Mykózy metódy mikrobiologickej diagnostiky mykóz. Laboratórna diagnostika plesňových ochorení

Laboratórna diagnostika hubových chorôb je založená na detekcii huby a určení jej rodu a typu. Pozostáva z dvoch hlavných etáp: mikroskopické a kultúrne štúdie.

Mikroskopické vyšetrenie

Mikroskopické vyšetrenie je prvým a dôležitým článkom pri potvrdení predbežnej diagnózy.

Úspešnosť mikroskopického vyšetrenia do značnej miery závisí od správneho odberu patologického materiálu. Na mikroskopické vyšetrenie je potrebné vybrať vlasy, ktoré majú viditeľné známky poškodenia plesňami (matné, zlomené, zhrubnuté). Chĺpky, ktorých vzhľad sa zmenil, sa odstráni epilačnou pinzetou. Na detekciu jednotlivých postihnutých chĺpkov mikrosporiou môžete použiť žiarivku s Woodovým filtrom (zeleno-modrá žiara).

Pri výbere postihnutých vlasov je možné použiť množstvo ďalších charakteristík. Vlasy postihnuté mikrospórami majú na základni sivú pošvu z vonkajších spór. V prípade chronickej trichofytózy sa vo folikule nachádzajú krátke sivé postihnuté chĺpky zakrivené vo forme „čiarok“ a „otáznikov“, ako aj „čierne bodky“ (zhrubnuté čierne postihnuté chĺpky odlomené pri ústí folikulu). hrúbka šupín. V prípade infiltratívne-hnisavej trichofytózy na mikroskopické vyšetrenie okrem postihnutých vlasov môžete použiť hnis a kôry z lézie.

Z kožných lézií s mikrosporiou, trichofytózou a mykózou inguinálnych záhybov treba zoškrabať šupiny z periférnej zóny lézie, kde sa huba nachádza vo väčšom množstve. Vellus vlasy sú zoškrabané spolu s kožnými vločkami.

Pri vyšetrovaní postihnutých vlasov mikrosporiou a trichofytózou sa venuje pozornosť umiestneniu spór (vo vnútri alebo mimo vlasu) a ich veľkosti. Tieto údaje umožňujú v niektorých prípadoch objasniť diagnózu, klinickú formu mykózy a epidemiológiu.

Pri interdigitálnej forme mykózy chodidiel sa na mikroskopické vyšetrenie využívajú kožné šupiny a odrezky macerovaného stratum corneum. Oblasť nechtu, ktorú je potrebné odobrať na mikroskopické vyšetrenie, závisí od formy onychomykózy. Pri povrchovej forme je potrebné oškrabať povrch nechtovej platničky.

Pri najčastejšej distálnej-laterálnej forme sa používa zoškrab z nechtového lôžka, spod platničky (subungválna hyperkeratóza) s časťou odrezanej zmenenej nechtovej platničky. Pri proximálnej subunguálnej forme sa používajú špeciálne metódy na odber materiálu (vŕtanie okien pomocou vŕtačky, biopsia nechtov).

Pri skvamózno-hyperkeratotickej forme mykózy chodidiel sú šupiny zoškrabané z povrchu chodidla. Pri dyshidrotickej forme mykózy chodidiel sú kryty pľuzgierov odrezané na vyšetrenie.

Technika prípravy materiálu na mikroskopické vyšetrenie vlasov . Na podložné sklíčko sa nanesie malá kvapka 30 % KOH a pomocou pitevnej ihly sa do nej vložia postihnuté vlasy. Kvapka s vlasmi sa mierne zahrieva nad plameňom alkoholovej lampy, kým sa nad hladinou kvapaliny neobjaví para alebo kým pozdĺž okraja kvapky alkálie nevypadne okraj kryštálov. Po zakrytí krycím sklíčkom sa prebytočná alkália odstráni filtračným papierom. Liečivo sa skúma najprv pod malým a potom pod vysokým (x 400) zväčšením mikroskopu.

Šupinky kože a nechtov . Tenké nechtové šupiny na mikroskopické vyšetrenie sa umiestnia na podložné sklíčko v kvapke 30 % KOH a zahrievajú sa, pričom sa pri vyparovaní pridáva zásada. Ochladená, nezafarbená vzorka sa prikryje krycím sklíčkom a skúma sa pod mikroskopom.

Hrubé šupiny kože a nechtov sa umiestnia do centrifugačnej skúmavky a naplnia sa niekoľkými kvapkami 30 % KOH. Skúmavka sa zahreje do varu a nechá sa 20-30 minút. Časť zmäkčeného materiálu sa prenesie na podložné sklíčko pomocou sklenenej tyčinky, pritlačí sa zápalkou, kým sa neobjaví „oblak“, potom sa skúma pod mikroskopom.

Hnis . Kvapka hnisu sa zmieša s kvapkou alkoholu a pol na pol glycerínu a vyšetrí sa v natívnom prípravku.

Kultúrna diagnostika

Na definitívne objasnenie diagnózy a objasnenie epidemiológie sa vykonáva kultúrna diagnostika. Zahŕňa získanie kultúry huby s následným mikroskopickým vyšetrením.

Postihnuté vlasy, šupiny (koža a nechty), pľuzgiere alebo hnis sa naočkujú na umelé živné médium. Vzhľadom obrovských kolónií na Petriho miskách je možné získať predstavu o rode patogénu (Microsporum, Trichophyton, Epidermophyton), jeho type (L. canis alebo ferrugineum, T. violaceum, verrucosum alebo sadra). Konečné objasnenie rodu a druhu huby je možné až na základe mikroskopického vyšetrenia výslednej kultúry.

