A helper T-limfociták (CD4) növekedésének és csökkenésének okai. Miért alacsonyak a limfociták a vérben, mit jelent ez? A Cd3 cd8 növelte a citotoxikus limfociták számát

A T-limfociták fő feladata az idegen vagy megváltozott saját antigének felismerése az MHC-molekulákkal alkotott komplex részeként. Ha idegen vagy megváltozott molekulák vannak jelen sejtjeinek felületén, a T-limfocita pusztulásukat váltja ki.

A B-limfocitákkal ellentétben a T-limfociták nem termelnek antigénfelismerő molekulák oldható formáit. Ezenkívül a legtöbb T-limfocita nem képes felismerni és megkötni az oldható antigéneket.

Ahhoz, hogy egy T-limfocita „figyeljen az antigénre”, más sejteknek valamilyen módon „át kell engedniük” magukon az antigént, és meg kell jeleníteniük a membránjukon MHC-I-vel vagy MHC-II-vel komplexben. Ez az antigén prezentációja a T-limfocitáknak. Az ilyen komplexek T-limfociták általi felismerése kettős felismerés, vagy a T-limfociták MHC restrikciója.

ANTIGÉN FELISMERÉS T-LIMFOCITA RECEPTOR

A T-sejt antigén-felismerő receptorok, TCR-ek, az immunglobulin szupercsaládhoz tartozó láncokból állnak (lásd 5-1. ábra). A sejtfelszín fölé kiemelkedő TCR antigénfelismerő régió heterodimer, azaz. két különböző polipeptid láncból áll. Két ismert TCR-változat létezik, amelyeket αβTCR-nek és γδTCR-nek neveznek. Ezek a változatok az antigénfelismerő régió polipeptidláncainak összetételében különböznek. Minden T-limfocita a receptornak csak egy változatát fejezi ki. Az αβT sejteket korábban fedezték fel, és részletesebben tanulmányozták, mint a γδT limfocitákat. Ebben a tekintetben kényelmesebb a T-limfociták antigénfelismerő receptorának szerkezetét az αβTCR példájával leírni. A transzmembránon elhelyezkedő TCR komplex 8 polipeptidből áll

Rizs. 6-1. A T-sejt-receptor és a kapcsolódó molekulák diagramja

láncok (maga a TCR α- és β-láncának egy heterodimerje, két ζ segédlánc, valamint a CD3 molekula ε/δ- és ε/γ-láncainak egy-egy heterodimerje) (6. ábra- 1).

. Transzmembrán láncokα és β TCR. Ez 2 körülbelül azonos méretű polipeptidlánc -α (molekulatömeg 40-60 kDa, savas glikoprotein) illβ (molekulatömeg 40-50 kDa, semleges vagy bázikus glikoprotein). Ezen láncok mindegyike 2 glikozilált domént tartalmaz a receptor extracelluláris részében, egy hidrofób (lizin és arginin oldalláncok miatt pozitív töltésű) transzmembrán részt és egy rövid (5-12 aminosavból álló) citoplazmatikus régiót. Mindkét lánc extracelluláris részeit egyetlen diszulfidkötés köti össze.

- V-régió. Mindkét lánc külső extracelluláris (distalis) doménje változó aminosav-összetételű. Ezek homológok az immunglobulin molekulák V-régiójával, és a TCR V-régióját alkotják. Az α és β láncok V régiói lépnek kölcsönhatásba az MHC-peptid komplexszel.

-C-terület. Mindkét lánc proximális doménje homológ az immunglobulinok konstans régióival; ezek a TCR C régiói.

Egy rövid citoplazmatikus régió (az α- és β-láncok egyaránt) nem képesek önállóan biztosítani a jelnek a sejtbe való vezetését. Erre a célra további 6 polipeptidláncot használnak: γ, δ, 2ε és 2ζ.

.CD3 komplex. láncokγ, δ, ε heterodimereket alkotnak egymás közöttγε és δε (együtt CD3 komplexnek nevezik). Ez a komplex szükséges a kifejezéshezα- és β-láncok, ezek stabilizálása és jelátvitele a sejtbe. Ez a komplex egy extracelluláris, transzmembránból áll (negatív töltésű, ezért elektrosztatikusan kapcsolódik a transzmembrán régiókhozα- és β-láncok) és citoplazmatikus részek. Fontos, hogy ne keverjük össze a CD3 komplex láncaitγ A TCR dimer δ láncai.

.ζ - Láncok diszulfidhíd köti össze egymással. A legtöbb ilyen lánc a citoplazmában található. A ζ-láncok továbbítják a jelet a cellába.

.ITAM szekvenciák. Polipeptidláncok citoplazmatikus régióiγ, δ, ε és ζ 10 ITAM szekvenciát tartalmaz (mindegyik 1 szekvenciátγ-, ε- és δ-láncok és 3 - mindegyik ζ-láncban), kölcsönhatásba lépnek a Fyn-nel, egy citoszolos tirozin-kinázzal, amelynek aktiválása beindítja a biokémiai reakciók megindulását, amelyek jelet vezetnek (lásd a 6-1. ábrát).

Az antigénkötés ionos, hidrogén-, van der Waals- és hidrofób erőket foglal magában; a receptor konformációja jelentősen megváltozik. Elméletileg mindegyik TCR körülbelül 105 különböző antigén megkötésére képes, amelyek nemcsak szerkezetükben rokonok (keresztreagálnak), de szerkezetükben sem homológok. A valóságban azonban a TCR polispecifitása csak néhány szerkezetileg hasonló antigén peptid felismerésére korlátozódik. Ennek a jelenségnek a szerkezeti alapja az MHC-peptid komplex egyidejű TCR felismerése.

Koreceptor molekulák CD4 és CD8

Magán a TCR-en kívül minden érett T-limfocita expresszálja az úgynevezett koreceptor molekulák egyikét - CD4 vagy CD8, amelyek szintén kölcsönhatásba lépnek az APC-ken vagy a célsejteken lévő MHC-molekulákkal. Mindegyikhez citoplazmatikus régió tartozik

az Lck tirozin kinázzal, és valószínűleg hozzájárul a jel átviteléhez a sejtbe az antigénfelismerés során.

.CD4(β2 domén) az MHC-II molekula (az immunglobulin szupercsaládba tartozik, lásd 5-1. ábra, b). A CD4 molekulatömege 55 kDa, és 4 doménje van az extracelluláris részben. Amikor egy T-limfocita aktiválódik, egy TCR-molekulát 2 CD4-molekula „kiszolgál”: valószínűleg a CD4-molekulák dimerizációja következik be.

.CD8 az invariáns részhez kapcsolódik(az MHC-I molekula α3-doménje (az immunglobulin szupercsaládba tartozik, lásd 5-1. ábra, a). CD8 - lánc heterodimerα és β, diszulfid kötés köti össze. Egyes esetekben két α láncból álló homodimert találnak, amely kölcsönhatásba léphet az MHC-I-vel is. Az extracelluláris részben mindegyik láncnak van egy immunglobulinszerű doménje.

T sejt receptor gének

Gének Az α-, β-, γ- és δ-láncok (6-2. ábra, lásd még 5-4. ábra) homológok az immunglobulin génekkel, és a T-limfociták differenciálódása során DNS-rekombináción mennek keresztül, ami elméletileg biztosítja a limfociták keletkezését. az antigénkötő receptorok körülbelül 10 16 -10 18 változata (a valóságban ezt a változatot a szervezetben lévő limfociták száma 10 9-re korlátozza).

.Az α-lánc géneknek ~54 V-szegmensük, 61 J-szegmensük és 1 C-szegmensük van.

.A β-lánc gének ~65 V szegmenst, 2 D szegmenst, 13 J szegmenst és 2 C szegmenst tartalmaznak.

.δ-lánc gének. Az α-lánc V- és J-szegmensei között a δ-lánc D-(3), J-(4) és C-(1) szakaszának génjei találhatók.γ δTCR. A δ lánc V szakaszai az α lánc V szegmensei között vannak elszórva.

.γ-lánc gének γ A δTCR-eknek 2 C szegmense van, 3 J szegmens az első C szegmens előtt és 2 J szegmens a második C szegmens előtt, 15 V szegmens.

Gén átrendeződés

.A DNS-rekombináció akkor következik be, amikor a V-, D- és J-szegmensek egyesülnek, és ugyanaz a rekombináz komplex katalizálja, mint a B-limfociták differenciálódása során.

.Az α-lánc génekben a VJ és a β-lánc génekben a VDJ átrendeződése, valamint a nem kódoló N- és P-nukleotidok DNS-hez való hozzáadása után

Rizs. 6-2. A humán T-limfocita antigénfelismerő receptor α- és β-láncának génjei

RNS írja át. A C szegmenssel való fúzió és a felesleges (fel nem használt) J szegmensek eltávolítása az elsődleges transzkriptum illesztése során történik.

