सिफलिस एलिसा के लिए विश्लेषण - विश्लेषण की व्याख्या। मानदंड और विचलन

सेलुलर प्रौद्योगिकियों, आणविक जीव विज्ञान, आनुवंशिकी, भौतिकी, रसायन विज्ञान और कई अन्य उच्च-तकनीकी विषयों के विकास के संबंध में, नई उच्च-परिशुद्धता और उच्च-तकनीकी विधियों को रोजमर्रा के अभ्यास में पेश किया जा रहा है। ये अंतःविषय रुझान चिकित्सा ज्ञान के क्षेत्र और जैविक और जैव रासायनिक समस्याओं के संबंधित क्षेत्रों दोनों को प्रभावित करते हैं। पिछले दस वर्षों में, एंजाइम इम्यूनोएसे नामक एक नैदानिक ​​​​प्रयोगशाला निदान पद्धति व्यापक हो गई है और बड़े पैमाने पर अभ्यास में पेश की गई है।

सामान्य तौर पर, 20वीं सदी के शुरुआती 80 के दशक से प्रतिरक्षाविज्ञानी एंजाइमैटिक और रेडियोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं की प्रौद्योगिकियों का व्यापक रूप से टाइपिंग कोशिकाओं, सेल संस्कृतियों और विभिन्न ऊतकों में उपयोग किया गया है। हालाँकि, ये विधियाँ बहुत श्रम-गहन थीं, एकीकृत नहीं थीं, मानकीकृत नहीं थीं, जिससे बड़े पैमाने पर निदान और उपचार उद्देश्यों के लिए उनका उपयोग बाधित हो गया। ऐसी विधियों का उपयोग केवल संकीर्ण, ज्ञान-गहन और अत्यधिक विशिष्ट प्रयोगशालाओं द्वारा किया जाता था।

हालाँकि, प्रौद्योगिकी, सूक्ष्म प्रौद्योगिकी के विकास और विभिन्न बायोपॉलिमर सामग्रियों के उत्पादन के साथ, तैयार एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट डायग्नोस्टिक किट का उत्पादन करना संभव हो गया है जिसका उपयोग सामान्य चिकित्सा संस्थानों की प्रयोगशालाओं द्वारा किया जा सकता है। एलिसा का उपयोग व्यापक रूप से सभी प्रकार के संक्रमणों (क्लैमाइडिया, सिफलिस, साइटोमेगालोवायरस, टॉक्सोप्लाज्मोसिस, हर्पीस इत्यादि) के निदान के लिए किया जाता है, दोनों तीव्र और जीर्ण, साथ ही अव्यक्त रूप जो नैदानिक ​​लक्षणों के बिना होते हैं। इस पद्धति का उपयोग पुरानी बीमारियों को नियंत्रित करने के लिए भी किया जाता है। . आइए यह जानने का प्रयास करें कि यह किस प्रकार की विधि है और इसके अंतर्गत कौन से सिद्धांत हैं?

एंजाइम इम्यूनोएसे के घटक - प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया और एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया

जैसा कि नाम से पता चलता है, एंजाइम इम्यूनोएसे में दो अलग-अलग घटक होते हैं - एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया और एक एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया। प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया जैविक अणुओं, कोशिका या सूक्ष्मजीव के तत्वों का बंधन पैदा करती है, जिसका वे वास्तव में पता लगाने की कोशिश कर रहे हैं, और एंजाइम प्रतिक्रिया आपको प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रिया के परिणाम को देखने और मापने की अनुमति देती है। यानी, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया एक जटिल तकनीक का हिस्सा है जो वास्तव में वांछित सूक्ष्म जीव का पता लगाती है। और एंजाइम प्रतिक्रिया एक जटिल तकनीक का वह हिस्सा है जो आपको प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के परिणाम को आंखों के लिए दृश्यमान और नियमित रासायनिक तकनीकों का उपयोग करके माप के लिए सुलभ रूप में परिवर्तित करने की अनुमति देती है। एंजाइम इम्यूनोएसे विधि की इस संरचना के आधार पर हम इसके दोनों भागों का अलग-अलग विश्लेषण करेंगे।

प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया, यह क्या है? एंटीबॉडी या एंटीजन क्या है?

प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया क्या है? एंटीजन क्या है?
सबसे पहले, आइए देखें कि प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएँ क्या हैं। प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएं- ये एक प्रतिरक्षा परिसर के गठन के साथ एक एंटीजन को एक एंटीबॉडी से जोड़ने की विशिष्ट प्रतिक्रियाएं हैं। इसका मतलब क्या है? किसी भी जीव की प्रत्येक कोशिका की सतह पर विशेष संरचनाएँ होती हैं जिन्हें कहा जाता है एंटीजन. सामान्यतः एंटीजन ऐसे अणु होते हैं जो किसी कोशिका के बारे में जानकारी रखते हैं (किसी व्यक्ति के बैज पर जानकारी के समान, जो उस व्यक्ति के मूल डेटा को इंगित करता है)।

व्यक्तिगत और प्रजाति प्रतिजन - वे क्या हैं? इन एंटीजन की आवश्यकता क्यों है?

उपलब्ध व्यक्तिगत प्रतिजन, अर्थात्, केवल इस विशेष जीव में निहित है। ये व्यक्तिगत एंटीजन सभी लोगों के लिए अलग-अलग होते हैं; कुछ ऐसे भी होते हैं जो एक-दूसरे के समान होते हैं, लेकिन फिर भी भिन्न होते हैं। प्रकृति में अलग-अलग एंटीजन की दो समान प्रतियां नहीं हैं!

एंटीजन का दूसरा मुख्य प्रकार है प्रजाति प्रतिजन, अर्थात किसी विशिष्ट प्रकार के जीवित प्राणियों में निहित। उदाहरण के लिए, मनुष्यों के पास अपनी प्रजाति का एंटीजन होता है, जो सभी लोगों में समान होता है, चूहों के पास अपनी माउस प्रजाति का एंटीजन होता है, आदि। प्रत्येक कोशिका की सतह पर एक विशिष्ट और व्यक्तिगत एंटीजन आवश्यक रूप से मौजूद होता है।

प्रजाति एंटीजन का उपयोग प्रतिरक्षा प्रणाली की कोशिकाओं द्वारा "दोस्त या दुश्मन" को पहचानने के लिए किया जाता है।

एंटीजन पहचान कैसे होती है?

