Karyotypizácia lymfocytov periférnej krvi páru. Ako a prečo sa vykonáva karyotypizácia pre nastávajúce matky a otcov - vyšetrovací mechanizmus

Karyotyp odráža súbor ľudských chromozómov. Normálne má človek 46 chromozómov alebo 23 párov. 23. pár - pohlavné chromozómy - XX u ženy, XY u muža. Analýza karyotypu vedený pre deti a dospelých. Karyotyp dieťaťa umožňuje vylúčiť niektoré genetické choroby. Karyotypizácia manželov pomáha identifikovať genetickú príčinu neplodnosti a potratu, ako aj prognózu zdravého potomstva.

Čo je to karyotyp?

karyotyp- kompletný súbor chromozómov v ľudských bunkách. Normou pre obsah chromozómov v somatických (neembryonálnych) ľudských bunkách je 46 chromozómov, usporiadaných do 23 párov. Každý pár pozostáva z jedného chromozómu od matky a jedného od otca. Na štúdium ľudského karyotypu sa krv odoberá zo žily. V laboratóriu CIR sa karyotypizácia vykonáva cytogenetickými a molekulárno-genetickými metódami. K dispozícii je tiež FISH analýza karyotypu, ktorá umožňuje analýzu chromozómov pomocou fluorescenčných farbív.

Laboratórium CIR vykonáva tieto karyotypizačné testy:

Prvé tri analýzy sa vykonávajú cytogenetickou metódou. XMA je molekulárna genetická analýza karyotypu.

Hovorme o cytogenetickej metóde na vykonávanie analýzy karyotypu.
Vzhľad chromozómov sa počas bunkového cyklu výrazne mení: počas interfázy sú chromozómy lokalizované v jadre spravidla despiralizované a ťažko pozorovateľné; preto bunky v jednom zo štádií ich delenia, metafáze mitózy, sa používajú na určenie karyotypu. Chromozómy vo svetelnom mikroskope v štádiu metafázy sú molekuly DNA zbalené pomocou špeciálnych proteínov do hustých, nadzávitnicových tyčovitých štruktúr. Veľké množstvo chromozómov je teda zbalené do malého objemu a umiestnené v relatívne malom objeme bunkového jadra. Poloha chromozómov, viditeľná pod mikroskopom, sa odfotografuje a z niekoľkých fotografií sa zozbiera systematizovaný karyotyp – očíslovaná sada chromozómových párov homológnych chromozómov. V tomto prípade sú obrazy chromozómov orientované vertikálne, s krátkymi ramenami nahor a ich číslovanie sa vykonáva v zostupnom poradí podľa veľkosti. Pár pohlavných chromozómov (X a Y pre muža, X a X pre ženu) je umiestnený na samom konci obrázku sady chromozómov.

Kedy sa daruje krv na karyotyp?

Vyšetrenie na karyotyp je nerutinná analýza, na ktorú existujú indikácie.

Dôvody, ktoré môže lekár navrhnúť na testovanie, môžu zahŕňať:

• narodenie dieťaťa s genetickou patológiou alebo prítomnosťou chromozomálnej patológie u príbuzných jedného z manželov;
• neplodnosť v rodine;
• obvyklý potrat a / alebo spontánny potrat v prvých 12 týždňoch tehotenstva;
• vystavenie žiareniu, škodlivá produkcia pri práci a pod.

Čo absolvovať analýzu karyotypu?

Analýza karyotypu sa môže uskutočniť dvoma spôsobmi: karyotypizácia bez aberácií a karyotypizácia s aberáciami. Prvá analýza ukazuje genetickú sadu človeka - počet chromozómov a veľké zmeny vo všetkých chromozómoch získaných od rodičov. Karyotypizácia s aberáciami ukazuje zmeny, ktoré sa vyskytujú v chromozómoch počas života človeka pod vplyvom rôznych škodlivých faktorov prostredia. Analýza na karyotyp metódou CMA sa odovzdáva v ojedinelých prípadoch s retardáciou rastu u detí, autizmom, podozrením na mikrodelečné syndrómy.

Analýza karyotypu manželského páru (karyotypizácia manželov)

Na identifikáciu možnej príčiny neplodnosti v rodine môže lekár predpísať manželom karyotypizáciu. Manželia môžu test absolvovať v rôznom čase, nemá to vplyv na výklad. Ak existuje predpoklad o genetickej povahe neplodnosti, karyotypová analýza môže byť priradená jednému z manželov. .

Ako urobiť test karyotypu? Kde môžem urobiť test karyotypu?

Karyotyp: cena analýzy

Zistite si cenu rozboru karyotypu v našom cenníku,.

Analýza karyotypu: ako sa vykonáva štúdia ľudského karyotypu?

Každý chromozóm pozostáva zo špecializovaných štruktúr – centroméry a dvoch telomér. Centroméra (cen) alebo primárny screed delí chromozóm na dve časti – dlhé (q) a krátke (p) ramená a je zodpovedná za separáciu chromozómov pri delení buniek. Pred delením buniek pozostáva chromozóm z jednej chromatidy. Po duplikácii DNA - z dvoch chromatidov, kým sa nerozdelia na dve nové bunky.

Na postup určenia karyotypu cytogenetickej metódy môže byť použitá akákoľvek populácia deliacich sa buniek. Na stanovenie ľudského karyotypu sa spravidla používajú lymfocyty periférnej krvi. Na analýzu karyotypu sa krv odoberie zo žily do sterilnej skúmavky. Na vykonanie analýzy nie sú žiadne podmienky, pred návštevou laboratória sa môžete naraňajkovať.

Prechod lymfocytov z pokojového štádia G0 do proliferácie je vyvolaný pridaním stimulátora bunkového delenia - fytohemaglutinínu. Na určenie karyotypu sa môžu použiť aj bunky kostnej drene alebo primárna kultúra kožných fibroblastov. Na zvýšenie počtu buniek v štádiu metafázy sa krátko pred fixáciou do bunkovej kultúry pridáva kolchicín alebo nocadazol, ktoré blokujú tvorbu mikrotubulov, čím bránia separácii chromatidov k pólom bunkového delenia a dokončeniu mitózy.

Po fixácii sa prípravky metafázových chromozómov farbia a skúmajú pod mikroskopom.