.Az α-lánc gének többször is átrendezhetők, míg a β-lánc gének már megfelelően átrendeződnek és expresszálódnak. Ezért van némi lehetőség arra, hogy egyetlen sejt egynél több TCR-változatot hordozzon.

.A TCR gének nem esnek szomatikus hipermutagenezis alá.

JELVEZETÉS A LYMPOCITÁK ANTIGÉNFELISMERŐ RECEPTORAIBÓL

A TCR-nek és a BCR-nek számos közös mintája van az aktiváló jelek regisztrálásának és továbbításának a cellába (lásd 5-11. ábra).

. Receptor klaszterezés. A limfocita aktiválásához antigénfelismerő receptorok és koreceptorok csoportosítása szükséges, pl. Több receptor „keresztkötése” egy antigénnel.

. Tirozin kinázok. A fehérjék foszforilációs/defoszforilációs folyamatai a tirozin-maradéknál tirozin-kinázok és tirozin-foszfatázok hatására jelentős szerepet játszanak a jelátvitelben.

ami e fehérjék aktiválódásához vagy inaktiválásához vezet. Ezek a folyamatok könnyen visszafordíthatóak és „kényelmesek” a külső jelekre adott gyors és rugalmas sejtreakciók érdekében.

. Src kinázok. Az immunreceptorok citoplazmatikus régióinak tirozinban gazdag ITAM szekvenciáit az Src családba tartozó nem receptor (citoplazmatikus) tirozin kinázok (B-limfocitákban Fyn, Blk, Lyn, T-limfocitákban Lck és Fyn) foszforilezik.

. ZAP-70 kinázok(T limfocitákban) ill Syk(B-limfocitákban), foszforilált ITAM szekvenciákhoz kötődve az adapter fehérjék aktiválódnak és elkezdenek foszforilálódni: LAT (Linker a T-sejtek aktiválásához)(ZAP-70 kináz), SLP-76 (ZAP-70 kináz) vagy SLP-65 (Syk kináz).

. Az adaptor fehérjék toboroznak foszfoinozitid 3-kináz(PI3K). Ez a kináz viszont aktiválja az Akt szerin/treonin protein kinázt, ami fokozott fehérje bioszintézist okoz, ami elősegíti a sejtnövekedés felgyorsulását.

. Foszfolipáz Cγ (lásd 4-8. ábra). A Tec családba tartozó kinázok (Btk - B-limfocitákban, Itk - T-limfocitákban) adapterfehérjéket kötnek és aktiválják a foszfolipáz Cγ(PLCγ) ).

A PLCγ a sejtmembrán foszfatidil-inozitol-difoszfátot (PIP 2) inozit 1,4,5-trifoszfáttá (IP 3) és diacilglicerinné hasítja.

(DAG).

A DAG a membránban marad, és aktiválja a protein kináz C-t (PKC), egy szerin/treonin kinázt, amely aktiválja az evolúciósan „ősi” transzkripciós faktort, az NFκB-t.

Az IP 3 az endoplazmatikus retikulumban lévő receptorához kötődik, és a raktárokból kalciumionokat szabadít fel a citoszolba.

A szabad kalcium aktiválja a kalciumkötő fehérjéket - a kalmodulint, amely számos más fehérje aktivitását szabályozza, és a kalcineurint, amely defoszforilálja és ezáltal aktiválja az aktivált T-limfociták nukleáris faktorát NFAT (Aktivált T-sejtek nukleáris faktora).

. Ras és más kis G-fehérjék inaktív állapotban a GDP-hez kapcsolódnak, de az adapter fehérjék ez utóbbit GTP-re cserélik, ezáltal a Ras-t átviszik az aktív állapotba.

A Ras saját GTPáz aktivitással rendelkezik, és gyorsan lehasítja a harmadik foszfátot, ezáltal visszatér inaktív állapotba (öninaktiválás).

A rövid távú aktiválás állapotában a Ras-nak sikerül aktiválnia a következő MAPK-nak nevezett kinázkaszkádot. (Mitogen Activated Protein Kinase), amelyek végül aktiválják az AP-1 transzkripciós faktort a sejtmagban. ábrán. A 6-3. ábra a fő TCR jelátviteli útvonalak sematikus ábrázolását mutatja be. Az aktiváló jel akkor kapcsol be, amikor a TCR egy ligandumhoz (MHC peptid komplex) kötődik egy koreceptor (CD4 vagy CD8) és a CD28 kostimuláló molekula részvételével. Ez a Fyn és Lck kinázok aktiválásához vezet. A CD3 polipeptid láncok citoplazmatikus részeiben lévő ITAM régiók pirossal vannak jelölve. A receptorhoz kapcsolódó Src kinázok szerepe a fehérjék foszforilációjában: a receptorok és a szignálok egyaránt tükröződnek. Figyelemre méltó a koreceptor-asszociált Lck-kináz hatásainak rendkívül széles skálája; a Fyn kináz szerepe kevésbé biztos (a vonalak nem folytonos jellegében tükröződik).

Rizs. 6-3. Az aktiváló jelek forrásai és iránya a T-limfociták stimulálása során. Megnevezések: ZAP-70 (ζ - asszociált protein kináz, azt mondják tömeg 70 kDa) - p70 protein kináz, amely a ζ-lánchoz kapcsolódik; PLCγ (foszfolipáz Cγ ) - foszfolipáz C, γ izoforma; PI3K (foszfatidil-inozitol-3-kináz)- foszfatidil-inozitol-3-kináz; Lck, Fyn-tirozin kinázok; LAT, Grb, SLP, GADD, Vav - adapter fehérjék

A ZAP-70 tirozin kináz kulcsszerepet játszik a receptor kinázok és az adaptermolekulák és enzimek közötti közvetítésben. Aktiválja (foszforiláción keresztül) az SLP-76 és LAT adaptermolekulákat, az utóbbi pedig aktiválási jelet továbbít más adapterfehérjékhez, a GADD-hoz, GRB-hez, és aktiválja a foszfolipáz C y-izoformáját (PLCy). E szakasz előtt a jelátvitel kizárólag a sejtmembránhoz kapcsolódó tényezőket érinti. A jelátviteli utak aktiválásában fontos szerepet játszik a CD28 kostimuláló molekula, amely a kapcsolódó lipidkináz PI3K-n keresztül fejti ki hatását. (foszfatidil-inozitol-3-kináz). A PI3K kináz fő célpontja a citoszkeletonhoz kapcsolódó Vav faktor.

A jel képződése és a T-sejt receptorról a sejtmagba történő átvitele eredményeként 3 transzkripciós faktor képződik - NFAT, AP-1 és NF-kB, amelyek a T folyamatát irányító gének expresszióját indukálják. -limfocita aktiváció (6-4. ábra). Az NFAT képződését egy kostimulációtól nem függő jelátviteli út okozza, amely a foszfolipáz C aktiválódása miatt aktiválódik és ionok részvételével valósul meg

Rizs. 6-4. Jelátviteli utak sémája T-sejt aktiváció során. NFAT (Az aktivált T-sejtek nukleáris faktora), AP-1 (Aktiváló fehérje-1), NF-κB (A nukleáris tényezőNak nek - B-sejtek génje)- transzkripciós faktorok

Ca 2+. Ez az út a kalcineurin aktiválását idézi elő, amely foszfatáz aktivitással defoszforilálja az NFAT-P citoszol faktort. Ennek köszönhetően az NFAT-P elnyeri azt a képességet, hogy bevándoroljon a sejtmagba és kötődjön az aktiváló gének promótereihez. Az AP-1 faktor a c-Fos és c-Jun fehérjék heterodimerjeként képződik, melynek képződését a megfelelő gének aktiválódása indukálja a három megvalósítása eredményeként kialakuló faktorok hatására. a MAP kaszkád összetevői. Ezeket az útvonalakat a rövid GTP-kötő fehérjék, a Ras és Rac aktiválják. A MAP kaszkád megvalósításához jelentős mértékben hozzájárulnak a CD28 molekulán keresztül történő kostimulációtól függő jelek. A harmadik transzkripciós faktor, az NF-kB a veleszületett immunsejtek fő transzkripciós faktoraként ismert. Aktiválja a blokkoló IκB alegység IKK kináz általi hasításával, amelyet a T-sejtekben a protein kináz C izoforma ϴ-függő jelátvitel (PKC9) aktivál. Ennek a jelátviteli útvonalnak az aktiválásához a fő hozzájárulást a CD28-ból származó kostimulációs jelek adják. A kialakult transzkripciós faktorok a gének promóter régióihoz kötődnek és expressziójukat indukálják. A génexpresszió különösen fontos a T-sejtes stimulációra adott válasz kezdeti szakaszában IL2És IL2R, amely meghatározza az IL-2 T-sejt növekedési faktor termelését és nagy affinitású receptorának expresszióját a T-limfocitákon. Ennek eredményeként az IL-2 autokrin növekedési faktorként működik, és az antigénre adott válaszban részt vevő T-sejt klónok proliferatív expanzióját okozza.

