Sastav cerebrospinalne tekućine u različitim nozologijama. Kako se radi analiza cerebrospinalne tekućine i koje se bolesti mogu otkriti? Priroda cerebrospinalne tekućine kod meningokokne infekcije

U pregledu su prikazane promjene laboratorijskih parametara cerebrospinalne tekućine kod težih teških bolesti središnjeg živčanog sustava.

MENINGITIS

Test cerebrospinalne tekućine je jedina metoda koja može brzo dijagnosticirati meningitis. Odsutnost upalnih promjena u cerebrospinalnoj tekućini uvijek omogućuje isključivanje dijagnoze meningitisa. Etiološka dijagnoza meningitisa postavlja se bakterioskopskim i bakteriološkim metodama, virološkim i serološkim studijama.

Pleocitoza je najkarakterističnija značajka promjena u likvoru. Prema broju stanica razlikujemo serozni i gnojni meningitis. Kod seroznog meningitisa, citoza je 500-600 u 1 μl, s gnojnim meningitisom - više od 600 u 1 μl. Studija se mora provesti najkasnije 1 sat nakon primitka.

Prema etiološkoj strukturi, 80-90% bakteriološki potvrđenih slučajeva su Neisseria meningitides, Streptococcus pneumoniae i Haemophilus. Bakterioskopija likvora, zbog karakteristične morfologije meningokoka i pneumokoka, daje pozitivan rezultat prve lumbalne punkcije 1,5 puta češće nego rast kulture.

CSF s gnojnim meningitisom varira od blago zamućenog, kao da je izbijeljen mlijekom, do gusto zelene, gnojne, ponekad ksantokromne. U početnoj fazi razvoja meningokoknog meningitisa dolazi do povećanja intrakranijalnog tlaka, zatim se bilježi blaga neutrofilna citoza u cerebrospinalnoj tekućini, au 24,7% bolesnika likvor je normalan u prvim satima bolesti. Zatim, u mnogih bolesnika, već prvog dana bolesti, citoza doseže 12 000-30 000 u 1 μl, prevladavaju neutrofili. Povoljan tijek bolesti popraćen je smanjenjem relativnog broja neutrofila i povećanjem limfocita. Pojavni slučajevi gnojnog meningitisa s tipičnom kliničkom slikom i relativno malom citozom vjerojatno se mogu objasniti djelomičnom blokadom subarahnoidalnog prostora. Možda ne postoji jasna korelacija između težine pleocitoze i težine bolesti.

Sadržaj proteina u likvoru tijekom gnojnog meningitisa obično se povećava na 0,6-10 g / l i smanjuje se kako se cerebrospinalna tekućina sanira. Količina proteina i citoza obično su paralelni, ali u nekim slučajevima s visokom citozom razina proteina ostaje normalna. Visok sadržaj proteina u likvoru češći je u teškim oblicima sa sindromom ependimitisa, a njegova prisutnost u visokim koncentracijama tijekom razdoblja oporavka ukazuje na intrakranijalnu komplikaciju (blok cerebrospinalnog tekućinskog trakta, duralni izljev, apsces mozga). Kombinacija niske pleocitoze s visokim sadržajem proteina posebno je nepovoljan prognostički znak.

U većine bolesnika s gnojnim meningitisom od prvih dana bolesti dolazi do sniženja razine glukoze (ispod 3 mmol/l), au slučaju smrti razina glukoze bila je u obliku tragova. U 60% bolesnika razina glukoze je ispod 2,2 mmol/l, a omjer razine glukoze i one u krvi u 70% manji je od 0,31.Povišenje razine glukoze je gotovo uvijek prognostički povoljan znak.

Kod tuberkuloznog meningitisa bakterioskopski pregled likvora često daje negativan rezultat. Mikobakterije se češće nalaze u svježim slučajevima bolesti (u 80% bolesnika s tuberkuloznim meningitisom). Odsutnost mikobakterija u lumbalnom punktatu često se primjećuje kada se otkriju u cisternom likvoru. U slučaju negativnog ili upitnog bakterioskopskog pregleda, tuberkuloza se dijagnosticira kulturom ili biološkim testom. Kod tuberkuloznog meningitisa likvor je bistar, bezbojan ili blago opalescentan. Pleocitoza se kreće od 50 do 3000 u 1 µl, ovisno o stadiju bolesti, a do 5-7. dana bolesti iznosi 100-300 u 1 µl. U nedostatku etiotropnog liječenja, broj stanica raste od početka do kraja bolesti. Može doći do naglog pada citoze s ponovljenom lumbalnom punkcijom obavljenom 24 sata nakon prve. Stanice su pretežno limfociti, ali često se na početku bolesti javlja mješovita limfocitno-neutrofilna pleocitoza, koja se smatra tipičnom za milijarnu tuberkulozu sa sijanjem moždanih ovojnica. Karakteristika tuberkuloznog meningitisa je raznolikost staničnog sastava, kada uz prevlast limfocita, postoje neutrofili, monociti, makrofagi i divovski limfociti. Kasnije pleocitoza dobiva limfoplazmocitni ili fagocitni karakter. Veliki broj monocita i makrofaga ukazuje na nepovoljan tijek bolesti.

Ukupni protein kod tuberkuloznog meningitisa uvijek je povećan na 2-3 g/l, a raniji su istraživači primijetili da se protein povećava prije početka pleocitoze i nestaje nakon značajnog smanjenja, tj. u prvim danima bolesti dolazi do disocijacije protein-stanica. mjesto. Moderne atipične oblike tuberkuloznog meningitisa karakterizira odsutnost tipične proteinsko-stanične disocijacije.

S tuberkuloznim meningitisom opaža se rano smanjenje koncentracije glukoze na 0,83-1,67 mmol / l i niže. U nekih bolesnika otkriva se smanjenje razine klorida. Kod virusnog meningitisa oko 2/3 slučajeva uzrokovano je virusom zaušnjaka i skupinom enterovirusa.

Kod seroznog meningitisa virusne etiologije likvor je proziran ili blago opalescentan. Pleocitoza je mala (rijetko do 1000) s dominacijom limfocita. U nekih bolesnika na početku bolesti mogu prevladavati neutrofili, što je tipično za teži tijek i nepovoljnu prognozu. Ukupni protein je unutar 0,6-1,6 g/l ili normalan. U nekih bolesnika otkriva se smanjenje koncentracije proteina zbog prekomjerne proizvodnje cerebrospinalne tekućine.

ZATVORENA KRANIO OZLJEDA MOZGA

Propusnost cerebralnih žila u akutnom razdoblju traumatske ozljede mozga nekoliko je puta veća od propusnosti perifernih žila i izravno ovisi o težini ozljede. Da bi se odredila ozbiljnost lezije u akutnom razdoblju, mogu se koristiti brojni likvorološki i hematološki testovi. To uključuje: težinu i trajanje prisutnosti hiperproteinorakije kao testa koji karakterizira dubinu disgemijskih poremećaja u mozgu i propusnost krvno-cerebrospinalne tekućinske barijere; prisutnost i ozbiljnost eritroarhije kao testa koji pouzdano karakterizira intracerebralno krvarenje u tijeku; prisutnost izražene neutrofilne pleocitoze unutar 9-12 dana nakon ozljede, koja služi kao pokazatelj nereagiranja tkiva koja ograničavaju prostore cerebrospinalne tekućine i inhibicije dezinfekcijskih svojstava arahnoidnih stanica ili dodatka infekcije.