Na získanie klasického karyotypu sa používa farbenie chromozómov rôznymi farbivami alebo ich zmesami: v dôsledku rozdielov vo väzbe farbiva na rôzne časti chromozómov dochádza k zafarbeniu nerovnomerne a vzniká charakteristická pásiková štruktúra (komplex priečnych značiek, anglicky banding), odráža lineárnu heterogenitu chromozómu a je špecifický pre homológne páry chromozómov a ich úsekov (s výnimkou polymorfných oblastí sú lokalizované rôzne alelické varianty génov). Prvú metódu farbenia chromozómov na získanie takýchto vysoko detailných obrázkov vyvinul švédsky cytológ Kaspersson (Q-farbenie). \\Používajú sa aj iné farbivá, takéto techniky sa súhrnne nazývajú diferenciálne farbenie chromozómov.

Typy diferenciálneho farbenia chromozómov

G-farbenie- modifikované farbenie podľa Romanovského - Giemsa. Citlivosť je vyššia ako citlivosť Q-farbenia, preto sa používa ako štandardná metóda pre cytogenetickú analýzu. Používa sa na detekciu malých aberácií a markerových chromozómov (segmentovaných inak ako normálne homológne chromozómy).

Q-farbenie- farbenie podľa Kasperssona acrichinovou horčicou so štúdiom pod fluorescenčným mikroskopom. Najčastejšie sa používa na štúdium chromozómov Y (rýchle určenie genetického pohlavia, detekcia translokácií medzi chromozómami X a Y alebo medzi chromozómom Y a autozómami, skríning mozaiky zahŕňajúcej chromozómy Y).

R-farbenie- používa sa akridínová oranž a podobné farbivá, pričom sa farbia časti chromozómov, ktoré nie sú citlivé na farbenie G. Používa sa na odhalenie detailov homológnych G- alebo Q-negatívnych oblastí sesterských chromatidov alebo homológnych chromozómov.

C-farbenie- používa sa na analýzu centromerických oblastí chromozómov obsahujúcich konštitutívny heterochromatín a variabilnú distálnu časť chromozómu Y.

T-farbenie- používa sa na analýzu telomerických oblastí chromozómov.

Chromozomálna mikročipová analýza (CMA)

Modernejšia technológia na štúdium karyotypu. Analýza karyotypu sa vykonáva molekulárno-genetickou metódou aCGH (comparative microarray genomic hybridization), ktorá má na rozdiel od klasickej cytogenetickej metódy vysoké rozlíšenie umožňujúce detekovať menšie štrukturálne zmeny v karyotype.

Fluorescenčná in situ hybridizácia Fluorescenčná in situ hybridizácia, FISH

Detekcia aneuploidie - porušenie počtu chromozómov. Na obrázku zelená zodpovedá chromozómu 13 a červená 21, čo naznačuje prítomnosť triploidie na chromozóme 21 v tejto vzorke.

V poslednej dobe sa používa technika takzvanej spektrálnej karyotypizácie (fluorescenčná in situ hybridizácia, anglicky Fluorescence in situ hybridization, FISH), ktorá spočíva vo farbení chromozómov sadou fluorescenčných farbív, ktoré sa viažu na špecifické oblasti chromozómov. Výsledkom takéhoto farbenia je, že homológne páry chromozómov získavajú identické spektrálne charakteristiky, čo nielen značne uľahčuje identifikáciu takýchto párov, ale uľahčuje aj detekciu interchromozomálnych translokácií, to znamená pohybov úsekov medzi chromozómami - translokované úseky majú spektrum ktorý sa líši od spektra zvyšku chromozómu.

Porušenia v štruktúre chromozómov sa počas života nemusia nijako prejaviť. Ale keď sa vajíčko a spermia spoja, stretnú sa dve genetické sady a potom môže neúspešná zhoda génov spôsobiť potrat alebo vytvorenie vrodenej patológie u plodu. Karyotypizácia manželov pomáha identifikovať abnormality v štruktúre a počte chromozómov, ako aj pravdepodobnosť konkrétnej odchýlky.

Vyšetrenie karyotypu je voliteľná analýza. Postup má svoje vlastné indikácie, vrátane potratov a zmeškaného tehotenstva v anamnéze. Reprodukčné problémy spojené so zvláštnosťami genetiky sú pomerne zriedkavé.

Karyotypizácia je diagnostický postup, ktorý zisťuje abnormality v štruktúre a počte chromozómov. Takéto odchýlky môžu spôsobiť dedičné patológie u dieťaťa a neplodnosť manželov.

Každý človek má svoj vlastný špecifický súbor génov, ktorý sa nazýva karyotyp. Chromozómy sú usporiadané do párov: 22 párov autozómov a 1 pár pohlavných chromozómov, ktoré sú reprezentované ako XX v ženskom tele a XY v mužskom tele. Pozostávajú z génov - úsekov, ktoré sú zodpovedné za prejav určitého znaku.

Karyotypizácia zisťuje choroby, ktoré priamo súvisia so zmenami v DNA. Defekt môže byť v akomkoľvek géne, v štruktúre chromozómov alebo ich počte. Najznámejším príkladom je Downov syndróm, nazývaný aj trizómia 21.

Karyotypizácia manželov (cytogenetická analýza) je štúdium chromozómov krvných buniek. Zákrok odhalí príčiny potratu či neplodnosti u párov, keď sú už vylúčené iné faktory (hormonálne, imunitné, infekčné). Ak sa zistí zvýšená nestabilita genómu, použitie antioxidantov a imunomodulátorov pomôže znížiť riziko zlyhania koncepcie.

Ktoré páry sú indikované na karyotypizáciu?

Ako už bolo uvedené, karyotypizácia manželov nie je zahrnutá v zozname povinných diagnostických postupov. Zobrazuje sa v nasledujúcich prípadoch:

1. Jeden alebo obaja rodičia majú viac ako 35 rokov.
2. Neplodnosť, ktorej príčiny nemožno určiť inými metódami.
3. Niekoľko neúspešných postupov IVF.
4. Život v oblastiach so zlými environmentálnymi podmienkami, práca v nebezpečných odvetviach, kontakt s nebezpečnými chemikáliami.
5. Fajčenie, zneužívanie alkoholu, užívanie drog, niektorých liekov.
6. Predchádzajúce potraty, potraty, predčasné pôrody.
7. Manželia sú pokrvní príbuzní.
8. Predtým narodené deti s genetickými chorobami.

