Діагностикум сальмонельозний еритроцитарний антигенний vi рідкий. Діагностикум еритроцитарний сальмонельозний ві-антигенний

Набір реагентів Діагностикум Сальмонельозний ВІ-антигенний призначений для виявлення в сироватці крові людини специфічних антитіл до Ві-антигену тифу сальмонел в реакції пасивної гемаглютинації (РПГА).

1. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРУ

2.1. Принцип способу.

Діагностиком Сальмонельозний ВІ-антигенний є Ві-антиген, фіксований на поверхні еритроцитів. При взаємодії із сироватками, що містять антитіла до Ві-антигену, спостерігається феномен аглютинації еритроцитів.

2.2. СКЛАД НАБОРУ

Реагенти	Кількість
Діагностикум еритроцитарний сальмонельозний Ві-антигенний рідкий- являє собою 1% завись формалінізованих та сенсибілізованих Ві-антигеном сальмонел тифу еритроцитів барана у фосфатному буферному розчині (рН 7,2 + 0,2; концентрація 0,06 моль/л). Гомогенна суспензія коричневого кольору без пластівців; при відстоюванні утворюється 2 шари: щільний коричневий осад еритроцитів і прозора жовта надосадова рідина	1 флакон - 6 мл
Сироватка діагностична сальмонельозна адсорбована рецепторгомогенна маса від білого з коричневим відтінком до бежевого кольору	1 флакон – з 0,1 мл
1 % завись формалінізованих, несенсибілізованих еритроцитів барана- гомогенна суспензія коричневого кольору без пластівців; при відстоюванні утворюється 2 шари: щільний коричневий осад еритроцитів і прозора жовта надосадова рідина	1 флакон –
Розчин для розведення сироватки та постановки РПГА 0,9 % розчин натрію хлориду – прозора безбарвна рідина, рН від 6,5 до 7,5	2 флакони – по 8 мл
Планшет круглодонний для імунологічних реакцій одноразового застосування.складається з 8 рядів, кожен з яких включає 12 лунок з прозорим, безбарвним, круглим дном.	1 шт

1. Аналітичні та діагностичні характеристики.

3.1. Діагностикум повинен аглютинуватися в РПГА сироваткою діагностичної сальмонельозної адсорбованої рецептор Ві сухий у розведенні не менше ніж 1:160.

Умовним рівнем діагностичної характеристики сироватки крові здорових людей слід вважати розведення сироватки не вище 1:20.

3.2. Час проведення аналізу – 2 год.

3.3. Набір розрахований на 8 визначень.

1. ЗАПОБІЖНІ ЗАХОДИ

Працюючи з набором слід дотримуватися «Правила устрою, техніки безпеки, виробничої санітарії, протиепідемічного режиму та особистої гігієни під час роботи у лабораторіях (відділеннях, відділах) санітарно-епідеміологічних установ системи Міністерства охорони здоров'я СРСР (М., 1981 р.).

Аналізовані сироватки, а також реагенти, що перебувають з ними в контакті, слід розглядати як потенційно інфіковані, здатні тривалий час зберігати або передавати ВІЛ, вірус гепатиту або будь-який інший збудник вірусної інфекції — поводитися з ними слід обережно:

• працювати у гумових рукавичках;
• під час піпетування необхідно користуватися автоматичними дозаторами;
• при завершенні роботи аналізовані сироватки і реагенти, що знаходяться з ними в контакті, інструменти піддавати обробці дезінфікуючим розчином
• обладнання до та після роботи протирати 70% етиловим спиртом.

Аналізовані сироватки повинні бути інактивовані за температури 56 0 С протягом 30 хв.

Діагностична сальмонельозна адсорбована рецептор Ві, що входить до складу набору сироватка, суха інактивована.

Об'єктивні результати аналізу гарантуються під час таких умов:

• зберігання всіх реагентів набору здійснювати за температури від 2 до 8 0 С;
• не використовувати реагенти з терміном придатності, що минув;
• не використовувати реагенти набору за відсутності на їх упаковці відповідного маркування;
• для проведення РПГА використовувати реагенти, що входять лише до цього набору.

Vi-діагностикум

Діагностикум Ві

Vi-антигенний

Грамотно проведений аналіз крові допомагає виявити збудників різних складних захворювань в організмі на ранніх стадіях їх розвитку, а іноді навіть до клінічних симптомів хвороби. Дуже часто лікарі призначають пацієнтам проведення аналізу на реакцію аглютинації. Далі ми розберемося з тим, що це РПГА аналіз крові, коли він застосовується і про що може розповісти?

