Tükürüğün kristal yapısı. diş sağlığını korumak

Bölüm 2. Duodenal ülser tedavisinin etkinliğinin gerçek tanı ve kontrolü sorunları. Gastroduodenal patolojide tükürük kristalografisinin özellikleri (literatür taraması).

2.1 Duodenal ülserde mukozal bir kusurun araçsal tanımı.

2.2 Duodenal ülserde inflamasyon evresinin morfolojik tanısı.

2.3 Helicobacter pylori enfeksiyonunun mevcut tanı durumu.

2.4 Peptik ülser tedavisinin etkinliğinin tanısında ve değerlendirilmesinde tükürük kristalografisi kullanma olanakları.

Bölüm 3. Araştırmanın kapsamı ve yöntemleri.

Bölüm 4. Duodenal ülserde tükürüğün kristalografik resminin özellikleri.

Bölüm 5. Araştırma sonuçlarının tartışılması.

Bölüm 6. Sonuçlar.

Teze giriş (özetin bir kısmı) "Duodenal ülser tedavisinin etkinliğinin teşhisinde ve izlenmesinde tükürüğün kristalografisi" konusunda

Tez araştırması için referans listesi Tıp Bilimleri Adayı Vorobyov, Alexander Viktorovich, 2004

Lütfen yukarıda sunulan bilimsel metinlerin inceleme için gönderildiğini ve orijinal tez metinlerinin (OCR) tanınmasıyla elde edildiğini unutmayın. Bu bağlamda, tanıma algoritmalarının kusurlu olmasıyla ilgili hatalar içerebilirler. Teslim ettiğimiz tez ve özetlerin PDF dosyalarında böyle bir hata bulunmamaktadır.

NİHAİ YETERLİLİK ÇALIŞMASI
"AKR farelerinde akut lösemiyi saptamak için kristalloskopi kullanımı"

Giriş ................................................ .. ................................................ 3
Bölüm I. Literatürün Gözden Geçirilmesi ................................................................ .. ................ 3
1.1 Biyolojik sıvıların kristalografisi ................................ 6
1.1.1 Maddenin kristal halinin temel kavramları .......... 6
1.1.2 Canlı sistemlerde kristalleşme süreçleri .................................................. .... 8
1.1.3 Biyolojik sıvıların kristalografik özellikleri ... 8
1.1.4 Biyolojik sıvıların morfolojisi ................................................................ .... 8
1.2 Kristalografik araştırma yöntemleri ..................................... 12
1.2.1 Biyolojik sıvıların kristalleşmesi olgusunun incelenmesi için ön koşullar ................................................. ................................ ............. 12
1.2.2 Kristalografik araştırma yöntemleri hakkındaki fikirlerin mevcut durumu ................................................ ........................ ................................. on sekiz
1.2.2.1 Biyolojik substratların thesio-kristaloskopi tekniğinin genel özellikleri ................................................ ................................................................ 25
2. Araştırmanın nesneleri, amaçları ve yöntemleri ................................................. 26
2.1 Çalışmanın amaçları, hedefleri ve aşamaları ................................................................. ..... 26
2.2 Bulaşıkların ve çalışma alanının hazırlanması ................................................................ ... 28
2.3 Uygulanan araştırma yöntemleri ................................................................. 28
2.3.1 Tesio-kristaloskopik test tekniği ................................ 28
2.4 Verilerin istatistiksel olarak işlenmesi ................................................................. ...... 43
3. Çalışmanın sonuçları ................................................................ ........ ........ 44
3.1 Lösemili sağlıklı ve yapay olarak enfekte olmuş farelerin idrar morfolojisi ................................................. ................................ .................................. .................... 44
3.2 Normal ve patolojik koşullarda (lösemi) farelerde idrarın tesigrafik fasiyesini değerlendirmek için ana kriterler .................................. ................................. .......... 46
3.3 AKR hattının fareleri ................................................................ .. ................. 49
3.4 Lösemi gelişiminin dinamikleri .................................................. ... ... elli
3.5 Sonuçlar ................................................................ ... ......................
Kullanılan literatür listesi ................................................................ ................. 52

giriiş

Modern biyoteknolojiler, doğa bilimlerinin çeşitli alanlarındaki bilimsel başarıların bir sentezidir: tıp, biyoloji, matematik, fizik, kimya ve diğer bilimler. Fizikte Nobel Ödülü sahibi Zh.Alferov, özellikle son yıllarda öğrencileri tarafından fizik ve biyoloji, fizik ve tıbbın kesiştiği alanlarda yapılan çalışmalarda önemli sonuçlar elde edildiğini kaydetti. Böyle bir örnek, en akut modern sosyal sorunu çözme yaklaşımıdır - malign hastalıkların teşhisi ve etkili tedavisi. Her yıl milyonlarca çocuk ve yaşlı insan ve ayrıca yüksek değerli ırkların çiftlik hayvanları lösemiden ölmektedir. Tüm dünyada, insanlarda löseminin geliştirilmesi ve tedavisine yönelik teknolojiler, kesin olarak tanımlanmış bir genetik çizgiye sahip hayvanlar üzerinde incelenmektedir. 10 yıldan fazla bir süredir, FGU "KNIIG ve Rusya'nın PC FMBA'sı", AKR hattının fare modelinde nakledilebilir lösemi gelişimi üzerine araştırmalar yürütüyor. Deneysel ve klinik lösemi alanında elde edilen başarılara rağmen, tarif edilen patolojinin sorunu nihai olarak çözülmekten çok uzaktır.
Son 40 yılda, aktif olarak yeni bir teşhis yönü geliştirildi - biyolojik sıvıların kalitatif bileşiminin içlerinde kristal yapıların oluşumuyla belirlenmesine dayanan kristalloskopi.
Kristalografinin klinik uygulamasındaki ilk deneyim, geçen yüzyılın 60'lı yıllarının başlarına kadar uzanır. Başlangıçta, çoğu araştırmacı tesigrafik yöntemi kullandı. 1964'te Daems, prostat hipertrofisi ve karsinoması olan hastaların kan kristalogramları üzerine bir çalışma yaptı. J.Leal ve B.Finlayson (1977) idrar kristal oluşumunun özelliklerini belirledi.

A.A. Kozhinova ve L.S. Maslennikova (1968). V.Ya. Neretin ve V.I. Kiryakov (1977), bu yöntemi beyin ve omuriliğin çeşitli hastalıkları olan hastaların beyin omurilik sıvısını incelemek için kullandı. D. B. Kalikshtein ve diğerleri (1981), çeşitli böbrek hastalıkları olan hastaların idrarının tesigrafik resmini inceledi. VV Usin (1995), baş ve yüzde kronik nörojenik ağrı sendromları olan hastalarda beyin omurilik sıvısı ve tükürükteki kristalografik değişiklikleri inceledi. Ayrıca tesigrafi, pediatri, kadın hastalıkları, gastroenteroloji ve tıbbın diğer alanlarında tanı ve prognostik amaçlarla kullanılmaktadır.
Şu anda, kristaloskopik analiz neredeyse tüm biyolojik sıvıları (kan, idrar, tükürük, beyin omurilik sıvısı, safra, burun salgısı vb.) incelemek için kullanılmaktadır. Biyolojik sıvıların kristal yapıları, belirli bir organın durumu, vücudun ayrı bir sistemi ve bir bütün olarak vücut hakkında en önemli bilgileri içerir.
Şu anda, bilim adamlarının tıpta biyolojik sıvıların kristalografisi yönteminin kullanımına olan ilgisi yüksek kalmaktadır. Bu nedenle, biyosubstratların çok çeşitli özelliklerinin (biyokimyasal, immünolojik, morfolojik, biyofiziksel testler, vb.) Listelenen yöntemlerin çoğunun zayıf noktası, pahalı reaktifler, ekipman ve yüksek nitelikli personelin eğitimi nedeniyle yüksek maliyettir. Yukarıdakilerin tümü, yeterince büyük sayıda destek hizmetinin bakımını ve bakımını gerektirir.
Ancak değişen ekonomik koşullar, lösemi teşhisi için oldukça etkili ve ekonomik yöntemlerin geliştirilmesini ve uygulanmasını gerektirmektedir.
Kristalloskopik yöntem, önemli bir teşhis duyarlılığına sahiptir ve bu nedenle, önce adli kimyasal analiz pratiğinde ve daha sonra tıpta geniş uygulama alanı bulmuştur. Patolojik sürecin doğasını (alerjik, enflamatuar vb.) Belirlemede, anemi, ödem, zehirlenme ve ciddiyetinin varlığını belirlemede ayırıcı tanı yeteneklerini genişletmeyi mümkün kılmıştır. Biyopolimerlerin kristalografi yöntemini kullanarak çeşitli organların patolojisini belirlemek mümkündür. Bu teknik, malzeme parçacıklarının kristal oluşturan bir çözeltiyle kombinasyonunu içerdiğinden, kötü huylu sürecin doğası, oluşturulan kristal modelinden de değerlendirilebilir (Kontorshchikova K.N. ve diğerleri (2002-2012)).
Bu tezin amacı, akut lösemi teşhisi için AKR farelerinin idrarının kristalloskopisi için bir yöntem geliştirmekti.

1 Literatür taraması.
1.1 Biyolojik sıvıların kristalografisi

"Kristal" terimi, "buz" anlamına gelen Yunanca "krystallos" kelimesinden gelir. Bir kristalde atomlar ve moleküller düzenli bir yapı (kristal kafes) oluşturur. Kristaller, bağımsız bir dal - kristalografinin tahsisinin temeli olan hem cansız hem de canlı doğada önemlidir. Kristalografi, iç özelliklerin veya dış etkilerin etkisi altında kristalli bir ortamda meydana gelen fenomenler olan tek kristallerin ve kristal agregaların yapı ve fiziksel özelliklerinin bilimidir.

1.1.1 Maddenin kristal halinin temel kavramları

Kristaller bir buhardan, bir çözeltiden, bir eriyikten, amorf bir maddeden veya farklı bir fiziksel durumdaki bir maddeden oluşur. Kristalleşme, belirli dış koşullar altında başlar, örneğin sıvının aşırı soğutulması, buharın aşırı doyması, çözeltinin dehidrasyonu, kristalleşme merkezleri etrafında kademeli olarak birçok küçük kristal göründüğünde. Bir kristal, bir sıvı veya buhardan atomlar veya moleküller ekleyerek büyür.
Denge ve gerçek kristal formları vardır. Kristallerin denge şekli sadece denge koşulları altında elde edilir, yani. sonsuz yavaş bir kristalizasyon süreci ile.
Dış ortamın parametreleri zaman ve mekanda tekdüze olmadığından, kristal yapıda kaçınılmaz olarak çeşitli kusurlar ortaya çıkar. Bu nedenle, kristallerin gerçek (zorlanmış) formları sadece kristalin simetrisini değil, aynı zamanda dış büyüme koşullarının (kristal oluşumu ortamında çeşitli maddelerin konsantrasyonu, sıcaklık, basınç vb.) hangi kristaller çok hassas tepki verir. Bazı kristal formları Şekil 1'de gösterilmektedir.

a b içinde

G d e

ve h ve

Şekil.1 Çeşitli biyolojik sıvılardaki kristal formları: a, b-filamentli, c, d, e, f, g - radyal iğneli küresel formasyonlar; h-bastırılmış dendrit; ve - dallı dendrit.
Çoğu doğal ve endüstriyel katı malzeme polikristaldir, tek kristallere tek kristal denir. Metallerin ve tuzların kristalleşmesi sırasında, genellikle ağaç benzeri kristaller - dendritler - oluşur. Kristalizasyon sırasında, radyal olarak düzenlenmiş kristal iğnelerden oluşan bir veya birkaç merkezden sferülitler oluşur.

1.1.2 Canlı sistemlerde kristalleşme süreçleri

Hayvan ve insan organizmasının tüm biyolojik ortamları, liyotropik sıvı kristaller oldukları için belirli bir moleküler sıralı yapıya sahiptir. Canlı bir organizma, birçok yapısal bileşenin kendileriyle çevre arasındaki etkileşim süreçlerinin sürekli olarak gerçekleştiği karmaşık, oldukça dinamik bir sistemdir. Normal koşullar altında, organizmanın biyofiziksel parametrelerindeki dalgalanmalar nispeten dar sınırlarla sınırlıdır. Bununla birlikte, belirli durumlarda, yeterince uzun bir süre boyunca normal sınırların ötesine geçebilirler. Bazı durumlarda, bu, vücudun olağandışı yeni varoluş koşullarına adaptasyonundan kaynaklanır, diğerlerinde - kalıcı dekompansasyon ile derin bir homeostaz ihlali. Bu karmaşık yüksek dinamik süreçler, çeşitli biyolojik sıvıların veya biyopolimerlerin kristal yapılarının özelliklerine açıkça yansır.

