Płyn antygenowy Diagnosticum Salmonella erythrocyte vi. Diagnostyka erytrocytów Salmonella V-antygenowa

Zestaw odczynników Diagnosticum Salmonella VI-antigenic przeznaczony jest do wykrywania w surowicy krwi ludzkiej swoistych przeciwciał przeciwko antygenowi V Salmonella duru brzusznego w reakcji biernej hemaglutynacji (RPHA).

1. CECHY ZESTAWU

2.1. Zasada metody.

Substancją czynną antygenu Diagnosticum Salmonella VI jest antygen V utrwalony na powierzchni erytrocytów. Podczas interakcji z surowicami zawierającymi przeciwciała przeciwko antygenowi Vee obserwuje się zjawisko aglutynacji erytrocytów.

2.2. SKŁAD ZESTAWU

1. CHARAKTERYSTYKI ANALITYCZNE I DIAGNOSTYCZNE.

3.1. Diagnosticum należy aglutynować w RPHA z surowicą diagnostycznego receptora B zaadsorbowanego przez Salmonella w rozcieńczeniu co najmniej 1:160.

Warunkowy poziom cech diagnostycznych surowicy krwi osób zdrowych należy uznać za rozcieńczenie surowicy nie wyższe niż 1:20.

3.2. Czas analizy to 2 godziny.

3.3. Zestaw przeznaczony jest na 8 definicji.

1. ŚRODKI OSTROŻNOŚCI

Podczas pracy z zestawem należy przestrzegać „Zasad projektowania, środków ostrożności, warunków sanitarnych, reżimu przeciwepidemicznego i higieny osobistej podczas pracy w laboratoriach (działach, departamentach) instytucji sanitarno-epidemiologicznych systemu Ministerstwa Zdrowie ZSRR (M., 1981).

Analizowane surowice, jak również odczynniki mające z nimi kontakt, powinny być uważane za potencjalnie zakaźne, zdolne do zatrzymania lub przeniesienia przez długi czas wirusa HIV, zapalenia wątroby lub jakiegokolwiek innego czynnika wywołującego zakażenie wirusowe i należy się z nimi obchodzić ostrożnie:

• pracować w gumowych rękawiczkach;
• podczas pipetowania konieczne jest użycie pipet automatycznych;
• pod koniec pracy analizowane surowice i mające kontakt z nimi odczynniki, narzędzia, należy potraktować roztworem dezynfekującym
• Przetrzeć sprzęt przed i po pracy 70% alkoholem etylowym.

Analizowane surowice należy inaktywować w temperaturze 56°C przez 30 minut.

Do zestawu dołączona jest diagnostyczna inaktywowana surowica Vee z adsorbowanym receptorem salmonelli.

Obiektywne wyniki analizy są gwarantowane w następujących warunkach:

• przechowywanie wszystkich odczynników zestawu powinno odbywać się w temperaturze od 2 do 8 0 С;
• nie używaj przeterminowanych odczynników;
• nie używać odczynników z zestawu, jeśli nie są one odpowiednio oznakowane na ich opakowaniu;
• w przypadku RPHA należy używać odczynników zawartych tylko w tym zestawie.

Vi-Diagnosticum

Diagnostyka Vee

Vi-antygeniczny

Dobrze przeprowadzone badanie krwi pomaga wykryć patogeny różnych złożonych chorób w organizmie we wczesnych stadiach ich rozwoju, a czasem nawet przed wystąpieniem klinicznych objawów choroby. Bardzo często lekarze przepisują pacjentom analizę reakcji aglutynacji. Następnie zajmiemy się tym, że jest to badanie krwi na RPHA, kiedy jest stosowane i o czym może powiedzieć?

Zasada działania

Pośrednia reakcja hemaglutynacji (zwana także bierną reakcją hemaglutynacji, znaną również jako RPHA, RNHA) występuje, gdy erytrocyty adsorbujące antygen są wystawione na działanie surowicy odpornościowej odpowiadającej temu antygenowi.

Badania wykazały, że metoda ta znacznie przewyższa inne testy serologiczne pod względem swoistości i czułości. Dlatego jest często używany do wykrywania chorób wywołanych przez bakterie lub riketsje. Ekstrakty bakteryjne, oczyszczone antygeny różnych drobnoustrojów, składniki szczepionek bakteryjnych mogą służyć jako antygeny do takiej analizy.

Po dostaniu się chorobotwórczej bakterii do organizmu ludzkiego zaczynają w niej wytwarzać się specyficzne i niespecyficzne przeciwciała, tworząc pewną odpowiedź immunologiczną. W przypadku kiły, która prawdopodobnie jest spowodowana przez treponema pallidum, w ludzkiej krwi wytwarzane są gram-ujemne krętki, przeciwciała niekrętkowe lub krętkowe. Laboratoryjne badania diagnostyczne opierają się na ich wykryciu, które powinno potwierdzić lub odrzucić obecność czynnika sprawczego wirusa w organizmie.

