Клебсієли. Klebsiella pneumoniae

Рід Klebsiella, що відноситься до сімейства ентеробактерій, об'єднує капсульні бактерії, що викликають різні захворювання: пневмонію та гнійно-запальні процеси – К. pneumoniae, риносклерому – К. rinoscleromatis, озену (смердючий нежить) – К. ozaenae.

Морфологія. Клебсієли - короткі товсті палички, розміром 0,6-6,0×0,3-1,5 мкм із закругленими кінцями. Нерухливі. Утворюють капсулу. У мазках розташовуються поодиноко, попарно або короткими ланцюжками.

Культивування. Клебсієли – факультативні анаероби. Добре ростуть на простих поживних середовищах при 35-37 ° С. На щільних середовищах утворюють куполоподібні слизові оболонки колонії, на бульйоні - інтенсивне помутніння.

Ферментативні властивості. Ферментують лактозу, розщеплюють глюкозу та маніт з утворенням кислоти та газу, розкладають сечовину, не утворюють індолу та сірководню.

Токсиноутворення. Мають ендотоксин. Вірулентність їх залежить від наявності капсули – безкапсульні форми менш вірулентні.

Антигенна структура. Клебсієли містять капсульні К-і соматичні О-антигени. Поєднання цих нтигенів зумовлює приналежність культур до певних сероварів. В даний час відомо 80 К-і 11 О-антигенів.

Стійкість до факторів довкілля. Завдяки наявності капсули клебсієли стійкі та тривало зберігаються у ґрунті, воді, на предметах побуту. При 65 ° С гинуть протягом години. Чутливі до дії розчинів дезінфікуючих речовин (хлораміну, фенолу та ін.). Відзначається висока резистентність до антибіотиків.

Сприйнятливість тварин. У природних умовах викликають захворювання різних тварин: корів, свиней, коней (мастит, пневмонію, септицемію).

Джерела інфекції. При екзогенній інфекції джерелом інфекції є хвора людина та здоровий носій.

Шляхи передачі. Контактно-побутовий (брудні руки, предмети побуту). У дитячих закладах та лікарнях інфекція часто передається через білизну, інструментарій, іграшки.

Патогенез. Клебсієльози розвиваються здебільшого як вторинна інфекція в осіб із зниженою опірністю та у новонароджених (недоношених). Бактерії з верхніх дихальних шляхів та кишечника проникають у різні органи та кров та викликають гнійно-запальні процеси, сепсис, менінгіт.

Імунітет. Післяінфекційний імунітет нетривалий і розвивається лише щодо одного певного збудника (серовару).

Профілактика. Дотримання санітарно-гігієнічного режиму у пологових будинках, лікарнях, дитячих закладах. Специфічна профілактикаВідсутнє.

Лікуванняутруднено у зв'язку з високою стійкістю клебсієл до антибіотиків. Найбільш ефективним є застосування гентаміцину, канаміцину, іноді ампіциліну.

Мікробіологічне дослідження

Мета дослідження: виділення та ідентифікація клебсієл з патологічного матеріалу та об'єктів зовнішнього середовища.

Матеріал для дослідження

1. Мокрота.

2. Слиз із зіва, гній з вуха, що відокремлюється рани.

3. Випорожнення.

4. Змив з предметів навколишнього середовища.

Основні методи дослідження

1. Мікробіологічний.

2. Серологічний.

Хід дослідження

Другий день дослідження

Роблять мазки, фарбують за Грамом. За наявності амнегативних паличок відбирають слизові колонії (4-5) і пересівають їх на скошений агар та середовище Ворфель - Фергюсона (для виділення чистої культури) та на комбіноване середовище Рассела (або середовище з сечовиною) для визначення ферментативних властивостей та рухливості. У пробірку під пробку опускають смужки паперу, просочені реактивами визначення індолоутворення і сірководню.

Роблять висів із глюкозного агару на щільні живильні середовища для проведення (якщо знадобиться) додаткового дослідження.

Третій день дослідження

При зростанні нерухомої культури, що ферментує лактозу, глюкозу, сечовину, що не утворює індолу та сірководню, роблять посів на середовища з цитратом і малонатом і мазки для визначення наявності капсули. За наявності капсули ставлять реакцію аглютинації на склі з аглютинуючими К-сироватками. Переглядають додатковий посів на щільні живильні середовища. Можна видати орієнтовну відповідь: "Виділено клебсієли".

