचार: पेनिसिलिन, टेट्रासाइक्लिन, बिस्मथ युक्त दवाएं।

सिफलिस एक चक्रीय मानव यौन रोग है जो पैलिडम स्पिरोचेट के कारण होता है; स्टेज I चैंक्रॉइड (fr) द्वारा प्रकट होता है। फोड़ा- अल्सर), चरण II - रक्त वाहिकाओं की दीवारों को नुकसान और विभिन्न चकत्ते, चरण III - तंत्रिका तंत्र को नुकसान के साथ विभिन्न अंगों में मसूड़े। गुम्मा (अव्य.) . गुम्मी- गम) एक नोड के रूप में एक पुरानी घुसपैठ है, जिसमें क्षय और अल्सर होने का खतरा होता है। सिफिलिटिक गुम्मा ( syn.: सिफिलिटिक ग्रैनुलोमा, गुम्मा सिफिलाइड, तृतीयक सिफिलोमा) एक दर्द रहित अर्धगोलाकार गुम्मा है, जो तृतीयक सक्रिय सिफलिस की अभिव्यक्ति है। रोगज़नक़ - ट्रैपोनेमा पैलिडम- इसकी खोज 1905 में एफ. शाउडिन और ई. हॉफमैन ने की थी।

टी. पैलिडम- एक सर्पिल आकार का सूक्ष्मजीव, आयाम 0.09 - 0.18 x 6 - 20 माइक्रोन। सर्पिल घुमावों की संख्या 8 से 12 तक है, घुमाव एक समान हैं, एक दूसरे से समान दूरी पर स्थित हैं, लगभग 1 माइक्रोन, सिरों की ओर ऊँचाई कम हो जाती है। इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप में यह सांप या केंचुए जैसा दिखता है। ट्रेपोनिमा के दोनों सिरों पर ब्लेफेरोप्लास्ट होते हैं जिनके साथ फ्लैगेल्ला जुड़ा होता है, जिनकी संख्या दो से कई तक भिन्न होती है; वे स्पाइरोचेट के प्रोटोप्लाज्मिक सिलेंडर के चारों ओर मुड़े हुए एक अक्षीय धागे का निर्माण करते हैं। प्रतिकूल परिस्थितियों में यह सिस्ट बना सकता है। जानवरों के शरीर में म्यूकोपॉलीसेकेराइड प्रकृति का एक कैप्सूल जैसा मामला दिखाई दे सकता है।

ट्रेपोनिमा एनिलिन रंगों के साथ अच्छी तरह से दाग नहीं करता है, यही कारण है कि सिफलिस के प्रेरक एजेंट को पेल स्पिरोचेट कहा जाता है। सिल्वर नाइट्रेट को धात्विक सिल्वर में कम कर देता है, जो सूक्ष्म जीव की सतह पर जमा हो जाता है और इसे ऊतकों में दिखाई देता है: जब मोरोज़ोव के अनुसार दाग लगाया जाता है, तो ट्रेपोनिमा भूरे या लगभग काले दिखाई देते हैं। जब रोमानोव्स्की-गिम्सा के अनुसार रंगा जाता है, तो वे हल्का गुलाबी रंग प्राप्त कर लेते हैं।

ट्रेपोनिमा आमतौर पर अनुप्रस्थ विभाजन द्वारा प्रजनन करते हैं, और विभाजित कोशिकाएं कुछ समय के लिए एक-दूसरे से चिपकी रह सकती हैं। विभाजन का समय लगभग 30 घंटे है।

जीवित ट्रेपोनेम बहुत गतिशील होते हैं, वे अपने स्वयं के अनुदैर्ध्य अक्ष के चारों ओर गति करते हैं, साथ ही लचीलेपन, लहर जैसी और अनुवाद संबंधी गति भी करते हैं।

आज तक, ऐसी कोई विधि नहीं है जिसके द्वारा ट्रेपोनेमी संस्कृतियों को स्थिर रूप से प्राप्त करना संभव हो सके। मनुष्यों के लिए रोगजनक ट्रेपोनेमा पैलिडम की खेती कभी भी कृत्रिम पोषक मीडिया, चिकन भ्रूण या कोशिका संवर्धन में नहीं की गई है। उनके उपभेदों की वे किस्में जो अवायवीय परिस्थितियों में बढ़ती हैं, संभवतः सैप्रोफाइटिक स्पाइरोकेट्स हैं, जो सिफलिस के प्रेरक एजेंट के करीब हैं। उनके शरीर विज्ञान का बहुत कम अध्ययन किया गया है। ट्रेपोनेमास केमोऑर्गनोट्रॉफ़ हैं, इनमें कैटालेज़ और ऑक्सीडेज़ नहीं होते हैं, और कार्बोहाइड्रेट को किण्वित कर सकते हैं। वे 11 अमीनो एसिड, विटामिन, लवण और सीरम एल्ब्यूमिन युक्त बहुत समृद्ध मीडिया पर उगते हैं। रोगजनक स्पाइरोकेट्स को विकसित करने का सबसे अच्छा तरीका खरगोश के अंडकोष (प्रायोगिक ऑर्काइटिस) में संक्रमण करना है। यह सुझाव दिया गया है कि वहाँ है टी. पैलिडमजीवन चक्र, जिसमें सर्पिल आकार के अलावा, दानेदार चरण और पुटी जैसे गोलाकार निकायों का चरण शामिल है। यह इन सूक्ष्मजीवों के दानेदार रूप हैं जो बैक्टीरिया फिल्टर से गुजरने में सक्षम हैं।

ट्रेपोनिमा एंटीजन का खराब अध्ययन किया गया है। यह स्थापित किया गया है कि ट्रेपोनेम्स में प्रोटीन, पॉलीसेकेराइड और लिपिड कॉम्प्लेक्स होते हैं। सांस्कृतिक और ऊतक ट्रेपोनेम्स की एंटीजेनिक संरचना इतनी करीब है कि सांस्कृतिक ट्रेपोनेम्स से तैयार एंटीजन का उपयोग सिफलिस के निदान में आरएससी के लिए किया जा सकता है। मानव शरीर में, ट्रेपोनेम्स एंटीबॉडी के उत्पादन को उत्तेजित करते हैं, जो जीवित गतिशील ट्रेपोनेम्स के स्थिरीकरण और मृत्यु का कारण बनते हैं, निलंबन की उपस्थिति में पूरक को ठीक करते हैं टी. पैलिडमया संबंधित स्पाइरोकेट्स, और अप्रत्यक्ष आरआईएफ में भी पाए जाते हैं।

सिफलिस का प्रेरक एजेंट एक्सोटॉक्सिन का उत्पादन नहीं करता है। ट्रेपोनेमा पैलिडम बाहरी प्रभावों के प्रति अपेक्षाकृत अप्रतिरोधी है। सूखने पर और ऊंचे तापमान (15 मिनट के लिए 55 डिग्री सेल्सियस पर) पर वे जल्दी मर जाते हैं। 0.3 - 0.5% एचसीएल समाधान में वे तुरंत अपनी गतिशीलता खो देते हैं; वे इसे जल्दी ही खो देते हैं और आर्सेनिक, बिस्मथ और पारा की उपस्थिति में मर जाते हैं। पूरे रक्त या सीरम में 4 डिग्री सेल्सियस पर वे 24 घंटे तक व्यवहार्य रहते हैं, जिसे रक्त आधान करते समय ध्यान में रखा जाना चाहिए।

महामारी विज्ञान।सिफलिस एक विशिष्ट यौन रोग है। संक्रमण का स्रोत एक बीमार व्यक्ति है, जो आमतौर पर 3 से 5 वर्षों तक संक्रामक रहता है; सिफलिस के अंतिम रूपों वाले रोगी संक्रामक नहीं होते हैं। अधिकांश मामलों में संक्रमण विभिन्न प्रकार के यौन और घरेलू संपर्कों के माध्यम से होता है, शायद ही कभी बीमार मां से बच्चे में प्रत्यारोपण मार्ग के माध्यम से (जन्मजात सिफलिस) या चिकित्सा कर्मियों के बीच संपर्क के माध्यम से व्यावसायिक संक्रमण के रूप में होता है। प्राकृतिक परिस्थितियों में, केवल मनुष्य ही सिफलिस से पीड़ित होते हैं; प्रयोगों में, बंदर, हैम्स्टर और खरगोश भी संक्रमित हो सकते हैं। बंदरों में, ट्रेपोनिमा इंजेक्शन के स्थल पर चेंक्र विकसित होता है; खरगोशों और हैम्स्टर्स में, संक्रमण स्पर्शोन्मुख होता है।