W przypadku RPHA erytrocyty, których powierzchnia adsorbuje antygeny bladego treponemy, w przypadku dodania surowicy z przeciwciałami przeciwko treponemie z materiału osoby zakażonej kiłą, sklejają się ze sobą, to znaczy następuje ich aglutynacja.

Rzetelność badania

Należy pamiętać, że przeciwciała przeciwko krętkowi blademu zaczynają pojawiać się w organizmie osób zakażonych 2-4 tygodnie po zakażeniu, a w niektórych przypadkach okres ten może się wydłużyć nawet do 6 tygodni.

Z tego powodu czułość analizy dla RPHA w pierwotnym stadium rozwoju choroby wynosi około 86%, co jest znacznie gorsze od trafności diagnozowania pacjentów na kolejnych dwóch etapach. Czułość analizy dla takich pacjentów, a także dla nosicieli utajonej kiły sięga 99-100%.

Jednak reakcja hemaglutynacji biernej ma bardzo wysoką swoistość, która osiąga poziom 96-100%.

Umożliwia to wykorzystanie tego badania do potwierdzenia diagnozy w przypadku pozytywnej reakcji wstępnego badania niekrętkowego, na przykład reakcji mikroprecypitacji raka pęcherza moczowego.

Biorąc pod uwagę, że czułość testów krętkowych, w tym TPHA, znacznie przewyższa czułość metod bezkrętkowych, coraz częściej zaleca się takie testy do badań przesiewowych w kierunku kiły. Jednak w przypadku uzyskania pozytywnej reakcji przesiewowej wymagana jest inna swoista (krętkowa) analiza w celu wyjaśnienia diagnozy, ale nie TPHA.

Rozszyfrowanie analizy

Po dodaniu surowicy z przeciwciałami przeciwko treponemie z materiału osoby zakażonej kiłą do odczynnika, za pomocą którego przeprowadza się badanie, następuje aglutynacja erytrocytów, w wyniku której wytrącają się.

Na liczbę przylegających erytrocytów wpływa poziom przeciwciał w surowicy. Dlatego hemaglutynacja pasywna nie tylko pokazuje obecność przeciwciał, ale także pozwala ustawić ich liczbę. Wynik badania jest reprezentowany przez poziom miana przeciwciał.

Pozytywna reakcja wskazuje na obecność patogenu w ciele pacjenta. Jednak w trakcie procesu diagnostycznego mogą wystąpić reakcje fałszywie dodatnie, których liczba statystycznie nie przekracza 0,05-2,5% ogólnej liczby badań.

Pozytywna reakcja TPHA u osób niezakażonych kiłą może wystąpić, jeśli występuje:

• układowe choroby tkanki łącznej,
• we krwi pacjenta przeciwciała przeciwko patogenom podobnym do bladego treponemy,
• patologie fizjologiczne, takie jak zawał mięśnia sercowego,
• zapalenie wątroby typu B lub C
• choroby onkologiczne,
• tyfus, leptospiroza, gruźlica,
• Zakażenie wirusem HIV
• etiologia odkleszczowa boreliozy,
• rozległe urazy lub złamania,
• ciąża,
• w przypadku wstrzyknięć narkotyków.

W większości przypadków fałszywie dodatnim reakcjom towarzyszy niskie miano. Wysokie miana są typowe dla wtórnego stadium choroby i wcześniej utajonej kiły. Mogą jednak pojawić się również z fałszywie dodatnią reakcją u pacjentów z nowotworami złośliwymi.

U osób, które przynajmniej raz przeszły kiłę, reakcja RPHA pozostaje pozytywna do końca życia.

Rzadkimi wyjątkami są sytuacje, w których choroba została wykryta na wczesnym etapie rozwoju, po czym przeprowadzono intensywną i skuteczną terapię. Dlatego analiza TPHA nie może być wykorzystywana do oceny dynamiki powrotu do zdrowia lub diagnozy porównawczej wczesnych lub późnych stadiów choroby.

Po otrzymaniu pozytywnej reakcji konieczne jest zbadanie członków rodziny chorego oraz osób, które miały z nim kontakt seksualny.

Negatywną reakcję można uzyskać w następujących przypadkach:

• osoba nie ma kiły,
• błędnie pobrana krew do badań,
• Od zakażenia minęły 2-4 tygodnie, a produkcja przeciwciał jeszcze się nie rozpoczęła.

W każdym przypadku wynik badania należy ocenić w połączeniu z dodatkowymi wskaźnikami laboratoryjnymi i anamnestycznymi.

Komu pokazano analizę?

Lekarz może skierować oddanie krwi dla pacjentów z RPHA w następujących przypadkach:

• w obecności klinicznych objawów kiły: wrzodziejące wysypki, powiększone węzły chłonne, rozlane łysienie i inne,
• jeśli podejrzewasz możliwą infekcję w przypadku kontaktu z już chorymi osobami,
• dawcy chętni do oddania krwi,
• osoby, które przechodzą coroczne badania profilaktyczne lub sporządzają książeczki sanitarne,
• pacjenci z pozytywnym wynikiem testu przesiewowego,
• przed przyjęciem do szpitala,
• podczas badania przedoperacyjnego
• do wykrywania patogenów salmonellozy, błonicy, czerwonki metodą RPHA z odpowiednią diagnostyką.