1.1.3 Biyolojik sıvıların kristalografik özellikleri

Çeşitli hastalıkların patogenezinin bir bileşeni olarak bir metabolik bozukluğun, biyolojik sıvıların (bundan sonra biyoakışkanlar olarak anılacaktır) kimyasal bileşiminde ve fizikokimyasal özelliklerinde bir değişikliğe yol açtığı bilinmektedir. Biyoakışkanlarda meydana gelen karmaşık dinamik süreçler, biyoakışkan numunelerinin kristalizasyonu sırasında oluşan yapıların morfolojik özelliklerine yansır. Şu anda, biyolojik sıvıların yapısal analizine dayanan orijinal teşhis yöntemleri geliştirilmiş ve klinik uygulamada kullanılmıştır. Biyolojik sıvıların katı fazının yapıları, moleküller ve esas olarak biyolojik sıvıda çözünmüş organik ve mineral maddelerin mikro agregatları tarafından oluşturulur. Yapıların spesifik özellikleri, biyoakışkanın genel fizikokimyasal özellikleri, bu maddelerin moleküllerinin niceliksel ve niteliksel bileşimi ve bunların molekül içi ve moleküller arası kimyasal bağlar kurma yetenekleri ile belirlenir. Sonuç olarak, biyolojik sıvıların yapısı, öznenin biyosıvı ile yıkanan organlarının metabolizma durumu ve bir bütün olarak vücudun homeostazı hakkında bütünleyici bilgiler taşır.
Biyolojik sıvıların morfolojisi, tıp, veterinerlik ve diğer bilimler alanında kanıtlanmış bir bilimsel yöndür. Kristalizasyon sırasında bir biyosıvının yapı oluşumu açık modellere sahiptir.
Ağır metallerin (HM) özel bir yer işgal ettiği çeşitli toksinlerle çevre kirliliği, kanser de dahil olmak üzere bazı hastalıkların olasılığında önemli bir artışa yol açmaktadır. Vücut biyoakışkanının morfolojik analizinin yerel element analizi ile kombinasyonu, onkolojik hastalıkların erken teşhisi alanında araştırmalar için yeni bir analitik araç olarak hizmet edebilir.
Mikrokimyasal analiz, kristal optik ve tesigrafinin geliştirilmesindeki ilerlemeler, çeşitli patolojilerde insan ve hayvan biyolojik sıvılarının kristal yapılarını incelemek için temel oluşturdu. Biyolojik sıvılardaki kristalografik süreçler, bilim adamlarının giderek daha fazla ilgisini çekiyor. Geçtiğimiz on yıllar boyunca yürütülen çalışmalar, biyosıvıların kristalografik özellikleri ile vücuttaki patolojik süreçlerin gelişimi arasındaki ilişkiyi tanımlamaya odaklanmıştı; ya da biyoakışkanlarda kristal yapıların oluşumu üzerindeki dış etkilerin etkisini araştırma görevini üstlenirler (Skopinov S.A. ve diğerleri 1997).
Böylece, biyolojik bir sıvıda, çözeltiden kristallere kadar bir dizi yapısal yeniden düzenleme gözlemlenebilir. Kristalografik analiz, kristal kafesteki patolojik değişiklikleri supramoleküler seviyede tespit etmeyi mümkün kılar. Bu değişiklikler, patolojik sürecin gelişimi için erken bir tanı kriteri olarak hizmet edebilir.

1.1.4. Biyolojik sıvıların morfolojisi

Çeşitli biyosıvıların morfolojik resminin incelenmesi, doğa bilimlerinde, son yıllarda birçok disiplinden bilim adamları tarafından özel ilgi gösterilen iyi bilinen bir yöndür. Şu anda, hastalığın belirgin klinik belirtileri aşamasında ve presemptomatik aşamada, yani gelişme düzeyinde vücudun durumu, bireysel organ ve dokuların işlevi hakkında bilgi elde etmek için bir yöntem geliştirilmiştir. bir doğanın patolojik süreci (inflamatuar, onkolojik, taş oluşumu, hipoksik-iskemik, sklerotik vb.). Çeşitli biyopolimerlerin kristalografi yöntemi, kurma ve sonuçları dikkate alma tekniği açısından basittir. Standart bir ince kesit olan susuz (kurutulmuş) bir biyolojik sıvı damlasının morfolojik resmi incelenmiştir. Örneğin, bir damla idrar incelenirken böbrek dokusundaki taş oluşum sürecinin aktivitesi ve mevcut veya ortaya çıkan bir böbrek taşının (ürat, kalsiyum oksalat, kalsiyum fosfat) bileşimi belirlenebilir; genitoüriner sistemin akut veya kronik kandidiyazisi, böbrek dokusunda hipoksik-iskemik hasar ve sürecin ciddiyeti (hipoksik nefropati, interstisyel nefrit, akut böbrek yetmezliği, böbrek enfarktüsleri); bakteriyel enfeksiyon (patojen türünü belirlemeden).
Bir damla biyolojik sıvı, bir kişinin neyle hasta olduğunu ve biyolojik yaşının ne olduğunu söyleyebilir. Gerçek bir mikroskop lamı üzerine bir damla kurutulmuş sıvı konur ve monitörde defalarca büyütülmüş bir görüntü belirir. "Aç karnına alınan bir damla tükürükte fraksiyonel üç ışınlı çatlaklar görülebilir, bu durgunluğun kanıtıdır. Ve kahvaltıdan sonra alınan bir damlada çatlak yoktur, yani tükürük bezlerinin kanallarının içinde olduğu anlamına gelir. Ama mide suyunun asiditesi biraz azaldı" Şimdi ekranda bir damla kan serumu var, kenarlı bir düğme gibi görünüyor ve radyal çatlaklarla kaplı, çatlakların yapısı dikkatli bir analize tabi tutuluyor. : periferdeki desen, vazospazm nedeniyle hastanın basıncının zaman zaman arttığını gösterir.
Profesör S.N. Shatokhina, vücudun şartlı olarak iki sisteme bölünebileceğini açıklıyor: hücresel ve hücresel olmayan. Tüm dünya öncelikle hücreleri inceler, ancak hücreleri birbirine bağlayan biyolojik sıvılar, yaşamsal aktiviteleri hakkında birçok bilgi taşır. Bir damla biyosıvı kuruduğunda, içinde kodlanan bilgiler görünür hale gelir. Araştırmacılar, "Kararlı bir duruma geçişte, bağların gücü iki büyüklük mertebesi kadar artar" diye açıklıyor araştırmacılar, "Suyu çıkardıktan sonra, üzerinde daha önce çözünmüş halde bulunan elementlerin uzamsal düzeninin bir modelinin bulunduğu bir film kalıyor. durum sabittir”, hastalığa her zaman yapıyı değiştiren bazı kimyasalların birikimi eşlik eder, simetri bozulur ve Profesör S.N. Shatokhina hastada bulundu. Ve bu kalıpları bulmak için araştırmacılar damlaları kurutmak için özel bir yöntem geliştirdiler. Bir damla tükürük çok şey söyleyebilir. Çürük ve periodontitisi yansıtır. Ve ayrıca, örneğin, bir damla tükürükte lamel formlarının ortaya çıkmasına neden olan pürülan otitis. Bir damla mide suyunu analiz eden uzmanlar, kronik gastrit ve ülserleri ortaya çıkarır; eklem sıvısı - artroz; son olarak, gözyaşları - glokom, katarakt, retinadaki enflamatuar süreçler.
Bugün bilim adamları, klinisyenler ile yakın bir şekilde çalışarak gizli patolojileri görmelerine ve tedavi yöntemlerini iyileştirmelerine yardımcı oluyor. Araştırmacılar, biyoakışkanları analiz ederek bir kişinin gerçek biyolojik yaşını da belirleyebilirler. Kimyasal yapısı gereği kolesterol olan kan serumundaki katmanlı yapılar tarafından verilir. Ondan, gelecekte damarlarda aterosklerotik plaklar oluşur. Bu, en görkemli "yaşlanma belirteçlerinden" biridir. Ve bilim adamları ayrıca karşılıklı sağlık potansiyelini değerlendirir, bunun için bir test tüpündeki kan bir elektromanyetik alan veya bir lazerle ışınlanır - böyle bir maruziyetten sonra, moleküller arası bağlar yok edilir, bu nedenle, bu tür kan kuruduğunda, film deseni farklı olacaktır, Sağlıklı bir insan için, ışınlamadan sonra bağları eski haline getirmek dört saat sürer. Bir gün sürerse - üç - endişelenmelisin. Araştırmacılar, bu yöntemin bir kişinin aşırı koşullarda çalışıp çalışamayacağını belirlemek için kullanılabileceğine inanıyor.

1.2 Kristalografik araştırma yöntemleri.
1.2.1 Biyolojik sıvıların kristalleşmesi olgusunun incelenmesi için ön koşullar

Geçen yüzyılın son çeyreğinde, klinik teşhiste alternatif bir yaklaşım olarak pratik uygulamaları açısından incelenen kristalografik araştırma yöntemlerine bilim camiasının önemli bir ilgisi vardı. Çeşitli biyolojik substratların kristalizasyon kapasitesinin entegre bir değerlendirmesine izin verirler. Son yıllarda, aktif olarak yeni bir teşhis yönü geliştirildi - bir sıvının kalitatif bileşiminin kristal yapıların oluşumuyla belirlenmesine dayanan klinik kristalografi.
Kimyasalların kristalografik özelliklerine göre kalitatif olarak belirlenmesi yöntemi ilk olarak öğrenci M.V. Lomonosov - T.E. Lovits. 1804'te, ikincisi, maddelerin kalitatif analizi için iki yöntem tanımladı - "yıpranmış tuz baskınları" yöntemi ve kristalleşen bir maddenin çözeltisine başka bir bileşen ekleyerek normal kristal oluşumunu değiştirmeye dayanan bir yöntem, böylece temeli attı. kristalografide iki modern eğilim için:
1) doğal sıvıların kristalografisi - buharlaşma sırasında oluşan kristaller tarafından bir sıvının kalitatif bileşiminin belirlenmesine dayanan bir yöntem;
2) tesigrafi - test sıvısına standart kristal oluşturan bir çözelti eklemeye ve test sıvısı varlığında standart çözeltinin kristallerindeki değişiklikleri analiz etmeye dayanan bir yöntem.
Kristalografinin klinik uygulamasındaki ilk deneyim, geçen yüzyılın 60'lı yıllarının başlarına kadar uzanır. Başlangıçta, çoğu araştırmacı tesigrafik yöntemi kullandı. 1964'te Daems, prostat hipertrofisi ve karsinoması olan hastaların kan kristalogramları üzerine bir çalışma yaptı. Leal J. ve Finlayson B. (1977), idrar kristal oluşumunun özelliklerini belirledi.
Yerli tıpta kristalografik araştırma (CGI) yöntemlerinin kullanımı ilk olarak çalışmada bildirilmiştir.
Kozhinova A.A. ve Maslennikova L.S. (1968). Neretin V.Ya. ve Kiryakov V.I. (1977) bu yöntem, çeşitli beyin ve omurilik hastalıkları olan hastaların beyin omurilik sıvısını incelemek için kullanıldı. D. B. Kalikshtein ve diğerleri (1981), çeşitli böbrek hastalıkları olan hastaların idrarının tesigrafik resmini inceledi. Usin V.V. (1995), baş ve yüzde kronik nörojenik ağrı sendromları olan hastalarda beyin omurilik sıvısı ve tükürükteki kristalografik değişiklikleri inceledi. Ayrıca tesigrafi, pediatri, kadın hastalıkları, gastroenteroloji ve tıbbın diğer alanlarında tanı ve prognostik amaçlarla kullanılmaktadır.
Şu anda, kristalografik analiz neredeyse tüm biyolojik sıvıları (kan, idrar, tükürük, beyin omurilik sıvısı, safra, burun salgısı vb.) incelemek için kullanılmaktadır. Biyolojik sıvıların kristal yapıları, ilgili organ ve dokuların durumu hakkında en önemli bilgileri içerir.
Oftalmik patolojinin teşhisi için gözyaşı sıvısının (LF) kristalografik analizi ilk kez kullanıldı
Chensova O.B. 1985 yılında ortak yazarlarla. Bir lakrimal sıvı tesigrafisi yöntemi önerdiler - bir alkol bakır klorür çözeltisi ilavesiyle kristalografi. 0.02 ml gözyaşı konik bir test tüpüne yerleştirilir ve sürekli çalkalanarak 0.1 ml %2'lik bir alkol bakır klorür çözeltisi eklenir. Tüp bir pamuklu çubukla kapatılır ve oda sıcaklığında oturmaya bırakılır. 1 saat 20 dakika sonra, elde edilen çözeltiden bir damla, iki saat boyunca 25°C'lik bir termostatta bir Petri kabına yerleştirilen bir cam slayta uygulanır. Kuluçka süresinin sona ermesinden sonra, sonuçların makro ve mikroskobik bir değerlendirmesi yapılır.
Gözlerin ve yörüngenin inflamatuar, dejeneratif ve tümör hastalıkları olan hastalarda tesigrafik resmin özellikleri not edildi. Chentsova O.B.'ye göre. ve diğerleri, normal yetişkinlerde ve çocuklarda gözyaşı sıvısının kristalografik resmi (CHC), şeffaf, uzun, nadiren aralıklı silindirik kristallerdir ve bunlar düzenli bir geometrik desende, çoğunlukla bir üçgen şeklinde toplanır. Chensova O.B. ve diğerleri (1989), orbital hastalıkların ayırıcı tanısı için CGI SF'yi gerçekleştirmiştir. Yazarlar, endokrin oftalmopatisi, inflamatuar orbital hastalıkları ve neoplazmaları olan hastalarda gözyaşı preparatlarında normdan niteliksel farklılıklar ortaya çıkardı.
O zamandan beri kristalografik inceleme, bu ve diğer yazarlar tarafından çeşitli göz hastalıklarının tanısında kullanılmıştır.
Tyurikov Yu.A., Pokoeva V.A. (1992), doymuş sulu bir glisin çözeltisinin eklenmesi ve oda sıcaklığında günlük maruz kalma ile tesigrafi tekniğini kullandı. Göz içi ve orbital neoplazmaları olan hastaların kristalogramlarında karakteristik değişiklikler ortaya çıktı.
Bazı yazarlar SF tesigrafisini sadece teşhis için değil, aynı zamanda etkilenen gözün CG SF'sinin dinamik izlenmesi için de kullanmıştır (Kokarev V.Yu. ve diğerleri, 1990; Somov E.E., Brzhesky V.V., 1994; E.I. Ustinova ve diğerleri (Kokarev V.Yu. ve diğerleri, 1990). 1996), tüberküloz sürecinin aktivite fazının ayırıcı tanısı ve netleştirilmesi için ek bir laboratuvar testi olarak SF'nin kristalografik çalışma yöntemini önerdi.
Chukhman T.P. (1999), bir gözyaşı ve kristal oluşturan çözelti karışımının uzun süreli çökelmesini, çalışma süresini azaltan santrifüjleme ile değiştirmeyi önererek SF tesigrafi tekniğini geliştirdi. Ayrıca, çeşitli enflamatuar göz hastalıklarında SF'nin CGI'si yapıldı ve klinik öncesi aşamada bile komplikasyonları zamanında tespit etmeyi mümkün kılan karakteristik kristal türleri tanımlandı. Buna ek olarak, yazar çeşitli dış faktörlerin (preparatların kuruma sıcaklığı, nem) kristalojenezi üzerindeki etkisini ve ayrıca gözyaşı toplama yöntemlerini inceledi.
Bilim adamlarının tıpta biyolojik sıvıların tesigrafi yönteminin kullanımına olan ilgisi günümüzde yüksek kalmaktadır. Bununla birlikte, tesigrafi, ek reaktiflerin kullanılmasını gerektiren ve sonuçları yorumlamanın zor olduğu oldukça zahmetli bir teknik olarak ortaya çıktı (Shatokhina S.N., Shabalin V.N., 1997). Ayrıca tesigrafi yönteminin dayandığı kristalizasyon işleminin düzenlilikleri bilinmemektedir. Daha basit ve daha erişilebilir kristalografik çalışma yöntemlerinin araştırılması, doğal biyosıvı preparatlarının kristalografisine ayrılmış bir dizi çalışmanın ortaya çıkmasına yol açmıştır.
Sonuç olarak, çeşitli hastalıkların teşhisinde birincil test olarak kullanılabilecek bir ekspres yöntemin geliştirilmesine ihtiyaç vardır. Ayrıca, seçimi için gerekli gereksinimler, yeterli derecede doğruluk ve önemli maddi kaynaklara yatırım yapmadan yaygın kullanım olasılığıdır (Menshikov V.V., 1988; Nazarenko G.I., Kishkun A.A., 2000; Zelenin V.A., Bulychev V.F., Steklova G.P. ve diğerleri, 2004).
Tıbbın çeşitli alanlarından uzmanlar bu sorunla ilgilenmeye başladı. Bunun sonucu, bir yandan invaziv olmayan, diğer yandan hızlı bir şekilde ön sonuçların elde edilmesini mümkün kılan tükürük teşhisinin hızlı gelişimiydi (Borovsky E. V., Leontiev V. K., 1991; Sukmansky O. I., 1991). ; Komarova L.G., Alekseeva O.P., 1994; Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997; Butaev M.T., 1998; Grigoriev I.V., Chirkin A.A., 1998; Bulgakova V.A., 1999; Erichev I.V., Korotko G.G., Reshetova I.V., 1999; Denisov A.B., 2000, 2001;).
Kimyasal bileşiklerin kristalleşme yeteneklerine göre kalitatif tayini için yöntemler ilk olarak 1804-1805'te M. V. Lomonosov'un bir öğrencisi olan T. E. Lovits tarafından önerildi. Çalışmalarında, incelenen maddelerin yapısının kalitatif bir analizi için iki orijinal testi tanımladı. Bu, "yıpranmış tuz biriktirme yöntemi" (kristal tortuları) ve ayrıca mikrokristal reaksiyonlardır. Yukarıdakilerden ilki, daha sonra geliştirilen ilaçların kalitatif tayini için yöntemin temeliydi (Knizhko P. O., 1956; Bubon N.T., Puzyrevsky K. Ya., 1965; Nikolskaya M.N., Gandel V.G. , Popkov V.A., 1965; Lobanov V. I. , 1966). Mikrokristal reaksiyon tekniği artık adli tıpta uygulama alanı bulmuştur (Belova A.V., 1960; Semenova T.D., 1972; Taher M.A. Assad, 1995).
İnsan biyolojik sıvılarının kristalizasyonu ile ilgili fikirlerin geliştirilmesi bağlamında, çeşitli patolojik durumların teşhisinde uygulanabilirliği sorusu önem kazanmaktadır (Kokueva O.V., Savina L.V., Li A.M., 2000; Zubeeva G.N., Motyleva I.M. , Potekhina Yu.P., 2001; Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2001; Vorobyov A.V., Vorobieva V.A., Neshtakova N.L., 2002; Alekseeva O.P. , Vorobyov A.V., 2003; Volosnikova N.N., G.. Savinaev G., 2003 Rapis E.G., 2003; Anaev E. Kh., Shatokhina S.N.., Chuchalin A.G., 2004).
Bu bağlamda, kristaloskopik araştırma yöntemleri, biyolojik ortamın kalitatif ve kantitatif bileşiminde saklı metabolik bilgiyi deşifre etmek amacıyla, tıp biliminin oldukça ayrı bir dalı olarak seçilmektedir.
Ek olarak, birleşik bir analiz şeması, kristalografik çalışmaların birleştirilmesine ve basitleştirilmesine katkıda bulunabilir. Bu, hem ayırıcı tanıda hem de oryantasyon testi yaparken faydalı olacaktır.
Vücudun biyolojik substratlarının tanısal kristalizasyonunun sonuçlarının standardize edilmesinde önemli bir faktör, aynı zamanda, hastanın yüzlerinin bileşimindeki kalitatif ve kantitatif değişiklikler hakkında bilgi de dahil olmak üzere, kristaloskopik bir test üzerinde tek bir sonuç şekli olabilir. pratik olarak sağlıklı bireyler (yapıların sayısı ve boyutundaki değişiklikler, belirli bir biyosıvı için patolojik görünüm), oluşumlar, vb.).