रोगजनन और क्लिनिक.अधिग्रहीत सिफलिस के लिए ऊष्मायन अवधि 2 से 10 सप्ताह तक होती है, आमतौर पर 20 - 28 दिन। संक्रमण के प्रवेश बिंदु अक्सर जननांग अंगों की श्लेष्मा झिल्ली होते हैं, कम अक्सर मौखिक गुहा, साथ ही क्षतिग्रस्त त्वचा। प्रवेश स्थल पर, रोगज़नक़ कई गुना बढ़ जाता है, और प्राथमिक सिफिलोमा (कठोर चेंक्र) बनता है - एक संकुचित आधार के साथ क्षरण या अल्सर। इसके बाद, रोगज़नक़ लसीका प्रणाली में प्रवेश करता है, और लिम्फैंगाइटिस और क्षेत्रीय लिम्फैडेनाइटिस विकसित होता है। यह प्राथमिक सिफलिस की एक विशिष्ट नैदानिक ​​तस्वीर है, जो 1.5 - 2 महीने तक रहती है। फिर ये लक्षण गायब हो जाते हैं. सिफलिस की द्वितीयक अवधि प्रक्रिया के सामान्यीकरण से जुड़ी होती है, जब कई लिम्फ नोड्स बढ़ते हैं, और त्वचा और श्लेष्म झिल्ली पर चकत्ते दिखाई देते हैं; आंतरिक अंगों और तंत्रिका तंत्र को नुकसान हो सकता है। द्वितीयक ताज़ा और द्वितीयक आवर्तक उपदंश होते हैं। प्रत्येक बाद की पुनरावृत्ति के साथ, दाने की तीव्रता कम हो जाती है, और पुनरावृत्ति के बीच की अवधि बढ़ जाती है। दाने के तत्वों में बड़ी संख्या में जीवित ट्रेपोनेमा होते हैं; इस अवधि के दौरान रोगी सबसे अधिक संक्रामक होता है। द्वितीयक सिफलिस की अवधि 4 वर्ष या उससे अधिक तक होती है। फिर रोग एक लंबी स्पर्शोन्मुख अवधि में प्रवेश करता है, जिसके बाद, कुछ वर्षों के बाद, तृतीयक सिफलिस विकसित होता है। इस मामले में, आंतरिक अंगों, हृदय प्रणाली, केंद्रीय तंत्रिका तंत्र, हड्डियों को सकल जैविक क्षति देखी जाती है, मसूड़े बनते हैं, ऊतक क्षय और अपक्षयी परिवर्तनों के साथ। सिफलिस की एक विशिष्ट नैदानिक ​​विशेषता रोगी की ओर से किसी भी व्यक्तिपरक शिकायत (दर्द, खुजली, जलन, आदि) की अनुपस्थिति है।

रोग प्रतिरोधक क्षमता।सिफलिस के विरुद्ध कोई प्राकृतिक या कृत्रिम प्रतिरक्षा नहीं है; केवल संक्रामक प्रतिरक्षा मौजूद है, और जब तक यह मौजूद है, एक व्यक्ति व्यावहारिक रूप से एक नए संक्रमण के प्रति संवेदनशील नहीं है। कठोर चेंकेर (चैनक्रॉइड प्रतिरक्षा) की उपस्थिति के 10-11 दिनों के बाद संक्रामक प्रतिरक्षा विकसित होती है; इस अवधि के दौरान, पुन: संक्रमण या तो नहीं देखा जाता है, या नवगठित चेंकेर गर्भपात (सुपरइंफेक्शन) होता है। इसके बाद, सुपरइन्फेक्शन के दौरान, परिणामी घावों की प्रकृति पुन: संक्रमण के समय रोग के चरण से मेल खाती है। सुपरइन्फेक्शन को संक्रामक प्रतिरक्षा के अस्थायी रूप से कमजोर होने या "टूटने" से समझाया जाता है। पुनर्संक्रमण को सुपरइन्फेक्शन से अलग करना आवश्यक है, यानी किसी ऐसे व्यक्ति का नया, बार-बार संक्रमण जिसे पहले सिफलिस हुआ था (ठीक हो गया था) और इसलिए, संक्रामक प्रतिरक्षा खो चुका है। सिफलिस के भी तीन मामलों का वर्णन किया गया है। ऐसे रोगियों में ऊष्मायन अवधि कम होती है, लिम्फैडेनाइटिस के साथ कई अल्सरेटिव चैंक्र अधिक बार विकसित होते हैं, और सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं पहले सकारात्मक हो जाती हैं। द्वितीयक अवधि में, त्वचा पर दाने अक्सर नष्ट हो जाते हैं। यह इस तथ्य से समझाया गया है कि सिफलिस के साथ विलंबित प्रकार की अतिसंवेदनशीलता प्रतिक्रिया विकसित होती है; उपचार के बाद, संवेदनशील लिम्फोसाइट्स लंबे समय तक शरीर में रहते हैं। संक्रामक प्रतिरक्षा प्रकृति में गैर-बाँझ है और हास्य कारकों के कारण होती है: रोगी के सीरम में वर्ग जी, ए और एम के इम्युनोग्लोबुलिन पाए जाते हैं।

प्रयोगशाला निदान.सिफलिस का निदान करने के लिए, एक एकीकृत दृष्टिकोण इष्टतम है, जिसमें कई तरीकों का एक साथ उपयोग शामिल है। उन्हें पारंपरिक रूप से प्रत्यक्ष लोगों में विभाजित किया जाता है, जो अध्ययन के तहत सामग्री (जानवरों के संक्रमण, विभिन्न प्रकार की माइक्रोस्कोपी और डीएनए का पता लगाने के आणविक आनुवंशिक तरीकों) में एक रोगज़नक़ की उपस्थिति को साबित करना संभव बनाता है। टी. पैलिडम- पीसीआर और डीएनए जांच), और अप्रत्यक्ष - एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए सीरोलॉजिकल परीक्षण। बदले में, सीरोलॉजिकल परीक्षणों को गैर-ट्रेपोनेमल और ट्रेपोनेमल परीक्षणों द्वारा दर्शाया जाता है।

प्रत्यक्ष तरीकों से ट्रेपोनिमा का पता लगाने के लिए जिस सामग्री का परीक्षण किया जाना है वह है चेंक्र डिस्चार्ज या उसका पंचर, लिम्फ नोड पंक्टेट, रोजोला स्क्रैपिंग और सेरेब्रोस्पाइनल तरल पदार्थ। मूल सामग्री में रोगज़नक़ का सबसे अच्छा पता डार्क-फ़ील्ड (चित्र 111.4 देखें) या चरण-कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी द्वारा लगाया जाता है, जो किसी को जीवित रोगज़नक़ के विभिन्न प्रकार के आंदोलन का निरीक्षण करने की अनुमति देता है। यदि एंटीबायोटिक दवाओं के साथ उपचार पहले ही शुरू हो चुका है, तो रोग संबंधी सामग्री में रोगज़नक़ का पता नहीं लगाया जा सकता है। यदि आवश्यक हो, तो प्रत्यक्ष (या अप्रत्यक्ष) आरआईएफ किया जाता है या रोमानोव्स्की-गिम्सा के अनुसार तैयारी को दाग दिया जाता है। इन विधियों का उपयोग केवल सिफलिस के शीघ्र निदान के लिए किया जाता है।

सेरोनिगेटिव प्राथमिक सिफलिस को छोड़कर, रोग के विभिन्न चरणों में सीरोलॉजिकल परीक्षणों का उपयोग किया जा सकता है। आमतौर पर सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं के एक कॉम्प्लेक्स का उपयोग किया जाता है। को गैर treponemalपरिणामों के दृश्य निर्धारण के साथ परीक्षणों में शामिल हैं: गोजातीय हृदय की मांसपेशी (क्रॉस-रिएक्टिंग एंटीजन) के कार्डियोलिपिन एंटीजन के साथ पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया (वासेरमैन प्रतिक्रिया = आरएसकेके = आरडब्ल्यू), माइक्रोप्रेजर्वेशन प्रतिक्रिया (एमआर, या आरएमपी) - प्लाज्मा और निष्क्रिय सीरम के साथ माइक्रोरिएक्शन; आरपीआर - रैपिड प्लाज्मा रीगिन परीक्षण, और अन्य प्रतिक्रियाएं। विशेषज्ञों का मानना ​​है कि सामूहिक परीक्षण के लिए दो परीक्षणों का उपयोग करना सबसे अच्छा है: आरपीआर और आरपीजीए या एलिसा, क्योंकि आरपीआर प्राथमिक सिफलिस में अधिक संवेदनशील है, आरपीजीए - रोग के बाद के चरणों में, और एलिसा - सभी चरणों में। परिणामों के सूक्ष्म अध्ययन के साथ गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षणों में वीडीआरएल परीक्षण और यूएसआर परीक्षण शामिल हैं। गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षणों का उपयोग स्क्रीनिंग परीक्षणों के रूप में किया जाता है, क्योंकि वे गलत-सकारात्मक परिणाम दे सकते हैं। में treponemalपरीक्षण ट्रेपोनेमल मूल के एंटीजन का उपयोग करते हैं। उनका उपयोग सिफलिस के नैदानिक, महामारी विज्ञान और इतिहास संबंधी संदेह के लिए, अव्यक्त और देर से रूपों के निदान के लिए, पूर्वव्यापी निदान के लिए गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षणों (झूठे सकारात्मक?) के परिणामों की पुष्टि करने के लिए किया जाता है। ट्रेपोनेमल परीक्षणों में शामिल हैं: आरएसकेटी (ट्रेपोनेमल एंटीजन के साथ आरएसके), आरआईबीटी (या आरआईटी) - ट्रेपोनेमा पैलिडम की स्थिरीकरण प्रतिक्रिया, आरआईएफ (सर्वोत्तम प्रतिक्रियाओं में से एक), आरपीजीए, एलिसा, इम्युनोब्लॉटिंग।

सिफलिस का सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान

व्यावहारिक कार्य

चिकित्सा एवं पशु चिकित्सा

इसकी कम रंग क्षमता के कारण इसे "पेल" ट्रेपोनेमा नाम दिया गया था। अन्य रोगजनक ट्रेपोनेम्स हैं: टी. पर्टेन्यू - यॉज़ का प्रेरक एजेंट, टी. कैरेटम - पिंट का प्रेरक एजेंट, टी. बेजेल - क्रोनिक सामान्यीकृत स्पाइरोकेटोसिस (बेजेल) का प्रेरक एजेंट। निर्दिष्ट रोगज़नक़ और उनके कारण...

