Este eficientă un frotiu o amprentă de la o formare a pielii? Obținerea și prelucrarea materialului pentru examen citologic

Amprenta de frotiu

pregătire pentru microscopie, preparată prin atingerea unei lame de sticlă de țesutul sau organul studiat, urmată de uscare, fixare și colorare.

1. Mică enciclopedie medicală. - M.: Enciclopedia Medicală. 1991-96 2. Primul ajutor. - M.: Marea Enciclopedie Rusă. 1994 3. Dicţionar enciclopedic de termeni medicali. - M.: Enciclopedia Sovietică. - 1982-1984.

Vedeți ce este „Smear-print” în alte dicționare:

Un microscop este un preparat (vezi. Preparate microscopice), care este preparat din țesuturi sau mai rar din bacterii care cresc pe medii dense. Pentru a face acest lucru, o bucată de țesut este tăiată din organ și tăierea acesteia este atinsă o dată sau de mai multe ori. (!) La un diapozitiv, un frotiu ...... Dicţionar de microbiologie

Pregătirea pentru microscopie, pregătită prin atingerea unei lame de sticlă a țesutului sau organului studiat, urmată de uscare, fixare și colorare... Dicţionar medical mare

Testul Papanicolaou, testul Papanicolau sau frotiu citologic (testul Papanicolaou în engleză, testul Papanicolau sau frotiul Papanicolau) un test care poate fi utilizat pentru a identifica celulele precanceroase sau canceroase din vagin și col uterin (vezi Malign ... ... Wikipedia

Introducere artificială în animalele de laborator (vezi) issl. a ry microorganisme, toxine, issl. material, în care se presupune conținutul de microbi sau toxine ale acestora. În microbiologie Z. e. folosit pentru a reproduce o boală sau a acesteia ...... Dicţionar de microbiologie

- (celula histologică cytus + doctrina logos greacă) se bazează pe studiul cu ajutorul microscopului a caracteristicilor structurale ale celulelor, compoziția celulară a organelor tisulare, fluidele corporale ale oamenilor și animalelor în procese normale și patologice. C. și...... Enciclopedia medicală

- (din altă greacă βίος viață și ὄψις aspect) o metodă de cercetare prin care celulele sau țesuturile sunt prelevate din organism in vivo în scopuri de diagnostic. Biopsia este o metodă obligatorie pentru confirmarea diagnosticului cu ...... Wikipedia

O biopsie (din grecescul „βίος” viață și „όψη” aspect/aspect) este o metodă de cercetare prin care celulele sau țesuturile sunt prelevate din organism in vivo și apoi examinate microscopic. O biopsie este obligatorie ... ... Wikipedia

Vedeți semnul, puțin, consecința și urma a răcit, atacați urma, nu există nicio urmă ... Dicționar de sinonime și expresii rusești similare ca înțeles. sub. ed. N. Abramova, M .: Dicționare rusești, 1999. marca trasă, amprentă, amprentă; amprentă, amprentă, reflecție, ...... Dicţionar de sinonime

Un set de metode pentru detectarea și studierea substanțelor morfologice și tinctoriale în bacterii (microbi) într-o probă de laborator, material patologic sau în probe din mediul extern folosind microscopie. Folosit pentru a stabili d pentru infecții. ...... Dicţionar de microbiologie

Listă de episoade din serialul de televiziune Dexter, despre criminalul în serie fictiv Dexter Morgan, care lucrează ca cercetător criminalist cu stropi de sânge pentru Departamentul de Poliție din Miami. Primele șase sezoane ale serialului au 72 de episoade. În Rusia, spectacolul ... ... Wikipedia

Cuvântul gag în rusă modernă este foarte comun. Poartă o amprentă stilistică a vorbirii colocviale. Sensul său principal poate fi definit după cum urmează: pe nimic altceva decât pe propriile tale născociri, pe propriul tău capriciu, nu se bazează ... ... Istoria cuvintelor

Pentru a determina în ce stare se află pacientul, de ce boală suferă, medicul poate folosi adesea utilizarea unui frotiu de amprentă. Această metodă este utilizată pe scară largă în diferite domenii ale medicinei. Dermatologi, ginecologi, urologi, oncologi - toți recurg la ea cu o frecvență diferită. O examinare a frotiului vă permite să determinați rapid patologia și să prescrieți un curs competent de tratament.

Un frotiu-amprentă este un preparat medical, este pregătit pentru utilizare prin presarea țesuturilor pe o lamă de sticlă. O amprentă colorată și fixată în siguranță este examinată la microscop.

Frotiul de amprentă este utilizat pentru a rezolva o varietate de probleme. Cel mai adesea este folosit pentru:

Nu există o modalitate generală de a lua tampoane. Metoda folosită de medic va diferi în funcție de problema pacientului și de scopul care va fi stabilit pentru studiu.

Pentru un frotiu, se poate folosi material biologic din diferite părți ale corpului. Dacă vorbim despre diagnosticul de cancer de sân, atunci telecomanda pentru amprente va fi luată de medic de la sfarcurile pacientului. Dacă este detectată o infecție, puroiul va fi luat pentru un tampon din acea parte a corpului care a suferit de inflamație. Cel mai adesea folosit pentru mânjirea secrețiilor din organele abdominale.

