Anaerobni mikrobi. Aerobne i anaerobne bakterije

1.Genetski i biokemijski mehanizmi rezistencije na lijekove. Način prevladavanja otpornosti bakterija na lijekove.
2. Koristite "infekcija", "zarazni proces", "zarazna bolest". Uvjeti za nastanak zarazne bolesti.
1. Racionalna antibiotska terapija. Nuspojave antibiotika na ljudski organizam i mikroorganizme. Stvaranje oblika bakterija otpornih na antibiotike i antibiotika ovisnih.
2. Reakcija taloženja i njezine vrste. Mehanizam i metode ugradnje, praktična primjena.
1. Metode za određivanje osjetljivosti bakterija na antibiotike. Određivanje koncentracije antibiotika u mokraći i krvi.
2. Glavne stanice imunološkog sustava: t, b-limfociti, makrofagi, subpopulacije t-stanica, njihove karakteristike i funkcije.
1. Mehanizmi djelovanja antibiotika na mikrobne stanice. Baktericidno i bakteriostatsko djelovanje antibiotika. Jedinice za mjerenje antimikrobnog djelovanja antibiotika.
2. Reakcija imunološke lize kao jedan od mehanizama uništavanja mikroba, komponente reakcije, praktična primjena.
3. Uzročnik sifilisa, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti. Epidemologija i patogeneza. Mikrobiološka dijagnostika.
1. Metode uzgoja bakteriofaga, njihova titracija (po Graciji i Appelmanu).
2. Stanična suradnja između T, B-limfocita i makrofaga u procesu humoralnog i staničnog imunološkog odgovora.
1. Disanje bakterija. Aerobni i anaerobni tipovi biološke oksidacije. Aerobi, anaerobi, fakultativni anaerobi, mikroaerofili.
1. Djelovanje bioloških čimbenika na mikroorganizme. Antagonizam u mikrobnim biocenozama, bakteriocini.
3. Bordetella. Taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti. Bolesti uzrokovane Bordetellom. Patogeneza hripavca. Laboratorijska dijagnostika, specifična prevencija.
1. Pojam bakterija. Autotrofi i heterotrofi. Holofitni način ishrane bakterija. Mehanizmi prijenosa hranjivih tvari u bakterijsku stanicu.
2. Antigenska struktura bakterijske stanice. Glavna svojstva mikrobnih antigena su lokalizacija, kemijski sastav i specifičnost bakterijskih antigena, toksina, enzima.
1. Antibiotici. Povijest otkrića. Podjela antibiotika prema načinu proizvodnje, podrijetlu, kemijskoj strukturi, mehanizmu djelovanja, spektru antimikrobnog djelovanja.
3. Virusi influence, taksonomija, opće karakteristike, antigeni, tipovi varijabilnosti. Epidemiologija i patogeneza gripe, laboratorijska dijagnostika. Specifična prevencija i terapija gripe.
2. Serološka metoda za dijagnosticiranje zaraznih bolesti, njezina procjena.
3. Dijarejačne ešerihije, njihove vrste, faktori patogenosti, bolesti uzrokovane njima, laboratorijska dijagnostika.
1. Opće karakteristike gljiva, njihova klasifikacija. Uloga u ljudskoj patologiji. Primijenjeni aspekti studija.
3. Escherichia, njihova uloga kao normalnog stanovnika crijeva. Sanitarne indikativne vrijednosti Escherichia za vodu i tlo. Escherichia kao etiološki čimbenik gnojno-upalnih bolesti čovjeka.
1. Primjena bakteriofaga u mikrobiologiji i medicini za dijagnostiku, prevenciju i terapiju zaraznih bolesti.
2. Bakterijski otrovi: endotoksin i egzotoksin. Podjela egzotoksina, kemijski sastav, svojstva, mehanizam djelovanja. Razlike između endotoksina i egzotoksina.
3. Mikoplazme, taksonomija, vrste patogene za čovjeka. Karakteristike njihovih bioloških svojstava, faktori patogenosti. Patogeneza i imunitet. Laboratorijska dijagnostika. Prevencija i terapija.
1. Laboratorijska dijagnoza disbakterioze. Lijekovi koji se koriste za prevenciju i liječenje disbakterioze.
2. Imunofluorescencija u dijagnostici zaraznih bolesti. Izravne i neizravne metode. Potrebni lijekovi.
3. Virus krpeljnog encefalitisa, taksonomija, opće karakteristike. Epidemiologija i patogeneza, laboratorijska dijagnostika, specifična prevencija krpeljnog encefalitisa.
1. Strukturne značajke rikecije, mikoplazme i klamidije. Metode njihovog uzgoja.
2. Biološki pripravci za specifičnu prevenciju i liječenje zaraznih bolesti: cjepiva.
3. Salmonela, taksonomija. Uzročnik trbušnog tifusa i paratifusa. Epidemiologija patogeneze trbušnog tifusa. Laboratorijska dijagnostika. Specifična prevencija.
2. Antigenska struktura toksina, virusa, enzima: lokalizacija, kemijski sastav i specifičnost. Anatoksini.
3. Virusi uzročnici akutnih respiratornih bolesti. Paramiksovirusi, opće karakteristike obitelji, uzročnici bolesti. Patogeneza ospica, specifična prevencija.
1. Razmnožavanje virusa (disjunktivno razmnožavanje). Glavne faze interakcije između virusa i stanice domaćina tijekom produktivnog tipa infekcije. Značajke reprodukcije virusa koji sadrže DNA i RNA.
2. Pojam rane, respiratorne, crijevne, krvi i urogenitalne infekcije. Antroponoza i zoonoza. Mehanizmi prijenosa infekcije.
3. Tetanus clostridia, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti. Epidemiologija i patogeneza tetanusa. Laboratorijska dijagnostika, specifična terapija i prevencija.
1. Mikroflora kože i usne šupljine zdrave osobe. Mikroflora sluznice respiratornog trakta, genitourinarnog trakta i očiju. Njihovo značenje u životu.
2. Intrauterine infekcije. Etiologija, putevi prijenosa infekcije na fetus. Laboratorijska dijagnostika, preventivne mjere.
1. Vrste interakcije između virusa i stanice: integrativne i autonomne.
2. Sustav komplementa, klasični i alternativni put aktivacije komplementa. Metode određivanja komplementa u krvnom serumu.
3. Hrana bakterijska intoksikacija stafilokokne prirode. Patogeneza, značajke laboratorijske dijagnostike.
1. Djelovanje kemijskih čimbenika na mikroorganizme. Asepsa i dezinfekcija. Mehanizam djelovanja različitih skupina antiseptika.
2. Živa ubijena, kemijska, toksoidna, sintetička, moderna cjepiva. Principi dobivanja, mehanizmi stvaranja imuniteta. Adjuvansi u cjepivima.
3. Klebsiella, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti, uloga u humanoj patologiji. Laboratorijska dijagnostika.
1. Dysbacteriosis, uzroci, čimbenici njegovog formiranja. Stadiji disbakterioze. Laboratorijska dijagnostika, specifična prevencija i terapija.
2. Uloga neutralizacije toksina toksoidom. Praktična upotreba.
3. Pikornovirusi, podjela, karakteristike polio virusa. Epidemiologija i patogeneza, imunitet. Laboratorijska dijagnostika, specifična prevencija.
1. Tipovi varijabilnosti kod bakterija: modifikacijska i genotipska varijabilnost. Mutacije, vrste mutacija, mehanizmi nastanka mutacija, mutageni.
2. Lokalni antiinfektivni imunitet. Uloga sekretornih protutijela.
3. Prehrambene bakterijske toksične infekcije uzrokovane Eschirichijom, Proteusom, stafilokokom, anaerobnim bakterijama. Patogeneza, laboratorijska dijagnostika.
2. Središnji i periferni organi imunološkog sustava. Dobne karakteristike imunološkog sustava.
1. Citoplazmatska membrana bakterija, njena građa, funkcije.
2. Nespecifični čimbenici antivirusne imunosti: antivirusni inhibitori, interferoni (vrste, mehanizam djelovanja).
1. Protoplasti, sferoplasti, L-oblici bakterija.
2. Stanični imunološki odgovor u antiinfektivnoj obrani. Interakcija između T-limfocita i makrofaga tijekom imunološkog odgovora. Načini kako ga identificirati. Alergijska dijagnostička metoda.
3. Virus hepatitisa A, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava. Epidemiologija i patogeneza Botkinove bolesti. Laboratorijska dijagnostika. Specifična prevencija.
2. Antitijela, glavne klase imunoglobulina, njihove strukturne i funkcionalne značajke. Zaštitna uloga protutijela u antiinfektivnom imunitetu.
3. Virusi hepatitisa C i E, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava. Epidemiologija i patogeneza, laboratorijska dijagnostika.
1. Spore, kapsule, resice, flagele. Njihova struktura, kemijski sastav, funkcije, metode detekcije.
2. Potpuna i nepotpuna antitijela, autoantitijela. Pojam monoklonskih antitijela, hibrida.
1. Morfologija bakterija. Osnovni oblici bakterija. Građa i kemijski sastav različitih struktura bakterijske stanice: nukleotid, mezosomi, ribosomi, citoplazmatske inkluzije, njihove funkcije.
2. Patogenetske značajke virusnih infekcija. Infektivna svojstva virusa. Akutna i dugotrajna virusna infekcija.
1. Prokarioti i eukarioti, njihove razlike u građi, kemijskom sastavu i funkciji.
3. Togavirusi, njihova klasifikacija. Virus rubeole, njegove karakteristike, patogeneza bolesti u trudnica. Laboratorijska dijagnostika.
1. Bakterijski plazmidi, vrste plazmida, njihova uloga u određivanju patogenih svojstava i otpornosti bakterija na lijekove.
2. Dinamika stvaranja protutijela, primarni i sekundarni imunološki odgovor.
3. Gljivice Candida slične kvascima, njihova svojstva, razlikovna svojstva, vrste gljivica Candida. Uloga u ljudskoj patologiji. Uvjeti pogodni za pojavu kandidijaze. Laboratorijska dijagnostika.
1. Osnovni principi taksonomije mikroorganizama. Taksonomski kriteriji: carstvo, odjel, porodica, rod vrsta. Pojam soja, klona, populacije.
2. Pojam imuniteta. Klasifikacija različitih oblika imuniteta.
3. Proteus, taksonomija, svojstva Proteusa, faktori patogenosti. Uloga u ljudskoj patologiji. Laboratorijska dijagnostika. Specifična imunoterapija, fagoterapija.
1. Mikroflora novorođenčadi, njeno formiranje tijekom prve godine života. Utjecaj dojke i umjetnog hranjenja na sastav mikroflore djeteta.
2. Interferoni kao čimbenici antivirusne imunosti. Vrste interferona, metode dobivanja interferona i praktična primjena.
3. Streptococcus pneumoniae (pneumokok), taksonomija, biološka svojstva, faktori patogenosti, uloga u ljudskoj patologiji. Laboratorijska dijagnostika.
1. Strukturne značajke aktinomiceta i spiroheta. Metode za njihovu identifikaciju.
2. Značajke antivirusnog imuniteta. Kongenitalna i stečena imunost. Stanični i humoralni mehanizmi urođene i stečene imunosti.
3. Enterobacteriaceae, podjela, opće karakteristike bioloških svojstava. Antigenska struktura, ekologija.
1. Metode uzgoja virusa: u kulturama stanica, pilećim embrijima, u životinjama. Njihova procjena.
2. Reakcija aglutinacije u dijagnostici infekcija. Mehanizmi, dijagnostička vrijednost. Aglutinirajući serumi (kompleksni i monoreceptorski), dijagnostikumi. Reakcije opterećenja imunološkog sustava.
3. Campylobacter, taksonomija, opće karakteristike, uzročnici bolesti, njihova patogeneza, epidemiologija, laboratorijska dijagnostika, prevencija.
1. Bakteriološka metoda za dijagnosticiranje zaraznih bolesti, stadiji.
3. Onkogeni DNA virusi. Opće karakteristike. Virogenetska teorija nastanka tumora L.A. Zilbera. Moderna teorija karcinogeneze.
1. Osnovni principi i metode uzgoja bakterija. Hranjive podloge i njihova klasifikacija. Kolonije raznih vrsta bakterija, svojstva kulture.
2. Enzimski imunološki test. Komponente reakcije, mogućnosti njezine primjene u laboratorijskoj dijagnostici zaraznih bolesti.
3. HIV virusi. Povijest otkrića. Opće karakteristike virusa. Epidemiologija i patogeneza bolesti, klinika. Laboratorijske dijagnostičke metode. Problem je specifična prevencija.
1. Organizacija genetskog materijala bakterijske stanice: bakterijski kromosom, plazmidi, transpozoni. Genotip i fenotip bakterija.
2. Reakcija neutralizacije virusa. Mogućnosti neutralizacije virusa, opseg.
3. Yersinia, taksonomija. Obilježja uzročnika kuge, čimbenici patogenosti. Epidemiologija i patogeneza kuge. Laboratorijske dijagnostičke metode, specifična prevencija i terapija.
1. Rast i razmnožavanje bakterija. Faze razmnožavanja bakterijskih populacija u tekućem hranjivom mediju u stacionarnim uvjetima.
2. Seroterapija i seroprofilaksa. Karakteristike anatoksičnih i antimikrobnih seruma, imunoglobulina. Njihova priprema i titracija.
3. Rotavirusi, klasifikacija, opće karakteristike obitelji. Uloga rotavirusa u crijevnoj patologiji odraslih i djece. Patogeneza, laboratorijska dijagnostika.
2. Reakcija vezanja komplementa u dijagnostici zaraznih bolesti. Komponente reakcije, praktična primjena.
3. Virus hepatitisa B i D, delta virusi, taksonomija. Opće karakteristike virusa. Epidemiologija i patogeneza hepatitisa B i dr. Laboratorijska dijagnostika, specifična prevencija.
1. Genetske rekombinacije: transformacija, transdukcija, konjugacija. Od vrsta i mehanizma.
2. Putevi prodiranja mikroba u tijelo. Kritične doze mikroba koji uzrokuju zarazne bolesti. Ulazna vrata infekcije. Načini distribucije mikroba i toksina u tijelu.
3. Virus bjesnoće. Taksonomija, opće karakteristike. Epidemiologija i patogeneza virusa bjesnoće.
1. Mikroflora ljudskog tijela. Njegova uloga u normalnim fiziološkim procesima i patologiji. Crijevna mikroflora.
2. Indikacija mikrobnih antigena u patološkom materijalu pomoću imunoloških reakcija.
3. Pikornavirusi, taksonomija, opće karakteristike porodice. Bolesti uzrokovane virusima Coxsackie i Echo. Laboratorijska dijagnostika.
1. Mikroflora atmosferskog zraka, stambenih prostorija i bolničkih ustanova. Sanitarno-indikativni mikroorganizmi zraka. Putovi za ulazak mikroba i preživljavanje u zraku.
2. Stanični nespecifični zaštitni čimbenici: nereaktivnost stanica i tkiva, fagocitoza, prirodne stanice ubojice.
3. Yersinia pseudotuberculosis i enterokolitis, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti. Epidemiologija i patogeneza pseudotube
1. Virusi: morfologija i struktura virusa, njihov kemijski sastav. Načela klasifikacije virusa, značaj u humanoj patologiji.
3. Leptospira, taksonomija, karakteristike bioloških svojstava, faktori patogenosti. Patogeneza leptospiroze. Laboratorijska dijagnostika.
1. Umjereni bakteriofagi, njihova interakcija s bakterijskom stanicom. Fenomen lizogenije, fagna konverzija, značenje ovih pojava.

1. Disanje bakterija. Aerobni i anaerobni tipovi biološke oksidacije. Aerobi, anaerobi, fakultativni anaerobi, mikroaerofili.

Na temelju vrste disanja dijele se u nekoliko skupina.

1) aerobi, koji zahtijevaju molekularni kisik

2) obligatni aerobi ne mogu rasti u nedostatku kisika, jer ga koriste kao akceptor elektrona.

3).mikroaerofili su sposobni rasti u prisutnosti malih koncentracija O2 (do 2%) 4)anaerobi ne trebaju slobodni kisik, potrebni E dobivaju razgradnjom tvari koje sadrže veliku količinu skrivenog E.

5) obligatni anaerobi - ne podnose ni male količine kisika (klostridije)

6) fakultativni anaerobi - prilagođeni postojanju u uvjetima s kisikom i bez kisika. Proces disanja kod mikroba je fosforilacija ili fermentacija supstrata: glikoliza, fosfoglikonatni put i ketodeoksifosfoglikonatni put. Vrste vrenja: mliječno kiselo (bifidobakterije), mravlja kiselina (enterobakterije), maslačno kiselo (klostridije), propionsko kiselo (propionobakterije),

2. Antigeni, definicija, uvjeti antigenosti. Antigene determinante, njihova struktura. Imunokemijska specifičnost antigena: vrsta, skupina, tip, organ, heterospecifični. Potpuni antigeni, hapteni, njihova svojstva.

