Ελμινθολογικές μέθοδοι. Βασικές μέθοδοι έρευνας για πρωτόζωα

Τα πιο απλά χωρίζονται σε 4 κατηγορίες:

Όταν εγκυστώνεται, ο μικροοργανισμός αποκτά στρογγυλεμένο σχήμα και καλύπτεται με προστατευτικό κέλυφος. Με τη μορφή κύστης, τα πρωτόζωα γίνονται λιγότερο ευαίσθητα σε δυσμενείς περιβαλλοντικούς παράγοντες.

Η έρευνα μπορεί να περιλαμβάνει:

Σημείωση:Υπάρχουν πολλές ποικιλίες διαγνωστικών, θα εξετάσουμε εκείνους τους τύπους που είναι πιο συνηθισμένοι στην κλινική εργαστηριακή πρακτική.

Ιδιωτικοί τύποι διαγνωστικών

Σε κάθε συγκεκριμένη περίπτωση, ο εργαστηριακός βοηθός είναι επιφορτισμένος με την εύρεση ενός συγκεκριμένου παθογόνου, μερικές φορές εντοπίζονται και άλλα μαζί με το κύριο.

Υπάρχουν 6 είδη αυτού του μικροοργανισμού ικανά να ζουν στο ανθρώπινο έντερο. Κλινική σημασία έχει μόνο η αμοιβάδα δυσεντερίας, η οποία εμφανίζεται σε βλαστική μορφή και με τη μορφή κύστεων.

Επιπλέον, χρησιμοποιούνται ανοσολογικές μέθοδοι:

• Έμμεσος ανοσοφθορισμός;
• έμμεση συγκόλληση (PHA);
• ακτινική ανοσοδιάχυση.

Σημείωση: Οι ορολογικές μέθοδοι είναι μη ενημερωτικές και χρησιμοποιούνται μόνο ως προσθήκη στις κύριες σε αμφίβολες περιπτώσεις.

Διάγνωση βλεφαρίδων (ακροειδών)

Η παθογόνος μορφή των μικροοργανισμών αυτού του γένους είναι τα balantidia. Αυτό είναι ένα μικρόβιο που προκαλεί βαλαντιδίαση - μια ασθένεια που συνοδεύεται από μια ελκώδη διαδικασία του παχέος εντέρου. Ο αιτιολογικός παράγοντας βρίσκεται σε ένα εγγενές επίχρισμα με τη μορφή βλαστικής μορφής και κύστης. Το υλικό για το επίχρισμα (περιττώματα και βλέννα) λαμβάνεται κατά τη διάρκεια σιγμοειδοσκόπησης και σπέρνεται σε ειδικά μέσα.

Διαγνωστικά μαστιγωτών (λεϊσμανία, γιάρδια, τρυπανοσώματα, τριχομονάδες)

Η λεϊσμανία, το τρυπανόσωμα, η γιάρδια, οι τριχομονάδες είναι επικίνδυνες για τον άνθρωπο.

Leishmania- Τα μικρόβια που προκαλούν λεϊσμανίαση εξετάζονται σε επιχρίσματα αίματος, υλικά μυελού των οστών, ξύσεις από δερματικά διηθήματα. Σε ορισμένες περιπτώσεις, στη διάγνωση της Λεϊσμανίας, χρησιμοποιείται σπορά σε θρεπτικά μέσα.

Τρυπανοσώματα- Αιτιακοί παράγοντες της ασθένειας του ύπνου (Αμερικανική / Αφρικανική τρυπανοσωμίαση ή νόσος Chagas).

Η αφρικανική παραλλαγή προσδιορίζεται στην αρχική περίοδο στη μελέτη του περιφερικού αίματος. Παθολογικά μικρόβια κατά την εξέλιξη της νόσου εντοπίζονται στο υλικό των παρακεντήσεων των λεμφαδένων, σε προχωρημένα στάδια - στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό.

Για τη διάγνωση των τρυπανοσωμάτων σε περίπτωση ύποπτης νόσου Chagas, το υλικό δοκιμής εξετάζεται κάτω από μικροσκόπιο σε χαμηλή μεγέθυνση. Σε αυτή την περίπτωση, οι κηλίδες και μια παχιά σταγόνα είναι προχρωματισμένα.

Τριχομονάς(εντερικά, στοματικά) ανιχνεύονται με μικροσκοπία υλικών που λαμβάνονται από τους προσβεβλημένους βλεννογόνους.

Αναγνώριση σπορόζωων (πλασμώδιο ελονοσίας, αιτιολογικός παράγοντας κοκκίδωσης κ.λπ.)

Το πιο κοινό και επικίνδυνο είδος για τον άνθρωπο είναι το πλασμώδιο της ελονοσίας, το οποίο έχει 4 κύριες ποικιλίες του παθογόνου: τον αιτιολογικό παράγοντα της ελονοσίας τριών ημερών, της ελονοσίας τεσσάρων ημερών, της τροπικής ελονοσίας και της ελονοσίας οβάλ.

Η σεξουαλική ανάπτυξη του Plasmodium (σπορογονία) λαμβάνει χώρα στα κουνούπια Anopheles. Άφυλη (σχιζογονία ιστών και ερυθροκυττάρων) - στον ηπατικό ιστό και στα ανθρώπινα ερυθροκύτταρα. Αυτά τα χαρακτηριστικά του κύκλου ζωής πρέπει να λαμβάνονται υπόψη κατά τη διάγνωση του πλασμωδίου της ελονοσίας.

Έτσι, στο αίμα ενός πρόσφατα άρρωστου ασθενούς, μπορούν να βρεθούν γεννητικά κύτταρα του κύκλου σπορογονίας. Αλλά στο αποκορύφωμα των κρίσεων ελονοσίας, οι σχιζόντες εμφανίζονται σε μεγάλους αριθμούς στο αίμα.

Επιπλέον, σε διάφορες φάσεις του ελονοσιακού πυρετού, εμφανίζονται διάφορες μορφές πλασμωδίου:

• Κατά την περίοδο της ψύχρας, το αίμα γεμίζει με μεροζωίτες, ένα είδος σχιζόντη.
• στο ύψος της θερμοκρασίας, τροφοζωίτες σε σχήμα δακτυλίου συσσωρεύονται στα ερυθροκύτταρα.
• η μείωση της θερμοκρασίας χαρακτηρίζεται από την επικράτηση των αμοιβοειδών τροφοζωιτών.
• σε περιόδους φυσιολογικής κατάστασης, το αίμα περιέχει ενήλικες μορφές σχιζόντων.

Η μελέτη του αιτιολογικού παράγοντα της ελονοσίας (πλασμώδιο ελονοσίας) πραγματοποιείται σε επίχρισμα και σε παχιά σταγόνα.

Σημείωση:η διάγνωση της ελονοσίας στη μελέτη επιχρισμάτων και παχύρρευστων σταγόνων αίματος είναι μερικές φορές λανθασμένη. Τα αιμοπετάλια του αίματος σε ορισμένες περιπτώσεις μπορεί λανθασμένα να ταξινομηθούν ως παθογόνα ελονοσίας. Επίσης, θραύσματα λευκοκυττάρων και άλλων κυττάρων μερικές φορές προσομοιώνουν το πλασμώδιο.

Βασικές μέθοδοι έρευνας για πρωτόζωα

Ας ρίξουμε μια σύντομη ματιά στις πιο κοινές μεθόδους έρευνας για την παρουσία πρωτοζώων.

