Composizione del liquido cerebrospinale in varie nosologie. Come viene eseguita l'analisi del liquido cerebrospinale e quali malattie può rilevare? La natura del liquido cerebrospinale nell'infezione da meningococco

La revisione presenta i cambiamenti nei parametri di laboratorio del liquido cerebrospinale nelle principali malattie gravi del sistema nervoso centrale.

MENINGITE

L’esame del liquido cerebrospinale è l’unico metodo in grado di diagnosticare rapidamente la meningite. L'assenza di alterazioni infiammatorie nel liquido cerebrospinale consente sempre di escludere la diagnosi di meningite. La diagnosi eziologica della meningite viene stabilita utilizzando metodi batterioscopici e batteriologici, studi virologici e sierologici.

La pleocitosi è la caratteristica più caratteristica dei cambiamenti del liquido cerebrospinale. In base al numero di cellule si distingue la meningite sierosa e quella purulenta. Con la meningite sierosa, la citosi è 500-600 in 1 μl, con meningite purulenta - più di 600 in 1 μl. Lo studio deve essere effettuato entro e non oltre 1 ora dal ricevimento.

Secondo la struttura eziologica, l'80-90% dei casi confermati batteriologicamente sono Neisseria meningitides, Streptococcus pneumoniae e Haemophilus. La batterioscopia del liquido cerebrospinale, a causa della morfologia caratteristica dei meningococchi e dei pneumococchi, dà un risultato positivo alla prima puntura lombare 1,5 volte più spesso della crescita della coltura.

Il liquido cerebrospinale con meningite purulenta varia da leggermente torbido, come se fosse sbiancato con il latte, a densamente verde, purulento, talvolta xantocromico. Nella fase iniziale di sviluppo della meningite meningococcica, si osserva un aumento della pressione intracranica, quindi si nota una lieve citosi neutrofila nel liquido cerebrospinale e nel 24,7% dei pazienti il liquido cerebrospinale è normale nelle prime ore della malattia. Quindi, in molti pazienti, già dal primo giorno di malattia, la citosi raggiunge 12.000-30.000 in 1 μl, predominano i neutrofili. Un decorso favorevole della malattia è accompagnato da una diminuzione del numero relativo di neutrofili e da un aumento dei linfociti. I casi ricorrenti di meningite purulenta con quadro clinico tipico e citosi relativamente ridotta possono probabilmente essere spiegati da un blocco parziale dello spazio subaracnoideo. Potrebbe non esserci una chiara correlazione tra la gravità della pleocitosi e la gravità della malattia.

Il contenuto proteico nel liquido cerebrospinale durante la meningite purulenta aumenta solitamente fino a 0,6-10 g/l e diminuisce quando il liquido cerebrospinale viene disinfettato. La quantità di proteine e la citosi sono generalmente parallele, ma in alcuni casi con citosi elevata il livello proteico rimane normale. Un elevato contenuto proteico nel liquido cerebrospinale è più comune nelle forme gravi con sindrome da ependimite e la sua presenza in alte concentrazioni durante il periodo di recupero indica una complicanza intracranica (blocco del tratto del liquido cerebrospinale, versamento durale, ascesso cerebrale). La combinazione di una bassa pleocitosi con un alto contenuto proteico è un segno prognostico particolarmente sfavorevole.

Nella maggior parte dei pazienti affetti da meningite purulenta, fin dai primi giorni di malattia si osserva una diminuzione dei livelli di glucosio (sotto i 3 mmol/l); in caso di morte, il livello di glucosio era sotto forma di tracce. Nel 60% dei pazienti il livello di glucosio è inferiore a 2,2 mmol/l e il rapporto tra livello di glucosio e valore nel sangue nel 70% è inferiore a 0,31.Un aumento del livello di glucosio è quasi sempre un segno prognostico favorevole.

Nella meningite tubercolare, l'esame batterioscopico del liquido cerebrospinale dà spesso un risultato negativo. I micobatteri si riscontrano più spesso nei casi freschi della malattia (nell'80% dei pazienti con meningite tubercolare). L'assenza di micobatteri nel punto lombare viene spesso notata quando vengono rilevati nel liquido cerebrospinale cisternale. In caso di esame batterioscopico negativo o dubbio, la tubercolosi viene diagnosticata mediante coltura o test biologico. Nella meningite tubercolare, il liquido cerebrospinale è limpido, incolore o leggermente opalescente. La pleocitosi varia da 50 a 3000 in 1 μl, a seconda dello stadio della malattia, arrivando a 100-300 in 1 μl entro il 5-7° giorno di malattia. In assenza di trattamento etiotropico, il numero di cellule aumenta dall'inizio alla fine della malattia. Potrebbe verificarsi un improvviso calo della citosi con una ripetizione della puntura lombare eseguita 24 ore dopo la prima. Le cellule sono prevalentemente linfociti, ma spesso all'esordio della malattia si verifica una pleiocitosi mista linfocitico-neutrofila, considerata tipica della tubercolosi miliare con semina delle meningi. Caratteristica della meningite tubercolare è la diversità della composizione cellulare, quando, insieme alla predominanza dei linfociti, sono presenti neutrofili, monociti, macrofagi e linfociti giganti. Successivamente, la pleocitosi acquisisce un carattere linfoplasmacitico o fagocitico. Un gran numero di monociti e macrofagi indica un decorso sfavorevole della malattia.

Le proteine totali nella meningite tubercolare aumentano sempre fino a 2-3 g/l, e i primi ricercatori avevano notato che le proteine aumentano prima dell'inizio della pleocitosi e scompaiono dopo una significativa diminuzione, cioè nei primi giorni della malattia, avviene la dissociazione proteina-cellula. posto. Le moderne forme atipiche di meningite tubercolare sono caratterizzate dall'assenza della tipica dissociazione delle cellule proteiche.

Nella meningite tubercolare si osserva una diminuzione precoce della concentrazione di glucosio fino a 0,83-1,67 mmol/le inferiore. In alcuni pazienti viene rilevata una diminuzione dei livelli di cloruro. Nella meningite virale, circa 2/3 dei casi sono causati dal virus della parotite e da un gruppo di enterovirus.

Nella meningite sierosa ad eziologia virale, il liquido cerebrospinale è trasparente o leggermente opalescente. La pleocitosi è piccola (raramente fino a 1000) con predominanza di linfociti. In alcuni pazienti, all'esordio della malattia, i neutrofili possono prevalere, caratteristica tipica di un decorso più grave e di una prognosi meno favorevole. Le proteine totali sono comprese tra 0,6 e 1,6 g/l o normali. In alcuni pazienti viene rilevata una diminuzione della concentrazione proteica a causa della sovrapproduzione di liquido cerebrospinale.

LESIONE DEL CRANIO CERVELLO CHIUSO

La permeabilità dei vasi cerebrali nel periodo acuto della lesione cerebrale traumatica è molte volte superiore alla permeabilità dei vasi periferici e dipende direttamente dalla gravità della lesione. Per determinare la gravità della lesione nel periodo acuto, è possibile utilizzare numerosi test liquorologici ed ematologici. Questi includono: la gravità e la durata della presenza di iperproteinorachia come test che caratterizza la profondità dei disturbi disgemici nel cervello e la permeabilità della barriera sangue-liquido cerebrospinale; la presenza e la gravità dell'eritroarchia come test che caratterizza in modo affidabile il sanguinamento intracerebrale in corso; la presenza di pronunciata pleiocitosi neutrofila entro 9-12 giorni dall'infortunio, che serve come indicazione della non reattività dei tessuti che limitano gli spazi del liquido cerebrospinale e dell'inibizione delle proprietà disinfettanti delle cellule aracnoidi o dell'aggiunta di un'infezione.