Принцип дії

Реакція непрямої гемаглютинації (названа також реакцією пасивної гемаглютинації він же РПГА, РНГА) відбувається у випадку, коли на адсорбовані антиген еритроцити впливають імунною сироваткою, що відповідає даному антигену.

Дослідженнями підтверджено, що у специфічності і чутливості цей спосіб значно перевищує інші серологічні аналізи. Тому її часто використовують для виявлення захворювань, спричинених бактеріями чи рикетсіями. Як антигени для такого аналізу можуть виступати бактеріальні екстракти, очищені антигени різних мікробів, компоненти бактеріальних вакцин.

Після потрапляння хвороботворної бактерії в організм людини, у ньому починають продукуватися специфічні та неспецифічні антитіла, формуючи певну імунну відповідь. У разі сифілісу, збудником якого вважається бліда трепонема, що належить до грамнегативних спірохетів, у крові людини виробляються нетрепонемні або трепонемні антитіла. На їхньому виявленні засновані лабораторні діагностичні дослідження, які мають підтвердити чи спростувати наявність збудника вірусу в організмі.

При РПГА еритроцити, поверхня яких адсорбувала антигени блідої трепонеми, у разі додавання сироватки з антитілами до трепонеми з матеріалу людини, зараженого сифілісом, склеюються один з одним, тобто відбувається їх аглютинація.

Достовірність дослідження

Важливо пам'ятати, що антитіла до блідої спірохети починають з'являтися в організмі інфікованих людей через 2-4 тижні після зараження, а в деяких випадках цей термін може розтягуватися до 6 тижнів.

З цієї причини чутливість аналізу на РПГА на первинній стадії розвитку хвороби становить близько 86%, що значно поступається точності діагностики хворих на двох наступних стадіях. Чутливість аналізу для таких пацієнтів, як і носіїв прихованого сифілісу, досягає 99-100%.

Однак реакція пасивної гемаглютинації має дуже високу специфічність, що досягає рівня 96-100%.

Це дає можливість застосовувати дане обстеження для підтвердження діагнозу у разі отримання позитивної реакції попереднього нетрепонемного дослідження, наприклад, реакції мікропреципітації РМП.

Враховуючи, що чутливість трепонемних аналізів, включаючи РПГА, суттєво перевищує чутливість нетрепонемних методів, такі обстеження стали дедалі частіше призначати під час проведення скринінгових аналізів на сифіліс. Однак при отриманні позитивної реакції скринінгового дослідження для уточнення діагнозу потрібно провести ще один специфічний (трепонемний) аналіз, але не РПГА.

Розшифровка аналізу

При додаванні сироватки з антитілами до трепонеми з матеріалу людини, інфікованого сифілісом, реагенту, з яким проводиться дослідження, відбувається аглютинація еритроцитів, внаслідок чого вони випадають в осад.

На кількість склеєних еритроцитів впливає рівень вмісту антитіл у сироватці. Тому пасивна гемаглютинація як показує присутність антитіл, а й дозволяє встановити їх кількість. Результат дослідження представлений рівнем титру антитіл.

Позитивна реакція свідчить про наявність збудника хвороби в організмі пацієнта. Однак у процесі проведення діагностики можлива поява хибнопозитивних реакцій, кількість яких статистично не перевищує рівня 0,05-2,5% від загальної кількості досліджень.

Позитивна реакція РПГА у людей, не інфікованих сифілісом, може виявлятись у разі наявності:

• системних захворювань сполучної тканини,
• в крові пацієнта антитіл до збудників, схожих на бліду трепонему,
• фізіологічних патологій, наприклад, інфаркту міокарда,
• гепатиту В або С,
• онкологічних захворювань,
• тифу, лептоспірозу, туберкульозу,
• ВІЛ-інфекції,
• бореліозу кліщової етіології,
• великих травм чи переломів,
• вагітності,
• у разі ін'єкцій наркотичних препаратів.

Найчастіше хибнопозитивні реакції супроводжуються низьким титром. Високі показники титру типові для вторинної стадії хвороби та раніше прихованого сифілісу. Однак вони можуть з'явитися і при помилково позитивної реакції у пацієнтів із злоякісними новоутвореннями.

У людей, які хоча б одного разу перехворіли на сифіліс, реакція РПГА до кінця життя залишається позитивною.

