Agjenti shkaktar i sifilizit. Taksonomia

Nr. 23 Agjenti shkaktar i sifilizit. Taksonomia. Karakteristike. Diagnostifikimi mikrobiologjik. Mjekimi.
Treponema paladium; T. entericum
Morfologjia: treponema tipike me 8-12 vorbulla, aparate motorike - 3 flagjela periplazmike në çdo pol qelizore. Njolla Gram nuk perceptohet; njolla Romanovsky-Giemsa është rozë e lehtë, e zbuluar nga ngopja e argjendit.
Pronat kulturore: tendosje virulente në gropë. nuk rritet në mjedise, akumulimi i kulturës ndodh nëpërmjet infeksionit të lepurit në testikul. Llojet virulente kultivohen në media që përmbajnë indet e trurit dhe veshkave.
Vetitë biokimike: mikroaerofil
Struktura antigjenike: kompleks, ka proteina specifike dhe antigjene lipoide, ky i fundit është identik në përbërje me kardiolipinën e nxjerrë nga zemra e gjedhit (difosfadilglicerol)
Faktorët e patogjenitetit: adhezinat përfshihen në procesin e ngjitjes, lipoproteinat përfshihen në zhvillimin e proceseve imunopatologjike.
Rezistenca: e ndjeshme ndaj tharjes, rrezet e diellit, qëndron në objekte derisa të thahet. Në kushte të pafavorshme, ajo shndërrohet në L-forma dhe formon kiste.
Patogjeneza: Shkakton sifilizin. Nga porta hyrëse, treponemat hyjnë në nyjet limfatike rajonale, ku shumohen. Më pas, T. depërton në qarkullimin e gjakut, ku ngjitet me qelizat endoteliale, duke shkaktuar endarterit, duke çuar në vaskulit dhe nekrozë të indeve. Me gjakun, T. përhapet në të gjithë trupin, duke mbjellë organet: mëlçinë, veshkat, kockat, sistemin kardiovaskular dhe nervor.
Imuniteti: imuniteti mbrojtës nuk është zhvilluar. Në përgjigje të antigjeneve patogjene, zhvillohen HRT dhe proceset autoimune. Imuniteti humoral zhvillohet në përgjigje të antigjenit lipoid T. dhe është një titër i IgA dhe IgM.
Ekzaminimi mikroskopik. Kryeni për sifilisin primar gjatë shfaqjes së shankut. Materiali për hulumtim: shkarkimi i shankut, përmbajtja e nyjeve limfatike rajonale, nga të cilat përgatitet një pikë "e shtypur" dhe ekzaminohet në një fushë të errët. Nëse rezultati është pozitiv, duken fijet e holla të shtrënguara 6-14 mikron të gjata, me 10-12 kaçurrela të vogla uniforme të formës së rregullt. Treponema e zbehtë karakterizohet nga lëvizje të ngjashme me lavjerrësin dhe me përkulje përkthimore. Me zhvillimin e lezioneve në mukozën e gojës gjatë sifilisit sekondar, si dhe me lokalizimin e kankroitit në zgavrën e gojës, është e nevojshme të diferencohet Treponema pallidum nga Treponema saprofitike, të cilat janë përfaqësuese të mikroflorës normale. Në këtë rast, zbulimi i treponemave tipike në pikën e nyjeve limfatike rajonale është me rëndësi diagnostike vendimtare.
Serodiagnoza. Reaksioni Wasserman kryhet njëkohësisht me 2 antigjenë: 1) specifik, që përmban antigjenin e patogjenit - treponemat e shkatërruara me ultratinguj; 2) jospecifike - kardiolipinë. Serumi i provës hollohet në një raport 1:5 dhe vendoset RSC sipas metodës së pranuar përgjithësisht. Me një reagim pozitiv, vërehet një vonesë në hemolizë, me një reagim negativ, ndodh hemoliza e qelizave të kuqe të gjakut; intensiteti i reaksionit vlerësohet në përputhje me rrethanat nga (+ + + +) në (-). Periudha e parë e sifilizit është seronegative dhe karakterizohet nga një reagim negativ Wasserman. Në 50% të pacientëve, reagimi bëhet pozitiv jo më herët se 2-3 javë pas shfaqjes së shankrit. Në periudhën e dytë dhe të tretë të sifilizit, frekuenca e reaksioneve pozitive arrin 75-90%. Pas kursit të trajtimit, reagimi Wasserman bëhet negativ. Paralelisht me reaksionin Wasserman, kryhet një reaksion mikroprecipitimi me një antigjen kardiolipin jospecifik dhe serumin ose plazmën e gjakut të inaktivizuar nga testi. 3 pika serumi aplikohen në një pus në një pjatë pleksiglas (ose xhami të rregullt) dhe shtohet 1 pikë antigjen kardiolipin. Përzierja përzihet mirë dhe merren parasysh rezultatet. Një reagim pozitiv me serumin e gjakut të një pacienti me sifilis karakterizohet nga formimi dhe humbja e thekoneve të madhësive të ndryshme; me rezultat negativ vërehet opalescencë uniforme e dritës.
RIF - reaksion indirekt imunofluoreshent - është specifik për diagnozën e sifilizit. Një pezullim i treponemave të indeve përdoret si një antigjen. Përdoret reaksioni RIF_200. Serumi i pacientit inaktivizohet në të njëjtën mënyrë si për reaksionin Wassermann dhe hollohet në një raport 1:200. Pikat e antigjenit aplikohen në rrëshqitjet e qelqit, thahen dhe fiksohen në aceton për 5 minuta. Pastaj serumi i pacientit aplikohet në përgatitje, pas 30 minutash lahet dhe thahet. Hapi tjetër është trajtimi i ilaçit me serum fluoreshent kundër globulinave njerëzore. Përgatitja studiohet duke përdorur një mikroskop fluoreshent, duke vënë në dukje shkallën e lumineshencës së treponemave.
Reagimi RIT i imobilizimit të treponemave është gjithashtu specifik. Një kulturë e gjallë e Treponemës përftohet duke e kultivuar atë në një testikul lepuri. Testikuli shtypet në një medium të veçantë në të cilin treponemët mbeten të lëvizshëm. Reagimi është vendosur si më poshtë: një pezullim i treponemave indore (lëvizëse) kombinohet në një epruvetë me serumin e provës dhe shtohet komplement i freskët. Në një tub kontrolli, në vend të serumit të testimit, shtohet serumi i një personi të shëndetshëm, në tjetrin, në vend të komplementit të freskët, shtohet i inaktivuar - joaktiv. Pas mbajtjes në 35 °C në kushte anaerobe (anaerostat), përgatitet një pikë "e grimcuar" nga të gjitha epruvetat dhe numri i treponemave të lëvizshme dhe të palëvizshme përcaktohet në një fushë të errët.
Trajtimi: Penicilina, tetraciklina, barna që përmbajnë bismut.

Sifilizi është një sëmundje ciklike veneriane e njeriut e shkaktuar nga një spiroket e zbehtë; Faza I manifestohet nga kankroidi (fr. shankër– ulçera), stadi II – dëmtimi i mureve të enëve të gjakut dhe skuqjet e ndryshme, stadi III – mishrat e dhëmbëve në organe të ndryshme me dëmtim të sistemit nervor. Gumma (lat. . gummi- çamçakëz) është një infiltrat kronik në formën e një nyje, i prirur për kalbje dhe ulçerim. Gumma sifilitike ( sin.: granuloma sifilitike, sifilidi i gumës, sifiloma terciare) është një gomë hemisferike pa dhimbje, e cila është një manifestim i sifilisit terciar aktiv. Patogjen - Treponema e zbehtë- u zbulua në vitin 1905 nga F. Schaudin dhe E. Hoffmann.

T. pallidum– mikroorganizëm në formë spirale me përmasa 0,09 – 0,18 x 6 – 20 mikron. Numri i kthesave spirale është nga 8 në 12, kthesat janë uniforme, të vendosura në të njëjtën distancë nga njëra-tjetra, rreth 1 mikron, lartësia zvogëlohet drejt skajeve. Në një mikroskop elektronik duket si një gjarpër ose krimb toke. Në të dy skajet e treponemës ka blefaroplaste me flagjela të ngjitura në to, numri i të cilave varion nga dy në disa; ato formojnë një fije boshtore të përdredhur rreth cilindrit protoplazmatik të spiroketës. Në kushte të pafavorshme mund të formojë kiste. Në trupin e kafshëve, mund të shfaqet një rast i ngjashëm me kapsulën me natyrë mukopolisakaride.