Procedura badawcza

Do badania przesyłana jest próbka krwi żylnej od pacjenta. Aby nie uzyskać błędnego wniosku, pacjent powinien być odpowiedzialny za przygotowanie do analizy. Aby wyniki testu były wiarygodne, należy przestrzegać następujących zaleceń:

• Analizę należy wykonywać tylko na pusty żołądek.
• W dniu analizy można pić wodę mineralną bez gazu w minimalnych ilościach.
• Nie należy palić przez co najmniej 30 minut przed badaniem, ale lepiej wydłużyć ten czas do kilku godzin.
• Wprowadzono bezpośredni zakaz spożywania napojów alkoholowych.
• Pacjenci, którzy muszą regularnie stosować jakiekolwiek leki, powinni zdecydowanie poinformować o tym lekarza kierującego.
• W przypadku złego samopoczucia lub złego samopoczucia należy powiadomić pielęgniarkę pobierającą próbkę krwi lub lekarza w przychodni, w której należy wykonać badanie.

Bądź odpowiedzialny nie tylko za pytanie, gdzie przystąpić do testu, ale także za przygotowanie do egzaminu.

Diagnoza innych chorób zakaźnych

Nie należy myśleć, że takie badanie jak RPGA można przeprowadzić tylko w celu zidentyfikowania czynnika sprawczego kiły w ciele.

Analiza z diagnostyką salmonelli pozwala zidentyfikować obecność infekcji w układzie pokarmowym - salmonella. Począwszy od czwartego dnia po zakażeniu organizm wytwarza przeciwciała przeciwko antygenom Salmonelli, które można wykryć metodą RPGA. Wynik ujemny wskazuje na brak infekcji, a miano dodatnie, wzrastające od 1:200 do 1:800 w fazie ostrej, wskaże na jej obecność.

Metoda wykonania RPHA z markerem błonicy pozwala na rozpoznanie błonicy i ocenę odporności po szczepieniu. Przeciwciała zaczynają być wytwarzane przez układ odpornościowy już następnego dnia po zakażeniu i pozostają w organizmie przez kilka tygodni. Czułość tej analizy przewyższa bakteriologiczną metodę badań. Miano 1:80 potwierdza obecność błonicy w organizmie.

Marker czerwonki w RPHA najdokładniej wykrywa szigellozę (czerwonkę bakteryjną), nawet w porównaniu z laboratoryjną metodą diagnostyczną poprzez hodowlę bakterii. Jeśli pacjent nie otrzymuje wysokiej jakości leczenia, choroba przechodzi w proces przewlekły, w którym często występują nawroty. Analiza pozwala na zdiagnozowanie ostrej i przewlekłej fazy biegunki, identyfikację czynnika sprawczego czerwonki, odróżnienie szigellozy bakteryjnej od raka jelita grubego, zaburzeń endokrynologicznych czy zapalenia okrężnicy. Negatywna reakcja wskazuje na brak prątków i potwierdza jej obecność w mianie 1:80 dla niemowląt lub 1:320 dla dorosłych.

Przeprowadzenie badania markerem odry pozwala określić chorobę za pomocą odry. Takie badanie może być alternatywą dla często wykonywanej analizy HI w diagnostyce odry.

A więc badanie krwi RPHA - co to jest? Podsumowując, możemy śmiało powiedzieć, że jest to nowoczesna, bardzo czuła i niezawodna metoda diagnozowania różnych chorób o etiologii bakteriologicznej.

W kontakcie z

Świadectwo rejestracji nr RZN 2016/3905 z dnia 04.04.2016

Zamiar

Zestaw odczynników „Diagnosticum erytrocytów Salmonella Vi-antygen dla RPHA” (SED-Vi) jest przeznaczony do wykrywania przeciwciał przeciwko antygenowi Vi czynnika wywołującego dur brzuszny w surowicy krwi ludzkiej za pomocą pasywnego testu hemaglutynacji (RPHA).

Ustaw charakterystykę

Zasada działania

W obecności przeciwciał przeciwko czynnikowi wywołującemu dur brzuszny obserwuje się hemaglutynację erytrocytów kurzych uczulonych antygenem Vi, co prowadzi do powstania „parasola” osadzonych erytrocytów na dnie studzienek w kształcie litery U. tablet. W przypadku braku przeciwciał przeciwko czynnikowi wywołującemu dur brzuszny, osiadłe erytrocyty tworzą „punkt”.