Laboratórna diagnostika povrchovej kandidózy

Na laboratórne testovanie na kvasinky podobné hubám je potrebný čerstvý materiál. Na mikroskopické vyšetrenie, v závislosti od klinických prejavov a lokalizácie lézií, kožné šupinky, škrabance z nechtov, kvapka hnisu spod nechtového záhybu, belavé ložiská z postihnutých oblastí ústnej sliznice a vonkajších genitálií, pošvových stien, môžu sa odobrať škrabky zo sliznice.membrány močovej trubice, ako aj výplachy z červeného okraja pier, postihnutých oblastí kože veľkých a malých záhybov.

V závislosti od lokalizácie lézie a povahy klinických prejavov sa materiál na výskum odoberá vatovým tampónom, skalpelom, slučkou atď. Šupiny kože a nechtov, odrezky epidermy a škrabance zo sliznice sú pre- ošetrené 30 % KOH. Patologický materiál sa vyšetruje v nefarbených alebo zafarbených preparátoch.

V prvom prípade sa materiál zmieša s rovnakým množstvom alkoholu a glycerínu. Pri farbení podľa Grama sa kvasinkové bunky a pseudomycélium javia ako tmavofialové, podľa Ziehl-Neelsen - modré a podľa Romanovského-Giemsa - ružovofialové. V tomto prípade je charakteristickým znakom kvasinkovej bunky pučanie - objavenie postavy „presýpacích hodín“. Odber materiálu zo sliznice ústnej dutiny, pohlavných orgánov, z kože červeného okraja pier, z kútikov úst, z kože veľkých a malých záhybov sa vykonáva sterilným tampónom. Po odbere materiálu sa tampón vloží do ďalšej sterilnej skúmavky s tekutou mladinou. Skúmavka s tampónom sa posiela do mikrobiologického laboratória. Izolácia čistej kultúry kvasinkovitých húb rodu Candida sa uskutočňuje podľa všeobecne uznávaných mikrobiologických metód.

Prvé stretnutie

Pri vymenovaní mykológ vykoná vyšetrenie a tiež predpíše komplexné vyšetrenie.

Laboratórna diagnostika

Najúčinnejšou metódou diagnostiky kožných mykóz sú rôzne laboratórne testy, ktoré dokážu identifikovať patogén a pomôcť pri výbere liečebného režimu. Na identifikáciu pôvodcu mykózy sú predpísané nasledujúce laboratórne testy:

• histologická analýza;
• bakteriologická kultúra;
• imunologický výskum;
• PCR diagnostika;
• kultúrne vyšetrenie;
• mikrobiologický výskum.

Mikrobiologická diagnostika pomáha odhaliť hubu a určiť jej rod a druh.

Mikrobiologická diagnostika je najbežnejšou a najjednoduchšou metódou na zistenie mykózy v krvi a koži. Na identifikáciu presnej diagnózy by ste mali vedieť, ako správne zbierať materiál potrebný na štúdiu. Postihnuté vlasy by sa mali zbierať pinzetou. Ak je koža infikovaná, koža z poškodenej oblasti by sa mala zoškrabať na mikroskopiu. Všetok zozbieraný materiál sa umiestni do 30 % roztoku hydroxidu draselného a potom na podložné sklíčko. Mikrobiologická diagnostika dokáže presne odhaliť, kde sa huba nachádza (vo vnútri alebo mimo vlasu, kože) a jej veľkosť.

Aby sa predišlo chybnej diagnóze mykózy, je potrebné správne a kompetentne odobrať materiál na mikrobiologické vyšetrenie.

V medicíne existujú tieto mikrobiologické diagnostické metódy:

• Mikroskopia s použitím natívnych alebo nefarbených prípravkov. Na tento účel sa materiál vyčíri pomocou 10-30% roztokov hydroxidu draselného alebo sodného. Potom sa spracovaný materiál položí na laboratórne sklo, do ktorého sa predtým nakvapkalo trochu glycerínu. Vrch sa prikryje sklenenou doskou a vykoná sa analýza.
• Mikroskopia zafarbených prípravkov sa uskutočňuje niekoľkými spôsobmi, ktoré identifikujú baktérie, rozlíšia rôzne baktérie a identifikujú rôzne huby.

Bakteriologická kultúra

Bakteriologická kultivácia je jednou z najúčinnejších metód diagnostiky.

Odber bakteriologickej kultúry na živnom médiu je presným spôsobom diagnostiky mykózy. Berúc do úvahy vzhľad a vlastnosti pestovanej kolónie húb, dermatológ určuje typ patogénu, ktorý spôsobil mykózu. Jedinou nevýhodou prieskumu je, že vypestovanie kolónie trvá dlho. V priemere trvá zistenie kmeňa patogénu asi 3 týždne. V niektorých prípadoch metóda neprináša očakávané výsledky.

PCR diagnostika

Diagnostická metóda PCR zahŕňa identifikáciu pôvodcu mykózy pomocou polymerázovej reťazovej reakcie. Počas vyšetrenia sa zvyšuje citlivosť hybridizácie, čím sa zvyšuje obsah vírusovej DNA v testovanom materiáli. Táto vyšetrovacia metóda je nová a vyžaduje si od pacienta niekoľko testov. Predpokladá sa, že tento typ diagnózy je dosť drahý, ale poskytuje presné výsledky.

Kultivačné vyšetrenie

V konečnom štádiu diagnózy sa odporúčajú kultúrne diagnostické opatrenia. Metóda spočíva v získaní kultúry huby, ktorá sa následne odošle na vyšetrenie pomocou mikroskopu. Výsledný materiál sa umiestni na umelo vytvorené živné médium a identifikuje sa typ patogénu, vzhľad a veľkosť. Potom je indikovaná špeciálna liečba, ktorá je zameraná na boj proti špecifickému typu patogénu mykózy.

