La composizione del liquido cerebrospinale in varie nosologie. Come viene eseguita l'analisi del liquido cerebrospinale e quali malattie può rivelare? La natura del liquido cerebrospinale nell'infezione meningococcica

La rassegna presenta i cambiamenti nei parametri di laboratorio del liquido cerebrospinale nelle principali malattie gravi del sistema nervoso centrale.

MENINGITE

Lo studio del liquido cerebrospinale è l'unico metodo che consente di diagnosticare rapidamente la meningite. L'assenza di alterazioni infiammatorie nel liquido cerebrospinale consente sempre di escludere la diagnosi di meningite. La diagnosi eziologica della meningite viene stabilita utilizzando metodi batterioscopici e batteriologici, studi virologici e sierologici.

La pleocitosi è una caratteristica delle alterazioni del liquido cerebrospinale. In base al numero di cellule si distingue la meningite sierosa e purulenta. Con la meningite sierosa, la citosi è 500-600 in 1 ml, con la meningite purulenta - più di 600 in 1 ml. Lo studio deve essere effettuato entro e non oltre 1 ora dal suo ricevimento.

Secondo la struttura eziologica, l'80-90% dei casi confermati batteriologicamente sono Neisseria meningitides, Streptococcus pneumoniae e Haemophilus. La batterioscopia del liquido cerebrospinale, a causa della caratteristica morfologia di meningococchi e pneumococchi, dà un risultato positivo alla prima puntura lombare 1,5 volte più spesso rispetto alla crescita della coltura.

Il liquido cerebrospinale nella meningite purulenta varia da leggermente velato, come se sbiancato con il latte, a densamente verde, purulento, a volte xantocromico. Nella fase iniziale dello sviluppo della meningite meningococcica, c'è un aumento della pressione intracranica, quindi si nota una lieve citosi neutrofila nel liquido cerebrospinale e nel 24,7% dei pazienti, il liquido cerebrospinale è normale nelle prime ore della malattia. Quindi, in molti pazienti, già il primo giorno della malattia, la citosi raggiunge 12.000-30.000 per 1 μl, predominano i neutrofili. Il decorso favorevole della malattia è accompagnato da una diminuzione del numero relativo di neutrofili e da un aumento dei linfociti. I casi che si verificano di meningite purulenta con un quadro clinico tipico e una citosi relativamente piccola possono essere spiegati, probabilmente, da un blocco parziale dello spazio subaracnoideo. Potrebbe non essere osservata una chiara correlazione tra la gravità della pleiocitosi e la gravità della malattia.

Il contenuto proteico nel liquido cerebrospinale con meningite purulenta è solitamente aumentato a 0,6-10 g / le diminuisce man mano che il liquido cerebrospinale viene disinfettato. La quantità di proteine e la citosi sono generalmente parallele, ma in alcuni casi, con una citosi elevata, il livello di proteine rimane normale. Un alto contenuto di proteine nel liquido cerebrospinale è più comune nelle forme gravi con sindrome da ependidimite e la sua presenza in alte concentrazioni durante il periodo di convalescenza indica una complicanza intracranica (blocco delle vie del liquido cerebrospinale, versamento durale, ascesso cerebrale). La combinazione di bassa pleiocitosi con alto contenuto proteico è un segno prognostico particolarmente scarso.

Nella maggior parte dei pazienti con meningite purulenta, sin dai primi giorni della malattia, si nota una diminuzione dei livelli di glucosio (inferiore a 3 mmol / l), in caso di morte il contenuto di glucosio era sotto forma di tracce. Nel 60% dei pazienti, il contenuto di glucosio è inferiore a 2,2 mmol / l e il rapporto tra glucosio e quello nel sangue nel 70% è inferiore a 0,31 Un aumento del glucosio è quasi sempre un segno prognosticamente favorevole.

Nella meningite tubercolare, l'esame batterioscopico del liquido cerebrospinale spesso dà un risultato negativo. I micobatteri si trovano più spesso nei nuovi casi della malattia (nell'80% dei pazienti con meningite tubercolare). Spesso c'è una mancanza di micobatteri nel puntato lombare quando si trovano nel liquido cerebrospinale cisternale. In caso di esame batterioscopico negativo o discutibile, la tubercolosi viene diagnosticata mediante coltura o test biologico. Nella meningite tubercolare, il liquido cerebrospinale è limpido, incolore o leggermente opalescente. La pleocitosi varia da 50 a 3000 in 1 µl, a seconda dello stadio della malattia, ammontando a 100-300 in 1 µl entro il 5-7° giorno di malattia. In assenza di trattamento eziotropico, il numero di cellule aumenta dall'inizio alla fine della malattia. Potrebbe esserci un improvviso calo della citosi con una seconda puntura lombare eseguita 24 ore dopo la prima. Le cellule sono prevalentemente linfociti, ma spesso all'esordio della malattia si manifesta una pleiocitosi mista linfocitica-neutrofila, considerata tipica della tubercolosi miliare con inseminazione delle meningi. Caratteristica della meningite tubercolare è la diversità della composizione cellulare, quando, insieme alla predominanza di linfociti, si trovano neutrofili, monociti, macrofagi e linfociti giganti. Successivamente, la pleocitosi acquisisce un carattere linfoplasmocitico o fagocitico. Un gran numero di monociti e macrofagi indica un decorso sfavorevole della malattia.

La proteina totale nella meningite tubercolare è sempre aumentata a 2-3 g / l e i ricercatori precedenti hanno notato che la proteina aumenta prima della comparsa della pleiocitosi e scompare dopo una diminuzione significativa, ad es., nei primi giorni della malattia, proteina-cellula avviene la dissociazione. Le moderne forme atipiche di meningite tubercolare sono caratterizzate dall'assenza della tipica dissociazione proteina-cellula.

Con la meningite tubercolare, si nota presto una diminuzione della concentrazione di glucosio a 0,83-1,67 mmol / le inferiore. In alcuni pazienti viene rilevata una diminuzione del contenuto di cloruri. Nella meningite virale, circa 2/3 dei casi sono causati dal virus della parotite e da un gruppo di enterovirus.

Nella meningite sierosa di eziologia virale, il liquido cerebrospinale è trasparente o leggermente opalescente. La pleocitosi è piccola (raramente fino a 1000) con una predominanza di linfociti. In alcuni pazienti, i neutrofili possono predominare all'esordio della malattia, caratteristica di un decorso più grave e di una prognosi meno favorevole. Proteina totale entro 0,6-1,6 g/l o normale. In alcuni pazienti viene rilevata una diminuzione della concentrazione proteica dovuta all'iperproduzione di liquido cerebrospinale.

LESIONI CRANIO-CEREBRALI CHIUSE

La permeabilità dei vasi cerebrali nel periodo acuto della lesione cerebrale traumatica è diverse volte superiore alla permeabilità dei vasi periferici e dipende direttamente dalla gravità della lesione. Per determinare la gravità della lesione nel periodo acuto, possono essere utilizzati numerosi test del liquido cerebrospinale ed ematologici. Questi includono: la gravità e la durata della presenza di iperproteinorachia come test che caratterizza la profondità dei disturbi disgemici nel cervello e la permeabilità della barriera ematoliquore; la presenza e la gravità dell'eritroarchia come test che caratterizza in modo affidabile il sanguinamento intracerebrale in corso; la presenza entro 9-12 giorni dopo la lesione di pronunciata pleiocitosi neutrofila, che è un'indicazione della non reattività dei tessuti che limitano gli spazi del liquido cerebrospinale e dell'inibizione delle proprietà igienizzanti delle cellule della membrana aracnoidea o dell'infezione.