Treponema nuk njolloset mirë me bojëra aniline, prandaj shkaktari i sifilizit quhet spiroketa e zbehtë. Redukton nitratin e argjendit në argjend metalik, i cili depozitohet në sipërfaqen e mikrobit dhe e bën atë të dukshëm në inde: kur njolloset sipas Morozov, treponema duket kafe ose pothuajse e zezë. Kur njollosen sipas Romanovsky-Giemsa, ato marrin një ngjyrë rozë të zbehtë.

Treponema zakonisht riprodhohet me ndarje tërthore dhe qelizat e ndara mund të ngjiten me njëra-tjetrën për ca kohë. Koha e ndarjes është rreth 30 orë.

Treponemat e gjalla janë shumë të lëvizshme, duke bërë lëvizje rreth boshtit të tyre gjatësor, si dhe lëvizje të përkuljes, valëve dhe përkthimit.

Deri më sot, nuk ka asnjë metodë me të cilën do të ishte e mundur të siguroheshin në mënyrë të qëndrueshme kulturat treponeme. Treponema pallidum, patogjene për njerëzit, nuk është kultivuar kurrë në mjedise ushqyese artificiale, në embrionet e pulave ose në kulturat e qelizave. Ato varietete të shtameve të tyre që rriten në kushte anaerobe janë ndoshta spiroketa saprofitike, afër agjentit shkaktar të sifilizit. Fiziologjia e tyre mbetet pak e studiuar. Treponema janë kemoorganotrofe, nuk kanë katalazë dhe oksidazë dhe mund të fermentojnë karbohidratet. Ata rriten në mjedise shumë të pasura që përmbajnë deri në 11 aminoacide, vitamina, kripëra dhe albuminë serumi. Mënyra më e mirë për të rritur spiroketat patogjene është të infektoni një lepur në testis (orkit eksperimental). Është sugjeruar që ka T. pallidum ciklin jetësor, duke përfshirë, përveç formës spirale, fazën e grimcuar dhe fazën e trupave sferikë të ngjashëm me kist. Janë format kokrrizore të këtyre mikroorganizmave që janë në gjendje të kalojnë nëpër filtra bakterial.

Antigjenet e treponemës janë studiuar dobët. Është vërtetuar se treponemët përmbajnë proteina, polisaharide dhe komplekse lipide. Përbërja antigjenike e treponemave kulturore dhe indore është aq e afërt sa që antigjenet e përgatitura nga treponemat kulturore mund të përdoren për RSC në diagnostikimin e sifilizit. Në trupin e njeriut, treponemat stimulojnë prodhimin e antitrupave, të cilët shkaktojnë imobilizim dhe vdekje të treponemave të gjallë lëvizëse, fiksojnë komplementin në prani të një pezullimi. T. pallidum ose spiroketa të ngjashme, dhe zbulohen gjithashtu në RIF indirekte.

Agjenti shkaktar i sifilizit nuk prodhon ekzotoksina. Treponema pallidum është relativisht jorezistente ndaj ndikimeve të jashtme. Ata vdesin shpejt kur thahen dhe në temperatura të larta (në 55 °C për 15 minuta). Në një zgjidhje 0,3 - 0,5% HCl ata humbasin menjëherë lëvizshmërinë e tyre; Ata gjithashtu e humbin shpejt atë dhe vdesin në prani të arsenikut, bismutit dhe merkurit. Në gjakun e plotë ose në serumin në 4 °C ato mbeten të qëndrueshme për 24 orë, gjë që duhet të merret parasysh gjatë transfuzionit të gjakut.

Epidemiologjia. Sifilizi është një sëmundje tipike veneriane. Burimi i infeksionit është një person i sëmurë, zakonisht ngjitës për 3 deri në 5 vjet; pacientët me forma të vonshme të sifilizit nuk janë ngjitës. Infeksioni në shumicën dërrmuese të rasteve ndodh përmes llojeve të ndryshme të kontakteve seksuale dhe shtëpiake, rrallë përmes rrugës transplacentare nga një nënë e sëmurë tek fëmija (sifilizi kongjenital) ose si një infeksion profesional përmes kontaktit të personelit mjekësor. Në kushte natyrore, vetëm njerëzit vuajnë nga sifilizi; në eksperimente, majmunët, brejtësi dhe lepujt mund të infektohen. Tek majmunët, shankri zhvillohet në vendin e injektimit të treponemës; tek lepujt dhe hamsterët, infeksioni është asimptomatik.

Patogjeneza dhe klinika. Periudha e inkubacionit për sifilizin e fituar varion nga 2 deri në 10 javë, zakonisht 20-28 ditë. Pikat hyrëse për infeksion janë më shpesh mukozat e organeve gjenitale, më rrallë zgavra me gojë, si dhe lëkura e dëmtuar. Në vendin e depërtimit, patogjeni shumëfishohet dhe formohet sifiloma parësore (shankre i fortë) - erozion ose ulçerë me një bazë të ngjeshur. Më pas, patogjeni hyn në sistemin limfatik dhe zhvillohet limfangiti dhe limfadeniti rajonal. Kjo është një pasqyrë tipike klinike e sifilizit primar, e cila zgjat 1,5 - 2 muaj. Më pas këto shenja zhduken. Periudha dytësore e sifilizit shoqërohet me përgjithësimin e procesit, kur shumë nyje limfatike zmadhohen dhe shfaqen skuqje në lëkurë dhe mukoza; Mund të ndodhë dëmtim i organeve të brendshme dhe sistemit nervor. Ka sifilis dytësor të freskët dhe sekondar të përsëritur. Me çdo rikthim pasues, intensiteti i skuqjes bëhet më pak i theksuar dhe periudhat midis rikthimeve rriten. Elementet e skuqjes përmbajnë një numër të madh treponemash të gjalla; gjatë kësaj periudhe pacienti është më ngjitës. Kohëzgjatja e sifilizit sekondar është deri në 4 vjet ose më shumë. Sëmundja pastaj hyn në një periudhë të gjatë asimptomatike, pas së cilës, pas disa vitesh, zhvillohet sifilizi terciar. Në këtë rast, vërehen dëmtime të rënda organike të organeve të brendshme, sistemit kardiovaskular, sistemit nervor qendror, kockave, formohen mishrat e dhëmbëve, të shoqëruar me prishje të indeve dhe ndryshime degjenerative. Një tipar karakteristik klinik i sifilizit është mungesa e ndonjë ankese subjektive nga pacienti (dhimbje, kruajtje, djegie, etj.).

Imuniteti. Nuk ka imunitet natyral apo artificial kundër sifilizit; Ekziston vetëm imuniteti infektiv, dhe për sa kohë që ekziston, një person praktikisht nuk është i ndjeshëm ndaj një infeksioni të ri. Imuniteti infektiv zhvillohet 10-11 ditë pas shfaqjes së një shankre të fortë (imuniteti kankroid); gjatë kësaj periudhe, ri-infeksioni ose nuk vërehet, ose shankri i sapoformuar është abortive (superinfeksion). Më pas, gjatë superinfeksionit, natyra e lezioneve që rezultojnë korrespondon me fazën e sëmundjes në kohën e ri-infeksionit. Superinfeksioni shpjegohet me një dobësim të përkohshëm ose "prishje" të imunitetit infektiv. Është e nevojshme të dallohet riinfeksioni nga superinfeksioni, pra një infeksion i ri, i përsëritur i një personi që më parë ka pasur sifiliz (të shëruar) dhe, për rrjedhojë, ka humbur imunitetin infektiv. Janë përshkruar edhe tre raste të sifilizit. Periudha e inkubacionit në pacientë të tillë është më e shkurtër, shankri i shumëfishtë ulceroz me limfadenit zhvillohet më shpesh dhe reaksionet serologjike bëhen pozitive më herët. Në periudhën dytësore, papulat në lëkurë shpesh gërryen. Kjo shpjegohet me faktin se me sifiliz zhvillohet një reaksion i mbindjeshmërisë së tipit të vonuar; pas trajtimit, limfocitet e sensibilizuar mbeten në trup për një kohë të gjatë. Imuniteti infektiv është i natyrës jo sterile dhe shkaktohet nga faktorë humoralë: imunoglobulinat e klasave G, A dhe M gjenden në serumin e pacientit.