Διάγνωση πρωτοζώων με χρήση φυσικού επιχρίσματος και επιχρίσματος βαμμένου με διάλυμα Lugol (στα κόπρανα)

Το φάρμακο παρασκευάζεται από γαλάκτωμα περιττωμάτων σε ισοτονικό διάλυμα. Δύο σταγόνες χλωριούχου νατρίου και διαλύματος Lugol εφαρμόζονται σε μια γυάλινη πλάκα. Το υλικό δοκιμής προστίθεται και στις δύο συνθέσεις με ένα ξύλινο ραβδί και, αφού καλυφθεί με γυαλί, παρατηρείται σε διαφορετικές αναλύσεις του μικροσκοπίου.

Σύμφωνα με ορισμένα σημάδια, τα πρωτόζωα που βρέθηκαν είναι καταχωρημένα. Για ακρίβεια, παρασκευάζονται 2-3 παρασκευάσματα από ένα υλικό. Σε αμφίβολες περιπτώσεις, η ανάλυση επαναλαμβάνεται πολλές φορές σε διάστημα 2-3 εβδομάδων.

Η μέθοδος μπορεί να ανιχνεύσει φυτικές και κυστικές μορφές:

• Λάμπια?
• balantidia;
• αμοιβάδα δυσεντερίας.

Μαζί με τις παθογόνες μορφές προσδιορίζονται και τα μη παθογόνα πρωτόζωα. Οι υγιείς φορείς έχουν επίσης αυλικές και κυστικές μορφές.

Σπουδαίος:έρευνα για την αποφυγή ανακρίβειων και λαθών θα πρέπει να διεξάγεται επανειλημμένα.

Το αποτέλεσμα της διάγνωσης των πρωτοζώων με τη μέθοδο ενός εγγενούς και χρωματισμένου επιχρίσματος πρέπει να περιέχει περιγραφή της μορφής του παθογόνου (ημιδιαφανές, κύστη, ιστός).

Απαιτήσεις έρευνας:

• το υλικό που λαμβάνεται για ανάλυση (υγρά κόπρανα) εξετάζεται το αργότερο 30 λεπτά μετά την αφόδευση.
• Τα σχηματισμένα κόπρανα πρέπει να διαγνωστούν εντός 2 ωρών μετά την αφόδευση.
• το υλικό δεν πρέπει να περιέχει ακαθαρσίες (απολυμαντικά, νερό, ούρα).
• Μόνο ξύλινα ραβδιά χρησιμοποιούνται για την εργασία με το υλικό, τα γυάλινα δεν είναι κατάλληλα λόγω της ολίσθησης της βλέννας.
• Τα ραβδιά πρέπει να καίγονται αμέσως μετά τη χρήση.

Μέθοδος διατήρησης (εξέταση κοπράνων) στη διάγνωση πρωτοζώων

Η μελέτη πραγματοποιείται με στερέωση των πρωτόζωων με συντηρητικό. Η διαφορά μεταξύ αυτής της μεθόδου και της προηγούμενης είναι ότι τα συντηρητικά σας επιτρέπουν να αποθηκεύσετε το φάρμακο για μεγάλο χρονικό διάστημα.

Χρησιμοποιημένα συντηρητικά:

• Χειράμαξα. Περιέχει συντηρητικά συστατικά: 0,7 ml χλωριούχο νάτριο, 5 ml φορμαλίνη, 12,5 ml αλκοόλη 96%, 2 g φαινόλη και 100 ml απεσταγμένο νερό. Σύνθεση χρωματισμού: 0,01% διάλυμα θειονίνης (αζούρ).
• Η λύση του Safarliev. Σύνθεση: 1,65 g θειικό ψευδάργυρο, 10 ml φορμαλίνη, 2,5 g κρυσταλλική φαινόλη, 5 ml οξικό οξύ, 0,2 g μπλε του μεθυλενίου, 100 ml νερό. Αυτό το συντηρητικό χρησιμοποιείται σε περιπτώσεις όπου το υλικό πρέπει να αποθηκευτεί για περισσότερο από ένα μήνα.

Τα άδεια μπουκάλια γεμίζονται με συντηρητικό, το υλικό μεταφέρεται σε αυτά, σε αναλογίες 3: 1 και, εάν είναι απαραίτητο, προστίθεται μια βαφή. Η αξιολόγηση των αποτελεσμάτων πραγματοποιείται στη μελέτη 2-3 φαρμάκων.

Μέθοδος εμπλουτισμού φορμαλίνης-αιθέρα (ανάλυση για την παρουσία πρωτοζώων στα κόπρανα)

Αυτή η διαγνωστική μέθοδος σας επιτρέπει να διαχωρίσετε και να συγκεντρώσετε κύστεις πρωτόζωων. Για την ανάλυση απαιτούνται τα ακόλουθα συστατικά: φορμαλίνη (10 ml), 0,85 g ισοτονικού διαλύματος, απεσταγμένο νερό, θειικός αιθέρας, διάλυμα Lugol.

Ένα μείγμα βιοϋλικού με τα αναγραφόμενα υγρά αναμειγνύεται και φυγοκεντρείται. Το ίζημα που λαμβάνεται στον πυθμένα του σωλήνα χρωματίζεται με διάλυμα Lugol και εξετάζεται για την παρουσία κύστεων και βλαστικών μορφών.

Μέθοδος ανίχνευσης λεϊσμανίας (επίχρισμα μυελού των οστών)

Για τη διάγνωση της λεϊσμανίασης, χρησιμοποιούνται αντιδραστήρια: μείγμα Nikiforov (θειικός αιθέρας και αιθυλική αλκοόλη), ρυθμιστικό φωσφορικών, Azur-eosin σύμφωνα με τον Romanovsky.

Η ουσία του μυελού των οστών τοποθετείται πολύ προσεκτικά σε μια γυάλινη πλάκα μετά από ειδική προετοιμασία. Χρησιμοποιείται μικροσκόπιο με σύστημα εμβάπτισης.

Στην οξεία περίοδο της νόσου, μεγάλος αριθμός Λεϊσμανιών εντοπίζεται στο σημείο.

Σημείωση:Μερικές φορές τα κύτταρα του αίματος μπορεί να μοιάζουν με τη λεϊσμανία που έχει υποβληθεί σε θεραπεία, επομένως είναι πολύ σημαντικό για τον τεχνικό εργαστηρίου να είναι προσεκτικός και να έχει αρκετή εμπειρία για να μελετήσει ανεξάρτητα.

Μέθοδος ανίχνευσης λεϊσμανίας σε επίχρισμα από διήθηση δέρματος

Τα απαιτούμενα αντιδραστήρια είναι παρόμοια με την προηγούμενη ανάλυση.

Το υλικό δοκιμής λαμβάνεται από το υπάρχον φυματικό ή ελκώδες περιεχόμενο. Η απόξεση με υποψία λεϊσμανίασης γίνεται πολύ προσεκτικά με νυστέρι, χωρίς αίμα. Στη συνέχεια το παρασκεύασμα παρασκευάζεται σε γυαλί. Για την ακρίβεια των αποτελεσμάτων που λαμβάνονται, εξετάζονται ταυτόχρονα διάφορα παρασκευάσματα.

Με την παρουσία μιας ασθένειας, μεταξύ των μακροφάγων, των ινοβλαστών και των λεμφικών κυττάρων που υπάρχουν στο υλικό δοκιμής, προσδιορίζεται επίσης η λεϊσμανία.

Μέθοδος απομόνωσης καθαρής καλλιέργειας Leishmania που λαμβάνεται με απόξεση παθολογικών ιστών

Με αυτή τη μέθοδο διάγνωσης, οι απλούστερες αποξέσεις ιστών τοποθετούνται σε ειδικό θρεπτικό μέσο στο οποίο η Leishmania αναπαράγεται ενεργά.