Potres mozga: CSF je obično bezbojan, bistar i sadrži malo ili nimalo crvenih krvnih stanica. 1-2 dana nakon ozljede citoza je normalna, 3-4 dana javlja se umjereno izražena pleocitoza (do 100 u 1 μl), koja se 5-7 dana smanjuje na normalne brojke. U liquorogramu, limfociti s prisutnošću malog broja neutrofila i monocita, makrofaga, u pravilu, odsutni su. Razina proteina 1-2 dana nakon ozljede je normalna, 3-4 dana raste na 0,36-0,8 g/l i vraća se na normalu do 5-7 dana.

Kontuzija mozga: broj crvenih krvnih stanica kreće se od 100 do 35 000, a s masivnim subarahnoidnim krvarenjem doseže 1-3 milijuna, ovisno o tome, boja CSF-a može biti od sivkaste do crvene. Zbog iritacije moždanih ovojnica razvija se reaktivna pleocitoza. Za modrice blage i umjerene težine, pleocitoza 1-2 dana je u prosjeku 160 u 1 μl, au teškim slučajevima doseže nekoliko tisuća. 5-10 dana pleocitoza značajno opada, ali ne dostiže normalu u sljedećih 11-20 dana. U cerebrospinalnoj tekućini nalaze se limfociti, često makrofagi s hemosiderinom. Ako se priroda pleocitoze promijeni u neutrofilnu (70-100% neutrofila), gnojni meningitis se razvio kao komplikacija. Sadržaj bjelančevina u blagim do umjerenim slučajevima iznosi prosječno 1 g/l i ne vraća se na normalu za 11-20 dana. S teškim oštećenjem mozga, razina proteina može doseći 3-10 g/l (često smrtonosno).

S traumatskom ozljedom mozga, energetski metabolizam mozga prelazi na put anaerobne glikolize, što dovodi do nakupljanja mliječne kiseline u njemu i, u konačnici, do acidoze mozga.

Proučavanje parametara koji odražavaju stanje energetskog metabolizma mozga omogućuje procjenu ozbiljnosti patološkog procesa. Smanjenje arteriovenske razlike u pO2 i pCO2, povećanje potrošnje glukoze u mozgu, povećanje venoarterijske razlike u mliječnoj kiselini i njezino povećanje u cerebrospinalnoj tekućini. Uočene promjene posljedica su poremećaja aktivnosti niza enzimskih sustava i ne mogu se nadoknaditi opskrbom krvlju. Potrebno je stimulirati živčanu aktivnost pacijenata.

HEMORAGIJSKI MOZDANI UDAR

Boja cerebrospinalne tekućine ovisi o primjesi krvi. U 80-95% bolesnika tijekom prvih 24-36 sati likvor sadrži očitu primjesu krvi, a kasnije je krvav ili ksantokromičan. Međutim, u 20-25% bolesnika s malim lezijama smještenim u dubokim dijelovima hemisfera ili u slučaju blokade putova cerebrospinalne tekućine zbog brzog razvoja cerebralnog edema, crvene krvne stanice se ne otkrivaju u likvoru. Osim toga, crvene krvne stanice mogu biti odsutne tijekom lumbalne punkcije u prvim satima nakon početka krvarenja, dok krv doseže razinu kralježnice. Takve situacije razlog su dijagnostičkih pogrešaka - dijagnoza "ishemijskog moždanog udara". Najveća količina krvi nalazi se kada se krv probije u ventrikularni sustav. Uklanjanje krvi iz cerebrospinalnog likvorskog trakta počinje od prvog dana bolesti i traje 14-20 dana u slučaju traumatske ozljede mozga i moždanog udara, au slučaju cerebralne aneurizme do 1-1,5 mjeseci i ne ovisi o na masivnost krvarenja, već na etiologiju procesa.

Drugi važan znak promjena u likvoru kod hemoragijskog moždanog udara je ksantokromija, otkrivena u 70-75% bolesnika. Javlja se 2. dan i nestaje 2 tjedna nakon moždanog udara. S vrlo velikim brojem crvenih krvnih stanica, ksantokromija se može pojaviti unutar 2-7 sati.

Povećanje koncentracije proteina opaženo je u 93,9% bolesnika, a njegova količina se kreće od 0,34 do 10 g/l i više. Hiperproteinorakija i povišena razina bilirubina mogu dugo trajati i uz likvorodinamske poremećaje uzrokovati meningealne simptome, osobito glavobolju, čak i 0,5 - 1 godinu nakon subarahnoidalnog krvarenja.

Pleocitoza se otkriva u gotovo 2/3 bolesnika, povećava se tijekom 4-6 dana, broj stanica se kreće od 13 do 3000 u 1 μl. Pleocitoza je povezana ne samo s prodorom krvi u puteve cerebrospinalne tekućine, već i s reakcijom moždanih ovojnica na prolivenu krv. Čini se važnim u takvim slučajevima utvrditi pravu citozu cerebrospinalne tekućine. Ponekad, kod krvarenja u mozgu, citoza ostaje normalna, što je povezano s ograničenim hematomima bez proboja u likvorski prostor ili s nereagiranjem moždanih ovojnica.

Kod subarahnoidnih krvarenja, primjesa krvi može biti toliko velika da se cerebrospinalna tekućina vizualno gotovo ne razlikuje od čiste krvi. Prvog dana broj crvenih krvnih stanica u pravilu ne prelazi 200-500 x 109/l, kasnije se njihov broj povećava na 700-2000 x 109/l. Već u prvim satima nakon razvoja subarahnoidalnih krvarenja malog volumena lumbalnom punkcijom može se dobiti bistra cerebrospinalna tekućina, ali do kraja prvog dana u njoj se pojavljuje primjesa krvi. Razlozi za odsutnost krvi u likvoru mogu biti isti kao i kod hemoragičnog moždanog udara. Pleocitoza, uglavnom neutrofilna, preko 400-800x109/l, do petog dana zamjenjuje se limfocitnom. Unutar nekoliko sati nakon krvarenja mogu se pojaviti makrofagi koji se mogu smatrati markerima subarahnoidalnog krvarenja. Povećanje ukupnog proteina obično odgovara stupnju krvarenja i može doseći 7-11 g/l i više.

MOŽDANI UDAR

Likvor je bezbojan i proziran, u 66% citoza ostaje unutar normalnog raspona, u ostatku se povećava na 15-50x109/l, u tim slučajevima otkrivaju se karakteristični cerebralni infarkti, smješteni blizu putova cerebrospinalne tekućine. Pleocitoza, pretežno limfoidno-neutrofilna, uzrokovana je reaktivnim promjenama oko opsežnih ishemijskih žarišta. U polovici bolesnika sadržaj proteina se određuje u rasponu od 0,34-0,82 g / l, rjeđe do 1 g / l. Porast koncentracije proteina posljedica je nekroze moždanog tkiva i povećane propusnosti krvno-moždane barijere. Sadržaj proteina može se povećati do kraja prvog tjedna nakon moždanog udara i trajati više od 1,5 mjeseca. Vrlo karakteristična za ishemijski moždani udar je protein-stanična disocijacija (povećanje sadržaja proteina uz normalnu citozu) ili stanično-proteinska disocijacija.