Zona cu probleme poate fi localizată nu numai pe suprafața pielii, ci și sub ea. Dacă medicul se confruntă cu o situație similară, pentru a obține amprente, va trebui să deschidă pielea. Pentru a lua un frotiu din locuri greu accesibile, se folosesc dispozitive speciale - tampoane, perii. Descărcarea rămâne pe ele și apoi distribuită cu grijă peste lama de sticlă.

Amprenta frotiu de la un ulcer pe organele genitale

Urologii, venerologii și ginecologii sunt nevoiți cel mai adesea să preia amprente de pe organele genitale ale pacienților lor. De obicei, puteți judeca natura infecției prin răzuire din uretră sau uretră. Dacă pacientul suferă de o boală mai puțin gravă, acest lucru poate fi suficient. Cu toate acestea, infecția nu afectează întotdeauna uretra.

Bolile cu transmitere sexuală, adică bolile dobândite pe cale sexuală, afectează în primul rând nu uretra, ci membrana mucoasă. Acest lucru este tipic pentru sifilis și herpes genital, precum și pentru o serie de boli similare. La un pacient care se confruntă cu probleme venerice, se formează ulcere pe membrana mucoasă din perineu și o amprentă a frotiu este luată direct din această zonă afectată.

Pentru a examina un frotiu prelevat dintr-un ulcer, specialiștii folosesc microscopia în câmp întunecat. În unele cazuri, ea nu va putea determina boala cu acuratețe absolută. Cu toate acestea, dacă treponemul este găsit în urma studiului amprentelor, medicul, fără ezitare, diagnostichează sifilisul la pacient.

De asemenea, microscopia în câmp întunecat face posibilă distingerea ulcerelor care apar cu herpes de orice alte boli.

Amprenta de frotiu a capului penisului

Ca obiect pentru un frotiu la un bărbat, capul penisului său este adesea folosit. Motivul pentru aceasta poate fi balanopostita, în care capul însuși sau preputul care îl acoperă devine inflamat.

Un tampon luat de pe cap vă permite să identificați o serie de probleme. Poate detecta cocii, E. coli, infecțiile fungice și o serie de alte boli.

Dacă balanopostita, la suspiciunea unui medic, este de origine herpetică, se va lua o amprentă pe frotiu nu numai din cap, ci și din veziculele care au apărut pe piele. Dacă celulele Tzank sunt găsite în vezicule, atunci pacientul suferă de herpes genital. Materialul biologic rezultat este colorat în timpul studiului. Această procedură este posibilă numai atunci când apar vezicule.

Frotiu de amprentă pentru examen citologic

O examinare citologică a amprentelor este efectuată de oncologi pentru a depista celulele atipice din materialul biologic obținut în urma frotiurilor, indicând faptul că pacientul suferă de cancer. În acest caz, un frotiu de amprentă este luat dintr-o tumoare, care poate fi localizată nu numai pe organele genitale, ci și pe alte zone ale pielii.

Într-un studiu citologic, se evaluează întreaga compoziție celulară: se măsoară dimensiunile nucleelor ​​și celulelor.

Tehnica permite diagnosticarea nu numai a cancerului, ci și a altor procese care nu sunt legate de oncologie.

Pregătirea pentru a lua o amprentă pe frotiu

Pacientul nu poate veni la spital și poate fi supus imediat acestei proceduri. Necesită o pregătire îndelungată. Dacă la un pacient se suspectează o infecție, acesta nu trebuie să ia antiseptice și antibiotice înainte de a face un frotiu, deoarece acestea sunt modalități de a distorsiona tabloul clinic și chiar de a masca infecția.

Pacientul nu trebuie să spele locul din care va fi luat frotiul. Dacă acest lucru este necesar din motive de igienă, puteți spăla locul cu apă curentă obișnuită fără a folosi săpun și alte produse de curățare.

Placa, veziculele și alte formațiuni care au apărut pe piele pot interfera cu luarea unui frotiu. În acest caz, înainte de a începe procedura, acestea vor fi șterse.

Cum se studiază o amprentă pe frotiu?

Este necesar un microscop pentru a examina tamponul luat. Lama de sticlă pe care este plasat materialul biologic trebuie să fie absolut curată și uscată.

Medicamentul poate fi fixat în diferite moduri. De obicei, pentru fixare se folosesc căldură, alcool etilic, metilic sau sublimat 95%, vapori de acid acetic. Metoda aleasă depinde de laboratorul în care se va efectua studiul. Astăzi, preparatele derivate special sunt utilizate în mod activ pentru fixare, care sunt un amestec de o serie de substanțe chimice.

Fixatorul are o importanță decisivă pentru eficacitatea întregii proceduri. Dacă un specialist folosește o soluție de calitate insuficientă, aceasta va avea un efect dăunător asupra structurii celulelor din frotiu și este probabil să dea un rezultat fals negativ. Pe baza rezultatelor analizei, pacientul va fi informat că este absolut sănătos, dar de fapt nu este așa. Doar o soluție de fixare de înaltă calitate este capabilă să mențină locația corectă a tuturor celulelor de frotiu și să identifice formațiunile bacteriene dintre ele.

Materialul fix este supus colorării, care pot fi orientative și diferențiale.