Πριν από την απόξεση, το δέρμα επεξεργάζεται προσεκτικά με οινόπνευμα, στη συνέχεια γίνεται μια τομή στο φυμάτιο, από το κάτω μέρος του οποίου αφαιρείται το περιεχόμενο και τοποθετείται σε δοκιμαστικό σωλήνα με το μέσο. Το υλικό λαμβάνεται πολλές φορές και στη συνέχεια τοποθετείται σε διαφορετικούς δοκιμαστικούς σωλήνες. Στη συνέχεια, σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία 22-24 βαθμών, γίνεται καλλιέργεια. Τα αποτελέσματα αξιολογούνται σε μικροσκόπιο. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται όταν άλλες, φθηνότερες και ταχύτερες μέθοδοι διάγνωσης πρωτοζώων είναι αναποτελεσματικές.

Μπορείτε να δείτε πώς οι δοκιμές για την παρουσία πρωτοζώων αποκρυπτογραφούνται στην πράξη με μια σταγόνα αίματος παρακολουθώντας μια ανασκόπηση βίντεο:

Lotin Alexander, ιατρικός αρθρογράφος

Τα κόπρανα εξετάζονται με δύο τρόπους:

1. Μακροσκοπικό - βρείτε ελμίνθους, τα κεφάλια τους, τμήματα, υπολείμματα στροβιλίων. Μικρές μερίδες κοπράνων αναμειγνύονται με νερό σε ένα επίπεδο λουτρό ή τρυβλίο Petri και βλέπονται σε καλό φως σε σκούρο φόντο, χρησιμοποιώντας μεγεθυντικό φακό εάν είναι απαραίτητο. Όλοι οι ύποπτοι σχηματισμοί μεταφέρονται με τσιμπιδάκια σε ένα άλλο φλιτζάνι νερό ή σε μια γυάλινη πλάκα σε μια σταγόνα αραιωμένης γλυκερίνης.

Με τη μέθοδο υποστηρίζονταςτο εξεταζόμενο τμήμα των κοπράνων αναδεύεται με νερό σε γυάλινο κύλινδρο, μετά την καθίζηση, το ανώτερο στρώμα νερού αποστραγγίζεται. Αυτό επαναλαμβάνεται αρκετές φορές. Όταν το υγρό γίνει διαφανές, στραγγίζεται και το ίζημα παρατηρείται σε ένα τρυβλίο Petri.

2. Μικροσκοπικό - για την ανίχνευση αυγών και προνυμφών ελμινθών. Υπάρχουν πολλές μέθοδοι έρευνας.

ένας). αυτοφυές επίχρισμα - η πιο κοινή και τεχνικά διαθέσιμη μέθοδος έρευνας. Μπορείτε να βρείτε αυγά και προνύμφες όλων των ελμινθών. Ωστόσο, με μικρό αριθμό αυγών, δεν βρίσκονται πάντα. Ως εκ τούτου, χρησιμοποιείται η μέθοδος εμπλουτισμού.

ένας). Μέθοδος Fülleborg - Αυτή είναι μια μέθοδος εμπλουτισμού, που βασίζεται στην εμφάνιση αυγών ελμινθίασης σε κορεσμένο διάλυμα NaCl (1,2 - πυκνότητα, 400 g NaCl ανά 1 λίτρο νερού, διάλυμα NaCl 40%). Η μέθοδος είναι πιο αποτελεσματική από το εγγενές επίχρισμα. 2-5 g περιττωμάτων τοποθετούνται σε γυάλινα βάζα και γεμίζονται με διάλυμα NaCl, αναδεύονται και μετά από 45 λεπτά το σχηματισμένο φιλμ αφαιρείται με μεταλλικό βρόχο, μια σταγόνα γλυκερίνης τοποθετείται σε μια γυάλινη πλάκα. Εξετάστε στο μικροσκόπιο. Το μειονέκτημα της μεθόδου είναι η καθυστερημένη εμφάνιση αυγών διαφόρων ελμίνθων, νάνος ταινίας - μετά από 15-20 λεπτά, στρογγυλός σκώληκας - 1,5 ώρα, μαστίγιος - 2-3 ώρες.

2) Μέθοδος Καλανταριάν - επίσης μέθοδος εμπλουτισμού, αλλά χρησιμοποιείται κορεσμένο διάλυμα NaNO 3 (πυκνότητα 1,38). Τα περισσότερα από τα αυγά επιπλέουν, δεν απαιτείται εξέταση του ιζήματος. Το μειονέκτημα είναι ότι τα αυγά διατηρούνται σε διάλυμα για μεγάλο χρονικό διάστημα, γεγονός που οδηγεί στο γεγονός ότι ορισμένα αυγά αρχίζουν να διογκώνονται και να κατακάθονται στον πυθμένα, εξαφανίζονται από την επιφανειακή μεμβράνη.

3. Η μέθοδος του Γκοριάτσεφ - με βάση την αρχή της εναπόθεσης αυγών, ανίχνευση μικρών αυγών τρηματωδών. Ως διάλυμα χρησιμοποιείται κορεσμένο διάλυμα NaCl και από πάνω επιστρώνονται προσεκτικά 3-4 ml διαλύματος περιττωμάτων. Μετά από 15-20 ώρες, τα αυγά τρηματωδών εγκαθίστανται στον πυθμένα. Το υγρό στραγγίζεται, καθιζάνει σε γυάλινη πλάκα και κάτω από μικροσκόπιο.

4. Μέθοδος συστροφής Shulman – για την ανίχνευση προνυμφών ελμινθών στα κόπρανα. Εξετάστε μόνο τα πρόσφατα απομονωμένα κόπρανα. 2-3 g τοποθετούνται σε ένα γυάλινο βάζο και προστίθεται 5 φορές η ποσότητα νερού, ανακατεύεται γρήγορα με ένα ραβδί, χωρίς να αγγίζει τα τοιχώματα του βάζου - 20-30 λεπτά, στη συνέχεια το ραβδί αφαιρείται γρήγορα και μια σταγόνα υγρό στο τέλος μεταφέρεται σε γυάλινη πλάκα και μικροσκοπείται.

5. Μέθοδος Berman - βασίζεται στην ικανότητα των προνυμφών ελμινθών να μεταναστεύουν προς τη ζεστασιά και χρησιμεύει για την αναγνώρισή τους στα κόπρανα.

6. Μέθοδος Harada και Mori (μέθοδος ανάπτυξης προνυμφών) και συνιστάται για έλεγχο για αγκυλοστομία. Η μέθοδος βασίζεται στο γεγονός ότι στη θερμότητα και σε υγρό φιλτραρισμένο χαρτί, τα αυγά αγκυλόστομων αναπτύσσονται σε νηματώδεις προνύμφες, οι οποίες μπορούν εύκολα να ανιχνευθούν. 15 γραμμάρια περιττωμάτων εφαρμόζονται στη μέση μιας λωρίδας φιλτραρισμένου χαρτιού, το χαρτί με περιττώματα τοποθετείται σε ένα βάζο, έτσι ώστε το κάτω άκρο να βυθίζεται σε νερό και το πάνω άκρο στερεώνεται με φελλό. Το βάζο διατηρείται σε θερμοστάτη στους 28 0 C για 5-6 ημέρες. Κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου αναπτύσσονται φιλαρόμορφες προνύμφες και κατεβαίνουν στο νερό. Το υγρό εξετάζεται κάτω από μεγεθυντικό φακό. Εάν είναι δύσκολο να εντοπιστεί, το υγρό φυγοκεντρείται, αφού θανατωθούν οι προνύμφες με θέρμανση στους 60 0. Ο τεχνικός εργαστηρίου πρέπει να φοράει γάντια.

7. Μέθοδοι για εντεροβίαση – αναγνώριση αυγών σκουληκιών και ταινίας βοοειδών.

