N acetil l cisteína benefícios e danos. Acetilcisteína - instruções completas

, sacarina , sacarose , aromatizante .

Cada pacote de pó, além da substância principal, contém aditivo de sabor Limão "Aromático" , lactose monohidratada , .

Formulário de liberação

O medicamento é produzido na forma de solução para uso interno ou cápsulas. Além disso, é conhecida uma forma de liberação como comprimidos efervescentes.

efeito farmacológico

Mucolítico ação.

Farmacodinâmica e farmacocinética

Pró acetilcisteína o que é e qual é o seu mecanismo de ação, é importante saber antes de usar o medicamento. É um derivado aminoácidos de cisteína . A ação da droga Acetilcisteína se deve ao fato de que sua grupo sulfidrila divisões dissulfeto ligações ácidas mucopolissacarídeos de escarro . Isso é o que causa mucolítico ação. Mucorregulador atividade depende do aumento da secreção de substâncias menos viscosas células caliciformes de sialomucinas . No células epiteliais a adesão de bactérias na mucosa brônquica é reduzida. Isso se deve à diminuição da viscosidade escarro e levantar depuração mucociliar .

O efeito desinfetante do medicamento é devido à ação de sulfidrila grupos que influenciam toxinas oxidativas eletrofílicas neutralizando-os.

Esta droga protege as células dos radicais livres tanto pela interação direta com eles quanto pelo transporte cisteína para síntese .

A droga é rapidamente clivada quando administrada internamente. Mas ele biodisponibilidade – aproximadamente 10%. O grau de conexão com proteínas plasmáticas é de 50%. A concentração máxima neste caso é observada após 60-180 minutos. A substância ativa pode ser administrada através de barreira placentária e se acumulam no líquido amniótico. A meia-vida é de 60 minutos. Em - até 8 horas.

Excretado principalmente pelos rins como inativos. Alguma parte é excretada inalterada pelos intestinos. No plasma, é determinado inalterado, bem como metabólito N-acetilcisteína , éster de cisteína e N,N-diacetilcisteína .

Indicações de uso

O medicamento é usado para separação difícil escarro , pulmão , catarral e otite média purulenta , remoção de um segredo viscoso do trato respiratório após as operações, bem como no caso de condições pós-traumáticas. Além disso, entre seus depoimentos estão doença pulmonar intersticial , fibrose cística , pulmões , envenenamento.

Contra-indicações

Você não pode usar este remédio durante a exacerbação, pulmonar , hipersensibilidade para a droga hemoptise , .

Efeitos colaterais

O medicamento pode levar ao aparecimento de reações adversas como:

• irritação na pele, broncoespasmo ;
• náusea, estomatite , vômitos, sensação de estômago cheio;

Em casos raros, zumbido, ardor no local da injeção (no caso de usar uma solução), bem como tosse reflexa, rinorréia e irritação local do trato respiratório inalação inscrição.

Instrução de aplicação de acetilcisteína (forma e dosagem)

As dosagens são selecionadas dependendo da idade e da natureza da doença do paciente.

As instruções de uso da Acetilcisteína relatam que, para crianças de 2 a 6 anos, geralmente é indicada uma dosagem diária de 100 mg 3 vezes ou 200 mg 2 vezes. A droga é usada na forma de um granulado solúvel em água. E para crianças menores de 2 anos, é prescrita uma ingestão diária de 2 vezes 100 mg. Por sua vez, crianças de 6 a 14 anos recebem 2 vezes 200 mg por dia, caso fibrose cística - 200 mg 3 vezes. O medicamento pode ser tomado na forma de comprimidos efervescentes, cápsulas ou grânulos.

Os adultos tomam 200 mg da droga todos os dias 2-3 vezes em qualquer forma possível de liberação.

Por terapia de aerossol 20 ml de uma solução a 10% são pulverizados em aparelhos ultrassônicos e 6 ml de uma solução a 10% são pulverizados em aparelhos com válvula de distribuição. Inalação fazer todos os dias 15-20 minutos 2-4 vezes. Em condições agudas, a terapia é de 5 a 10 dias, em condições crônicas - até seis meses.

Com um forte secretolítico ação precisa ser uma merda segredo , bem como reduzir a frequência de uso e dosagem do medicamento.

Overdose

Uma overdose do medicamento pode causar náuseas, dor no abdômen e vômitos.

substância-pó Reg. Nº: FS-000013

Grupo clínico-farmacológico:

Forma de lançamento, composição e embalagem

substância -em pó.

50 kg - sacos (1) - tambores de papelão.

Descrição dos ingredientes ativos do medicamento Acetilcisteína»

efeito farmacológico

agente mucolítico. Liquidifica a expectoração, aumenta o seu volume, facilita a excreção, promove a expectoração. A ação da acetilcisteína está associada à capacidade de seus grupos sulfidrila de quebrar as ligações dissulfeto dos mucopolissacarídeos ácidos do escarro, o que leva à despolarização das mucoproteínas e à diminuição da viscosidade do muco. Permanece ativo na presença de expectoração purulenta.

Possui efeito antioxidante devido à presença do grupo SH, que é capaz de interagir e neutralizar as toxinas oxidativas eletrofílicas. A acetilcisteína promove um aumento na síntese de glutationa, que é um importante fator antioxidante na proteção intracelular e mantém a atividade funcional e a integridade morfológica da célula.