Diagnostifikimi laboratorik. Për të diagnostikuar sifilizin, një qasje e integruar është optimale, duke përfshirë përdorimin e njëkohshëm të disa metodave. Ato ndahen tradicionalisht në ato të drejtpërdrejta, të cilat bëjnë të mundur vërtetimin e pranisë së një patogjeni në materialin në studim (infeksioni i kafshëve, lloje të ndryshme të mikroskopisë dhe metodat gjenetike molekulare të zbulimit të ADN-së T. pallidum– PCR dhe probing ADN), dhe indirekte – teste serologjike për zbulimin e antitrupave. Nga ana tjetër, testet serologjike përfaqësohen nga testet jo-treponemale dhe treponemale.

Materiali që do të testohet për zbulimin e treponemave në metoda të drejtpërdrejta është shkarkimi i shankut ose pika e tij, pika e nyjeve limfatike, gërvishtja e roseolës dhe lëngu cerebrospinal. Patogjeni zbulohet më së miri në materialin vendas me anë të fushës së errët (shih Fig. 111.4) ose mikroskopi me kontrast fazor, i cili mundëson vëzhgimin e llojeve të ndryshme të lëvizjes së patogjenit të gjallë. Nëse trajtimi me antibiotikë tashmë ka filluar, patogjeni nuk mund të zbulohet në materialin patologjik. Nëse është e nevojshme, kryhet RIF direkt (ose indirekt) ose përgatitja ngjyroset sipas Romanovsky-Giemsa. Këto metoda përdoren vetëm për diagnostikimin e hershëm të sifilizit.

Testet serologjike mund të përdoren në faza të ndryshme të sëmundjes, me përjashtim të sifilizit primar seronegativ. Zakonisht përdoret një kompleks reaksionesh serologjike. TE jo treponemale testet me përcaktimin vizual të rezultateve përfshijnë: reaksionin e fiksimit të komplementit (reaksioni Wassermann = RSKk = RW) me antigjenin kardiolipin të muskulit të zemrës së gjedhit (antigjen me reaksion të kryqëzuar), reaksionin e mikroprecipitimit (MR, ose RMP) - mikroreaksion me plazmën dhe serumin e inaktivuar; RPR - testi i shpejtë i rigjenerimit të plazmës dhe reaksione të tjera. Ekspertët besojnë se për ekzaminim masiv është më mirë të përdoren dy teste: RPR dhe RPGA ose ELISA, pasi RPR është më i ndjeshëm në sifilizin primar, RPGA - në fazat e mëvonshme të sëmundjes dhe ELISA - në të gjitha fazat. Testet jo-treponemale me leximin mikroskopik të rezultateve përfshijnë testin VDRL dhe testin USR. Testet jo-treponemale përdoren si teste depistuese, pasi ato mund të japin rezultate false pozitive. NË treponemal testet përdorin antigjene me origjinë treponemale. Ato përdoren për të konfirmuar rezultatet e testeve jo-treponemale (false pozitive?) për dyshimin klinik, epidemiologjik dhe anamnestik të sifilisit, për diagnostikimin e formave latente dhe të vonshme, për një diagnozë retrospektive. Testet treponemale përfshijnë: RSKt (RSK me antigjen treponemal), RIBT (ose RIT) - reaksion imobilizimi i Treponema pallidum, RIF (një nga reaksionet më të mira), RPHA, ELISA, imunoblotting.

Diagnoza mikrobiologjike e sifilizit

Punë praktike

Mjekësia dhe mjekësia veterinare

Emri treponema "e zbehtë" u dha për shkak të aftësisë së saj të ulët ngjyruese. Ka treponeme të tjera patogjene: T. pertenue - shkaktar i yaws, T. carateum - shkaktar i pint, T. bejel - shkaktar i spiroketozës kronike të gjeneralizuar (bejel). Patogjenët e specifikuar dhe ato të shkaktuara...

Udhëzime për nxënësit për mësimin praktik nr.36.

Tema e mësimit:

Synimi: Studimi i metodave të diagnostikimit mikrobiologjik, terapisë dhe parandalimit të sifilizit.

Moduli 2 . Mikrobiologji e veçantë, klinike dhe mjedisore.

Tema 36: Diagnoza mikrobiologjike e sifilizit.

Rëndësia e temës:

Agjenti shkaktar i sifilizit

Sifilizi është një sëmundje infektive veneriane e shkaktuar nga Treponema pallidum, e karakterizuar nga dëmtimi i lëkurës, organeve të brendshme, kockave dhe sistemit nervor. Ka sifilis të fituar dhe të lindur.

Taksonomia. Agjenti shkaktar i sifilizit - treponema pallidum (Treponema pallidum) - u zbulua në vitin 1905 nga F. Schaudinn dhe E. Hoffman; i përket familjes Spirochaetaceae, ndarjes Gracilicutes.

Morfologjia dhe vetitë tintoriale.Emri treponema "e zbehtë" u dha për shkak të aftësisë së saj të ulët ngjyruese. Ka treponeme të tjera patogjene: T. pertenue - shkaktar i yaws, T. carateum - shkaktar i pint, T. bejel - shkaktar i spiroketozës kronike të gjeneralizuar (bejel). Këta patogjenë dhe sëmundjet që shkaktojnë janë më të zakonshme në rajonet me klimë të nxehtë dhe të lagësht. Treponema pallidum është një bakter i hollë në formë spirale, 4 deri në 14 mikron i gjatë, me kaçurrela të vogla uniforme (8-14 kaçurrela); së bashku me formën spirale mund të ketë forma të tjera - në formën e cisteve, granulave, formave L; e njollosur sipas Romanovsky-Giemsa në një ngjyrë rozë të zbehtë karakteristike. Lëvizjet variojnë nga spirale në përkulje.

Kultivimi.Treponema pallidum është një anaerobe e detyrueshme, jashtëzakonisht kërkuese për lëndë ushqyese. Treponema e kultivuar në mjedise ushqyese - një spiroket kulturore - ndryshon nga ajo patogjene në të qenit më pak virulente, por antigjenet e tyre janë të ngjashëm, e cila përdoret në serodiagnozën e sifilizit.

Struktura antigjenike.Treponema pallidum karakterizohet nga lidhje antigjenike me treponema të tjera, si dhe me lipoide të indeve shtazore dhe njerëzore. Disa antigjene janë identifikuar në patogjen, njëri prej të cilëve, antigjeni lipoid, është identik me ekstraktin lipoid të zemrës së gjedhit.

Rezistenca. Treponema pallidum është pak rezistente në mjedis; në 55 0 C vdes brenda 15 minutave, është i ndjeshëm ndaj tharjes, dritës, kripërave të merkurit, bismutit, arsenikut, penicilinës. Në sendet shtëpiake mbetet infektues derisa të thahet; të ruajtura mirë në indin kadaverik.

Ndjeshmëria e kafshëve.Eksperimentalisht, procesi patologjik mund të induktohet në testikujt dhe lëkurën e lepujve dhe në lëkurën e majmunëve të mëdhenj.

Epidemiologjia. Burimi i infeksionit është një person i sëmurë. Infeksioni ndodh kryesisht nëpërmjet kontaktit seksual, rrallë nëpërmjet sendeve shtëpiake (syze, furça dhëmbësh, cigare etj.) të kontaminuara me sekrecione nga pacienti; Infeksioni përmes puthjeve, qumështit nga një nënë gjidhënëse (sifilizi shtëpiak) është i mundur; nuk përjashtohen rastet e infeksionit përmes transfuzioneve të gjakut nga donatorët me sifiliz.

Patogjeneza dhe pasqyra klinike.Agjenti shkaktar i sifilizit hyn në trup përmes lëkurës ose mukozës, përhapet nëpër organe dhe inde, duke shkaktuar dëmtimin e tyre. Periudha e inkubacionit zgjat mesatarisht 3-4 javë. Pas periudhës së inkubacionit, sifilizi shfaqet në mënyrë ciklike në formën e periudhave primare, sekondare dhe terciare. Në vendin e futjes së patogjenit (në organet gjenitale, në zgavrën me gojë, etj.) Shfaqet një lezion parësor - shankre - një ngjeshje e kufizuar ashpër me një ulçerë në sipërfaqe. Periudha dytësore e sifilisit zgjat 3-4 vjet, e karakterizuar nga një skuqje dhe një shkelje e gjendjes së përgjithshme të trupit. Periudha terciare karakterizohet nga dëmtimi i lëkurës, mukozave, organeve të brendshme, kockave dhe sistemit nervor: shfaqen formacione që janë të prirura për kalbje dhe ulçerim.

Imuniteti. Nuk ka imunitet të lindur ndaj sifilizit. Me sifiliz, zhvillohet imuniteti jo-steril; Pas shërimit, imuniteti nuk ruhet, kështu që sëmundjet e përsëritura janë të mundshme.

