Чи ефективний мазок відбиток зі шкірного утворення. Отримання та обробка матеріалу для цитологічного дослідження

Мазок-відбиток

препарат для мікроскопії, приготований шляхом дотику предметним склом до досліджуваної тканини або органу з подальшим висушуванням, фіксацією та забарвленням.

1. Мала медична енциклопедія. - М: Медична енциклопедія. 1991-96 р.р. 2. Перша медична допомога. - М: Велика Російська Енциклопедія. 1994 3. Енциклопедичний словник медичних термінів. - М: Радянська енциклопедія. - 1982-1984 рр..

Дивитись що таке "Мазок-відбиток" в інших словниках:

Мікроскоп препарат (див. Препарати мікроскопічні), який готують з тканин або рідше з бактерій росту на щільних середовищах Для цього з органу вирізають шматочок тканини і її зрізом один або кілька разів торкаються (!) до предметного скла, мазок ... Словник мікробіології

Препарат для мікроскопії, приготований шляхом дотику предметним склом до досліджуваної тканини або органу з подальшим висушуванням, фіксацією та забарвленням. Великий медичний словник

Мазок Папаніколау, тест Папаніколау або цитологічний мазок (англ. Papanicolaou test, Pap test або Pap smear) тест, за допомогою якого можна визначити передракові або ракові клітини у піхві та шийці матки (див. Злоякісні…).

Штучне запровадження тваринам лабораторним (див.) ісл. кри мікроорганізмів, токсинів, ісл. матеріалу, в якому передбачається вміст мікробів або їх токсинів. У мікробіології З. е. застосовують з метою відтворити захворювання або його… Словник мікробіології

- (гістологічне cytus клітина + грец. logos вчення) засноване на вивченні за допомогою мікроскопа особливостей будови клітин, клітинного складу органів тканин, рідин організму людини та тварин у нормі та при патологічних процесах. Ц. і. Медична енциклопедія

- (Від ін. грец. βίος життя та ὄψις зовнішній вигляд) метод дослідження, при якому проводиться прижиттєвий паркан клітин або тканин з організму з діагностичною метою. Біопсія є обов'язковим методом підтвердження діагнозу при ... Вікіпедія

Біопсія (від Грецького «βίος» життя і «όψη» дивлюся/зовнішній вигляд) це метод дослідження, при якому проводиться прижиттєвий забір клітин або тканин з організму та подальше їх мікроскопічне дослідження. Біопсія є обов'язковим… Вікіпедія

Див. знак, небагато, слідство і слід застудився, напасти на слід, немає сліду ... Словник російських синонімів і подібних за змістом виразів. під. ред. Н. Абрамова, М.: Російські словники, 1999. слід мітка, відбиток, відбиток; відбиток, друк, відблиск, … Словник синонімів

Сукупність способів виявлення та вивчення морфологічних і тинкторіальних св у бактерій (мікробів) в лабораторній к ре, патологічному матеріалі або в пробах із зовнішнього середовища за допомогою мікроскопії. Застосовують для встановлення д за інфекцію. Словник мікробіології

Список епізодів телесеріалу «Декстер», який розповідає про вигаданого серійного вбивцю Декстера Моргана, який працює судовим експертом із бризок крові в поліції Майамі. Перші шість сезонів серіалу налічують 72 епізоди. У Росії показ… … Вікіпедія

Слово отсебятина в сучасній російській мові дуже вживане. Воно носить стилістичний відбиток розмовної мови. Його основне значення можна визначити так: ні на чому, крім власних вигадок, власної забаганки, не засноване… … Історія слів

Для того щоб визначити, в якому стані знаходиться пацієнт, від якої хвороби він страждає, лікар часто може застосувати використання мазка-відбитка. Даний метод широко поширений у різних сферах медицини. Дерматологи, гінекологи, урологи, онкологи – всі вони з різною періодичністю вдаються до нього. Дослідження мазка дозволяє оперативно визначити патологію та призначити грамотний курс лікування.

Мазок-відбиток – це медичний препарат, він готується до використання через притискання тканин до предметного скла. Надійно зафіксований та забарвлений відбиток досліджується під мікроскопом.

Мазок-відбиток застосовується для вирішення різних завдань. Найчастіше його використовують для:

Немає одного загального способу взяття мазків. Метод, який використовується лікарем, відрізнятиметься залежно від проблеми пацієнта та мети, яка буде поставлена ​​перед дослідженням.

Для мазка може використовуватися біологічний матеріал із різних частин тіла. Якщо йдеться про діагностику раку грудей, то відбитки, що віддаляються, буде взято лікарем з сосків пацієнта. При виявленні інфекції для мазка буде взято гній із тієї частини тіла, яка постраждала при запаленні. Найчастіше використовуються для мазка виділення із порожнинних органів.

Проблемна зона може бути не лише на поверхні шкіри, а й під нею. Якщо лікар зіткнеться з подібною ситуацією, для отримання відбитків йому доведеться розкрити шкіру. Для взяття мазка із важкодоступних місць використовуються спеціальні пристрої - тампони, щіточки. Відокремлюване залишається на них, а потім дбайливо розподіляється по предметному склу.

