A bakteriológiai laboratórium tanul. Bakteriológiai laboratórium - laboratóriumok, paraklinikák

Bevezetés

Mint minden más tudomány általános része, az általános bakteriológia sem konkrét kérdésekkel (mondjuk az egyes baktériumfajok azonosításával) foglalkozik, hanem általában a problémákkal; módszertana olyan alapvető eljárásokra terjed ki, amelyeket széles körben alkalmaznak a legkülönfélébb laboratóriumi vizsgálatokban. Ennek az oktatási segédletnek nem célja a mikroorganizmusok egyetlen csoportjának azonosítása sem. Ez a feladat a következő publikációkban - a magán- és egészségügyi mikrobiológiáról. Az itt bemutatott módszerek azonban hasznosak lehetnek minden olyan területen, ahol baktériumok érintettek, és alkalmazhatók a baktériumok izolálásával és tipizálásával kapcsolatos gyakorlati problémákra.

A bakteriológia csak azután vált tudománygá, hogy olyan egyedi technikákat fejlesztettek ki, amelyek révén továbbra is befolyásolja és behatol a későbbi tudományos területekre, mint például a virológia, az immunológia és a molekuláris biológia. Az R. Koch által kifejlesztett tiszta tenyészetek alkalmazási technikája és az immunológiai reakciók és a kémiai elemzések, amelyeket először L. Pasteur alkalmazott, nem veszítették el jelentőségét.

Ez a kiadvány az általános bakteriológia módszertanát tükrözi, az e tudományág standard tankönyveire jellemző szerkezettel. Az egyetemi mikrobiológiai kurzus laboratóriumi műhelyeivel ellentétben azonban egyes részekben részletesebben is bemutatásra kerül, és csak tájékoztató jellegű. Ez a struktúra figyelembe veszi a bakteriológusok és állatorvosok speciális képzését és specializációját. Az anyagot gyakran önkényesen mutatják be, így egyes módszereket többször is megemlítenek, a kölcsönös kapcsolatuk bemutatása miatt.

Bakteriológiai laboratórium

A bakteriológiai laboratóriumok, mint szerkezeti egységek a regionális, járási, járásközi állatorvosi laboratóriumok részeként, valamint övezeti állatorvosi laboratóriumok struktúrájában szerveződnek. Szervezik egészségügyi és járványügyi felügyeleti központokban, fertőzőkórházakban, általános kórházakban, egyes szakkórházakban (például tuberkulózis, reumatológia, dermatovenerológia) és poliklinikákon. A bakteriológiai laboratóriumok speciális kutatóintézetek részét képezik. Folyamatosan bakteriológiai laboratóriumokat vesznek igénybe a hús VSE szerinti élelmiszer-felhasználási alkalmasságának megerősítésére, illetve értékelésére.

A bakteriológiai laboratóriumokban végzett kutatások tárgyai:

1. Váladékozás a szervezetből: vizelet, széklet, köpet, genny, valamint vér, kóros és holttest.

2. A külső környezet tárgyai: víz, levegő, talaj, berendezésekből származó kimosások, takarmányok, haszonállatok levágásából nyert technológiai alapanyagok.

3. Élelmiszeripari termékek, hús- és húskészítményminták, tej és tejtermékek, amelyek élelmiszeripari célra való alkalmasságát értékelni kell.

Bakteriológiai laboratórium helyiségei és munkahelyi berendezései

A mikrobiológiai munka sajátosságai megkövetelik, hogy a laboratórium számára elkülönített helyiséget el kell különíteni a lakóhelyiségektől, az élelmiszer-egységektől és az egyéb nem alaptermelő helyiségektől.

A bakteriológiai laboratórium a következőket tartalmazza: bakteriológiai kutatás laboratóriumi helyiségei és használati helyiségei; autokláv vagy sterilizálás hulladék anyagok és szennyezett edények fertőtlenítésére; mosogatáshoz felszerelt mosóhelyiség; bakteriológiai konyha – tápközegek elkészítésére, palackozására, sterilizálására és tárolására; Vivárium kísérleti állatok tartására; tartalék reagensek, edények, berendezések és háztartási felszerelések tárolására szolgáló anyagok.

A felsorolt ​​használati helyiségek, mint önálló szerkezeti egységek nagy bakteriológiai laboratóriumok részét képezik. Kislaboratóriumokban a bakteriológiai konyhát és a sterilizáló konyhát egy helyiségben egyesítik; Kísérleti állatok tartására nincs külön helyiség.

A mikrobiológiai laboratóriumok helyiségei a személyzet veszélyeztetettsége szerint 2 zónára vannak osztva:

I. „Fertőző” zóna - olyan helyiség vagy laboratóriumi helyiségek csoportja, ahol patogén biológiai ágenseket kezelnek és tárolnak, a személyzet megfelelő típusú védőruházatot visel.

II. „Tiszta” zóna - olyan helyiségek, ahol nem végeznek munkát biológiai anyagokkal, a személyzet személyes ruházatban van.

A legvilágosabb, legtágasabb helyiségek a laboratóriumi helyiségek számára vannak kijelölve, ahol minden bakteriológiai vizsgálatot végeznek. Ezekben a szobákban a falak a padlótól 170 cm magasságig világos színűre vannak festve olajfestékkel vagy csempével burkolva. A padlót relin vagy linóleum borítja. Ez a fajta felület lehetővé teszi fertőtlenítő oldatok használatát a helyiség tisztítása során.

Minden szobában legyen egy mosogató folyóvízzel és egy polc egy üveg fertőtlenítő oldat számára.

Az egyik helyiség üvegdobozsal van felszerelve - egy elszigetelt helyiség előszobával (elődoboz) az aszeptikus körülmények közötti munkavégzéshez. A dobozba vetőasztal és zsámoly kerül, a munkahely fölé baktericid lámpák vannak felszerelve. Az előkamrában egy szekrény van elhelyezve a steril anyagok tárolására. A „fertőző” zónában lévő helyiségek ablakait és ajtóit le kell zárni. A „fertőző” zónából származó elszívó szellőzést el kell szigetelni a többi szellőzőrendszertől, és finom légszűrőkkel kell felszerelni.

A laboratóriumi helyiség laboratóriumi típusú asztalokkal, szekrényekkel, polcokkal van felszerelve a munkavégzéshez szükséges eszközök, edények, festékek, reagensek tárolására.

A bakteriológus és a laboráns munkahelyének megfelelő megszervezése nagyon fontos a munkavégzés szempontjából. A laboratóriumi asztalok az ablakok közelében vannak felszerelve. Elhelyezésüknél törekedni kell arra, hogy a lámpa a dolgozó elé vagy oldalára, lehetőleg a bal oldalra, de semmi esetre se hátulról essen. Javasoljuk, hogy az elemzéshez, különösen a mikroszkópiához, az ablakok északi vagy északnyugati irányúak legyenek, mivel a munkához egyenletes, szórt fényre van szükség. A munkaasztalok felületének megvilágítása 500 lux legyen. A fertőtlenítés megkönnyítése érdekében a laboratóriumi asztalok felületét műanyaggal borítják, vagy vassal kárpitozzák. Minden laboratóriumi dolgozó külön 150 x 60 cm méretű munkahelyet kap.

Valamennyi munkahely fel van szerelve a mindennapi bakteriológiai munkához szükséges eszközökkel, melyek listáját az 1. táblázat tartalmazza.

Asztal 1.

A bakteriológiai munkához szükséges tárgyak

Termék név	Hozzávetőleges mennyiség
1. Festék- és reagenskészlet festéshez
2. Üvegcsúszdák	25-50
3. Takarja le a poharakat	25-50
4. Szemüvegek lyukakkal	5-10
5. Kémcsőtartó állvány
6. Bakteriális hurok
7. Üveg spatulák
8. Fém spatulák
9. Jar vatta
10. 1, 2, 5, 10 ml-es beosztású pipetták	minden kötetből 25
11. Pasteur pipetták	25-50
12. Csipesz, olló, szike	1-től
13. Tartályok fertőtlenítő oldatokkal
14. Mikroszkóp megvilágítóval
15. Nagyító 5'
16. Olajozó merülőolajjal
17. Szűrőpapír	3-5 lap
18. Üveg fertőtlenítő oldattal pipettákhoz
19. Alkohol- vagy gázégő
20. Színező készítmények telepítése
21. Homokóra 1 vagy 2 percig	1-től
22. Körte gumicsővel
23. Ceruza üvegen
24. Korsó alkoholos vatta
25. Szükséges steril edények	-

Fertőtlenítés

A fertőtlenítés a mikroorganizmusok elpusztítása a környezeti tárgyakban.

A mikrobiológiai laboratóriumokban nagyon széles körben alkalmazzák a fertőtlenítő intézkedéseket. A fertőző anyagokkal végzett munka befejezésekor a bakteriológiai laboratóriumok dolgozói megelőzően fertőtlenítik a kezüket és a munkahelyüket.