व्यावहारिक पाठ संख्या 36 के लिए छात्रों के लिए दिशानिर्देश।

पाठ विषय:

लक्ष्य: सिफलिस के सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान, उपचार और रोकथाम के तरीकों का अध्ययन।

मॉड्यूल 2 . विशेष, नैदानिक ​​और पर्यावरण सूक्ष्म जीव विज्ञान।

विषय 36: सिफलिस का सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान।

विषय की प्रासंगिकता:

सिफलिस का प्रेरक एजेंट

सिफलिस एक संक्रामक यौन रोग है जो ट्रेपोनेमा पैलिडम के कारण होता है, जो त्वचा, आंतरिक अंगों, हड्डियों और तंत्रिका तंत्र को नुकसान पहुंचाता है। अधिग्रहीत और जन्मजात सिफलिस हैं।

वर्गीकरण। सिफलिस का प्रेरक एजेंट - ट्रेपोनेमा पैलिडम (ट्रेपोनेमा पैलिडम) - की खोज 1905 में एफ. शाउडिन और ई. हॉफमैन द्वारा की गई थी; स्पाइरोचेटेसी परिवार, ग्रेसिलिक्यूट्स प्रभाग से संबंधित है।

आकृति विज्ञान और टिनक्टोरियल गुण।इसकी कम रंग क्षमता के कारण इसे "पेल" ट्रेपोनेमा नाम दिया गया था। अन्य रोगजनक ट्रेपोनेम्स हैं: टी. पर्टेन्यू - यॉज़ का प्रेरक एजेंट, टी. कैरेटम - पिंट का प्रेरक एजेंट, टी. बेजेल - क्रोनिक सामान्यीकृत स्पाइरोकेटोसिस (बेजेल) का प्रेरक एजेंट। ये रोगज़नक़ और उनके कारण होने वाली बीमारियाँ गर्म और आर्द्र जलवायु वाले क्षेत्रों में अधिक आम हैं। ट्रेपोनिमा पैलिडम एक पतला सर्पिल आकार का जीवाणु है, जो 4 से 14 माइक्रोन लंबा होता है, जिसमें एक समान छोटे कर्ल (8-14 कर्ल) होते हैं; सर्पिल आकार के साथ-साथ इसके अन्य रूप भी हो सकते हैं - सिस्ट, ग्रैन्यूल, एल-फॉर्म के रूप में; रोमानोव्स्की-गिम्सा के अनुसार एक विशिष्ट हल्के गुलाबी रंग में रंगा हुआ। गतियाँ पेचदार से लेकर लचीलेपन तक होती हैं।

खेती।ट्रेपोनेमा पैलिडम एक बाध्य अवायवीय जीव है, जो पोषक मीडिया की अत्यधिक मांग करता है। पोषक मीडिया पर खेती की जाने वाली ट्रेपोनिमा - एक सांस्कृतिक स्पाइरोकीट - कम विषैले होने के कारण रोगजनक से भिन्न होती है, लेकिन उनके एंटीजन समान होते हैं, जिनका उपयोग सिफलिस के सेरोडायग्नोसिस में किया जाता है।

प्रतिजनी संरचना.ट्रेपोनेमा पैलिडम को अन्य ट्रेपोनेमास के साथ-साथ जानवरों और मानव ऊतकों के लिपोइड्स के साथ एंटीजेनिक कनेक्शन की विशेषता है। रोगज़नक़ में कई एंटीजन की पहचान की गई है, जिनमें से एक, लिपोइड एंटीजन, गोजातीय हृदय के लिपोइड अर्क के समान है।

प्रतिरोध। ट्रेपोनेमा पैलिडम पर्यावरण में कमजोर रूप से प्रतिरोधी है; 55 पर 0 सी 15 मिनट के भीतर मर जाता है, सूखने, प्रकाश, पारा लवण, बिस्मथ, आर्सेनिक, पेनिसिलिन के प्रति संवेदनशील है। घरेलू वस्तुओं पर यह सूखने तक संक्रामक रहता है; शव के ऊतकों में अच्छी तरह से संरक्षित।

पशु संवेदनशीलता.प्रयोगात्मक रूप से, रोग प्रक्रिया को खरगोशों के अंडकोष और त्वचा और महान वानरों की त्वचा में प्रेरित किया जा सकता है।

महामारी विज्ञान। संक्रमण का स्रोत एक बीमार व्यक्ति है। संक्रमण मुख्य रूप से यौन संपर्क के माध्यम से होता है, शायद ही कभी रोगी के स्राव से दूषित घरेलू वस्तुओं (चश्मा, टूथब्रश, सिगरेट, आदि) के माध्यम से होता है; चुंबन, स्तनपान कराने वाली मां के दूध (घरेलू सिफलिस) के माध्यम से संक्रमण संभव है; सिफलिस के साथ दाताओं से रक्त संक्रमण के माध्यम से संक्रमण के मामलों से इंकार नहीं किया जा सकता है।

रोगजनन और नैदानिक ​​चित्र.सिफलिस का प्रेरक एजेंट त्वचा या श्लेष्म झिल्ली के माध्यम से शरीर में प्रवेश करता है, अंगों और ऊतकों के माध्यम से फैलता है, जिससे उन्हें नुकसान होता है। ऊष्मायन अवधि औसतन 3-4 सप्ताह तक रहती है। ऊष्मायन अवधि के बाद, सिफलिस प्राथमिक, माध्यमिक और तृतीयक अवधि के रूप में चक्रीय रूप से होता है। रोगज़नक़ के परिचय के स्थल पर (जननांगों पर, मौखिक गुहा में, आदि) एक प्राथमिक घाव दिखाई देता है - चेंक्र - सतह पर एक अल्सर के साथ एक तेजी से सीमांकित संघनन। सिफलिस की द्वितीयक अवधि 3-4 साल तक रहती है, जिसमें दाने और शरीर की सामान्य स्थिति का उल्लंघन होता है। तृतीयक अवधि में त्वचा, श्लेष्म झिल्ली, आंतरिक अंगों, हड्डियों और तंत्रिका तंत्र को नुकसान की विशेषता होती है: ऐसी संरचनाएं दिखाई देती हैं जिनमें क्षय और अल्सर होने का खतरा होता है।

रोग प्रतिरोधक क्षमता। सिफलिस के प्रति कोई जन्मजात प्रतिरक्षा नहीं होती है। सिफलिस के साथ, गैर-बाँझ प्रतिरक्षा विकसित होती है; ठीक होने के बाद रोग प्रतिरोधक क्षमता बरकरार नहीं रहती, इसलिए बीमारियों का दोबारा होना संभव है।

डार्क-फील्ड माइक्रोस्कोपी का उपयोग चैंक्रॉइड डिस्चार्ज में ट्रेपोनेमा पैलिडम का पता लगाने के लिए किया जाता है। प्राथमिक और माध्यमिक अवधि के अंत तक, वासरमैन की सेर्गोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं, काह्न की तलछट प्रतिक्रियाएं, साइटोकोलिक और अन्य परीक्षण जो ट्रेपोनेमा पैलिडम के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाते हैं, सकारात्मक हो जाते हैं। सामूहिक परीक्षाओं के दौरान, रक्त या सीरम की एक बूंद और एक विशेष एंटीजन के साथ चयन प्रतिक्रिया, या कांच पर माइक्रोरिएक्शन का उपयोग किया जाता है। अनुसंधान प्रयोगशालाएँ ट्रेपोनेमी स्थिरीकरण प्रतिक्रिया और अन्य आधुनिक तरीकों का भी उपयोग करती हैं।

सिफलिस के लिए सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान की योजना

सूक्ष्म परीक्षण सेरोडायग्नोसिस

(सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं का सेट):

वासरमैन प्रतिक्रिया

ट्रेपोनिमा स्थिरीकरण प्रतिक्रिया

देशी तैयारी आरआईएफ की माइक्रोस्कोपी

एक अँधेरे मैदान में

उत्तर उत्तर

इलाज। सबसे प्रभावी रोगाणुरोधी एजेंट पेनिसिलिन एंटीबायोटिक्स हैं। बिस्मथ, आयोडीन आदि की तैयारी का भी उपयोग किया जाता है।

रोकथाम। कोई विशेष रोकथाम नहीं है. गैर-विशिष्ट रोकथाम में स्वच्छता के नियमों का पालन करना शामिल है, साथ ही सार्वजनिक प्रकृति के स्वच्छता और स्वच्छ उपायों का एक सेट पूरा करना शामिल है: सिफलिस के रोगियों का पंजीकरण, संक्रामक रूपों वाले सभी रोगियों का अस्पताल में भर्ती होना, परिवार के सभी सदस्यों की जांच में शामिल होना बीमार व्यक्ति की, जोखिम समूहों की व्यवस्थित जांच, जनसंख्या की शिक्षा, आदि।

विशिष्ट लक्ष्य:

सिफलिस के प्रेरक एजेंट की आकृति विज्ञान से परिचित हों।

सिफलिस के नैदानिक ​​पाठ्यक्रम की विशेषताएं निर्धारित करें।

"ऊतक" और "सांस्कृतिक" ट्रेपोनेम की अवधारणाओं को परिभाषित करें।

सूक्ष्म परीक्षण के परिणामों की व्याख्या करें।

सिफलिस के सीरोलॉजिकल निदान के तरीकों का अध्ययन करें।

रोकथाम के तरीकों और विशिष्ट चिकित्सा से खुद को परिचित करें।

करने में सक्षम हों:

• रोगियों से अनुसंधान के लिए सामग्री एकत्र करें
• सूक्ष्म परीक्षण के परिणामों की व्याख्या करें
• वासरमैन प्रतिक्रिया को अंजाम देने में सक्षम हो

सैद्धांतिक प्रश्न:

1. रोगज़नक़।

• गुण। प्रतिरोध।
• मनुष्यों और जानवरों के लिए रोगज़नक़. रोगजनकता कारक, विषाक्त पदार्थ।
• मनुष्यों में रोग का रोगजनन, प्रतिरक्षा।
• सूक्ष्मजैविक निदान.
• विशिष्ट रोकथाम और उपचार