Мазок-відбиток з виразки на статевих органах

Урологам, венерологам та гінекологам найчастіше доводиться брати відбитки зі статевих органів своїх пацієнтів. Зазвичай судити про характер інфекції можна, зробивши зіскрібок з уретри або сечівника. Якщо хворий страждає від не серйозної хвороби, цього може бути достатньо. Однак далеко не завжди інфекція вражає уретру.

Венеричні захворювання, тобто захворювання, набуті статевим шляхом, в першу чергу вражають не уретру, а слизову оболонку. Це притаманно як сифілісу і генітального герпесу, так ряду аналогічних хвороб. У хворого, який відчуває венеричні проблеми, на слизовій оболонці у промежині утворюються виразки, і мазок-відбиток береться прямо з цієї ураженої області.

Для того, щоб дослідити мазок, взятий із виразки, фахівці застосовують темнопольну мікроскопію. У деяких випадках вона не зможе абсолютно точно визначити хворобу. Однак, якщо в результаті дослідження відбитків будуть виявлені трепонеми, лікар, не сумніваючись, діагностує у хворого сифіліс.

Також темнопольна мікроскопія дозволяє відрізнити виразки, що виникають при герпесі, від інших захворювань.

Мазок-відбиток головки пеніса

Як об'єкт для мазка у чоловіка часто використовується головка його статевого члена. Приводом для цього може послужити баланопостит, при якому запалюється сама головка або крайня плоть, що покриває її.

Мазок, взятий з головки, дозволяє визначити низку проблем. Він може виявити коки, кишкову паличку, грибкову інфекцію та низку інших захворювань.

Якщо баланопостит, за підозрою лікаря, має герпетичне походження, мазок-відбиток буде взятий не тільки з головки, але і з везикул, що з'явилися на шкірі. Якщо у везикулах будуть виявлені клітини Тцанка, то пацієнт страждає від генітального герпесу. Отриманий біологічний матеріал забарвлюється щодо. Ця процедура можлива лише у разі виникнення везикул.

Мазок-відбиток для цитологічного дослідження

Цитологічне дослідження відбитків проводиться онкологами, щоб виявити в отриманому після мазків біологічному матеріалі атипові клітини, що свідчать про те, що хворий страждає на рак. У цьому випадку мазок-відбиток береться з пухлини, яка може розташовуватися не тільки на статевих органах, але й інших ділянках шкіри.

При цитологічному дослідженні оцінці піддається весь клітинний склад: вимірюються розміри ядер, клітин.

Методика дозволяє діагностувати як рак, а й інші процеси, які мають стосунку до онкології.

Підготовка до взяття мазка-відбитка

Пацієнт не може прийти до лікарні і відразу пройти цю процедуру. Вона потребує тривалої підготовки. Якщо у хворого підозрюється інфекція, перед взяттям мазка йому не варто приймати антисептики та антибіотики, оскільки вони способи спотворити клінічну картину і навіть замаскувати інфекцію.

Хворому не варто мити місце, з якого буде взято мазок. Якщо ж це необхідно з гігієнічних причин, промити місце можна звичайною проточною водою без використання мила та інших засобів для чищення.

Взяттю мазка можуть перешкоджати нальоти, везикули та інші утворення, що з'явилися на шкірі. У такому разі перед початком процедури їх буде видалено.

Як вивчають мазок-відбиток?

Для дослідження взятого мазка потрібний мікроскоп. Предметне скло, на яке поміщається біологічний матеріал, має бути абсолютно чистим та сухим.

Препарат може бути зафіксований різними способами. Зазвичай для фіксації використовуються жар, 95% етиловий, метиловий або сулемовий спирт, пари оцтової кислоти. Вибраний метод залежить від лабораторії, в якій проводитиметься дослідження. Сьогодні для фіксації активно застосовуються спеціально виведені препарати, які є сумішшю низки хімічних речовин.

Фіксатор має значення для ефективності всієї процедури. Якщо фахівцем буде використано недостатньо якісний розчин, він чинитиме згубний вплив на структуру клітин у мазку і, ймовірно, дасть хибнонегативний результат. За підсумками аналізу хворому буде повідомлено, що він абсолютно здоровий, але насправді це не так. Лише якісний розчин для фіксації здатний зберегти правильне розташування всіх клітин мазка та виявити серед них бактеріальні утворення.

Зафіксований матеріал піддається фарбуванню, яке буває орієнтовним та диференціальним.

Автор(и):Ян Рибничек, MVDr, Diplomate European College of Veterinary Dermatology
Організація(и): Dermatology and Dermatopathology Service, Czech Republic
Журнал: №2 - 2013

Більшість хвороб шкіри мають подібну клінічну картину, проте можна виділити дев'ять основних груп характерних дерматологічних порушень:

- алопеція

– освіта лусочок/кірка/себорея

– макули/папули/пустули, що розкриваються.