Autorii): Jan Rybnicek, MVDr, Diplomat Colegiul European de Dermatologie Veterinară
Organizație(e): Serviciul Dermatologie și Dermatopatologie, Cehia
Revistă: №2 - 2013

Majoritatea bolilor de piele au un tablou clinic similar, dar pot fi distinse nouă grupuri principale de tulburări dermatologice caracteristice:

– alopecie

– descuamare/cruste/seboree

– macule/papule/pustule sparte

– ganglioni/tumori

- modificari de pigmentare

Odată ce clinicianul începe să atribuie fiecare pacient la oricare dintre categoriile enumerate mai sus, îi va deveni mult mai ușor să formeze o listă de diagnostice diferențiale și să dezvolte un plan de diagnostic. Trebuie amintit că pacientul poate avea boli concomitente în prezent, care îngreunează stabilirea diagnosticului principal. .

Diagnosticul rapid prezintă adesea dificultăți semnificative pentru practician, prin urmare, mai jos vom vorbi despre metodele de cercetare de laborator disponibile care necesită timp și bani minim. Cele mai simple și mai rapide teste de diagnostic utilizate în practică sunt:

– zgârieturi de piele

– Trihoscopie

- Pieptănarea cu un pieptene sau o perie

– Testul Scotch

– Test pentru dermatofite

– Citologie cutanată

Răzuire ale pielii

Acest studiu trebuie efectuat în toate cazurile! Pentru răzuirea pielii sunt necesare următoarele echipamente și materiale: ulei mineral, lame de sticlă, o lamă de bisturiu sau o spatulă (chiuretă), un microscop.

Studiul în razele lămpii Wood este extrem de nespecific, totuși, atunci când este detectată fluorescența, firele de păr afectate sunt smulse și supuse unei examinări ulterioare (microscopie după tratarea preparatului cu o soluție alcalină, semănat pentru detectarea unei culturi). a dermatofitelor). O soluție de KOH 10% este aplicată pe o lamă de sticlă, părul îndepărtat este așezat, încălzit la flacără, se efectuează microscopie, acoperit în prealabil cu o lamă, mai întâi la mărire mică (obiectiv 10x), apoi la mărire mare (40x). obiectiv). Colorația cu clorolactofenol poate fi utilizată pentru o mai bună vizualizare.

Testul Scotch

Pentru a obține material pentru citologie, este necesar să tăiați scurt lâna din zona selectată, să apăsați ferm o bandă de bandă adezivă, apoi este coborâtă alternativ în soluții de colorant, lipită pe o lamă de sticlă și se efectuează microscopia. Această metodă detectează cu ușurință ciupercile de drojdie din gen Malassezia sub formă de „matryoshka”, bacterii din gen Simonsiella(indică pătrunderea salivei în timpul linsului), etc.

Trihoscopie

Cu microscopie, se acordă atenție structurii și pigmentării firelor de păr, se examinează capetele părului, se evaluează tricograma (raportul părului în diferite faze ale ciclului folicular: anagen / telogen). Anagen - stadiul de creștere, rădăcina părului îndepărtat este moale, capătă o formă rotunjită („mânere de umbrelă”). Catagen - o etapă intermediară, creșterea părului se oprește, rădăcina are forma unei perii înconjurată de o membrană vitroasă. Telogen - stadiul de repaus al foliculului de păr, rădăcina părului pierde pigmentul, se îngustează spre final sub forma unei „perii artistice”, ia forma unei „sulițe”. Distingeți părul primar și cel secundar (normal). Căderea părului primar poate fi unul dintre criteriile de diagnostic pentru unele alopecie (de exemplu, alopecia X). Tijele primare de păr sunt mai mari în diametru, medulara este întotdeauna mai groasă decât corticala. Peri secundari de diametru mai mic, adesea ondulați, medulara mai subțire decât corticala.

Nu există reguli stricte pentru tricogramă, dar există observații care descriu raportul anagen/telogen 1:9 iarna și 1:1 vara la unii câini. Există caracteristici de rasă - la câinii cu păr în continuă creștere (de exemplu, pudeli), foliculii în stadiul anagen predomină indiferent de sezon, iar la câinii din rasele nordice se poate observa o telogenizare pronunțată a bulbilor.

Prezența întregului păr 100% în stadiul telogen în cele mai multe cazuri nu este normală, se poate datora prelevării necorespunzătoare, tulburărilor hormonale, alopeciei X, efluviului telogen. Factorii hormonali influențează ciclul foliculului de păr și sunt însoțiți de telogenizare, din cauza întârzierii ciclului foliculului de păr, părul trece treptat prin procesul de îmbătrânire (părul negru devine roșcat, părul roșu se decolorează, vârfurile se pot despica). Părul primar dispare, subpelul întârziat arată ca părul de cățel. Cauzele endocrine ale unei astfel de alopecie pot fi hipotiroidismul, hiperestrogenismul, hipercortizolismul. Cauza non-endocrină este sincronizarea tuturor firelor de păr din telogen cauzată de boală gravă sau stres. De îndată ce părul își reia creșterea, remisiunea are loc în 1-2 luni. Alopecia X este o boală cu o etiologie inexplicabilă.

