Kariotipizacija limfocita periferne krvi supružnika. Kako i zašto se radi kariotipizacija budućih majki i očeva - mehanizam pregleda

Kariotip odražava sastav kromosoma osobe. Normalno, osoba ima 46 kromosoma ili 23 para. 23. par - spolni kromosomi - XX u žena, XY u muškaraca. Analiza kariotipa održava za djecu i odrasle. Kariotip djeteta omogućuje isključivanje nekih genetskih bolesti. Kariotipizacija supružnika pomaže u utvrđivanju genetskog uzroka neplodnosti i pobačaja, kao i prognozi zdravog potomstva.

Što je kariotip?

kariotip- kompletan set kromosoma u ljudskim stanicama. Normalan sadržaj kromosoma u ljudskim somatskim (neembrionalnim) stanicama je 46 kromosoma, organiziranih u 23 para. Svaki par se sastoji od jednog kromosoma primljenog od majke i jednog primljenog od oca. Za proučavanje kariotipa osobe uzima se krv iz vene. U Laboratoriju CIR kariotipizacija se provodi citogenetskim i molekularno genetičkim metodama. Postoji i analiza kariotipa FISH, koja vam omogućuje analizu kromosoma pomoću fluorescentnih boja.

Laboratorij CIR provodi sljedeće pretrage kariotipizacije:

Prve tri analize rade se citogenetskom metodom. CMA je molekularna genetička analiza kariotipa.

Razgovarajmo o citogenetskoj metodi provođenja analize kariotipa.
Izgled kromosoma značajno se mijenja tijekom staničnog ciklusa: tijekom interfaze, kromosomi su lokalizirani u jezgri, u pravilu, despiralizirani i teško ih je promatrati, stoga se za određivanje kariotipa stanice koriste u jednoj od faza njihove diobe - metafaza mitoze. Kromosomi u svjetlosnom mikroskopu u fazi metafaze su molekule DNA upakirane uz pomoć posebnih proteina u guste supersmotane strukture u obliku štapića. Dakle, veliki broj kromosoma upakiran je u mali volumen i smješten u relativno mali volumen stanične jezgre. Raspored kromosoma, vidljiv u mikroskopu, fotografira se i iz nekoliko fotografija prikuplja se sustavni kariotip - numerirani skup kromosomskih parova homolognih kromosoma. U ovom slučaju, slike kromosoma su usmjerene okomito, s kratkim kracima prema gore, a njihovo numeriranje se provodi silaznim redoslijedom veličine. Par spolnih kromosoma (X i Y kod muškarca, X i X kod žene) nalazi se na samom kraju slike kromosomske garniture.

Kada se daje krv za kariotip?

Pregled kariotipa je nerutinska analiza, za koju postoje indikacije.

Razlozi zbog kojih liječnik može predložiti pregled mogu uključivati:

• rođenje djeteta s genetskom patologijom ili prisutnost kromosomske patologije u rodbini jednog od supružnika;
• neplodnost u obitelji;
• ponovljeni pobačaj i/ili spontani pobačaj u prvih 12 tjedana trudnoće;
• izloženost zračenju, opasan rad na poslu itd.

Koji test kariotipa trebam napraviti?

Analiza kariotipa može se provesti u dvije verzije: kariotipizacija bez aberacija i kariotipizacija s aberacijama. Prva analiza pokazuje genetski sklop osobe - broj kromosoma i velike promjene u svim kromosomima dobivenim od roditelja. Kariotipizacija s aberacijama pokazuje promjene koje se događaju u kromosomima tijekom života osobe pod utjecajem različitih štetnih čimbenika okoliša. Analiza kariotipa CMA metodom provodi se u rijetkim slučajevima u slučaju zastoja u rastu djece, autizma ili sumnje na mikrodelecijski sindrom.

Analiza kariotipa bračnog para (kariotipizacija supružnika)

Kako bi se utvrdio mogući uzrok neplodnosti u obitelji, liječnik može propisati kariotipizaciju supružnika. Supružnici mogu polagati test u različito vrijeme, to ne utječe na tumačenje. Ako postoji pretpostavka o genetskoj prirodi neplodnosti, test kariotipa može se dodijeliti jednom od supružnika. .

Kako se testirati na kariotip? Gdje mogu dobiti test kariotipa?

Kariotip: cijena analize

Cijenu analize kariotipa saznajte u našem cjeniku.

Analiza kariotipa: kako se proučava ljudski kariotip?

Svaki se kromosom sastoji od specijaliziranih struktura – centromera i dva telomera. Centromera (cen) ili primarni spoj dijeli kromosom na dva dijela – dugi (q) i kratki (p) krak i odgovoran je za odvajanje kromosoma tijekom stanične diobe. Prije nego što počne dioba stanice, kromosom se sastoji od jedne kromatide. Nakon udvostručenja DNK – od dvije kromatide, sve dok se ne podijele u dvije nove stanice.

Za postupak određivanja kariotipa citogenetička metoda može se koristiti bilo koja populacija stanica koje se dijele. Za određivanje ljudskog kariotipa obično se koriste limfociti periferne krvi. Za analizu kariotipa krv se uzima iz vene u sterilnu epruvetu. Nema uvjeta za polaganje testa, možete doručkovati prije odlaska u laboratorij.

Prijelaz limfocita iz stadija mirovanja G0 u proliferaciju izaziva se dodatkom stimulatora stanične diobe - fitohemaglutinina. Za određivanje kariotipa također se mogu koristiti stanice koštane srži ili primarna kultura fibroblasta kože. Kako bi se povećao broj stanica u fazi metafaze, neposredno prije fiksacije u staničnu kulturu dodaje se kolhicin ili nokadazol, koji blokiraju stvaranje mikrotubula, čime se sprječava divergencija kromatida prema polovima stanične diobe i završetak mitoze.

Nakon fiksacije preparati metafaznih kromosoma se boje i pregledavaju pod mikroskopom.