Рідкісними винятками можуть бути ті ситуації, коли хвороба була виявлена ​​на ранній стадії розвитку, після чого була проведена інтенсивна та ефективна терапія. Тому аналіз РПГА не може використовуватися для оцінки динаміки одужання або порівняльної діагностики ранньої чи пізньої стадії хвороби.

При отриманні позитивної реакції необхідно обстежити членів сім'ї хворої людини та людей, які вступали з нею в статевий контакт.

Негативна реакція може бути отримана у таких випадках:

• людина не хвора на сифіліс,
• неправильно взята кров для дослідження,
• після зараження пройшло 2-4 тижні, і вироблення антитіл ще не почалося.

У будь-якому разі результат дослідження необхідно оцінювати у поєднанні з додатковими лабораторними та анамнестичними показниками.

Кому показано аналіз?

Лікар може направити здавати кров на РПГА пацієнтів у таких випадках:

• при наявності клінічних проявів сифілісу: виразкових висипів, збільшених лімфовузлів, дифузної алопеції та інших,
• при підозрі на можливе інфікування у разі контакту з людьми, які вже захворіли,
• донорів, які бажають здати кров,
• людей, які проходять щорічні профілактичні огляди або оформляють санітарні книжки,
• пацієнтів з позитивною реакцією скринінгового тесту,
• перед госпіталізацією до стаціонарного лікувального закладу,
• при передопераційному обстеженні,
• виявлення збудників сальмонельозу, дифтерії, дизентерії методом проведення РПГА з відповідним діагностикумом.

Порядок проведення дослідження

На дослідження надсилають зданий пацієнтом зразок венозної крові. Для того, щоб не отримати помилкового висновку, пацієнту слід відповідально поставитися до підготовки до аналізу. Щоб результати тесту були достовірними, слід дотримуватись таких рекомендацій:

• Здавати аналіз слід лише натще.
• У день проведення аналізу можна пити мінеральну воду без газу у мінімальних кількостях.
• Щонайменше 30 хвилин до проведення аналізу не можна курити, а краще збільшити цей час до кількох годин.
• Пряма заборона накладається на вживання алкогольних напоїв.
• Пацієнти, яким необхідно регулярно застосовувати будь-які лікарські препарати, обов'язково повинні проінформувати про це лікаря, який направляє на обстеження.
• У разі нездужання або поганого самопочуття потрібно повідомити медсестру, яка виконує забір крові, або лікаря амбулаторії, де потрібно здати аналіз.

Поставтеся відповідально не лише до питання, де здати аналіз, а й до підготовки до обстеження.

Діагностика інших інфекційних захворювань

Не слід думати, що таке дослідження, як РПГА, може проводитися тільки для виявлення в організмі збудника сифілісу.

Аналіз із сальмонельозним діагностикумом дозволяє виявити наявність інфекції в травній системі – сальмонели. Починаючи з четвертого дня після зараження, організм продукує антитіла до антигенів сальмонели, виявити які допомагає метод РПГА. Негативний результат говорить про відсутність інфекції, а про її наявність скаже позитивний титр, що наростає від 1:200 до 1:800 у гострій фазі.

Метод проведення РПГА з дифтерійним маркером дозволяє діагностувати дифтерію та оцінити імунітет після проведення вакцинації. Антитіла починають вироблятися імунною системою вже наступного після зараження, і залишаються в організмі протягом декількох тижнів. Чутливість даного аналізу перевищує бактеріологічний спосіб дослідження. Титр 1:80 підтверджує наявність дифтерії у організмі.

Дизентерійний маркер при РПГА найточніше виявляє шигельоз (бактеріальну дизентерію), навіть у порівнянні з методом лабораторної діагностики за допомогою бактеріального посіву. Якщо хворий не отримує якісного лікування, то хвороба перетікає у хронічний процес, у якому часто трапляються рецидиви. Аналіз дозволяє діагностувати гостру та хронічну фазу діареї, виявити збудника дизентерії, відрізнити бактеріальний шигельоз від колоректального раку, ендокринних порушень чи запалення товстої кишки. Негативна реакція говорить про відсутність бацили, а підтверджує її наявність титр 1:80 для малюків або 1:320 для дорослих.

Проведення дослідження з коровим маркером дозволяє визначити захворювання на кір. Таке обстеження може стати альтернативою аналізу РТГА, що часто проводиться для діагностики кору.

Отже, РПГА аналіз крові – що це? Підсумовуючи, можна сміливо стверджувати, що це сучасний, високочутливий та достовірний метод діагностики різних захворювань бактеріологічної етіології.

Вконтакте

Реєстраційне посвідчення № РЗН 2016/3905 від 04.04.2016 р.