Commozione cerebrale: il liquido cerebrospinale è solitamente incolore, limpido e contiene pochi o nessun globulo rosso. Nei giorni 1-2 dopo l'infortunio, la citosi è normale; nei giorni 3-4 appare una pleocitosi moderatamente pronunciata (fino a 100 in 1 µl), che diminuisce a valori normali nei giorni 5-7. Nel liquorogramma, i linfociti con la presenza di un piccolo numero di neutrofili e monociti, i macrofagi, di regola, sono assenti. Il livello proteico nei giorni 1-2 dopo l'infortunio è normale, nei giorni 3-4 aumenta a 0,36-0,8 g/l e ritorna normale entro i giorni 5-7.

Contusione cerebrale: il numero dei globuli rossi varia da 100 a 35.000 e in caso di emorragia subaracnoidea massiccia raggiunge 1-3 milioni, a seconda di ciò il colore del liquido cerebrospinale può variare dal grigiastro al rosso. A causa dell'irritazione delle meningi, si sviluppa la pleocitosi reattiva. Per i lividi di gravità lieve e moderata, la pleocitosi nei giorni 1-2 è in media 160 in 1 μl e nei casi più gravi raggiunge diverse migliaia. Nei giorni 5-10, la pleocitosi diminuisce significativamente, ma non raggiunge la normalità nei successivi 11-20 giorni. Nel liquido cerebrospinale ci sono linfociti, spesso macrofagi con emosiderina. Se la natura della pleocitosi cambia in neutrofila (70-100% di neutrofili), la meningite purulenta si è sviluppata come complicazione. Il contenuto proteico nei casi da lievi a moderati è in media di 1 g/l e non ritorna normale entro 11-20 giorni. In caso di gravi danni cerebrali, i livelli proteici possono raggiungere 3-10 g/l (spesso fatale).

Con una lesione cerebrale traumatica, il metabolismo energetico del cervello passa al percorso della glicolisi anaerobica, che porta all'accumulo di acido lattico in esso e, in definitiva, all'acidosi cerebrale.

Lo studio dei parametri che riflettono lo stato del metabolismo energetico cerebrale consente di giudicare la gravità del processo patologico. Una diminuzione della differenza artero-venosa in pO2 e pCO2, un aumento del consumo di glucosio da parte del cervello, un aumento della differenza venoarteriosa nell'acido lattico e un aumento di esso nel liquido cerebrospinale. I cambiamenti osservati sono il risultato dell'interruzione dell'attività di numerosi sistemi enzimatici e non possono essere compensati dall'afflusso di sangue. È necessario stimolare l'attività nervosa dei pazienti.

ICTUS EMORRAGICO

Il colore del liquido cerebrospinale dipende dalla miscela di sangue. Nell'80-95% dei pazienti, durante le prime 24-36 ore, il liquido cerebrospinale contiene un'evidente mescolanza di sangue e successivamente diventa sanguigno o xantocromico. Tuttavia, nel 20-25% dei pazienti con piccole lesioni localizzate nelle parti profonde degli emisferi, o in caso di blocco delle vie del liquido cerebrospinale a causa di un edema cerebrale in rapido sviluppo, i globuli rossi non vengono rilevati nel liquido cerebrospinale. Inoltre, durante la puntura lombare, nelle primissime ore dopo l'inizio dell'emorragia, i globuli rossi possono essere assenti, mentre il sangue raggiunge il livello spinale. Tali situazioni sono motivo di errori diagnostici: la diagnosi di "ictus ischemico". La quantità maggiore di sangue si trova quando il sangue penetra nel sistema ventricolare. La rimozione del sangue dal tratto del liquido cerebrospinale inizia dal primo giorno della malattia e continua per 14-20 giorni in caso di trauma cranico e ictus, e in caso di aneurismi cerebrali fino a 1-1,5 mesi e non dipende sull'entità dell'emorragia, ma sul processo eziologico.

Il secondo importante segno di alterazioni del liquido cerebrospinale nell'ictus emorragico è la xantocromia, rilevata nel 70-75% dei pazienti. Appare il 2° giorno e scompare 2 settimane dopo l'ictus. Con un numero molto elevato di globuli rossi, la xantocromia può comparire entro 2-7 ore.

Un aumento della concentrazione proteica si osserva nel 93,9% dei pazienti e la sua quantità varia da 0,34 a 10 g/l e oltre. L'iperproteinorachia e l'aumento dei livelli di bilirubina possono persistere a lungo e, insieme ai disturbi liquorodinamici, possono causare sintomi meningei, in particolare mal di testa, anche 0,5 - 1 anno dopo l'emorragia subaracnoidea.

La pleocitosi viene rilevata in quasi 2/3 dei pazienti, aumenta nell'arco di 4-6 giorni, il numero di cellule varia da 13 a 3000 in 1 μl. La pleocitosi è associata non solo alla penetrazione del sangue nelle vie del liquido cerebrospinale, ma anche alla reazione delle meningi al sangue versato. In questi casi sembra importante determinare la vera citosi del liquido cerebrospinale. A volte, con emorragie nel cervello, la citosi rimane normale, il che è associato a ematomi limitati senza sfondamento nello spazio del liquido cerebrospinale o alla mancata risposta delle meningi.

Nelle emorragie subaracnoidee, la miscela di sangue può essere così grande che il liquido cerebrospinale è visivamente quasi indistinguibile dal sangue puro. Il 1° giorno, il numero dei globuli rossi, di regola, non supera 200-500 x 109/l, successivamente il loro numero aumenta fino a 700-2000 x 109/l. Nelle primissime ore dopo lo sviluppo di emorragie subaracnoidee di piccolo volume, una puntura lombare può produrre liquido cerebrospinale limpido, ma entro la fine del 1 ° giorno appare una miscela di sangue. Le ragioni dell'assenza di sangue nel liquido cerebrospinale possono essere le stesse di un ictus emorragico. La pleocitosi, prevalentemente neutrofila, oltre 400-800x109/l, è sostituita da linfocitaria entro il quinto giorno. Entro poche ore dall'emorragia possono comparire i macrofagi, che possono essere considerati marcatori di emorragia subaracnoidea. Un aumento delle proteine totali corrisponde solitamente al grado di emorragia e può raggiungere i 7-11 g/le oltre.

ICTUS ISCHEMICO

Il liquido cerebrospinale è incolore e trasparente, nel 66% la citosi rimane nel range di normalità, nel resto aumenta fino a 15-50x109/l, in questi casi si rilevano infarti cerebrali caratteristici, localizzati in prossimità delle vie del liquido cerebrospinale. La pleocitosi, prevalentemente linfoide-neutrofila, è causata da alterazioni reattive attorno a estesi focolai ischemici. Nella metà dei pazienti il contenuto proteico è determinato nell'intervallo 0,34-0,82 g/l, meno spesso fino a 1 g/l. L'aumento della concentrazione proteica è dovuto alla necrosi del tessuto cerebrale e all'aumento della permeabilità della barriera ematoencefalica. Il contenuto proteico può aumentare entro la fine della prima settimana dopo un ictus e durare per oltre 1,5 mesi. Abbastanza caratteristica dell'ictus ischemico è la dissociazione proteina-cellula (aumento del contenuto proteico con citosi normale) o cellula-proteina.