Капсульні бактерії- Клебсієли - виявляються в слизу зіва і носа, виділення з дихальних шляхів і легень, на об'єктах зовнішнього середовища. Вони відносяться до сімейства Enterobacteriaceae, роду Klebsiella. Клебсієли мають здатність утворювати капсули як в організмі, так і на живильних середовищах.

Клебсієли- товсті короткі палички розміром 2-5 * 0,3-1,25 мкм, із закругленими кінцями, нерухомі. Суперечка не утворюють. У мазках розташовуються попарно чи одиночно, зазвичай оточені капсулою, грам-негативні. Добре ростуть на простих живильних середовищах за нормальної температури 35—37°С. На м'ясо-пептонному агарі утворюють каламутні слизові колонії, у бульйоні інтенсивне помутніння. Характер зростання на агарі та ферментативні властивості наведені у табл. 6. Клебсієли не утворюють екзотоксинів, містять ендотоксини. Капсульні бактерії включають три антигени: капсульний (К-антиген), соматичний гладкий (О-антиген), соматичний шорсткий (R-антиген); К- та О-антигени є вуглеводами, R-антиген - протеїном.

Резистентність клебсієл досить висока: при кімнатній температурі вони зберігаються місяцями, при нагріванні до 65 ° С гинуть протягом години. Чутливі до дії різних речовин, що дезінфікують: розчину хлораміну, фенолу та ін.

Вірулентність клебсієл пов'язана з наявністю у них капсул. Бактерії, що втратили капсулу, стають невірулентними та при введенні в організм тварини швидко фагоцитуються. Капсульні варіанти викликають загибель мишей через 24-48 год після зараження з обсіменіння всіх органів.

У людини клебсієли призводять до захворювання на пневмонію, озену та риносклерому. Klebsiella pneumoniae (паличка Фрідлендера) викликає у людини бронхопневмонію, яка протікає з ураженням однієї або кількох часток легені.

Можливі зливні осередки та абсцеси у легкому. Висока летальність. Іноді клебсієли пневмонії можуть спричинити піємію, менінгіт, апендицит, цистит та змішані інфекції. Klebsiella ozaepae є збудником смердючого нежитю, який зустрічається в Іспанії, Індії, Китаї, Японії. Випадки озені відомі й у СРСР. При захворюванні уражаються слизова оболонка носа, глотки, трахеї, гортані, а також придаткові порожнини носа та носові раковини. Для озени характерно виділення в'язкого секрету, що підсихає з утворенням щільних скоринок, що утруднюють дихання і видають смердючий запах. Захворювання передається повітряно-краплинним шляхом. Klebsiella rhinoscleromatis (паличка Волковича - Фріша) викликає хронічний гранулематозний процес на шкірі, слизовій оболонці носа, трахеї, гортані, бронхів. Ріносклерома - малозаразна хронічна хвороба, яка зустрічається в Австрії, Польщі, а також у СРСР. Клебсієли риносклероми виявляються внутрішньоклітинно і позаклітинно в зіскрібках з вузликів (гранулем) тканин у вигляді коротких паличок, оточених капсулою.

Імунітет.Після перенесеного захворювання нестійкий.

Мікробіологічна діагностика. Здійснюється за допомогою мікробіологічного та серологічного методів. Досліджуваний матеріал: мокротиння (при пневмонії), слиз із зіва, носа, трахеї (при озені), шматочки тканини з гранульом (при риносклеромі).

Посіви виробляють на м'ясо-пептонний або гліцериновий агар, а також на диференціальні середовища-бромтимоловий або бромкрезоловий агар. Інкубують при 37°С. Через 24 год із вирослих слизових колоній роблять пересівання на скошений агар. Вивчають ферментативні властивості одержаної чистої культури.

Для диференціації капсульних бактерій рекомендується також вивчення будови молодих колоній на чашці з м'ясо-пептонним агаром. Палички пневмонії розташовані в молодих колоніях петлеподібно, палички риносклероми – концентрично, палички озени – концентрично та розсіяно (див. табл. 6).