Príprava na skúšobný postup

Analýza sa vykonáva v laboratóriu a nepredstavuje žiadne nebezpečenstvo pre zdravie manželov. 2 týždne pred zákrokom musíte prestať piť alkohol, tabakové výrobky a lieky. Ak nie je možné zrušiť príjem akéhokoľvek lieku, musí byť na to upozornený laboratórny asistent.

Odber krvi sa vykonáva na plný žalúdok, posledné jedlo by sa malo uskutočniť 1-2 hodiny pred analýzou. Pred samotným zákrokom je potrebné vyplniť špeciálny dotazník alebo si ho priniesť so sebou (v niektorých prípadoch ho vypĺňa lekár vopred). Ak sa karyotypizácia manželov zhoduje s exacerbáciou alebo akútnym priebehom infekčného ochorenia u jedného alebo oboch z páru, potom by sa mala štúdia preložiť.

Vykonávanie analýzy

Pri karyotypizácii sa krv odoberá zo žily. Laborant ňou naplní skúmavku a pacienta prepustí. Genetická analýza a príprava výsledkov zvyčajne trvá približne 5 dní.

Na ďalší výskum je potrebná len časť materiálu – lymfocyty. V období delenia sú izolované z krvi. Na vyvolanie aktivity tohto procesu sa pridávajú špeciálne lieky (Colchicine, Nocazadol). Počas nasledujúcich troch dní sa analyzujú vlastnosti bunkovej reprodukcie. Na základe získaných výsledkov sa robí záver o možných patológiách a rizikách potratu.

Moderné technológie umožňujú karyotypizáciu len s použitím 15 buniek a špeciálnych prípravkov. Na získanie presných a úplných informácií o chromozómoch a génoch preto stačí jeden odber krvi.

Čo prinesie výsledok?

Interpretáciu analýzy na karyotypizáciu manželov vykonáva genetik. Normálny výsledok pre ženy je 46XX, pre mužov - 46XY. To znamená, že sa našlo celkovo 46 chromozómov, z ktorých posledný pár je sexuálny. Keď sa zistí genetická patológia, tento vzorec sa zmení. Napríklad pri Downovom syndróme (trizómia na 21. chromozóme) to vyzerá ako 46XX21+.

Výsledok karyotypizácie pomáha určiť nasledujúce patológie:

1. Trizómia je prítomnosť ďalšieho tretieho chromozómu v páre. Trizómia na 21. chromozóme - Downov syndróm, 16. - spontánny potrat v 1. trimestri, 13. - Patauov syndróm, 18. - Edwardsov syndróm. Z nich je jedinou životaschopnou možnosťou Downov syndróm.
2. Monozómia je absencia jedného chromozómu z páru. Monozómia ktoréhokoľvek autozomálneho chromozómu vedie k skorej smrti embrya. Podobná patológia v páre XX u žien sa prejavuje syndrómom Shereshevsky-Turner.
3. Delécia je absencia časti chromozómu. Ak dôjde k strate veľkých plôch, nastáva skorá smrť embrya. V iných prípadoch sa môžu vyvinúť genetické patológie (napríklad syndróm plačúcej mačky s deléciou 5. chromozómu) alebo pozitívny vplyv na životaschopnosť (napríklad rezistencia na HIV). Delécia pohlavného chromozómu u mužov je príčinou narušenej spermatogenézy a vedie k neplodnosti.
4. Duplikácia je prítomnosť duplicitného fragmentu chromozómu. Funkcie pôvodných génov nie sú ovplyvnené.
5. Inverzia je otočenie časti chromozómu o 180°. Niektoré z týchto zmien sú normálne, zatiaľ čo iné vedú k smrti zárodočných buniek a tvorbe nevyváženého materiálu v nich. Výsledkom je znížená plodnosť, zvýšené riziko potratu a abnormalít plodu.
6. Translokácia je pohyb segmentu chromozómu. Niektoré z týchto zmien človeka nijako neovplyvnia, iné vedú k potratom, vrodeným anomáliám plodu (Robertsonove translokácie).

Výsledkový formulár zaznamenáva zmeny v štruktúre chromozómov. Dlhé rameno je označené písmenom "q", krátke - "t". Napríklad syndróm mačacieho plaču (delécia na 5. chromozóme) sa zapisuje takto: 46XX5t alebo 46XY5t.

Druhá vec, ktorá sa zistí pri karyotypizácii, sú zmeny v génoch. Možno identifikovať:

1. Génové mutácie, ktoré ovplyvňujú zrážanlivosť krvi. Zvýšená tvorba trombu môže spôsobiť potrat, neplodnosť alebo nemožnosť implantácie oplodneného vajíčka.
2. Mutácia génov v chromozóme Y je príčinou mužskej neplodnosti, ktorá si vyžaduje použitie darcovských spermií.
3. Génové mutácie, ktoré znižujú schopnosť organizmu detoxikovať sa – zbavujú sa škodlivých látok získaných z vonkajšieho prostredia.
4. Zmeny v géne pre cystickú fibrózu, čo vedie k výskytu tohto ochorenia u dieťaťa.

Zistené odchýlky od normy: čo robiť?

Na získanie kompletných informácií o výsledkoch karyotypizácie je potrebné, aby sa manželia dostavili na konzultáciu s genetikom. Podrobne vám povie o možných rizikách a pravdepodobnosti vzniku konkrétneho porušenia.

Karyotypizácia je jednou z nových metód cytogenetického výskumu, prostredníctvom ktorej sa študujú súbory ľudských chromozómov (tzv. karyotyp). Vedci, ktorí vykonávajú svoje štúdie, môžu určiť štruktúru chromozómov, a ak je to tak, porušenie ich štruktúry. Karyotypizácia chromozómov stačí vykonať raz za život - výsledky štúdie určujú genóm mužských a ženských jedincov na vzájomnú korešpondenciu. Inými slovami, vďaka takýmto analýzam je možné skontrolovať, či sa muž a žena zhodujú na úrovni génov, či môžu mať deti a či ich dieťa bude zdravé.

Metóda karyotypizácie je najnovším návrhom v medicíne, ktorý sa však medzi mladými (a nie veľmi mladými) manželmi stáva každým rokom obľúbenejším.