2. वासरमैन प्रतिक्रिया के मंचन के लक्ष्य।

3. वासरमैन प्रतिक्रिया और तलछटी प्रतिक्रियाओं का नैदानिक ​​​​मूल्य।

4. वासरमैन प्रतिक्रिया का तंत्र।

5. सिफलिस में प्रतिरक्षा की विशेषताएं।

कक्षा में किए गए व्यावहारिक कार्य:

• प्रदर्शन तैयारियों की माइक्रोस्कोपी.
• स्केचिंग प्रदर्शन प्रोटोकॉल में माइक्रोस्लाइड करता है।
• प्रयोगशाला निदान योजना का विश्लेषण।
• प्रोटोकॉल तैयार करना।

साहित्य:

1. कोरोत्येव ए.आई., बाबिचेव एस.ए., मेडिकल माइक्रोबायोलॉजी, इम्यूनोलॉजी और वायरोलॉजी / मेडिकल विश्वविद्यालयों के लिए पाठ्यपुस्तक, सेंट पीटर्सबर्ग: "विशेष साहित्य", 1998. - 592 पी।

2. टिमकोव वी.डी., लेवाशेव वी.एस., बोरिसोव एल.बी. माइक्रोबायोलॉजी/पाठ्यपुस्तक - दूसरा संस्करण, संशोधित। और अतिरिक्त - एम.: मेडिसिन, 1983, - 512 पी।

3. पायटकिन के.डी. क्रिवोशीन यू.एस. वायरोलॉजी और इम्यूनोलॉजी के साथ माइक्रोबायोलॉजी। - कीव: विशा स्कूल, 1992. - 431 पी।

4. मेडिकल माइक्रोबायोलॉजी / वी.आई. द्वारा संपादित। पोक्रोव्स्की।- एम.: जियोटार-मेड, 2001.- 768 पी।

5. माइक्रोबायोलॉजी, इम्यूनोलॉजी और वायरोलॉजी में व्यावहारिक कक्षाओं के लिए गाइड। /ईडी। एमपी। ज़्यकोवा.- एम. ​​"मेडिसिन"। 1977. 288 पी.

6. चर्केस एफ.के., बोगोयावलेंस्काया एल.बी., बेलस्कैन एन.ए. सूक्ष्म जीव विज्ञान. /ईडी। एफ.के. सर्कसियन। एम.: मेडिसिन, 1986. 512 पी।

7. व्याख्यान नोट्स.

अतिरिक्त साहित्य:

1. मकियारोव के.ए. माइक्रोबायोलॉजी, वायरोलॉजी और इम्यूनोलॉजी। - अल्मा-अता.: "कजाकिस्तान", 1974. 372 पी।

2. टिटोव एम.वी. संक्रामक बीमारियाँ। - के., 1995. 321 पी।

3. शुवालोवा ई.पी. संक्रामक रोग। - एम.: मेडिसिन, 1990. - 559 पी।

4. बीएमई, टी. 1, 2, 7.

5. पावलोविच एस.ए. ग्राफ़ में मेडिकल माइक्रोबायोलॉजी: पाठ्यपुस्तक। चिकित्सा के लिए भत्ता इन-टोव। एमएन: उच्चतर। स्कूल, 1986. 255 पी.

व्यावहारिक पाठ में काम करने के लिए संक्षिप्त दिशानिर्देश।

पाठ की शुरुआत में, छात्रों की पाठ के लिए तैयारी के स्तर की जाँच की जाती है।

• स्वतंत्र काम।
• वासरमैन प्रतिक्रिया का मंचन।
• वासरमैन की प्रतिक्रिया का लेखा-जोखा और प्रोटोकॉल में रिकॉर्डिंग।
• प्रोटोकॉल में प्रयोगशाला निदान योजनाओं का विश्लेषण और रिकॉर्डिंग।

स्वतंत्र कार्य में प्रदर्शन तैयारियों की माइक्रोस्कोपी और पाठ प्रोटोकॉल में उनका स्केचिंग भी शामिल है।

पाठ के अंत में, प्रत्येक छात्र के स्वतंत्र कार्य के अंतिम परिणामों का परीक्षण नियंत्रण और विश्लेषण किया जाता है।

व्यावहारिक पाठ आयोजित करने के लिए तकनीकी मानचित्र

नहीं।	चरणों	समय मिनट में.	सीखने के तरीके	उपकरण	जगह
	किसी पाठ की तैयारी के आउटपुट स्तर की जाँच करना और उसे ठीक करना	20	आउटपुट लेवल टेस्ट	टेबल्स। विषय पर परीक्षण.	अध्ययन कक्ष
	स्वतंत्र काम	35	ग्राफ़ तार्किक संरचना	प्रदर्शन औषधियों, जैविक उत्पादों का संग्रह।
	सीखी गई सामग्री की स्व-निगरानी और सुधार	15	लक्षित प्रशिक्षण कार्यक्रम
	परीक्षण नियंत्रण	15	परीक्षण
	कार्य परिणामों का विश्लेषण

प्रयोगशाला कार्य एल्गोरिदम:

सिफलिस के लिए प्रयोगशाला निदान योजना का अध्ययन।

संवर्धित और ऊतक ट्रेपोनेम से तैयार स्मीयरों की माइक्रोस्कोपी।

अध्ययन की जा रही सामग्री की माइक्रोस्कोपी के लिए रोगियों से सामग्री एकत्र करने के नियमों से परिचित होना।

प्रदर्शन तैयारियों की माइक्रोस्कोपी और विश्लेषण।

प्रोटोकॉल में दवाओं का रेखाचित्र बनाना।

प्रोटोकॉल में प्रयोगशाला निदान योजनाओं की रिकॉर्डिंग।

प्रोटोकॉल तैयार करना।

प्रत्येक छात्र के स्वतंत्र कार्य के परिणामों का परीक्षण नियंत्रण और विश्लेषण।

लक्ष्य प्रशिक्षण कार्य:

1. एक मरीज को प्राथमिक सिफलिस के निदान के साथ अस्पताल में भर्ती कराया गया था। रोग की इस अवस्था में निम्नलिखित में से कौन सी निदान पद्धति का उपयोग किया जाता है?

ए . डार्क फील्ड माइक्रोस्कोपी;

सी। जेल में आरपी

डी। आरए

इ . अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस

2. मैक्सिलोफेशियल सर्जरी विभाग के एक मरीज में जब वासरमैन प्रतिक्रिया की गई तो वह नकारात्मक निकली। नकारात्मक आरएससी की घटना को निर्धारित करने के लिए निम्नलिखित में से किस परिणाम का उपयोग किया जाता है?

ए . एरिथ्रोसाइट एग्लूटिनेशन द्वारा;

बी . लाल रक्त कोशिका तलछट की उपस्थिति से;

सी . तरल का रंग बदलकर;

डी . फिल्म निर्माण द्वारा

इ . परीक्षण ट्यूबों में हेमोलिसिस की उपस्थिति से।

3. केवीडी के एक मरीज की जांच करते समय, धड़ और अंगों पर पपुलर-रोज़ियोलस चकत्ते और बढ़े हुए लिम्फ नोड्स का पता चला। सिफलिस का प्रारंभिक निदान. कौन सी प्रयोगशाला निदान पद्धति इस निदान की पुष्टि कर सकती है?

एक। एलर्जी;

बी। जैविक;

सी . जीवाणुविज्ञानी;

डी . बैक्टीरियोस्कोपिक;

इ। एलिसा

4. अपॉइंटमेंट के दौरान, दंत चिकित्सक को मरीज के मुंह में एक कठोर चांसर का पता चला। निदान करने के लिए निम्नलिखित में से किस प्रयोगशाला निदान पद्धति का उपयोग किया जा सकता है?

ए . ट्रेपोनिमा स्थिरीकरण प्रतिक्रिया

बी . वासरमैन प्रतिक्रिया

सी। कहन प्रतिक्रिया

डी। आरए

इ . बैक्टीरियोस्कोपिक

5. एक महिला गर्भावस्था के 8वें सप्ताह में प्रसवपूर्व क्लिनिक में आई। जांच के दौरान, ट्रेपोनेमेस के प्रति विशिष्ट एंटीबॉडी की उपस्थिति की जांच के लिए उसका रक्त लिया गया। ट्रेपोनिमा के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए निम्नलिखित में से किस सीरोलॉजिकल परीक्षण का उपयोग किया जा सकता है?

एक। राइट की प्रतिक्रिया

बी . वासरमैन प्रतिक्रिया

सी। विडाल प्रतिक्रिया

डी . बोर्डेट-गेंगौ प्रतिक्रिया

इ। आरटीजीए.

6. सिफलिस के निदान की पुष्टि करने के लिए, प्रयोगशाला तकनीशियन ने एक सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया की, जिसमें उन्होंने रोगी के रक्त सीरम, कार्डियोलिपिड एंटीजन, पूरक और एक संकेतक प्रणाली का उपयोग किया। दी गई प्रतिक्रिया का नाम क्या है?

ए . ट्रेपोनिमा स्थिरीकरण प्रतिक्रिया;

बी . वासरमैन प्रतिक्रिया;

सी। कहन प्रतिक्रिया

डी। आर.पी

इ . इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया.

7. रोगी के रक्त सीरम में सिफलिस के प्रेरक एजेंट के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए एक सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया का संचालन करते समय, ट्रैपोनेम्स को अवायवीय परिस्थितियों में रोगी के सीरम के साथ ऊष्मायन किया गया था, जिसके बाद बैक्टीरिया ने अपनी गतिशीलता खो दी। क्या प्रतिक्रिया दी गई और इसका क्या मतलब है?