Az elhasznált kóros anyagokat (ürülék, vizelet, köpet, különféle folyadékok, vér) fertőtlenítik, mielőtt a csatornába dobják.

A kóros anyaggal vagy mikrobakultúrával szennyezett graduált és Pasteur pipettákat, üveglapátokat és fémeszközöket használatuk után azonnal az asztalon elhelyezett fertőtlenítő oldattal ellátott üvegedényekbe engedik le.

A munkavégzés során használt tárgylemezeket és fedőpoharakat is kötelező fertőtleníteni, mivel még a rögzített és festett kenet is időnként életképes mikroorganizmusokat tart fenn, amelyek laboratóriumon belüli szennyeződés forrásai lehetnek. Csak azokat az edényeket nem kezelik fertőtlenítőszerrel, amelyekben mikroorganizmusokat termesztettek. Fémtartályokba vagy tartályokba helyezik, lezárják és autoklávozásra bocsátják.

A fertőtlenítőszer megválasztását, oldatának koncentrációját, a fertőtlenítőszer mennyisége és a fertőtlenítendő anyag arányát, valamint a fertőtlenítés időtartamát az adott körülmények függvényében határozzák meg, mindenekelőtt a stabilitást figyelembe véve. a fertőtlenített mikrobákról, a várható szennyezettség mértékéről, annak az anyagnak az összetételéről és állagáról, amelyben találhatók.

Kézfertőtlenítés a fertőző anyaggal végzett munka és a bőrrel való érintkezés után. A fertőző anyaggal végzett munka befejezése után a kezet profilaktikusan fertőtlenítjük. Egy vattakorongot vagy gézszalvétát 1%-os klóramin oldattal megnedvesítünk, először a bal, majd a jobb kezét töröljük le a következő sorrendben: kézhát, tenyérfelszín, ujjközi terek, körömágyak. Így először a legkevésbé szennyezett területeket kell kezelni, majd tovább kell lépni a bőr legerősebben szennyezett területeire. Két egymás utáni tamponnal törölje meg a kezét 2 percig. Ha a kezek kórokozó mikroba vagy kóros anyag tenyészetével szennyeződnek, először a bőr szennyezett területeit fertőtlenítik. Ebből a célból 3-5 percre letakarják 1%-os klóramin oldattal megnedvesített vattával, majd a vattát hulladékanyaggal ellátott tartályba vagy vödörbe öntik, és a kezet ugyanabban a második pálcikával kezelik. úgy, mint a megelőző fertőtlenítés során. A klóraminnal végzett kezelés után mosson kezet meleg vízzel és szappannal. Ha spórákat képző baktériumokkal dolgozik, a kézkezelést 1% aktivált klóraminnal végezzük. Ha fertőző anyag kézzel érintkezik, a fertőtlenítőszerrel való érintkezés 5 percre nő.

Sterilizáció

A sterilizálás a fertőtlenítéssel ellentétben magában foglalja az összes vegetatív és spórát hordozó, kórokozó és nem patogén mikroorganizmus elpusztítását a sterilizálandó tárgyban. A sterilizálást különféle módokon hajtják végre: gőzzel, száraz forró levegővel, forralással, szűréssel stb. Az egyik vagy másik sterilizációs módszer kiválasztását a sterilizálandó tárgy mikroflórájának minősége és tulajdonságai határozzák meg.

Laboratóriumi eszközök előkészítése, sterilizálása

Sterilizálás előtt a laboratóriumi üvegedényeket kimossák és szárítják. A kémcsöveket, fiolákat, palackokat, matracokat és lombikokat pamut-gézdugóval zárják le. Helyezzen papírsapkát az egyes edények dugóira (kivéve a kémcsöveket).

A gumi-, parafa- és üvegdugókat az edény nyakára kötözött külön zacskóban sterilizálják. A Petri-csészéket papírba csomagolva sterilizáljuk, egyenként 1-10 darabot. Pasteur pipetta 3-15 db. csomagolópapírba csomagolva. Mindegyik pipetta tetejére egy darab vattát helyezünk, hogy az anyag ne kerüljön a környezetbe. A pipetták becsomagolásakor nagyon ügyelni kell arra, hogy a kapillárisok lezárt vége ne törjön le. Működés közben a pipettákat a felső végénél távolítják el a tasakból.

A Pasteur pipettákhoz hasonlóan a beosztásos pipetták felső részébe biztonsági vattát helyezünk, majd vastag papírba csomagoljuk, előre vágjuk 2-2,5 cm széles és 50-70 cm hosszú csíkokra A csíkot az asztalra helyezzük, a A bal végét behajtjuk és becsavarjuk a pipetta hegyét, majd a pipettát forgatva tekerjünk rá egy papírcsíkot. A papír kihajtásának megakadályozása érdekében a másik végét csavarják vagy ragasztják. A papírra fel van írva a becsomagolt pipetta térfogata. Ha vannak tolltartók, azokban a beosztásos pipettákat sterilizálják.

A laboratóriumi üvegedényeket sterilizálják:

a) száraz hő 180°C, illetve 160°C hőmérsékleten 1 óra 150 percig.

b) autoklávban 1,5 atm nyomáson. 60 percig, a spóra mikroflóra elpusztítására - 90 percig 2 atm.

A fecskendők sterilizálása. A fecskendőket szétszerelt formában sterilizáljuk: külön a hengert és a dugattyút 2% -os nátrium-hidrogén-karbonát-oldatban 30 percig. A spórás mikroflórával végzett munka során a sterilizálást autoklávban 132±2°C-on (2 atm.) 20 percig, 126±2°C-on (1,5 atm.) - 30 percig végezzük. A sterilizált fecskendőt lehűlés után összeszerelik, dugattyút helyeznek a hengerbe, tűt helyeznek rá, miután először eltávolították belőle a tüskét. A tűt, a hengert és a dugattyút csipesszel veszik, amelyeket a fecskendővel együtt sterilizálnak.

Fémműszerek sterilizálása. A fémeszközöket (olló, szike, csipesz stb.) 2%-os nátrium-hidrogén-karbonát oldatban sterilizálják, ami megakadályozza a rozsdásodást és az élesség elvesztését. Javasoljuk, hogy a szike és olló pengéit vattával tekerje be, mielőtt belemerítené őket az oldatba.

Bakteriális hurkok sterilizálása. A platina- vagy nikrómhuzalból készült bakteriális hurkokat alkohol- vagy gázégő lángjában sterilizálják. Ezt a sterilizálási módszert kalcinálásnak vagy flambírozásnak nevezik.

A hurok vízszintes helyzetbe kerül az égő lángjának alsó, leghidegebb részébe, hogy megakadályozzuk az elégett kórokozó anyag kifröccsenését. Égése után a hurkot függőleges helyzetbe hozzuk, először a huzal alsó, majd a felső részét vörösre melegítjük és a huroktartót átégetjük. A kalcinálás általában 5-7 másodpercet vesz igénybe.

Előkészítés papír, géz és vatta sterilizálására és sterilizálására. A vattát, gézt, szűrőpapírt 160°C-os száraz hőkemencében sterilizálják a hőmérő leolvasásától számított egy órán belül, vagy autoklávban 1 atm nyomáson. 30 percen belül.

Sterilizálás előtt a papírt és a gézt darabokra vágják, és a vattát a szükséges méretű golyókba vagy tamponokba görgetik. Ezt követően minden anyagfajtát külön-külön, egy vagy több darabot vastag papírba csomagolnak. Ha a csomagolás eltörik, a sterilizált anyagot újra sterilizálni kell, mert a sterilitása romlik.

Kesztyűk és egyéb gumitermékek sterilizálása. A mikrobák vegetatív formájával szennyezett gumitermékeket (kesztyűket, tubusokat stb.) 2%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldatban történő forralással vagy 30 perces vízgőzzel sterilizálnak; ha spórás mikroflórával szennyezett, autoklávban 1,5-2 atm nyomáson. 30 vagy 20 percig. Sterilizálás előtt a gumikesztyűket kívül-belül meghintjük talkummal, nehogy letapadjanak. A kesztyűk közé géz kerül. Minden pár kesztyűt külön-külön gézbe csomagolunk, és ebben a formában dobozokba helyezzük.

Patogén mikrobiális tenyészetek sterilizálása. A további munkához nem szükséges mikrobatenyészetet tartalmazó kémcsöveket és csészéket fémtartályba helyezzük, a fedelet lezárjuk és sterilizálásra helyezzük. A patogén mikrobák, vegetatív formák tenyészeteit autoklávban 30 percig 1 atm nyomáson elpusztítják. A sterilizálásra szánt tartályok autoklávba szállítását erre a célra kijelölt személy végzi aláírás ellenében. A sterilizálási rendszert egy speciális naplóban rögzítik. Az I. és II. patogenitási csoportba tartozó mikrobák tenyészeteinek megsemmisítésekor, valamint az e csoportba tartozó kórokozókkal szennyezett vagy fertőzött anyaggal szennyezett anyagok megsemmisítésekor a hulladékanyagot tartalmazó tartályokat magas oldalú fémtálcákon kell áthelyezni egy arra feljogosított kísérő jelenlétében. fertőző anyagokkal dolgozni.