Призначення

Набір реагентів "Діагностикум сальмонельозний еритроцитарний Vi-антигенний для РПГА" (СЕД-Vi) призначений для виявлення антитіл до Vi-антигену збудника черевного тифу в сироватках крові людей реакцією пасивної гемаглютинації (РПГА).

Характеристика набору

Принцип дії

За наявності антитіл до збудника черевного тифу спостерігається гемаглютинація сенсибілізованих Vi-антигеном курячих еритроцитів, що призводить до утворення на дні U-подібних лунок планшета "парасолька" з еритроцитів, що осіли. За відсутності антитіл до збудника черевного тифу осілі еритроцити утворюють "крапку".

Склад набору

Найменування реагенту	Опис	Кількість у наборі
Діагностикум еритроцитарний сальмонельозний Vi-антигенний, сухий 6% (СЕД)	Формалінізовані курячі еритроцити, сенсибілізовані Vi-антигеном S.typhi. Суха гігроскопічна маса коричневого кольору. Після розчинення – суспензія червоно-коричневого кольору.	1 фл., з 0,6 мл
Сироватка діагностична сальмонельозна адсорбована, рецептор Vi, суха (у розведенні 1:20, (К+))	Кроляча сироватка сальмонельозна адсорбована, рецептор Vi, у розведенні 1:20. Суха гігроскопічна маса пориста білого кольору. Після розчинення – прозора рідина жовтуватого кольору або безбарвна.	1 фл., з 0,3 мл
Розріджувач досліджуваних проб (РІП)	Прозора рідина синьо-фіолетового кольору.	1 фл., 10 мл
Буферний фосфатний розчин (ФБР)	Прозора безбарвна рідина.	1 фл., 10 мл
Планшет полімерний для імунологічних реакцій одноразового застосування.	Планшет полімерний для імунологічних реакцій одноразового застосування із прозорого безбарвного полістиролу.	1 шт.

Діагностичні характеристики

Діагностикум повинен аглютинуватися в РПГА сироваткою діагностичної сальмонельозної адсорбованої, рецептор Vi, сухий (у розведенні 1:20), до титру, вказаного на етикетці сироватки. Умовним рівнем діагностичної характеристики сироватки крові здорових людей слід вважати розведення сироватки не вище 1:20. Час проведення аналізу – 3040 хвилин. Набір розрахований на дослідження 42 сироваток крові у варіанті скринінгу або 10 сироваток крові у варіанті їх титрування.

Запобіжні заходи

Набір призначений тільки для діагностики in vitro. Вхідні компоненти набору речовини інактивовані і безпечні. При роботі з набором слід дотримуватись СП 1.3.2322-08 та СанПіН 2.1.7.2790-10.

Додаткове обладнання та матеріали

Обладнання, матеріали, розчини:

• дозатори піпеткові 1-канальні з об'ємом дозування, що варіюється, 5 - 40 мкл; 40 - 200 мкл; 200 - 1000 мкл і 1000 - 5000 мкл;
• дозатори піпеткові 8- або 12-канальні з об'ємом дозування, що варіюється, 5 - 40 мкл і 40 - 200 мкл;
• вода дистильована (ГОСТ 6709-72).

Аналізовані зразки

Досліджувані зразки сироватки крові зберігають при температурі від 2 до 8 ° С не більше 3 діб від моменту взяття крові. Допускається зберігання сироватки в замороженому стані за температури не вище мінус 18 °С не більше 1 року. Перед використанням зразки розморожують при температурі від 16 до 25 °З перемішують струшуванням. Повторне заморожування не допускається. Не можна використовувати зразки з бактеріальним проростом та гемолізом. Перед постановкою реакції випробувані сироватки прогрівають при 56 С протягом 30 хвилин.

Проведення аналізу

Підготовка контрольної діагностичної сироватки (К+)

Готують робочий розчин сироватки діагностичної адсорбованої сальмонельозної, рецептор Vi, сухий (у розведенні 1:20) з 0,3 мл (К+). Для цього до вмісту флакона К+ додають 0,3 мл фосфатного буферного розчину (ФБР). Кількість сироватки, що залишилася, можна аліквотувати і зберігати в замороженому стані при температурі не вище мінус 18 °С не більше 6 місяців.

