Este un frotiu eficient pentru amprentarea unei leziuni cutanate? Obținerea și prelucrarea materialului pentru cercetări citologice

frotiu-amprentă

un preparat pentru microscopie preparat prin atingerea unei lame de sticlă de țesutul sau organul examinat, urmată de uscare, fixare și colorare.

1. Mică enciclopedie medicală. - M.: Enciclopedie medicală. 1991-96 2. Primul ajutor. - M.: Marea Enciclopedie Rusă. 1994 3. Dicţionar enciclopedic de termeni medicali. - M.: Enciclopedia Sovietică. - 1982-1984.

Vedeți ce este o „amprentă” în alte dicționare:

Pregătirea microscopului (vezi Preparate microscopice), care se prepară din țesuturi sau mai rar din bacterii care cresc pe medii solide. Pentru a face acest lucru, o bucată de țesut este tăiată din organ și tăierea acesteia este atinsă o dată sau de mai multe ori (!) pentru o lamă de sticlă, un frotiu... Dicţionar de microbiologie

Un preparat pentru microscopie preparat prin atingerea unei lame de sticlă cu țesutul sau organul examinat, urmat de uscare, fixare și colorare... Dicționar medical mare

Frotiu Papanicolaou, test Papanicolaou sau frotiu citologic (testul Papanicolaou în engleză, testul Papanicolau sau frotiul Papanicolau) un test care poate fi utilizat pentru a identifica celulele precanceroase sau canceroase din vagin și col uterin (vezi Malign ... ... Wikipedia

Administrare artificială la animale de laborator (vezi) cercetare. microorganisme, toxine, cercetare. material care este de așteptat să conțină microbi sau toxinele acestora. În microbiologie Z. e. folosit pentru a reproduce boala sau... Dicţionar de microbiologie

- (celula histologică cytus + doctrina logos greacă) se bazează pe studiul cu ajutorul microscopului a caracteristicilor structurale ale celulelor, a compoziției celulare a organelor tisulare, a fluidelor corporale ale oamenilor și animalelor în condiții normale și în procese patologice. Ts. și.... ... Enciclopedie medicală

- (din greaca veche: βίος viata si ὄψις aspect) o metoda de cercetare in care se efectueaza prelevarea intravitala de celule sau tesuturi din organism in scop de diagnostic. Biopsia este o metodă obligatorie de confirmare a diagnosticului când... ... Wikipedia

Biopsia (din grecescul „βίος” viață și „όψη” aspect/aspect) este o metodă de cercetare prin care celulele sau țesuturile sunt prelevate intravital din organism și apoi examinate microscopic. O biopsie este obligatorie... ... Wikipedia

Vezi semn, micime, consecință și urma a dispărut, atacă urma, nu există urmă... Dicționar de sinonime și expresii ruse similare ca înțeles. sub. ed. N. Abramova, M.: Dicționare rusești, 1999. urmă marca, amprentă, amprentă; amprentă, imprimare, reflectare, ...... Dicţionar de sinonime

Un set de metode pentru detectarea și studierea proprietăților morfologice și tinctoriale în bacterii (microbi) în probe de laborator, material patologic sau în probe din mediul extern folosind microscopie. Folosit pentru stabilirea diagnosticului de infecție... ... Dicţionar de microbiologie

Lista de episoade din serialul de televiziune Dexter, despre criminalul fictiv în serie Dexter Morgan, care lucrează ca expert criminalist în stropi de sânge pentru poliția din Miami. Primele șase sezoane ale seriei constau din 72 de episoade. În Rusia spectacolul... ... Wikipedia

Cuvântul gag este foarte comun în limba rusă modernă. Poartă amprenta stilistică a vorbirii colocviale. Sensul său principal poate fi definit după cum urmează: pe nimic altceva decât pe propriile invenții, pe propriul capriciu, nu se bazează... ... Istoria cuvintelor

Pentru a determina în ce stare se află pacientul, de ce boală suferă, medicul poate folosi adesea un frotiu de amprentă. Această metodă este utilizată pe scară largă în diferite domenii ale medicinei. Dermatologi, ginecologi, urologi, oncologi - toți recurg la ea cu o frecvență diferită. O examinare a frotiului vă permite să determinați rapid patologia și să prescrieți un curs competent de tratament.

Un frotiu-amprentă este un preparat medical; este pregătit pentru utilizare prin presarea țesuturilor pe o lamă de sticlă. Amprenta bine fixată și colorată este examinată la microscop.

Frotiul de amprentă este utilizat pentru a rezolva o varietate de probleme. Cel mai adesea este folosit pentru:

Nu există o modalitate generală de a lua tampoane. Metoda folosită de medic va diferi în funcție de problema pacientului și de scopul studiului.

Materialul biologic din diferite părți ale corpului poate fi folosit pentru un frotiu. Dacă vorbim despre diagnosticarea cancerului de sân, atunci materialul de amprentă va fi luat de către medic din mameloanele pacientului. Dacă este detectată o infecție, puroiul va fi luat pentru un frotiu din partea corpului care a fost deteriorată de inflamație. Cel mai frecvent utilizat pentru frotiuri sunt secrețiile din organele abdominale.