Kompozycja zestawu

Nazwa odczynnika	Opis	Ilość w zestawie
Diagnostyka erytrocytów Salmonella Vi-antygenowa, sucha 6% (SED)	Sformalizowane erytrocyty kurczaka uczulone antygenem S.typhi Vi. Sucha higroskopijna masa koloru brązowego. Po rozpuszczeniu - zawiesina koloru czerwono-brązowego.	1 fiolka, od 0,6 ml
Salmonella diagnostyczna w surowicy adsorbowana, receptor Vi, sucha (rozcieńczona 1:20, (K+))	Zaadsorbowana przez Salmonella surowica królicza, receptor Vi, rozcieńczona 1:20. Sucha higroskopijna porowata masa o barwie białej. Po rozpuszczeniu jest klarowną, żółtawą lub bezbarwną cieczą.	1 fiolka, od 0,3 ml
Rozcieńczalnik do próbek (RID)	Klarowny niebiesko-fioletowy płyn.	1 fiolka, 10 ml
Roztwór buforu fosforanowego (PBS)	Przezroczysta bezbarwna ciecz.	1 fiolka, 10 ml
Jednorazowa płytka polimerowa do reakcji immunologicznych	Jednorazowa płytka polimerowa do reakcji immunologicznych wykonana z przezroczystego, bezbarwnego polistyrenu.	1 szt.

Charakterystyka diagnostyczna

Diagnosticum należy aglutynować w RPHA z diagnostyczną surowicą zaadsorbowaną salmonellą, receptor Vi, suchą (w rozcieńczeniu 1:20), do miana wskazanego na etykiecie surowicy. Warunkowy poziom cech diagnostycznych surowicy krwi osób zdrowych należy uznać za rozcieńczenie surowicy nie wyższe niż 1:20. Czas analizy to 3040 minut. Zestaw przeznaczony jest do badania 42 surowic krwi w opcji przesiewowej lub 10 surowic krwi w opcji miareczkowania.

Środki ostrożności

Zestaw przeznaczony jest wyłącznie do diagnostyki in vitro. Substancje zawarte w składnikach zestawu są inaktywowane i bezpieczne. Podczas pracy z zestawem należy przestrzegać SP 1.3.2322-08 i SanPiN 2.1.7.2790-10.

Dodatkowe wyposażenie i materiały

Sprzęt, materiały, rozwiązania:

• 1-kanałowe dozowniki do pipet o zmiennej objętości dozowania 5-40 µl; 40 - 200 µl; 200 - 1000 µl i 1000 - 5000 µl;
• dozowniki pipet 8- lub 12-kanałowych o zmiennej objętości dozowania 5-40 µl i 40-200 µl;
• woda destylowana (GOST 6709-72).

Analizowane próbki

Badane próbki surowicy krwi przechowuje się w temperaturze od 2 do 8 °C nie dłużej niż 3 dni od momentu pobrania krwi. Serwatkę można przechowywać w stanie zamrożonym w temperaturze nieprzekraczającej minus 18°C ​​nie dłużej niż 1 rok. Przed użyciem próbki rozmraża się w temperaturze od 16 do 25 °C i miesza przez wstrząsanie. Ponowne zamrażanie nie jest dozwolone. Nie należy używać próbek wykazujących wzrost bakterii i hemolizę. Przed rozpoczęciem reakcji surowice testowe ogrzewa się w 56°C przez 30 minut.

Przeprowadzanie analizy

Przygotowanie kontrolnej surowicy diagnostycznej (K+)

Przygotować roztwór roboczy surowicy diagnostycznej zaadsorbowanej salmonellą, receptor Vi, suchy (rozcieńczony 1:20) z 0,3 ml (K+). W tym celu do zawartości fiolki z K+ dodaje się 0,3 ml roztworu buforu fosforanowego (PBS). Pozostałą ilość surowicy można podzielić i przechowywać w stanie zamrożonym w temperaturze nieprzekraczającej minus 18°C ​​nie dłużej niż 6 miesięcy.

Przygotowanie diagnostyki salmonelli erytrocytów (SED)

Aby przygotować robocze rozcieńczenie zawiesiny Salmonella erythrocyte diagnosticum, do zawartości fiolki z suchym 6% SED dodaje się 0,6 ml wody destylowanej i pozostawia do nawodnienia przez 2 godziny w temperaturze 16–25 °C. Następnie do roztworu dodaje się 2,4 ml roztworu buforu fosforanowego (PBS). Roztwór roboczy przechowuje się w temperaturze od 2 do 8 °C nie dłużej niż 1 miesiąc. Zamrażanie nie jest dozwolone.

Oświadczenie RPHA podczas badania przesiewowego surowicy krwi

Surowice przesiewowe rozcieńcza się w dołkach płytki w następujący sposób:

• wstępne rozcieńczenia 1:20 sporządza się w pierwszych studzienkach tabletki, dodając najpierw do nich 190 μl roztworu RIP, a następnie 10 μl badanych surowic. Każdą surowicę dodaje się osobną końcówką i ostrożnie pipetuje (w tym przypadku kolor roztworu w studzienkach po dodaniu surowicy powinien zmienić się z niebiesko-fioletowego na zielony);
• rozcieńczenia przesiewowe 1:40 przygotowuje się w drugich studzienkach, najpierw wprowadzając do nich 25 µl roztworu PBS, a następnie 25 µl wstępnie rozcieńczonych surowic i ostrożnie pipetując.

