Microbii anaerobi. Bacteriile aerobe și anaerobe

  • 1.Mecanismele genetice și biochimice ale rezistenței la medicamente. O modalitate de a depăși rezistența la medicamente a bacteriilor.
  • 2. Folosiți „infecție”, „proces infecțios”, „boală infecțioasă”. Condiții pentru apariția bolilor infecțioase.
  • 1. Antibioterapie rațională. Efectele secundare ale antibioticelor asupra organismului uman și asupra microorganismelor. Formarea de forme de bacterii rezistente la antibiotice și dependente de antibiotice.
  • 2. Reacția de precipitare și varietățile acesteia. Mecanism și metode de instalare, aplicare practică.
  • 1. Metode de determinare a sensibilității bacteriilor la antibiotice. Determinarea concentrației de antibiotice în urină și sânge.
  • 2. Principalele celule ale sistemului imunitar: t, limfocite b, macrofage, subpopulații de celule t, caracteristicile și funcțiile acestora.
  • 1. Mecanisme de acţiune a antibioticelor asupra celulelor microbiene. Efectul bactericid și efectul bacteriostatic al antibioticelor. Unități de măsurare a activității antimicrobiene a unui antibiotic.
  • 2. Reacția de liză imună ca unul dintre mecanismele de distrugere a microbilor, componente ale reacției, utilizare practică.
  • 3. Agentul cauzal al sifilisului, taxonomia, caracteristicile proprietăților biologice, factorii de patogenitate. Epidemologie și patogeneză. Diagnosticul microbiologic.
  • 1. Metode de cultivare a bacteriofagelor, titrarea acestora (după Gracia și Appelman).
  • 2. Cooperarea celulară între limfocitele T, B și macrofage în procesul de răspuns imun umoral și celular.
  • 1. Respirația bacteriilor. Tipuri aerobe și anaerobe de oxidare biologică. Aerobi, anaerobi, anaerobi facultativi, microaerofili.
  • 1. Efectul factorilor biologici asupra microorganismelor. Antagonism în biocenoze microbiene, bacteriocine.
  • 3. Bordetella. Taxonomie, caracteristici ale proprietăților biologice, factori de patogenitate. Boli cauzate de Bordetella. Patogenia tusei convulsive. Diagnosticul de laborator, prevenirea specifica.
  • 1. Conceptul de bacterii. Autotrofi și heterotrofe. Mod holofitic de hrănire a bacteriilor. Mecanisme de transfer de nutrienți în celula bacteriană.
  • 2. Structura antigenică a unei celule bacteriene. Principalele proprietăți ale antigenelor microbiene sunt localizarea, compoziția chimică și specificitatea antigenelor bacteriene, toxinelor, enzimelor.
  • 1. Antibiotice. Istoria descoperirii. Clasificarea antibioticelor după metode de producție, origine, structură chimică, mecanism de acțiune, spectru de acțiune antimicrobiană.
  • 3. Virusuri gripale, taxonomie, caracteristici generale, antigeni, tipuri de variabilitate. Epidemiologia și patogeneza gripei, diagnostic de laborator. Prevenirea și terapia specifică a gripei.
  • 2. Metoda serologică de diagnosticare a bolilor infecțioase, evaluarea acesteia.
  • 3. Escherichia diareeică, soiurile lor, factori de patogenitate, boli cauzate de ei, diagnostic de laborator.
  • 1. Caracteristicile generale ale ciupercilor, clasificarea lor. Rolul în patologia umană. Aspecte aplicate ale studiului.
  • 3. Escherichia, rolul lor de locuitor normal al intestinului. Valori indicative sanitare ale Escherichia pentru apa si sol. Escherichia ca factor etiologic în bolile purulent-inflamatorii umane.
  • 1. Utilizarea bacteriofagelor în microbiologie și medicină pentru diagnosticul, prevenirea și terapia bolilor infecțioase.
  • 2. Toxine bacteriene: endotoxină și exotoxine. Clasificarea exotoxinelor, compoziția chimică, proprietățile, mecanismul de acțiune. Diferențele dintre endotoxine și exotoxine.
  • 3. Micoplasme, taxonomie, specii patogene pentru om. Caracteristicile proprietăților lor biologice, factori de patogenitate. Patogenie și imunitate. Diagnosticul de laborator. Prevenire și terapie.
  • 1. Diagnosticul de laborator al disbacteriozei. Medicamente utilizate pentru prevenirea și tratamentul disbacteriozei.
  • 2. Imunofluorescența în diagnosticul bolilor infecțioase. Metode directe și indirecte. Medicamentele necesare.
  • 3. Virusul encefalitei transmise de căpușe, taxonomie, caracteristici generale. Epidemiologie și patogeneză, diagnostic de laborator, prevenire specifică a encefalitei transmise de căpușe.
  • 1. Caracteristici structurale ale rickettziei, micoplasmei și chlamidiei. Metode de cultivare a acestora.
  • 2. Produse biologice utilizate pentru prevenirea și tratamentul specific al bolilor infecțioase: vaccinuri.
  • 3. Salmonella, taxonomie. Agentul cauzal al febrei tifoide și al febrei paratifoide. Epidemiologia patogenezei febrei tifoide. Diagnosticul de laborator. Prevenirea specifică.
  • 2. Structura antigenică a toxinelor, virusurilor, enzimelor: localizarea, compoziția chimică și specificitatea acestora. Anatoxine.
  • 3. Virușii care provoacă boli respiratorii acute. Paramixovirusuri, caracteristici generale ale familiei, boli cauzate. Patogenia rujeolei, prevenire specifică.
  • 1. Reproducerea virusurilor (reproducere disjunctive). Principalele etape ale interacțiunii dintre un virus și o celulă gazdă în timpul unui tip productiv de infecție. Caracteristici ale reproducerii virusurilor care conțin ADN și ARN.
  • 2. Conceptul de rană, infecții respiratorii, intestinale, de sânge și urogenitale. Antroponoze și zoonoze. Mecanisme de transmitere a infecției.
  • 3. Clostridiile tetanosului, taxonomia, caracteristicile proprietăților biologice, factorii de patogenitate. Epidemiologia și patogeneza tetanosului. Diagnostic de laborator, terapie specifică și prevenire.
  • 1. Microflora pielii și a cavității bucale a unei persoane sănătoase. Microflora mucoaselor tractului respirator, tractului genito-urinar și ochilor. Semnificațiile lor în viață.
  • 2. Infecții intrauterine. Etiologie, căi de transmitere a infecției la făt. Diagnosticare de laborator, masuri preventive.
  • 1. Tipuri de interacțiune între viruși și celule: integratoare și autonome.
  • 2. Sistemul de complement, calea clasică și alternativă de activare a complementului. Metode de determinare a complementului în serul sanguin.
  • 3. Intoxicație bacteriană alimentară de natură stafilococică. Patogenie, caracteristici ale diagnosticului de laborator.
  • 1. Efectul factorilor chimici asupra microorganismelor. Asepsie și dezinfecție. Mecanismul de acțiune al diferitelor grupe de antiseptice.
  • 2. Vaccinuri ucise vii, chimice, toxoide, sintetice, moderne. Principii de obținere, mecanisme ale imunității create. Adjuvanți în vaccinuri.
  • 3. Klebsiella, taxonomie, caracteristici ale proprietăților biologice, factori de patogenitate, rol în patologia umană. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Disbacterioza, cauze, factori de formare a acesteia. Stadiile disbacteriozei. Diagnosticul de laborator, prevenirea si terapia specifica.
  • 2. Rolul neutralizării toxinei de către toxoid. Uz practic.
  • 3. Picornovirusuri, clasificare, caracteristici ale virusurilor poliomielitei. Epidemiologie și patogeneză, imunitate. Diagnosticul de laborator, prevenirea specifica.
  • 1. Tipuri de variabilitate la bacterii: modificare și variabilitate genotipică. Mutații, tipuri de mutații, mecanisme de mutații, mutageni.
  • 2. Imunitatea antiinfecțioasă locală. Rolul anticorpilor secretori.
  • 3. Infecții toxice bacteriene alimentare cauzate de Eschirichia, Proteus, stafilococi, bacterii anaerobe. Patogeneza, diagnostic de laborator.
  • 2. Organele centrale și periferice ale sistemului imunitar. Caracteristicile sistemului imunitar legate de vârstă.
  • 1. Membrana citoplasmatică a bacteriilor, structura ei, funcțiile.
  • 2. Factori nespecifici ai imunității antivirale: inhibitori antivirali, interferoni (tipuri, mecanism de acțiune).
  • 1. Protoplaste, sferoplaste, forme L de bacterii.
  • 2. Răspunsul imun celular în apărarea antiinfecțioasă. Interacțiunea dintre limfocitele T și macrofage în timpul răspunsului imun. Modalități de a-l identifica. Metoda de diagnostic al alergiei.
  • 3. Virusul hepatitei A, taxonomie, caracteristici ale proprietăților biologice. Epidemiologia și patogeneza bolii Botkin. Diagnosticul de laborator. Prevenirea specifică.
  • 2. Anticorpi, principalele clase de imunoglobuline, caracteristicile lor structurale și funcționale. Rolul protector al anticorpilor în imunitatea antiinfecțioasă.
  • 3. Virusurile hepatite C și E, taxonomie, caracteristici ale proprietăților biologice. Epidemiologie și patogeneză, diagnostic de laborator.
  • 1. Spori, capsule, vilozități, flageli. Structura lor, compoziția chimică, funcțiile, metodele de detectare.
  • 2. Anticorpi completi si incompleti, autoanticorpi. Conceptul de anticorpi monoclonali, hibrid.
  • 1. Morfologia bacteriilor. Forme de bază ale bacteriilor. Structura și compoziția chimică a diferitelor structuri ale unei celule bacteriene: nucleotide, mezosomi, ribozomi, incluziuni citoplasmatice, funcțiile acestora.
  • 2. Caracteristicile patogenetice ale infecțiilor virale. Proprietățile infecțioase ale virusurilor. Infecție virală acută și persistentă.
  • 1. Procariote și eucariote, diferențele lor de structură, compoziție chimică și funcție.
  • 3. Togavirusuri, clasificarea lor. Virusul rubeolei, caracteristicile sale, patogeneza bolii la femeile însărcinate. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Plasmide bacteriene, tipuri de plasmide, rolul lor în determinarea caracteristicilor patogene și rezistența la medicamente a bacteriilor.
  • 2. Dinamica formării anticorpilor, răspunsul imun primar și secundar.
  • 3. Ciupercile Candida asemănătoare drojdiei, proprietățile lor, caracteristici diferențiatoare, tipuri de ciuperci Candida. Rolul în patologia umană. Condiții favorabile apariției candidozei. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Principii de bază ale taxonomiei microorganismelor. Criterii taxonomice: regn, diviziune, familie, gen specie. Conceptul de tulpină, clonă, populație.
  • 2. Conceptul de imunitate. Clasificarea diferitelor forme de imunitate.
  • 3. Proteus, taxonomie, proprietăți ale lui Proteus, factori de patogenitate. Rolul în patologia umană. Diagnosticul de laborator. Imunoterapie specifică, fagoterapie.
  • 1. Microflora nou-născuților, formarea ei în primul an de viață. Influența hrănirii la sân și artificială asupra compoziției microflorei copilului.
  • 2. Interferonii ca factori ai imunității antivirale. Tipuri de interferoni, metode de obținere a interferonilor și aplicare practică.
  • 3. Streptococcus pneumoniae (pneumococi), taxonomie, proprietăți biologice, factori de patogenitate, rol în patologia umană. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Caracteristici structurale ale actinomicetelor și spirochetelor. Metode de identificare a acestora.
  • 2. Caracteristici ale imunității antivirale. Imunitatea congenitală și dobândită. Mecanisme celulare și umorale ale imunității înnăscute și dobândite.
  • 3. Enterobacteriaceae, clasificare, caracteristici generale ale proprietăților biologice. Structura antigenică, ecologie.
  • 1. Metode de cultivare a virusurilor: în culturi celulare, embrioni de pui, la animale. Evaluarea lor.
  • 2. Reacția de aglutinare în diagnosticul infecțiilor. Mecanisme, valoare diagnostică. Seruri aglutinante (complexe și monoreceptoare), diagnostice. Reacții de încărcare ale sistemului imunitar.
  • 3. Campylobacter, taxonomie, caracteristici generale, boli cauzate, patogeneza acestora, epidemiologie, diagnostic de laborator, prevenire.
  • 1. Metodă bacteriologică de diagnosticare a bolilor infecțioase, etape.
  • 3. Virusuri ADN oncogene. Caracteristici generale. Teoria virogenetică a apariției tumorilor L.A. Zilbera. Teoria modernă a carcinogenezei.
  • 1. Principii de bază și metode de cultivare a bacteriilor. Medii nutritive și clasificarea acestora. Colonii de diferite tipuri de bacterii, proprietăți culturale.
  • 2. Imunotestul enzimatic. Componentele reacției, opțiunile de utilizare a acesteia în diagnosticul de laborator al bolilor infecțioase.
  • 3. Virușii HIV. Istoria descoperirii. Caracteristicile generale ale virusurilor. Epidemiologia și patogeneza bolii, clinică. Metode de diagnostic de laborator. Problema este prevenirea specifică.
  • 1. Organizarea materialului genetic al unei celule bacteriene: cromozom bacterian, plasmide, transpozoni. Genotipul și fenotipul bacteriilor.
  • 2. Reacția de neutralizare a virusului. Opțiuni de neutralizare virală, domeniul de aplicare.
  • 3. Yersinia, taxonomie. Caracteristicile agentului patogen al ciumei, factori de patogenitate. Epidemiologia și patogeneza ciumei. Metode de diagnostic de laborator, prevenire și terapie specifice.
  • 1. Creșterea și reproducerea bacteriilor. Fazele reproducerii populațiilor bacteriene într-un mediu nutritiv lichid în condiții staționare.
  • 2. Seroterapia si seroprofilaxie. Caracteristicile serurilor anatoxice și antimicrobiene, imunoglobulinelor. Prepararea și titrarea lor.
  • 3. Rotavirusuri, clasificare, caracteristici generale ale familiei. Rolul rotavirusurilor în patologia intestinală a adulților și copiilor. Patogeneza, diagnostic de laborator.
  • 2. Reacția de fixare a complementului în diagnosticul bolilor infecțioase. Componentele reacției, aplicare practică.
  • 3. Virusul hepatitei B și D, virusurile delta, taxonomie. Caracteristicile generale ale virusurilor. Epidemiologia și patogeneza hepatitei B etc. Diagnosticul de laborator, prevenirea specifică.
  • 1. Recombinări genetice: transformare, transducție, conjugare. Din tipuri și mecanism.
  • 2. Căi de pătrundere a microbilor în organism. Doze critice de microbi care provoacă boli infecțioase. Poarta de intrare a infecției. Modalități de distribuție a microbilor și a toxinelor în organism.
  • 3. Virusul rabiei. Taxonomie, caracteristici generale. Epidemiologia și patogeneza virusului rabiei.
  • 1. Microflora corpului uman. Rolul său în procesele fiziologice și patologie normale. Microflora intestinală.
  • 2. Indicarea antigenelor microbiene în material patologic folosind reacții imunologice.
  • 3. Picornavirusuri, taxonomie, caracteristici generale ale familiei. Boli cauzate de virusurile Coxsackie și Echo. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Microflora aerului atmosferic, spații rezidențiale și instituții spitalicești. Microorganismele aerului indicativ sanitar. Căi prin care microbii pătrund și supraviețuiesc în aer.
  • 2. Factori de protecție celulari nespecifici: nereactivitatea celulelor și țesuturilor, fagocitoză, celule natural killer.
  • 3. Yersinia pseudotuberculosis și enterocolită, taxonomie, caracteristici ale proprietăților biologice, factori de patogenitate. Epidemiologia și patogeneza pseudotubului
  • 1. Viruși: morfologia și structura virusurilor, compoziția lor chimică. Principii de clasificare a virusurilor, semnificație în patologia umană.
  • 3. Leptospira, taxonomie, caracteristici ale proprietăților biologice, factori de patogenitate. Patogenia leptospirozei. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Bacterofagii temperați, interacțiunea lor cu celula bacteriană. Fenomenul de lizogenie, conversia fagilor, sensul acestor fenomene.

1. Respirația bacteriilor. Tipuri aerobe și anaerobe de oxidare biologică. Aerobi, anaerobi, anaerobi facultativi, microaerofili.

