ПЦР діагностика кішок. Діагностика коронавірусної інфекції методом полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР)

I. Які аналізи треба здати підібраній на вулиці кішці чи коті?

Строго кажучи, призначати дослідження повинен лікар залежно від стану тварини, але грамотний фахівець все одно призначить якусь комбінацію зі списку, наведеного нижче. Здавати аналізи я рекомендую навіть цілком здоровим на вигляд тваринам. Чому стане ясно під час прочитання цієї статті. А ось у кошенят до 2-х місяців брати кров на аналізи, у тому числі для перевірки на інфекції нема рації.

Розташуємо аналізи з пріоритету:

1. на панлейкопенію (методом ПЛР).
2. На мляві вірусні інфекції (методом ПЛР).
3. Загальноклінічний аналіз крові (перед здаванням потрібно голодування 4 години)
4. Біохімічний аналіз крові (перед здаванням потрібно голодування 8-12 годин).
5. Аналіз сечі. (загальноклінічний, а також співвідношення білок-креатинін).

Розглянемо докладніше:

1. Панлейкопенія чи чума кішок (парвовірусна інфекція). Найбільш заразне та смертоносне захворювання кішок. Не передається людям та іншим видам тварин. За відсутності лікування часто призводить до смерті, особливо кошенят. Вакцинація імпортним препаратом, яка щорічно проводиться за всіма правилами (з подвійною дегельмінтизацією), ефективно захищає від цієї хвороби. Тому, якщо у Вас вдома є нещеплені кішки, аналіз дуже важливий. Але навіть якщо у Вас вдома немає інших кішок або вони щеплені — я все одно рекомендую здати цей аналіз.

Навіть цілком здорова на вигляд тварина може бути носієм цього найнебезпечнішого вірусу (інкубаційний період становить від 4-х до 21 дня) і якщо аналіз виявить вірус, лікарі зможуть вжити відповідних заходів, щоб пом'якшити перебіг хвороби. Поки результату не отримано, рекомендую дотримуватися.

1. Аналізи на мляві інфекції. Найбільш поширені 4 інфекції: вірусний лейкоз кішок, імунодефіцит кішок, вірусний перитоніт кішок (ФІП) та коронавірус (вірусний ентерит). Не передаються людині та іншим видам тварин. Здача аналізів вкрай необхідна, якщо у вас є свої кішки (причому неважливо, вони щеплені чи ні, тому що ефективних щеплень від цих вірусів не існує). Якщо інших кішок у квартирі немає, то бажано знати про наявність вірусу в тілі тварини т.к. ці інфекції можуть "дрімати" роками без будь-яких видимих ​​проявів, але активізуватися у разі стресового впливу на організм (від сильного глистогінного препарату до наркозу при операції) і перейти в гостру стадію. Ефективного лікування лейкозу, імунодефіциту та ФІП у гострій стадії немає. Існує підтримуюча терапія, але вона не завжди ефективна. Поки результату не отримано, рекомендую дотримуватися.

Вартість аналізу методом ПЛР (рекомендую лише цей метод) 300-600руб без урахування вартості забору крові за кожен (мазка із прямої кишки), залежно від лабораторії або клініки. Результат через 1-3 доби також залежить від лабораторії. Деякі лабораторії поєднують ці аналізи в один т.зв. профіль, що дає змогу заощадити гроші. Наприклад, лабораторія Нуклеом, через ветклініку Зооакадемія, надає можливість здати аналізи на мляві інфекції методом ПЛР у складі профілю за 900руб (причому туди НЕ входить, коронавірус, який рекомендується здати додатково за 300р, зате включена панлейкопенія)! На сьогоднішній день це найвигідніша з відомих мені пропозицій по Москві. В інших лабораторіях та ветклініках подібне дослідження може обійтися вдвічі дорожче.

1. Загальноклінічний аналіз крові. Перед здаванням потрібно голодування 4 години. Дуже інформативний для лікарів. Розкаже про гострі стани, наприклад, про запальні процеси в організмі, і допоможе лікарю правильно підібрати препарати для лікування, якщо виникне потреба. Підтвердити чи спростувати результати досліджень №1-2. При цьому коштує недорого 300-600руб (без урахування вартості забору крові), тому суворо рекомендується до здачі при будь-якому заборі крові, наприклад, для досліджень №1-2.

1. Біохімічне дослідження крові. Перед здаванням потрібне голодування 8-12 годин. Покаже стан внутрішніх органів та допоможе лікарю призначити правильне лікування за потреби. Так само як і дослідження №3 аналіз може допомогти у підтвердженні результатів досліджень №2. Є набір показників, тому вартість варіюється в залежності від їх кількості та від лабораторії. Як правило, немає необхідності ламати голову на тему, які показники складатимуть т.к. будь-яка лабораторія поєднує їх у спеціальні профілі. Можна здати стандартний чи розширений. Вартість варіюється в залежності від клініки та лабораторії. Стандартний профіль коштує від 900р, розширений від 1200р без урахування вартості забору крові.

Важливе зауваження. Немає сенсу здавати біохімію крові: а) вагітним; б) кошеням до 4-х місяців; в) раніше одного місяця після операції з наркозом! Результат буде сильно спотворений і може ввести в оману лікаря, який призначить непотрібне лікування.