APSCES MOZGA

Početnu fazu stvaranja apscesa karakterizira neutrofilna pleocitoza i blagi porast proteina. Kako se kapsula razvija, pleocitoza se smanjuje i njezin neutrofilni karakter zamjenjuje limfoidni, a što je kapsula veća, to je pleocitoza manje izražena. U tom kontekstu, iznenadna pojava izražene neutrofilne pleocitoze ukazuje na proboj apscesa. Ako se apsces nalazi u blizini ventrikularnog sustava ili površine mozga, citoza će biti od 100 do 400 u 3 μl. Manja pleocitoza ili normalna citoza mogu se pojaviti kada je apsces od okolnog moždanog tkiva odvojen gustom fibroznom ili hijaliniziranom kapsulom. Zona upalne infiltracije oko apscesa u ovom slučaju je odsutna ili slabo izražena.

TUMORI CNS-a

Uz disocijaciju protein-stanica, koja se smatra karakterističnom za tumore, pleocitoza se može pojaviti uz normalan sadržaj proteina u cerebrospinalnoj tekućini. S gliomima cerebralnih hemisfera, bez obzira na njihovu histologiju i lokaciju, povećanje proteina u cerebrospinalnoj tekućini opaženo je u 70,3% slučajeva, au nezrelim oblicima - u 88%. Normalan ili čak hidrocefalni sastav ventrikularne i spinalne tekućine može se pojaviti i kod duboko smještenih i kod glioma koji rastu u klijetke. To se uglavnom opaža u zrelim difuzno rastućim tumorima (astrocitomi, oligodendrogliomi), bez očitih žarišta nekroze i formiranja cista i bez velikog pomaka ventrikularnog sustava. U isto vrijeme, isti tumori, ali s velikim pomakom ventrikula, obično su popraćeni povećanjem količine proteina u cerebrospinalnoj tekućini. Hiperproteinorahija (od 1 g/l i više) opaža se u tumorima koji se nalaze u bazi mozga. S tumorima hipofize, sadržaj proteina kreće se od 0,33 do 2,0 g / l. Stupanj pomaka u proteinogramu izravno ovisi o histološkoj prirodi tumora: što je maligniji tumor, to su teže promjene u proteinskoj formuli cerebrospinalne tekućine. Pojavljuju se beta lipoproteini koji se normalno ne otkrivaju, a sadržaj alfa lipoproteina se smanjuje.

U bolesnika s tumorima mozga, bez obzira na njihovu histološku prirodu i mjesto, često se javlja polimorfna pleocitoza. Stanična reakcija određena je osobitostima bioloških procesa koji se odvijaju u tumoru u određenim fazama njegovog razvoja (nekroza, krvarenje), koji određuju reakciju. Moždano tkivo i membrane koje okružuju tumor. Tumorske stanice cerebralnih hemisfera u tekućini iz ventrikula mogu se otkriti u 34,4%, au spinalnoj cerebrospinalnoj tekućini - od 5,8 do 15% svih opažanja. Glavni faktor koji određuje ulazak tumorskih stanica u cerebrospinalnu tekućinu je priroda strukture tumorskog tkiva (loša vezivna stroma), nepostojanje kapsule i položaj tumora u blizini likvorskih prostora.

KRONIČNE UPALNE BOLESTI (arahnoiditis, arahnoencefalitis, periventrikularni encefalitis)

Tuberkulozni meningitis češće se javlja kod djece i adolescenata nego kod odraslih. U pravilu je sekundarna, razvija se kao komplikacija tuberkuloze drugog organa (pluća, bronhija ili mezenteričnih limfnih čvorova) s naknadnom hematogenom diseminacijom i oštećenjem moždanih ovojnica.

Klinička slika

Početak bolesti je subakutan, često postoji prodromalno razdoblje s povećanim umorom, slabošću, glavoboljom, anoreksijom, znojenjem, inverzijom sna, promjenama karaktera, osobito u djece - u obliku pretjerane osjetljivosti, plačljivosti, smanjene mentalne aktivnosti i pospanost.

Tjelesna temperatura je subfebrilna. Povraćanje se često javlja kao posljedica glavobolje. Prodromalno razdoblje traje 2-3 tjedna. Zatim se postupno javljaju blagi simptomi ljuske (ukočen vrat, Kernigov znak i dr.). Ponekad se pacijenti žale na zamagljen vid ili slabljenje vida. Rano se pojavljuju znaci oštećenja III i VI para CN (blago dvoslike, blaga ptoza gornjih kapaka, strabizam). U kasnijim stadijima, ako se bolest ne prepozna i ne započne specifično liječenje, mogu se javiti pareza udova, afazija i drugi simptomi žarišnog oštećenja mozga.

Najtipičniji tijek bolesti je subakutan. U ovom slučaju, prijelaz iz prodromalnih fenomena u razdoblje pojave oftalmoloških simptoma događa se postupno, u prosjeku unutar 4-6 tjedana. Akutni početak je rjeđi (obično u male djece i adolescenata). Kronični tijek je moguć u bolesnika koji su prethodno bili liječeni specifičnim lijekovima za tuberkulozu unutarnjih organa.

Dijagnostika

Dijagnoza se postavlja na temelju epidemiološke anamneze (kontakt s tuberkuloznim bolesnicima), podataka o prisutnosti tuberkuloze unutarnjih organa i razvoja neuroloških simptoma. Mantouxova reakcija nije vrlo informativna.

Odlučujuća je studija cerebrospinalne tekućine. Tlak cerebrospinalne tekućine je povećan. Tekućina je bistra ili blago opalescentna. Dokazuje se limfocitna pleocitoza do 600-800x106/l, sadržaj proteina je povećan na 2-5 g/l (tablica 31-5).

Tablica 31-5. Pokazatelji cerebrospinalne tekućine su normalni i kod meningitisa različitih etiologija

Indeks	Norma	Tuberkulozni meningitis	Virusni meningitis	Bakterijski meningitis
Pritisak	100-150 mm vodenog stupca, 60 kapi u minuti	Povećana	Povećana	Povećana
Transparentnost	Transparentan	Prozirno ili blago opalescentno	Transparentan	Mutno
Citoza, stanice/µl	1 -3 (do 10)	Do 100-600	400-1000 ili više	Stotine, tisuće
Stanični sastav	Limfociti, monociti	Limfociti (60-80%), neutrofili, sanacija za 4-7 mjeseci	Limfociti (70-98%), sanacija za 16-28 dana	Neutrofili (70-95%), oporavak za 10-30 dana
Sadržaj glukoze	2,2-3,9 mmol/l	Oštro smanjeno	Norma	Spuštena na nižu razinu
Sadržaj klorida	122-135 mmol/l	Spuštena na nižu razinu	Norma	Spuštena na nižu razinu
Sadržaj proteina	Do 0,2-0,5 g/l	Povećana 3-7 puta ili više	Normalno ili blago povećano	Povećana 2-3 puta
Pandeyeva reakcija	0	+++	0/+	+++
Fibrinski film	Ne	Često	Rijetko	Rijetko
Mikobakterije	Ne	"+" u 50% slučajeva	Ne	Ne

Često se na početku bolesti otkriva mješovita neutrofilna i limfocitna pleocitoza u cerebrospinalnoj tekućini. Karakterizira smanjenje sadržaja glukoze na 0,15-0,3 g / l i klorida na 5 g / l. Kada se ekstrahirani likvor čuva u epruveti 12-24 sata, u njemu se stvara nježna fibrinska mrežica (film) koja počinje od razine tekućine i podsjeća na prevrnuto božićno drvce. Mycobacterium tuberculosis se često nalazi u ovom filmu tijekom bakterioskopije. U krvi se utvrđuje povećanje ESR i leukocitoza.