Presná diagnostika invazívnych mykóz neľahké. To sa vysvetľuje nielen ťažkosťami pri získavaní kultúry húb, ale aj pri interpretácii výsledkov výskumu, pretože huby, kvasinkové aj vláknité, môžu kolonizovať sliznice a kontaminovať študované vzorky. V tomto ohľade je diagnostika invazívnych mykóz založená na integrovanom prístupe, ktorý zahŕňa nielen výsledky mykologických (kultúrnych) a sérologických (stanovenie hubového antigénu) štúdií, ale aj klinické príznaky plesňovej infekcie, údaje z pomocných výskumných metód ( počítačové alebo magnetické rezonančné zobrazovanie, ultrazvuk).

skupina pre európsko-americkú spoluprácu na štúdium invazívnych mykóz U imunokompromitovaných pacientov boli vyvinuté kritériá na diagnostiku invazívnych mykóz. Boli prezentované v roku 2001 na Medzinárodnej konferencii o antimikrobiálnych látkach a chemoterapii (ICAAC, Chicago) a v roku 2002 v tlačenej podobe. Boli definované kritériá pre preukázanú, pravdepodobnú a možnú invazívnu mykózu, ktoré sa odporúčajú na použitie v klinických a epidemiologických štúdiách

Overená invazívna mykóza spôsobená vláknitými hubami: detekcia hubového mycélia v biopsiách alebo aspirátoch počas histologického alebo cytologického vyšetrenia alebo izolácie kultúry zo vzoriek získaných za aseptických podmienok z normálne sterilnej lézie, ktorá je podľa výsledkov klinických a rádiologických štúdií spojená s infekciou, s výnimkou štúdií moču a slizníc.

Overená invazívna mykóza spôsobená kvasinkovými hubami: detekcia kvasinkových buniek (huby rodu Candida môžu vytvárať pseudomycélium alebo pravé mycélium) v biopsiách alebo aspirátoch, s výnimkou vzoriek zo slizníc, alebo izolácia kultúry zo vzoriek získaných za aseptických podmienok z normálne sterilnej lézie, ktorá podľa na výsledky klinického a rádiologického vyšetrenia spojeného s infekciou, s výnimkou moču, vzoriek z dutín a slizníc, alebo detekciu mikroskopicky a špecifické farbenie (v kvapke indického atramentu, mucikarmínové farbenie) kvasinkových buniek alebo a pozitívny antigén Cryptococcus spp. v cerebrospinálnej tekutine.

Huba spôsobená vláknitými hubami: izolácia krvnej kultúry húb, s výnimkou Aspergillus spp. a Penicillium spp., vrátane Penicillium marneffei, v kombinácii s klinickými symptómami infekčného procesu kompatibilného s izolovaným patogénom.

Plesne spôsobené kvasinkovými hubami: izolácia hemokultúry Candida alebo iných kvasinkových húb od pacientov s klinickými príznakmi infekcie spojenej s týmto patogénom.

Komplex diagnostických štúdií pre invazívne mykózy

Študovaný biomateriál	Indikácie, použité médiá, význam
Krv	Indikácie: pretrvávajúca horúčka (4-5 dní alebo viac) počas liečby širokospektrálnymi antibiotikami; druhá „vlna“ horúčky počas antibiotickej liečby Odber krvi zo žily do liekoviek na aeróbne baktérie* alebo do selektívneho média pre huby, opakovane (2-3 krát denne s intervalom 1 hodiny) Diagnostický význam: izolácia kvasinkových húb, starostlivá interpretácia pri izolácii vláknitých húb, s výnimkou Fusarium spp.
Venózny katéter	Indikácie: izolácia kvasinkových húb z krvi Centrálny alebo periférny venózny katéter sa odstráni vo všetkých prípadoch izolácie kvasiniek z krvi Na mykologický výskum sa používa asepticky odstránený distálny úsek katétra v dĺžke 5-6 cm Štúdia sa vykonáva semikvantitatívne (metóda Maki) alebo kvantitatívna metóda na Sabouraudovom médiu Diagnostický význam: izolácia kvasinkových húb v semikvantitatívnej štúdii 15 CFU alebo viac, v kvantitatívnej štúdii - 103 CFU/ml alebo viac na potvrdenie diagnózy infekcie spojenej s katétrom alebo infekcie katétra
Výtok z horných dýchacích ciest, spútum, výplachy z priedušnice, priedušiek, tekutina z bronchoalveolárneho výplachu	Indikácie: podozrenie na mykózy spôsobené vláknitými hubami alebo Cryptococcus neoformans; dlhotrvajúca horúčka počas liečby širokospektrálnymi antibiotikami a neutropénia Mikroskopia vzoriek s calcofluor white (detekcia mycélia alebo pseudomycélia); siatie na Sabouraudovom médiu; stanovenie antigénu Aspergillus v tekutine z bronchoalveolárnej laváže v prítomnosti lézií v pľúcach charakteristických pre invazívnu aspergilózu Diagnostický význam: izolácia vláknitých húb alebo Cryptococcus neoformans
Cerebrospinálna tekutina	Indikácie: príznaky meningitídy; detekcia lézie (lézií) v mozgu pomocou počítačovej tomografie alebo zobrazovania magnetickou rezonanciou; „mozgové“ symptómy v dôsledku horúčky a neutropénie Mikroskopia s calcofluor white, v kvapke atramentu; stanovenie antigénu Aspergillus, Cryptococcus; siatie v stredu Sabouraud Diagnostický význam: detekcia húb, kvasinkových aj vláknitých; pozitívny antigén
Biopsie, aspiráty, peritoneálna tekutina, pleurálna tekutina	Indikácie: klinické a/alebo rádiologické príznaky invazívnej mykózy; horúčka počas liečby širokospektrálnymi antibiotikami. Mikroskopia s calcofluor white, kultivácia na Sabouraudovom médiu Diagnostický význam: detekcia húb, kvasinkových aj vláknitých

* Frekvencia izolácie húb z krvi bola identická, keď sa počiatočná krv odobrala do oboch fľaštičiek s bakteriálnym kultivačným médiom a so selektívnym hubovým médiom. Štúdia sa uskutočnila s použitím bakteriologického analyzátora VASTES 9240.