Da bi se dobio klasični kariotip, kromosomi se boje raznim bojama ili njihovim mješavinama: zbog razlika u vezivanju boje na različite dijelove kromosoma, bojenje se događa neravnomjerno i stvara se karakteristična trakasta struktura (kompleks poprečnih oznaka, engl. banding), odražavajući linearnu heterogenost kromosoma i specifične za homologne parove kromosoma i njihove dijelove (s izuzetkom polimorfnih regija, različite alelne varijante gena su lokalizirane). Prvu metodu bojenja kromosoma koja je proizvela tako vrlo detaljne slike razvio je švedski citolog Kaspersson (Q-bojenje). \\Koriste se i druge boje; takve se tehnike zajednički nazivaju diferencijalno bojenje kromosoma.

Vrste diferencijalnog bojenja kromosoma

G-bojanje- modificirano bojanje po Romanovsky-Giemsi. Osjetljivost je veća od Q-bojanja, stoga se koristi kao standardna metoda za citogenetsku analizu. Koristi se za otkrivanje malih aberacija i kromosoma markera (segmentiranih drugačije od normalnih homolognih kromosoma).

Q-bojanje- Bojenje po Kasperssonu kininskim iperitom uz pregled pod fluorescentnim mikroskopom. Najčešće se koristi za proučavanje Y kromosoma (brzo određivanje genetskog spola, otkrivanje translokacija između X i Y kromosoma ili između Y kromosoma i autosoma, probir mozaicizma koji uključuje Y kromosome).

R-bojenje- koriste se akridin narančasta i slična bojila te se boje područja kromosoma koja su neosjetljiva na G-bojanje. Koristi se za identifikaciju detalja homolognih G- ili Q-negativnih regija sestrinskih kromatida ili homolognih kromosoma.

C-bojanje- koristi se za analizu centromernih regija kromosoma koji sadrže konstitutivni heterokromatin i varijabilni distalni dio Y kromosoma.

T-bojenje- koristi se za analizu telomernih regija kromosoma.

Analiza kromosomskih mikronizova (CMA)

Modernija tehnologija za istraživanje kariotipa. Analiza kariotipa provodi se molekularno genetičkom metodom aCGH (comparative microarray genomic hybridization), koja za razliku od klasične citogenetičke metode ima visoku rezoluciju koja omogućuje otkrivanje manjih strukturnih promjena u kariotipu.

Fluorescentna in situ hibridizacija, engleski. Fluorescencija in situ hibridizacija, FISH

Otkrivanje aneuploidije - kršenje broja kromosoma. Na slici zelena boja odgovara kromosomu 13, a crvena 21, što ukazuje na prisutnost triploidije na kromosomu 21 u ovom uzorku.

U novije vrijeme koristi se tehnika tzv. spektralne kariotipizacije (fluorescence in situ hybridization, engleski Fluorescence in situ hybridization, FISH) koja se sastoji u bojenju kromosoma setom fluorescentnih boja koje se vežu na određene regije kromosoma. Kao rezultat takvog bojenja, homologni parovi kromosoma poprimaju identične spektralne karakteristike, što ne samo da uvelike olakšava identifikaciju takvih parova, već također olakšava otkrivanje interkromosomskih translokacija, odnosno pomicanja dijelova između kromosoma - translocirani dijelovi imaju spektar koji se razlikuje od spektra ostatka kromosoma.

Poremećaji u strukturi kromosoma možda se neće manifestirati tijekom života. Ali kada se jajna stanica i spermija spoje, susreću se dva genetska skupa, a tada neuspješno podudaranje gena može uzrokovati pobačaj ili stvaranje kongenitalne patologije u fetusu. Kariotipizacija supružnika pomaže identificirati abnormalnosti u strukturi i broju kromosoma, kao i vjerojatnost određenog odstupanja.

Pregled kariotipa je izborna analiza. Postupak ima svoje indikacije, uključujući pobačaje i propuštenu trudnoću u povijesti. Reproduktivni problemi povezani s osobitostima genetike prilično su rijetki.

Kariotipizacija je dijagnostički postupak kojim se otkrivaju abnormalnosti u građi i broju kromosoma. Takva odstupanja mogu uzrokovati nasljedne patologije kod djeteta i neplodnost supružnika.

Svaka osoba ima svoj specifičan skup gena, koji se naziva kariotip. Kromosomi su raspoređeni u parove: 22 para autosoma i 1 par spolnih kromosoma, koji su u ženskom tijelu predstavljeni kao XX, au muškom XY. Sastoje se od gena - područja koja su odgovorna za manifestaciju određene osobine.

Kariotipizacija otkriva bolesti koje su izravno povezane s promjenama u DNK. Defekt može biti u genu, u strukturi kromosoma ili u njihovom broju. Najpoznatiji primjer je Downov sindrom, koji se naziva i trisomija 21.

Kariotipizacija supružnika (citogenetička analiza) proučavanje je kromosoma krvnih stanica. Postupkom se identificiraju uzroci pobačaja ili neplodnosti kod parova kada su drugi čimbenici već isključeni (hormonalni, imunološki, infektivni). Ako se otkrije povećana genomska nestabilnost, upotreba antioksidansa i imunomodulatora pomoći će smanjiti rizik od neuspjeha tijekom začeća.

Kojim parovima se preporučuje kariotipizacija?

Kao što je već navedeno, kariotipizacija supružnika nije uključena u popis obveznih dijagnostičkih postupaka. Indiciran je u sljedećim slučajevima:

1. Jedan ili oba roditelja su stariji od 35 godina.
2. Neplodnost, čiji se uzroci ne mogu utvrditi drugim metodama.
3. Nekoliko neuspješnih IVF postupaka.
4. Život u područjima s lošim ekološkim uvjetima, rad u opasnim industrijama, kontakt s opasnim kemikalijama.
5. Pušenje, zlouporaba alkohola, uzimanje droga, određenih lijekova.
6. Prethodni pobačaji, izostala trudnoća, prijevremeni porodi.
7. Supružnici su u krvnom srodstvu.
8. Prethodno rođena djeca s genetskim bolestima.

Priprema za ispitni postupak

Analiza se radi u laboratoriju i ne predstavlja nikakvu opasnost za zdravlje supružnika. 2 tjedna prije zahvata morate prestati piti alkohol, duhanske proizvode i lijekove. Ako se uzimanje bilo kojeg lijeka ne može prekinuti, morate o tome upozoriti laboratorijskog tehničara.