Indicações

Doenças e condições respiratórias acompanhadas pela formação de expectoração viscosa e mucopurulenta: bronquite aguda e crônica, traqueíte devido a infecção bacteriana e / ou viral, pneumonia, bronquiectasia, asma brônquica, atelectasia devido ao bloqueio dos brônquios por um tampão mucoso, sinusite ( para facilitar a descarga de secreções ), fibrose cística (como parte da terapia combinada).

Remoção de segredo viscoso do trato respiratório em condições pós-traumáticas e pós-operatórias.

Superdosagem de paracetamol.

Regime de dosagem

Individual. Dentro de adultos e crianças com mais de 6 anos - 200 mg 2-3 vezes / dia; crianças de 2 a 6 anos - 200 mg 2 vezes / dia ou 100 mg 3 vezes / dia, até 2 anos - 100 mg 2 vezes / dia.

Em / m adultos - 300 mg 1 vez / dia, crianças - 150 mg 1 vez / dia.

Efeito colateral

Do sistema digestivo: raramente - azia, náusea, vômito, diarréia, sensação de plenitude no estômago.

Reações alérgicas: raramente - erupção cutânea, coceira, urticária, broncoespasmo.

Com uma injeção intramuscular superficial e na presença de hipersensibilidade, uma sensação de queimação leve e passageira pode aparecer e, portanto, recomenda-se injetar a droga profundamente no músculo.

Para uso por inalação: possível tosse reflexa, irritação local do trato respiratório; raramente - estomatite, rinite.

Outros: raramente - hemorragias nasais, raramente - zumbido.

Do lado dos indicadores de laboratório:é possível reduzir o tempo de protrombina no contexto da nomeação de grandes doses de acetilcisteína (é necessário monitorar o estado do sistema de coagulação do sangue), alterar os resultados do teste para a determinação quantitativa de salicilatos (colorimétrico teste) e o teste para determinação quantitativa de cetonas (teste com nitroprussiato de sódio).

Contra-indicações

Úlcera péptica do estômago e duodeno na fase aguda, hemoptise, sangramento pulmonar, hipersensibilidade à acetilcisteína.

Gravidez e lactação

Não foram realizados estudos clínicos adequados e estritamente controlados da segurança da acetilcisteína durante a gravidez e lactação.

Durante a gravidez e lactação, o uso de acetilcisteína só é possível se o benefício pretendido para a mãe superar o risco potencial para o feto ou o bebê.

Pedido de violações da função hepática

Use acetilcisteína com cautela em pacientes com doença hepática.

Pedido de violações da função renal

Use acetilcisteína com cautela em pacientes com doença renal.

Aplicativo para crianças

Ao usar acetilcisteína em pacientes com asma brônquica, é necessário garantir a drenagem do escarro. Em recém-nascidos, é usado apenas por motivos de saúde na dose de 10 mg / kg sob estrita supervisão de um médico.

Dentro de crianças com mais de 6 anos - 200 mg 2-3 vezes / dia; crianças de 2 a 6 anos - 200 mg 2 vezes / dia ou 100 mg 3 vezes / dia, até 2 anos - 100 mg 2 vezes / dia.

Instruções Especiais

A acetilcisteína é usada com cautela em pacientes com asma brônquica, doenças do fígado, rins, glândulas supra-renais. Ao usar acetilcisteína em pacientes com asma brônquica, é necessário garantir a drenagem do escarro. Em recém-nascidos, é usado apenas por motivos de saúde na dose de 10 mg / kg sob estrita supervisão de um médico.

Entre tomar acetilcisteína e antibióticos, deve ser observado um intervalo de 1-2 horas.

A acetilcisteína reage com alguns materiais como ferro, cobre e borracha usados ​​no nebulizador. Em locais de possível contato com uma solução de acetilcisteína, devem ser usadas peças feitas dos seguintes materiais: vidro, plástico, alumínio, metal cromado, tântalo, prata de padrão estabelecido ou aço inoxidável. Após o contato, a prata pode manchar, mas isso não afeta a eficácia da acetilcisteína e não prejudica o paciente.

interação medicamentosa

interação medicamentosa

O uso simultâneo de acetilcisteína com antitússicos pode aumentar a estagnação do escarro devido à supressão do reflexo da tosse.

Com o uso simultâneo com antibióticos (incluindo tetraciclina, ampicilina, anfotericina B), é possível sua interação com o grupo tiol da acetilcisteína.

A acetilcisteína reduz o efeito hepatotóxico do paracetamol.

Os proprietários da patente RU 2549433:

A invenção refere-se a um método para tratar um mamífero com endometriose. Este método inclui administração oral pulsada ou intermitente por 3-5 dias consecutivos seguido de um intervalo de 2-4 dias ou por 1-3 dias consecutivos seguido de um intervalo de 1-2 dias de uma composição farmacêutica contendo N-acetil-L-cisteína, em um período de pelo menos dois meses. N-acetil-L-cisteína neste método é administrado na dose de 20 a 90 mg/kg/dia. O método reivindicado fornece um efeito mais significativo sobre os sintomas da endometriose em comparação com a administração diária tradicional de N-acetil-L-cisteína. 10 z.p. f-ly, 7 il., 2 mesas, 3 pr.

CAMPO DE INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica contendo N-acetil-L-cisteína útil no tratamento da endometriose e indicações associadas à endometriose.