Možná invazívna mykóza diagnostikovaná na základe kombinácie nasledujúcich kritérií:
jeden znak z kategórie mikrobiologických kritérií;
jeden príznak z kategórie „významných“ alebo dva zo skupiny „menej významných“ klinických príznakov infekčného procesu.

Možná invazívna mykóza diagnostikovaná na základe kombinácie nasledujúcich kritérií:
prítomnosť aspoň jedného rizikového faktora vyvolávajúceho rozvoj invazívnej mykózy;
jeden znak z kategórie mikrobiologických kritérií alebo jeden znak z kategórie „významné“ (dva zo skupiny „menej významné“) klinické príznaky infekčného procesu.

Koncept " možná invazívna mykóza» Neodporúča sa používať v klinických štúdiách skúmajúcich účinnosť antimykotík. Tento termín môžete použiť pri analýze empirickej antimykotickej liečby, epidemiologických štúdiách a štúdiu farmakoekonomiky.

O mykologický výskum sterilné aspiráty alebo biopsie zohľadňujú nielen izoláciu hubových kultúr, ale aj dôkaz mycélia alebo pseudomycélia mikroskopicky. V histologických preparátoch je Aspergillus ťažké odlíšiť od Fusarium spp., Sceclosporium apiospermum a niektorých iných vláknitých húb. Pre diferenciálnu diagnostiku je potrebné vykonať imunohistochemickú štúdiu s protilátkami proti Aspergillus.

Izolácia kvasinkových húb z krvi aspoň v jednej štúdii patrí do kategórie „overených“ invazívnych mykóz a je absolútnou indikáciou na predpisovanie systémových antimykotík u pacientov s neutropéniou. Frekvencia detekcie kvasinkových húb z krvi je nízka, dokonca aj pri diseminovanej kandidóze je 35-50%.
Vykonávanie opakované hemokultúry zvyšuje pravdepodobnosť dosiahnutia pozitívnych výsledkov.

Iné výklad výsledky v prípade zistenia vláknitých húb v krvi. Vysoká frekvencia izolácie vláknitých húb je charakteristická pre Fusarium spp. a predstavuje 40 až 60 %. Aspergillus sa zistí veľmi zriedkavo, vo väčšine prípadov sa považuje za kontamináciu, s výnimkou Aspergillus terreus.

Výber Aspergillus terreus z krvi pacientov s hemoblastózami môže naznačovať skutočnú aspergilémiu a v prítomnosti klinických príznakov infekcie je základom pre predpisovanie antimykotík.

Kritériá pre invazívnu mykózu

Index	Kritériá
Faktory vyvolávajúce výskyt invazívnej mykózy (makroorganizmus)	neutropénia (< 0,5*109/л в течение 10 дней) Pretrvávajúca horúčka viac ako 96 hodín počas liečby širokospektrálnymi antibiotikami Telesná teplota nad 38 °C alebo pod 36 °C a niektorý z nasledujúcich predisponujúcich príznakov: predĺžená neutropénia (viac ako 10 dní) počas predchádzajúcich 60 dní, intenzívna imunosupresívna liečba počas posledných 30 dní, preukázaná alebo pravdepodobná invazívna mykóza v predchádzajúcich periodická neutropénia alebo AIDS Prítomnosť symptómov GVHD, predovšetkým prípady ťažkého priebehu (II. stupeň) alebo rozsiahly priebeh chronického ochorenia Dlhodobé (viac ako 3 týždne) užívanie glukokortikoidov počas posledných 60 dní
Mikrobiologické príznaky	Izolácia kultúry vláknitých húb (vrátane Aspergillus spp., Fusaruim spp., Sceclosporium spp. a zygomycetes) a Cryptococcus neqformans zo spúta alebo tekutiny z bronchoalveolárnej laváže Pozitívne výsledky kultivačného alebo cytologického vyšetrenia (priama mikroskopia) na detekciu vláknitých húb z aspirátov vedľajších nosových dutín Detekcia vláknitých húb alebo Cryptococcus neoformans pomocou cytológie/priamej mikroskopie zo spúta alebo tekutiny z bronchoalveolárnej laváže Pozitívny antigén Aspergillus vo vzorkách bronchoalveolárnej laváže, cerebrospinálnej tekutiny a krvi (najmenej dvoch) Pozitívny kryptokokový antigén vo vzorkách krvi Detekcia hubových elementov cytologickým vyšetrením alebo priamou mikroskopiou vo vzorkách normálne sterilných tekutín (napríklad Cryptococcus spp. v mozgovomiechovom moku) Dva pozitívne výsledky štúdií o detekcii kultúr kvasiniek v moči pri absencii močového katétra Kryštály Candidy v moči bez močového katétra Izolácia Candida spp. z krvných kultúr
Klinické príznaky Dolné dýchacie cesty	Musí byť spojené s miestom, z ktorého sa odoberajú vzorky na mikrobiologický výskum Ktorýkoľvek z nasledujúcich typov nových pľúcnych infiltrátov podľa CT: znak halo, znak polmesiaca, dutina s oblasťami konsolidácie* Príznaky infekcie dolných dýchacích ciest (kašeľ, bolesť na hrudníku, hemoptýza, dýchavičnosť), trenie pohrudnice, akákoľvek nová infiltrácia, ktorá nie je zahrnutá medzi príznaky vysokej závažnosti; pleurálny výpotok
Horné dýchacie cesty Znaky s vysokým významom Známky menšieho významu	Rádiologické príznaky invazívnej infekcie v nosových dutinách (erózia steny alebo šírenie infekcie do priľahlých štruktúr, rozsiahla deštrukcia kostí lebky) Výtok z nosa, upchatý nos, ulcerácia v nose, epistaxa, periorbitálny edém, bolesť v hornej čeľusti, čierna nekrotická ulcerácia alebo perforácia tvrdého podnebia
centrálny nervový systém Znaky s vysokým významom Známky menšieho významu	Rádiologické príznaky suspektnej infekcie CNS (mastoiditída alebo iné parameningeálne ložisko, extradurálny empyém, mnohopočetné lézie v substancii mozgu alebo miechy) fokálne neurologické symptómy a znaky, vrátane fokálnych záchvatov, hemiparézy; poruchy vedomia, meningeálne symptómy, poruchy biochemického zloženia mozgovomiechového moku a jeho bunkového zloženia (pri absencii iných patogénov, podľa kultivácie a mikroskopie, pri absencii nádorových buniek)