Серологічна діагностика здійснюється шляхом постановки реакції зв'язування комплементу та реакції аглютинації. Як допоміжний метод використовують шкірну алергічну пробу, але менш специфічна, ніж серологічні реакції.

Профілактика та лікування. Своєчасне виявлення хворих та їх госпіталізація.

Для лікування призначають антибіотики (стрептоміцин, левоміцетин, неоміцин, тетрациклін), препарати сурми (солюсурмін), вакцинотерапію. Вакцину готують із капсульних штамів шляхом нагрівання.

Підручник складається із семи частин. Частина перша – «Загальна мікробіологія» – містить відомості про морфологію та фізіологію бактерій. Частина друга присвячена генетиці бактерій. У частині третій – «Мікрофлора біосфери» – розглядається мікрофлора навколишнього середовища, її роль у кругообігу речовин у природі, а також мікрофлора людини та її значення. Частина четверта – «Вчення про інфекцію» – присвячена патогенним властивостям мікроорганізмів, їх ролі в інфекційному процесі, а також містить відомості про антибіотики та механізми їх дії. Частина п'ята - "Вчення про імунітет" - містить сучасні уявлення про імунітет. У шостій частині – «Віруси та захворювання, які вони викликають» – представлені відомості про основні біологічні властивості вірусів і про ті захворювання, які вони викликають. Частина сьома – «Приватна медична мікробіологія» – містить відомості про морфологію, фізіологію, патогенні властивості збудників багатьох інфекційних захворювань, а також про сучасні методи їх діагностики, специфічну профілактику та терапію.

Підручник призначений для студентів, аспірантів та викладачів вищих медичних навчальних закладів, університетів, мікробіологів усіх спеціальностей та практичних лікарів.

5-те видання, виправлене та доповнене

Книга:

Рід Klebsiellaвідноситься до сімейства Enterobacteriaceae. На відміну від переважної більшості пологів цього сімейства, бактерії роду Klebsiellaмають здатність утворювати капсулу. До роду Klebsiellaвідноситься кілька видів. Основну роль патології людини їх грає вид Klebsiella pneumoniae, яка поділяється на три підвиди: K. pneumoniae subsp. pneumoniae, K. pneumoniae subsp. ozaenaeі K. pneumoniae subsp. rhinoscleromatis. Однак за останні роки виявлено нові види клебсієлл ( K. oxytoca, K. mobilis, K. planticola, K. terrigena), які поки що мало вивчені і роль їх у патології людини уточнюється. Назва роду дано на честь німецького бактеріолога Е. Клебса. Клебсієли постійно виявляють на шкірі та слизових оболонках людини та тварин. K. pneumoniae- Частий збудник внутрішньолікарняних інфекцій, у тому числі змішаних.

Клебсієли – грамнегативні еліпсоїдні бактерії, мають форму товстих коротких паличок із закругленими кінцями, розміром 0,3 – 0,6? 1,5 - 6,0 мкм, капсульна форма має розміри 3 - 5? 5 – 8 мкм. Розміри схильні до сильних коливань, особливо у клебсієлл пневмонії. Джгутики відсутні, бактерії суперечка не утворюють, частина штамів має вії. Зазвичай видно товсту полісахаридну капсулу; безкапсульні форми можуть бути отримані при дії на бактерії низької температури, сироватки, жовчі, фагів, антибіотиків та при мутаціях. Розташовані попарно чи поодинці.

Клебсієли добре ростуть на простих живильних середовищах, факультативні анаероби, хемоорганотрофи. Оптимальна температура зростання 35 – 37 °C, рН 7,2 – 7,4, але може зростати при 12 – 41 °C. Чи здатні рости на середовищі Симмонса, тобто використовувати цитрат натрію як єдине джерело вуглецю (крім K. rhinoscleromatis). На щільних живильних середовищах утворюють каламутні слизові колонії, причому в молодих 2 - 4-годинних колоніях бактерії озени розташовуються розсіяно-концентричними рядами, риносклероми - концентричними, пневмонії - петлеподібно, що легко визначається при мікроскопії колонії з малим збільшенням і може бути використане . При зростанні МПБ клебсієли викликають рівномірне помутніння, іноді зі слизовою плівкою на поверхні; на напіврідких середовищах зростання більш велике у верхній частині середовища.