Concussione: il liquido cerebrospinale è solitamente incolore, limpido, non contiene o contiene pochi globuli rossi. Il 1°-2° giorno dopo la lesione, la citosi è normale, il 3°-4° giorno compare una pleiocitosi moderatamente pronunciata (fino a 100 in 1 μl), che diminuisce a valori normali il 5°-7° giorno. Nel liquorogramma sono assenti i linfociti con la presenza di un piccolo numero di neutrofili e monociti, i macrofagi. Il livello proteico è normale nei giorni 1-2 dopo l'infortunio, nei giorni 3-4 sale a 0,36-0,8 g/l e torna alla normalità entro i giorni 5-7.

Contusione cerebrale: il numero di globuli rossi varia da 100 a 35.000 e con una massiccia emorragia subaracnoidea raggiunge 1-3 milioni A seconda di ciò, il colore del liquido cerebrospinale può variare da grigiastro a rosso. A causa dell'irritazione delle meningi, si sviluppa la pleiocitosi reattiva. Con lividi di gravità lieve e moderata, la pleiocitosi per 1-2 giorni è in media di 160 per 1 μl e nei casi più gravi raggiunge diverse migliaia. Nei giorni 5-10, la pleiocitosi diminuisce significativamente, ma non raggiunge la norma nei successivi 11-20 giorni. Nel liquorogamma, linfociti, spesso macrofagi con emosiderina. Se la natura della pleiocitosi cambia in neutrofila (70-100% dei neutrofili), la meningite purulenta si è sviluppata come complicanza. Il contenuto proteico di gravità lieve e moderata è in media di 1 g/l e non torna alla normalità entro 11-20 giorni. Con gravi danni cerebrali, il livello proteico può raggiungere 3-10 g / l (spesso finisce con la morte).

Con una lesione cerebrale traumatica, il metabolismo energetico del cervello passa al percorso della glicolisi anaerobica, che porta all'accumulo di acido lattico in esso e, infine, all'acidosi cerebrale.

Lo studio dei parametri che riflettono lo stato del metabolismo energetico del cervello consente di giudicare la gravità del decorso del processo patologico. Diminuzione della differenza arterovenosa di pO2 e pCO2, aumento del consumo di glucosio nel cervello, aumento della differenza venoarteriosa nell'acido lattico e suo aumento nel liquido cerebrospinale. I cambiamenti osservati sono il risultato di una violazione dell'attività di un certo numero di sistemi enzimatici e non possono essere compensati dall'afflusso di sangue. È necessario stimolare l'attività nervosa dei pazienti.

Ictus emorragico

Il colore del liquido cerebrospinale dipende dalla miscela di sangue. Nell'80-95% dei pazienti, durante le prime 24-36 ore, il liquido cerebrospinale contiene una chiara mescolanza di sangue e in un secondo momento è sanguinante o xantocromico. Tuttavia, nel 20-25% dei pazienti con piccole lesioni localizzate nelle parti profonde degli emisferi, o in caso di blocco delle vie del liquido cerebrospinale a causa di edema cerebrale a rapido sviluppo, gli eritrociti nel liquido cerebrospinale non vengono rilevati. Inoltre, gli eritrociti possono essere assenti durante una puntura lombare nelle primissime ore dopo l'inizio dell'emorragia, mentre il sangue raggiunge il livello spinale. Tali situazioni sono la ragione di errori diagnostici: la diagnosi di "ictus ischemico". La maggior quantità di sangue si trova quando il sangue irrompe nel sistema ventricolare. La rimozione del sangue dal liquido cerebrospinale inizia dal primo giorno della malattia e dura 14-20 giorni con lesioni e ictus craniocerebrali e con aneurismi cerebrali fino a 1-1,5 mesi e non dipende dall'entità dell'emorragia, ma sul processo eziologico.

Il secondo segno importante delle alterazioni del liquido cerebrospinale nell'ictus emorragico è la xantocromia, che viene rilevata nel 70-75% dei pazienti. Appare il 2° giorno e scompare 2 settimane dopo l'ictus. Con un numero molto elevato di globuli rossi, la xantocromia può comparire dopo 2-7 ore.

Nel 93,9% dei pazienti si osserva un aumento della concentrazione proteica e la sua quantità varia da 0,34 a 10 g/l e oltre. L'iperproteinorachia e l'elevato contenuto di bilirubina possono persistere a lungo e, insieme ai disturbi della liquorodinamica, possono causare sintomi meningei, in particolare mal di testa, anche 0,5-1 anno dopo l'emorragia subaracnoidea.

La pleocitosi viene rilevata in quasi 2/3 dei pazienti, ha un carattere crescente entro 4-6 giorni, il numero di cellule varia da 13 a 3000 in 1 μl. La pleocitosi è associata non solo a un'irruzione del sangue nelle vie del liquor, ma anche alla reazione delle meningi al sangue che defluisce. Sembra importante determinare la vera citosi del liquido cerebrospinale in questi casi. A volte, con le emorragie nel cervello, la citosi rimane normale, che è associata a ematomi limitati senza sfondamento nello spazio del liquor, o con la mancata reattività delle meningi.

Con le emorragie subaracnoidee, la miscela di sangue può essere così grande che il liquido cerebrospinale è visivamente quasi indistinguibile dal sangue puro. Il 1 ° giorno, il numero di eritrociti, di regola, non supera 200-500 x 109 / l, in futuro il loro numero aumenta a 700-2000 x 109 / l. Nelle primissime ore dopo lo sviluppo di piccole emorragie subaracnoidee, è possibile ottenere un liquido cerebrospinale chiaro con una puntura lombare, ma entro la fine del 1 ° giorno appare una miscela di sangue. Le ragioni dell'assenza di sangue nel liquido cerebrospinale possono essere le stesse dell'ictus emorragico. La pleocitosi, prevalentemente neutrofila, superiore a 400-800x109/l, al quinto giorno è sostituita da quella linfocitaria. Entro poche ore dall'emorragia possono comparire i macrofagi, che possono essere considerati marker di emorragia subaracnoidea. L'aumento delle proteine totali corrisponde solitamente al grado di emorragia e può raggiungere 7-11 g/l e oltre.

COLPO ISCHEMICO

Il liquido cerebrospinale è incolore, trasparente, nel 66% la citosi rimane nel range di normalità, nel resto sale a 15-50x109/l, in questi casi si rilevano caratteristici infarti cerebrali, vicini alle vie del liquido cerebrospinale. La pleocitosi, prevalentemente linfoide-neutrofilica, è dovuta a cambiamenti reattivi intorno a estesi focolai ischemici. Nella metà dei pazienti, il contenuto proteico è determinato nell'intervallo 0,34-0,82 g/l, meno spesso fino a 1 g/l. Un aumento della concentrazione proteica è dovuto alla necrosi del tessuto cerebrale, un aumento della permeabilità della barriera ematoencefalica. Il contenuto proteico può aumentare entro la fine della prima settimana dopo un ictus e durare più di 1,5 mesi. Abbastanza caratteristico dell'ictus ischemico è la dissociazione proteina-cellula (un aumento del contenuto proteico con citosi normale) o cellula-proteina.