1. Аналіз сечі. 5.1. Загальноклінічний. 5.2. Співвідношення білок/креатинін.

Найскладніше щодо отримання матеріалу дослідження. Зате для його збору не треба вести тварину до клініки. Дуже важливим є дослідження, яке може виявити на ранній стадії проблеми з нирками або ознаки сечокам'яної хвороби, чого ніколи не зможе показати дослідження №3. Водночас у ньому немає такої терміновості, як у дослідженнях №1-3. Сечу необхідно збирати в чистий (!) Лоток. Можна використовувати спеціальний набір для збору сечі (вартість 300-400р), що представляє собою гранули, що не поглинають рідину, і контейнер для сечі. Для збору сечі з лотка можна використовувати звичайний шприц (20 мл) без голки. Транспортувати до лабораторії або ветклініки можна також у ньому. Необхідні дотримуватися деяких умов. Аналіз не повинен зберігатися більше 5 годин з моменту збору до моменту поміщення в лабораторне обладнання. Зберігатися та транспортуватися він повинен у холоді. При транспортуванні рекомендую використовувати термопакет та хладогент. Якщо у Вас немає хладогенту, можна використовувати заморожені овочі J. Середня вартість — близько 600р.

ІІ. Де складати аналізи?

А) Можна у клініці, поєднавши з первинним прийомом лікаря. У будь-якому випадку Вам доведеться йти до лікаря з результатами аналізів. інтерпретація аналізів №3-5 потребує лікарської кваліфікації.

Б) Безпосередньо у спеціалізованих лабораторіях. В цьому випадку Вам доведеться самим вирішувати, що здавати, а що ні.

При цьому багато ветклінік мають власні лабораторії, здатні проводити дослідження №3-5, тоді як дослідження на віруси вимагають більш дорогого обладнання, тому клініки, не маючи його, відправляють забраний матеріал у спеціалізовані лабораторії, з якими вони співпрацюють. Найбільш відомі лабораторії в Москві (за абеткою): Веттест, Неовет, Нуклеом, Пастер, ЦМД (звенигородське шосе), Шанс біо (мережа). З якими лабораторіями співпрацює конкретна ветклініка (бажано, щоб їх було більше однієї), а також вартість аналізів рекомендую дізнаватися заздалегідь. Як правило, у всіх лабораторіях є високоякісне обладнання, але якість отриманих результатів, на жаль, залежить від людського фактора. Так що це певною мірою лотерея, і часом доводиться передавати аналізи в різних лабораторіях, щоб підтвердити або спростувати той чи інший результат.

Про правила читайте у окремій статті.

Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) – метод молекулярної діагностики, що став для багатьох інфекцій «золотим стандартом», перевірений часом і ретельно апробований клінічно. Висока чутливість та специфічність методу дозволяють гарантовано виявляти одиничні збудники в біологічному матеріалі на основі їхньої генетичної інформації. Аналітична чутливість ПЛР для більшості вірусів та бактерій становить 1000 мікроорганізмів на 1 мл проби. Специфічність ПЛР для вірусних, хламідійних, мікоплазмових та більшості інших бактеріальних інфекцій досягає 100%.

Метод ПЛР був розроблений порівняно недавно, але до цього часу встиг зайняти передові позиції як у медичній, так і ветеринарній лабораторній діагностиці інфекційних та інвазійних захворювань. Основні принципи ПЛР відкрив у 1983 році американський хімік Кері Б. Мюлліс, за що і був удостоєний Нобелівської премії.

ПЛР-аналіз складається з кількох етапів. Перший етап – пробопідготовка – полягає в обробці досліджуваного матеріалу (приготування суспензії, центрифугування). З другого краю етапі проводиться виділення спадкового матеріалу - ДНК чи РНК - з клітин. При цьому після лізису клітин та руйнування комплексу «ДНК-білок» проводиться осадження ДНК або РНК на сорбенті з подальшим переходом в елююючий буфер. На етапі проводиться ампліфікація, тобто множення кількості специфічних ділянок ДНК. Для цього використовуються тест-системи, до складу яких входять праймери – олігонуклеотиди, які є специфічними для кожного збудника. До розлитої в мікропробірки ПЛР-суміші додають зразки і контролі, які поміщають в ампліфікатор або термоциклер - програмований термостат з високою швидкістю і точністю температури, що задається. Процес ампліфікації містить у собі три стадії: денатурація, відпал та елонгація. При визначенні в клінічних зразках РНК-вірусів ампліфікації передує стадія зворотної транскрипції, при якій РНК переводять у форму ДНК з використанням ферменту зворотної транскриптази, або ревертази. Четвертий етап ПЛР-діагностики полягає у проведенні електрофоретичної детекції продуктів ПЛР – ампліконів. При цьому продукти ПЛР поміщають у лунки агарозного гелю та піддають дії постійного електричного струму, внаслідок чого негативно заряджена молекула ДНК рухається до позитивного електрода. До складу гелю входить бромід етидія, який утворюючи стійкий комплекс з ДНК, робить ці смуги добре помітними при перегляді під ультрафіолетовим опроміненням (рис. 1).