Zona cu probleme poate fi localizată nu numai pe suprafața pielii, ci și sub ea. Dacă un medic se confruntă cu o situație similară, va trebui să deschidă pielea pentru a obține amprente. Pentru a lua un frotiu din locuri greu accesibile, se folosesc dispozitive speciale - tampoane, perii. Descărcarea rămâne pe ele și apoi este distribuită cu grijă pe o lamă de sticlă.

Amprenta frotiu de la un ulcer pe organele genitale

Urologii, venerologii și ginecologii sunt nevoiți cel mai adesea să preia amprente de la organele genitale ale pacienților lor. De obicei, puteți judeca natura infecției prin răzuirea uretrei sau uretrei. Dacă pacientul suferă de o boală minoră, aceasta poate fi suficientă. Cu toate acestea, infecția nu afectează întotdeauna uretra.

Bolile cu transmitere sexuală, adică bolile dobândite pe cale sexuală, afectează în primul rând nu uretra, ci membrana mucoasă. Acest lucru este tipic pentru sifilis și herpes genital, precum și pentru o serie de boli similare. La un pacient care se confruntă cu probleme venerice, se formează ulcere pe membrana mucoasă a perineului și o amprentă cu tampon este luată direct din această zonă afectată.

Pentru a examina un frotiu prelevat dintr-un ulcer, specialiștii folosesc microscopia în câmp întunecat. În unele cazuri, nu va putea determina boala cu acuratețe absolută. Cu toate acestea, dacă, în urma examinării amprentelor, se descoperă treponeme, medicul, fără îndoială, va diagnostica pacientul cu sifilis.

De asemenea, microscopia în câmp întunecat vă permite să distingeți ulcerele care apar cu herpes de orice alte boli.

Amprenta de frotiu a capului penisului

Glandul penisului este adesea folosit ca obiect pentru un frotiu la un bărbat. Motivul pentru aceasta poate fi balanopostita, în care capul însuși sau preputul care îl acoperă devine inflamat.

Un frotiu prelevat de pe cap vă permite să identificați o serie de probleme. Poate detecta coci, E. coli, infecții fungice și o serie de alte boli.

Dacă balanopostita, conform suspiciunii medicului, este de origine herpetică, se va preleva un frotiu de amprentă nu numai din cap, ci și din veziculele care apar pe piele. Dacă celulele Tzanck se găsesc în vezicule, atunci pacientul suferă de herpes genital. Materialul biologic rezultat este colorat în timpul examinării. Această procedură este posibilă numai atunci când apar vezicule.

Frotiu de amprentă pentru examen citologic

O examinare citologică a amprentelor digitale este efectuată de către oncologi pentru a detecta celulele atipice din materialul biologic obținut în urma frotiurilor, indicând faptul că pacientul suferă de cancer. În acest caz, se prelevează un frotiu de amprentă din tumoare, care poate fi localizat nu numai pe organele genitale, ci și pe alte zone ale pielii.

În timpul unui examen citologic, se evaluează întreaga compoziție celulară: se măsoară dimensiunile nucleelor ​​și celulelor.

Tehnica face posibilă diagnosticarea nu numai a cancerului, ci și a altor procese care nu sunt legate de oncologie.

Se pregătește să ia un frotiu

Pacientul nu poate veni la spital și poate fi supus imediat acestei proceduri. Necesită pregătire îndelungată. Dacă un pacient este suspectat că are o infecție, nu trebuie să ia antiseptice și antibiotice înainte de a face un frotiu, deoarece acestea pot distorsiona tabloul clinic și chiar pot masca infecția.

Pacientul nu trebuie să spele zona din care va fi luat frotiul. Dacă acest lucru este necesar din motive de igienă, puteți clăti zona cu apă curentă obișnuită, fără să folosiți săpun sau alte produse de curățare.

Luarea unui frotiu poate fi îngreunată de plăci, vezicule și alte formațiuni care apar pe piele. În acest caz, acestea vor fi îndepărtate înainte de începerea procedurii.

Cum studiezi un frotiu-amprentă?

Este necesar un microscop pentru a examina frotiul luat. Lama pe care este plasat materialul biologic trebuie să fie absolut curată și uscată.

Medicamentul poate fi reparat folosind diferite metode. În mod obișnuit, pentru fixare se utilizează căldură, alcool etilic, metilic sau sublimat 95% și vapori de acid acetic. Metoda aleasă depinde de laboratorul în care se va desfășura cercetarea. Astăzi, preparatele special dezvoltate, care sunt un amestec de o serie de substanțe chimice, sunt utilizate în mod activ pentru fixare.

Fixatorul este esențial pentru eficacitatea întregii proceduri. Dacă un specialist folosește o soluție de calitate insuficientă, aceasta va avea un efect dăunător asupra structurii celulelor din frotiu și va da probabil un rezultat fals negativ. Pe baza rezultatelor analizei, pacientul va fi informat că este absolut sănătos, dar în realitate nu este cazul. Doar o soluție de fixare de înaltă calitate poate păstra locația corectă a tuturor celulelor frotiului și poate identifica formațiunile bacteriene dintre ele.

Materialul fix este supus colorării, care pot fi orientative sau diferențiale.