Клебсієли ферментують вуглеводи з утворенням кислоти або кислоти та газу, відновлюють нітрати в нітрити. Желатин не розріджують, індолу та сірководню не утворюють. Мають уреазну активність, не завжди створюють молоко. Найменше біохімічна активність виражена у збудника риносклероми (табл. 26).

Таблиця 26

Біохімічні ознаки клебсієл

Примітка. (+) – ознака позитивна; (–) – ознака відсутня; d – ознака непостійна.

Антигени.У клебсієл є О-і К-антигени. По О-антигену клебсієли поділяють на 11 серотипів, а за капсульним К-антигеном - на 82. Серологічне типування клебсієл засноване на визначенні К-антигенів. Групоспецифічний антиген виявлений майже у всіх штамів клебсієл. Деякі К-антигени споріднені з К-антигенами стрептококів, ешерихій і сальмонел. Виявлено О-антигени, споріднені з О-антигенами E. coli.

Основними факторами патогенностіклебсієлл є К-антиген, що пригнічує фагоцитоз, та ендотоксин. Крім них, K. pneumoniaeможе продукувати термолабільний ентеротоксин – білок, за механізмом дії подібний до токсину ентеротоксигенної кишкової палички. Клебсієли мають виражені адгезивні властивості.

Епідеміологія.Клебсієльоз є найчастіше внутрішньолікарняною інфекцією. Джерелом служить хвора людина та бактеріоносій. Можливе як екзогенне, так і ендогенне зараження. Найбільш часті – харчовий, повітряно-краплинний та контактно-побутовий. Факторами передачі найчастіше є харчові продукти (особливо м'ясні та молочні), вода, повітря. В останні роки частота клебсієльозів зросла, одна з причин цього – підвищення патогенності збудника через зниження резистентності організму людини. Цьому сприяє також широке використання антибіотиків, що змінюють нормальне співвідношення мікроорганізмів у природному біоценозі, імунодепресантів і т. д. Слід зазначити високий рівень резистентності клебсієл до різних антибіотиків.

Клебсієли чутливі до дії різних дезінфікуючих речовин, при температурі 65 °C гинуть протягом 1 години. і навіть місяцями.

Патогенез та клініка.K. pneumoniaeнайчастіше викликають захворювання, що протікає за типом кишкової інфекції та характеризується гострим початком, нудотою, блюванням, болями в животі, діареєю, лихоманкою та загальною слабкістю. Тривалість хвороби – 1 – 5 днів. Клебсієли можуть викликати ураження органів дихання, суглобів, мозкових оболонок, кон'юнктиви, сечостатевих органів, а також сепсис та гнійні післяопераційні ускладнення. Найбільшою тяжкістю відрізняється генералізований септико-піємічний перебіг хвороби, що призводить нерідко до смерті.

K. ozaenaeвражає слизову оболонку носа та його придаткових пазух, викликає їх атрофію, запалення супроводжується виділенням в'язкого смердючого секрету. K. rhinoscleromatisвражає не тільки слизову оболонку носа, а й трахею, бронхи, горлянку, гортань, при цьому в ураженій тканині розвиваються специфічні гранульоми з подальшим склерозуванням та розвитком хрящеподібних інфільтратів. Течія захворювання хронічна, смерть може наступити на тлі обтурації трахеї або гортані.

Постінфекційний імунітетнеміцний, носить переважно клітинний характер. При хронічному захворюванні іноді розвиваються ознаки ГЧЗ.

Лабораторна діагностика.Основним методом діагностики є бактеріологічний. Матеріал для сівби може бути різним: гній, кров, ліквор, випорожнення, змив з предметів та ін. від жовтої або зелено-жовтої до блакитної. Далі у бактерій визначають рухливість посівом у середу Пєшкова та наявність орнітиндекарбоксилази. Ці ознаки не властиві клебсієлам. Остаточна ідентифікація полягає у вивченні біохімічних властивостей та визначенні серогрупи за допомогою реакції аглютинації живої культури з К-сироватками. Виділена чиста культура перевіряється на чутливість до антибіотиків.

Іноді для діагностики клебсієльозів може бути використана реакція аглютинації або РЗК зі стандартним О-клебсієльозним антигеном або з аутоштамом.