Diferencijalnu dijagnozu olakšava kultura i detaljna citološka pretraga cerebrospinalne tekućine. Ako se klinički posumnja na tuberkulozni meningitis, a laboratorijski podaci to ne potvrđuju, iz zdravstvenih razloga propisuje se antituberkulozna terapija exjuvantibus.

Liječenje

Koriste se različite kombinacije lijekova protiv tuberkuloze. Tijekom prva 2 mjeseca do utvrđivanja osjetljivosti na antibiotike propisuju se 4 lijeka (prva faza liječenja): izoniazid, rifampicin, pirazinamid i etambutol ili streptomicin. Režim se prilagođava nakon utvrđivanja osjetljivosti na lijekove. Nakon 2-3 mjeseca liječenja (druga faza liječenja) često se prelazi na 2 lijeka (obično izoniazid i rifampicin). Minimalno trajanje liječenja je obično 6-12 mjeseci. Koristi se nekoliko kombinacija lijekova.

Isoniazid 5-10 mg/kg, streptomicin 0,75-1 g/dan u prva 2 mjeseca. Uz stalno praćenje toksičnog učinka na VIII par CN - etambutol 15-30 mg/kg dnevno. Kada se koristi ova trijada, ozbiljnost intoksikacije je relativno niska, ali baktericidni učinak nije uvijek dovoljan.

Da bi se pojačao baktericidni učinak izoniazida, dodaje se rifampicin 600 mg uz streptomicin i etambutol 600 mg jednom dnevno.

Kako bi se maksimizirao baktericidni učinak, pirazinamid se koristi u dnevnoj dozi od 20-35 mg/kg u kombinaciji s izoniazidom i rifampicinom. Međutim, kada se ti lijekovi kombiniraju, rizik od hepatotoksičnosti značajno se povećava.

Također se koristi sljedeća kombinacija lijekova: para-aminosalicilna kiselina do 12 g / dan (0,2 g na 1 kg tjelesne težine u frakcijskim dozama 20-30 minuta nakon jela, isprati s alkalnom vodom), streptomicin i ftivazid u dnevna doza 40-50 mg/kg (0,5 g 3-4 puta dnevno).

Prvih 60 dana bolesti je kritično u liječenju. U ranim stadijima bolesti (unutar 1-2 mjeseca) preporučljivo je oralno koristiti glukokortikoide kako bi se spriječio adhezivni pahimeningitis i povezane komplikacije.

Liječenje u bolnici treba biti dugotrajno (oko 6 mjeseci), u kombinaciji s općim mjerama jačanja, poboljšanom prehranom i kasnijim boravkom u specijaliziranom sanatoriju. Zatim pacijent nastavlja uzimati izoniazid nekoliko mjeseci. Ukupno trajanje liječenja je 12-18 mjeseci.

Za prevenciju neuropatija koriste se piridoksin (25-50 mg/dan), tioktična kiselina i multivitamini. Praćenje bolesnika je neophodno kako bi se spriječilo trovanje lijekom u obliku oštećenja jetre, perifernih neuropatija, uključujući oštećenje optičkih živaca, kao i kako bi se spriječile komplikacije u obliku cicatricijalnih priraslica i otvorenog hidrocefalusa.

Prognoza

Prije upotrebe lijekova protiv tuberkuloze, meningitis je završio smrću 20-25. dana bolesti. Trenutno, uz pravodobno i dugotrajno liječenje, povoljan ishod javlja se u 90-95% pacijenata. Ako je dijagnoza odgođena (nakon 18-20 dana bolesti), prognoza je loša. Ponekad se javljaju recidivi i komplikacije u obliku epileptičkih napadaja, hidrocefalusa i neuroendokrinih poremećaja.

Neurokirurzi, neurolozi i specijalisti za zarazne bolesti često moraju obaviti lombalnu punkciju, odnosno uzimanje cerebrospinalne tekućine (likvora) od pacijenta. Postupak je vrlo učinkovit način dijagnosticiranja raznih bolesti središnjeg živčanog sustava (SŽS).

U klinikama se određuju komponente likvora, mikroskopira i uzima likvor na mikroorganizme.

Postoje dodatne istražne mjere, na primjer, mjerenje tlaka likvora, lateks aglutinacija, provjera boje supernatanta. Temeljito razumijevanje svakog od testova omogućuje stručnjacima da ih koriste kao najučinkovitije metode za dijagnosticiranje bolesti.

Zašto raditi pretragu cerebrospinalne tekućine?

Likvor (likvor, cerebrospinalna tekućina) prirodna je tvar potrebna za normalno funkcioniranje središnjeg živčanog sustava. Njegova je analiza najvažnija među svim vrstama laboratorijskih studija.

Analiza se provodi u nekoliko faza:

Pripremni– uključuje pripremu pacijenta, uzimanje i slanje pretrage u laboratorij.
Analitički- ovo je postupak za proučavanje tekućine.
Postanalitički– je dešifriranje primljenih podataka.

Samo iskusni stručnjaci mogu kompetentno izvršiti sve gore navedene radnje, o čemu ovisi kvaliteta dobivene analize.

Cerebrospinalna tekućina se proizvodi u posebnim pleksusima posuda koje se nalaze u mozgu. U odraslih cirkulira u subarhnoidnom prostoru iu ventrikulama mozga, od 120 do 150 ml tekućine, prosječna vrijednost u lumbalnom kanalu je 60 mg.

Proces njegovog formiranja je beskonačan, brzina proizvodnje je od 0,3 do 0,8 ml u minuti, ovaj pokazatelj izravno ovisi o intrakranijalnom tlaku. Tijekom dana prosječna osoba proizvede od 400 do 1000 ml tekućine.

Samo na temelju dokaza lumbalne punkcije može se postaviti dijagnoza, naime:

prekomjerni sadržaj proteina u CSF;
smanjena razina glukoze;
određivanje ukupnog broja bijelih krvnih stanica.

Kada se dobiju ovi pokazatelji i povišena razina leukocita u krvi, postavlja se dijagnoza "seroznog meningitisa", a ako se poveća broj neutrofilnih leukocita, dijagnoza se mijenja u "gnojni meningitis". Ovi podaci su vrlo važni, jer o njima ovisi liječenje bolesti u cjelini.

Što je analiza

Tekućina se dobiva uzimanjem punktata iz leđne moždine, koji se naziva i lombal, prema određenoj tehnici, a to je: uvođenje vrlo tanke igle u prostor u kojem cirkulira likvor i uzimanje.

Prve kapi tekućine se uklanjaju (smatra se "putnom" krvlju), ali nakon toga se prikupljaju najmanje 2 epruvete. Obični (kemijski) prikuplja se za opći i kemijski pregled, drugi je sterilan - za pregled prisutnosti bakterija.