Antigeni su spojevi velike molekulske mase.

Kada uđu u tijelo, izazivaju imunološku reakciju i stupaju u interakciju s produktima te reakcije.

Klasifikacija antigena. 1. Po porijeklu:

prirodni (proteini, ugljikohidrati, nukleinske kiseline, bakterijski egzo- i endotoksini, antigeni tkiva i krvnih stanica);

umjetni (dinitrofenilirani proteini i ugljikohidrati);

sintetski (sintetizirane poliaminokiseline).

2. Po kemijskoj prirodi:

proteini (hormoni, enzimi itd.);

ugljikohidrati (dekstran);

nukleinske kiseline (DNA, RNA);

konjugirani antigeni;

polipeptidi (polimeri a-aminokiselina);

lipidi (kolesterol, lecitin).

3. Po genetskom srodstvu:

autoantigeni (iz tkiva vlastitog tijela);

izoantigeni (od genetski identičnog donora);

aloantigeni od nesrodnog donora iste vrste)

4. Po prirodi imunološkog odgovora:

1) ksenoantigeni (od donora druge vrste). antigeni ovisni o timusu;

2) antigeni neovisni o timusu.

Također se ističe:

vanjski antigeni (ulaze u tijelo izvana);

unutarnji antigeni; nastaju od oštećenih molekula tijela koje su prepoznate kao strane

skriveni antigeni – specifični antigeni

(npr. živčano tkivo, proteini leće i spermija); anatomski odvojen od imunološkog sustava histohematskim barijerama tijekom embriogeneze.

Hapteni su tvari male molekulske mase koje u normalnim uvjetima ne izazivaju imunološku reakciju, ali kada se vežu za molekule velike molekularne mase postaju imunogeni.

Infektivni antigeni su antigeni bakterija, virusa, gljivica i proteja.

Vrste bakterijskih antigena:

specifično za skupinu;

specifično za vrstu;

tipski specifičan.

Na temelju lokalizacije u bakterijskoj stanici razlikuju se:

O - AG - polisaharid (dio stanične stijenke bakterije);

lipidA - heterodimer; sadrži glukozamin i masne kiseline;

N - AG; dio bakterijskih flagela;

K - AG - heterogena skupina površinskih, kapsularnih antigena bakterija;

toksini, nukleoproteini, ribosomi i bakterijski enzimi.

3.Streptoci, taksonomija, klasifikacija po Lanefieldu. Obilježja bioloških svojstava i faktora patogenosti streptokoka. Uloga streptokoka skupine A u ljudskoj patologiji. Značajke imuniteta. Laboratorijska dijagnostika streptokokne infekcije.

Obitelj Streptococcacea

Rod Streptococcus

Prema Lesfieldu (klasa se temelji na različitim tipovima hemolize): skupina A (Str. Pyogenes) skupina B (Str. Agalactiae - infekcije nakon poroda i urogenitisa, mastitis, vaginitis, sepsa i meningitis u novorođenčadi.), gr. C ( Str. Equisimilis), gr. D (Enterococcus, Str. Fecalis). Gr.A je akutni infektivni proces s alergijskom komponentom (šarlah, erizipel, miokarditis), GrB je glavni uzročnik kod životinja, a kod djece uzrokuje sepsu. GrS-karakteristična hemoliza (uzrokuje patologiju reparativnog trakta) GrD-posjedovan. sve vrste hemolize, kao normalan stanovnik ljudskog crijeva. To su kuglaste stanice, raspoređene u parovima.gr+, kemoorganotrofi, zahtijevaju prehranu. Srijedom, zagrijavanje na krv ili šećer. agaru, na polučvrstom mediju stvaraju se male kolonije, a na tekućem rastu pri dnu, ostavljajući medij prozirnim. Po karakteristike rasta na krvnom agaru: alfa-hemoliza (mala zona hemolize zeleno-sive boje), beta-hem (prozr), nehemol. Aerobi ne stvaraju katalazu, već kapljičnim putem, rjeđe kontaktom.

Parametri uzorka 1) razreda zid – neki imaju kapsulu.

2) f-r prianjanje-teichoi na-ti

3) protein M-protektivan, sprječava fagocitozu

4) niz toksina: eritrogeno-šarlah, O-streptolizin = hemolizin, leukocidin 5) citotoksini.

Dijagnoza: 1)b/l: gnoj, sluz iz grla - kultura na krv. agar (prisutnost/odsutnost zone hemolize), identifikacija Ag St. 2) b/s - razmazi po Gramu 3) s/l - tražiti Ab do O-streptolizin u RSC ili prec.

Liječenje: c-laktam.a/b. Gr.A izazivajući gnojno-upalni proces, upalu, praćenu obilnim gnojem, sepsom.

Anaerobi(grč. negativni prefiks an- + aē r zrak + b život) - mikroorganizmi koji se razvijaju u nedostatku slobodnog kisika u svojoj okolini. Pronađeni u gotovo svim uzorcima patološkog materijala za različite gnojno-upalne bolesti, oni su oportunistički, a ponekad i patogeni. Postoje fakultativni i obligatni A. Fakultativni A. mogu postojati i razmnožavati se i u kisikovim i bez kisikovim sredinama. Tu spadaju Escherichia coli, Yersinia, te streptokoki, Shigella i drugi bakterije.

Obligate A. umiru u prisutnosti slobodnog kisika u okolišu. Dijele se u dvije skupine: bakterije koje stvaraju spore ili klostridije i bakterije koje ne stvaraju spore ili tzv. neklostridijski anaerobi. Među klostridijama postoje uzročnici anaerobnih klostridijskih infekcija - a, klostridijske infekcije rane, a. U neklostridijske A. spadaju gram-negativne i gram-pozitivne štapićaste ili kuglaste bakterije: bakteroidi, fuzobakterije, veillonella, peptokoki, peptostreptokoki, propionske bakterije, eubakterije itd. Neklostridijske A. sastavni su dio normalne mikroflore ljudi i životinja, ali istodobno igraju važnu ulogu u razvoju takvih gnojno-upalnih procesa kao što su peritonitis, pluća i mozak, pleura, flegmona maksilofacijalnog područja itd. Većina anaerobne infekcije, uzrokovana neklostridijalnim anaerobima, endogena je i razvija se uglavnom sa smanjenjem otpornosti organizma kao rezultat ozljede, operacije, hlađenja i oslabljenog imuniteta.

Glavni dio klinički značajnih A. su bakteroidi i fusobakterije, peptostreptokoki i sporni gram-pozitivni bacili. Bacteroides čine oko polovicu gnojno-upalnih procesa uzrokovanih anaerobnim bakterijama.

Bacteroides - rod gram-negativnih obveznih anaerobnih bakterija iz obitelji Bacteroidaceae, štapići s bipolarnim bojanjem, veličina 0,5-1,5´ 1-15 µm, nepokretni ili se kreću uz pomoć peritrihalno smještenih flagela, često imaju polisaharidnu kapsulu, koja je faktor virulencije. Oni proizvode različite toksine i enzime koji djeluju kao faktori virulencije. Što se tiče osjetljivosti na antibiotike, oni su heterogeni: bakteroidi, npr. skupina B. fragilis, rezistentni su na benzilpenicilin. Bakteroidi otporni na b-laktamske antibiotike proizvode b-laktamaze (penicilinaze i cefalosporinaze) koje uništavaju penicilin i cefalosporine. Bakteroidi su osjetljivi na neke derivate imidazola - metronidazol (trihopol,

flagil), tinidazol, ornidazol - lijekovi učinkoviti protiv različitih skupina anaerobnih bakterija, kao i kloramfenikol i eritromicin. Bakteroidi su otporni na aminoglikozide - gentamicin, kanamicin, streptomicin, polimiksin, oleandomicin. Značajan dio bakteroida otporan je na tetracikline.

Fusobacterium je rod gram-negativnih, štapićastih, obveznih anaerobnih bakterija; žive na sluznici usne šupljine i crijeva, nepokretni su ili pokretni i sadrže snažan endotoksin. U patološkom materijalu najčešće se nalaze F. nucleatum i F. necrophorum. Većina fuzobakterija osjetljiva je na b-laktamske antibiotike, no pronađeni su sojevi otporni na penicilin. Fuzobakterije, s iznimkom F. varium, osjetljive su na klindamicin.

Peptostreptokok (Peptostreptococcus) je rod gram-pozitivnih kuglastih bakterija; raspoređeni u parovima, tetradama, u obliku nepravilnih nakupina ili lanaca. Nemaju flagele i ne stvaraju spore. Osjetljiv na penicilin, karbenicilin, cefalosporine, kloramfenikol, otporan na metronidazol.

Peptococcus (Peptococcus) je rod gram-pozitivnih sferičnih bakterija, predstavljen jedinom vrstom P. niger. Nalaze se pojedinačno, u parovima, ponekad u obliku grozdova. Ne stvaraju bičeve niti spore.

Osjetljivost na penicilin, karbenicilin, eritromicin, klindamicin, kloramfenikol. Relativno otporan na metronidazol.

Veillonella je rod gram-negativnih anaerobnih diplokoka; nalaze se u obliku kratkih lanaca, nepokretni su i ne stvaraju spore. Osjetljiv na penicilin, kloramfenikol, tetraciklin, polimiksin, eritromicin, otporan na streptomicin, neomicin, vankomicin.

Od ostalih neklostridijskih anaerobnih bakterija izoliranih iz patološkog materijala bolesnika treba spomenuti gram-pozitivne propionske bakterije, gram-negativne volinele i druge, čije je značenje manje proučavano.

Clostridium je rod gram-pozitivnih anaerobnih bakterija u obliku štapića koje stvaraju spore. Klostridije su rasprostranjene u prirodi, posebice u tlu, a žive i u probavnom traktu ljudi i životinja. Oko deset vrsta klostridija je patogeno za ljude i životinje: C. perfringens, C. novyii, C. septicum, C. ramosum, C. botulirnim, C. tetani, C. difficile, itd. Ove bakterije proizvode visoko egzotoksine specifične za svaku vrsta biološka aktivnost na koju su ljudi i mnoge životinjske vrste osjetljivi. C. difficile su pokretne bakterije s peritrihalnim bičevima. Prema nizu istraživača, ove bakterije, nakon iracionalne antimikrobne terapije, razmnožavaju se, mogu uzrokovati pseudomembranozu. C. difficile je osjetljiva na penicilin, ampicilin, vankomicin, rifampicin,

metronidazol; otporan na aminoglikozide.

Uzročnik anaerobne infekcije može biti bilo koja vrsta bakterije, ali češće su ove infekcije uzrokovane različitim asocijacijama mikroba: anaerobno-anaerobnim (bakteroidi i fusobakterije); anaerobno-aerobni (bakteroidi i

Bakterije su prisutne posvuda u našem svijetu. Ima ih posvuda, a broj njihovih sorti jednostavno je nevjerojatan.

Ovisno o potrebi za kisikom u hranjivoj podlozi za obavljanje životnih aktivnosti, mikroorganizmi se dijele na sljedeće vrste.

Obligate aerobne bakterije, koje se okupljaju u gornjem dijelu hranjivog medija, sadržavale su maksimalnu količinu kisika u flori.
Obligate anaerobne bakterije, koje se nalaze u donjem dijelu okoliša, nalaze se što dalje od kisika.
Fakultativne bakterije uglavnom žive u gornjem dijelu, ali se mogu rasporediti po okolišu, jer ne ovise o kisiku.
Mikroaerofili preferiraju niske koncentracije kisika, iako se nakupljaju u gornjem dijelu medija.
Aerotolerantni anaerobi ravnomjerno su raspoređeni u hranjivoj podlozi i neosjetljivi su na prisutnost ili odsutnost kisika.

Pojam anaerobnih bakterija i njihova klasifikacija

Pojam "anaerobi" pojavio se 1861. godine zahvaljujući radu Louisa Pasteura.

Anaerobne bakterije su mikroorganizmi koji se razvijaju bez obzira na prisutnost kisika u hranjivoj podlozi. Oni dobivaju energiju fosforilacijom supstrata. Postoje fakultativni i obligatni aerobi, kao i druge vrste.

Najznačajniji anaerobi su bakteroidi

Najznačajniji aerobi su bakteroidi. Približno pedeset posto svih gnojno-upalnih procesa, čiji uzročnici mogu biti anaerobne bakterije, čine bakteroide.

Bacteroides su rod gram-negativnih obveznih anaerobnih bakterija. To su šipke s bipolarnom obojanošću, čija veličina ne prelazi 0,5-1,5 do 15 mikrona. Proizvode toksine i enzime koji mogu uzrokovati virulentnost. Različiti bakteroidi imaju različitu otpornost na antibiotike: postoje i otporni i osjetljivi na antibiotike.

Proizvodnja energije u ljudskim tkivima

Neka tkiva živih organizama imaju povećanu otpornost na niske razine kisika. U standardnim uvjetima sinteza adenozin trifosfata odvija se aerobno, ali s povećanom tjelesnom aktivnošću i upalnim reakcijama dolazi do izražaja anaerobni mehanizam.

Adenozin trifosfat (ATP) je kiselina koja ima važnu ulogu u tjelesnoj proizvodnji energije. Postoji nekoliko mogućnosti za sintezu ove tvari: jedna aerobna i tri anaerobna.

Anaerobni mehanizmi za sintezu ATP-a uključuju:

refosforilacija između kreatin fosfata i ADP;
reakcija transfosforilacije dviju molekula ADP;
anaerobna razgradnja rezervi glukoze ili glikogena u krvi.

Uzgoj anaerobnih organizama

Postoje posebne metode za uzgoj anaeroba. Sastoje se od zamjene zraka plinskim smjesama u zatvorenim termostatima.

Drugi način bi bio uzgoj mikroorganizama u hranjivoj podlozi kojoj se dodaju redukcijske tvari.

Hranjive podloge za anaerobne organizme

Postoje zajednički mediji kulture i diferencijalno dijagnostičke hranjive podloge. Uobičajeni uključuju okruženje Wilson-Blair i okruženje Kitt-Tarozzi. Diferencijalno dijagnostički su Hissov medij, Resselov medij, Endoov medij, Ploskirevov medij i bizmut-sulfit agar.

Osnova za Wilson-Blairov medij je agar-agar s dodatkom glukoze, natrijevog sulfita i željeznog klorida. Crne kolonije anaeroba formiraju se uglavnom u dubini stupca agara.

Russellov medij koristi se za proučavanje biokemijskih svojstava bakterija kao što su Shigella i Salmonella. Također sadrži agar-agar i glukozu.

Srijeda Ploskireva inhibira rast mnogih mikroorganizama pa se koristi u diferencijalnodijagnostičke svrhe. U takvom okruženju dobro se razvijaju uzročnici trbušnog tifusa, dizenterije i druge patogene bakterije.

Glavna svrha bizmut sulfit agara je izolacija salmonele u čistom obliku. Ovo okruženje temelji se na sposobnosti Salmonella da proizvodi sumporovodik. Ovo okruženje je slično Wilson-Blair okruženju u smislu korištene metodologije.

Anaerobne infekcije

Većina anaerobnih bakterija koje žive u tijelu čovjeka ili životinje mogu uzrokovati razne infekcije. U pravilu, infekcija se javlja tijekom razdoblja oslabljenog imuniteta ili poremećaja opće mikroflore tijela. Postoji i mogućnost ulaska uzročnika iz vanjske sredine, osobito u kasnu jesen i zimi.

Infekcije uzrokovane anaerobnim bakterijama obično su povezane s florom ljudske sluznice, odnosno s glavnim staništima anaeroba. Tipično, takve infekcije nekoliko uzročnika odjednom(do 10).

Točan broj bolesti uzrokovanih anaerobima gotovo je nemoguće utvrditi zbog teškoća prikupljanja materijala za analizu, transporta uzoraka i uzgoja samih bakterija. Najčešće se ova vrsta bakterija nalazi u kroničnim bolestima.

Osobe bilo koje dobi osjetljive su na anaerobne infekcije. Istodobno, djeca imaju veću stopu zaraznih bolesti.