Підготовка діагностикуму еритроцитарного сальмонельозного (СЕД)

Для приготування робочого розведення суспензії діагностикуму еритроцитарного сальмонельозного до вмісту флакона з сухим 6% СЕД додають 0,6 мл дистильованої води та залишають для гідратації на 2 години при температурі від 16 до 25 °С. Потім до розчину додають 2,4 мл буферного фосфатного розчину (ФБР). Робочий розчин зберігають за нормальної температури від 2 до 8 °З трохи більше 1 міс. Заморожування не допускається.

Постановка РПГА при скринінгу сироваток крові

Сироватки крові для скринінгового дослідження розводять у лунках планшета наступним чином:

• попередні розведення 1:20 готують у перших лунках планшета, вносячи до них спочатку 190 мкл розчину РІП, потім - по 10 мкл досліджуваних сироваток. Кожну сироватку вносять окремим наконечником і ретельно піпетують (при цьому колір розчину в лунках після додавання сироваток повинен змінитися з синьо-фіолетового на зелений);
• скринінгові розведення 1:40 готують у других лунках, вносячи в них спочатку 25 мкл розчину ФБР, а потім по 25 мкл попередньо розведених сироваток і ретельно піпетують.

При кожній постановці РПГА необхідно проводити контрольне визначення титру К+. Для цього 8 лунок довгого ряду вносять по 50 мкл розчину ФБР. Потім у першу лунку вносять 50 мкл робочого розчину К+ (1:20), ретельно піпетують і переносять у наступні лунки по 50 мкл, отримуючи 2-кратні розведення від 1:40 до 1:5120. Ще 4 лунки вносять по 50 мкл розчину ФБР контролю СЕД відсутність спонтанної гемагглютинации.

У всі лунки планшета зі скринінговими розведеннями досліджуваних сироваток (крім перших, що містять РІП) і контролю вносять по 25 мкл СЕД. Суспензію СЕД у флаконі або ванночці перед використанням перемішати!Планшет ретельно струшують і залишають при температурі від 16 до 25 ° С на 30 - 40 хвилин до осідання еритроцитів у контролі.

Постановка РПГА при титруванні досліджуваних сироваток крові

Титрування досліджуваних сироваток та робочого розчину К+ проводять у коротких рядах планшета. Ще один короткий ряд використовують для контролю на відсутність спонтанної гемаглютинації СЕД.

У перші лунки коротких рядів для титрування сироватки, що досліджується, вносять 180 мкл розчину РІП. У решту лунок вносять по 50 мкл розчину ФБР.

У лунки з розчином РІП вносять 20 мкл досліджуваних сироваток (отримують розведення 1:10). Кожну сироватку вносять своїм наконечником і ретельно піпетують (колір розчину в лунках має змінитися з синьо-фіолетового на зелений). Потім з перших лунок переносять по 50 мкл наступні лунки рядів, отримуючи дворазові розведення від 1:20 до 1:1280. Наприкінці титрування з останніх лунок розчини об'ємом 50 мкл видаляють.

При кожній постановці РПГА необхідно проводити контрольне визначення титру К+. Для цього 8 лунок довгого ряду вносять по 50 мкл розчину ФБР. Потім у першу лунку вносять 50 мкл робочого розчину К+ (1:20), ретельно піпетують і переносять у наступні лунки по 50 мкл, отримуючи 2-кратні розведення від 1:40 до 1:5120.

Для контролю діагностикуму відсутність спонтанної гемагглютинації в усі лунки короткого ряду вносять по 50 мкл розчину ФБР.

У всі лунки (крім перших лунок кожного ряду досліджуваних сироваток, що містять РІП) вносять по 25 мкл СЕД. Суспензію СЕД у флаконі або ванночці перед використанням перемішати! Планшет ретельно струшують і залишають при температурі від 16 до 25 ° С на 30-40 хвилин до повного осідання еритроцитів у контролі.

Облік та інтерпретація результатів

Облік результатів при скринінгу сироваток крові

Облік результатів проводять за умовною шкалою чотирьох хрестів. Титром сироватки вважається її розведення, що дає гемаглютинацію не менш як на 3 (+++) хреста.

• ++++ (4+) - аглютиновані еритроцити утворюють на дні лунки перевернутий "парасольку", краї його опадають;
• +++ (3+) - аглютиновані еритроцити утворюють на дні лунки перевернутий "парасольку", краї його рівні;
• ++ (2+) - поряд з аглютинованими еритроцитами на дні лунки є осад у вигляді невеликого «кільця» з неаглютинованих еритроцитів;
• + (1+) - більшість еритроцитів не аглютиноване і осідає у вигляді невеликого «кільця»;
• (-) - Неаглютиновані еритроцити утворюють на дні лунки «крапку».