Mikroskopi me fushë të errët përdoret për të zbuluar Treponema pallidum në shkarkimin e kankrodit. Në fund të periudhës parësore dhe dytësore, reaksionet sergologjike të Wasserman, reaksionet e sedimentit të Kahn, testet citokolike dhe të tjera që zbulojnë antitrupa ndaj treponema pallidum bëhen pozitive. Gjatë ekzaminimeve masive, përdoret një reaksion përzgjedhjeje ose mikroreaksion në xhami me një pikë gjaku ose serum dhe një antigjen të veçantë. Laboratorët kërkimorë përdorin gjithashtu reaksionin e imobilizimit të treponemës dhe metoda të tjera moderne.

Skema e hulumtimit mikrobiologjik për sifilizin

Ekzaminimi mikroskopik Serodiagnoza

(grupi i reaksioneve serologjike):

Reagimi i Wasserman

Reagimi i imobilizimit të treponemës

Mikroskopi i preparatit vendas RIF

Në një fushë të errët

PËRGJIGJE PËRGJIGJE

Mjekimi. Agjentët antimikrobikë më efektivë janë antibiotikët penicilinë. Përdoren edhe preparatet e bismutit, jodit etj.

Parandalimi. Nuk ka asnjë parandalim specifik. Parandalimi jospecifik konsiston në respektimin e rregullave të higjienës, si dhe në kryerjen e një sërë masash sanitare dhe higjienike të natyrës publike: regjistrimin e pacientëve me sifiliz, shtrimin në spital të të gjithë pacientëve me forma infektive, përfshirjen në ekzaminimin e të gjithë anëtarëve të familjes. i të sëmurit, ekzaminimi sistematik i grupeve të riskut, edukimi i popullatës etj.

Qëllimet specifike:

Njihuni me morfologjinë e agjentit shkaktar të sifilizit.

Përcaktoni tiparet e rrjedhës klinike të sifilizit.

Përcaktoni konceptet e treponemave "indore" dhe "kulturore".

Interpretoni rezultatet e ekzaminimit mikroskopik.

Metodat e studimit të diagnozës serologjike të sifilizit.

Njihuni me metodat e parandalimit dhe terapisë specifike.

Te jesh i afte te:

• Mblidhni materiale për kërkime nga pacientët
• Interpretoni rezultatet e ekzaminimit mikroskopik
• Të jetë në gjendje të kryejë reagimin Wasserman

Pyetje teorike:

1. Patogjen.

• Vetitë. Rezistenca.
• Patogjeniteti për njerëzit dhe kafshët. Faktorët e patogjenitetit, toksinat.
• Patogjeneza e sëmundjes tek njerëzit, imuniteti.
• Diagnostifikimi mikrobiologjik.
• Parandalimi dhe trajtimi specifik

2. Qëllimet e inskenimit të reagimit Wasserman.

3. Vlera diagnostike e reaksionit Wasserman dhe reaksioneve sedimentare.

4. Mekanizmi i reaksionit Wasserman.

5. Veçoritë e imunitetit në sifiliz.

Detyrat praktike të kryera në klasë:

• Mikroskopi i preparateve demonstruese.
• Demonstrimi i skicimit kalon në protokoll.
• Analiza e skemës së diagnostikimit laboratorik.
• Hartimi i protokollit.

Literatura:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Mikrobiologjia mjekësore, imunologjia dhe virologjia / Tekst mësimor për universitetet mjekësore, Shën Petersburg: "Literaturë speciale", 1998. - 592 f.

2. Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Mikrobiologjia / Teksti mësimor - Botimi i 2-të, i rishikuar. dhe shtesë - M.: Mjekësi, 1983, - 512 f.

3. Pyatkin K.D. Krivoshein Yu.S. Mikrobiologjia me virologji dhe imunologji - Kiev: Shkolla Vishcha, 1992. - 431 f.

4. Mikrobiologjia mjekësore /Redaktuar nga V.I. Pokrovsky.- M.: GEOTAR-MED, 2001.- 768 f.

5. Udhëzues për orët praktike në mikrobiologji, imunologji dhe virologji. /Ed. M.P. Zykova.- M. “Mjekësi”. 1977. 288 f.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Mikrobiologjia. /Ed. F.K. çerkez M.: Mjekësi, 1986. 512 f.

7. Shënime leksioni.

Literaturë shtesë:

1. Makiyarov K.A. Mikrobiologjia, virologjia dhe imunologjia - Alma-Ata.: "Kazakhstan", 1974. 372 f.

2. Titov M.V. Sëmundjet infektive - K., 1995. 321 f.

3. Shuvalova E.P. Sëmundjet infektive - M.: Mjekësi, 1990. - 559 f.

4. BME, T. 1, 2, 7.

5. Pavlovich S.A. Mikrobiologjia mjekësore në grafikë: Libër mësuesi. kompensim për mjekësi in-tov Mn.: Më i lartë. shkolla, 1986. 255 f.

Udhëzime të shkurtra për të punuar në një mësim praktik.

Në fillim të orës së mësimit kontrollohet niveli i përgatitjes së nxënësve për mësimin.

• Punë e pavarur.
• inskenimi i reaksionit Wasserman.
• Kontabilizimi i reagimit të Wasserman dhe regjistrimi në protokoll.
• Analiza dhe regjistrimi i skemave diagnostikuese laboratorike në protokoll.

Puna e pavarur përfshin edhe mikroskopinë e përgatitjeve demonstruese dhe skicimin e tyre në protokollin e mësimit.

Në fund të orës së mësimit, kryhet një kontroll testi dhe analiza e rezultateve përfundimtare të punës së pavarur të secilit student.

Harta teknologjike për zhvillimin e një mësimi praktik

Nr.	Fazat	Koha në min.	Mënyrat e të mësuarit	Pajisjet	Vendndodhja
	Kontrollimi dhe korrigjimi i nivelit të prodhimit të përgatitjes për një mësim	20	Testet e nivelit të prodhimit	Tabelat. Testet mbi temën.	Dhomë studimi
	Punë e pavarur	35	Grafiku strukturë logjike	Koleksion i barnave demonstruese, produkteve biologjike.
	Vetë-monitorimi dhe korrigjimi i materialit të mësuar	15	Programet e synuara të trajnimit
	Kontrolli i testit	15	Testet
	Analiza e rezultateve të punës

Algoritmi i punës laboratorike:

Studimi i skemës së diagnostikimit laboratorik të sifilizit.

Mikroskopi i njollave të përgatitura nga treponemat e kultivuara dhe indore.

Njohja me rregullat e grumbullimit të materialit nga pacientët për mikroskopimin e materialit që studiohet.

Mikroskopi dhe analiza e preparateve demonstruese.

Skicimi i barnave në protokoll.

Regjistrimi i skemave diagnostikuese laboratorike në protokoll.

Hartimi i protokollit.

Kontrolli i testit dhe analiza e rezultateve të punës së pavarur të secilit student.

Detyrat e synuara të trajnimit:

1. Një pacient u shtrua në spital me diagnozën e sifilizit primar. Cila nga metodat e mëposhtme diagnostike përdoret në këtë fazë të sëmundjes?

A . mikroskopi i fushës së errët;

C. RP në xhel

D. RA

E . imunofluoreshencë indirekte

2. Në një pacient nga departamenti i kirurgjisë maksilofaciale, kur është kryer reagimi Wasserman, ka rezultuar negativ. Cili nga rezultatet e mëposhtme përdoret për të përcaktuar fenomenin e RSC negative?

A . nga aglutinimi i eritrociteve;

B . nga prania e sedimentit të qelizave të kuqe të gjakut;

C . duke ndryshuar ngjyrën e lëngut;

D . nga formimi i filmit

E . nga prania e hemolizës në provëza.

3. Gjatë ekzaminimit të një pacienti me KVD, u zbuluan skuqje papulare-rozeoloze në bust dhe gjymtyrë dhe nyje limfatike të zmadhuara. Diagnoza paraprake e sifilizit. Cila metodë diagnostike laboratorike mund ta konfirmojë këtë diagnozë?

A. alergjik;

B. biologjike;

C . bakteriologjike;

D . bakterioskopik;

E. ELISA

4. Gjatë takimit, dentisti zbuloi një shankër të fortë në gojën e pacientit. Cila nga metodat e mëposhtme të diagnostikimit laboratorik mund të përdoret për të vendosur një diagnozë?