– вузли/пухлини

- Зміни пігментації

Як тільки лікар-клініцист почне відносити кожного пацієнта до будь-якої з вище перерахованих категорій, йому стане набагато простіше формувати список диференціальних діагнозів та розробляти діагностичний план. Необхідно пам'ятати, що у пацієнта можуть бути супутні хвороби зараз, які ускладнюють постановку основного діагнозу. .

Швидка постановка діагнозу часто становить значні труднощі для практикуючого лікаря, тому далі йтиметься про доступні методи лабораторного дослідження, що вимагають мінімальних витрат часу та коштів. Найбільш прості та швидкі діагностичні тести, що використовуються на практиці:

- Зіскрібки шкіри

- Трихоскопія

- Вичісування гребенем або щіткою

- Скотч-тест

- Дослідження на дерматофіти

- Цитологія шкіри

Шкірні зіскрібки

Це дослідження повинно проводитися у всіх випадках! Для проведення шкірних зіскрібок необхідне наступне обладнання та матеріали: мінеральне масло, предметне скло, лезо скальпеля або шпатель (кюретка), мікроскоп.

Дослідження у променях лампи Вуда – вкрай неспецифічне, проте при виявленні флюоресценції, уражені волоски вищипуються і піддаються подальшому дослідженню (мікроскопії після обробки препарату луги, посів для виявлення культури дерматофітів). На предметне скло наносять 10% розчин КОН, розміщують віддалену вовну, нагрівають над полум'ям, проводять мікроскопію, попередньо накривши покривним склом, спочатку під малим збільшенням (об'єктив 10х), потім під великим (об'єктив 40х). Для кращої візуалізації можна використовувати фарбування хлорлактофенолом.

Скотч-тест

Для отримання матеріалу для цитології необхідно коротко підстригти вовну з обраної ділянки, щільно притиснути смужку скотчу, потім її по черзі опускають у розчини барвників, приклеюють на предметне скло та проводять мікроскопію. Цим методом легко виявляються дріжджові гриби роду Malasseziaу формі «матрьошки», бактерії роду Simonsiella(свідчить про влучення слини при вилизуванні) та ін.

Трихоскопія

При мікроскопії звертають увагу на структуру та пігментацію стрижнів волосся, оглядають кінчики волосся, оцінюють трихограму (співвідношення волосся у різних фазах циклу фолікула: анаген/телоген). Анаген – стадія росту, корінь віддаленого волосся м'який, набувають округлої форми («ручки від парасольки»). Катаген – проміжна стадія, ріст волосся припиняється, корінь має форму кисті, оточеної склоподібною оболонкою. Телоген – стадія спокою волосяного фолікула, корінь волосся втрачає пігмент, звужується до кінця у формі «художнього пензля», набуває вигляду «списа». Розрізняють первинне та вторинне волосся (у нормі). Втрата первинного волосся може бути одним із діагностичних критеріїв при деяких алопеціях (наприклад, при алопеції Х). Стрижні первинного волосся більшого діаметру, мозкова речовина завжди товщі кіркової. Вторинне волосся меншого діаметру, часто хвилясте, мозкова речовина тонша за кіркову.

Суворих норм для трихограми немає, проте є спостереження, що описують співвідношення анаген/телоген 1:9 взимку і 1:1 влітку в деяких собак. Існують породні особливості - у собак з постійно вовняною вовною (наприклад, пуделі) переважають фолікули в стадії анагену незалежно від пори року, а у собак північних порід може спостерігатися виражена телогенізація цибулин.

Наявність всіх 100% волосся у стадії телогена в більшості випадків не є нормою, може бути обумовлена ​​неправильним взяттям проби, гормональними порушеннями, алопецією Х, телогеновою алопецією. Гормональні чинники впливають на цикл волосяного фолікула і супроводжуються телогенізацією, через затримки в циклі волосяного фолікула волосся поступово піддається процесу старіння (чорна шерсть набуває червоного відтінку, руда - знебарвлюється, кінчики можуть розщеплюватися). Первинний волосся зникає, підшерстя, що затримався, має вигляд щенячої вовни. Ендокринними причинами таких алопецій можуть бути гіпотиреоз, гіперестрогенізм, гіперкортицизм. Неендокринною причиною є синхронізація всіх волосся в телогені, спричинена тяжкою хворобою або стресом. Як тільки волосся відновлює своє зростання, через 1-2 місяці настає ремісія. Алопеція Х є хворобою з нез'ясованою до кінця етіологією.

Структурні порушення коренів волосся виникають внаслідок фолікулярної дистрофії чи дисплазії. У поодиноких випадках це може бути пов'язане з пошкодженням гранулами пігменту. Також коріння волосся ушкоджується при осередковій алопеції та дії цитотоксичних ліків (рідко).