A endometriose é a terceira causa de internação ginecológica nos Estados Unidos e afeta aproximadamente 14 milhões de mulheres na Europa. As taxas de incidência de endometriose amplamente utilizadas incluem 5-10% de todas as mulheres em idade reprodutiva e 30-40% de todas as mulheres com problemas de infertilidade. É uma doença caracterizada pela presença fora da cavidade uterina de tecido histologicamente idêntico ao endométrio, ou seja, a membrana que reveste o interior do útero dos mamíferos. Esse tecido anormalmente localizado se desenvolve em crescimentos ou lesões (também chamados de implantes ou nódulos) que respondem ao ciclo menstrual da mesma forma que o tecido endometrial uterino: a cada mês, o tecido cresce, se decompõe e se desprende. Enquanto o sangue menstrual flui para fora do útero, o sangue e o tecido derramados pelos crescimentos endometriais não têm saída. Isso leva a sangramento interno, avulsão de vasos sanguíneos e tecidos de lesões e inflamação crônica subsequente.

Os dois sintomas mais comuns da endometriose são dor e infertilidade. Os sintomas podem incluir: dismenorreia, que é dor antes ou depois da menstruação, e dor durante ou após o sexo; dor pélvica ou lombar crônica e dores intestinais; períodos menstruais intensos ou manchas e sangramento entre os períodos; movimentos intestinais dolorosos ou micção dolorosa durante os períodos menstruais; infertilidade.

A causa da endometriose é atualmente desconhecida, e várias teorias têm sido propostas para justificar a migração ectópica e implantação de células endometriais. Dados recentes estabelecem uma ligação entre a ocorrência de endometriose e o estado alterado do tecido de origem: o endométrio eutópico. Existe uma crença crescente na técnica de que a migração, implantação e crescimento descontrolados de endometriomas surgem de distúrbios em células endometriais eutópicas.

Atualmente, não há cura para a endometriose. Existem muitas opções de tratamento e existem maneiras de minimizar os sintomas causados ​​por essa condição. Com exceção do uso de analgésicos para o tratamento da dor, o tratamento da endometriose está associado principalmente à supressão da função ovariana na secreção de estrogênios, e consequentemente tratamentos hormonais em diversos sujeitos, até a indução da menopausa nas mais Casos severos. a cirurgia é usada para remover endometriomas, aderências, implantes peritoneais e lesões profundas localizadas no septo retovaginal ou em outro local (ou seja, bexiga, intestino) e para aliviar a dor. No entanto, as recidivas ocorrem tanto após o tratamento terapêutico quanto cirúrgico. Mulheres jovens com endometriose muitas vezes enfrentam decisões difíceis em relação à sua reprodução futura. Os tratamentos hormonais destinados a suprimir a função ovariana são incompatíveis com a gravidez.

A N-acetil-L-cisteína (doravante denominada NAC) é uma droga bem conhecida que tem sido usada principalmente como agente mucolítico e no tratamento de envenenamento por paracetamol. Nos últimos anos, também foi reconhecido por outras propriedades benéficas, como efeitos anti-inflamatórios e anti-proliferativos, e foi proposto para o tratamento de vários distúrbios e sintomas diferentes, como esquizofrenia, diabetes e câncer.

Estudos anteriores examinando os mecanismos moleculares subjacentes e associados à endometriose sugeriram que o aumento das taxas de proliferação celular na endometriose pode ser induzido pelo estresse oxidativo no tecido endometriótico causado por radicais livres ou ROS (espécies reativas de oxigênio - espécies reativas de oxigênio). Assim, foi levantada a hipótese de que novas estratégias terapêuticas para a endometriose podem ser baseadas em antioxidantes e aceptores de ROS, como o NAC.

ARTE ANTERIOR

Charlotte Ngo et ai. sugeriram (The American Journal of Pathology (2009), Vol. 175, No. I, páginas 225-234) que o estresse oxidativo pode induzir ou aumentar a proliferação de células endometrióides na endometriose. Portanto, antioxidantes como o NAC têm sido propostos para o tratamento da endometriose. Estudos em linhagens celulares primárias de pacientes com endometriose, bem como em um modelo de camundongo implantado com tecido endometrioide derivado de humanos, mostraram que o NAC aboliu os sinais de estresse oxidativo, bem como aumentou a proliferação nos respectivos modelos. Assim, tem sido sugerido que antioxidantes como o NAC podem ser usados ​​como um tratamento seguro e eficaz para a endometriose.

Nastaran Foyouzi et al. também sugeriu (Fertility and Sterility (2004), Vol. 82, Supl. 3, páginas 1019-1022) que antioxidantes como NAC podem ser usados ​​para tratar a endometriose. O artigo descreve um estudo in vitro onde células isoladas de indivíduos saudáveis ​​e de pacientes com endometriose foram tratadas com outro antioxidante, como o NAC. Todos os antioxidantes inibiram a proliferação de células do estroma endometrial.

Em Yan Wo e Sun-Wei Guo (Gynecologic and Obstetric Investigation (2006), Vol.62, No. 4, páginas 193-205; European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology, (2008), Vol.137, páginas 198 -203); pedido de patente US 2007/0287676 A1) investigou o efeito de NAC na proliferação e parada do ciclo celular em células estromais endometriais humanas imortais e comparou com outros agentes propostos para o tratamento da endometriose. NAC demonstrou ter um efeito tanto na proliferação quanto na parada do ciclo celular, embora não tão pronunciado quanto os inibidores da histona desacetilase.