*Pri absencii infekcie spôsobenej mikroorganizmami, ktoré môžu spôsobiť podobný rádiologický obraz, vrátane tvorby dutín (Mycobacterium spp., Legionella spp., Nocardia spp.).

O detekcia v krvi alebo iných sterilných biosubstrátov kvasinkových húb je potrebné vykonať identifikáciu k druhu a určiť citlivosť na antimykotiká, pri izolácii vláknitých (plesňových) húb iba identifikáciu na druh, citlivosť sa nestanovuje.

V klinickom prax Citlivosť vláknitých húb nie je študovaná kvôli nedokonalým štandardom na stanovenie citlivosti takýchto húb na antimykotiká. Okrem toho iba jedna štúdia preukázala koreláciu medzi citlivosťou Aspergillus spp. a výsledky liečby invazívnej aspergilózy u pacientov s hematologickými malignitami. Žiadna z nasledujúcich štúdií nepriniesla podobné výsledky.

Nedávno sa začali objavovať ojedinelé správy o vzniku získanej rezistencie húb A. fumigatus na itrakonazol a vorikonazol.

Identifikácia húb podľa druhov, najmä tie, ktoré sa získajú zo sterilných lokusov, je nevyhnutný predovšetkým na výber antimykotika a uskutočnenie adekvátnej antifungálnej terapie. Candida krusei je teda rezistentná na flukonazol a menej citlivá ako iné druhy kvasiniek na amfotericín B; Aspergillus terreus, Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boydii), Trichosporon beigelii, Scopulariopsis spp. odolný voči amfotericínu B; Mucorales sú rezistentné na itrakonazol, vorikonazol, Candida glabrata prejavuje citlivosť na flukonazol závislú od dávky a pri izolácii tohto typu húb, dokonca aj citlivých kmeňov, je potrebné zvýšiť dávku flukonazolu (dospelým sa predpisuje 800 mg namiesto 400 mg); Candida lusitaniae je odolná voči amfotericínu B.

Identifikácia húb podľa druhov je tiež dôležité pre vykonávanie epidemiologických analýz v nemocnici - identifikácia pôvodcov prepuknutia infekcie a ak je to možné, zdroj infekcie. Boli popísané ohniská infekcie spôsobené takými vzácnymi hubami ako C. lusitaniae, C. krusei, C. lipolytica.

Na základe identifikácia druhov húb Možno predpokladať invazívnu mykózu alebo plesňové osídlenie slizníc. Napríklad u Aspergillus niger je podstatne menej pravdepodobné ako u Aspergillus fumigatus, že spôsobí invazívnu aspergilózu u pacientov s akútnou leukémiou. Izolácia Aspergillus niger z tekutiny bronchoalveolárnej laváže sa najčastejšie považuje za kolonizáciu dýchacieho traktu a zo spúta ako kontamináciu zo vzduchu a vyžaduje si ďalší výskum pri potvrdení diagnózy invazívnej aspergilózy.

Na základe sekréty vláknitých húb zo spúta, bronchoalveolárnej tekutiny a aspirátu z vedľajších nosových dutín možno invazívnu mykózu iba predpokladať, bez toho, aby sme ju zaradili do kategórie „overené“. Vždy je však potrebné vziať do úvahy detekciu Aspergillus v spúte, najmä Aspergillus fumigatus alebo Aspergillus flavus, u pacientov s neutropéniou, ktorí dostávajú alogénnu kostnú dreň. To si vyžaduje opakované mykologické vyšetrenie a počítačovú tomografiu pľúc. Pri neutropénii je teda pravdepodobnosť detekcie invazívnej aspergilózy v prípade pozitívnej kultúry Aspergillus spp. v spúte je 80 %.

Výber Cryptococcus neoformans u imunokompromitovaných pacientov z dýchacích ciest (výplachy, výplachy) je diagnosticky významný. Ak identifikácia kvasinkových húb z tekutín získaných z dýchacích ciest (tracheálne, bronchiálne výplachy, bronchoalveolárna laváž) imunokompromitovaných pacientov nie je potrebný výskum, potom je potrebný skríning na identifikáciu Cryptococcus neoformans z týchto vzoriek.