Przy każdym ustawieniu RPHA konieczne jest przeprowadzenie kontrolnego oznaczenia miana K+. W tym celu do 8 studzienek długiego rzędu dodaje się 50 μl roztworu PBS. Następnie do pierwszego dołka dodaje się 50 µl roztworu roboczego K+ (1:20), ostrożnie pipetuje i przenosi do kolejnych dołków po 50 µl, otrzymując dwukrotne rozcieńczenia od 1:40 do 1:5120. W kolejnych 4 studzienkach dodaje się 50 µl roztworu PBS w celu kontroli SED pod kątem braku spontanicznej hemaglutynacji.

Do wszystkich studzienek tabletki z rozcieńczeniami przesiewowymi badanych surowic (z wyjątkiem pierwszej zawierającej RIP) i kontroli dodać 25 µl SED. Przed użyciem wymieszać zawiesinę SED w butelce lub kąpieli! Tabletkę dokładnie wstrząsnąć i pozostawić w temperaturze od 16 do 25°C na 30 do 40 minut do całkowitego osadzenia erytrocytów w kontroli.

Stwierdzenie RPHA podczas miareczkowania badanych surowic krwi

Miareczkowanie badanych surowic i roztworu roboczego K+ przeprowadza się w krótkich rzędach płytki. Kolejny krótki rząd służy do kontrolowania braku spontanicznej hemaglutynacji EDS.

Do pierwszych studzienek krótkich rzędów do miareczkowania surowicy testowej dodaje się 180 μl roztworu RIP. Wszystkie inne studzienki wypełnia się 50 µl roztworu PBS.

20 μl surowic testowych dodaje się do studzienek z roztworem RIP (uzyskuje się rozcieńczenie 1:10). Każdą surowicę dodaje się końcówką i ostrożnie pipetuje (kolor roztworu w dołkach powinien zmienić się z niebiesko-fioletowego na zielony). Następnie 50 μl przenosi się z pierwszych dołków do kolejnych dołków rzędów, otrzymując dwukrotne rozcieńczenia od 1:20 do 1:1280. Pod koniec miareczkowania z ostatnich studzienek usuwa się 50 μl roztworów.

Przy każdym ustawieniu RPHA konieczne jest przeprowadzenie kontrolnego oznaczenia miana K+. W tym celu do 8 studzienek długiego rzędu dodaje się 50 μl roztworu PBS. Następnie do pierwszego dołka dodaje się 50 µl roztworu roboczego K+ (1:20), ostrożnie pipetuje i przenosi do kolejnych dołków po 50 µl, otrzymując dwukrotne rozcieńczenia od 1:40 do 1:5120.

Aby skontrolować diagnostykę pod kątem braku spontanicznej hemaglutynacji, do wszystkich studzienek w krótkim rzędzie dodaje się 50 μl roztworu PBS.

We wszystkich studzienkach (z wyjątkiem pierwszych studzienek każdego rzędu dla badanych surowic zawierających RIP) dodać 25 µl SED. Przed użyciem wymieszać zawiesinę SED w butelce lub kąpieli! Tabletkę dokładnie wstrząsnąć i pozostawić w temperaturze od 16 do 25°C na 30-40 minut do całkowitego osadzenia erytrocytów w kontroli.

Rachunkowość i interpretacja wyników

Rozliczanie wyników w badaniach przesiewowych surowic krwi

Rozliczanie wyników odbywa się na warunkowej skali czterech krzyżyków. Miano surowicy to jej rozcieńczenie, które powoduje hemaglutynację przez co najmniej 3 (+++) krzyżyki.

• ++++ (4+) - zlepione erytrocyty tworzą odwrócony „parasol” na dnie otworu, jego krawędzie odpadają;
• +++ (3+) - zlepione erytrocyty tworzą odwrócony „parasol” na dnie otworu, jego krawędzie są równe;
• ++ (2+) - wraz z aglutynowanymi erytrocytami na dnie otworu znajduje się osad w postaci małego „pierścienia” nieaglutynowanych erytrocytów;
• + (1+) - większość erytrocytów nie ulega aglutynacji i osadza się w postaci małego „pierścienia”;
• (-) - nieaglutynowane erytrocyty tworzą „punkt” na dnie zagłębienia.

Za wynik dodatni uważa się hemaglutynację erytrocytów obciążonych antygenem Vi przez co najmniej 3 krzyżówki (+++).

Kontrola jakości stanowiska diagnostycznego to 4 studzienki rzędu kontrolnego, do których dodano tylko roztwór PBS i SED. W tych dołkach nie powinno być spontanicznej hemaglutynacji - reakcja jest ujemna (-). W przeciwnym razie badanie należy powtórzyć. Jeśli hemaglutynacja pojawi się podczas ponownej inscenizacji, lek nie jest stosowany.