Karyotyp je kompletný súbor chromozómov, navyše s popisom určitých znakov - či už ide o veľkosť, tvar, množstvo. U ľudí, ako je známe z kurzu elementárnej biológie, je v genóme 46 chromozómov - spolu 23 párov. Zároveň je 44 chromozómov autozomálnych: sú zodpovedné za prenos údajov, ktoré označujú dedičné znaky jedného alebo druhého druhu. Patrí sem farba a typ srsti, štruktúra uší, kvalita videnia atď. Ale jeden pár chromozómov je zodpovedný za sexuálne charakteristiky - je to ona, ktorá dáva ženský ("XX") alebo mužský ("XY") karyotyp.

Vďaka dekódovaniu chromozómov, ich porovnávaniu a spájaniu vedia vedci s presnosťou 99 % povedať o pravdepodobnosti narodenia hendikepovaného či chorého bábätka.

Molekulárna karyotypizácia: indikácie

Samozrejme, bolo by absolútne správne, keby úplne všetci rodičia vykonali karyotypizáciu predtým, ako budú mať deti. Navyše bez ohľadu na to, či lekári predpisujú takúto analýzu alebo nie. Možno v budúcnosti budú takéto analýzy povinné, ale nie dnes. Zatiaľ ich posielajú na karyotypizáciu len vtedy, ak sú na to dobré dôvody.

Množstvo dedičných chorôb, ktoré sa vyskytli v rode u konkrétneho človeka, sa niekedy objaví celkom nečakane (aj keď predvídateľne). Niekoľko generácií môže byť absolútne zdravých a potom sa zrazu objaví nejaká choroba. Práve karyotypizácia dokáže odhaliť samotnú patológiu u nenarodeného dieťaťa a vopred vypočítať všetky riziká.

Analýza je potrebná, ak:

1. Jeden alebo obaja manželia, ktorí sa rozhodnú mať dieťa, majú viac ako 35 rokov.
2. Žena nemôže dlhodobo otehotnieť a lekári nevedia určiť pôvod neplodnosti.
3. Boli opakované pokusy o umelé oplodnenie, ale všetky boli neúspešné.
4. Jeden z manželov v rodine mal nejaké dedičné choroby.
5. Žena má nejaké poruchy, nerovnováhu hormónov v tele.
6. Muž má v anamnéze poruchu spermatogenézy a príčina poruchy tvorby spermií nebola stanovená.
7. Jeden z manželov bol v kontakte s nebezpečnými chemikáliami.
8. Jeden z manželov bol vystavený rádioaktívnemu žiareniu.
9. Manželia žijú v nepriaznivom ekologickom prostredí.
10. V minulosti boli momenty, ktoré mohli dieťa negatívne ovplyvniť. Napríklad predtým žena alebo muž fajčili, pili alkohol alebo drogy, brali veľa liekov.
11. Žena mala tri alebo viac tehotenstiev spontánne ukončených (potrat, potrat, predčasný pôrod).
12. Muž a žena spolu úzko súvisia.
13. Manželia už majú dieťa s nejakou vrodenou patológiou a malformáciou.

Karyotypizáciu je najlepšie podstúpiť počas plánovania tehotenstva. Teraz je však príležitosť preskúmať karyotyp dieťaťa, ktoré žena nosí - vykonáva sa takzvaná prenatálna karyotypizácia.

Karyotypizácia: príprava na analýzu

Na určenie karyotypu sú potrebné krvinky. Aby bola analýza presnejšia a kvalitná, treba urobiť všetko preto, aby sa vylúčili faktory, ktoré rast buniek komplikujú. Preto príprava na karyotypizáciu často trvá dva alebo viac týždňov.

Ak sa rozhodnete skontrolovať svoj karyotyp, potrebujete aspoň 14 dní:

1. ZÁKAZ FAJČIŤ.
2. Nepite alkoholické nápoje.
3. Neužívajte lieky (týka sa to predovšetkým antibiotík).
4. Nenechajte sa ochorieť (to platí pre infekčné prechladnutia aj exacerbácie rôznych chronických ochorení).

Karyotypizácia: ako užívať

1. Na identifikáciu karyotypu človeka je potrebná venózna krv, ktorá sa odoberá mužovi a žene (je veľmi dôležité, aby boli obaja manželia pripravení na testovanie).
2. Po prijatí venóznej krvi sa lymfocyty skrínujú v laboratóriu (sú práve v stave delenia (fáza mitózy)).
3. Na vykonanie kvalitatívnej analýzy stačí 12 až 15 lymfocytov - to stačí na identifikáciu kvantitatívnych a kvalitatívnych nesúladov chromozómov - sú to tie, ktoré naznačujú prítomnosť akýchkoľvek genetických dedičných chorôb.
4. Tri dni sa sledujú bunky lymfocytov – robí sa rozbor ich delenia, rastu a rozmnožovania.
5. Na stimuláciu fázy mitózy sa lymfocytové bunky ošetria špeciálnou zlúčeninou - mitogénom.
6. Keď dôjde k priamemu procesu delenia, vedci študujú chromozómy - v tomto prípade by mala byť mitóza zastavená špeciálnou liečbou.
7. Keď vedci zhromaždia dostatok údajov, pripravia špeciálne prípravky na štúdium chromozómov na skle.
8. Aby bola štruktúra chromozómov jasnejšia, je možné pridať farbivo, ktoré umožňuje genómu získať farbu. Keďže chromozómy majú individualitu, po zafarbení sa môžu stať ešte zreteľnejšími.
9. V záverečnej fáze sa analyzujú zafarbené nátery, ktoré dokážu určiť nielen celkový počet chromozómov, ale aj štruktúru každého zvlášť.
10. Vedci porovnávajú párové chromozómy a ich pruhovanie a kontrolujú výsledok pomocou tabuľky, kde sú napísané normy cytogenetických schém chromozómov.

Karyotypizácia: výsledky

Analýzu na štúdium karyotypu musí vykonať genetik na špecializovanej klinike. Ak vám bude ponúknuté, aby ste sa podrobili testom v bežnej nemocnici, existuje riziko, že analýza bude nespoľahlivá, pretože v bežných zdravotníckych zariadeniach najčastejšie nie sú kvalifikovaní lekári a zariadenia na vykonanie samotného procesu.

Ak je analýza normálna, mala by vyzerať ako "46XX" (žena) alebo "46XY" (muž). V prípade, že odborníci náhle objavia genetickú poruchu, záznam bude komplikovanejší. Napríklad „46XY21+“ znamená, že muž má patológiu vo forme extra chromozómu (navyše 21 znamená, že 21 párov má tretí chromozóm).