ASCESSO DEL CERVELLO

La fase iniziale della formazione di ascessi è caratterizzata da pleiocitosi neutrofila e un leggero aumento delle proteine. Man mano che la capsula si sviluppa, la pleiocitosi diminuisce e il suo carattere neutrofilo viene sostituito da quello linfoide e maggiore è lo sviluppo della capsula, minore è la pleiocitosi. In questo contesto, l'improvvisa comparsa di una pronunciata pleiocitosi neutrofila indica una svolta dell'ascesso. Se l'ascesso si trovava vicino al sistema ventricolare o alla superficie del cervello, la citosi sarà da 100 a 400 in 3 µl. La pleocitosi minore o la citosi normale possono verificarsi quando l'ascesso è stato delimitato dal tessuto cerebrale circostante da una capsula fibrosa densa o ialinizzata. La zona di infiltrazione infiammatoria attorno all'ascesso in questo caso è assente o debolmente espressa.

TUMORI DEL SNC

Insieme alla dissociazione proteina-cellula, che è considerata caratteristica dei tumori, può verificarsi pleocitosi con un contenuto proteico normale nel liquido cerebrospinale. Con i gliomi degli emisferi cerebrali, indipendentemente dalla loro istologia e localizzazione, nel 70,3% dei casi si osserva un aumento delle proteine nel liquido cerebrospinale e nell'88% in forme immature. La composizione normale o addirittura idrocefalica del liquido ventricolare e spinale può verificarsi sia nei gliomi profondi che nei gliomi che crescono nei ventricoli. Ciò si osserva principalmente nei tumori maturi a crescita diffusa (astrocitomi, oligodendrogliomi), senza evidenti focolai di necrosi e formazione di cisti e senza grossolano spostamento del sistema ventricolare. Allo stesso tempo, gli stessi tumori, ma con un grosso spostamento dei ventricoli, sono solitamente accompagnati da un aumento della quantità di proteine nel liquido cerebrospinale. L'iperproteinorachia (da 1 g / le oltre) si osserva nei tumori situati alla base del cervello. Nei tumori dell'ipofisi, il contenuto proteico varia da 0,33 a 2,0 g/l. Il grado di spostamento del proteinogramma dipende direttamente dalla natura istologica del tumore: più il tumore è maligno, più grossolani saranno i cambiamenti nella formula proteica del liquido cerebrospinale. Compaiono beta-lipoproteine che normalmente non si trovano, il contenuto di alfa-lipoproteine diminuisce.

Nei pazienti con tumori cerebrali, indipendentemente dalla loro natura istologica e localizzazione, si verifica spesso la pleiocitosi polimorfa. La reazione cellulare è dovuta alle peculiarità dei processi biologici che si verificano nel tumore in determinate fasi del suo sviluppo (necrosi, emorragia), che determinano la reazione. Tessuti tumorali circostanti del cervello e delle membrane. Le cellule tumorali degli emisferi cerebrali nel liquido dei ventricoli si trovano nel 34,4% e nel liquido cerebrospinale spinale - dal 5,8 al 15% di tutti i casi. Il principale fattore che causa l'ingresso di cellule tumorali nel liquido cerebrospinale è la natura della struttura del tessuto tumorale (povertà dello stroma connettivo), l'assenza di una capsula e la posizione della neoplasia vicino agli spazi del liquido cerebrospinale.

MALATTIE INFIAMMATORIE CRONICHE (aracnoidite, aracnoencefalite, encefalite periventricolare)

La meningite tubercolare è più comune nei bambini e negli adolescenti che negli adulti. Di norma, è secondario, si sviluppa come complicanza della tubercolosi di un altro organo (polmoni, linfonodi bronchiali o mesenterici) con successiva disseminazione ematogena e danno alle meningi.

Quadro clinico

L'esordio della malattia è subacuto, spesso c'è un periodo prodromico con maggiore affaticamento, debolezza, mal di testa, anoressia, sudorazione, inversione del sonno, cambiamento di carattere, specialmente nei bambini - sotto forma di eccessiva permalosità, pianto, diminuzione dell'attività mentale, sonnolenza.

Temperatura corporea subfebbrile. Sullo sfondo di un mal di testa, si verifica spesso il vomito. Il periodo prodromico dura 2-3 settimane. Quindi compaiono gradualmente lievi sintomi di conchiglia (torcicollo, sintomo di Kernig, ecc.). A volte i pazienti si lamentano della visione offuscata o del suo indebolimento. Compaiono i primi segni di danno alle coppie III e V I di CN (leggero raddoppio, lieve ptosi delle palpebre superiori, strabismo). Nelle fasi successive, se la malattia non viene riconosciuta e non si inizia un trattamento specifico, possono essere associati paresi delle estremità, afasia e altri sintomi di danno cerebrale focale.

Il decorso subacuto più tipico della malattia. Allo stesso tempo, il passaggio dai fenomeni prodromici al periodo di comparsa dei gusci dei sintomi oculari avviene gradualmente, in media, entro 4-6 settimane. L'esordio acuto è meno comune (di solito nei bambini piccoli e negli adolescenti). Un decorso cronico è possibile in pazienti che sono stati precedentemente trattati con farmaci specifici per la tubercolosi degli organi interni.

Diagnostica

La diagnosi viene stabilita sulla base di una storia epidemiologica (contatto con pazienti affetti da tubercolosi), dati sulla presenza di tubercolosi degli organi interni e sviluppo di sintomi neurologici. La reazione di Mantoux non è informativa.

Lo studio del liquido cerebrospinale è decisivo. La pressione del liquido cerebrospinale è aumentata. Il liquido è limpido o leggermente opalescente. La pleiocitosi linfocitaria viene rilevata fino a 600-800x106 / l, il contenuto proteico viene aumentato a 2-5 g / l (Tabella 31-5).

Tabella 31-5. Valori del liquido cerebrospinale nella norma e nella meningite di varie eziologie

Indice	Norma	Meningite tubercolare	Meningite virale	Meningite batterica
Pressione	100-150 mm c.a., 60 gocce al minuto	Aggiornato	Aggiornato	Aggiornato
Trasparenza	trasparente	Trasparente o leggermente opalescente	trasparente	fangoso
Citosi, cellule/µl	1 -3 (fino a 10)	Fino a 100-600	400-1000 e oltre	Centinaia, migliaia
Composizione cellulare	Linfociti, monociti	Linfociti (60-80%), neutrofili, sanificazione dopo 4-7 mesi	Linfociti (70-98%), sanificazione dopo 16-28 giorni	Neutrofili (70-95%), sanificazione dopo 10-30 giorni
Contenuto di glucosio	2,2-3,9 mmol/l	Drammaticamente abbassato	Norma	Declassato
Contenuto di cloruro	122-135 mmol/l	Declassato	Norma	Declassato
Contenuto proteico	Fino a 0,2-0,5 g/l	Aumentato di 3-7 volte o più	Normale o leggermente aumentato	Aumentato di 2-3 volte
La reazione di Pandey	0	+++	0/+	+++
film di fibrina	Non	Di frequente	Raramente	Raramente
Micobatteri	Non	"+" nel 50% dei casi	Non	Non

Spesso, all'inizio della malattia, nel liquido cerebrospinale viene rilevata la pleiocitosi neutrofila e linfocitica mista. È caratteristica una diminuzione del contenuto di glucosio a 0,15-0,3 g/l e di cloruri a 5 g/l. Quando il liquido cerebrospinale estratto viene conservato in una provetta per 12-24 ore, al suo interno si forma una delicata rete fibrinosa simile a una rete (pellicola), che parte dal livello del liquido e ricorda un albero di Natale capovolto. Mycobacterium tuberculosis si trova spesso in questo film durante la batterioscopia. Nel sangue viene determinato un aumento della VES e della leucocitosi.