Pe baza tipurilor de respirație, acestea sunt împărțite în mai multe grupuri.

1) aerobi, care necesită oxigen molecular

2) aerobii obligați nu sunt capabili să crească în absența oxigenului, deoarece îl folosesc ca acceptor de electroni.

3).microaerofilii sunt capabili să crească în prezența unor concentrații mici de O2 (până la 2%) 4) anaerobii nu au nevoie de oxigen liber, obțin E necesar prin descompunerea substanțelor care conțin o cantitate mare de E ascuns.

5) anaerobi obligați - nu pot tolera nici măcar cantități mici de oxigen (clostridial)

6) anaerobi facultativi - adaptați existenței atât în ​​condiții de oxigen, cât și în condiții lipsite de oxigen. Procesul de respirație la microbi este fosforilarea sau fermentația substratului: glicoliză, calea fosfogliconatului și calea cetodeoxifosfogliconatului. Tipuri de fermentație: acid lactic (bifidobacterii), acid formic (enterobacterii), acid butiric (clostridii), acid propionic (propionobacterii),

2. Antigeni, definiție, condiții de antigenicitate. Determinanți antigenici, structura lor. Specificitatea imunochimică a antigenelor: specie, grup, tip, organ, heterospecific. Antigene complete, haptene, proprietățile lor.

Antigenele sunt compuși cu greutate moleculară mare.

La intrarea în organism, ele provoacă o reacție imună și interacționează cu produsele acestei reacții.

Clasificarea antigenelor. 1. După origine:

naturale (proteine, carbohidrați, acizi nucleici, exo- și endotoxine bacteriene, antigene ale țesuturilor și ale celulelor sanguine);

artificiale (proteine ​​dinitrofenilate și carbohidrați);

sintetice (poliaminoacizi sintetizati).

2. După natura chimică:

proteine ​​(hormoni, enzime etc.);

carbohidrați (dextran);

acizi nucleici (ADN, ARN);

antigene conjugate;

polipeptide (polimeri ai a-aminoacizilor);

lipide (colesterol, lecitină).

3. Prin relație genetică:

autoantigene (din țesuturile propriului corp);

izoantigene (de la un donator identic genetic);

aloantigene de la un donator neînrudit din aceeași specie)

4. După natura răspunsului imun:

1) xenoantigene (de la un donator al altei specii). antigene dependente de timus;

2) antigene timus-independente.

Se disting de asemenea:

antigeni externi (intra in organism din exterior);

antigeni interni; provin din moleculele deteriorate ale corpului care sunt recunoscute ca străine

antigene ascunse - antigene specifice

(de exemplu, țesutul nervos, proteinele cristalinului și spermatozoizii); separată anatomic de sistemul imunitar prin bariere histohematice în timpul embriogenezei.

Haptenele sunt substanțe cu greutate moleculară mică care în condiții normale nu provoacă o reacție imună, dar atunci când sunt legate de molecule cu greutate moleculară mare devin imunogene.

Antigenele infecțioase sunt antigene ale bacteriilor, virușilor, ciupercilor și proteelor.

Tipuri de antigene bacteriene:

specifice grupului;

specifice speciei;

specifice tipului.

Pe baza localizării în celula bacteriană, se disting:

O - AG - polizaharid (parte a peretelui celular bacterian);

lipidA - heterodimer; conține glucozamină și acizi grași;

N - AG; parte a flagelilor bacterieni;

K - AG - un grup eterogen de antigene de suprafață, capsulare ale bacteriilor;

toxine, nucleoproteine, ribozomi și enzime bacteriene.

3.Streptocci, taxonomie, clasificare după Lanefield. Caracteristicile proprietăților biologice și factorii de patogenitate ai streptococilor. Rolul streptococilor de grup A în patologia umană. Caracteristicile imunității. Diagnosticul de laborator al infecției cu streptococ.

Familia Streptococcacea

Genul Streptococcus

Potrivit lui Lesfield (clasa se bazează pe diferite tipuri de hemoliză): grupa A (Str. Pyogenes) grupa B (Str. Agalactiae - infecții postpartum și urogenite, mastita, vaginită, sepsis și meningită la nou-născuți.), gr. C ( Str. Equisimilis), gr. D (Enterococcus, Str. Fecalis). Gr.A este un proces infecțios acut cu o componentă alergică (scarlatină, erizipel, miocardită), GrB este principalul agent patogen la animale, și provoacă sepsis la copii. GrS-hemoliza caracteristica (provoaca patologia tractului reparator) GrD-posedat. toate tipurile de hemoliză, fiind un locuitor normal al intestinului uman. Acestea sunt celule sferice, dispuse in perechi.gr+, chemoorganotrofe, solicitante de nutritie. Miercurea, încălziți-vă cu sânge sau zahăr. agar se formează colonii mici pe mediu semisolid, iar pe cele lichide cresc la fund, lăsând mediul transparent. De caracteristicile de creștere pe agar-sânge: alfa-hemoliza (zonă mică de hemoliză cu o culoare verde-gri), beta-hem (prozr), non-hemol. Aerobii nu formează catalaza, ci prin picături, mai rar prin contact.

Parametrii modelului 1) clasă perete – unele au o capsulă.

2) f-r adeziune-teichoi la-voi

3) proteina M-protectoare, previne fagocitoza

4) un număr de toxine: scarlatina eritrogenă, O-streptolizină = hemolizină, leucocidină 5) citotoxine.

Diagnostic: 1)b/l: puroi, mucus din gat - cultura pe sange. agar (prezența/absența zonei de hemoliză), identificare prin Ag St. 2) b/s - frotiuri conform Gram 3) s/l - căutați Ab la O-streptolizină în RSC sau precizie

Tratament: c-lactamn.a/b. Gr.A provocând un proces purulent-inflamator, inflamație, însoțită de puroi abundent, sepsis.

Anaerobi(prefix negativ grecesc an- + aē r aer + b viață) - microorganisme care se dezvoltă în absența oxigenului liber în mediul lor. Găsite în aproape toate probele de material patologic pentru diferite boli purulent-inflamatorii, acestea sunt oportuniste și uneori patogene. Există A. facultativ și obligatoriu. A. facultativ sunt capabili să existe și să se reproducă atât în ​​medii fără oxigen, cât și în medii lipsite de oxigen. Acestea includ Escherichia coli, Yersinia și streptococi, Shigella și alții bacterii.

Obligat A. mor în prezenţa oxigenului liber în mediu. Ele sunt împărțite în două grupe: bacterii care formează spori sau clostridii și bacterii care nu formează spori sau așa-numiții anaerobi non-clostridieni. Printre clostridii există agenți cauzali ai infecțiilor clostridiene anaerobe - a, infecția plăgii clostridiene, a. A. non-clostridiene includ bacterii gram-negative și gram-pozitive în formă de baston sau sferice: bacteroides, fusobacterii, veillonella, peptococi, peptostreptococi, propionibacterii, eubacterii etc. A. non-clostridiene fac parte integrantă din microflora normală a oameni și animale, dar în același timp joacă un rol important în dezvoltarea unor astfel de procese purulent-inflamatorii precum peritonita, plămânii și creierul, pleura, flegmonul zonei maxilo-faciale etc. Cele mai multe infectii anaerobe, cauzat de anaerobi non-clostridieni, este endogen și se dezvoltă în principal cu o scădere a rezistenței organismului ca urmare a rănilor, intervențiilor chirurgicale, răcirii și imunității afectate.

Partea principală a A. semnificative clinic sunt bacteriide și fusobacterii, peptostreptococi și bacili gram-pozitivi spori. Bacteroides reprezintă aproximativ jumătate din procesele purulent-inflamatorii cauzate de bacteriile anaerobe.

Bacteroides - un gen de bacterii anaerobe obligate gram-negative din familia Bacteroidaceae, bastonașe cu colorare bipolară, dimensiune 0,5-1,5´ 1-15 µm, imobile sau în mișcare cu ajutorul flagelilor localizați peritric, au adesea o capsulă polizaharidă, care este un factor de virulență. Ele produc diverse toxine și enzime care acționează ca factori de virulență. În ceea ce privește sensibilitatea la antibiotice, acestea sunt eterogene: bacterioizii, de exemplu grupul B. fragilis, sunt rezistenți la benzilpenicilină. Bacteroidele rezistente la antibioticele b-lactamice produc b-lactamaze (penicilinaze si cefalosporinaze) care distrug penicilina si cefalosporinele. Bacteroidele sunt sensibile la unii derivați de imidazol - metronidazol (tricopol,

flagyl), tinidazol, ornidazol - medicamente eficiente împotriva diferitelor grupuri de bacterii anaerobe, precum și cloramfenicol și eritromicină. Bacteroidele sunt rezistente la aminoglicozide - gentamicina, kanamicina, streptomicina, polimixina, oleandomicina. O parte semnificativă a bacterioidelor sunt rezistente la tetracicline.

Fusobacterium este un gen de bacterii anaerobe obligatorii gram-negative, în formă de baston; trăiesc pe membrana mucoasă a gurii și a intestinelor, sunt imobile sau mobile și conțin endotoxină puternică. F. nucleatum și F. necrophorum se găsesc cel mai adesea în materialul patologic. Cele mai multe fusobacterii sunt sensibile la antibioticele b-lactamice, dar se găsesc tulpini rezistente la penicilină. Fusobacterii, cu excepția F. varium, sunt sensibile la clindamicină.

Peptostreptococcus (Peptostreptococcus) este un gen de bacterii sferice gram-pozitive; dispuse în perechi, tetrade, sub formă de ciorchini sau lanțuri neregulate. Nu au flageli și nu formează spori. Sensibil la penicilină, carbenicilină, cefalosporine, cloramfenicol, rezistent la metronidazol.

Peptococcus (Peptococcus) este un gen de bacterii sferice gram-pozitive, reprezentate de singura specie P. niger. Sunt situate individual, în perechi, uneori sub formă de ciorchini. Nu formează flageli sau spori.

Sensibil la penicilină, carbenicilină, eritromicină, clindamicină, cloramfenicol. Relativ rezistent la metronidazol.

Veillonella este un gen de diplococi anaerobi gram-negativi; sunt situate sub formă de lanțuri scurte, sunt imobile și nu formează spori. Sensibil la penicilină, cloramfenicol, tetraciclină, polimixină, eritromicină, rezistent la streptomicina, neomicina, vancomicina.

Printre alte bacterii anaerobe non-clostridiene izolate din materialul patologic al pacienților, trebuie menționate bacteriile propionice gram-pozitive, volinella gram-negative și altele, a căror semnificație este mai puțin studiată.

Clostridium este un gen de bacterii anaerobe gram-pozitive, în formă de tijă, care formează spori. Clostridiile sunt răspândite în natură, în special în sol, și trăiesc, de asemenea, în tractul gastrointestinal al oamenilor și animalelor. Aproximativ zece specii de clostridii sunt patogene pentru oameni și animale: C. perfringens, C. noviii, C. septicum, C. ramosum, C. botulirnim, C. tetani, C. difficile etc. Aceste bacterii produc exotoxine foarte specifice fiecăreia. activitate biologică a speciilor la care oamenii și multe specii de animale sunt sensibile. C. difficile sunt bacterii mobile cu flageli peritric. Potrivit unui număr de cercetători, aceste bacterii, după terapia antimicrobiană irațională, se înmulțesc, pot provoca pseudomembranoase. C. difficile este sensibil la penicilină, ampicilină, vancomicină, rifampicină,

metronidazol; rezistent la aminoglicozide.

Agentul cauzal al unei infecții anaerobe poate fi orice tip de bacterie, dar cel mai adesea aceste infecții sunt cauzate de diverse asociații de microbi: anaerob-anaerob (bacteroide și fusobacterii); anaerob-aerob (bacteroidi și

Bacteriile sunt prezente peste tot în lumea noastră. Sunt peste tot, iar numărul soiurilor lor este pur și simplu uimitor.

În funcție de necesarul de oxigen din mediul nutritiv pentru a desfășura activitățile vieții, microorganismele sunt clasificate în următoarele tipuri.

  • Bacteriile aerobe obligatorii, care se adună în partea superioară a mediului nutritiv, au conținut cantitatea maximă de oxigen din floră.
  • Bacteriile anaerobe obligatorii, care se găsesc în partea inferioară a mediului, sunt cât mai departe de oxigen.
  • Bacteriile facultative trăiesc în principal în partea superioară, dar pot fi distribuite în mediul înconjurător, deoarece nu depind de oxigen.
  • Microaerofilii preferă concentrații scăzute de oxigen, deși se acumulează în partea superioară a mediului.
  • Anaerobii aerotoleranți sunt distribuiti uniform în mediul nutritiv și sunt insensibili la prezența sau absența oxigenului.

Conceptul de bacterii anaerobe și clasificarea lor

Termenul de „anaerobi” a apărut în 1861, datorită lucrării lui Louis Pasteur.

Bacteriile anaerobe sunt microorganisme care se dezvoltă indiferent de prezența oxigenului în mediul nutritiv. Ei primesc energie prin fosforilarea substratului. Există aerobi facultativi și obligatorii, precum și alte specii.

Cei mai semnificativi anaerobi sunt bacteroidii

Cei mai semnificativi aerobi sunt bacteroidii. Aproximativ cincizeci la sută din toate procesele purulent-inflamatorii, ai căror agenți cauzali pot fi bacterii anaerobe, reprezintă bacteroides.

Bacteroides sunt un gen de bacterii anaerobe obligatorii gram-negative. Acestea sunt tije cu colorabilitate bipolară, a căror dimensiune nu depășește 0,5-1,5 pe 15 microni. Produce toxine și enzime care pot provoca virulență. Diferite bacterii au rezistență diferită la antibiotice: se găsesc atât rezistente, cât și sensibile la antibiotice.

Producția de energie în țesuturile umane

Unele țesuturi ale organismelor vii au rezistență crescută la niveluri scăzute de oxigen. În condiții standard, sinteza adenozin trifosfat are loc aerob, dar cu activitate fizică crescută și reacții inflamatorii, mecanismul anaerob iese în prim-plan.

Adenozin trifosfat (ATP) este un acid care joacă un rol important în producerea de energie a organismului. Există mai multe opțiuni pentru sinteza acestei substanțe: una aerobă și trei anaerobe.

Mecanismele anaerobe pentru sinteza ATP includ:

  • refosforilarea între creatină fosfat și ADP;
  • reacția de transfosforilare a două molecule de ADP;
  • defalcarea anaerobă a glucozei din sânge sau a rezervelor de glicogen.

Cultivarea organismelor anaerobe

Există metode speciale pentru creșterea anaerobilor. Acestea constau in inlocuirea aerului cu amestecuri de gaze in termostate sigilate.

O altă modalitate ar fi să crească microorganismele într-un mediu nutritiv la care se adaugă substanțe reducătoare.

Medii nutritive pentru organisme anaerobe

Există medii de cultură comune și medii nutritive de diagnostic diferenţial. Cele comune includ mediul Wilson-Blair și mediul Kitt-Tarozzi. Cele de diagnostic diferențial includ mediul Hiss, mediu Ressel, mediu Endo, mediu Ploskirev și agar bismut-sulfit.

Baza pentru mediul Wilson-Blair este agar-agar cu adaos de glucoză, sulfit de sodiu și clorură feroasă. Coloniile negre de anaerobi se formează în principal în adâncurile coloanei de agar.

Mediul lui Russell este folosit pentru a studia proprietățile biochimice ale bacteriilor precum Shigella și Salmonella. De asemenea, conține agar-agar și glucoză.

Miercuri Ploskireva inhibă creșterea multor microorganisme, deci este utilizat în scopuri de diagnostic diferențial. Într-un astfel de mediu, agenții patogeni ai febrei tifoide, a dizenteriei și a altor bacterii patogene se dezvoltă bine.

Scopul principal al agarului cu sulfit de bismut este izolarea salmonelei în forma sa pură. Acest mediu se bazează pe capacitatea Salmonellei de a produce hidrogen sulfurat. Acest mediu este similar cu mediul Wilson-Blair din punct de vedere al metodologiei utilizate.

Infecții anaerobe

Majoritatea bacteriilor anaerobe care trăiesc în corpul uman sau animal pot provoca diferite infecții. De regulă, infecția are loc în timpul unei perioade de imunitate slăbită sau de perturbare a microflorei generale a corpului. Exista si posibilitatea ca agentii patogeni sa intre din mediul extern, mai ales toamna tarziu si iarna.