Позитивним результатом вважають гемаглютинацію навантажених Vi-антигеном еритроцитів не менше ніж на 3 хрести (+++).

Контролем якості діагностикуму служать 4 лунки контрольного ряду, які вносили тільки розчин ФБР і СЕД. У цих лунках не повинно бути спонтанної гемаглютинації – негативна реакція (-). Інакше слід повторити дослідження. Якщо при повторній постановці з'являється гемаглютинація, препарат не використовується.

Сироватки з негативним результатом слід вважати антитіл, що не містять, до Vi-антигену в діагностичному титрі 1:40 і нижче.

Сироватки, що дають позитивний результат у розведенні 1:40, слід досліджувати повторно у варіанті титрування сироватки для встановлення її титру.

Облік результатів при титруванні сироваток крові

Титром сироватки вважається її розведення, що дає гемаглютинацію не менше ніж на 3 (+++) хреста.

Контролем якості діагностикуму служать лунки низки контролю СЕД. У цих лунках не повинно бути спонтанної гемаглютинації – негативна реакція (-). Інакше слід повторити дослідження. Якщо при повторній постановці з'являється гемаглютинація, препарат не використовується.

Початком діагностикуму, що діє, є Ві-антиген, фіксований на поверхні еритроцитів. При взаємодії із сироватками, що містять антитіла до Ві-антигену, спостерігається феномен аглютинації еритроцитів.

Форма випуску

Випускається у наборі 1 флакон з діагностикумом - 3 мл, діагностична сироватка сальмонельозна адсорбована рецептор Ві Суха у вигляді ліофілізату з 0,1 мл 1 флакон; 0,9% розчин натрію хлориду - 2 флакони по 8 мл; планшет для імунологічних реакцій одноразового застосування – 1 шт.

склад

Реагенти Кількість:

Діагностикум еритроцитарний сальмонельозний Ві-антигенний, який являє собою 0,75% завись формалінізованих та сенсибілізованих Ві-антигеном еритроцитів людини Про (I) групи крові у фос-фатному буферному розчині (рН-7,2±0,2; концентрація - 0,06 моль/л). Консервант – формалін. Гомогенна суспензія коричневого кольору без пластівців; при відстоюванні утворюється 2 шари: щільний коричневий осад еритроцитів і прозора жовтувата надосадова рідина 1 флакон-3 мл.

Сироватка діагностична сальмонельозна адсорбована рецептор Ви суха - гомогенна маса від білого з коричневим відтінком до бежевого кольору. 1 флакон – з 0,1 мл.

Підтримуючий розчин – 0,9 % розчин натрію хлориду – прозора безбарвна рідина, рН від 6,5 до 7,5. 2 флакони – по 8 мл.

Планшет круглодонний для імунологічних реакцій одноразового застосування - складається з 8 рядів, кожен з яких включає 12 лунок з прозорим, безбарвним, круглим дном. 1 шт.

Діагностикум повинен аглютинуватися в РПГА сироваткою діагностичної сальмонельозної адсорбованої рецептор Ві сухий у розведенні не нижче 1/2 їх титру, але не менше ніж 1/160. Діагностикум не повинен аглютинуватися сироватками діагностичними сальмонельозними адсорбованими сухими для РА: Про рецептор 9 - у розведенні 1:40 і вище, Н рецептор d - у розведенні 1:10 і вище.


Показання для застосування

Призначений для виявлення в сироватці крові людини специфічних антитіл до Ві-антигена сальмонел тифу реакції пасивної гемаглютинації (РПГА).

Режим дозування та спосіб застосування

Як аналізовані зразки використовують зразки сироватки крові людини.
Аналізований зразок зберігають в умовах, що запобігають бактеріальному проросту при температурі від 2 до 8 °С не більше 72 годин. Допускається заморожування, аналізовані заморожені зразки перед дослідженням розморозити при кімнатній температурі.
Аналіз зразків з вираженим гемолізом, бактеріальним проростом, а також довго зберігалися без заморожування або повторно заморожуються не допускається.