Мал. 1. Стадії ПЛР

Слід зазначити, що для отримання достовірного результату ПЛР-аналізу необхідною умовою є дотримання правил відбору, зберігання та транспортування клінічного матеріалу. Незважаючи на те, що ПЛР є дуже чутливим методом, бажано наявність певної кількості збудника у пробі.

Взяття матеріалу для ПЛР-дослідженняслід проводити в одноразових неталькованих рукавичках (оскільки тальк пригнічує ПЛР). При взятті зіскрібків та змивів слід користуватися одноразовими стерильними зондами з підвищеною адсорбцією (що мають на кінці щіточку), оскільки вони відбирають оптимальну кількість матеріалу.

Зіскрібки та змивизі слизових оболонок носа, ротової порожнини, піхви, кон'юнктиви відбирають в одноразові пластикові мікропробірки - епендорфи - об'ємом 1,5 мл, які розлито по 0,5 мл стерильного фізіологічного розчину. Бажано не використовувати зонди із ватними наконечниками. Слід також уникати відламування кінчика зонда в пробірку з фізіологічним розчином, оскільки це ускладнює подальшу обробку та підвищує ризик перехресної контамінації проб. Для отримання необхідної кількості матеріалу достатньо обертати зонд у пробірці протягом 1-2 хвилин, уникаючи розбризкування рідини. Проба має бути каламутною на вигляд, а при відстоюванні в ній повинен утворюватися невеликий осад.

Забір кровіпроводять одноразовою голкою в одноразовий шприц або скляну пробірку без антикоагулянту. При заборі в шприц кров з нього акуратно (без утворення піни) переносять в одноразову скляну пробірку. Можливе використання вакуумних систем (Vacuette) для забору крові. Для дослідження можна надати сироватку крові: пробірки з кров'ю відстоюють при кімнатній температурі протягом 30 хвилин до повного утворення згустку, потім центрифугують при 3 тис. об/хв протягом 10 хвилин і переносять у кількості не менше 1 мл стерильні епендорфи обсягом 1, 5мл.

Спермувідбирають у стерильні одноразові пробірки чи флакони.

Сеча.Відбирають першу порцію ранкової сечі в кількості не менше 20-40 мл стерильний сухий флакон або пробірку.

Фекалії.Відбирають проби масою 1-3 грами з попередньо продезінфікованого та вимитого лотка, одноразовими лопаточками переносять у стерильний флакон.

Шматочки уражених органіввід полеглих тварин відбирають у стерильні одноразові контейнери або чисті скляні або пластикові ємності.

Слід суворо дотримуватись температурних режимів зберігання та транспортування відібраного матеріалу. Транспортування здійснюють у термоконтейнері з охолоджувальними елементами або термосі з льодом. При зберіганні матеріалу більше доби необхідно заморозити при Т мінус 20°С.

Найбільш часто зустрічаються захворювання у кішок і собак є кон'юнктивіт, ринотрахеїт, а також ентерит. Для того, щоб з'ясувати етіологію захворювання, потрібно провести якісну лабораторну діагностику.

Причиною кон'юнктивітів або інфекцій верхнього респіраторного тракту у котів може бути інфікування наступними мікроорганізмами: герпесвірус типу 1 (FHV1), каліцівірус котів, Chlamediapcittaci. Mycoplasma felis, Bordetella bronchiseptica, Feline reovirus, Staphylococ-cuc aureus, Brohaemolytic streptococcic та Salmonella tephimurium.

Найбільш частою причиною, за даними різних авторів та методів дослідження, є герпес-вірус типу FHY1 (від 10% до 34%) та каліцівірус кішок (від 20% до 53%). Chlamydia pcittaci (від 10% до 35%).

Герпесвірусна інфекція, асоційована абортами, високою смертністю новонароджених (інфікування майже 60% випадків) з ознаками інтерстиціальної пневмонії
Каліцівірус – важко протікає у кошенят, у той же час 25-80% перехворілих дорослих тварин стають носіями та є джерелом зараження, передаючи вірус через слину.

Панлейкопенія- контагіозне вірусне захворювання кішок, що характеризується різким падінням рівня лейкоцитів, гастроентеритом, ринітами з кон'юнктивітами, високою смертністю (30-90% кошенят).

Справжнім бичем для розплідників є інфекційний перитоніт кішок- тяжке захворювання, збудником якого є РНК-містить високопатогенний вірус. Вірус реплікується в мигдаликах та ентероцитах тонкого кишечника, розсіюючись по організму через макрофаги та моноцити. Коронавіруси з низькою вірулентністю викликають ентерити середньої тяжкості, найчастіше у кошенят після відлучення від матері. Високовірулентний коронавірус може призвести до розвитку сухого або випітного перитоніту. Перитоніт часто супроводжується нирковою недостатністю, печінковими та неврологічними симптомами.

При інфікуванні аденовірусамиобох типів та вірусом чуми м'ясоїдниху собак проявляється загальний комплекс симптомів: лихоманка, кон'юнктивіти та ринотрахеїти, розлад шлунково-кишкового тракту, ураження нервової системи.

При чумі м'ясоїднихклінічні ознаки можуть включати серозно-слизові назальні та кон'юнктивальні виділення, кашель, задишку, пневмонію, блювання та пронос, а також лихоманку та гіперкератоз.