ASCESSO CERVELLO

La fase iniziale della formazione dell'ascesso è caratterizzata da pleiocitosi neutrofila e da un leggero aumento delle proteine. Man mano che la capsula si sviluppa, la pleocitosi diminuisce e il suo carattere neutrofilo viene sostituito da quello linfoide, e quanto maggiore è lo sviluppo della capsula, tanto meno pronunciata è la pleocitosi. In questo contesto, l'improvvisa comparsa di una pronunciata pleocitosi neutrofila indica una svolta dell'ascesso. Se l'ascesso si trova vicino al sistema ventricolare o alla superficie del cervello, la citosi sarà compresa tra 100 e 400 in 3 μl. Una pleocitosi minore o una citosi normale possono verificarsi quando l'ascesso è delimitato dal tessuto cerebrale circostante da una densa capsula fibrosa o ialinizzata. La zona di infiltrazione infiammatoria attorno all'ascesso in questo caso è assente o debolmente espressa.

TUMORI DEL SNC

Insieme alla dissociazione delle cellule proteiche, che è considerata caratteristica dei tumori, può verificarsi pleocitosi con un contenuto proteico normale nel liquido cerebrospinale. Con gliomi degli emisferi cerebrali, indipendentemente dalla loro istologia e posizione, si osserva un aumento delle proteine nel liquido cerebrospinale nel 70,3% dei casi e nelle forme immature - nell'88%. Una composizione normale o addirittura idrocefalica del liquido ventricolare e spinale può verificarsi sia con gliomi profondi che con gliomi che crescono nei ventricoli. Ciò si osserva principalmente nei tumori maturi a crescita diffusa (astrocitomi, oligodendrogliomi), senza evidenti focolai di necrosi e formazione di cisti e senza grosso spostamento del sistema ventricolare. Allo stesso tempo, gli stessi tumori, ma con un grosso spostamento dei ventricoli, sono solitamente accompagnati da un aumento della quantità di proteine nel liquido cerebrospinale. L'iperproteinorachia (da 1 g/le oltre) si osserva nei tumori localizzati alla base del cervello. Nei tumori ipofisari il contenuto proteico varia da 0,33 a 2,0 g/l. Il grado di spostamento del proteinogramma dipende direttamente dalla natura istologica del tumore: più il tumore è maligno, più gravi sono i cambiamenti nella formula proteica del liquido cerebrospinale. Appaiono le lipoproteine beta che normalmente non vengono rilevate e il contenuto delle lipoproteine alfa diminuisce.

Nei pazienti con tumori cerebrali, indipendentemente dalla loro natura istologica e dalla loro posizione, si verifica abbastanza spesso la pleiocitosi polimorfica. La reazione cellulare è determinata dalle peculiarità dei processi biologici che si verificano nel tumore in determinate fasi del suo sviluppo (necrosi, emorragia), che determinano la reazione. Il tessuto cerebrale e le membrane che circondano il tumore. Le cellule tumorali degli emisferi cerebrali nel fluido dei ventricoli possono essere rilevate nel 34,4% e nel liquido cerebrospinale spinale - dal 5,8 al 15% di tutte le osservazioni. Il fattore principale che determina l'ingresso delle cellule tumorali nel liquido cerebrospinale è la natura della struttura del tessuto tumorale (scarso stroma connettivo), l'assenza di una capsula e la posizione del tumore vicino agli spazi del liquido cerebrospinale.

MALATTIE INFIAMMATORIE CRONICHE (aracnoidite, aracnoencefalite, encefalite periventricolare)

La meningite tubercolare si verifica più spesso nei bambini e negli adolescenti che negli adulti. Di norma, è secondario, sviluppandosi come complicazione della tubercolosi di un altro organo (polmoni, linfonodi bronchiali o mesenterici) con successiva diffusione ematogena e danno alle meningi.

Quadro clinico

L'esordio della malattia è subacuto; c'è spesso un periodo prodromico con aumento dell'affaticamento, debolezza, mal di testa, anoressia, sudorazione, inversione del sonno, cambiamenti di carattere, soprattutto nei bambini - sotto forma di eccessiva sensibilità, pianto, diminuzione dell'attività mentale e sonnolenza.

La temperatura corporea è subfebbrile. Il vomito si verifica spesso a causa del mal di testa. Il periodo prodromico dura 2-3 settimane. Successivamente compaiono gradualmente sintomi lievi della conchiglia (torcicollo, segno di Kernig, ecc.). A volte i pazienti lamentano visione offuscata o indebolimento della vista. Segni di danno al III e VI paio del NC compaiono precocemente (leggera visione doppia, lieve ptosi delle palpebre superiori, strabismo). Nelle fasi successive, se la malattia non viene riconosciuta e non viene avviato un trattamento specifico, possono verificarsi paresi degli arti, afasia e altri sintomi di danno cerebrale focale.

Il decorso più tipico della malattia è subacuto. In questo caso, il passaggio dai fenomeni prodromici al periodo di comparsa dei sintomi oftalmici avviene gradualmente, in media entro 4-6 settimane. L'esordio acuto è meno comune (di solito nei bambini piccoli e negli adolescenti). Un decorso cronico è possibile nei pazienti precedentemente trattati con farmaci specifici per la tubercolosi degli organi interni.

Diagnostica

La diagnosi viene stabilita sulla base di un'anamnesi epidemiologica (contatto con pazienti affetti da tubercolosi), dati sulla presenza di tubercolosi degli organi interni e sullo sviluppo di sintomi neurologici. La reazione di Mantoux non è molto istruttiva.

Lo studio del liquido cerebrospinale è decisivo. La pressione del liquido cerebrospinale aumenta. Il liquido è limpido o leggermente opalescente. La pleiocitosi linfocitaria viene rilevata fino a 600-800x106/l, il contenuto proteico aumenta a 2-5 g/l (Tabella 31-5).

Tabella 31-5. Gli indicatori del liquido cerebrospinale sono normali e con meningite di varie eziologie

Indice	Norma	Meningite tubercolare	Meningite virale	Meningite batterica
Pressione	Colonna d'acqua 100-150 mm, 60 gocce al minuto	È aumentato	È aumentato	È aumentato
Trasparenza	Trasparente	Trasparente o leggermente opalescente	Trasparente	Fangoso
Citosi, cellule/μl	1 -3 (fino a 10)	Fino a 100-600	400-1000 o più	Centinaia, migliaia
Composizione cellulare	Linfociti, monociti	Linfociti (60-80%), neutrofili, igiene in 4-7 mesi	Linfociti (70-98%), igienizzazione in 16-28 giorni	Neutrofili (70-95%), recupero in 10-30 giorni
Contenuto di glucosio	2,2-3,9 mmol/l	Nettamente ridotto	Norma	Declassato
Contenuto di cloruro	122-135 mmol/l	Declassato	Norma	Declassato
Contenuto proteico	Fino a 0,2-0,5 g/l	Aumentato di 3-7 volte o più	Normale o leggermente aumentato	Aumentato di 2-3 volte
La reazione di Pandey	0	+++	0/+	+++
Pellicola di fibrina	NO	Spesso	Raramente	Raramente
Micobatteri	NO	"+" nel 50% dei casi	NO	NO

Spesso, all'inizio della malattia, nel liquido cerebrospinale viene rilevata una pleiocitosi mista neutrofila e linfocitaria. Caratterizzato da una diminuzione del contenuto di glucosio a 0,15-0,3 g/l e di cloruri a 5 g/l. Quando il liquore estratto viene conservato in una provetta per 12-24 ore, al suo interno si forma una delicata rete (pellicola) simile a una rete di fibrina, che parte dal livello del liquido e ricorda un albero di Natale rovesciato. Mycobacterium tuberculosis si trova spesso in questo film durante la batterioscopia. Un aumento della VES e della leucocitosi sono determinati nel sangue.