ए . वासरमैन प्रतिक्रिया, रोगी को सिफलिस है;

बी .वासेरमैन प्रतिक्रिया, रोगी ऊष्मायन अवधि में है;

सी . ट्रेपोनिमा स्थिरीकरण प्रतिक्रिया, रोगी को सिफलिस है;

डी . अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया, रोगी को सिफलिस है;

इ . ट्रेपोनेमा स्थिरीकरण प्रतिक्रिया, रोगी एक बार सिफलिस से पीड़ित था।

8. वासरमैन प्रतिक्रिया का उपयोग करके सिफलिस के सीरोलॉजिकल निदान के लिए, प्रयोगशाला डॉक्टर ने निम्नलिखित अभिकर्मक तैयार किए: कार्डियोलिपिड एंटीजन, आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान, हेमोलिटिक प्रणाली। इस प्रतिक्रिया को चरणबद्ध करने के लिए अन्य किस घटक की आवश्यकता है?

ए . लाइव ट्रेपोनेमा;

बी . भेड़ की लाल रक्त कोशिकाएं;

सी। पूरक होना;

डी . एंटीग्लोबुलिन सीरम;

इ . नैदानिक ​​अवक्षेपण सीरम.

9. रोमानोव्स्की-गिम्सा के अनुसार रोगी के लिम्फ नोड्स के एक बिंदु से तैयार माइक्रोस्लाइड में, डॉक्टर ने हल्के गुलाबी रंग के 12-14 समान कर्ल के साथ पतले सूक्ष्मजीवों की पहचान की। इस मामले में हम किस संक्रामक रोग प्रेरक एजेंट के बारे में बात कर सकते हैं?

ए . पुनरावर्तन बुखार;

बी। लेप्टोस्पायरोसिस;

सी। Leishmaniasis

डी। उपदंश

इ। ट्रिपैनोसोमियासिस.

10. संदिग्ध प्राथमिक सिफलिस वाले एक मरीज से मौखिक श्लेष्मा से एक स्क्रैप लिया गया था। रोमानोव्स्की-गिम्सा विधि का उपयोग करके दागे गए स्मीयर की माइक्रोस्कोपी से जटिल बैंगनी बैक्टीरिया का पता चला। निम्नलिखित में से कौन सा निष्कर्ष सही है?

ए . रोगी का निदान किया गयाटी। पैलिडम;

बी . रोगी में असामान्य रूप पाए गएटी। पैलिडम;

सी . रोगी को गैर-रोगजनक ट्रेपोनेम्स का निदान किया गया था;

डी . गलत पेंटिंग विधि चुनी गई;

इ। -

11. एक चिकित्सक को एक मरीज में प्राथमिक सिफलिस का संदेह हुआ। निदान की पुष्टि के लिए कौन सी शोध सामग्री एकत्र करना उचित है?

ए . चेंक्रे और पंचर लिम्फ नोड्स से ऊतक द्रव;

बी . त्वचा पर चकत्ते से खरोंच;

सी। मस्तिष्कमेरु द्रव;

डी। नाक से बलगम

इ। लार.

12. परीक्षण के लिए संदिग्ध माध्यमिक सिफलिस वाले रोगी से रक्त लिया गया था। निदान की पुष्टि के लिए किस निदान पद्धति का उपयोग करना उचित है?

ए . विडाल प्रतिक्रिया;

बी . एलर्जी परीक्षण;

डी . बोर्डेट-गेंगौ प्रतिक्रिया

इ . बैक्टीरियोलॉजिकल विधि

सी . अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया.

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टी. पैलिडम उप-प्रजाति पैलिडम एक सर्पिल आकार का जीवाणु है जिसकी माप 6-14x0.2-0.3 µm है; फसलों में वे बड़े हो सकते हैं। सर्पिल कर्ल ऊंचाई में समान हैं, उनमें से 14 तक हो सकते हैं। एल-आकार बनाने में सक्षम।

बुनियादी सिफलिस के प्रजनन की विधि- अनुप्रस्थ विभाजन. सिफलिस का प्रेरक एजेंटबाहरी वातावरण में यह बहुत स्थिर नहीं होता है और सूखने पर मर जाता है, लेकिन ठंड में यह 50 दिनों तक बना रहता है। एक घंटे के लिए 40 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर गर्म करने से रोगजनक गुणों का नुकसान होता है; 48 डिग्री सेल्सियस पर बैक्टीरिया 10 मिनट के भीतर मर जाते हैं।

सिफलिस का प्रेरक एजेंटएनिलिन रंगों के साथ अच्छी तरह से दाग नहीं पड़ता (इसलिए इसका नाम "पेल स्पिरोचेट") है। सिफलिस बैक्टीरियासिल्वर नाइट्रेट को धात्विक सिल्वर में कम करें, जो कपड़ों को काला या गहरा भूरा रंग देता है।

घरेलू अभ्यास में, चांदी की मोरोज़ोव विधि व्यापक है। रोमानोव्स्की-गिम्सा के अनुसार, यह गुलाबी रंग का है और गैर-रोगजनक है ट्रेपोनिमा- बैंगनी या नीले रंग में. बुर्री नकारात्मक कंट्रास्ट का भी उपयोग किया जाता है।

सिफलिस के सांस्कृतिक गुण. सिफलिस के प्रेरक एजेंट की संस्कृति

पीला स्पिरोचेटखेती की स्थितियों पर मांग करना, कृत्रिम मीडिया पर खराब रूप से बढ़ता है; संस्कृतियों के स्थिर उत्पादन के तरीकों का अभी भी अभाव है।

हमारे देश में सबसे ज्यादा संख्या सिफलिस उपभेदकज़ान माइक्रोबायोलॉजिस्ट वी.एम. द्वारा पहचाना गया। अरिस्टोव्स्की और पी.पी. गेल्टसर।

ये "कज़ान" सिफलिस उपभेदरेइटर स्ट्रेन के साथ, इसका उपयोग सेरोडायग्नोसिस के लिए एजी के उत्पादन के लिए किया जाता है। लंबी अवधि की खेती के साथ सिफलिस बैक्टीरियासरल वातावरण (उदाहरण के लिए, किट्टा-तारोज़ी) के अनुकूल हो जाते हैं और रोगजनक गुण खो देते हैं।

सिफलिस की बस्तियाँछोटे, खेती के 3-5वें दिन दिखाई देते हैं।

लेख की सामग्री

ट्रैपोनेमा पैलिडम

आकृति विज्ञान और शरीर विज्ञान

टी. पैलिडम में एक सर्पिल आकार, एक प्रोटोप्लास्टिक सिलेंडर होता है, जो 8-12 चक्करों में मुड़ा होता है। 3 पेरिप्लास्मिक फ्लैगेल्ला कोशिका के सिरों से विस्तारित होते हैं। ट्रेपोनिमा पैलिडम एनिलिन रंगों को अच्छी तरह से स्वीकार नहीं करता है, इसलिए इसे रोमानोव्स्की-गिम्सा पेंट से रंगा जाता है। हालाँकि, सबसे प्रभावी तरीका डार्क-फील्ड या चरण-कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप में इसका अध्ययन करना है। माइक्रोएयरोफाइल। कृत्रिम पोषक माध्यम पर नहीं उगता। टी. पैलिडम की खेती खरगोश के वृषण ऊतक में की जाती है, जहां यह अच्छी तरह से प्रजनन करता है और अपने गुणों को पूरी तरह से बरकरार रखता है, जिससे जानवर में ऑर्काइटिस होता है। एंटीजन। टी. पैलिडम की एंटीजेनिक संरचना जटिल है। यह बाहरी झिल्ली प्रोटीन, लिपोप्रोटीन से जुड़ा हुआ है। उत्तरार्द्ध मनुष्यों और मवेशियों में आम तौर पर क्रॉस-रिएक्शन करने वाले एंटीजन हैं। इन्हें सिफलिस के सेरोडायग्नोसिस के लिए वासरमैन प्रतिक्रिया में एंटीजन के रूप में उपयोग किया जाता है।

रोगजनन और रोगजनन

ट्रेपोनिमा पैलिडम के विषैले कारकों में बाहरी झिल्ली प्रोटीन और एलपीएस शामिल हैं, जो कोशिका से निकलने के बाद अपने विषाक्त गुणों को प्रदर्शित करते हैं। साथ ही, जाहिरा तौर पर, ट्रेपोनिमा की क्षमता, विभाजित होने पर, अलग-अलग टुकड़े बनाने के लिए जो ऊतकों में गहराई से प्रवेश करती है, को भी विषाणु कारकों के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है। सिफलिस के रोगजनन में तीन चरण होते हैं। प्राथमिक सिफलिस के साथ, एक प्राथमिक फोकस का गठन देखा जाता है - संक्रमण के प्रवेश द्वार के स्थल पर कठोर चेंक्र, इसके बाद क्षेत्रीय लिम्फ नोड्स में प्रवेश होता है, जहां रोगज़नक़ गुणा और जमा होता है। प्राथमिक सिफलिस लगभग 6 सप्ताह तक रहता है। दूसरे चरण में संक्रमण का सामान्यीकरण होता है, जिसमें रक्त में रोगज़नक़ का प्रवेश और परिसंचरण होता है, जो त्वचा पर चकत्ते के साथ होता है। अनुपचारित रोगियों में माध्यमिक सिफलिस की अवधि 1-2 वर्ष तक होती है। तीसरे चरण में, आंतरिक अंगों और ऊतकों में स्थानीयकृत संक्रामक ग्रैनुलोमा (गमों के क्षय होने की संभावना) का पता लगाया जाता है। अनुपचारित रोगियों में यह अवधि कई वर्षों तक चलती है और केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (प्रगतिशील पक्षाघात) या रीढ़ की हड्डी (टैब्स डॉर्सलिस) को नुकसान के साथ समाप्त होती है।