Аденовірус м'ясоїдних. Збудник - ДНК-аденовірус м'ясоїдних першого типу (викликає інфекційний гепатит м'ясоїдних) і другого типу (викликає аденовіроз собак). Спостерігаються лихоманка, апатія, анорексія, спрага, блювання та пронос, болючість черевної стінки при пальпації. Іноді розвиваються кон'юнктивіт, кератит, світлобоязнь. Можуть бути точкові крововиливи на слизовій оболонці та шкірі. Рідко спостерігаються неврологічні розлади.

Всі перелічені захворювання мають високий індекс контагіозності та асоційовані з високою смертністю серед цуценят, від парвовірусного ентериту гине 10-50% хворих цуценят, при інфікуванні не вакцинованих цуценят вірусом чуми м'ясоїдних смертність доходить до 100%.

Токсоплазмоз. Збудник – найпростіше Toxoplasma gondii. Розмноження збудника відбувається у кішок на стінках кишківника. З калом вони виділяють у довкілля ооцисти.

Тканинні цисти можуть викликати анорексію, пригнічення, кератити, жовтяницю, блювання, пронос та неврологічні симптоми залежно від уражених органів. У собак клінічні симптоми залежать від уражених органів: можуть спостерігатися неврологічні порушення (тремор, атаксія, параліч) або токсоплазмозний міозит (порушення ходи, атрофія м'язів, ригідність), а також міокардит та гепатит.

Хламідіоз та орнітоз. Збудники у кішок – Chlamydophila felts, у собак – Chlamydophila abortus, Ch. pecorum, у тих та в інших захворювання може викликати Ch. psittaci. У птахів – Ch. psittaci.
У кішок захворювання проявляється в основному у формі гнійних та негнійних кон'юнктивітів та кератитів, також можуть спостерігатися риніт, пневмонія, вагініт, аборти та безпліддя. У кошенят зустрічається неонатальний хламідіозний кон'юнктивіт. У собак симптоми різноманітні та виявляються запальними захворюваннями кон'юнктиви, статевих органів, гастритами, артритами, абортами та безпліддям. Є дані про роль хламідій у патогенезі атеросклерозу у собак.

Мікоплазмоз. Збудники – мікроорганізми роду Mycoplasma. Протікає з ознаками бронхопневмонії, кератокон'юктевітів та кератитів.

Віру ний імунодефіцит кішок.Імунодефіцит кішок - важке захворювання, що викликається вірусом із сімейства Retrovoridae, роду Lentivirus. Вірус вражає імунну та нервову системи. Має тропізм до Т-лімфоцитів. Внаслідок імунодепресії організм стає беззахисним проти бактерій, грибів, вірусів і гине від вторинної інфекції.
Клінічні ознаки розвиваються повільно, захворювання частіше реєструється серед кішок 6-10 років.

Трапляються у домашніх тварин і такі захворювання як: лептоспіроз собак, листеріоз кішок і собак, ієрсиніоз цуценят, бруцельоз, ротовірусний ентерит, сказ.

Правильність постановки ПЛР-аналізу та якісне виділення інфекції залежить, насамперед, від правильності взяття матеріалу, по-друге, від дотримання температурного режиму зберігання та транспортування проб. Проба, що надійшла в лабораторію реєструється, проходить всі стадії ПЛР, піддається електрофоретичної детекції з подальшою видачею кінцевого результату.

Таким чином, висока чутливість та специфічність ПЛР-методу дозволяє гарантовано виявляти поодиноких збудників у біологічному матеріалі за короткий проміжок часу, що дозволяє поставити точний діагноз, призначити адекватне лікування та розробити профілактичні заходи.

І.М. Буркун, член-кореспондент РАСГН, д.б.н., професор, Н.А. Пєлєвіна, м.н.с, О.Г. Бодрова, м.н.с,
ДНУ Уральський державний науково-дослідний ветеринарний інститут РАСГН

З кожним роком завдяки науковому прогресу з'являються нові, сучасні методики та діагностики захворювань тварин. Зараз, практично у будь-якій ветеринарній клініці, проводиться ПЛР діагностика інфекційбудь-яких свійських тварин. У клініці «Лапки-драпки» є спеціальна лабораторія, в якій можна провести різноманітні аналізи.

Завдяки цим інноваційним розробкам ми можемо вчасно правильно діагностувати будь-які інфекційні захворювання домашніх улюбленців. Особливо це важливо при серйозних захворюваннях, які необхідно виявляти на ранніх стадіях і які не завжди можна визначити за інших клінічних аналізів або УЗД. Полімеразна ланцюгова реакція(ПЛР)є незамінним методом діагностики для проведення важливих ветеринарних досліджень і використовується паралельно з бактеріологічним та імунохімічним методами.

При клініці «Лапки-драпки» знаходиться спеціальна лабораторія ПЛР діагностикиінфекцій тварин. Ми надаємо послуги по Ленінградській області та Санкт-Петербургу. Відмінна риса наших послуг - паркани проб у вас вдома та безкоштовна кур'єрська служба.

ПЛР діагностика інфекцій - це найточніший, сучасний, швидкий спосіб дослідження у ветеринарній вірусології та мікробіології, що дозволяє не тільки виявити захворювання, але й визначити РНК, ДНК вірусу та антитіла до нього.