La diagnosi differenziale è facilitata dalla coltura e dall'esame citologico dettagliato del liquido cerebrospinale. Se si sospetta clinicamente una meningite tubercolare e i dati di laboratorio non lo confermano, per motivi di salute viene prescritta la terapia antitubercolare exjuvantibus.

Trattamento

Vengono utilizzate varie combinazioni di farmaci antitubercolari. Durante i primi 2 mesi e fino al rilevamento della sensibilità agli antibiotici, vengono prescritti 4 farmaci (la prima fase del trattamento): isoniazide, rifampicina, pirazinamide ed etambutolo o streptomicina. Il regime viene modificato dopo aver determinato la sensibilità ai farmaci. Dopo 2-3 mesi di trattamento (la seconda fase del trattamento), spesso passano a 2 farmaci (solitamente isoniazide e rifampicina). La durata minima del trattamento è solitamente di 6-12 mesi. Vengono utilizzate diverse combinazioni di farmaci.

Isoniazide 5-10 mg/kg, streptomicina 0,75-1 g/die nei primi 2 mesi. Con monitoraggio costante dell'effetto tossico sull'VIII coppia del CN - etambutolo 15-30 mg/kg al giorno. Quando si utilizza questa triade, la gravità dell'intossicazione è relativamente bassa, ma l'effetto battericida non è sempre sufficiente.

Per potenziare l'effetto battericida dell'isoniazide, si aggiunge rifampicina 600 mg insieme a streptomicina ed etambutolo, 600 mg una volta al giorno.

Per massimizzare l'effetto battericida, la pirazinamide viene utilizzata alla dose giornaliera di 20-35 mg/kg in combinazione con isoniazide e rifampicina. Tuttavia, quando questi farmaci vengono combinati, il rischio di epatotossicità aumenta significativamente.

Viene utilizzata anche la seguente combinazione di farmaci: acido para-aminosalicilico fino a 12 g/die (0,2 g per 1 kg di peso corporeo in dosi frazionate 20-30 minuti dopo i pasti, lavati con acqua alcalina), streptomicina e ftivazide in una soluzione dose giornaliera di 40-50 mg/kg (0,5 g 3-4 volte al giorno).

I primi 60 giorni della malattia sono fondamentali per il trattamento. Nelle fasi iniziali della malattia (entro 1-2 mesi), è consigliabile l'uso di glucocorticoidi per via orale per prevenire la pachimeningite adesiva e le complicanze associate.

Il trattamento in ospedale dovrebbe essere a lungo termine (circa 6 mesi), combinato con misure generali di rafforzamento, alimentazione migliorata e successivo soggiorno in un sanatorio specializzato. Quindi il paziente continua a prendere isoniazide per diversi mesi. La durata totale del trattamento è di 12-18 mesi.

Per prevenire le neuropatie si utilizzano piridossina (25-50 mg/die), acido lipoico e multivitaminici. Il monitoraggio dei pazienti è necessario per prevenire l'intossicazione da farmaci sotto forma di danni al fegato, neuropatie periferiche, compresi danni ai nervi ottici, nonché per prevenire complicazioni sotto forma di aderenze cicatriziali e idrocefalo aperto.

Previsione

Prima dell'uso dei farmaci antitubercolari, la meningite terminava con la morte al 20-25° giorno di malattia. Attualmente, con un trattamento tempestivo e a lungo termine, si ottiene un risultato favorevole nel 90-95% dei pazienti. Se la diagnosi è tardiva (dopo 18-20 giorni di malattia), la prognosi è infausta. A volte si verificano ricadute e complicazioni sotto forma di crisi epilettiche, idrocefalo e disturbi neuroendocrini.

Neurochirurghi, neurologi e specialisti in malattie infettive spesso devono eseguire una puntura lombale, che è la raccolta del liquido cerebrospinale (CSF) da un paziente. La procedura è un modo molto efficace per diagnosticare varie malattie del sistema nervoso centrale (SNC).

Nelle cliniche vengono determinati i componenti del liquore, viene eseguita la microscopia e viene prelevato il liquido cerebrospinale per i microrganismi.

Esistono ulteriori misure investigative, ad esempio la misurazione della pressione del liquido cerebrospinale, l'agglutinazione del lattice, il controllo del colore del surnatante. Una conoscenza approfondita di ciascuno dei test consente agli specialisti di utilizzarli come il metodo più efficace per diagnosticare le malattie.

Perché eseguire un test del liquido cerebrospinale?

Il liquore (CSF, liquido cerebrospinale) è una sostanza naturale necessaria per il normale funzionamento del sistema nervoso centrale. La sua analisi è la più importante tra tutti i tipi di studi di laboratorio.

L’analisi viene effettuata in più fasi:

Preparatorio– comprende la preparazione del paziente, il prelievo e l'invio del test al laboratorio.
Analitico- questa è la procedura per studiare il liquido.
Post-analitico– è una decrittazione dei dati ricevuti.

Solo specialisti esperti sono in grado di eseguire con competenza tutte le azioni di cui sopra, la qualità dell'analisi risultante dipende da questo.

Il liquido cerebrospinale viene prodotto in speciali plessi di vasi situati nel cervello. Negli adulti circola nello spazio subarconoideo e nei ventricoli cerebrali da 120 a 150 ml di liquido, il valore medio nel canale lombare è di 60 mg.

Il processo della sua formazione è infinito, la velocità di produzione va da 0,3 a 0,8 ml al minuto, questo indicatore dipende direttamente dalla pressione intracranica. Durante la giornata, una persona media produce dai 400 ai 1000 ml di liquidi.

Solo in base all'evidenza di una puntura lombare si può fare la diagnosi, vale a dire:

contenuto eccessivo di proteine nel liquido cerebrospinale;
diminuzione dei livelli di glucosio;
determinazione del numero totale di globuli bianchi.

Quando si ottengono questi indicatori e il livello dei leucociti nel sangue è elevato, viene posta la diagnosi di “meningite sierosa”; se si osserva un aumento del numero dei leucociti neutrofili, la diagnosi viene cambiata in “meningite purulenta”. Questi dati sono molto importanti, poiché da essi dipende il trattamento della malattia nel suo insieme.

Cos'è l'analisi

Il liquido si ottiene prelevando una puntura dal midollo spinale, detta anche lombal, secondo una certa tecnica e cioè: inserendo un ago molto sottile nello spazio in cui circola il liquido cerebrospinale e prelevandolo.

Vengono rimosse le prime gocce di fluido (considerato sangue "in viaggio"), ma successivamente vengono raccolte almeno 2 provette. Quello normale (chimico) viene raccolto per l'esame generale e chimico, il secondo è sterile - per l'esame della presenza di batteri.