La diagnosi differenziale è facilitata dalla coltura e da un esame citologico dettagliato del liquido cerebrospinale. Se si sospetta clinicamente la meningite tubercolare e i dati di laboratorio non lo supportano, per motivi di salute viene prescritta una terapia antitubercolare esjuvantibus.

Trattamento

Vengono utilizzate varie combinazioni di farmaci antitubercolari. Durante i primi 2 mesi e fino a quando non viene rilevata la sensibilità agli antibiotici, vengono prescritti 4 farmaci (prima fase del trattamento): isoniazide, rifampicina, pirazinamide ed etambutolo o streptomicina. Lo schema viene corretto dopo aver determinato la sensibilità ai farmaci. Dopo 2-3 mesi di trattamento (la seconda fase del trattamento), spesso passano a 2 farmaci (di solito isoniazide e rifampicina). La durata minima del trattamento è generalmente di 6-12 mesi. Vengono utilizzate diverse combinazioni di farmaci.

Isoniazide 5-10 mg/kg, streptomicina 0,75-1 g/die per i primi 2 mesi. Con un monitoraggio costante dell'effetto tossico sull'VIII coppia di CN - etambutolo a 15-30 mg / kg al giorno. Quando si utilizza questa triade, la gravità dell'intossicazione è relativamente bassa, ma l'effetto battericida non è sempre sufficiente.

Per potenziare l'azione battericida dell'isoniazide, viene aggiunta rifampicina 600 mg 1 volta al giorno insieme a streptomicina ed etambutolo.

Per massimizzare l'effetto battericida, la pirazinamide viene utilizzata alla dose giornaliera di 20-35 mg/kg in combinazione con isoniazide e rifampicina. Tuttavia, la combinazione di questi farmaci aumenta significativamente il rischio di epatotossicità.

Viene utilizzata anche la seguente combinazione di farmaci: acido para-aminosalicilico fino a 12 g / die (0,2 g per 1 kg di peso corporeo in dosi frazionate 20-30 minuti dopo i pasti, lavato con acqua alcalina), streptomicina e ftivazide in un dose giornaliera di 40-50 mg/kg (0,5 g 3-4 volte al giorno).

Nel trattamento, i primi 60 giorni di malattia sono cruciali. Nelle fasi iniziali della malattia (entro 1-2 mesi), è consigliabile utilizzare i glucocorticoidi per via orale per prevenire la pachimeningite adesiva e le relative complicanze.

Il trattamento in ospedale dovrebbe essere lungo (circa 6 mesi), combinato con misure generali di rafforzamento, nutrizione migliorata e successiva permanenza in un sanatorio specializzato. Il paziente continua quindi ad assumere isoniazide per diversi mesi. La durata totale del trattamento è di 12-18 mesi.

Per la prevenzione delle neuropatie vengono utilizzati piridossina (25-50 mg / die), acido tioctico e multivitaminici. È necessario monitorare i pazienti per prevenire l'intossicazione da farmaci sotto forma di danno epatico, neuropatie periferiche, compreso il danno ai nervi ottici, nonché per prevenire complicazioni sotto forma di aderenze cicatriziali e idrocefalo aperto.

Previsione

Prima dell'uso di farmaci antitubercolari, la meningite si è conclusa con la morte nel 20-25esimo giorno della malattia. Attualmente, con un trattamento tempestivo ea lungo termine, si verifica un esito favorevole nel 90-95% dei pazienti. Con diagnosi tardiva (dopo il 18-20° giorno di malattia), la prognosi è infausta. A volte ci sono ricadute e complicazioni sotto forma di crisi epilettiche, idrocefalo, disturbi neuroendocrini.

Neurochirurghi, neurologi e specialisti in malattie infettive devono spesso eseguire una puntura lombare, ovvero la raccolta di liquido cerebrospinale (CSF) da un paziente. La procedura è un modo molto efficace per diagnosticare varie malattie del sistema nervoso centrale (SNC).

Nelle cliniche, vengono determinati i componenti del liquido cerebrospinale, viene eseguita la microscopia e viene prelevato il liquido cerebrospinale per i microrganismi.

Esistono ulteriori misure di ricerca, ad esempio la misurazione della pressione del liquido cerebrospinale, l'agglutinazione del lattice, il controllo del colore del supernatante. Una conoscenza approfondita di ciascuno dei test consente agli specialisti di utilizzarli come i metodi più efficaci per diagnosticare le malattie.

Perché analizzare il liquido cerebrospinale

Il liquore (CSF, liquido cerebrospinale) è una sostanza naturale necessaria per il normale funzionamento del sistema nervoso centrale. La sua analisi è la più importante tra tutte le varietà di studi di laboratorio.

L'analisi si svolge in più fasi:

Preparatorio- comprende la preparazione del paziente, il prelievo e l'invio dell'analisi al laboratorio.
Analitico- questa è la procedura per studiare il liquido.
post-analitica- è la decodifica dei dati ricevuti.

Solo specialisti esperti sono in grado di eseguire con competenza tutte le azioni di cui sopra, la qualità dell'analisi ottenuta dipende da questo.

Il liquido cerebrospinale viene prodotto in plessi speciali dai vasi sanguigni nel cervello. Negli adulti circola nello spazio subaracnoideo e nei ventricoli del cervello, da 120 a 150 ml di liquido, il valore medio nel canale lombare è di 60 mg.

Il processo della sua formazione è infinito, la velocità di produzione va da 0,3 a 0,8 ml al minuto, questo indicatore dipende direttamente dalla pressione intracranica. Durante il giorno, una persona comune produce da 400 a 1000 ml di liquido.

Solo sulle indicazioni di una puntura lombare si può fare una diagnosi, ovvero:

contenuto proteico eccessivo nel liquido cerebrospinale;
basso livello di glucosio;
determinazione del numero totale di globuli bianchi.

Dopo aver ricevuto questi indicatori e un aumento del livello di leucociti nel sangue, viene fatta una diagnosi di "meningite sierosa", se c'è un aumento del numero di leucociti neutrofili, la diagnosi cambia in "meningite purulenta". Questi dati sono molto importanti, poiché da essi dipende il trattamento della malattia nel suo insieme.

Cos'è l'analisi

Il fluido si ottiene prelevando una puntura dal midollo spinale, detto anche lombare, secondo un certo metodo, ovvero: inserire un ago molto sottile nello spazio in cui circola il liquido cerebrospinale e prelevarlo.

Le prime gocce di liquido vengono rimosse (considerato sangue "da viaggio"), ma successivamente vengono raccolte almeno 2 provette. Nel solito (chimico) quello viene raccolto per la ricerca generale e chimica, il secondo è sterile - per l'esame per la presenza di batteri.