Autorii): Jan Rybniček, MVDr, Diplomat Colegiul European de Dermatologie Veterinară
Organizație(e): Serviciul Dermatologie și Dermatopatologie, Cehia
Revistă: №2 - 2013

Majoritatea bolilor de piele au un tablou clinic similar, dar pot fi distinse nouă grupuri principale de tulburări dermatologice caracteristice:

– alopecie

– formarea de solzi/cruste/seboree

– macule/papule/pustule de deschidere

– ganglioni/tumori

– modificări ale pigmentării

Odată ce clinicianul începe să clasifice fiecare pacient într-una dintre categoriile enumerate mai sus, îi va deveni mult mai ușor să formuleze o listă de diagnostice diferențiale și să dezvolte un plan de diagnostic. Trebuie amintit că pacientul poate avea boli concomitente în momentul actual care îngreunează stabilirea diagnosticului principal .

Un diagnostic rapid pune adesea dificultăți semnificative pentru un medic practicant, așa că în continuare vom vorbi despre metodele de cercetare de laborator disponibile care necesită timp și bani minim. Cele mai simple și mai rapide teste de diagnostic utilizate în practică:

– zgârieturi de piele

– Trihoscopie

– Pieptănarea cu un pieptene sau o perie

– Testul Scotch

– Test pentru dermatofite

– Citologie cutanată

Răzuire ale pielii

Acest studiu trebuie efectuat în toate cazurile! Pentru efectuarea răzuirii pielii sunt necesare următoarele echipamente și materiale: ulei mineral, lame de sticlă, lamă de bisturiu sau spatulă (chiuretă), microscop.

Examinarea în razele unei lămpi Wood este extrem de nespecifică, cu toate acestea, atunci când este detectată fluorescența, firele de păr afectate sunt smulse și supuse unei examinări ulterioare (microscopie după tratarea medicamentului cu o soluție alcalină, cultură pentru identificarea unei culturi de dermatofite). O soluție de KOH 10% este aplicată pe o lamă de sticlă, lâna îndepărtată este plasată, încălzită peste o flacără și se efectuează microscopia, mai întâi acoperită cu o sticlă de acoperire, mai întâi cu mărire mică (obiectiv 10x), apoi cu mărire mare ( obiectiv 40x). Colorația cu clorolactofenol poate fi utilizată pentru o mai bună vizualizare.

Testul Scotch

Pentru a obține material pentru citologie, este necesar să tăiați părul scurt din zona selectată, să apăsați strâns banda de bandă, apoi este scufundat unul câte unul în soluții de colorant, lipit pe o lamă de sticlă și se efectuează microscopia. Această metodă identifică cu ușurință ciupercile de drojdie din gen Malassezia sub formă de „matryoshka”, bacterii din gen Simonsiella(indică intrarea salivei în timpul linsului) etc.

Trihoscopie

În timpul microscopiei, se acordă atenție structurii și pigmentării firelor de păr, se examinează vârfurile părului și se evaluează tricograma (raportul părului în diferite faze ale ciclului folicular: anagen/telogen). Anagenul este stadiul de creștere, rădăcina părului îndepărtat este moale și capătă o formă rotunjită („mânere de umbrelă”). Catagenul este o etapă intermediară, creșterea părului se oprește, rădăcina are forma unei perii înconjurată de o membrană sticloasă. Telogenul este stadiul de repaus al foliculului de păr, rădăcina părului își pierde pigmentul, se îngustează spre sfârșit sub forma unei „perise de artă” și capătă aspectul unei „sulițe”. Există fire de păr primare și secundare (în mod normal). Căderea părului primar poate fi unul dintre criteriile de diagnostic pentru unele alopecii (de exemplu, alopecia X). Tijele primare de păr sunt mai mari în diametru, iar medulara este întotdeauna mai groasă decât cortexul. Părul secundar este mai mic în diametru, adesea ondulat, medularul este mai subțire decât cortexul.

Nu există standarde stricte pentru Trichogramma, totuși există observații care descriu un raport anagen/telogen de 1:9 iarna și 1:1 vara la unii câini. Există caracteristici de rasă - la câinii cu păr în continuă creștere (de exemplu, pudeli), predomină foliculii în stadiul anagen, indiferent de perioada anului, iar la câinii din rasele nordice se poate observa o telogenizare pronunțată a foliculilor.

Prezența a 100% din păr în stadiul telogen în cele mai multe cazuri nu este o normă; se poate datora prelevării necorespunzătoare, tulburărilor hormonale, alopeciei X, efluviului telogen. Factorii hormonali influențează ciclul foliculului de păr și sunt însoțiți de telogenizare; din cauza unei întârzieri a ciclului foliculului de păr, părul trece treptat prin procesul de îmbătrânire (lana neagră devine roșiatică, părul roșu se decolorează, vârfurile se pot despica). Parul primar dispare, iar subpelul retinut are aspectul de par de catelus. Cauzele endocrine ale unei astfel de alopecie pot fi hipotiroidismul, hiperestrogenismul, hipercortizolismul. O cauză non-endocrină este sincronizarea tuturor firelor de păr telogen cauzate de boală gravă sau stres. De îndată ce părul își reia creșterea, remisiunea apare după 1-2 luni. Alopecia X este o boală cu etiologie neclară.

Tulburările structurale ale rădăcinilor părului apar din cauza distrofiei foliculare sau a displaziei. În cazuri rare, acest lucru se poate datora deteriorării granulelor de pigment. Rădăcinile părului sunt, de asemenea, deteriorate de alopecia areata și de expunerea la medicamente citotoxice (rar).