Em um estudo de S. Estany et al. (Journal of Reproductive Immunology (2007), Vol. 75, páginas 1-10) foi demonstrado que a atividade antioxidante de NAC e outros agentes antioxidantes em células endometriais em cultura melhorou a viabilidade de células oxidadas prevenindo H 2 O 2 induzida citotoxicidade celular.

Outra técnica anterior relacionada inclui US 2003/0190381 A1, WO 2004/096206 A2, US 6239137 B1, US 2003/0119875 A1, US 2004/0014672 A1 e WO 2005/048822 A2.

Outra técnica anterior que descreve a ação molecular do NAC no tratamento do câncer inclui T. Parasassi, et. al. (Cell Death and Differentiation (2005), Vol. 12, No. 10, páginas 1285-1296); E. K. Krasnowska et. al. (Free Radicals Biology and Medicine 2008, 45(11): 1566-72) e A.C. Gustavsson et. al. (BMC Câncer (2005), 5:75).

OBJETOS DA INVENÇÃO

O resultado clínico do tratamento com NAC na endometriose, de acordo com os inventores, não foi determinado na técnica anterior, nem foi proposto um regime eficaz para o tratamento da endometriose ou o uso de NAC para o tratamento de indicações associadas à endometriose.

Portanto, o objetivo principal da presente invenção é fornecer uma solução para o problema de obtenção de uma composição farmacêutica contendo N-acetil-L-cisteína (NAC) para o tratamento de endometriose e indicações associadas à endometriose em humanos e mamíferos. Um aspecto desse objetivo é fornecer uma composição farmacêutica contendo N-acetil-L-cisteína (NAC) para uso em um regime de dosagem eficaz para o tratamento da endometriose e sintomas associados à endometriose em mamíferos, incluindo humanos.

SUMARIO DA INVENÇÃO

Tem sido sugerido que o NAC pode ser usado em novas estratégias terapêuticas para endometriose com base em seu uso como antioxidante e eliminador de ROS. Os autores da presente descrição mostram que o NAC induz alterações moleculares e celulares que não apenas inibem a proliferação, mas também induzem a diferenciação do tecido doente em relação ao tecido normal.

Estas descobertas levaram os presentes inventores a propor uma nova prescrição para NAC no tratamento de endometriose e indicações associadas à endometriose em um paciente humano ou mamífero. Além do mais? proposta de doses efetivas de NAC no tratamento da endometriose. Em uma modalidade da presente invenção, o regime de tratamento prescrito pode ser usado, por exemplo, para controlar a frequência e intensidade dos sintomas de dor (dismenorreia, dispareunia e dor pélvica crônica acíclica), para reduzir o tamanho das lesões endometrióticas, eventualmente desaparecendo , para reduzir a recorrência após a cirurgia e/ou para melhorar a fertilização. Os efeitos colaterais desse tratamento estão praticamente ausentes e, em particular, esse tratamento não previne a gravidez.

A presente invenção fornece uma composição farmacêutica contendo N-acetil-L-cisteína para uso no tratamento de um mamífero, incluindo um humano com endometriose, onde a composição se destina a administração oral pulsada ou intermitente, durante um período de tempo de dois meses ou mais, N-acetil-L-cisteína na dose de 20 a 90 mg/kg/dia por dia, quando administrado.

Em uma modalidade da invenção, é fornecida uma composição farmacêutica compreendendo N-acetil-L-cisteína para o uso acima, em que a composição se destina a ser administrada ao longo de 3-5 dias consecutivos, seguido por um intervalo de 2-4 dias. . Em ainda outra modalidade, a composição farmacêutica compreendendo N-acetil-L-cisteína destina-se a ser administrada durante 1-3 dias consecutivos seguidos por 1-2 dias de folga.

Em uma modalidade da invenção, é fornecida uma composição farmacêutica contendo N-acetil-L-cisteína para o uso acima, em que a composição se destina a administrar N-acetil-L-cisteína em uma dose de 30 a 60 mg/kg/dia no dia da administração. Em ainda outra modalidade, a composição farmacêutica é para administração de N-acetil-L-cisteína em uma dose de 30 a 45 mg/kg/dia no dia da administração.

Em uma modalidade da invenção, uma composição farmacêutica compreendendo N-acetil-L-cisteína é fornecida para o uso descrito acima, em que a composição farmacêutica é protegida da luz. Em ainda outra modalidade, a composição farmacêutica é um comprimido solúvel em água. Em ainda outra modalidade, a composição farmacêutica contém bicarbonato de sódio. Em uma modalidade, a composição farmacêutica é uma formulação de liberação lenta e/ou um protetor gástrico.

Em uma modalidade, a invenção fornece uma composição farmacêutica contendo N-acetil-L-cisteína para uso no tratamento da dor causada pela endometriose. Em ainda outra modalidade, a composição farmacêutica é para uso no tratamento de infertilidade causada por endometriose. Em ainda outra modalidade, a composição farmacêutica é para uso no pré-tratamento de mamíferos com endometriose antes da laparoscopia ou cirurgia. Em uma modalidade, a composição farmacêutica é para uso no tratamento de mamíferos com endometriose após laparoscopia ou cirurgia para prevenir a recorrência.