Anaerobne bakterije mogu uzrokovati razne intrakranijalne bolesti (meningitis, apscesi i druge). Širenje se obično događa kroz krvotok. U kroničnim bolestima anaerobi mogu uzrokovati patologije u području glave i vrata: otitis, limfadenitis, apscesi. Ove bakterije predstavljaju opasnost i za gastrointestinalni trakt i za pluća. Uz razne bolesti ženskog genitourinarnog sustava, također postoji rizik od razvoja anaerobnih infekcija. Razne bolesti zglobova i kože mogu biti posljedica razvoja anaerobnih bakterija.

Uzroci anaerobnih infekcija i njihovi znaci

Svi procesi tijekom kojih aktivne anaerobne bakterije ulaze u tkiva dovode do infekcija. Također, razvoj infekcija može biti uzrokovan poremećenom opskrbom krvlju i nekrozom tkiva (razne ozljede, tumori, edemi, vaskularne bolesti). Oralne infekcije, ugrizi životinja, plućne bolesti, upalne bolesti zdjelice i mnoge druge bolesti također mogu biti uzrokovane anaerobi.

Infekcija se različito razvija u različitim organizmima. Na to utječe i vrsta patogena i stanje ljudskog zdravlja. Zbog poteškoća povezanih s dijagnosticiranjem anaerobnih infekcija, zaključak se često temelji na nagađanju. Infekcije uzrokovane neklostridijski anaerobi.

Prvi znakovi infekcije tkiva aerobi su gnojenje, tromboflebitis i stvaranje plinova. Neki tumori i neoplazme (crijevni, maternični i drugi) također su popraćeni razvojem anaerobnih mikroorganizama. Kod anaerobnih infekcija može se pojaviti neugodan miris, ali njegov izostanak ne isključuje anaerobe kao uzročnike infekcije.

Značajke uzimanja i transporta uzoraka

Prvi test u prepoznavanju infekcija uzrokovanih anaerobima je vizualni pregled. Razne kožne lezije česta su komplikacija. Također, dokaz vitalne aktivnosti bakterija bit će prisutnost plina u zaraženim tkivima.

Za laboratorijske testove i uspostavljanje točne dijagnoze, prije svega, morate kompetentno uzeti uzorak materije iz zahvaćenog područja. Da bi to učinili, koriste posebnu tehniku, zahvaljujući kojoj normalna flora ne ulazi u uzorke. Najbolja metoda je aspiracija ravnom iglom. Uzimanje laboratorijskog materijala metodom razmaza nije preporučljivo, ali je moguće.

Uzorci koji nisu prikladni za daljnju analizu uključuju:

sputum dobiven samoizlučivanjem;
uzorci dobiveni tijekom bronhoskopije;
razmazi iz vaginalnih svodova;
urin sa slobodnim mokrenjem;
izmet.

Sljedeće se može koristiti za istraživanje:

krv;
pleuralna tekućina;
transtrahealni aspirati;
gnoj dobiven iz šupljine apscesa;
cerebrospinalna tekućina;
punkcije pluća.

Transportni uzorci potrebno je što je brže moguće u posebnom spremniku ili plastičnoj vrećici u anaerobnim uvjetima, jer čak i kratkotrajna interakcija s kisikom može uzrokovati smrt bakterija. Tekući uzorci transportiraju se u epruveti ili u špricama. Brisevi s uzorcima transportiraju se u epruvetama s ugljičnim dioksidom ili unaprijed pripremljenim medijima.

Liječenje anaerobne infekcije

Ako se dijagnosticira anaerobna infekcija, potrebno je pridržavati se sljedećih načela za odgovarajuće liječenje:

toksini koje proizvode anaerobi moraju se neutralizirati;
treba promijeniti stanište bakterija;
širenje anaeroba mora biti lokalizirano.

U skladu s ovim načelima u liječenju se koriste antibiotici, koji pogađaju i anaerobne i aerobne organizme, jer je često flora kod anaerobnih infekcija miješana. Istodobno, pri propisivanju lijekova liječnik mora procijeniti kvalitativni i kvantitativni sastav mikroflore. Sredstva koja djeluju protiv anaerobnih patogena uključuju: peniciline, cefalosporine, klapamfenikol, fluorokinolo, metronidazol, karbapeneme i druge. Neki lijekovi imaju ograničen učinak.

Za kontrolu staništa bakterija u većini slučajeva koristi se kirurška intervencija, koja uključuje liječenje zahvaćenih tkiva, isušivanje apscesa i osiguravanje normalne cirkulacije krvi. Kirurške metode ne smiju se zanemariti zbog opasnosti od komplikacija opasnih po život.

Ponekad se koristi pomoćne metode liječenja, a također i zbog poteškoća povezanih s točnim identificiranjem uzročnika infekcije, koristi se empirijsko liječenje.

Kada se u usnoj šupljini razviju anaerobne infekcije, također se preporuča u prehranu dodati što više svježeg voća i povrća. Najkorisnije za to su jabuke i naranče. Mesna hrana i brza hrana podliježu ograničenjima.

Anaerobna infekcija

Etiologija, patogeneza, antibakterijska terapija.

Predgovor................................................. ......................................................... 1

Uvod................................................. ......................................................... .... 2

1.1 Definicija i karakteristike..................................................... ...... .... 2

1.2 Sastav mikroflore glavnih ljudskih biotopa.................................. 5

2. Čimbenici patogenosti anaerobnih mikroorganizama......... 6

2.1. Uloga anaerobne endogene mikroflore u patologiji

osoba................................................. .........................................................……… . 8

3. Glavni oblici anaerobne infekcije............................................. ........... 10

3.1. Pleuropulmonalna infekcija................................................. ................... ........….. 10

3.2. Infekcija dijabetičkog stopala..................................................... ...... . 10

3.3. Bakteriemija i sepsa..................................................... ..... ................. jedanaest

3.4. Tetanus................................................. ................................. jedanaest

3.5. Proljev................................................. ............................................ 12

3.6. Kirurške infekcije rana i mekih tkiva.................................. 12

3.7. Infekcija mekog tkiva koja stvara plinove ............................................ ......... 12

3.8. Klostridijalna mionekroza..................................................... ................. ... 12

3.9. Polako se razvija nekrotizirajuća infekcija rane...13

3.10. Intraperitonealna infekcija....................................................... 13

3.11. Obilježja eksperimentalnih anaerobnih apscesa.....13

3.12. Pseudomembranozni kolitis..................................................... ................. ..........14

3.13. Obstetričke i ginekološke infekcije.................................................. ......14

3.14. Anaerobna infekcija u bolesnika s rakom……………..15

4. Laboratorijska dijagnostika............................................. ...... ................15

4.1. Materijal koji se proučava ................................................. .......... .....................15

4.2. Faze istraživanja materijala u laboratoriju............................................16

4.3. Izravno ispitivanje materijala..................................................... ............ 16

4.4. Metode i sustavi za stvaranje anaerobnih uvjeta.................................16

4.5. Hranjive podloge i uzgoj.................................................. .....17

5. Antibiotska terapija anaerobne infekcije.................................................. ....... 21

5.1. Karakteristike glavnih antimikrobnih lijekova,

koristi se u liječenju anaerobnih infekcija.....................................21

5.2. Kombinacija beta-laktamskih lijekova i inhibitora

beta-laktamaze..................................................... .... .................................24

5.3. Klinički značaj određivanja osjetljivosti anaerobnih

mikroorganizama na antimikrobne lijekove.......…………...24

6. Korekcija crijevne mikroflore.....................................…………….26

Zaključak................................................. ............................................27
Autori……………………………………………………………….27

Predgovor

Posljednje godine obilježene su ubrzanim razvojem mnogih područja opće i kliničke mikrobiologije, što je vjerojatno posljedica kako našeg boljeg razumijevanja uloge mikroorganizama u razvoju bolesti, tako i potrebe liječnika za stalnim korištenjem informacija o etiologiji bolesti, svojstva uzročnika s ciljem uspješnog zbrinjavanja bolesnika i dobivanja zadovoljavajućih konačnih rezultata kemoterapije ili kemoprofilakse. Jedno od tih područja mikrobiologije koja se brzo razvija je klinička anaerobna bakteriologija. U mnogim zemljama svijeta ovom dijelu mikrobiologije posvećuje se značajna pozornost. Sekcije posvećene anaerobima i anaerobnim infekcijama uključene su u programe izobrazbe liječnika različitih specijalnosti. Nažalost, u našoj zemlji ovom dijelu mikrobiologije nije se posvećivalo dovoljno pažnje, kako u pogledu izobrazbe specijalista, tako i u dijagnostičkom aspektu rada bakterioloških laboratorija. Metodološki priručnik “Anaerobne infekcije” pokriva glavne dijelove ove problematike - definiciju i klasifikaciju, karakteristike anaerobnih mikroorganizama, glavne biotope anaerobnih infekcija u tijelu, karakteristike oblika anaerobnih infekcija, pravce i metode laboratorijske dijagnostike, kao i sveobuhvatna antibakterijska ispitivanja -rapija (antimikrobni lijekovi, rezistencija/osjetljivost mikroorganizama, metode utvrđivanja i prevladavanja). Naravno, metodološki priručnik nema za cilj pružiti detaljne odgovore na sve aspekte anaerobne infekcije. Sasvim je jasno da mikrobiolozi koji žele raditi u području anaerobne bakteriologije trebaju proći poseban ciklus usavršavanja, kako bi potpunije ovladali problematikom mikrobiologije, laboratorijske tehnike, metoda indikacije, uzgoja i identifikacije anaeroba. Osim toga, dobro iskustvo stječe sudjelovanjem na posebnim seminarima i simpozijima posvećenim anaerobnim infekcijama na nacionalnoj i međunarodnoj razini. Ove metodološke preporuke upućene su bakteriolozima, liječnicima različitih specijalnosti (kirurzima, terapeutima, endokrinolozima, opstetričarima-ginekolozima, pedijatrima), studentima medicinskih i bioloških fakulteta, nastavnicima medicinskih sveučilišta i medicinskih škola.

Uvod

Prve ideje o ulozi anaerobnih mikroorganizama u ljudskoj patologiji pojavile su se prije mnogo stoljeća. Još u 4. stoljeću prije Krista Hipokrat je detaljno opisao kliničku sliku tetanusa, au 4. stoljeću nove ere Ksenofont je opisao slučajeve akutnog nekrotizirajućeg ulceroznog gingivitisa kod grčkih vojnika. Kliničku sliku aktinomikoze opisao je Langenbeck 1845. godine. Međutim, u to vrijeme nije bilo jasno koji mikroorganizmi uzrokuju ove bolesti, koja su njihova svojstva, kao što je koncept anaerobioze bio odsutan sve do 1861. godine, kada je Louis Pasteur objavio klasično djelo o proučavanju Vibrioa. butirig a organizme koji žive u nedostatku zraka nazivaju "anaerobima" (17). Kasnije je Louis Pasteur (1877.) izolirao i uzgojio Clostridium septicum , i Izrael 1878. opisao je aktinomicete. Uzročnik tetanusa je Clostridium tetani - 1883. otkrio N.D. Monastyrsky, a 1884. A. Nikolayer. Prve studije pacijenata s kliničkom anaerobnom infekcijom proveo je Levy 1891. godine. Ulogu anaeroba u razvoju raznih medicinskih patologija prvi je opisao i potpunije argumentirao Veiloon i Zuber godine 1893-1898. Opisali su različite vrste teških infekcija uzrokovanih anaerobnim mikroorganizmima (gangrena pluća, upala slijepog crijeva, apscesi pluća, mozga, zdjelice, meningitis, mastoiditis, kronični otitis, bakterijemija, parametritis, bartholinitis, gnojni artritis). Osim toga, razvili su mnoge metodološke pristupe izolaciji i uzgoju anaeroba (14). Tako su do početka 20. stoljeća postali poznati mnogi anaerobni mikroorganizmi, formirana je ideja o njihovom kliničkom značaju i stvorena odgovarajuća tehnika za uzgoj i izolaciju anaerobnih mikroorganizama. Od 60-ih godina prošlog stoljeća do danas, aktualnost problema anaerobnih infekcija i dalje raste. To je zbog etiološke uloge anaerobnih mikroorganizama u patogenezi bolesti i razvoja rezistencije na široko korištene antibakterijske lijekove, kao i teškog tijeka i visoke smrtnosti bolesti koje uzrokuju.

1.1. Definicija i karakteristike

U kliničkoj mikrobiologiji mikroorganizmi se obično klasificiraju na temelju njihovog odnosa s atmosferskim kisikom i ugljikovim dioksidom. To se lako može provjeriti inkubiranjem mikroorganizama na krvnom agaru u različitim uvjetima: a) na normalnom zraku (21% kisika); b) u uvjetima CO 2 inkubatora (15% kisika); c) u mikroaerofilnim uvjetima (5% kisika) d) anaerobnim uvjetima (0% kisika). Ovim pristupom bakterije se mogu podijeliti u 6 skupina: obligatni aerobi, mikroaerofilni aerobi, fakultativni anaerobi, aerotolerantni anaerobi, mikroaerotolerantni anaerobi, obligatni anaerobi. Ove informacije korisne su za početnu identifikaciju i aeroba i anaeroba.

Aerobi. Za rast i razmnožavanje obligatni aerobi zahtijevaju atmosferu koja sadrži molekularni kisik u koncentraciji od 15-21% ili CO; inkubator. Mikobakterije, Vibrio cholerae i neke gljive primjeri su obveznih aeroba. Ovi mikroorganizmi većinu svoje energije dobivaju procesom disanja.

Mikroaerofili(mikroaerofilni aerobi). Oni također trebaju kisik za reprodukciju, ali u koncentracijama nižim od onih koje su prisutne u atmosferi prostorije. Gonococci i Campylobacter su primjeri mikroaerofilnih bakterija i preferiraju atmosferu s udjelom O2 od oko 5%.

Mikroaerofilni anaerobi. Bakterije koje mogu rasti u anaerobnim i mikroaerofilnim uvjetima, ali ne mogu rasti u CO 2 inkubatoru ili zračnom okruženju.

Anaerobi. Anaerobi su mikroorganizmi kojima za život i razmnožavanje nije potreban kisik. Obligatni anaerobi su bakterije koje rastu samo u anaerobnim uvjetima, tj. u atmosferi bez kisika.

Aerotolerantni mikroorganizmi. Oni mogu rasti u atmosferi koja sadrži molekularni kisik (zrak, CO2 inkubator), ali bolje rastu u anaerobnim uvjetima.

Fakultativni anaerobi(fakultativni aerobi). Sposoban preživjeti u prisutnosti ili odsutnosti kisika. Mnoge bakterije izolirane iz bolesnika su fakultativni anaerobi (enterobacteriaceae, streptokoki, stafilokoki).

kapnofili. Niz bakterija koje bolje rastu u prisutnosti visokih koncentracija CO 2 nazivaju se kapnofili ili kapnofilni organizmi. Bacteroides, fusobacteria, hemoglobinofilne bakterije svrstavaju se u kapnofile, jer bolje rastu u atmosferi koja sadrži 3-5% CO 2 (2,

19,21,26,27,32,36).

Glavne skupine anaerobnih mikroorganizama prikazane su u tablici 1 (42, 43, 44).

Stolja. Najznačajniji anaerobni mikroorganizmi

Rod	Vrste		kratak opis
*Bakteroidi*	U. fragilis U. vulgatus U. distansonis U. eggerthii		Gram-negativne štapići koji ne stvaraju spore
*Prevotella*	P. melaninogenicus P. bivija P. buccalis P. denticola P. intermedia
*Porfiromonas*	P. asaccharolyticum P. endodontalis P. gingivalis			Gram-negativne štapići koji ne stvaraju spore
*Ctostridium*	C. perfringens C. ramosum C. septicum C. novyi C. sporogenes C. sordelii C. tetani C. botulinum C. difficile		Gram-pozitivni štapići koji stvaraju spore ili bacili
*Actinomyces*	A. izraelci A. bovis
*Pseudoramibacter* *	P. alactolyticum		Gram-pozitivne šipke koje ne stvaraju spore
		E. lentum E. rektalno E. limosum	Gram-pozitivne šipke koje ne stvaraju spore
*Bifidobakterija*		B. eriksonii B. adolescentis B. breve	Gram-pozitivne šipke
*Propionobacterium*		P. akne P. avidum P. granulosum P.propionica**	Gram-pozitivan. štapići koji ne tvore spore
*Lactobacillus*		L. catenaforme L. acidophylus	Gram-pozitivne šipke
*Peptococcus*		P. magnus P. sacharolyticus P. asaccharolyticus
*Peptostreptokok*		P. anaerobius P. intermedius P. mikros P. produkt	Gram-pozitivni kokci koji ne stvaraju spore
*Veilonella*		V. parvula	Gram-negativni koki koji ne stvaraju spore
*Fusobacterium*		F. nucleatum F. necrophorum F. varium F. mortiferum	Fusiform štapići
*Campilobacter*		C. fetus C.jejuni	Gram-negativne, tanke, spiralne šipke koje ne stvaraju spore

* Eubacterium alaclolyticum reklasificirano kao Pseudoramibacter alactolyticum (43,44)

** ranije Arahnija propionska (44)

*** sinonimi F. pseudonecroforum, F. necrophorum biovar S(42,44)

1.2. Sastav mikroflore glavnih ljudskih biotopa

Etiologija zaraznih bolesti posljednjih je desetljeća doživjela značajne promjene. Kao što je poznato, ranije su glavna opasnost za ljudsko zdravlje bile visoko zarazne infekcije: trbušni tifus, dizenterija, salmoneloza, tuberkuloza i mnoge druge, koje su se prenosile pretežno egzogenim putem. Iako su ove infekcije i dalje društveno važne i njihova medicinska važnost sada ponovno raste, općenito se njihova uloga znatno smanjila. Istodobno, sve je veća uloga oportunističkih mikroorganizama, predstavnika normalne mikroflore ljudskog organizma. Normalna ljudska mikroflora uključuje više od 500 vrsta mikroorganizama. Normalnu mikrofloru koja živi u ljudskom tijelu u velikoj mjeri predstavljaju anaerobi (tablica 2).