रोग प्रतिरोधक क्षमता

सिफलिस के साथ, एक विनोदी और सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया होती है। परिणामी एंटीबॉडी में सुरक्षात्मक गुण नहीं होते हैं। सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया रोगज़नक़ के निर्धारण और ग्रैनुलोमा के गठन से जुड़ी होती है। हालाँकि, शरीर से ट्रेपोनेम का उन्मूलन नहीं होता है। साथ ही, प्रतिकूल पर्यावरणीय परिस्थितियाँ ट्रेपोनेमा द्वारा सिस्ट के निर्माण को प्रेरित करती हैं, जो रक्त वाहिकाओं की दीवार में स्थानीयकृत होती हैं। ऐसा माना जाता है कि यह रोग के निवारण में संक्रमण का संकेत देता है। सिस्ट के साथ, ट्रेपोनेम्स एल-फॉर्म बनाते हैं। सिफलिस के साथ, एचआरटी का गठन होता है, जिसे ट्रेपोनेम के मारे गए निलंबन के साथ एलर्जी त्वचा परीक्षण द्वारा पता लगाया जा सकता है। ऐसा माना जाता है कि सिफलिस की तृतीयक अवधि की अभिव्यक्ति एचआरटी से जुड़ी है।

पारिस्थितिकी और महामारी विज्ञान

सिफलिस एक आम तौर पर मानवजनित संक्रमण है। केवल वे लोग ही बीमार पड़ते हैं जो प्रकृति में संक्रमण के भंडार हैं। संक्रमण का संचरण यौन संपर्क के माध्यम से होता है और, बहुत कम बार, अंडरवियर और अन्य वस्तुओं के माध्यम से होता है। बाहरी वातावरण (वायु) में ट्रेपोनेम्स जल्दी मर जाते हैं।

सिफलिस और अन्य ट्रेपोनेमाटोज़

सिफलिस मनुष्यों का एक दीर्घकालिक संक्रामक यौन रोग है, इसका चक्रीय प्रगतिशील पाठ्यक्रम है, यह त्वचा, श्लेष्मा झिल्ली, आंतरिक अंगों और तंत्रिका तंत्र को प्रभावित करता है। रोग का प्रेरक एजेंट ट्रेपोनेमा पैलिडम है। सिफलिस के विकास की तीन मुख्य अवधियाँ हैं, जिनकी प्रयोगशाला निदान विधियों की अपनी विशेषताएं हैं। रोग की प्रारंभिक अवधि में, प्रयोगशाला निदान के लिए सामग्री चेंक्र से स्राव, लिम्फ नोड्स से पंचर, रोजोला से स्क्रैपिंग, सिफिलाइड्स आदि हैं। माध्यमिक और तृतीयक अवधि के दौरान, रक्त सीरम और मस्तिष्कमेरु द्रव की जांच की जाती है। इस तथ्य के कारण कि पारंपरिक बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाओं में ट्रेपोनेम की शुद्ध संस्कृतियों को अलग करना असंभव है, रोग की प्राथमिक अवधि के दौरान (शायद ही बाद में) एक बैक्टीरियोस्कोपिक निदान पद्धति का प्रदर्शन किया जाता है। द्वितीयक काल से शुरू होकर, मुख्य रूप से सीरोलॉजिकल तरीकों का उपयोग किया जाता है।

बैक्टीरियोस्कोपिक परीक्षा

पैथोलॉजिकल सामग्री लेने से पहले, वसामय पट्टिका और दूषित माइक्रोफ्लोरा को हटाने के लिए सिफिलिटिक अल्सर को पहले कपास झाड़ू से मिटा दिया जाता है। फिर चेंकर के निचले हिस्से को एक स्केलपेल या एक धातु स्पैटुला से चिढ़ाया जाता है, या घाव को बाहर निकालने के लिए रबर के दस्ताने में उंगलियों के साथ अल्सर को किनारों से जोर से निचोड़ा जाता है। यदि थोड़ी मात्रा में स्पष्ट तरल है, तो इसे 0.85% सोडियम क्लोराइड घोल की एक बूंद में मिलाया जा सकता है। यदि चेंकेर के नीचे से सामग्री लेना असंभव है (फिमोसिस, अल्सर का निशान, आदि), तो क्षेत्रीय लिम्फ नोड्स का एक पंचर किया जाता है। अल्सर या पंचर से तरल की एक बूंद एक पतले गिलास पर लगाई जाती है स्लाइड (1.1-1.2 मिमी), एक कवरस्लिप के साथ कवर किया गया और देखने के अंधेरे क्षेत्र में जांच की गई (अधिक सुंदर!), या एक चरण-कंट्रास्ट या एनोप्ट्रल माइक्रोस्कोप का उपयोग किया गया। देखने के एक अंधेरे क्षेत्र में पीला ट्रेपोनेमा थोड़ा चमकदार दिखता है खड़ी, समान, गोलाकार प्राथमिक कर्ल के साथ पतली नाजुक सर्पिल। चालें चिकनी हैं, इसलिए यह एक कोण पर झुकता है। लेकिन इसकी विशेष विशेषता पेंडुलम जैसे दोलन हैं। सिफलिस के प्रेरक एजेंट को ट्रेपोनेमा रिफ्रिंजेंस (जो बाहरी जननांग को उपनिवेशित करता है) से अलग किया जाना चाहिए, जो मोटा, खुरदरा, असमान बड़े कर्ल के साथ होता है और इसमें सक्रिय अनियमित गतिविधियां होती हैं, लेकिन झुकता नहीं है। फ्यूसोस्प-इरोकेटस सहजीवन के ट्रेपोनेमा को एक पतले पैटर्न, कोमल कर्ल और अनियमित गति से पहचाना जाता है। मौखिक सिफलिस का निदान करते समय, पीला ट्रेपोनेमा को दंत ट्रेपोनेम, विशेष रूप से टी. डेंटियम, साथ ही टी. बुकेलिस से अलग किया जाना चाहिए। उनमें से पहले को आम तौर पर सिफिलिटिक से अलग करना मुश्किल होता है। हालाँकि, यह छोटा है, इसमें 4-8 तेज कर्ल हैं, और इसमें पेंडुलम जैसी कोई गति नहीं है। टी. बुकेलिस अधिक मोटा होता है, इसमें खुरदरे प्रारंभिक कर्ल और अनियमित गति होती है। यदि कोई संदेह है, तो यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि सभी सैप्रोफाइटिक ट्रेपोनेम, पीले वाले के विपरीत, एनिलिन रंगों से अच्छी तरह से रंगे हुए हैं। वे लिम्फ नोड्स में प्रवेश नहीं करते हैं, इसलिए पंक्टेट के अध्ययन का बड़ा नैदानिक ​​महत्व है। लिम्फ नोड्स के बिंदु में विशिष्ट ट्रेपोनेम की पहचान निर्विवाद रूप से सिफलिस के निदान की पुष्टि करती है। इसलिए, सिफलिस के प्रेरक एजेंट की पहचान करने के लिए दबाए गए बूंदों की डार्क-फील्ड परीक्षा सबसे अच्छी विधि है। इसका लाभ यह है कि सामग्री की शीघ्रता से जांच की जाती है, और जीवित अवस्था में ट्रेपोनेम्स की आकृति विज्ञान सबसे विशिष्ट है। बुर्री विधि का उपयोग करने वाले स्याही स्मीयरों का अब उपयोग नहीं किया जाता है। यदि दृश्य के अंधेरे क्षेत्र में अनुसंधान करना असंभव है, तो विभिन्न धुंधला तरीकों का उपयोग किया जा सकता है। ट्रेपोनेमा पैलिडम एनिलिन रंगों को अच्छी तरह से स्वीकार नहीं करता है। कई प्रस्तावित धुंधला तरीकों में से, रोमानोवेकी-गिम्सा धुंधलापन का उपयोग करते समय सबसे अच्छे परिणाम प्राप्त होते हैं। तैयार स्मीयरों को मिथाइल अल्कोहल या निकिफोरोव के मिश्रण में तय किया जाता है। जब रोमानोव्स्की-गिम्सा पेंट को तैयारी में डाला जाता है तो स्पष्ट परिणाम प्राप्त होते हैं। ऐसा करने के लिए, माचिस के टुकड़ों को पेट्री डिश में रखा जाता है, उन पर एक ग्लास स्लाइड रखी जाती है, स्मियर किया जाता है, और डाई तब तक डाली जाती है जब तक कि यह स्मीयर को गीला न कर दे। पेंटिंग का समय दोगुना हो गया है। माइक्रोस्कोपी के तहत, हल्के ट्रेपोनेमा का रंग हल्का गुलाबी होता है, जबकि अन्य प्रकार के ट्रेपोनेमा नीले या नीले-बैंगनी रंग में रंगे होते हैं। आप मोरोज़ोव सिल्वरिंग विधि का भी उपयोग कर सकते हैं। ट्रेपोनिमा पूरी तरह से अपनी रूपात्मक विशेषताओं को बरकरार रखते हैं और माइक्रोस्कोप के नीचे भूरे या लगभग काले दिखते हैं। लेकिन सिल्वर-प्लेटेड तैयारियां लंबे समय तक संग्रहीत नहीं की जाती हैं। हाल ही में, ट्रेपोनेम्स को धुंधला करने के तरीकों का उपयोग शायद ही कभी किया जाता है। यदि कीमोथेरेपी के साथ सिफलिस का उपचार शुरू किया जाता है, तो अंधेरे क्षेत्र की मदद से भी पैथोलॉजिकल सामग्रियों में रोगज़नक़ की पहचान करना व्यावहारिक रूप से असंभव है। यदि कोई नकारात्मक परीक्षण प्राप्त होता है, तो उसे दोहराया जाना चाहिए।