Atentie la varfurile parului: in mod normal au o forma ascutita, dar cu alopecie datorata linsului se observa semne de traumatisme la varfurile parului (pot fi rupte). Capetele părului se pot deteriora din cauza fragilității crescute cauzate de modificările structurale. De exemplu, s-a remarcat apariția capetelor de păr bifurcate din cauza trichofitozei la Golden Retrievers. Modificările patologice ale vârfurilor părului pot fi rezultatul spălării și pieptănării extrem de agresive a hainei, precum și deteriorării mecanice în zonele cu frecare crescută.

La evaluarea firului de păr, pot fi detectați spori dermatofiți. Când este efectuată corect, tricoscopia dă un rezultat pozitiv în 60-70% din cazurile de dermatofitoză. Este de preferat să examinați părul care are fluorescență sub o lampă Wood. Structura firului de păr este perturbată nu numai cu dermatofitoză, ci și într-o serie de alte cazuri, de exemplu, chimioterapie (rar), traumatisme mecanice și chimice (îngrijire agresivă), lipsă de nutrienți, boli ereditare (tricorexis nodular etc. .). Modificări caracteristice în structura firului de păr sunt observate în tricomalacia medulară a ciobanilor germani, care se manifestă la câinii adulți. Blana apare tunsă pe corp, coadă și zona umăr-scapulară. În timpul trihoscopiei, se observă fisuri longitudinale și rupturi în firele de păr. Se observă modificări caracteristice în alopecia asociată cu producția afectată de melanină - alopecia de culoare „slăbită” și displazia foliculară a părului negru. Câinii albaștri și maro deschis sunt susceptibili la „alopecie de albire”. Cu această boală, granule mari de pigment se găsesc în părul cu culoarea slăbită, ceea ce provoacă o fragilitate crescută a părului, ceea ce duce la alopecie. Displazia foliculară a părului negru apare la câinii bi și tricolori, afectând doar foliculii de păr negri. Cățeii se nasc normali, dar ulterior zonele cu păr întunecat suferă treptat alopecie. Trihoscopia dezvăluie aglomerări anormale de melanină în firul de păr.

Trichoscopia poate detecta cu ușurință agregatele de keratină sub formă de gipsuri de foliculi de păr pe firul de păr. Acestea apar ca urmare a defectelor de keratinizare (seboreea primară a cocker spanielilor, dermatoză datorată deficienței de vitamina A, adenită a glandelor sebacee, leishmanioză, demodicoză), precum și a altor boli foliculare, de exemplu, foliculita bacteriană.

Citologia pielii

Citologia cutanată este o metodă rapidă, neinvazivă, care are o mare valoare diagnostică. Acest tip de studiu este deosebit de valoros pentru diagnosticul leziunilor nodulare, exsudative, pustuloase, cu formare de cruste și seboree, precum și cu otita medie. Pentru leziunile nodulare, este de preferat să se obțină material prin aspirație cu ac fin folosind o seringă de 10 ml cu ace 21G, 24G. Pentru leziunile care scurge, frotiurile de amprentă pot fi examinate. De asemenea, preparatele de bandă adezivă și, bineînțeles, răzuirea profundă sunt supuse examenului citologic. Preparatele se usucă la aer; se poate folosi fixarea cu metanol. Folosesc un colorant Wright modificat (Diff-Qick), iar laboratoarele efectuează și colorații cu coloranți speciali și imunocitochimie. Preparatele sunt vizualizate secvenţial folosind lentile 4x, 10x, 40x, 100x (cu ulei de imersie).

În răzuirea de pe piele normală predomină corneocitele; sunt prezente și alte keratinocite și fibroblaste unice. Atunci când se efectuează o examinare citologică a materialului din zonele inflamate, se acordă atenție următoarelor celule:

– Neutrofile (degenerative și nedegenerative);

– Macrofage;

– Limfocite/celule plasmatice;

– Eozinofile și mastocite;

– Celule acantolitice (keratinocite rotunjite, lipsite de procese);

– Celulele neoplazice.

De asemenea, pot fi detectate microorganisme (bacil, coci, Malassezia, alte ciuperci, Leishmania etc.).

Folosesc următoarele criterii principale pentru diagnosticul diferenţial citologic:

– Bacteriile și celulele epiteliale – creșterea excesivă bacteriană;

– Neutrofile și bacterii degenerative – piodermie;

– Neutrofile nedegenerative în număr mare + celule acantolitice – pemfigus foliaceu, pemfigus eritematos etc.(în plus + histopatologie);

– Neutrofile + macrofage – piogranulom/granulom (infecție fungică, bacteriană atipică);

– Limfocite, plasmocite – inflamatie cronica, pododermatita plasmacitara, limfom (in plus + limfoblaste);

– Malassezia sp. iar celulele epiteliale – dermatita Malassezia.

Atunci când se evaluează morfologia celulară, se obișnuiește să se evalueze următoarele semne de malignitate:

– Criterii citoplasmatice (anizocitoză, macrocitoză, intensitate diferită a colorării (grad de bazofilie), incluziuni/vacuolizare atipice, absența granulelor specifice, raport nuclear-citoplasmatic mare, precum și prezența în prepararea celulelor care diferă semnificativ în acest parametru) ;

– Criterii nucleare (anizocarioză, macrocarioză, modificări ale formei nucleare, cromatina rară sau hipercromazie, anizocromazie, indice mitotic ridicat, mitoze neregulate, nucleoli multipli, nucleoli giganți, forma patologică a nucleolilor).