Infecțiile cauzate de bacteriile anaerobe sunt de obicei asociate cu flora mucoaselor umane, adică cu principalele habitate ale anaerobilor. De obicei, astfel de infecții mai mulți agenți patogeni deodată(la 10).

Numărul exact de boli cauzate de anaerobi este aproape imposibil de determinat din cauza dificultății de a colecta materiale pentru analiză, de a transporta probe și de a cultiva bacteriile în sine. Cel mai adesea, acest tip de bacterii se găsește în bolile cronice.

Oamenii de orice vârstă sunt susceptibili la infecții anaerobe. În același timp, copiii au o rată mai mare de boli infecțioase.

Bacteriile anaerobe pot provoca diverse boli intracraniene (meningita, abcese si altele). Răspândirea are loc de obicei prin fluxul sanguin. În bolile cronice, anaerobii pot provoca patologii în zona capului și gâtului: otită, limfadenită, abcese. Aceste bacterii reprezintă un pericol atât pentru tractul gastrointestinal, cât și pentru plămâni. Cu diferite boli ale sistemului genito-urinar feminin, există și riscul de a dezvolta infecții anaerobe. Diverse boli ale articulațiilor și ale pielii pot fi o consecință a dezvoltării bacteriilor anaerobe.

Cauzele infecțiilor anaerobe și semnele acestora

Toate procesele în care bacteriile anaerobe active pătrund în țesuturi duc la infecții. De asemenea, dezvoltarea infecțiilor poate fi cauzată de afectarea aportului de sânge și necroza tisulară (diverse leziuni, tumori, edem, boli vasculare). Infecțiile bucale, mușcăturile de animale, bolile pulmonare, bolile inflamatorii pelvine și multe alte boli pot fi, de asemenea, cauzate de anaerobi.

Infecția se dezvoltă diferit în diferite organisme. Acest lucru este influențat atât de tipul de agent patogen, cât și de starea sănătății umane. Din cauza dificultăților asociate cu diagnosticarea infecțiilor anaerobe, concluzia se bazează adesea pe presupuneri. Infecții cauzate de anaerobi non-clostridieni.

Primele semne ale infecției tisulare cu aerobi sunt supurația, tromboflebita și formarea de gaze. Unele tumori și neoplasme (intestinale, uterine și altele) sunt, de asemenea, însoțite de dezvoltarea microorganismelor anaerobe. În cazul infecțiilor anaerobe, poate apărea un miros neplăcut, cu toate acestea, absența acestuia nu exclude anaerobii ca agent cauzator al infecției.

Caracteristici de obținere și transport de probe

Primul test de identificare a infecțiilor cauzate de anaerobi este o examinare vizuală. Diverse leziuni ale pielii sunt o complicație frecventă. De asemenea, dovada activității vitale a bacteriilor va fi prezența gazului în țesuturile infectate.

Pentru testele de laborator și stabilirea unui diagnostic precis, în primul rând, trebuie să faceți în mod competent obțineți o mostră de materie din zona afectată. Pentru a face acest lucru, ei folosesc o tehnică specială, datorită căreia flora normală nu intră în probe. Cea mai bună metodă este aspirația cu ac drept. Obținerea de material de laborator prin metoda frotiului nu este recomandată, dar este posibilă.

Probele care nu sunt potrivite pentru analize suplimentare includ:

  • spută obținută prin auto-excreție;
  • probe obținute în timpul bronhoscopiei;
  • pete din boltele vaginale;
  • urină cu urinare liberă;
  • fecale.

Următoarele pot fi folosite pentru cercetare:

  • sânge;
  • lichid pleural;
  • aspirate transtraheale;
  • puroiul obținut din cavitatea abcesului;
  • fluid cerebrospinal;
  • puncții pulmonare.

Transport probe este necesar cât mai repede posibil într-un recipient special sau o pungă de plastic cu condiții anaerobe, deoarece chiar și interacțiunea pe termen scurt cu oxigenul poate provoca moartea bacteriilor. Probele lichide sunt transportate într-o eprubetă sau în seringi. Tampoanele cu probe sunt transportate în tuburi cu dioxid de carbon sau medii pre-preparate.

Tratamentul infecției anaerobe

Dacă este diagnosticată o infecție anaerobă, trebuie respectate următoarele principii pentru un tratament adecvat:

  • toxinele produse de anaerobi trebuie neutralizate;
  • habitatul bacteriilor ar trebui schimbat;
  • răspândirea anaerobilor trebuie să fie localizată.

Pentru a respecta aceste principii antibioticele sunt folosite în tratament, care afectează atât anaerobii, cât și organismele aerobe, deoarece adesea flora în infecțiile anaerobe este mixtă. În același timp, atunci când prescrie medicamente, medicul trebuie să evalueze compoziția calitativă și cantitativă a microflorei. Agenții care sunt activi împotriva agenților patogeni anaerobi includ: peniciline, cefalosporine, clapamfenicol, fluorochinolo, metronidazol, carbapenemi și alții. Unele medicamente au efect limitat.

Pentru a controla habitatul bacteriilor, în cele mai multe cazuri, se folosește intervenția chirurgicală, care presupune tratarea țesuturilor afectate, drenarea abceselor și asigurarea circulației normale a sângelui. Metodele chirurgicale nu trebuie ignorate din cauza riscului de complicații care pun viața în pericol.

Uneori folosit metode de tratament auxiliare, precum și din cauza dificultăților asociate cu identificarea cu precizie a agentului cauzal al infecției, se utilizează tratamentul empiric.

Când se dezvoltă infecții anaerobe în cavitatea bucală, se recomandă, de asemenea, să adăugați în dietă cât mai multe fructe și legume proaspete. Cele mai utile pentru aceasta sunt merele și portocalele. Mâncărurile din carne și fast-food-urile sunt supuse restricțiilor.

Infecție anaerobă

Etiologie, patogeneză, terapie antibacteriană.

Prefaţă................................................. ...................................................... 1

Introducere................................................. ....... ................................................. .... 2

1.1 Definiție și caracteristici.............................................. ...... .... 2

1.2 Compoziția microflorei principalelor biotopuri umane.................................. 5

2. Factorii de patogenitate ai microorganismelor anaerobe......... 6

2.1. Rolul microflorei endogene anaerobe în patologie

persoană................................................. ....... ................................................……… . 8

3. Principalele forme de infecție anaerobă............................................. ........... 10

3.1. Infecția pleuropulmonară .................................................................. ................... ......….. 10

3.2. Infecția piciorului diabetic.................................................. ...... . 10

3.3. Bacteremia și sepsisul .................................................................. ..... ................. unsprezece

3.4. Tetanus.................................................. .................................... unsprezece

3.5. Diaree................................................. ............................................... 12

3.6. Infecția chirurgicală a rănilor și a țesuturilor moi.................................................. 12

3.7. Infecția țesuturilor moi care formează gaze.................................. ........ 12

3.8. Mionecroza clostridiană.............................................................. ................. ... 12

3.9. Infecția plăgii necrozante în curs de dezvoltare lent...13

3.10. Infecția intraperitoneală.................................................................. 13

3.11. Caracteristicile abceselor anaerobe experimentale.....13

3.12. Colita pseudomembranoasă ............................................................. ............. ..........14

3.13. Infecție obstetrică și ginecologică.................................................. ......14

3.14. Infecția anaerobă la pacienții cu cancer……………..15

4. Diagnosticare de laborator.............................................. ...... ................15

4.1. Material în studiu .................................................. .......... .....................15

4.2. Etapele cercetării materialelor în laborator..................................16

4.3. Examinarea directă a materialului............................................................. ............ .......16

4.4. Metode şi sisteme de creare a condiţiilor anaerobe...........................................16

4.5. Medii nutritive și cultivare .................................................. .....17

5. Terapia cu antibiotice pentru infectia anaeroba............................................ ....... 21

5.1. Caracteristicile principalelor medicamente antimicrobiene,

utilizat în tratamentul infecţiei anaerobe.................................................21

5.2. Combinație de medicamente beta-lactamice și inhibitori

beta-lactamaze.............................................................. .... ....................................24

5.3. Semnificația clinică a determinării sensibilității anaerobei

microorganisme la medicamentele antimicrobiene……………...24

6. Corectarea microflorei intestinale...................................................................26

  1. Concluzie................................................. ........................................27
  2. Autorii………………………………………………………………….27

Prefaţă

Ultimii ani au fost caracterizați de dezvoltarea accelerată a multor domenii ale microbiologiei generale și clinice, ceea ce se datorează probabil atât înțelegerii noastre mai adecvate a rolului microorganismelor în dezvoltarea bolilor, cât și nevoii medicilor de a utiliza în mod constant informații despre etiologie. a bolilor, proprietățile agenților patogeni cu scopul de a gestiona cu succes pacienții și de a obține rezultate finale satisfăcătoare ale chimioterapiei sau chimioprofilaxiei. Una dintre aceste domenii de dezvoltare rapidă ale microbiologiei este bacteriologia clinică anaerobă. În multe țări din întreaga lume, se acordă o atenție semnificativă acestei secțiuni a microbiologiei. Secțiunile dedicate anaerobilor și infecțiilor anaerobe sunt incluse în programele de formare a medicilor de diferite specialități. Din păcate, în țara noastră, acestei secțiuni de microbiologie s-a acordat o atenție insuficientă, atât în ​​ceea ce privește formarea specialiștilor, cât și aspectul diagnostic al activității laboratoarelor bacteriologice. Ghidul metodologic „Infecția anaerobă” acoperă principalele secțiuni ale acestei probleme - definiție și clasificare, caracteristicile microorganismelor anaerobe, principalele biotopuri ale anaerobilor din organism, caracteristicile formelor de infecție anaerobă, direcții și metode de diagnosticare de laborator, precum și testare cuprinzătoare antibacteriană -rapia (medicamente antimicrobiene, rezistență/sensibilitate a microorganismelor, metode de determinare și depășire a acesteia). Desigur, manualul metodologic nu își propune să ofere răspunsuri detaliate la toate aspectele infecției anaerobe. Este destul de clar că microbiologii care doresc să lucreze în domeniul bacteriologiei anaerobe trebuie să urmeze un ciclu de pregătire special, pentru a stăpâni mai pe deplin problemele de microbiologie, tehnologie de laborator, metode de indicare, cultivare și identificare a anaerobilor. În plus, o bună experiență se câștigă prin participarea la seminarii și simpozioane speciale dedicate infecției anaerobe la nivel național și internațional. Aceste recomandări metodologice se adresează bacteriologilor, medicilor de diferite specialități (chirurgi, terapeuți, endocrinologi, obstetricieni-ginecologi, pediatri), studenților facultăților de medicină și biologică, profesorilor universităților de medicină și școlilor de medicină.

Introducere

Primele idei despre rolul microorganismelor anaerobe în patologia umană au apărut cu multe secole în urmă. În secolul al IV-lea î.Hr., Hipocrate a descris în detaliu tabloul clinic al tetanosului, iar în secolul al IV-lea d.Hr. Xenofon a descris cazuri de gingivita ulceroasă acută necrozantă la soldații greci. Tabloul clinic al actinomicozei a fost descris de Langenbeck în 1845. Cu toate acestea, la acea vreme nu era clar care microorganisme au cauzat aceste boli, care sunt proprietățile lor, la fel cum conceptul de anaerobioză a lipsit până în 1861, când Louis Pasteur a publicat o lucrare clasică despre studiul Vibrio. butirigă și au numit organisme care trăiesc în absența aerului „anaerobe” (17). Ulterior, Louis Pasteur (1877) a izolat și a cultivat Clostridium septicum , şi Israel în 1878 a descris actinomicetele. Agentul cauzal al tetanosului este Clostridium tetani - descoperit în 1883 de N.D. Monastyrsky, iar în 1884 de A. Nikolayer. Primele studii asupra pacienților cu infecție anaerobă clinică au fost efectuate de Levy în 1891. Rolul anaerobilor în dezvoltarea diferitelor patologii medicale a fost pentru prima dată descris și argumentat mai pe deplin de către Veiloon și Zuber în 1893-1898. Ei au descris diferite tipuri de infecții severe cauzate de microorganisme anaerobe (gangrenă pulmonară, apendicită, abcese pulmonare, creier, pelvis, meningită, mastoidită, otită cronică, bacteriemie, parametrită, bartolinită, artrită purulentă). În plus, au dezvoltat multe abordări metodologice pentru izolarea și cultivarea anaerobilor (14). Astfel, până la începutul secolului al XX-lea, multe microorganisme anaerobe au devenit cunoscute, s-a format o idee despre semnificația lor clinică și a fost creată o tehnică adecvată pentru cultivarea și izolarea microorganismelor anaerobe. Din anii 60 până în prezent, relevanța problemei infecțiilor anaerobe continuă să crească. Acest lucru se datorează atât rolului etiologic al microorganismelor anaerobe în patogeneza bolilor, cât și dezvoltării rezistenței la medicamentele antibacteriene utilizate pe scară largă, cât și evoluției severe și mortalității ridicate a bolilor pe care le provoacă.

1.1. Definiție și caracteristici

În microbiologia clinică, microorganismele sunt de obicei clasificate în funcție de relația lor cu oxigenul atmosferic și dioxidul de carbon. Acest lucru poate fi verificat cu ușurință prin incubarea microorganismelor pe agar sânge în diferite condiții: a) în aer normal (21% oxigen); b) în condiţii de incubator cu CO 2 (oxigen 15%); c) în condiţii microaerofile (5% oxigen) d) condiţii anaerobe (0% oxigen). Folosind această abordare, bacteriile pot fi împărțite în 6 grupe: aerobi obligați, aerobi microaerofili, anaerobi facultativi, anaerobi aerotoleranți, anaerobi microaerotoleranți, anaerobi obligatorii. Aceste informații sunt utile pentru identificarea inițială atât a aerobilor, cât și a anaerobilor.

Aerobi. Pentru creștere și reproducere, aerobii obligatorii necesită o atmosferă care să conțină oxigen molecular într-o concentrație de 15-21% sau CO; incubator. Micobacteriile, Vibrio cholerae și unele ciuperci sunt exemple de aerobi obligatorii. Aceste microorganisme își obțin cea mai mare parte a energiei prin procesul de respirație.

Microaerofili(aerobi microaerofili). Au nevoie și de oxigen pentru a se reproduce, dar în concentrații mai mici decât cele prezente în atmosfera camerei. Gonococii și Campylobacter sunt exemple de bacterii microaerofile și preferă o atmosferă cu un conținut de O2 de aproximativ 5%.

Anaerobi microaerofili. Bacteriile care pot crește în condiții anaerobe și microaerofile, dar nu pot crește într-un incubator cu CO 2 sau într-un mediu aerian.

Anaerobi. Anaerobii sunt microorganisme care nu au nevoie de oxigen pentru a trăi și a se reproduce. Anaerobii obligatorii sunt bacterii care cresc numai în condiții anaerobe, adică. într-o atmosferă fără oxigen.

Microorganisme aerotolerante. Ele sunt capabile să crească într-o atmosferă care conține oxigen molecular (aer, incubator cu CO2), dar cresc mai bine în condiții anaerobe.

Anaerobi facultativi(aerobi facultativi). Capabil să supraviețuiască în prezența sau absența oxigenului. Multe bacterii izolate de la pacienți sunt anaerobe facultative (enterobacteriacee, streptococi, stafilococi).

Capnofili. Un număr de bacterii care cresc mai bine în prezența unor concentrații mari de CO 2 sunt numite capnofile sau organisme capnofile. Bacteroidele, fusobacteria, bacteriile hemoglobinofile sunt clasificate ca capnofile, deoarece cresc mai bine într-o atmosferă care conține 3-5% CO 2 (2,

19,21,26,27,32,36).

Principalele grupe de microorganisme anaerobe sunt prezentate în Tabelul 1 (42, 43, 44).