Surowice z wynikiem ujemnym należy uznać za niezawierające przeciwciał przeciwko antygenowi Vi w mianie diagnostycznym 1:40 i niższym.

Surowice dające wynik dodatni przy rozcieńczeniu 1:40 należy ponownie zbadać w wariancie z miareczkowaniem surowicy w celu ustalenia jego miana.

Uwzględnianie wyników podczas miareczkowania surowic krwi

Miano surowicy to jej rozcieńczenie, które powoduje hemaglutynację przez co najmniej 3 (+++) krzyżyki.

Kontrola jakości diagnostycznej to studzienki rzędu do kontroli SED. W tych dołkach nie powinno być spontanicznej hemaglutynacji - reakcja jest ujemna (-). W przeciwnym razie badanie należy powtórzyć. Jeśli hemaglutynacja pojawi się podczas ponownej inscenizacji, lek nie jest stosowany.

Aktywnym początkiem diagnostyki jest antygen V utrwalony na powierzchni erytrocytów. Podczas interakcji z surowicami zawierającymi przeciwciała przeciwko antygenowi Vee obserwuje się zjawisko aglutynacji erytrocytów.

Formularz zwolnienia

Produkowany w zestawie 1 butelka z diagnostyką - 3 ml, diagnostycznym receptorem adsorbowanym w surowicy salmonelli Vee Dry w postaci liofilizatu od 0,1 ml 1 butelka; 0,9% roztwór chlorku sodu - 2 butelki po 8 ml; tabletka na reakcje immunologiczne jednorazowego użytku - 1 szt.

Mieszanina

Ilość odczynników:

Diagnosticum erythrocyte salmonella V-antigenic, który jest 0,75% zawiesiną sformalizowanej i uczulonej grupy krwi ludzkich erytrocytów O(I) z antygenem V w roztworze buforu fosforanowego (pH-7,2 ± 0,2; stężenie - 0,06 mol/l). Konserwant - formalina. Jednorodna zawiesina koloru brązowego bez płatków; podczas osadzania tworzą się 2 warstwy: gęsty brązowy osad erytrocytów i przezroczysta żółtawa ciecz supernatantu 1 fiolka-3 ml.

Receptor zaadsorbowany w surowicy diagnostycznej salmonelli Vee dry - jednorodna masa od białej z brązowawym odcieniem do beżowego. 1 butelka - od 0,1 ml.

Roztwór podtrzymujący - 0,9% roztwór chlorku sodu - klarowna, bezbarwna ciecz o pH 6,5 do 7,5. 2 butelki - 8 ml.

Płytka okrągłodenna do jednorazowych reakcji immunologicznych - składa się z 8 rzędów, z których każdy zawiera 12 dołków z przezroczystym, bezbarwnym, okrągłodennym. 1 szt.

Diagnosticum powinno być aglutynowane w RPHA z suchą surowicą diagnostycznego receptora B zaadsorbowanego przez Salmonella w rozcieńczeniu nie mniejszym niż 1/2 ich miana, ale nie mniejszym niż 1/160. Diagnosticum nie powinno być aglutynowane z suchą adsorbowaną surowicą diagnostyczną salmonelli dla RA: O receptor 9 – w rozcieńczeniu 1:40 i wyższym, H receptor d – w rozcieńczeniu 1:10 i wyższym.


Wskazania do stosowania

Przeznaczony jest do wykrywania w surowicy krwi ludzkiej swoistych przeciwciał przeciwko antygenowi V salmonelli durowej w reakcji biernej hemaglutynacji (RPHA).

Schemat dawkowania i sposób stosowania

Jako próbki analizowane stosuje się próbki surowicy krwi ludzkiej.
Analizowana próbka jest przechowywana w warunkach zapobiegających rozwojowi bakterii w temperaturze od 2 do 8 °C przez nie więcej niż 72 godziny. Zamrażanie jest dozwolone, zamrożone analizowane próbki należy rozmrozić w temperaturze pokojowej przed badaniem.
Niedozwolona jest analiza próbek z silną hemolizą, wzrostem bakterii, a także przechowywanych przez długi czas bez zamrażania lub ponownego zamrażania.

ANALIZA
Przygotowanie roztworów dla RPHA.
Otwarte fiolki osuszyć surowicą zaadsorbowanego receptora V Salmonelli diagnostycznej i dodać 1 ml dołączonego 0,9% roztworu chlorku sodu, uzyskując w ten sposób rozcieńczenie 1:10, które jest rozcieńczeniem roboczym.
Otwartą fiolkę z surowicą diagnostycznego receptora V zaadsorbowanego przez Salmonella suchą w rozcieńczeniu 1:10 w postaci zamkniętej można przechowywać w temperaturze od 2 do 8°C przez jeden miesiąc.
Diagnosticum jest gotowe do użycia. Przed otwarciem fiolki z preparatem diagnostycznym delikatnie wstrząsnąć, aż do uzyskania jednorodnej zawiesiny. Zaleca się powtarzanie wstrząsania podczas pracy.
Otwartą fiolkę z testem diagnostycznym w zamkniętej formie można przechowywać w temperaturze od 2 do 8 ° C przez miesiąc.
0,9% roztwór chlorku sodu. Gotowy do użycia.