प्रतिरक्षा कोशिका संदिग्ध कोशिका से संपर्क करती है और व्यक्तिगत एंटीजन के आधार पर पहचान करती है। प्रतिरक्षा कोशिका की स्मृति में, यह "रिकॉर्ड" किया जाता है कि "उसका एंटीजन" कैसा दिखता है। इस प्रकार, यदि किसी संदिग्ध कोशिका का एंटीजन "स्वयं एंटीजन" विवरण से मेल खाता है, तो शरीर की अपनी यह कोशिका कोई खतरा पैदा नहीं करती है। फिर प्रतिरक्षा कोशिका "खुल जाती है" और चली जाती है। और यदि एंटीजन "स्वयं" के विवरण से मेल नहीं खाता है, तो प्रतिरक्षा कोशिका इस कोशिका को "विदेशी" के रूप में पहचानती है और इसलिए संभवतः पूरे जीव के लिए खतरनाक है। इस मामले में, प्रतिरक्षा कोशिका "ढीली" नहीं होती, बल्कि खतरनाक वस्तु को नष्ट करना शुरू कर देती है। ऐसी प्रतिरक्षाविज्ञानी पहचान की सटीकता अद्भुत है - 99.97%। व्यावहारिक रूप से कोई ग़लतियाँ नहीं हैं!

एंटीबॉडी, प्रतिरक्षा कॉम्प्लेक्स क्या है?
एंटीबॉडी क्या है?

एंटीबॉडी एक विशेष अणु है जो प्रतिरक्षा कोशिका की सतह पर स्थित होता है। यह एंटीबॉडी है जो संदिग्ध कोशिका के एंटीजन से जुड़ती है। इसके बाद, एंटीबॉडी कोशिका के अंदर सूचना प्रसारित करता है, जहां पहचान होती है, और दो प्रकार के रिटर्न सिग्नल प्राप्त करता है, "स्वयं" या "विदेशी।" "स्वयं" संकेत प्राप्त होने पर, एंटीबॉडी एंटीजन के साथ बंधन को तोड़ देती है और कोशिका को छोड़ देती है।

इम्यून कॉम्प्लेक्स क्या है?
जब सिग्नल "अजनबी" होता है, तो स्थिति अलग तरह से सामने आती है। एंटीबॉडी एंटीजन के साथ संबंध नहीं तोड़ती है, बल्कि, इसके विपरीत, विशिष्ट संकेत भेजकर "सुदृढीकरण" का कारण बनती है। जैविक रूप से, इसका मतलब है कि कोशिका के दूसरे भाग में स्थित अन्य एंटीबॉडी उस स्थान पर जाना शुरू कर देते हैं जहां से खतरे का संकेत आ रहा है और वे अपने और पकड़े गए एंटीजन के बीच एक बंधन भी बनाते हैं। अंत में, एंटीजन चारों ओर से घिरा हुआ और मजबूती से जुड़ा हुआ हो जाता है। इस एंटीजन + एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स को कहा जाता है प्रतिरक्षा जटिल. इसी क्षण से, एंटीजन का उपयोग शुरू हो जाता है। लेकिन अब हमें एंटीजन न्यूट्रलाइजेशन प्रक्रिया के विवरण में कोई दिलचस्पी नहीं है।

एंटीबॉडी के प्रकार (आईजी ऐ, आईजीएम, आईजीजी, आईजी डी, मैं जीई)
एंटीबॉडीज़ प्रोटीन संरचनाएं हैं, जिनका तदनुसार एक रासायनिक नाम होता है, जिसका उपयोग एंटीबॉडी शब्द के पर्याय के रूप में किया जाता है। इसलिए, एंटीबॉडीज़ = इम्युनोग्लोबुलिन.

इम्युनोग्लोबुलिन (आईजी) 5 प्रकार के होते हैं, जो मानव शरीर के विभिन्न स्थानों में विभिन्न प्रकार के एंटीजन से बंधते हैं (उदाहरण के लिए, त्वचा पर, श्लेष्म झिल्ली पर, रक्त में, आदि)। यानी एंटीबॉडी में श्रम का विभाजन होता है। इन इम्युनोग्लोबुलिन को लैटिन वर्णमाला के अक्षरों - ए, एम, जी, डी, ई द्वारा बुलाया जाता है और इन्हें इस प्रकार नामित किया जाता है - आईजीए, आईजीएम, आईजीजी, आईजीडी, आईजीई।

निदान में, केवल एक प्रकार के एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है, जो पता लगाए जाने वाले सूक्ष्म जीव के लिए सबसे विशिष्ट है। अर्थात्, इस प्रकार के एंटीबॉडी का पता लगाए गए एंटीजन से बंधन हमेशा होता रहता है। आईजीजी और आईजीएम का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है।

यह प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का सिद्धांत है (जैविक वस्तु की पहचान की अद्वितीय सटीकता और विशिष्टता निर्धारित की जाती है) जो एंजाइम इम्यूनोएसे को रेखांकित करती है। एंटीजन को पहचानने में एंटीबॉडी की उच्च सटीकता के कारण, संपूर्ण एंजाइम इम्यूनोएसे विधि की सटीकता भी है उच्चतम।

एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया

कौन सी प्रतिक्रिया एंजाइमेटिक है? किसी प्रतिक्रिया की एफ़िनिटी, सब्सट्रेट और उत्पाद क्या हैं?
आइए एंजाइम इम्यूनोएसे विधि के कार्य में एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया पर विचार करें।

एन्जाइमी प्रतिक्रिया क्या है?

एंजाइमैटिक प्रतिक्रिया एक रासायनिक प्रतिक्रिया है जिसमें एक एंजाइम की क्रिया द्वारा एक पदार्थ दूसरे में परिवर्तित हो जाता है। वह पदार्थ जिस पर एन्जाइम कार्य करता है, कहलाता है सब्सट्रेट. तथा वह पदार्थ जो किसी एन्जाइम की क्रिया के फलस्वरूप प्राप्त होता है, कहलाता है प्रतिक्रिया उत्पाद. इसके अलावा, एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया की ख़ासियत ऐसी है कि एक निश्चित एंजाइम केवल एक निश्चित सब्सट्रेट पर कार्य करता है। किसी एंजाइम के "अपने" सब्सट्रेट को पहचानने के इस गुण को कहा जाता है आत्मीयता.

इस प्रकार, प्रत्येक एंजाइम अपने लिए केवल एक विशिष्ट प्रतिक्रिया करता है। जैविक दुनिया में बड़ी संख्या में ज्ञात एंजाइम हैं, साथ ही एंजाइमेटिक प्रतिक्रियाएं भी हैं। एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट डायग्नोस्टिक्स में, केवल कुछ एंजाइमेटिक प्रतिक्रियाओं का उपयोग किया जाता है - 10 से अधिक नहीं। उसी समय, ऐसी एंजाइमेटिक प्रतिक्रियाओं को चुना गया, जिसका उत्पाद रंगीन पदार्थ हैं। एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया के उत्पादों को रंगीन क्यों होना चाहिए? क्योंकि किसी रंगीन घोल से किसी पदार्थ की सांद्रता की गणना करने के लिए एक सरल रासायनिक विधि है - वर्णमिति.