Em um aspecto da invenção, é fornecido um método de tratamento de um mamífero com endometriose compreendendo a administração oral de uma composição farmacêutica compreendendo N-acetil-L-cisteína ao referido mamífero em um regime pulsado ou intermitente durante um período de dois meses ou mais de N-acetil-L-cisteína, em uma dose que varia de 20 a 90 mg/kg/dia por dia quando administrada. Em uma modalidade do método, a composição farmacêutica é administrada durante 3-5 dias consecutivos seguidos por 2-4 dias de folga. Em ainda outra modalidade, a composição farmacêutica é administrada durante 1-3 dias consecutivos, seguidos por 1-2 dias de folga.

Em uma modalidade do método, a dose de N-acetil-L-cisteína é de 30 a 60 mg/kg/dia no dia da administração. Em ainda outra modalidade do método, a dose de N-acetil-L-cisteína é de 30 a 45 mg/kg/dia no dia da administração.

Em uma modalidade, o método é para o tratamento da dor causada pela endometriose. Em outras modalidades, o método é para o tratamento de infertilidade devido à endometriose, para pré-tratamento de mamíferos com endometriose antes de laparoscopia ou cirurgia, ou para tratamento após laparoscopia ou cirurgia, para prevenir a recorrência de lesões endometrióides.

BREVE DESCRIÇÃO DOS GRÁFICOS

A presente invenção será explicada com mais detalhes na descrição a seguir, com referência aos desenhos anexos, onde:

A Figura 1 mostra o efeito inibitório de NAC no crescimento de lesões endometrióides em camundongos, conforme demonstrado no Exemplo 1. Peso total médio de animais de controle (n = 10) e tratados com NAC (n = 10), 21 dias após a implantação, com padrão erro. Significado p<0,05. Во вставках над гистограммами воспроизведены типичные картины эндометриом для контроля (А) и обработки NAC (В). Полоска: 1 см;

A Figura 2A mostra géis de RT-PCR semiquantitativos exemplares (reação em cadeia da polimerase em tempo real) como demonstrado no Exemplo 1. A Figura 2B mostra a expressão reduzida de COX-2 e MMP-9 em cistos de camundongos tratados com NAC, conforme demonstrado no Exemplo 1 Valores de RT-PCR semiquantitativos em média de 5 controles e 5 camundongos tratados com NAC com erro padrão;

A Figura 3 mostra a translocação de E-caderina em cistos de camundongos tratados com NAC, conforme demonstrado no Exemplo 1. Imagens representativas de imunocoloração de E-caderina em endometriomas de controle (A e B) e camundongos tratados com NAC (C e D). Nas amostras controle, a coloração acastanhada difusa pode ser observada em todo o citoplasma das células epiteliais, enquanto nas amostras tratadas com NAC, essa coloração é claramente limitada ao nível dos contatos célula-célula. Ampliação do original 40x;

4 mostra coloração Cox-2 atenuada em cistos de animais tratados com NAC como demonstrado no Exemplo 1. Imagens representativas de coloração imuno-histoquímica de cistos de camundongos de controle (A-C) e de camundongos tratados com NAC (D-F). Nas amostras de controle, uma presença notável de coloração acastanhada é detectada em várias áreas, enquanto dificilmente pode ser detectada nas amostras tratadas com NAC. Ampliação do original 40x;

A Figura 5 mostra a coloração de Ki-67 atenuada em cistos de animais tratados com NAC, conforme demonstrado no Exemplo 1. Imagens representativas de coloração imuno-histoquímica de cistos de camundongos de controle (A-C) e camundongos tratados com NAC (D-F). As setas apontam para células coradas e em proliferação. Ampliação do original 40x;

6 é uma representação esquemática da técnica anterior demonstrando vários mecanismos em funcionamento quando células em proliferação, que são exemplificadas por células cancerosas, são tratadas com NAC. Esses mecanismos são reduzidos à diferenciação celular terminal. Os exemplos da presente descrição também mostram que pelo menos alguns destes efeitos também ocorrem se o NAC de acordo com a presente invenção for utilizado para tratar a endometriose;

7 mostra os resultados de um estudo clínico preliminar realizado em um total de 64 mulheres, 33 tratadas com NAC e 31 controles não tratados. A mudança no tamanho do cisto após três meses de tratamento com NAC foi medida por ultra-som como o diâmetro máximo. Na figa mostra a mudança no tamanho dos cistos em números absolutos em pacientes tratados e controles. 7B mostra a mesma comparação como uma mudança percentual.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

NAC em geral

N-acetil-L-cisteína ​​(NAC) é um medicamento farmacêutico de moléculas pequenas bem conhecido com a fórmula química

As propriedades do NAC estão relacionadas principalmente ao seu grupo tiol, o que o torna eficaz na maioria das vias bioquímicas envolvendo a glutationa tripeptídica (GSH), presente em todos os tecidos humanos em concentrações relativamente altas, mesmo acima de 10 mM. A cisteína está de fato entre os três aminoácidos que contêm GSH, então o NAC é considerado o precursor do GSH com sua cisteína desacetilada. O NAC foi e ainda é amplamente utilizado como agente mucolítico quando o modo de ação está geralmente relacionado à degradação redox de pontes dissulfeto de cisteína sensíveis em proteínas do muco. De fato, o NAC está envolvido no complexo ciclo redox dos grupos tiol, onde atuam várias enzimas. De fato, o ciclo de formação e destruição do dissulfeto, o mecanismo geral pelo qual a atividade proteica e a sinalização celular são reguladas, é de importância fisiológica excepcional. Enzimas como proteínas tirosina fosfatases e tirosina quinases, por exemplo, desempenham papéis fundamentais no controle do ciclo celular, proliferação e diferenciação celular, e muitas delas são reguladas pelo estado redox de suas cisteínas.