Prowadzenie RPGA.
Kontrolując dowolną ilość analizowanych surowic, należy obowiązkowo ustawić pierwszy rząd aglutynacji z surowicą diagnostycznego receptora B zaadsorbowanego przez Salmonella.
Do produkcji RPHA stosuje się jednorazową tabletkę do reakcji immunologicznych. Przygotowuje się dwukrotne seryjne rozcieńczenia analizowanych surowic w 0,05 ml dołączonego 0,9% roztworu chlorku sodu zaczynając od 1:10 do 1:2560 i 1 serię dwukrotnych seryjnych rozcieńczeń surowicy diagnostycznego receptora zaadsorbowanego przez Salmonella Wi suche, zaczynając od rozcieńczenia 1:10 do dwukrotności miana wskazanego na etykiecie fiolek tej surowicy.
Do każdej studzienki z rozcieńczeniami surowicy dodaje się 0,025 ml Diagnosticum.

Obowiązkowe kontrole to:
1. Kontrola surowicy diagnostycznego receptora zaadsorbowanego na salmonellę
Wysuszyć i przeanalizować surowicę, która w rozcieńczeniu 1:10 w objętości 0,05 ml przyczynia się
w dwóch studzienkach kontrolnych.
2. Sprawdzenie braku spontanicznej aglutynacji diagnostycznej, dla której 0,025 ml diagnostycznego dodaje się do dwóch studzienek zawierających 0,05 ml 0,9% roztworu chlorku sodu.
Tabletkę wstrząsa się i umieszcza na 1,5-2,0 godziny w termostacie w temperaturze (37+1)°C.

RACHUNKOWOŚĆ WYNIKÓW
Reakcja jest brana pod uwagę zgodnie z systemem czterokrzyżowym:
4+ - wszystkie erytrocyty są zlepione i równomiernie pokrywają dno otworu;
3+ - prawie wszystkie erytrocyty ulegają aglutynacji. Na ich tle znajduje się niepozorny pierścień osadzonych, nieaglutynowanych erytrocytów;
3+ - wraz z jednolitym aglutynatem na dnie otworu znajduje się osad nieaglutynowanych erytrocytów w postaci małego „pierścienia” lub „guzika”;
1+ - większość erytrocytów nie ulega aglutynacji i osadza się w postaci małego „pierścienia” o gładkich krawędziach lub „guzików” pośrodku dna otworu.
(-) - brak oznak aglutynacji. Erytrocyty osiadły w postaci małego „pierścienia” o gładkich krawędziach lub guzikach na środku zagłębienia lub na dnie probówki.
Reakcja co najmniej 3+ jest uważana za pozytywną.
Wyniki uzyskane w RPGA można uznać za wiarygodne, jeśli surowica diagnostycznego receptora B zaadsorbowanego Salmonella sucha 1:10 uzyskała wynik dodatni w rozcieńczeniu co najmniej 14 ich mian oraz w 2 studzienkach z analizowaną surowicą i surowicą z diagnostycznego receptora B zaadsorbowanego przez salmonellę suche w rozcieńczeniach 1:10 nie powinno być płatków i osadu; w studzienkach z 0,9% roztworem chlorku sodu i diagnostyką - reakcja negatywna.
Miano przeciwciał analizowanej surowicy to ostatnie rozcieńczenie surowicy, które nadal daje dodatnią aglutynację erytrocytów.
Interpretacja wyników.
Osoby, które mają przeciwciała przeciwko antygenowi V w rozcieńczeniu 1:40 i wyższym, są uważane za podejrzane o przewlekły nosiciel bakterii duru brzusznego. Jednak ze względu na to, że diagnozy nie można postawić wyłącznie na podstawie badania serologicznego, konieczne jest dogłębne badanie bakteriologiczne.

Środki ostrożności dotyczące stosowania

Surowica diagnostyczna zaadsorbowany receptor Salmonella Vee zawarty w zestawie jest inaktywowany na sucho.
Surowice przeznaczone do analizy należy inaktywować w temperaturze 56°C przez 30 minut.
Surowice do analizy, jak również odczynniki, sprzęt i instrumenty mające z nimi kontakt mogą być materiałem potencjalnie zakaźnym i należy się z nimi obchodzić ostrożnie:
- praca w gumowych rękawiczkach;
- podczas pipetowania należy używać urządzeń automatycznych;
- po zakończeniu pracy analizowane surowice i odczynniki mające z nimi kontakt, narzędzia, należy potraktować roztworem dezynfekującym;
- Przetrzeć sprzęt przed i po pracy 96% alkoholem etylowym.