Prilikom upućivanja bolesnika na analizu likvora, liječnik mora navesti ne samo ime bolesnika, već i njegovu kliničku dijagnozu te svrhu pretrage.

Analize koje se dostavljaju u laboratorij moraju biti potpuno zaštićene od pregrijavanja ili hlađenja, a neki se uzorci zagrijavaju u posebnim vodenim kupkama 2 do 4 minute.

Faze istraživanja

Ova tekućina se ispituje odmah nakon prikupljanja. Laboratorijska istraživanja podijeljena su u 4 važne faze.

Makroskopski pregled

Proces ima nekoliko važnih pokazatelja koji su neophodni za određivanje točne dijagnoze.

Boja

U svom normalnom stanju, ova tekućina je apsolutno bezbojna i ne može se razlikovati od vode. Kod patologija središnjeg živčanog sustava moguće su neke promjene u boji cerebrospinalne tekućine. Za točno određivanje boje tvar se detaljno uspoređuje s pročišćenom vodom.

Blago crvena nijansa može značiti da su nečistoće nepromijenjene krvi - eritrociti - ušle u tekućinu. Ili je to slučajno gutanje nekoliko kapi krvi tijekom testa.

Transparentnost

U zdrave osobe CSF je proziran i izgledom se ne razlikuje od vode. Mutna tvar može značiti da se u tijelu odvijaju patološki procesi.

Ako nakon postupka centrifugiranja tekućina u epruveti postane prozirna, to znači da je mutna konzistencija posljedica nekih elemenata uključenih u sastav. Ako ostane mutno - mikroorganizmi.

Lagana opalescencija tekućine može se pojaviti kod povećanog sadržaja nekih dispergiranih proteina, poput fibrinogena.

Fibrinozni film

U zdravom stanju gotovo da ne sadrži fibrinogen. Kada je njegova koncentracija visoka, u epruveti se stvara tanka mrežica, vrećica ili ugrušak sličan želeu.

Vanjski sloj proteina se savija, što rezultira vrećicom tekućine. Liker, koji sadrži puno proteina, odmah nakon ispuštanja počinje koagulirati u ugrušak poput želea.

Ako cerebrospinalna tekućina sadrži crvene krvne stanice, gore opisani film se ne formira.

Mikroskopski pregled

Pronalaženje ukupnog broja stanica cerebrospinalne tekućine mora se provesti odmah nakon uzimanja analize, budući da njegove stanice karakterizira brzo uništavanje.

U normalnim uvjetima cerebrospinalna tekućina nije bogata staničnim elementima. U 1 ml možete pronaći 0-3-6 limfocita, zbog toga se broje u posebnim komorama velikog kapaciteta - Fuchs-Rosenthal.

Pod povećanjem u komori za brojanje, broj bijelih krvnih stanica u tekućini se izračunava nakon što su sve crvene krvne stanice uništene. U procesu se koristi Samsonov reagens.

Kako odrediti:

Prije svega mjesto CSF in vitro.
Reagens se puni u melanger do oznake 1. Samson.
Zatim dodajte tekućinu i otopinu do oznake 11 ocat kiseline, što ukazuje na primjesu crvenih krvnih zrnaca, dodaje se fuksin, koji leukocitima, odnosno njihovim jezgrama, daje crveno-ljubičastu boju. Nakon toga se dodaje karbolna kiselina radi konzerviranja.
Reagens i liker se miješa, za to se melangeur mora valjati između dlanova i ostaviti pola sata za bojanje.
Prva kap se odmah šalje na filtriranje papir, pomiješajte Fuchs-Rosenthalov kvadrat, koji se sastoji od 16 velikih kvadrata, od kojih je svaki podijeljen na još 16, čime se formira 256 kvadrata.
Zadnji korak je brojanje ukupnog broja leukocita u svim kvadratima, dobiveni broj podijeljen je s 3,2 - volumenom komore. Dobiveni rezultat jednak je broju leukocita u 1 μl likvora.

Normalni pokazatelji:

lumbalni - od 7 do 10 u komori;
cisterna – od 0 do 2;
ventrikularni - od 1 do 3.

Povećana citoza - pleocitoza, pokazatelj je aktivnih upalnih procesa koji zahvaćaju ovojnice mozga, odnosno meningitisa, organskih lezija sive tvari (tumori, apscesi), arahnoiditisa, traume pa čak i krvarenja.

U djece je normalna razina citoze viša nego u odraslih.

Detaljni koraci za očitavanje citograma:

Tekućina centrifuga 10 minuta, talog se ocijedi.
Sediment počistiti na predmetno staklo, lagano ga protresite tako da se ravnomjerno rasporedi po površini.
Nakon brisa suho toplo tijekom dana.
Za 5 minuta zaroniti u metilnom alkoholu ili 15 u etilnom alkoholu.
Oni uzimaju Otopina azur-eozina, prethodno razrijeđena 5 puta, i obojiti razmaz.
primijeniti uranjanje ulje za mikroskopiranje.

U zdrave osobe CSF sadrži samo limfocite.

Ako postoje neke patologije, mogu se naći sve vrste leukocita, makrofaga, poliblasta i stanica novonastalih tumora. Makrofagi nastaju nakon gubitka krvi u središnjem živčanom sustavu ili nakon razgradnje tumora.

Biokemijska analiza

Ova analiza pomaže u razjašnjavanju primarnog uzroka patologije moždanog tkiva, pomaže u procjeni nastale štete, prilagođavanju slijeda liječenja i određivanju prognoze bolesti. Glavni nedostatak analize je to što se provodi samo invazivnom intervencijom, odnosno punkcijom se uzima CSF.

U normalnom stanju tekućina sadrži protein albumin, a vrlo je bitan njegov omjer u tekućini i postotak sadržaja u plazmi.

Taj se omjer naziva albuminski indeks (normalno njegova vrijednost ne smije prelaziti 9 jedinica). Njegov porast ukazuje da je krvno-moždana barijera (barijera između moždanog tkiva i krvi) oštećena.

Bakterioskopski i bakteriološki

Ova studija tekućine uključuje njezino dobivanje probijanjem spinalnog kanala. Dobivena tvar ili talog, koji se dobije nakon centrifugiranja, ispituje se pod povećanjem.

Od konačnog materijala laboratorijski pomoćnici dobivaju mrlje koje proučavaju nakon ponovnog bojanja. Nije važno jesu li mikroorganizmi pronađeni u CSF-u ili ne, studija će se svakako provesti.

Ako postoji sumnja na zarazni oblik meningitisa, analizu provodi liječnik koji je neophodan u različitim situacijama kako bi se utvrdila vrsta iritansa. Bolest može biti uzrokovana i neobičnom florom, moguće streptokokom, meningokok je standardni uzročnik, kao i bacil tuberkuloze.

Nekoliko tjedana prije pojave meningitisa bolesnici često primjećuju pojavu kašlja, prolaznu temperaturu i curenje nosa. Na razvoj bolesti može ukazivati stalna migrena pucajuće prirode, koja ne reagira na lijekove protiv bolova. U tom slučaju tjelesna temperatura može porasti do visokih razina.

Kod meningokoka nastaje osip na površini tijela, najčešće na nogama. Pacijenti se također često žale na negativnu percepciju jakog svjetla. Mišići na vratu postaju tvrđi, zbog čega osoba ne može bradom dodirnuti prsa.