Звертають увагу на кінчики волосся: в нормі вони мають загострену форму, а при алопеції внаслідок вилизування спостерігаються ознаки травмування кінчиків волосся (вони можуть бути обламані). Кінчики волосся можуть пошкоджуватися через підвищену крихкість, спричинену структурними змінами. Наприклад, відмічено появу роздвоєних кінчиків волосся при трихофітозі у гольден-ретріверів. Патологічні зміни кінчиків волосся можуть бути наслідком надзвичайно агресивного миття та розчісування вовни, а також механічного пошкодження у місцях підвищеного тертя.

При оцінці стрижня волосся можна виявити суперечки дерматофітів. При правильному виконанні трихоскопія дає позитивний результат у 60-70% випадків дерматофітозу. Переважно досліджувати волосся, що флюорескує в променях лампи Вуда. Структура стрижня волосся порушується не тільки при дерматофітозі, а й у ряді інших випадків, наприклад, хіміотерапії (рідко), механічній та хімічній травмі (агресивний догляд), нестачі поживних речовин, спадкових хворобах (вузловий трихорексіс та ін.). Характерні зміни структури стрижня волосся спостерігаються при медулярній трихомаляції німецьких вівчарок, що виявляється у дорослих собак. Вовна виглядає підстриженою на тілі, хвості, плече-лопатковій ділянці. При трихоскопії у стрижнях волосся спостерігаються поздовжні тріщини, розриви. Характерні зміни відзначаються при алопеціях, пов'язаних з порушенням продукції меланіну – алопеції «ослабленого» забарвлення та фолікулярної дисплазії чорного волосся. «Знебарвлюючу алопецію» схильні собаки з блакитним і світло-коричневим забарвленнями. При цій хворобі у волоссі з ослабленим кольором виявляються великі гранули пігменту, які викликають підвищену ламкість волосся, що призводить до алопеції. Фолікулярна дисплазія чорного волосся спостерігається у двох-і триколірних собак, при цьому уражаються лише фолікули чорного волосся. Цуценята народжуються нормальними, але згодом зони темного волосся поступово піддаються алопеції. При трихоскопії виявляються аномальні глибки меланіну у стрижні волосся.

При трихоскопії можна легко виявити агрегати кератину у вигляді зліпків волосяних фолікулів на стрижні волосся. Вони виникають внаслідок дефектів кератинізації (первинна себорея кокер-спанієлей, дерматоз при нестачі вітаміну А, аденіт сальних залоз, лейшманіоз, демодекоз), а також при інших фолікулярних хворобах, наприклад, бактеріальному фолікуліті.

Цитологія шкіри

Цитологія шкіри – швидкий, неінвазивний метод, що має велику діагностичну цінність. Даний вид дослідження особливо цінний для діагностики нодулярних, ексудативних, гнійних поразок, при утворенні кірок і себореї, а також при отитах. При нодулярних ураженнях краще отримання матеріалу шляхом тонкоголкової аспірації за допомогою шприца об'ємом 10 мл з голками 21G, 24G. При поразках, що мокнуть, можна проводити дослідження мазків-відбитків. Також цитологічного дослідження піддають скотч-препарати, і, звичайно, глибокі зіскрібки. Препарати висушують у повітрі, можна використовувати фіксацію метанолом. Я використовую модифікований барвник Райта (Diff-Qick), у лабораторіях також проводять забарвлення спеціальними барвниками, імуноцитохімію. Перегляд препаратів проводять послідовно з використанням об'єктивів 4х, 10х, 40х, 100х (з імерсійною олією).

У зіскрібку з нормальної шкіри переважають корнеоцити, присутні також інші кератиноцити, поодинокі фібробласти. При цитологічному дослідженні матеріалу із запалених ділянок звертають увагу на такі клітини:

- Нейтрофіли (дегенеративні та недегенеративні);

- Макрофаги;

- Лімфоцити/плазматичні клітини;

- Еозинофіли та опасисті клітини;

- акантолітичні клітини (округлені кератиноцити, позбавлені відростків);

- Неопластичні клітини.

Також можна виявити мікроорганізми (палички, коки, маласезію, інші гриби, лейшманії та ін.).

Я використовую такі основні критерії цитологічної диференціальної діагностики:

– бактерії та епітеліальні клітини – бактеріальний переріст;

- Дегенеративні нейтрофіли та бактерії - піодермія;

- Недегенеративні нейтрофіли у великій кількості + акантолітичні клітини - листоподібна пухирчатка, еритематозна пухирчатка та ін (додатково + гістопатологія);

- Нейтрофіли + макрофаги - піогранульома/гранульома (грибкова, атипова бактеріальна інфекція);

– лімфоцити, плазматичні клітини – хронічне запалення, плазмацитарний підодерматит, лімфома (додатково + лімфобласти);

– Malassezia sp.та епітеліальні клітини – маласезіозний дерматит.

Оцінюючи морфології клітин прийнято оцінювати такі ознаки злоякісності:

– цитоплазматичні критерії (анізоцитоз, макроцитоз, різна інтенсивність забарвлення (ступінь базофілії), атипові включення/вакуолізація, відсутність специфічних гранул, велике ядерно-цитоплазматичне співвідношення, а також наявність у препараті клітин, що значно відрізняються за цим параметром);

- Ядерні критерії (анізокаріоз, макрокаріоз, зміна форми ядер, розріджений хроматин або гіперхромазія, анізохромазія, високий мітотичний індекс, неправильні мітози, множинні ядерця, гігантські ядерця, патологічна форма ядерців).