A sterilizálás típusai

Sterilizálás forralással. A forralással történő sterilizálást sterilizátorban végezzük. Desztillált vizet öntünk a sterilizátorba, mivel a csapvíz vízkövet képez. (Az üvegtárgyakat hideg vízbe, a fémtárgyakat nátrium-hidrogén-karbonát hozzáadásával forró vízbe merítjük). A sterilizálandó tárgyakat alacsony lángon 30-60 percig forraljuk. A sterilizálás kezdetének azt a pillanatot kell tekinteni, amikor a víz felforr a sterilizátorban. A forralás végén steril csipesszel veszik a műszereket, amelyeket más tárgyakkal együtt felforralnak.

Száraz hő sterilizálás. A száraz hősterilizálás Pasteur kemencében történik. A sterilizálásra előkészített anyagot úgy helyezzük a polcokra, hogy ne érintkezzen a falakkal. A szekrény zárva van, majd bekapcsolja a fűtést. A sterilizálás időtartama 150°C-on 2 óra, 165°C-on – 1 óra, 180°C-on – 40 perc, 200°C-on – 10-15 perc (170°C-on papír-vattaforgatás) sárga, magasabb hőmérsékleten pedig elszenesedett). A sterilizálás kezdetének azt a pillanatot kell tekinteni, amikor a sütő hőmérséklete eléri a kívánt magasságot. A sterilizálási időszak végén a sütőt kikapcsolják, de a szekrényajtókat csak akkor nyitják ki, amíg teljesen ki nem hűlt, mivel a szekrénybe jutó hideg levegő repedéseket okozhat a forró edényeken.

Gőzsterilizálás nyomás alatt. A nyomás alatti gőzsterilizálást autoklávban végezzük. Az autokláv két egymásba helyezett kazánból, egy burkolatból és egy fedélből áll. A külső kazánt víz-gőz kamrának, a belsőt sterilizáló kamrának nevezik. A gőz egy víz-gőz kazánban keletkezik. A sterilizálandó anyagot a belső üstbe helyezzük. A sterilizáló kazán tetején kis lyukak vannak, amelyeken keresztül a víz-gőz kamrából származó gőz áthalad. Az autokláv fedele hermetikusan a házhoz van csavarozva. A felsorolt ​​főbb részeken kívül az autoklávnak számos, a működését szabályozó alkatrésze van: nyomásmérő, vízmérő üveg, biztonsági szelep, kimeneti, levegő- és kondenzációs szelepek. A nyomásmérő a sterilizáló kamrában keletkező nyomás meghatározására szolgál. A normál légköri nyomást (760 Hgmm) nullának tekintjük, ezért az üresjárati autoklávban a nyomásmérő mutatója nullán áll. Van egy bizonyos kapcsolat a nyomásmérő leolvasása és a hőmérséklet között (2. táblázat).

2. táblázat.

Kapcsolat a nyomásmérő leolvasása és a víz forráspontja között

A nyomásmérő skáláján lévő piros vonal határozza meg az autoklávban megengedett legnagyobb üzemi nyomást. A biztonsági szelep a túlzott nyomásképződés elleni védelemre szolgál. Adott nyomásra van beállítva, vagyis arra a nyomásra, amelyen a sterilizálást végre kell hajtani, amikor a nyomásmérő tűje keresztezi a vonalat, az autokláv szelepe automatikusan kinyílik és kiengedi a felesleges gőzt, ezzel lelassítva a nyomás további emelkedését.

Az autokláv oldalfalán egy vízmérő üveg található, amely a vízgőz kazán vízszintjét mutatja. A vízmérő üvegcsövén két vízszintes vonal található - alsó és felső, jelezve a vízgőzkamra megengedett alsó és felső vízszintjét. A levegőszelepet úgy tervezték, hogy a sterilizálás kezdetén eltávolítsa a levegőt a sterilizáló és a víz-gőz kamrából, mivel a levegő, mivel rossz hővezető, megzavarja a sterilizálási rendszert. Az autokláv alján egy kondenzvízcsap található, amely megszabadítja a sterilizáló kamrát a sterilizált anyag melegítési periódusa során keletkező kondenzátumtól.

Az autoklávval végzett munka szabályai. A munka megkezdése előtt ellenőrizze az autoklávot és a vezérlőberendezést. Az automatikus gőzvezérlésű autoklávokban a víz-gőzkamra elektromos vákuumnyomásmérőjén lévő nyilak a sterilizálási módnak megfelelően vannak beállítva: az alsó nyíl 0,1 atm-re van állítva. alsó, felső - 0,1 atm. üzemi nyomás felett a víz-gőz kamra a mérőüveg felső jeléig vízzel van feltöltve. A vízzel való feltöltés ideje alatt a cső szelepét, amelyen keresztül a gőz belép a kamrába, nyitva tartják, hogy a levegő szabadon távozhasson a kazánból. Az autokláv sterilizáló kamrája meg van töltve a sterilizálandó anyaggal. Ezt követően az autokláv fedelét (vagy ajtaját) zárjuk, központi zárral vagy csavarokkal szorosan rögzítjük; a torzulás elkerülése érdekében csavarja keresztbe a csavarokat (az átmérő mentén). Ezután kapcsolja be a fűtőforrást (villamos áram, gőz), zárja el a gőzforrást a sterilizáló kamrával összekötő cső szelepét. A gőzképződés kezdetével és a víz-gőz kamrában a nyomás létrejöttével öblítést hajtanak végre (levegő eltávolítása a sterilizáló kazánból). A levegő eltávolításának módját az autokláv kialakítása határozza meg. Eleinte a levegő külön-külön adagokban távozik, majd egyenletes, folyamatos gőzáram jelenik meg, jelezve, hogy a levegő teljesen kiszorult a sterilizáló kamrából. A levegő eltávolítása után a csap elzáródik, és a sterilizáló kamrában fokozatos nyomásnövekedés kezdődik.

A sterilizálás kezdetének azt a pillanatot kell tekinteni, amikor a nyomásmérő tűje a beállított nyomást mutatja. Ezt követően a fűtési intenzitást lecsökkentjük, hogy az autoklávban a nyomás a szükséges ideig azonos szinten maradjon. A sterilizálási idő végén a melegítés leáll. Zárja el a sterilizáló kamrába gőzt szállító csővezeték szelepét, és nyissa ki a kondenzációs (le) cső szelepét, hogy csökkentse a kamrában lévő gőznyomást. Miután a nyomásmérő tű nullára süllyedt, lassan lazítsa meg a szorítóeszközöket, és nyissa ki az autokláv fedelét.

A sterilizálás hőmérsékletét és időtartamát a sterilizálandó anyag minősége és a fertőzött mikroorganizmusok tulajdonságai határozzák meg.

A sterilizáló kamrában a hőmérsékletet rendszeresen bakteriológiai tesztekkel szabályozzák. A bioteszteket az Érzékeny Tudományok Központja bakteriológiai laboratóriumai készítik. Ha ezek a tesztek nem felelnek meg, ellenőrizni kell az autokláv műszaki állapotát.

Sterilizálás áramló gőzzel. Az áramló gőzzel történő sterilizálást Koch áramló gőzkészülékben vagy autoklávban hajtják végre lecsavart fedéllel és nyitott kilépőszeleppel. A Koch-készülék egy fém üreges henger, kettős fenékkel. A felső és az alsó alsó lapok közötti teret 2/3-ig töltik fel vízzel (van egy csap, amely a sterilizálás után a maradék vizet leengedi). A készülék fedelének közepén egy lyuk van a hőmérő számára, és több kis lyuk a gőz távozásához. A sterilizálandó anyagot lazán töltik be a készülék kamrájába, így biztosítva a gőzzel való maximális érintkezést. A sterilizálás kezdetének azt az időpontot kell tekinteni, amikor a víz felforr, és a gőz belép a sterilizáló kamrába. Folyékony gőzkészülékben főként a tápközegeket sterilizálják, amelyek tulajdonságai 100°C feletti hőmérsékleten megváltoznak. Az áramló gőzzel történő sterilizálást meg kell ismételni, mivel egyetlen 100°C-os melegítés nem biztosítja a teljes fertőtlenítést. Ezt a módszert frakcionált sterilizálásnak nevezik: a sterilizált anyagot 3 napon keresztül naponta 30 percig áramló gőzzel kezelik. A sterilizálások közötti időközökben az anyagot szobahőmérsékleten tartják, hogy a spórák vegetatív formába csírázzanak, amelyek a későbbi melegítés során elhalnak.