Vďaka karyotypizácii sa môžu objaviť patológie ako:

• trizómia - prítomnosť tretieho extra chromozómu v páre (pravdepodobne Downov syndróm);
• monozómia - absencia jedného chromozómu v páre;
• delécia - strata niektorej časti chromozómu;
• duplikácia - zdvojnásobenie jedného z fragmentov chromozómu;
• inverzia - nesprávne otočenie niektorej časti chromozómu;
• translokácia - rošáda určitých úsekov chromozómu.

Ak sa nájde delécia v chromozóme Y, potom to s najväčšou pravdepodobnosťou naznačuje porušenie spermatogenézy a v dôsledku toho neplodnosť u muža. Okrem toho je to delécia, ktorá je najčastejšie príčinou vrodenej patológie u dieťaťa.

Aby to bolo pohodlné, ak existujú nejaké porušenia v štruktúre chromozómov, vedci zaznamenávajú výsledky analýz pomocou latinských písmen. Napríklad: dlhé rameno je označené "q", krátke - "t". Ak má žena v minulosti stratu fragmentu, povedzme krátkeho ramena piateho chromozómu, záznam bude takýto - „46XX5t“. Táto genetická odchýlka sa nazýva „mačací plač“ – bábätko, ktoré sa takémuto páru narodí, má pravdepodobne vrodené poruchy, bude plakať aj bez príčiny.

Vďaka karyotypizácii je možné posúdiť stav génov, pretože je možné identifikovať:

1. Génová mutácia, ktorá ovplyvňuje krvné zrazeniny – to výrazne narúša prietok krvi a môže spôsobiť potrat alebo dokonca neplodnosť.
2. Génová mutácia Y-chromozómu - tehotenstvo je možné, ale iba ak existuje iná spermia (pomocou darcu).
3. Mutácia génov, ktoré sú zodpovedné za detoxikáciu – to naznačuje, že telo má nízku schopnosť dekontaminovať toxické faktory.
4. Génová mutácia, ktorá sa prejavuje pri cystickej fibróze, čo pomôže úplne eliminovať riziko vzniku tohto ochorenia.

Moderné vybavenie tiež umožňuje identifikovať predispozíciu k takým ochoreniam, ktoré nemajú takú nápadnú genetickú charakteristiku: srdcový infarkt alebo diabetes mellitus, hypertenzia alebo patológia kĺbov atď.

Karyotypizácia: čo robiť ďalej

1. Ak sa pri karyotypizácii zistia nejaké abnormality, lekár o tom okamžite informuje manželov. Nezáleží na tom, či ide o génovú mutáciu alebo chromozómovú aberáciu, jednému alebo obom manželom naraz genetik všetko podrobne vysvetlí a objasní, aké sú riziká pre nenarodené bábätko, aká je pravdepodobnosť narodenia chorého dieťaťa. .
2. Okamžite treba poznamenať, že genetická patológia je nevyliečiteľná, ak existujú chromozómové poruchy, potom musia manželia urobiť veľmi dôležité a zodpovedné rozhodnutie: stále porodiť svoje dieťa (na vlastné nebezpečenstvo a riziko), použiť darcovské spermie ( vajíčko), prilákať náhradnú matku nie preto, aby mala dieťa, ale aby si ho adoptovala.
3. Ak lekári zistili chromozomálne abnormality u ženy počas tehotenstva, lekári vysvetľujú, že existuje možnosť mať choré dieťa a odporúčajú prerušiť tehotenstvo. Ale je na rozhodnutí budúcich rodičov, či ísť na potrat alebo nie. Nikto nemá právo trvať na ukončení tehotenstva – ani lekár, ani genetik, ani nikto z príbuzných.
4. V prípade, že ide o anomáliu počtu chromozómov alebo jej prítomnosť vedie k nízkemu percentu narodenia chorého dieťaťa, potom lekári predpisujú vitamíny, ktoré znižujú pravdepodobnosť, že sa dieťa narodí s patológiami alebo abnormalitami.

Karyotypizácia plodu: čo to je?

Ak z viacerých dôvodov rodičia počas plánovania tehotenstva nevykonali karyotypizáciu a pod srdcom ženy už dozrieva nový život, možno vykonať perinatálnu karyotypizáciu. Táto metóda pomôže identifikovať prítomnosť chromozomálnych patológií u plodu už v prvom trimestri tehotenstva. Táto štúdia identifikuje akékoľvek abnormality a nasmeruje lekárov na liečbu, úpravu alebo iné nepopulárne akcie potrebné počas tehotenstva.

Vďaka tejto metóde je možné vylúčiť Downov syndróm, Patau, Turner, Edwards a Klinefelter, ako aj polyzómiu X-chromozómu.

Karyotypizácia plodu: metódy

V súčasnosti existujú dve metódy, ktoré sa používajú na štúdium plodu.

1. neinvazívna metóda. Úplne bezpečné pre mamu aj dieťa. Na túto štúdiu stačí vykonať ultrazvukové vyšetrenie, na ktorom sa vykonajú merania plodu, ako aj štúdium biochemickej analýzy tehotnej ženy s cieľom identifikovať špeciálne markery.
2. invazívna metóda. Závažnejšia metóda, pretože manipulácie sa musia vykonávať priamo v maternici, aby sa zistila patológia. Lekár odoberie na rozbor buď bunky z chorionu alebo bunky z placenty, ako aj pupočníkovú krv a vzorku plodovej vody. Táto analýza je presnejšia. Vďaka biopsii z vyššie uvedených materiálov môžu lekári získať dostatok informácií o zdravotnom stave bábätka. Celý postup sa vykonáva presne rovnakým spôsobom, ako je opísané vyššie - ľudský karyotyp sa určuje štúdiom chromozómovej sady.

Karyotypizácia plodu: komplikácie

Pred praktizovaním invazívnej metódy fetálnej karyotypizácie musí lekár oznámiť, že po štúdiách existuje malé (nie viac ako 2-3%) riziko komplikácií. V najhoršom prípade je možný potrat, môže sa otvoriť krvácanie alebo môže začať odtekať plodová voda.