α) ξύσιμο από τις περιπρωκτικές πτυχές - με μια μπατονέτα σφιχτά τυλιγμένη σε ξύλινο ραβδί και εμποτισμένη με διάλυμα γλυκερίνης 50%. Στο εργαστήριο, το στυλεό ξεπλένεται με 1-2 σταγόνες υδατικού διαλύματος γλυκερίνης 50%.

β) μέθοδος με κολλώδη ακάρεα (μέθοδος Graham)

Η κολλητική ταινία εφαρμόζεται στις περιπρωκτικές πτυχές, στη συνέχεια με ένα κολλώδες στρώμα στη γυάλινη πλάκα και υποβάλλεται σε μικροσκόπιο.

Γ) ξύσιμο με τη βοήθεια eye sticks (μέθοδος Rabinovich). Για την περιπρωκτική απόξεση, χρησιμοποιούνται γυάλινες ράβδους ματιών, το ευρύτερο μέρος των οποίων καλύπτεται με ειδική κόλλα, η οποία καθιστά δυνατή τη συγκράτηση των αυγών των σκουληκιών.

Εξέταση αίματος, χολής, πτυέλων και μυών

Μικροσκόπηση αίματος - ανιχνεύονται προνύμφες filariae.

Εξέταση πτυέλων - αυγά paraganim, προνύμφες στρογγυλών σκουληκιών, necator, strongyloid, στοιχεία εχινόκοκκου κύστης.

Εξέταση μυών - εάν υπάρχει υποψία τριχίνωσης, εξετάζονται οι μύες ενός ασθενούς ή του πτώματος, καθώς και το κρέας, που φέρεται να προκάλεσε μόλυνση στον άνθρωπο. Για τους σκοπούς της τριχινοσκόπησης, ο μυς κόβεται σε μικρά κομμάτια και τοποθετείται σε συμπιεστές, πρόκειται για δύο πλατιά, χοντρά ποτήρια που συνθλίβουν τους μύες και οι προνύμφες Trichinella βρίσκονται σε μορφή κάψουλας - η μέθοδος συμπίεσης.

Μέθοδος πέψης - οι μύες χύνονται με τεχνητό γαστρικό χυμό (διάλυμα υδροχλωρικού οξέος και πεψίνη). Οι μύες πέπτονται και οι προνύμφες αναγνωρίζονται εύκολα. Προσδιορισμός της έντασης της εισβολής: αριθμός προνυμφών έως 200 ανά 1 g μυϊκού ιστού - μέτρια ένταση εισβολής. έως 500 - εντατική. πάνω από 500 - υπερεντατική εισβολή.

Ορολογικές μέθοδοι

Ελμινθολογικές μέθοδοι έρευνας. Οι μέθοδοι διάγνωσης ελμινθασών χωρίζονται σε άμεσες, με βάση την άμεση ανίχνευση των ίδιων των ελμινθών ή των θραυσμάτων τους, καθώς και των προνυμφών και των αυγών των ελμινθών (μέθοδοι για την εξέταση των κοπράνων, των ούρων, της χολής και του δωδεκαδακτύλου, των πτυέλων, του αίματος και των ιστών, υλικό που λαμβάνεται με απόξεση από την περιπρωκτική περιοχή και τους υπογόνιους χώρους), και έμμεσο, με τη βοήθεια του οποίου ανιχνεύονται δευτερογενείς αλλαγές που συμβαίνουν στο ανθρώπινο σώμα ως αποτέλεσμα της δραστηριότητας των ελμινθών (μελέτες της μορφολογικής σύνθεσης του αίματος, ανοσολογικές μέθοδοι διάγνωσης ελμινθάσεων, ακτινολογικές μελέτες κ.λπ.). Από τις άμεσες μεθόδους, οι πιο κοινές είναι οι κοπρολογικές, οι οποίες χωρίζονται σε μακρο- και μικροελμινθοσκόπηση. Σε ορισμένες περιπτώσεις, χρησιμοποιούνται ειδικές μέθοδοι.

Μέθοδοι έρευνας μακρογελμιτοσκόπησηςπου στοχεύει στην αναζήτηση ελμινθών ή θραυσμάτων τους (scolex, τμήματα, τμήματα του strobila των κεστωδών). Χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση των ελμινθιών στις οποίες τα αυγά δεν απεκκρίνονται με τα περιττώματα του ασθενούς ή απεκκρίνονται σε μικρές ποσότητες και όχι πάντα (για παράδειγμα, με εντεροβίαση, σκουλήκια καρφίτσας βρίσκονται στα κόπρανα, με τενιιδώσεις, τμήματα).

Για να ανιχνευθούν σκουλήκια καρφίτσας ή τμήματα κεστωδών στα κόπρανα, τα κόπρανα εξετάζονται με γυμνό μάτι. Για τη διαφορική διάγνωση των τενιιδώσεων, συνιστάται η προβολή περιττωμάτων αραιωμένων με νερό σε ξεχωριστές μικρές μερίδες σε μαύρες φωτογραφικές κυψέλες ή σε πιάτα Petri σε σκούρο φόντο. Μεγάλοι σχηματισμοί ύποπτοι για θραύσματα ελμινθών εξετάζονται κάτω από μεγεθυντικό φακό ανάμεσα σε δύο γυάλινες διαφάνειες. Εάν, σύμφωνα με κλινικές ενδείξεις, προτείνεται η ανίχνευση μικρών ελμινθών ή κεφαλών κεστόδων μετά τη θεραπεία, τότε τα ύποπτα σωματίδια εξετάζονται κάτω από μεγεθυντικό φακό σε μια σταγόνα γλυκερίνης και, εάν είναι απαραίτητο, σε μικροσκόπιο.

Μέθοδοι έρευνας μικροελμινθοσκόπησης(ποιοτικά) στοχεύουν στον εντοπισμό αυγών και προνυμφών ελμινθών. Εφαρμόστε τη μέθοδο παχιάς επάλειψης με κάλυμμα σελοφάν κατά Kato. Το μείγμα Kato αποτελείται από 6 ml 3% υδατικό διάλυμα πράσινου μαλαχίτη, 500 mlγλυκερίνη και 500 mlΔιάλυμα φαινόλης 6%. Πιάτα Κάτω (υδροφιλικό σελοφάν κομμένο σε κομμάτια 20΄ 40 mm) βυθίζονται στο 24 ηστο μείγμα Κάτω έτσι ώστε να είναι γειτονικά το ένα με το άλλο (3-5 mlΔιάλυμα Kato για 100 πιάτα). 100 mgΤα κόπρανα εφαρμόζονται σε μια γυάλινη πλάκα, καλύπτονται με μια πλάκα κάλυψης σελοφάν σύμφωνα με το Kato και πιέζονται προς τα κάτω έτσι ώστε τα κόπρανα να αλείφονται στη γυάλινη πλάκα μέσα στην πλάκα σελοφάν. Το επίχρισμα αφήνεται σε θερμοκρασία δωματίου για διαύγαση κατά 40-50°C min,και στη συνέχεια παρατηρήθηκε στο μικροσκόπιο. Την καυτή περίοδο, για να μην στεγνώσει το παρασκεύασμα, τοποθετείται ένα υγρό σφουγγάρι στο πιάτο του παρασκευασμένου σκευάσματος.

Για την πλήρη ανίχνευση όλων των τύπων ελμινθών, πρέπει να χρησιμοποιείται η μέθοδος παχύρρευστης επίχρισης της πλάκας κάλυψης Kato σελοφάν σε συνδυασμό με μία από τις μεθόδους εμπλουτισμού. Οι πιο συνηθισμένες από αυτές είναι η μέθοδος Kalantaryan και η μέθοδος Fülleborn.