Переваги ПЛР діагностики:

Можливість виявити інфекцію у випадках, коли іншими методами це визначити неможливо

Швидкість дослідження, яка пояснюється тим, що не потрібно тривалий час вирощувати та визначати збудників

Процес повністю автоматизований і стандартизований, що унеможливлює навіть найменші помилки, на відміну від ручних досліджень.

Результат досліджень готовий протягом 12 годин

Діагностика - універсальна, тому що допомагає визначити збудників у різних рідинах та біологічних тканинах.

Величезне значення ПЛР діагностика тваринмає на ранніх стадіях таких захворювань, як бруцельоз, хламідіоз, лейкоз, лептоспіроз, листериоз та багато інших. Використання цього методу дало змогу розробити унікальні програми з успішного оздоровлення більшості інфекційних та вірусних захворювань домашніх тварин.

Скористайтеся цим унікальним методом діагностики, якщо хочете, щоб ваш домашній улюбленець був здоровим і радував вас довгі роки! ПЛР діагностика інфекцій часто є єдиним шансом порятунку життя! З будь-яких питань, що виникли у вас, вам докладно дадуть відповідь фахівці клініки «Лапки-драпки» в онлайн-режимі або за телефонами. Звертайтеся, ми завжди прийдемо на допомогу вашим вихованцям!

Інфекційний перитоніт котів- системна вірусна хвороба (Coronavirus), яка вражає багато тканин організму. Визначено дві форми хвороби: вологу та суху. При вологій формі запальна рідина акумулюється в черевній порожнині. При сухій формі вірус атакує різні органи, такі як нирки та селезінка. Немає лікування для цієї хвороби і майже завжди результат фатальний. ІПК найчастіше діагностується у кошенят і дорослих кішок до 3-х років. Кішки в розплідниках або в будинках із кількома тваринами мають найвищий ризик розвитку хвороби.

Додаткова інформація
ІПК – системна вірусна хвороба, що характеризується прихованим початком, періодичною неконтрольованою лихоманкою, піогранулематозною реакцією, акумулювання ексудату в порожнинах тіла, високою смертністю.

Патофізіологія
Вірус ІПК реплікується локально в епітеліальних клітинах респіраторного тракту чи орофарингсу. Вірусні тіла починають вироблятися, і вірус поглинається макрофагами. Вірус транспортується макрофагами/моноцитами організмом, локалізуючись у стінках різних вен і периваскулярного простору. Локальна периваскулярна реплікація вірусу та подальша піогранулематозна реакція з боку тканин утворює характерну картину ураження при ІПК.

Уражені системи

• Мультисистемна – піогранулематозні або гранулематозні ушкодження відбувається у сальнику, на серозних оболонках органів черевної порожнини, таких як печінка, нирки, кишечник, в черевних лімфатичних вузлах, та підслизовому шарі кишечника.
• Респіраторна – ураження на поверхні легень, плевральний випіт при вологій формі ІПК.
• Нервова – васкулярні ураження проявляються протягом усього ЦНС, особливо, на оболонках
• Офтальмологічна – ушкодження можуть виявлятися увеїтом та хореоретинітом.

Генетична схильність
Ні.

Поширеність
Поширеність антитіл проти коронавірусу кішок (вірусу ІПК, КВК, FCoV) висока у більшості популяцій, особливо там, де багато кішок міститься спільно. Інциденти клінічного прояву хвороби низькі у більшості популяцій, особливо у котів, які містяться одні. Через труднощі в діагностиці, контролі та профілактиці спалах ІПК у готелях для кішок може стати катастрофою.

Ознаки інфекційного, вірусного перитоніту кішок (ІПК, ВІПК, FIP)

Домашні кішки та екзотичні кішки схильні до інфекції ВІПК.

Породна схильність
Деякі сім'ї чи лінії кішок виявляють велику схильність до розвитку клінічної форми хвороби після інфікування ВІПК. Серед екзотичних кішок гепарди особливо схильні до розвитку фатального ІПК.

Середній вік та діапазон
Висока поширеність ВІПК проявляється у кошенят на 3 міс. до 3-х років. Поширеність знижується після досягнення кішкою 3 років.

Статева схильність
Ні

Анамнез
Загальні коментарі
Широкий діапазон ознак може виявитися залежно від вірулентності та патогенності штаму вірусу залученого до процесу, ефективності імунної системи господаря та уражених систем. Розрізняють дві класичні форми хвороби, волога, з випотом ексудатів у порожнині тіла та суха, яка вражає різні органи.
Анамнез

1. Є прихований початок
2. Поступове виснаження зниження апетиту
3. Зупинка у зростанні
4. Поступове збільшення об'єму живота, розвиток водянки, асциту, пузатий вид тварини
5. Постійна лихоманка без відповіді на антибіотики

Результати фізикального обстеження

• Депресія, низькорослість
• Поганий загальний стан – втрата ваги та поганий стан вовни
• Абдомінальні та плевральні випоти
• Пальпація може виявити абдомінальні маси (гранулеми або піогранулеми) на сальнику, на поверхні внутрішніх органів, особливо нирок, та на кишкових стінках. Мезентеральні лімфатичні вузли можуть бути збільшені.
• Очі: , зміна кольору райдужної оболонки, неправильна форма зіниці.
• Неврологічні ознаки можуть містити різні варіанти.