वर्णमिति विधि - सार और सिद्धांत

वर्णमितिसमाधान के रंग घनत्व के माप का उपयोग करता है, और पदार्थ की एकाग्रता की गणना रंग घनत्व से की जाती है। इस मामले में, एक विशेष उपकरण - एक वर्णमापी समाधान के रंग घनत्व को मापता है। वर्णमिति में, किसी पदार्थ की सांद्रता पर रंग घनत्व की निर्भरता के लिए दो संभावित विकल्प हैं - सीधे आनुपातिक निर्भरता या व्युत्क्रम आनुपातिक निर्भरता। सीधे आनुपातिक संबंध के साथ, पदार्थ की सांद्रता जितनी अधिक होगी, घोल का रंग घनत्व उतना ही अधिक तीव्र होगा। व्युत्क्रमानुपाती संबंध के साथ, पदार्थ की सांद्रता जितनी अधिक होगी, घोल का रंग घनत्व उतना ही कम होगा। तकनीकी रूप से, यह इस प्रकार होता है: किसी पदार्थ की ज्ञात सांद्रता वाले कई समाधान लिए जाते हैं, इन समाधानों का घनत्व मापा जाता है, और रंग घनत्व पर एकाग्रता की निर्भरता का एक ग्राफ बनाया जाता है ( अंशांकन चार्ट).

इसके बाद, समाधान का रंग घनत्व, जिसकी एकाग्रता निर्धारित की जाती है, मापा जाता है, और अंशांकन ग्राफ से, समाधान के मापा रंग घनत्व के स्तर के अनुरूप एकाग्रता मान पाया जाता है। आधुनिक स्वचालित वर्णमापी में, अंशांकन होता है केवल एक बार किया जाता है, फिर डिवाइस स्वयं एक अंशांकन वक्र बनाता है, जो डिवाइस की मेमोरी में रहता है, और माप स्वचालित रूप से होता है।

एंजाइम इम्यूनोएसे में निम्नलिखित एंजाइमों का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है: पेरोक्सीडेज, क्षारीय फॉस्फेट, एविडिन।

एंजाइम इम्यूनोएसे में प्रतिरक्षाविज्ञानी और एंजाइमैटिक प्रतिक्रियाएं कैसे संयुक्त होती हैं? अब हम एंजाइम इम्यूनोएसे पर ही विचार करने के लिए आगे बढ़ेंगे। इसमें कौन से चरण शामिल हैं और इन प्रतिक्रियाओं के दौरान क्या होता है? एंजाइम इम्यूनोएसे किया जा सकता है प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष.

प्रत्यक्ष एंजाइम इम्यूनोपरख - कार्यान्वयन के चरण

प्रत्यक्ष एंजाइम इम्यूनोपरख में, पता लगाए गए एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है, जिसे एक विशिष्ट लेबल के साथ जोड़ा जाता है। यह विशिष्ट लेबल एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया का सब्सट्रेट है।

कुएं की सतह पर एंटीजन का जुड़ाव और एंटीबॉडी के साथ एंटीजन का संयोजन

प्रत्यक्ष एंजाइम इम्यूनोपरख कैसे की जाती है? जैविक सामग्री ली जाती है (रक्त, श्लेष्म झिल्ली से स्क्रैपिंग, स्मीयर) और विशेष छिद्रों में रखा जाता है। जैविक सामग्री को 15-30 मिनट के लिए कुओं में छोड़ दिया जाता है ताकि एंटीजन कुओं की सतह पर चिपक सकें। इसके बाद, पता लगाए गए एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी को इन कुओं में जोड़ा जाता है। इसका मतलब यह है कि जब एंटीजन का पता लगाया जाता है, उदाहरण के लिए, सिफलिस, सिफलिस एंटीजन के खिलाफ एंटीबॉडी जोड़े जाते हैं। ये एंटीबॉडी औद्योगिक रूप से प्राप्त की जाती हैं, और प्रयोगशालाएं तैयार किट खरीदती हैं। परीक्षण सामग्री और एंटीबॉडी के इस मिश्रण को कुछ समय (30 मिनट से 4-5 घंटे तक) के लिए छोड़ दिया जाता है ताकि एंटीबॉडी "अपने" एंटीजन को ढूंढ सकें और उनसे संपर्क कर सकें। जैविक नमूने में जितने अधिक एंटीजन होंगे, उतनी ही अधिक एंटीबॉडी उनसे जुड़ेंगी।

"अतिरिक्त" एंटीबॉडी को हटाना

जैसा कि संकेत दिया गया है, एंटीबॉडीज़ भी एक विशिष्ट लेबल से जुड़े होते हैं। चूंकि एंटीबॉडीज़ को अधिक मात्रा में जोड़ा जाता है, इसलिए उनमें से सभी एंटीजन से नहीं बंधेंगे, और यदि नमूने में कोई एंटीजन नहीं है, तो तदनुसार, एक भी एंटीबॉडी एंटीजन से नहीं बंधेगा। वांछित प्रतिजन. "अतिरिक्त" एंटीबॉडी को हटाने के लिए, कुओं से सामग्री को आसानी से बाहर निकाल दिया जाता है। इसके परिणामस्वरूप, सभी "अतिरिक्त" एंटीबॉडी हटा दिए जाते हैं, और जो एंटीजन से बंधे होते हैं वे बने रहते हैं, क्योंकि एंटीजन कुओं की सतह पर "चिपके" होते हैं। कुओं को एक विशेष समाधान के साथ कई बार धोया जाता है, जो आपको सभी "अतिरिक्त" एंटीबॉडी को धोने की अनुमति देता है।

इसके बाद, दूसरा चरण शुरू होता है - एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया। धुले हुए कुओं में एंजाइम वाला घोल डाला जाता है और 30-60 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है। इस एंजाइम में उस पदार्थ (विशिष्ट लेबल) के प्रति आकर्षण होता है जिससे एंटीबॉडी बंधे होते हैं। एंजाइम एक प्रतिक्रिया करता है जो इस विशिष्ट चिह्न (सब्सट्रेट) को एक रंगीन पदार्थ (उत्पाद) में परिवर्तित करता है। फिर वर्णमिति का उपयोग करके इस रंगीन पदार्थ की सांद्रता ज्ञात की जाती है। चूंकि यह विशिष्ट लेबल एंटीबॉडी से जुड़ा है, इसका मतलब है कि रंगीन प्रतिक्रिया उत्पाद की एकाग्रता एंटीबॉडी की एकाग्रता के बराबर है। और एंटीबॉडी की सांद्रता एंटीजन की सांद्रता के बराबर होती है। इस प्रकार, विश्लेषण के परिणामस्वरूप, हमें पता लगाए गए सूक्ष्म जीव या हार्मोन की एकाग्रता के बारे में उत्तर प्राप्त होता है।

प्रत्यक्ष एंजाइम इम्यूनोएसे ठीक इसी प्रकार काम करता है। हालाँकि, आज अप्रत्यक्ष एंजाइम इम्यूनोएसे का अधिक उपयोग किया जाता है, क्योंकि अप्रत्यक्ष की संवेदनशीलता और सटीकता प्रत्यक्ष की तुलना में अधिक है। तो, चलिए अप्रत्यक्ष एंजाइम इम्यूनोएसे की ओर बढ़ते हैं।