Tindalizáció. A Tyndall a Tyndall által javasolt frakcionált sterilizálást jelenti 100 °C alatti hőmérsékleten. A sterilizálandó anyagot termosztáttal felszerelt vízfürdőben egy órán át 60-65°C-on 5 napig, illetve 70-80°C-on 3 napig melegítjük. A hevítés közötti időközönként a kezelt anyagot 25°C hőmérsékleten tartják, hogy a spórák vegetatív formába csírázzanak, amelyek a későbbi melegítés során elpusztulnak. A tindalizálást a fehérjét tartalmazó tápközeg műtrágytalanítására használják.

Mechanikus sterilizálás bakteriális ultraszűrőkkel. Bakteriális szűrőket használnak a folyadék megszabadítására a benne lévő baktériumoktól, valamint a baktériumok elválasztására a vírusoktól, fágoktól és exotoxinoktól. A vírusokat a bakteriális szűrők nem tartják vissza, ezért az ultraszűrés a szó elfogadott értelmében nem tekinthető sterilizálásnak. Az ultraszűrők gyártásához finoman porózus anyagokat (kaolin, azbeszt, nitrocellulóz stb.) használnak, amelyek képesek megfogni a baktériumokat.

Az azbesztszűrők (Seitz-szűrők) 3-5 mm vastagságú, 35 és 140 mm átmérőjű azbesztlemezek kis és nagy mennyiségű folyadék szűrésére. Hazánkban az azbesztszűrőket két márkában gyártják: „F” (szűrő), amely visszatartja a lebegő részecskéket, de átengedi a baktériumokat, illetve „SF” (sterilizáló), sűrűbb, visszatartó baktériumokat. Használat előtt az azbesztszűrőket szűrőberendezésekbe szerelik, és velük együtt autoklávban sterilizálják. Az azbesztszűrőt egyszer használják. A membrán ultraszűrők nitrocellulózból készülnek, és 35 mm átmérőjű, 0,1 mm vastagságú fehér korongok.

A bakteriális szűrők pórusméretükben különböznek, és sorozatszámmal vannak jelölve (3. táblázat).

3. táblázat.

Bakteriális szűrők

Közvetlenül használat előtt a membránszűrőket forralással sterilizáljuk. A szűrőket desztillált vízbe helyezzük, 50-60°C-ra melegítjük, hogy ne csavarodjanak össze, és 30 percig lassú tűzön forraljuk, 2-3-szor vízcserével. A sérülések elkerülése érdekében a sterilizált szűrőket flambírozott és hűtött, sima hegyű csipesszel távolítják el a sterilizátorból.

A folyadékok szűrésére bakteriális szűrőket szerelnek fel speciális szűrőeszközökbe, különösen egy Seitz szűrőbe.

2 részből áll: egy felső, henger vagy tölcsér alakú, és egy alsó tartórész a készüléknek, fémhálóból vagy tiszta kerámialapból készült úgynevezett szűrőasztallal, amelyen membrán vagy azbeszt szűrő van elhelyezve. A készülék alátámasztó része tölcsér alakú, amelynek elvékonyodó része a Bunsen-lombik nyakának gumidugójában található. Működőképes állapotban a készülék felső része csavarokkal van rögzítve az alsó részhez. A szűrés megkezdése előtt a berendezés különböző részeinek csomópontjait paraffinnal töltik fel, hogy tömítést hozzon létre. A lombik kivezető csöve vastag falú gumicsővel van összekötve egy vízsugárral, olajjal vagy kerékpárral. Ezt követően a leszűrt folyadékot a berendezés hengerébe vagy tölcsérébe öntik, és a szivattyút bekapcsolják, vákuumot hozva létre a fogadóedényben. A kialakuló nyomáskülönbség hatására a szűrt folyadék a szűrő pórusain keresztül a vevőbe jut. A mikroorganizmusok a szűrő felületén maradnak.

Kenetek készítése

A mikroorganizmusok festett formában történő vizsgálatához egy tárgylemezen kenetet készítenek, szárítják, rögzítik, majd megfestik.

A vizsgálandó anyagot vékony rétegben eloszlatjuk egy jól zsírtalanított tárgylemez felületén.

A keneteket mikrobatenyészetekből, kóros anyagból (köpet, genny, vizelet, vér stb.) és a holttestek szerveiből készítik.

A kenet készítésének technikáját a vizsgált anyag természete határozza meg.

Mikrobatenyészetekből folyékony tápközeggel és folyékony kóros anyagból (vizelet, agy-gerincvelői folyadék stb.) kenet készítése. A tesztfolyadék egy kis cseppjét bakteriális hurokkal egy tárgylemezre visszük, és körkörös mozdulatokkal egyenletes rétegben elosztjuk a hurkokat egy fillér érme átmérőjű kör formájában.

Vérkenetek készítése. Egy csepp vért csepegtetünk a tárgylemezre, közelebb annak egyik végéhez. A második - csiszolt - üveget, amelynek keskenyebbnek kell lennie, mint a tárgyüveg, 45°-os szögben ráhelyezzük az elsőre, és egy csepp vérig hozzákeverjük, amíg érintkezésbe nem kerül vele. Miután a vér szétterjedt a polírozott él mentén, az üveggel jobbról balra csúszó mozgást végzünk, egyenletesen elosztva a vért vékony rétegben az üveg teljes felületén. Az ütés vastagsága az üvegek közötti szögtől függ: minél élesebb a szög, annál vékonyabb a körvonal. A megfelelően elkészített kenet halvány rózsaszín színű és végig azonos vastagságú.

Vastag csepp előkészítése. Pasteur pipettával egy csepp vért csepegtetünk a tárgylemez közepére, vagy az üveget közvetlenül a kiálló vércseppre. Az üvegre felvitt vért bakteriális hurokkal bekenjük úgy, hogy a kapott kenet átmérője egy fillér érme méretének feleljen meg. Az üveget vízszintes helyzetben kell hagyni, amíg a vér meg nem szárad. A „vastag csepp” vére egyenetlenül oszlik el, egyenetlen szélt képezve.

Kenet készítése viszkózus anyagból (köpet, genny). A keskeny széléhez közelebb eső tárgylemezre felvitt köpetet vagy gennyet egy másik tárgylemez fedi le. A poharak enyhén egymáshoz nyomódnak.

Ezt követően mindkét kezünk 1-es és 2-es ujjával megragadjuk az üveg szabad végeit, és ellentétes irányba mozgatjuk, hogy mozgás közben mindkét pohár szorosan illeszkedjen egymáshoz. Az eredmény egy nagy területet elfoglaló, egyenletesen eloszló anyagú kenet.

Tenyészetekből kenetek készítése szilárd táptalajból. Egy tiszta, jól kikent üveglemez közepére egy csepp vizet teszünk, és abba egy baktériumhurkot csepegtetünk a vizsgált mikrobakultúra kis mennyiségével, így a folyadékcsepp enyhén zavarossá válik. Ezt követően a hurkon lévő felesleges mikrobiális anyagot lángban elégetjük, és a fent leírt módszer szerint elkészítjük a kenetet.

Kenet készítése szervekről és szövetekről. Fertőtlenítés céljából a szerv felületét csipesz felmelegített pofáival kauterizálják, ezen a helyen bemetszést ejtenek, és hegyes ollóval a mélységből kis szövetdarabot vágnak ki, amelyet két üveglap közé helyeznek. . Ezután járjon el ugyanúgy, mint a gennyből és köpetből készült kenet elkészítésekor. Ha a szerv szövete sűrű, akkor a bemetszés mélységéből szikével kaparják le. A kaparással nyert anyagot szikével vagy bakteriális hurokkal vékony rétegben szétosztják az üveg felületén.

A szöveti elemek és a benne lévő mikroorganizmusok egymáshoz viszonyított helyzetének tanulmányozására ujjlenyomat-keneteket készítenek. Ennek érdekében a szerv közepéből kivágott kis szövetdarabot csipesszel megragadjuk, és a vágott felülettel egymás után többször felvisszük egy tárgylemezre, így kenet-lenyomat sorozatot kapunk.

Szárító és rögzítő kenetek. Az üveglemezre készített kenetet levegőn szárítjuk, és teljes száradás után rögzítjük. Rögzítéskor a kenet az üveglemez felületén rögzül, ezért a készítmény későbbi festése során a mikrobasejtek nem mosódnak le. Ráadásul az elölt mikrobasejtek jobban festődnek, mint az élők.

Létezik fizikai rögzítési módszer, amely a magas hőmérsékletnek a mikrobiális sejtre gyakorolt ​​hatásán alapul, és kémiai módszerek, amelyek a fehérjék koagulációját okozó szerek alkalmazását jelentik. Az I–II patogenitási csoportba tartozó kórokozókat tartalmazó keneteket ne rögzítse láng felett.