При дослідженні цитологічних препаратів нодулярних уражень слід відповісти на такі питання:

- Запалення/пухлина;

– Неоплазія – доброякісна/злоякісна;

- Джерело неоплазії;

- Походження тканини: епітеліальні, мезенхімальні, гемопоетичні (круглоклітинні) пухлини.

Найчастішими цитологічними диференціальними діагнозами пухлинних уражень шкіри на практиці є:

- Епітеліальні пухлини (кератоакантома, плоскоклітинний рак та інші);

- Мезенхімальні пухлини (фібросаркома, меланома та ін);

- Круглоклітинні пухлини (мастоцитома, гістіоцитома, лімфома);

У зв'язку із зростанням доступності гістопатології останніми роками значно зросла можливість діагностики різних дерматологічних патологій. Незважаючи на це, поки що досить рідко вдаються до взяття гістобіоптатів через можливість отримання малоінформативних результатів. Тому подальша інформація присвячується оцінці необхідності взяття гістобіопсії шкіри, правильного вибору ділянки шкіри для гістологічного дослідження, коректного забору зразка, вибору патогістолога та інтерпретації гістологічного укладання. Тільки за дотримання всіх цих умов, можна отримати точний діагноз.

1) Гістобіопсія зазвичай не застосовується для діагностики у собак з хронічним свербінням. У більшості випадків результати біопсії не дадуть інформації, яку може отримати фахівець-дерматолог при клінічному обстеженні.

2) Гістобіопсія шкіри може бути корисною в наступних випадках:

– Алопеція, коли не вдається поставити діагноз із використанням «швидких» методів діагностики (тобто трихоскопії, шкірних зіскрібків, цитології…)

- Лушпиння, коли не вдається поставити діагноз з використанням «швидких» тестів

- Плями, папули, пустули, що розкриваються, коли не вдається поставити діагноз з використанням «швидких» тестів

– Незагойні ерозії, виразки, нориці

– Довго існуючі вузли, ущільнення, пухлини

- Депігментація та незвичайна гіперпігментація

– Підозра на аутоімунні хвороби

– Підозра на хвороби шкіри, при яких підтвердження діагнозу можливе лише гістологічно (наприклад, аденіт сальних залоз)

– Випадки, коли підозрюється небезпечний для життя діагноз (дерматоміозит та ін.)

– Випадки, коли відсутня відповідь на цілком раціональне лікування

Як отримати якісні гістобіоптати шкіри

Щоб отримати зрозумілий правильний гістологічний діагноз, слід виконувати такі дії:

1) Вибір ділянки для біопсії

Необхідно подати патологу відповідні зразки, тому клініцист повинен приділити увагу вибору потрібної ділянки шкіри. У більшості випадків для більш ймовірного отримання правильного діагнозу необхідно взяти щонайменше 3-5 зразків шкіри від одного пацієнта. Вибір місця для біопсії залежить від типу виявлених поразок:

– Алопеція:біоптати повинні бути отримані з ділянки повністю облисілої шкіри (бажано 2), на межі нормальної шкіри та області алопеції (1) і зі шкіри, покритої нормальною вовною (якщо така є), щоб патолог міг зіставити фізіологічні волосяні фолікули та фолікули з області патологічного процесу даного пацієнта.

– Поразки, що лущиться («себорейна» шкіра):береться 2-3 біоптати з ураженої ділянки та зразок нормальної шкіри (1), щоб була можливість порівняти епідерміс, особливо роговий шар у цих ділянках. Можна використовувати біопсійну голку для отримання зразків.

– Макули, папули, пустули:в результаті біопсії повинні бути отримані зразки щонайменше з трьох ділянок первинних уражень, які повинні розташовуватися в центрі біоптату. Можна використовувати біопсійну голку для отримання зразків.

– Покриті виразками ділянки:це найскладніший для біопсії тип поразок. Основною помилкою є направлення патологу біоптату з центру виразки з подальшим отриманням відповіді виразка без будь-якого специфічного діагнозу. У ситуації, коли матеріал отримано з центру виразки, гістологічна картина буде характерна для інфекційного процесу. Доводиться також брати кілька зразків, щоб патолог міг пов'язати процеси, що відбуваються у виразці, та у нормальній шкірі. Якщо є невеликі виразки, можна відправити на дослідження всю цю зону цілком, включаючи обідок здорової тканини.

– Свищі:зазвичай патологічний процес розташований глибоко в дермі, а найчастіше під шкірою, тому потрібна дуже глибока біопсія для з'ясування природи патологічного процесу. У таких випадках лезом скальпеля проводять висічення клиноподібного біоптату, за допомогою біопсійної голки за такого типу поразок неможливо отримати інформативний зразок. У той самий час, має сенс біопсійний матеріал направити на бактеріологічне, мікологічне дослідження.