अप्रत्यक्ष एंजाइम इम्यूनोपरख - कार्यान्वयन के चरण

अप्रत्यक्ष एंजाइम इम्यूनोपरख में दो चरण होते हैं। पहले चरण के दौरान, पहचाने गए एंटीजन के लिए बिना लेबल वाले एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है, और दूसरे चरण में, पहले बिना लेबल वाले एंटीबॉडी के लिए लेबल वाले एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है। अर्थात्, यह किसी एंटीबॉडी का किसी एंटीजन से सीधा बंधन नहीं है, बल्कि दोहरा नियंत्रण है: एंटीबॉडी का एक एंटीजन से बंधन, उसके बाद दूसरे एंटीबॉडी का एंटीबॉडी + एंटीजन कॉम्प्लेक्स से बंधन। एक नियम के रूप में, पहले चरण के लिए एंटीबॉडी चूहे हैं, और दूसरे के लिए - बकरी।

कुएं की सतह पर एंटीजन का स्थिरीकरण और एंटीजन को बिना लेबल वाले एंटीबॉडी से बांधना
सीधे एंजाइम इम्यूनोएसे की तरह, जैविक सामग्री एकत्र की जाती है - रक्त, स्क्रैपिंग, स्मीयर। अध्ययन के तहत जैविक सामग्री को कुओं में पेश किया जाता है और एंटीजन को कुओं की सतह पर चिपकने के लिए 15-30 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है। फिर एंटीजन में बिना लेबल वाले एंटीबॉडी को कुओं में जोड़ा जाता है और कुछ समय (1-5 घंटे) के लिए छोड़ दिया जाता है ताकि एंटीबॉडी "अपने" एंटीजन से बंध जाएं और एक प्रतिरक्षा कॉम्प्लेक्स बनाएं ( पहला कदम). उसके बाद, कुओं की सामग्री को बाहर निकालकर "अतिरिक्त" अनबाउंड एंटीबॉडी को हटा दिया जाता है। सभी अनबाउंड एंटीबॉडीज को पूरी तरह हटाने के लिए एक विशेष घोल से धोएं।

लेबल किए गए एंटीबॉडी को एंटीजन + अनलेबल एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स से बांधना
जिसके बाद वे दूसरे लेबल वाले एंटीबॉडी लेते हैं, उन्हें कुओं में डालते हैं और फिर से थोड़ी देर के लिए छोड़ देते हैं - 15-30 मिनट ( दूसरा चरण). इस समय के दौरान, लेबल किए गए एंटीबॉडी पहले - बिना लेबल वाले - से जुड़ते हैं और एक जटिल - एंटीबॉडी + एंटीबॉडी + एंटीजन बनाते हैं। हालाँकि, लेबल किए गए और बिना लेबल वाले दोनों एंटीबॉडी कुओं में अधिक मात्रा में जोड़े जाते हैं। इसलिए, पहले से लेबल किए गए "अतिरिक्त" एंटीबॉडी को फिर से हटाना आवश्यक है जो गैर-लेबल वाले एंटीबॉडी से बंधे नहीं हैं। ऐसा करने के लिए, कुओं की सामग्री को बाहर निकालने और एक विशेष समाधान से धोने की प्रक्रिया को दोहराएं।

एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया - एक रंगीन यौगिक का निर्माण
उसके बाद, एक एंजाइम जोड़ा जाता है जो "लेबल" को रंगीन पदार्थ में परिवर्तित करने की प्रतिक्रिया करता है। रंग 5-30 मिनट के भीतर विकसित हो जाता है। फिर वर्णमिति की जाती है और रंगीन पदार्थ की सांद्रता की गणना की जाती है। चूँकि रंगीन पदार्थ की सांद्रता लेबल वाले एंटीबॉडी की सांद्रता के बराबर होती है, और लेबल किए गए एंटीबॉडी की सांद्रता बिना लेबल वाले एंटीबॉडी की सांद्रता के बराबर होती है, जो बदले में एंटीजन की सांद्रता के बराबर होती है। इस प्रकार, हम ज्ञात एंटीजन की सांद्रता प्राप्त करते हैं।
दो प्रकार के एंटीबॉडी के उपयोग के रूप में इस दोहरे नियंत्रण ने एंजाइम इम्यूनोएसे विधि की संवेदनशीलता और विशिष्टता को बढ़ाना संभव बना दिया। विश्लेषण के समय को लंबा करने और अतिरिक्त चरणों को शामिल करने के बावजूद, इन नुकसानों की भरपाई परिणाम की सटीकता से की जाती है। यही कारण है कि वर्तमान में अधिकांश एंजाइम इम्यूनोपरख विधियां अप्रत्यक्ष एंजाइम इम्यूनोपरख हैं।

एंजाइम इम्यूनोएसे द्वारा किन रोगों का पता लगाया जाता है?

आइए इस बात पर विचार करें कि एंजाइम इम्यूनोएसे द्वारा किन बीमारियों और कौन से जैविक रूप से सक्रिय पदार्थों का पता लगाया जाता है। एंजाइम इम्यूनोएसे द्वारा पता लगाए गए पदार्थ तालिका में प्रस्तुत किए गए हैं।

थायराइड रोग के हार्मोन और मार्कर	थायराइड पेरोक्सीडेज (टीपीओ)
	थायरोग्लोबुलिन (टीजी)
	थायराइड-उत्तेजक हार्मोन (टीएसएच)
	थायरोक्सिन (T4)
	ट्राईआयोडोथायरोनिन (T3)
	मुफ़्त थायरोक्सिन (T4)
	मुफ़्त ट्राईआयोडोथायरोनिन (T3)
प्रजनन क्रिया का निदान	ल्यूटिनाइजिंग हार्मोन (एलएच)
	कूप उत्तेजक हार्मोन (FSH)
	प्रोलैक्टिन
	प्रोजेस्टेरोन
	एस्ट्राडियोल
	टेस्टोस्टेरोन
	कोर्टिसोल
	स्टेरॉयड बाइंडिंग ग्लोब्युलिन (एसबीजी)
	अल्फाफेटोप्रोटीन (एएफपी)
ट्यूमर मार्कर्स	कोरियोनिक गोनाडोट्रोपिन (सीजी)
	प्रोस्टेट-विशिष्ट एंटीजन (पीएसए)
	एसए - 125
	एसए - 19.9
	साइफ्रा-21-1
	एम - 12 (एसए - 15.3)
	एमयूसी - 1 (एम - 22)
	MUC1 (एम - 20)
	एल्वोमुसिन
	के - श्रृंखला
	एल - श्रृंखला
	ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर (TNFα)
	γ - इंटरफेरॉन
	कार्सिनोएम्ब्रायोनिक एंटीजन (सीईए)
संक्रामक रोगों का निदान