Anaerobne bakterije koje nastanjuju kožu i sluznicu čovjeka, vršeći mikrobnu transformaciju supstrata egzo- i endogenog podrijetla, proizvode širok spektar različitih enzima, toksina, hormona i drugih biološki aktivnih spojeva koji se apsorbiraju i vežu na komplementarne receptore te utječu na funkciju stanica i organa. Poznavanje sastava specifične normalne mikroflore pojedinih anatomskih područja korisno je za razumijevanje etiologije infektivnih procesa. Skup vrsta mikroorganizama koji nastanjuju određeno anatomsko područje naziva se autohtona mikroflora. Štoviše, detekcija specifičnih mikroorganizama u značajnim količinama na daljinu ili na neuobičajenom mjestu samo naglašava njihovo sudjelovanje u razvoju infektivnog procesa (11, 17, 18, 38).

Dišni put. Mikroflora gornjeg dišnog trakta vrlo je raznolika i uključuje više od 200 vrsta mikroorganizama uključenih u 21 rod. 90% bakterija u slini su anaerobi (10, 23). Većina tih mikroorganizama nije klasificirana suvremenim taksonomskim metodama i nemaju značajan značaj za patologiju. Respiratorni trakt zdravih ljudi najčešće je koloniziran sljedećim mikroorganizmima: Streptococcus upala pluća- 25-70%; H aemophilus influenzae- 25-85%; Streptococcus pyogenes- 5-10%; Neisseria meningitis- 5-15%. Anaerobni mikroorganizmi kao što su Fusobacterium, Bakteroidi spiralis, Peptostreptokok, Peptococcus, Veilonella i neke vrste Actinomyces naći u gotovo svih zdravih ljudi. Koliformne bakterije nalaze se u respiratornom traktu 3-10% zdravih ljudi. Pojačana kolonizacija dišnog trakta ovim mikroorganizmima utvrđena je kod alkoholičara, teško bolesnih osoba, kod pacijenata koji su primali antibakterijsku terapiju koja potiskuje normalnu mikrofloru, kao i kod osoba s oštećenim funkcijama imunološkog sustava.

Tablica 2. Kvantitativni sadržaj mikroorganizama u biotopima

normalno ljudsko tijelo

Populacije mikroorganizama u respiratornom traktu prilagođavaju se određenim ekološkim nišama (nos, ždrijelo, jezik, gingivalne pukotine). Prilagodba mikroorganizama na određene biotope određena je afinitetom bakterija prema određenim tipovima stanica ili površina, odnosno staničnom ili tkivnom tropizmom. Na primjer, Streptococcus salivarius je dobro pričvršćen za epitel obraza i dominira u sastavu bukalne sluznice. Bakterijska adhezija

ry također može objasniti patogenezu nekih bolesti. Streptococcus pyogenes dobro prianja uz epitel ždrijela i često uzrokuje faringitis; E. coli ima afinitet za epitel mokraćnog mjehura i stoga uzrokuje cistitis.

Koža. Autohtona mikroflora kože predstavljena je uglavnom bakterijama sljedećih rodova: Stafilokok, Mikrokok, Corinobakterija, Propionobacterium, Brevibacterium I Acinetobacter. Često su prisutni i kvasci roda Pityrosporium. Anaerobi su uglavnom zastupljeni gram-pozitivnim bakterijama roda Propi- onobakterija (obično Propionobacterium akne). Gram-pozitivni koki (Peptostreptokok spp.) I gram-pozitivne bakterije iz roda Eubacterium prisutan kod nekih pojedinaca.

Uretra. Bakterije koje naseljavaju distalni dio uretre su stafilokoki, nehemolitički streptokoki, difteroidi i u manjem broju slučajeva različiti predstavnici porodice Enterobacteriaceae. Anaerobi su u većoj mjeri zastupljeni gram-negativnim bakterijama - BakteroidiIFusobacterium spp..

Vagina. Oko 50% bakterija iz sekreta vrata maternice i rodnice su anaerobi. Većina anaeroba su laktobacili i peptostreptokoki. Prevo-tells se često nalaze - P. bivija I P. disiens. Osim toga, postoje gram-pozitivne bakterije roda Mobiluncus I Clostridium.

Crijeva. Od 500 vrsta koje nastanjuju ljudsko tijelo, otprilike 300 - 400 vrsta živi u crijevima. Sljedeće anaerobne bakterije nalaze se u najvećem broju u crijevima: Bakteroidi, Bifidobakterija, Clostridium, Eubacterium, LactobacillusIPeptostrepto- kokus. Bakteroidi su dominantni mikroorganizmi. Utvrđeno je da na jednu stanicu E. coli dolazi tisuću bakteroidnih stanica.

2. Čimbenici patogenosti anaerobnih mikroorganizama

Patogenost mikroorganizama označava njihovu potencijalnu sposobnost izazivanja bolesti. Pojava patogenosti kod mikroba povezana je s njihovim stjecanjem brojnih svojstava koja im omogućuju da se pričvrste, prodru i šire u tijelu domaćina, odupru se njegovim obrambenim mehanizmima i uzrokuju oštećenja vitalnih organa i sustava. Istodobno, poznato je da je virulencija mikroorganizama polideterminno svojstvo, koje se u potpunosti ostvaruje samo u tijelu domaćina osjetljivog na patogen.

Trenutno se razlikuje nekoliko skupina faktora patogenosti:

a) adhezini ili faktori pričvršćivanja;

b) čimbenici prilagodbe;

c) invazini, odnosno čimbenici penetracije

d) kapsula;

e) citotoksini;

f) endotoksini;

g) egzotoksini;

h) enzimi, toksini;

i) faktori koji moduliraju imunološki sustav;

j) superantigeni;

l) proteini toplinskog šoka (2, 8, 15, 26, 30).

Faze i mehanizmi, spektar reakcija, interakcija i odnosa na molekularnoj, staničnoj i organskoj razini između mikroorganizama i organizma domaćina vrlo su složeni i raznoliki. Spoznaje o čimbenicima patogenosti anaerobnih mikroorganizama i njihovoj praktičnoj primjeni u prevenciji bolesti još nisu dovoljne. Tablica 3 prikazuje glavne skupine faktora patogenosti anaerobnih bakterija.

Tablica 3. Čimbenici patogenosti anaerobnih mikroorganizama

Faza interakcije		Faktor		Vrste
Prianjanje		Fimbrija kapsularni polisaharidi Hemaglutinini
Invazija		Fosfolipaza C Proteaze
Šteta tkanine	Egzotoksini Hemolizini Proteaze kolagenaza fibrinolizin Neuraminidaza Heparinaza Hondriitin sulfat glukoronidaza N-acetil-glukozaminidaza Citotoksini Enterotoksini Neurotoksini		P. melaninogenica P. melaninogenica
Čimbenici koji potiskuju imunološki sustav	Metabolički produkti Lipopolisaharidi (O-antigen) Imunoglobulinske proteaze (G, A, M) C 3 i C 5 konvertaze Proteaza a 2 -mikroglobulin Metabolički produkti Masne kiseline anaeroba Spojevi sumpora Oksidoreduktaze Beta-laktamaze		Većina anaeroba
Aktivatori faktora oštećenja	Lipopolisaharidi (O-antigen) Površinske strukture

Sada je utvrđeno da su faktori patogenosti anaerobnih mikroorganizama genetski određeni. Identificirani su kromosomski i plazmidni geni, kao i transpozoni koji kodiraju različite faktore patogenosti. Proučavanje funkcija ovih gena, mehanizama i obrazaca ekspresije, prijenosa i cirkulacije u populaciji mikroorganizama vrlo je važan problem.

2.1. Uloga anaerobne endogene mikroflore u ljudskoj patologiji

Anaerobni mikroorganizmi normalne mikroflore vrlo često postaju uzročnici zaraznih procesa lokaliziranih u različitim anatomskim područjima tijela. Tablica 4 prikazuje učestalost anaerobne mikroflore u razvoju patologije. (2, 7, 11, 12, 18, 24, 27).

O etiologiji i patogenezi većine tipova anaerobnih infekcija može se formulirati niz važnih generalizacija: 1) izvor anaerobnih mikroorganizama je normalna mikroflora bolesnika iz vlastitog gastrointestinalnog, dišnog ili urogenitalnog trakta; 2) promjene svojstava tkiva uzrokovane traumom i/ili hipoksijom stvaraju odgovarajuće uvjete za razvoj sekundarne ili oportunističke anaerobne infekcije; 3) anaerobne infekcije u pravilu su polimikrobne i često su uzrokovane mješavinom više vrsta anaerobnih i aerobnih mikroorganizama koji sinergistički djeluju štetno; 4) infekcija je praćena stvaranjem i oslobađanjem jakog mirisa u približno 50% slučajeva (anaerobi koji ne stvaraju spore sintetiziraju hlapljive masne kiseline koje uzrokuju ovaj miris); 5) infekcija je karakterizirana stvaranjem plinova, nekrozom tkiva, razvojem apscesa i gangrene; 6) infekcija se razvija tijekom liječenja aminoglikozidnim antibioticima (bakteroidi su otporni na njih); 7) eksudat je obojen u crno (porphyromonas i prevotella proizvode tamnosmeđi ili crni pigment); 8) infekcija ima dugotrajan, spor, često subklinički tijek; 9) postoje opsežne nekrotične promjene u tkivu, nesklad između težine kliničkih simptoma i količine destruktivnih promjena te malo krvarenja na rezu.

Iako anaerobne bakterije mogu uzrokovati ozbiljne i smrtonosne infekcije, početak infekcije općenito ovisi o stanju tjelesnih obrambenih čimbenika, tj. funkcije imunološkog sustava (2, 5, 11). Načela liječenja takvih infekcija uključuju uklanjanje mrtvog tkiva, drenažu, uspostavljanje adekvatne cirkulacije krvi, uklanjanje stranih tvari te primjenu aktivne antimikrobne terapije primjerene uzročniku, u odgovarajućoj dozi i trajanju.

Tablica 4. Etiološka uloga anaerobne mikroflore

u razvoju bolesti

bolesti	Broj pregledanih osoba	Učestalost izlučivanja anaeroba
Glava i vrat Netraumatski apscesi glave Kronični sinusitis Infekcije perimandibularnog prostora
Prsni koš Aspiracijska pneumonija Apsces pluća
Trbuh Apscesi ili peritonitis Upala slijepog crijeva Apsces jetre
Ženski genitalni trakt Mješoviti tipovi Apscesi zdjelice Upalni procesi			33 (100%) 22 (88%)
Meke tkanine Infekcija rane Kožni apscesi Dijabetički ulkusi udova Neklostridijalni celulitis
Bakteriemija Sve kulture Intraabdominalna sepsa Septički pobačaj

3. Glavni oblici anaerobne infekcije

3.1. Pleuropulmonalna infekcija

Etiološki značajni anaerobni mikroorganizmi u ovoj patologiji predstavnici su normalne mikroflore usne šupljine i gornjih dišnih puteva. Oni su uzročnici raznih infekcija, uključujući aspiracijsku pneumoniju, nekrotizirajuću pneumoniju, aktinomikozu i plućni apsces. Glavni uzročnici pleuropulmonalnih bolesti prikazani su u tablici 5.

Tablica 5. Anaerobne bakterije koje uzrokuju

pleuropulmonalni infekcija

Čimbenici koji doprinose razvoju anaerobne pleuropulmonalne infekcije u bolesnika uključuju aspiraciju normalne mikroflore (kao rezultat gubitka svijesti, disfagije, prisutnosti mehaničkih predmeta, opstrukcije, loše oralne higijene, nekrotizacije plućnog tkiva) i hematogeno širenje mikroorganizama. Kao što se može vidjeti iz tablice 5, aspiracijsku pneumoniju najčešće uzrokuju organizmi koji su prethodno bili označeni kao vrste "oralnih bakteroida" (trenutno vrste Prevotella i Porphyromonas), Fusobacterium i Peptostreptococcus. Spektar bakterija izoliranih iz anaerobnog empijema i plućnog apscesa gotovo je isti.

3.2. Infekcija dijabetičkog stopala

Među više od 14 milijuna dijabetičara u Sjedinjenim Državama, loše stopalo je najčešći zarazni uzrok hospitalizacije. Ovu vrstu infekcije bolesnik u početnom stadiju često zanemaruje, a ponekad je liječnici i neadekvatno liječe. Općenito, pacijenti ne nastoje pažljivo i redovito pregledavati svoje donje ekstremitete i ne slijede preporuke liječnika za režim njege i hodanja. Uloga anaeroba u razvoju infekcija stopala kod dijabetičara utvrđena je prije mnogo godina. Glavni tipovi mikroorganizama koji uzrokuju ovu vrstu infekcije prikazani su u tablici 6.

Tablica 6. Aerobni i anaerobni mikroorganizmi koji uzrokuju

infekcija stopala kod dijabetičara

Aerobi	Anaerobi
Proteus mirabili	Bacteroides fragilis
Pseudomonas aeruginosa	druge vrste skupine B. fragilis
Enterobacter aerogenes	Prevotella melaninogenica
Escherichia coli	druge vrste Prevotella\ Porphyromonas
Klebsiella pneumonija	Fusobacterium nucleatum
	druge fuzobakterije
	Peptostreptokok
Staphylococcus aureus	druge vrste klostridija

Utvrđeno je da 18-20% dijabetičara ima mješovitu aerobno-anaerobnu infekciju. U prosjeku je detektirano 3,2 aerobnih i 2,6 anaerobnih vrsta mikroorganizama po bolesniku, a od anaerobnih bakterija dominantni su peptostreptokoki. Bacteroides, Prevotella i Clostridia također su često otkriveni. Udruga bakterija izolirana je iz dubokih rana u 78% slučajeva. U 25% bolesnika otkrivena je gram-pozitivna aerobna mikroflora (stafilokoki i streptokoki), au približno 25% - gram-negativna aerobna mikroflora u obliku šipke. Oko 50% slučajeva anaerobne infekcije su miješane. Te su infekcije teže i najčešće zahtijevaju amputaciju zahvaćenog ekstremiteta.

3.3. Bakteriemija i sepsa

Udio anaerobnih mikroorganizama u razvoju bakterijemije kreće se od 10 do 25%. Većina studija ukazuje na to U.fragilis i druge vrste ove skupine, kao i Bakteroidi thetaiotaomicron češći su uzrok bakterijemije. Sljedeća najčešće izolirana vrsta su klostridije (osobito Clostridium perfringens) i peptostreptokoke. Često su izolirani u čistoj kulturi ili u udruženjima. Posljednjih desetljeća u mnogim zemljama svijeta bilježi se porast učestalosti anaerobne sepse (s 0,67 na 1,25 slučajeva na 1000 prijema u bolnicu). Stopa smrtnosti bolesnika sa sepsom uzrokovanom anaerobnim mikroorganizmima je 38-50%.

3.4. Tetanus

Tetanus je dobro poznata ozbiljna i često smrtonosna infekcija još od vremena Hipokrata. Stoljećima je ova bolest bila gorući problem povezan s ranama od vatrenog oružja, opeklinama i traumatskim ranama. Polemika Clostridium tetani otkrivaju se u ljudskom i životinjskom izmetu i rašireni su u okolišu. Ramon i njegovi kolege 1927. uspješno su predložili imunizaciju toksoidom za prevenciju tetanusa. Rizik obolijevanja od tetanusa veći je u osoba starijih od 60 godina zbog smanjenja učinkovitosti/gubitka zaštitne postcijepne antitoksične imunosti. Terapija uključuje davanje imunoglobulina, liječenje rana, antimikrobnu i antitoksičnu terapiju, stalnu njegu, primjenu sedativa i analgetika. Trenutačno se posebna pažnja posvećuje neonatalnom tetanusu.