A rögzítés fizikai módja. A készítménnyel ellátott tárgylemezt csipesszel vagy a jobb kéz I. és II. ujjával a bordáknál fogva felfelé húzva, simán mozgatva 2-3-szor az égő lángjának felső része fölött. A teljes rögzítési folyamat legfeljebb 2 másodpercig tarthat. A rögzítés megbízhatóságát a következő egyszerű technikával ellenőrizzük: a tárgylemez elkenődésmentes felületét a bal kéz hátsó felületére visszük fel. Ha a kenetet megfelelően rögzítik, az üvegnek forrónak kell lennie, de nem okozhat égő érzést.

Kémiai rögzítési módszer. A kenetek rögzítésére a 4. táblázatban felsorolt ​​vegyszereket és vegyületeket is használják.

4. táblázat.

Kémiai rögzítéshez használt anyagok

A megszáradt kenettel ellátott tárgylemezt fixálószeres palackba merítjük, majd levegőn szárítjuk.

Színező vonások

Kenetfestési technika. A kenetek színezéséhez festékoldatokat vagy színezőpapírt használnak, ahogy azt A.I. Sinev. Az elkészítési egyszerűség, a könnyű használhatóság, valamint a tintapapír korlátlan ideig történő tárolásának lehetősége volt az alapja a különféle színező eljárásokban való széles körű alkalmazásuknak.

Vonások színezése tintapapírral. A megszáradt és rögzített készítményre néhány csepp vizet csepegtetünk, majd 2×2 cm-es színes papírdarabokat helyezünk el, a festés teljes ideje alatt a papír nedves maradjon és szorosan illeszkedjen az üveg felületéhez. Szárításkor a papírt még vízzel is megnedvesítik. A kenet festésének időtartamát a festési módszer határozza meg. A festés végén a papírt csipesszel óvatosan eltávolítjuk, a kenetet csapvízzel lemossuk és levegőn vagy szűrőpapírral szárítjuk.

Kenetek festése festékoldatokkal. A megszáradt és rögzített készítményre pipettával visszük fel a festéket olyan mennyiségben, hogy az a teljes kenetet befedje. Ha a keneteket koncentrált festékoldatokkal (Ziehl karbol fukszin, karbolikus tárnics vagy kristályibolya) festjük, a festés a festékrészecskéket visszatartó szűrőpapíron keresztül történik: egy szűrőpapírcsíkot helyezünk egy rögzített kenetre, és festékoldatot öntünk rá. .

Mikroszkópos vizsgálathoz az előkészített, szárított és fixált keneteket megfestik. A színezés lehet egyszerű vagy összetett. Az egyszerű festés azt jelenti, hogy egy festéket felvisznek egy kenetre egy bizonyos ideig. Az egyszerű festéshez leggyakrabban alkohol-víz (1:10) Pfeiffer fukszint, Leffler-féle metilénkéket és szafranint használnak. Az eozint, mint egy savas festéket, csak a sejtek citoplazmájának megfestésére és a háttér színezésére használják. A savas fukszin teljesen alkalmatlan a baktériumok megfestésére.

fotó a lentachel.ru webhelyről

Alig száz évvel ezelőtt a tudományos kutatás során a szennyeződés gyakorlatilag elkerülhetetlennek számított. Sok tudós halálos kockázatnak tette ki testét azáltal, hogy olyan mikrobákat és baktériumokat tanulmányozott, amelyek természetéről keveset tudtak. Napjainkra a körülöttünk lévő veszélyes mikroorganizmusok nagy részét leírták és tanulmányozták, emellett a bakteriológiai laboratóriumok számára speciális gyógyászati ​​termékek állnak rendelkezésre, amelyek használata 99%-os valószínűséggel megvédi a kutatókat a szakmai kockázatoktól.

Minden tárgy, amellyel a bakteriológiai laboratórium dolgozói dolgoznak, patogén mikroflórával telítettek. Az egészséges beltéri környezet fenntartása és a szennyezett anyagokkal való közvetlen érintkezés elkerülése érdekében fokozott védő- és antimikrobiális tulajdonságokkal rendelkező bútorokat, ruházati eszközöket és edényeket használnak.

A hermetikusan zárt üveg- és fémszekrények és dobozok, a fertőtlenítésre, sterilizálásra és autoklávozásra alkalmas laboratóriumi asztalok, valamint a zárható hűtőszekrény olyan elemek, amelyek biztosítják a fertőzött mintákon kutatók biztonságát.

A minták tárolására használt edények: lombik, mérőpohár hermetikusan lezárva, hogy elkerüljük a mikrobák terjedését a laboratóriumi levegőben.

A tartályok készítéséhez speciális törhetetlen üveget vagy nagy szilárdságú műanyagot használnak. A dupla falak, a speciális stabil fenékforma, a gumielemek a fedeleken, a tálcákon és a küvettákon teremtik meg a legjobb feltételeket az olyan veszélyes szomszédok izolálásához, mint a meningococcusok, streptococcusok, staphylococcusok, bacillusok és klostridiumok.

A kutatás megkezdése előtt a személyzet speciális ruházatot vesz fel: védőköpenyt, maszkot, védőszemüveget. A nagyon veszélyes anyagokkal való munkavégzéshez gumírozott kötényeket vagy speciális, nedvességtaszító impregnálással ellátott köpenyeket használnak.

A levegő megfelelő időben történő kezelése ultraibolya besugárzókkal és baktériumölő lámpákkal, a mosóhelyiség bevált módosításainak alkalmazása, minden dolgozónak teljes védőruházattal való ellátása általánosan elfogadott szabvány, ettől való eltérés adminisztratív, súlyos következmények esetén , büntetőjogilag büntetendő.

Az átfogó felszerelés és az összes óvintézkedés végrehajtása elősegíti a munkavállalók egészségének megőrzését, a foglalkozási megbetegedések csökkentését és a magas kutatási termelékenységet: megfigyelhető, hogy a megbízható, bevált védőfelszerelések használata csökkenti a szorongást, és elősegíti a gyorsabb és hatékonyabb cselekvést.

Bakteriológiai laboratórium

A bakteriológiai laboratórium 1996-ban önálló részleggé vált szét.

Vezető - az orvostudományok kandidátusa, a legmagasabb kategóriájú bakteriológus Polikarpova Szvetlana Veniaminovna

KIEMELT TEVÉKENYSÉGI TERÜLETEK

A bakteriológiai laboratóriumban a következő típusú elemzéseket végzik:

A vér (hemokultúra) és a cerebrospinális folyadék bakteriológiai vizsgálata;
- köpet, légcső-aspirátum, hörgőmosóvíz bakteriológiai vizsgálata;
- a különböző gyulladásos gócokból származó váladék bakteriológiai vizsgálata: mandulagyulladás, pharyngitis, otitis, sinusitis stb.;
- pontok, effúziók, váladékok bakteriológiai vizsgálata;
- a garat és az orr nyálkahártyájából származó váladék bakteriológiai vizsgálata feltételesen patogén mikroflóra kimutatására;
- a vizelet bakteriológiai vizsgálata a bakteriuria mértékének meghatározására;
- a genitális váladék bakteriológiai vizsgálata opportunista mikroflóra kimutatására;
- kötőhártya-váladék bakteriológiai vizsgálata;
- a széklet vizsgálata kórokozó bélflóra kimutatására;
- a széklet bakteriológiai vizsgálata dysbacteriosisra;
- az anyatej bakteriológiai vizsgálata;
- a B csoportú streptococcus antigén kvalitatív meghatározása;
- az antigén minőségi meghatározása Helicobacter pylori emberi ürülékben;
- az A és B toxinok antigénjének minőségi meghatározása Clostridium difficile emberi ürülékben;
- izolált mikroorganizmusok antibiotikumokkal szembeni érzékenységének/rezisztenciájának értékelése.

EREDMÉNYEK

A bakteriológiai laboratóriumban kutatásokat végeznek a különféle bioanyagokból izolált patogén és feltételesen patogén mikroorganizmusok antibiotikumokkal szembeni érzékenységének izolálására, azonosítására és antibiotikumokkal szembeni érzékenységének meghatározására.

A klasszikus klinikai mikrobiológia elvein alapuló laboratórium munkája új kutatási módszereket vezetett be, amelyek a molekuláris genetikai technológiák legújabb eredményeire épülnek.

A bakteriológiai laboratórium a modern orosz és nemzetközi szabványoknak megfelelő mikrobiológiai vizsgálatokat végez.

Évente több mint 10 000 kórházi osztályokon kórházba került beteg, 6 000 szülészeten 6 000 beteg és újszülött, a CDC és a keleti közigazgatási körzet klinikáinak több mint 5 000 betegének bakteriológiai vizsgálatát végzik el a laboratóriumi dolgozók, évente több mint 45 000 mikrobiológiai vizsgálatot. év.