– Ущільнення та вузли:Знову хірургічна ексцизія всього вузла з прилеглими нормальними тканинами є способом вибору. Згідно з встановленими правилами, ця процедура може проводитися тільки після виключення мастоцитоми шляхом проведення тонкоголкової аспірації та цитологічного дослідження.

– Депігментація:гістобіоптати отримують з повністю депігментованих ділянок (мінімум 2), з прикордонної зони між нормальною та позбавленою пігменту шкіри (1), а також один зразок з нормальної шкіри.

– Гіперпігментація:гістобіоптати отримують з пігментованих ділянок (мінімум 2), а також один зразок з нормальної шкіри.

2) Інтерпретація гістологічного укладання

Зазвичай дерматогистопатолог видає висновок, який має містити такі розділи:

1. Опис зразка тканин

2. Морфологічний діагноз

3. Етіологічний діагноз (за можливості визначення причини)

4. Коментарі

Гістологічний опис є інформацією, яку бачить патолог у препаратах. Гістологічний опис містить цінну інформацію з використанням безлічі термінів, що має велике значення у діагностиці. Проте потрібен значний досвід пояснення цих побачених змін, тому клініцисту який завжди варто довіряти інтерпретації укладання патолога. Знання базової термінології вкрай необхідне коректної інтерпретації висновків лабораторії. На жаль, більшість клініцистів взагалі не читають описової частини.

Морфологічний діагноз є коротким викладом патологічних змін у гістологічному зразку в одному реченні (щось подібне: виражена гіперплазія з утворенням кірок та периваскулярною еозинофільною інфільтрацією з чесоточними кліщами в роговому шарі). Морфологічний діагноз ґрунтується на термінах, використаних в описі гістопатологічного зразка.

Етіологічний діагноз можливий, коли гістопатологія специфічна для будь-якої хвороби. Наприклад, в наведеному вище випадку, етіологічний діагноз – «саркоптоз». Якщо етіологічний діагноз встановити неможливо, патолог пропонує список диференціальних діагнозів і, можливо, рекомендації з подальшої діагностики.

Клініцист ніколи не повинен наосліп покладатися на висновок, дуже важливо, щоб лікар пов'язував воєдино клінічну картину та гістопатологічну інформацію. Існує велика кількість хвороб, діагноз яких може бути встановлений гістологічно, але багато з них можна підозрювати за характерними ознаками.

Найчастіші гістопатологічні висновки будуть наведені нижче.

Епідермальні порушення

2. Гіперплазія- це неспецифічна відповідь епідермісу на хронічне запалення або травму, що спостерігається при багатьох запальних процесах, що супроводжуються свербінням.

3. Субкорнеальні та інтраепідермальні пустули– як правило, зустрічаються при поверхневій піодермії, а також при листоподібній пухирчатці та деяких рідкісних стерильних пустулярних хворобах.

4. Субепідермальні пустули та везикули– це дуже рідкісна ознака, що зустрічається при спадкових та аутоімунних хворобах, наприклад, при звичайній пухирчатці.

5. Некрози та виразки– зазвичай спостерігаються при опіках, контактному дерматиті, піотравматичному дерматиті («гарячі плями»), синдромі сверблячки в ділянці голови та шиї у котів, еозинофільному комплексі у котів. Більш рідкісними причинами є гепатошкірний синдром, мультиформна еритема/токсичний епідермальний некроліз, деякі лікарські реакції, вірусні хвороби кішок (вірус коров'ячої віспи, герпес-вірус), тимома у кішок. Виразки можуть бути вторинними ураженнями внаслідок серйозних хвороб шкіри, таких як васкуліт.

Поразки дерми

1. Поверхневі поразки дерми- Досить рідкісні, можуть спостерігатися при піодермії шкірно-слизових зон, вовчаку, мультиформної еритеми, епітеліотропної лімфомі, тимомі (у кішок), дерматоміозіті.

3. Фолікуліт/фурункульоз– у більшості випадків вказує на ураження шкіри інфекційної природи, спричинене, наприклад, стафілококами, дерматофітами чи демодексами. Іншими причинами можуть бути еозинофільний фурункульоз, листоподібна пухирчатка, епітеліотропна лімфома.

5. Паннікуліт– цю ознаку можна спостерігати при глибоких підшкірних бактеріальних, мікобактеріальних та грибкових інфекціях, при стерильному нодулярному, ідіопатичному панікуліті, панстеатиті, вовчаку, а також при місцевій реакції на ін'єкції, травми. Можливо наслідком панкреатиту.

6. Васкуліт- ця ознака говорить про безпосереднє ушкодження кровоносних судин. Васкуліт може бути присутнім при дуже різноманітних процесах, таких як септичний васкуліт, імуноопосередковані хвороби, а також внаслідок дії ліків.

7. Атрофія– спостерігається при ендокринних хворобах, деяких специфічних алопеціях, таких як сезонна алопеція бічної поверхні тіла, паранеопластичний синдром та ішемічна дерматопатія.