Krv se uzima na pun želudac, a posljednji obrok trebao bi biti 1-2 sata prije testa. Prije samog zahvata potrebno je ispuniti poseban upitnik ili ga ponijeti sa sobom (u nekim slučajevima ga unaprijed ispunjava liječnik). Ako se kariotipizacija supružnika podudara s pogoršanjem ili akutnim tijekom zarazne bolesti kod jednog ili oba para, tada se studija mora ponovno zakazati.

Provođenje analize

Tijekom kariotipizacije krv se uzima iz vene. Laborant njime napuni epruvetu i pusti bolesnika. Genetska analiza i priprema rezultata obično traje oko 5 dana.

Za daljnja istraživanja bit će potreban samo dio materijala - limfociti. Izoliraju se iz krvi tijekom razdoblja diobe. Kako bi se izazvala aktivnost ovog procesa, dodaju se posebni lijekovi (Colchicine, Nocazadol). Tijekom sljedeća tri dana analiziraju se značajke reprodukcije stanica. Na temelju dobivenih rezultata donosi se zaključak o mogućim patologijama i rizicima od pobačaja.

Suvremene tehnologije omogućuju kariotipizaciju uz pomoć samo 15 stanica i posebnih pripravaka. Stoga je dovoljno jedno vađenje krvi da se dobiju točni i potpuni podaci o kromosomima i genima.

Kakav će biti rezultat?

Tumačenje analize kariotipizacije supružnika provodi genetičar. Normalni rezultat za žene je 46HH, za muškarce - 46HU. Znači da je otkriveno ukupno 46 kromosoma, od kojih je posljednji par spolni kromosom. Kada se otkrije genetska patologija, ova se formula mijenja. Na primjer, s Downovim sindromom (trisomija 21) izgleda kao 46XX21+.

Rezultat kariotipizacije pomaže identificirati sljedeće patologije:

1. Trisomija je prisutnost dodatnog trećeg kromosoma u paru. Trisomija na 21. kromosomu - Downov sindrom, na 16. - spontani pobačaj u 1. tromjesečju, na 13. - Patauov sindrom, na 18. - Edwardsov sindrom. Od njih, jedina moguća opcija je Downov sindrom.
2. Monosomija je odsutnost jednog kromosoma u paru. Monosomija bilo kojeg autosomnog kromosoma dovodi do rane embrionalne smrti. Slična patologija u paru XX kod žena očituje se Shereshevsky-Turnerovim sindromom.
3. Delecija je odsutnost dijela kromosoma. Ako su velika područja izgubljena, dolazi do rane embrionalne smrti. U drugim slučajevima mogu se razviti genetske patologije (na primjer, sindrom cry-the-cat zbog brisanja na kromosomu 5) ili pozitivan učinak na vitalnost (na primjer, otpornost na HIV). Delecija spolnog kromosoma kod muškaraca uzrokuje poremećaje u spermatogenezi i dovodi do neplodnosti.
4. Duplikacija je prisutnost dvostrukog fragmenta kromosoma. Funkcije izvornih gena nisu pogođene.
5. Inverzija je zaokret bilo kojeg dijela kromosoma za 180°. Neke od tih promjena su normalne, druge dovode do smrti zametnih stanica i stvaranja neuravnoteženog materijala u njima. Rezultat je smanjena plodnost, povećan rizik od pobačaja i abnormalnosti fetusa.
6. Translokacija je pomicanje dijela kromosoma. Neke od tih promjena ni na koji način ne utječu na osobu, druge dovode do pobačaja i kongenitalnih anomalija fetusa (Robertsonove translokacije).

Obrazac za rezultate bilježi promjene u strukturi kromosoma. Dugi krak označen je slovom "q", a kratki krak "t". Na primjer, sindrom cry-the-cat (brisanje na kromosomu 5) piše se kao 46HH5t ili 46HY5t.

Druga stvar koja se otkriva kariotipizacijom su promjene u genima. Može se identificirati:

1. Mutacije gena koje utječu na zgrušavanje krvi. Povećano stvaranje tromba može uzrokovati pobačaj, neplodnost ili neuspjeh implantacije oplođenog jajašca.
2. Genske mutacije na kromosomu Y uzrok su muške neplodnosti, što zahtijeva korištenje sperme donora.
3. Genske mutacije koje smanjuju sposobnost tijela za detoksikaciju – oslobađanje od štetnih tvari primljenih iz vanjskog okruženja.
4. Promjene u genu za cističnu fibrozu koje dovode do razvoja ove bolesti kod djeteta.

Utvrđena su odstupanja od norme: što učiniti?

Za dobivanje potpunih informacija o rezultatima kariotipizacije, supružnici trebaju doći na konzultacije s genetičarom. On će vam detaljno reći o mogućim rizicima i vjerojatnosti razvoja pojedinog poremećaja.

Kariotipizacija je jedna od novih metoda citogenetskih istraživanja, kojom se proučavaju skupovi ljudskih kromosoma (tzv. kariotip). Znanstvenici, vodeći svoja istraživanja, mogu odrediti strukturu kromosoma i, ako se to dogodi, kršenje njihove strukture. Dovoljno je provesti kariotipizaciju kromosoma jednom u životu - rezultati studije određuju genom muških i ženskih pojedinaca za međusobno dosljednost. Drugim riječima, zahvaljujući takvim analizama moguće je provjeriti podudaraju li se muškarac i žena na genetskoj razini, mogu li imati djecu i hoće li njihova beba biti zdrava.

Metoda kariotipizacije je najnoviji medicinski prijedlog, koji međutim svake godine postaje sve popularniji među mladim (i manje mladim) supružnicima.

Kariotip je kompletan skup kromosoma, s opisom određenih karakteristika - veličina, oblik, broj. Kod ljudi, kao što je poznato iz tečaja elementarne biologije, u genomu postoji 46 kromosoma - ukupno 23 para. Štoviše, 44 kromosoma su autosomna: oni su odgovorni za prijenos podataka koji ukazuju na nasljedne osobine ove ili one vrste. To uključuje boju i tip kose, strukturu ušiju, kvalitetu vida itd. Ali jedan par kromosoma je odgovoran za spolne karakteristike - to je onaj koji daje ženski kariotip ("XX") ili muški ("XY").