A . Reagimi i imobilizimit të treponemës

B . Reagimi i Wasserman

C. Reagimi Kahn

D. RA

E . bakterioskopike

5. Një grua erdhi në klinikën antenatale në 8 javë të shtatzënisë. Gjatë ekzaminimit, asaj iu mor gjak për të kontrolluar praninë e antitrupave specifikë ndaj treponemave. Cili nga testet serologjike të mëposhtme mund të përdoret për të zbuluar antitrupat ndaj treponemës?

A. Reagimi i Wright

B . Reagimi i Wasserman

C. Reagimi Vidal

D . Reagimi Bordet-Gengou

E. RTGA.

6. Për të konfirmuar diagnozën e sifilizit, laboranti kreu një reaksion serologjik, në të cilin përdori serumin e gjakut të pacientit, antigjenin kardiolipid, komplementin dhe një sistem tregues. Cili është emri i reagimit të dhënë?

A . Reagimi i imobilizimit të treponemës;

B . Reagimi Wasserman;

C. Reagimi Kahn

D. RP

E . reagimi i imunofluoreshencës.

7. Gjatë kryerjes së një reaksioni serologjik për zbulimin e antitrupave ndaj agjentit shkaktar të sifilizit në serumin e gjakut të pacientit, treponemet u inkubuan me serumin e pacientit në kushte anaerobe, pas së cilës bakteret humbën lëvizshmërinë e tyre. Çfarë reagimi është dhënë dhe çfarë do të thotë?

A . Reagimi Wasserman, pacienti ka sifiliz;

B .Reagimi Wassermann, pacienti është në periudhë inkubacioni;

C . Reagimi i imobilizimit të treponemës, pacienti ka sifiliz;

D . reaksion indirekt imunofluoreshent, pacienti ka sifilis;

E . Reagimi i imobilizimit të Treponemës, pacienti dikur vuante nga sifilizi.

8. Për diagnozën serologjike të sifilisit duke përdorur reaksionin Wasserman, mjeku laboratorik përgatiti reagentët e mëposhtëm: antigjen kardiolipid, tretësirë ​​izotonike klorur natriumi, sistem hemolitik. Çfarë komponenti tjetër nevojitet për të zhvilluar këtë reagim?

A . treponema e gjallë;

B . qelizat e kuqe të gjakut të deleve;

C. plotësues;

D . serum antiglobulin;

E . serum precipitues diagnostik.

9. Në një mikrorrëshqitje të përgatitur nga nyjet limfatike me pika të një pacienti, të njollosur sipas Romanovsky-Giemsa, mjeku identifikoi mikroorganizma të hollë me 12-14 kaçurrela uniforme me ngjyrë rozë të zbehtë. Për cilin shkaktar të sëmundjes infektive mund të flasim në këtë rast?

A . ethet e përsëritura;

B. leptospiroza;

C. leishmanioza

D. sifilizit

E. trypanosomiasis.

10. Një skrap nga mukoza e gojës është marrë nga një pacient me sifilis primar të dyshuar. Mikroskopi i një njollosjeje të njollosur duke përdorur metodën Romanovsky-Giemsa zbuloi baktere të ndërlikuara ngjyrë vjollce. Cili nga përfundimet e mëposhtme është i saktë?

A . pacienti u diagnostikua T. pallidum;

B . Pacienti u zbulua se kishte forma atipike T. pallidum;

C . Pacienti u diagnostikua me treponeme jo patogjene;

D . u zgjodh metoda e gabuar e pikturës;

E. -

11. Një klinicist dyshoi për sifiliz primar te një pacient. Çfarë materiali kërkimor është i përshtatshëm për të mbledhur për të konfirmuar diagnozën?

A . lëngu i indeve nga shankri dhe nyjet limfatike me pika;

B . kruarje nga skuqjet e lëkurës;

C. lëngu cerebrospinal;

D. mukusit nga hunda

E. pështymë.

12. Është marrë gjak nga një pacient me sifilis dytësor të dyshuar për analizë. Cila metodë diagnostike është e përshtatshme të përdoret për të konfirmuar diagnozën?

A . Reagimi Vidal;

B . test alergjik;

D . Reagimi Bordet-Gengou

E . metodë bakteriologjike

C . reaksion indirekt imunofluoreshent.

Si dhe vepra të tjera që mund t'ju interesojnë
68128.		Fjalët në krye - dhe parajsa në shpirt	78.5 KB
	Meta: thithin njohuritë akademike nga teoria e letërsisë, analizën ideologjike dhe artistike të veprës poetike dhe përmirësojnë të kuptuarit e leximit kuptimplotë; zhvilloni një vizion më poetik të imazheve; të nënndash dashurinë tek fjala artistike dhe tek natyra natyrore. Do t'i lexoj vargjet poetike dhe ti do jesh fajtor...
68129.		Lojë intelektuale “Argëtim letrar” Do të jeni gjithmonë në zemrat e njerëzve, Taras!	43.5 KB
	Shevchenko zhvillon një kuptim logjik të leximit virazne vikhovuvaty deri në fjalën e Shevchenkos dhe tsikavіst deri në zhvillimin e krijimtarisë së tij. Taras Shevchenko Taras Ky emër rebel dhe profetik është i njohur jo vetëm për ukrainasit, por edhe për pjesën tjetër të botës. Burimi i Shevchenkos me ujin e Dzherelnoy është si një lutje shpirtërore për njerëzit.
68130.		Njohja me Tokën e Logjikës	28.5 KB
	Sot fëmijët na dërgohen me një kosto të paparë. Fëmijët ecin në shkollë në rrugën më të shkurtër, por ata mund të enden nëpër labirinte të ndryshme për vite me rradhë. Fëmijët hipin dhe zbresin në autobus. Boshti i kompanisë është ai që ulen fëmijët. Borya Petrik Yurko Vira Stas Ira.
68131.		Analogjia. Merr të vegjlit për një analogji	263.5 KB
	Lloji i mësimit: mësim i zotëruar dhe fillestar Aftësitë: figura gjeometrike dhe objekte të vogla për të luajtur Fotograf; Komplete individuale të figurave gjeometrike të gojës së foshnjës në sekuencë. Ndryshoj vendet dhe rregulloj gjërat. Të gjitha figurat janë me ngjyra të ndryshme Dhe tani hapni sytë dhe mrekullohuni...
68132.		Udhëtimi përgjatë oqeanit të drejtimeve logjike	27.5 KB
	Meta: Njihuni me fëmijë me koncepte të ndryshme; zhvillojnë të menduarit, gjuhën, kujtesën, zellin; tregoni përulësi, guxim. Drejtohuni te mësimi Ju lutemi vini re temat dhe vini re mësimin. Sot, kostoja e udhëtimit nëpër botë me anije po rritet. Na presin shumë përfitime të ndryshme. Lyudina është një gjë e ëmbël. Mendimet kthehen në fjalë.
68133.		Koncepte të çmendura dhe të pakuptimta. Kërkesa për përsëritje	84.5 KB
	Meta: të qartësojë dhe të sistemojë njohuritë e studentëve për konceptet e koncepteve të çmendura dhe absurde për të kuptuar plotësisht njohuritë e studentëve për të zhbllokuar detyrat logjike për të zhvilluar vetëdijen logjike të ndërgjegjësimit të respektit të kujtesës; frymëzoni dashurinë për krijesat, zgjoni interesin njohës për çdo gjallesë, formuloni vetëndriçime...
68136.		MODERNIZIMI I MJETEVE NË UKRAINË: MEKANIZMAT E RREGULLIMIT INSTITUCIONAL	188 KB
	Efektiviteti dhe efikasiteti i funksionimit të sistemit të ndriçimit të lartë të Ukrainës në fillim të shekullit të 21-të do të sigurohet vetëm nëse ato nuk i nënshtrohen urdhrave më të larta të bazuara në kohë të krijuara nga paqëndrueshmëria ekonomike dhe politike, kriza demografike, sociokulturore. vakum.

Nëngrupi T. pallidum pallidum është një bakter në formë spirale me përmasa 6-14x0,2-0,3 μm; në kultura ato mund të jenë të mëdha. Kaçurrelat spirale janë të njëjta në lartësi, mund të jenë deri në 14. Të afta për të formuar forma L.

bazë Metoda e riprodhimit të sifilizit- ndarje tërthore. Agjenti shkaktar i sifilizit Nuk është shumë i qëndrueshëm në mjedisin e jashtëm dhe vdes kur thahet, por në të ftohtë vazhdon deri në 50 ditë. Ngrohja në një temperaturë prej 40 °C për një orë çon në humbjen e vetive patogjene; në 48 °C bakteret vdesin brenda 10 minutave.