Підсумовуючи, можна сказати, що якщо у тварин з ознаками алопеції, лущенням і скоринками, макулами, папулами, пустулами мені не вдається встановити діагноз шляхом проведення всіх перерахованих вище швидких тестів, я вдаюся до проведення гістобіопсії. Потрібно пам'ятати, що у ряді випадків гістологічне дослідження малоінформативне (наприклад, у тварин з хронічним свербінням), тому хочу відзначити крайню важливість швидких тестів у цих пацієнтів, а також необхідність клінічної оцінки та ретельного аналізу анамнестичних даних ветеринарним фахівцем.

Література

1. Cowell R.L., Tyler R.D., Meinkoth J.H., DeNicola D.B. Diagnostic Cytology and Hematology of Dog and Cat, 3rd ed., Mosby Elsevier, 2008.

2. Raskin R.E., Meyer D.J. Canine and Feline Cytology, Saunders Elsevier, 2nd ed., 2010.

3. Mc. Cullough S., Brinson J. Clinical Techniques in Small Animal Practice, Vol.14, No.4, November, 1999.

4. Taylor S.M. Small Animal Clinical Techniques, Saunders Elsevier, 2010.

Приготування забарвленого препарату складається з наступних етапів:

1) приготування мазків;

2) висушування мазка;

3) фіксація мазка;

фарбування мазка.

Для приготування препарату, на знежирене предметне скло, наносять краплю води або фізіологічного розчину, яку петлею вносять досліджуваний матеріал і розподіляють тонким рівномірним шаром по склу на площі приблизно 1 см 2 . Якщо досліджуваний матеріал знаходиться в рідкому середовищі, його безпосередньо наносять петлею на предметне скло і готують мазок. Мазки висушують на повітрі або в струмені теплого повітря над полум'ям спиртування, не даючи краплі закипати.

Для фіксації мазка предметне скло (мазком нагору) повільно проводять 3-4 рази через полум'я спиртування. Мікроорганізми при фіксації гинуть, щільно прикріплюються до поверхні скла та не змиваються при подальшій обробці. Більше тривале нагрівання може викликати деформацію клітинних структур.

При фіксації за допомогою хімічних речовин використовують хромові сполуки, формалін, осмієву кислоту, ацетон. Один із поширених прийомів фіксації - обробка препарату метиловим або етиловим спиртом, або сумішшю Нікіфорова (рівні обсяги етилового спирту та ефіру). При цьому препарат занурюють на 5-20 хв. у фіксуючу рідину.

Методи фарбування мазків та барвники, що використовуються в мікробіології.

Існують прості та складні методи забарвлення . При простому забарвленні використовують якийсь із барвників, наприклад, фуксин водний (1-2 хв.), метиленовий синій (3-5 хв.). При фарбуванні мазка препарат поміщають препаратодержатель. На мазок наносять кілька крапель барвника. Після закінчення часу фарбування препарат промивають водою, фільтрувальним папером видаляють надлишки води, висушують на повітрі та мікроскопують.

При складному забарвленні послідовно наносяться на препарат певні барвники, що розрізняються за хімічним складом та кольором. Це дозволяє виявити певні структури клітин та диференціювати одні види мікроорганізмів від інших. Такими є методи забарвлення за Грамом, за Цилем-Нільсеном, забарвлення суперечки за методом Ожешки.

Барвники, у яких при дисоціації виділяються водневі іони, що надають барвнику кислого характеру, називаються кислими. Вони фарбують (як аніону) речовини основний природи. Барвники, у яких при дисоціації виділяються гідроксильні іони, - основними.

У мікробіологічній практиці кислі та основні барвники використовуються у вигляді солей, оскільки вони здатні вступати в реакцію з кислотами та основами. Основні барвники найчастіше застосовуються у вигляді солей соляної, рідше оцтової та сірчаної кислот; кислі барвники – як натрієвих чи калійних солей.

Барвники основної природи

Червоні Фіолетові

нейтральний червоний генціан фіолетовий

піронін кристалічний фіолетовий

сафранін метиловий фіолетовий

фуксин метиловий зелений

гематоксилін малахітовий зелений

Сині Коричневі

Вікторія везивін

метиленовий синій хризоїдин.

Зелений Чорний

янус зелений індулін

Барвники кислої природи

Червоні та рожеві Чорні Жовті

кислий фуксин нігрозин конго

еритрозин пікринова кислота

флюоресцин

Інтенсивність барвника, що забарвлює, заздрить від рН середовища: основні барвники забарвлюють об'єкт тим інтенсивніше, чим більш лужне середовище, кислі – чим кисліше.

Барвники можна розділити на: позитивні та негативні. Позитивні барвники фарбують безпосередньо клітини мікроорганізмів. Вони фарбують клітини за кімнатної температури протягом 30-60 секунд. Негативні барвники фарбують простір, що оточує клітини мікроорганізмів. В результаті клітини виглядають силуетами на тлі барвника.