Detekcia kandidy v moči u pacientov s neutropéniou a horúčkou sa zvyčajne považuje za prejav diseminovanej kandidálnej infekcie.

Včas diagnostika invazívne úspešne použiť komerčný test na zistenie cirkulácie špecifického antigénu Aspergillus spp. galaktoman (polysacharid vo vode rozpustný komponent bunkovej steny huby).

Galactomann možno stanoviť dvoma metódami: latexovou aglutinačnou metódou (Pastorex Aspergillus, BioRAD) a enzýmovou imunoanalýzou (Platelia Aspergillus, BioRAD).

Výhoda metóda enzýmovej imunoanalýzy je nižší prah citlivosti na stanovenie hladiny galaktomanu v krvi - 1 ng/ml alebo menej a pomocou latexovej aglutinácie - 15 ng/ml. Stanovenie galaktomanu v krvi (najmenej 2 vzorky), cerebrospinálnej tekutine a bronchoalveolárnej laváže má diagnostickú hodnotu. Senzitivita metódy enzýmovej imunoanalýzy je asi 90 %, špecificita 90 – 99 %, u príjemcov alogénnej kostnej drene sú tieto ukazovatele nižšie a rovnajú sa 60 – 70 % a 80 – 90 %, v dôsledku profylaktickej užívanie antifungálnych liekov (antimykotiká znižujú prahovú hladinu galaktomanu).

V 40% prípadov detekcia galaktoman v krvi predbieha prejavy invazívnej aspergilózy, zistené počítačovým vyšetrením pľúc a v 70 % predbieha klinické príznaky infekcie.

Diagnostická hodnota testu detekcie antigénu Aspergillus ide o prípad, ak sa štúdia vykonáva opakovane. Stanovenie antigénu Aspergillus v krvi sa má vykonávať počas horúčky počas liečby širokospektrálnymi antibiotikami u pacientov s neutropéniou 2-krát týždenne; na pneumóniu, ktorá sa vyskytuje alebo pretrváva počas antibakteriálnej liečby; keď sa zistia lézie v pľúcnom tkanive (počítačová tomografia).

Častým problémom sú ochorenia spôsobené plesňami alebo mykózami. Existuje neskutočné množstvo patogénov, ktoré spôsobujú mykózy.

Každý rok vedci objavujú a popisujú nové druhy húb. Napriek tomu je diagnostika a liečba mykóz dlhodobo overeným a jasným mechanizmom.

Druhy hubových chorôb

U ľudí väčšina húb postihuje sliznice a kožu.

Choroby, pri ktorých sú huby príčinou choroby, zahŕňajú:

• lišaj
• kandidóza
• onychomykóza
• pestrý alebo pityriasis versicolor
• lišajník čierny
• seborea
• aspergilóza

Metódy diagnostiky mykóz

Jednou z najpopulárnejších metód je mikrobiologická diagnostika mykóz.

Moderné diagnostické metódy umožňujú presne určiť, ktorá huba bola príčinou ochorenia. V budúcnosti to umožňuje zvoliť optimálny priebeh liečby. V súčasnosti existujú tri hlavné metódy laboratórnej diagnostiky mykóz.

Tie obsahujú:

• mikroskopické
• kultúrne
• sérologické

Každá metóda má svoje výhody. Kultúrna diagnostika mykóz umožňuje určiť typ huby. V tomto prípade je možné posúdiť citlivosť kolónií na rôzne lieky.

Táto metóda vám umožní vybrať účinný liek. Táto metóda vyžaduje veľa času na siatie a pestovanie kolónií.

Mikroskopické a sérologické metódy na diagnostiku mykóz si vyžadujú menej času. Pri ich použití sa určuje aj typ patogénu, ale nie je možné skontrolovať jeho citlivosť na lieky. V niektorých prípadoch je možné použiť aj luminiscenčnú diagnostickú metódu. Táto metóda je menej bežná kvôli jej zložitosti.

Luminiscenčnú metódu možno použiť len vtedy, keď sú vlasy napadnuté hubami. Metóda je neúčinná na diagnostiku v počiatočných štádiách. Je to spôsobené tým, že efekt žiary sa prejaví iba vtedy, ak sú vlasy silne poškodené plesňou.

Diagnóza mykózy nohy

Mykóza nohy je jednou z najčastejších dermatomykóz.

Tento termín sa bežne chápe ako plesňová infekcia kože nohy a nechtov.

Pamätajte! Ochorenie má recidivujúci priebeh.

Pri diagnostike mykózy nohy je potrebné ju odlíšiť od množstva iných ochorení. Diagnostika mykózy nohy je založená na klinických prejavoch a mikroskopickom vyšetrení. Je možné použiť kultúrnu metódu.

Liečba mykóz

Vedúcu úlohu v liečbe mykóz zohrávajú antimykotiká lokálneho a systémového účinku.

Liečba lokálnymi antimykotikami je zameraná priamo na zdroj ochorenia. Zároveň je negatívny vplyv na telo ako celok minimálny.

Systémové antimykotiká sa predpisujú, ak:

• lokálne antifungálne lieky sú neúčinné
• ochorenie má systémový charakter

Keď sú mykózy sprevádzané zápalovým procesom alebo alergickými reakciami, predpisujú sa desenzibilizačné a antihistaminiká. Ak je sekundárna infekcia spojená s mykózami, môžu byť predpísané antibakteriálne lieky.