3.5. Proljev

Postoji niz anaerobnih bakterija koje uzrokuju proljev. Anaerobiospirillum sukciniciproducens- mobilne bakterije spiralnog oblika s bipolarnim flagelama. Uzročnik se izlučuje izmetom pasa i mačaka s asimptomatskim infekcijama, kao i osoba s proljevom. Enterotoksigeni sojevi U.fragilis. Godine 1984. Mayer je pokazao ulogu sojeva koji proizvode toksine U.fragilis u patogenezi proljeva. Toksigeni sojevi ovog uzročnika oslobađaju se tijekom proljeva kod ljudi i životinja. Ne mogu se razlikovati od običnih sojeva biokemijskim i serološkim metodama. Eksperimentalno uzrokuju proljev i karakteristične lezije debelog crijeva i distalnog tankog crijeva s hiperplazijom kripte. Enterotoksin ima molekulsku masu 19,5 kD i termolabilan je. Patogeneza, spektar i učestalost bolesti, kao ni optimalna terapija, još uvijek nisu dovoljno razrađeni.

3.6. Kirurška anaerobna infekcija rana i mekih tkiva

Uzročnici infekcije izolirani iz kirurških rana uvelike ovise o vrsti kirurškog zahvata. Uzrok gnojenja tijekom čistih kirurških zahvata, koji nisu popraćeni otvaranjem gastrointestinalnog, urogenitalnog ili dišnog trakta, u pravilu je Sv. aureus. U drugim vrstama gnojenja rane (čisto onečišćene, onečišćene i prljave) najčešće se izolira miješana polimikrobna mikroflora kirurški reseciranih organa. Posljednjih godina bilježi se porast uloge oportunističke mikroflore u razvoju takvih komplikacija. Većina površinskih rana dijagnosticira se kasnije u životu između osmog i devetog dana nakon operacije. Ako se infekcija razvije ranije - unutar prvih 48 sati nakon operacije, to je tipično za gangrenoznu infekciju uzrokovanu određenim vrstama klostridija ili beta-hemolitičkog streptokoka. U ovim slučajeva Dolazi do dramatičnog povećanja ozbiljnosti bolesti, izražene toksikoze, brzog lokalnog razvoja infekcije koja uključuje sve slojeve tjelesnog tkiva u procesu.

3.7. Stvaranje plina infekcija mekih tkiva

Prisutnost plina u inficiranom tkivu zloslutan je klinički znak, au prošlosti su ovu infekciju liječnici najčešće povezivali s prisutnošću klostridijske plinske gangrene. Sada je poznato da infekciju koja stvara plinove kod kirurških pacijenata uzrokuje mješavina anaerobnih mikroorganizama kao što su Clostridium, Peptostreptokok ili Bakteroidi, ili jedna od vrsta aerobnih koliformnih bakterija. Predisponirajući čimbenici za razvoj ovog oblika infekcije su vaskularne bolesti donjih ekstremiteta, dijabetes i traume.

3.8. Klostridijalna mionekroza

Plinska gangrena je destruktivni proces mišićnog tkiva povezan s lokalnom krepitacijom, teškom sustavnom intoksikacijom uzrokovanom anaerobnim plinotvornim klostridijama.Klostridije su gram-pozitivni obligatni anaerobi koji su široko rasprostranjeni u tlu kontaminiranom životinjskim izmetom. Kod ljudi su inače stanovnici probavnog i ženskog spolnog trakta. Ponekad se mogu naći na koži iu usnoj šupljini. Najznačajnija vrsta od 60 poznatih je Clostridium perfringens. Ovaj mikroorganizam je tolerantniji na kisik iz zraka i brzo raste. Riječ je o alfa toksinu, fosfolipazi C (lecitinazi), koja razgrađuje lecitin na fosforilkolin i digliceride, te kolagenazu i proteazu, koje uzrokuju razaranje tkiva. Proizvodnja alfa-toksina povezana je s visokom smrtnošću kod plinske gangrene. Ima hemolitička svojstva, razara trombocite, uzrokuje intenzivno oštećenje kapilara i sekundarno razaranje tkiva. U 80% slučajeva mionekroza je uzrokovana S.perfringens. Osim toga, etiologija ove bolesti uključuje S.novyi, S. septicum, SA.bifer- mentas. Druge vrste klostridija C. histolitikum, SA.sporogenes, SA.padati, SA.tercij imaju mali etiološki značaj.

3.9. Polako se razvija nekrotizirajuća infekcija rane

Agresivna infekcija rane opasna po život Može se pojaviti 2 tjedna nakon infekcije, osobito kod dijabetičara

bolestan. Obično su to mješovite ili monomikrobne fascijalne infekcije. Monomikrobne infekcije su relativno rijetke. u otprilike 10% slučajeva i obično se opažaju u djece. Uzročnici su streptokoki skupine A, Staphylococcus aureus i anaerobni streptokoki (peptostreptokoki). Stafilokok i hemolitički streptokok izoliraju se jednakom učestalošću u približno 30% bolesnika. Većina ih se zarazi izvan bolnice. Većina odraslih ima nekrotizirajući fascilitis ekstremiteta (u 2/3 slučajeva zahvaćeni su ekstremiteti). U djece je češće zahvaćeno područje trupa i prepona. Polimikrobna infekcija uključuje niz procesa uzrokovanih anaerobnom mikroflorom. U prosjeku se iz rana izdvaja oko 5 glavnih vrsta. Stopa smrtnosti od takvih bolesti ostaje visoka (oko 50% među pacijentima s teškim oblicima). Stariji ljudi obično imaju lošu prognozu. Stopa smrtnosti kod osoba starijih od 50 godina je više od 50%, a kod bolesnika s dijabetesom - više od 80%.

3.10. Intraperitonealna infekcija

Intraabdominalne infekcije najteže su za rano dijagnosticiranje i učinkovito liječenje. Uspješan ishod prvenstveno ovisi o ranoj dijagnozi, brzoj i adekvatnoj kirurškoj intervenciji te primjeni učinkovitog antimikrobnog režima. Polimikrobna priroda bakterijske mikroflore uključene u razvoj peritonitisa kao posljedice perforacije kod akutnog apendicitisa prvi put je prikazana 1938. Altemeier. Broj aerobnih i anaerobnih mikroorganizama izoliranih iz područja intraabdominalne sepse ovisi o prirodi mikroflore ili ozlijeđenog organa. Generalizirani podaci pokazuju da se prosječan broj bakterijskih vrsta izoliranih iz izvora infekcije kreće od 2,5 do 5. Za aerobne mikroorganizme ti podaci iznose 1,4-2,0 vrste i 2,4-3,0 vrste anaerobnih mikroorganizama. Najmanje 1 vrsta anaeroba otkriva se u 65-94% bolesnika. Najčešće identificirani aerobni mikroorganizmi su Escherichia coli, Klebsiella, Streptococcus, Proteus i Enterobacter, a anaerobni mikroorganizmi su Bacteroides, Peptostreptococcus i Clostridia. Bacteroides čine 30% do 60% svih izoliranih sojeva anaerobnih mikroorganizama. Prema rezultatima brojnih studija, 15% slučajeva infekcija uzrokovano je anaerobnom, a 10% aerobnom mikroflorom, a prema tome 75% uzrokovano je asocijacijama. Najznačajniji od njih su E.coli I U.fragilis. Prema Bogomolovoj N. S. i Bolshakovu L. V. (1996.), anaerobna infekcija

bio je uzrok razvoja odontogenih bolesti u 72,2% slučajeva, peritonitis slijepog crijeva - u 62,92% slučajeva, peritonitis zbog ginekoloških bolesti - u 45,45% pacijenata, kolangitis - u 70,2%. Anaerobna mikroflora izolirana je najčešće kod teškog peritonitisa u toksičnom i terminalnom stadiju bolesti.

3.11. Obilježja eksperimentalnih anaerobnih apscesa

U eksperimentu U.fragilis inicira razvoj potkožnog apscesa. Početni događaji su migracija polimorfonuklearnih leukocita i razvoj edema tkiva. Nakon 6 dana jasno se identificiraju 3 zone: unutarnja - sastoji se od nekrotičnih masa i degenerativno promijenjenih upalnih stanica i bakterija; srednja je formirana od leukocitne osovine, a vanjska zona je predstavljena slojem kolagena i fibroznog tkiva. Koncentracija bakterija kreće se od 10 8 do 10 9 u 1 ml gnoja. Apsces karakterizira nizak redoks potencijal. Vrlo je teško liječiti, jer se uočava uništavanje antimikrobnih lijekova od strane bakterija, kao i izbjegavanje obrambenih faktora domaćina.

3.12. Pseudomembranozni kolitis

Pseudomembranozni kolitis (PMC) je ozbiljna gastrointestinalna bolest koju karakteriziraju eksudativni plakovi na sluznici debelog crijeva. Ova je bolest prvi put opisana 1893. godine, mnogo prije pojave antimikrobnih lijekova i njihove upotrebe u medicinske svrhe. Sada je utvrđeno da je etiološki faktor ove bolesti Clostridium difficile. Poremećaj crijevne mikroekologije zbog primjene antibiotika uzrok je razvoja MVP-a i širokog širenja infekcija uzrokovanih S.difficile, čiji klinički spektar manifestacija vrlo varira - od nositeljstva i kratkotrajnog, samoograničavajućeg proljeva do razvoja MVP-a. Broj bolesnika s kolitisom uzrokovanim S. difficile, među ambulantnim pacijentima 1-3 na 100.000, a među hospitaliziranim pacijentima 1 na 100-1000.

Patogeneza. Kolonizacija ljudskog crijeva toksigenim sojevima S,difficile važan je čimbenik u razvoju MVP-a. Međutim, asimptomatsko nositeljstvo javlja se u otprilike 3-6% odraslih i 14-15% djece. Normalna crijevna mikroflora služi kao pouzdana barijera koja sprječava naseljavanje patogenih mikroorganizama. Lako ga oštećuju antibiotici i vrlo ga je teško obnoviti. Najizraženiji učinak na anaerobnu mikrofloru imaju cefalosporini 3. generacije, klindamicin (skupina linkomicina) i ampicilin. U pravilu svi bolesnici s MVP-om pate od proljeva. U ovom slučaju, stolica je tekuća s nečistoćama krvi i sluzi. Postoji hiperemija i otok crijevne sluznice. Često se opaža ulcerozni kolitis ili proktitis, karakteriziran granulacijama i hemoragičnom sluznicom. Većina bolesnika s ovom bolešću ima vrućicu, leukocitozu i napetost u trbuhu. Nakon toga se mogu razviti ozbiljne komplikacije, uključujući opću i lokalnu intoksikaciju, hipoalbuminemiju. Simptomi proljeva uzrokovanog uzimanjem antibiotika počinju 4-5 dana antibiotske terapije. S. se otkriva u stolici takvih bolesnika. difficile u 94% slučajeva, dok se u zdravih odraslih osoba ovaj mikroorganizam izolira samo u 0,3% slučajeva.

S.difficile proizvodi dvije vrste vrlo aktivnih egzotoksina - A i B. Toksin A je enterotoksin koji uzrokuje hipersekreciju i nakupljanje tekućine u crijevima, kao i upalnu reakciju s hemoragičnim sindromom. Toksin B je citotoksin. Neutralizira se polivalentnim antigangrenoznim serumom. Ovaj citotoksin nađen je u približno 50% bolesnika s kolitisom uzrokovanim primjenom antibiotika bez stvaranja pseudomembrane i u 15% bolesnika s proljevom uzrokovanim primjenom antibiotika s normalnim sigmoidoskopskim nalazima. Njegov citotoksični učinak temelji se na depolimerizaciji aktinskih mikrofilamenata i oštećenju citoskeleta enterocita. U posljednje vrijeme pojavljuje se sve više podataka o S.difficile kao nozokomijalni uzročnik infekcije. S tim u vezi, preporučljivo je izolirati kirurške bolesnike koji su nositelji ovog mikroorganizma kako bi se izbjeglo širenje infekcije u bolnici. S.difficile najosjetljiviji na vankomicin, metronidazol i bacitracin. Dakle, ova opažanja potvrđuju da sojevi koji proizvode toksine S.difficile uzrokuju širok raspon bolesti, uključujući proljev, kolitis i MVP.

3.13. Opstetričke i ginekološke infekcije

Razumijevanje obrazaca razvoja infekcija ženskih spolnih organa moguće je na temelju dubinskog proučavanja mikrobiocenoze vagine. Normalna vaginalna mikroflora mora se smatrati zaštitnom barijerom protiv najčešćih patogena.

Disbiotski procesi doprinose nastanku bakterijske vaginoze (BV). BV je povezan s razvojem komplikacija kao što su anaerobne postoperativne infekcije mekog tkiva, postpartalni i post-abortivni endometritis, prijevremeni prekid trudnoće, intraamnionska infekcija (10). Opstetrička i ginekološka infekcija je polimikrobne prirode. Prije svega, želio bih istaknuti sve veću ulogu anaeroba u razvoju akutnih upalnih procesa zdjeličnih organa - akutne upale privjesaka maternice, postporođajni endometritis, osobito nakon kirurškog poroda, postoperativne komplikacije u ginekologiji (perikultitis, apscesi, infekcija rane) (5 ). Mikroorganizmi koji se najčešće izoliraju tijekom infekcija ženskog genitalnog trakta uključuju Baktemidi fragilis, kao i vrste Peptococcus I Peptostreptokok. Streptokoki skupine A rijetko se nalaze u infekcijama zdjelice. Streptokoki skupine B češće uzrokuju sepsu u opstetričkih bolesnica čija je ulazna točka genitalni trakt. Posljednjih godina, tijekom opstetričkih i ginekoloških infekcija, S.trachomatis. Najčešći infektivni procesi urogenitalnog trakta uključuju pelvioperitonitis, endometritis nakon carskog reza, infekcije vaginalne manšete nakon histerektomije i infekcije zdjelice nakon septičkog pobačaja. Učinkovitost klindamicina u ovim infekcijama kreće se od 87% do 100% (10).

3.14. Anaerobna infekcija kod bolesnika s rakom

Rizik od razvoja infekcije kod bolesnika s rakom neusporedivo je veći nego kod ostalih kirurških bolesnika. Ova se značajka objašnjava nizom čimbenika - ozbiljnošću osnovne bolesti, stanjem imunodeficijencije, velikim brojem invazivnih dijagnostičkih i terapijskih postupaka, velikim volumenom i traumatičnom prirodom kirurških intervencija te korištenjem vrlo agresivnih metoda liječenja - radioterapije. i kemoterapije. U bolesnika operiranih zbog gastrointestinalnih tumora u postoperativnom razdoblju nastaju subfrenični, subhepatični i intraperitonealni apscesi anaerobne etiologije. Dominantni uzročnici su Bakteroidi fragi- lis, Prevotella spp.. Fusobacterium spp., gram-pozitivne koke. Posljednjih godina pojavljuje se sve više izvještaja o važnoj ulozi nesporogenih anaeroba u razvoju septičkih stanja i njihovom oslobađanju iz krvi tijekom bakterijemije (3).

4. Laboratorijska dijagnostika

4.1. Materijal koji se proučava

Laboratorijska dijagnoza anaerobne infekcije prilično je težak zadatak. Vrijeme istraživanja od trenutka dostave patološkog materijala iz klinike u mikrobiološki laboratorij do dobivanja potpunog detaljnog odgovora kreće se od 7 do 10 dana, što ne može zadovoljiti kliničare. Često rezultat bakteriološke analize postaje poznat do trenutka otpuštanja pacijenta. U početku treba odgovoriti na pitanje: jesu li u materijalu prisutni anaerobi? Važno je zapamtiti da su anaerobi glavna komponenta lokalne mikroflore kože i sluznice te da se, štoviše, njihova izolacija i identifikacija mora provesti u odgovarajućim uvjetima. Uspješan početak istraživanja kliničke mikrobiologije anaerobnih infekcija ovisi o pravilnom prikupljanju odgovarajućeg kliničkog materijala.