A T-LYMFOCIták DIFFERENCIÁLÁSA

A T-limfocita fejlődési szakaszainak azonosításának alapja a receptor V gének állapota és a TCR expressziója, valamint a koreceptorok és más membránmolekulák. A T-limfociták differenciálódási sémája (6-5. ábra) hasonló a B-limfociták fejlődésének fenti sémájához (lásd 5-13. ábra). Bemutatjuk a fejlődő T-sejtek fenotípusának és növekedési faktorainak fő jellemzőit. A T-sejtek fejlődési szakaszainak elfogadott megnevezéseit a koreceptorok kifejeződése határozza meg: DN (tól Dupla negatív CD4CD8) - kettős negatív, DP (tól Dupla pozitív, CD4 + CD8 +) - kettős pozitív, SP (tól Egyszeres pozitív, A CD4 + CD8 - és a CD4 CD8 +) egyetlen pozitív. A DNtimociták DN1, DN2, DN3 és DN4 stádiumokra való felosztása a természeten alapul.

Rizs. 6-5. T-limfociták fejlődése

CD44 és CD25 molekulák expressziója. Egyéb szimbólumok: SCF (tól őssejt faktor)- őssejtfaktor, lo (alacsony; indexjel) - alacsony expressziós szint. Átrendeződési szakaszok: D-J - előzetes stádium, a D és J szegmensek összekapcsolása (csak a TCR β- és δ-láncának génjeiben, lásd 6-2. ábra), V-DJ - végső szakasz, a germinális V gén összekapcsolása a kombinált DJ szegmenssel .

.A timociták különböznek egy közös prekurzor sejttől, amely bár a csecsemőmirigyen kívül van, olyan membránmarkereket expresszál, mint a CD7, CD2, CD34 és a CD3 citoplazmatikus formája.

.A T-limfocitákká való differenciálódásra kötelezett prekurzor sejtek a csontvelőből a csecsemőmirigy-kéreg szubkapszuláris zónájába vándorolnak, ahol lassan, körülbelül egy hét alatt szaporodnak. Új membránmolekulák, CD44 és CD25 jelennek meg a timocitákon.

.Ezután a sejtek mélyebbre költöznek a csecsemőmirigy kéregébe, és a CD44 és CD25 molekulák eltűnnek a membránjukról. Ebben a szakaszban kezdődik meg a β gének átrendeződése-, γ- és TCR δ láncok. Ha a génekγ- és a δ-láncoknak van idejük produktívak lenni, azaz. kereteltolódás nélkül hamarabb átrendeződik, mint a β-lánc gének, akkor a limfocita tovább differenciálódikγ δT. Egyébként a β-lánc a membránon pT-vel komplexben expresszálódikα (egy invariáns helyettesítő lánc, amely ebben a szakaszban helyettesíti a valódi α láncot) és a CD3. Ez szolgál

jel a γ- és δ-lánc gének átrendeződésének leállítására. A sejtek szaporodni kezdenek, és CD4-et és CD8-at egyaránt expresszálnak. dupla pozitív timociták. Ilyenkor sejttömeg halmozódik fel kész β-lánccal, de még át nem rendezett α-lánc génekkel, ami hozzájárul az αβ-heterodimerek sokféleségéhez.

.A következő szakaszban a sejtek abbahagyják az osztódást, és elkezdik átrendezni a Vα géneket, 3-4 nap alatt többször is. Az α-lánc gének átrendeződése az α-lánc gének szegmensei között elhelyezkedő δ-lókusz irreverzibilis delécióját eredményezi.

.A TCR expressziója az α-lánc minden új variánsával és a timociták szelekciójával (szelekciójával) megtörténik a thymus epiteliális sejtek membránján lévő MHC-peptid komplexhez való kötődés erőssége alapján.

Pozitív szelekció: elpusztulnak azok a timociták, amelyek nem kötötték meg a rendelkezésre álló MHC-peptid komplexeket. A pozitív szelekció eredményeként a timociták körülbelül 90%-a elpusztul a csecsemőmirigyben.

A negatív szelekció kiküszöböli azokat a timocita klónokat, amelyek túl nagy affinitással kötik az MHC-peptid komplexeket. A negatív szelekció a pozitív szelekción átesett sejtek 10-70%-át eliminálja.

Olyan timociták, amelyek megkötötték bármelyik MHC-peptid komplexet a megfelelővel, pl. átlagos erősséggel és affinitással jelet kapnak a túlélésről és folytatják a differenciálódást.

.Rövid időre mindkét koreceptor molekula eltűnik a timocita membránról, majd az egyik expresszálódik: az MHC-I-vel komplexben lévő peptidet felismerő timociták a CD8 koreceptort, az MHC-II-vel pedig a CD4 koreceptort fejezik ki. Ennek megfelelően kétféle T-limfocita jut el a perifériára (kb. 2:1 arányban): CD8+ és CD4+, amelyek funkciója a következő immunválaszokban eltérő.

-CD8+ T-sejtek a citotoxikus T-limfociták (CTL) szerepét töltik be – felismerik és közvetlenül elpusztítják a vírus által módosított sejteket, daganatokat és más „megváltozott” sejteket (6-6. ábra).

-CD4+ T-sejtek. A CD4 + T limfociták funkcionális specializációja változatosabb. A CD4 + T-limfociták jelentős része az immunválasz kialakulása során T-helperekké (helperek) válik, amelyek kölcsönhatásba lépnek a B-limfocitákkal, T-limfocitákkal és más sejtekkel.

Rizs. 6-6. A citotoxikus T-limfocita hatásmechanizmusa a célsejtre. A gyilkos T-sejtben a Ca 2+ -koncentráció növekedésére reagálva a perforint (lila ovális) és granzimeket (sárga körök) tartalmazó szemcsék egyesülnek a sejtmembránnal. A felszabaduló perforin beépül a célsejt membránjába, majd granzimek, víz és ionok számára áteresztő pórusok képződnek. Ennek eredményeként a célsejt lizálódik

közvetlen érintkezés vagy oldható faktorok (citokinek) révén. Bizonyos esetekben CD4 + CTL-ekké fejlődhetnek: különösen a Lyell-szindrómás betegek bőrében találhatók jelentős mennyiségben ilyen T-limfociták.

T segítő alpopulációk

A 20. század 80-as éveinek vége óta szokás volt megkülönböztetni a T-helperek két alpopulációját (attól függően, hogy milyen citokinkészletet termelnek) - a Th1-et és a Th2-t. Az elmúlt években a CD4 + T-sejt alcsoportok spektruma tovább bővült. Olyan szubpopulációkat fedeztek fel, mint a Th17, T-regulátorok, Tr1, Th3, Tfh stb.

Főbb CD4+ T-sejt-alcsoportok:

. Th0 - A CD4+ T limfociták az immunválasz kialakulásának korai szakaszában csak IL-2-t (minden limfocita mitogénjét) termelnek.

.Th1- a CD4 + T-limfociták differenciált szubpopulációja, amely IFN termelésére specializálódott y, TNF β és IL-2. Ez a szubpopuláció számos sejtes immunválaszt szabályoz, beleértve a késleltetett típusú túlérzékenységet (DTH) és a CTL aktivációt. Ezenkívül a Th1 serkenti a B-limfociták opszonizáló IgG antitestek termelését, amelyek beindítják a komplement aktivációs kaszkádot. A túlzott gyulladás kialakulása az ezt követő szövetkárosodással közvetlenül összefügg a Th1 szubpopuláció aktivitásával.

.Th2- a CD4 + T limfociták differenciált szubpopulációja, amely az IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 és IL-13 termelésére specializálódott. Ez az alpopuláció részt vesz a B-limfociták aktiválásában, és elősegíti a különböző osztályokba tartozó antitestek, különösen az IgE nagy mennyiségű szekrécióját. Ezenkívül a Th2 szubpopuláció részt vesz az eozinofilek aktiválásában és az allergiás reakciók kialakulásában.

.Th17- a CD4 + T limfociták egy IL-17 termelésére specializálódott szubpopulációja. Ezek a sejtek gombaellenes és antimikrobiális védelmet nyújtanak a hám- és nyálkahártya gátak ellen, és kulcsszerepet játszanak az autoimmun betegségek patológiájában is.