A laboratórium bázisán kidolgozásra került és folyamatosan korszerűsödik a „Mikrobiológus, epidemiológus és kemoterapeuta automatizált munkaállomása”, amely két programból áll: MICROB-AUTOMAT és MIKROBIOLÓGIAI MONITORING RENDSZER „MICROB” (SMM). A programok lehetővé teszik a kórházi mikrobiológiai szolgálat fő feladatainak megoldását: a mikrobiális táj és antibiotikum rezisztencia szintjének folyamatos monitorozását a megfelelő antibiotikum terápia előírása érdekében, valamint az egészségügyi ellátással összefüggő fertőzések (HAI) időben történő felismerését.

A mikrobiológiai kutatások megfelelő minőségének biztosítása érdekében az alábbiakat vezetjük be a laboratóriumba:

• Minőségirányítási rendszer szabvány szerint GOST R ISO 15189 -15

„Orvosi laboratóriumok. A minőségre és a szakértelemre vonatkozó különleges követelmények”;

• Alapok SOVÁNY technológiák (lean gyártás) - a laboratóriumi menedzsment megközelítései, amelyek célja a munka minőségének javítása a veszteségek csökkentésével: anyagi, pénzügyi, időbeli veszteségek;
• Rendszer 5S- karcsú gyártási eszköz - munkaterület szervezése a műveletek végzésének optimális feltételeinek megteremtése, a rend, tisztaság, rendezettség, idő- és energiamegtakarítás érdekében.

A laboratórium 2014 óta vesz részt a Közép-Ázsia és Kelet-Európa országaiban zajló antibiotikum-rezisztencia monitorozását célzó nemzetközi programban. WHO(UK NEQAS) A laboratórium szakértői laboratóriumként vesz részt a laboratóriumi kutatás minőségének külső értékelésében a „Klinikai mikrobiológia” (FSVOK) szekcióban.

A bakteriológusok sok éven át folytatnak „Modern kutatási módszerek a klinikai mikrobiológiában” minősítési ciklusokat a kórházban a moszkvai egészségügyi intézmények középfokú orvosi végzettséggel rendelkező dolgozói számára.

CSÚCSTECHNOLÓGIA

• Molekuláris genetikai módszerek bevezetése a fertőző betegségek diagnosztikájába - a valós idejű polimeráz láncreakció (PCR) módszere;

• az antibakteriális gyógyszerekkel szembeni bakteriális rezisztencia kialakulásának és terjedésének fő mechanizmusainak meghatározása fenotípusos és genotípusos módszerekkel;

• immunkromatográfiás expressz módszerek (IMCT) alkalmazása a fertőző és gyulladásos betegségek kórokozóinak etiológiai diagnosztizálására;

• a bakteriológusok, kezelőorvosok, klinikai farmakológusok részére a mikroorganizmusok antimikrobiális gyógyszerekkel szembeni érzékenységének megállapításának és a rezisztencia mechanizmusainak azonosításának eredményeinek értelmezésére szolgáló elektronikus szakvélemények modul létrehozása és megvalósítása.

TUDOMÁNYOS TEVÉKENYSÉG

A tanszék fennállása alatt 2 kandidátusi szakdolgozat készült el a laborban. A tanszék munkatársai rendszeresen tartanak előadásokat nemzetközi, összoroszországi, városi kongresszusokon, konferenciákon, szimpóziumokon és szemináriumokon, valamint rendszeresen publikálnak tudományos és gyakorlati kiadványokban.

A bakteriológiai laboratórium együttműködik:

• FSBI "Szövetségi Epidemiológiai és Mikrobiológiai Kutatóközpont"

őket. N. F. Gamaleya tiszteletbeli akadémikus, az Orosz Föderáció Egészségügyi Minisztériuma";

• Az Orosz Föderáció Egészségügyi Minisztériumának FGAU "Gyermekegészségügyi Tudományos Központja";
• Az Orosz Orvostudományi Akadémia "Orvosi Genetikai Kutatóközpont" Szövetségi Állami Költségvetési Intézménye;
• Szövetségi költségvetési intézmény Roszpotrebnadzor Epidemiológiai Központi Kutatóintézete;
• FBUN Moszkvai Epidemiológiai és Mikrobiológiai Kutatóintézet névadója. G. N. Gabrichevsky Roszpotrebnadzor;
• Az A. I. Evdokimovról elnevezett Moszkvai Állami Orvosi és Fogorvosi Egyetem Reproduktív Orvostudományi és Sebészeti Tanszéke (MGMSU);

A tudományos munka a következő területeken folyik:

• az egészségügyi ellátással összefüggő fertőzések (HAI) mikrobiológiai diagnosztikája és megelőzése. Mikrobiökológia az egészségügyi intézményekben.
• az alsó légúti fertőzések mikrobiológiai diagnózisának jellemzői cisztás fibrózisban szenvedő betegeknél;
• az enterobaktériumok antimikrobiális gyógyszerekkel szembeni rezisztenciájának mechanizmusainak tanulmányozása;
• algoritmusok kidolgozása a B csoportú streptococcusok hordozásának gyors diagnosztizálására terhes nőknél és újszülötteknél.

CIKKEK, KONFERENCIÁK

2016

LABORATÓRIUMI FELSZERELÉS

Jelenleg a bakteriológiai laboratórium modern berendezésekkel van felszerelve:

• Automata vérkultúra analizátor VersaTREK(TREK Diagnostic Systems) - a szepszis diagnosztizálásának képessége a lehető legrövidebb időn belül - a pozitív eredmények 90% -a az első 24 órán belül észlelhető. A kutatási protokoll maximális ideje 5
• Bakteriológiai analizátor mikroorganizmusok azonosítására és érzékenységének meghatározására Főnix 100(BD) - az azonosítási eredmények megszerzésének átlagos ideje 6-8 óra, az antimikrobiális érzékenységi eredmények megszerzésének átlagos ideje 12-16 óra.
• Félautomata analizátor iEMSOlvasó(ThermoLabsystems), amely nemcsak a mikroorganizmusok érzékenységének azonosítását és meghatározását teszi lehetővé, hanem számos gyakorlati és tudományos-gyakorlati probléma megoldását is lehetővé teszi: vizelet és egyéb bioanyagok mikrobiális szennyezettségének meghatározása, az antibakteriális terápia hatékonyságának laboratóriumi monitorozása, a vérszérum baktericid hatásának felmérése, valamint a mikrobiális növekedés kinetikai modelljeinek kutatása.

A laboratórium munkájába bekerült az ALISA laboratóriumi információs rendszer, a bakteriológus minden munkaállomása számítógépes.

KOLLEKTÍV

Pivkina Nadezsda Vasziljevna

A legmagasabb kategóriájú orvos-bakteriológus, szakmai átképzéssel rendelkezik a „Bakteriológia” szakterületen. Tagja a Klinikai Mikrobiológusok és Antimikrobiális Kemoterapeuták Nemzetközi Szövetségének (IACMAC), tagja a Laboratóriumi Orvostudományi Szövetségnek (FLM). Számos tudományos cikk társszerzője a klinikai mikrobiológia problémáiról. Szakterületen szerzett szakmai tapasztalat 1992 óta.

Timofejeva Olga Gennadievna

A legmagasabb kategóriájú bakteriológusként a „Bakteriológia” szakon végzett szakmai gyakorlatot, és továbbképzésen vett részt „PCR elemzés klinikai diagnosztikai laboratóriumokban” témakörben. Tagja a Laboratóriumi Orvostudományi Szövetségnek (FLM). Jelenleg Ph.D. disszertáció megírásán dolgozik. Publikációi vannak a klinikai mikrobiológia problémáiról. Szakterületen szerzett szakmai tapasztalat 1996 óta.

Bondarenko Natalia Alekszandrovna

Az első kategóriájú bakteriológus, a Laboratóriumi Orvostudományi Szövetség (FLM) tagja. Számos tudományos cikk társszerzője a klinikai mikrobiológia problémáiról. Szakterületen szerzett szakmai tapasztalat 1988 óta.

Balina Valeria Vladimirovna

Bakteriológus, klinikai laboratóriumi diagnosztikus orvos. Gyakorlati idejét a „Klinikai laboratóriumi diagnosztika” szakon végezte, szakmai átképzését a „Bakteriológia” szakon végezte. Sikeres végzettségfejlesztés a „Molekuláris genetikai módszerek a fertőző betegségek diagnosztizálásában” témában. Tagja a Laboratóriumi Orvostudományi Szövetségnek (FLM). Szakterületen szerzett szakmai tapasztalat 2013 óta.

Ápoló személyzet

A laboratórium a következőket alkalmazza:

• 1 orvostechnológus
• 1 orvosi laboráns
• 5 orvosi laboráns
• 1 fő laboráns
• Minden alkalmazott rendelkezik a legmagasabb képesítési besorolással.