Em geral, embora os mecanismos detalhados de ação não tenham sido elucidados de forma conclusiva, a NAC parece atuar em todas as vias bioquímicas em que o GSH está envolvido. Enzimas e proteínas cuja atividade é modulada por GSH atuam em diversos processos, seja diretamente ou por meio de uma rede de vias de sinalização. Nesta situação, o NAC pode agir de forma semelhante ao GSH ou pode ser ainda mais eficaz do que o GSH.

A GSH, por exemplo, geralmente forma conjugados com metabólitos reativos formados pelo paracetamol e promove sua desintoxicação. No entanto, quando muito paracetamol é tomado, o GSH é esgotado e os metabólitos do paracetamol começam a interagir com as proteínas celulares, levando à morte celular. No tratamento da insuficiência hepática transitória após intoxicação por paracetamol, o NAC atua em vez do GSH na desintoxicação dos metabólitos do paracetamol. Acredita-se que a NAC praticamente não tenha efeitos colaterais indesejados, como também indicado pelas altas doses de NAC usadas no tratamento da intoxicação por paracetamol - presumivelmente cerca de 40 g/dia para um paciente de 70 kg.

Ao contrário do tripeptídeo GSH, que pode ser degradado já no estômago, a molécula NAC simples difunde-se livremente em quase todos os tecidos e células. Estudos farmacocinéticos de NAC determinaram um pico de concentração plasmática atingido em cerca de uma hora, com meia-vida de eliminação de aproximadamente três horas. A liberação total ocorre entre seis e doze horas.

NAC como um agente diferenciador antiproliferativo

Recentemente, os inventores descobriram que a N-acetil-L-cisteína (NAC) tem um efeito antiproliferativo marcante nas células cancerígenas de origem epitelial - a mesma origem das células endometriais (Cell Death and Differentiation 2005, 12(10): 1285-1296). Embora o câncer e a endometriose sejam doenças predominantemente não relacionadas, elas compartilham algumas propriedades que levaram os inventores à ideia de que o NAC também pode ser útil no tratamento da endometriose. Em particular, a endometriose, assim como o câncer, é uma doença proliferativa, embora com um mecanismo molecular e etiologia diferentes. As observações obtidas para o câncer serão apresentadas neste relatório descritivo como um pré-requisito para os efeitos do NAC e como um provável modo de ação também na endometriose.

NAC foi usado para parar a proliferação e induzir a diferenciação em duas linhagens de células de adenocarcinoma e em células de queratinócitos normais primários, todas as células de origem epitelial. Nesses sistemas, a diferenciação foi caracterizada morfologicamente, bioquimicamente e por análise de expressão gênica (a análise de expressão gênica é amplamente abordada em BMC Cancer 2005, 5: 75).

Em um estudo de câncer, o efeito antiproliferativo do NAC não foi associado à morte celular ou toxicidade, mas resultou da ativação de uma via de diferenciação fisiológica, que pode ser considerada uma normalização das funções celulares em relação ao tecido de origem.

Além da proliferação reduzida, a morfologia das células cancerosas tratadas com NAC também mudou. In vitro, as células epiteliais, quando proliferam ativamente, exibem uma morfologia irregular – morfologia mesenquimal – e muitas vezes formam várias camadas multicelulares. Em contraste, quando as células sofrem um processo de diferenciação para a estrutura e função de seu tecido alvo final, elas param de proliferar, sua morfologia torna-se poligonal regular, cada célula às vezes é mais espessa e formam uma monocamada de células adjacentes. Este processo é acompanhado por um aumento das junções célula-célula e célula-substrato, consistente com uma mudança de um fenótipo mesenquimal em proliferação para um fenótipo adesivo, menos móvel e diferenciado.

Em geral, uma série complexa de alterações metabólicas foi encontrada após a adição de NAC às células cancerosas, todas resultando na interrupção da proliferação descontrolada e indução de sua diferenciação terminal, conforme ilustrado no esquema mostrado na Fig.6.

Especialmente o tratamento com NAC induziu um aumento significativo nos complexos de adesão célula-célula e célula-substrato.A proliferação descontrolada pode ser atribuída a um estado em que as células perderam a inibição de contato e sua capacidade de responder a sinais de diferenciação. As células que entram na via de diferenciação exibem um aumento acentuado nos complexos de junção célula-célula, e esse processo também é geralmente chamado de inibição de contato. Algumas evidências indicam que os sinais para as células entrarem no ponto final da diferenciação geram componentes dos próprios complexos intercelulares. Essas conexões também são um caminho para a propagação de sinais entre as células.

As células migratórias, como as células endometriais na endometriose, devem, além de ter uma quantidade reduzida de complexos de adesão, ter e secretar metaloproteinases de matriz ativa suficientes, enzimas projetadas para quebrar a matriz extracelular, para permitir a migração através da matriz extracelular. neste modelo de câncer epitelial, NAC foi encontrado para reprimir esta enzima, sugerindo que a migração celular foi retardada. Além disso, o Exemplo 1 desta divulgação mostra que NAC, quando usado de acordo com a presente invenção para o tratamento de endometriose, suprime a expressão de matriz metaloproteinase 9 (MMP-9). Isso sugere que o NAC pode interferir na migração celular tanto do endométrio eutópico para novos implantes (prevenção de recorrência) quanto no tecido endometriótico (prevenção de novas lesões).