एलिसा एक आधुनिक प्रयोगशाला परीक्षण है जो विशिष्ट बीमारियों के लिए रक्त में विशिष्ट एंटीबॉडी (या एंटीजन) की खोज करता है ताकि न केवल एटियोलॉजी, बल्कि बीमारी के चरण की भी पहचान की जा सके।

1. किसी भी संक्रामक रोग के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी की खोज करना;
2. किसी भी संक्रामक रोग के प्रतिजनों की खोज;
3. रोगी की हार्मोनल स्थिति का अध्ययन;
4. ऑटोइम्यून बीमारियों की उपस्थिति के लिए स्क्रीनिंग।

प्रयोगशाला निदान की किसी भी विधि की तरह, एलिसा के भी अपने फायदे और नुकसान हैं। विधि के फायदों में शामिल हैं:

1. विधि की उच्च विशिष्टता और संवेदनशीलता (90% से अधिक);
2. रोग का निर्धारण करने और प्रक्रिया की गतिशीलता को ट्रैक करने की क्षमता, यानी विभिन्न समय अवधि में एंटीबॉडी की संख्या की तुलना करना;
3. इस शोध की पहुंच और गति;
4. सामग्री एकत्र करने की गैर-आक्रामक विधि, अनुसंधान नहीं;

विधि का नुकसान यह तथ्य है कि विश्लेषण के दौरान रोग के प्रेरक एजेंट की पहचान करना संभव नहीं है, बल्कि केवल इसके प्रति प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया (एंटीबॉडी) की पहचान करना संभव है।

एलिसा विधि का सार

एलिसा के कई प्रकार हैं: प्रत्यक्ष, अप्रत्यक्ष, अवरुद्ध विधि, प्रतिस्पर्धी। हालाँकि, व्यवहार में, विषम एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख, या एलिसा, का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है।

एंजाइम इम्यूनोएसे का आधार एक प्रतिरक्षा परिसर के गठन के साथ एक एंटीजन और एक एंटीबॉडी की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया है, जिसके परिणामस्वरूप एंटीबॉडी की सतह पर विशिष्ट निशानों की एंजाइमेटिक गतिविधि में बदलाव होता है।

मूलतः, इस प्रक्रिया को कई चरणों में विभाजित किया जा सकता है:

1. परीक्षण प्रणाली टैबलेट के कुओं की सतह पर एक विशिष्ट रोगज़नक़ का शुद्ध एंटीजन होता है। जब पशु रक्त सीरम मिलाया जाता है, तो इस एंटीजन और वांछित एंटीबॉडी के बीच एक विशिष्ट प्रतिक्रिया होती है;
2. इसके बाद, एक विशेष क्रोमोजेन (पेरोक्सीडेज के साथ लेबल किया गया संयुग्म) कुएं में जोड़ा जाता है। एक एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया होती है, जिसके परिणामस्वरूप प्लेट के कुएं में एक रंगीन पदार्थ बनता है। इसके रंग की तीव्रता पशु के सीरम में निहित इम्युनोग्लोबुलिन (एंटीबॉडी) की मात्रा पर निर्भर करती है;
3. फिर परिणाम का मूल्यांकन किया जाता है. मल्टीचैनल स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करके, परीक्षण सामग्री के ऑप्टिकल घनत्व की तुलना नियंत्रण नमूनों के ऑप्टिकल घनत्व से की जाती है और परिणामों को गणितीय रूप से संसाधित किया जाता है। किसी मरीज में एंटीबॉडी की मात्रा सीधे तौर पर दिए गए कुएं के ऑप्टिकल घनत्व की ऊंचाई पर निर्भर करती है।

यह याद रखना चाहिए: प्रत्येक परीक्षण प्रणाली के लिए, परिणामों को रिकॉर्ड करने के लिए व्यक्तिगत संकेतक विकसित किए जाते हैं, सामान्यता और विकृति विज्ञान के संकेतक ("संदर्भ मान")। प्रत्येक विशिष्ट अध्ययन के परिणामों का मूल्यांकन करते समय इसे ध्यान में रखा जाना चाहिए।

किसी अन्य प्रयोगशाला के "संदर्भ मूल्यों" के आधार पर एक प्रयोगशाला के परिणामों की व्याख्या करना गलत है। विभिन्न प्रयोगशालाओं के नतीजों की एक-दूसरे से तुलना करना भी गलत है।

विशिष्ट संक्रमणों के परिणामों का आकलन करते समय, पाए गए एंटीबॉडी के वर्ग और उनकी मात्रा महत्वपूर्ण होती है। न केवल संक्रमण के एटियलजि का सवाल इस पर निर्भर करता है, बल्कि बीमारी की अपेक्षित अवस्था (तीव्र, पुरानी), साथ ही परीक्षा के समय एक सक्रिय संक्रमण (तीव्र या पुरानी की तीव्रता) की उपस्थिति भी इस पर निर्भर करती है।

एंटीबॉडीज़ के प्रकट होने की अनुमानित समय सीमा क्या है?

सबसे प्रारंभिक एंटीबॉडी IgM हैं। संभावित संक्रमण के 1-3 सप्ताह बाद उनका पता लगाया जा सकता है, जो संक्रामक प्रक्रिया के तीव्र चरण की विशेषता है। आईजीएम एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए दूसरी स्थिति एक पुरानी प्रक्रिया का तेज होना है। आईजीएम औसतन लगभग 3 महीने तक प्रसारित होता है, फिर उनकी मात्रा धीरे-धीरे गायब हो जाती है। हालाँकि, कुछ रोगियों में, संक्रमण के 1-2 साल के भीतर आईजीएम की थोड़ी मात्रा का पता लगाया जा सकता है।

संक्रमण के चौथे सप्ताह से, आईजीजी एंटीबॉडी दिखाई देने लगती हैं। अधिकांश संक्रमणों में, उनका अनुमापांक धीरे-धीरे अलग-अलग समय पर अधिकतम (औसतन 1.5-2 महीने के बाद) बढ़ता है, फिर अनुमापांक निम्न स्तर पर रहता है और प्रतिरक्षा को इंगित करता है। कुछ बीमारियों में आईजीजी का स्तर ऊंचा नहीं होता है।

एंटीबॉडी का पता लगाने के विकल्प

• आईजीएम एंटीबॉडी का पृथक पता लगाना प्राथमिक संक्रमण की उपस्थिति का सुझाव देता है।
• रक्त में आईजीएम और आईजीजी का एक साथ पता लगाना पिछले 2-3 महीनों में प्राथमिक संक्रमण के साथ-साथ किसी पुरानी बीमारी के बढ़ने के दौरान विशिष्ट है।
• पृथक आईजीजी का पता लगाने से रोग प्रतिरोधक क्षमता और दीर्घकालिक संक्रमण दोनों का संकेत मिल सकता है। दूसरी स्थिति में, एंटीबॉडी (टिटर) की मात्रा और समय के साथ इस टिटर में परिवर्तन दोनों महत्वपूर्ण हैं। आमतौर पर, अध्ययन 2-4-6 सप्ताह के अंतराल पर किए जाते हैं।