1.2.2 Kristalografik hakkındaki fikirlerin mevcut durumu
Araştırma Yöntemleri

Kristalografik araştırma yöntemleri- serbest veya farklı kimyasal bileşimdeki temel maddeler tarafından başlatılan, kurutulmuş sıvı veya sıvı biyolojik materyalin kristal oluşumu olgusuna dayalı olarak, bir organizmanın ve / veya parçalarının metabolizması ve homeostazı hakkında bilgi çıkarmaya yönelik bir dizi metodolojik yaklaşım, takip edilen, kristalojenez sonuçlarının yorumlanmasıyla.
Son otuz yılda, tanısal kristalloskopiyi gerçekleştirmek için çok sayıda metodolojik yaklaşım oluşturulmuştur, ancak bunların çoğunun özü olarak sadece dehidrasyon süreci koşullarında bir değişiklik olduğu, ancak tek tek ayırmanın mümkün göründüğü belirtilmelidir. sadece temelde sadece üç seçenek: doğrudan analiz edilen biyolojik sıvının kurutmaya tabi tutulması durumunda serbest kristalizasyon; "biyoçevre - temel kristal oluşturan madde" sisteminin dehidrasyonunun sonucu, esas olarak ikincisinin yapı oluşumunun bir çalışmasına dayanarak görselleştirildiğinde, başlatılan kristalojenez; kısmi kristalizasyon (model kompozitler yöntemi), belirli bir biyolojik substratın kristaloskopik resminin tek tek bileşenlerini yeniden oluşturmak için bir dizi yöntem ve bu nedenle öncelikle bilimsel araştırma için önemlidir.
Genel olarak, bugüne kadar modern kristaloskopide aşağıdaki yöntemler önerilmiştir:
1) Klasik kristaloskopi (D.B. Kalikshtein, L.A. Moroz, N.N. Kvitko ve diğerleri, 1990; L.V. Savina, 1992, 1999; V.N. Shabalin, S.N. Shatokhina, 2001; Alekseeva O.P., Vorobyov A.V., 2003) en yaygın seçeneklerden biridir. özü daha önce belirtildiği gibi biyolojik sıvıların doğrudan kristalizasyonu olan bir dehidrasyon testi yapmak. Preparatların hazırlanması hem oda koşullarında hem de bir termostatta (37-400C) gerçekleştirilebilir, ancak çok sayıda literatüre göre biyolojik ortamların mikropreparasyonlarının hazırlanma süresi 1-2 gündür, bu açıkça gereksinimleri karşılamamaktadır. hızlı testler için. Bu bağlamda, bir mikro preparasyonun hazırlanması için harcanan süreyi optimize etmek için kurutma koşullarında önemli bir ayarlama yapılması gerekmektedir.
Bu kristaloskopik yaklaşımın, bir biyosıvının kristal oluşturma özelliklerini değerlendirmeyi mümkün kıldığı ve bu nedenle, yalnızca tanısal olarak önemli fasiyesler (kristalize numuneler) elde etmekle kalmayıp, aynı zamanda analiz edilen substratın ayrı bileşenlerinin varlığını da belirlediği belirtilmelidir ( Savina L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V. Yu. ve diğerleri, 2003). Bu konunun özel literatürde yeterli bir çözümü yoktur, ancak biyolojik çevre, biyoloji ve tıptaki patolojik kapanımların pratik bir tanımlaması olarak önemlidir - insan ve hayvanların patolojisinin patojenetik yönlerinin incelenmesi ve ayrıca ilaçlı ve ilaçsız tedavinin etkinliğinin makul seçimi ve değerlendirilmesi (Buiko A.S. , Tsykalo A.L., Terentyeva L.S. ve diğerleri, 1977; Erichev I.V., Korotko G.G., Reshetova I.V., 1999; Zaichik A. Sh., Churilov L.P., 2001 ; Alekseeva O.P., Vorobyov A.V., 2003; Baidaulet I. O., 2003). Bu, dehidrasyonun kısmi modellemesi de dahil olmak üzere biyolojik sıvıların bileşenlerinin kristalojenezinin özelliklerinin araştırılmasını gerektirir. Sorulan soruyu çözmenin belirli yolları L. V. Savina ve diğerleri tarafından önerildi. (2003), çalışmalarına göre, biyo-ortamın 1 bileşenini açıkça karşılık gelen bir konsantrasyonda içeren monosistemler olan çözeltilerin kristal oluşumunun aşamalı olarak incelenmesiyle biyokristalleşmenin tek bir resmini yeniden oluşturmanın mümkün olduğu görülüyor. ona (“model kompozit”). Bu metodolojik yaklaşımın tüm önemi ile birlikte, bu durumda biyosubstrat kristalojenezinin doğasını belirleyen en önemli faktörlerden birinin dikkate alınmadığı kabul edilmelidir - biyoakışkanın bileşenleri arasında farklı olan moleküller arası etkileşimlerin varlığı. sırayla, kesin kristaloskopik modellerin oluşumunda, özellikle dehidrasyon işlemi sırasında kristalleşme kayışlarına dönüştürülen fasiyeslerin "birincil bölgelerinin" sayısını ve çapını belirlemede önemli bir rol oynayan kimyasal yapıda (Koledintsev M.N., 1999; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maychuk N.V., 2002; Koledintsev M.N., Maichuk N.V., 2002).
Kristal oluşumunu modellemek için benzer girişimler, daha sonra tartışılacak olan G. G. Korotko (2000) tarafından yapılmıştır.
2) Thesigrafi (Nefedova N.B., Tsyvenkova L.A., 1985; Moroz L.A., Kalikshtein D.B., 1986; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., 1990; Kidalov V.N.., Khadartsev A.A., Yakushina G.N., 2004) kristalloskopik bir test gerçekleştirmek için yaygın yöntemlerdir ve kristal oluşum süreçlerini başlatmak için insan vücudunun kurutulmuş biyosıvısına çeşitli kimyasalların ek olarak eklenmesidir. Bunu yapmak için, çoğu kompleksleştirici özelliklere sahip çok çeşitli kristal oluşturucular (NaCl, CaCl2, MgCl2 ve diğerleri) kullanılır ve konsantrasyonlar farklı yazarlar arasında büyük farklılıklar gösterir.
Bu kristalografik yöntemin kullanıldığı laboratuvarlarda uygulaması klasik tesigrafi, yani. farklı koşullar altında elde edilen numunelerin karşılaştırılmasındaki objektif zorluklar ve eşit olmayan fonksiyonel durum nedeniyle elde edilen bilgilerin yorumlanmasını önemli ölçüde karmaşıklaştıran, bağımsız bir numune olarak bir biyomateryal ve temel bir kristal oluşturan maddeden oluşan bir sistemin dehidrasyon sonucunun dikkate alınması incelenen kişilerin organizmasının Bu bağlamda, yukarıda açıklanan yaklaşıma uygun olarak oluşturulan tez grafiği, önceden var olan "desenler" ("fotoğrafik" yaklaşım) ile elde edilen sonucun bir karşılaştırmasını gerektirir (Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2002; Baidaulet I.O., 2003). ; Beloglazov V.G., Atkov E.L., Fedorov A.A. ve diğerleri, 2003; Volosnikova N.N., Muzlaev G.G., Savina L.V. ve diğerleri, 2003; Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N., 2004) veya Ta'nın ampirik olarak bulunan değerleri G.A., 1994; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maychuk N.V., 2002), ancak bu faktör, tesigrafik teşhisin bilgi içeriğini ve güvenilirliğini kesinlikle ve önemli ölçüde azaltır.
Şu anda, tesigrafik fasiyesleri tanımlamak, analiz etmek ve yorumlamak için genel kabul görmüş bir şema algoritmasının olmadığını, tıpkı onu elde etmek için tek bir yöntem olmadığını vurgulamak önemli görünüyor.
Temel maddelerin kontrol örneğinin kullanımına ilişkin tek raporlar vardır (Tarusinov G.A., 1994), ancak bilinmeyen nedenlerle kullanımı keskin bir şekilde sınırlıdır (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2003; Martusevich A.K. , 2004).
3) Profil dehidrasyonu (Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 1999). Biyolojik sıvıların, belirli bir konsantrasyonda bir lesitin çözeltisi ile önceden işlenmiş bir cam slayta uygulanmasını içerir. Yazarlara göre, lesitin yardımıyla kristallerin baza olan afinitesini değiştirmek ve sonuç olarak dehidrate biyosubstratın termodinamik özelliklerini dönüştürmek mümkün görünmektedir.
4) Vakum kristalloskopisi (Savina L.V., 1999), müstahzarların vakum altında hazırlanmasını (kurutulmasını) içerir. Bu, suyu alınmış numunenin dış ortamdan izolasyonunu sağlar, biyoortamın sıvı kısmının uzaklaştırılması ve biyokristalizasyon işlemlerinin gerçekleştirildiği nispeten kapalı bir sistem oluşturur.
5) Kapalı bir hücrede biyolojik sıvıların kristalizasyonu (Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997). Şekillendirme örneğinin dış ortamdan izolasyonu vakumlu kristaloskopiye benzer şekilde sağlanır, ancak teknik olarak bu yöntem pratik kullanım için daha uygundur, çünkü vakum koşullarının oluşturulmasını gerektirmez, ancak yalnızca içinde bulunduğu kapalı bir hücrenin kullanılmasını gerektirir. doğrudan mikroskobik analiz yapmak mümkündür. Değişikliğin yazarları, biyomateryalin ön santrifüjünü kullandı.
6) Kemer kristalloskopisi - kristal kemerlerinin ve bireysel kristal oluşumların çalışmasına dayanan kristalografik bir araştırma yöntemi (Koledintsev M.N., 1999; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maychuk N.V., 2002; Koledintsev M.N., Maychuk N.V., 2002). Yöntemin fizikokimyasal temeli, bu biyolojik ortamın elementleri olan maddelerin moleküler ağırlıklarına bağlı olarak biyolojik sıvıların bileşen bileşiminin heterojenliği ve sonuç olarak, suyun kademeli dehidrasyonu sırasında fasiyes boyunca farklı hareket etme yetenekleridir. örnek ve fasiyes oluşumu. Bu, kaydı biyolojik sıvının bu özelliğini yargılamayı mümkün kılan bir veya (çok daha sık) birkaç kristalizasyon kuşağının oluşumuna yol açar (Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maychuk N.V., 2002).
7) Kama şeklindeki dehidrasyon yöntemi (V.N. Shabalin, S.N. Shatokhina, 2001-2005). Saydam bir düzlem üzerine yerleştirilmiş bir damla biyolojik sıvının suyunu kurutmak için bir yöntem. Damla, enine kesitte, radyal yönde eşit olmayan bir dehidrasyon oranı için koşullar yaratan bir kama şeklindedir. Bu, fizikokimyasal parametrelere göre susuz damlanın hacmindeki çözünmüş maddelerin ozmoforetik hareketine ve test sıvısının elde edildiği organizmanın durumuna karşılık gelen net, kesinlikle bireyselleştirilmiş yapıların oluşumuna neden olur.
8) Polarize edici mikroskopi (Rapis E.G., 1976; Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997; Savina L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V. Yu. ve diğerleri, 2003) - serbest veya başlatılmış kristalin sonuçlarını değerlendirmek için bir yöntem polarize ışıkta biyolojik bir sıvının oluşumu, hem bir bütün olarak fasiyesin hem de bireysel yapısal unsurlarının bazı ek özelliklerini tanımlamayı ve ayrıca dokusunu karakterize etmeyi mümkün kılar. Kristalojenez sonuçlarının görselleştirilmesine yönelik yaklaşımın evrensel bir modifikasyonudur ve biyolojik ortamları incelemek için kristalografik yöntemlerden herhangi birine ek olarak kullanılabilir.
9) Substrat topluluğu (G. G. Korotko, 2000), biyolojik substratların (lipidler, proteinler, polisakkaritler) bileşenleri olan bireysel bileşenlerin kristal oluşumunu modellemeye izin veren yardımcı bir kristalografik yöntemdir. Bu durumda, "model kompozitler" yöntemiyle karşılaştırıldığında, biyolojik ortamın gerçek bileşimine ürün çeşitliliği açısından daha büyük bir yaklaşım elde edilir, ancak bileşenlerin tam oranı açısından değil, ancak, ana biyokimyasal elementleri ile biyoakışkandaki değişiklikleri hesaba katar.
10) Sıvı kristal termografisi (Buiko A.S., Tsykalo A.L., Terentyeva L.S. et al., 1977; Shkromida M.I., Pospishin Yu.A., 1977) kristalografik çalışmalar için umut verici bir tekniktir, temel nokta kolesterik sıvı kristal kullanımıdır. (erime sıcaklığı aralığı 33.5-38.20C veya 36.8-41.20C) kolesterilpelargoleat, kolesteriloleat vb. sistemlerle çalışılan yüzeylerin kaplamaları. Bu durumda cilt, bileşimin uygulandığı bir “alt tabaka” olarak kullanılır. Sıvı kristallerin durum dönüşümünün yorumlanması, özel bir spektrofotometre kullanılarak değerlendirilir.
Bu metodolojik yaklaşımın yeterince geniş teşhis yetenekleri, açık vaadi, basitliği ve uygulama hızına rağmen pratikte şu anda kullanılmamaktadır.
11) Biyolojik sıvılardan bir taşıyıcıya enerji-bilgi aktarımı yöntemi (Vorobiev A.V., Vorobyova V.A., Neshtakova N.L. ve diğerleri, 2002), biyolojik ortamdan "saf bezelye süt şekerine", daha sonra, bir cam slayt, 0.1 ml bazik madde (%5 sulu bakır sülfat çözeltisi) ile birleştirilirler. Mikropreparasyonların hazırlanması 24 saat boyunca karanlık bir odada gerçekleştirilir.Değerlendirme, elde edilen kristalize numunelerin kalitatif analizi ile yapılır.
Biyolojik substratların dehidrasyonuna dayanan testi gerçekleştirmek için bu kadar çeşitli metodolojik seçenekler, muhtemelen farklı yaklaşımların kullanılmasının elde edilen sonuçların daha iyi tanımlanmasına katkıda bulunmasından kaynaklanmaktadır (tablo). Metabolitlerin toplamında saklı bilgilerin çıkarılması, biyomateryaldeki nicel ve nitel oranları, kristaloskopik teşhisin en önemli ve önemli görevlerinden biridir. Çok sayıda yazarın bakış açısından (Alekseeva V.I., 1965; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., 1990; Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. ve diğerleri, 1990; Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997; Plaksina G.V., Rimarchuk G.V., Butenko S.V. ve diğerleri, 1999; Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2001, 2004; Alekseeva O.P., Vorobyov A.V., 2003; Baydaulet I.O., 2003; Rapis E.G., 2003; Savina L.V. By, 2003; Savina L.V. A.A., Deev L.A., 2004; Zalessky M.G., Emmanuel V.L., Krasnova M.V., 2004; Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N., 2004; Gromova I.P., 2005), metabolik değişimlerin ortaya çıkmasında birincil rol insan ve hayvan vücudunun çevreleri, bireysel oluşumlar (kristal ve amorf doğa) arasındaki deterministik ilişkiler dikkate alınarak niteliksel bileşene verilir. Gözlenen farklılıkların nesnelliği için açık bir kriter olmasına rağmen, nicel bileşene çok daha az dikkat edilir.