Μέθοδος Kalantaryan: σε φιάλες με φαρδύ λαιμό 100 mlανακατεύουμε καλά με μια γυάλινη ράβδο 5 σολκόπρανα, προσθέτοντας σταδιακά ένα κορεσμένο διάλυμα νιτρικού νατρίου (1 κιλόνιτρικό νάτριο ανά 1 μεγάλονερό όταν βράζει) μέχρι το χείλος του ποτηριού. Τα μεγάλα σωματίδια που έχουν επιπλεύσει στην επιφάνεια αφαιρούνται με μια σέσουλα χαρτιού. Μια γυάλινη αντικειμενοφόρος πλάκα εφαρμόζεται στην επιφάνεια του αλατούχου διαλύματος (προστίθεται αλατούχο διάλυμα μέχρι το μείγμα να έρθει σε πλήρη επαφή με τη γυάλινη πλάκα). Μετά το 20-30 ελάχΗ γυάλινη πλάκα αφαιρείται και το φιλμ εξετάζεται με μικροσκόπιο. Ελλείψει αυτού του αλατιού, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε ένα κορεσμένο διάλυμα επιτραπέζιου αλατιού σύμφωνα με το Fholleborn (400 σολαλάτι σε 1 μεγάλοβραστό νερό).

Λόγω του γεγονότος ότι αυγά με μεγάλο ειδικό βάρος (μη γονιμοποιημένα αυγά ασκαριδών, αυγά τρεματωδών και μεγάλων κεστωδών) δεν επιπλέουν, εκτός από την εξέταση του επιφανειακού στρώματος του υγρού, κατά τη χρήση της μεθόδου Fülleborn, είναι απαραίτητο να δείτε 2-4 παρασκευάσματα από το ίζημα στο μικροσκόπιο.

Ειδικές εργαστηριακές μέθοδοι έρευνας για διάφορες ελμινθίασες.

Για την ανίχνευση θραυσμάτων ελμινθών, τα κόπρανα παρατηρούνται γυμνά, στη συνέχεια αναμιγνύονται με νερό και εξετάζονται σε μικρές μερίδες σε ένα τρυβλίο Petri σε σκούρο φόντο. Όλα τα ύποπτα σωματίδια τοποθετούνται σε μια γυάλινη διαφάνεια σε μια σταγόνα νερού και εξετάζονται κάτω από ένα μεγεθυντικό φακό. Μπορείτε να τοποθετήσετε την ημερήσια μερίδα σε κύλινδρο με προσθήκη 5-10 φορές μεγαλύτερη ποσότητα νερού. Μετά την ανάδευση, το δοχείο αφήνεται μέχρι την πλήρη καθίζηση των αιωρούμενων σωματιδίων. Το επιφανειακό στρώμα του υγρού στραγγίζεται και χύνεται καθαρό νερό. Το πλυμένο ίζημα παρατηρείται σε μικρές μερίδες με γυμνό μάτι ή κάτω από ένα μεγεθυντικό φακό. Για την ανίχνευση αυγών χρησιμοποιούνται μικροσκοπικές μέθοδοι εξέτασης.

Μητρική μέθοδος επιχρίσματος. Μια μικρή ποσότητα περιττωμάτων από διαφορετικά σημεία του τμήματος δοκιμής λειοτριβείται σε μια γυάλινη αντικειμενοφόρο πλάκα σε μια σταγόνα διαλύματος γλυκερίνης 50%, ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου ή νερό. Το μείγμα καλύπτεται με καλυπτρίδα και παρατηρείται κάτω από μικροσκόπιο.

Η αιωρούμενη μέθοδος του Fülleborn. Ένα μέρος των κοπράνων αναμιγνύεται με 20 μέρη κορεσμένου διαλύματος χλωριούχου νατρίου (ειδικό βάρος 1,18), που προστίθενται σε μικρές μερίδες. Τα μεγάλα σωματίδια που έχουν επιπλεύσει στην επιφάνεια αφαιρούνται αμέσως και το μείγμα αφήνεται για 45 λεπτά. Κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου, τα αυγά ελμινθών, με χαμηλότερο ειδικό βάρος από το διάλυμα χλωριούχου νατρίου, επιπλέουν στην επιφάνεια. Το επιφανειακό φιλμ αφαιρείται με συρμάτινο βρόχο διαμέτρου περίπου 1 cm και μεταφέρεται σε γυάλινη πλάκα για εξέταση στο μικροσκόπιο.

μέθοδος Kalantaryan. Η αποτελεσματικότητα της μεθόδου επίπλευσης αυξάνεται με την αντικατάσταση του χλωριούχου νατρίου με ένα κορεσμένο διάλυμα νιτρικού νατρίου. Σε αυτή την περίπτωση, το μείγμα διατηρείται για 10-15 λεπτά.

Η επιφανειακή μεμβράνη που σχηματίζεται μετά την καθίζηση ενός μείγματος περιττωμάτων με διάλυμα χλωριούχου νατρίου ή νιτρικού νατρίου μπορεί επίσης να αφαιρεθεί με μια γυάλινη πλάκα. Για το σκοπό αυτό, ένα βάζο γεμάτο μέχρι το χείλος με μείγμα περιττωμάτων με διάλυμα αλατιού καλύπτεται με γυάλινη πλάκα έτσι ώστε η κάτω επιφάνειά του να έρχεται σε επαφή με το υγρό. Μετά την καθίζηση, το γυαλί αφαιρείται και, γυρίζοντας γρήγορα προς τα πάνω την επιφάνεια στην οποία βρίσκεται το φιλμ, εξετάζεται με μικροσκόπιο.

Το ξύσιμο των σπειροειδών πτυχών (για τον εντοπισμό των αυγών των σκουληκιών καρφίτσας και των ογκόσφαιρων της ταινίας βοοειδών) γίνεται το πρωί πριν την κατασκευή της τουαλέτας. Μια ξύλινη σπάτουλα βουτηγμένη σε νερό ή διάλυμα γλυκερίνης 50% χρησιμοποιείται για να ξύσει γύρω από τον πρωκτό. Το προκύπτον υλικό μεταφέρεται σε μια γυάλινη αντικειμενοφόρο πλάκα σε μια σταγόνα νερού ή διάλυμα γλυκερίνης 50% και εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Η σπάτουλα μπορεί να αντικατασταθεί με μια βρεγμένη μπατονέτα, η οποία χρησιμοποιείται για να σκουπίσει την περιπρωκτική περιοχή και στη συνέχεια ξεπλύνετε καλά με νερό. Το νερό φυγοκεντρείται και το ίζημα εξετάζεται σε μικροσκόπιο.

Μέθοδος Bermann (για ανίχνευση προνυμφών). Ένα μεταλλικό πλέγμα επικαλυμμένο με 5-6 g περιττωμάτων στερεώνεται σε μια γυάλινη χοάνη που εισάγεται σε βάση. Ένας ελαστικός σωλήνας με σφιγκτήρα τοποθετείται στο κάτω άκρο της χοάνης. Το χωνί γεμίζει με νερό που θερμαίνεται στους t ° 50 °, έτσι ώστε το κάτω μέρος του πλέγματος με τα κόπρανα να έρχεται σε επαφή με το νερό. Οι προνύμφες κινούνται ενεργά στο νερό και συσσωρεύονται στο κάτω μέρος του ελαστικού σωλήνα. Μετά από 4 ώρες, το υγρό χαμηλώνεται σε σωλήνες φυγοκέντρησης, φυγοκεντρείται και το ίζημα εξετάζεται σε μικροσκόπιο.