Діагностичне значення має чотириразове наростання титрів антитіл.

Профілактика та лікування.Специфічної профілактики не розроблено. Загальна профілактика зводиться до суворого дотримання санітарно-гігієнічних норм при зберіганні харчових продуктів, суворого дотримання асептики та антисептики в лікувальних закладах, а також дотримання правил особистої гігієни.

Лікування клебсієльозів за клінічними показаннями проводиться в умовах стаціонару. При ураженні кишечника антибіотики не показані. При явищах зневоднення (наявність збудника ентеротоксину) перорально або парентерально вводять сольові розчини. При генералізованих та млявих хронічних формах застосовують антибіотики (відповідно до результатів перевірки на чутливість до них), аутовакцини; проводять заходи, що стимулюють імунітет (аутогемотерапія, пірогенотерапія тощо).

Назва дано на честь Еге. Клебса. До роду Klebsiella відносяться два види: Klebsiella pneumoniae та Enterobacter. Перший вид поділений на два підвиди: К. ozenae, К. rinoscleromatis.

Морфологія та фізіологія.Представники виду Klebsiella pneumoniae – короткі, товсті, нерухомі грамнегативні палички, що утворюють на відміну від інших ентеробактерій виражені полісахаридні капсули. Клебсієли, як і інші ентеробактерій, невибагливі до живильних середовищ. Вони ферментують глюкозу з кислотою і газом і використовують її і цитрат як єдине джерело вуглецю, а аміак - джерело азоту. Підвиди клебсієл розрізняють за біохімічними ознаками. На відміну від виду Enterobacter, К. pneumoniae позбавлені джгутиків, не синтезують орнітиндекарбоксилазу, ферментують сорбіт. Диференціація різних видів клебсієл проводиться на підставі їх неоднакової здатності ферментувати вуглеводи, утворювати уреазу та лізиндекарбоксилазу, утилізувати цитрат та інші ознаки. Клебсієли утворюють слизові колонії.

Klebsiella

Антигени.Клебсієли містять О-і К-антигени. Всього відомо близько 11 О-антигенів та 70 К-антигенів. Останні представлені капсульними полісахаридами. Серологічна ідентифікація клебсієл заснована на їх антигенних відмінностях. Найбільше О- і К-антигенів містять К. pneumoniae. Деякі О-і К-антигени клебсієлл споріднені з О-антигенами ешерихій і сальмонел.

Патогенність та патогенез.Вірулентність клебсієлл пневмонії обумовлена ​​їх адгезією, пов'язаною з капсульним полісахаридом, пилками та білком зовнішньої мембрани, подальшим розмноженням та колонізацією ентероцитів. Капсула також захищає бактерії від дії фагоцитуючих клітин. При руйнуванні бактеріальних клітин звільняється ендотоксин (ЛПС). Крім того, клебсієли пневмонії секретують термостабільний ентеротоксин, що підсилює випіт рідини в просвіт тонкої кишки, що відіграє істотну роль у патогенезі ОКЗ, та мембранотоксин з гемолітичною активністю. Клебсієли є збудниками пневмонії, ОКЗ, риносклероми, озени. Вони також можуть викликати ураження сечостатевих органів, мозкових оболонок дорослих та дітей, токсико-септичні стани та ОКЗ у новонароджених. Клебсієли можуть викликати внутрішньолікарняні інфекції. Для пневмонії, викликаної К. pneumoniae, характерні утворення множинних вогнищ у часточках легені з подальшим їх злиттям та ослизненням ураженої тканини, що містить велику кількість клебсієл. Можливе утворення гнійних вогнищ в інших органах та розвиток сепсису. При склеромі, викликаній К. rhinoscleromatis, уражається слизова оболонка носа (риносклерома), носоглотки, трахеї, бронхів. У тканинах утворюються гранульоми з наступними склеротичними змінами. При озені, викликаної К. ozenae, уражається слизова оболонка носа та придаткових порожнин з наступною атрофією носових раковин та виділенням смердючого секрету.

Імунітет.Клебсієли викликають гуморальну та клітинну імунну відповідь. Однак антитіла, що утворюються, не володіють про-тектиними властивостями. Розвиток ГЗТ пов'язаний із внутрішньоклітинною локалізацією клебсієлл.