Masaeu. Cele mai semnificative microorganisme anaerobe

Gen

feluri

o scurtă descriere a

Bacteroides

ÎN. fragilis

ÎN. vulgatus

ÎN. distansonis

ÎN. eggerthii

Baghete gram-negative, care nu formează spori

Prevotella

P. melaninogenicus

P. bivia

P. buccalis

P. denticola

P. intermedia

Porphyromonas

P. asaccharolyticum

P. endodontalis

P. gingivalis

Baghete gram-negative, care nu formează spori

Ctostridium

C. perfringens

C. ramosum

C. septice

C. novyi

C. sporogenes

C. sordelii

C. tetani

C. botulinum

C. difficile

Bacili Gram pozitivi, formatori de spori sau bacili

Actinomyces

A. israelii

A. bovis

Pseudoramibacter *

P. alactolyticum

Baghete gram-pozitive, care nu formează spori

E. lentum

E. rectale

E. limosum

Baghete gram-pozitive, care nu formează spori

Bifidobacterium

B. eriksonii

B. adolescenta

B. breve

Tije Gram pozitive

Propionobacteria

P. acnee

P. avidum

P. granulosum

P. propionica**

Gram-pozitiv. tije care nu formează spori

Lactobacillus

L. catenaforme

L. acidophylus

Tije Gram pozitive

Peptococul

P. magnus

P. saccharolyticus

P. asaccharolyticus

Peptostreptococul

P. anaerobiu

P. intermedius

P. micros

P. productus

Coci gram-pozitivi, care nu formează spori

Veilonella

V. parvula

Coci gram-negativi, care nu formează spori

Fusobacterium

F. nucleatum

F. necrophorum

F. varium

F. mortiferum

Fusiform bastoane

Campilobacter

C. făt

C.jejuni

Baghete Gram negative, subțiri, în formă de spirală, care nu formează spori

* Eubacterium alaclolyticum reclasificat ca Pseudoramibacter alactolyticum (43,44)

** anterior Arahnia propionica (44)

*** sinonime F. pseudonecrophorum, F. necrophorum biovar CU(42,44)

1.2. Compoziția microflorei principalelor biotopuri umane

Etiologia bolilor infecțioase a suferit modificări semnificative în ultimele decenii. După cum se știe, anterior principalul pericol pentru sănătatea umană erau infecțiile puternic infecțioase: febra tifoidă, dizenteria, salmoneloza, tuberculoza și multe altele, care se transmiteau predominant exogen. Deși aceste infecții rămân în continuare importante din punct de vedere social și importanța lor medicală crește acum din nou, în general rolul lor a scăzut semnificativ. În același timp, există un rol tot mai mare al microorganismelor oportuniste, reprezentanți ai microflorei normale a corpului uman. Microflora umană normală include mai mult de 500 de specii de microorganisme. Microflora normală care trăiește în corpul uman este reprezentată în mare măsură de anaerobi (Tabelul 2).

Bacteriile anaerobe care locuiesc pe pielea și membranele mucoase ale oamenilor, care efectuează transformarea microbiană a substraturilor de origine exo- și endogenă, produc o gamă largă de diferite enzime, toxine, hormoni și alți compuși biologic activi care sunt absorbiți și se leagă de receptori complementari și influențează. funcția celulelor și organelor. Cunoașterea compoziției microflorei normale specifice a anumitor zone anatomice este utilă pentru înțelegerea etiologiei proceselor infecțioase. Setul de specii de microorganisme care locuiesc într-o anumită zonă anatomică se numește microfloră indigenă. Mai mult, detectarea microorganismelor specifice în cantități semnificative la distanță sau într-un loc neobișnuit nu face decât să sublinieze participarea lor la dezvoltarea procesului infecțios (11, 17, 18, 38).

Tractului respirator. Microflora tractului respirator superior este foarte diversă și include peste 200 de specii de microorganisme incluse în 21 de genuri. 90% dintre bacteriile salivare sunt anaerobe (10, 23). Majoritatea acestor microorganisme sunt neclasificate prin metode moderne de taxonomie și nu au o importanță semnificativă pentru patologie. Tractul respirator al oamenilor sănătoși este cel mai adesea colonizat de următoarele microorganisme - streptococ pneumonie- 25-70%; H aemophilus influenzae- 25-85%; streptococ piogenes- 5-10%; Neisseria meningitidis- 5-15%. Microorganisme anaerobe precum Fusobacterium, Bacteroides spiralis, Peptostreptococul, Peptococul, Veilonella si unele tipuri Actinomyces întâlnită la aproape toți oamenii sănătoși. Bacteriile coliforme se găsesc în tractul respirator la 3-10% dintre oamenii sănătoși. Colonizarea crescută a tractului respirator de către aceste microorganisme a fost detectată la alcoolici, persoanele cu boli severe, la pacienții care au primit terapie antibacteriană care suprimă microflora normală, precum și la persoanele cu funcțiile sistemului imunitar afectate.

Tabelul 2. Conținutul cantitativ al microorganismelor din biotopuri

corpul uman normal

Populațiile de microorganisme din tractul respirator se adaptează la anumite nișe ecologice (nas, faringe, limbă, crăpături gingivale). Adaptarea microorganismelor la biotopi dați este determinată de afinitatea bacteriilor față de anumite tipuri de celule sau suprafețe, adică determinată de tropismul celular sau tisular. De exemplu, streptococ salivare este bine atașată de epiteliul obrazului și domină compoziția mucoasei bucale. Aderența bacteriană

ry poate explica, de asemenea, patogeneza unor boli. streptococ piogenes aderă bine la epiteliul faringelui și provoacă adesea faringită, E. coli are afinitate pentru epiteliul vezicii urinare și, prin urmare, provoacă cistită.

Piele. Microflora indigenă a pielii este reprezentată în principal de bacterii din următoarele genuri: Stafilococ, Micrococcus, Corinobacterii, Propionobacteria, Brevibacterium Și Acinetobacter. Drojdiile din genul sunt, de asemenea, adesea prezente Pityrosporium. Anaerobii sunt reprezentați în mare parte de bacterii gram-pozitive ale genului Propi- onobacterii (de obicei Propionobacteria acnee). Coci gram-pozitivi (Peptostreptococul spp.) Și bacterii gram-pozitive ale genului Eubacterium prezente la unii indivizi.

Uretra. Bacteriile care colonizează uretra distală sunt stafilococii, streptococul nehemolitic, difteroizii și, într-un număr mic de cazuri, diverși reprezentanți ai familiei Enterobacteriaceae. Anaerobii sunt reprezentați într-o măsură mai mare de bacterii gram-negative - BacteroidesȘiFusobacterium spp..

vagin. Aproximativ 50% dintre bacteriile din secrețiile colului uterin și vaginului sunt anaerobe. Majoritatea anaerobilor sunt reprezentați de lactobacili și peptostreptococi. Prevo-tell-urile sunt adesea găsite - P. bivia Și P. disiens. În plus, există bacterii gram-pozitive ale genului Mobiluncus Și Clostridium.

Intestinele. Din cele 500 de specii care locuiesc în corpul uman, aproximativ 300 - 400 de specii trăiesc în intestine. Următoarele bacterii anaerobe se găsesc în cel mai mare număr în intestine - Bacteroides, Bifidobacterium, Clostridium, Eubacterium, LactobacillusȘiPeptostrepto- coccus. Bacteroidele sunt microorganismele dominante. S-a stabilit că pentru o celulă de E. coli există o mie de celule bacteriide.

2. Factori de patogenitate ai microorganismelor anaerobe

Patogenitatea microorganismelor înseamnă capacitatea lor potențială de a provoca boli. Apariția patogenității în microbi este asociată cu dobândirea lor a unui număr de proprietăți care oferă capacitatea de a se atașa, de a pătrunde și de a se răspândi în corpul gazdei, de a rezista mecanismelor sale de apărare și de a provoca leziuni organelor și sistemelor vitale. În același timp, se știe că virulența microorganismelor este o proprietate polideterminată, care se realizează pe deplin numai în corpul unei gazde sensibile la agentul patogen.

În prezent, se disting mai multe grupuri de factori de patogenitate:

a) adezine sau factori de atașare;

b) factori de adaptare;

c) invazine sau factori de penetrare

d) capsulă;

e) citotoxine;

f) endotoxine;

g) exotoxine;

h) enzime, toxine;

i) factori care modulează sistemul imunitar;

j) superantigene;

l) proteine ​​de șoc termic (2, 8, 15, 26, 30).

Etapele și mecanismele, spectrul de reacții, interacțiuni și relații la nivel molecular, celular și organismal dintre microorganisme și organismul gazdă sunt foarte complexe și diverse. Cunoștințele despre factorii de patogenitate ai microorganismelor anaerobe și utilizarea lor practică pentru prevenirea bolilor nu sunt încă suficiente. Tabelul 3 prezintă principalele grupe de factori de patogenitate ai bacteriilor anaerobe.

Tabelul 3. Factorii de patogenitate ai microorganismelor anaerobe

Etapa de interacțiune

Factor

feluri

Adeziune

Polizaharide capsulare fimbrie

Hemaglutininele

Invazie

Fosfolipaza C

Proteaze

Deteriora

tesaturi

Exotoxine

Hemolizinele

Proteaze

Colagenaza

Fibrinolizina

Neuraminidaza

heparinaza

Condriitin sulfat glucoronidază

N-acetil-glucozaminidaza Citotoxine

Enterotoxine

Neurotoxine

P. melaninogenica

P. melaninogenica

Factori care suprimă sistemul imunitar

Produse metabolice Lipopolizaharide

(O-antigen)

Proteaze de imunoglobuline (G, A, M)

C3 și C5 convertaze

Proteaza a 2 -microglobuline Produse metabolice Acizi grași ai anaerobilor

Compuși ai sulfului

Oxidorreductaze

Beta-lactamaze

Majoritatea anaerobilor

Activatori ai factorilor de deteriorare

Lipopolizaharide

(O-antigen)

Structuri de suprafață

S-a stabilit acum că factorii de patogenitate ai microorganismelor anaerobe sunt determinați genetic. Au fost identificate genele cromozomilor și plasmidelor, precum și transpozonii care codifică diferiți factori de patogenitate. Studierea funcțiilor acestor gene, mecanismelor și tiparelor de exprimare, transmitere și circulație într-o populație de microorganisme este o problemă foarte importantă.

2.1. Rolul microflorei endogene anaerobe în patologia umană

Microorganismele anaerobe ale microflorei normale devin foarte adesea agenți cauzali ai proceselor infecțioase localizate în diferite zone anatomice ale corpului. Tabelul 4 arată frecvența microflorei anaerobe în dezvoltarea patologiei. (2, 7, 11, 12, 18, 24, 27).

Se pot formula o serie de generalizări importante cu privire la etiologia şi patogeneza majorităţii tipurilor de infecţii anaerobe: 1) sursa microorganismelor anaerobe este microflora normală a pacienţilor din propriul tract gastrointestinal, respirator sau urogenital; 2) modificările proprietăților tisulare cauzate de traumatisme și/sau hipoxie oferă condiții adecvate pentru dezvoltarea unei infecții anaerobe secundare sau oportuniste; 3) infecțiile anaerobe, de regulă, sunt polimicrobiene și sunt adesea cauzate de un amestec de mai multe tipuri de microorganisme anaerobe și aerobe care au sinergic efect dăunător; 4) infecția este însoțită de formarea și eliberarea unui miros puternic în aproximativ 50% din cazuri (anaerobii neformatori de spori sintetizează acizi grași volatili care provoacă acest miros); 5) infecția se caracterizează prin formarea de gaze, necroză tisulară, dezvoltarea abceselor și a gangrenei; 6) infecția se dezvoltă în timpul tratamentului cu antibiotice aminoglicozide (bacteroidele sunt rezistente la acestea); 7) exudatul este colorat în negru (porphyromonas și prevotella produc pigment maro închis sau negru); 8) infectia are un curs prelungit, lent, adesea subclinic; 9) există modificări necrotice extinse în țesut, o discrepanță între severitatea simptomelor clinice și cantitatea de modificări distructive și sângerare mică pe incizie.

Deși bacteriile anaerobe pot provoca infecții grave și fatale, inițierea infecției depinde în general de starea factorilor de apărare ai organismului, adică. funcțiile sistemului imunitar (2, 5, 11). Principiile tratamentului unor astfel de infecții includ îndepărtarea țesutului mort, drenajul, restabilirea circulației sanguine adecvate, îndepărtarea substanțelor străine și utilizarea terapiei antimicrobiene active adecvate agentului patogen, într-o doză și durată adecvate.

Tabelul 4. Rolul etiologic al microflorei anaerobe

în dezvoltare boli

Boli

Numărul de persoane examinate

Frecvența excreției anaerobilor

Cap și gât

Abcese ale capului netraumatice

Sinuzita cronica

Infecții ale spațiului perimandibular

Cutia toracică

Pneumonie de aspirație

Abces pulmonar

Abdomen

Abcese sau peritonită Apendicită

Abces hepatic

Tractul genital feminin

Tipuri mixte

Abcese pelvine Procese inflamatorii

33 (100%) 22 (88%)

Țesături moi

Infecții ale rănilor

Abcese cutanate

Ulcere ale membrelor diabetice Celulită non-clostridială

Bacteremia

Toate culturile

Sepsis intraabdominal Avort septic

3. Principalele forme de infecție anaerobă

3.1. Infecție pleuropulmonară

Microorganismele anaerobe semnificative din punct de vedere etiologic din această patologie sunt reprezentanți ai microflorei normale a cavității bucale și a tractului respirator superior. Sunt agenții cauzatori ai diferitelor infecții, inclusiv pneumonia de aspirație, pneumonia necrozantă, actinomicoza și abcesul pulmonar. Principalii agenți cauzali ai bolilor pleuropulmonare sunt prezentați în Tabelul 5.

Tabelul 5. Bacteriile anaerobe care cauzează

pleuropulmonar infecţie

Factorii care contribuie la dezvoltarea infecției pleuropulmonare anaerobe la un pacient includ aspirația microflorei normale (ca urmare a pierderii cunoștinței, disfagiei, prezența obiectelor mecanice, obstrucția, igiena orală deficitară, necrotizarea țesutului pulmonar) și răspândirea hematogenă a microorganisme. După cum se poate observa din Tabelul 5, pneumonia de aspirație este cauzată cel mai adesea de organisme desemnate anterior ca specii „bacteroides orale” (în prezent speciile Prevotella și Porphyromonas), Fusobacterium și Peptostreptococcus. Spectrul de bacterii izolate din empiem anaerob și abces pulmonar este aproape același.

3.2. Infecția piciorului diabetic

Dintre cei peste 14 milioane de diabetici din Statele Unite, piciorul rău este cea mai frecventă cauză infecțioasă de spitalizare. Acest tip de infecție este adesea ignorat de pacient în stadiul inițial și, uneori, tratat inadecvat de către medici. În general, pacienții nu se străduiesc să-și examineze cu atenție și în mod regulat extremitățile inferioare și nu urmează recomandările medicilor pentru îngrijirea și regimul de mers pe jos. Rolul anaerobilor în dezvoltarea infecțiilor piciorului la diabetici a fost stabilit cu mulți ani în urmă. Principalele tipuri de microorganisme care provoacă acest tip de infecție sunt prezentate în Tabelul 6.

Tabelul 6. Microorganisme aerobe şi anaerobe care cauzează

infecția piciorului la diabetici

Aerobi

Anaerobi

Proteus mirabili

Bacteroides fragilis

Pseudomonas aeruginosa

alte specii din grupa B. fragilis

Enterobacter aerogenes

Prevotella melaninogenica

Escherichia coli

alte specii de Prevotella\ Porphyromonas

Pneumonie Klebsiella

Fusobacterium nucleatum

alte fusobacterii

Peptostreptococul

Staphylococcus aureus

alte tipuri de clostridii

S-a stabilit că 18-20% dintre pacienții diabetici au o infecție mixtă aerobă/anaerobă. În medie, au fost detectate 3,2 specii de microorganisme aerobe și 2,6 anaerobe per pacient.Din bacteriile anaerobe, peptostreptococii au fost dominanti. Bacteroides, Prevotella și Clostridia au fost adesea detectate. O asociere de bacterii a fost izolată din răni profunde în 78% din cazuri. La 25% dintre pacienți a fost detectată microfloră aerobă gram-pozitivă (stafilococi și streptococi), iar la aproximativ 25% - microfloră aerobă în formă de bastonaș gram-negativă. Aproximativ 50% din cazurile de infecție anaerobă sunt mixte. Aceste infecții sunt mai severe și necesită cel mai adesea amputarea membrului afectat.

3.3. Bacteremia și sepsis

Ponderea microorganismelor anaerobe în dezvoltarea bacteriemiei variază de la 10 la 25%. Majoritatea studiilor indică asta ÎN.fragilis și alte specii din acest grup, precum și Bacteroides thetaiotaomicron sunt o cauză mai frecventă a bacteriemiei. Următoarele specii cel mai frecvent izolate sunt clostridiile (în special Clostridium perfringens) și peptostreptococi. Ele sunt adesea izolate în cultură pură sau în asociații. În ultimele decenii, în multe țări ale lumii s-a înregistrat o creștere a frecvenței sepsisului anaerob (de la 0,67 la 1,25 cazuri la 1000 de internări în spital). Rata mortalității pacienților cu sepsis cauzat de microorganisme anaerobe este de 38-50%.