1.2.2.1. Biyolojik substratların thesiokristaloskopi tekniğinin genel özellikleri

Yukarıda sunulan literatür verilerinin analizine dayanarak, aynı cam üzerinde gerçekleştirilen klasik kristaloskopi ve karşılaştırmalı tesigrafinin eşzamanlı ve paralel performansına dayanan biyolojik substratların tesiokristaloskopisinin bütünleştirici bir yöntemi önerildi. Bu, hem biyolojik sıvının doğrudan kristalleşme kabiliyetini hem de araştırmacı tarafından belirtilen temel kristal oluşturucu madde ile ilgili başlatma potansiyelini değerlendirmeyi mümkün kılar (Tablo 1).

Tablo 1. Bazı kristalografik yöntemlerin karşılaştırmalı özellikleri

• deneysel kısım

• 2.Araştırmanın nesneleri, amaçları ve yöntemleri

• 2.1. Çalışmanın amaçları, hedefleri ve aşamaları.

• Bu çalışmanın amacı sağlıklı ve lenfoid lösemili (LL) farelerden alınan kurutulmuş idrar örneklerinin morfolojisinin incelenmesi.
• Çalışmada belirtilen hedefe ulaşmak için aşağıdakiler formüle edilmiştir. görevler:
• 1. Biyosubstratların kristalografisi sorunları üzerine modern literatürü incelemek.
• 2. Biyosubstratların thesio-kristaloskopi yapma tekniğine hakim olmak.
• 3. Sağlıklı farelerde idrar kristal oluşumunun doğasını değerlendirin.
• 4. LL'li farelerde başlatılan idrar kristalojenezinin özelliklerini belirleyin.
• Çalışma, Kirov Hematoloji ve Kan Transfüzyonu Araştırma Enstitüsü'nün Kan ve Doku Koruma Laboratuvarı temelinde gerçekleştirildi.
• Araştırma aşamaları:

1. Araştırma için AKR hattının sağlıklı laboratuvar farelerinin hazırlanması.
2. AKR farelerine lenfoid löseminin aşılanması.
3. Sağlıklı farelerde ve lösemili farelerde inceleme için biyosubstrat örneklemesi (idrar).
4. Sağlıklı farelerden ve lösemili farelerden idrar mikropreparasyonlarının hazırlanması.
5. Sağlıklı farelerden ve lösemili farelerden alınan idrarın kurutulmuş mikropreparasyonlarının tesigrafik analizi.

• Sağlıklı farelerin ve lösemili farelerin idrarının tesigrafik "kalıpları" çalışmanın konusu oldu.
• Bu deneysel çalışmanın amacı, 10 sağlıklı farenin ve lösemili 10 farenin idrarıydı.
• Tesigrafik testte temel madde olarak aktif kristal oluşturucu olan %10'luk sodyum klorür çözeltisi kullandık.
• Kontrol grubundan (sağlıklı fareler), lösemili farelerden (deney grubu) alınan toplam 20 idrar mikropreparasyonu elde edildi.
• Çalışmanın deneysel kısmı, lösemili sağlıklı farelerden alınan kurutulmuş idrar örneklerinin morfolojisinin çalışmasını içeriyordu.

2.2 Bulaşıkların ve işyerinin hazırlanması

Çalışmada kullanılan gereçler (test tüpleri, ölçü pipetleri, cam lamlar) deterjan kullanılarak sıcak su ile yıkanmış, önce çeşme suyu ile durulanmış ve ardından saf su ile kurutulmuştur.
Ambalaj kağıdına önceden sarılmış kaplar, 120°C sıcaklıkta ve 1 atm basınçta 25 dakika boyunca bir otoklavda sterilize edildi.
Biyolojik sıvının örneklenmesi sırasındaki çalışmalar, Roszdrav Federal Devlet Kurumu "KNIIG ve PK" hayvanlarının laboratuvarında (vivaryum) gerçekleştirildi. Roszdrav Federal Devlet Kurumu "KNIIG ve PK" nın kan ve doku koruma laboratuvarında kan serumunun tesiokristalin fasiyeslerinin daha fazla elde edilmesi gerçekleştirildi. Çalışmadan önce oda 30 dakika kuvars lamba ile ışınlandı. Çalışmadan önce ve sonunda masaüstüne %70 alkol uygulandı.

2.3. Uygulamalı araştırma yöntemleri

2.3.1 Tesiokristalin test tekniği

Sağlıklı ve lösemi farelerinin biyosubstratlarının (kan serumu) kristal-optik özelliklerinin incelenmesi, thesiokristaloskopi yöntemine göre gerçekleştirildi (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005; Martusevich A.K. ve diğerleri, 2000-2006).
Biyolojik materyal örnekleri (kan serumu, idrar, tükürük, ter, gözyaşı, vb.) daha önce yağları alınmış, yıkanmış ve kurutulmuş bir cam lam üzerine 0,3 ml'lik bir hacimde uygulanır; cam alanı ve analiz edilecek kristal ve amorf yapıların miktarı açısından. Aynı zamanda, tesiokristaloskopi yöntemi arasındaki fark, incelenen cama 3 numunenin uygulanmasıdır (Şekil 2.1.), ilk (1) sadece biyomateryal içerir, ikincisi (2) biyoakışkan karışımıdır. ve bir kristal oluşturan (baz) madde, üçüncü (3) - kristal oluşturan bileşiğin kontrolü. Baz madde olarak %10 NaCl çözeltisi kullanılmıştır.

Şekil 2.1. Tesiokristaloskopi yöntemiyle hazırlanan preparatın şeması

Elde edilen mikropreparasyon, ılık hava akımında değiştirilmiş bir şekilde kurutulur. Bu durumda, camın yatay konumu ve buna karşılık gelen akış yönü, numunelerin aynı koşullar altında dehidrasyonunu sağlayarak havuzlanmalarını önlemelidir. Daha sonra, elde edilen kristalografik desenler, kristalografik ve tesigrafik bileşenler için ayrı ayrı geleneksel şemaya göre analiz edilir.
Bir damla substratın ıslak bir yüzey (cam) üzerinde kurutulması 3 farklı bölgenin oluşmasına yol açar: dış (marjinal - su, elektrolitler, düşük moleküler ağırlıklı bileşikler); iç (merkezi - yüksek moleküler proteinler, elektrolitler, düşük moleküler bileşikler konsantre edilir) ve en düşük madde konsantrasyonu ile karakterize edilen ara. İç bölge ifade edilmiş ve edilmemiş sınırlara sahip olabilir. Çoğu zaman, kristal ve amorf yapılar, iç sınırın dış çevresine bitişiktir.
Bir kolloidin kurumasına, geri çekilmesi, düşük moleküler ağırlıklı bileşiklerin konsantrasyonunda bir artış ve çeşitli tiplerde kristal yapıların oluşumu eşlik eder.
Elde edilen sonuçların istatistiksel olarak işlenmesi, yerleşik işlevler kullanılarak Microsoft Excel XP ortamında gerçekleştirilmiştir.
Kristalloskopik modelleri yorumlamak için karşılaştığımız tüm kristal ve amorf oluşumları sınıflandırdık (Tablo 2.1, Şekil 2). Bu sınıflandırmaya uygun olarak klasik kristaloskopi yöntemi ile analize hazırlanan preparatların değerlendirilmesi yapılmıştır. Hem biyoakışkanın kristaloskopik özelliklerinin genel bir çalışması hem de bunların karşılaştırmalı özellikleri gerçekleştirilmiştir.

Tablo 2.1 Biyoakışkanların "klasik" kristalografik analizinde karşılaşılan kristal ve amorf yapılar

Not: * - sayılarda farklılık gösterir (biraz - toplamda görüş alanının% 30'undan azını kaplarlar, orta miktarda - toplamda görüş alanının% 30-50'sini kaplarlar, çok sayıda - toplamda görüş alanının %50'sinden fazlasını kaplar) ve boyut olarak (küçük, orta, büyük, birimler).
Kurutulmuş biyolojik sıvıların sayısız mikropreparasyonunun analizine dayanarak, her biri sırayla spesifik oluşumlar içeren 5 kristal yapı sınıfı ayırt edildi (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005;). Bazıları için, kimyasal bileşim deşifre edilmiştir; bu, belirli bir derecede yaklaşıklık ile, dinamik bir çalışma durumunda biyolojik ortamdaki bileşen oranlarının kalitatif ve kantitatif özelliklerindeki değişikliği yargılamayı mümkün kılar. ikincisinin kristal oluşturan özellikleri.
Kristal olmayan yapıdaki cisimler - amorf oluşumlar tarafından ayrı bir kategori oluşturulur. Kalsiyum karbonattan türetilenler, boyut ve sayı olarak son derece değişkendir ve bu da tanısal değere sahip olabilir.
Susuz bir biyosubstratın fasiyesindeki büyük kristallerin ve amorf parçacıkların etkileşimi de ilgi çekicidir (Şekil 2). Bu fenomenin bilgi içeriği henüz belirlenmemiştir, ancak bize göre, biyoakışkanın kristaloskopik olarak görselleştirilmemiş bileşenlerinin (örneğin, protein makromolekülleri, yağlar) kristalojenez üzerindeki etkisini yansıtabileceğinden, kendisine yakından dikkat edilmesi gerekmektedir. , karbonhidratlar, vb.) .