Екологія та епідеміологія.Клебсієльоз є антропонозною інфекцією. Джерело інфекції - хворі та носії. Зараження відбувається через респіраторні шляхи. Клебсієли входять до складу кишкового біоценозу, виявляються на шкірі та слизових оболонках. Вони стійкі до факторів навколишнього середовища і порівняно довго зберігаються у ґрунті, воді, у приміщеннях. У молочних продуктах виживають та розмножуються при зберіганні їх у холодильниках. При нагріванні гинуть вже за температури 65°С, чутливі до розчинів звичайних дезінфектантів.

Лабораторна діагностика.Діагноз ґрунтується на результатах мікроскопії мазків з досліджуваного матеріалу (мокрота, слиз з носа та ін.) та виділення чистої культури збудника. Диференціювання клебсієлл та їх ідентифікація проводиться за морфологічними, біохімічними та антигенними ознаками. Серодіагностику проводять у РСК із сироватками хворих та О-антигеном клебсієлл.

Профілактика та лікування.Специфічна вакцинопрофілактика клебсієльозів не розроблена. Для лікування застосовують антибіотики, з яких цефалоспорини третього покоління є найефективнішими.

КЛЕБСІЄЛИ (КАПСУЛЬНІ БАКТЕРІЇ)
Серед патогенних мікроорганізмів зустрічається група бактерій, для якої характерне утворення капсули не тільки в організмі хворої людини, а й на штучних живильних середовищах. Тому ці бактерії отримали назву капсульних. До них відноситься збудник запалення легень – диплобактерії Фрідлендера (Klebsiella pneumoniae), паличка риносклероми (Klebsiella rhinoscleromatis) та паличка озени (Klebsiella ozaenae).
Морфологія та тинкторіальні властивості. Всі мікроби цієї групи являють собою невеликі палички із закругленими кінцями від 1 до 3 мк у довжину та від 0,5 до 0,8 мк у товщину. Часто розташовуються парами. Суперечку не утворюють, джгутиків не мають. Забезпечені слизовою капсулою (див. рис. 19 на вклейці). Легко сприймають анілінові фарби, грамнегативні.
Культуральні та біохімічні властивості. На звичайних живильних середовищах капсульні бактерії дають пишне зростання. Оптимальна температура зростання 37 °. На агарових пластинках утворюються круглі слизові оболонки сірувато-білі колонії. За Ельбертом, палички озені в молодій колонії (3-4 годинного зростання) розташовуються концентрично, бактерії пневмонії петлеподібні. На скошеному агарі утворюють сірувато-білий наліт слизового характеру. У бульйоні викликають дифузне зростання з утворенням «а дні тягучого слизового осаду, але в поверхні - слизової плівки. Желатину не розріджують. Вуглеводи зброджують непостійно з утворенням кислоти, а іноді й газу. Паличка риносклероми не ферментує лактозу (Ельберт).
Патогенність для тварин та людини. До капсульних бактерій чутливі білі миші, які гинуть через 24-48 годин після парентерального введення ним культури.
Клебсієли пневмонії викликають у людини запалення легень, гнійні та фібринозні плеврити, перикардит, менінгіт, гайморит та ін. Паличка риносклероми вражає верхні дихальні шляхи. Хвороба виявляється у освіті хронічних інфільтратів хрящової консистенції у шкірі та слизової носа, на слизових оболонках глотки і гортані. Для ураженої тканини при риносклеромі характерна наявність великих клітин Микулича з ув'язненими збудниками.
Паличка озени викликає запалення слизової оболонки носа з виділенням в'язкого слизово-гнійного секрету, який швидко засихає з утворенням скоринок.
Мікробіологічна діагностика Лабораторна діагностика захворювань, викликаних капсульними бактеріями, ґрунтується на бактеріоскопічному, бактеріологічному та експериментальному дослідженні патологічного матеріалу (мокрота при пневмонії, слиз із носа при озені, шматочки тканин при риносклеромі). Для діагностики риносклером використовують реакцію зв'язування комплементу.
Епідеміологію капсульних інфекцій вивчено мало. Специфічної профілактики немає. Лікування здійснюється застосуванням стрептоміцину, тетрацикліну, неоміцину та препаратів сурми.

Увага, тільки СЬОГОДНІ!