सिफलिस का सीरोलॉजिकल निदान

सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं करते समय, यूक्रेन में एकीकृत निम्नलिखित अनुसंधान विधियों का अब उपयोग किया जाता है: पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया (सीएफआर), इम्यूनोफ्लोरेसेंस (आरआईएफ), ट्रेपोनेमल इमोबिलाइजेशन (पीआईटी), माइक्रोप्रेजर्वेशन रिएक्शन (एमपीआर) और एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा) ) कई वर्षों तक, मुख्य और सबसे आम प्रतिक्रिया पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया या वासरमैन प्रतिक्रिया (आरडब्ल्यू) थी। इसे करने के लिए, तंत्रिका तंत्र को नुकसान होने की स्थिति में सिफलिस और मस्तिष्कमेरु द्रव वाले रोगी के रक्त सीरम का उपयोग करें। वासरमैन प्रतिक्रिया के मंचन की तकनीक आरएससी करने की तकनीक से भिन्न नहीं है। एकमात्र अंतर यह है कि आरओ के लिए, न केवल विशिष्ट ट्रेपोनेमल, बल्कि गैर-विशिष्ट कार्डियोलिपिन एंटीजन का उपयोग किया जाता है। उलनार नस से 5-10 मिलीलीटर रक्त खाली पेट पर या भोजन के 6 घंटे से पहले नहीं लिया जाता है। आपको बुखार के रोगियों, शराब और वसायुक्त भोजन पीने के बाद, गर्भवती महिलाओं से जन्म देने से 10 दिन पहले और प्रसव के दौरान महिलाओं से रक्त नहीं लेना चाहिए। रक्त से निकाले गए सीरम को अपने स्वयं के पूरक को निष्क्रिय करने के लिए 56 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 30 मिनट तक गर्म किया जाता है। आरओ को दो एंटीजन के साथ रखा जाना चाहिए: विशिष्ट और गैर-विशिष्ट। अल्ट्रासाउंड-विशिष्ट ट्रेपोनेमल एंटीजन टेस्ट ट्यूब में उगाए गए और अल्ट्रासाउंड के संपर्क में आने वाले ट्रेपोनेमा पैलिडम (रेइटर स्ट्रेन) की संस्कृतियों से तैयार किया जाता है। इसका उत्पादन फ्रीज-सूखे पाउडर के रूप में किया जाता है। गैर-विशिष्ट कार्डियोलिपिन एंटीजन गोजातीय हृदय से लिपिड के अल्कोहलिक निष्कर्षण और गिट्टी मिश्रण से शुद्धिकरण द्वारा तैयार किया जाता है, जिसे 2 मिलीलीटर ampoules में पैक किया जाता है। पीओ में एंटीजन को शामिल करने के लिए, इसे इन निर्देशों के अनुसार शीर्षक दिया जाता है। आरवी के मंचन से तुरंत पहले, आरएससी की तरह ही पूरक और हेमोलिटिक सीरम का अनुमापन किया जाता है। वासरमैन प्रतिक्रिया गुणात्मक और मात्रात्मक दोनों तरीकों का उपयोग करके की जाती है। सामान्य योजना के अनुसार दो एंटीजन के साथ तीन परीक्षण ट्यूबों में गुणात्मक प्रतिक्रिया की जाती है। प्रतिक्रिया के परिणामों का मूल्यांकन 4 प्लस प्रणाली के अनुसार किया जाता है: सकारात्मक प्रतिक्रिया - जब हेमोलिसिस में पूर्ण या महत्वपूर्ण देरी होती है (4+, 3+); कमजोर सकारात्मक प्रतिक्रिया - हेमोलिसिस में आंशिक देरी (2 +); संदिग्ध प्रतिक्रिया - हेमोलिसिस में थोड़ी देरी (1+)। पूर्ण हेमोलिसिस की स्थिति में, आरओ को नकारात्मक माना जाता है। सकारात्मक गुणात्मक प्रतिक्रिया देने वाले प्रत्येक सीरम को 1:10 से 1:640 तक क्रमिक कमजोर पड़ने के साथ मात्रात्मक विधि का उपयोग करके जांच की जानी चाहिए। परीक्षण सीरम का टिटर (रीगिन टिटर) ) को इसका अधिकतम तनुकरण माना जाता है, जिस पर हेमोलिसिस में पूर्ण (4+) या महत्वपूर्ण (3+) देरी होती है। सिफलिस उपचार की प्रभावशीलता का आकलन करने के लिए आरओ स्टेजिंग की मात्रात्मक विधि महत्वपूर्ण है। रीगिन टिटर में तेजी से कमी सफल चिकित्सा का संकेत देती है। यदि सीरम टिटर लंबे समय तक कम नहीं होता है, तो यह उपयोग की जाने वाली दवाओं की प्रभावशीलता की कमी और उपचार रणनीति को बदलने की आवश्यकता को इंगित करता है। सेरोनिगेटिव प्राथमिक सिफलिस या अव्यक्त, तृतीयक या जन्मजात के लिए पाइलोसिस के मामले में, इसे करने की सिफारिश की जाती है उसी योजना के अनुसार ठंड में वासरमैन परीक्षण। यदि न्यूरोसाइफिलिस का संदेह है, तो आरओ को मस्तिष्कमेरु द्रव के साथ किया जाता है, जो निष्क्रिय होता है क्योंकि इसमें अपना स्वयं का पूरक नहीं होता है। बिना पतला शराब को 1:2 और 1:5 के तनुकरण में प्रतिक्रिया में पेश किया जाता है। चेंक्र की उपस्थिति के 2-3 सप्ताह बाद वासरमैन प्रतिक्रिया सकारात्मक हो जाती है। माध्यमिक सिफलिस में, यह 100% मामलों में सकारात्मक है, तृतीयक सिफलिस में - 75% में। इसके अलावा, सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं (सीएसआर) के परिसर में, रक्त प्लाज्मा या निष्क्रिय सीरम के साथ एक माइक्रोप्रेजर्वेशन प्रतिक्रिया का उपयोग स्क्रीनिंग परीक्षण के रूप में किया जाता है।

वर्षा सूक्ष्म प्रतिक्रिया

वर्षा माइक्रोरिएक्शन कार्डियोलिपिन एंटीजन के साथ किया जाता है। प्रतिक्रिया का सिद्धांत यह है कि जब सिफलिस से पीड़ित रोगी के प्लाज्मा या सीरम में कार्डियोलिपिन एंटीजन का इमल्शन मिलाया जाता है, तो एक अवक्षेप (एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स) बनता है, जो सफेद गुच्छे के रूप में अवक्षेपित होता है। निम्नलिखित तकनीक का उपयोग किया जाता है: प्लाज्मा (या निष्क्रिय सीरम) की तीन बूंदों को प्लेट के कुएं में पाइप किया जाता है, फिर मानक कार्डियोलिपिन एंटीजन इमल्शन की एक बूंद डाली जाती है। प्रतिक्रिया घटकों को 5 मिनट के लिए प्लेट को हिलाकर मिश्रित किया जाता है, जिसके बाद 0.9% सोडियम क्लोराइड समाधान की तीन बूंदें डाली जाती हैं और अगले 5 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर छोड़ दिया जाता है। कमजोर सकारात्मक रक्त सीरम के साथ अनिवार्य नियंत्रण। परिणामों का मूल्यांकन कृत्रिम प्रकाश स्रोत पर नग्न आंखों से किया जाता है। जब छेद में बड़े गुच्छे दिखाई देते हैं, तो प्रतिक्रिया को सकारात्मक (4+, 3+) माना जाता है, मध्यम और छोटे गुच्छे को कमजोर रूप से सकारात्मक (2+, 1+) ​​माना जाता है। यदि परिणाम नकारात्मक है, तो कोई अवक्षेप नहीं बनता है। अवक्षेपण एंटीबॉडी के अनुमापांक को स्थापित करने और इस आधार पर उपचार की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए मात्रात्मक विधि का उपयोग करके अवक्षेपण की सूक्ष्म प्रतिक्रिया भी की जा सकती है। सीरम की तुलना में प्लाज्मा से उच्च एमआरपी टाइटर्स प्राप्त होते हैं। विदेश में, रोगी सीरम के साथ एमआरपी का एनालॉग वीडीआरएल (वेनरल डिजीज रिसर्च लेबोरेटोइ) है, और प्लाज्मा के साथ - आरपीआर (रैपिड प्लाज्मा रीगिन)।

इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया (आरआईएफ)