Простий метод фарбування

На приготовлений та фіксований мазок нанести кілька крапель водяного розчину фуксину. Фарбувати 1-2 хв. Змити фарбу водою, промокнути препарат фільтрувальним папером, досушити на повітрі та мікроскопувати.

Забарвлення методом Грама.

На фіксований мазок нанести карболово - спиртовий розчин фіолетового генціанового через смужку фільтрувального паперу. Через 1-2 хв папір зняти, а барвник злити.

Нанести розчин Люголю на 1-2 хв.

Знебарвити етиловим спиртом протягом 30-60с до припинення відходження фіолетових структур барвника.

Промити водою.

5. Дофарбувати водним розчином фуксину протягом 1-2 хв, промити водою, висушити фільтрувальним папером і на повітрі, і мікроскопувати.

Грампозитивні бактерії забарвлюються у темно – фіолетовий колір, грамнегативні – у червоний.

Відношення бактерій до фарбування за Грамом визначається їх здатністю утримувати комплекс генціанового фіолетового з йодом, що утворилися в процесі фарбування. Це залежить від відмінностей у хімічному складі та проникності клітинної стінки грампозитивних та грамнегативних бактерій пептидоглікан багатошарових, з ним пов'язані тейхоєві кислоти.

У грамнегативних бактерій пептидоглікан одношаровий, є зовнішня мембрана, до складу якої входять фосфоліпіди, ліпопротеїди, білки та складний мепополісахарид (ЛПС). Всю зовнішню мембрану пронизують білки – порини, що забезпечують дифузію різних сполук. Таким чином, у грампозитивних бактерій створюються оптимальні умови для міцної фіксації барвника та резистентності до знебарвлення спиртом.

До грампозитивних бактерій відносяться старілококи, стрептококи, коринебактерії дифтерії, мікобактерії туберкульозу та ін., до грамнегативних – гонококи, менінгококи, кишкова паличка та ін. Деякі види бактерії можуть забарвлюватися за Грамом структуру клітинної стінки. Тому для фарбування потрібно брати завжди молоді, 1-добові культури.

Основна помилка, що допускається при фарбуванні за Грамом, полягає в "перезнебарвленні" мазка етиловим спиртом. Грампозитивні бактерії при цьому можуть втрачати початкове забарвлення генціановим фіолетовим і набувати червоного кольору (характерний для грамнегативних бактерій) в результаті подальшого дофарбування мазка фуксином грамнегативні бактерії, у свою чергу, можуть зберігати синьо-фіолетовий колір генціанового фіолетового. Для правильного фарбування слід суворо дотримуватися техніки знебарвлення.

У нормі у жінки поза лактацією відсутні виділення із грудей. Рідина (ексудат), що з молочної залози, аналізують шляхом взяття мазків-відбитків. Досліджується також вміст кіст та шкірних виразок.

Для чого береться аналіз – мазки з молочної залози

За допомогою цього методу визначається хвороба, що спричинила появу виділень із молочних залоз. Проводиться цитологічний аналіз рідини визначення клітинного складу. При злоякісних пухлинах у мазку визначаються атипові (ракові) клітини. За допомогою мазків-відбитків діагностують:

• рак грудей
• мастопатії та мастити;
• галакторею – виділення молока їхніх залоз, пов'язане з гормональним збоєм;
• туберкульоз молочних залоз;
• доброякісні освіти;
• закупорку та розширення проток;
• вміст кіст і ранових поверхонь

Як проводиться обстеження молочної залози

Відокремлюють із сосків і ран на шкірі наносять на скельце, підсушують і відправляють в лабораторію.

Для дослідження вмісту кіст проводиться пункція із забором рідини. Укол робиться тонкою голкою, тому знеболювання не потрібне. Після взяття аналізу хвора йде додому. До місця проколу жінка вдома прикладає лід. Пунктат наносять на скло та відправляють на дослідження.

Процедура проводиться амбулаторно та не вимагає госпіталізації. Перед нею не можна приймати препарати, що змінюють згортання крові. У день дослідження заборонено наносити на груди та пахвову ділянку крему, спреї, дезодоранти.

Результати дослідження мазків молочної залози

У лабораторії матеріал забарвлюють та розглядають під мікроскопом:

• при травмах та незлоякісних захворюваннях молочних залоз у рідині присутні кров та лейкоцити. Можуть виявлятись клітини доброякісних пухлин. І тут жінку обстежують додатково;
• при раку молочної залози у відділяється знаходять атипові (ракові) клітини - великі, неправильної форми з кількома дрібними «ядерцями». Точність аналізу наближається до 100%. Під час дослідження визначають тип злоякісної пухлини;
• при початкових стадіях раку грудей змінені клітини в мазку визначаються який завжди. У 15% онкологічний процес виявляють іншими методами – УЗД доплерографією, МРТ. За сумнівного результату жінку обстежують повторно.

Взяття мазків-відбитків із молочної залози – малотравматичний та інформативний метод діагностики раку та інших патологій молочної залози.