Preto pred rozhodnutím o tomto postupe je potrebné zvážiť všetky pre a proti a až potom dať súhlas. Ak chcete len zistiť pohlavie dieťaťa v počiatočnom štádiu (a s touto metódou je to celkom možné), je lepšie odmietnuť invazívnu karyotypizáciu plodu. Úplne iná otázka je, ak existuje riziko, že dieťa bude mať genetické abnormality alebo anomálie.

Karyotypizácia plodu: indikácie

Intervencia počas tehotenstva na vykonanie invazívnej karyotypizácie plodu sa praktizuje iba zo zdravotných dôvodov. Tento postup sa odporúča, ak:

1. Je tehotná viac ako 35 rokov a toto je jej prvé dieťa.
2. Ultrazvukové vyšetrenie ukázalo prítomnosť patológie u plodu.
3. V krvi tehotnej ženy sa dramaticky zmenili biochemické parametre – krvné markery (AFP, hCG, PPAR).
4. V rodine sa vyskytuje choroba, ktorá sa prenáša len podľa pohlavia (napríklad hemofília - táto choroba sa prenesie zo ženy na jej syna a nie na dcéru).
5. Rodina už má dieťa s patológiou alebo malformáciou alebo s genetickým ochorením.
6. Žena máva dlhé potraty, pretože u plodu sa vyvinie vývojová anomália nezlučiteľná so životom.
7. Rodičia dieťaťa boli ožiarení alebo dlhodobo pracovali (práca) v nebezpečnom odvetví.
8. Tehotná žena v prvom trimestri trpela vírusovým ochorením.
9. Jeden alebo obaja rodičia užívali drogy.

Čo je karyotypizácia. Video

Analýza karyotypu je moderný laboratórny test, ktorý umožňuje identifikovať možné patologické poruchy na genetickej úrovni, určiť príčinu neplodnosti a dokonca určiť, či bude nenarodené dieťa zdravé. V získanom výsledku sú zaznamenané zmeny v sade chromozómov. Diagnostický postup je v súčasnosti veľmi žiadaný, pretože umožňuje stanoviť úroveň genetickej zhody mužov a žien.

Karyotyp – súbor chromozómov sa vyznačujú určitými vlastnosťami. Normou je prítomnosť 46 chromozómov:

• 44 - zodpovedný za podobnosť s rodičmi (farba očí, vlasov atď.).
• 2 - uveďte pohlavie.

Analýza karyotypizácie je potrebná na určenie patologických porúch vyskytujúcich sa v tele. Laboratórna diagnostika je nevyhnutná na zistenie príčin neplodnosti a prítomnosti vrodených patológií, ktoré môžu byť dedičné.

Postupnosť karyotypizácie:

1. Odber vzoriek venóznej krvi a skríning jednojadrových leukocytov v laboratóriu.
2. Umiestnenie biologického materiálu do média s PHA (fytohemaglutinín) a začiatok kultivácie buniek (mitotické delenie).
3. Ukončenie mitózy po dosiahnutí štádia metafázy, ktorá sa uskutočňuje pomocou kolchicínu.
4. Liečba roztokom hypotonického typu a príprava mikropreparátov.
5. Štúdium a fotografovanie vytvorených buniek špeciálnym mikroskopom.

Až po 2 týždňoch dostanú odborníci v laboratóriu výsledok štúdie. Formulár obsahuje informácie o celkovom počte chromozómov a zaznamenávajú sa existujúce porušenia genetického kódu.

Na posúdenie reprodukčných funkcií páru plánujúceho deti je predpísaná genetická štúdia. Na stanovenie diagnózy je potrebný úplný obraz genetických znakov. Na základe získaných výsledkov je možné hľadať možnosti riešenia existujúceho problému, ak existuje. Karyotypizácia je zameraná na určenie počtu, tvaru a veľkosti chromozómov v biologickej vzorke.

Ak existujú nejaké porušenia, existujú problémy z vnútorných systémov a orgánov. V niektorých prípadoch sú nositeľmi genetickej mutácie úplne zdraví ľudia. Vizuálne to nie je možné určiť. V dôsledku toho problémy s počatím, malformácie alebo narodenie nezdravého dieťaťa.

Existujú nasledujúce lekárske indikácie pre karyotypizáciu:

• veková hranica 35 rokov a viac;
• potrat a neplodnosť;
• hormonálne poruchy v ženskom tele;
• vystavenie alebo otrava chemikáliami;
• znečistené životné prostredie a prítomnosť zlých návykov;
• dedičná predispozícia a pokrvné manželstvá;
• prítomnosť chromozómovej mutácie u predchádzajúcich detí.

Krvný test na karyotyp by sa mal vykonať raz, pretože tieto vlastnosti sa vekom nemenia. Absolútnou indikáciou pre karyotypizáciu je problém počatia a neschopnosť vydržať tehotenstvo. V posledných rokoch podstupuje túto analýzu čoraz viac mladých párov, aby sa ubezpečili, že sa im narodia zdravé deti. Laboratórna diagnostika umožňuje posúdiť pravdepodobnosť, že sa dieťa narodí s abnormalitami spôsobenými porušením chromozómov a identifikovať skutočnú príčinu neplodnosti.

Príprava na karyotypizáciu

Krvné bunky sa používajú na karyotypizáciu, preto sa pred vykonaním analýzy musíte pripraviť, čím sa eliminuje vplyv faktorov tretích strán, ktoré komplikujú ich rast. V opačnom prípade bude štúdia málo informatívna.

Príprava musí začať 2 týždne vopred:

1. Vyhnite sa alkoholu, fajčeniu a nezdravým jedlám.
2. O ukončení liečby sa poraďte so svojím lekárom.
3. 9-11 hodín pred odberom biologického materiálu vylúčiť stravu.
4. 2-3 hodiny pred laboratórnym testom nepite tekutiny.

Darovanie krvi pre karyotyp sa vykonáva ráno na prázdny žalúdok. V prípade zhoršenia zdravotného stavu, infekčnej choroby alebo exacerbácie chronických ochorení sa štúdia odloží, kým sa pacient nezotaví.

• Aneuploidia (zmena množstva). Pri nekvalitnom biologickom materiáli môžu vzniknúť ťažkosti v diagnostickom procese.
• Štrukturálne odchýlky - spojené kombinácie po oddelení. Štúdia odhaľuje veľké porušenia. Na identifikáciu menších odchýlok je predpísaná chromozomálna analýza microarray.