U rutinskoj laboratorijskoj praksi najčešće korišteni materijali su: 1) inficirane lezije iz gastrointestinalnog trakta ili ženskog spolnog trakta; 2) materijal iz trbušne šupljine s peritonitisom i apscesima; 3) krv septičkih bolesnika; 4) iscjedak od kroničnih upalnih bolesti dišnog trakta (sinusitis, otitis, mastoiditis); 5) materijal iz donjih dijelova respiratornog trakta tijekom aspiracijske pneumonije; 6) cerebrospinalna tekućina za meningitis; 7) sadržaj apscesa mozga; 8) lokalni materijal za bolesti zuba; 9) sadržaj površinskih apscesa: 10) sadržaj površinskih rana; 11) materijal iz inficiranih rana (kirurških i traumatskih); 12) biopsijski uzorci (19, 21, 29, 31, 32, 36, 38).

4.2. Faze istraživanja materijala u laboratoriju

Uspješno dijagnosticiranje i liječenje anaerobne infekcije moguće je samo uz zainteresiranu suradnju mikrobiologa i kliničara odgovarajućeg profila. Pribavljanje odgovarajućih uzoraka uzoraka za mikrobiološka ispitivanja je ključno. Metode prikupljanja materijala ovise o mjestu i vrsti patološkog procesa. Laboratorijska istraživanja temelje se na indikaciji i naknadnoj identifikaciji vrste anaerobnih i aerobnih mikroorganizama sadržanih u ispitivanom materijalu tradicionalnim i ekspresnim metodama, kao i na određivanju osjetljivosti izoliranih mikroorganizama na antimikrobne kemoterapijske lijekove (2).

4.3. Izravno ispitivanje materijala

Postoje mnogi brzi izravni testovi koji uvjerljivo pokazuju prisutnost anaeroba u velikim količinama u ispitivanom materijalu. Neki od njih su vrlo jednostavni i jeftini i stoga imaju prednosti pred mnogim skupim laboratorijskim testovima.

1. 3 a p a x. Smrdljivi materijali uvijek sadrže anaerobe, samo su neki od njih bez mirisa.

2. Plinsko-tekućinska kromatografija (GLC). Jedna je od ekspresnih dijagnostičkih metoda. GLC omogućuje određivanje kratkolančanih masnih kiselina (octena, propionska, izovalerijanska, izokaproična, kapronska) u gnoju koje uzrokuju miris. Koristeći GLC, spektar hlapivih masnih kiselina može se koristiti za identifikaciju vrsta mikroorganizama prisutnih u njemu.

3. Fluorescencija. Pregled materijala (gnoj, tkiva) u ultraljubičastom svjetlu na valnoj duljini od 365 nm otkriva intenzivnu crvenu fluorescenciju, što se objašnjava prisutnošću crnopigmentiranih bakterija iz skupine Basteroides i Porphyromonas, a što ukazuje na prisutnost anaeroba.

4. Bakterioskopija. Prilikom ispitivanja mnogih pripravaka obojenih metodom po Gramu, razmaz otkriva prisutnost stanica upalnog žarišta, mikroorganizama, posebno polimorfnih gram-negativnih štapića, malih gram-pozitivnih koka ili gram-pozitivnih bacila.

5. Imunofluorescencija. Izravna i neizravna imunofluorescencija su ekspresne metode i omogućuju identifikaciju anaerobnih mikroorganizama u materijalu koji se proučava.

6. Imunoenzimska metoda. Enzimski imunotest vam omogućuje određivanje prisutnosti strukturnih antigena ili egzotoksina anaerobnih mikroorganizama.

7. Molekularno biološke metode. Lančana reakcija polimerazom (PCR) posljednjih je godina pokazala najveću prevalenciju, osjetljivost i specifičnost. Koristi se za otkrivanje bakterija izravno u materijalu i za identifikaciju.

4.4. Metode i sustavi za stvaranje anaerobnih uvjeta

Materijal prikupljen iz odgovarajućih izvora iu odgovarajućim spremnicima ili transportnim medijima mora se odmah prevesti u laboratorij. Međutim, postoje dokazi da klinički značajni anaerobi u velikim količinama gnoja ili u anaerobnom transportnom mediju prežive 24 sata. Važno je da se medij u koji se provodi inokulacija inkubira u anaerobnim uvjetima ili stavi u posudu napunjenu CO2 i čuva do prijenosa u poseban sustav inkubacije. Postoje tri vrste anaerobnih sustava koji se obično koriste u kliničkim laboratorijima. Širu primjenu imaju mikroanaerostatski sustavi (GasPark, BBL, Cockeysville) koji se već dugi niz godina koriste u laboratorijima, posebno u malim laboratorijima, i daju zadovoljavajuće rezultate. Petrijeve zdjelice inokulirane anaerobnim bakterijama stavljaju se u posudu istovremeno s posebnim paketom za stvaranje plina i indikatorom. U vrećicu se dodaje voda, posuda se hermetički zatvori, a CO2 i H2 se oslobađaju iz vrećice uz prisustvo katalizatora (obično paladija). U prisutnosti katalizatora, H2 reagira s O2 stvarajući vodu. CO2 je neophodan za rast anaeroba, jer su oni kapnofili. Dodaje se metilensko modrilo kao indikator anaerobnih uvjeta. Ako sustav za generiranje plina i katalizator rade učinkovito, uočava se promjena boje indikatora. Većina anaeroba zahtijeva uzgoj najmanje 48 sati. Nakon toga, komora se otvara i posuđe se prvo ispituje, što se ne čini sasvim prikladnim, jer su anaerobi osjetljivi na kisik i brzo gube svoju održivost.

U posljednje vrijeme u praksu ulaze jednostavniji anaerobni sustavi – anaerobne vrećice. Jedna ili dvije inokulirane čašice s vrećicom za stvaranje plina stave se u prozirnu, hermetički zatvorenu plastičnu vrećicu i inkubiraju u termostatskim uvjetima. Prozirnost plastičnih vrećica olakšava povremeno praćenje rasta mikroorganizama.

Treći sustav za uzgoj anaerobnih mikroorganizama je automatski zatvorena komora sa staklenom prednjom stijenkom (anaerobna stanica) s gumenim rukavicama i automatskim dovodom mješavine plinova bez kisika (N2, H2, CO2). Materijali, čašice, epruvete, pločice za biokemijsku identifikaciju i određivanje osjetljivosti na antibiotike postavljat će se u ovu ordinaciju kroz poseban otvor. Sve manipulacije obavlja bakteriolog u gumenim rukavicama. Materijal i ploče u ovom sustavu mogu se pregledavati svakodnevno, a kulture se mogu inkubirati 7-10 dana.

Ova tri sustava imaju svoje prednosti i nedostatke, ali su učinkoviti za izolaciju anaeroba i trebali bi biti u svakom bakteriološkom laboratoriju. Često se koriste istovremeno, ali najveću pouzdanost ima metoda uzgoja u anaerobnoj stanici.

4.5. Podloge kulture i uzgoj

Proučavanje anaerobnih mikroorganizama provodi se u nekoliko faza. Opća shema za izolaciju i identifikaciju anaeroba prikazana je na slici 1.

Važan čimbenik u razvoju anaerobne bakteriologije je prisutnost zbirke tipičnih bakterijskih sojeva, uključujući referentne sojeve iz kolekcija ATCC, CDC i VPI. Ovo je posebno važno za praćenje medija kulture, za biokemijsku identifikaciju čistih kultura i procjenu aktivnosti antibakterijskih lijekova. Dostupan je širok raspon osnovnih medija koji se koriste za pripremu posebnih medija za uzgoj anaeroba.

Hranjive podloge za anaerobe moraju ispunjavati sljedeće osnovne zahtjeve: 1) zadovoljavati prehrambene potrebe; 2) osigurati brz rast mikroorganizama; 3) biti primjereno smanjen. Primarna inokulacija materijala provodi se na pločicama s krvnim agarom ili izbornim podlogama danim u tablici 7.

Izolacija obligatnih anaeroba iz kliničkog materijala sve se češće provodi na podlogama koje sadrže selektivne tvari u određenoj koncentraciji, što omogućuje izolaciju pojedinih skupina anaeroba (20, 23) (tablica 8).

Trajanje inkubacije i učestalost pregleda inokuliranih zdjelica ovisi o materijalu koji se proučava i sastavu mikroflore (tablica 9).

Materijal koji se proučava

Iscjedak iz rane

Sadržaj apscesa,

Traheobronhonski aspirat itd.

Prijevoz u laboratorij: na Cipru, u posebnom transportnom mediju (trenutačno stavljanje materijala u medij)

Mikroskopiranje materijala

Bojenje po Gramu

Uzgoj i izolacija

čista kultura

Čašice za aerobik za

35±2°S u usporedbi s

18-28 sati anaerobi

5-10% C0 2

1. Krvni agar Mikroaerostat

Gas-Pak

(H 2 + C0 2)

35±2°S

od 48 sati do 7 dana

2. Schedlerov krvni agar

35±2°S

od 48 sati do 7 dana

3. Okruženje selektivne identifikacije

anaerobi

od 48 sati do 2 tjedna

4. Tekući medij (tioglikolat)

Identifikacija.Čiste kulture iz izoliranih kolonija

1. Bojenje po Gramu i Ozheshku za identifikaciju spora

2.Morfologija kolonija

3. Odnos tipa kolonije s kisikom

4. Preliminarna diferencijacija na temelju osjetljivosti na antimikrobne lijekove

5.Biokemijske pretrage

Određivanje osjetljivosti na antibiotike

1. Metoda razrjeđivanja u agaru ili bujonu

2. Metoda papirnog diska (difuzija)

Riža. 1. Izolacija i identifikacija anaerobnih mikroorganizama

anaerobni mikroorganizmi

srijeda	Svrha
Krvni agar za brucele (CDC anaerobni krvni agar, Schadlerov krvni agar) (BRU agar)	Neselektivan, za izolaciju anaeroba prisutnih u materijalu
Žučni eskulinski agar za bakteroide(BBE agar)	Selektivno i diferencijalno; za izolaciju bakterija iz skupine Bacteroides fragilis
Kanamicin-vankomicin krvni agar(KVLB)	Selektivan za većinu nesporeformatora gram-negativne bakterije
Fenil etil agar(GRAŠAK)	Inhibira rast Proteusa i drugih enterobakterija; stimulira rast gram-pozitivnih i gram-negativnih anaeroba
Tioglikolni bujon(THIO)	Za posebne situacije
agar od žumanjaka(EYA)	Za izolaciju klostridija
Cikloserin-cefoksitin-fruktozni agar(CCFA) ili cikloserin manitol agar (CMA) ili cikloserin manitol krvni agar (CMBA)	Selektivan za C. difficile
Crystal-violet-eritromicin-novi agar(CVEB)	Za izolaciju Fusobacterium nucleatum i Leptotrichia buccalis
Bacteroid gingivalis agar(BGA)	Za izolaciju Porphyromonas gingivalis

Tablica 8. Selektivni agensi za obligatne anaerobe

organizmi	Selektivna sredstva
Obligate anaerobi iz kliničkog materijala	neomicin (70 mg/l) nalidiksična kiselina (10 mg/l)
Actinomyces spp.	metronidazol (5 mg/l)
Bacteroides spp. Fusobacterium spp.	nalidiksična kiselina (10 mg/l) + vankomicin (2,5 mg/l)
Bacteroides urealytica	nalidiksična kiselina (10 mg/l) teikoplanin (20 mg/l)
Clostridium difficile	cikloserin (250 mg/l) cefoksitin (8 mg/l)
Fusobacterium	rifampicin (50 mg/l) neomicin (100 mg/l) vankomicin (5 mg/l)

Rezultati se bilježe opisivanjem svojstava kulture uzgojenih mikroorganizama, pigmentacije kolonija, fluorescencije i hemolize. Zatim se iz kolonija priprema bris, boji po Gramu i tako se identificiraju gram-negativne i gram-pozitivne bakterije, mikroskopski pregledaju i opisuju morfološka svojstva. Nakon toga, mikroorganizmi svake vrste kolonije se supkultiviraju i kultiviraju u tioglikolatnoj juhi uz dodatak hemina i vitamina K. Morfologija kolonija, prisutnost pigmenta, hemolitička svojstva i karakteristike bakterija korištenjem bojenja po Gramu omogućuju preliminarnu identifikaciju i diferencijacija anaeroba. Zbog toga se svi anaerobni mikroorganizmi mogu podijeliti u 4 skupine: 1) Gr+ koke; 2) Gr+ bacili ili kokobacili: 3) Gr- koki; 4) Gr- bacili ili kokobacili (20, 22, 32).

Tablica 9. Trajanje inkubacije i učestalost testiranja

kulture anaerobnih bakterija

Vrsta usjeva	Vrijeme inkubacije*	Učestalost proučavanja
Krv		Svaki dan prije 7 i poslije 14
Tekućine		Dnevno
Apscesi, rane		Dnevno
Zračni putovi Sputum Transtrahealni aspirat Bronhijalni iscjedak		Dnevno Jednom Dnevno Dnevno
Urogenitalni trakt Vagina, maternica, prostata		Dnevno Dnevno Dnevno Jednom
Izmet		Dnevno
Anaerobi Brucela Aktinomicete		Dnevno 3 puta tjedno 1 puta tjedno

*do dobivanja negativnog rezultata

U trećoj fazi istraživanja provodi se duža identifikacija. Konačna identifikacija temelji se na određivanju biokemijskih svojstava, fizioloških i genetskih karakteristika, faktora patogenosti u testu neutralizacije toksina. Iako potpunost identifikacije anaeroba može značajno varirati, neki jednostavni testovi vrlo vjerojatno će identificirati čiste kulture anaerobnih bakterija - bojanje po Gramu, pokretljivost, određivanje osjetljivosti na određene antibiotike metodom papirnatog diska i biokemijska svojstva.

5. Antibakterijska terapija anaerobne infekcije

Sojevi mikroorganizama otporni na antibiotike pojavili su se i počeli širiti odmah nakon širokog uvođenja antibiotika u kliničku praksu. Mehanizmi nastanka rezistencije mikroorganizama na antibiotike su složeni i raznoliki. Dijele se na primarne i stečene. Stečena rezistencija nastaje pod utjecajem lijekova. Glavni načini njegovog stvaranja su sljedeći: a) inaktivacija i modifikacija lijeka bakterijskim enzimskim sustavima i njegov prijenos u neaktivni oblik; b) smanjena propusnost površinskih struktura bakterijske stanice; c) poremećaj transportnih mehanizama u stanicu; d) promjena funkcionalnog značaja mete za lijek. Mehanizmi stečene rezistencije mikroorganizama povezani su s promjenama na genetskoj razini: 1) mutacije; 2) genetske rekombinacije. Mehanizmi intra- i interspeciesnog prijenosa izvankromosomskih čimbenika nasljeđa - plazmida i transpozona koji kontroliraju rezistenciju mikroorganizama na antibiotike i druge kemoterapijske lijekove - iznimno su važni (13, 20, 23, 33, 39). Informacije o rezistenciji anaerobnih mikroorganizama na antibiotike potječu iz epidemioloških i genetskih/molekularnih studija. Epidemiološki podaci pokazuju da je od otprilike 1977. godine došlo do porasta rezistencije anaerobnih bakterija na nekoliko antibiotika: tetraciklin, eritromicin, penicilin, ampicilin, amoksicilin, tikarcilin, imipenem, metronidazol, kloramfenikol itd. Otprilike 50% bakteroida je rezistentno na na penicilin G i tetraciklin.

Pri propisivanju antibakterijske terapije mješovite aerobno-anaerobne infekcije potrebno je odgovoriti na niz pitanja: a) gdje je infekcija lokalizirana?; b) koji mikroorganizmi najčešće uzrokuju infekcije u ovom području?; c) koja je težina bolesti?; d) koje su kliničke indikacije za primjenu antibiotika?; e) kakva je sigurnost primjene ovog antibiotika?; f) koliki je njegov trošak?; g) koje je njegovo antibakterijsko svojstvo?; h) koliko je prosječno trajanje primjene lijeka do izlječenja?; i) prodire li kroz krvno-moždanu barijeru?; j) kako djeluje na normalnu mikrofloru?; k) jesu li potrebni dodatni antimikrobni lijekovi za liječenje ovog procesa?