.T-szabályozók- CD4 + T limfociták, amelyek immunszuppresszív citokinek szekréciója révén elnyomják az immunrendszer más sejtjeinek aktivitását - IL-10 (makrofág és Th1 sejtaktivitás gátlója) és TGFβ - a limfocita proliferáció gátlója. A gátló hatás közvetlen intercelluláris interakcióval is elérhető, mivel az aktivált és „elhasznált” limfociták apoptózisának induktorai - FasL (Fas ligand) - egyes T-szabályozók membránján expresszálódnak. A CD4 + szabályozó T-limfocitáknak számos populációja létezik: természetes (Treg), a csecsemőmirigyben érő (CD4 + CD25 +, Foxp3 transzkripciós faktort expresszálva), és indukált - túlnyomórészt az emésztőrendszer nyálkahártyáján lokalizálódik, és átáll a csecsemőmirigyre. TGFβ képződése (Th3) vagy IL-10 (Tr1). A T-szabályozók normális működése szükséges az immunrendszer homeosztázisának fenntartásához és az autoimmun betegségek kialakulásának megelőzéséhez.

.További segítő populációk. A közelmúltban a CD4 + T limfociták egyre új populációiról írtak le.

az általuk túlnyomórészt termelt citokin típusa szerint osztályozzák. Tehát, mint kiderült, az egyik legfontosabb populáció a Tfh (angol nyelvből). follikuláris segítő- follikuláris segítő). A CD4 + T limfocitáknak ez a populációja túlnyomórészt limfoid tüszőkben található, és segítő funkciót fejt ki a B limfociták számára az IL-21 termelése révén, ami érését és terminális differenciálódását okozza plazmasejtekké. A Tfh az IL-21 mellett IL-6-ot és IL-10-et is képes termelni, amelyek a B-limfociták differenciálódásához szükségesek. Ennek a populációnak a működési zavara autoimmun betegségek vagy immunhiányos betegségek kialakulásához vezet. Egy másik „újonnan megjelenő” populáció a Th9 – IL-9 termelők. Nyilvánvalóan ezek a Th2, amely átváltott az IL-9 szekréciójára, amely antigénstimuláció hiányában képes a T helper sejtek proliferációját előidézni, valamint fokozni a B limfociták IgM, IgG és IgE szekrécióját.

A T helper sejtek fő alpopulációit az 1. ábra mutatja be. 6-7. Az ábra összefoglalja a CD4 + T-sejtek adaptív szubpopulációival kapcsolatos jelenlegi elképzeléseket, pl. alpopulációk kialakulása-

Rizs. 6-7. Adaptív CD4+ T-sejt alcsoportok (citokinek, differenciációs faktorok, kemokin receptorok)

immunválasz során jelentkezik, nem pedig a sejtek természetes fejlődése során. Minden típusú T-helper sejt esetében az indukáló citokinek (a sejteket szimbolizáló körökhöz vezető nyilakon), a transzkripciós faktorok (a körökön belül), a migrációt irányító kemokin receptorok (a „sejtfelületről kinyúló vonalak közelében”) vannak feltüntetve, és a termelődött citokinek (a téglalapokban, amelyekre a körökből kiinduló nyilak irányulnak).

A CD4 + T-sejtek adaptív szubpopulációinak családjának bővítése megkövetelte annak a kérdésnek a megoldását, hogy milyen sejtekkel lépnek kölcsönhatásba ezek az alpopulációk (akiknek segítő funkciójuknak megfelelően „segítséget” nyújtanak). Ezeket az elképzeléseket tükrözi az ábra. 6-8. Naprakész áttekintést ad ezen alpopulációk funkcióiról (részvétel a kórokozók bizonyos csoportjaival szembeni védekezésben), valamint e sejtek aktivitásának kiegyensúlyozatlan növekedésének kóros következményeiről.

Rizs. 6-8. Adaptív T-sejt-alcsoportok (partnersejtek, fiziológiai és patológiai hatások)

γ δT limfociták

A csecsemőmirigyben limfopoézisben áteső T-limfociták túlnyomó többsége (99%) αβT-sejt; kevesebb mint 1%-a γδT-sejtek. Ez utóbbiak többnyire a csecsemőmirigyen kívül, elsősorban az emésztőrendszer nyálkahártyájában differenciálódnak. A bőrben, a tüdőben, az emésztőrendszerben és a szaporodási szervekben ezek alkotják az intraepiteliális limfociták domináns alpopulációját. A szervezetben lévő összes T-limfocita között a γδT-sejtek 10-50%-ot tesznek ki. Az embriogenezisben a γδT-sejtek korábban jelennek meg, mint az αβT-sejtek.

.γδ A T-sejtek nem expresszálnak CD4-et. A CD8 molekula néhány γδT sejten expresszálódik, de nem ap-heterodimerként, mint a CD8+ apT sejteken, hanem két a-lánc homodimerjeként.

.Antigénfelismerő tulajdonságok: A γδTCR-ek jobban emlékeztetnek az immunglobulinokra, mint az αβTCR-ekre, pl. képes megkötni a natív antigéneket a klasszikus MHC molekuláktól függetlenül - γδT sejtek esetében az antigén előzetes APC-vel történő feldolgozása nem vagy egyáltalán nem szükséges.

.Sokféleségγδ TCR kevesebb, mint az αβTCR vagy az immunglobulinok, bár általában a γδT sejtek képesek az antigének széles skáláját felismerni (főleg a mikobaktériumok foszfolipid antigénjeit, szénhidrátokat, hősokkfehérjéket).

.Funkciókγδ T-sejtek még nem tanulmányozták teljesen, bár az uralkodó vélemény, hogy a veleszületett és szerzett immunitás egyik összekötő elemeként szolgálnak. A γδT-sejtek az egyik első akadály a kórokozókkal szemben. Ezenkívül ezek a citokineket szekretáló sejtek fontos immunszabályozó szerepet töltenek be, és képesek CTL-ekké differenciálódni.

NKT limfociták

A természetes gyilkos T-sejtek (NKT-sejtek) a limfociták egy speciális alpopulációját képviselik, amelyek a veleszületett és az adaptív immunsejtek között köztes helyet foglalnak el. Ezek a sejtek mind az NK, mind a T-limfociták jellemzőivel rendelkeznek. Az NKT sejtek αβTCR-t és az NK-sejt-specifikus receptort, az NK1.1-et expresszálják, amely a C-típusú lektin glikoprotein szupercsaládba tartozik. Az NKT sejtek TCR receptora azonban jelentős eltéréseket mutat a közönséges sejtek TCR receptoraitól. Egerekben a legtöbb NKT sejt invariáns a-lánc V-domént expresszál, amely a következőkből áll

A Vα14-Jα18 szegmensek, amelyeket néha Jα281-nek is neveznek. Emberben az α lánc V doménje Vα24-JαQ szegmensekből áll. Egerekben az invariáns TCR α-lánca túlnyomórészt Vβ8.2-vel, emberben pedig Vβ11-gyel komplexálódik. A TCR láncok szerkezeti sajátosságai miatt az NKT sejteket invariánsnak nevezik - iTCR. Az NKT sejtek fejlődése a CD1d molekulától függ, amely hasonló az MHC-I molekulákhoz. Ellentétben a klasszikus MHC-I molekulákkal, amelyek peptideket mutatnak be a T-sejteknek, a CD1d csak glikolipideket mutat be a T-sejteknek. Bár úgy gondolják, hogy a máj az NKT-sejtek fejlődésének helye, erős bizonyítékok állnak rendelkezésre a csecsemőmirigy szerepére a fejlődésben. Az NKT sejtek fontos szerepet játszanak az immunitás szabályozásában. Különféle autoimmun folyamatokban szenvedő egerekben és emberekben az NKT sejtek funkcionális aktivitása súlyosan károsodott. Nincs teljes kép az ilyen rendellenességek jelentőségéről az autoimmun folyamatok patogenezisében. Egyes autoimmun folyamatokban az NKT sejtek szuppresszor szerepet játszhatnak.

Az autoimmun és allergiás reakciók szabályozása mellett az NKT sejtek részt vesznek az immunrendszer felügyeletében, és funkcionális aktivitásuk növekedésével tumorkilökődést okoznak. Szerepük az antimikrobiális védekezésben nagy, különösen a fertőző folyamat kialakulásának korai szakaszában. Az NKT-sejtek különféle gyulladásos fertőző folyamatokban vesznek részt, különösen a vírusos májelváltozásokban. Általánosságban elmondható, hogy az NKT-sejtek limfociták többfunkciós populációja, amelyek még mindig számos tudományos rejtélyt hordoznak.

ábrán. A 6-9. ábrák a T-limfociták funkcionális alpopulációkba való differenciálódására vonatkozó adatokat foglalják össze. A bifurkáció több szintje is bemutatásra kerül: γ δТ/ αβТ, majd αβТ sejteknél - NKT/ egyéb T limfociták, utóbbiaknál - CD4 + /CD8 +, CD4 + T sejtek esetében - Th/Treg, CD8 + T limfocitáknál - CD8αβ /CD8αα. Az összes fejlődési vonalért felelős differenciálódási transzkripciós faktorokat is bemutatjuk.

Rizs. 6-9. A T-limfociták természetes szubpopulációi és differenciálódási tényezőik

A felnőttek vérében a teljes T-limfociták száma normális - 58-76%, abszolút szám - 1,1-1,7-10"/l.