Tulburările structurale ale rădăcinilor părului apar din cauza distrofiei foliculare sau a displaziei. În cazuri rare, acest lucru se poate datora deteriorării granulelor de pigment. De asemenea, rădăcinile părului sunt deteriorate de alopecia areata și de expunerea la medicamente citotoxice (rar).

Atentie la varfurile parului: in mod normal, au forma ascutita, iar in cazul alopeciei datorate linsului apar semne de traumatisme la varfurile parului (pot fi rupte). Capetele părului pot fi deteriorate din cauza fragilității crescute cauzate de modificările structurale. De exemplu, apariția părului bifurcat se termină cu tricofitoză la Golden Retrievers. Modificările patologice ale vârfurilor părului pot fi rezultatul spălării și pieptănării extrem de agresive a hainei, precum și deteriorării mecanice în locurile cu frecare crescută.

La evaluarea firului de păr, pot fi detectați spori dermatofiți. Când este efectuată corect, tricoscopia dă un rezultat pozitiv în 60-70% din cazurile de dermatofitoză. Este de preferat să examinăm părul fluorescent în razele lămpii Woods. Structura firului de păr este perturbată nu numai în dermatofitoză, ci și într-o serie de alte cazuri, de exemplu, chimioterapie (rar), traumatisme mecanice și chimice (îngrijire agresivă), deficiențe nutriționale, boli ereditare (trichorexis nodosa etc. ). Modificări caracteristice în structura firului de păr sunt observate cu tricomalacia medulară a ciobanilor germani, care se manifestă la câinii adulți. Haina pare tunsă pe corp, coadă, regiunea umăr-scapulară. Cu tricoscopie, se observă fisuri longitudinale și rupturi în firele de păr. Modificări caracteristice sunt observate în alopecia asociată cu o încălcare a producției de melanină - alopecia „slăbită” de culoare și displazia foliculară a părului negru. „Decolorarea alopeciei” afectează câinii albaștri și maro deschis. Cu această boală, granule mari de pigment se găsesc în păr cu o culoare slăbită, care provoacă o fragilitate crescută a părului, ceea ce duce la alopecie. Displazia foliculară a părului negru a fost observată la câinii bicolori și tricolori, fiind afectați doar foliculii de păr negri. Cățeii se nasc normali, dar ulterior zonele de păr întunecate suferă treptat alopecie. Trihoscopia dezvăluie aglomerări anormale de melanină în firul de păr.

Cu tricoscopie, agregatele de keratina pot fi detectate cu ușurință sub formă de gipsuri de foliculi de păr pe firul de păr. Acestea apar din cauza defectelor de keratinizare (seboreea primară a cocker spanielilor, dermatoză cu lipsă de vitamina A, adenită a glandelor sebacee, leishmanioză, demodicoză), precum și alte boli foliculare, cum ar fi foliculita bacteriană.

citologie cutanată

Citologia cutanată este o metodă rapidă, neinvazivă, de mare valoare diagnostică. Acest tip de studiu este deosebit de valoros pentru diagnosticul leziunilor nodulare, exsudative, pustuloase, cu formare de cruste și seboree, precum și cu otita medie. În cazul leziunilor nodulare, este de preferat să se obțină material prin aspirație cu ac fin folosind o seringă de 10 ml cu ace 21G, 24G. Cu leziuni de plâns, amprentele frotiu pot fi examinate. Preparatele scotch sunt, de asemenea, supuse examenului citologic și, bineînțeles, răzuirii profunde. Preparatele se usucă la aer, se poate folosi fixarea cu metanol. Folosesc colorantul modificat al lui Wright (Diff-Qick), in laboratoare se coloreaza si cu coloranti speciali, imunocitochimie. Pregătirile de vizualizare se efectuează secvenţial folosind obiective 4x, 10x, 40x, 100x (cu ulei de imersie).

Razuirea de pe piele normală este dominată de corneocite, există și alte keratinocite, fibroblaste unice. La examinarea citologică a materialului din zonele inflamate, se acordă atenție următoarelor celule:

– Neutrofile (degenerative și nedegenerative);

– Macrofage;

– Limfocite/celule plasmatice;

– Eozinofile și mastocite;

– Celule acantolitice (keratinocite rotunjite, lipsite de procese);

- Celulele neoplazice.

De asemenea, se pot depista microorganisme (tije, coci, malassezia, alte ciuperci, leishmania etc.).

Folosesc următoarele criterii de bază pentru diagnosticul diferenţial citologic:

– Bacteriile și celulele epiteliale – creșterea excesivă bacteriană;

– Neutrofile și bacterii degenerative – piodermie;

- Neutrofile nedegenerative in numar mare + celule acantolitice - pemfigus foliaceu, pemfigus eritematos etc (in plus + histopatologie);

– Neutrofile + macrofage – piogranulom/granulom (infecție fungică, bacteriană atipică);

– Limfocite, plasmocite – inflamatie cronica, pododermatita plasmacitara, limfom (in plus + limfoblaste);

– Malassezia sp. iar celulele epiteliale - dermatita Malassezia.