Quando invia un paziente per l'analisi del liquido cerebrospinale, il medico deve indicare non solo il nome del paziente, ma anche la sua diagnosi clinica e lo scopo dell'esame.

Le analisi consegnate al laboratorio devono essere completamente protette dal surriscaldamento o dal raffreddamento e alcuni campioni vengono riscaldati in appositi bagni d'acqua, da 2 a 4 minuti.

Fasi di ricerca

Questo liquido viene esaminato subito dopo la sua raccolta. La ricerca in laboratorio è suddivisa in 4 fasi importanti.

Esame macroscopico

Il processo ha diversi indicatori importanti che sono necessari per determinare una diagnosi accurata.

Colore

Nel suo stato normale, questo liquido è assolutamente incolore, non può essere distinto dall'acqua. Con patologie del sistema nervoso centrale sono possibili alcuni cambiamenti nel colore del liquido cerebrospinale. Per determinare con precisione il colore, la sostanza viene confrontata in dettaglio con acqua purificata.

Una sfumatura leggermente rossa può significare che le impurità del sangue immodificato sono entrate nel liquido: l'eritrocitarchia. O è un'ingestione accidentale di un paio di gocce di sangue durante l'analisi.

Trasparenza

In una persona sana, il liquido cerebrospinale è limpido e sembra acqua. Una sostanza torbida può significare che nel corpo si stanno verificando processi patologici.

Nel caso in cui, dopo il processo di centrifugazione, il liquido nella provetta diventi trasparente, ciò significa che la consistenza torbida è dovuta ad alcuni degli elementi che compongono la composizione. Se rimane torbido - microrganismi.

Una leggera opalescenza del fluido può essere dovuta ad un aumento del contenuto di alcune proteine disperse, come il fibrinogeno.

film fibrinoso

In uno stato sano, non contiene quasi fibrinogeno. Alla sua alta concentrazione in una provetta, si forma una maglia sottile, un sacchetto o un coagulo, simile alla gelatina.

Lo strato esterno delle pieghe proteiche, risultando in una sacca con liquido. Il liquore, che contiene molte proteine, subito dopo il rilascio inizia a raggomitolarsi sotto forma di un coagulo gelatinoso.

Se il liquido cerebrospinale contiene globuli rossi, il film sopra descritto non si forma.

esame microscopico

La ricerca del numero totale di cellule nel liquido cerebrospinale deve essere eseguita immediatamente dopo l'analisi, poiché le sue cellule sono caratterizzate da una rapida distruzione.

In condizioni normali, il liquido cerebrospinale non è ricco di elementi cellulari. In 1 ml puoi trovare 0-3-6 linfociti, per questo motivo vengono contati in speciali camere ad alta capacità: Fuchs-Rosenthal.

Sotto ingrandimento nella camera di conteggio, il numero di globuli bianchi nel fluido viene calcolato dopo che tutti i globuli rossi sono stati distrutti. Il reagente di Sansone viene utilizzato nel processo.

Come si determina:

Innanzitutto il luogo CSF in vitro.
Il reagente viene inserito nel melange fino al segno di 1 Sansone.
Inoltre, fino al segno di 11, aggiungere liquore e soluzione acetico acido, che mostra una miscela di eritrociti, aggiunge la fucsina, che conferisce ai leucociti, più precisamente ai loro nuclei, un colore rosso-viola. Successivamente, viene aggiunto acido fenico per la conservazione.
Reagente e il liquido cerebrospinale è mescolato, per questo il melangeur deve essere arrotolato tra i palmi e lasciato per mezz'ora per la colorazione.
La prima goccia viene immediatamente inviata a filtraggio carta, mescolare il carem Fuchs-Rosenthal, composto da 16 quadrati grandi, ognuno dei quali è diviso in altri 16, formando così 256 quadrati.
L'ultimo passo è contare il numero totale leucociti in tutti i quadrati, il numero risultante è diviso per 3,2 - il volume della camera. Il risultato ottenuto è uguale al numero di leucociti in 1 µl di liquido cerebrospinale.

Prestazioni normali:

lombare - da 7 a 10 nella camera;
cisterna - da 0 a 2;
ventricolare - da 1 a 3.

Citosi potenziata - pleiocitosi, è un indicatore di processi infiammatori attivi che colpiscono le membrane del cervello, cioè meningite, lesioni organiche della sostanza grigia (tumori, ascessi), aracnoidite, lesioni e persino emorragie.

Nei bambini, il livello normale di citosi è più alto che negli adulti.

Passaggi dettagliati per la lettura del citogramma:

Liquido centrifuga per 10 minuti il post-sedimentario viene drenato.
sedimento pulire su un vetrino, facendolo oscillare leggermente in modo che si distribuisca uniformemente sulla superficie.
Dopo la macchia essiccato caldo tutto il giorno.
Per 5 minuti immergere in alcol metilico o 15 in etilico.
prendere soluzione di azzurro-eosina, precedentemente diluita 5 volte e macchiare lo striscio.
Applicare immersione olio per microscopia.

In una persona sana, nel liquido cerebrospinale sono presenti solo i linfociti.

Se ci sono alcune patologie, puoi trovare tutti i tipi di leucociti, macrofagi, poliblasti, cellule di tumori di nuova formazione. I macrofagi si formano dopo la perdita di sangue nel sistema nervoso centrale o dopo la decomposizione del tumore.

Analisi biochimica

Questa analisi aiuta a chiarire la causa primaria della patologia dei tessuti cerebrali, aiuta a valutare il danno causato, a regolare la sequenza del trattamento ea determinare la prognosi della malattia. Lo svantaggio principale dell'analisi è che viene eseguita solo con un intervento invasivo, ovvero effettuano una puntura per raccogliere il liquido cerebrospinale.

Allo stato normale, la composizione del liquido contiene proteine dell'albumina, mentre sono molto importanti il suo rapporto nel liquido e la percentuale nel plasma.

Questo rapporto è chiamato indice di albumina (normalmente, il suo valore non deve superare le 9 unità). Il suo aumento mostra che la barriera ematoencefalica (la barriera tra il tessuto cerebrale e il sangue) è danneggiata.

Batterioscopico e batteriologico

Questo studio del fluido implica ottenerlo perforando il canale spinale. Sotto ingrandimento, viene considerata la sostanza o il sedimento ottenuto, che si ottiene dopo la centrifugazione.

Dal materiale finale, gli assistenti di laboratorio ricevono delle sbavature, che studiano dopo averle ridipinte. Non importa se nel liquido cerebrospinale si trovano o meno microrganismi, lo studio sarà sicuramente condotto.

La nomina dell'analisi viene eseguita dal medico necessario in varie situazioni, se si sospetta una forma infettiva di meningite, al fine di stabilire il tipo di irritante. La malattia può anche essere causata da flora insolita, possibilmente streptococchi, il meningococco è un agente causale comune della malattia, così come il bacillo tubercolare.

Poche settimane prima dell'inizio della meningite, i pazienti notano molto spesso la comparsa di tosse, febbre temporanea e naso che cola. Lo sviluppo della malattia può essere indicato da un'emicrania costante di natura esplosiva, che non risponde agli antidolorifici medicinali. In questo caso, la temperatura corporea può salire a livelli elevati.

Con il meningococco, si forma un'eruzione cutanea sulla superficie del corpo, il più delle volte sulle gambe. Tuttavia i pazienti spesso si lamentano di una percezione negativa della luce intensa. I muscoli del collo diventano più rigidi, di conseguenza, una persona non è in grado di toccare il petto con il mento.