Az érett T-limfociták „felelősek” a sejtes immunreakciókért, és a szervezetben az antigén homeosztázis immunológiai felügyeletét végzik. A csontvelőben képződnek, és a csecsemőmirigyben differenciálódnak, ahol effektor (killer T-limfociták, késleltetett típusú túlérzékenységi T-limfociták) és szabályozó (segítő T-limfociták, szupresszor T-limfociták) részekre oszlanak. Ennek megfelelően a T-limfociták két fontos funkciót látnak el a szervezetben: effektor és szabályozó. A T-limfociták effektor funkciója az idegen sejtekkel szembeni specifikus citotoxicitás. A szabályozó funkció (T-helper - T-szupresszor rendszer) az immunrendszer specifikus reakciójának kifejlődésének intenzitásának szabályozása az idegen antigénekkel szemben. A vérben a T-limfociták abszolút számának csökkenése a sejtes immunitás hiányát, a növekedés az immunhiperaktivitást és az immunproliferatív betegségek jelenlétét jelzi.

Bármely gyulladásos folyamat kialakulását szinte teljes időtartama alatt a T-limfociták tartalmának csökkenése kíséri. Ez sokféle etiológiájú gyulladásban figyelhető meg: különféle fertőzések, nem specifikus gyulladásos folyamatok, sérült szövetek és sejtek elpusztulása műtét után, trauma, égési sérülések, szívroham, rosszindulatú daganatsejtek elpusztulása, trofikus pusztulás stb. A T-limfociták számának csökkenését a gyulladásos folyamat intenzitása határozza meg, de ez a mintázat nem mindig figyelhető meg. A T-limfociták az összes immunkompetens sejt közül a leggyorsabban reagálnak a gyulladásos folyamat kezdetére. Ez a reakció még a betegség klinikai képének kialakulása előtt is megnyilvánul. A T-limfociták számának növekedése a gyulladásos folyamat során kedvező jel, és a T-limfociták magas szintje az ilyen folyamat kifejezett klinikai megnyilvánulásaival, éppen ellenkezőleg, kedvezőtlen jel, ami a gyulladás lassú lefolyását jelzi. gyulladásos folyamat, amely hajlamos krónikussá válni. A gyulladásos folyamat teljes befejezését a T-limfociták számának normalizálása kíséri. A T-limfociták relatív számának növekedése nem nagy klinikai jelentőséggel bír. A T-limfociták abszolút számának növekedése a vérben azonban nagyon fontos a leukémia diagnózisához. A táblázatban bemutatjuk azokat a betegségeket és állapotokat, amelyek a vér T-limfociták számának változásához vezetnek. 7.19.

7.19. táblázat. Betegségek és állapotok, amelyek az összeg változásához vezetnek

T-limfociták (CD3) a vérben

7.19. táblázat folytatása

Helper T limfociták (CD4) a vérben

A segítő T-limfociták száma a felnőttek vérében normális - 36-55%, abszolút

Mennyiség - 0,4-1,110"/l-

A T-limfociták az immunválasz segítői (induktorai), olyan sejtek, amelyek szabályozzák a szervezet idegen antigénre adott immunválaszának erősségét, szabályozzák a szervezet belső környezetének állandóságát (antigén homeosztázis) és fokozott antitesttermelést okoznak. A helper T-limfociták számának növekedése immunhiperaktivitást, míg csökkenése immunhiányt jelez.

Az immunrendszer állapotának megítélésében kulcsfontosságú a T-helperek és T-szuppresszorok aránya a perifériás vérben, hiszen ettől függ az immunválasz intenzitása. Általában annyi citotoxikus sejtet és antitestet kell termelni, amennyi egy adott antigén eltávolításához szükséges. A T-szuppresszorok elégtelen aktivitása a T-helperek befolyásának túlsúlyához vezet, ami hozzájárul az erősebb immunválaszhoz (kifejezett antitest-termelés és/vagy a T-effektorok elhúzódó aktiválódása). A T-szuppresszorok túlzott aktivitása éppen ellenkezőleg, az immunválasz gyors elnyomásához és abortuszához, sőt az immunológiai tolerancia jelenségeihez vezet (az antigénre adott immunológiai válasz nem alakul ki). Erős immunválasz esetén autoimmun és allergiás folyamatok kialakulása lehetséges. A T-szuppresszorok magas funkcionális aktivitása ilyen válaszreakcióban nem teszi lehetővé megfelelő immunválasz kialakulását, ezért az immunhiány klinikai képét a fertőzések és a rosszindulatú növekedésre való hajlam uralják. Az 1,5-2,5 közötti CD4/CD8 index normergikus állapotnak felel meg, több mint 2,5 - hiperaktivitás, 1,0 alatti - immunhiány. A gyulladásos folyamat súlyos eseteiben a CD4/CD8 arány 1-nél kisebb is lehet. Ez az arány alapvető fontosságú AIDS-ben szenvedő betegek immunrendszerének értékelése során. Ebben a betegségben a humán immunhiány vírus szelektíven megfertőzi és elpusztítja a CO4 limfocitákat, aminek következtében a CD4/CD8 arány csökken. előtt 1-nél lényegesen kisebb értékek.

A CD4/CD8 arány növekedése (3-ig) gyakran megfigyelhető különböző gyulladásos betegségek akut fázisában a T helper sejtek szintjének növekedése és a T-szuppresszor sejtek csökkenése miatt. Egy gyulladásos betegség közepén a T-helper sejtek lassú csökkenése és a T-szuppresszor sejtek számának növekedése tapasztalható. Amikor a gyulladásos folyamat lecseng, ezek a mutatók és arányuk normalizálódik. A CD4/CD8 arány növekedése szinte minden autoimmun betegségre jellemző: hemolitikus anaemia, immunthrombocytopenia, Hashimoto thyreoiditis, vészes vérszegénység, Goodpasture-szindróma, szisztémás lupus erythematosus, rheumatoid arthritis. A felsorolt ​​betegségekben a CD4/CD8 arány növekedése a CD8 szintjének csökkenése miatt általában a folyamat magas aktivitásával járó exacerbáció csúcsán észlelhető. A CD4/CD8 arány csökkenése a CD8 szint emelkedése miatt számos daganatra jellemző, különösen a Kaposi-szarkómára. A vér CD4-számának változásához vezető betegségeket és állapotokat a táblázat tartalmazza. 7.20.

7.20. táblázat. Betegségek és állapotok, amelyek a vér CD4-számának megváltozásához vezetnek

A táblázat folytatása. 7.20

A limfociták a vér leukocita egységének sejtjei, amelyek számos fontos funkciót látnak el. E sejtek szintjének csökkenése vagy növekedése kóros folyamat kialakulását jelezheti a szervezetben.

A limfociták képződésének és működésének folyamata

A limfociták a csontvelőben termelődnek, majd a csecsemőmirigybe (csecsemőmirigy) vándorolnak, ahol a hormonok és a hámsejtek hatására változásokon mennek keresztül, és különböző funkciójú alcsoportokká differenciálódnak. Az emberi testnek másodlagos nyirokszervei is vannak, ezek közé tartozik a nyirokcsomók és a lép. A lép a limfociták halálának helye is.

Vannak T és B limfociták. A nyirokcsomókban található limfociták 10-15%-a átalakul B-limfocitákká. Ezeknek a sejteknek köszönhetően az emberi szervezet egész életen át tartó immunitást szerez a múltbéli betegségekkel szemben - idegen anyaggal (vírus, baktérium, kémiai vegyület) való első érintkezéskor a B-limfociták antitesteket termelnek ellene, emlékeznek a kórokozó elemre, és ismételt interakció esetén mobilizálódnak. immunitása annak elpusztítására. Ezenkívül a B-limfociták vérplazmában való jelenléte miatt a vakcinázás hatása elérhető.

A csecsemőmirigyben a limfociták körülbelül 80%-a T-limfocitákká alakul (a CD3 gyakori sejtmarker). A T-limfocita receptorok detektálják és megkötik az antigéneket. A T-sejtek viszont három altípusra oszlanak: ölő T-sejtek, segítő T-sejtek és szupresszor T-sejtek. A T-limfociták mindegyik típusa közvetlenül részt vesz az idegen ágens eltávolításában.

A gyilkos T-sejtek elpusztítják és lebontják a baktériumok és vírusok által fertőzött sejteket, valamint a rákos sejteket. A gyilkos T-sejtek a vírusellenes immunitás fő elemei. A T-helper sejtek funkciója az adaptív immunválasz fokozása, az ilyen T-sejtek speciális anyagokat választanak ki, amelyek aktiválják a T-gyilkos választ.

A gyilkos T-sejtek és a segítő T-sejtek effektor T-limfociták, amelyek funkciója az immunválasz biztosítása. Vannak szupresszor T-sejtek is – szabályozó T-limfociták, amelyek szabályozzák az effektor T-sejtek aktivitását. Az immunválasz intenzitásának szabályozásával a szabályozó T-limfociták megakadályozzák az egészséges sejtek pusztulását a szervezetben, és megakadályozzák az autoimmun folyamatok előfordulását.