Agjenti shkaktar i sifilizit nuk njolloset mirë me ngjyra aniline (prandaj edhe emri "spirochete i zbehtë"). Bakteret e sifilizit zvogëloni nitratin e argjendit në argjend metalik, i cili i jep pëlhurave një ngjyrë të zezë ose kafe të errët.

Në praktikën shtëpiake, metoda e argjendit Morozov është e përhapur. Sipas Romanovsky-Giemsa, është me ngjyrë rozë, dhe jo patogjene Treponema- në vjollcë ose blu. Përdoret gjithashtu kontrasti negativ Burri.

Vetitë kulturore të sifilizit. Kultura e agjentit shkaktar të sifilizit

Spiroketa e zbehtë kërkuese për kushtet e kultivimit, rritet dobët në media artificiale; Metodat për prodhim të qëndrueshëm të kulturave ende mungojnë.

Në vendin tonë numri më i madh shtamet e sifilisit identifikuar nga mikrobiologët e Kazanit V.M. Aristovsky dhe P.P. Geltser.

Këto "Kazan" shtamet e sifilisit së bashku me shtamin Reiter përdoret për prodhimin e Ag për serodiagnozë. Me kultivim afatgjatë bakteret e sifilizit përshtaten me mjedise më të thjeshta (për shembull, Kitta-Tarozzi) dhe humbasin vetitë patogjene.

Kolonitë e sifilizit të vogla, shfaqen në ditën e 3-5 të kultivimit.

Përmbajtja e artikullit

Treponema e zbehtë

Morfologjia dhe fiziologjia

T. pallidum ka një formë spirale, një cilindër protoplastik, i cili është i përdredhur në 8-12 rrotulla. 3 flagjela periplazmike shtrihen nga skajet e qelizës. Treponema pallidum nuk i pranon mirë ngjyrat aniline, prandaj lyhet me bojë Romanovsky-Giemsa. Megjithatë, metoda më efektive është ta studiojmë atë në një mikroskop me fushë të errët ose me kontrast fazor. Mikroaerofil. Nuk rritet në lëndë ushqyese artificiale. T. pallidum kultivohet në indin testikular të lepurit, ku shumohet mirë dhe ruan plotësisht vetitë e tij, duke shkaktuar orkit tek kafshët. Antigjenet. Struktura antigjenike e T. pallidum është komplekse. Ajo është e lidhur me proteinat e membranës së jashtme, lipoproteinat. Këto të fundit janë antigjene me reaksion të kryqëzuar të përbashkët për njerëzit dhe bagëtinë. Ato përdoren si një antigjen në reaksionin Wassermann për serodiagnozën e sifilizit.

Patogjeniteti dhe patogjeneza

Faktorët e virulencës së Treponema pallidum përfshijnë proteinat e membranës së jashtme dhe LPS, të cilat shfaqin vetitë e tyre toksike pas çlirimit nga qeliza. Në të njëjtën kohë, me sa duket, aftësia e treponemës, kur ndahet, për të formuar fragmente të veçanta që depërtojnë thellë në inde, mund t'i atribuohet gjithashtu faktorëve të virulencës. Ekzistojnë tre faza në patogjenezën e sifilizit. Me sifilizin primar, vërehet formimi i një fokusi parësor - shankre i fortë në vendin e portës hyrëse të infeksionit, i ndjekur nga depërtimi në nyjet limfatike rajonale, ku patogjeni shumëfishohet dhe grumbullohet. Sifilizi primar zgjat rreth 6 javë. Faza e dytë karakterizohet nga përgjithësimi i infeksionit, i shoqëruar me depërtim dhe qarkullim të patogjenit në gjak, i cili shoqërohet me skuqje të lëkurës. Kohëzgjatja e sifilizit sekondar në pacientët e patrajtuar varion nga 1-2 vjet. Në fazën e tretë, zbulohen granuloma infektive (mishrat e prirura për t'u prishur), të lokalizuara në organet dhe indet e brendshme. Kjo periudhë tek pacientët e patrajtuar zgjat disa vite dhe përfundon me dëmtim të sistemit nervor qendror (paralizë progresive) ose palcës kurrizore (tabes dorsalis).

Imuniteti

Me sifilizin, ndodh një përgjigje imune humorale dhe qelizore. Antitrupat që rezultojnë nuk kanë veti mbrojtëse. Reagimi imunitar qelizor shoqërohet me fiksimin e patogjenit dhe formimin e granulomave. Megjithatë, eliminimi i treponemave nga trupi nuk ndodh. Në të njëjtën kohë, kushtet e pafavorshme mjedisore nxisin formimin e kisteve nga treponema, të cilat lokalizohen në muret e enëve të gjakut. Besohet se kjo tregon kalimin e sëmundjes në falje. Së bashku me cistat, treponemat formojnë forma L. Me sifilis, formohet HRT, e cila mund të zbulohet nga një test alergjik i lëkurës me një pezullim të vrarë të treponemave. Besohet se manifestimi i periudhës terciare të sifilisit shoqërohet me HRT.

Ekologjia dhe epidemiologjia

Sifilizi është një infeksion tipik antroponoz. Sëmuren vetëm njerëzit që janë rezervuarë të infeksionit në natyrë. Transmetimi i infeksionit ndodh përmes kontaktit seksual dhe, shumë më rrallë, përmes të brendshmeve dhe objekteve të tjera. Në mjedisin e jashtëm (ajër), treponemat vdesin shpejt.

Sifilizi dhe treponematoza të tjera

Sifilizi është një sëmundje veneriane kronike infektive e njerëzve, ka një ecuri progresive ciklike, prek lëkurën, mukozën, organet e brendshme dhe sistemin nervor. Shkaktar i sëmundjes është Treponema pallidum.Ka tre periudha kryesore të zhvillimit të sifilizit, metodat e diagnostikimit laboratorik të të cilave kanë karakteristikat e veta. Në periudhën e hershme të sëmundjes, material për diagnostikimin laboratorik është shkarkimi nga shankri, pika nga nyjet limfatike, gërvishtjet nga rozeola, sifilidet etj. Gjatë periudhës dytësore dhe terciare bëhet ekzaminimi i serumit të gjakut dhe lëngut cerebrospinal.Për shkak të faktit se izolimi i kulturave të pastra të treponemave në laboratorët bakteriologjikë konvencionalë është i pamundur, gjatë periudhës parësore të sëmundjes (rrallë më vonë) kryhet një metodë diagnostike bakterioskopike. Duke filluar nga periudha dytësore, përdoren kryesisht metoda serologjike.