3.4. tetanos

Tetanusul a fost o infecție gravă și adesea fatală bine-cunoscută încă de pe vremea lui Hipocrate. Timp de secole, această boală a fost o problemă presantă asociată cu împușcături, arsuri și răni traumatice. Controversă Clostridium tetani sunt detectate în fecalele umane și animale și sunt răspândite în mediu. Ramon și colegii săi în 1927 au propus cu succes imunizarea cu toxoid pentru prevenirea tetanosului. Riscul de a dezvolta tetanos este mai mare la persoanele peste 60 de ani din cauza scaderii eficacitatii/pierderii imunitatii protectoare antitoxice post-vaccinare. Terapia include administrarea de imunoglobuline, tratamentul rănilor, terapia antimicrobiană și antitoxică, îngrijirea constantă a asistentei medicale, utilizarea de sedative și analgezice. O atenție deosebită este acordată în prezent tetanosului neonatal.

3.5. Diaree

Există o serie de bacterii anaerobe care provoacă diaree. Anaerobiospirillum succiniciproducens- bacterii mobile în formă de spirală cu flageli bipolari. Agentul patogen este excretat în fecalele câinilor și pisicilor cu infecții asimptomatice, precum și de la persoanele cu diaree. Tulpini enterotoxigenice ÎN.fragilis. În 1984, Mayer a arătat rolul tulpinilor producătoare de toxine ÎN.fragilis în patogeneza diareei. Tulpinile toxice ale acestui agent patogen sunt eliberate în timpul diareei la oameni și animale. Ele nu pot fi diferențiate de tulpinile obișnuite prin metode biochimice și serologice. Experimental, ele provoacă diaree și leziuni caracteristice intestinului gros și intestinului subțire distal cu hiperplazie de criptă. Enterotoxina are o greutate moleculară de 19,5 kD și este termolabilă. Patogenia, spectrul și incidența bolii, precum și terapia optimă, nu au fost încă suficient dezvoltate.

3.6. Infecția anaerobă chirurgicală a rănilor și a țesuturilor moi

Agenții infecțioși izolați din rănile chirurgicale depind în mare măsură de tipul de intervenție chirurgicală. Cauza supurației în timpul intervențiilor chirurgicale curate, care nu sunt însoțite de deschiderea tractului gastrointestinal, urogenital sau respirator, de regulă, este Sf. aureus. În alte tipuri de supurație a plăgii (pur contaminate, contaminate și murdare), microflora polimicrobiană mixtă a organelor rezecate chirurgical este cel mai adesea izolată. În ultimii ani, s-a înregistrat o creștere a rolului microflorei oportuniste în dezvoltarea unor astfel de complicații. Majoritatea rănilor superficiale sunt diagnosticate mai târziu în viață, între a opta și a noua zi după operație. Dacă infecția se dezvoltă mai devreme - în primele 48 de ore după operație, atunci acest lucru este tipic pentru o infecție gangrenoasă cauzată de anumite specii fie de clostridii, fie de streptococ beta-hemolitic. În aceste cazuri Există o creștere dramatică a severității bolii, toxicoză pronunțată, dezvoltarea locală rapidă a infecției care implică toate straturile de țesut corporal în acest proces.

3.7. Formarea de gaze infecția țesuturilor moi

Prezența gazului în țesutul infectat este un semn clinic de rău augur, iar în trecut, această infecție a fost asociată cel mai adesea de către medici cu prezența gangrenei gazoase clostridiene. Acum se știe că infecția care formează gaz la pacienții operați este cauzată de un amestec de microorganisme anaerobe, cum ar fi Clostridium, Peptostreptococul sau Bacteroides, sau unul dintre tipurile de bacterii coliforme aerobe. Factorii predispozanți pentru dezvoltarea acestei forme de infecție sunt bolile vasculare ale extremităților inferioare, diabetul și traumatismele.

3.8. Mionecroza clostridiană

Gangrena gazoasă este un proces distructiv al țesutului muscular asociat cu crepitus local, intoxicație sistemică severă cauzată de clostridiile formatoare de gaze anaerobe.Clostridiile sunt anaerobi obligatorii gram-pozitivi care sunt larg răspândiți în solul contaminat cu excremente animale. La oameni, ei sunt în mod normal locuitori ai tractului gastrointestinal și genital feminin. Uneori pot fi găsite pe piele și în cavitatea bucală. Cea mai semnificativă specie dintre cele 60 cunoscute este Clostridium perfringens. Acest microorganism este mai tolerant la oxigenul aerului și crește rapid. Este o toxină alfa, fosfolipaza C (lecitinaza), care descompune lecitina în fosforilcolină și digliceride, precum și colagenază și proteaze, care provoacă distrugerea țesuturilor. Producția de alfa-toxine este asociată cu o mortalitate ridicată în gangrena gazoasă. Are proprietăți hemolitice, distruge trombocitele, provoacă leziuni capilare intense și distrugerea secundară a țesuturilor. În 80% din cazuri, mionecroza este cauzată de CU.perfringens. În plus, etiologia acestei boli implică CU.novyi, CU. septica, CU.bifer- mentas. Alte tipuri de clostridii C. histoliticum, CU.sporogene, CU.fallax, CU.tertiu au semnificație etiologică scăzută.

3.9. Infecție necrozantă a plăgii în curs de dezvoltare

Infecție agresivă a rănilor care pune viața în pericol Poate apărea la 2 săptămâni după infecție, în special la diabetici

bolnav. De obicei, acestea sunt fie infecții fasciale mixte, fie monomicrobiene. Infecțiile monomicrobiene sunt relativ rare. în aproximativ 10% din cazuri și se observă de obicei la copii. Agenții cauzali sunt streptococii de grup A, Staphylococcus aureus și streptococii anaerobi (peptostreptococi). Stafilococul și streptococul hemolitic sunt izolați cu aceeași frecvență la aproximativ 30% dintre pacienți. Majoritatea se infectează în afara spitalului. Majoritatea adulților au fascilita necrozantă a extremităților (în 2/3 din cazuri extremitățile sunt afectate). La copii, trunchiul și zona inghinală sunt mai des implicate. Infecția polimicrobiană include o serie de procese cauzate de microflora anaerobă. În medie, aproximativ 5 tipuri principale sunt izolate de răni. Rata mortalității pentru astfel de boli rămâne ridicată (aproximativ 50% în rândul pacienților cu forme severe). Persoanele în vârstă au tendința de a avea un prognostic prost. Rata mortalității la persoanele peste 50 de ani este mai mare de 50%, iar la pacienții cu diabet zaharat - mai mult de 80%.

3.10. Infecție intraperitoneală

Infecțiile intra-abdominale sunt cele mai dificile pentru diagnosticarea precoce și tratamentul eficient. Un rezultat de succes depinde în primul rând de diagnosticul precoce, intervenția chirurgicală rapidă și adecvată și utilizarea unui regim antimicrobian eficient. Natura polimicrobiană a microflorei bacteriene implicată în dezvoltarea peritonitei ca urmare a perforației în apendicita acută a fost demonstrată pentru prima dată în 1938. Altemeier. Numărul de microorganisme aerobe și anaerobe izolate din zonele de sepsis intraabdominal depinde de natura microflorei sau a organului lezat. Datele generalizate indică faptul că numărul mediu de specii bacteriene izolate din sursa de infecție variază de la 2,5 la 5. Pentru microorganismele aerobe, aceste date sunt de 1,4-2,0 specii și 2,4-3,0 specii de microorganisme anaerobe. Cel puțin 1 tip de anaerobi este detectat la 65-94% dintre pacienți. Microorganismele aerobe identificate cel mai frecvent sunt Escherichia coli, Klebsiella, Streptococcus, Proteus și Enterobacter, iar microorganismele anaerobe sunt Bacteroides, Peptostreptococcus și Clostridia. Bacteroidele reprezintă 30% până la 60% din toate tulpinile izolate de microorganisme anaerobe. Conform rezultatelor a numeroase studii, 15% dintre cazurile de infecție sunt cauzate de microflora anaerobă și 10% aerobă și, în consecință, 75% sunt cauzate de asociații. Cele mai semnificative dintre ele sunt E.coli Și ÎN.fragilis. Potrivit lui Bogomolova N. S. și Bolshakov L. V. (1996), infecția anaerobă

a fost cauza dezvoltării bolilor odontogenice în 72,2% din cazuri, peritonita apendiculară - în 62,92% din cazuri, peritonita datorată afecțiunilor ginecologice - la 45,45% dintre pacienți, colangita - în 70,2%. Microflora anaerobă a fost izolată cel mai adesea în peritonita severă în stadiile toxice și terminale ale bolii.

3.11. Caracteristicile abceselor anaerobe experimentale

În experiment ÎN.fragilis inițiază dezvoltarea unui abces subcutanat. Evenimentele inițiale sunt migrarea leucocitelor polimorfonucleare și dezvoltarea edemului tisular. După 6 zile, se identifică clar 3 zone: interne - constă din mase necrotice și celule și bacterii inflamatorii modificate degenerativ; cea din mijloc este formată din diafisul leucocitar iar zona exterioară este reprezentată de un strat de colagen și țesut fibros. Concentrația bacteriilor variază de la 108 la 109 la 1 ml de puroi. Un abces se caracterizează printr-un potențial redox scăzut. Este foarte dificil de tratat, deoarece se observă distrugerea medicamentelor antimicrobiene de către bacterii, precum și evaziunea factorilor de apărare ai gazdei.

3.12. Colita pseudomembranoasă

Colita pseudomembranoasă (PMC) este o boală gastrointestinală gravă caracterizată prin plăci exsudative pe mucoasa colonului. Această boală a fost descrisă pentru prima dată în 1893, cu mult înainte de apariția medicamentelor antimicrobiene și de utilizarea lor în scopuri medicinale. S-a stabilit acum că factorul etiologic al acestei boli este Clostridium difficile. Perturbarea microecologiei intestinale din cauza utilizării antibioticelor este cauza dezvoltării MVP și a răspândirii pe scară largă a infecțiilor cauzate de CU.difficile, al cărui spectru clinic de manifestări variază foarte mult - de la transport și diaree autolimitată pe termen scurt până la dezvoltarea MVP. Numărul de pacienți cu colită cauzată de S. difficile, în ambulatoriu 1-3 la 100.000, iar în rândul pacienţilor internaţi 1 la 100-1000.

Patogeneza. Colonizarea intestinului uman cu tulpini toxice CU,difficile este un factor important în dezvoltarea MVP. Cu toate acestea, transportul asimptomatic apare la aproximativ 3-6% dintre adulți și 14-15% dintre copii. Microflora intestinală normală servește ca o barieră de încredere care împiedică colonizarea de către microorganisme patogene. Este ușor deteriorat de antibiotice și este foarte greu de restaurat. Efectul cel mai pronunțat asupra microflorei anaerobe este exercitat de cefalosporinele de generația a 3-a, clindamicină (grupul lincomicinei) și ampicilină. De regulă, toți pacienții cu MVP suferă de diaree. În acest caz, scaunul este lichid cu impurități de sânge și mucus. Există hiperemie și umflarea mucoasei intestinale. Deseori se observă colita ulcerativă sau proctită, caracterizată prin granulații și mucoasă hemoragică. Majoritatea pacienților cu această boală au febră, leucocitoză și tensiune abdominală. Ulterior, pot apărea complicații grave, inclusiv intoxicație generală și locală, hipoalbuminemie. Simptomele diareei asociate antibioticelor încep în zilele 4-5 ale terapiei cu antibiotice. S. este detectată în scaunul unor astfel de pacienţi. difficile în 94% din cazuri, în timp ce la adulții sănătoși acest microorganism este izolat doar în 0,3% din cazuri.

CU.difficile produce două tipuri de exotoxine foarte active - A și B. Toxina A este o enterotoxină care provoacă hipersecreție și acumulare de lichid în intestine, precum și o reacție inflamatorie cu sindrom hemoragic. Toxina B este o citotoxină. Este neutralizat de ser polivalent anti-gangrenos. Această citotoxină a fost găsită la aproximativ 50% dintre pacienții cu colită asociată cu antibiotice fără formare de pseudomembrană și la 15% dintre pacienții cu diaree asociată cu antibiotice cu constatări sigmoidoscopice normale. Efectul său citotoxic se bazează pe depolimerizarea microfilamentelor de actină și deteriorarea citoscheletului enterocitelor. Recent, au apărut tot mai multe date despre CU.difficile ca agent infecţios nosocomial. În acest sens, se recomandă izolarea pacienților chirurgicali care sunt purtători ai acestui microorganism pentru a evita răspândirea infecției în spital. CU.difficile cel mai sensibil la vancomicină, metronidazol și bacitracină. Astfel, aceste observații confirmă faptul că tulpinile producătoare de toxine CU.difficile provoacă o gamă largă de boli, inclusiv diaree, colită și MVP.

3.13. Infecții obstetricale și ginecologice

Înțelegerea tiparelor de dezvoltare a infecțiilor organelor genitale feminine este posibilă pe baza unui studiu aprofundat al microbiocenozei vaginului. Microflora vaginala normala trebuie luata in considerare ca o bariera protectoare impotriva celor mai frecventi agenti patogeni.

Procesele disbiotice contribuie la formarea vaginozei bacteriene (BV). BV este asociată cu dezvoltarea de complicații precum infecțiile anaerobe postoperatorii ale țesuturilor moi, endometrita postpartum și post-avort, întreruperea prematură a sarcinii, infecția intraamniotică (10). Infecția obstetrică și ginecologică este de natură polimicrobiană. În primul rând, aș dori să remarc rolul crescând al anaerobilor în dezvoltarea proceselor inflamatorii acute ale organelor pelvine - inflamația acută a anexelor uterine, endometrita postpartum, în special după nașterea chirurgicală, complicații postoperatorii în ginecologie (pericultită, abcese, infecție a plăgii) (5). Microorganismele izolate cel mai adesea în timpul infecțiilor tractului genital feminin includ Bactemide fragilis, precum și tipuri Peptococul Și Peptostreptococul. Streptococii de grup A nu se găsesc foarte des în infecțiile pelvine. Streptococii de grup B provoacă mai des sepsis la pacientele obstetricale al căror punct de intrare este tractul genital. În ultimii ani, în timpul infecțiilor obstetricale și ginecologice, CU.trachomatis. Cele mai frecvente procese infecțioase ale tractului urogenital includ pelvioperitonita, endometrita după operație cezariană, infecțiile manșetei vaginale după histerectomie și infecțiile pelvine după avortul septic. Eficacitatea clindamicinei în aceste infecții variază de la 87% la 100% (10).

3.14. Infecția anaerobă la pacienții cu cancer

Riscul de a dezvolta infectie la pacientii cu cancer este incomparabil mai mare decat la alti pacienti operati. Această caracteristică este explicată de o serie de factori - severitatea bolii de bază, starea de imunodeficiență, un număr mare de proceduri diagnostice și terapeutice invazive, volumul mare și natura traumatică a intervențiilor chirurgicale și utilizarea unor metode de tratament foarte agresive - radioterapie. si chimioterapie. La pacienţii operaţi de tumori gastrointestinale se dezvoltă în perioada postoperatorie abcese subfrenice, subhepatice şi intraperitoneale de etiologie anaerobă. Agentii patogeni dominanti sunt Bacteroides fragi- lis, Prevotella spp.. Fusobacterium spp., coci gram-pozitivi. În ultimii ani, au apărut tot mai multe rapoarte despre rolul important al anaerobilor nesporogeni în dezvoltarea afecțiunilor septice și eliberarea lor din sânge în timpul bacteriemiei (3).

4. Diagnosticare de laborator

4.1. Material în studiu

Diagnosticul de laborator al infecției anaerobe este o sarcină destul de dificilă. Timpul de cercetare de la momentul livrării materialului patologic de la clinică la laboratorul de microbiologie și până la primirea unui răspuns complet detaliat variază de la 7 la 10 zile, ceea ce nu poate satisface clinicienii. Adesea, rezultatul analizei bacteriologice devine cunoscut în momentul în care pacientul este externat. Inițial, ar trebui să se răspundă la întrebarea: sunt anaerobii prezenți în material? Este important de reținut că anaerobii sunt componenta principală a microflorei locale a pielii și a membranelor mucoase și, în plus, că izolarea și identificarea acestora trebuie efectuate în condiții adecvate. Inițierea cu succes a cercetării în microbiologia clinică a infecției anaerobe depinde de colectarea corectă a materialului clinic adecvat.