Meningitis zahtijeva hitnu hospitalizaciju, zatim pregled i hitno liječenje u bolničkim uvjetima.

Dekodiranje pokazatelja cerebrospinalne tekućine

Promjena boje različitog intenziteta može biti posljedica miješanja crvenih krvnih zrnaca, koje se javlja kod nedavne ozljede mozga ili gubitka krvi. Prisutnost crvenih krvnih stanica može se vizualno primijetiti kada je njihov broj veći od 600 po µl.

Kod raznih poremećaja i upalnih procesa koji se javljaju u tijelu, likvor može postati ksantokromni, odnosno imati žutu ili smećkastu boju zbog produkata razgradnje hemoglobina. Ne treba zaboraviti na lažnu ksantokromiju - cerebrospinalna tekućina je obojena zbog lijekova.

U medicinskoj praksi također se nalazi zelena boja, ali samo u rijetkim slučajevima gnojnog meningitisa ili apscesa mozga. U literaturi se smeđa boja opisuje kao ruptura ciste kraniofaringoma u put cerebrospinalne tekućine.

Zamućenost tekućine može ukazivati na prisutnost mikroorganizama ili krvnih stanica u njoj. U prvom slučaju, zamućenje se može ukloniti centrifugiranjem.

Proučavanje sastava likvora posebno je važan zadatak koji uključuje velik broj različitih manipulacija, ispitivanja i izračuna, dok je potrebno obratiti pažnju na mnoge druge pokazatelje.

Nakon postupka, pacijentu se propisuje mirovanje u krevetu jedan dan. Tijekom sljedećih nekoliko dana može se početi žaliti na migrenu. To je zbog prenaprezanja moždanih ovojnica zbog nakupljanja tekućine tijekom postupka.

Uvod………………………………………………………………………………………..3

Laboratorijske metode za proučavanje cerebrospinalne tekućine…………………………………….3

Fiziologija cerebrospinalne tekućine…………………………………………………………..3
Sastav i funkcije cerebrospinalne tekućine………………………………………………………3
Predanalitička faza………………………………………………………….7
Metode laboratorijskog ispitivanja cerebrospinalne tekućine………………………………..9
1. Makroskopija cerebrospinalne tekućine………………………………………………………...9
  Mikroskopski pregled cerebrospinalne tekućine………………………………….10
  Opći klinički pregled cerebrospinalne tekućine…………………...15
  Biokemijsko ispitivanje cerebrospinalne tekućine………………………………………22

Zaključak……………………………………………………………………………………..31

UVOD

Studije likvora sastavni su dio dijagnostike bolesti koje zahvaćaju središnji živčani sustav. Cerebrospinalna tekućina je izravni nastavak izvanstaničnog i perikapilarnog prostora živčanog tkiva, tako da odmah reagira na sve promjene koje se događaju u mozgu. Na temelju fizikalno-kemijskih parametara i staničnog sastava cerebrospinalne tekućine može se prosuditi priroda patologije, njezin stadij i pratiti napredak liječenja. Kod virusnih infekcija središnjeg živčanog sustava antigeni uzročnika se otkrivaju u cerebrospinalnoj tekućini, kod bakterijskih infekcija mikrobna tijela se otkrivaju mikroskopskom metodom, bakteriološkom metodom utvrđuje se vrsta bakterije i njihova osjetljivost na antibiotike. odlučan.

Suvremene laboratorijske dijagnostičke mogućnosti značajno su proširile količinu informacija koje se mogu dobiti kao rezultat lumbalne punkcije. Izrada visokoosjetljivih metoda

LABORATORIJSKE METODE ZA PROUČAVANJE CSF

Fiziologija cerebrospinalne tekućine

Likvor (cerebrospinalna tekućina) je biološka tekućina koja ispire strukture središnjeg živčanog sustava. Njegova sinteza odvija se u venskim vaskularnim pleksusima bočnih ventrikula mozga, odakle tekućina ulazi u treću moždanu komoru kroz foramen interventriculare. Potonji, kroz Sylvian akvadukt, komunicira s IV ventrikulom, iz koje cerebrospinalna tekućina prolazi kroz srednje i bočne otvore u subarahnoidni prostor leđne moždine i mozga. Manji dio tekućine prodire i u subduralni prostor.

Slika 1 – Shema glavnih putova stvaranja cerebrospinalne tekućine.

Stvaranje cerebrospinalne tekućine u bočnim ventrikulima događa se prilično intenzivno, zbog čega se u njihovoj šupljini stvara dovoljan pritisak da protok tekućine dobije kaudalni smjer. Međutim, cerebrospinalna tekućina se ne može izjednačiti s filtratom krvne plazme, jer je pomiješana s izvanstaničnom tekućinom živčanog tkiva koja ulazi kroz ventrikularnu ependimu. Donekle se događa i obrnuti proces - protok cerebrospinalne tekućine kroz ependimu do neurocita i glija stanica.

Suvremene radioizotopske metode istraživanja omogućile su utvrđivanje da cerebrospinalna tekućina napušta ventrikularnu šupljinu u roku od nekoliko minuta i ulazi u subarahnoidalni prostor iz cisterni na dnu mozga unutar 4-8 sati. Odrasla osoba luči oko 500 ml cerebrospinalne tekućine dnevno, a količina u likvorskim kanalima je 125-150 ml (10-14% mase mozga). U bočnim komorama nalazi se 10-15 ml tekućine, u III i IV ukupno oko 5 ml, u subarahnoidnom kranijalnom prostoru - 30 ml, u spinalnom prostoru - 70-80 ml. Tijekom dana, cerebrospinalna tekućina se mijenja do 3-4 puta u odraslih i do 8 puta u djece.

Cirkulacija cerebrospinalne tekućine u subarahnoidnom prostoru odvija se kroz sustav kanala cerebrospinalne tekućine i subarahnoidalnih stanica. Protok tekućine se ubrzava pri promjeni položaja tijela u prostoru i pod utjecajem kontrakcija mišića. Danas se smatra da se cerebrospinalna tekućina koja se nalazi u lumbalnoj regiji kreće kranijalno unutar jednog sata, moguće je da se cirkulacija odvija u oba smjera istovremeno.

Odljev cerebrospinalne tekućine za 30-40% događa se kroz Pachionijeve granulacije arahnoidne membrane u gornji sagitalni sinus, koji je dio venskog sustava dura mater. Pojavljuju se kod ljudi u dobi od 1,5 godine, rastu na vanjskoj površini arahnoidne membrane duž velikih sinusa i vena. Granulacije su okrenute prema dura mater i ne dolaze u dodir s moždanom tvari. Likvor se nakuplja u gornjem sagitalnom sinusu, stvarajući tlak od 15-50 mm Hg. viši od venskog, zbog čega dolazi do prijelaza tekućine iz likvornih kanala u krvožilni sustav.

Slika 2 – Shema odnosa membrana mozga i granulacija arahnoidalne membrane (Pachyon granulacije).

1 – dura mater; 2 – subduralni prostor; 3 – arahnoidna membrana; 4 – subarahnoidni prostor; 5 – granulacija arahnoidne membrane; 6 – gornji sagitalni sinus; 7 – lateralna lakuna; 8 – žilnica.