Zahvaljujući dekodiranju kromosoma, njihovoj usporedbi i povezivanju, znanstvenici mogu s 99%-tnom točnošću reći kolika je vjerojatnost da se rodi neispravna ili bolesna beba.

Molekularna kariotipizacija: indikacije

Naravno, bilo bi apsolutno ispravno da se apsolutno svi roditelji podvrgnu kariotipizaciji prije nego što dobiju djecu. Štoviše, bez obzira na to propisuju li liječnici takvu analizu ili ne. Možda će u budućnosti takve analize biti obvezne, ali ne danas. Za sada se ljudi upućuju na kariotipizaciju samo ako za to postoje uvjerljivi razlozi.

Brojne nasljedne bolesti koje su se pojavile u obitelji određene osobe ponekad se pojavljuju sasvim neočekivano (iako predvidljivo). Nekoliko generacija može biti apsolutno zdravo, a onda se iznenada pojavi neka vrsta bolesti. To je kariotipizacija koja može identificirati istu patologiju u nerođenog djeteta i unaprijed izračunati sve rizike.

Analiza je potrebna ako:

1. Jedan ili oba supružnika koji se odluče na dijete stariji su od 35 godina.
2. Žena dugo ne može zatrudnjeti, a liječnici ne mogu utvrditi podrijetlo neplodnosti.
3. Bilo je više pokušaja umjetne oplodnje, ali svi su bili neuspješni.
4. Jedan od supružnika je imao neke nasljedne bolesti u svojoj obitelji.
5. Žena ima nekakav poremećaj, neravnotežu hormona u tijelu.
6. Muškarac ima povijest poremećene spermatogeneze, a uzrok poremećenog stvaranja spermija nije utvrđen.
7. Jedan od supružnika došao je u kontakt s opasnim kemikalijama.
8. Jedan od supružnika bio je izložen zračenju.
9. Par živi u nepovoljnom ekološkom okruženju.
10. U prošlosti je bilo trenutaka koji su mogli imati negativan utjecaj na dijete. Na primjer, žena ili muškarac prethodno su pušili, pili alkohol ili droge ili uzimali mnogo lijekova.
11. Žena je imala tri ili više spontano prekinutih trudnoća (spontani pobačaj, smrznuta trudnoća, prijevremeni porod).
12. Muškarac i žena su blisko povezani.
13. Par već ima dijete s nekom vrstom urođene patologije i nedostatkom u razvoju.

Najbolje je podvrgnuti kariotipizaciji prilikom planiranja trudnoće. Ali sada je moguće proučavati kariotip djeteta koje žena nosi - provodi se takozvana prenatalna kariotipizacija.

Kariotipizacija: priprema za analizu

Za određivanje kariotipa potrebne su krvne stanice. Kako bi analiza bila točnija i kvalitetnija, potrebno je učiniti sve kako bi se eliminirali čimbenici koji otežavaju rast stanica. Zato priprema za kariotipizaciju često traje dva ili više tjedana.

Ako se odlučite provjeriti kariotip, potrebno vam je najmanje 14 dana:

1. Zabranjeno pušenje.
2. Nemojte piti alkoholna pića.
3. Nemojte uzimati lijekove (to se prije svega odnosi na antibiotike).
4. Nemojte se razboljeti (ovo se odnosi i na zarazne prehlade i na pogoršanja raznih kroničnih bolesti).

Kariotipizacija: kako to učiniti

1. Za određivanje kariotipa osobe potrebna je venska krv koja se uzima od muškarca i žene (vrlo je važno da su oba supružnika spremna za testiranje).
2. Nakon primljene venske krvi, laboratorij izdvaja limfocite (oni su tek u fazi diobe (faza mitoze)).
3. Za provođenje kvalitativne analize dovoljno je 12 do 15 limfocita - to je dovoljno za identifikaciju kvantitativnih i kvalitativnih odstupanja kromosoma - oni su ti koji ukazuju na prisutnost bilo koje genetske nasljedne bolesti.
4. Stanice limfocita prate se tri dana – analizira se njihova dioba, rast i razmnožavanje.
5. Za poticanje faze mitoze, stanice limfocita se tretiraju posebnim spojem - mitogenom.
6. Kada dođe do neposrednog procesa diobe, znanstvenici proučavaju kromosome - u ovom slučaju mitoza se mora zaustaviti posebnim tretmanom.
7. Nakon što znanstvenici prikupe dovoljno podataka, pripremaju posebne preparate za ispitivanje kromosoma na staklu.
8. Da bi struktura kromosoma bila jasnija, moguće je dodati boju koja omogućuje genomu da dobije boju. Budući da kromosomi imaju individualnost, nakon bojenja mogu postati još uočljiviji.
9. U završnoj fazi, obojeni razmazi se podvrgavaju analizi, koja može odrediti ne samo ukupan broj kromosoma, već i zasebnu strukturu svakog od njih.
10. Uspoređujući uparene kromosome i njihove pruge, znanstvenici provjeravaju dobivene rezultate svojom tablicom koja opisuje norme citogenetskih obrazaca kromosoma.

Kariotipizacija: rezultati

Analizu za proučavanje kariotipa mora uzeti genetičar u specijaliziranoj klinici. Ako vam se ponudi da se podvrgnete testovima u redovnoj bolnici, tada postoji rizik da će analiza biti nepouzdana, jer najčešće u redovnim medicinskim ustanovama nema kvalificiranih liječnika i opreme za izvođenje samog procesa.

Ako analiza odgovara normi, onda bi trebala izgledati kao "46XX" (žensko) ili "46XY" (muško). U slučaju da stručnjaci iznenada otkriju genetski poremećaj, snimanje će biti kompliciranije. Na primjer, "46XY21+" znači da muškarac ima patologiju u obliku dodatnog kromosoma (štoviše, 21 znači da je treći kromosom prisutan u 21 paru).