La examinarea preparatelor citologice ale leziunilor nodulare, trebuie să se răspundă la următoarele întrebări:

– Inflamație/tumoare;

– Neoplazie – benign/malign;

– Sursa de neoplazie;

– Origine tisulară: tumori epiteliale, mezenchimale, hematopoietice (celule rotunde).

Cele mai frecvente diagnostice citologice diferențiale ale leziunilor cutanate tumorale în practică sunt:

– Tumori epiteliale (keratoacantom, carcinom spinocelular și altele);

– Tumori mezenchimale (fibrosarcom, melanom etc.);

– Tumori cu celule rotunde (mastocitom, histiocitom, limfom);

Datorită disponibilității în creștere a histopatologiei în ultimii ani, capacitatea de a diagnostica diferite patologii dermatologice a crescut semnificativ. În ciuda acestui fapt, este încă destul de rar să se recurgă la prelevarea de specimene de histobiopsie din cauza posibilității de a obține rezultate neinformative. Prin urmare, informații suplimentare sunt dedicate evaluării necesității de a efectua o histobiopsie cutanată, selecția corectă a zonei cutanate pentru examinarea histologică, colectarea corectă a probei, alegerea unui patolog și interpretarea raportului histologic. Doar dacă toate aceste condiții sunt îndeplinite se poate obține un diagnostic precis.

1) Histobiopsia nu este utilizată în mod obișnuit pentru diagnostic la câinii cu prurit cronic. În cele mai multe cazuri, rezultatele unei biopsii nu vor oferi aceleași informații pe care le poate obține un dermatolog în timpul unui examen clinic.

2) Histobiopsia cutanată poate fi utilă în următoarele cazuri:

– Alopecia, când nu este posibil să se pună un diagnostic folosind metode de diagnostic „rapide” (de exemplu, tricoscopie, răzuire cutanată, citologie...)

– Peeling atunci când diagnosticul nu poate fi pus cu ajutorul testelor „rapide”.

– Pete, papule, pustule rupte atunci când diagnosticul nu poate fi pus prin teste „rapide”

– Eroziuni nevindecatoare, ulcere, fistule

– Ganglioni pe termen lung, compactări, tumori

– Depigmentare și hiperpigmentare neobișnuită

– Suspiciunea de boli autoimune

– Suspiciune de boli de piele, pentru care confirmarea diagnosticului este posibilă doar histologic (de exemplu, adenita glandelor sebacee)

– Cazuri în care se suspectează un diagnostic care pune viața în pericol (dermatomiozită etc.)

– Cazuri în care nu există răspuns la un tratament complet rațional

Cum să obțineți histobioptate cutanate de înaltă calitate

Pentru a obține un diagnostic histologic clar, corect, trebuie urmați următorii pași:

1) Selectarea unui loc pentru biopsie

Specimenele adecvate trebuie prezentate medicului patolog, astfel încât clinicianul trebuie să aibă grijă să selecteze locul adecvat al pielii. În majoritatea cazurilor, de la un pacient trebuie prelevate cel puțin 3-5 probe de piele pentru a obține un diagnostic corect. Alegerea locului de biopsie depinde de tipul de leziune găsit:

– Alopecie: Biopsiile trebuie obținute dintr-o zonă de piele complet cheală (de preferință 2), la marginea pielii normale și o zonă de alopecie (1) și din piele acoperită cu păr normal (dacă există), astfel încât medicul patolog să poată comparați foliculii de păr fiziologici și foliculii din zona procesului patologic al acestui pacient.

– Leziuni solzoase (tegumente „seboreice”): Se prelevează 2-3 biopsii din zona afectată și o probă de piele normală (1) astfel încât să fie posibilă compararea epidermei, în special a stratului cornos din aceste zone. Un ac de biopsie poate fi folosit pentru a obține probe.

– Macule, papule, pustule: Biopsia trebuie să obțină probe de la cel puțin trei locuri de leziuni primare, care ar trebui să fie situate în centrul biopsiei. Un ac de biopsie poate fi folosit pentru a obține probe.

– Zone ulcerate: Acesta este cel mai dificil tip de leziune de biopsit. Principala greșeală este trimiterea unei biopsii din centrul ulcerului către patolog și apoi primirea răspunsului „ulcer” fără niciun diagnostic specific. Într-o situație în care materialul este obținut din centrul unui ulcer mare, tabloul histologic va fi caracteristic unui proces infecțios. De asemenea, este necesar să se preleveze mai multe probe, astfel încât medicul patolog să poată compara procesele care apar în ulcer și în pielea normală. Dacă sunt prezente ulcere mici, întreaga zonă, inclusiv marginea țesutului sănătos, poate fi trimisă pentru examinare.

– Fistule: De obicei, procesul patologic este localizat adânc în derm și adesea sub piele, deci este necesară o biopsie foarte profundă pentru a determina natura procesului patologic. În astfel de cazuri, o biopsie în formă de pană este excizată cu ajutorul unei lame de bisturiu; cu acest tip de leziune, este imposibil să se obțină o probă informativă folosind un ac de biopsie. În același timp, este logic să trimiteți materialul de biopsie pentru cercetări bacteriologice și micologice.