5/91. oldal

A mikrobiológiai vizsgálatok elvégzésére a kórházakban és a klinikákon vagy azoktól függetlenül bakteriológiai laboratóriumok működnek. Beteg emberektől származó különféle anyagokat (köpet, vizelet, genny, ürülék, vér, agy-gerincvelői folyadék stb.) kapnak kutatásra. Ezen kívül vannak egészségügyi és bakteriológiai laboratóriumok is, amelyekben a víz, a levegő és az élelmiszertermékek bakteriológiai ellenőrzésnek vannak kitéve.
A bakteriológiai laboratóriumok szerepe a fertőző betegségek megelőzésében is nagy. Egyesek egy fertőző betegség (tífusz, vérhas, diftéria stb.) elszenvedése után továbbra is kórokozó mikrobákat bocsátanak ki a környezetbe. Ezek az úgynevezett baktériumhordozók. A baktériumhordozók az egészséges emberek között is megtalálhatók. Az ilyen baktériumhordozók azonosításával a bakteriológiai laboratóriumok segítenek az egészségügyi hatóságoknak számos megelőző intézkedés végrehajtásában.
A kórokozó mikroorganizmusokkal szennyezett víz és élelmiszerek tífusz, kolera stb. járványokat (tömeges megbetegedések) okozhatnak, ezért is olyan fontos az ivóvíz, tej és egyéb termékek minőségének mindennapos egészségügyi és bakteriológiai ellenőrzése.
A bakteriológiai laboratóriumnak legalább három helyiséggel kell rendelkeznie: 1) egy kis helyiség - a vizsgálatok fogadására és kiadására szolgáló regisztrációs helyiség; 2) közepes főzés és mosogatás - tápközeg elkészítéséhez és mosogatáshoz; 3) bakteriológiai kutatást végző laboratórium. Kísérleti állatok tartására alkalmas helyiség (vivárium) kialakítása célszerű. Minden helyiségben legyen megfelelő bútorzat (konyhai és laboratóriumi asztalok, különféle szekrények, zsámolyok stb.).
Az alábbiakban felsoroljuk a napi laboratóriumi munkához szükséges legfontosabb elemeket. Használatuk célját, kezelésük módját, valamint kialakításuk elvét a kurzus vonatkozó részei ismertetik.
Optikai eszközök. Biológiai mikroszkóp merülő rendszerrel, nagyítókkal, agglutinoszkóppal.
Sterilizáláshoz és melegítéshez szükséges eszközök. Autokláv, folyékony gőzkészülék, szárítószekrény, Seitz szűrők, termosztátok, műszerek sterilizálói.
Berendezések főzéshez. Tölcsér forró szűréshez, tölcsér közegkiöntőhöz, vízfürdő, különböző méretű edények, tárazott mérleg súlyokkal, húsdaráló, fém és fa állványok a szűréshez.
Eszközök. Különféle formájú és típusú szikék: olló, egyenes, íves, tompa hegyű, bélolló, anatómiai és sebészeti csipeszek, fecskendők.
Üveg tárgyak. Poharak, tárgylemezek lyukkal, fedőlemezek, bakteriológiai csövek, rövid csövek szerológiai reakciókhoz (agglutináció), centrifugák, Heidepreich edények*, üvegcsövek és rudak, 1, 2, 5, 10 ml-es beosztásos pipetták, Pasteur pipetták, üveg festékes palackok pipettával, különböző méretű üvegpoharak és lombikok, különböző méretű hengerek, szűrőtölcsérek stb.

*Eddig a legtöbb mikrobiológus és a tankönyvekben az izolált mikrobakolóniák előállítására szolgáló edényeket Petri-csészéknek nevezték, nem Heidenreich-csészéknek, ami nem felel meg a dolgok valós állapotának. A csészéket először Heidenreich orosz mikrobiológus vezette be a laboratóriumi gyakorlatba.

Különféle tárgyak. Bakteriális hurok, platina drót, gumicsövek, kézi kürtmérleg súllyal, állványok (fa, fém) kémcsövekhez, hőmérők, állatketrecek, állatok rögzítésére szolgáló eszközök, centrifuga.
Vegyszerek, festékek, tápanyagok stb. Agar-agar, zselatin, fehér lapokban, immerziós olaj, szűrőpapír, nedvszívó és sima vatta, géz, etil-alkohol, anilin festékek (bíbor, encián és kristályibolya, vesuvin, metilén kék, semlegesrott, szafranin stb.), Giemsa festék, savak (salétromsav, sósav, kénsav, karbolsav, foszforsav, pikrinsav, oxálsav stb.), lúgok (kálium, marónátron, ammónia, szóda), sók (kálium-nitrát) , kálium-permanganát, nátrium-szulfid, nátrium-klorid stb.).

Laboratóriumi asztal

A mikrobiológiai kutatások elvégzéséhez a laboránsnak megfelelően felszerelt munkahelyet kell biztosítani. A laboratóriumi asztalnak bizonyos magasságúnak kell lennie, hogy könnyen mikroszkóppal lehessen rajta ülni (9. ábra). Lehetőleg az asztalt linóleummal, minden munkahelyet horganyzott tálcával vagy tükörüveggel borítsuk be. A munkahelyet fel kell szerelni mikroszkóppal, kémcsövek és festékek állványaival, platina hurokkal és tűvel az oltáshoz, híddal ellátott csészével a készítményekhez, alátéttel, homokórával, tárgylemezekkel és fedőpoharakkal, pipettákkal, festékkészlettel, szűrőpapír, alkoholos vagy gázégő és fertőtlenítő oldattal (Lizol, karbolsav, szublimát, klóramin vagy lizoform) ellátott tégely, amelybe fertőtlenítés céljából használt tárgylemezeket és fedőlemezeket, pipettákat, üvegrudakat stb. a szaporodó mikrobákat nem lehet vegyszerekkel fertőtleníteni. A fertőtlenítőszerek nyomai az ilyen edényeken később alkalmatlanná teszik a mikroorganizmusok szaporodását és szaporodását. Használat után az edényeket fémtartályokba vagy fedővel ellátott vödrökbe helyezik, lezárják és autoklávban sterilizálják. Használat után a kisméretű eszközöket (csipesz, szike, olló) sterilizálóba helyezzük és 30-60 percig forraljuk, vagy 30-60 percre 3-5%-os szappan-karbolsav-klóramin oldatba merítjük.

Rizs. 9. Bakteriológiai tárgyak mikroszkópos vizsgálatának technikája.

A munkahelyet teljesen tisztán kell tartani. Elfogadhatatlan, hogy az asztal szennyezett legyen a vizsgált fertőző anyaggal (vizelet, széklet, genny stb.). Utóbbi esetben az asztalról származó fertőző anyag átterjedhet a környező tárgyakra, így lehetséges a laboratóriumon belüli fertőzés. A munka befejezése után a laboránsnak rendet kell tennie a feladatkörébe tartozó munkahelyen, és megelőzés céljából 5%-os karbolsav vagy klóramin oldattal megnedvesített vattadarabbal törölje át a munkahelyi üveget.

Laboratóriumi munka és magatartás szabályai

Fertőző anyaggal végzett munka során a laboratóriumi dolgozóknak emlékezniük kell arra a lehetőségre, hogy maguk is megfertőződhetnek, és a fertőző betegséget átvihetik családjukra, lakásukra stb. Ezért munkájuk során figyelmesnek, körültekintőnek, ügyesnek és pedánsnak kell lenniük.
A laboratóriumi munka során a következő szabályokat kell betartani:

1. Kötelező a laborban lenni, és még inkább abban dolgozni, köntösben és fejkendőben, sapkában.
2. Feleslegesen ne mozogjon egyik laborhelyiségből a másikba, és csak a kijelölt munkahelyet és eszközöket használja.
3. Ne egyen és ne dohányozzon a laboratóriumban.
4. Fertőző anyagokkal és élő kultúrákkal végzett munka során használjon megfelelő eszközöket: csipeszt, kampót, spatulát és egyéb tárgyakat, amelyeket használat után meg kell semmisíteni vagy ártalmatlanná kell tenni (égő lángon égetve, forralni stb.). A folyékony fertőző anyagot ne a szájjal, hanem ballonok, hagymák segítségével szívja ki pipettákba, öntse a fertőző anyagot tartalmazó folyadékot egyik edényből a másikba csak valamilyen gyűjtőedényre (tálcára, medencére), amelybe fertőtlenítő folyadék (karbolsav oldat, Lysol) öntjük. A vetés és az újravetés kémcsövek, spatulák, platinahurkok, pipetták stb. égető lángján történő elégetésével történik.
5. Ha az edény eltörik, vagy fertőző anyagot tartalmazó folyadék vagy élő tenyészet kiömlik, azonnal alaposan fertőtlenítse a szennyezett munkaterületet, ruhát és kezet. Mindezt a laborvezető jelenlétében vagy felügyelete mellett kell megtenni, akit azonnal értesíteni kell a balesetről.
6. Ha lehetséges, semmisítse meg az összes használt és szükségtelen tárgyat és anyagot (legjobb, ha elégeti, vagy sterilizálógépben vagy fertőtlenítő folyadékban alaposan semlegesíti).