Ανάλυση πτυέλων, ρινικής βλέννας και κολπικής έκκρισης για την ανίχνευση αυγών του πνευμονικού trematode paragonimus, προνύμφες ασκαρίδων και αγκυλόστομων, αυγών σκουληκιών, θραυσμάτων εχινόκοκκου κύστης. Το εξεταζόμενο τμήμα της βλέννας (εκκρίσεις) επαλείφεται σε γυαλί και παρατηρείται μακροσκοπικά σε ασπρόμαυρο φόντο και στη συνέχεια κάτω από μικροσκόπιο. Μπορείτε να προσθέσετε ένα διάλυμα αντιφορμίνης 25% στο υλικό δοκιμής, να ανακινήσετε καλά και να κρατήσετε για 1-1,5 ώρα για να διαλυθεί η βλέννα. Το μίγμα φυγοκεντρείται και το ίζημα εξετάζεται σε μικροσκόπιο.

Ανάλυση δωδεκαδακτυλικού και γαστρικού υγρού για την ανίχνευση αυγών ήπατος, αγκυλόστομα, προνύμφες Strongyloides. Και τα τρία μέρη του περιεχομένου του δωδεκαδακτύλου που λαμβάνεται με φυγοκεντρούνται και το ίζημα εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Επίσης εξερευνήστε και.

Μελέτη ιστών. Για την αναγνώριση των προνυμφών Trichinella, κομμάτια του μυ που έχει υποβληθεί σε βιοψία χωρίζονται προσεκτικά σε ίνες, συμπιέζονται ανάμεσα σε γυαλιά συμπιεστή (χοντρά γυαλιά με βίδες) και εξετάζονται κάτω από μικροσκόπιο με σκιασμένο φως. Για την αναγνώριση των κυστικέρων, οι μύες στρωματοποιούνται με βελόνες ανατομής, το απομονωμένο κυστίδιο καθαρίζεται από τον περιβάλλοντα ιστό, συμπιέζεται ανάμεσα σε δύο γυάλινες πλάκες και εξετάζεται κάτω από μεγεθυντικό φακό.

Εξέταση αίματος (για την ανίχνευση προνυμφών filariae). Μια κρεμασμένη σταγόνα εξετάζεται σε μια ολίσθηση κάλυψης με βαζελίνη. Μπορείτε να αναμίξετε 0,3 ml αίματος με 10 φορές την ποσότητα ενός διαλύματος 3%. Το μίγμα φυγοκεντρείται και το ίζημα εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Για τον εμπλουτισμό των παρασκευασμάτων, προστίθενται 3 ml διαλύματος φορμαλίνης 2% ή πενταπλάσια ποσότητα υγρού που αποτελείται από 95 ml διαλύματος φορμαλίνης 5%, 5 ml οξικού οξέος και 2 ml πυκνού διαλύματος αλκοόλης αιματοξυλίνης. σε 1 ml φλεβικού αίματος. Το μίγμα φυγοκεντρείται, το ίζημα πλένεται με απεσταγμένο νερό και εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Για τη διαφοροποίηση διαφορετικών τύπων φιλαριών, εξετάζονται επιχρίσματα που βάφονται σύμφωνα με τη μέθοδο Giemsa-Romanovsky.

Μέθοδοι ανοσολογικής διάγνωσης. Εφαρμόστε (συγκόλληση, στερέωση συμπληρώματος) και αλλεργικά διαγνωστικά τεστ (βλ.) με από τον αντίστοιχο τύπο ελμινθίου.

Ελμινθολογικές μέθοδοι έρευνας. Ρύζι. Αυγά ελμινθίου. 1-10 - αυγά στρογγυλών σκουληκιών (νηματώδη): 1 - 3 - στρογγυλά σκουλήκια (1 - γονιμοποιημένο αυγό, 2 - γονιμοποιημένο αυγό χωρίς κέλυφος πρωτεΐνης, 3 - μη γονιμοποιημένο αυγό). 4 - στρογγυλό σκουλήκι της γάτας. 5 - σαρκοφάγα στρογγυλά σκουλήκια. 5 - pinworms? 7 - μαστίγιο? 8 - tominx; 9 - αγκυλόστομος? 10 - tricho-strongylid. 11-15 - αυγά ταινίας (κεστόδες): 11 - ταινία βοοειδών. 12 - νάνος ταινίας? 13 - ταινία αρουραίων? 14 - ταινία κολοκύθα? 15 - φαρδιά κορδέλα. 16 - 24 - αυγά φουσκωτών (τρεματωδών): 16 - τρεματώδη (σχιστοσώματα) Ιαπωνικά. 17 - τρεματώδη (σχιστοσώματα) ούρα - σεξουαλική. 18 - τρηματώδεις (σχιστοσώματα) Munson; 19 - τρεματώδη (παρογώνυμα) πνευμονικά. 20 - trematodes (opisthorchis) Siberian (αιλουροειδές). 21 - trematodes (clonorchis) κινέζικα. 22 - εντερικοί τρηματώδεις (metagonimus); 23 - τρηματώδεις (fasciolas) του ήπατος. 24 - λογχοειδή τρεματώδη (δικροκήλιο).

Μια αποτελεσματική και βολική μέθοδος ελμινθολογικής έρευνας είναι μελέτη παχύρρευστου κατά Κάτω, η ουσία του οποίου είναι η ανίχνευση αυγών ελμινθών σε ένα παχύ επίχρισμα περιττωμάτων, διαυγασμένα με γλυκερίνη και χρωματισμένα με πράσινο μαλαχίτη. Η σύνθεση του μείγματος Kato είναι 6 ml υδατικού διαλύματος πράσινου μαλαχίτη 3%, 500 ml γλυκερίνης, 500 ml διαλύματος φαινόλης 6%. Το διάλυμα είναι σταθερό και μπορεί να αποθηκευτεί σε θερμοκρασία δωματίου. Για την προετοιμασία των παρασκευασμάτων, κομμάτια περιττωμάτων σε μέγεθος μπιζελιού εφαρμόζονται σε μια γυάλινη πλάκα, καλύπτονται με μια μεμβράνη υδρόφιλου σελοφάν που έχει ωριμάσει σε μείγμα Kato για 24 ώρες και πιέζονται στο γυαλί για να κατανεμηθεί ομοιόμορφα το υλικό. Τα επιχρίσματα διαυγασμένα για 40-60 λεπτά εξετάζονται μικροσκοπικά. Τα ανιχνευμένα αυγά έλμινθου μετρώνται και η υπαγωγή τους στο είδος προσδιορίζεται από μορφολογικά χαρακτηριστικά. Η μέθοδος επιτρέπει να αποκαλυφθούν τα αυγά των ασκαρίδων, μαστιγίων, κεστωδών, τρεματωδών, σε μικρότερο βαθμό - αγκυλόστομος και πυγμαίος ταινίας.