– Garnituri si componente: din nou, excizia chirurgicală a întregului nod cu țesut normal adiacent este tratamentul de elecție. Conform regulilor stabilite, această procedură poate fi efectuată numai după ce mastocitomul a fost exclus prin aspirarea cu ac fin și examenul citologic.

– Depigmentare: histobioptații se obțin din zone complet depigmentate (minim 2), din zona de frontieră dintre pielea normală și cea depigmentată (1), precum și o probă din piele normală.

– Hiperpigmentare: histobioptații se obțin din zone pigmentate (minim 2), precum și o probă din piele normală.

2) Interpretarea raportului histologic

De obicei, dermatohistopatologul emite un raport care ar trebui să conțină următoarele secțiuni:

1. Descrierea probei de țesut

2. Diagnosticul morfologic

3. Diagnosticul etiologic (dacă este posibil să se determine cauza)

4. Comentarii

Descrierea histologica reprezinta informatiile pe care patologul le vede in preparate. Descrierea histologică conține informații valoroase folosind o varietate de termeni, care este de mare importanță în diagnostic. Cu toate acestea, este necesară o experiență considerabilă pentru a explica aceste modificări observate, astfel încât clinicianul nu ar trebui să aibă întotdeauna încredere în interpretarea raportului patologului. Cunoașterea terminologiei de bază este esențială pentru interpretarea corectă a constatărilor de laborator. Din păcate, majoritatea clinicienilor nu citesc deloc narațiunea.

Diagnosticul morfologic este un rezumat într-o singură propoziție a modificărilor patologice din specimenul histologic (ceva de genul: hiperplazie marcată cu cruste și infiltrație eozinofilă perivasculară cu acarieni scabie în stratul cornos). Diagnosticul morfologic se bazează pe termenii folosiți în descrierea specimenului histopatologic.

Diagnosticul etiologic este posibil atunci când histopatologia este specifică unei boli. De exemplu, în cazul descris mai sus, diagnosticul etiologic este „sarcoptoză”. În cazul în care nu se poate stabili un diagnostic etiologic, medicul anatomopatolog oferă o listă de diagnostice diferențiale și, eventual, recomandări pentru un diagnostic suplimentar.

Clinicianul nu trebuie niciodată să se bazeze orbește pe raport; este important ca clinicianul să conecteze tabloul clinic și informațiile histopatologice împreună. Există un număr mare de boli care pot fi diagnosticate histologic, dar multe dintre ele pot fi suspectate pe baza trăsăturilor caracteristice.

Cele mai frecvente constatări histopatologice vor fi prezentate mai jos.

Tulburări epidermice

2. Hiperplazie- acesta este un răspuns nespecific al epidermei la inflamația sau leziunea cronică, observată în multe procese inflamatorii însoțite de mâncărime.

3. Pustule subcorneene și intraepidermice– întâlnit de obicei în piodermite superficiale, precum și în pemfigus foliaceu și în unele boli pustuloase sterile rare.

4. pustule și vezicule subepidermice- acesta este un simptom foarte rar, întâlnit în bolile ereditare și autoimune, de exemplu, în pemfigusul vulgar.

5. Necroze și ulcere– se observă de obicei în arsuri, dermatită de contact, dermatită piotraumatică („puncte fierbinți”), sindrom de prurit la cap și gât la felin, complex eozinofil felin. Cauze mai rare sunt sindromul hepatocutanat, eritemul multiform/necroliza epidermică toxică, unele reacții la medicamente, bolile virale feline (virusul variolei bovine, virusul herpesului), timomul la pisici. Ulcerele pot fi leziuni secundare datorate unor boli grave ale pielii, cum ar fi vasculita.

Leziuni dermice

1. Leziuni superficiale ale dermului– destul de rar, se poate observa cu piodermite zonelor mucocutanate, lupus, eritem multiform, limfom epiteliotrop, timom (la pisici), dermatomiozita.

3. Foliculita/furunculoza– în majoritatea cazurilor, indică o leziune cutanată de natură infecțioasă, cauzată, de exemplu, de stafilococi, dermatofiți sau demodexi. Alte cauze pot fi furunculoza eozinofilă, pemfigus foliaceu și limfomul epiteliotrop.

5. Paniculita– acest semn poate fi observat cu infecții subcutanate profunde bacteriene, micobacteriene și fungice, cu paniculită sterilă nodulară, idiopatică, pansteatita, lupus, precum și cu reacții locale la injecții și leziuni. Poate fi o consecință a pancreatitei.

6. Vasculita- acest semn indică lezarea directă a vaselor de sânge. Vasculita poate fi prezentă într-o mare varietate de afecțiuni, cum ar fi vasculita septică, bolile mediate imun și din cauza expunerii la medicamente.

7. Atrofie– observate în bolile endocrine, unele alopecii specifice, precum alopecia sezonieră a suprafeței laterale a corpului, sindromul paraneoplazic și dermatopatia ischemică.