5.1. Značajke glavnih antimikrobnih lijekova koji se koriste u liječenju anaerobnih infekcija

PENICILONI. Povijesno se penicilin G naširoko koristio za liječenje mješovitih infekcija. Međutim, anaerobi, posebno bakterije iz skupine Bacteroides fragilis, imaju sposobnost stvaranja beta-laktamaze i uništavanja penicilina, što smanjuje njegovu terapijsku učinkovitost. Ima nisku ili umjerenu toksičnost, zanemariv učinak na normalnu mikrofloru, ali ima slabu aktivnost protiv anaeroba koji proizvode beta-laktamazu, osim toga, ima ograničenja protiv aerobnih mikroorganizama. Polusintetski penicilini (naflacin, oksacilin, kloksacilin i dikloksacilin) su manje aktivni i neadekvatni za liječenje anaerobnih infekcija. Usporedna randomizirana studija kliničke učinkovitosti penicilina i klindamicina u liječenju plućnih apscesa pokazala je da je pri korištenju klindamicina u bolesnika razdoblje vrućice i proizvodnje sputuma smanjeno na 4,4 u odnosu na 7,6 dana odnosno na 4,2 u odnosu na 8 dana. Prosječno je izliječeno 8 (53%) od 15 bolesnika liječenih penicilinom, dok je svih 13 bolesnika (100%) bilo izliječeno klindamicinom. Klindamicin je učinkovitiji od penicilina u liječenju bolesnika s anaerobnim plućnim apscesom. U prosjeku, učinkovitost penicilina bila je oko 50-55%, a klindamicin - 94-95%. Istodobno je uočena prisutnost mikroorganizama rezistentnih na penicilin u materijalu, što je postalo čest uzrok neučinkovitosti penicilina i ujedno pokazalo da je klindamicin lijek izbora za terapiju na početku liječenja.

T etra c l i n s. Tetracikline također karakterizira niska

nema toksičnosti i ima minimalan učinak na normalnu mikrofloru. Tetraciklini su također ranije bili lijekovi izbora, jer su gotovo svi anaerobi bili osjetljivi na njih, ali od 1955. godine dolazi do porasta rezistencije na njih. Doksiciklin i monociklin su aktivniji od njih, ali značajan broj anaeroba također je otporan na njih.

K l o r a m p h e n i k o l. Kloramfenikol ima značajan učinak na normalnu mikrofloru. Ovaj lijek je izuzetno učinkovit protiv bakterija iz skupine B. fragilis, dobro prodire u tjelesne tekućine i tkiva, a ima prosječnu aktivnost protiv drugih anaeroba. U tom smislu koristi se kao lijek izbora u liječenju po život opasnih bolesti, posebice onih koje zahvaćaju središnji živčani sustav, budući da lako prodire kroz krvno-moždanu barijeru. Nažalost, kloramfenikol ima niz nedostataka (inhibicija hematopoeze ovisna o dozi). Osim toga, može uzrokovati idiosenkratičnu, o dozi neovisnu aplastičnu anemiju. Neki sojevi C. perfringens i B. fragilis sposobni su reducirati p-nitro skupinu kloramfenikola i selektivno je inaktivirati. Neki sojevi B. fragilis vrlo su otporni na kloramfenikol jer proizvode acetiltransferazu. Trenutno je upotreba kloramfenikola za liječenje anaerobnih infekcija značajno smanjena zbog straha od razvoja nuspojava hematoloških učinaka i zbog pojave mnogih novih, učinkovitih lijekova.

K l i n d a m i cin. Klindamicin je 7(S)-kloro-7-deoksi derivat linkomicina. Kemijska modifikacija molekule linkomicina dovela je do nekoliko prednosti: bolja apsorpcija iz gastrointestinalnog trakta, osmerostruko povećanje aktivnosti protiv aerobnih gram-pozitivnih koka, proširenje spektra djelovanja protiv mnogih gram-pozitivnih i gram-negativnih anaerobnih bakterija, kao kao i protozoe (toksoplazma i plazmodij). Terapijske indikacije za primjenu klindamicina dosta su široke (Tablica 10).

Gram-pozitivne bakterije. Rast više od 90% sojeva S. aureus inhibiran je u prisutnosti klindamicina u koncentraciji od 0,1 μg/ml. U koncentracijama koje se lako mogu postići u serumu, klindamicin je aktivan protiv Str. pyogenes, Str. upala pluća, Str. viridans. Većina sojeva bacila difterije također je osjetljiva na klindamicin. Ovaj antibiotik je neaktivan protiv gram-negativnih aerobnih bakterija Klebsiella, Escherichia coli, Proteus, Enterobacter, Shigella, Serration i Pseudomonas. Gram-pozitivni anaerobni koki, uključujući sve vrste peptokoka, peptostreptokoka, kao i propionobakterije, bifidumbakterije i laktobacile, općenito su vrlo osjetljivi na klindamicin. Na njega su osjetljive i klinički značajne klostridije - C. perfringens, C. tetani, kao i druge klostridije, koje se često nalaze u intraperitonealnim i pelvičnim infekcijama.

Tablica 10. Indikacije za primjenu klindamicina

Biotop	Bolest
Gornji respiratorni trakt	Tonsilitis, faringitis, sinusitis, otitis media, šarlah
Donji respiratorni trakt	Bronhitis, upala pluća, empijem, apsces pluća
Koža i meko tkivo	Piodermija, čirevi, celulitis, impetigo, apscesi, rane
Kosti i zglobovi	Osteomijelitis, septički artritis
Organi zdjelice	Endometritis, celulitis, infekcije vaginalne manžete, tubo-ovarijski apscesi
Usne šupljine	Parodontni apsces, parodontitis
Septikemija, endokarditis

Gram-negativni anaerobi - Bacteroides, Fusobacteria i Veillonella - vrlo su osjetljivi na klindamicin. Dobro je raspoređen u mnogim tkivima i biološkim tekućinama, tako da se u većini njih postižu značajne terapijske koncentracije, ali ne prolazi krvno-moždanu barijeru. Posebno su zanimljive koncentracije lijeka u tonzilama, plućnom tkivu, slijepom crijevu, jajovodima, mišićima, koži, kostima i sinovijalnoj tekućini. Klindamicin se koncentrira u neutrofilima i makrofagima. Alveolarni makrofagi koncentriraju klindamicin intracelularno (30 minuta nakon primjene koncentracija je 50 puta veća od izvanstanične). Povećava fagocitnu aktivnost neutrofila i makrofaga, stimulira kemotaksiju i suzbija stvaranje određenih bakterijskih toksina.

M e tr o n i d a z o l. Ovaj kemoterapijski lijek karakterizira vrlo niska toksičnost, baktericidan je protiv anaeroba i ne inaktiviraju ga bakteroidne beta-laktamaze. Bakteroidi su vrlo osjetljivi na njega, ali određeni anaerobni koki i anaerobni gram-pozitivni bacili mogu biti otporni. Metronidazol je neaktivan na aerobnu mikrofloru iu liječenju intraabdominalne sepse mora se kombinirati s gentamicinom ili nekim aminoglikozidima. Može uzrokovati prolaznu neutropeniju. Kombinacije metronidazol-gentamicin i klindamicin-gentamicin ne razlikuju se u učinkovitosti u liječenju ozbiljnih intraabdominalnih infekcija.

Ts e f o k s i t i n. Ovaj antibiotik pripada cefalosporinima, ima nisku i umjerenu toksičnost i, u pravilu, nije inaktiviran bakteroidnom beta-laktamazom. Iako postoje podaci o slučajevima izolacije rezistentnih sojeva anaerobnih bakterija zbog prisutnosti proteina koji vežu antibiotike koji smanjuju transport lijeka u bakterijsku stanicu. Otpornost bakterije B. fragilis na cefoksitin kreće se od 2 do 13%. Preporučuje se za liječenje umjerenih abdominalnih infekcija.

C ephoto e t a n. Ovaj lijek je aktivniji protiv gram-negativnih anaerobnih mikroorganizama u usporedbi s cefoksitinom. Međutim, utvrđeno je da je otprilike 8% do 25% sojeva B. fragilis otporno na njega. Djelotvoran je u liječenju ginekoloških i abdominalnih infekcija (apscesi, upala slijepog crijeva).

C e p h e m e t a z o l. Po spektru djelovanja sličan je cefoksitinu i cefotetanu (aktivniji od cefoksitina, ali manje aktivan od cefotetana). Može se koristiti za liječenje blagih do umjerenih infekcija.

C epha r e z o n. Karakterizira ga niska toksičnost, veća aktivnost u usporedbi s tri gornja lijeka, ali je identificirano od 15 do 28% rezistentnih sojeva anaerobnih bakterija. Jasno je da to nije lijek izbora za liječenje anaerobne infekcije.

C eft i z o k s i m. To je siguran i učinkovit lijek u liječenju infekcija nogu kod dijabetičara, traumatskog peritonitisa i apendicitisa.

M e r o p e n e m. Meropenem je novi karbapenem, koji je metiliran na poziciji 1, karakteriziran otpornošću na djelovanje renalne dehidrogenaze 1, koja ga uništava. Otprilike 2-4 puta je aktivniji od imipenema protiv aerobnih gram-negativnih mikroorganizama, uključujući predstavnike enterobakterija, hemofilusa, pseudomonasa, neisseria, ali ima nešto manje djelovanja protiv stafilokoka, nekih streptokoka i enterokoka. Njegovo djelovanje protiv gram-pozitivnih anaerobnih bakterija slično je djelovanju imipenema.

5.2. Kombinacije beta-laktamskih lijekova i inhibitora beta-laktamaze

Razvoj inhibitora beta-laktamaze (klavulanat, sulbaktam, tazobaktam) je perspektivan smjer i omogućuje upotrebu novih beta-laktamskih sredstava zaštićenih od hidrolize kada se daju istovremeno: a) amoksicilin - klavulanska kiselina - ima širi spektar antimikrobnog djelovanja od sam amoksicilin i njegova učinkovitost je blizu kombinacije antibiotika - penicilin-kloksacilin; b) tikarcilin-klavulanska kiselina - proširuje spektar antimikrobnog djelovanja antibiotika protiv bakterija koje proizvode beta-lakgamazu, kao što su stafilokoki, hemofilus, klebsiella i anaerobi, uključujući bakteroide. Minimalna inhibitorna koncentracija ove smjese bila je 16 puta niža od koncentracije tikarcilina; c) ampicilin-sulbaktam - kada se kombiniraju u omjeru 1:2, njihov se spektar značajno proširuje i uključuje stafilokoke, hemofilus, klebsielu i većinu anaerobnih bakterija. Samo 1% bakteroida je otporno na ovu kombinaciju; d) cefaperazon-sulbaktam - u omjeru 1:2 također značajno proširuje spektar antibakterijskog djelovanja; e) piperacilin-tazobaktam. Tazobaktam je novi beta-laktamski inhibitor koji djeluje na mnoge beta-laktamaze. Stabilniji je od klavulanske kiseline. Ova se kombinacija može smatrati lijekom za empirijsku monoterapiju teških polimikrobnih infekcija, kao što su pneumonija, intraabdominalna sepsa, nekrotizirajuće infekcije mekih tkiva, ginekološke infekcije; f) Imipenem-cilastatin - Imipenem je član nove klase antibiotika poznatih kao karbapenemi. Koristi se u kombinaciji sa cilastatinom u omjeru 1:1. Njihova je učinkovitost slična klindamicin-aminoglikozidima u liječenju miješane anaerobne kirurške infekcije.

5.3. Klinički značaj određivanja osjetljivosti anaerobnih mikroorganizama na antimikrobne lijekove

Sve veća rezistencija mnogih anaerobnih bakterija na antimikrobna sredstva postavlja pitanje kako i kada je opravdano određivanje osjetljivosti na antibiotike. Cijena ovog testiranja i vrijeme potrebno za dobivanje konačnog rezultata dodatno povećavaju važnost ove problematike. Jasno je da početna terapija anaerobnih i miješanih infekcija treba biti empirijska. Temelji se na specifičnosti infekcije i određenom spektru bakterijske mikroflore tijekom određene infekcije. Potrebno je uzeti u obzir patofiziološko stanje i prethodnu primjenu antimikrobnih lijekova koji bi mogli modificirati normalnu mikrofloru i mikrofloru lezije, kao i rezultate bojenja po Gramu. Sljedeći korak trebao bi biti rana identifikacija dominantne mikroflore. Podaci o spektru vrsta antibakterijske osjetljivosti dominantne mikroflore. Informacije o spektru specifične antibakterijske osjetljivosti dominantne mikroflore će nam omogućiti procjenu primjerenosti inicijalno odabranog režima liječenja. U liječenju, ako je tijek infekcije nepovoljan, potrebno je koristiti određivanje osjetljivosti čiste kulture na antibiotike. Godine 1988. Anaerobe Task Force pregledao je preporuke i indikacije za ispitivanje osjetljivosti anaeroba na antibiotike.

Određivanje osjetljivosti anaeroba preporučuje se u sljedećim slučajevima: a) potrebno je ustanoviti promjene u osjetljivosti anaeroba na određene lijekove; b) potreba utvrđivanja spektra djelovanja novih lijekova; c) u slučajevima pružanja bakteriološkog praćenja pojedinog bolesnika. Osim toga, određene kliničke situacije također mogu diktirati potrebu za njegovom provedbom: 1) u slučaju neuspješno odabranog početnog antimikrobnog režima i perzistentne infekcije; 2) kada odabir učinkovitog antimikrobnog lijeka ima ključnu ulogu u ishodu bolesti; .3) kada je izbor lijeka u konkretnom slučaju otežan.

Treba uzeti u obzir da, s kliničkog gledišta, postoje i druge točke: a) povećanje rezistencije anaerobnih bakterija na antimikrobne lijekove veliki je klinički problem; b) kliničari se ne slažu oko kliničke učinkovitosti nekih lijekova protiv anaerobne infekcije; c) postoje odstupanja između rezultata osjetljivosti mikroorganizama na lijekove in vitro i njihove učinkovitosti in vivo; r) interpretacija rezultata koja je prihvatljiva za aerobe ne mora uvijek biti primjenjiva na anaerobe. Promatranjem osjetljivosti/rezistentnosti 1200 sojeva bakterija izoliranih iz različitih biotopa pokazalo se da je značajan dio njih visoko rezistentan na najčešće korištene lijekove (Tablica 11).

Tablica 11. Otpornost anaerobnih bakterija na

naširoko korišteni antibiotici

Bakterije	Antibiotici	Postotak rezistentnih oblika
Peptostreptokok	Penicilin Eritromicin Klindamicin
Clostridium perfringens	Penicilin Cefoksitin Metronidazol Eritromicin Klindamicin
Bacteroides fragilis	cefoksitin metronidazol eritromicin klindamicin
Veilonella	penicilin metronidazol eritromicin

Istodobno, brojnim studijama utvrđene su minimalne inhibitorne koncentracije najčešćih lijekova koje su primjerene za liječenje anaerobnih infekcija (Tablica 12).

Tablica 12. Minimalne inhibitorne koncentracije

antibiotici za anaerobne mikroorganizme

Minimalna inhibitorna koncentracija (MIC) je najniža koncentracija antibiotika koja u potpunosti inhibira rast mikroorganizama. Vrlo važan problem je standardizacija i kontrola kvalitete određivanja osjetljivosti mikroorganizama na antibiotike (korišteni testovi, njihova standardizacija, priprema medija, reagensa, obuka osoblja koje provodi ovaj test, korištenje referentnih kultura: B. fragilis-ATCC 25285; B. thetaiotaomicron - ATCC 29741; C. perfringens-ATCC 13124; E. lentum-ATCC 43055).

U opstetriciji i ginekologiji za liječenje anaerobnih infekcija koriste se penicilin, neki cefalosporini 3-4 generacije, linkomicin i kloramfenikol. Međutim, najučinkovitiji antianaerobni lijekovi su predstavnici skupine 5-nitroimidazola - metronidazol, tinidazol, ornidazol i klindamicin. Učinkovitost liječenja samim metronidazolom je 76-87%, ovisno o bolesti, a 78-91% tinidazolom. Kombinacija imidazola s aminoglikozidima i cefalosporinima 1.-2. generacije povećava stopu uspješnosti liječenja na 90-95%. Klindamicin ima značajnu ulogu u liječenju anaerobnih infekcija. Kombinacija klindamicina s gentamicinom standardna je metoda liječenja gnojno-upalnih bolesti ženskih spolnih organa, osobito u slučajevima miješanih infekcija.

6. Korekcija crijevne mikroflore

Tijekom prošlog stoljeća, normalna mikroflora ljudskog crijeva bila je predmet aktivnih istraživanja. Brojnim istraživanjima utvrđeno je da autohtona mikroflora gastrointestinalnog trakta ima značajnu ulogu u osiguravanju zdravlja organizma domaćina, igrajući važnu ulogu u sazrijevanju i održavanju funkcije imunološkog sustava, kao i u osiguravanju niza metabolički procesi. Polazna točka za razvoj disbiotičkih manifestacija u crijevu je supresija autohtone anaerobne mikroflore - bifidobakterija i laktobacila, kao i stimulacija proliferacije oportunističke mikroflore - enterobakterija, stafilokoka, streptokoka, klostridije, kandide. I. I. Mechnikov formulirao je temeljne znanstvene principe o ulozi autohtone crijevne mikroflore, njezinoj ekologiji i iznio ideju o zamjeni štetne mikroflore korisnom kako bi se smanjila intoksikacija tijela i produljio ljudski život. Ideja I. I. Mečnikova dalje je razvijena u razvoju niza bakterijskih pripravaka koji se koriste za korekciju ili "normalizaciju" ljudske mikroflore. Zovu se "eubiotici" ili "probiotici" i sadrže žive ili

osušene bakterije iz roda Bifidobacterium i Lactobacillus. Pokazano je imunomodulatorno djelovanje niza eubiotika (primjećuje se stimulacija stvaranja protutijela i aktivnost peritonealnih makrofaga). Također je važno da sojevi eubiotskih bakterija imaju kromosomsku rezistenciju na antibiotike, a njihova zajednička primjena povećava preživljenje životinja. Najrasprostranjeniji su fermentirani mliječni oblici laktobakterina i bifidumbakterina (4).