Επίσης χρησιμοποιείται ευρέως μεθόδους εμπλουτισμού. Η αρχή των μεθόδων επίπλευσης είναι η εναιώρηση των κοπράνων σε ένα αλατούχο διάλυμα, το οποίο έχει μεγαλύτερη σχετική πυκνότητα από τα αυγά ελμινθών, με αποτέλεσμα να επιπλέουν στην επιφάνεια. Τα περιεχόμενα της επιφανειακής μεμβράνης εξετάζονται σε μικροσκόπιο. Ως εμπλουτιστικά μείγματα, χρησιμοποιούνται διαλύματα: επιτραπέζιο αλάτι - 400 g σε 1 λίτρο νερού (σχετική πυκνότητα σύμφωνα με το Fülleborn -1,18). νιτρικό νάτριο - 1 kg σε 1 λίτρο νερού (σχετική πυκνότητα σύμφωνα με Kalantaryan-1,38), νιτρικό νάτριο - 900 g και νιτρικό κάλιο - 400 g σε 1 λίτρο νερού (σχετική πυκνότητα σύμφωνα με Brudastov και Krasnonos-1,48). βρασμένο και κρυωμένο.
Για έρευνα, 5-10 g περιττωμάτων προστίθενται σε ένα ποτήρι ή φαγεντιανή, 100-200 ml αλατούχου διαλύματος προστίθενται σε αυτό και αναμειγνύονται καλά. Στη συνέχεια, τα μεγάλα σωματίδια που έχουν βγει στην επιφάνεια αφαιρούνται με μια ξύλινη σπάτουλα ή μια σέσουλα από χαρτί ή χαρτόνι και μια φαρδιά γυάλινη πλάκα εφαρμόζεται αμέσως στην επιφανειακή μεμβράνη έτσι ώστε το αλατούχο διάλυμα και η γυάλινη πλάκα να έρθουν σε πλήρη επαφή. Μετά από 30-40 λεπτά καθίζησης του μείγματος, αφαιρείται η γυάλινη πλάκα, τοποθετείται στο μικροσκόπιο με το φιλμ προς τα πάνω και εξετάζεται προσεκτικά ολόκληρη η επιφάνεια. Για να αποφύγετε το στέγνωμα, μπορείτε να προσθέσετε 2-3 σταγόνες από ένα διάλυμα γλυκερίνης 50%. Το επιφανειακό φιλμ μπορεί επίσης να αφαιρεθεί με συρμάτινο βρόχο. Η αποτελεσματικότητα των μεθόδων επίπλευσης αυξάνεται καθώς αυξάνεται η σχετική πυκνότητα των διαλυμάτων αλάτων. Χρησιμοποιώντας αυτές τις μεθόδους, είναι δυνατός ο εντοπισμός αυγών νηματωδών, κεστωδών και τρεματωδών.

Για την ανίχνευση αυγών στα κόπρανα, χρησιμοποιείται η μέθοδος καθίζησης Krasilnikov.. Τα κόπρανα αναμιγνύονται με διάλυμα απορρυπαντικού 1% (σκόνη πλυσίματος Lotos κ.λπ.) σε αναλογία 1:10 μέχρι να σχηματιστεί ένα εναιώρημα. Υπό την επίδραση του απορρυπαντικού διαλύονται διάφορα συστατικά των περιττωμάτων (πρωτεΐνες, λίπη, στοιχεία ιστού). Μετά από 30 λεπτά, τα περιεχόμενα του σωλήνα ανακινούνται για 1-2 λεπτά και στη συνέχεια φυγοκεντρούνται για 5 λεπτά. Τα παρασκευάσματα παρασκευάζονται από το ίζημα και εξετάζονται σε μικροσκόπιο.
Σε συνθήκες πεδίου, καθώς και κατά τη διάρκεια μαζικών ερευνών του πληθυσμού για προσβολή ελμινθών, είναι βολικό να χρησιμοποιείται η μέθοδος παχύρρευστης επίχρισης Kato. Σε σταθερές συνθήκες, κατά την εξέταση ασθενών, είναι προτιμότερο να χρησιμοποιούνται οι πιο αποτελεσματικές μέθοδοι επίπλευσης. Όταν χρησιμοποιείτε αυτές τις μεθόδους κατά τη διάρκεια της μικροσκοπίας, συνιστάται να μετράτε τα αυγά που βρίσκονται στο παρασκεύασμα. Με την επιφύλαξη του τυπικού βάρους ή όγκου που λαμβάνεται για τη μελέτη των περιττωμάτων (για παράδειγμα, 1 κουταλάκι του γλυκού ή κουταλιά της σούπας) και ενός σταθερού ενιαίου όγκου αλατούχων διαλυμάτων, μπορεί κανείς να κρίνει κατά προσέγγιση την ένταση των εισβολών. Αυτό το ποσοτικό αρχείο μπορεί να είναι χρήσιμο για την τεκμηρίωση της συνταγογραφούμενης θεραπείας και την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της αποπαρασίτωσης. Επιπλέον, άλλες πιο ακριβείς ποσοτικές μέθοδοι, ιδίως η μέθοδος Stoll, μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον προσδιορισμό της έντασης της μόλυνσης.

Για τη διάγνωση της τενιαρύγνωσης και της εντεροβίασηςεφαρμόστε τη μέθοδο έρευνας των περιπρωκτικών-ορθικών ξύσεων. Μια ξύλινη σπάτουλα εμποτισμένη σε διάλυμα γλυκερίνης 50% χρησιμοποιείται για να ξύσει τις περιπρωκτικές πτυχές το πρωί πριν από την αφόδευση γύρω από τον πρωκτό και το κάτω μέρος του ορθού. Το προκύπτον υλικό, καθαρισμένο με μια σπάτουλα από την άκρη του καλύμματος, τοποθετείται σε μια γυάλινη πλάκα σε μια σταγόνα διαλύματος γλυκερίνης 50%, καλύπτεται με καλυπτρίδα και εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Μπορείτε επίσης να εξετάσετε μια λωρίδα ταινίας κυτταρίνης, η οποία πιέζεται πρώτα με μια κολλητική πλευρά στις διανυστικές πτυχές, στη συνέχεια τοποθετείται σε μια γυάλινη πλάκα και υποβάλλεται σε μικροσκόπιο.

Ανίχνευση προνυμφών νηματωδών στα κόπρανα με τη μέθοδο Berman. Η μέθοδος βασίζεται στη θερμοτροπική ιδιότητα των προνυμφών. Για έρευνα, λαμβάνεται 1 κουταλιά της σούπας περιττώματα, τοποθετούνται σε μεταλλικό πλέγμα ή πλέγμα πολλών στρωμάτων γάζας σε συρμάτινο πλαίσιο. Το πλέγμα είναι εγκατεστημένο σε μια χοάνη στερεωμένη σε τρίποδο. Ένας λαστιχένιος σωλήνας με σφιγκτήρα ενώνει το χωνί. Ανυψώνοντας το πλέγμα, το χωνί γεμίζει με νερό (θερμοκρασία +40°...+50°C) ώστε το κάτω μέρος του πλέγματος να βυθιστεί σε νερό. Οι προνύμφες από τα κόπρανα μεταναστεύουν ενεργά σε ζεστό νερό και, καθιζάνοντας, συσσωρεύονται στο κάτω μέρος της χοάνης. Μετά από 2-4 ώρες, ο σφιγκτήρας ανοίγει, το νερό κατεβάζεται σε σωλήνα φυγοκέντρησης και φυγοκεντρείται για 2-3 λεπτά. Στη συνέχεια το υπερκείμενο στραγγίζεται, το ίζημα μεταφέρεται σε μια γυάλινη αντικειμενοφόρο πλάκα και εξετάζεται με μικροσκόπιο, όπου βρίσκονται κινητές προνύμφες του παθογόνου της ισχυροειδίασης.