Istjecanje cerebrospinalne tekućine također se događa kroz kanale cerebrospinalne tekućine u subduralni prostor, iz kojeg ulazi u krvne kapilare dura mater i prelazi u venski sustav. Osim toga, djelomično ulazi u limfni sustav kroz perineuralne prostore kranijalnih živaca (5-30%), apsorbira ga ventrikularni ependim (10%) i ulazi u parenhim mozga.

Sastav i funkcije cerebrospinalne tekućine

Sastav cerebrospinalne tekućine sličan je krvnoj plazmi i sastoji se od 90% vode i 10% suhe tvari. Sadrži aminokiseline (20-25), proteine (oko 14 frakcija), enzime uključene u metabolizam živčanog sustava, šećer, kolesterol, mliječnu kiselinu i oko 15 elemenata u tragovima. U cerebrospinalnoj tekućini određuju se neurotransmiteri: acetilkolin, norepinefrin, dopamin, serotonin; hormoni – melatonin, endofini, enkefalini, kinini.

Funkcije cerebrospinalne tekućine:

Mehanička zaštita struktura središnjeg živčanog sustava;

Izlučivanje – metabolički proizvodi uklanjaju se s tekućinom;

Transport - cerebrospinalna tekućina služi za transport metabolita, biološki aktivnih tvari, medijatora, hormona;

Respiratorni – opskrbljuje kisikom moždane opne i živčano tkivo;

Homeostaza – održava stabilnu okolinu mozga, neutralizira kratkotrajne promjene u sastavu krvi, održava pH na određenoj razini, osmotski tlak u moždanim stanicama, osigurava normalnu ekscitabilnost središnjeg živčanog sustava, stvara intrakranijalni tlak;

Imunološki – sudjeluje u stvaranju specifične imunobiološke barijere središnjeg živčanog sustava.

Funkcije cerebrospinalne tekućine do danas nisu u potpunosti proučene, stoga se istraživački rad na njezinom proučavanju nastavlja.

Preanalitička faza

Quincke je prvi put dobio cerebrospinalnu tekućinu za istraživanje 1891. godine, nakon čega je njegova tehnika postala raširena. Opća klinička analiza cerebrospinalne tekućine provodi se unutar 3 sata nakon uzimanja materijala, tako da se analiza svega provodi hitno. Za dobivanje cerebrospinalne tekućine najčešće se koristi lumbalna punkcija, rijetko se koristi subokcipitalna punkcija, a intraoperativno se koristi ventrikularna punkcija.

Lumbalnu punkciju izvodi neurolog/anesteziolog-reanimatologinja u ordinaciji, garderobi ili operacijskoj sali. Bolesnika se položi na bok s koljenima prinesenim prsima, nakon čega se iglom zabode u prostor između 4. i 5. lumbalnog kralješka u subarahnoidnom prostoru. Ukloni se prvih pet kapi cerebrospinalne tekućine jer sadrže putnu krv iz krvnih žila oštećenih tijekom manipulacije. Tekućina se skuplja u 2 sterilne epruvete: jedna od njih se šalje na biokemijske i citološke studije, druga se koristi za otkrivanje fibroznog filma ili ugruška. Ako postoji potreba za bakteriološkom kulturom, 3. epruveta se puni cerebrospinalnom tekućinom. Bez opasnosti po zdravlje, odrasloj osobi možete uzeti 8-10 ml cerebrospinalne tekućine, djeci 5-7 ml, dojenčadi 2-3 ml.

Ne možete protresti dobiveni biomaterijal ili ga izložiti promjenama temperature, jer ovo stvorenje mijenja svoje parametre. Sve epruvete su označene prije početka studije, numerirane, nakon punjenja su čvrsto zatvorene i odmah poslane u laboratorij. U smjeru trebate navesti:

Prezime, ime, patronim pacijenta, njegova dob;

Odjel, odjel, broj povijesti bolesti;

Datum, vrijeme i mjesto punkcije;

Svrha studije;

Pretpostavljena ili klinička dijagnoza;

Podaci liječnika koji je poslao materijal na istraživanje.

2.4 Metode laboratorijskog ispitivanja cerebrospinalne tekućine

2.4.1. Makroskopski pregled

Makroskopski pregled su svi podaci o biomaterijalu koje laboratorijski tehničar može dobiti osjetilima.

Boja - Normalno, cerebrospinalna tekućina je bezbojna i izgledom se ne razlikuje od vode. Boja mu se određuje usporedbom epruvete s materijalom s istom epruvetom napunjenom vodom na bijeloj podlozi. Može se promijeniti u različitim patološkim procesima:

crvena – primjesa nepromijenjenih crvenih krvnih stanica (eritrocita). Može se odrediti pomoću test traka (HemoFAN), koje imaju 2 usporedne ljestvice: jedna od njih mijenja boju u prisutnosti netaknutih crvenih krvnih stanica, druga u prisutnosti slobodnog hemoglobina u cerebrospinalnoj tekućini;

ksantokromna (žuta, žutosmeđa, ružičasta, smeđa) boja javlja se u prisutnosti oksihemoglobina, methemoglobina i bilirubina;

ružičastu boju cerebrospinalne tekućine daje oksihemoglobin, oslobođen iz liziranih eritrocita;

Žuta boja je zbog visokog sadržaja bilirubina, koji se formira iz hemoglobina. Za određivanje bilirubinarhije i njezine težine koriste se test trake (IctoFAN), čija zona reagensa mijenja boju od blijedo ružičaste do tamno ružičaste ovisno o koncentraciji bilirubina;

methemoglobin i metalbumin daju smeđu boju cerebrospinalnoj tekućini, pojavljuju se u prisutnosti inkapsuliranih hematoma i krvarenja u središnjem živčanom sustavu;

zelena boja javlja se kod izražene bilirubinarhije, jer bilirubin prelazi u biliverdin, pigment maslinaste boje. Ponekad je uzrokovana primjesom gnoja.

Prozirnost - cerebrospinalna tekućina je normalno prozirna, ovaj parametar se određuje usporedbom dobivenog materijala s destiliranom vodom. Lagana zamućenost cerebrospinalne tekućine opaža se s leukocitozom preko 200x10 6 / l, sadržajem eritrocita više od 400x10 6 / l, ukupnim proteinom - više od 3 g / l. Ako nakon centrifugiranja cerebrospinalna tekućina postane prozirna, tada je zamućenje uzrokovano formiranim elementima, ako ostane zamućeno, uzrok su mikroorganizmi. Pri visokim koncentracijama fibrinogena dolazi do opalescencije cerebrospinalne tekućine.

Fibrinozni film - normalno, cerebrospinalna tekućina ima nizak sadržaj fibrina i film se ne stvara tijekom taloženja. Visok sadržaj fibrina stvara osjetljivu mrežicu ili film na stijenkama epruvete, vrećicu ili ugrušak nalik na žele. Tečnost koja sadrži veliku količinu grubih bjelančevina odmah nakon ispuštanja koagulira u želatinasti ugrušak.

2.4.2. Mikroskopski pregled cerebrospinalne tekućine

Ovo je jedna od najkritičnijih faza proučavanja cerebrospinalne tekućine, na temelju podataka o kojima se dijagnoze često potvrđuju ili opovrgavaju.