Quando si indirizza un paziente per un’analisi del liquido cerebrospinale, il medico deve indicare non solo il nome del paziente, ma anche la sua diagnosi clinica e lo scopo dell’esame.

Le analisi fornite al laboratorio devono essere completamente protette dal surriscaldamento o dal raffreddamento e alcuni campioni vengono riscaldati in appositi bagnimaria per 2-4 minuti.

Fasi della ricerca

Questo liquido viene esaminato immediatamente dopo la sua raccolta. La ricerca di laboratorio è divisa in 4 fasi importanti.

Esame macroscopico

Il processo ha diversi indicatori importanti necessari per determinare una diagnosi accurata.

Colore

Nel suo stato normale, questo liquido è assolutamente incolore e non può essere distinto dall'acqua. Con patologie del sistema nervoso centrale sono possibili alcuni cambiamenti nel colore del liquido cerebrospinale. Per determinare con precisione il colore, la sostanza viene confrontata in dettaglio con l'acqua purificata.

Una tinta leggermente rossa può significare che le impurità del sangue invariato - gli eritrociti - sono entrate nel liquido. Oppure si tratta dell'ingestione accidentale di un paio di gocce di sangue durante un test.

Trasparenza

In una persona sana, il liquido cerebrospinale è trasparente e non differisce nell'aspetto dall'acqua. Una sostanza torbida può significare che si stanno verificando processi patologici nel corpo.

Se, dopo il processo di centrifugazione, il liquido nella provetta diventa trasparente, significa che la consistenza torbida è dovuta ad alcuni elementi presenti nella composizione. Se rimane torbido - microrganismi.

Una leggera opalescenza del liquido può verificarsi con un aumento del contenuto di alcune proteine disperse, come il fibrinogeno.

Pellicola fibrinosa

In uno stato sano, non contiene quasi fibrinogeno. Quando la sua concentrazione è elevata, nella provetta si forma una rete sottile, una sacca o un coagulo simile alla gelatina.

Lo strato esterno di proteine si piega formando una sacca di liquido. Il liquore, che contiene molte proteine, subito dopo il rilascio inizia a coagularsi in un coagulo gelatinoso.

Se il liquido cerebrospinale contiene globuli rossi, la pellicola sopra descritta non si forma.

Esame microscopico

La determinazione del numero totale di cellule del liquido cerebrospinale deve essere effettuata immediatamente dopo l'analisi, poiché le sue cellule sono caratterizzate da una rapida distruzione.

In condizioni normali, il liquido cerebrospinale non è ricco di elementi cellulari. In 1 ml puoi trovare 0-3-6 linfociti, per questo motivo vengono contati in speciali camere di grande capacità - Fuchs-Rosenthal.

Sotto ingrandimento in una camera di conteggio, il numero di globuli bianchi nel fluido viene calcolato dopo che tutti i globuli rossi sono stati distrutti. Nel processo viene utilizzato il reagente di Sansone.

Come determinare:

Prima di tutto posizionano QCS in vitro.
Il reagente viene versato nel melange fino alla tacca 1. Sansone.
Successivamente, aggiungi liquore e soluzione fino al segno 11 aceto acido, che indica una mescolanza di globuli rossi, viene aggiunta la fucsina, che conferisce ai leucociti, o meglio ai loro nuclei, un colore rosso-viola. Successivamente viene aggiunto acido fenico per la conservazione.
Reagente e si mescola il liquore, per questo il melangeur va fatto rotolare tra le palme e lasciato mezz'ora a colorare.
La prima goccia viene immediatamente inviata filtraggio carta, mescolare il quadrato Fuchs-Rosenthal, composto da 16 quadrati grandi, ognuno dei quali è diviso in altri 16, formando così 256 quadrati.
L'ultimo passo è contare il numero totale leucociti in tutti i quadrati il numero risultante è diviso per 3,2: il volume della camera. Il risultato ottenuto è pari al numero di leucociti in 1 μl di liquido cerebrospinale.

Indicatori normali:

lombare: da 7 a 10 nella camera;
cisternale – da 0 a 2;
ventricolare – da 1 a 3.

L'aumento della citosi - pleocitosi, è un indicatore di processi infiammatori attivi che colpiscono le membrane del cervello, cioè meningite, lesioni organiche della sostanza grigia (tumori, ascessi), aracnoidite, traumi e persino emorragia.

Nei bambini, il livello normale di citosi è più alto che negli adulti.

Passaggi dettagliati per la lettura di un citogramma:

Liquido centrifuga per 10 minuti, il sedimento viene drenato.
Sedimento ripulire sul vetrino, scuotendolo leggermente in modo che sia distribuito uniformemente sulla superficie.
Dopo lo striscio essiccato caldo per tutto il giorno.
Per 5 minuti immergere in alcool metilico o 15 in alcool etilico.
Essi prendono Soluzione di Azur-eosina, precedentemente diluita 5 volte, e dipingere lo striscio.
Fare domanda a immersione olio per microscopia.

In una persona sana, il liquido cerebrospinale contiene solo linfociti.

Se sono presenti patologie, si possono trovare tutti i tipi di leucociti, macrofagi, poliblasti e cellule di tumori appena formati. I macrofagi si formano dopo la perdita di sangue nel sistema nervoso centrale o dopo la decomposizione del tumore.

Analisi biochimica

Questa analisi aiuta a chiarire la causa principale della patologia del tessuto cerebrale, aiuta a valutare il danno causato, a regolare la sequenza del trattamento e a determinare la prognosi della malattia. Lo svantaggio principale dell'analisi è che viene eseguita solo mediante un intervento invasivo, ovvero viene effettuata una puntura per raccogliere il liquido cerebrospinale.

Nello stato normale, il liquido contiene la proteina albumina, e il suo rapporto nel liquido e la percentuale del suo contenuto nel plasma sono molto importanti.

Questo rapporto è chiamato indice dell'albumina (normalmente il suo valore non deve superare le 9 unità). Il suo aumento indica che la barriera ematoencefalica (la barriera tra tessuto cerebrale e sangue) è danneggiata.

Batterioscopico e batteriologico

Questo studio del liquido prevede di ottenerlo perforando il canale spinale. La sostanza o sedimento risultante, ottenuto dopo la centrifugazione, viene esaminata sotto ingrandimento.

Dal materiale finale, gli assistenti di laboratorio ricevono delle macchie, che studiano dopo averle ridipinte. Non importa se nel liquido cerebrospinale sono stati trovati microrganismi o meno, lo studio verrà sicuramente effettuato.

Se si sospetta una forma infettiva di meningite, l'analisi viene effettuata da un medico, necessaria in varie situazioni per stabilire il tipo di sostanza irritante. La malattia può anche essere causata da una flora insolita, possibilmente streptococchi; il meningococco è un agente eziologico standard, così come il bacillo della tubercolosi.

Alcune settimane prima dell'inizio della meningite, i pazienti notano spesso la comparsa di tosse, febbre temporanea e naso che cola. Lo sviluppo della malattia può essere indicato da un'emicrania costante di natura scoppiata, che non risponde agli antidolorifici. In questo caso, la temperatura corporea può salire a livelli elevati.

Con il meningococco si forma un'eruzione cutanea sulla superficie del corpo, molto spesso sulle gambe. I pazienti lamentano spesso anche una percezione negativa della luce intensa. I muscoli del collo diventano più duri, di conseguenza la persona non è in grado di toccare il petto con il mento.