Pirinç. 2.2 Kristal ve amorf yapıların etkileşimleri

Analiz edilen biyolojik sıvının fizikokimyasal özellikleri hakkında ek bilgi elde etmek için, aşağıdaki parametreleri içeren klasik kristalloskopi sonucunu değerlendirmek için ek kriterler geliştirilmiştir (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005):
1. Hücresellik (I)– fasiyeslerdeki organik-mineral etkileşimlerinin özelliklerini yansıtır. Değerlendirme, altı puanlık bir doğrudan ölçekte (0-5 puan) yapılır; 0 puan, bu fenomenin belirtilerinin tamamen yokluğu ve 5 puan, hücreselliğin mikroskop olmadan görünürlüğüdür.
2. tekdüzelik elemanların dağılımı (R) serbest kristalojenez sürecinin doğruluğunu gösteren bir kriterdir. Ayrıca tesigrafik bileşen bölümünde verilen altılı skalaya (0-5 puan) göre yorumlanmıştır.
3. Marjinal bölgenin şiddeti (Kz)- biyolojik ortamın protein bileşeninin varlığını ve miktarını gösteren bir parametre (Shatokhina S.N., 1995; Nazarova L.O., Shatokhina S.N., Shabalin V.N., 2000). Bu göstergeyi yarı niceliksel altı puanlık bir ölçekte değerlendirmek için bir plan sunuyoruz:
- 0 puan - marjinal bölgenin mutlak yokluğu, belirgin çizgiler, fasiyes kenarı bölgesinde yerel yıkım belirtileri;
- 1 puan - marjinal bölge, bir ışık mikroskobunun düşük bir büyütmesinde zayıf bir şekilde ayırt edilebilir, belirsiz bir şekilde ifade edilen "örtülü" olanlar da dahil olmak üzere tek "hatalar" gözlenir;
- 2 puan - marjinal bölge açıkça ayırt edilebilir, pratik olarak homojendir, az sayıda "arıza" vardır;
- 3 puan - marjinal bölge, ara bölgeden açıkça sınırlandırılmıştır, homojendir, tüm marjinal halka boyunca yıkıcı bir karakter getirmeyen “hatalar” vardır;
- 4 puan - marjinal bölge açıkça görselleştirilir, ara bölgeden bir "şaft" ile sınırlandırılır, önemli sayıda "arıza" vardır, ancak mikroskopi olmadan ayırt edilemez.
- 5 puan - marjinal bölge mikroskopi olmadan görselleştirilir, homojendir, yıkım belirtileri yoktur; mikroskopi, önemli sayıda "arıza" gösterir.
4. Fasiyes tahribatı derecesi (SDF)- kristalojenezin seyrinin doğruluğunu (fasiyeslerin ana niteliksel özelliği) yansıtan ve hem eksojeni (dehidrasyon sürecinin koşulları - sıcaklık, nem, basınç, hava akış hızı, ek maddelerin girişi vb.) .) ve endojen faktörler (termodinamik bileşen kristal oluşumu, kristalli hidratların oluşumu için yeterli miktarda suyun varlığı ve organik makromoleküllerin stabilizasyonu, vb.).
* 0 derece- doğru konfigürasyondaki fasiyeslerin tüm unsurları, hem genel olarak hem de kendi bölümlerinde tahrip edilmemiş, fasiyes dokusunun tahrip olduğuna dair hiçbir işaret yoktur;
* ben derece– fasiyes elemanlarının ilk tahribat belirtileri vardır, dokuda tahribatlı bir değişiklik gözlenmez;
* II derece- çok sayıda tahrip olmuş veya değiştirilmiş yapı görselleştirildi, doku bütünlüğünün yerel ihlalleri var;
* III derece- fasiyesin tüm unsurları yok edilir, fasiyesin ve yapının tek tek parçalarını ayırt etmek imkansızdır, numune şekilsiz, genellikle renkli, materyalden oluşan şekilsiz bir kütledir; doku tahribatının açık işaretleri vardır.
Genel olarak, oluşturulan yapıların modellenmesi ve çeşitli değerlendirme kriterlerinin uygulanması, kristaloskopik modeldeki değişikliklerin daha net bir şekilde farklılaşmasına katkıda bulunacaktır, ancak bunlar tarafından aşırı "aşırı yüklenme" fasiyes analiz sürecinin önemli bir komplikasyonuna yol açacaktır.
Karşılaştırmalı tesigrafi kullandık (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2002-2005; Martusevich A.K. ve diğerleri, 2000-2005), bu da çeşitli dış koşulları dengelemek için saf bazik bir maddenin ek bir kontrol örneğinin kullanımını içerir; başlama yönünü (kristal oluşturucunun kristalojenezinin aktivasyonu veya depresyonu) ve ciddiyetini belirtmeyi mümkün kılar.
Yukarıda daha önce bahsedildiği gibi, tesigrafik fasiyeslerin değerlendirilmesi, ilkinin morfolojisinin homojenliği ile ilişkili olan kristaloskopikten daha zordur ve bu nedenle, klasik kristalloskopi için bir tanımlama tablosu zaten geliştirilmişse ve ek kriterler oynayacaktır. sadece açıklayıcı bir rol, daha sonra tesigrafik testte lider pozisyonları alırlar (Nefedova N.B., Tsyvenkova L.A., 1985; Moroz L.A., Kalikshtein D.B., 1986; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., 1990; Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N., 2004; Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2003-2005). Bu bağlamda, tesigrafik fasiyes dikkate alındığında kullanılabilecek bir kriter sınıflandırması önerilmektedir:
I. Temel kriterler
- Temel tesigrafik katsayısı Q
- Açıklama katsayısı R
- Başlatma faktörü M
- Bağıl faktör N
II. Ek Kriterler
fasiyes yoğunluğunun tekdüzeliği (R);
resmin hücresellik derecesi (I);
rastgelelik indeksi (IR)
bireysel kristalizasyon bölgelerinin şiddeti (Z)

Yukarıdaki kriterlerin seçimi, gerekli türev katsayısının belirlenmesinde göstergelerin her birinin öneminin doğrulanmasına dayanan, tesigrafik fasiyesleri değerlendirmek için birleşik bir matematiksel yaklaşım oluşturmayı mümkün kılmıştır (Martusevich A.K. ve diğerleri, 2004, 2005). .

Kullanılan hesaplanmış katsayılar için açıklamalar:
I. Ana kriterler:
Q = A / B, burada A prototipteki kristalleşme merkezlerinin sayısıdır, birimler; B, kontrol numunesindeki kristalizasyon merkezlerinin sayısıdır, birimler.
P = d1 / d2, burada d1 minimum kristalleşme kuşağının yarıçapıdır, mm; d2 - maksimum kristalleşme bölgesinin yarıçapı, mm.

II. Ek kriterler:
R, tesigrafik fasiyes elemanlarının, noktaların dağılım yoğunluğunun tekdüzelik derecesidir;
I - tesigrafik fasiyeslerin hücresellik derecesi, noktalar.

Çalışmalarımız, tesigrafik fasiyeslerin tanımlanmasında yukarıda tanımlanan katsayıların bilgisel önemini varsaymamıza izin verdi:
1. Temel tesigrafik katsayı Q- malzemenin etkisi altında temel maddenin kristalojenezinin organizasyon / düzensizlik derecesini gösterir (çoğu durumda - doğal nötr koşullar altında tipik dehidrasyon yapılarının oluşumuna eğilimli izo-ozmotik konsantrasyonlu bir sodyum klorür çözeltisi) inceleniyor.
2. Netlik katsayısı P- incelenen substratın bileşenlerinin moleküler kütlelerinin heterojenlik derecesini gösterir.
3. Model I'in hücresellik derecesi- muhtemelen hidrofiliklik / hidrofobiklik derecesi için farklı kimyasal bileşim ve özelliklere sahip protein kümelerinin varlığını ve ayrıca biyolojik ortamın sulu çözeltisinde yağda çözünen bileşenlerin varlığını gösterir.
4. Parametre R - yapıların dağılımının tesigrafik fasiyes üzerindeki tekdüzeliğini vurgular. Malzemedeki kristalojenezi lokal olarak engelleyebilen görselleştirilemeyen bileşenlerin içeriğini gösterebilir. Mikropreparasyonu kurutma yöntemi ile birbirine bağlanabilir.
Tesigrafik fasiyesleri değerlendirmek için yukarıdaki göstergelere göre, ek değerlendirme kriterlerine göre tesigrafik fasiyeslerin kompozisyonunu kaydetme özelliklerinin kısa bir derecelendirmesi formüle edilmiştir (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005):
1. Kristal yapıların fasiyes üzerindeki dağılım yoğunluğunun tekdüzeliği (R):
0 puan - fasiyeslerin tam rastgeleliği, heterojen elementlerin varlığı, boşluklar, kristal yapıların birikme yerleri, görüş alanındaki farklı oluşum yönelimleri.
1 nokta - bazı kristal grupları, tek doğru yapı alanları ana hatlarıyla belirtilmiştir, toplam görüş alanının% 30'undan azını kaplar, şekillerin yönü hala kaotiktir.
2 nokta - görüş alanı alanının% 30 ila% 50'sini kaplayan (en az üç çalışılanın her birinde) açık bir düzen "adaları" gözlenir, gruplardaki elemanlar arasındaki mesafeler yaklaşık olarak eşitlenir, bazıları fasiyeslerin yapısal oluşumları yönünde düzenlilik kaydedilmiştir.
3 puan - fasiyesin yeterince önemli sayıda yapısal elemanı (toplamın% 50'sinden fazlası) yapılandırılmıştır, tekdüzelik "adaları" nispeten geniş bir alanın alanlarına dönüşür. Bu bölgeler içinde, bireysel oluşumlar arasındaki mesafelerin doğru düzenlenmesi ve tekdüzeliği gözlemlenir. Elemanların yönünün düzenliliği ve imar oldukça açık bir şekilde göze çarpmaktadır.
4 puan - fasiyes unsurlarının çoğu yapılandırılmıştır (toplamın% 75'inden fazlası), geri kalanı görüş alanı üzerinde, daha sık olarak marjinal bölgede "adacıklar" halinde dağıtılır. Bireysel oluşumlar arasındaki mesafeler pratik olarak sabittir. Öğelerin oryantasyonu, görüş alanının neredeyse tüm yüzeyinde belirli bir desene uyar.
5 puan - tesigrafik fasiyeslerin tüm unsurları, çeşitli alanların incelenmesiyle onaylanan tüm görüş alanı boyunca açıkça yapılandırılmıştır. Merkezi, orta ve marjinal bölgelere bölünme, mikroskobik olmayan görsel kontrolle bile açıkça görülebilir, ikincisinin sınırlarını belirlemek mümkündür. Resmin elemanları arasındaki mesafeler sabittir, şekillerin yönü doğrudur, fasiyesin tüm yüzeyinde düzenlidir.
2. Fasiyeslerin hücreselliğinin tezahür derecesi (I):
0 puan - hücresel görünüm belirtilerinin tamamen yokluğu, resmin tekdüzeliği, kristallerin "adalarının" ayrılması yoktur. Fasiyes kristal oluşumların tek bir "katmanını" temsil eder.
1 puan - ilk heterojenlik belirtilerinin varlığı, kristaloskopik modelin "ezilmesi" (tanısal olarak en önemli ilkeler vurgulanmıştır):
element gruplarının ayrılmasının başlangıcı (görüş alanının %30'undan azını kaplayan tüm oluşumların %30'undan azı);
resmin bazı heterojenliği;
kristal figürlerden oluşan tek bir "katmanın" "ezilmesinin" başlangıcı.
2 puan - fasiyeslerin "ezilmesine", kristallerin "adalarının" oluşumuna yönelik oldukça görünür bir eğilim vardır (tanısal olarak en önemli ilkeler vurgulanmıştır):
"adalarda" izole edilmiş elemanların sayısı - tüm yapıların% 30'undan% 50'sine kadar, fasiyes görüş alanının yüzeyinin% 30'undan fazlasını işgal ederler;
belirgin heterojenlik, resmin imar edilmesi;
fasiyeslerin bölümlere "ayırma" süreci görselleştirilir, ortaya çıkan kristalleşme kayışları kaydedilir, ikincisinin sınırları olarak hizmet eder, bazı durumlarda tamamen değil, 1 kristal kalınlığında.
3 puan - yüzlerde belirgin değişiklikler var:
"adalardaki" elemanlar toplam sayının %50 ila %75'ini oluşturur, işgal ettikleri yüzey görüş alanının %50'sinden fazladır (birkaç alanda);
belirgin heterojenlik, resmin "taneli";
fasiyeslerin "parçalanma" süreci, çeşitli görüş alanlarında açıkça görülebilir;
kristalizasyon kayışları, birden fazla kristal yapı tarafından oluşturulan oldukça belirgindir.
4 puan - hücresel görünümün belirtileri güvenilir bir şekilde görülebilir (tanısal olarak en önemli ilkeler vurgulanmıştır):
hücrelerde gruplanan yapıların sayısı, ikincisinin toplam sayısının %75'i ile %100'ü arasındadır.;
gruplandırılmış öğeler tüm görüş alanını kaplar (birkaç, en az üç görüş alanını incelerken);
kristalleşme kemerleri birden fazla kristal sırasından oluşur, görüş alanının tüm yüzeyinde bulunurlar, "adaları" tamamen kuşatın.
5 puan - resim aşağıdaki morfolojik özelliklerle karakterize edilir (tanısal olarak en önemli ilkeler vurgulanır):
hücrelerde gruplanan yapıların sayısı, ikincisinin toplam sayısının %75 ila %100'ü;
gruplandırılmış öğeler tüm görüş alanını kaplar (birkaç, en az üç görüş alanını incelerken);
çok net bir şekilde ifade edilen "kesirli", "taneli" resim;
birden fazla kristal sırasından oluşan kristalleşme kayışları, görüş alanının tüm yüzeyinde bulunur, "adaları" tamamen çevreler;
resmin "hataları" var (bu fenomenin olduğu kan serumu fasiyesleri hariç) bağımsız tanı işareti).