O efeito conhecido do NAC também está relacionado ao seu efeito anti-inflamatório, motivo de sua adição à família dos anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs). O perfil de expressão gênica das células tratadas com NAC de fato mostrou supressão da ciclooxigenase-2 (COX-2), cuja indução está associada a respostas inflamatórias. Além disso, este efeito do NAC foi confirmado no tecido endometriótico no Exemplo 1 desta divulgação, indicando que o NAC também pode aliviar os sintomas associados à inflamação na endometriose.

Como exemplo da capacidade do NAC de modular a transdução de sinal nas células através do status redox-responsivo das cisteínas, a enzima tirosina quinase não receptora c-Src foi estudada em um modelo in vitro de carcinoma de cólon (CaCo-2) e ovário células de carcinoma (OVCAR-3) (Free Radicals Biology and Medicine 2008, 45(11): 1566-72). c-Src está envolvido na mudança de proliferação/diferenciação e é ativo na montagem/desmontagem de complexos associados e na organização do citoesqueleto. Esta quinase é suprarregulada e superexpressa em vários cânceres humanos, especialmente em carcinomas de cólon e ovário. Um notável esforço internacional de desenvolvimento de drogas é, de fato, direcionado para encontrar inibidores específicos de c-Src. Em vez disso, descobriu-se que, simplesmente tratando as células de adenocarcinoma com NAC, o objetivo de suprimir c-Src poderia ser alcançado por meio de um mecanismo relacionado a transições redox em resíduos de cisteína sensíveis em c-Src, capazes de "desligar" essa quinase , entregando-o em endolisossomos, onde é armazenado ou destruído. Assim, o NAC, que induziu a diferenciação terminal em células de adenocarcinoma, foi associado à regulação negativa de c-Src. Vale ressaltar que a atividade desta quinase parece ser importante durante a fase decidual do ciclo celular endometrial, sugerindo assim que sua desregulação está envolvida na endometriose (Endocrine Journal, 2008, 55(5): 795-810).

NAC e endometriose

Conforme explicado na seção anterior, foi sugerido anteriormente que o NAC poderia ser usado em novas estratégias terapêuticas para endometriose com base em seu uso como antioxidante e eliminador de ROS. Nos estudos de câncer epitelial descritos acima, os presentes inventores descobriram que o NAC tinha alguns efeitos benéficos além dos efeitos antioxidantes e aceptor de ROS em células de câncer epitelial, e que tais efeitos também seriam úteis no tratamento de células endometrióides, se as células endometrióides responderem de maneira semelhante. Em particular, esperava-se que os efeitos antiproliferativos e diferenciadores do NAC encontrados no câncer também pudessem ocorrer com o uso do NAC no tratamento da endometriose.

Pensava-se que se o NAC tivesse os seguintes efeitos moleculares observados no câncer também no tecido endometrioide, poderia ser útil no tratamento da endometriose;

1) aumento das conexões célula-célula e célula-substrato de acordo com a mudança de um fenótipo proliferativo para um diferenciado;

2) diminuição da expressão de metaloproteinases de matriz associada a diminuição da migração celular;

3) diminuição da expressão da ciclooxigenase-2 (COX-2) associada à redução da resposta inflamatória;

4) modulação da atividade da c-Src para regular o ciclo de proliferação/decidualização endometrial e promover possível gravidez.

Portanto, foi hipotetizado que o NAC pode ter os seguintes efeitos fisiológicos na endometriose:

1) redução da proliferação de células endometriais;

2) redução da inflamação crônica local e, portanto, alívio da dor a ela associada;

3) normalização do tecido fonte, o endométrio eutópico, por meio de um ciclo proliferação-diferenciação mais regular;

4) um número reduzido de células endometriais ectópicas associadas à motilidade celular reduzida devido a uma diminuição nas metaloproteinases teciduais e junções célula-célula e substrato-célula reduzidas;

5) reorganização da conformação dos receptores de estrogênio através da remontagem de pontes dissulfeto nos resíduos de cisteína relevantes.

Em geral, todos os resultados putativos foram confirmados direta ou indiretamente através da resposta dos pacientes no estudo clínico e através da análise histológica das suas biópsias ou, em modelo animal, ao nível da morfologia, histologia, bioquímica e biologia molecular.

Em particular, os inventores descobriram que NAC realmente reduz a expressão de ciclooxigenase-2 (COX-2) e metaloproteinase de matriz 9 (MMP-9) no tecido endometriótico. Eles também demonstram que o NAC induz a relocalização da E-caderina do citoplasma para o tecido endometriótico nas junções intercelulares no tecido tratado com NAC. Isso indica um aumento nas conexões intercelulares, o que é consistente com uma diminuição na proliferação celular. De fato, outros efeitos, como aumento da expressão de p21 e diminuição da expressão de Ki-67, também indicam que o tratamento com NAC na endometriose resulta em redução da proliferação celular. Os inventores também demonstram que esses efeitos moleculares do tratamento da endometriose com NAC levam a uma redução no tamanho das lesões endometrióticas, alívio da dor e gravidez desejável. Uma vantagem no uso de NAC para o tratamento de endometriose ou indicações relacionadas à endometriose é que não são necessários tratamentos hormonais convencionais para endometriose que suprimem a função ovariana. Assim, o uso de NAC aumenta comparativamente a probabilidade dessas pacientes engravidarem. O tratamento pré-operatório do CAP também resultou em endometriomas mais regulares e compactos, mais fáceis de remover e causaram muito pouco sangramento durante a laparoscopia.