În practica de laborator de rutină, cele mai frecvent utilizate materiale sunt: ​​1) leziuni infectate din tractul gastrointestinal sau tractul genital feminin; 2) material din cavitatea abdominală cu peritonită și abcese; 3) sânge de la pacienți septici; 4) scurgeri din bolile inflamatorii cronice ale tractului respirator (sinuzite, otite, mastoidite); 5) material din părțile inferioare ale tractului respirator în timpul pneumoniei de aspirație; 6) lichid cefalorahidian pentru meningită; 7) conținutul unui abces cerebral; 8) material local pentru boli dentare; 9) conţinutul abceselor superficiale: 10) conţinutul plăgilor superficiale; 11) material din răni infectate (chirurgicale și traumatice); 12) probe de biopsie (19, 21, 29, 31, 32, 36, 38).

4.2. Etapele cercetării materialelor în laborator

Diagnosticul și tratamentul cu succes al infecției anaerobe sunt posibile numai cu cooperarea interesată a microbiologilor și clinicienilor de profil adecvat. Obținerea probelor adecvate pentru testarea microbiologică este critică. Metodele de colectare a materialului depind de locația și tipul procesului patologic. Cercetările de laborator se bazează pe indicarea și identificarea ulterioară a speciilor a microorganismelor anaerobe și aerobe conținute în materialul de testat prin metode tradiționale și exprese, precum și pe determinarea sensibilității microorganismelor izolate la medicamentele chimioterapeutice antimicrobiene (2).

4.3. Examinarea materială directă

Există multe teste directe rapide care indică în mod convingător prezența anaerobilor în cantități mari în materialul testat. Unele dintre ele sunt foarte simple și ieftine și, prin urmare, au avantaje față de multe teste de laborator costisitoare.

1. 3 a p a x. Materialele urât mirositoare conțin întotdeauna anaerobi, doar câteva dintre ele sunt inodore.

2. Cromatografia gaz-lichid (GLC). Este una dintre metodele de diagnostic expres. GLC face posibilă determinarea acizilor grași cu lanț scurt (acetic, propionic, izovaleric, izocaproic, caproic) în puroi, care provoacă miros. Folosind GLC, spectrul de acizi grași volatili poate fi utilizat pentru a identifica speciile de microorganisme prezente în acesta.

3. Fluorescență. Examinarea materialelor (puroi, țesuturi) în lumină ultravioletă la o lungime de undă de 365 nm relevă o fluorescență roșie intensă, care se explică prin prezența bacteriilor pigmentate negru aparținând grupelor Basteroides și Porphyromonas și care indică prezența anaerobilor.

4. Bacterioscopie. La examinarea multor preparate colorate prin metoda Gram, frotiul evidențiază prezența celulelor focarului inflamator, a microorganismelor, în special bastonașe polimorfe gram-negative, coci gram-pozitivi mici sau bacili gram-pozitivi.

5. Imunofluorescență. Imunofluorescența directă și indirectă sunt metode exprese și permit identificarea microorganismelor anaerobe în materialul studiat.

6. Metoda imunoenzimelor. Imunotestul enzimatic vă permite să determinați prezența antigenelor structurale sau exotoxinelor microorganismelor anaerobe.

7. Metode biologice moleculare. Reacția în lanț a polimerazei (PCR) a arătat cea mai mare prevalență, sensibilitate și specificitate în ultimii ani. Este folosit atât pentru detectarea bacteriilor direct în material, cât și pentru identificare.

4.4. Metode și sisteme pentru crearea condițiilor anaerobe

Materialele colectate din surse adecvate și în containere sau medii de transport adecvate trebuie transportate prompt la laborator. Cu toate acestea, există dovezi că anaerobii semnificativi clinic în volume mari de puroi sau într-un mediu de transport anaerob supraviețuiesc timp de 24 de ore. Este important ca mediul în care se efectuează inocularea să fie incubat în condiții anaerobe sau plasat într-un vas umplut cu CO2 și depozitat până când este transferat într-un sistem special de incubație. Există trei tipuri de sisteme anaerobe utilizate în mod obișnuit în laboratoarele clinice. Mai utilizate sunt sistemele microanaerostate (GasPark, BBL, Cockeysville), care sunt folosite în laboratoare de mulți ani, în special în laboratoarele mici, și oferă rezultate satisfăcătoare. Vasele Petri inoculate cu bacterii anaerobe sunt plasate în interiorul vasului simultan cu un pachet special generator de gaze și un indicator. Se adaugă apă în pungă, vasul este sigilat ermetic și CO2 și H2 sunt eliberate din pungă în prezența unui catalizator (de obicei paladiu). În prezența unui catalizator, H2 reacționează cu O2 pentru a forma apă. CO2 este necesar pentru creșterea anaerobilor, deoarece aceștia sunt capnofili. Albastrul de metilen este adăugat ca indicator al condițiilor anaerobe. Dacă sistemul de generare a gazului și catalizatorul funcționează eficient, atunci se observă decolorarea indicatorului. Majoritatea anaerobilor necesită cultivare timp de cel puțin 48 de ore. După aceasta, camera este deschisă și vasele sunt examinate inițial, ceea ce nu pare în întregime convenabil, deoarece anaerobii sunt sensibili la oxigen și își pierd rapid viabilitatea.

Recent, au intrat în practică sisteme anaerobe mai simple - pungi anaerobe. Una sau două pahare inoculate cu o pungă generatoare de gaze sunt introduse într-o pungă de plastic transparentă, închisă ermetic și incubate în condiții termostatice. Transparența pungilor de plastic facilitează monitorizarea periodică a creșterii microorganismelor.

Al treilea sistem de cultivare a microorganismelor anaerobe este o cameră închisă automat cu un perete frontal din sticlă (stație anaerobă) cu mănuși de cauciuc și alimentarea automată cu un amestec de gaze fără oxigen (N2, H2, CO2). Materiale, pahare, eprubete, placi pentru identificarea biochimica si determinarea sensibilitatii la antibiotice vor fi amplasate in acest cabinet printr-o trapa speciala. Toate manipulările sunt efectuate de un bacteriolog care poartă mănuși de cauciuc. Materialul și plăcile din acest sistem pot fi vizualizate zilnic, iar culturile pot fi incubate timp de 7-10 zile.

Aceste trei sisteme au avantajele și dezavantajele lor, dar sunt eficiente pentru izolarea anaerobilor și ar trebui să fie în fiecare laborator bacteriologic. Adesea sunt utilizate simultan, deși cea mai mare fiabilitate aparține metodei de cultivare într-o stație anaerobă.

4.5. Medii de cultură și cultivare

Studiul microorganismelor anaerobe se realizează în mai multe etape. Schema generală pentru izolarea și identificarea anaerobilor este prezentată în Figura 1.

Un factor important în dezvoltarea bacteriologiei anaerobe este prezența unei colecții de tulpini bacteriene tipice, inclusiv tulpini de referință din colecțiile ATCC, CDC și VPI. Acest lucru este deosebit de important pentru monitorizarea mediilor de cultură, pentru identificarea biochimică a culturilor pure și evaluarea activității medicamentelor antibacteriene. Există o gamă largă de medii de bază disponibile care sunt utilizate pentru a pregăti medii speciale de cultură pentru anaerobi.

Mediile nutritive pentru anaerobi trebuie să îndeplinească următoarele cerințe de bază: 1) să satisfacă nevoile nutriționale; 2) asigura o crestere rapida a microorganismelor; 3) să fie redus în mod adecvat. Inocularea primară a materialului se efectuează pe plăci de agar cu sânge sau medii de selecție prezentate în tabelul 7.

Din ce în ce mai mult, izolarea anaerobilor obligatorii din materialul clinic se realizează pe medii care includ agenți selectivi într-o anumită concentrație, permițând izolarea anumitor grupuri de anaerobi (20, 23) (Tabelul 8).

Durata incubației și frecvența examinării vaselor inoculate depind de materialul studiat și de compoziția microflorei (Tabelul 9).

Material în studiu

Descărcarea plăgii

Conținutul abceselor,

Aspirat traheobronhonal etc.

Transport la laborator: în Cipru, într-un mediu de transport special (plasarea imediată a materialului în mediu)

Microscopia materialului

Pata Gram

Cultivare și izolare

cultură pură

Cupe aerobe pt

35±2°С comparativ cu

18-28 ore anaerobi

5-10% CO2

  1. 1. Agar cu sânge Microaerostat

Gas-Pak

(H2 + C02)

35±2°С

de la 48 de ore la 7 zile

2. Geloza cu sânge Schedler

35±2°С

de la 48 de ore la 7 zile

  1. 3. Mediu de identificare selectivă

anaerobi

de la 48 de ore la 2 săptămâni

4. Mediu lichid (tioglicolat)

Identificare. Culturi pure din colonii izolate

1. Colorație Gram și Ozheshko pentru a identifica sporii

2.Morfologia coloniilor

3.Relația tip colonie cu oxigenul

4.Diferentiere preliminara bazata pe sensibilitatea la medicamentele antimicrobiene

5. Teste biochimice

Determinarea sensibilității la antibiotice

1.Metoda de diluare în agar sau bulion

2.Metoda discului de hârtie (difuzie)

Orez. 1. Izolarea și identificarea microorganismelor anaerobe

microorganisme anaerobe

miercuri

Scop

Geloză cu sânge pentru Brucella (geloză cu sânge anaerobă CDC, agar cu sânge Schadler) (geloză cu sânge BRU)

Neselectiv, pentru izolarea anaerobilor prezenți în material

Agar biliar esculin pentru Bacteroides(agar BBE)

selectivă și diferențială; pentru izolarea bacteriilor din grupul Bacteroides fragilis

Agar sânge kanamicina-vancomicină(KVLB)

Selectiv pentru majoritatea non-formatori de spori

bacterii gram-negative

Agar fenil etil(MAZĂRE)

Inhibă creșterea Proteus și a altor enterobacterii; stimulează creșterea anaerobilor gram-pozitivi și gram-negativi

Bulion de tioglicol(THIO)

Pentru situatii speciale

Agar cu galbenus(EYA)

Pentru izolarea clostridiilor

Agar cicloserin-cefoxitin-fructoză(CCFA) sau cicloserin manitol agar (CMA) sau cicloserin manitol blood agar (CMBA)

Selectiv pentru C. difficile

Agar cristal-violet-eritromicină-nouă(CVEB)

Pentru izolarea Fusobacterium nucleatum și Leptotrichia buccalis

Agar Bacteroid gingivalis(BGA)

Pentru izolarea Porphyromonas gingivalis

Tabelul 8. Agenți selectivi pentru anaerobii obligați

Organismele

Agenți selectivi

Obligați anaerobii din materialul clinic

neomicina (70 mg/l)

acid nalidixic (10 mg/l)

Actinomyces spp.

metronidazol (5 mg/l)

Bacteroides spp. Fusobacterium spp.

acid nalidixic (10 mg/l) + vancomicina (2,5 mg/l)

Bacteroides urealytica

acid nalidixic (10 mg/l) teicoplanină (20 mg/l)

Clostridium difficile

cicloserina (250 mg/l) cefoxitin (8 mg/l)

Fusobacterium

rifampicina (50 mg/l)

neomicina (100 mg/l)

vancomicină (5 mg/l)

Rezultatele sunt înregistrate prin descrierea proprietăților culturale ale microorganismelor crescute, pigmentarea coloniilor, fluorescența și hemoliza. Apoi se prepară un frotiu din colonii, se colorează cu Gram și astfel se identifică bacteriile gram-negative și gram-pozitive, se examinează microscopic și se descriu proprietățile morfologice. Ulterior, microorganismele fiecărui tip de colonie sunt subcultivate și cultivate în bulion tioglicolat cu adaos de hemină și vitamina K. Morfologia coloniilor, prezența pigmentului, proprietățile hemolitice și caracteristicile bacteriilor cu ajutorul colorației Gram permit identificarea prealabilă și diferențierea anaerobilor. Ca urmare, toate microorganismele anaerobe pot fi împărțite în 4 grupe: 1) Coci Gr+; 2) bacili Gr+ sau cocobacili: 3) coci Gr-; 4) Gr- bacili sau cocobacili (20, 22, 32).

Tabelul 9. Durata incubației și frecvența testării

culturi de bacterii anaerobe

Tipul culturilor

Timp de incubație*

Frecvența studiului

Sânge

În fiecare zi înainte de 7 și după 14

Lichide

Zilnic

Abcese, răni

Zilnic

Căile aeriene

Sputa Aspirat transtraheal Secreţie bronşică

Zilnic

O dată

Zilnic

Zilnic

Tractul urogenital

Vagin, uter Prostată

Zilnic

Zilnic

Zilnic

O dată

Fecale

Zilnic

Anaerobi

Brucella

Actinomicete

Zilnic

de 3 ori pe saptamana

1 dată pe săptămână

*pana la obtinerea unui rezultat negativ

La a treia etapă a cercetării, se realizează o identificare mai lungă. Identificarea finală se bazează pe determinarea proprietăților biochimice, a caracteristicilor fiziologice și genetice, a factorilor de patogenitate într-un test de neutralizare a toxinelor. Deși caracterul complet al identificării anaerobilor poate varia semnificativ, unele teste simple sunt foarte probabil să identifice culturi pure de bacterii anaerobe - colorație Gram, motilitate, determinarea sensibilității la anumite antibiotice folosind metoda discului de hârtie și proprietăți biochimice.

5. Terapie antibacteriană pentru infecția anaerobă

Au apărut tulpini de microorganisme rezistente la antibiotice și au început să se răspândească imediat după introducerea pe scară largă a antibioticelor în practica clinică. Mecanismele de formare a rezistenței microorganismelor la antibiotice sunt complexe și diverse. Ele sunt clasificate în primare și dobândite. Rezistența dobândită se formează sub influența medicamentelor. Principalele moduri de formare a acestuia sunt următoarele: a) inactivarea și modificarea medicamentului de către sistemele enzimatice bacteriene și transferul acestuia într-o formă inactivă; b) scăderea permeabilității structurilor de suprafață ale celulei bacteriene; c) perturbarea mecanismelor de transport în celulă; d) modificarea semnificației funcționale a țintei pentru medicament. Mecanismele de rezistenţă dobândită a microorganismelor sunt asociate cu modificări la nivel genetic: 1) mutaţii; 2) recombinări genetice. Mecanismele de transmitere intra- și interspecie a factorilor extracromozomiali ai eredității - plasmide și transpozoni care controlează rezistența microorganismelor la antibiotice și alte medicamente chimioterapeutice - sunt extrem de importante (13, 20, 23, 33, 39). Informațiile privind rezistența la antibiotice la microorganismele anaerobe provin atât din studii epidemiologice, cât și din studii genetice/moleculare. Datele epidemiologice indică faptul că, din aproximativ 1977, s-a înregistrat o creștere a rezistenței bacteriilor anaerobe la mai multe antibiotice: tetraciclină, eritromicină, penicilină, ampicilină, amoxicilină, ticarcilină, imipenem, metronidazol, cloramfenicol etc. Aproximativ 50% dintre bacteroide sunt rezistente. la penicilina G și tetraciclină.

La prescrierea terapiei antibacteriene pentru o infecție mixtă aerob-anaerobă este necesar să se răspundă la o serie de întrebări: a) unde este localizată infecția?; b) ce microorganisme provoacă cel mai adesea infecții în această zonă?; c) care este gravitatea bolii?; d) care sunt indicaţiile clinice de utilizare a antibioticelor?; e) care este siguranța utilizării acestui antibiotic?; f) care este costul acestuia?; g) care este caracteristica sa antibacteriană?; h) care este durata medie de utilizare a medicamentului pentru a obține vindecare?; i) pătrunde în bariera hemato-encefalică?; j) cum afectează microflora normală?; k) sunt necesare medicamente antimicrobiene suplimentare pentru a trata acest proces?