Genel olarak, yukarıdaki kriterlerin, göstergelerin ve hesaplanan katsayıların uygulanması, analiz edilen alt tabakaların niteliksel ve niceliksel bileşiminde saklı bilgi yükünün çıkarılması prosedürünü algoritmalaştırmamıza izin verdi.
Bu şemaya göre, analiz iki ana alanda aşamalı olarak gerçekleştirilir - serbest kristalojenez ve başlatılmış kristal oluşumu çalışması, bu da bize hem bir biyoakışkanın doğrudan kristal oluşturma kabiliyetini hem de başlatma potansiyelini kapsamlı bir şekilde değerlendirmemize izin verir.

Pirinç. 2.3 Tesiyo-kristaloskopik fasiyeslerin değerlendirilmesi için algoritma.

Bu nedenle, matematiksel aparatın yaygın olarak dahil edilmesi, biyolojik sıvıların, fizikokimyasal özellikleri hakkında büyük miktarda bilgi sağlayan kristalojenezleri ve dolaylı olarak, bizim görüşümüze göre niteliksel ve niceliksel bileşen bileşimi ile multiparametrik değerlendirilmesine izin verir. tüm teşhis, uygulama ve temel bilimlerden önce klinik için özel bir öneme sahiptir.

2.4 Verilerin istatistiksel olarak işlenmesi

Çalışılan tüm yıkamalarda araştırma sırasında elde edilen asıl materyal, varyasyon istatistikleri yöntemiyle işlendi (Tyurin Yu.N., Makarov A.A., 1998; Nasledov A.D., 2004). Ortalama değerler (M), standart hataları (m) ve standart sapmaları () hesaplandı. Göstergeler p değerlerinde anlamlı kabul edildi<0,05 (по t-критерию Стьюдента и U-критерия Манна-Уитни). Зависимость между признаками оценивали при помощи коэффициента парной корреляции (r), его ошибки (mr) и уровня значимости различий (по t-критерию Стьюдента). Зависимость считалась сильной при r  >0,7, çift korelasyon değerinin modülü 0,3-0,7 aralığındaysa ortalama. Modal değerde 0,3'ten küçük bir korelasyon değeri bulunurken zayıf olarak alındı. Bulunan çift korelasyonunun (p) güvenilirliği de hesaplandı.
Hesaplamalar, Microsoft Excel 2003 elektronik tablo ortamında ve ayrıca Primer of biostatistics 4.03 ve SPSS 11.0 istatistik yazılım paketleri kullanılarak gerçekleştirilmiştir.

3. Araştırma sonuçları.

Serbest kristalojenezin sonuçlarının doğrudan değerlendirmesi, 5 ana kristal ve amorf madde sınıfı (morfometri) ve ek kriterler (fasiyeslerin yıkım derecesi - SDF, ciddiyeti) dahil olmak üzere tek bir tanımlama tablosu kullanılarak gerçekleştirildi. marjinal bölgesi (Kz) ve hücreselliği (I), dağıtım elemanlarının tekdüzeliği (R)). Tesigrafik fasiyes, bir temel (temel tesigrafik katsayı Q, bölgeleme katsayısı P) ve ek parametreler (klasik kristalloskopi için kullanılanlara benzer) bir sistem kullanılarak analiz edildi.
Sağlıklı farelerde ve lösemili farelerde serbest ve başlatılmış idrar kristalojenezinin dinamiklerini inceledik.

3.1. Lösemili sağlıklı ve yapay olarak enfekte olmuş farelerin idrar morfolojisi.

Kurutulmuş idrar numunelerinin mikropreparasyonlarına ilişkin analizimiz, söz konusu koşullar için net "kalıplar" oluşturmayı mümkün kıldı.
Sağlıklı ve hasta hayvanlardan elde edilen kristaloskopik resimlerin karşılaştırılması yapılmıştır.

Tablo 3.1. Sağlıklı farelerin ve lösemili hastaların kristaloskopik özellikleri.

Tablo 3.1'de verilen verilere göre, kontrol ve deney grupları arasında kristalografik desende açık farklılıklar olduğu açıktır.

Görsel morfometrinin sonuçlarına göre, lösemili farelerin idrarının kristaloskopik resminin, sağlıklı hayvanlara kıyasla, en önemlileri arasında önemli özellikleri olduğu bulundu:
tek kristalli bileşende kaydedilen değişikliklerin bir teyidi olan lineer polikristal yapıların tamamen yokluğu haricinde hasta farelerde dendrit sayısında bir artış;
sayılarında genişleme ve azalmadan oluşan amorf oluşumların konsantrasyonu, büyük kristal figürlerden vurgulanan sınırlandırmaları;
fasiyeslerin yıkım derecesinde artış (kristalografik fasiyeslerin kararsızlığının ana göstergesi);
bir mikro preparasyonda kristalin ve amorf oluşumların dağılımının tekdüzeliğinde bir azalma, fasiyes elemanlarının ayrışması ile birlikte, hücresellik derecesinde önemli bir artışla kendini gösterdi (p<0,05).
Farelerin kan serumunun kristal oluşturma kabiliyetini değerlendirmenin sonuçlarına dayanarak, sağlıklı farelerin ve lösemili farelerin karakteristiği olan bir "desen" oluşturulmuştur.

3.2. Normal ve patolojik koşullarda (lösemi) farelerde kan serumunun tesigrafik yüzlerini değerlendirmek için ana kriterler.

Çalışma, hem löseminin nitel belirteçlerinin araştırılmasını hem de tesigrafinin nicel “kalıplarının” oluşumunu içeriyordu. Hasta farelerin idrarındaki patolojik değişiklik belirtilerinin saptanması temelinde bir dizi tanısal olarak önemli nitel parametre derlenmiştir.
Şekil 2'de sunulan verilere göre. 2.4'te, temel madde olarak %10 sodyum klorür çözeltisi kullanıldığında, sağlıklı farelerin ve lösemili farelerin idrar tezigramlarının en önemli ayırt edici göstergeleri şunlardır:
- biyolojik çevre tarafından temel maddenin başlatılmasının doğası (sağlıklı farelerde - lösemili hasta farelerde temel maddenin kristalojenezinin belirgin bir aktivasyonu - orta derecede inhibisyon);
- biyosıvının düzensiz organik-mineral bileşimi (sağlıklı farelerde mineral bileşenlerin baskınlığı ve lösemili farelerde organik bileşiklerin prevalansı);
- deney grubunun temsilcilerinde biraz daha yüksek olan fasiyeslerin yıkım derecesi;
- löseminin varsayılan bir belirteci olan pratik olarak sağlıklı bireylerde önemli şiddeti ile lösemili farelerin fasiyesindeki marjinal bölgenin genişlemesi.

Tablo 3.2. Lösemili sağlıklı farelerin ve farelerin idrarının karşılaştırmalı tesigrafisi (temel madde - %10 sodyum klorür çözeltisi)

Not: "*" - kontrol grubu p ile ilgili farklılıkların önemi<0,05

Pirinç. 2.4. Sağlıklı farelere kıyasla lösemili farelerde idrar tezigrafisi için ana ve ek kriterlerdeki değişiklikler

3.3 AKR fareleri

AKR farelerinin yüksek lösemik çizgisi, 1928'de yakın akraba bireylerin çaprazlanmasıyla elde edildi. Her iki cinsiyetten fareler, lenfoid lösemiye karşı hassastır. Kadınların yaklaşık %91'i 300. günde lösemiden ölmektedir.

3.4 Lösemi gelişiminin dinamikleri.

Pirinç. 3.1 Homojen fasiyes, belirgin oluşum yok - sağlıklı fare X40

Pirinç. 3.2 Fasiyes homojendir, marjinal bölgenin ilk parçalanma belirtileri ortaya çıkar - lösemi gelişiminin ilk belirtileri, 5 aylık. X40

Pirinç. 3.3 Yapının heterojenliği, marjinal bölgenin zayıf şiddeti, hücreselliğin tezahürü - lösemi gelişiminin başlangıcı. 7 ay X40

Pirinç. 3.4 Çizgili dendritik yapıların ortaya çıkışının başlangıcı - lösemi gelişimi. 8 ay X40

Pirinç. 3.5 Doğrusal ve dikdörtgen dendritik yapılar fasiyes yapısında baskındır - ileri lösemi, 9 ay. X40

Pirinç. 3.6 Fasiyeslerin belirgin hücreselliği, elementlerin eşit olmayan dağılım yoğunluğu - oldukça gelişmiş lösemi. 13 ay X40

3.5 Sonuçlar

Kuru bir idrar damlasının fasiyesi üzerinde deneysel bir biyo-tahlilin birkaç kalitatif parametresinin (en az 3) saptanmasına dayanarak, patolojik değişikliklerin varlığını veya akut lösemi gelişme derecesini belirlemek mümkün görünmektedir.
Tablo 3.2'de verilen veriler kullanılarak, Q ve P katsayıları ile ilgili olarak, idrar tesigramlarında değerlerinde önemli farklılıkların kaydedildiği not edilebilir.
Tablo 3.2'de sunulan verilere göre, tesigrafinin ana göstergeleri arasındaki farklılıkların güvenilirliği, kalitatif özellikler kullanılarak tespit edilen idrarın tesigrafik fasiyeslerinin özelliklerinin önemini doğrulamaktadır.
Bu nedenle, sağlıklı farelerde ve lösemili farelerde karşılaştırmalı idrar tezigrafisinin kullanılması, lösemi varlığının kalitatif ve kantitatif belirteçlerini tanımlamayı mümkün kılar.
Biyosıvıların siokristaloskopik analizi, insan ve hayvanların fizyolojik ve patolojik durumlarını göstermede faydalı olabilecek, içerdikleri metabolik bilgilerin multiparametrik bir değerlendirmesine izin verir. Her biyosıvı, kimyasal bileşimlerinin ve işlevlerinin farklılaşmasıyla ilişkili olan kendi kristalojenez özelliklerine sahiptir.
Kristalografik bileşen incelenirken, tek bir tanımlama tablosunun ve tesigrafik bileşen için ana (Q ve P katsayıları) ve ek (desenin düzgün dağılımı, hücresellik, vb.) değerlendirme kriterlerinin kullanılması önerilir. Devam eden araştırmalar, insan vücudunun fizyolojik ve patolojik reaksiyonlarının gelişiminin alt ve moleküler mekanizmaları hakkında fikirler geliştirmeye hizmet edecektir.

Kullanılan literatür listesi:

1. Agafonov V. A., Bagrov S. N. Vitröz cismin durumunun kurutma yöntemiyle incelenmesi. bilimsel makaleler "Lens ve vitreus transsiliyer cerrahisi". - Moskova. - 1982. - S. 158-164.
2. Alekseeva O. P., Vorobyov A. V. Tükürük kristalografisi - H. pylori teşhisi için yeni bir non-invaziv yöntem // Nizhny Novgorod tıp dergisi. - 2003. - No. 2. - S.73-78.
3. Antropova I.P., Gabinsky Ya. L. Kapalı bir hücrede bir biyosıvının örnek olarak tükürük kullanılarak kristalleştirilmesi Klinik laboratuvar teşhisi. - 1997. - No. 8. - S.36-38.
4. Babenko G.A. Kötü huylu büyüme, metaller ve şelatlama maddeleri. İz elementlerin biyolojik rolü. - M.: Nauka, 1983.
5. Barer G.M., Denisov A.B., Mikhaleva I.N. ve diğerleri. Oral sıvının kristalizasyonu. Substrat yüzeyinin bileşimi ve saflığı // Deneysel Biyoloji ve Tıp Bülteni. - 1998. - T. 126, No. 12. – S. 693-696.
6. Can güvenliği. Teknolojik süreçlerin ve üretimlerin güvenliği (İşçi koruması). Uh. üniversiteler için ödenek / P. P. Kukin ve diğerleri - M., 1999.
7. Brown G., Walken J. Sıvı kristaller ve biyolojik yapılar. M.: Mir, 1982. - 198'ler.
8. Bubo N.T., Puzyrevsky K. Ya. Papaverin tespiti için mikrokristaloskopik reaksiyon // Eczane. - 1965. - No. 2. - S. 50-52.
9. Buzoverya M.E., Shishpor I.V., Shatokhina S.N. ve diğerleri. Kan serumu fasiyeslerinin morfometrik analizi // Klinik laboratuvar teşhisi. - 2003. - No. 9. - S. 22-23.
10. Bystrevskaya A. A., Deev L. A. Gözyaşı sıvısının yapısının tahriş edici tipine ve substratın kalitesine bağımlılığı // III Tüm Rusya Bilimsel ve Pratik Konferansının Bildirileri "Biyolojik Sıvıların Fonksiyonel Morfolojisi". - Moskova. - 2004. - S. 17-19.
11. Vegman E.F., Rufanov Yu.G., Fedorchenko I.N. Kristalografi, mineraloji, petrografi ve radyografi. M.: Metalurji, 1990. - 263s.
12. Volchetsky A.L., Ruvinova L.G., Spasennikov B.A. ve diğerleri. Kristalizasyon ve kristalografi: tıbbi ve biyolojik yönler. Arkhangelsk, 1999. - 374s.
13. Volchetsky A.L., Spasennikov B.A., Agafonov V.M. ve diğerleri. Tesigrafik analiz yönteminin ve bilgisayar yönünün değiştirilmesi // İnsan Ekolojisi. - 1999. - No. 3. - S.38-42.
14. Vorobyov A.V., Vorobyov P.V., Vorobyeva V.A. Hassas kristalografi yöntemini kullanarak bir kişinin enerji-bilgi bileşeninin belirlenmesi. XI Moskova Uluslararası Homeopati Konferansı "Modern tıpta homeopatik yöntemin geliştirilmesi" raporları. - Moskova. -2001. – S. 202-207.
15. Vorob'eva V. A., Vorobyov A. V., Zamarenov N. A. Bir insan biyolojik sıvısı ve bir homeopatik preparasyonun kristal oluşturan bir çözelti ile etkileşimi sırasında kristalografik bir modelin oluşum modeli / Keşif. - 231 sayılı Rusya Doğa Bilimleri Akademisi Diploması. (8.06.2002 tarihli rüçhan).
16. Golubev S.N. Yaşayan kristaller // Priroda. - 1989. - No. 3. - S. 13-21.
17. A.N. Gordienko, L.A. Kurbatova ve A.N. Filippov, Phys. - Kalinin. - 1985. - Sayı. 8. - S. 83-86.
18. Gromova I. P. “Açık damla” yöntemini kullanarak toksikolojik ve hijyenik bir deneyde kan serumunu incelemek için kristaloskopik yöntem // Hijyen ve Sanitasyon. - 2005. - No. 2. - S.66-69.
19. V. G. Gulyaev, A. K. Martusevich ve A. N. Koshkin, “Adli bilimde kristalografik araştırma yöntemlerinin kullanımına ilişkin özellikler ve beklentiler”, Mat. İnternet katılımı ile üniversiteler arası bilimsel-pratik konferans "Kriminalistik ve uzman faaliyetinin güncel konuları: sorunlar ve beklentiler". - Kirov: KF MGUA. - 2004. - S. 35-39.
20. Gulyaeva S.F., Martusevich A.K., Pomaskina T.V. Maden suyu alımının etkinliği için bir kriter olarak başlatılan tükürük kristalojenezi sonucunun matematiksel modellemesi // İnsan Ekolojisi. - 2005. - No. 7. - S. 33-35.
21. De Gee V. Sıvı kristal maddelerin fiziksel özellikleri. M.: Mir, 1982. - 175s.
22. Deryabina N. I., Zalessky M. G. Kuruması sırasında bir damla kan serumundaki protein bileşenlerinin içeriği // Yeni tıbbi teknolojiler bülteni. - 2005. - T. XII, No. 1. - S. 85-87.
23. Dawson R., Elliot D., Elliot W. et al. Biyokimyacının el kitabı. M.: Mir, 1997. - 544 s.
24. Zamkova N.G., Zinenko V. I. Solunum modelinde iyonik kristallerin kafes dinamiği ve polarize olabilen iyonlar. // FTT. - 1998. - T. 40, No. 2. - S. 350-354.
25. Zaitsev V.V., Zaitseva N.B., Usoltseva N.V. Miyokard enfarktüslü hastalarda biyolojik sıvı kristal dokuları Izvestiya Akademii Nauk. Fiziksel seri - 1996. - cilt 60, No. 4 - sayfa 115-118.
26. Zinenko V. I., Zamkova N. G. Monte Carlo yöntemiyle ASVKh 4 kristallerinde faz geçişleri ve orantısız faz çalışması. // Kristalografi. - 2000. - T. 45, No. 3. - S. 513-517.
27. Zinenko V. I., Zamkova N. G. Yer değiştirme tipi (elpasolit yapılı kristaller) ve düzen bozukluğu tipi (potasyum sülfat ailesi) yapısal faz geçişlerinin mikroskobik hesaplamaları. // Kristalografi. - 2004. - Cilt 1, Sayı 1. – S. 38-45.
28. Ivanov O. V., Shport D. A., Maksimov E. G. Perovskit kristallerinde ferroelektrik kararsızlığın mikroskobik hesaplamaları.
29. Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. et al. Biyolojik substratların kristalografik çalışması // Klinik tıp. - 1990. - No. 4. - S. 28-31.
30. Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Chernyakov V. L. Tesigrafik idrar inceleme yönteminin önemi // Laboratuvar işi. - 1981. - No. 2. - S.79-81.
31. Kalinin A.P. ve diğerleri Bazı endokrin hastalıklarında kristalin kan serumu birikintileri yönteminin bilgilendiriciliği // Tüm Rusya Bilimsel ve Pratik Konferansı'nın eserlerinin toplanması. "Tıpta kristalografik araştırma yöntemleri", Moskova - 1997. - S. 131-133
32. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Biyoakışkanların siokristaloskopi yöntemi hakkında // Klinik laboratuvar teşhisi. - 2002. - Hayır. 10. - s. 3.
33. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Biyolojik sıvıların bileşiminin kristal-skobik olarak tanımlanmasına modern yaklaşımlar // İnsan Ekolojisi. - 2003. - No. 5. - S. 23-25.
34. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Normal ve patolojik koşullarda insan vücudunun biyolojik sıvılarının thesiokristaloskopik portresinin özellikleri Yeni Tıbbi Teknolojiler Bülteni. - 2003. - T.X, No. 4. - S. 57-59.
35. N. F. Kamakin, A. K. Martusevich ve E. P. Kolevatykh, “Birincil ve İkincil Biyokristalizasyon Üzerine”, Sb. bilimsel çalışmalar "Doğa bilimi ve hümanizm". - Tomsk. - 2005. - Cilt 2, Sayı 1. - S. 18-19.
36. Kamakin N.F., Martusevich A.K., Koshkin A.N. Kristalografik araştırma yöntemlerinin geliştirilmesi için beklentiler Vyatskiy Tıp Bülteni. - 2003. - No. 3. - S.6-11. Kamakin N.F., Martusevich A.K. Normal ve patolojik koşullarda insan vücudunun biyolojik sıvılarının tesio-kristaloskopik portresinin özellikleri // Yeni tıbbi teknolojiler bülteni. 2003. T.X. No. 4. S. 57–59.
37. Kamyshnikov V. S. Klinik ve biyokimyasal laboratuvar teşhisi el kitabı. 2 cilt halinde Minsk: Beyaz Rusya, 2000. V.1. 495s.; T.2. 463'ler.
38. Karkishchenko N. N. Biyomodellemenin temelleri. M.: Askeri Sanayi Kompleksi Yayınevi, 2004. - 608 s.
39. Karachunsky A.I. Çocuklarda akut lenfoblastik lösemi. Pediatrinin topikal sorunları üzerine dersler. Ed. V.F. Demina, S.O. Klyuchnikova., M: RSMU; 2000.
40. Kidalov V. N., Khadartsev A. A., Yakushina G. N. Kanın tesiografik çalışmaları ve pratik olanakları // Yeni tıbbi teknolojiler bülteni. - 2004. - T. XI, No. 1-2. - S. 23-25.
41. Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maichuk N.V. Oftalmolojide kristalografik analizin fiziksel temeli. Öz uluslararası katılımlı genç bilim adamları ve öğrencilerin bölgeler arası bilimsel-pratik konferansının raporları "St. Petersburg Bilimsel Okumalar-2002". - St.Petersburg. - 2002. - S. 42-43.
42. Kolotilov N. N., Bakai E. A. Biyolojik nesnelerin sıvı kristal yapısı // Moleküler Biyoloji. - 1980. - Sayı. 27. - S. 87-96.
43. E. V. Kononenko ve E. V. Mironov, “Agregasyon sırasında biyoakışkan doku dönüşümünün dislokasyon-disklinasyon mekanizmaları,” Sb. 2. Tüm Rusya bilimsel ve pratik konferansının bilimsel makaleleri "Tedavinin etkinliğinin teşhisi ve izlenmesinde biyolojik sıvıların morfolojisi." - Moskova. - 2001. - S. 21-26.
44. Korago A. A. Biyomineralojiye giriş. Petersburg: Nedra, 1992. - 280p.
45. Koshkin A.N., Martusevich A.K., Lopatin M.A. Tanı yöntemi olarak insan vücudunun biyoakışkanlarının kristalloskopisi // Rusya Devlet Tıp Üniversitesi Bülteni. - 2002. - Hayır. 1. - S.134.
46. ​​​​Tıpta kristalografik araştırma yöntemleri: Sat. ilmi 1. Tüm Rusya Bilimsel ve Pratik Konferansı Tutanakları. - M., 1997.
47. Biyolojik substratları incelemek için kristaloskopik yöntem: Yöntem. tavsiyeler / L.A. Moroz, I.L. Teodor, V.E. Bryk ve ark. - M., 1981. - 9'lar.
48. Kuznetsov VD Kristaller ve kristalizasyon. M., 1954. - 65'ler.
49. Kuznetsov A.V., Rechkalov A.V., Smelysheva L.N. Gastrointestinal sistem ve stres. Kurgan: Kurgan Devlet Üniversitesi Yayınevi, 2004. - 254s.
50. Kuznetsov N.N., Vershinina G.A., Skopinov S.M. ve diğerleri. Çocuklarda endojen zehirlenme sendromunun şiddetinin değerlendirilmesinde optik polarizasyon ve refraktometrik yöntemler // Sat. 2. Tüm Rusya bilimsel ve pratik konferansının bilimsel makaleleri "Tedavinin etkinliğinin teşhisi ve izlenmesinde biyolojik sıvıların morfolojisi." - Moskova. - 2001. - S. 30-33.
51. Kuznetsov N.N., Skopinov S.A., Vershinina G.A. ve diğerleri. Çocuklarda endojen zehirlenme teşhisi için kristal-skobik yöntem. 03/04/1998 tarih ve 2158923 sayılı Rusya Federasyonu Patenti
52. Kungurov N.V., Kokhan M.M., Kononenko E.V. ve diğerleri. Kronik dermatozlu hastalarda biyolojik sıvıların kristalografik çalışmaları. Yekaterinburg, 1997. - 41'ler.
53. Kurnysheva N.I., Deev A.I., Gryzunov Yu.A. ve diğerleri. Gözyaşı sıvısının floresan muayenesi ile involüsyonel oftalmik endotoksikozun değerlendirilmesi için bir yöntem Oftalmoloji Bülteni. - 2000. - No. 3. - S. 16-19.
54. Lobanov V. I. Bazı barbitürik asit türevlerinin tespitinin mikrokristaloskopik reaksiyonları // Analitik Kimya Dergisi. - 1966. - Hayır. 1. – S. 110.
55. A. A. Loktyushin ve A. V. Manakov, “Holografik bir madde modelinde mineraller ve yaşam,” Proc. 2. Uluslararası Seminer "Mineraloloji ve Yaşam: Biyomineral Etkileşimler". - Sıktıvkar. - 1996. - S. 10-11.
56. Martusevich A. K. Fizyolojide kristaloskopik araştırma yöntemleri // Rus Fizyoloji Dergisi. I. M. Sechenov. - 2004. - T. 90, No. 8. - S.18.
57. Martusevich A. K. Biyolojik sıvıların morfolojisinin bir yansıması olarak kristalleşmenin fiziksel ve biyokimyasal teorisi hakkında bilgi Sibirya Tıbbı Bülteni. - 2005. - T. 4. - Ek 1. - S. 185.
58. A. K. Martusevich ve A. N. Koshkin, “Biyoakışkanların kristalografisinde araştırma yaklaşımının sorunları,” Mat. uluslararası katılımlı üçüncü disiplinlerarası konferans "NBITT-21". - Petrozavodsk. - 2004. - S. 50.
59. Martusevich A.K., Koshkin A.N. İnsan vücudunun biyolojik sıvılarının kristalleşmesi için koşulların tesio-kristaloskopik testin sonucu üzerindeki etkisinin özellikleri. ilmi konferansa adanmış genç bilim adamları ve Rusya Federasyonu uzmanlarının makaleleri. acad. B. S. Grakova "Tıbbın güncel sorunları ve yeni teknolojiler-2003". - Krasnoyarsk. - 2003. - S. 154-157.
60. Martusevich A.K., Ponomareva G. L. Lomber osteokondrozlu hastalarda tahmini bir sayı kullanarak tesigrafik yüzleri tanımlamak için matematiksel yöntemler Klinik laboratuvar teşhisi. - 2004. - No. 9. - S. 85-86.
61. Klinik uygulamada Menshikov VV Laboratuvar testleri. M.: Tıp, 1988. - 428'ler.
62. Kağıt kromatografisi kullanarak kan serumunda serbest amino asitlerin belirlenmesi için mikro yöntem // Tıbbi laboratuvar teknolojileri. SPb., 1999. - T. 2. - S. 106-108.
63. Moroz L. A., Kalikshtein D. B. Biyolojik substratları incelemek için kristalografik yöntem. Yönergeler. M., 1986. - 24 s.
64. Mushkambarov N. N. Fiziksel ve kolloidal kimya: ders dersi. M.: GEOTAR-MED, 2001. - 384 s.
65. Nazarenko G. I., Kishkun A. A. Laboratuvar sonuçlarının klinik değerlendirmesi. M.: Tıp, 2000. - 544 s.
66. Nikolskaya M. N., Gandel V. G., Popkov V. A. İnce bir tabakada kristalizasyon yoluyla sülfanilamid preparatlarının tespiti // İlaç işi. - 1965. - No. 4. - S. 13-14.
67. PB 10-115-96. Basınçlı kapların tasarımı ve güvenli çalışması için kurallar.
68. Pikin S. A. Sıvı kristallerin yapısal dönüşümleri. - E. - 1981. - 269'lar.
69. Plaksina G.V., Komolova G.S., Mashkov A.E. ve diğerleri. Sütten elde edilen anjiyogeninin biyolojik sıvıların kristal yapısı üzerindeki stabilize edici etkisi Deneysel Biyoloji ve Tıp Bülteni. - 2003. - T. 136, No. 10. - S. 406-409.
70. Plaksina G.V., Rimarchuk G.V., Butenko S.V. ve diğerleri. İdrar muayenesinin kristalografik ve kristalografik yönteminin klinik önemi Klinik laboratuvar teşhisi. - 1999. - No. 10. - S.34.
71. Prigogine I., Stengers I. Kaostan Düzen / Per. İngilizceden. M.: İlerleme, 1986. - 429s.
72. Rapis E. G. Normal koşullarda ve hemoftalmi ile insan ve hayvanların vitreus gövdesini kullanmanın mikrokristal-optik yöntemi Oftalmoloji Bülteni. - 1976. - No. 4. - S.62-67.
73. Rapis E. G. Protein ve yaşam. Nanoyapılı supramoleküler protein filmlerinin kendi kendine organizasyonu, kendi kendine montajı ve simetrisi. M.: "MILTA - PKP GIT", 2003. - 368'ler.
74. Romanov Yu. A. Biyolojik sistemler teorisi ve zamansal organizasyonları sorunu // Kronobiyoloji sorunları. - 1992. - Hayır. 3-4. - S.105-123.
75. Savina L. V. İç hastalıkları kliniğinde kan serumunun kristaloskopik yapıları: Tezin özeti. diss... d.m.s. - Perm, 1992. - 40'lar.
76. Savina L. V. Sağlıklı ve hasta bir kişinin kan serumunun kristaloskopik yapıları. Krasnodar, 1999. - 238'ler.
77. Savina L.V. Vakum altında kan serumunun yapı oluşumu // Klinik laboratuvar teşhisi. - 1999. - No. 11. - S.48.
78. Savina L.V., Konueva O.V., Korotko G.G. et al. Kronik pankreatitli hastalarda pankreasın ekzokrin fonksiyon bozukluklarının kristaloskopik tanısı / IV Uluslararası Kongresi "Parenteral ve Enteral Beslenme". - Moskova, 2000. - S. 98.
79. Savina L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V. Yu. ve diğerleri. Metabolik bozuklukların tanısında polarizasyon mikroskobu // Klinik laboratuvar teşhisi. - 2003. - No. 3. - S. 11-13.
80. Saltykov A. B. Fonksiyonel sistemlerin oluşum sürecinin morfolojik yönleri // Modern biyolojinin başarıları. - 2005. - T. 125, No. 2. – S. 167-178.
81. Skalny A.V., Yesenin A.V. İnsan biyosubstratlarını kullanarak insanlara ve çevreye kurşun maruziyetinin izlenmesi ve risk değerlendirmesi // Toksikolojik Bülten. 6, 1996. - S. 16-23.
82. Skopinov SA Biyosıvılardan tuz kristalizasyonunun bilgisayar simülasyonu.// Tıpta kristalografik araştırma yöntemleri. Oturdu. ilmi 1. Tüm Rusya Bilimsel ve Pratik Konferansı Tutanakları. . M., 1997. . İle birlikte. 33.36
83. Smotrova S.P., Chesnokova S.M. ve diğerleri Çevre kirliliği koşullarında selenyum eksikliği // III Uluslararası Bilimsel ve Teknik Konferansın Bildirileri "Tıp ve Biyoteknolojide Fizik ve Radyoelektronik" - Vladimir, 1998. - S. 304-305.
84. Sobur S.V. Elektrik tesisatlarının yangın güvenliği: Ref./S. V. Sobur. - M., 2003.
85. Sonin AS Sıvı kristallerin fiziğine giriş. M., 1989. - 369s.
86. Kişisel koruyucu ekipman: Ref. ödenek/S. L. Kaminsky. - L., 1989.
87. Surovkina M.S., Shatokhina S.N., Surovkin V.A. ve diğerleri. Yaşlı hastalarda ortalama kütle moleküllerinin seviyesindeki değişiklikler ve kan plazmasının sistemik organizasyonu // Sat. 2. Tüm Rusya bilimsel ve pratik konferansının bilimsel makaleleri "Tedavinin etkinliğinin teşhisi ve izlenmesinde biyolojik sıvıların morfolojisi." - Moskova. - 2001. - S. 18-20.
88. Tarasevich S. Yu. // Teknik Fizik Dergisi. - 2001. - T. 71, Sayı. 5. - S. 123-125.
89. Tarusinov G. A. Çocuklarda yaygın bağ dokusu hastalıklarının tanı ve ayırıcı tanısında idrarın kristalografik çalışması // Pediatri. - 1994. - No. 1. - S. 55-57.
90. Tekutskaya E.E., Sof'ina L.I. ve diğerleri Biyolojik ortamlarda ağır metallerin içeriğini izleme yöntemleri ve uygulamaları. // Hijyen ve sanitasyon - 1999-№4-S.72-74.
91. Biyolojik substratların tesiokristal çalışması: Kılavuzlar / Kamakin N.F., Martusevich A.K. - Kirov, 2005. - 34p.