Normál limfocitaszám

A limfociták normál értékei minden életkorban eltérőek - ez az immunrendszer fejlődésének sajátosságaiból adódik.

Az életkorral csökken a csecsemőmirigy térfogata, amelyben a limfociták nagy része érik. 6 éves korig a limfociták dominálnak a vérben, az életkor előrehaladtával a neutrofilek válnak dominánssá.

• újszülött gyermekek - a leukociták teljes számának 12-36% -a;
• 1 hónapos élet - 40-76%;
• 6 hónapos korban - 42-74%;
• 12 hónapos korban - 38-72%;
• 6 éves korig - 26-60%;
• 12 éves korig - 24-54%;
• 13-15 éves korig - 22-50%;
• felnőtt - 19-37%.

A limfociták számának meghatározásához általános (klinikai) vérvizsgálatot végeznek. Egy ilyen vizsgálat segítségével meg lehet határozni a limfociták teljes számát a vérben (ezt a mutatót általában százalékban fejezik ki). Az abszolút értékek megszerzéséhez a számítás során figyelembe kell venni a leukociták teljes tartalmát.

A limfociták koncentrációjának részletes meghatározását immunológiai vizsgálat során végezzük. Az immunogram a B és T limfociták mutatóit tükrözi. A T-limfociták normál aránya 50-70%, (50,4±3,14)*0,6-2,5 ezer A B-limfociták normál aránya 6-20%, 0,1-0,9 ezer A T-helperek és a T- aránya a szupresszorok általában 1,5-2,0.

A T-limfociták szintjének növekedése és csökkenése

A T-limfociták számának növekedése az immunogramon az immunrendszer hiperaktivitását és az immunproliferatív rendellenességek jelenlétét jelzi. A T-limfociták szintjének csökkenése a sejtes immunitás hiányát jelzi.

Bármely gyulladásos folyamatban a T-limfociták szintje csökken. A T-sejtek koncentrációjának csökkenésének mértékét a gyulladás intenzitása befolyásolja, de ez a mintázat nem minden esetben figyelhető meg. Ha a T-limfociták megnövekednek a gyulladásos folyamat dinamikájában, ez kedvező jel. A T-sejtek megnövekedett szintje azonban a súlyos klinikai tünetek hátterében, éppen ellenkezőleg, kedvezőtlen jel, amely a betegség krónikus formába való átmenetét jelzi. A gyulladás teljes megszüntetése után a T-limfociták szintje eléri a normál értékeket.

A T-limfociták szintjének növekedését olyan rendellenességek okozhatják, mint például:

• limfocitás leukémia (akut, krónikus);
• Sézary-szindróma;
• az immunrendszer hiperaktivitása.

A T-limfociták a következő patológiákban csökkenthetők:

• krónikus fertőző betegségek (HIV, tuberkulózis, gennyes folyamatok);
• csökkent limfociták termelése;
• immunhiányt okozó genetikai rendellenességek;
• limfoid szövet daganatai (lymphosarcoma, lymphogranulomatosis);
• az utolsó szakasz vese- és szívelégtelensége;
• limfociták pusztulása bizonyos gyógyszerek (kortikoszteroidok, citosztatikumok) vagy sugárterápia hatására;
• T-sejtes limfóma.

A T-limfociták szintjét más vérelemekkel együtt kell értékelni, figyelembe véve a beteg tüneteit és panaszait. Ezért csak szakképzett szakember értelmezheti a vérvizsgálat eredményeit.

A CD8 antigént expresszáló sejteket két fő alpopuláció képviseli - a citotoxikus T-sejtek és a szuppresszor aktivitással rendelkező T-limfociták.

Idővel ismertté vált, hogy a CD8-at nem csak ezek a limfociták alpopulációi fejezik ki, hanem más sejtek egyedi klónjai is: makrofágok, természetes gyilkos sejtek (NK), hízósejtek, dendritikus sejtek (DC); a CD8 fő ligandumai az I. osztályú antigének a2 és a3 doménjei fő hisztokompatibilitási komplexum (MHC).

Ebből következik, hogy a CD8 egy nem specifikus marker citotoxikus limfociták (CTL)és T-szuppresszor limfociták, de e sejtek egyik fő fenotípusos jellemzőjének tekintik.

Éppen ezért a T-limfocita-szuppresszió szintjének objektív megítélésekor szükséges a CD8-at expresszáló sejtek szuppresszor aktivitásának vizsgálata egy erre a célra kifejlesztett módszerrel, hiszen csak a CD8 meghatározása nem ad okot arra, hogy beszéljünk sem a CD8 közös markerrel rendelkező T-limfociták citotoxikus vagy szuppresszor aktivitása.

A CD8+CD28 T-limfociták általános ismerete

A szuppresszor T-limfociták általános elképzelése már a múlt század 70-es éveiben kezdett kialakulni, és a 80-as évek közepére ismertté vált, hogy ezeket a sejteket különböző klónok képviselik, amelyek eltérőek előfordulásuk körülményeikben, kinetikában. formáció, a hatás jellemzői, a tulajdonságok sokfélesége, a kiválasztott közvetítők stb.

Ennek ellenére még akkor is B.D. Brondz megfogalmazta, hogy vannak közös jellemzőik, amelyek abban állnak, hogy képesek blokkolni más limfoid sejtek differenciálódását és aktivitását, és ez alapvetően megkülönbözteti őket a CTL-ektől. A T-szuppresszorok és más T-limfociták közötti különbségek közé tartozik az instabilitás, a különféle hatásokra való nagy érzékenység, a rövid élettartam stb.

Az akkori számos híres immunológus kutatásának köszönhetően (az akkori módszertani képességek segítségével) azonosították e sejtek egyes felszíni markereit, megállapították a többi sejttől való eltérésüket, valamint a T aktiválódásának egyes szakaszait és mechanizmusait. -elnyomókat azonosítottak.

Ennek eredményeként arra a következtetésre jutottak, hogy a T-szuppresszorok és különféle klónjaik olyan szabályozó sejtek, amelyek szabályozzák a celluláris és humorális immunitás közötti kapcsolatot, és nagymértékben meghatározzák a daganatokra, transzplantátumokra és vírusokra adott válasz intenzitását. Hozzá kell tenni, hogy ez az elképzelés alapvetően a mai napig nem változott.

Idővel a CD8+ T limfociták vizsgálata lehetővé tette annak megállapítását, hogy a szuppresszor aktivitású CD8+ T limfocitákra jellemző a CD28 molekulák expressziójának hiánya, így fenotípusukat CD8+CD28-ként határoztuk meg.

Amikor ezeket a sejteket különböző rendszerekben vizsgálták (különösen gyakran alkalmaztak vegyes limfocitatenyészetet), kimutatták, hogy számos gátló hatásuk van: az allogén sejtek által stimulált CD4 + T limfociták proliferációjának gátlása, az elsősorban sejthez kapcsolódó receptorok gátlása. aktiváció (IL-2 receptorok és transzferrin), a kostimuláló molekulák expressziójának elnyomása antigénprezentáló sejtek által, ami megakadályozza a CD4+ T limfociták optimális kölcsönhatását, a citokinek szekréciójának fenntartására való képtelenség stb.

Megállapítást nyert, hogy a CD8+CD28 T-limfociták gátló hatásuk kifejtése során felismerik a komplex MHC I. osztályú antigéneket - peptideket, ezen sejtek TCR-jének részvételével. Azt is megállapították, hogy a CD8+CD28 T-limfociták heterogén alpopulációt alkotnak.

Az ilyen típusú sejtek általános jellemzőinél fontos, hogy az ingerekre adott válaszként a proliferáció csökkenése jellemezze őket, gátolják a citotoxicitást, magas szintű CD11b, CD29, CD57, CD94 expresszióval rendelkezzenek alacsony CD25 szint mellett. CD8+CD28+T limfocitákhoz képest; A perifériás vér CD8+CD28 T-limfocitái szignifikánsan csökkentik a TCR-zéta lánc foszforilációját és magas a ciklin-dependens p16 kináz inhibitor szintje.

A CD8+CD28 T-limfocitákkal szigorúan kölcsönhatásba lépő monoklonális antitestek termelése lehetővé tette annak igazolását, hogy ezek független sejtklónt képviselnek, amely különbözik a citotoxikus limfocitáktól; ezen antitestek alkalmazása megszüntette a CD8+CD28-T limfociták gátló hatását mind in vivo, mind in vitro, de nem befolyásolta a CTL-ek funkcióit.

Monoklonális antitestek felhasználásával ezekben a sejtekben azonosították az egyik gangliozid epitópot, a CD75-öt, amely más sejtekben nem volt kimutatható, ami a fenotípusos jellemzők kiterjesztésének alapjául szolgált, amelyeket CD8+CD28-CD75+-ként határoztunk meg.