Zahvaljujući kariotipizaciji moguće je identificirati patologije kao što su:

• trisomija - prisutnost trećeg dodatnog kromosoma u paru (vjerojatno Downov sindrom);
• monosomija - odsutnost jednog kromosoma u paru;
• delecija – gubitak nekog dijela kromosoma;
• duplikacija – udvostručenje jednog od fragmenata kromosoma;
• inverzija - netočna rotacija nekog dijela kromosoma;
• translokacija - rokada određenih dijelova kromosoma.

Ako se u Y kromosomu pronađe brisanje, to najvjerojatnije ukazuje na kršenje spermatogeneze i, kao posljedicu, neplodnost kod muškarca. Osim toga, to je brisanje koje najčešće uzrokuje kongenitalnu patologiju kod djeteta.

Kako bi bilo zgodno, ako postoje bilo kakve nepravilnosti u strukturi kromosoma, znanstvenici zapisuju rezultate testa latiničnim slovima. Na primjer: dugi krak označen je "q", kratki krak označen je "t". Ako žena ima povijest gubitka fragmenta, recimo, kratkog kraka petog kromosoma, tada će unos biti "46HH5t". Ovo genetsko odstupanje naziva se "mačji plač" - beba rođena od takvog para najvjerojatnije će imati urođene poremećaje, također će plakati bez razloga.

Zahvaljujući kariotipizaciji moguće je procijeniti stanje gena, jer je moguće identificirati:

1. Mutacija gena koja utječe na stvaranje krvnih ugrušaka - to značajno pogoršava protok krvi i može uzrokovati pobačaj ili čak neplodnost.
2. Genska mutacija Y kromosoma - trudnoća je moguća, ali samo ako postoji drugi spermij (korištenje donora).
3. Mutacija gena koji su odgovorni za detoksikaciju - to ukazuje na to da tijelo ima nisku sposobnost dezinfekcije toksičnih čimbenika.
4. Mutacija gena koja rezultira cističnom fibrozom, što će pomoći u potpunom uklanjanju rizika od razvoja ove bolesti.

Suvremena oprema također omogućuje prepoznavanje predispozicije za bolesti koje nemaju tako jasnu genetsku karakteristiku: srčani udar ili dijabetes melitus, hipertenzija ili patologija zglobova itd.

Kariotipizacija: što dalje

1. Ako su tijekom kariotipizacije otkrivene bilo kakve abnormalnosti, liječnik će o tome odmah obavijestiti supružnike. Bez obzira radi li se o mutaciji gena ili kromosomskoj aberaciji, kod jednog ili oba supružnika odjednom, genetičar će sve detaljno objasniti i razjasniti koji su rizici za nerođeno dijete, kolika je vjerojatnost da će dijete biti bolesno. .
2. Odmah je vrijedno napomenuti da je genetska patologija neizlječiva, ako postoje kromosomski poremećaji, tada supružnici moraju donijeti vrlo važnu i odgovornu odluku: ipak roditi svoje dijete (na vlastitu odgovornost i rizik), koristiti spermu donora (jaje) , privući surogat majku, ne da rodi dijete, već da usvoji bebu.
3. Ako su liječnici identificirali kromosomske abnormalnosti kod žene tijekom trudnoće, liječnici objašnjavaju da postoji mogućnost bolesnog djeteta i savjetuju prekid trudnoće. Ali na budućim roditeljima je odluka hoće li pobaciti ili ne. Nitko nema pravo inzistirati na prekidu trudnoće – ni liječnik, ni genetičar, niti bilo tko od rodbine.
4. Ako je u pitanju kromosomska abnormalnost ili njezina prisutnost dovodi do niskog postotka rađanja bolesne bebe, tada liječnici propisuju tečaj vitamina koji smanjuju vjerojatnost da se beba rodi s patologijama ili abnormalnostima.

Fetalni kariotip: što je to?

Ako roditelji iz više razloga nisu proveli kariotipizaciju tijekom planiranja trudnoće, a pod srcem žene već sazrijeva novi život, tada se može provesti perinatalna kariotipizacija. Ova metoda pomoći će identificirati prisutnost kromosomskih patologija u fetusu već u prvom tromjesečju trudnoće. Ova će studija identificirati sve abnormalnosti i uputiti liječnike za liječenje, prilagodbu ili druge nepopularne radnje potrebne tijekom trudnoće.

Zahvaljujući ovoj metodi moguće je isključiti Downov, Patauov, Turnerov, Edwardsov i Klinefelterov sindrom, kao i polisomiju X kromosoma.

Kariotipizacija fetusa: metode

Trenutno postoje dvije metode koje se koriste za ispitivanje fetusa.

1. Neinvazivna metoda. Potpuno siguran za majku i bebu. Za ovu studiju dovoljno je provesti ultrazvučni pregled, koji će uzeti mjerenja fetusa, kao i proučiti biokemijsku analizu trudnice kako bi se identificirali posebni markeri.
2. Invazivna metoda. Ozbiljnija metoda, budući da se za identifikaciju patologije manipulacije moraju provesti izravno u maternici. Liječnik uzima ili stanice iz koriona ili stanice iz placente, kao i krv iz pupkovine i uzorak amnionske tekućine za analizu. Ova analiza je preciznija. Zahvaljujući biopsiji gore navedenih materijala, liječnici mogu dobiti dovoljno informacija o zdravlju bebe. Cijeli se postupak provodi točno kako je gore opisano - kariotip osobe određuje se proučavanjem skupa kromosoma.

Kariotipizacija fetusa: komplikacije

Prije prakticiranja invazivne metode kariotipizacije fetusa, liječnik mora obavijestiti da postoji mali (ne više od 2-3%) rizik od komplikacija nakon studija. U najgorem slučaju moguć je pobačaj, može doći do krvarenja ili može početi curiti amnionska tekućina.

Zato, prije nego što se odlučite na ovaj zahvat, morate odvagnuti sve prednosti i nedostatke i tek onda dati svoj pristanak. Ako samo želite saznati spol djeteta u ranoj fazi (a ovom metodom to je sasvim moguće), bolje je odbiti invazivno fetalno kariotipiziranje. Sasvim je drugo pitanje postoji li rizik od rođenja djeteta s genetskim poremećajem ili anomalijom.