एलिसा विश्लेषण बड़ी संख्या में विभिन्न रोगों के लिए एक आधुनिक प्रयोगशाला निदान तकनीक है। संक्षिप्त नाम एंजाइम इम्यूनोएसे के लिए है। तकनीक का सार एंटीबॉडी के टिटर (गतिविधि) को निर्धारित करना है।

एलिसा तकनीक वर्तमान में काफी लोकप्रियता हासिल कर रही है। इसका उपयोग नैदानिक ​​चिकित्सा में विभिन्न विकृति के निदान के लिए किया जाता है, साथ ही प्रयोगात्मक अध्ययनों में भी किया जाता है जिनके लिए अध्ययन किए गए मीडिया में विभिन्न यौगिकों की एकाग्रता के सटीक निर्धारण की आवश्यकता होती है।

एलिसा विधि का सिद्धांत

एंजाइम इम्यूनोएसे एक प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रिया है। यह विशिष्ट एंटीबॉडीज़ को जोड़ने पर आधारित है
या परीक्षण माध्यम में एंटीजन (अक्सर रक्त का परीक्षण किया जा रहा है), इसके बाद परिणामी एंटीजन-एंटीबॉडी परिसरों की एकाग्रता का एंजाइमेटिक निर्धारण होता है। कॉम्प्लेक्स की सांद्रता के आधार पर, कोई भी परीक्षण माध्यम में निर्धारित किए जा रहे यौगिक के स्तर या गतिविधि का न्याय कर सकता है।

एंटीजन-एंटीबॉडी परिसरों की एकाग्रता का निर्धारण आमतौर पर क्रोमैटोग्राफिक विधि का उपयोग करके विशेष उपकरणों का उपयोग करके किया जाता है।

उपयोग के संकेत

एलिसा विश्लेषण विभिन्न संकेतों के लिए किया जाता है, जिनमें नैदानिक ​​चिकित्सा में मुख्य हैं:

• मुख्य रूप से यौन संचरण (एसटीआई) के साथ संक्रामक विकृति का निदान, जिसमें संक्रामक एजेंट के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी की पहचान करते हुए क्लैमाइडिया, माइकोप्लाज्मोसिस, यूरियाप्लाज्मोसिस, ट्राइकोमोनिएसिस शामिल हैं।
• रोग प्रक्रिया के चरण को निर्धारित करने के लिए विभिन्न स्थानीयकरण के संक्रामक रोगों का निदान, मुख्य रूप से पैरेंट्रल वायरल हेपेटाइटिस और एचआईवी के निदान की प्रक्रिया में।
• अंतःस्रावी तंत्र के अंगों (अंतःस्रावी ग्रंथियों) के विभिन्न विकृति के निदान के लिए हार्मोन सांद्रता का निर्धारण।
• जहर, कीड़े या साँप के काटने के मामले में शरीर के नशे के कारण का निदान करने के लिए विभिन्न यौगिकों का निर्धारण।

इन चिकित्सीय संकेतों के लिए, एलिसा रक्त परीक्षण किया जाता है। इम्यूनोप्रोफिलैक्सिस के लिए नई दवाओं और टीकों के विकास के दौरान विभिन्न नैदानिक ​​​​अध्ययनों के दौरान प्रायोगिक चिकित्सा में भी इस तकनीक का सक्रिय रूप से उपयोग किया जाता है।

शोध कैसे किया जाता है

एलिसा का उपयोग करके रक्त परीक्षण एक विशेष प्रयोगशाला में किया जाता है। इसे करने के लिए, सबसे पहले शिरापरक रक्त लिया जाता है, आमतौर पर क्यूबिटल नस से 5-10 मिलीलीटर की मात्रा में, जिसे बाद में प्रयोगशाला में भेजा जाता है। औसतन, परीक्षण का परिणाम अगले ही दिन प्राप्त किया जा सकता है, जो रोग के निदान के बाद तुरंत उपचार निर्धारित करने के लिए एक महत्वपूर्ण बिंदु है।

एलिसा की तैयारी कैसे करें?

एंजाइम इम्यूनोएसे का उपयोग करके विश्वसनीय शोध परिणाम प्राप्त करने के लिए, आपको कई सरल प्रारंभिक अनुशंसाओं का पालन करना चाहिए, जिनमें शामिल हैं:

• परीक्षण से एक दिन पहले, आपको वसायुक्त भोजन (मांस, स्मोक्ड मीट) और शराब खाना बंद कर देना चाहिए।
• अध्ययन के लिए सामग्री सुबह खाली पेट जमा करनी होगी।
• अध्ययन के दिन शारीरिक और मानसिक-भावनात्मक तनाव से बचने की सलाह दी जाती है।
• अध्ययन से पहले आपको धूम्रपान न करने का प्रयास करना चाहिए।

एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परीक्षण के अधिकांश गलत-सकारात्मक परिणाम प्रारंभिक सिफारिशों के अनुचित कार्यान्वयन के कारण होते हैं। यह ज्यादातर मामलों में वसायुक्त भोजन खाने से जुड़ा होता है, जिससे रक्त प्लाज्मा में ट्राइग्लिसराइड्स (वसा) की सांद्रता में वृद्धि होती है, जो एलिसा की विशिष्टता को कम करती है।

परिणामों को डिकोड करना

एलिसा का उपयोग करके एंटीबॉडी के लिए रक्त परीक्षण में 2 संशोधन होते हैं - गुणात्मक और मात्रात्मक निर्धारण। पर
एंटीबॉडी के गुणात्मक निर्धारण में, परिणाम सकारात्मक हो सकता है (एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है, जो एक संक्रामक एजेंट के कारण होने वाली रोग प्रक्रिया की संभावित उपस्थिति का संकेत देता है) या नकारात्मक (कोई एंटीबॉडी नहीं है, जो एक संक्रामक प्रक्रिया की अनुपस्थिति का संकेत देता है)।

एंटीबॉडी की अनुपस्थिति हमेशा किसी संक्रामक प्रक्रिया की अनुपस्थिति का 100% संकेतक नहीं होती है। यह इस तथ्य के कारण है कि संक्रमण के बाद, एंटीबॉडी तुरंत नहीं बनती हैं, बल्कि एक निश्चित अवधि (कम से कम लगभग 2 सप्ताह) में बनती हैं। इसलिए, संक्रमण की अनुपस्थिति की पुष्टि करने के लिए, एलिसा को कुछ समय बाद दोहराया जा सकता है।