Причини
ВІПК викликається одним із двох типів коронавірусу котячих. Більшість інфекцій, можливо 85%, викликаються типом 1 вірусу (FCoV-1), інші типом 2 (FCoV-2). Дуже важливо проводити різницю між двома біотипами вірусу, менш вірулентні та авірулентні кишкові види вірусу (кишковий коронавірус кішок або КККВ) та вірулентними видами, які призводять до виникнення ВІПК. Насправді, ВВВК і ВІПК можуть ставати як типом 1 так і типом 2. У кожному типі є спектр вірулентності з авірулентних вірусів, які утворюють асимптоматичні інфекції та фатальну поразку ВІПК.

Чинники ризику

• Вступ FCoV-антитілпозитивної кішки в популяцію FCoV-антитілнегативних кішок (незахищених антитілами проти ВІПК)
• Кішки, що містяться групами

Діагностика ВІПК

Волога форма ВІПК може бути легко виявлена ​​клінічним шляхом, тоді як суху форму важко точно діагностувати. Немає жодного лабораторного тесту для діагностики ВІПК, тому що хвороба варіабельна час від часу.

Диференціальний діагноз

• Гарячка невідомого походження. Цей діагноз можна поставити, коли відкинуті всі інші можливі причини гіпертермії.
• Хвороби серця, що викликають плевральний випіт. Це випіт матиме низьку відносну щільність і кількість клітин у порівнянні з високою щільністю та величезним вмістом клітин при ВІПК випоті.
• Ушкодження при лімфомі, особливо нирок, можуть бути подібними до ВІПК при пальпації. Пухлини ЦНС можуть виявляти ознаки подібні до тих, що і при ВІПК. Більшість кішок із позитивним тестом на ВІПК-антиген. У кішок з негативним результатом тесту, біопсія місць ураження (за можливості) повинні піддаватися гістопатологічному або імунохімічному аналізу на ВІПК-антиген.
• Респіраторні хвороби, що викликаються каліцівірусом кішок та герпесвірусом кішок, хламідіями або різними бактеріями.
• Панстеатит (хвороба жовтого жиру). Біль при пальпації живота і дієта тільки з риби.
• Панлейкопенія, що викликає ентерит. Кількість лейкоцитів має бути низьким.
  Діагноз
• Це захворювання підозрюється за відсутності відповіді лихоманки на введення антибіотиків, наявності ексудатів у грудній та перитонеальній порожнинах без явних інфекційних агентів, гіперглобулінемії та підвищеним вмістом білка у випоті при вологій формі.
• Серцева недостатність, лімфосаркома та розрив лімфатичних проток тощо. хвороби з ознаками випоту в грудну та черевну порожнини повинні бути уважно враховані та перевірені, як і лейкемія кішок, вірусний імунодефіцит кішок та панлейкопенія кішок.
• З різних причин ізоляція вірусу не практична.
• Серологічні процедури: деякі діагностичні лабораторії не можуть проводити тести на ВІПК через складність інтерпретації результатів. ВІПК позитивний результат імунофлуорересцентного аналізу (ІФА) свідчить лише про те, що тварина мала контакт з вірусом, не підтверджуючи наявності вірусу. Однак, існує наскільки свідчень, що багато серологічно позитивних кішок позбулися коронавірусу можливо в респіраторному або шлунково-кишковому тракті. Позитивні тести з ІФА або ELISA не дають гарантованого діагнозу на ВІПК.
• Позитивний результат тесту ІФА на ВІПК (титр 1:50 до 1:6000) разом із клінічними ознаками ВІПК говорить про вірний прояв ВІПК. Хоча й незвичайно, але деякі кішки з проявом ознак ВІПК мають негативний результат серологічне дослідження.

ІФА (імуноферментний аналіз) віддається перевагу багатьма діагностичними лабораторіями, ніжELISA.

• Діагностичні набори для ІФА та ELISA діагностики доступні для використання на коронавірусі кішок, але результати необхідно інтерпретувати з обережністю.
• Загальний білок, який визначається електрофорезом, помітно підвищений.
• Позитивний результат фарбування зразків (з легень, печінки, нирок, лімфатичних вузлів брижі та плеври) специфічними антитілами, що флуорескують, на ВІПК вважається остаточним діагнозом. Кишковий коронавірус перехресно реагує на тест до ВІПК.
• За життя у тварин у крові можна виявити важку анемію, нейтрофілію та лейкопенію.
• Також комерційно доступне ПРЦ дослідження надання допомоги у ідентифікації вірусу у різних тканинах.

Аналізи крові та сечі

• Кішки з ВІПК мають тенденцію до розвитку лейкопенії на ранній стадії інфекції, але пізніше розвивається лейкоцитоз з нейтрофілією та лімфопенією.
• Може виявлятися анемія різного ступеня тяжкості – від середньої до тяжкої.
• Зазвичай помітно підвищення рівня загального плазмового глобуліну.
• Часто присутня і гіпербілірубіурія.