Pentru a rezuma, putem spune că dacă la animalele cu semne de alopecie, peeling și cruste, macule, papule, pustule, nu pot stabili un diagnostic prin efectuarea tuturor testelor rapide de mai sus, recurg la efectuarea histobiopsiei. Trebuie amintit că în unele cazuri examenul histologic nu este foarte informativ (de exemplu, la animalele cu mâncărimi cronice), așa că aș dori să subliniez importanța extremă a testelor rapide la acești pacienți, precum și necesitatea evaluării clinice și analiza atentă a datelor anamnestice de către un medic veterinar.

Literatură

1. Cowell R.L., Tyler R.D., Meinkoth J.H., DeNicola D.B. Citologia diagnostică și hematologia câinelui și pisicii, ed. a 3-a, Mosby Elsevier, 2008.

2. Raskin R.E., Meyer D.J. Citologie canină și felină, Saunders Elsevier, a 2-a ed., 2010.

3. Mc. Cullough S., Brinson J. Clinical Techniques in Small Animal Practice, Vol.14, No.4, noiembrie 1999.

4. Taylor S.M. Tehnici clinice pentru animale mici, Saunders Elsevier, 2010.

Pregătirea preparatului colorat constă în următoarele etape:

1) pregătirea frotiurilor;

2) uscarea frotiului;

3) fixarea frotiului;

frotiu de colorare.

Pentru a pregăti preparatul, se aplică o picătură de apă sau soluție salină pe o lamă de sticlă fără grăsimi, în care materialul de testat este introdus într-o buclă și distribuit într-un strat subțire și uniform peste sticlă pe o suprafață de aproximativ 1. cm 2 . Dacă materialul studiat este într-un mediu lichid, atunci se aplică direct cu o buclă pe o lamă de sticlă și se prepară un frotiu. Frotiurile se usucă în aer sau într-un curent de aer cald peste flacăra unei lămpi cu alcool, fără a lăsa picătura să fiarbă.

Pentru a fixa frotiul, o lamă de sticlă (smear up) este trecută încet prin flacăra unei lămpi cu alcool de 3-4 ori. Microorganismele mor atunci când sunt fixate, sunt strâns atașate de suprafața sticlei și nu sunt spălate în timpul prelucrării ulterioare. Încălzirea mai lungă poate provoca deformarea structurilor celulare.

La fixarea cu substanțe chimice, se folosesc compuși de crom, formol, acid osmic și acetonă. Una dintre metodele comune de fixare este tratarea preparatului cu alcool metilic sau etilic sau amestecul lui Nikiforov (volume egale de alcool etilic și eter). În acest caz, medicamentul este scufundat timp de 5-20 de minute. în lichidul de fixare.

Metode de colorare a frotiurilor și coloranților utilizate în microbiologie.

Exista metode simple și complexe de pictură . Pentru o colorare simplă, utilizați unul dintre coloranți, de exemplu, fuchsin apos (1-2 minute), albastru de metilen (3-5 minute). La colorarea unui frotiu, medicamentul este plasat pe un suport de medicament. Pe frotiu se aplică câteva picături de colorant. După expirarea timpului de colorare, preparatul se spală cu apă, se îndepărtează excesul de apă cu hârtie de filtru, se usucă la aer și se examinează microscopic.

Pentru colorarea complexă, anumiți coloranți care diferă în compoziție chimică și culoare sunt aplicați secvenţial la preparat. Acest lucru face posibilă identificarea anumitor structuri celulare și diferențierea unor tipuri de microorganisme de altele. Acestea sunt metodele de colorare Gram, colorarea Ziehl-Neelsen și colorarea sporilor folosind metoda Ozheshka.

Se numesc coloranți care eliberează ioni de hidrogen la disociere, dând colorantului un caracter acid acru. Ele colorează (sub formă de anion) substanțe de natură bazică. Coloranți care eliberează ioni de hidroxil la disociere - cele principale.

În practica microbiologică, coloranții acizi și bazici sunt utilizați sub formă de săruri, deoarece sunt capabili să reacționeze cu acizi și baze. Coloranții de bază sunt adesea folosiți sub formă de săruri ale acizilor clorhidric, mai rar acetic și sulfuric; coloranți acizi – sub formă de săruri de sodiu sau potasiu.

Vopsele de bază de natură

Roșu Violet

violet de gențiană roșu neutru

pironina violet cristalin

violet de metil safranină

verde de metil fuchsin

verde de malachit hematoxilină

Albastru Maro

Victoria Vezivin

crisoidina albastru de metilen.

Verde Negru

Janus verde indulin

Coloranți de natură acidă

Roșu și roz Negru Galben

acru fuchsin nigrosin Congo

acid eritrozin picric

fluoresceina

Intensitatea capacității de colorare a colorantului depinde de pH-ul mediului: coloranții bazici colorează un obiect mai intens cu cât mediul este mai alcalin, coloranții acizi cu atât este mai acid.

Coloranții pot fi împărțiți în: pozitiv și negativ. Coloranții pozitivi colorează direct celulele microbiene. Ei colorează celulele la temperatura camerei timp de 30-60 de secunde. Coloranții negativi colorează spațiul din jurul celulelor microorganismelor. Ca rezultat, celulele apar ca siluete pe fundalul colorantului.

Metodă simplă de vopsire

Aplicați câteva picături dintr-o soluție apoasă de fucsin pe frotiul preparat și fixat. Vopsea timp de 1-2 minute. Spălați vopseaua cu apă, ștergeți preparatul cu hârtie de filtru, uscați la aer și la microscop.

Colorație Gram.