Typy diagnostiky

Karyotypizácia sa vykonáva niekoľkými spôsobmi, ktoré sa líšia prístupom k výskumu a zdrojom biologického materiálu:

1. Klasická- na výskum sa odoberie venózna krv (10-20 ml). U tehotných žien môže byť potrebný odber plodovej vody na diagnostiku. V niektorých prípadoch sa bunky odoberajú z kostnej drene. Chromozómy sú zafarbené a skúmané svetelnou mikroskopiou.
2. SKY (spektrálne)- nová technika, ktorá sa považuje za najúčinnejšiu, pretože umožňuje vizuálne a rýchlo identifikovať porušenia. V tomto prípade sa časti chromozómov detegujú pomocou fluorescenčných značiek bez bunkovej kultúry. Používa sa, keď štandardná karyotypizácia zlyhala.
3. Analýza FISH (fluorescenčná hybridizácia)- štúdia sa vykonáva špeciálnym spôsobom a zahŕňa špecifickú väzbu určitých častí chromozómov a fluorescenčných značiek. Na laboratórnu diagnostiku sa odoberajú embryonálne bunky alebo ejakulát.

Na získanie čo najpresnejšieho výsledku sa krvný test vykonáva v spojení s inými, nie menej informatívnymi, genetickými testami.

Ako dešifrovať

Genetik sa zaoberá stanovením diagnózy na pozadí výsledku karyotypizácie. Špecialista vykoná dôkladnú analýzu a urobí záver, v ktorom uvedie príčiny porušení reprodukčných funkcií alebo narodenie nezdravého dieťaťa.

Dešifrovanie analýzy vám umožňuje určiť nasledujúce genetické poruchy:

• prítomnosť geneticky odlišných buniek;
• pohyb častí genetického kódu;
• zvrátenie alebo duplikácia chromozómu;
• neprítomnosť jedného fragmentu alebo prítomnosť ďalšieho fragmentu.

Pomocou karyotypizácie je možné stanoviť predispozíciu k rozvoju hypertenzie, artritídy, infarktu myokardu, mŕtvice a diabetes mellitus. Vďaka tejto analýze tisíce párov identifikovali príčinu neplodnosti a úspešne vyliečili existujúce poruchy v tele.

Odchýlky sú možné ako zo strany mužského, tak aj zo strany ženského tela. Normálne ukazovatele:

• u mužov - 46XY;
• u žien - 46XX.

U detí sa pozorujú nasledujúce porušenia genetického kódu:

1. 47XX + 21 alebo 47XY + 21 - Downov syndróm (prítomnosť extra chromozómu).
2. 47XX + 13 alebo 47XY + 13 - Patauov syndróm.

Existujú aj iné odchýlky od normy, ktoré sú menej nebezpečné. Za riziká nezdravého dieťaťa pre každý jednotlivý prípad môže zodpovedať iba genetik. Ak sa pri karyotypizácii zistili nebezpečné poruchy alebo mutácie, lekár odporúča ukončenie tehotenstva.

Karyotypizácia poskytuje hodnotenie nielen počtu, ale aj stavu génov:

• Mutácie, ktoré spôsobujú tvorbu trombu, narúšajú výživu malých ciev v čase tvorby placenty, čo je príčinou potratov.
• Patológie z génu cystickej fibrózy, aby sa vylúčila pravdepodobnosť vzniku určitej choroby u dieťaťa.
• Poruchy génov z Y-chromozómu.
• Odchýlky od génov, ktoré sú zodpovedné za schopnosť dekontaminovať toxické faktory.

Pri zistení delécie (straty miesta) v chromozóme Y hovoríme o mužskej neplodnosti v dôsledku narušenej spermatogenézy. To je príčinou dedičných chorôb.

Čo robiť, ak sa zistia odchýlky

Aby sa vylúčila možnosť genetických abnormalít u dieťaťa, je potrebné skontrolovať karyotyp oboch rodičov ešte pred počatím. V prítomnosti genetických porúch lekár vysvetlí možné riziká. Pri detekcii chromozomálnych mutácií neprepadajte panike. Aj v tomto prípade je možné podľa odporúčaní lekára zniesť tehotenstvo a porodiť zdravé dieťa, ak sa dieťa nájde.

Plánovanie dieťaťa vám umožňuje pripraviť telo matky a otca na narodenie zdravých potomkov a určiť riziká nezdravých detí. Dokonca aj potom, čo žena otehotnie, karyotypizácia sa môže vykonať v prvom týždni na posúdenie možných rizík, čo umožňuje včasné opatrenia na zabránenie potratu. V prípade závažných genetických mutácií o ukončení tehotenstva rozhoduje pár. Lekár iba naznačuje možné následky a vydáva odporúčania, ak je potrebné prerušenie.

Záver

Genetika je v súčasnosti zlyhávajúcim rozvinutým vedeckým odvetvím. Pomocou moderných diagnostických testov je možné identifikovať prebiehajúce odchýlky v počiatočných formách progresie a prijať opatrenia na boj proti nim. Vďaka karyotypizácii je možné vyliečiť neplodnosť, zabrániť opakovaným potratom a vylúčiť možnosť mať deti s genetickou mutáciou. Pri plánovaní rodiny nebude zbytočné kontrolovať genetickú kompatibilitu.

Často sú odchýlky vo vývoji a ťažkosti s počatím dieťaťa spojené s poruchami, ktoré sú dedičné. Ak má jeden z rodičov príbuzných trpiacich genetickými chorobami, alebo je sám nosičom, je vhodné absolvovať vyšetrenie ešte pred plánovaním narodenia bábätka. Lekári urobia analýzu na karyotyp, ak majú podozrenie na patológiu chromozómov alebo molekúl DNA. Na účely štúdie sa pacientovi odoberie krv a ošetrí sa farbivom. Po spracovaní pod mikroskopom sa študuje veľkosť, tvar a počet chromozómov.

Definícia

Karyotyp je individuálny súbor chromozómov, ktorý má svoje vlastné charakteristiky pre každý špecifický biologický druh a jednotlivca. Človek má len 23 párov chromozómov, teda spolu 46. Z dvadsiatich troch párov len jeden určuje pohlavie a zvyšok nemá rozdiely v štruktúre. Genetická analýza karyotypu vám umožňuje identifikovať odchýlky v zložení alebo štruktúre chromozómov. Vďaka tejto štúdii môžu lekári prijať včasné opatrenia, aby patológia nespôsobila vážne komplikácie, až po smrť plodu.