Лабораторні тести

• Тест на сироваткові антитіла визначають антитіла проти коронавірусів кішок. Позитивний результат не є діагностичним, і краще показує попередню інфекцію ВІПК. Кореляція між верхнім значенням титру та потенційного підтвердження ВІПК не велике.
• ПЛР (полімеразна ланцюгова реакція) дозволяє визначити вірусний антиген. Точність позитивного тесту корелює із клінічним проявом хвороби.
• Імуногістохімічне дослідження (імунопероксидазою) доступне для визначення ВІПК антигену в певних клітинах у гістопатологічних зразках кішок при посмертному дослідженні з фатальною формою хвороби та зразках біопсії. Цей тест є прекрасним для підтвердження ВІПК.

Візуальні методи діагностикизазвичай не потрібні, але можуть допомогти у виявленні абдомінального та плеврального випоту, а також піогранулематозних ушкоджень.
Рідина при вологій формі ВІПК може виявлятися і в черевній порожнині (асцит).
УЗД дає додаткову інформацію, яку не можна отримати за допомогою рентгенографії. В даному випадку збільшені лімфатичні вузли в центрі кишечника.

Рентгенограма: 1 . Дифузне затемнення в нижній частині грудної клітки через плевральний випот, через що межі серця 2 не видно, а легені 4 зрушені до хребта і мало вентилюються, 3 - трахея, 5 - печінка, 6 - Шлунок, 7 - кишечник

Інші діагностичні процедури

• Рідина, отримана з грудної та черевної порожнин, блідого або солом'яного кольору, тягуча, часто з вкрапленнями фібрину, а після відстоювання в ній осідають згустки. Специфічна густина такої рідини зазвичай висока (1.030-1.040).
• Лапароскопія може бути корисною для виявлення специфічних пошкоджень у черевній порожнині та отримання зразків тканин для гістопатологічного та імунохімічного підтвердження.
• Діагностична лапаротомія може виявити істину, якщо є труднощі у постановці діагнозу і якщо лапароскопія недоступна.

Зовнішні та гістопатологічні зміни

Моніторинг за пацієнтом
У кішки з ВІПК необхідно контролювати скупчення ексудату в плевральній порожнині.

Профілактика

• Є у продажу MLV інтраназальна вакцина проти ВІПК. Однак, ефективність дано вакцини низька, отже на ній не можна повністю покладатися у питанні контролю ВІПК.
• Головний спосіб передачі ВІПК – від кішок асимптоматичних вірусоносіїв кошенятам віком 5-7 тижнів, коли колостральний імунітет почне слабшати. Отже, раннє відлучення кошенят у віці 4-5 тижнів з вирощуванням кошенят ізольованих від прямого контакту з іншими кішками включаючи матерів, перерве цикл передачі вірусу від матері до потомства.
• Звичайна дезінфекція місць проживання кішки та засобів для догляду та годування швидко інактивує вірус та зменшує ризик передачі від кішки до кішки.
• Тільки FCoV-антитіл негативні кішки повинні вводитися в розплідник або колонію кішок як гарантія свободи організму від вірусу. Вакцинація може робити кішок антитіл-позитивними і може утруднити контроль вірусу у популяції.

Можливі ускладнення
При плевральному випоті необхідний торакоцентез як засіб лікування.

Очікуваний курс та прогноз
ВІПК може запустити прояв клінічних ознак протягом кількох днів або кількох місяців. Прогноз смертельний після прояву типових ознак ВІПК-інфекції, досягаючи 100% смертності.

Клінічні ознаки, що типово виявляються при даній хворобі.

• Зниження вольтажу на ЕКГ, згасання комплексів та низька амплітуда.
• Приглушення серцевих тонів
• Тахікардія, почастішання пульсу
• Розтяг черевної порожнини
• Анорексія, скорочення або втрата апетиту
• Асцит
• Зниження об'єму фекалій, запор, відсутність фекалій
• Діарея
• Дисфагія
• Гепатоспленомегалія, спленомегалія, гепатомегалія
• Поліфагія, надлишковий апетит
• Аномальне пропріорецептивне позиціонування
• Атаксія, дискоординація, падіння
• Ціаноз
• Дегідратація
• Дисметрія, гіперметрія, гіпометрія
• Непереносимість фізичного навантаження
• Лихоманка
• Кульгавість передніх кінцівок
• Генералізована діагностика
• Генералізована слабкість
• Слабкість у ділянці голови, шиї, парез, параліч
• Геміпарез
• Кульгавість задніх кінцівок
• Маси в черевній порожнині
• Нестача зростання
• Лімфаденопатія
• Опістотонус
• Блідість шкіри та слизових оболонок
• Полідипсія
• Припухлість в області препуція, насінників, пеніса, мошонки
• Тетрапарез, слабкість, параліч 4х кінцівок
• Тремтіння, тремор, фасцікуляція
• Втрата ваги
• Аномальна поведінка, агресія, зміна навичок
• Аномальні рефлекси передніх кінцівок, посилення чи зменшення
• Аномальні рефлекси задніх кінцівок, посилення чи зменшення
• Аварія
• Дезорієнтація, втрата пам'яті
• Тупоумство, депресія, летаргія
• Деліріум, марення, манія, збудження
• Гіпоестезія передніх кінцівок, анестезія
• Нахил голови