La evaluarea morfologiei celulare, se obișnuiește să se evalueze următoarele semne de malignitate:

– Criterii citoplasmatice (anizocitoză, macrocitoză, intensitate diferită a culorii (grad de bazofilie), incluziuni/vacuolizare atipice, absența granulelor specifice, raport nuclear-citoplasmatic mare, precum și prezența în prepararea celulelor care diferă semnificativ în acest parametru) ;

– Criterii nucleare (anizocarioză, macrocarioză, modificarea formei nucleilor, cromatina rară sau hipercromazie, anizocromazie, indice mitotic ridicat, mitoze neregulate, nucleoli multipli, nucleoli giganți, forma patologică a nucleolilor).

Când se examinează preparatele citologice ale leziunilor nodulare, trebuie să se răspundă la următoarele întrebări:

– Inflamație/umflare;

– Neoplazie – benign/malign;

– Sursa de neoplazie;

– Origine tisulară: tumori epiteliale, mezenchimale, hematopoietice (celule rotunde).

Cele mai frecvente diagnostice citologice diferențiale ale leziunilor cutanate tumorale în practică sunt:

– Tumori epiteliale (keratoacantom, carcinom spinocelular și altele);

– Tumori mezenchimale (fibrosarcom, melanom etc.);

– Tumori cu celule rotunde (mastocitom, histiocitom, limfom);

Datorită disponibilității în creștere a histopatologiei în ultimii ani, capacitatea de a diagnostica diferite patologii dermatologice a crescut semnificativ. În ciuda acestui fapt, până acum recurg rar la prelevarea de specimene de histobiopsie din cauza posibilității de a obține rezultate neinformative. Prin urmare, informații suplimentare sunt dedicate evaluării necesității unei histobiopsii a pielii, alegerii corecte a zonei cutanate pentru examinarea histologică, prelevării corecte, alegerii unui patolog și interpretării concluziei histologice. Numai în toate aceste condiții, puteți obține un diagnostic precis.

1) Histobiopsia nu este utilizată în mod obișnuit pentru diagnostic la câinii cu prurit cronic. În cele mai multe cazuri, rezultatele unei biopsii nu vor oferi informațiile pe care un dermatolog le poate obține dintr-un examen clinic.

2) Histobiopsia cutanată poate fi utilă în următoarele cazuri:

– Alopecie atunci când nu se poate pune un diagnostic prin metode de diagnostic „rapide” (de exemplu, tricoscopie, răzuire cutanată, citologie...)

– Peeling atunci când un diagnostic nu poate fi pus folosind teste „rapide”.

– Pete, papule, pustule rupte când diagnosticul nu poate fi pus prin teste „rapide”

– Eroziuni nevindecatoare, ulcere, fistule

– Noduri, foci, tumori de lungă durată

– Depigmentare și hiperpigmentare neobișnuită

– Suspiciunea de boli autoimune

– Suspiciunea de boli de piele, în care confirmarea diagnosticului este posibilă numai histologic (de exemplu, adenita glandelor sebacee)

– Cazuri în care se suspectează un diagnostic care pune viața în pericol (dermatomiozită etc.)

– Cazuri în care nu există răspuns la un tratament complet rațional

Cum să obțineți specimene de histobiopsie cutanată de înaltă calitate

Pentru a obține un diagnostic histologic corect de înțeles, trebuie urmați următorii pași:

1) Selectarea unui loc de biopsie

Specimenele adecvate trebuie prezentate patologului, astfel încât clinicianul trebuie să acorde atenție selecției zonei de piele dorite. În cele mai multe cazuri, ar trebui prelevate cel puțin 3-5 mostre de piele per pacient pentru a avea mai multe șanse de a obține un diagnostic corect. Alegerea locului de biopsie depinde de tipul de leziuni găsite:

– Alopecie: Probele de biopsie trebuie obținute dintr-o zonă de piele complet cheală (de preferință 2), la marginea pielii normale și alopeciei (1) și din piele acoperită cu păr normal (dacă există), astfel încât medicul patolog să poată compara părul fiziologic. foliculi și foliculi din zona procesului patologic acest pacient.

– Leziuni solzoase (tegumente „seboreice”): Se prelevează 2-3 biopsii din zona afectată și o probă de piele normală (1) pentru a putea compara epiderma, în special stratul cornos din aceste zone. Un ac de biopsie poate fi folosit pentru a obține probe.

– Macule, papule, pustule: Biopsia ar trebui să aibă ca rezultat probe de la cel puțin trei locuri de leziuni primare, care ar trebui să fie situate în centrul biopsiei. Un ac de biopsie poate fi folosit pentru a obține probe.

– Zone ulcerate: acesta este cel mai dificil tip de leziune de biopsit. Principala greșeală este să trimiți un specimen de biopsie din centrul ulcerului către patolog și apoi să primești răspunsul „ulcer” fără niciun diagnostic specific. Într-o situație în care materialul este obținut din centrul unui ulcer mare, tabloul histologic va fi caracteristic procesului infecțios. De asemenea, este necesar să se preleveze mai multe probe, astfel încât medicul patolog să poată conecta procesele care apar în ulcer și în pielea normală. Dacă sunt prezente ulcere mici, întreaga zonă, inclusiv marginea țesutului sănătos, poate fi trimisă pentru examinare.

– Fistule: de obicei, procesul patologic este localizat adânc în derm și adesea sub piele, așa că este necesară o biopsie foarte profundă pentru a determina natura procesului patologic. În astfel de cazuri, un specimen de biopsie în formă de pană este excizat cu o lamă de bisturiu; este imposibil să se obțină o probă informativă cu un ac de biopsie cu acest tip de leziune. În același timp, este logic să trimiteți materialul de biopsie pentru examen bacteriologic, micologic.