ПРОВЕДЕННЯ АНАЛІЗУ
Приготування розчинів для РПГА.
Флакони з сироваткою діагностичної сальмонельозної адсорбованої рецептор Ві сухий розкрити і додати 1 мл 0,9% розчину натрію хлориду, що додається, отримавши, таким чином, розведення 1:10, що є робочим розведенням.
Розкритий флакон із сироваткою діагностичної сальмонельозної адсорбованої рецептор Ві сухий при розведенні 1:10 у закритому вигляді можна зберігати при температурі від 2 до 8 °С протягом одного місяця.
Діагностикум готовий до застосування. Перед розкриттям флакон з діагностикумом необхідно обережно струснути до одержання гомогенної суспензії. Під час роботи струшування рекомендується повторювати.
Розкритий флакон із діагностикумом у закритому вигляді можна зберігати при температурі від 2 до 8 °С протягом одного місяця.
0,9% розчин хлориду натрію. Готовий до застосування.

Проведення РПДА.
При контролі будь-якої кількості аналізованих сироваток обов'язковою є постановка 1 ряду аглютинації з сироваткою діагностичної сальмонельозної адсорбованої рецептор Ві сухий.
Для постановки РПГА використовують планшет для імунологічних реакцій одноразового застосування. Готують дворазові серійні розведення аналізованих сироваток в 0,05 мл додається 0,9% розчину натрію хлориду починаючи з 1:10 до 1:2560 і 1 ряд дворазового серійного розведення сироватки діагностичної сальмонельозної адсорбованої рецептор Ві сухий, починаючи до подвоєного титру, зазначеного на етикетці флаконів даної сироватки.
У кожну з лунок із розведеннями сироватки додають по 0,025 мл діагностикуму.

Обов'язковими контролюми є:
1. Контроль сироватки діагностичної сальмонельозної адсорбованої рецептор
Ви сухої та аналізованої сироватки, які у розведенні 1:10 в обсязі 0,05 мл вносять
у дві контрольні лунки.
2. Перевірка відсутності спонтанної аглютинації діагностикуму, для чого дві лунки, що містять по 0,05 мл 0,9 % розчину натрію хлориду додають по 0,025 мл діагностикуму.
Планшет струшують і поміщають на 1,5-2,0 год термостат при температурі (37+1) °С.

ОБЛІК РЕЗУЛЬТАТІВ
Облік реакції здійснюється за чотирихресною системою:
4+ - всі еритроцити аглютиновані та рівномірно покривають дно лунки;
3+ - аглютиновані майже всі еритроцити. На їх тлі є малопомітне кільце з неаглютинованих еритроцитів, що осіли;
3+ - поряд з рівномірним аглютинатом на дні лунки є осад з неаглютинованих еритроцитів у вигляді маленького «кільця» або «гудзика»;
1+ - більшість еритроцитів неаглютинована і осіла у вигляді маленького «кільця» з рівними краями або «гудзики» в центрі лунки.
(-) – ознак аглютинації немає. Еритроцити осіли у вигляді маленького «кільця» з рівними краями або гудзики в центрі лунки або дна пробірки.
Позитивною вважається реакція не менш як на 3+.
Результати, отримані в РПГА можна вважати достовірними у тому випадку, якщо сироваткою діагностичної сальмонельозної адсорбованої рецептор Ві сухий 1:10 отримано позитивний результат у розведенні не нижче ніж 14 їх титрів, а в 2 лунках з аналізованої сироваткою і сироваткою діагностичної сальмонел сухий у розведеннях 1:10 не повинно бути пластівців та осаду; у лунках з 0,9 % розчином натрію хлориду та діагностикумом – реакція негативна.
Титром антитіл аналізованої сироватки вважається останнє розведення сироватки, яка ще дає позитивну аглютинацію еритроцитів.
Інтерпретація результатів.
Особи, у яких виявляються антитіла до Ві-антигена у розведенні 1:40 і вище, розглядаються як підозрілі на хронічне черевнотифозне бактеріоносійство. Однак, у зв'язку з тим, що діагноз не може бути поставлений лише на підставі серо-логічного дослідження, необхідне поглиблене бактеріологічне обстеження.

Запобіжні заходи при застосуванні

Діагностична сальмонельозна адсорбована рецептор Ві, що входять до складу набору сироватка, суха інактивована.
Аналізовані сироватки повинні бути інактивовані при температурі 56° протягом 30 хвилин.
Аналізовані сироватки, а також реагенти, обладнання та інструменти, що знаходяться з ними в контакті, можуть являти собою потенційно інфекційний матеріал, і поводитися з ним слід обережно:
- працювати у гумових рукавичках;
- під час піпетування необхідно користуватися автоматичними пристроями;
- при завершенні роботи аналізовані сироватки і реагенти, що знаходяться з ними в контакті, інструменти піддавати обробці дезінфікуючим розчином;
- Обладнання до і після роботи протирати 96% етиловим спиртом.