La meningite richiede il ricovero urgente con successivo esame e trattamento urgente in ospedale.

Decifrare gli indicatori del liquido cerebrospinale

Il colore alterato di diverse intensità può essere dovuto alla miscelazione degli eritrociti, che compaiono con recenti lesioni cerebrali o perdita di sangue. Visivamente, la presenza di globuli rossi può essere vista quando il loro numero è superiore a 600 per µl.

Con una varietà di disturbi, processi infiammatori che si verificano nel corpo, il liquido cerebrospinale può diventare xantocromico, cioè avere un colore giallo o brunastro a causa dei prodotti di degradazione dell'emoglobina. Non dobbiamo dimenticare la falsa xantocromia: il liquido cerebrospinale è macchiato a causa dei farmaci.

Nella pratica medica c'è anche una tinta verde, ma solo in rari casi di meningite purulenta o ascesso cerebrale. In letteratura, il colore marrone è descritto come una svolta di una cisti craniofaringnoma nella via del liquido cerebrospinale.

La torbidità del liquido può indicare la presenza di microrganismi o globuli in esso contenuti. Nel primo caso, la torbidità può essere rimossa mediante centrifugazione.

Lo studio della composizione del QCS è un compito particolarmente importante, che comprende un gran numero di diverse manipolazioni, test e calcoli, mentre è necessario prestare attenzione a molti altri indicatori.

Dopo la procedura, al paziente viene prescritto il riposo a letto per un giorno. Nei giorni successivi potrebbe lamentarsi di emicrania. Ciò è dovuto al sovraccarico delle meningi dovuto alla raccolta di liquidi durante la procedura.

Introduzione………………………………………………………………………………..3

Metodi di laboratorio per lo studio del liquido cerebrospinale…………………………………….3

Fisiologia del liquido cerebrospinale…………………………………………………………………..3
Composizione e funzioni del liquido cerebrospinale……………………………………………………………3
Fase preanalitica………………………………………………………….7
Metodi di ricerca di laboratorio del liquido cerebrospinale……………………………..9
1. Esame macroscopico del liquido cerebrospinale……………………………………………………………...9
  Esame microscopico del liquido cerebrospinale……………………………………….10
  Studio clinico generale del liquido cerebrospinale………………………………………...15
  Studio biochimico del liquido cerebrospinale…………………………………………22

Conclusione……………………………………………………………………………..31

INTRODUZIONE

La ricerca sul liquido cerebrospinale è parte integrante della diagnosi delle malattie che colpiscono il sistema nervoso centrale. Il liquido cerebrospinale è una continuazione diretta dello spazio extracellulare e pericapillare del tessuto nervoso, quindi risponde immediatamente a qualsiasi cambiamento avvenuto nel cervello. Secondo i parametri fisico-chimici e la composizione cellulare del liquido cerebrospinale, si può giudicare la natura della patologia, il suo stadio e controllare il corso del trattamento. Con le infezioni virali del sistema nervoso centrale, gli antigeni dell'agente patogeno vengono rilevati nel liquido cerebrospinale, con metodi microscopici batterici, vengono rilevati corpi microbici, batteriologici: vengono determinati il tipo di batteri e la loro sensibilità agli antibiotici.

Le moderne possibilità di diagnostica di laboratorio hanno notevolmente ampliato la quantità di informazioni che possono essere ottenute a seguito della puntura lombare. Creazione di metodi altamente sensibili

METODI DI LABORATORIO PER LO STUDIO CSF

Fisiologia del liquido cerebrospinale

Il liquore (liquido cerebrospinale) è un fluido biologico che lava le strutture del sistema nervoso centrale. La sua sintesi avviene nei plessi vascolari venosi dei ventricoli laterali del cervello, da dove, attraverso il forame interventricolare, il fluido entra nel terzo ventricolo cerebrale. Quest'ultimo attraverso l'acquedotto silviano comunica con il IV ventricolo, dal quale, attraverso le aperture mediane e laterali, il liquido cerebrospinale passa nello spazio subaracnoideo del midollo spinale e del cervello. Una piccola parte del fluido penetra anche nello spazio subdurale.

Figura 1 - Schema delle principali vie di formazione del liquido cerebrospinale.

La formazione di liquido cerebrospinale nei ventricoli laterali avviene in modo abbastanza intenso, a causa della quale viene creata una pressione sufficiente nella loro cavità per dare al flusso del fluido una direzione caudale. Tuttavia, il liquido cerebrospinale non può essere equiparato al filtrato di plasma sanguigno, poiché è mescolato con il liquido extracellulare del tessuto nervoso che entra attraverso l'ependima dei ventricoli. In una certa misura, si verifica anche il processo inverso: il flusso del liquido cerebrospinale attraverso l'ependima ai neurociti e alle cellule gliali.

I moderni metodi di ricerca sui radioisotopi hanno permesso di stabilire che il liquido cerebrospinale lascia la cavità dei ventricoli entro pochi minuti ed entra nello spazio subaracnoideo dalle cisterne della base del cervello entro 4-8 ore. Circa 500 ml di liquido cerebrospinale vengono secreti al giorno in un adulto, la sua quantità nelle vie del liquido cerebrospinale è di 125-150 ml (10-14% della massa cerebrale). Nei ventricoli laterali ci sono 10-15 ml di liquido ciascuno, in III e IV un totale di circa 5 ml, nello spazio cranico subaracnoideo - 30 ml, nello spazio spinale - 70-80 ml. Durante il giorno, il liquido cerebrospinale viene sostituito fino a 3-4 volte negli adulti e fino a 8 volte nei bambini.

La circolazione del liquido cerebrospinale nello spazio subaracnoideo avviene attraverso il sistema dei canali del liquido cerebrospinale e delle cellule subaracnoidee. Il flusso del fluido viene accelerato modificando la posizione del corpo nello spazio e sotto l'influenza delle contrazioni muscolari. Ad oggi, si ritiene che il liquido cerebrospinale situato nella regione lombare si muova cranialmente per un'ora, è possibile che la circolazione avvenga in entrambe le direzioni contemporaneamente.

Il deflusso del liquido cerebrospinale del 30-40% avviene attraverso le granulazioni pachiniche della membrana aracnoidea nel seno sagittale superiore, che fa parte del sistema venoso della dura madre. Appaiono in una persona all'età di 1,5 anni, crescendo sulla superficie esterna della membrana aracnoidea lungo i grandi seni e vene. Le granulazioni sono dirette verso la dura madre e non entrano in contatto con la sostanza del cervello. Il liquore si accumula nel seno sagittale superiore, creando una pressione di 15-50 mm Hg al suo interno. superiore al venoso, a causa del quale vi è una transizione di liquido dal liquido cerebrospinale al sistema circolatorio.

Figura 2 - Schema del rapporto tra le meningi del cervello e le granulazioni della membrana aracnoidea (granulazioni pachiniche).

1 - dura madre; 2 - spazio subdurale; 3 - aracnoide; 4 - spazio subaracnoideo; 5 - granulazione dell'aracnoide; 6 - seno sagittale superiore; 7 - spazio laterale; 8 - coroide.