La meningite richiede un ricovero urgente, seguito da un esame e da un trattamento urgente in ambiente ospedaliero.

Decodifica degli indicatori del liquido cerebrospinale

Il cambiamento di colore di diversa intensità può essere dovuto alla miscelazione dei globuli rossi, che compaiono in seguito a recenti lesioni cerebrali o perdite di sangue. La presenza di globuli rossi può essere notata visivamente quando il loro numero è superiore a 600 per µl.

Con vari disturbi e processi infiammatori che si verificano nel corpo, il liquido cerebrospinale può diventare xantocromico, cioè avere un colore giallo o brunastro a causa dei prodotti di degradazione dell'emoglobina. Non dovremmo dimenticare la falsa xantocromia: il liquido cerebrospinale viene colorato a causa dei farmaci.

Nella pratica medica si trova anche una tinta verde, ma solo in rari casi di meningite purulenta o ascesso cerebrale. In letteratura, il colore marrone è descritto come una rottura di una cisti di craniofaringoma nel percorso del liquido cerebrospinale.

La torbidezza del liquido può indicare la presenza di microrganismi o cellule del sangue al suo interno. Nel primo caso la torbidità può essere rimossa mediante centrifugazione.

Lo studio della composizione del liquido cerebrospinale è un compito particolarmente importante, che comprende un gran numero di diverse manipolazioni, test e calcoli, mentre è necessario prestare attenzione a molti altri indicatori.

Dopo la procedura, al paziente viene prescritto il riposo a letto per un giorno. Nei prossimi giorni potrebbe iniziare a lamentarsi di emicrania. Ciò è dovuto allo sforzo eccessivo delle meningi dovuto alla raccolta di liquidi durante la procedura.

Introduzione…………………………..3

Metodi di laboratorio per lo studio del liquido cerebrospinale…………….3

Fisiologia del liquido cerebrospinale………………………………..3
Composizione e funzioni del liquido cerebrospinale………………………3
Fase preanalitica……………………………………….7
Metodi per l'analisi di laboratorio del liquido cerebrospinale……………..9
1. Macroscopia del liquido cerebrospinale………………………………...9
  Esame microscopico del liquido cerebrospinale…………….10
  Esame clinico generale del liquido cerebrospinale…………………...15
  Studio biochimico del liquido cerebrospinale…………………22

Conclusione………………………………..31

INTRODUZIONE

Gli studi sul liquido cerebrospinale sono parte integrante della diagnosi delle malattie che colpiscono il sistema nervoso centrale. Il liquido cerebrospinale è una continuazione diretta dello spazio extracellulare e pericapillare del tessuto nervoso, quindi risponde immediatamente a qualsiasi cambiamento che si verifica nel cervello. Sulla base dei parametri fisico-chimici e della composizione cellulare del liquido cerebrospinale, si può giudicare la natura della patologia, il suo stadio e monitorare l'avanzamento del trattamento. In caso di infezioni virali del sistema nervoso centrale, gli antigeni dell'agente patogeno vengono rilevati nel liquido cerebrospinale; in caso di infezioni batteriche, i corpi microbici vengono rilevati mediante metodo microscopico; con metodo batteriologico, il tipo di batteri e la loro sensibilità agli antibiotici vengono rilevati determinato.

Le moderne capacità diagnostiche di laboratorio hanno notevolmente ampliato la quantità di informazioni che possono essere ottenute a seguito della puntura lombare. Creazione di metodi altamente sensibili

METODI DI LABORATORIO PER LO STUDIO DEL LICR

Fisiologia del liquido cerebrospinale

Il liquore (liquido cerebrospinale) è un fluido biologico che lava le strutture del sistema nervoso centrale. La sua sintesi avviene nei plessi vascolari venosi dei ventricoli laterali del cervello, da dove il fluido entra nel terzo ventricolo cerebrale attraverso il forame interventricolare. Quest'ultimo, attraverso l'acquedotto silviano, comunica con il IV ventricolo, dal quale il liquido cerebrospinale passa attraverso le aperture mediane e laterali nello spazio subaracnoideo del midollo spinale e dell'encefalo. Una piccola parte del fluido penetra anche nello spazio subdurale.

Figura 1 – Schema delle principali vie di formazione del liquido cerebrospinale.

La formazione del liquido cerebrospinale nei ventricoli laterali avviene in modo piuttosto intenso, grazie alla quale nella loro cavità viene creata una pressione sufficiente per dare al flusso del fluido una direzione caudale. Tuttavia, il liquido cerebrospinale non può essere equiparato al filtrato del plasma sanguigno, poiché è mescolato con il liquido extracellulare del tessuto nervoso che entra attraverso l'ependima ventricolare. In una certa misura, si verifica anche il processo inverso: il flusso del liquido cerebrospinale attraverso l'ependima verso i neurociti e le cellule gliali.

I moderni metodi di ricerca sui radioisotopi hanno permesso di stabilire che il liquido cerebrospinale lascia la cavità ventricolare entro pochi minuti ed entra nello spazio subaracnoideo dalle cisterne alla base del cervello entro 4-8 ore. Un adulto secerne circa 500 ml di liquido cerebrospinale al giorno, la sua quantità nei dotti del liquido cerebrospinale è di 125-150 ml (10-14% della massa del cervello). Nei ventricoli laterali ci sono 10-15 ml di liquido, nel III e IV un totale di circa 5 ml, nello spazio cranico subaracnoideo - 30 ml, nello spazio spinale - 70-80 ml. Durante il giorno, il liquido cerebrospinale cambia fino a 3-4 volte negli adulti e fino a 8 volte nei bambini.

La circolazione del liquido cerebrospinale nello spazio subaracnoideo avviene attraverso un sistema di canali del liquido cerebrospinale e cellule subaracnoidee. Il flusso del fluido accelera quando cambia la posizione del corpo nello spazio e sotto l'influenza delle contrazioni muscolari. Oggi si ritiene che il liquido cerebrospinale situato nella regione lombare si muova cranialmente entro un'ora; è possibile che la circolazione avvenga contemporaneamente in entrambe le direzioni.

Il deflusso del liquido cerebrospinale del 30-40% avviene attraverso le granulazioni pachioniane della membrana aracnoidea nel seno sagittale superiore, che fa parte del sistema venoso della dura madre. Appaiono negli esseri umani all'età di 1,5 anni, crescendo sulla superficie esterna della membrana aracnoidea lungo i grandi seni e le vene. Le granulazioni sono rivolte verso la dura madre e non entrano in contatto con la materia cerebrale. Il liquor si accumula nel seno sagittale superiore, creando una pressione di 15-50 mm Hg. superiore a quello venoso, per cui avviene il passaggio del fluido dai condotti del liquor al sistema circolatorio.

Figura 2 – Schema del rapporto tra le membrane del cervello e le granulazioni della membrana aracnoidea (granulazioni del Pachione).

1 – dura madre; 2 – spazio subdurale; 3 – membrana aracnoidea; 4 – spazio subaracnoideo; 5 – granulazione della membrana aracnoidea; 6 – seno sagittale superiore; 7 – lacuna laterale; 8 – coroide.