• Гіперестезія, гіперактивність
• Гіпертонія м'язів, міотонія
• Гіпотонія м'язів
• Пропульсія, безцільне бродіння
• Судоми або непритомність, конвульсії, колапс
• Тремор
• Аномальний рефлекс зіниці на світ
• Аномальна рефлективність сітківки
• Аномальний розмір судин сітківки
• Анізокорія
• Блефароспазм
• Сліпота
• Хемоз, набряк кон'юнктиви, рогівки
• Аномальна васкуляризація кон'юнктиви та рогівки
• Червоність кон'юнктиви, рогівки
• Набряк рогівки
• Паннус
• Гіфема, «чорне око»
• Гіпопіон
• Сльозотеча
• Міоз, скорочення зіниці
• Мідріаз, розширення зіниці
• Ністагм
• Помутніння склоподібного тіла
• Атрофія зорового нерва, скорочення розмірів зорового нерва
• Гнійні витікання з очей
• Відшарування клітковини
• Складки та горби на сітківки
• Крововиливи сітківки
• Синехії
• Біль спини
• Біль шиї
• Біль від зовнішнього тиску на черевну порожнину
• Аномальний розмір сім'яників
• Кашель
• Пригасання легеневих звуків
• Диспное
• Тахіпное
• Слизові носові закінчення, серозні, рідкі
• Гнійні носові закінчення
• Грубість та неохайність вовни
• Глюкозурія
• Кетонурія
• Поліурія

Лікування

Залежно від тяжкості перебігу хвороби тварина повинна проходити лікування або стаціонарно або амбулаторно, бажання та можливості власників забезпечити хороше підтримуюче лікування.

Активність
Активність тварини необхідно скоротити зменшення поширення вірусу до інших кішок.

Дієта
Анорексія та втрата ваги – лавні проблеми при ВІПК. Будь-яка дієта, яка спонукає тварину до їди, вітається.

Навчання власників
Обговоріть різноманітні аспекти ВІПК. Включно з фатальним прогнозом при закінченій постановці діагнозу.

Хірургічні аспекти
Ні

Лікарські препарати

• Немає препаратів для ефективного лікування ВІПК. Кішки з генералізованою інфекцією ВІПК майже завжди гинуть.
• Імуносупресивні препарати, такі як преднізолон та циклофосфамід застосовуються з обмеженим успіхом. Кортикостероїди як субкон'юнктивальні ін'єкції ефективні лише за офтальмологічного прояву хвороби.
• Інтерферони, хоч і ефективні in vitro, мають обмежений успіх у лікуванні ВІПК. Рекомбінантний інтерферон за оцінками мав певний успіх у лікуванні ВІПК у Японії.
• Антибіотики не є ефективними, оскільки вторинні бактеріальні інфекції не є частиною клінічного прояву хвороби.

Протипоказання
Ні

Застереження
Ні

Можливі взаємодії
Ні

Альтернативні препарати
Нема ефективних противірусних ліків проти ВІПК.

Прогноз
ВІПК проходить клінічний прояв протягом кількох днів до кількох місяців. Прогноз смертельний при прояві характерних клінічних ознак смертність 100%.

ПЛР- це полімеразна ланцюгова реакція, заснована на принципі копіювання певної ділянки нитки ДНК. За рахунок багаторазового збільшення в обсязі ДНК-матеріалу, стає можливим виявити в мікроскопі бактерії, що шукаються. Перевагою ПЛР є:

• висока чутливість;
• висока специфічність;
• виявлення гострих та латентних інфекцій;
• можливість виявлення будь-якого з нині відомих збудників.

ПЛР у ветеринарії

В даний час метод ПЛР діагностики знайшов широке застосування у ветеринарії. Даний метод дослідження дозволяє за короткий термін отримати достовірну відповідь. До того ж для його проведення потрібна дуже мала кількість біологічного матеріалу, на відміну, наприклад, від загального аналізу крові, що суттєво спрощує роботу ветеринарним лікарям. Як у людей, так і у тварин матеріалом для постановки ПЛР можуть бути:

• кров та її компоненти;
• сеча;
• біоптат шлунка;
• слина;
• зіскрібки епітеліальних клітин.

Проведення ПЛР-діагностики кішкам

Під час обстеження кішки ветеринаром для підтвердження або спростування передбачуваного діагнозу може виникнути необхідність зробити аналіз кішці на ПЛР. Причиною призначення такого дослідження можуть бути найчастіше зустрічаються і в той же час важко діагностовані захворювання, такі як перитоніт, ринотрахеїт, коронавірус, токсоплазмоз та ін.

Особливо важким захворюванням, у якому необхідний ПЛР-метод є вірусний імунодефіцит кішок. Цей вірус вражає як імунну, а й нервову системи тварини. Організм кішки стає ослабленим і беззахисним перед бактеріями та вірусами, внаслідок чого тварина гине від вторинних інфекцій. І щоб виключити наявність цього вірусу, ветеринарний лікар рекомендує проводити кішці полімеразну ланцюгову реакцію.

Цей метод, крім різноманіття переваг, має низку недоліків. Всі апарати для ПЛР-діагностики дуже чутливі, і тому найменше забруднення може дати помилкову позитивну відповідь. Так само не маловажною вважається дорожнеча обладнання та реактивів, тому не кожна ветклініка в Москві може його придбати. Однак, діагностика захворювань без цього методу стає все більш скрутною, тому проведення аналізу ПЛР у кішок у Москві можна зробити в нашій клініці звернувшись за контактними телефонами, або залишивши заявку на сайті.