Ekzaminimi bakterioskopik

Para marrjes së materialit patologjik, ulçera sifilitike fillimisht fshihet me një shtupë pambuku për të hequr pllakën dhjamore dhe mikroflora kontaminuese. Pastaj pjesa e poshtme e shankut acarohet me një bisturi ose një shpatull metalik, ose ulçera shtrydhet fuqishëm nga anët me gishta në një dorezë gome për të çliruar eksudatin e plagës. Nëse ka një sasi të vogël të lëngut të pastër, mund të shtohet në një pikë prej 0,85% zgjidhje klorur natriumi. Nëse është e pamundur të merret materiali nga fundi i shankut (fimozë, dhëmbëza e ulçerës, etj.), bëhet një shpim i nyjeve limfatike regjionale. Një pikë lëngu nga ulçera ose pika e pikës vendoset në një gotë të hollë. rrëshqitje (1,1-1,2 mm), e mbuluar me një mbulesë dhe e ekzaminuar në një fushë të errët të shikimit (më bukur!), ose duke përdorur një mikroskop me kontrast fazor ose anoptral. Treponema e zbehtë në një fushë të errët shikimi ka pamjen e një pamjeje paksa të shndritshme spirale e hollë delikate me kaçurrela primare të pjerrëta, uniforme, të rrumbullakosura. Lëvizjet janë të qetë, kështu që përkulet në një kënd. Por veçanërisht karakteristike për të janë lëkundjet si lavjerrës. Agjenti shkaktar i sifilisit duhet dalluar nga Treponema refringens (që kolonizon organet gjenitale të jashtme), e cila është më e trashë, më e ashpër, me kaçurrela të mëdha të pabarabarta dhe ka lëvizje aktive të çrregullta, por nuk përkulet. Treponema e simbiozës fusosp-iroketoze dallohen nga një model i hollë, kaçurrela të buta dhe lëvizje të çrregullta.Kur diagnostikohet sifilizi oral, treponema e zbehtë duhet të diferencohet nga treponemat dentare, veçanërisht T. dentium, si dhe nga T. buccalis. E para prej tyre në përgjithësi është e vështirë të dallohet nga sifilitike. Sidoqoftë, është më i shkurtër, ka 4-8 kaçurrela të mprehta dhe nuk ka lëvizje të ngjashme me lavjerrësin. T. buccalis është më i trashë, ka kaçurrela fillestare të vrazhda dhe lëvizje të çrregullt.Nëse ka dyshime duhet pasur parasysh se të gjitha treponemat saprofitike, ndryshe nga ajo e zbehta, janë të njollosura mirë me ngjyra aniline. Ata nuk depërtojnë në nyjet limfatike, kështu që studimi i pikave ka vlerë të madhe diagnostike. Identifikimi i treponemave tipike në pikën e nyjave limfatike konfirmon padiskutim diagnozën e sifilizit.Pra, ekzaminimi në fushë të errët të pikave të shtypura është metoda më e mirë për identifikimin e shkaktarit të sifilizit. Përparësitë e tij janë se materiali shqyrtohet shpejt, dhe morfologjia e treponemave në gjendjen e gjallë është më karakteristike. Nuk përdoren më njollat ​​me bojë me metodën Burri.Nëse është e pamundur të kryhen kërkime në një fushë të errët shikimi, mund të përdoren metoda të ndryshme ngjyrosjeje. Treponema pallidum nuk i pranon mirë ngjyrat aniline. Nga shumë metoda të propozuara të ngjyrosjes, rezultatet më të mira merren kur përdorni ngjyrosjen Romanoveki-Giemsa. Njollat ​​e përgatitura fiksohen me alkool metil ose në përzierjen e Nikiforov. Rezultatet e qartësisë merren kur bojë Romanovsky-Giemsa derdhet në përgatitje. Për ta bërë këtë, fragmente shkrepsesh vendosen në një enë Petri, mbi to vendoset një rrëshqitje xhami, lyhet dhe derdhet bojë derisa të lag njollën. Koha e lyerjes dyfishohet. Në mikroskop treponemat e zbehtë kanë ngjyrë rozë të butë, ndërsa llojet e tjera të treponemave janë të lyer me ngjyrë blu ose blu-vjollcë.Mund të përdorni edhe metodën e argjendimit Morozov. Treponemat ruajnë plotësisht karakteristikat e tyre morfologjike dhe duken kafe ose pothuajse të zeza në mikroskop. Por përgatitjet e veshura me argjend nuk ruhen për një kohë të gjatë. Kohët e fundit, metodat e ngjyrosjes së treponemave përdoren rrallë.Nëse fillohet trajtimi i sifilizit me kimioterapi, është praktikisht e pamundur të identifikohet patogjeni në materialet patologjike edhe me ndihmën e një fushe të errët shikimi. Nëse merret një test negativ, ai duhet të përsëritet.

Diagnoza serologjike e sifilizit

Gjatë kryerjes së reaksioneve serologjike, tani përdoren metodat e mëposhtme kërkimore, të unifikuara në Ukrainë: reaksioni i fiksimit të komplementit (CFR), imunofluoreshenca (RIF), imobilizimi treponemal (PIT), reaksioni i mikroprecipitimit (MPR) dhe analiza imunosorbente e lidhur me enzimën (ELISA). Për shumë vite, reagimi kryesor dhe më i zakonshëm ishte reaksioni i fiksimit të komplementit ose reagimi Wassermann (RW). Per kryerjen e tij perdorni serumin e gjakut te pacientit me sifilis dhe lengun cerebrospinal ne rast demtimi te sistemit nervor Teknika e stadifikimit te reaksionit Wasserman nuk ndryshon nga teknika e kryerjes se RSC. I vetmi ndryshim është se për RO, përdoret jo vetëm antigjeni treponemal specifik, por kardiolipin jospecifik. Marrja e 5-10 ml gjak nga vena ulnare kryhet me stomakun bosh ose jo më herët se 6 orë pas ngrënies. Nuk duhet të merrni gjak nga pacientët me temperaturë, pas pirjes së alkoolit dhe ushqimeve të yndyrshme, nga gratë shtatzëna 10 ditë para lindjes dhe nga gratë në lindje. Serumi i marrë nga gjaku nxehet në një temperaturë prej 56 ° C për 30 minuta për të çaktivizuar komplementin e tij. RO duhet të vendoset me dy antigjene: specifik dhe jospecifik.Antigjeni treponemal specifik për ultratingullin përgatitet nga kulturat e Treponema pallidum (strani Reiter) të rritur në epruveta dhe të ekspozuara ndaj ultrazërit. Prodhohet në formën e pluhurit të tharë në ngrirje. Antigjeni kardiolipin jospecifik përgatitet me nxjerrjen alkoolike të lipideve nga zemra e gjedhit dhe pastrimin nga përzierjet e çakëllit, të paketuara në ampula 2 ml. Për të futur antigjenin në PO, ai titrohet sipas këtyre udhëzimeve. Menjëherë përpara stadifikimit të RV, titrimi i komplementit dhe serumit hemolitik kryhet sipas të njëjtës skemë si në RSC. Reagimi Wasserman kryhet duke përdorur metoda cilësore dhe sasiore. Një reaksion cilësor kryhet në tre epruveta me dy antigjene sipas skemës së zakonshme.Rezultatet e reaksionit vlerësohen sipas sistemit 4 plus: reagim pozitiv - kur ka një vonesë të plotë ose të konsiderueshme në hemolizë (4 +, 3 +); reagimi i dobët pozitiv - vonesa e pjesshme e hemolizës (2 +); reagim i dyshimtë - vonesë e lehtë në hemolizë (1 +). Në rast të hemolizës së plotë, RO konsiderohet negative.Çdo serum që ka dhënë një reaksion cilësor pozitiv duhet të ekzaminohet duke përdorur metodën sasiore me hollimin e tij serik nga 1:10 deri në 1:640. Titri i serumit të testit (titri i reagin ) konsiderohet të jetë hollimi maksimal i tij, në të cilin shkakton një vonesë të plotë (4 +) ose të konsiderueshme (3 +) të hemolizës. Metoda sasiore e stadifikimit të RO është e rëndësishme për vlerësimin e efektivitetit të trajtimit të sifilisit. Një rënie e shpejtë e titrit të reaginës tregon terapi të suksesshme. Nëse titri i serumit nuk ulet për një kohë të gjatë, kjo tregon mungesë efektiviteti të barnave të përdorura dhe nevojën e ndryshimit të taktikave të trajtimit.Në rast të pilozës për sifilis primar seronegativ ose latent, terciar ose kongjenital, rekomandohet kryerja testi Wasserman në të ftohtë sipas të njëjtës skemë. Nëse dyshohet për neurosifilis, RO kryhet me lëng cerebrospinal, i cili është i inaktivizuar pasi nuk përmban komplementin e vet. Likueri i paholluar futet në reaksion në hollime 1:2 dhe 1:5. Reaksioni Wasserman bëhet pozitiv 2-3 javë pas shfaqjes së shankrit. Në sifilisin sekondar, është pozitiv në 100% të rasteve, në sifilizin terciar - në 75%.Përveç kësaj, në kompleksin e reaksioneve serologjike (CSR), një reaksion mikroprecipitimi me plazmën e gjakut ose serumin e inaktivuar përdoret si test depistues.

Mikroreaksioni i reshjeve

Mikroreaksioni i precipitimit kryhet me antigjenin kardiolipin. Parimi i reaksionit është që kur një emulsion i antigjenit kardiolipin shtohet në plazmën ose serumin e një pacienti me sifilis, formohet një precipitat (kompleksi antigjen-antitrup), i cili precipiton në formën e thekoneve të bardha. Përdoret teknika e mëposhtme: tre pika të plazmës (ose serumit të inaktivizuar) hidhen me pipetë në pusin e pllakës, pastaj shtohet një pikë emulsioni standard i antigjenit kardiolipin. Komponentët e reaksionit përzihen duke tundur pjatën për 5 minuta, pas së cilës shtohen tre pika tretësirë ​​0,9% të klorurit të natriumit dhe lihen në temperaturën e dhomës për 5 minuta të tjera. Kontroll i detyrueshëm me serum gjaku pak pozitiv. Rezultatet vlerësohen me sy të lirë mbi një burim drite artificiale. Kur thekon të mëdha shfaqen në vrimë, reagimi konsiderohet pozitiv (4 +, 3 +), thekonet e mesme dhe të vogla konsiderohen dobët pozitive (2 +, 1 +). Nëse rezultati është negativ, nuk formohet precipitat.Mikroreaksioni i precipitimit mund të kryhet gjithashtu duke përdorur një metodë sasiore për të përcaktuar titrin e antitrupave precipitues dhe për të vlerësuar efektivitetin e trajtimit mbi këtë bazë. Titra më të lartë MRP fitohen me plazmë sesa me serum. Jashtë vendit, analogi i MRP me serumin e pacientit është VDRL (Laboratoiy për studimin e sëmundjes venerale), dhe me plazmën - RPR (Rapid plasma reagin).