Je dôležité začať liečbu plesňových ochorení v počiatočných štádiách ochorenia. Ak je proces starý, liečba môže trvať dlhšie.

Keď sa objavia prvé príznaky, okamžite vyhľadajte pomoc od nášho lekára.

Podľa vedcov má 70% svetovej populácie príznaky mykózy nôh. Toto ochorenie postihuje medziprstové záhyby a kožu na chodidlách. Príčinou ochorenia je huba, ktorá sa pôvodne vyskytovala len v obmedzených oblastiach juhovýchodnej Ázie a Afriky. Prvá svetová vojna, spôsobujúca masovú migráciu ľudí a zhoršujúce sa hygienické podmienky, viedla k rozšíreniu choroby do celého sveta.

Čo spôsobuje mykózu nôh

Hlavným pôvodcom ochorenia je Trichophyton rubrum. Infekciu môžu spôsobiť T. mentagrophytes a Epidermophyton floccosum. Huby rodu Candida a plesňové mikroorganizmy sa môžu stať patogénnymi mikróbmi oveľa menej často.

Najvýznamnejšie rizikové faktory ochorenia:

• cukrovka;
• stav imunodeficiencie (AIDS);
• ploché nohy;
• ateroskleróza periférnych artérií;
• kŕčové žily dolných končatín.

Vonkajšie podmienky vedúce k rozvoju infekcie:

• uzavretá nenasiakavá obuv;
• poranenia chodidiel (mozole, odreniny);
• športovať.

Symptómy atletickej nohy sa najčastejšie vyskytujú u dospelých mužov. Deti zriedka ochorejú.

Príznaky mykózy nôh

S rozvojom ochorenia sa objavuje olupovanie a suchá koža, svrbenie a pálenie, najmä v priestoroch medzi prstami a vznik bolestivých prasklín pod prstami. Niekedy sú prvými príznakmi mykózy chodidla pľuzgiere, ktoré prasknú s tvorbou erózií. Často sa choroba vyskytuje vo vymazanej forme, ktorá sa prejavuje len miernym odlupovaním, pripomínajúcim múku, v záhyboch medzi prstami.

Existujú 4 klinické formy ochorenia.

Interdigitálny alebo intertriginózny variant je najbežnejší. Koža medzi prstami sčervená, praská, povrchová vrstva mokvá a odlupuje sa. Tieto príznaky siahajú až po chodidlo a sú sprevádzané silným svrbením a pálením. Často sa pridružuje bakteriálny zápal.

Skvamózno-hyperkeratotický variant je spojený so silným zhrubnutím a praskaním kože. Podošva sčervená a odlupuje sa. V oblasti päty sa objavujú hlboké bolestivé trhliny, svrbenie je zvyčajne netypické. Toto je často bilaterálna lézia a nazýva sa aj „mokasínová noha“.

Dyshidrotický variant je sprevádzaný výskytom viacerých malých svrbivých, bolestivých pľuzgierov. Vzájomne sa spájajú a vytvárajú veľké bubliny. Kryty pľuzgierov prasknú a odhalia lesklý, zraniteľný, bolestivý povrch - erózia. Vonkajšie prejavy pripomínajú ekzém.

Mikrobiálny zápal je často spojený so zväčšenými inguinálnymi lymfatickými uzlinami, horúčkou, bolesťou nôh, nevoľnosťou, bolesťou hlavy a inými príznakmi intoxikácie. Pri dyshidrotickej forme sa často vyskytuje alergia na plesne - mykotický ekzém. Je sprevádzaná vyrážkami na oblastiach tela, ktoré nie sú infikované hubou, napríklad na rukách.

Vymazaná verzia zvyčajne zostáva nepovšimnutá. Je sprevádzané miernym olupovaním kože medzi veľkým a ukazovákom a/alebo prstencom a malíčkami na chodidle. Neexistuje žiadne svrbenie.

Známky mykózy nôh

Rôzne typy mykózy chodidiel môžu byť nezávislé ochorenia alebo sa vyskytujú ako súčasť všeobecnej hubovej infekcie tela. Niekedy sa pri zapojení týchto orgánov vyskytuje znak „dve nohy - jedna ruka“. Môže sa vyskytnúť onychomykóza, hubová deštrukcia nechtu. Niekedy sú súčasne ovplyvnené aj inguinálne záhyby.

Hlavné príznaky a liečba mykózy chodidiel sú uvedené na fotografii:

Odlupovanie kože

Suchá a popraskaná pokožka

Bubliny a erózie

Diagnostika

Skúsený dermatológ dokáže rozpoznať rôzne druhy mykózy nôh už pri prvom vyšetrení. Na potvrdenie diagnózy je však potrebné mikroskopické vyšetrenie. Na to sa používajú šupiny z lézie, ktoré sa zoškrabú špachtľou a ošetria alkalickým roztokom. Výsledný materiál sa skúma pod mikroskopom a zisťujú sa patogény.

Priama mikroskopia je rýchla, lacná a ľahko vykonateľná, ale nedokáže určiť, ktorý typ huby spôsobuje ochorenie. Preto sa materiál naočkuje na živné médium, po ktorom nasleduje kultivačné vyšetrenie výsledného materiálu. Po zistení pod mikroskopom je však možné získať kultúru huby iba v 20–6% prípadov.

Typy liečby mykózy nôh

Lieky na liečbu plesňových ochorení by mal predpisovať dermatológ. Zvyčajne sa liečba mykózy nohy uskutočňuje pomocou vonkajších prostriedkov.