– Sigilii și noduri: din nou, excizia chirurgicală a întregului nod cu țesut normal adiacent este metoda de elecție. Conform regulilor stabilite, această procedură poate fi efectuată numai după excluderea mastocitomului prin aspirație cu ac fin și examen citologic.

– Depigmentare: Se obțin probe de histobiopsie din zone complet depigmentate (minim 2), din zona de frontieră dintre pielea normală și cea depigmentată (1), precum și o probă din piele normală.

– Hiperpigmentare: Se obțin probe de histobiopsie din zone pigmentate (minim 2), precum și o probă din piele normală.

2) Interpretarea concluziei histologice

De obicei, un dermatohistopatolog emite o concluzie, care ar trebui să conțină următoarele secțiuni:

1. Descrierea probei de țesut

2. Diagnosticul morfologic

3. Diagnosticul etiologic (dacă cauza poate fi determinată)

4. Comentarii

Descrierea histologică este informația pe care patologul le vede în preparate. Descrierea histologică conține informații valoroase folosind o varietate de termeni, care este de mare importanță în diagnostic. Cu toate acestea, este necesară o experiență considerabilă pentru a explica aceste modificări observate, astfel încât clinicianul nu trebuie întotdeauna să aibă încredere în interpretarea raportului patologului. Cunoașterea terminologiei de bază este esențială pentru interpretarea corectă a constatărilor laboratorului. Din păcate, majoritatea clinicienilor nu citesc deloc narațiunea.

Diagnosticul morfologic este un rezumat într-o singură propoziție a modificărilor patologice din specimenul histologic (ceva asemănător: hiperplazie marcată cu cruste și infiltrație eozinofilă perivasculară cu acarieni scabie în stratul cornos). Diagnosticul morfologic se bazează pe termenii folosiți în descrierea specimenului histopatologic.

Un diagnostic etiologic este posibil atunci când histopatologia este specifică unei boli. De exemplu, în cazul descris mai sus, diagnosticul etiologic este „râia sarcoptică”. În cazul în care nu se poate stabili un diagnostic etiologic, medicul anatomopatolog oferă o listă de diagnostice diferențiale și, eventual, recomandări pentru un diagnostic ulterioar.

Clinicianul nu ar trebui niciodată să se bazeze orbește pe concluzie, este foarte important ca clinicianul să lege împreună tabloul clinic și informațiile histopatologice. Există un număr mare de boli care pot fi diagnosticate histologic, dar multe dintre ele pot fi suspectate prin trăsături caracteristice.

Cele mai frecvente constatări histopatologice vor fi enumerate mai jos.

Tulburări epidermice

2. Hiperplazie- acesta este un răspuns nespecific al epidermei la inflamația sau leziunea cronică, observată în multe procese inflamatorii însoțite de mâncărime.

3. Pustule subcorneene și intraepidermice- întâlnit de obicei în piodermite superficiale, precum și în pemfigus foliaceu și unele boli pustuloase sterile rare.

4. pustule și vezicule subepidermice- acesta este un simptom foarte rar, apare în boli ereditare și autoimune, de exemplu, în pemfigusul vulgar.

5. Necroze și ulcere- se observă de obicei cu arsuri, dermatită de contact, dermatită piotraumatică („puncte fierbinți”), sindrom de mâncărime în cap și gât la pisici, complex eozinofil la pisici. Cauze mai rare sunt sindromul hepatocutanat, eritemul multiform/necroliza epidermică toxică, anumite reacții la medicamente, bolile virale ale pisicilor (virusul vaccinului, virusul herpesului), timomul la pisici. Ulcerele pot fi leziuni secundare din cauza unor afectiuni grave ale pielii, cum ar fi vasculita.

Leziuni dermice

1. Leziuni superficiale ale dermului- destul de rar, se poate observa cu piodermie a zonelor mucocutanate, lupus, eritem multiform, limfom epiteliotrop, timom (la pisici), dermatomiozită.

3. Foliculita/furunculoza- in majoritatea cazurilor indica o leziune cutanata de natura infectioasa, cauzata, de exemplu, de stafilococi, dermatofiti sau demodexi. Alte cauze pot fi furunculoza eozinofilă, pemfigus foliaceu, limfom epiteliotrop.

5. paniculita- acest simptom poate fi observat cu infecții bacteriene, micobacteriene și fungice subcutanate profunde, cu paniculită sterilă nodulară, idiopatică, pansteatita, lupus, precum și cu reacții locale la injecții, leziuni. Poate fi din cauza pancreatitei.

6. Vasculita- acest semn indică lezarea directă a vaselor de sânge. Vasculita poate fi prezentă într-o mare varietate de procese, cum ar fi vasculita septică, bolile mediate imun și expunerea la medicamente.

7. Atrofie- observate in afectiunile endocrine, unele alopecie specifice, precum alopecia sezoniera a suprafetei laterale a corpului, sindromul paraneoplazic si dermatopatia ischemica.