Il deflusso del liquido cerebrospinale avviene anche attraverso i canali del liquido cerebrospinale nello spazio subdurale, da cui entra nei capillari sanguigni della dura madre e passa nel sistema venoso. Inoltre, entra parzialmente nel sistema linfatico attraverso gli spazi perineurali dei nervi cranici (5-30%), viene assorbito dall'ependima ventricolare (10%) ed entra nel parenchima cerebrale.

Composizione e funzioni del liquido cerebrospinale

La composizione del liquido cerebrospinale è simile al plasma sanguigno ed è composta per il 90% da acqua e per il 10% da sostanza secca. Contiene aminoacidi (20-25), proteine (circa 14 frazioni), enzimi coinvolti nel metabolismo del sistema nervoso, zucchero, colesterolo, acido lattico e circa 15 oligoelementi. I neurotrasmettitori sono determinati nel liquido cerebrospinale: acetilcolina, norepinefrina, dopamina, serotonina; ormoni – melatonina, endofine, encefaline, chinine.

Funzioni del liquido cerebrospinale:

Protezione meccanica delle strutture del sistema nervoso centrale;

Escretore: i prodotti metabolici vengono rimossi con il liquido;

Trasporto: il liquido cerebrospinale serve a trasportare metaboliti, sostanze biologicamente attive, mediatori, ormoni;

Respiratorio: fornisce ossigeno alle meningi e al tessuto nervoso;

Omeostasi – mantiene un ambiente stabile del cervello, neutralizza i cambiamenti a breve termine nella composizione del sangue, mantiene il pH a un certo livello, la pressione osmotica nelle cellule cerebrali, garantisce la normale eccitabilità del sistema nervoso centrale, crea pressione intracranica;

Immunitario – partecipa alla creazione di una specifica barriera immunobiologica del sistema nervoso centrale.

Le funzioni del liquido cerebrospinale fino ad oggi non sono state completamente studiate, quindi continua il lavoro di ricerca sul suo studio.

Fase preanalitica

Quincke ottenne per la prima volta il liquido cerebrospinale per la ricerca nel 1891, dopo di che la sua tecnica si diffuse. Un'analisi clinica generale del liquido cerebrospinale viene effettuata entro 3 ore dalla raccolta del materiale, quindi l'analisi di tutto viene eseguita urgentemente. Per ottenere il liquido cerebrospinale, nella maggior parte dei casi viene utilizzata la puntura lombare, la puntura suboccipitale viene utilizzata raramente e la puntura ventricolare viene utilizzata durante l'intervento.

Una puntura lombare viene eseguita da un neurologo/anestesista-rianimatore in una sala di trattamento, in uno spogliatoio o in una sala operatoria. Il paziente viene posizionato su un fianco con le ginocchia portate al petto, dopodiché viene inserito un ago nello spazio tra la 4a e la 5a vertebra lombare nello spazio subaracnoideo. Si rimuovono le prime cinque gocce di liquido cerebrospinale, poiché contengono sangue proveniente da vasi sanguigni danneggiati durante la manipolazione. Il liquido viene raccolto in 2 provette sterili: una di queste viene inviata per studi biochimici e citologici, l'altra viene utilizzata per rilevare un film fibroso o un coagulo. Se è necessaria una coltura batteriologica, una terza provetta viene riempita con liquido cerebrospinale. Senza pericolo per la salute, puoi assumere 8-10 ml di liquido cerebrospinale da un adulto, 5-7 ml dai bambini, 2-3 ml dai neonati.

Non puoi scuotere il biomateriale risultante o esporlo a sbalzi di temperatura, poiché questa creatura cambia i suoi parametri. Tutte le provette prima dell'inizio dello studio vengono etichettate, numerate, dopo il riempimento vengono sigillate ermeticamente e inviate immediatamente al laboratorio. Nella direzione dovresti indicare:

Cognome, nome, patronimico del paziente, sua età;

Dipartimento, reparto, numero di anamnesi;

Data, ora e luogo della puntura;

Scopo dello studio;

Diagnosi presuntiva o clinica;

Dati del medico che ha inviato il materiale per la ricerca.

2.4 Metodi per analisi di laboratorio del liquido cerebrospinale

2.4.1. Esame macroscopico

L'esame macroscopico è l'insieme delle informazioni su un biomateriale che un tecnico di laboratorio può ottenere utilizzando i sensi.

Colore - Normalmente il liquido cerebrospinale è incolore e non differisce nell'aspetto dall'acqua. Il suo colore viene determinato confrontando una provetta con materiale con la stessa provetta riempita d'acqua su uno sfondo bianco. Può cambiare in vari processi patologici:

rosso – una miscela di globuli rossi invariati (eritrociti). Può essere determinato utilizzando le strisce reattive (HemoFAN), che presentano 2 scale di confronto: una cambia colore in presenza di globuli rossi intatti, l'altra in presenza di emoglobina libera nel liquido cerebrospinale;

il colore xantocromo (giallo, giallo-marrone, rosa, marrone) si verifica in presenza di ossiemoglobina, metaemoglobina e bilirubina;

il colore rosa del liquido cerebrospinale è dato dall'ossiemoglobina, rilasciata dagli eritrociti lisati;

Il colore giallo è dovuto all'alto contenuto di bilirubina, che è formata dall'emoglobina. Per determinare la bilirubinchia e la sua gravità vengono utilizzate strisce reattive (IctoFAN), la cui zona reattiva cambia colore dal rosa pallido al rosa intenso a seconda della concentrazione di bilirubina;

la metaemoglobina e la metalbumina conferiscono il colore bruno al liquido cerebrospinale; compaiono in presenza di ematomi incapsulati ed emorragie nel sistema nervoso centrale;

il colore verde si verifica con bilirubinchia pronunciata, poiché la bilirubina si trasforma in biliverdina, un pigmento color oliva. A volte è causato da una miscela di pus.

Trasparenza – il liquido cerebrospinale è normalmente trasparente; questo parametro viene determinato confrontando il materiale risultante con acqua distillata. Si osserva una leggera torbidità del liquido cerebrospinale con leucocitosi superiore a 200x10 6 /l, contenuto di eritrociti superiore a 400x10 6 /l, proteine totali - più di 3 g/l. Se, dopo la centrifugazione, il liquido cerebrospinale diventa trasparente, la sua torbidità è dovuta agli elementi formatisi; se rimane torbido, è causata da microrganismi. L'opalescenza del liquido cerebrospinale si verifica ad alte concentrazioni di fibrinogeno.

Film fibrinoso: normalmente il liquido cerebrospinale ha un basso contenuto di fibrina e non si forma un film durante la sedimentazione. Un alto contenuto di fibrina produce una delicata rete o pellicola sulle pareti della provetta, una sacca o un coagulo gelatinoso. Il liquore contenente una grande quantità di proteine grossolane immediatamente dopo il rilascio si coagula in un coagulo gelatinoso.

2.4.2. Esame microscopico del liquido cerebrospinale

Questa è una delle fasi più critiche dello studio del liquido cerebrospinale, sulla base dei dati di cui le diagnosi vengono spesso confermate o smentite.

Il conteggio del numero degli elementi formati viene effettuato entro 30 minuti dall'estrazione del liquido cerebrospinale, seguito dalla differenziazione cellulare. Contare leucociti Il preparato viene colorato con uno dei seguenti reagenti:

5 ml soluzione di acido acetico glaciale al 10% + metilvioletto 0,1 + acqua fino a 50 ml – tempo di colorazione 2 minuti;
Reattivo di Sansone: 2,5 ml di soluzione alcolica di fucsina 1:10 + 30 ml di acido acetico + 2 g di acido fenico + acqua distillata fino a 100 ml, tempo di colorazione 10-15 minuti.