मात्रात्मक एलिसा का उपयोग एंटीबॉडी के टिटर (गतिविधि) के साथ-साथ उनकी कक्षाओं को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। ज्यादातर मामलों में, संक्रामक रोगों के निदान के लिए आईजीजी (इम्युनोग्लोबुलिन जी) और आईजीएम (इम्युनोग्लोबुलिन एम) वर्गों के एंटीबॉडी निर्धारित किए जाते हैं, जो संक्रमण के बाद विभिन्न अंतराल पर शरीर में बनते हैं, इसलिए परीक्षण के परिणाम को समझने के कई अर्थ हो सकते हैं:

• आईजीएम गतिविधि में वृद्धि और आईजीजी की अनुपस्थिति हाल के संक्रमण और संक्रामक प्रक्रिया के तीव्र होने का प्रमाण है।
• आईजीएम और आईजीजी की गतिविधि में वृद्धि इसके क्रोनिक कोर्स और लंबे समय तक चलने वाले संक्रमण के दौरान संक्रामक प्रक्रिया का तेज होना है।
• उच्च आईजीजी गतिविधि और आईजीएम की अनुपस्थिति लंबे समय से चले आ रहे संक्रमण की पृष्ठभूमि के खिलाफ संक्रामक प्रक्रिया का एक पुराना कोर्स है, जिसके बाद छह महीने से अधिक समय बीत चुका है (आईजीजी वर्ग एंटीबॉडी के गठन के लिए आवश्यक समय)।

सामान्य तौर पर, प्रत्येक संक्रामक प्रक्रिया के लिए एलिसा परिणामों को समझने में कुछ विशेषताएं होती हैं। एक संक्रामक रोग की उपस्थिति के साथ-साथ इसके पाठ्यक्रम के चरण का अधिक सटीक निर्धारण एक डॉक्टर द्वारा किया जाता है।

एलिसा वर्तमान में अधिकांश संक्रामक रोगों के निदान के लिए पसंदीदा तरीका है। इस तरह के एक अध्ययन के परिणामों के आधार पर, डॉक्टर के पास एक सटीक निदान स्थापित करने और बाद में पर्याप्त और प्रभावी उपचार निर्धारित करने के लिए रोग प्रक्रिया के चरण को निर्धारित करने का अवसर होता है।

आधुनिक निदान तकनीकें विशेष परीक्षणों का उपयोग करके प्रयोगशाला में किसी विशेष बीमारी की पहचान करना संभव बनाती हैं। इनमें से एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट रक्त परीक्षण है, जो पहले किए गए निदान की पुष्टि कर सकता है।

एंजाइम इम्यूनोएसे एलिसा प्रतिरक्षा और हार्मोनल असंतुलन के साथ-साथ ऑन्कोलॉजिकल प्रक्रियाओं से जुड़े विकारों की पहचान करने के लिए सबसे प्रभावी और आधुनिक तरीकों में से एक है। परीक्षण के दौरान, शरीर में संक्रमण होने पर उत्पन्न होने वाली एंटीबॉडी का रक्त में पता लगाया जा सकता है। इस बारीकियों को ध्यान में रखते हुए, बीमारी का उसके विकास के शुरुआती चरण में भी पता लगाया जा सकता है।

तकनीक का आधार क्या है?

एलिसा विश्लेषण के परिणाम एंजाइमों के लिए रासायनिक प्रतिक्रियाओं को प्राप्त करने पर आधारित होते हैं, जो एंटीबॉडी को पहचानने के लिए विशेष पहचान चिह्न के रूप में काम करते हैं। नतीजतन, इम्यूनोकेमिकल प्रतिक्रियाओं के दौरान, एंटीबॉडी कुछ एंटीजन के साथ बातचीत करना शुरू कर देते हैं। यह सब यह दावा करने का आधार देता है कि एलिसा के लिए रक्त दान करते समय गलत परिणाम न्यूनतम होते हैं।

अध्ययन आपको प्रतिरक्षा कोशिकाओं की संख्या, उनके गुणों, साथ ही आवश्यक एंटीबॉडी की उपस्थिति निर्धारित करने की अनुमति देता है

जब घोल में रंग का पता चलता है तो परिणाम सकारात्मक माना जाता है। रंग इंगित करता है कि एंटीजन एंटीबॉडी के साथ बातचीत कर रहे हैं। यदि ऐसा कुछ नहीं होता तो परिणाम नकारात्मक होता है।

शरीर के सुरक्षात्मक कार्यों के व्यापक मूल्यांकन के लिए एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परीक्षण (एलिसा) किया जाता है। अध्ययन के दौरान, प्रतिरक्षा कोशिकाओं की संख्या और गुण और आवश्यक एंटीबॉडी की उपस्थिति निर्धारित की जाती है। संक्रामक, हेमटोलॉजिकल, ऑटोइम्यून बीमारियों, प्राथमिक और माध्यमिक इम्युनोडेफिशिएंसी का निदान करने के लिए एलिसा रक्त परीक्षण किया जाता है। आइए विचार करें कि एलिसा रक्त परीक्षण क्या है और इस अध्ययन के संचालन के लिए क्या संकेत मौजूद हैं।

यह क्या है

एलिसा विधि का उपयोग करके रक्त परीक्षण एक प्रयोगशाला विधि है जिसके साथ रक्त के नमूने में एंटीबॉडी या एंटीजन निर्धारित किए जाते हैं। इस अध्ययन का उपयोग इम्युनोग्लोबुलिन, इम्यूनोलॉजिकल कॉम्प्लेक्स और हार्मोन के स्तर को निर्धारित करने के लिए किया जाता है।

विश्लेषण के लिए संकेत

एलिसा रक्त परीक्षण निर्धारित करने के लिए निम्नलिखित संकेत मौजूद हैं:

• यौन संचारित संक्रमणों का निदान - यूरियाप्लाज्मा, माइकोप्लाज्मा, क्लैमाइडिया, ट्राइकोमोनास, सिफलिस;
• वायरल रोगों का निदान - साइटोमेगालोवायरस, हर्पीस, हेपेटाइटिस, एपस्टीन-बार वायरस;
• हार्मोन के स्तर का निर्धारण;
• ऑन्कोलॉजिकल रोगों का निदान;
• इम्युनोडेफिशिएंसी का निर्धारण;
• एलर्जी का निदान;
• अंग प्रत्यारोपण से पहले प्रीऑपरेटिव व्यापक परीक्षा;
• चिकित्सा की प्रभावशीलता का मूल्यांकन.