Jedným z účinných liekov na túto chorobu je klotrimazol. V našom obchode si ho môžete kúpiť za nízku cenu. Liek vo forme pleťovej vody, Clotrimazol na nechty a pokožku, potláča množenie plesní v hrúbke rohovej vrstvy epitelu. Ak sú postihnuté medziprstové záhyby, pleťová voda sa nanáša denne na čistú suchú pokožku chodidiel po dobu jedného týždňa, v prípade potreby aj dlhšie.

V prípade silného rohovatenia a popraskania kože je potrebné najskôr odstrániť odumreté kožné ložiská. To si vyžaduje použitie exfoliačných liekov. Predpísaná je napríklad salicylová masť, krémy s kyselinou mliečnou alebo močovinou. Po odstránení zrohovatených usadenín sa pleťová voda používa 1 – 2 krát denne.

V dyshidrotickom variante je prvým krokom zníženie plaču. Na tento účel sa používajú pleťové vody s tanínom alebo kyselinou boritou. V závažných prípadoch sa k liečbe pridávajú glukokortikoidy. Potom aplikujte Clotrimazol lotion podľa obvyklého režimu.

Ak je chodidlo opotrebované, ošetrujte ho pleťovou vodou 1x denne po dobu 7-10 dní, ale dĺžka kurzu je individuálna a určuje ju lekár.

Systémová terapia

Dlhodobá alebo opakujúca sa atletická noha môže vyžadovať perorálne antifungálne lieky. Prechádzajú z gastrointestinálneho traktu do krvného obehu a následne do kože, kde ničia plesne. Používajú sa tri hlavné lieky:

• flukonazol;
• itrakonazol;
• terbinafín

Trvanie užívania týchto liekov je najmenej mesiac. Ich cena je dosť vysoká. Preto je prevencia mykózy nôh vždy jednoduchšia a výnosnejšia ako jej liečba.

Zvlášť často sa predpisujú systémové lieky, ak huba zasiahla nielen kožu, ale aj nechty. V tomto prípade sa lieky hromadia v rastúcej časti nechtovej platničky a zdravý necht postupne dorastá. Na zlepšenie účinku je možné necht chirurgicky úplne odstrániť, po ktorom sa obnoví bez plesní.

U starších pacientov je často potrebná kombinácia odstránenia nechtov a systémovej a lokálnej antimykotickej liečby. U tejto skupiny pacientov nechty často rastú pomaly, krvný obeh v chodidlách je narušený, takže na dosiahnutie účinku je potrebná veľká dávka liekov a dlhý priebeh liečby.

Liečba ľudovými prostriedkami

Použitie iba receptov tradičnej medicíny nepomôže zbaviť sa huby. Takýto doplnok ku klasickej terapii však skracuje priebeh liečby a urýchľuje rekonvalescenciu.

Užitočné je urobiť si každý večer na 10 minút teplé kúpele nôh, potom si nohy dôkladne pohladiť uterákom, najmä medzi prstami a natrieť liečivým mliekom Clotrimazol na nechty a pokožku. Užitočné prísady do kúpeľa, ktoré zmierňujú zápal a zmierňujú svrbenie:

• bylina skorocel a ľubovník bodkovaný;
• korene lopúcha;
• tráva palina;
• listy eukalyptu;
• jedľové ihličie;
• čerstvá usadenina z uvarenej mletej kávy;
• soľ;
• zmes strúhaného mydla na pranie, sódy bikarbóny, manganistanu draselného a horčičného prášku.

Postihnuté miesta je možné namazať brezovým dechtom alebo vlastnoručne pripravenou masťou zo 100 gramov masla zmiešaného s roztlačenou hlavičkou cesnaku. Užitočný je aj propolis, ktorý sa dá obviazať boľavé nechty.

Je užitočné vyrábať obklady z prírodných prostriedkov. Najprv sa nechajú 1 až 2 hodiny a ak sú tolerované, cez noc. Používajú sa tieto zložky:

• tekvicová buničina;
• drvené semená čiernej reďkovky;
• mäta pieporná, mletá soľou;
• listy lopúcha alebo jarabiny, mierne zmäkčené valčekom.

Je účinné namazať postihnuté miesta šťavami z niektorých rastlín a inými prírodnými prostriedkami:

• alkoholový roztok propolisu;
• cibuľová alebo cesnaková šťava;
• šťava z celandínu;
• čajovníkový olej.

Prevencia chorôb

Aby sme sa vyhli mykóze alebo zabránili jej relapsu, je potrebná jednoduchá, ale stála prevencia:

• v lete noste priedušnú obuv z prírodného materiálu;
• pri návšteve bazénov, kúpeľov, verejných spŕch noste individuálne gumené papuče;
• nenoste topánky niekoho iného, ​​napríklad pri návšteve;
• používajte iba vlastné hygienické pomôcky – nožnice, pemzu, pilník na nechty.

Aby sa predišlo opätovnej infekcii, vložky do topánok a vnútorné povrchy topánok by sa mali pravidelne ošetrovať dezinfekčnými prostriedkami. Známym ľudovým receptom je roztok octovej esencie, ktorý má však ostrý nepríjemný zápach.

Lekári odporúčajú používať liek Mikospray, ktorý má nielen protiplesňový, ale aj antibakteriálny účinok. Mycospray je skvelý nielen na ošetrenie topánok, ale aj na aplikáciu na chodidlá pred návštevou verejných miest na ochranu chodidiel.

Obyvatelia Moskvy a regiónov si môžu v našom internetovom obchode kúpiť lieky na liečbu mykózy chodidiel a na jej prevenciu. Majú preukázanú účinnosť a bezpečnosť. Ich použitie sa odporúča všetkým ľuďom, ktorí sa nechcú nakaziť plesňou nôh alebo sa jej rýchlo zbaviť.