La preparazione colorata viene posta in una camera Fuchs-Rosenthal da 3,2 µl. I leucociti vengono contati a basso ingrandimento in tutti i 256 quadrati, con una pleocitosi elevata di 200-1000x10 6 /l, viene contata metà della griglia e il risultato viene moltiplicato per 2, con pleocitosi superiore a 1000x10 6 /l, una fila di quadrati grandi viene contata contato e il risultato viene moltiplicato per 4. I valori normali di citosi sono indicati nella tabella 1, per vari tipi di patologia - nella tabella 2.

Tabella 1

Citosi nel liquido cerebrospinale lombare

Tavolo 2

Pleocitosi in varie malattie

Quantità globuli rossi nel liquore vengono contati nella camera di conteggio di Goryaev. Per fare ciò, il liquido cerebrospinale mescolato con il sangue viene diluito 10 volte: 9 parti di soluzione isotonica di cloruro di sodio e 1 parte di liquido cerebrospinale vengono mescolate in una provetta. Il liquido risultante viene accuratamente miscelato, la camera di conteggio di Goryaev viene riempita e, secondo le regole per il conteggio del numero di globuli rossi, viene determinato il numero di globuli rossi in cinque grandi quadrati. Il numero di globuli rossi in 1 μl di liquido cerebrospinale è determinato dalla formula:

dove A è il numero di globuli rossi in 5 quadrati grandi (80 piccoli), 1/400 è il volume di un quadrato piccolo, 10 è la diluizione del liquido cerebrospinale, 80 è il numero di quadrati piccoli.

Quando si esegue il conteggio in una camera di Fuchs-Rosenthal, negli elementi cellulari e formati colorati con fucsina sono visibili le strutture nucleari e citoplasmatiche, che ne consentono la differenziazione. Sono valutati con un ingrandimento di 7x40. La registrazione dei risultati del conteggio può avere un'espressione percentuale o numerica (liquorogramma). Considerando che gli elementi formati e cellulari possono subire alterazioni degenerative quando rimangono nel liquido cerebrospinale per lungo tempo, è necessario valutare e contare gli elementi formati e cellulari nei preparati colorati.

Le cellule del liquido cerebrospinale hanno un'affinità completamente diversa per i coloranti rispetto alle cellule del sangue, pertanto la selezione dei coloranti dovrebbe essere diversa. I seguenti tipi di colorazione dei preparati danno buoni risultati:

La colorazione secondo Rosina. Il liquido cerebrospinale viene centrifugato per 7-10 minuti. Il liquido surnatante viene drenato, il sedimento viene posto su un vetro sgrassato, agitato leggermente, distribuito sulla superficie del vetro e dopo 1-2 minuti il liquido viene drenato. Il vetro viene posto in posizione verticale ed essiccato in forno alla temperatura di 40–50°C, dopodiché viene fissato per 1–2 minuti con metanolo e colorato secondo Romanovsky: i preparati vengono colorati per 6–12 minuti , a seconda dello spessore dello striscio. La preparazione viene lavata con acqua distillata ed essiccata. Se i chicchi sono di colore blu pallido, lo striscio viene ridipinto per altri 2-3 minuti.

Colorazione secondo Vozna. Il sedimento ottenuto durante la centrifugazione viene versato sul vetro, agitandolo leggermente, e distribuito uniformemente sulla superficie. Asciugare a temperatura ambiente per 24 ore, fissare per 5 minuti con alcool metilico. Successivamente vengono colorate con una soluzione di eosina azzurra (la stessa della colorazione del sangue, ma diluita 5 volte) per 1 ora. Se le cellule sono di colore chiaro, terminare la colorazione con vernice non diluita sotto il controllo del microscopio per 2-10 minuti . Più elementi si formano nel liquido cerebrospinale, soprattutto in presenza di sangue, più lungo è il colore.

Colorazione secondo Alekseev. Applicare 6-10 gocce di colorante Romanovsky-Giemsa su una preparazione essiccata ma non fissata; utilizzando la stessa pipetta, distribuirla accuratamente su tutta la preparazione e lasciare agire per 30 secondi. Quindi aggiungere, senza scaricare la vernice, 12–20 gocce di acqua distillata, preriscaldata a una temperatura di 50–60 °C, in rapporto 1: 2. Agitando il preparato, mescolare la vernice con acqua e lasciare agire per 3 minuti. . Lavare via la vernice con un getto di acqua distillata, asciugare il preparato con carta da filtro ed esaminarlo al microscopio. Il metodo è adatto per l'esame citologico urgente.

I valori normali per il contenuto di elementi cellulari nel liquido cerebrospinale sono presentati nella Tabella 3.

Tabella 3

Tecnologia della citocentrifugazione (cytospin). La preparazione di preparati colorati di liquido cerebrospinale da liquido sedimentario dopo la centrifugazione non sempre consente di ottenere uno strato sottile di cellule adatto alla diagnosi. Per risolvere questo problema è stata sviluppata la tecnologia della citocentrifugazione, che prevede la produzione hardware di farmaci di alta qualità. A tale scopo, il liquido cerebrospinale risultante viene preparato per l'esame e posto in una citocamera, dopodiché viene dosato su vetrini posizionati verticalmente nel rotore della citocentrifuga. Sotto l'influenza della forza centrifuga, le cellule vengono distribuite uniformemente sul vetro, mentre il liquido più leggero viene rimosso dalla superficie del preparato. Anche l'essiccazione, il fissaggio e la colorazione del preparato vengono eseguiti in una citocentrifuga. Il dispositivo consente di creare fino a 8 zone diagnostiche su un vetrino.

Cellule atipiche – molto spesso si tratta di cellule tumorali del sistema nervoso centrale o delle sue membrane. Possono verificarsi anche nei processi infiammatori cronici (meningite tubercolare, meningoencefalite, sclerosi multipla, encefalomielite): si tratta di cellule ependimali dei ventricoli della membrana aracnoidea, nonché linfociti, monociti e plasmaciti con cambiamenti nel nucleo e nel citoplasma.

Celle alterate e ombre delle celle vengono rilevati durante la permanenza prolungata nel liquido cerebrospinale. Molto spesso, i granulociti neutrofili, le cellule aracnoidee e l'ependima ventricolare vanno incontro ad autolisi. Le celle modificate e le ombre delle celle non hanno valore diagnostico.

Cristalli nel liquore si trovano raramente. Nei giorni 4-5 dopo un'emorragia subaracnoidea o una lesione cerebrale traumatica, vengono rinvenuti cristalli di emosiderina; in caso di disintegrazione del tumore, si possono trovare cristalli di ematoidina, colesterolo e bilirubina nel contenuto della cisti; cristalli di colesterolo si formano anche in aree di degenerazione grassa, necrosi del tessuto cerebrale e cisti cerebrali. Per rilevare i cristalli nel liquido cerebrospinale vengono utilizzate le reazioni presentate nella Tabella 4.

Tabella 4

Reazioni utilizzate per rilevare cristalli nel liquore

Elementi dell'echinococco – uncini, scolice e frammenti della membrana chitinosa della vescica echinococcica possono essere rilevati nell'echinococcosi multipla delle meningi. Si trovano estremamente raramente.