Minden fertőtlenítendő tárgyat a laboratóriumon belül kell összegyűjteni speciális tartályokba, tartályokba, fedelű vödrökbe stb., és zárva kell átvinni egy autoklávba, ahol még aznap fertőtlenítik. A fertőző anyag autoklávba szállítását és sterilizálását speciálisan kijelölt felelős laboratóriumi dolgozóknak kell felügyelnie.

1. Tartsa be a szigorú tisztaságot és rendet. A lehető leggyakrabban fertőtlenítsen és mosson kezet a munkanap folyamán és a munka befejezése után.
2. A laboratóriumi dolgozókat kötelező védőoltásban részesíteni a jelentősebb fertőző betegségek (elsősorban a bélbetegségek) ellen.
3. Minden élő termésről és fertőzött állatról kötelező napi mennyiségi nyilvántartást vezetni, speciális naplókban és könyvelési könyvekben való bejegyzésekkel.
4. Munka végeztével minden, a további munkához szükséges anyagot és kultúrát zárt hűtőszekrényben vagy széfben kell hagyni, és a munkahelyet teljes rendbe tenni.
5. A laboratórium helyiségeinek napi alapos tisztítását fertőtlenítő folyadékkal nedvesen kell végezni.

A különböző baktériumok jelenléte a belekben normálisnak tekinthető. Ezek a baktériumok részt vesznek az élelmiszer feldolgozási és asszimilációs folyamataiban. A belek megfelelő emésztését és működését az apró, szerkezet nélküli részecskékből, úgynevezett törmelékből álló széklet bizonyítja.

A széklet mikrobiális összetételének tanulmányozására tartályelemzést végeznek. Ha a baktériumok száma megnövekszik, akkor az ember bélrendszeri patológiákat, különféle típusú hasi fájdalmakat tapasztal, és a székletben emésztetlen ételdarabok jelennek meg. Ez a tanulmány lehetővé teszi számos betegség kórokozóinak azonosítását.

A bélbaktériumok osztályozása

A részletes tanulmányozás alapján azonban a következő csoportokba sorolhatók:

1. Egészséges baktériumok: lakto- és bifidobaktériumok, Eschecheria. Ezek a mikroorganizmusok aktiválják a belek működését.
2. Opportunista: enterococcusok, candida, clostridia, staphylococcusok. Ezek a mikroorganizmusok bizonyos körülmények hatására kórokozóvá válnak, és képesek különféle patológiák kialakulását kiváltani.
3. Kórokozó: bacillusok, Klebsiella, Proteus, Salmonella, Shingella, Sarcinus. Ez a baktériumcsoport súlyos betegségek kialakulását provokálja.

Különféle módszerek léteznek a széklet vizsgálatára. Az egyik általános módszer a bakteriális elemzés.

Mi az a székletvizsgálat?

A széklet bakteriológiai vizsgálata lehetővé teszi a mikrobiális összetétel tanulmányozását, valamint a következő betegségek kórokozóinak jelenlétének meghatározását:

• Shigellosis;
• vérhas;
• szalmonellózis;
• tífusz;
• kolera és más betegségek.

A széklet elemzése meglehetősen hosszú időt vesz igénybe. A vizsgálatot az antibiotikum-terápia felírása előtt végzik.

A vizsgálat indikációi

Ki kell emelni a székletvizsgálat elvégzésének fő okait:

A scatológiai vizsgálatok lehetővé teszik a bélüregben előforduló patológiák azonosítását:

Az emésztőszervek patológiáinak diagnosztizálására tankvizsgálatot is előírnak.

Hogyan történik a székletminta vétele?

A vizsgálat megkezdése előtt a páciensnek néhány napig speciális előkészítésen kell átesnie.

• lomb;
• cékla;
• vörös hal;
• paradicsom.

Ezenkívül a húskészítmények befolyásolhatják a vizsgálat eredményeit.

A vizsgálatokra való felkészülés időszakában az antibiotikumok, gyulladáscsökkentők, valamint enzim- és vastartalmú gyógyszerek szedését le kell állítani.

A kutatáshoz szükséges anyaggyűjtést reggel kell elvégezni. A széklet összegyűjtéséhez használjon steril edényt, amelyet a gyógyszertárban vásárolhat meg. A bioanyag hűtőszekrényben való tárolásának időtartama nem haladja meg a 10 órát.

Hogyan zajlik a kutatás?

A széklet bakteriológiai vizsgálata lehetővé teszi az anyag fizikai és kémiai összetételének, tulajdonságainak és a patológiák jelenlétének meghatározását. Ez a vizsgálat segít kimutatni a baktériumokat a szervezetben és a bioegyensúly változásait.

A széklet katológiai elemzése a bakteriális elemzés kiegészítésének tekinthető. Ez a tanulmány lehetővé teszi számunkra, hogy felmérjük a széklet specifikus szagának jelenlétét, konzisztenciáját és sűrűségét, általános megjelenését, valamint a mikroorganizmusok jelenlétét vagy hiányát.

A tanulmány 2 szakaszból áll:

1. Makroszkópos elemzés.
2. Mikroszkopikus.

A mikroszkópos vizsgálat során a székletben nyálkát, fehérjét, megnövekedett bilirubinszintet, vérrögöket és jódfil flórát mutatnak ki. Ez utóbbi olyan hatóanyagoknak köszönhető, amelyek a keményítőt glükózzá alakítják. A jódfil flóra kimutatása nem minden esetben utal fertőzésre. A betegség kialakulását az erjedés okozta jódbaktériumok felhalmozódása jelzi.

Mivel a gyermek teste nem küzd jól a kórokozó flórával, az ilyen baktériumokat gyakran diagnosztizálják a gyermekek székletében.

Ma azt a módszert alkalmazzák, hogy a vizsgált bioanyagot speciális környezetben, bizonyos feltételek mellett vetik el. A szakértők meghatározzák a baktériumok szaporodási és telepképző képességét. A pontos eredmények elérése érdekében minden használt műszernek, valamint az összegyűjtött bioanyagot tartalmazó tartályoknak sterilnek kell lenniük.

A kórokozó mikroorganizmusokat a különféle antibakteriális gyógyszerekkel szembeni érzékenység szempontjából vizsgálják. A vizsgálatot rendkívül pontos eredmények jellemzik, amelyek alapján az orvos gyógyszert írhat fel.

A vizsgált anyag teljes mennyiségének csak 10% -a lehet patogén mikroflóra.

Az eredmények dekódolása

A széklet vizsgálata lehetővé teszi a baktériumok azonosítását és számának meghatározását. A kapott eredmények alapján az orvos diagnosztizálja és előírja a kezelést.

A székletben található patogén mikroflóra típusai:

1. E. coli. Megzavarják a szervezet kalcium és vas felszívódását, és általában férgek jelenlétét jelzik.
2. Enterobacteriaceae. Leggyakrabban ezek a baktériumok okozzák a vérhas és a bélfertőzések kialakulását.
3. A csökkent enzimaktivitású E. coli dysbacteriosis kialakulását jelzi.
4. Laktóz-negatív baktériumok. Zavarokat okoznak az emésztési folyamatban, és puffadást, gyomorégést, gyakori böfögést, elnehezülést okoznak.
5. Hemolitikus baktériumok. Méreganyagokat képeznek, amelyek negatívan hatnak az idegrendszerre és a belekre. Allergiák kialakulását okozza.
6. Élesztőszerű gombák provokálja a rigó kialakulását.
7. Klebsiella, provokálja a gasztroenterológiai patológiák kialakulását.
8. Enterococcusok, provokálja a nemi szervek, a kiválasztó rendszer és a húgyúti rendszer fertőző patológiáinak előfordulását.

A tartályelemzés értelmezése az űrlapokon fel van tüntetve, amelyek a baktériumok normál mutatóit is jelzik.

A bél dysbiosis egy nagyon veszélyes patológia, amely elpusztítja az egészséges mikroflórát. Ez az állapot dizentéria és staphylococcus kialakulásához vezet. Ennek elkerülése érdekében javasolt legalább évente egyszer székletvizsgálatot végezni a bél bioegyensúlyának ellenőrzésére.

A tartályelemzés megbízható tanulmánynak tekinthető, amely információt nyújt fontos belső szerveinek, a belek és a gyomor működéséről. A vizsgálat lehetővé teszi a patogén mikroorganizmusok időben történő azonosítását, amelyek befolyásolják a normál mikroflórát. Felnőtteknek és gyermekeknek egyaránt felírva.