Dôležité! Budúcim rodičom stačí raz za život urobiť karyotypizáciu, aby sa ubezpečili, že neexistujú žiadne alebo sú prítomné patológie.

Kedy urobiť test

Analýza je relevantná pre ľudí v akomkoľvek veku, pretože nie každý bol vyšetrený genetikom od raného detstva. Neexistujú žiadne kontraindikácie pre tehotné a dojčiace matky. V prvom rade je však potrebný výskum pre novorodencov, ktorým včasná diagnostika pomôže identifikovať nebezpečné genetické choroby ovplyvňujúce dĺžku života. Analýza v nemocnici na karyotyp manželov sa často vykonáva podľa predpisu lekára, ale nie každý vie, o aký druh vyšetrenia ide. Pre páry, ktoré chcú mať dieťa, je vyšetrenie indikované v týchto prípadoch:

• Po opakovaných neúspešných pokusoch o počatie.
• Porušenie menštruačného cyklu.
• Ak predtým došlo k potratom, alebo sa narodili mŕtve deti.
• U skôr narodených detí bolo zaznamenané zaostávanie v psychickom alebo fyzickom vývoji.
• Už v štádiu tehotenstva má plod poruchy vývoja.
• Ak sú budúca matka a otec blízki príbuzní.
• Ak má jeden z rodičov zlé návyky.
• Život v regióne s nepriaznivými environmentálnymi podmienkami alebo práca v nebezpečnom priemysle.
• Plánovanie prvého tehotenstva po 35 rokoch - dôvod spočíva v tom, že s vekom sa chromozómy môžu meniť.
• Ak majú rodičia genetické choroby, aj keď sa predtým narodili zdravé deti.

Pozor! Moderní lekári odporúčajú testovať všetky páry, pretože nie každý nosič má patológie, a preto o nich mnohí ani nemajú podozrenie.

Problémy, až neplodnosť, sa odhalia, keď sa človek rozhodne mať dieťa.

Ako prebieha štúdia

Analýza sa vykonáva počas obdobia metafázy, ktorej trvanie je od dvoch do desiatich minút. Práve v tomto bode je najjednoduchšie vidieť chromozómy pod mikroskopom. Existujú tri spôsoby detekcie anomálií – molekulárne, cytogenetické a molekulárne cielené. Lekár by si mal vybrať jednu alebo druhú metódu. Pred vykonaním analýzy karyotypu je potrebné pripraviť:

• Na vyliečenie prechladnutia, ak je človek chorý, môžete vykonať analýzu najskôr dva týždne po zotavení.
• 30 dní pred návštevou nemocnice odmietnite užívať antibiotiká alebo znížte ich spotrebu podľa pokynov lekára.
• Tri dni pred testovaním nepite alkohol.
• V deň testu si treba dať výdatné raňajky.

Na vyšetrenie sa odoberá venózna krv. Materiál získaný od pacienta je ošetrený farbivom na odhalenie chromozómov. Ďalej lekár urobí niekoľko obrázkov, ktoré vám umožňujú určiť počet molekúl DNA a patologické zmeny.

Dôležité. Molekulárna metóda je potrebná na detekciu malých oblastí štruktúrnych chromozómových anomálií s veľkosťou menšou ako 5 miliónov nukleotidov.

Na podrobnejšiu diagnostiku sa používa rozšírená alebo cielená molekulárna metóda.

Ako dešifrovať

Pre predstaviteľov silnejšieho pohlavia sú normálne výsledky analýzy karyotypu 46, XY a pre dámy - 46, XX. Číslo 46 označuje počet chromozómov v norme a X a Y na konci označujú tvar, štruktúru a veľkosť zdravého človeka - u mužov a žien sa tieto ukazovatele líšia. Na základe výsledkov testov lekár urobí niekoľko značiek na formulári. Pochopenie lekárskych termínov ich pomôže rozlúštiť:

1. Translokácia – došlo k preskupeniu chromozómu. Ak má pacient vyváženú translokáciu, potom sa s najväčšou pravdepodobnosťou neprejaví. Pri nevyváženosti sú možné vážne odchýlky.
2. Mozaicizmus – nachádzajú sa bunky s genetickými vlastnosťami, ktoré sa líšia od normálnych.
3. Trizómia - táto patológia sa vyskytuje najčastejšie, u pacienta sa zistí extra chromozóm. Najčastejším výskytom je objavenie sa kópie 21. chromozómu, čo vedie k chorobám, ako je Downov syndróm.
4. Inverzia - časť chromozómu je otočená o 180 stupňov.
5. Monozómia - v genotype iba jeden z párov homológnych chromozómov.
6. Delécia – stratí sa fragment chromozómu.

Čo robiť, ak sa zistia odchýlky

Nemali by ste predpokladať, že anomálie v analýze karinotypu vždy naznačujú, že manželský pár bude mať choré dieťa alebo bude úplne bezdetný. Napríklad rodičia s vyváženou translokáciou môžu mať zdravé dieťa, ktoré nemá chromozomálne abnormality. Aj keď sú ceny za analýzu karyotypu vysoké a začínajú od troch tisíc rubľov, je nežiaduce ju odmietnuť. Možno vám lekár na základe výsledkov poradí, aby ste podstúpili liečbu a až potom plánovali tehotenstvo.

Pozor! Ak žena vie, že bude mať dieťa s patológiami, musí dbať na zdravý životný štýl a dodržiavať odporúčania lekára.

Genetické abnormality môžu prebiehať rôznymi spôsobmi. S trizómiou trinásteho a osemnásteho chromozómu deti zomierajú v prvom roku života. Ľudia s Downovým syndrómom sú mentálne retardovaní, ale úmrtnosť je oveľa nižšia ako pri podobných ochoreniach. Anomálie pohlavných chromozómov, ako je Shereshevsky-Turnerov syndróm, často vedú k neplodnosti, ale človek s týmito poruchami sa môže dožiť vysokého veku. A pri monozómii X má asi 5 % žien možnosť porodiť dieťa. Je dôležité poradiť sa s genetikom, ktorý presne diagnostikuje. Genetická choroba sa nedá úplne vyliečiť, no pri pravidelnej liečbe sa kvalita života zlepší.