7. Zaključak

Anaerobna infekcija jedan je od neriješenih problema moderne medicine (osobito kirurgije, ginekologije, terapije, stomatologije). Dijagnostičke poteškoće, pogrešna procjena kliničkih podataka, pogreške u liječenju, provođenju antibakterijske terapije itd. dovode do visoke smrtnosti bolesnika s anaerobnom i mješovitom infekcijom. Sve ovo ukazuje na potrebu brzog otklanjanja kako postojećeg nedostatka znanja u ovoj oblasti bakteriologije, tako i značajnih nedostataka u dijagnostici i terapiji.

Anaerobni organizmi

Aerobne i anaerobne bakterije preliminarno se identificiraju u tekućem hranjivom mediju prema gradijentu koncentracije O2:
1. Obavezan aerobik bakterije (gladne kisika). uglavnom skupljeni na vrhu epruvete kako bi apsorbirali maksimalnu količinu kisika. (Iznimka: mikobakterije - rast kao film na površini zbog voštano-lipidne membrane.)
2. Obligatni anaerobni bakterije se skupljaju na dnu kako bi izbjegle kisik (ili ne rastu).
3. Neobavezno bakterije se skupljaju uglavnom u gornjem (najpovoljnije od glikolize), ali se mogu naći u cijelom mediju, budući da ne ovise o O 2.
4. Mikroaerofili skupljaju se u gornjem dijelu epruvete, ali njihov optimum je niska koncentracija kisika.
5. Aerotolerantan Anaerobi ne reagiraju na koncentracije kisika i ravnomjerno su raspoređeni po epruveti.

Anaerobi- organizmi koji dobivaju energiju u nedostatku kisika fosforilacijom supstrata; konačni produkti nepotpune oksidacije supstrata mogu se oksidirati kako bi se proizvelo više energije u obliku ATP-a u prisutnosti konačnog akceptora protona pomoću organizama koji vrše oksidativnu fosforilaciju.

Anaerobi su velika skupina organizama na mikro i makro razini:

anaerobni mikroorganizmi- velika skupina prokariota i neke protozoe.
makroorganizmi - gljive, alge, biljke i neke životinje (razred foraminifera, većina helminta (razred metilja, trakavice, valjkasti crvi (na primjer, valjkasti crvi)).

Osim toga, anaerobna oksidacija glukoze igra važnu ulogu u funkcioniranju poprečno-prugastih mišića životinja i ljudi (osobito u stanju hipoksije tkiva).

Klasifikacija anaeroba

Prema utvrđenoj klasifikaciji u mikrobiologiji postoje:

Fakultativni anaerobi
Kapneistički anaerobi i mikroaerofili
Aerotolerantni anaerobi
Umjereno strogi anaerobi
Obligatni anaerobi

Ako se organizam može prebaciti s jednog metaboličkog puta na drugi (npr. s anaerobnog na aerobno disanje i natrag), tada se uvjetno klasificira kao fakultativni anaerobi .

Do 1991. godine na mikrobiologiji je postojala nastava kapneični anaerobi, koji zahtijevaju smanjenu koncentraciju kisika i povećanu koncentraciju ugljičnog dioksida (Goveđa vrsta Brucella - B. abortus)

Umjereno strogi anaerobni organizam preživljava u okolišu s molekularnim O 2, ali se ne razmnožava. Mikroaerofili mogu preživjeti i razmnožavati se u okruženju s niskim parcijalnim tlakom O 2.

Ako se organizam ne može “prebaciti” s anaerobnog na aerobno disanje, ali ne umire u prisutnosti molekularnog kisika, tada pripada skupini aerotolerantni anaerobi. Na primjer, bakterije mliječne kiseline i mnoge bakterije maslačne kiseline

Obavezan Anaerobi umiru u prisutnosti molekularnog kisika O2 - na primjer, predstavnici roda bakterija i arheja: Bakteroidi, Fusobacterium, Butyrivibrio, Methanobacterium). Takvi anaerobi stalno žive u okruženju bez kisika. Obligate anaerobe uključuju neke bakterije, kvasce, bičaše i trepljače.

Otrovnost kisika i njegovih oblika za anaerobne organizme

Okolina koja sadrži kisik je agresivna prema organskim oblicima života. To je zbog stvaranja reaktivnih spojeva kisika tijekom života ili pod utjecajem raznih oblika ionizirajućeg zračenja, koji su puno toksičniji od molekularnog kisika O2. Čimbenik koji određuje održivost organizma u kisikovoj sredini je prisutnost funkcionalnog antioksidativnog sustava sposobnog eliminirati: superoksidni anion (O 2 −), vodikov peroksid (H 2 O 2), singletni kisik (O.), kao kao i molekularni kisik (O 2) iz unutarnjeg okoliša tijela. Najčešće takvu zaštitu osigurava jedan ili više enzima:

superoksid dismutaza, eliminacija superoksid aniona (O 2 −) bez energetske dobrobiti za tijelo
katalaza, eliminirajući vodikov peroksid (H 2 O 2) bez energetske dobrobiti za tijelo
citokrom- enzim odgovoran za prijenos elektrona od NAD H do O 2. Ovaj proces tijelu daje značajne energetske koristi.

Aerobni organizmi najčešće sadrže tri citokroma, fakultativni anaerobi - jedan ili dva, obvezni anaerobi ne sadrže citokrome.

Anaerobni mikroorganizmi mogu aktivno utjecati na okoliš stvarajući odgovarajući redoks potencijal okoliša (npr. Cl. perfringens). Neke inokulirane kulture anaerobnih mikroorganizama, prije nego što se počnu razmnožavati, smanjuju pH 20 s vrijednosti na

Istodobno, glikoliza je karakteristična samo za anaerobe, koji se, ovisno o konačnim produktima reakcije, dijele na nekoliko vrsta fermentacije:

mliječno kiselo vrenje – rod Lactobacillus ,Streptococcus , Bifidobakterija, kao i neka tkiva višestaničnih životinja i ljudi.
alkoholno vrenje - Saccharomycetes, Candida (organizmi iz carstva gljiva)
mravlja kiselina - obitelj enterobakterija
maslačna kiselina - neke vrste klostridija
propionska kiselina - propionobakterije (npr. Propionibacterium acnes)
fermentacija uz oslobađanje molekularnog vodika - neke vrste Clostridia, Sticklandova fermentacija
metanska fermentacija - npr. Methanobacterium

Kao rezultat razgradnje glukoze troše se 2 molekule i sintetiziraju se 4 molekule ATP-a. Dakle, ukupni prinos ATP-a je 2 ATP molekule i 2 NADH 2 molekule. Piruvat dobiven tijekom reakcije stanica koristi različito ovisno o vrsti fermentacije.

Antagonizam između fermentacije i truljenja

U procesu evolucije formiran je i učvršćen biološki antagonizam fermentativne i truležne mikroflore:

Razgradnju ugljikohidrata mikroorganizmima prati značajno smanjenje okoliša, dok razgradnju bjelančevina i aminokiselina prati povećanje (alkalinizacija). Prilagodba svakog organizma na određenu reakciju okoliša igra vitalnu ulogu u prirodi i ljudskom životu, primjerice, zahvaljujući procesima fermentacije sprječava se truljenje silaže, fermentiranog povrća i mliječnih proizvoda.

Uzgoj anaerobnih organizama

Izolacija čiste kulture anaeroba je shematski prikazana

Uzgoj anaerobnih organizama uglavnom je zadatak mikrobiologije.

Za uzgoj anaeroba koriste se posebne metode, čija je bit uklanjanje zraka ili njegova zamjena specijaliziranom mješavinom plinova (ili inertnih plinova) u zatvorenim termostatima. - anaerostati .

Drugi način uzgoja anaeroba (najčešće mikroorganizama) na hranjivim podlogama je dodavanje redukcijskih tvari (glukoza, natrij mravlja kiselina i dr.) koje smanjuju redoks potencijal.

Uobičajene podloge za uzgoj anaerobnih organizama

Za opće okruženje Wilson - Blair baza je agar-agar s dodatkom glukoze, natrijevog sulfita i željeznog klorida. Klostridije stvaraju crne kolonije na ovom mediju zbog redukcije sulfita u sulfidni anion, koji se spaja s kationima željeza (II) i proizvodi crnu sol. U pravilu se crne kolonije na ovoj podlozi pojavljuju u dubini stupca agara.

srijeda Kitta - Tarozzi sastoji se od mesno-peptonske juhe, 0,5% glukoze i komada jetre ili mljevenog mesa za apsorbiranje kisika iz okoline. Prije sjetve, medij se zagrijava u kipućoj vodenoj kupelji 20 - 30 minuta kako bi se uklonio zrak iz medija. Nakon sjetve, hranjivi medij se odmah prekriva slojem parafina ili vazelina kako bi se izolirao od kisika.

Metode opće kulture anaerobnih organizama

GasPak- sustav kemijski osigurava stalnu mješavinu plinova prihvatljivu za rast većine anaerobnih mikroorganizama. U zatvorenoj posudi, voda reagira s tabletama natrijevog borhidrida i natrijevog bikarbonata i proizvodi vodik i ugljikov dioksid. Vodik zatim reagira s kisikom u plinskoj smjesi na paladijevom katalizatoru da nastane voda, koja zatim drugi put reagira u reakciji hidrolize borohidrida.

Ovu su metodu predložili Brewer i Allgaer 1965. Programeri su predstavili vrećicu za jednokratnu upotrebu koja stvara vodik, koju su kasnije razvili u vrećice za stvaranje ugljičnog dioksida koje sadrže unutarnji katalizator.

Zeisslerova metoda koristi se za izolaciju čistih kultura anaeroba koji stvaraju spore. Da biste to učinili, inokulirajte na Kitt-Tarozzi medij, zagrijavajte ga 20 minuta na 80 °C (da uništite vegetativni oblik), napunite medij vazelinskim uljem i inkubirajte 24 sata u termostatu. Zatim se inokuliraju na agar s krvnim šećerom kako bi se dobile čiste kulture. Nakon 24-satnog uzgoja proučavaju se interesne kolonije - potkulturiraju se na Kitt-Tarozzi medij (nakon čega slijedi praćenje čistoće izolirane kulture).

Fortnerova metoda

Fortnerova metoda- inokulacije se provode na Petrijevoj zdjelici sa zadebljanim slojem podloge, podijeljenom na pola uskim utorom izrezanim u agaru. Jedna polovica je inokulirana kulturom aerobnih bakterija, druga anaerobnim bakterijama. Rubovi posude se pune parafinom i inkubiraju u termostatu. U početku se uočava rast aerobne mikroflore, a zatim (nakon apsorpcije kisika) rast aerobne mikroflore naglo prestaje i počinje rast anaerobne.

Weinbergova metoda koristi se za dobivanje čistih kultura obveznih anaeroba. Kulture uzgojene na mediju Kitta-Tarozzi prenose se u šećernu juhu. Zatim se pomoću jednokratne Pasteurove pipete materijal prenosi u uske epruvete (Vignalove epruvete) sa šećernim meso-peptonskim agarom, uranjajući pipetu do dna epruvete. Inokulirane epruvete se brzo hlade, što omogućuje fiksiranje bakterijskog materijala u debljini stvrdnutog agara. Epruvete se inkubiraju u termostatu, a zatim se pregledaju izrasle kolonije. Kada se pronađe kolonija od interesa, na njenom mjestu se napravi rez, materijal se brzo odabere i inokulira na Kitta-Tarozzi medij (uz naknadnu kontrolu čistoće izolirane kulture).

Peretzova metoda

Peretzova metoda- otopljenom i ohlađenom šećernom agar-agaru doda se kultura bakterija i izlije pod staklo postavljeno na plutene štapiće (ili komadiće šibica) u Petrijevu zdjelicu. Metoda je najmanje pouzdana od svih, ali vrlo jednostavna za korištenje.

Diferencijalno dijagnostički hranjivi mediji

srijedom Gissa("šareni red")
srijeda Ressel(Russell)
srijeda Ploskireva ili baktoagar "J"
Bizmut sulfit agar

Njegovi mediji: U 1% peptonsku vodu dodati 0,5% otopinu određenog ugljikohidrata (glukoza, laktoza, maltoza, manitol, saharoza i dr.) i Andredeov acidobazni indikator, uliti u epruvete u koje se stavi plovak za hvatanje plinovitih produkti koji nastaju tijekom razgradnje ugljikovodika.

Russellova okolina(Russell) koristi se za proučavanje biokemijskih svojstava enterobakterija (Shigella, Salmonella). Sadrži hranjivi agar agar, laktozu, glukozu i indikator (bromtimol plavo). Boja okoliša je travnato zelena. Obično se priprema u epruvetama od 5 ml s kosom površinom. Sjetva se obavlja pikiranjem u dubinu stupa i šaranjem po zakošenoj površini.

Srijeda Ploskireva(bactoagar F) je diferencijalno dijagnostički i selektivni medij, jer inhibira rast mnogih mikroorganizama i potiče rast patogenih bakterija (uzročnika trbušnog tifusa, paratifusa, dizenterije). Laktoza-negativne bakterije stvaraju bezbojne kolonije na ovoj podlozi, dok laktoza-pozitivne bakterije stvaraju crvene kolonije. Medij sadrži agar, laktozu, briljantno zeleno, žučne soli, mineralne soli, indikator (neutralno crveno).

Bizmut sulfit agar namijenjen je za izolaciju salmonele u čistom obliku iz zaraženog materijala. Sadrži triptični hidrolizat, glukozu, faktore rasta salmonele, briljantno zeleno i agar. Diferencijalna svojstva medija temelje se na sposobnosti salmonela da proizvode sumporovodik, te na njihovoj otpornosti na prisutnost sulfida, briljantnog zelenog i bizmut citrata. Kolonije su označene crno bizmut sulfidom (tehnika je slična podlozi Wilson - Blair).

Metabolizam anaerobnih organizama

Metabolizam anaerobnih organizama ima nekoliko različitih podskupina:

Anaerobni energetski metabolizam u tkivima osoba I životinje

Anaerobna i aerobna proizvodnja energije u ljudskim tkivima

Neka životinjska i ljudska tkiva vrlo su otporna na hipoksiju (osobito mišićno tkivo). U normalnim uvjetima sinteza ATP-a odvija se aerobno, a tijekom intenzivne mišićne aktivnosti, kada je dostava kisika u mišiće otežana, u stanju hipoksije, kao i tijekom upalnih reakcija u tkivima, dominiraju anaerobni mehanizmi regeneracije ATP-a. U skeletnim mišićima identificirana su 3 tipa anaerobnih i samo jedan aerobni put za regeneraciju ATP-a.

3 tipa anaerobnog puta za sintezu ATP-a

U anaerobne spadaju:

Mehanizam kreatin fosfataze (fosfogen ili alaktat) - refosforilacija između kreatin fosfata i ADP
Miokinaza - sinteza (inače resinteza) ATP u reakciji transfosforilacije 2 ADP molekule (adenilatne ciklaze)
Glikolitička – anaerobna razgradnja rezervi glukoze ili glikogena u krvi, što rezultira stvaranjem

KATEGORIJE

Probir

Ultrazvuk ekstremiteta

Vrste ultrazvuka

Ultrazvuk abdomena

Ultrazvuk prsnog koša

POPULARNI ČLANCI

	Negacija ne s glagolima (u osobnom obliku, u infinitivu, u obliku gerunda) piše se odvojeno: ne uzimati, nije, ne znajući, polako
	Prezentacija, izvješće o glavnim značajkama filozofije oživljavanja
	Stil fikcije
	Djeca zemlje Prezentacija mi smo djeca zemlje za vrtić
	Prezentacija na temu Prepreke u komunikaciji, rad su dovršili učenici Bez komunikacije se zaključavamo u sebe

2023 “kingad.ru” - ultrazvučni pregled ljudskih organa