Fetalni kariotip: indikacije

Intervencija tijekom trudnoće radi invazivne kariotipizacije fetusa provodi se samo iz medicinskih razloga. Ovaj postupak se preporučuje ako:

1. Trudna je preko 35 godina i ovo joj je prvo dijete.
2. Ultrazvučni pregled pokazao je prisutnost patologije u fetusu.
3. U krvi trudnice oštro su se promijenili biokemijski parametri - krvni markeri (AFP, hCG, PPAP).
4. U obitelji postoji bolest koja se prenosi samo po spolu (npr. hemofilija - ova će se bolest sa žene prenijeti na sina, a ne na kćer).
5. Obitelj već ima dijete s patologijom ili defektom u razvoju, ili s genetskom bolešću.
6. Žene doživljavaju pobačaje tijekom dugih vremenskih razdoblja, budući da fetus razvija razvojnu anomaliju koja nije kompatibilna sa životom.
7. Roditelji djeteta bili su ozračeni ili su dugo radili (rade) u opasnoj industriji.
8. Trudnica je u prvom tromjesečju bolovala od virusne bolesti.
9. Jedan ili oba roditelja su koristili droge.

Što je kariotipizacija. Video

Analiza kariotipa je suvremeni laboratorijski test koji vam omogućuje prepoznavanje mogućih patoloških poremećaja na genetskoj razini, utvrđivanje uzroka neplodnosti i čak utvrđivanje hoće li nerođeno dijete biti zdravo. Dobiveni rezultat bilježi promjene u skupu kromosoma. Dijagnostički postupak trenutno je vrlo tražen jer omogućuje utvrditi razinu genetske podudarnosti između muškaraca i žena.

Kariotip - kromosomski set, koji se razlikuju po određenim karakteristikama. Norma je prisutnost 46 kromosoma:

• 44 – odgovoran za sličnost s roditeljima (boja očiju, kosa, itd.).
• 2 – označava spol.

Analiza za kariotipizaciju neophodna je za utvrđivanje patoloških poremećaja koji se javljaju u tijelu. Laboratorijska dijagnostika je nezamjenjiva za utvrđivanje uzroka neplodnosti i prisutnosti kongenitalnih patologija koje se mogu naslijediti.

Redoslijed kariotipizacije:

1. Uzimanje uzoraka venske krvi i probir jednojezgrenih leukocita u laboratoriju.
2. Stavljanje biološkog materijala u medij s PHA (fitohemaglutinin) i početak uzgoja stanica (mitotska dioba).
3. Prestanak mitoze nakon postizanja faze metafaze, koja se provodi uz pomoć kolhicina.
4. Tretman hipotoničnom otopinom i izrada mikrostakalca.
5. Proučavanje i fotografiranje formiranih stanica posebnim mikroskopom.

Tek nakon 2 tjedna stručnjaci u laboratoriju dobivaju rezultat studije. Obrazac sadrži podatke o ukupnom broju kromosoma, a evidentiraju se i postojeće povrede genetskog koda.

Za procjenu reproduktivnih funkcija para koji planira djecu propisana je genetska studija. Za postavljanje dijagnoze potrebna je cjelovita slika genetskih karakteristika. Na temelju dobivenih rezultata moguće je tražiti načine rješavanja postojećeg problema, ako ga ima. Kariotipizacija ima za cilj određivanje broja, oblika i veličine kromosoma u biološkom uzorku.

Ako postoje bilo kakva kršenja, postoje problemi iz unutarnjih sustava i organa. U nekim slučajevima, potpuno zdravi ljudi su nositelji genetske mutacije. Vizualno to nije moguće utvrditi. Kao rezultat toga, problemi s koncepcijom, malformacijama ili rođenjem nezdravog djeteta.

Za kariotipizaciju postoje sljedeće medicinske indikacije:

• dobna granica od 35 godina i više;
• prekid trudnoće i neplodnost;
• hormonalni poremećaji u ženskom tijelu;
• izloženost zračenju ili kemijsko trovanje;
• zagađen okoliš i prisutnost loših navika;
• nasljedna predispozicija i krvno srodstvo;
• prisutnost mutacija kromosoma u prethodnoj djeci.

Krvni test za kariotip treba napraviti jednom, jer se te karakteristike ne mijenjaju s godinama. Apsolutna indikacija za kariotipizaciju je problem začeća i nemogućnost podnošenja trudnoće. Posljednjih godina sve više mladih parova podvrgava se ovoj analizi kako bi bili sigurni da će se roditi zdrava djeca. Laboratorijska dijagnostika omogućuje procjenu vjerojatnosti rođenja djeteta s abnormalnostima uzrokovanim kršenjem kromosoma i utvrđivanje pravog uzroka neplodnosti.

Priprema za kariotipizaciju

Krvne stanice koriste se za kariotipizaciju, pa se prije polaganja testa morate pripremiti uklanjanjem utjecaja čimbenika trećih strana koji kompliciraju njihov rast. Inače će provedeno istraživanje biti slabo informativno.

Pripreme moraju započeti 2 tjedna unaprijed:

1. Izbacite alkohol, pušenje i štetnu hranu.
2. Razgovarajte o prekidu terapije lijekovima sa svojim liječnikom.
3. 9-11 sati prije prikupljanja biološkog materijala, izbjegavajte jesti.
4. Nemojte piti tekućinu 2-3 sata prije laboratorijske pretrage.

Darivanje krvi za kariotip provodi se ujutro na prazan želudac. U slučaju pogoršanja zdravlja, zarazne bolesti ili pogoršanja kroničnih bolesti, studija se odgađa dok se pacijent ne oporavi.

• Aneuploidija (promjena količine). Ako je biološki materijal loše kvalitete, mogu nastati poteškoće u dijagnostičkom procesu.
• Strukturalna odstupanja - povezane kombinacije nakon razdvajanja. Studija otkriva velika kršenja. Kako bi se identificirala manja odstupanja, propisana je kromosomska analiza microarray.