विधि का सिद्धांत

एंजाइम इम्यूनोएसे विधि के संचालन का सिद्धांत रक्त में विशिष्ट एंटीबॉडी प्रोटीन - इम्युनोग्लोबुलिन के निर्धारण पर आधारित है। इम्युनोग्लोबुलिन मानव प्रतिरक्षा प्रणाली द्वारा उत्पादित होते हैं जब एंटीजन (विदेशी सूक्ष्मजीव) शरीर में प्रवेश करते हैं। ऐसे प्रतिरक्षा अणु शरीर में विभिन्न प्रकार के संक्रामक रोगजनकों से जुड़ते हैं और उन्हें बेअसर कर देते हैं।

इम्युनोग्लोबुलिन की एक महत्वपूर्ण विशेषता है - विशिष्टता। इसके लिए धन्यवाद, वे एक विशिष्ट एंटीजन से जुड़ सकते हैं, जिससे एक एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनता है। एलिसा रक्त परीक्षण के दौरान, यह वह जटिल है जिसे गुणात्मक और मात्रात्मक रूप से निर्धारित किया जाता है।

इम्युनोग्लोबुलिन के पाँच वर्ग हैं। लेकिन आमतौर पर तीन वर्ग परिभाषित होते हैं - इम्युनोग्लोबुलिन ए, एम, जी। ये एंटीबॉडीज संक्रमण के क्षण से अलग-अलग समय पर शरीर में जमा होते हैं।

• इम्युनोग्लोबुलिन कक्षा एम (आईजीएम)संक्रमण के क्षण से पांचवें दिन सबसे पहले रक्त में दिखाई देते हैं। वे 5-6 सप्ताह तक शरीर में रहते हैं, फिर रक्तप्रवाह से गायब हो जाते हैं। आईजीएम एंटीबॉडी रोग की तीव्र अवधि या उसके दीर्घकालिक पाठ्यक्रम के दौरान रोग के बढ़ने का संकेत देते हैं।
• संक्रमण के लगभग 3-4 सप्ताह बाद, रक्त में इम्युनोग्लोबुलिन दिखाई देने लगते हैं कक्षा जी (आईजीजी). वे मानव रक्त में कई महीनों या वर्षों तक मौजूद रह सकते हैं। एलिसा रक्त परीक्षण की व्याख्या के अनुसार, यदि दो सप्ताह के बाद क्रमिक रूप से लिए गए दो रक्त नमूनों में आईजीजी इम्युनोग्लोबुलिन की मात्रा बढ़ जाती है, तो वे वर्तमान संक्रमण या पुन: संक्रमण की बात करते हैं - एक ही संक्रमण से पुन: संक्रमण।
• इम्युनोग्लोबुलिन कक्षा ए (आईजीए)इस शोध पद्धति से संक्रमण या किसी संक्रामक रोग के बढ़ने के 2-4 सप्ताह बाद पता लगाया जा सकता है। इनमें से केवल 20% रक्त में प्रवाहित होता है, शेष श्लेष्मा झिल्ली के स्राव में होता है। संक्रामक एजेंटों के नष्ट होने के 2-8 सप्ताह बाद आईजीए एंटीबॉडी रक्तप्रवाह से गायब हो जाते हैं। इन इम्युनोग्लोबुलिन के गायब होने का मतलब संक्रमण का इलाज है। यदि रोग की समाप्ति के बाद रक्त में IgA एंटीबॉडी की उपस्थिति निर्धारित हो जाती है, तो इसका मतलब है कि रोग पुरानी अवस्था में प्रवेश कर चुका है।

विश्लेषण की तैयारी

एलिसा विधि का उपयोग करके रक्त परीक्षण करने के लिए, मानव रक्त का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है। लेकिन आप कांच के शरीर, मस्तिष्कमेरु द्रव और एमनियोटिक द्रव की सामग्री की भी जांच कर सकते हैं।

परीक्षण के लिए रक्त का नमूना रोगी की एंटेक्यूबिटल नस से लिया जाता है। खाली पेट रक्तदान करने की सलाह दी जाती है (आपके अंतिम भोजन के बाद कम से कम 12 घंटे बीत चुके होंगे)। यदि रोगी दवाएँ ले रहा है तो डॉक्टर को सूचित करना आवश्यक है, क्योंकि उनमें से कुछ परीक्षण के परिणाम को बदल सकते हैं। अध्ययन के परिणामों की विश्वसनीयता शराब और नशीली दवाओं के उपयोग से प्रभावित होती है।

डिकोडिंग

इस परीक्षण का परिणाम प्रपत्र इम्युनोग्लोबुलिन के प्रत्येक वर्ग के निर्धारण के सकारात्मक (+) या नकारात्मक (-) परिणाम को इंगित करता है।

आइए एलिसा रक्त परीक्षण की संभावित व्याख्या की व्याख्या पर विचार करें।

• IgM, IgG, IgA के लिए नकारात्मक परिणाम का अर्थ है संक्रमण के प्रति प्रतिरोधक क्षमता की कमी।
• IgM, IgA के लिए एक नकारात्मक परिणाम और IgG के लिए एक सकारात्मक परिणाम संक्रामक या टीकाकरण के बाद की प्रतिरक्षा है।
• आईजीजी, आईजीए का नकारात्मक या सकारात्मक परिणाम और आईजीएम का सकारात्मक परिणाम - तीव्र संक्रमण।
• IgM, IgG, IgA का सकारात्मक परिणाम एक पुरानी संक्रामक बीमारी का बढ़ना है।
• नकारात्मक IgM परिणाम और नकारात्मक या सकारात्मक IgG परिणाम, IgA - दीर्घकालिक संक्रमण।
• नकारात्मक IgM परिणाम और IgG, IgA का पता नहीं चला - पुनर्प्राप्ति।

विधि के लाभ

एलिसा रक्त परीक्षण के कई फायदे हैं। मुख्य की पहचान की जा सकती है:

• अपेक्षाकृत उच्च सटीकता (संवेदनशीलता);
• शीघ्र निदान की संभावना;
• संक्रामक प्रक्रिया की गतिशीलता की निगरानी करने की क्षमता;
• उच्च स्तर का एकीकरण, जो सामूहिक परीक्षाओं की अनुमति देता है;
• विश्लेषण परिणाम प्राप्त करने के लिए आवश्यक कम समय;
• उपयोग में आसानी;
• विश्लेषण के सभी चरणों का स्वचालन;
• अपेक्षाकृत कम लागत.

कमियां

एलिसा पद्धति का नुकसान यह है कि यह कभी-कभी गलत नकारात्मक या गलत सकारात्मक परिणाम देता है। अध्ययन के दौरान तकनीकी त्रुटियों के अलावा, गलत परिणामों का कारण रोगी का रुमेटीड कारक, पुरानी बीमारियों की उपस्थिति (जिसमें एंटीबॉडी का उत्पादन होता है), चयापचय संबंधी विकार या कुछ दवाओं का उपयोग हो सकता है।

• एस्कारियासिस;
• ट्राइचिनोसिस - विश्लेषण कई बार किया जाता है, एंटीबॉडी का अधिकतम स्तर संक्रमण के 4-12 सप्ताह बाद निर्धारित किया जाता है;
• सिस्टीसर्कोसिस;
• टेनियासिस;
• फैसीओलियासिस - रोग के तीव्र चरण में एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है;
• opisthorchiasis - रोग के जीर्ण और तीव्र रूपों के बीच विभेदक निदान किया जाता है;
• जिआर्डियासिस;
• आंत और त्वचीय लीशमैनियासिस;
• अमीबियासिस;
• टोक्सोप्लाज्मोसिस.

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