5.1. Caracteristicile principalelor medicamente antimicrobiene utilizate în tratamentul infecției anaerobe

PENICILIOARE. Din punct de vedere istoric, penicilina G a fost utilizată pe scară largă pentru a trata infecțiile mixte. Cu toate acestea, anaerobii, în special bacteriile din grupul Bacteroides fragilis, au capacitatea de a produce beta-lactamaze și de a distruge penicilina, ceea ce îi reduce eficiența terapeutică. Are toxicitate scăzută sau moderată, efect neglijabil asupra microflorei normale, dar are activitate slabă împotriva anaerobilor producători de beta-lactamaze, în plus, are limitări împotriva microorganismelor aerobe. Penicilinele semisintetice (naflacină, oxacilină, cloxacilină și dicloxacilină) sunt mai puțin active și sunt inadecvate pentru tratamentul infecțiilor anaerobe. Un studiu randomizat comparativ al eficacității clinice a penicilinei și clindamicinei pentru tratamentul abceselor pulmonare a arătat că, atunci când se utilizează clindamicină la pacienți, perioada de producere a febrei și a sputei a fost redusă la 4,4 față de 7,6 zile și, respectiv, la 4,2 față de 8 zile. În medie, 8 (53%) din cei 15 pacienți tratați cu penicilină au fost vindecați, în timp ce toți cei 13 pacienți (100%) s-au vindecat atunci când au fost tratați cu clindamicină. Clindamicina este mai eficientă decât penicilina în tratamentul pacienților cu abces pulmonar anaerob. În medie, eficacitatea penicilinei a fost de aproximativ 50-55%, iar clindamicinei - 94-95%. În același timp, a fost observată prezența microorganismelor rezistente la penicilină în material, care a devenit o cauză comună a ineficacității penicilinei și, în același timp, a arătat că clindamicina este medicamentul de elecție pentru terapie la începutul tratamentului.

T etra c l i n s. Tetraciclinele sunt, de asemenea, caracterizate de scăzut

fără toxicitate și efect minim asupra microflorei normale. Tetraciclinele au fost, de asemenea, anterior medicamentele de elecție, deoarece aproape toți anaerobii erau sensibili la acestea, dar din 1955 a avut loc o creștere a rezistenței la acestea. Doxiciclina și monociclina sunt cele mai active dintre acestea, dar un număr semnificativ de anaerobi sunt, de asemenea, rezistenți la ele.

C h l o r a m p h e n i c o l. Cloramfenicolul are un efect semnificativ asupra microflorei normale. Acest medicament este extrem de eficient împotriva bacteriilor din grupul B. fragilis, pătrunde bine în fluidele și țesuturile corpului și are activitate medie împotriva altor anaerobi. În acest sens, a fost folosit ca medicament de elecție pentru tratamentul bolilor care pun viața în pericol, în special a celor care implică sistemul nervos central, deoarece pătrunde cu ușurință în bariera hemato-encefalică. Din păcate, cloramfenicolul are o serie de dezavantaje (inhibarea hematopoiezei dependentă de doză). În plus, poate provoca anemie aplastică idiosencratică, independentă de doză. Unele tulpini de C. perfringens și B. fragilis sunt capabile să reducă gruparea p-nitro a cloramfenicolului și să o inactiveze selectiv. Unele tulpini de B. fragilis sunt foarte rezistente la cloramfenicol deoarece produc acetiltransferaza. În prezent, utilizarea cloramfenicolului pentru tratamentul infecției anaerobe a scăzut semnificativ atât din cauza fricii de a dezvolta efecte hematologice secundare, cât și a apariției multor medicamente noi, eficiente.

K l i n d a m i tsin. Clindamicina este un derivat 7(S)-clor-7-deoxi al lincomicinei. Modificarea chimică a moleculei de lincomicină a condus la mai multe avantaje: o mai bună absorbție din tractul gastrointestinal, o creștere de opt ori a activității împotriva cocilor aerobi gram-pozitivi, o extindere a spectrului de activitate împotriva multor bacterii anaerobe gram-pozitive și gram-negative, cum ar fi precum și protozoare (toxoplasmă și plasmodium). Indicațiile terapeutice pentru utilizarea clindamicinei sunt destul de largi (Tabelul 10).

Bacteriile Gram-pozitive. Creșterea a peste 90% din tulpinile de S. aureus este inhibată în prezența clindamicinei la o concentrație de 0,1 μg/ml. La concentrații care pot fi ușor atinse în ser, clindamicina este activă împotriva Str. pyogenes, Str. pneumonie, Str. viridans. Majoritatea tulpinilor de bacil difteric sunt, de asemenea, sensibile la clindamicină. Acest antibiotic este inactiv împotriva bacteriilor aerobe gram-negative Klebsiella, Escherichia coli, Proteus, Enterobacter, Shigella, Serration și Pseudomonas. Cocii anaerobi gram-pozitivi, inclusiv toate tipurile de peptococi, peptostreptococi, precum și propionobacteriile, bifidumbacteria și lactobacilii, sunt în general foarte sensibili la clindamicină. Clostridiile semnificative clinic sunt, de asemenea, sensibile la aceasta - C. perfringens, C. tetani, precum și alte clostridii, adesea găsite în infecțiile intraperitoneale și pelvine.

Tabelul 10. Indicații pentru utilizarea clindamicinei

Biotop

Boala

Căile respiratorii superioare

Amigdalita, faringita, sinuzita, otita medie, scarlatina

Căile respiratorii inferioare

Bronșită, pneumonie, empiem, abces pulmonar

Piele și țesuturi moi

Piodermie, furuncule, celulită, impetigo, abcese, răni

Oasele și articulațiile

Osteomielita, artrita septica

Organe pelvine

Endometrită, celulită, infecții ale manșetei vaginale, abcese tubo-ovariene

Cavitatea bucală

Abces parodontal, parodonite

Septicemie, endocardită

Anaerobii Gram negativi - Bacteroides, Fusobacteria și Veillonella - sunt foarte sensibili la clindamicină. Este bine distribuit în multe țesuturi și fluide biologice, astfel încât în ​​majoritatea dintre ele se realizează concentrații terapeutice semnificative, dar nu pătrunde în bariera hemato-encefalică. De interes deosebit sunt concentrațiile medicamentului în amigdale, țesut pulmonar, apendice, trompe uterine, mușchi, piele, oase și lichid sinovial. Clindamicina este concentrată în neutrofile și macrofage. Macrofagele alveolare concentrează clindamicină intracelular (la 30 de minute după administrare, concentrația o depășește de 50 de ori pe cea extracelulară). Crește activitatea fagocitară a neutrofilelor și macrofagelor, stimulează chemotaxia și suprimă producția de anumite toxine bacteriene.

M e tr o n i d a z o l. Acest medicament pentru chimioterapie se caracterizează printr-o toxicitate foarte scăzută, este bactericid împotriva anaerobilor și nu este inactivat de beta-lactamaze bacterioide. Bacteroides sunt foarte sensibili la acesta, dar anumiți coci anaerobi și bacili anaerobi gram-pozitivi pot fi rezistenți. Metronidazolul este inactiv împotriva microflorei aerobe iar în tratamentul sepsisului intraabdominal trebuie combinat cu gentamicina sau unele aminoglicozide. Poate provoca neutropenie tranzitorie. Combinațiile metronidazol-gentamicină și clindamicină-gentamicină nu diferă ca eficacitate în tratamentul infecțiilor grave intra-abdominale.

Ts e f o k s i t i n. Acest antibiotic aparține cefalosporinelor, are toxicitate scăzută și moderată și, de regulă, nu este inactivat de beta-lactamaze bacterioide. Deși există informații despre cazuri de izolare a tulpinilor rezistente de bacterii anaerobe datorită prezenței proteinelor care leagă antibioticele care reduc transportul medicamentului în celula bacteriană. Rezistența bacteriilor B. fragilis la cefoxitină variază de la 2 la 13%. Este recomandat pentru tratamentul infecțiilor abdominale moderate.

C ephot e t a n. Acest medicament este mai activ împotriva microorganismelor anaerobe gram-negative în comparație cu cefoxitina. Cu toate acestea, s-a stabilit că aproximativ 8% până la 25% din tulpinile de B. fragilis sunt rezistente la acesta. Este eficient in tratamentul infectiilor ginecologice si abdominale (abcese, apendicite).

C e p h e m e t a z o l. Are spectru de acțiune similar cu cefoxitina și cefotetanul (mai activ decât cefoxitina, dar mai puțin activ decât cefotetanul). Poate fi utilizat pentru tratarea infecțiilor ușoare până la moderate.

C epha r e z o n. Se caracterizează prin toxicitate scăzută, activitate mai mare în comparație cu cele trei medicamente de mai sus, dar au fost identificate de la 15 la 28% dintre tulpinile rezistente de bacterii anaerobe. Este clar că nu este medicamentul de elecție pentru tratamentul infecției anaerobe.

C eft i z o k s i m. Este un medicament sigur și eficient în tratamentul infecțiilor picioarelor la pacienții diabetici, peritonitei traumatice și apendicitei.

M e r o p e n e m. Meropenemul este un carbapenem nou, care este metilat la poziția 1, caracterizat prin rezistență la acțiunea dehidrogenazei renale 1, care îl distruge. Este de aproximativ 2-4 ori mai activ decât imipenem împotriva organismelor aerobe gram-negative, inclusiv reprezentanți ai enterobacteriilor, hemophilus, pseudomonas, neisseria, dar are o activitate puțin mai mică împotriva stafilococilor, unor streptococi și enterococi. Activitatea sa împotriva bacteriilor anaerobe gram-pozitive este similară cu cea a imipenemului.

5.2. Combinații de medicamente beta-lactamice și inhibitori de beta-lactamaze

Dezvoltarea inhibitorilor de beta-lactamaze (clavulanat, sulbactam, tazobactam) este o direcție promițătoare și permite utilizarea de noi agenți beta-lactamic protejați de hidroliză atunci când sunt administrați concomitent: a) amoxicilină - acid clavulanic - are un spectru mai larg de activitate antimicrobiană decât amoxicilină în monoterapie și eficacitatea sa este apropiată de combinația de antibiotice - penicilină-cloxacilină; b) ticarcilina-acid clavulanic - extinde spectrul de activitate antimicrobiană a antibioticului împotriva bacteriilor producătoare de beta-lacgamaze, precum stafilococii, hemophilus, klebsiella și anaerobii, inclusiv bacteroides. Concentrația inhibitorie minimă a acestui amestec a fost de 16 ori mai mică decât cea a ticarcilinei; c) ampicilină-sulbactam - atunci când sunt combinate într-un raport de 1:2, spectrul lor se extinde semnificativ și include stafilococi, hemophilus, klebsiella și majoritatea bacteriilor anaerobe. Doar 1% dintre bacteriide sunt rezistente la această combinație; d) cefaperazon-sulbactam - într-un raport de 1:2, de asemenea, extinde semnificativ spectrul activității antibacteriene; e) piperacilină-tazobactam. Tazobactam este un nou inhibitor beta-lactamic care acționează asupra multor beta-lactamaze. Este mai stabil decât acidul clavulanic. Această combinație poate fi considerată ca un medicament pentru monoterapia empirică a infecțiilor polimicrobiene severe, cum ar fi pneumonia, sepsisul intraabdominal, infecția necrozantă a țesuturilor moi, infecțiile ginecologice; f) Imipenem-cilastatin - Imipenem este un membru al unei noi clase de antibiotice cunoscute sub numele de carbapeneme. Folosit în combinație cu cilastatină într-un raport de 1:1. Eficacitatea lor este similară cu clindamicină-aminoglicozide în tratamentul infecției chirurgicale anaerobe mixte.

5.3. Semnificația clinică a determinării sensibilității microorganismelor anaerobe la medicamentele antimicrobiene

Creșterea rezistenței multor bacterii anaerobe la agenții antimicrobieni ridică întrebarea cum și când este justificată determinarea sensibilității la antibiotice. Costul acestei teste și timpul necesar pentru a obține un rezultat final măresc și mai mult importanța acestei probleme. Este clar că terapia inițială pentru infecțiile anaerobe și mixte ar trebui să fie empirică. Se bazează pe natura specifică a infecțiilor și pe un anumit spectru de microfloră bacteriană în timpul unei anumite infecții. Trebuie luate în considerare starea fiziopatologică și utilizarea anterioară a medicamentelor antimicrobiene, care ar putea modifica microflora normală și microflora leziunii, precum și rezultatele colorației Gram. Următorul pas ar trebui să fie identificarea timpurie a microflorei dominante. Informații despre spectrul de sensibilitate antibacteriană a speciilor microflorei dominante. Informațiile despre spectrul de sensibilitate antibacteriană specifică speciei a microflorei dominante ne vor permite să evaluăm caracterul adecvat al regimului de tratament ales inițial. În tratament, dacă evoluția infecției este nefavorabilă, este necesar să se utilizeze determinarea sensibilității unei culturi pure la antibiotice. În 1988, Grupul de lucru pentru anaerobi a revizuit recomandările și indicațiile pentru testarea sensibilității la antibiotice a anaerobilor.

Determinarea sensibilităţii anaerobilor se recomandă în următoarele cazuri: a) este necesară stabilirea unor modificări ale sensibilităţii anaerobilor la anumite medicamente; b) necesitatea de a determina spectrul de activitate al noilor medicamente; c) în cazurile de asigurare a monitorizării bacteriologice a unui pacient individual. În plus, anumite situații clinice pot dicta și necesitatea implementării acesteia: 1) în cazul unui regim antimicrobian inițial ales fără succes și al unei infecții persistente; 2) când alegerea unui medicament antimicrobian eficient joacă un rol cheie în deznodământul bolii; .3) când alegerea medicamentului într-un anumit caz este dificilă.

Trebuie avut în vedere că, din punct de vedere clinic, există și alte puncte: a) creșterea rezistenței bacteriilor anaerobe la medicamentele antimicrobiene este o mare problemă clinică; b) clinicienii au dezacorduri cu privire la eficacitatea clinică a unor medicamente împotriva infecției anaerobe; c) există discrepanțe între rezultatele sensibilității microorganismelor la medicamente in vitro și eficacitatea acestora in vivo; r) interpretarea rezultatelor care este acceptabilă pentru aerobi poate să nu fie întotdeauna aplicabilă anaerobilor. Observarea sensibilității/rezistenței a 1200 de tulpini de bacterii izolate din diferiți biotopi a arătat că o parte semnificativă dintre acestea sunt foarte rezistente la cele mai utilizate medicamente (Tabelul 11).

Tabelul 11. Rezistența bacteriilor anaerobe la

antibiotice utilizate pe scară largă

Bacterii

Antibiotice

Procentul formelor rezistente

Peptostreptococul

Penicilină Eritromicină Clindamicina

Clostridium perfringens

Penicilină Cefoxitin Metronidazol Eritromicină Clindamicină

Bacteroides fragilis

Cefoxitin Metronidazol Eritromicină Clindamicină

Veilonella

Penicilină Metronidazol Eritromicină

În același timp, numeroase studii au stabilit concentrații minime inhibitorii ale celor mai comune medicamente care sunt adecvate pentru tratamentul infecțiilor anaerobe (Tabelul 12).

Tabelul 12. Concentrații minime inhibitorii

antibiotice pentru microorganisme anaerobe

Concentrația minimă inhibitorie (MIC) este cea mai mică concentrație a unui antibiotic care inhibă complet creșterea microorganismelor. O problemă foarte importantă este standardizarea și controlul calității determinării sensibilității microorganismelor la antibiotice (testele utilizate, standardizarea acestora, prepararea mediilor, reactivilor, pregătirea personalului care efectuează acest test, utilizarea culturilor de referință: B. fragilis-ATCC 25285; B. thetaiotaomicron - ATCC 29741; C. perfringens-ATCC 13124; E. lentum-ATCC 43055).

În obstetrică și ginecologie, penicilina, unele cefalosporine din generația 3-4, lincomicina și cloramfenicolul sunt folosite pentru a trata infecțiile anaerobe. Cu toate acestea, cele mai eficiente medicamente antianaerobe sunt reprezentanții grupului 5-nitroimidazol - metronidazol, tinidazol, ornidazol și clindamicină. Eficacitatea tratamentului cu metronidazol în monoterapie este de 76-87%, în funcție de boală, și de 78-91% cu tinidazol. Combinația de imidazoli cu aminoglicozide și cefalosporine de generația 1-2 crește rata de succes a tratamentului la 90-95%. Clindamicina joacă un rol semnificativ în tratamentul infecțiilor anaerobe. Combinația de clindamicină cu gentamicina este metoda standard de tratare a bolilor purulent-inflamatorii ale organelor genitale feminine, în special în cazurile de infecții mixte.