Il deflusso del liquido cerebrospinale avviene anche attraverso i canali del liquido cerebrospinale nello spazio subdurale, da cui entra nei capillari sanguigni della dura madre e passa nel sistema venoso. Inoltre, entra parzialmente nel sistema linfatico attraverso gli spazi perineurali dei nervi cranici (5-30%), viene assorbito dall'ependima dei ventricoli (10%) ed entra nel parenchima cerebrale.

Composizione e funzioni del liquore

La composizione del liquido cerebrospinale è simile al plasma sanguigno ed è composta per il 90% da acqua e per il 10% da solidi. Contiene aminoacidi (20-25), proteine (circa 14 frazioni), enzimi coinvolti nel metabolismo del sistema nervoso, zucchero, colesterolo, acido lattico e circa 15 oligoelementi. I neurotrasmettitori sono determinati nel liquido cerebrospinale: acetilcolina, norepinefrina, dopamina, serotonina; ormoni - melatonina, endofine, encefaline, chinine.

Funzioni del liquore:

Protezione meccanica delle strutture del sistema nervoso centrale;

Escretore: i prodotti metabolici vengono rimossi con il liquido;

Trasporto - il liquore serve a trasferire metaboliti, sostanze biologicamente attive, mediatori, ormoni;

Respiratorio: fornisce ossigeno alle meningi e al tessuto nervoso;

Omeostasi: mantiene un ambiente stabile del cervello, livella cambiamenti a breve termine nella composizione del sangue, mantiene il pH a un certo livello, la pressione osmotica nelle cellule cerebrali, garantisce la normale eccitabilità del sistema nervoso centrale, crea pressione intracranica;

Immune: partecipa alla creazione di una specifica barriera immunobiologica del sistema nervoso centrale.

Infine, le funzioni del liquore non sono state studiate fino ad oggi, quindi il lavoro di ricerca scientifica sul suo studio continua.

Fase preanalitica

Per la prima volta, Quincke ricevette liquido cerebrospinale per la ricerca nel 1891, dopodiché la sua tecnica divenne ampiamente utilizzata. Un'analisi clinica generale del liquido cerebrospinale viene eseguita entro 3 ore dalla raccolta del materiale, pertanto l'analisi di tutto viene eseguita con urgenza. Per ottenere il liquido cerebrospinale, nella maggior parte dei casi, viene utilizzata una puntura lombare, raramente - suboccipitale, intraoperatoria - ventricolare.

La puntura lombare viene eseguita da un neurologo/anestesista-rianimatore in una sala di trattamento, spogliatoio o sala operatoria. Il paziente è disteso su un fianco con le ginocchia portate al torace, dopodiché un ago viene inserito nello spazio tra la 4a e la 5a vertebra lombare nello spazio subaracnoideo. Le prime cinque gocce di liquido cerebrospinale vengono rimosse, poiché contengono sangue in movimento proveniente dai vasi sanguigni danneggiati durante la manipolazione. Il liquido viene raccolto in 2 provette sterili: una viene inviata per studi biochimici e citologici, l'altra viene utilizzata per rilevare un film fibroso o un coagulo. Se è necessaria una coltura batteriologica, la 3a provetta viene riempita con liquido cerebrospinale. Senza rischi per la salute, 8-10 ml di liquido cerebrospinale possono essere prelevati da un adulto, 5-7 ml da bambini e 2-3 ml da neonati.

Non puoi scuotere il biomateriale risultante, esporlo a sbalzi di temperatura, poiché questa creatura cambia le sue prestazioni. Tutte le provette sono etichettate prima dell'inizio dello studio, numerate, dopo il riempimento vengono sigillate ermeticamente e inviate immediatamente al laboratorio. La direzione dovrebbe includere:

Cognome, nome, patronimico del paziente, sua età;

Reparto, reparto, numero di anamnesi;

Data, ora e luogo della foratura;

Scopo dello studio;

Diagnosi probabile o clinica;

Dati del medico che ha inviato il materiale per lo studio.

2.4 Metodi di ricerca di laboratorio del liquido cerebrospinale

2.4.1. Esame macroscopico

L'esame macroscopico è tutte le informazioni sul biomateriale che l'assistente di laboratorio può ottenere con l'aiuto dei sensi.

Colore - Normalmente, il liquido cerebrospinale è incolore e non differisce nell'aspetto dall'acqua. Il suo colore si determina confrontando la provetta con il materiale con la stessa provetta riempita d'acqua su fondo bianco. Può cambiare in vari processi patologici:

rosso - una miscela di eritrociti immodificati (eritrocititarchia). Può essere determinato utilizzando le strisce reattive (HemoFAN), che hanno 2 scale di confronto: una cambia colore in presenza di eritrociti intatti, l'altra in presenza di emoglobina libera nel liquido cerebrospinale;

il colore xantocromico (giallo, giallo-marrone, rosa, marrone) si presenta in presenza di ossiemoglobina, metaemoglobina e bilirubina;

il colore rosa del liquido cerebrospinale è dato dall'ossiemoglobina rilasciata dagli eritrociti lisati;

Il colore giallo è dovuto all'alto contenuto di bilirubina, che è formata dall'emoglobina. Per determinare la bilirubinarchia e la sua gravità vengono utilizzate strisce reattive (IctoFAN), la cui zona reagente cambia colore da rosa pallido a rosa intenso, a seconda della concentrazione di bilirubina;

Il colore bruno del liquido cerebrospinale è dato dalla metaemoglobina e dal metalbumino, compaiono in presenza di ematomi incapsulati ed emorragie nel sistema nervoso centrale;

il colore verde si verifica con una grave bilirubinarchia, poiché vi è una transizione dalla bilirubina alla biliverdina, un pigmento color oliva. A volte è dovuto a una miscela di pus.

Trasparenza: il normale liquido cerebrospinale è trasparente, questo parametro è determinato confrontando il materiale ottenuto con acqua distillata. Si osserva una leggera torbidità del liquido cerebrospinale con leucocitosi superiore a 200x10 6 / l, il contenuto di eritrociti è superiore a 400x10 6 / l, la proteina totale è superiore a 3 g / l. Se, dopo la centrifugazione, il liquido cerebrospinale diventa trasparente, la sua torbidità è dovuta agli elementi formati, se rimane torbido, ai microrganismi. L'opalescenza del liquido cerebrospinale si verifica ad alta concentrazione di fibrinogeno.

Film fibrinoso - normale nel liquido cerebrospinale è un basso contenuto di fibrina e il film non si forma durante la sedimentazione. Un alto contenuto di fibrina crea una rete o una pellicola delicata sulle pareti della provetta, un sacchetto o un coagulo gelatinoso. Il liquore, contenente una grande quantità di proteine grossolane, coagula immediatamente dopo il rilascio sotto forma di un coagulo gelatinoso.

2.4.2. Esame microscopico del liquido cerebrospinale

Questa è una delle fasi più critiche nello studio del liquido cerebrospinale, sulla base dei dati di cui le diagnosi sono spesso confermate o confutate.

Il conteggio del numero di elementi formati viene effettuato entro 30 minuti dall'estrazione del liquido cerebrospinale, seguito dalla differenziazione cellulare. Per contare leucociti la preparazione viene colorata con uno dei seguenti reagenti:

5 ml di soluzione al 10% di acido acetico glaciale + 0,1 viola di metile + acqua fino a 50 ml - tempo di colorazione 2 minuti;
Reagente di Sansone: 2,5 ml di soluzione alcolica di fucsina 1:10 + 30 ml di acido acetico + 2 g di acido fenico + acqua distillata fino a 100 ml, tempo di colorazione 10-15 minuti.