A CD8+CD28 T-limfociták általános biológiai jelentőségének megértése szempontjából fontos, hogy képesek kölcsönhatásba lépni a nyálkahártya hámsejtjeivel. Az ezzel a képességgel rendelkező CD8+CD28-T sejtek CD101-et és CD103-at expresszálnak, kölcsönhatásba lépnek a hámsejtekkel a p180 fehérjén keresztül, és szabályozó funkciókat látnak el.

A szerzők jogosan állapítják meg, hogy a nyálkahártyában vannak olyan CD8+CD28-CD101+CD103+T limfociták, amelyek helyi immunológiai kontrollt gyakorolnak. Ezekből az adatokból az következik, hogy a CD8 + CD28 T limfociták szabályozó hatásai nem korlátozódnak a Th1 limfocitákra, és szélesebb hatásspektrummal rendelkeznek.

A CD8+CD28-T limfociták és a hámsejtek kölcsönhatását az 1. ábra mutatja be. 58.

Rizs. 58. Kölcsönhatás a szupresszor T-limfociták és a hámsejtek között:
A CD101 egy glikoprotein, amely részt vesz a kostimulációban; CD103 - nyálkahártya limfocita antigén

A CD8+CD28 T-limfocitákkal kapcsolatos általános elképzeléseket a közelmúltban új adatokkal egészítették ki, amelyek feltárják mind a korábban ismeretlen gátló hatásukat, mind pedig a megvalósításukhoz szükséges útvonalakat és mechanizmusokat. Ilyen adatokat kaptunk mind a kísérleti vizsgálatok során, mind az egészséges egyének perifériás vérében lévő szuppresszor T-limfociták, valamint egyes patológiák vizsgálata során.

Jelentős érdeklődésre tart számot az az információ, hogy e sejtklón heterogenitásának fent említett ténye új megvilágításba kerül. A humán perifériás vér CD8+CD28 T-limfocitáinak tanulmányozása során három típust azonosítottak, amelyeket egyesített a T-limfociták antigén-specifikus válaszát gátló képessége.

Az első típust az jellemzi, hogy képes károsítani a kostimuláló molekulák expresszióját a DC-ken, amely hatás közvetlen intercelluláris kölcsönhatást igényel. A második kifejezett képességgel rendelkezik a citokinek, például az IFNy és az IL-6 szekréciójának gátlására, ami kötelező intercelluláris érintkezés nélkül történik. A harmadik IL-10 kiválasztásával közvetíti a hatását.

Fontos eredményekre jutottak a különböző korcsoportokba tartozó emberek perifériás vérében található CD28-at expresszáló és nem expresszáló T-limfociták tanulmányozása során. Először is kimutatták, hogy az életkor előrehaladtával a CD8+CD28 T-limfociták száma csökken, másodszor a stimuláció fitohemagglutinin(FGA) minden korcsoportban növeli ezen sejtklónok arányát, és nemcsak a CD8+CD28+-, hanem a CD8+CD28-T sejtek proliferációját is fokozza, utóbbiak magasabb proliferációjával idős egyénekben.

Végül azt találták, hogy a limfociták PHA-val történő kezelése az összes CD8+ T limfocita apoptózisához vezet, és az elhalt sejtek száma mindkét klónban azonos volt – bizonyíték arra, hogy az apoptózis képessége nem függ az életkortól. Ehhez hozzá kell adni azt az adatot, hogy a CD8+CD28 T-limfociták számának növekedése idős, azonosított patológiával nem rendelkező egyénekben magyarázhatja a proliferáció csökkenését, amihez a ciklin-dependens p16 proteinkináz aktivitásának növekedése társul.

Joggal feltételezhető, hogy ezek az új adatok a T-szuppresszor limfociták életkorral összefüggő változásainak további tanulmányozásával jelentősek lehetnek az immunológiai homeosztázis szabályozásának életkorral összefüggő sajátosságaiban betöltött szerepük tisztázásában.

Mára ismertté váltak a CD8+CD28 T-limfociták gátló hatásának főbb állomásai, melyek aktiválódása megtörténhet allogén, xenogén, valamint heterogén antigénprezentáló, antigénekkel feltöltött sejtek hatására. A szupresszor T-limfociták gátló hatásának megvalósításában a fő résztvevők: CD8 + CD28 + T-limfociták, antigénprezentáló sejtek és CD4 + T-helperek.

Ebben az esetben az antigénprezentáló sejtek egyfajta hídként működnek a T-szuppresszorok és a CD4+ T-limfociták között. A szupresszor T-limfociták gátló hatásának általános mechanizmusa a következőképpen ábrázolható: a humán CD8+CD28-T-limfociták aktivációja a fő hisztokompatibilitási komplex - peptid - komplex antigénjeik felismerésének eredményeként (a folyamat a TCR-szuppresszor sejtek részvétele) az antigénprezentáló sejteken, ami megfosztja őket attól, hogy kostimuláló molekulákat expresszáljanak, és ezért miután a T-helper limfociták felismerték az MHC II. osztályú antigének - peptidkomplexet, nem kapják meg a szükséges kostimuláló hatást. jelet ad, energikussá válik, és képtelenné válik az aktiválódásra és a burjánzásra. Ezt a folyamatot vázlatosan mutatja az ábra. 59.

Rizs. 59. A CD8+CD28~T-limfociták gátló hatásának szakaszai CD4+T-limfocitákon (helperek): APC - antigénprezentáló sejt

A szupresszor T-limfociták hatásmechanizmusának megértéséhez az is fontos, hogy gátló hatásuk kifejtéséhez ne legyen szükség sem proliferációra, sem fehérjeszintézisre. Ha a T-szuppresszor limfocitáktól származó gátló szignálokat alkalmaznak antigénprezentáló sejtekben, az NF-kappaB aktivitása gátolt, ami nagy szerepet játszik abban, hogy nem képesek kostimuláló jeleket küldeni a Th-limfocitáknak.

Amint már említettük, jelentős figyelmet fordítanak arra a kérdésre, hogy szükség van-e közvetlen érintkezésre antigénprezentáló sejtekkel ahhoz, hogy a CD8+CD28-T limfociták gátló hatást fejtsenek ki. Jelenleg a legtöbb szerző hajlamos azt hinni, hogy ilyen intercelluláris kapcsolatra van szükség.

A CD8+CD28 T-limfociták szabályozó képességeivel kapcsolatos ismereteink bővítését lehetővé tevő tényt szövettranszplantációs körülmények között, valamint autoimmun patológiás körülmények között történő tanulmányozása során szereztünk. A kapott adatok szerint a CD8+CD28 T-limfociták jelenléte nagymértékben meghatározza a transzplantáció sorsát.

Egészséges egyének és átültetett szívű emberek ezen perifériás vérsejtjeinek összehasonlító vizsgálata szignifikánsan kifejezettebb aktivációt mutatott a betegekben, mint az egészséges egyénekben, akiknél párhuzamosan expresszálták a CD38-at, a DR leukocita antigént és magasabb perforin-pozitív sejteket tartalmaztak.

Megállapították, hogy a CD27 expressziója kifejezettebb volt azon CD8+CD28-betegek sejtjein, akiknél nem volt transzplantált kilökődés, mint azoknál a betegeknél, akiknél a kilökődés jeleit mutatták. Ezen adatokkal összefüggésben a T-szuppresszor sejtek fontosságának egy másik aspektusa is azonosításra kerül: létezik a szabályozó sejtek CD8+CD28-CD27+ klónja, amely a graft védelmében játszik szerepet.

Azt is megállapították, hogy ezek a transzplantációból izolált sejtek nem mutatnak citotoxikus aktivitást a donorsejtekkel szemben, és magasabb a KIR94 expressziójuk – ez arra utal, hogy a transzplantáció fenotípusos változásokat okoz a T-szuppresszor limfocitákban.

Tekintettel arra, hogy a T-szuppresszor limfociták a transzplantáció után jelen vannak a vérben, valamint arra a képességükre, hogy elnyomják a kostimulátor molekulák (CD80, CD86) expresszióját a donor antigénprezentáló sejtjein, célszerű megfelelő monitorozást végezni a transzplantáció során.

Amint már jeleztük, a CD8+CD28 T-limfociták autoimmun patológiában történő vizsgálata szintén információkat szolgáltat ezen sejtek tulajdonságairól. Különösen azt találták, hogy az aktív fázisban lévő szisztémás lupus erythematosusban szenvedő betegeknél a CD8+CD28 T-limfociták nem mutattak gátló hatást, ami az IL-6 gátló hatása és az IL stimuláló hatása közötti egyensúlyhiánnyal párosult. -12.