6. Corectarea microflorei intestinale

În ultimul secol, microflora normală a intestinului uman a făcut obiectul unor cercetări active. Numeroase studii au stabilit că microflora indigenă a tractului gastrointestinal joacă un rol semnificativ în asigurarea sănătății organismului gazdă, jucând un rol important în maturizarea și menținerea funcției sistemului imunitar, precum și în asigurarea unui număr de procesele metabolice. Punctul de plecare pentru dezvoltarea manifestărilor disbiotice în intestin este suprimarea microflorei anaerobe indigene - bifidobacterii și lactobacili, precum și stimularea proliferării microflorei oportuniste - enterobacterii, stafilococi, streptococi, clostridii, candida. I. I. Mechnikov a formulat principiile științifice de bază privind rolul microflorei intestinale indigene, ecologia acesteia și a propus ideea înlocuirii microflorei dăunătoare cu altele utile pentru a reduce intoxicația organismului și a prelungi viața umană. Ideea lui I. I. Mechnikov a fost dezvoltată în continuare în dezvoltarea unui număr de preparate bacteriene utilizate pentru a corecta sau „normaliza” microflora umană. Se numesc „eubiotice” sau „probiotice” și conțin sau vii

bacterii uscate din genurile Bifidobacterium și Lactobacillus. S-a demonstrat activitatea imunomodulatoare a unui număr de eubiotice (se remarcă stimularea formării anticorpilor și activitatea macrofagelor peritoneale). De asemenea, este important ca tulpinile de bacterii eubiotice să aibă rezistență cromozomială la antibiotice, iar administrarea lor în comun crește supraviețuirea animalelor. Cele mai răspândite sunt formele de lapte fermentat de lactobacterină și bifidumbacterin (4).

7. Concluzie

Infecția anaerobă este una dintre problemele nerezolvate ale medicinei moderne (în special chirurgie, ginecologie, terapie, stomatologie). Dificultățile de diagnostic, evaluarea incorectă a datelor clinice, erorile de tratament, implementarea terapiei antibacteriene etc. duc la o mortalitate ridicată la pacienții cu infecție anaerobă și mixtă. Toate acestea indică necesitatea de a elimina rapid atât lipsa de cunoștințe existente în acest domeniu de bacteriologie, cât și deficiențele semnificative în diagnostic și terapie.

Organisme anaerobe

Bacteriile aerobe și anaerobe sunt identificate preliminar într-un mediu nutritiv lichid în funcție de gradientul de concentrație de O2:
1. Aerobic obligatoriu bacterii (foame de oxigen). Mai ales colectate în partea de sus a eprubetei pentru a absorbi cantitatea maximă de oxigen. (Excepție: micobacterii - creștere sub formă de peliculă la suprafață datorită membranei ceară-lipidice.)
2. Obligatoriu anaerob bacteriile se adună în partea de jos pentru a evita oxigenul (sau nu cresc).
3. Opțional bacteriile se adună în principal în partea superioară (cel mai avantajos decât glicoliza), dar pot fi găsite în tot mediul, deoarece nu sunt dependente de O2.
4. Microaerofili sunt colectate în partea superioară a eprubetei, dar optimul lor este o concentrație scăzută de oxigen.
5. Aerotolerant Anaerobii nu răspund la concentrațiile de oxigen și sunt distribuite uniform în eprubeta.

Anaerobi- organisme care obțin energie în absența oxigenului prin fosforilarea substratului; produșii finali de oxidare incompletă a substratului pot fi oxidați pentru a produce mai multă energie sub formă de ATP în prezența acceptorului final de protoni de către organismele care efectuează fosforilarea oxidativă.

Anaerobii sunt un grup mare de organisme, atât la nivel micro, cât și la nivel macro:

  • microorganisme anaerobe- un grup mare de procariote și unele protozoare.
  • macroorganisme - ciuperci, alge, plante și unele animale (clasa foraminifere, majoritatea helminților (clasa flukes, tenia, viermi rotunzi (de exemplu, viermi rotunzi)).

În plus, oxidarea anaerobă a glucozei joacă un rol important în funcționarea mușchilor striați ai animalelor și oamenilor (mai ales în starea de hipoxie tisulară).

Clasificarea anaerobilor

Conform clasificării stabilite în microbiologie, există:

  • Anaerobi facultativi
  • anaerobii capneisti și microaerofilii
  • Anaerobi aerotoleranti
  • Anaerobi moderat strict
  • Anaerobi obligatorii

Dacă un organism este capabil să treacă de la o cale metabolică la alta (de exemplu, de la respirația anaerobă la cea aerobă și înapoi), atunci este clasificat condiționat ca anaerobi facultativi .

Până în 1991, în microbiologie a existat o clasă anaerobii capneici, necesitând o concentrație redusă de oxigen și o concentrație crescută de dioxid de carbon (Tip bovin Brucella - B. abortus)

Un organism anaerob moderat strict supraviețuiește într-un mediu cu O 2 molecular, dar nu se reproduce. Microaerofilii sunt capabili să supraviețuiască și să se reproducă într-un mediu cu presiune parțială scăzută de O2.

Dacă un organism nu poate „trece” de la respirația anaerobă la cea aerobă, dar nu moare în prezența oxigenului molecular, atunci aparține grupului anaerobi aerotoleranti. De exemplu, acidul lactic și multe bacterii ale acidului butiric

Obliga Anaerobii mor în prezența oxigenului molecular O2 - de exemplu, reprezentanți ai genului de bacterii și arhee: Bacteroides, Fusobacterium, Butyrivibrio, Metanobacteriile). Astfel de anaerobi trăiesc în mod constant într-un mediu lipsit de oxigen. Anaerobii obligatorii includ unele bacterii, drojdii, flagelați și ciliați.

Toxicitatea oxigenului și a formelor sale pentru organismele anaerobe

Un mediu care conține oxigen este agresiv față de formele de viață organice. Acest lucru se datorează formării speciilor reactive de oxigen în timpul vieții sau sub influența diferitelor forme de radiații ionizante, care sunt mult mai toxice decât oxigenul molecular O2. Factorul care determină viabilitatea unui organism într-un mediu cu oxigen este prezența unui sistem antioxidant funcțional capabil să elimine: anionul superoxid (O 2 −), peroxidul de hidrogen (H 2 O 2), oxigenul singlet (O.), ca precum și oxigenul molecular ( O 2 ) din mediul intern al organismului. Cel mai adesea, o astfel de protecție este asigurată de una sau mai multe enzime:

  • superoxid dismutază, eliminând anionul superoxid (O 2 -) fără beneficii energetice pentru organism
  • catalaza, eliminând peroxidul de hidrogen (H 2 O 2) fără beneficii energetice pentru organism
  • citocrom- o enzimă responsabilă de transferul electronilor de la NAD H la O 2. Acest proces oferă organismului beneficii energetice semnificative.

Organismele aerobe conțin cel mai adesea trei citocromi, anaerobi facultativi - unul sau doi, anaerobii obligați nu conțin citocromi.

Microorganismele anaerobe pot influența activ mediul, creând un potențial redox adecvat al mediului (ex. Cl. perfringens). Unele culturi de microorganisme anaerobe inoculate, înainte de a începe să se înmulțească, reduc pH-ul 20 de la o valoare la

În același timp, glicoliza este caracteristică doar anaerobilor, care, în funcție de produșii finali de reacție, se împart în mai multe tipuri de fermentație:

  • fermentarea acidului lactic – gen Lactobacillus ,streptococ , Bifidobacterium, precum și unele țesuturi de animale multicelulare și oameni.
  • fermentație alcoolică - Saccharomycetes, Candida (organisme din regnul fungic)
  • acid formic - familia enterobacteriaceelor
  • acid butiric - unele tipuri de clostridii
  • acid propionic - propionobacterii (de exemplu, Propionibacterium acnes)
  • fermentație cu eliberare de hidrogen molecular - unele specii de Clostridia, fermentație Stickland
  • fermentarea metanului - de ex. Metanobacteriile

Ca urmare a descompunerii glucozei, se consumă 2 molecule și se sintetizează 4 molecule de ATP. Astfel, randamentul total de ATP este de 2 molecule de ATP și 2 molecule de NADH 2. Piruvatul obținut în timpul reacției este utilizat de celulă în mod diferit, în funcție de tipul de fermentație pe care îl urmează.

Antagonism între fermentație și putrefacție

În procesul de evoluție, s-a format și consolidat antagonismul biologic al microflorei fermentative și putrefactive:

Descompunerea carbohidraților de către microorganisme este însoțită de o scădere semnificativă a mediului, în timp ce descompunerea proteinelor și aminoacizilor este însoțită de o creștere (alcalinizare). Adaptarea fiecărui organism la o anumită reacție a mediului joacă un rol vital în natură și viața umană, de exemplu, datorită proceselor de fermentație, este împiedicată putrezirea silozului, a legumelor fermentate și a produselor lactate.

Cultivarea organismelor anaerobe

Izolarea unei culturi pure de anaerobi este schematică

Cultivarea organismelor anaerobe este în principal o sarcină a microbiologiei.

Pentru cultivarea anaerobilor se folosesc metode speciale, a căror esență este eliminarea aerului sau înlocuirea acestuia cu un amestec de gaze specializate (sau gaze inerte) în termostate sigilate. - anaerostate .

O altă modalitate de a crește anaerobi (cel mai adesea microorganisme) pe medii nutritive este adăugarea de substanțe reducătoare (glucoză, acid formic de sodiu etc.) care reduc potențialul redox.

Medii de cultură comune pentru organisme anaerobe

Pentru mediul general Wilson - Blair baza este agar-agar cu adaos de glucoză, sulfit de sodiu și clorură feroasă. Clostridiile formează colonii negre pe acest mediu datorită reducerii sulfitului la anionul sulfură, care se combină cu cationii de fier (II) pentru a produce o sare neagră. De regulă, coloniile negre pe acest mediu apar în adâncurile coloanei de agar.

miercuri Kitta - Tarozzi constă din bulion de carne-peptonă, glucoză 0,5% și bucăți de ficat sau carne tocată pentru a absorbi oxigenul din mediu. Înainte de însămânțare, mediul este încălzit într-o baie de apă clocotită timp de 20 - 30 de minute pentru a elimina aerul din mediu. După însămânțare, mediul nutritiv este imediat acoperit cu un strat de parafină sau vaselină pentru a-l izola de oxigen.

Metode generale de cultură pentru organisme anaerobe

GasPak- sistemul asigura chimic un amestec gazos constant acceptabil pentru cresterea majoritatii microorganismelor anaerobe. Într-un recipient sigilat, apa reacționează cu tabletele de borohidrură de sodiu și bicarbonat de sodiu pentru a produce hidrogen și dioxid de carbon. Hidrogenul reacţionează apoi cu oxigenul din amestecul de gaze pe un catalizator de paladiu pentru a forma apă, care reacţionează apoi pentru a doua oară în reacţia de hidroliză a borohidrurii.

Această metodă a fost propusă de Brewer și Allgaer în 1965. Dezvoltatorii au introdus o pungă de unică folosință generatoare de hidrogen, pe care l-au dezvoltat ulterior în pliculețe generatoare de dioxid de carbon care conțin un catalizator intern.

metoda Zeissler folosit pentru a izola culturi pure de anaerobi formatori de spori. Pentru a face acest lucru, se inoculează pe mediu Kitt-Tarozzi, se încălzește timp de 20 de minute la 80 °C (pentru a distruge forma vegetativă), se umple mediul cu ulei de vaselină și se incubează timp de 24 de ore într-un termostat. Apoi sunt inoculate pe agar de zahăr din sânge pentru a obține culturi pure. După 24 de ore de cultivare, se studiază coloniile de interes - sunt subcultivate pe mediu Kitt-Tarozzi (urmată de monitorizarea purității culturii izolate).

Metoda Fortner

Metoda Fortner- inoculările se efectuează pe o cutie Petri cu un strat îngroșat de mediu, împărțit în jumătate printr-un șanț îngust tăiat în agar. O jumătate este inoculată cu o cultură de bacterii aerobe, cealaltă cu bacterii anaerobe. Marginile vasului sunt umplute cu parafină și incubate într-un termostat. Inițial, se observă creșterea microflorei aerobe, iar apoi (după absorbția oxigenului) creșterea microflorei aerobe se oprește brusc și începe creșterea anaerobei.

metoda Weinberg folosit pentru a obţine culturi pure de anaerobi obligatorii. Culturile crescute pe mediu Kitta-Tarozzi sunt transferate în bulion de zahăr. Apoi, folosind o pipetă Pasteur de unică folosință, materialul este transferat în eprubete înguste (tuburi Vignal) cu agar peptonă cu zahăr, scufundând pipeta pe fundul eprubetei. Tuburile inoculate se racesc rapid, ceea ce permite fixarea materialului bacterian in grosimea agarului intarit. Tuburile sunt incubate într-un termostat, iar apoi coloniile crescute sunt examinate. Când se găsește o colonie de interes, se face o tăietură în locul ei, se selectează rapid materialul și se inoculează pe mediul Kitta-Tarozzi (cu controlul ulterior al purității culturii izolate).

metoda Peretz

metoda Peretz- se adauga o cultura de bacterii in agar-agar zahar topit si racit si se toarna sub sticla asezata pe batoane de pluta (sau fragmente de chibrituri) intr-o cutie Petri. Metoda este cea mai puțin fiabilă dintre toate, dar destul de simplu de utilizat.

Medii nutritive de diagnostic diferențial

  • miercuri Gissa(„rând pestriț”)
  • miercuri Ressel(Russell)
  • miercuri Ploskireva sau bactoagar "J"
  • Agar sulfit de bismut

Şuierat media: La 1% apă peptonă se adaugă o soluție 0,5% dintr-un anumit carbohidrat (glucoză, lactoză, maltoză, manitol, zaharoză etc.) și indicatorul acido-bazic al lui Andrede, se toarnă în eprubete în care se pune un flotor pentru a capta gazul. produse formate în timpul descompunerii hidrocarburilor.

mediul lui Russell(Russell) este folosit pentru a studia proprietățile biochimice ale enterobacteriilor (Shigella, Salmonella). Conține agar agar nutritiv, lactoză, glucoză și indicator (albastru de bromotimol). Culoarea mediului este verde ierb. Se prepară de obicei în eprubete de 5 ml cu o suprafață teșită. Semănatul se realizează prin înțepare în adâncimea coloanei și strivire de-a lungul suprafeței teșite.

Miercuri Ploskireva(bactoagar F) este un mediu de diagnostic diferențial și selectiv, deoarece inhibă creșterea multor microorganisme și favorizează creșterea bacteriilor patogene (agenți cauzatori ai febrei tifoide, febrei paratifoide, dizenteriei). Bacteriile lactoză-negative formează colonii incolore pe acest mediu, în timp ce bacteriile lactoză-pozitive formează colonii roșii. Mediul conține agar, lactoză, verde strălucitor, săruri biliare, săruri minerale, indicator (roșu neutru).

Agar sulfit de bismut este destinat izolării salmonelei în formă pură din materialul infectat. Conține hidrolizat triptic, glucoză, factori de creștere Salmonella, verde strălucitor și agar. Proprietățile diferențiale ale mediului se bazează pe capacitatea salmonelei de a produce hidrogen sulfurat și pe rezistența acestora la prezența sulfurei, verde strălucitor și citrat de bismut. Coloniile sunt marcate cu negru cu sulfură de bismut (tehnica este similară cu mediul Wilson - Blair).

Metabolismul organismelor anaerobe

Metabolismul organismelor anaerobe are mai multe subgrupe diferite:

Metabolismul energetic anaerob în țesuturi persoanăȘi animalelor

Producția de energie anaerobă și aerobă în țesuturile umane

Unele țesuturi animale și umane sunt foarte rezistente la hipoxie (în special țesutul muscular). În condiții normale, sinteza ATP are loc aerob, iar în timpul activității musculare intense, când livrarea de oxigen către mușchi este dificilă, în stare de hipoxie, precum și în timpul reacțiilor inflamatorii în țesuturi, domină mecanismele anaerobe de regenerare a ATP. În mușchii scheletici, au fost identificate 3 tipuri de cale anaerobă și o singură cale aerobă pentru regenerarea ATP.

3 tipuri de căi anaerobe pentru sinteza ATP

Cele anaerobe includ:

  • Mecanismul creatinfosfatazei (fosfogen sau alactat) - refosforilarea dintre creatina fosfat si ADP
  • Miokinaza - sinteza (altfel resinteza) ATP în reacția de transfosforilare a 2 molecule de ADP (adenilat ciclază)
  • Glicolitic - descompunerea anaerobă a glucozei din sânge sau a rezervelor de glicogen, ducând la formarea
CATEGORII

ARTICOLE POPULARE

2023 „kingad.ru” - examinarea cu ultrasunete a organelor umane