Vrste dijagnostike

Kariotipizacija se provodi na nekoliko načina, koji se razlikuju u pristupu istraživanju i izvorima biološkog materijala:

1. Klasična– uzima se venska krv (10-20 ml) za pretragu. U trudnica će možda biti potrebno prikupiti amnionsku tekućinu za dijagnozu. U nekim slučajevima, stanice se uzimaju iz koštane srži. Kromosomi se boje i ispituju svjetlosnim mikroskopom.
2. NEBO (spektralno)– nova tehnika koja se smatra najučinkovitijom jer omogućuje vizualnu i brzu identifikaciju kršenja. U ovom slučaju, dijelovi kromosoma se otkrivaju pomoću fluorescentnih oznaka bez uzgoja stanica. Koristi se kada standardna kariotipizacija nije uspjela.
3. FISH analiza (fluorescentna hibridizacija)– studija se provodi na poseban način i uključuje specifično vezanje određenih dijelova kromosoma i fluorescentnih oznaka. Za laboratorijsku dijagnostiku prikupljaju se embrionalne stanice ili ejakulat.

Da bi se dobio najtočniji rezultat, krvni test se provodi zajedno s drugim, ne manje informativnim, genetskim testovima.

Kako dešifrirati

Dijagnoza se postavlja na temelju rezultata kariotipizacije dobivenog od strane genetičara. Specijalist provodi temeljitu analizu i donosi zaključak koji ukazuje na razloge reproduktivnih poremećaja ili rođenja nezdravog djeteta.

Dekodiranje analize omogućuje nam određivanje sljedećih genetskih poremećaja:

• prisutnost genetski različitih stanica;
• kretanje dijelova genetskog koda;
• preokret ili udvostručenje kromosoma;
• odsutnost jednog fragmenta ili prisutnost dodatnog.

Pomoću kariotipizacije moguće je utvrditi sklonost razvoju hipertenzije, artritisa, infarkta miokarda, moždanog udara i dijabetesa. Zahvaljujući ovoj analizi tisuće bračnih parova otkrilo je uzrok neplodnosti i uspješno se oporavilo od postojećih poremećaja u organizmu.

Odstupanja su moguća i na muškoj i na ženskoj strani. Normalni pokazatelji:

• kod muškaraca - 46XY;
• kod žena - 46XX.

U djece se uočavaju sljedeća kršenja genetskog koda:

1. 47XX+21 ili 47XY+21 – Downov sindrom (prisutnost viška kromosoma).
2. 47XX+13 ili 47XY+13 – Patauov sindrom.

Postoje i druga odstupanja od norme koja su manje opasna. Samo genetičar može izračunati rizike rađanja nezdravog djeteta za svaki pojedinačni slučaj. Ako kariotipizacija otkrije opasne abnormalnosti ili mutacije, liječnik preporučuje prekid trudnoće.

Kariotipizacija procjenjuje ne samo broj, već i stanje gena:

• Mutacije koje uzrokuju stvaranje tromba, ometaju prehranu malih krvnih žila u vrijeme formiranja placente, što uzrokuje pobačaje.
• Patologije iz gena cistične fibroze, kako bi se isključila vjerojatnost razvoja određene bolesti kod djeteta.
• Poremećaji gena iz Y-kromosoma.
• Odstupanja u genima koji su odgovorni za sposobnost dezinfekcije toksičnih čimbenika.

Ako se otkrije delecija (gubitak dijela) u Y kromosomu, govorimo o muškoj neplodnosti zbog poremećene spermatogeneze. To je uzrok nasljednih bolesti.

Što učiniti ako se pronađu odstupanja

Kako bi se isključila mogućnost genetskih abnormalnosti u djeteta, prije začeća treba provjeriti kariotip oba roditelja. U prisutnosti genetskih poremećaja, liječnik će objasniti moguće rizike. Nemojte paničariti pri otkrivanju kromosomskih mutacija. Čak iu tom slučaju možete izdržati trudnoću do kraja i roditi zdravo dijete ako se dijete pronađe, slijedeći preporuke liječnika.

Planiranje djeteta omogućuje vam da pripremite tijelo majke i oca za rođenje zdravog potomstva i odredite rizike od rađanja nezdrave djece. Čak i nakon što žena ostane trudna, kariotipizacija se može napraviti u prvom tjednu kako bi se procijenili mogući rizici, što omogućuje pravovremeno poduzimanje mjera za sprječavanje pobačaja. U slučaju ozbiljnih genetskih mutacija, odluku o prekidu trudnoće donosi bračni par. Liječnik samo ukazuje na moguće posljedice i daje preporuke ako je prekid potreban.

Zaključak

Genetika je danas posrnula razvijena znanstvena grana. Uz pomoć suvremenih dijagnostičkih testova moguće je identificirati nastale odstupanja u početnim oblicima progresije i poduzeti mjere za borbu protiv njih. Zahvaljujući kariotipizaciji moguće je izliječiti neplodnost, spriječiti ponovljene pobačaje i eliminirati vjerojatnost rađanja djece s genetskom mutacijom. Prilikom planiranja obitelji, neće biti suvišno provjeriti genetsku kompatibilnost.

Razvojna odstupanja i poteškoće u začeću djeteta često su povezani s nasljednim poremećajima. Ako jedan od roditelja ima rođake koji pate od genetskih bolesti, ili je on sam nositelj, preporučljivo je podvrgnuti se testiranju prije planiranja rođenja djeteta. Liječnici rade test kariotipa ako sumnjaju na patologiju kromosoma ili DNA molekula. Za provođenje studije, krv se uzima od pacijenta i tretira spojem za bojenje. Nakon obrade pod mikroskopom proučava se veličina, oblik i broj kromosoma.

Definicija

Kariotip je pojedinačni skup kromosoma, koji ima svoje karakteristike za svaku specifičnu biološku vrstu i jedinku. Osoba ima samo 23 para kromosoma, odnosno ukupno 46. Od dvadeset i tri para samo jedan određuje spol, a ostali nemaju razlike u strukturi. Genetska analiza kariotipa omogućuje vam prepoznavanje odstupanja u sastavu ili strukturi kromosoma. Zahvaljujući ovoj studiji, liječnici mogu poduzeti pravovremene mjere kako bi spriječili da patologija izazove ozbiljne komplikacije, uključujući smrt fetusa.