A T-szuppresszor limfociták azon képessége, hogy elnyomják az antigén-specifikus CD4+T limfociták proliferációját, összefüggésbe hozható a remisszió megjelenésével autoimmun patológiás betegeknél. In vitro rendszerekben sikerült jellemezni a CD8+CD28-T limfociták prekurzorait, és kimutatni, hogy létrejöttükben kulcsszerepet játszanak a monociták, amelyek GM-CSF-fel (ebben az esetekben direkt) stimuláció után IL-10-et választanak ki. sejt-sejt kapcsolat nem játszik jelentős szerepet).

A progenitorok CD8+CD45RA-CD27-CCR-IL10Ra- fenotípusúak. Azt is kimutatták, hogy a T-szuppresszor limfociták elnyomják az antigén-specifikus citotoxikus limfociták aktivitását, csökkentve a fő hisztokompatibilitási komplex I. osztályú antigénjeinek expresszióját.

A bemutatott adatok nem hagynak kétséget afelől, hogy a CD8+CD28 T limfociták fontos szerepet játszanak az immunológiai homeosztázis fenntartásában a CD4+ szabályozó T limfociták mellett.

Elegendő bizonyíték áll rendelkezésre ahhoz, hogy elhiggyük, hogy e sejtek egyik fő funkciója egy specifikus T-sejtes válasz szabályozása. A szupresszor T-limfociták aktiválása fiziológiás körülmények között történő specifikus felismerés révén megvédi a Th-limfocitákat a túlzott aktivációtól, és ezáltal a túlzott immunológiai választól bizonyos körülmények között, különösen akkor, ha a reaktív T-helper sejtek száma nő.

A rendelkezésre álló adatok azt mutatják, hogy a T-szuppresszor limfociták gátló hatása a perifériás tolerancia kiváltásának egyik fontos szereplője, és ezeknek a sejteknek a szabályozásának diszregulációja más T-limfociták autoreaktív klónjaival szemben az oka lehet a limfociták kialakulásának. autoimmun patológia.

Ezzel együtt nem lehet egyet érteni azzal, hogy a CD8 + CD28 T-limfociták szerepének élettani jelentőségének megértése további tanulmányokat igényel, amelyek új adatokkal szolgálnak hatásmechanizmusukról daganatos és autoimmun patológiákban.

A CD8+CD28 T-limfociták általános elképzelését az 1. ábra mutatja. 60.

Rizs. 60. A CD8+CD28-T limfociták fenotípusos és funkcionális jellemzői

A szupresszor T-limfociták szabályozási funkciói

A szuppresszor CD8+CD28 T-limfociták tanulmányozásának eredményei nem hagynak kétséget afelől, hogy fontos szabályozó funkciókat látnak el, amelyek normális körülmények között meglehetősen egyértelműen meghatározottak.

Szintén jogos azt állítani, hogy mind a szupresszor T-limfociták (CD8+CD28-), mind a szabályozó CD4+CD25+T-limfociták (Th3/Trl) együttesen vesznek részt az immunológiai homeosztázis szabályozásában a kialakulásának minden szakaszában.

Ezzel együtt az is nyilvánvaló, hogy ha a szupresszor T-limfociták szerepe normális körülmények között teljesen egyértelmű, akkor ezeknek a sejteknek a rosszindulatú növekedésben betöltött szerepe a jövőben tisztázásra vár. Ebben a tekintetben különösen érdekes a kérdés: milyen körülmények között tesznek szert a CD8+CD28-T-szuppresszorok arra, hogy citotoxikus hatást fejtsenek ki – ez a tény csak akkor volt megfigyelhető, amikor tumorsejtekkel tenyésztették őket.

Ennek a kérdésnek a részletezése (minden esetben lehetséges-e a citotoxikussá válás képessége, ez mennyiben függ össze a tumorsejtek biológiai jellemzőivel, milyen arányban vannak ezek a sejtek a citotoxicitás megvalósításában és mi a mechanizmusa a citotoxikussá válásnak a tumorsejtek CD8+CD28-T limfocitákra gyakorolt ​​hatása) kétségtelenül új betekintést nyújt a T-szuppresszor limfociták szerepébe a tumorfolyamatban.

Nem kevésbé fontos a T-szuppresszor limfociták és az endotélsejtek közötti kölcsönhatás jellemzőinek további tanulmányozása a tumornövekedés során. A kérdés tisztázása iránti érdeklődés érthető abból a tényből adódóan, hogy a CD8+CD28 T-limfociták és az endothelsejtek kölcsönhatása az utóbbiak aktivitásának kifejezett megnyilvánulásaihoz vezet, ami befolyásolhatja a rosszindulatú átalakulás folyamatát.

A bemutatott anyagokat összegezve a következő következtetéseket vonhatjuk le:

Első

A T-szuppresszor limfociták - CD8+CD28- a CD8-at expresszáló T-limfociták külön klónjai, kifejezett gátló hatásuk van a CD4+T-limfocitákra, és képesek kölcsönhatásba lépni az endotélsejtekkel; fontos szerepet játszanak az immunológiai homeosztázis fenntartásában normál és patológiás körülmények között.

Második

A szupresszor T-limfociták gátló hatása intercelluláris kölcsönhatásoknak köszönhető, amelyekben a CD8+CD28-T-limfociták mellett dendritikus sejtek és CD4+T-limfociták vesznek részt.

Harmadik

A legtöbb esetben különböző onkológiai betegségek esetén a CD8 + CD28 T-limfociták száma a vérben megnő, ami gyakran rossz prognózissal párosul; a daganatba beszűrődő limfociták is jelentős számban tartalmazzák ezeket a sejteket.

Negyedik

Ha T-szuppresszor limfocitákat autológ tumorsejtekkel együtt tenyésztenek, CD8+CD28-T limfociták jelennek meg, amelyek citotoxikus hatást fejtenek ki.

Ötödik

A hatás monitorozására a CD8+CD28 T-limfociták számának meghatározása használható

Aktivációs zavar esetén T limfociták normál vagy megnövekedett számú T-sejt jelenléte jellemzi a vérben. Ezek a sejtek megtartják a normál fenotípust, de a receptoroktól a sejtbe irányuló jel átvitele károsodott. Ezért nem szaporodnak és nem termelnek citokineket, ha mitogének, antigének vagy a TCR egyéb jelei stimulálják őket.

A klinikai megnyilvánulások szerint az ilyen hibák hasonlóak más típusú hiányosságokhoz, és bizonyos esetekben megkülönböztethetetlenek a súlyos kombinált immunhiánytól.

CD8 lymphopenia a zéta-asszociált protein 70 gén mutációja miatt

Betegségben szenvedő betegeknél T-sejt aktiválás Súlyos, visszatérő és gyakran végzetes fertőzések csecsemőkorban alakulnak ki. A legtöbb esetet a mennoniták körében azonosították. A B-limfociták száma a vérben normális vagy megnövekedett; az immunglobulinok koncentrációja a szérumban változó. A CD3 és CD4 felületi antigének expressziója a T-limfocitákon megmarad, de a CD8 sejtek szinte teljesen hiányoznak.

Nem reagálnak mitogénekre vagy allogén sejtekre in vitro, és nem termelnek citotoxikus T-limfocitákat. Az NK-sejtek aktivitása megmarad. Az egyik beteg csecsemőmirigye normális szerkezetű volt, és mindkét felszíni markerrel - CD4 és CD8 - sejtjei voltak. A CD8 sejtek azonban hiányoztak. Ezt az állapotot a zéta-asszociált protein 70-et (ZAP-70) kódoló gén mutációi okozzák, amely egy tirozin-kináz, amely nem tartozik az Src családba, és fontos szerepet játszik a T-limfocitákhoz történő jelátvitelben.

ZAP-70 gén a 2. kromoszóma hosszú karján található (ql2 szakasz). A mindkét markerrel (CD4 és CD8) rendelkező T-limfociták normál száma azzal magyarázható, hogy a pozitív szelekcióhoz egy másik tirozin-kináz, a Syk is használható. A Syk szintje a timocitákban 4-szer magasabb, mint a perifériás T-limfocitákban, ami nyilvánvalóan meghatározza a vér CD4 sejtek normális reakciójának hiányát.

p56-Isk hiány. Egy 2 hónapos kisfiúnál, aki bakteriális, vírusos és gombás fertőzésekben szenvedett, limfopéniát és hipogammaglobulinémiát találtak. B- és NK-sejtek voltak jelen a vérben, de a CD4 T-limfociták száma alacsony volt. A mitogénekre adott válaszok következetlenek voltak. A TCR stimuláció nem eredményezett CD69 expressziót. Amikor azonban forbol-mirisztát-acetáttal és a CD69 kalcium-ionoforral (ami egy aktiválási marker) stimulálták, megjelent a T-limfocitákon, jelezve a sejtekbe jutó jelút proximális szakaszainak hibáját.

Molekuláris kutatás feltárta a transzkriptum alternatív splicingjét, ami a kináz domén hiányát eredményezte a p56-lck-ben.