Μέθοδος Harad και Το Mori επιτρέπει τη διαφοροποίηση των προνυμφών των αγκυλόστομων και των νεκροφόρων. Οι προνύμφες αγκυλόστομων καλλιεργούνται σε διηθητικό χαρτί. Για το σκοπό αυτό, 0,5 g φρέσκων περιττωμάτων που λαμβάνονται από τον ασθενή το αργότερο 1 ώρα μετά την αφόδευση εφαρμόζονται σε λωρίδες χαρτιού φίλτρου διαστάσεων 12Χ1,5 cm, αφήνοντας και τα δύο άκρα της ταινίας καθαρά. Το ένα άκρο της λωρίδας βυθίζεται σε δοκιμαστικό σωλήνα, το τέταρτο μέρος του οποίου είναι γεμάτο με νερό και το άλλο σφίγγεται με φελλό. Οι σωλήνες τοποθετούνται σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία +26 ... + 28°C. Οι προνύμφες που έχουν αναπτυχθεί από τα αυγά κατεβαίνουν κατά μήκος του διηθητικού χαρτιού και κατακάθονται στον πυθμένα του δοκιμαστικού σωλήνα. Μετά από 5-6 ημέρες, η λωρίδα χαρτιού αφαιρείται και το υγρό που παραμένει στον δοκιμαστικό σωλήνα εξετάζεται με μεγεθυντικό φακό ή φυγοκεντρείται. Το ίζημα που σχηματίζεται κατά τη φυγοκέντρηση εξετάζεται σε μικροσκόπιο φωτός. Όταν χρησιμοποιούνται αντί για δοκιμαστικούς σωλήνες τετραεδρικά γυάλινα βάζα (μέγεθος 15XYX7 cm), στα τοιχώματα των οποίων είναι προσαρτημένες 4 λωρίδες χαρτιού, η αποτελεσματικότητα των αναλύσεων αυξάνεται (GM Maruashvili et al., 1966).

Μέθοδοι έρευνας για τη σχιστοσωμίαση . Εξέταση κοπράνων - ένα μέρος των κοπράνων αναμιγνύεται με 250 ml νερού, φιλτράρεται μέσω 3 στρώσεων γάζας σε ένα κωνικό δοχείο, το οποίο γεμίζει μέχρι την κορυφή με νερό. Μετά από 30 λεπτά, το υγρό στρώμα αποστραγγίζεται, προστίθεται ένα φρέσκο ​​μέρος νερού στο ίζημα. Το ίζημα πλένεται έως ότου ληφθεί ένα διαυγές υπερκείμενο και εξετάζεται μικροσκοπικά.

Μέθοδος προνυμφοσκόπησης - 20-25 g περιττωμάτων τοποθετούνται σε φιάλη Erlenmeyer με γυάλινο σωλήνα συγκολλημένο στο πλάι και πλένονται με νερό βρύσης. Στη συνέχεια η φιάλη καλύπτεται με σκούρο χαρτί, αφήνοντας τον συγκολλημένο γυάλινο σωλήνα στο φως σε θερμοκρασία +25...+30°C. Τα εκκολαφθέντα miracidia συγκεντρώνονται στον μηνίσκο στον πλευρικό σωλήνα, όπου φαίνονται με μεγεθυντικό φακό ή με γυμνό μάτι. Εξέταση ούρων - συλλέγονται 100 ml ούρων μεταξύ 10 π.μ. και 2 μ.μ., ή η ημερήσια δόση καθιζάνει και στη συνέχεια φυγοκεντρείται στις 1500 σ.α.λ. Το προκύπτον ίζημα εφαρμόζεται* σε γυάλινη πλάκα και υποβάλλεται σε μικροσκόπιο. Ο ΠΟΥ συνιστά μια μέθοδο για το φιλτράρισμα ολόκληρου του τμήματος των ούρων. Μετά τη διήθηση, τα φίλτρα υποβάλλονται σε επεξεργασία με φορμαλίνη ή θερμαίνονται (για να σκοτωθούν τα αυγά) και στη συνέχεια υγραίνονται με ένα υδατικό διάλυμα νινυδρίνης. Σε αποξηραμένα παρασκευάσματα, τα έμβρυα αυγών αποκτούν μωβ χρώμα.

Η χρήση ανοσολογικών Οι μέθοδοι έρευνας για τη διάγνωση της σχιστοσωμίασης είναι δύσκολες, καθώς τα ενήλικα σχιστοσωμάτια και τα αυγά τους περιέχουν μεγάλο αριθμό αντιγόνων που προκαλούν ανοσολογικές αποκρίσεις που δεν είναι ειδικές για το είδος (D. Bradley, 1979).

Στη χώρα μας, για τη διαμόρφωση ανοσολογικών αντιδράσεων στην ελμινθίαση, παράγονται μια σειρά από τυπικά διαγνωστικά. Δερματικό αλλεργικό τεστ για εχινόκοκκο και κυψελιδικό, RLA με αντιγόνο εχινοκοκκίασης, RSK στο κρύο, αντίδραση κατακρήμνισης στο κρύο σε διάφορες τροποποιήσεις (κατακρήμνιση δακτυλίου, κατακρήμνιση σε δοκιμαστικούς σωλήνες ή τριχοειδή αγγεία, τα οποία τοποθετούνται με αντιγόνα τριχίνωσης, κυστεοκοκκίασης και ημικροασκαρίωσης πρακτικά έχουν) εφαρμογή. Τα τυπικά διαγνωστικά για τον καθορισμό των παραπάνω ορολογικών αντιδράσεων γίνονται από επιχειρήσεις που παράγουν βακτηριακά σκευάσματα. Ο κατασκευαστής επισυνάπτει λεπτομερείς οδηγίες σχετικά με τους κανόνες αποθήκευσης, τις ημερομηνίες λήξης του φαρμάκου και οδηγίες για τη χρήση των κατάλληλων αντιγόνων με την τεχνική ρύθμισης της αντίδρασης στα παρασκευασμένα διαγνωστικά.

Τα τελευταία χρόνια, ο κατάλογος των ορολογικών εξετάσεων που χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση της ελμινθίασης έχει διευρυνθεί σημαντικά. Για το σκοπό αυτό, χρησιμοποιούνται οι ακόλουθες αντιδράσεις: RIGA, έμμεσος ανοσοφθορισμός (RIF), ανοσοδιάχυση γέλης (RID), αντιανοσοηλεκτροφόρηση (VIEF), REAMA. Αυτές οι αντιδράσεις μπορούν να χρησιμοποιηθούν για ασκαρίαση, τοξοκαρίαση, τριχίνωση, λοιμώξεις από αγκυλόστομα, φιλαρίαση, εχινοκοκκίαση και κυψελιδική, οπισθορχίαση, σχιστοσωμίαση και παραγονιμίαση. Ωστόσο, για αυτές τις αντιδράσεις στη χώρα μας δεν εκδίδονται τυπικά διαγνωστικά και δεν ρυθμίζεται η τεχνική ρύθμισης τους. Ξεχωριστά εργαστήρια, ως επί το πλείστον επιστημονικά, παρασκευάζουν τα δικά τους ειδικά αντιγόνα και τα χρησιμοποιούν σε διάφορες τροποποιήσεις. Η περιγραφή αυτών των μεθόδων παρουσιάζεται ευρέως στη βιβλιογραφία και δεν είναι αυστηρά ενοποιημένη. Η ερμηνεία των δεδομένων ανοσοδοκιμασίας θα πρέπει να βασίζεται στη μελέτη της δυναμικής της ανοσολογικής απόκρισης, λαμβάνοντας υπόψη το επίπεδο ειδικότητας και ευαισθησίας κάθε εφαρμοζόμενης ορολογικής δοκιμής. Ως εκ τούτου, κατά τη διάγνωση, καθώς και κατά τη διάρκεια οροεπιδημιολογικών ερευνών του πληθυσμού, συνιστάται η χρήση πολλών από τις πιο ευαίσθητες αντιδράσεις. Από αυτές τις θέσεις, οι αντιδράσεις VIEF και REMA, οι οποίες διακρίνονται από υψηλή ευαισθησία και αρκετά υψηλή ειδικότητα, έχουν αποδειχθεί καλά (P. Ambroise-Thomas, 1978; I. E. Ballad, 1979; G. M. Negryanu, 1980; A. M. Ponomareva, 1981; Ya. Lysenko, 1978, κ.λπ.). Η αποτελεσματικότητα του REAMA έχει δοκιμαστεί στην αμεβίαση, τη λεϊσμανίαση, την τρυπανοσωμίαση και την τοξοπλάσμωση (GA Ermolin, 1980).