सिफलिस के सीरोलॉजिकल निदान के लिए व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली विशिष्ट प्रतिक्रियाओं के समूह में अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया शामिल है। एक एंटीजन के रूप में, यह संक्रमण के 7वें दिन खरगोश के अंडकोष के पैरेन्काइमा से रोगजनक पैलिड ट्रेपोनेमा स्ट्रेन निकोल्स के निलंबन का उपयोग करता है। प्रतिक्रिया दो संशोधनों में की जाती है: RIF-ABS और RIF-200। पहले विकल्प में, एक एंटीबॉडी सॉर्बेंट (सोनिकेट) का उपयोग किया जाता है - सीएससी के लिए अल्ट्रासोनिक ट्रेपोनेमल एंटीजन। इसका उत्पादन कौनास उद्यम द्वारा जीवाणु तैयारियों (लिथुआनिया) के उत्पादन के लिए किया जाता है। आरआईएफ-200 विकल्प के साथ, समूह एंटीट्रेपोनेमल एंटीबॉडी के प्रभाव को हटाने के लिए रोगी के सीरम को 200 बार पतला किया जाता है। आरआईएफ-एबीएस पतली, अच्छी तरह से वसा रहित ग्लास स्लाइड पर किया जाता है। कांच के पीछे, एक ग्लास कटर 0.7 सेमी के व्यास के साथ 10 सर्कल को चिह्नित करता है। सर्कल के भीतर, ग्लास पर एक एंटीजन लगाया जाता है - पीला ट्रेपोनिमा का निलंबन - इतनी मात्रा में कि उनमें से 50-60 हों देखने के क्षेत्र में. स्मीयरों को हवा में सुखाया जाता है, आंच पर रखा जाता है और एसीटोन में 10 मिनट तक रखा जाता है। एक अलग टेस्ट ट्यूब में 0.2 मिली सॉर्बेंट (सोनिकेट) और 0.5 मिली मरीज का रक्त सीरम डालें और अच्छी तरह मिलाएं। मिश्रण को स्मीयर (एंटीजन) पर लगाया जाता है ताकि इसे समान रूप से कवर किया जा सके, और 30 मिनट के लिए 3-7 डिग्री सेल्सियस (चरण II प्रतिक्रिया) पर एक आर्द्र कक्ष में रखा जाता है। इसके बाद, स्मीयर को फॉस्फेट बफर से धोया जाता है, सुखाया जाता है और उस पर 30 मिनट के लिए एंटी-शोबुलिन फ्लोरोसेंट सीरम लगाया जाता है, 37 डिग्री सेल्सियस (चरण II) पर एक आर्द्र कक्ष में रखा जाता है। तैयारी को फिर से फॉस्फेट बफर से धोया जाता है, सुखाया जाता है और एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। एक सकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, पीला ट्रेपोनिमा एक सुनहरे-हरे रंग की रोशनी का उत्सर्जन करता है, एक नकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, वे चमकते नहीं हैं। RIF-200 स्थापित करने की तकनीक है आरआईएफ-एबीएस के समान, केवल रोगी के रक्त सीरम को फॉस्फेट बफर के साथ 200 बार पूर्व-पतला किया जाता है। तंत्रिका तंत्र के सिफलिस वाले रोगी के मस्तिष्कमेरु द्रव के साथ इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया करते समय, RIF-c और RIF-10 का उपयोग किया जाता है, अर्थात। शराब को प्रतिक्रिया में निष्क्रिय और पतला किया जाता है, या 1:10 पतला किया जाता है।

ट्रेपोनेमा पैलिडम स्थिरीकरण प्रतिक्रिया (पीआईटी)

पैलिड ट्रेपोनेमा (पीआईटी) की स्थिरीकरण प्रतिक्रिया एनारोबियोसिस की स्थितियों के तहत रोगी के सीरम और पूरक से स्थिर एंटीट्रेपोनेमल एंटीबॉडी की उपस्थिति में उनकी गतिशीलता के नुकसान की घटना पर आधारित है। निकोल्स प्रयोगशाला स्ट्रेन से संक्रमित खरगोश के वृषण ऊतक से पेल ट्रेपोनेमा का निलंबन प्रतिक्रिया में एंटीजन के रूप में उपयोग किया जाता है। निलंबन को बाँझ 0.85% सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ पतला किया जाता है ताकि देखने के क्षेत्र में 10-15 स्पाइरोकेट्स हों। प्रतिक्रिया को अंजाम देने के लिए, रोगी के रक्त सीरम का 0.05 मिलीलीटर, एंटीजन का 0.35 मिलीलीटर और पूरक का 0.15 मिलीलीटर लिया जाता है। एक बाँझ टेस्ट ट्यूब में मिलाया जाता है। प्रयोग सीरम, एंटीजन और पूरक नियंत्रण के साथ है। टेस्ट ट्यूबों को एक ऐनेरोस्टेट में रखा जाता है, शारीरिक स्थितियां बनाई जाती हैं और थर्मोस्टेट में 18-20 घंटों के लिए 35 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर रखा जाता है। फिर प्रत्येक टेस्ट ट्यूब से दबाई गई बूंदें तैयार की जाती हैं, कम से कम 25 ट्रेपोनेम गिने जाते हैं और कितने उनमें से कितने मोबाइल हैं और कितने नोट किए गए हैं, नोट किए गए हैं। पेल ट्रेपोनेमा के विशिष्ट स्थिरीकरण के प्रतिशत की गणना सूत्र का उपयोग करके की जाती है: x = (ए-बी) / बी * 100, जहां एक्स स्थिरीकरण का प्रतिशत है, ए नियंत्रण ट्यूब में मोबाइल ट्रेपोनेम की संख्या है, बी मोबाइल की संख्या है टेस्ट ट्यूब में ट्रेपोनेम्स। प्रतिक्रिया को सकारात्मक माना जाता है जब स्थिरीकरण का प्रतिशत 50 या अधिक होता है, कमजोर सकारात्मक - 30 से 50 तक, संदिग्ध - 20 से 30 तक और नकारात्मक - 0 से 20 तक। व्यावहारिक प्रयोगशालाओं में वे एम.एम. के लिए सरल मेलेंजर विधि पीआईटी का उपयोग करते हैं। Ovchinnikov। प्रतिक्रियाशील मिश्रण (सीरम, एंटीजन, पूरक) को मेलेंजूर में रखकर अवायवीय प्रायोगिक स्थितियाँ बनाई जाती हैं, जिसके दोनों सिरे रबर की अंगूठी से बंद होते हैं। मेलेंजर तकनीक आपको एनारोबायोसिस बनाने के लिए जटिल उपकरण और तंत्र के बिना करने की अनुमति देती है, लेकिन ऐसे परिणाम देती है जो शास्त्रीय माइक्रोएनेरोस्टेट तकनीक द्वारा प्राप्त नहीं किए जाते हैं। ट्रेपोनेमा स्थिरीकरण प्रतिक्रियाएं और इम्यूनोफ्लोरेसेंस को सिफलिस के सीरोलॉजिकल निदान में सबसे विशिष्ट माना जाता है। और फिर भी, पीआईटी, इसकी विशिष्टता के बावजूद, इसके कार्यान्वयन की श्रमसाध्यता के कारण व्यापक अभ्यास में उपयोग के लिए अनुशंसित नहीं है।

एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा)

एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा) कैड्रिओलिपिन एंटीजन (गैर-विशिष्ट, चयन प्रतिक्रिया) और ट्रेपोनेमल एंटीजन (विशिष्ट प्रतिक्रिया) दोनों के साथ किया जाता है, जो सिफलिस के निदान की पुष्टि करता है। अप्रत्यक्ष एलिसा विधि का सिद्धांत यह है कि एंटीजन को सोख लिया जाता है टैबलेट के कुओं में ठोस चरण परीक्षण सीरम जोड़ा जाता है। यदि इसमें ट्रेपोनमेस के खिलाफ एंटीबॉडी शामिल हैं, तो एक एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनता है (चरण II)। अनबाउंड नॉनस्पेसिफिक एंटीबॉडीज को धोने के बाद, एक एंजाइम (अक्सर हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज) के साथ संयुग्मित एंटीग्लोबुलिन सीरम को कुओं में जोड़ा जाता है। संयुग्म मजबूती से एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स (चरण II) से जुड़ा हुआ है। अनबाउंड संयुग्म को धोने के बाद, ओपीडी स्टेनिंग सब्सट्रेट - ऑर्थोफेनिलिनेडियम (चरण III) को कुओं में जोड़ा जाता है। सल्फ्यूरिक एसिड मिलाने से पेरोक्सीडेज प्रतिक्रिया बंद हो जाती है। नियंत्रण के लिए, सकारात्मक और स्पष्ट रूप से नकारात्मक सीरा के साथ समान नमूनों का उपयोग किया जाता है। विश्लेषण के परिणाम एक फोटोमीटर का उपयोग करके दर्ज किए जाते हैं जो दोहरे-तरंग मोड (492 एनएम और 620 एनएम) में ऑप्टिकल घनत्व निर्धारित करता है। एक एंजाइम एंटीबॉडी प्रतिक्रिया स्थापित करने के लिए, एक फोटोमीटर के अलावा, आपको पॉलीप्रोपाइलीन टिप के साथ एक और आठ-चैनल स्वचालित पिपेट और नैदानिक ​​​​परीक्षण प्रणालियों के संबंधित सेट की आवश्यकता होती है। सिफलिस के सीरोलॉजिकल निदान में एलिसा विधि का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। यह ऊष्मायन अवधि (संक्रमण के 1-2 सप्ताह बाद), रोग की नैदानिक ​​​​अभिव्यक्तियों और इसके अव्यक्त रूपों के साथ रोग का पता लगाने के लिए समान रूप से प्रभावी है। बहुत बार, एलिसा का उपयोग जनसंख्या की स्क्रीनिंग परीक्षाओं में किया जाता है, विशेष रूप से रक्त आधान स्टेशनों पर। प्रयोगशाला अभ्यास में, प्रतिरक्षा आसंजन प्रतिक्रिया (आईएआर) और अप्रत्यक्ष हेमग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया (आईआरएचए) का भी कभी-कभी उपयोग किया जाता है। उनमें से पहला इस तथ्य पर आधारित है कि निकोल्स स्ट्रेन के रोगजनक वृषण ट्रेपोनेम्स, जब पूरक और मानव लाल रक्त कोशिकाओं की उपस्थिति में रोगी के सीरम के साथ मिश्रित होते हैं, तो लाल रक्त कोशिकाओं की सतह का पालन करते हैं। अपनी पद्धतिगत सरलता के कारण सिफलिस के निदान के लिए आरएनजीए का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। संक्रमण के तीन सप्ताह के भीतर यह पॉजिटिव हो जाता है। प्रतिक्रिया का सकारात्मक परिणाम ठीक होने के बाद भी वर्षों तक बना रहता है। विदेश में इस प्रतिक्रिया का एक एनालॉग टीआरएचए (ट्रेपोनेमा पैलिडम हेमोएग्लूटीनेशन) है।