Rezumând, dacă la animalele cu semne de alopecie, descuamări și cruste, macule, papule, pustule, nu reușesc să stabilesc un diagnostic prin toate testele rapide de mai sus, recurg la histobiopsie. Trebuie amintit că, în unele cazuri, examenul histologic nu este foarte informativ (de exemplu, la animalele cu prurit cronic), așa că vreau să remarc importanța extremă a testelor rapide la acești pacienți, precum și necesitatea evaluării clinice și analiza atentă a datelor anamnestice de către un medic veterinar.

Literatură

1. Cowell R.L., Tyler R.D., Meinkoth J.H., DeNicola D.B. Citologia diagnostică și hematologia câinelui și pisicii, ed. a 3-a, Mosby Elsevier, 2008.

2. Raskin R.E., Meyer D.J. Citologie canină și felină, Saunders Elsevier, a 2-a ed., 2010.

3. Mc. Cullough S., Brinson J. Clinical Techniques in Small Animal Practice, Vol.14, No.4, noiembrie 1999.

4. Taylor S.M. Tehnici clinice pentru animale mici, Saunders Elsevier, 2010.

Prepararea unui preparat colorat constă din următorii pași:

1) pregătirea frotiurilor;

2) uscarea frotiului;

3) fixarea frotiului;

frotiu de colorare.

Pentru a pregăti preparatul, se aplică o picătură de apă sau soluție salină pe o lamă de sticlă degresată, în care materialul de testat este introdus cu o buclă și distribuit într-un strat uniform subțire peste sticlă pe o suprafață de aproximativ 1 cm 2 . Dacă materialul de testat este într-un mediu lichid, atunci se aplică direct cu o buclă pe o lamă de sticlă și se prepară un frotiu. Frotiurile se usucă în aer sau într-un curent de aer cald peste flacăra unei lămpi cu alcool, împiedicând picătura să fiarbă.

Pentru a fixa frotiul, o lamă de sticlă (smear up) este trecută încet de 3-4 ori prin flacăra unei lămpi cu alcool. Microorganismele mor în timpul fixării, sunt strâns atașate de suprafața de sticlă și nu sunt spălate în timpul procesării ulterioare. Încălzirea mai lungă poate provoca deformarea structurilor celulare.

La fixarea cu substanțe chimice, se folosesc compuși de crom, formol, acid osmic, acetonă. Una dintre metodele comune de fixare este tratamentul preparatului cu alcool metilic sau etilic sau cu un amestec de Nikiforov (volume egale de alcool etilic și eter). În acest caz, medicamentul este scufundat timp de 5-20 de minute. în fluidul de fixare.

Metode de colorare a frotiurilor și coloranților utilizate în microbiologie.

Exista metode simple și complexe de colorare . Pentru colorarea simplă, se folosește unul dintre coloranți, de exemplu, apă magenta (1-2 min.), albastru de metilen (3-5 min.). La colorarea unui frotiu, medicamentul este plasat pe suportul medicamentului. Pe frotiu se aplică câteva picături de colorant. După ce a trecut timpul de colorare, preparatul este spălat cu apă, excesul de apă este îndepărtat cu hârtie de filtru, uscat la aer și microscopat.

Cu o colorare complexă, anumiti coloranți sunt aplicați succesiv pe preparat, diferind în compoziția chimică și culoare. Acest lucru vă permite să identificați anumite structuri celulare și să diferențiați unele tipuri de microorganisme de altele. Acestea sunt metodele de colorare după Gram, după Ziehl-Nielsen, colorarea sporilor după metoda Orzeszki.

Coloranții în care ionii de hidrogen sunt eliberați în timpul disocierii, dând colorantului un caracter acid, se numesc acru. Ele colorează (sub formă de anion) substanțe de natură bazică. Coloranții în care ionii de hidroxid sunt eliberați în timpul disocierii sunt de bază.

În practica microbiologică, coloranții acizi și bazici sunt utilizați sub formă de săruri, deoarece sunt capabili să reacționeze cu acizii și bazele. Coloranții de bază sunt folosiți mai des sub formă de săruri ale acizilor clorhidric, mai rar acetic și sulfuric; coloranți acizi – sub formă de săruri de sodiu sau potasiu.

Vopsele de bază de natură

Roșu Violet

roșu neutru violet de gențiană

pironina cristal violet

violet de metil safranină

verde de metil magenta

verde de malachit hematoxilină

Albastru Maro

victoria vesivine

crisoidina albastru de metilen.

Verde Negru

janus green indulin

Coloranți de natură acidă

Roșu și Roz Negru Galben

acru fuchsin nigrosine congo

acid eritrozin picric

fluoresceina

Intensitatea capacității de colorare a colorantului depinde de pH-ul mediului: coloranții bazici colorează obiectul mai intens, cu cât mediul este mai alcalin, coloranții acizi, cu atât mai acid.

Coloranții pot fi împărțiți în: pozitiv și negativ. Coloranții pozitivi colorează direct celulele microorganismelor. Ei colorează celulele la temperatura camerei timp de 30-60 de secunde. Coloranții negativi colorează spațiul din jurul celulelor microorganismelor. Ca rezultat, celulele arată ca siluete pe fundalul colorantului.

Metodă ușoară de colorare

Aplicați câteva picături dintr-o soluție apoasă de fucsin pe frotiul preparat și fixat. Culoare 1-2 min. Clătiți colorantul cu apă, ștergeți preparatul cu hârtie de filtru, uscați-l la aer și la microscop.