Hamileliğin doğru planlanması, üreme sisteminin çeşitli bozukluklarının tanımlanması, optimal doğum kontrol yönteminin seçimi için, kadının adet fonksiyonunun doğası hakkında net bir fikre sahip olmak gerekir. temel unsurları olan yumurtlama .

Adet döngüsü Kadınlarda bir adetin 1. gününden sonraki adetin 1. gününe kadar geçen süre ortalama olarak 28-30 gün. Adet döngüsünün ilk yarısında yumurtalıklardan biri olgunlaşır. folikül, sıvı ile dolu ve olgunlaşan bir yumurta içeren bir şişe. Üzerinde Döngünün 14-15 günü yumurtlama meydana gelir, bu da olgun bir yumurtanın folikülden döllenmeye hazır olarak çıkmasından oluşur.

Yumurtlamadan sonra olgun yumurta 2 gün içinde döllenebilir, ve spermatozoa boşalmadan sonra 4 gün boyunca dölleme aktivitesine sahiptir. Bu nedenle, en olası toplam periyot gebelik 6 gündür .

Muhtemel gebe kalma süresini belirlemek için, yumurtlama anını belirlemek için aşağıdakileri içeren çeşitli yöntemler kullanılır: servikal kanalda bulunan mukusun kristalleşmesinin doğasının değerlendirilmesi veya tükürük kristalleşmesi; rektumda sıcaklık ölçümü; ultrason verileri; hormon seviyelerini incelemek.

Bu nedenle, yumurtlama döneminde, bir cam slayta uygulandıktan ve kurutulduktan sonra servikal kanalda bulunan mukus, eğrelti otu yaprağına benzer bir desen oluşumu ile kristalleşmeye uğrar. Bu kristalleşme süreci, servikal mukusta meydana gelen bir dizi biyofiziksel ve biyokimyasal değişiklikten kaynaklanmaktadır.

Servikal kanalın duvarlarında bulunan bezlerin mukus üretiminin aktivitesi, kadın cinsiyet hormonlarının seviyesi tarafından kontrol edilir - estrojen. Yumurtlama anı yaklaştıkça östrojen konsantrasyonu ve aktivitesi artar. Bu, üretilen mukus miktarında bir artışa ve içindeki sodyum ve potasyum tuzlarında bir artışa yol açar. Sonuç olarak, mukus kuruduğunda, içerdiği tuzlar, eğrelti otu yaprağına benzeyen bir desen oluşturan müsin ile etkileşime girer.

Mikroskop altında bir mukus lekesi incelendiğinde, döngünün 9. gününden itibaren zayıf kristalleşme belirtilerinin ortaya çıktığı görülebilir. Ayrıca, kalıbın ifade derecesi kademeli olarak artar, yumurtlamadan 3-4 gün önce daha net bir şekilde kendini gösterir ve yumurtlama gününde en net ana hatlarına ulaşır. Yumurtlamadan sonra kristalleşme azalır. 2-3 gün içinde çizim bulanıklaşır ve “bulanık” bir görünüm kazanır.

Servikal mukus kristalizasyon testi kullanılarak yumurtlama zamanının belirlenmesi, jinekoloğun günlük ziyaretini gerektirir. Bazı durumlarda, serviksteki patolojik değişiklikler nedeniyle veya bir inflamatuar süreç sırasında, kristalizasyon paterni bozulduğu için çalışma zor olabilir veya sonucun güvenilirliği azalır.

Adet döngüsü sırasında servikal mukusa benzer şekilde kristalleşme paternindeki değişiklikler tükürükte de meydana gelir. Yumurtlama yaklaştıkça östrojen seviyelerinde bir artış, tükürükte ve ayrıca servikal mukusta, sodyum ve potasyum tuzlarının miktarında bir artışa yol açar. Konsantrasyonları yumurtlama gününde maksimuma ulaşır, bu da kurutma sırasında tükürüğün kristalleşmesine yol açar. Yumurtlamayı belirlemek için tükürük kristalizasyon testinin güvenilirliği %96 ile %99 arasında değişmektedir.

Tükürük kristalleşme modelini değerlendirmek ve buna göre yumurtlama zamanını belirlemek için günlük kullanım için uygun kompakt ve hafif optik aletler olan çeşitli mini mikroskoplar kullanılır.

olduğu günlerde gebe kalmak henüz mümkün değil(yumurtlamadan 5-6 gün önce veya daha fazla) veya artık mümkün olmadığında (yumurtlamadan 3-4 gün sonra), kuru tükürük nokta benzeri bulanık bir model oluşturur. Yumurtlamadan 3-4 gün önce, desenin eğreltiotu benzeri bir yapının oluşumunun başlangıcının bir resmi not edilir. Yumurtlama yaklaştıkça, model daha netleşecek ve bu da yüksek bir gebe kalma olasılığını gösterecektir. Yumurtlamadan 2-3 gün sonra desenin netliğinde azalma olur.

Ağız boşluğunda veya gırtlakta iltihaplanma süreçleri sonucun bozulmasına neden olabilir. Sabah tükürüğünün kullanılması veya testi yemekten, diş fırçalamadan, alkol ve sigara içmeden en geç 2-3 saat önce kullanmanız önerilir.

Hem servikal mukus hem de tükürüğün kristalleşmesinin her mikroskobik resminin varlığının süresi ve bunun başka bir resimle değiştirilmesi, adet döngüsünün aşamalarına göre sabit ve tutarlı bir karaktere sahipse, bu, yokluğunu gösterir. ihlalleri ve yumurtlama zamanında ve her adet döngüsünde gerçekleşir. Aynı kristalleşme resminin uzun süreli varlığı, başka bir resim tarafından yokluğu veya zamansız değişmesi, yumurtalık fonksiyonunun ihlal edildiğini gösterir. Bu durumda kesinlikle bir doktora danışmalısınız.

Yumurtlamayı belirlemek için Ayrıca kullanabilirsin sıcaklık testi Bu, adet döngüsünün evresine bağlı olarak vücut sıcaklığının belirli bir şekilde değişmesi gerçeğine dayanmaktadır. Devam eden termal değişikliklerin doğası hakkında en doğru veriler, ölçüm yapılarak elde edilebilir. rektumdaki sıcaklık uykudan hemen sonra, istirahatte, yataktan çıkmadan, tüm adet döngüsü boyunca her gün. Normal adet döngüsünün ilk aşamasında, sıcaklık genellikle daha düşüktür. 37°C. Kelimenin tam anlamıyla yumurtlamanın arifesinde hafifçe azalır ve hemen ardından sıcaklık ilkine göre 0,4-0,6 ° C artar ve kural olarak 37 ° C'den biraz daha yüksek olur. Devam eden sıcaklık dalgalanmaları, adet döngüsünün birinci ve ikinci aşamalarında östrojen seviyesindeki bir değişiklik ve seviyesindeki bir artış ile ilişkilidir. progesteron ikinci aşamaya geçilir. Aynı zamanda yumurtlamadan hemen sonra yumurtalıkta daha yüksek miktarda üretilmeye başlayan progesteron, termoregülatuar merkezi etkileyerek vücut sıcaklığında bir miktar artışa neden olur. Herhangi bir nedenle yumurtlama olmazsa, döngü boyunca sıcaklık yaklaşık olarak aynı olacaktır.

Kapsamlı bir teşhisin parçası olarak, kadın seks hormonlarının (çeşitli östrojen ve progesteron fraksiyonları) seviyesini ve ayrıca kandaki folikül uyarıcı ve lüteinize edici hormonları belirlemek için yöntemler kullanmak mümkündür. Bu hormonların konsantrasyonu, adet döngüsünün evrelerine, yumurtlamanın olup olmamasına bağlı olarak günden güne belirli bir şekilde değişir.

Ultrason yardımıyla folikülün oluşumunu takip etmek, boyutunu belirlemek ve yumurtlama anını belirlemek de mümkündür. Yumurtalıkta olgunlaşan bir folikülün varlığı, adet döngüsünün ilk yarısında kademeli olarak 2-3 cm çapa ulaşan ve ortasında kaybolan bir boşluk oluşumu ile kanıtlanır. Bu oluşumun büyüklüğündeki değişiklik, kural olarak, mukus kristalleşme modelindeki değişiklikler, rektumdaki sıcaklık ve hormon seviyesi ile açıkça bağlantılıdır. Folikülün olgunluğunun ve ultrasona göre erken (1.5 - 2 gün) yumurtlamanın başladığının bir işareti, folikülün iç yüzeyine bitişik küçük bir ışık oluşumuna benzeyen yumurta taşıyan bir tüberkülün saptanmasıdır. Yumurtlama sadece folikülün kaybolması ile değil, aynı zamanda uterusun arkasından sıvının ortaya çıkması ile de gösterilir.

Ultrasonun sağladığına inanılıyor foliküllerin olgunlaşması hakkında daha güvenilir bilgi hormonal testlerle karşılaştırıldığında, çünkü toplamda patolojik olarak olgunlaşmamış birkaç folikül, çalışılan hormonların normal seviyesini sağlayabilir ve bu da adet döngüsünün normal seyri hakkında yanlış bir izlenim yaratacaktır.

Şu anda ultrason, yumurtlama stimülasyonu sürecini ve etkinliğini izlemek için önemli yöntemlerden biridir. Yani aşırı uyarılma ile içlerinde çoklu kavite yapılarının oluşması ile yumurtalıklarda belirgin bir artış olur.

Bu nedenle, yumurtlamayı belirlemek için çeşitli yöntemlerin kullanılması, adet döngüsünün doğasını kontrol etmeyi ve planlı bir hamilelik sırasında gebe kalmak için en uygun dönemi seçmeyi mümkün kılar. İstenmeyen gebeliklerin önüne geçmek için bu testleri kullanarak en akılcı olanı seçebilirsiniz. doğum kontrolü şeması veya gebe kalma olasılığının en yüksek olduğu günlerde cinsel aktiviteyi hariç tutun. Yukarıdaki testleri kullanarak, adet fonksiyonunu düzeltmeye yönelik devam eden tedavinin etkinliğini kontrol etmek de mümkündür.

Ek olarak, rektumdaki sıcaklığı ölçmek veya tükürüğün kristalleşmesini değerlendirmek gibi bir dizi basit test yardımıyla, bir kadın menstrüel fonksiyonunu bağımsız olarak kontrol edebilir.