Obiektywne wyniki analizy są gwarantowane w następujących warunkach:
- wszystkie odczynniki z zestawu należy przechowywać w temperaturze od 2 do 8 °C;
- nie używaj przeterminowanych odczynników;
- nie używać odczynników z zestawu, jeśli na ich opakowaniu nie ma odpowiedniego oznaczenia;
- do RPHA stosować odczynniki zawarte tylko w tym zestawie.

2. diagnostyka

4.ze zniszczonych drobnoustrojów (izolacja określonego Ag)

Diagnostyka HBs erytrocytów

2. diagnostyka

4.zawiesina er.owiec potraktowanych garbnikami i wytrąconych a\g HBs

5. Aby wykryć specyficzne przeciwciała w surowicy krwi

Diagnostyka gp120

2. diagnostyka

4. Oddziel podniecenie. HIV

5. Aby wykryć HIV

Diagnostyka erytrocytów tężca

2. diagnostyka

4.zawiesina er.owiec leczona taniną z podnieceniem tężca

5. wykrywanie swoistych przeciwciał w surowicy krwi (do wzbudzenia tężca)

Antygen kardiolipina do mikroprecypitacji

2. diagnostyka

4. ekstrakcja frakcji lipidowych z serca zdrowego byka

5. Aby wykryć specyficzne przeciwciała w surowicy krwi

Ultrasonizowany antygen krętkowy

2. diagnostyka

4. z martwych ex. syfilis

5. Aby wykryć specyficzne przeciwciała w surowicy krwi

Diagnostyka tularemii korpuskularnej

2. diagnostyka

4. pojedynczych cząstek patogenów

5. Aby wykryć specyficzne przeciwciała w surowicy krwi

Diagnostyka czerwonki

2. diagnostyka

4. zawieszenie od zabitych m \ o

5. Aby wykryć specyficzne przeciwciała w surowicy pacjenta

Diagnostyka erytrocytów od Shigella Sonne

2. diagnostyka

4. zawieszenie er. owiec, leczone toniną

5. Aby wykryć specyficzne przeciwciała w surowicy krwi

Diagnostyka z salmonelli typhimurium

2. diagnostyka

4. z martwych ex. salmonella

5. Aby wykryć specyficzne przeciwciała w surowicy krwi

Serum

Przeciwzgorzelinowa surowica końska 5000 IU

2.surowica

4. z surowicy krwi koni hiperimm. z anatoksyną zgorzeli gazowej pobudzającej

6.pozajelitowo, po teście z globuliną 1:100

normalna ludzka immunoglobulina

2.surowica

4. z surowicy krwi dawcy

5.form-e przepustka. konkretny zakupione sztuka. jestem

6. pozajelitowo

wytrącające się serum wąglikowe

2.surowica

4. z surowicy krwi hiperimmunizowanych zwierząt a\g excit.sib. wrzody

6.reakcja strącania (RP)

Surowica botulinowa typ - A 400 IU

2.surowica

5. wykryć specyficzny antygen w materiale testowym

6.reakcja neutralizacji (RN)

Globulina wąglika

2.surowica

4. z surowicy krwi zwierząt hiperimmunizowanych a\g wrzody pobudliwe

5.form-e przepustka. konkretny zakupione sztuka. jestem

6. pozajelitowo

Surowica hemolityczna

2.surowica

4. z surowicy zwierząt hiperimmunizowanych erytrocytami zwierząt innego gatunku

5. wykryć specyficzny antygen w materiale testowym

Serum aglutynujące cholerę Ogawa

2.surowica

4. z surowicy krwi zwierząt hiperimmunizowanych

5. wykryć specyficzny antygen w materiale testowym

Świetlna surowica tularemii

2.surowica

4. z surowicy krwi hiperimmunizowanych zwierząt a\g pobudliwy tular.

5. wykryć specyficzny antygen w materiale testowym

Immunoglobulina przeciwko kleszczowemu zapaleniu mózgu u ludzi

2.surowica

4. z surowicy krwi dawcy

5.form-e przepustka. konkretny zakupione sztuka. jestem

6. pozajelitowo

Surowica diagnostyczna ESNO

2.surowica

4. z surowicy krwi zwierząt hiperimmunizowanych wirusami ESNO

5. wykryć specyficzny antygen w materiale testowym

Ludzka immunoglobulina przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu B

2.surowica

4. z surowicy krwi dawcy zaszczepionego przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu B

5.form-e przepustka. konkretny zakupione sztuka. jestem

6. pozajelitowo

Surowica antyglobulinowa znakowana perkoksydazą

2.surowica

4. z surowicy krwi zwierząt hiperimmunizowanych

5. wykrycie specyficznego antygenu w badanym materiale (HIV)

Immunoglobulina przeciw wściekliźnie

2.surowica

4. z surowicy krwi dawcy

5.form-e przepustka. konkretny zakupione sztuka. jestem