Colorație Gram.

Pe un frotiu fix, aplicați o soluție de alcool carbolic de violet de gențiană printr-o bandă de hârtie de filtru. După 1-2 minute, îndepărtați hârtia și scurgeți vopseaua.

Aplicați soluția Lugol timp de 1-2 minute.

Se decolorează cu alcool etilic timp de 30–60 s până când structurile violete ale colorantului nu se mai desprind.

Clătiți cu apă.

5. Finalizați cu o soluție apoasă de fuchsin timp de 1-2 minute, clătiți cu apă, uscați cu hârtie de filtru și în aer și microscop.

Bacteriile Gram pozitive colorează violet închis, bacteriile Gram negative se colorează cu roșu.

Raportul dintre bacterii și colorația Gram este determinat de capacitatea lor de a reține complexul de violet de gențiană cu iod format în timpul procesului de colorare. Acest lucru depinde de diferențele în compoziția chimică și permeabilitatea peretelui celular al bacteriilor Gram-pozitive și Gram-negative.Peptidoglicanul este multistratificat, acizii teicoici sunt asociați cu acesta.

În bacteriile gram-negative, peptidoglicanul are un singur strat, există o membrană exterioară, care include fosfolipide, lipoproteine, proteine ​​și o mepopopolizaharidă complexă (LPS). Întreaga membrană exterioară este pătrunsă de proteine ​​- porine, care asigură difuzia diverșilor compuși. În acest fel, bacteriilor Gram-pozitive sunt asigurate condiții optime pentru fixarea puternică a colorantului și rezistența la decolorarea alcoolului.

Bacteriile gram-pozitive includ starilococi, streptococi, corynebacterium diphtheria, mycobacterium tuberculosis etc., bacteriile gram-negative includ gonococi, meningococi, Escherichia coli etc. pe structura peretelui celular. Prin urmare, pentru colorare, ar trebui să luați întotdeauna culturi tinere, vechi de 1 zi.

Principala greșeală făcută la colorarea conform Gram este „decolorarea” frotiului cu alcool etilic. Bacteriile Gram-pozitive își pot pierde culoarea inițială cu violetul de gențiană și pot dobândi o culoare roșie (caracteristică bacteriilor Gram-negative) ca urmare a colorării ulterioare a frotiului cu fucsină; bacteriile Gram-negative, la rândul lor, pot păstra culoarea albastră. culoare violetă a violetului de gențiană. Pentru o colorare corectă, tehnica de albire trebuie respectată cu strictețe.

În mod normal, o femeie în afara lactației nu are scurgeri de la sân. Lichidul (exudatul) care curge din glanda mamară este analizat prin luarea de frotiuri de amprentă. Se examinează, de asemenea, conținutul de chisturi și ulcere ale pielii.

De ce se face analiza - frotiuri de la sân

Folosind această metodă, se determină boala care a provocat apariția secreției din glandele mamare. Se efectuează o analiză citologică a lichidului pentru a determina compoziția celulară. În tumorile maligne, celulele atipice (canceroase) sunt determinate în frotiu. Cu ajutorul frotiurilor-amprente diagnosticați:

• cancer mamar
• mastopatie și mastită;
• galactoree - secreția de lapte din glandele lor, asociată cu insuficiență hormonală;
• tuberculoza glandelor mamare;
• formațiuni benigne;
• blocarea și extinderea canalelor;
• conținutul chisturilor și suprafețelor rănilor

Cum se efectuează un examen de sân?

Secreția din mameloane și rănile de pe piele se aplică pe pahar, se usucă și se trimite la laborator.

Pentru a examina conținutul chisturilor, se efectuează o puncție cu prelevare de lichid. Injectarea se face cu un ac subțire, deci nu este necesară anestezia. După efectuarea analizei, pacientul pleacă acasă. Acasă, o femeie aplică gheață pe locul puncției. Punctul este aplicat pe sticlă și trimis pentru cercetare.

Procedura se efectuează în ambulatoriu și nu necesită spitalizare. Înainte de aceasta, nu puteți lua medicamente care modifică coagularea sângelui. În ziua studiului, este interzisă aplicarea de creme, spray-uri, deodorante pe piept și regiunea axilară.

Rezultate frotiul de sân

În laborator, materialul este colorat și examinat la microscop:

• cu leziuni și boli nemaligne ale glandelor mamare, sângele și leucocitele sunt prezente în lichid. Pot fi detectate celulele tumorilor benigne. În acest caz, femeia este examinată suplimentar;
• în cancerul de sân, în secreție se găsesc celule atipice (canceroase) - mari, de formă neregulată, cu mai mulți „nucleoli” mici. Precizia analizei se apropie de 100%. În timpul studiului se determină tipul de tumoră malignă;
• în stadiile inițiale ale cancerului de sân, celulele modificate dintr-un frotiu nu sunt întotdeauna determinate. În 15%, procesul oncologic este detectat prin alte metode - ecografie Doppler, RMN. Dacă rezultatul este îndoielnic, femeia este examinată din nou.

Prelevarea frotiurilor-amprente de la glanda mamară este o metodă puțin traumatică și informativă pentru diagnosticarea cancerului și a altor patologii ale glandei mamare.