La preparazione colorata viene posta in una camera Fuchs-Rosenthal da 3,2 µl. I leucociti vengono contati a basso ingrandimento in tutti i 256 quadrati, con pleocitosi alta 200-1000x10 6 /l, viene contata metà della griglia e il risultato viene moltiplicato per 2, con pleocitosi superiore a 1000x10 6 /l, viene contata una riga di quadrati grandi e il risultato viene moltiplicato per 4. I valori di citosi normali sono indicati nella tabella 1, per vari tipi di patologia - nella tabella 2.

Tabella 1

Citosi nel liquido cerebrospinale lombare

Tavolo 2

Pleocitosi in varie malattie

Quantità eritrociti nel liquido cerebrospinale vengono contati nella camera di conteggio di Goryaev. Per fare ciò, il liquido cerebrospinale mescolato al sangue viene diluito 10 volte: 9 parti di soluzione isotonica di cloruro di sodio e 1 parte di liquido cerebrospinale vengono mescolate in una provetta. Il liquido risultante viene accuratamente miscelato, la camera di conteggio di Goryaev viene riempita e, secondo le regole per il conteggio del numero di globuli rossi, viene determinato il numero di globuli rossi in cinque grandi quadrati. Il numero di eritrociti in 1 ml di liquido cerebrospinale è determinato dalla formula:

dove A è il numero di eritrociti in 5 quadrati grandi (80 piccoli), 1/400 è il volume di un quadratino, 10 è la diluizione del liquido cerebrospinale, 80 è il numero di quadratini.

Quando si contano nella camera di Fuchs-Rosenthal, le strutture del nucleo e del citoplasma sono visibili in elementi cellulari e uniformi colorati di magenta, che ne consentono la differenziazione. Sono valutati con un ingrandimento di 7x40. La registrazione dei risultati del conteggio può avere un'espressione percentuale o numerica (liquorogramma). Tenendo conto che gli elementi uniformi e cellulari possono subire alterazioni degenerative, con una lunga permanenza nel liquido cerebrospinale, è necessario valutare e contare gli elementi uniformi e cellulari nelle preparazioni colorate.

Le cellule del liquido cerebrospinale hanno un'affinità per i coloranti completamente diversa rispetto alle cellule del sangue, quindi la selezione dei coloranti dovrebbe essere diversa. Buoni risultati si ottengono con i seguenti tipi di preparazioni coloranti:

La colorazione secondo Rosina. Il liquido cerebrospinale viene centrifugato per 7-10 minuti. Il liquido supernatante viene drenato, il precipitato viene posto su un bicchiere sgrassato, viene distribuito sulla superficie del vetro agitando leggermente e dopo 1-2 minuti il liquido viene drenato. Il vetro viene posto in posizione verticale ed essiccato in forno a una temperatura di 40-50 ° C, dopodiché viene fissato per 1-2 minuti con metanolo e colorato secondo Romanovsky: i preparati vengono colorati per 6-12 minuti, a seconda dello spessore della macchia. Il preparato viene lavato con acqua distillata e asciugato. Se i nuclei sono blu pallido, lo striscio viene colorato per altri 2-3 minuti.

Colorare secondo Vozna. Il precipitato ottenuto dalla centrifugazione viene versato sul bicchiere, agitandolo leggermente, distribuito uniformemente sulla superficie. Asciugare a temperatura ambiente per 24 ore, fissare con alcool metilico per 5 minuti. Quindi colorare con una soluzione di eosina azzurra (la stessa della colorazione del sangue, ma diluita 5 volte) per 1 ora.Se le cellule sono macchiate pallido, colorare con colorante non diluito sotto controllo al microscopio per 2-10 minuti. Gli elementi più formati nel liquido cerebrospinale, specialmente in presenza di sangue, più lungo è il colore.

Colorare secondo Alekseev. 6-10 gocce di colorante Romanovsky-Giemsa vengono applicate su una preparazione essiccata, ma non fissa, distribuite accuratamente con la stessa pipetta sull'intera preparazione e lasciate per 30 secondi. Quindi, senza drenare la vernice, vengono aggiunte 12–20 gocce di acqua distillata, preriscaldate a una temperatura di 50–60 ° C, in un rapporto di 1: 2. La vernice viene miscelata con acqua agitando la preparazione e lasciata per 3 minuti. Lavare il colorante con un getto di acqua distillata, asciugare la preparazione con carta da filtro e microscopio. Il metodo è adatto per l'esame citologico urgente.

I valori normali del contenuto di elementi cellulari nel liquido cerebrospinale sono presentati nella Tabella 3.

Tabella 3

Tecnologia di citocentrifugazione (cytospin). La preparazione di preparati colorati di liquido cerebrospinale dal liquido sedimentario dopo la centrifugazione non sempre consente di ottenere uno strato sottile di cellule adatto per la diagnosi. Per risolvere questo problema è stata sviluppata una tecnologia di citocentrifugazione, che consiste nella produzione hardware di preparati di alta qualità. Per fare ciò, il liquido cerebrospinale ottenuto viene preparato per la ricerca e collocato in una citocamera, dopodiché viene dosato su vetrini posizionati verticalmente nel rotore della citocentrifuga. Sotto l'azione della forza centrifuga, le cellule vengono distribuite uniformemente sul vetro, mentre il liquido più leggero viene rimosso dalla superficie del preparato. Anche l'essiccazione, la fissazione e la colorazione del preparato vengono eseguite in una citocentrifuga. Il dispositivo consente di creare fino a 8 zone diagnostiche su una diapositiva.

cellule atipiche – più spesso sono celle di tumori del sistema nervoso centrale o le sue membrane. Possono anche verificarsi in un processo infiammatorio cronico (meningite tubercolare, meningoencefalite, sclerosi multipla, encefalomielite) - queste sono cellule dell'ependima dei ventricoli della membrana aracnoidea, nonché linfociti, monociti e plasmociti con cambiamenti nel nucleo e nel citoplasma .

Cellule alterate e ombre cellulari trovato durante la permanenza prolungata nel QCS. Molto spesso, i granulociti neutrofili, le cellule aracnoidi e gli ependimi ventricolari subiscono l'autolisi. Le celle alterate e le ombre delle celle non hanno valore diagnostico.

cristalli nel liquore si trovano raramente. Il 4-5 ° giorno dopo un'emorragia subaracnoidea, una lesione craniocerebrale, si trovano cristalli di emosiderina, in caso di collasso del tumore, si possono trovare cristalli di ematoidina, colesterolo, bilirubina nel contenuto della cisti, così come cristalli di colesterolo si formano nei fuochi della degenerazione grassa, nella necrosi del tessuto cerebrale e nelle cisti cerebrali. Per rilevare i cristalli nel liquido cerebrospinale, vengono utilizzate le reazioni presentate nella Tabella 4.

Tabella 4

Reazioni utilizzate per rilevare i cristalli nel liquido cerebrospinale

Elementi di Echinococco – ganci, scolex e frammenti della membrana chitinosa della vescica dell'echinococco possono essere rilevati nell'echinococcosi multipla delle meningi. Sono estremamente rari da trovare.