Об'єктивні результати аналізу гарантуються під час таких умов:
- Зберігання всіх реагентів набору здійснювати при температурі від 2 до 8 ° С;
- не використовувати реагенти з терміном придатності, що минув;
- не використовувати реагенти набору за відсутності на їх упаковці відповідного маркування;
- для проведення РПГА використовувати реагенти, що входять лише до цього набору.

2.діагностикум

4.з зруйнованих мікробів (виділення конкретного Аг)

Еритроцитарний HBs-діагностикум

2.діагностикум

4. завись ер.барана оброблених таніном і обложеними а\г HBs

5.для виявлення специфічних антитіл у сироватці крові

Діагностикум GP120

2.діагностикум

4.окремі а\г возб. ВІЛ

5.для виявлення а\т до ВІЛ

правцевий еритроцитарний діагностикум

2.діагностикум

4.свесь ер.барана, оброблені таніном з а\г возб.правця

5.для виявлення специфічних антитіл у сироватці крові (до возб.правця

Антиген кардіоліпіновий для мікропреципітації.

2.діагностикум

4.витяж.ліпід.фракцій із серця здорового бика

5.для виявлення специфічних антитіл у сироватці крові

Ультраозвучений трепонемний антиген

2.діагностикум

4.з убитих еб. сифілісу

5.для виявлення специфічних антитіл у сироватці крові

Корпускулярний туляремійний діагностикум

2.діагностикум

4.з окремих частинок збудника

5.для виявлення специфічних антитіл у сироватці крові

Дизентерійний діагностикум

2.діагностикум

4. завись із убитих м\о

5.для виявлення специфічних антитіл у сироватці крові пацієнта

Еритроцитарний діагностикум із шигел Зонне

2.діагностикум

4.свесь ер.барана, оброблені тонином

5.для виявлення специфічних антитіл у сироватці крові

Діагностикум із сальмонел тифімуріум

2.діагностикум

4.з убитих еб. сальмонел

5.для виявлення специфічних антитіл у сироватці крові

Сироватки

Протигангренозна кінська сироватка 5000 МО

2. сироватка

4.з сироватки крові гіперімм.коней анатоксином збудж.газової гангрени

6.парентерально, після проби з глобуліном 1:100

Імуноглобулін людини нормальний

2. сироватка

4. із сироватки крові донора

5. форм-е пас. специфічні. придб. мистецтв. імм

6.парентерально

Преципітуюча сибірка сироватка

2. сироватка

4. з сироватки крові гіперімунізованих тварин а\г возб.сиб. виразки

6. реакція преципітації (РП)

Ботулінічна сироватка тип – А 400 МО

2. сироватка

5.для виявлення специфічного антигену в досліджуваному матеріалі

6. реакція нейтралізації (РН)

Протисибірковий глобулін

2. сироватка

4.з сироватки крові гіперімунізованих тварин а\г возб.сиб.виразки

5. форм-е пас. специфічні. придб. мистецтв. імм

6.парентерально

Гемолітична сироватка

2. сироватка

4. із сироватки гіперімунізованих тварин еритроцитами тварин. ін.

5.для виявлення специфічного антигену в досліджуваному матеріалі

Холерна аглютинуюча сироватка Огава

2. сироватка

4.з сироватки крові гіперімунізованих тварин

5.для виявлення специфічного антигену в досліджуваному матеріалі

Люміністична туляремійна сироватка

2. сироватка

4.з сироватки крові гіперімунізованих тварин а\г возб.туляр.

5.для виявлення специфічного антигену в досліджуваному матеріалі

Імуноглобулін проти кліщового енцефаліту людини

2. сироватка

4. із сироватки крові донора

5. форм-е пас. специфічні. придб. мистецтв. імм

6.парентерально

ЕСНО-діагностична сироватка

2. сироватка

4. із сироватки крові гіперімунізованих тварин вірусами ЕСНО

5.для виявлення специфічного антигену в досліджуваному матеріалі

Імуноглобулін людини проти гепатиту В

2. сироватка

4. із сироватки крові донора, вакцинованого проти гепатиту В

5. форм-е пас. специфічні. придб. мистецтв. імм

6.парентерально

Антиглобулінова сироватка, мічена перкоксидазою

2. сироватка

4.з сироватки крові гіперімунізованих тварин

5.для виявлення специфічного антигену в досліджуваному матеріалі (ВІЛ)

Антирабічний імуноглобулін

2. сироватка

4. із сироватки крові донора

5. форм-е пас. специфічні. придб. мистецтв. імм