Važno! Dovoljno je da budući roditelji prođu kariotipizaciju jednom u životu kako bi se osigurala odsutnost ili prisutnost patologija.

Kada napraviti test

Analiza je relevantna za ljude bilo koje dobi, jer nisu svi bili pregledani od strane genetičara od ranog djetinjstva. Nema kontraindikacija za trudnice i dojilje. Ali prije svega, potrebna su istraživanja za novorođenčad, za koje će rana dijagnoza pomoći u prepoznavanju opasnih genetskih bolesti koje utječu na očekivani životni vijek. Analiza kariotipa supružnika u bolnici često se provodi prema propisu liječnika, ali ne znaju svi kakav je to pregled. Za parove koji žele imati dijete pregled je indiciran u sljedećim slučajevima:

• Nakon opetovanih neuspješnih pokušaja začeća.
• Menstrualne nepravilnosti.
• Ako je prije bilo pobačaja ili su rođena mrtva djeca.
• Kod prethodno rođene djece zabilježena su kašnjenja u mentalnom ili tjelesnom razvoju.
• Već u fazi trudnoće fetus ima poremećaje u razvoju.
• Ako su buduća majka i otac bliski rođaci.
• Ako jedan od roditelja ima loše navike.
• Živjeti u regiji s nepovoljnom ekološkom situacijom ili raditi u opasnoj industriji.
• Planiranje prve trudnoće nakon 35 godina – razlog leži u činjenici da se kromosomi mogu mijenjati s godinama.
• Ako roditelji imaju genetske bolesti, čak i ako su prije toga rođena zdrava djeca.

Pažnja! Moderni liječnici savjetuju svim parovima da se testiraju, jer ne pokazuje svaki nositelj patologije, pa ih mnogi nisu svjesni.

Problemi, uključujući neplodnost, prepoznaju se kada osoba odluči imati dijete.

Kako se studija radi

Analiza se provodi tijekom razdoblja metafaze, koje traje od dvije do deset minuta. Tu je najlakše vidjeti kromosome pod mikroskopom. Postoje tri načina otkrivanja abnormalnosti – molekularni, citogenetski i molekularno ciljani. Liječnik bi trebao odabrati jednu ili drugu metodu. Prije nego što se provede analiza kariotipa, potrebno je pripremiti:

• Da biste izliječili prehladu, ako je osoba bolesna, možete se testirati najranije dva tjedna nakon oporavka.
• 30 dana prije odlaska u bolnicu prestati uzimati antibiotike ili smanjiti njihovu konzumaciju prema uputama liječnika.
• Nemojte piti alkohol tri dana prije testiranja.
• Na dan testa morate imati obilan doručak.

Za analizu se uzima venska krv. Materijal dobiven od pacijenta tretira se bojom za identifikaciju kromosoma. Zatim liječnik napravi nekoliko slika, pomoću kojih se može odrediti broj molekula DNK i patoloških promjena.

Važno. Molekularna metoda je neophodna za otkrivanje malih područja strukturnih abnormalnosti kromosoma manjih od 5 milijuna nukleotida.

Za detaljniju dijagnostiku koristi se napredna ili ciljana molekularna metoda.

Kako dešifrirati

Za predstavnike jačeg spola normalni rezultati analize kariotipa su 46, XY, a za žene - 46, XX. Broj 46 označava normalan broj kromosoma, a X i Y na kraju označavaju oblik, građu i veličinu zdrave osobe – ti se pokazatelji razlikuju za muškarce i žene. Na temelju rezultata pretraga liječnik će napraviti nekoliko oznaka na obrascu. Razumijevanje medicinskih pojmova pomoći će u njihovom dešifriranju:

1. Translokacija - došlo je do preraspodjele kromosoma. Ako pacijent ima uravnoteženu translokaciju, tada se najvjerojatnije neće manifestirati. Ako je neuravnotežen, moguća su ozbiljna odstupanja.
2. Mozaicizam - nalaze se stanice s genetskim karakteristikama koje se razlikuju od normalnih.
3. Trisomija - ova patologija se najčešće javlja, pacijent ima dodatni kromosom. Najčešća pojava je pojava kopije kromosoma 21, što dovodi do bolesti kao što je Downov sindrom.
4. Inverzija - dio kromosoma je zakrenut za 180 stupnjeva.
5. Monosomija je samo jedan od parova homolognih kromosoma u genotipu.
6. Delecija – izgubljen je fragment kromosoma.

Što učiniti ako se pronađu odstupanja

Ne biste trebali pretpostaviti da anomalije u analizi karinotipa uvijek pokazuju da će bračni par imati bolesno dijete ili da će uopće ostati bez djece. Na primjer, roditelji s uravnoteženom translokacijom mogu roditi zdravo dijete koje neće imati kromosomske abnormalnosti. Iako su cijene analize kariotipa visoke i počinju od tri tisuće rubalja, nije preporučljivo odbiti je. Možda će vam liječnik na temelju rezultata savjetovati da se podvrgnete liječenju i tek tada planirate trudnoću.

Pažnja! Ako žena zna da će imati dijete s patologijama, mora obratiti pozornost na zdrav način života i slijediti preporuke liječnika.

Genetske abnormalnosti mogu se pojaviti na različite načine. S trisomijom trinaestog i osamnaestog kromosoma djeca umiru u prvoj godini života. Osobe s Downovim sindromom imaju mentalnu retardaciju, ali je stopa smrtnosti puno niža nego kod sličnih bolesti. Abnormalnosti spolnih kromosoma, kao što je Shereshevsky-Turnerov sindrom, često dovode do neplodnosti, ali osoba s ovim poremećajima može doživjeti duboku starost. A s monosomijom X, oko 5% žena ima priliku roditi dijete. Važno je konzultirati genetičara koji će točno dijagnosticirati. Genetska bolest se ne može u potpunosti izliječiti, ali ako se redovito liječi, kvaliteta života će se poboljšati.