Reagimi i imunofluoreshencës (RIF)

Grupi i reaksioneve specifike që përdoren gjerësisht për diagnozën serologjike të sifilizit përfshin reaksionin indirekt të imunofluoreshencës. Si një antigjen, ai përdor një pezullim të tendosjes patogjene të zbehtë Treponema Nichols nga parenkima e testikujve të lepurit në ditën e 7-të pas infektimit. Reagimi kryhet në dy modifikime: RIF-ABS dhe RIF-200. Në opsionin e parë, përdoret një sorbent i antitrupave (soniket) - antigjeni treponemal tejzanor për CSC. Prodhohet nga ndërmarrja Kaunas për prodhimin e preparateve bakteriale (Lituani). Me opsionin RIF-200, serumi i pacientit hollohet 200 herë në mënyrë që të largohet ndikimi i antitrupave antitreponemikë të grupit.RIF-ABS kryhet në rrëshqitëse qelqi të hollë dhe të ndotur mirë. Në anën e pasme të xhamit, një prerës xhami shënon 10 rrathë me diametër 0,7 cm. Brenda rrethit, në gotë aplikohet një antigjen - një pezullim i treponemës së zbehtë - në një sasi të tillë që të jenë 50-60 të tilla. në fushën e shikimit. Ngjyrosjet thahen në ajër, fiksohen mbi flakë dhe në aceton për 10 minuta. Shtoni 0,2 ml sorbent (sonike) dhe 0,5 ml serum të gjakut të pacientit në një provëz të veçantë dhe përzieni mirë. Përzierja aplikohet në njollë (antigjen) në mënyrë që të mbulohet në mënyrë të barabartë dhe mbahet për 30 minuta në një dhomë të lagësht në 3–7 ° C (reagimi i fazës II). Pas kësaj, njollosja lahet me tampon fosfati, thahet dhe mbi të aplikohet serumi fluoreshent anti-shobulin për 30 minuta, i vendosur në një dhomë të lagësht në 37 ° C (faza II). Përgatitja lahet përsëri me tampon fosfati, thahet dhe ekzaminohet me mikroskop fluoreshent.Me reaksion pozitiv treponema e zbehtë lëshon një dritë jeshile të artë, me reaksion negativ nuk shkëlqejnë.Teknika e vendosjes së RIF-200 është njësoj si RIF-ABS, vetëm serumi i gjakut i pacientit hollohet paraprakisht 200 herë me tampon fosfat. Kur kryeni një reaksion imunofluoreshence me lëngun cerebrospinal të një pacienti me sifilis të sistemit nervor, përdoren RIF-c dhe RIF-10, d.m.th. Lëngu futet në reaksion i paaktivizuar dhe i holluar, ose i holluar 1:10.

Reaksioni i imobilizimit të treponemës së zbehtë (PIT)

Reagimi i imobilizimit të treponemës së zbehtë (PIT) bazohet në fenomenin e humbjes së lëvizshmërisë së tyre në prani të antitrupave antitreponemikë imobilizues nga serumi dhe komplementi i pacientit në kushtet e anaerobiozës. Një pezullim i treponemës së zbehtë nga indi testicular i një lepuri të infektuar me shtamin laboratorik Nichols përdoret si një antigjen në reaksion. Suspensioni hollohet me tretësirë ​​sterile 0,85% klorur natriumi në mënyrë që në fushën e shikimit të ketë 10-15 spiroketa.Për të kryer reaksionin janë 0,05 ml serum të gjakut të pacientit, 0,35 ml antigjen dhe 0,15 ml komplement. të përziera në një provëz sterile. Eksperimenti shoqërohet me serum, antigjen dhe kontrolle të komplementit. Provavet vendosen në anerostat, krijohen kushte anatomike dhe mbahen në termostat për 18-20 orë në temperaturë 35 ° C. Më pas përgatiten pika të shtypura nga çdo epruvetë, numërohen të paktën 25 treponema dhe sa prej tyre janë të lëvizshme dhe sa janë shënuar janë shënuar. Përqindja e imobilizimit specifik të treponemës së zbehtë llogaritet duke përdorur formulën: x = (A-B) / B * 100, ku X është përqindja e imobilizimit, A është numri i treponemave të lëvizshme në tubin e kontrollit, B është numri i celularëve. treponemat në provëz. Reagimi konsiderohet pozitiv kur përqindja e imobilizimit është 50 ose më shumë, dobët pozitiv - nga 30 në 50, i dyshimtë - nga 20 në 30 dhe negativ - nga 0 në 20. Në laboratorët praktikë përdorin metodën më të thjeshtë melanger PIT për M.M. Ovchinnikov. Kushtet eksperimentale anaerobe krijohen duke vendosur përzierjen reaguese (serum, antigjen, komplement) në një melangeur, të dy skajet e së cilës mbyllen me një unazë gome. Teknika melanger ju lejon të bëni pa pajisje dhe aparatura komplekse për krijimin e anaerobiozës, por jep rezultate që nuk merren me teknikën klasike të mikroanaerostatit.Reaksionet e imobilizimit të treponemës dhe imunofluoreshenca konsiderohen si më specifiket në diagnozën serologjike të sifilizit. E megjithatë, PIT, megjithë specifikën e saj, nuk rekomandohet për përdorim në praktikën e përhapur për shkak të mundimit të zbatimit të tij.

Analiza imunosorbente e lidhur me enzimën (ELISA)

Analiza imunosorbente e lidhur me enzimën (ELISA) kryhet si me antigjenin kadriolipin (reaksion jospecifik, seleksionues) ashtu edhe me antigjenin treponemal (reaksion specifik), i cili konfirmon diagnozën e sifilizit. Parimi i metodës indirekte ELISA është që antigjeni i adsorbuar në faza e ngurtë në pusetat e tabletës shtohet serumi i provës. Nëse përmban antitrupa kundër treponemave, formohet një kompleks antigjen-antitrup (faza II). Pas larjes së antitrupave jospecifik të palidhur, serum antiglobulin i konjuguar me një enzimë (më shpesh peroksidaza rrikë) shtohet në puse. Konjugati është ngjitur fort në kompleksin antigjen-antitrup (faza II).Pas larjes së konjugatit të palidhur, në puset shtohet substrati për ngjyrosjen OPD - ortofenilendiaminë (faza III). Reaksioni i peroksidazës ndalet duke shtuar acid sulfurik. Për kontroll përdoren të njëjtat mostra me serum pozitiv dhe dukshëm negativ.Rezultatet e analizës regjistrohen duke përdorur një fotometër që përcakton densitetin optik në modalitetin me valë të dyfishta (492 nm dhe 620 nm). Për të vendosur një reaksion të antitrupave enzimë, përveç një fotometër, ju nevojiten pipeta automatike me një dhe tetë kanale me një majë polipropileni dhe grupe përkatëse të sistemeve të testimit diagnostik. Metoda ELISA përdoret gjerësisht në diagnostikimin serologjik të sifilizit. Është po aq efektiv për zbulimin e sëmundjes në periudhën e inkubacionit (1-2 javë pas infektimit), me manifestime klinike të sëmundjes dhe format e saj latente. Shumë shpesh, ELISA përdoret në ekzaminimet skrining të popullatës, veçanërisht në stacionet e transfuzionit të gjakut.Në praktikën laboratorike, ndonjëherë përdoret edhe reaksioni i ngjitjes imune (IAR) dhe reaksioni indirekt i hemaglutinimit (IRHA). E para prej tyre bazohet në faktin se treponemat testikulare patogjene të shtamit Nichols, kur përzihen me serumin e pacientit në prani të komplementit dhe qelizave të kuqe të gjakut të njeriut, ngjiten në sipërfaqen e qelizave të kuqe të gjakut. RNGA përdoret gjerësisht për diagnostikimin e sifilizit për shkak të thjeshtësisë së tij metodologjike. Ajo bëhet pozitive brenda tre javësh pas infektimit. Një rezultat pozitiv i reagimit mbetet për vite pas shërimit. Një analog i këtij reaksioni jashtë vendit është TRHA (Treponema pallidum haemoagglutination).