Brojanje formiranih elemenata provodi se unutar 30 minuta nakon ekstrakcije cerebrospinalne tekućine, nakon čega slijedi diferencijacija stanica. Brojati leukocita Preparat se boji jednim od sljedećih reagensa:

5 ml 10% otopine ledene octene kiseline + 0,1 metilviolet + voda do 50 ml – vrijeme bojenja 2 minute;
Samsonov reagens: 2,5 ml alkoholne otopine fuksina 1:10 + 30 ml octene kiseline + 2 g karbolne kiseline + destilirana voda do 100 ml, vrijeme bojenja 10-15 minuta.

Obojeni preparat se stavi u Fuchs-Rosenthal komoru od 3,2 µl. Leukociti se broje uz malo povećanje u svih 256 kvadrata, s visokom pleocitozom od 200-1000x10 6 /l, broji se polovica rešetke i rezultat se množi s 2, s pleocitozom preko 1000x10 6 /l, jedan red velikih kvadrata broji se i rezultat se množi s 4. Normalne vrijednosti citoze navedene su u tablici 1, za različite vrste patologije - u tablici 2.

stol 1

Citoza u lumbalnoj cerebrospinalnoj tekućini

tablica 2

Pleocitoza u raznim bolestima

Količina crvene krvne stanice u tekućini se broje u Goryaevljevoj komori za brojanje. Da biste to učinili, CSF pomiješan s krvlju se razrijedi 10 puta - 9 dijelova izotonične otopine natrijevog klorida i 1 dio CSF se miješaju u epruveti. Dobivena tekućina se temeljito promiješa, Gorjajevljeva komora za brojanje se napuni i, prema pravilima za brojanje broja crvenih krvnih zrnaca, odredi se broj crvenih krvnih zrnaca u pet velikih kvadrata. Broj crvenih krvnih stanica u 1 μl likvora određuje se formulom:

gdje je A broj crvenih krvnih stanica u 5 velikih (80 malih) kvadrata, 1/400 je volumen malog kvadrata, 10 je razrjeđenje cerebrospinalne tekućine, 80 je broj malih kvadrata.

Prilikom brojanja u Fuchs-Rosenthal komori, nuklearne i citoplazmatske strukture vidljive su u fuksinom obojenim staničnim i formiranim elementima, što omogućuje njihovu diferencijaciju. Procjenjuju se pri povećanju od 7x40. Registracija rezultata brojanja može imati postotni ili numerički izraz (likvorogram). S obzirom na to da formirani i stanični elementi mogu biti podvrgnuti degenerativnim promjenama kada ostanu u likvoru dulje vrijeme, potrebno je procijeniti i prebrojati formirane i stanične elemente u obojenim preparatima.

Stanice likvora imaju potpuno drugačiji afinitet prema bojama od krvnih stanica, stoga bi odabir boja trebao biti drugačiji. Sljedeće vrste bojenja preparata daju dobre rezultate:

Bojanje prema Rosini. CSF se centrifugira 7-10 minuta. Supernatant se ocijedi, talog se stavi na odmašćenu čašu, lagano protrese, rasporedi po površini čaše i nakon 1-2 minute tekućina se ocijedi. Staklo se postavlja u okomiti položaj i suši u pećnici na temperaturi od 40–50 ° C, nakon čega se fiksira 1–2 minute metanolom i boji prema Romanovskom: preparati se boje 6–12 minuta. , ovisno o debljini razmaza. Preparat se ispere destiliranom vodom i osuši. Ako su zrna blijedoplava, razmaz se ponovno boji još 2-3 minute.

Bojanje prema Vozni. Sediment dobiven centrifugiranjem izlije se na staklo uz lagano protresanje i ravnomjerno rasporedi po površini. Sušiti na sobnoj temperaturi 24 sata, fiksirati 5 minuta metilnim alkoholom. Zatim se boje otopinom azurnog eozina (isto kao za bojenje krvi, ali razrijeđeno 5 puta) 1 sat.Ako su stanice blijedo obojene, dovršiti bojenje nerazrijeđenom bojom pod kontrolom mikroskopa 2 do 10 minuta. . Što je više oblikovanih elemenata u cerebrospinalnoj tekućini, osobito u prisutnosti krvi, to je dulja boja.

Bojenje prema Aleksejevu. Na osušen, ali nefiksiran preparat nanijeti 6-10 kapi Romanovsky-Giemsa boje, istom pipetom pažljivo rasporediti po cijelom preparatu i ostaviti 30 sekundi. Zatim dodajte, bez ispuštanja boje, 12-20 kapi destilirane vode, prethodno zagrijane na temperaturu od 50-60 °C, u omjeru 1:2. Mućkajući pripravak pomiješajte boju s vodom i ostavite 3 minute. . Boju isprati mlazom destilirane vode, preparat osušiti filter papirom i mikroskopski pregledati. Metoda je prikladna za hitnu citološku pretragu.

Normalne vrijednosti sadržaja staničnih elemenata u cerebrospinalnoj tekućini prikazane su u tablici 3.

Tablica 3

Tehnologija citocentrifugiranja (citospin). Priprema obojenih pripravaka cerebrospinalne tekućine iz sedimentne tekućine nakon centrifugiranja ne omogućuje uvijek dobivanje tankog sloja stanica pogodnih za dijagnozu. Za rješavanje ovog problema razvijena je tehnologija citocentrifugiranja koja uključuje hardversku proizvodnju visokokvalitetnih lijekova. Da bi se to postiglo, dobivena cerebrospinalna tekućina priprema se za ispitivanje i stavlja u citokomoru, nakon čega se dozira na predmetna stakalca postavljena okomito u rotor citocentrifuge. Pod utjecajem centrifugalne sile stanice se ravnomjerno raspoređuju po staklu, dok se svjetlija tekućina uklanja s površine preparata. Sušenje, fiksiranje i bojenje preparata također se provodi u citocentrifugi. Uređaj vam omogućuje stvaranje do 8 dijagnostičkih zona na jednom slajdu.

Atipične stanice – najčešće su to tumorske stanice središnjeg živčanog sustava ili njegovih membrana. Mogu se javiti i kod kroničnih upalnih procesa (tuberkulozni meningitis, meningoencefalitis, multipla skleroza, encefalomijelitis) - to su ependimalne stanice ventrikula arahnoidne membrane, te limfociti, monociti i plazmociti s promjenama u jezgri i citoplazmi.

Promijenjene stanice i stanične sjene otkrivaju se tijekom duljeg boravka u likvoru. Najčešće autolizi prolaze neutrofilni granulociti, arahnoidne stanice i ventrikularni ependim. Promijenjene stanice i stanične sjene nemaju dijagnostičku vrijednost.

Kristali u likeru rijetko se nalaze. 4-5 dana nakon subarahnoidalnog krvarenja ili traumatske ozljede mozga nalaze se kristali hemosiderina; u slučaju raspadanja tumora u sadržaju ciste mogu se naći kristali hematoidina, kolesterola i bilirubina; kristali kolesterola također se stvaraju u područjima masne degeneracije, nekroze moždanog tkiva i kod cista na mozgu. Za otkrivanje kristala u likvoru koriste se reakcije prikazane u tablici 4.

Tablica 4

Reakcije koje se koriste za otkrivanje kristala u likeru

Echinococcus elementi – kuke, skoleks i fragmenti hitinske membrane ehinokoknog mjehura mogu se otkriti s višestrukom ehinokokozom moždanih ovojnica. Nalaze se izuzetno rijetko.