Aplicați o soluție de alcool carbolic de violet de gențiană pe frotiu fix printr-o bandă de hârtie de filtru. După 1-2 minute, îndepărtați hârtia și scurgeți vopseaua.

Aplicați soluția Lugol timp de 1-2 minute.

Decolorați cu alcool etilic timp de 30-60 s până când structurile de colorant violet nu se mai desprind.

Clătiți cu apă.

5. Terminați cu o soluție apoasă de fuchsin timp de 1-2 minute, clătiți cu apă, uscați cu hârtie de filtru și aer și microscop.

Bacteriile gram-pozitive sunt colorate în violet închis, în timp ce bacteriile gram-negative sunt colorate în roșu.

Atitudinea bacteriilor față de colorația Gram este determinată de capacitatea lor de a reține complexul de violet de gențiană cu iod format în timpul procesului de colorare. Acest lucru depinde de diferențele în compoziția chimică și permeabilitatea peretelui celular al bacteriilor gram-pozitive și gram-negative.Peptidoglicanul este multistratificat și acizii teicoici sunt asociați cu acesta.

În bacteriile gram-negative, peptidoglicanul este cu un singur strat, există o membrană exterioară, care include fosfolipide, lipoproteine, proteine ​​și mepopolizaharidă complexă (LPS). Întreaga membrană exterioară este pătrunsă de proteine ​​- porine, care asigură difuzia diverșilor compuși. Astfel, se creează condiții optime pentru bacteriile gram-pozitive pentru fixarea puternică a colorantului și rezistența la albirea cu alcool.

Bacteriile Gram pozitive includ stafilococi, streptococi, corynebacteria difterie, mycobacterium tuberculosis etc., iar bacteriile Gram negative includ gonococi, meningococi, E. coli etc. Unele tipuri de bacterii pot fi colorate cu variabile Gram, în funcție de vârstă, cultură. caracteristici și alți factori care afectează structura peretelui celular. Prin urmare, pentru colorare ar trebui să luați întotdeauna culturi tinere, vechi de 1 zi.

Principala greșeală făcută la colorarea conform Gram este „realbirea” frotiului cu alcool etilic. În acest caz, bacteriile Gram-pozitive își pot pierde culoarea inițială violet de gențiană și pot dobândi o culoare roșie (caracteristică bacteriilor Gram-negative) ca urmare a colorării ulterioare a frotiului cu fuchsină; bacteriile Gram-negative, la rândul lor, pot reține culoarea albastru-violet a violetului de gențiană. Pentru o colorare corectă, tehnica de albire trebuie urmată cu strictețe.

În mod normal, o femeie fără alăptare nu are scurgeri de la sân. Lichidul (exudatul) care curge din glanda mamară este analizat prin luarea de frotiuri de amprentă. Se examinează, de asemenea, conținutul de chisturi și ulcere ale pielii.

De ce se face testul - frotiuri mamare?

Folosind această metodă, se determină boala care a provocat apariția secreției din glandele mamare. Se efectuează o analiză citologică a fluidului pentru a determina compoziția celulară. În cazul tumorilor maligne, în frotiu sunt detectate celule atipice (canceroase). Cu ajutorul frotiurilor de amprentă, ei diagnostichează:

• cancer mamar
• mastopatie și mastită;
• galactoree - secreția de lapte din glandele lor, asociată cu dezechilibrul hormonal;
• tuberculoza mamară;
• formațiuni benigne;
• blocarea și dilatarea conductelor;
• conținutul chisturilor și suprafețelor rănilor

Cum se efectuează o examinare a sânilor?

Secreția din mameloane și rănile de pe piele se aplică pe o bucată de sticlă, se usucă și se trimite la laborator.

Pentru a examina conținutul chisturilor, se efectuează o puncție pentru a colecta lichid. Injectarea se face cu un ac subțire, deci nu este necesară anestezie. După efectuarea testului, pacientul pleacă acasă. O femeie aplică gheață pe locul puncției acasă. Punctul este aplicat pe sticlă și trimis pentru testare.

Procedura se efectuează în ambulatoriu și nu necesită spitalizare. Înainte de procedură, nu trebuie să luați medicamente care modifică coagularea sângelui. În ziua studiului, este interzisă aplicarea de creme, spray-uri sau deodorante în zona pieptului și axilei.

Rezultate frotiul de sân

În laborator, materialul este colorat și examinat la microscop:

• în cazul leziunilor și bolilor nemaligne ale glandelor mamare, în lichid sunt prezente sânge și leucocite. Celulele tumorale benigne pot fi detectate. În acest caz, femeia este examinată suplimentar;
• în cazul cancerului de sân, în secreție se găsesc celule atipice (canceroase) - mari, de formă neregulată, cu mai mulți „nucleoli” mici. Precizia analizei este aproape de 100%. În timpul studiului se determină tipul de tumoră malignă;
• În stadiile inițiale ale cancerului de sân, celulele modificate din frotiu nu sunt întotdeauna detectate. În 15%, procesul oncologic este detectat prin alte metode - ecografie Doppler, RMN. Dacă rezultatul este discutabil, femeia va fi examinată din nou.

Prelevarea frotiurilor de amprentă din glanda mamară este o metodă slab traumatică și informativă pentru diagnosticarea cancerului și a altor patologii ale glandei mamare.