Esquema de recepção

Concluiu-se a partir de um estudo de tratamento de NAC em linhas celulares de adenocarcinoma e células primárias de queratinócitos normais (Cell Death and Differentiation 2005, 12(10): 1285-1296) que a dose eficaz de NAC para induzir um efeito de diferenciação antiproliferativa variava e dependia de tipo de célula. Assim, a origem do tecido dita que a concentração efetiva de NAC que é necessária para o bloqueio completo da proliferação a ser observada deve ser determinada para cada tecido. Além disso, a dose de NAC também foi correlacionada com a malignidade das células. Mais detalhadamente, enquanto as células normais necessitavam de uma dose baixa para interromper a proliferação e iniciar a diferenciação, as células de carcinoma com um mau prognóstico característico necessitavam de uma concentração mais elevada de NAC.

Para os propósitos da presente invenção, um regime de dosagem de NAC para o tratamento de endometriose em um mamífero, incluindo humanos, foi projetado com base nos seguintes critérios:

1) uma dosagem de NAC por dia que seja consistente com outros tratamentos clínicos atuais e considerada livre de efeitos colaterais indesejados;

2) uma dose considerada alta o suficiente para atender à necessidade de células em proliferação anormal para colocá-las na via de diferenciação;

3) dada a diminuição relatada nos níveis plasmáticos de NAC após tratamentos prolongados (Pendyala L, Creaven PJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1995; 4:245-51), uma interrupção do tratamento de aproximadamente metade de cada semana foi considerada a resposta biológica ideal para tratamento por dois meses ou mais.

Uma composição da presente invenção contendo NAC para o tratamento da endometriose ou uma indicação associada à endometriose, de acordo com uma modalidade, deve ser administrada em uma dose de cerca de 20 a 90 mg/kg/dia. O limite inferior baseia-se no dobro da dose utilizada para o efeito mucolítico, ou seja, sabe-se que tem um efeito fisiológico por si só. O limite superior é baseado na noção de que doses mais altas causam problemas estomacais em muitos pacientes. Em outra modalidade da presente invenção, a composição contém NAC para administração em uma dose de aproximadamente 30-60 mg/kg/dia. O limite inferior mostrou-se eficaz na endometriose, e o limite superior é conhecido por praticamente não ter efeitos colaterais. Ainda em outra modalidade da presente invenção, a composição contém NAC para administração em uma dose de aproximadamente 30-45 mg/kg/dia. Surpreendentemente, esta baixa dosagem mostrou ser eficaz na endometriose.

Em uma modalidade, a composição deve ser administrada durante um período de tempo que é de dois meses ou mais, ou preferencialmente três meses ou mais. A fim de evitar uma diminuição do nível de NAC no plasma após tratamento a longo prazo, é possível administrar NAC na dosagem prescrita de forma intermitente, ou seja, de acordo com um regime de dosagem/tratamento intermitente. Administração ou tratamento intermitente significa que o tratamento é interrompido por períodos, ou seja, que a composição farmacêutica é administrada durante um período de tempo, como vários dias, seguido por uma interrupção na administração quando a composição farmacêutica não é administrada por um período de tempo, tal como vários dias. O tratamento intermitente pode ser regular, como o tratamento por um número fixo de dias ou semanas seguido de uma pausa por um número fixo de dias ou semanas. Exemplos incluem esquemas repetidos com tratamento por 4 dias seguidos por uma pausa de 3 dias por semana, ou tratamento por 2 semanas seguido por uma pausa de 1 semana. Um caso especial de tratamento intermitente regular é o tratamento pulsado, ou seja, o tratamento regular e a duração do intervalo, como administração a cada dois dias ou administração por dois dias seguidos de dois dias de folga, e assim por diante. Também são possíveis regimes de tratamento intermitentes irregulares que se repetem irregularmente ou têm um regime mais complexo que se repete, por exemplo, dependendo da resposta ao tratamento. Em várias modalidades ilustrativas da presente invenção, a dose prescrita de NAC é administrada durante 3-5 dias consecutivos seguidos por 2-4 dias de folga, ou administrada durante 1-3 dias consecutivos seguidos por 1-2 dias de folga.

Em uma modalidade, com referência a um peso corporal de aproximadamente 60 kg, a dose de NAC está na faixa de 1,2 a 5,4 g/dia, preferencialmente 1,8 a 3,6 g/dia. Esta dose pode ser dividida em duas ou mais, preferencialmente três ou quatro, administrações diárias de uma ou duas doses (por exemplo, pílulas) cada, onde cada dose pode conter, por exemplo, 0,15-2,7 g NAC ou preferencialmente 0,6-1,2 g NAC. O tratamento inclui a administração das doses acima em pulsos ou intermitentemente, por exemplo a cada dois dias ou durante três a quatro dias consecutivos a cada semana, com um intervalo de quatro a três dias, respectivamente. A duração total mínima do tratamento sai de dois meses, na ausência de uma duração máxima. Para pacientes com outros pesos, como indivíduos com peso maior ou menor do que o indicado, a dose diária deve ser ajustada de acordo.

Em uma modalidade da presente invenção, uma composição farmacêutica para o tratamento de endometriose ou sintomas relacionados à endometriose compreende NAC a uma dose de 150-5400 mg a ser administrada em duas ou mais administrações por dia durante um período de pelo menos 2 meses, como pelo menos 3 meses. Em uma modalidade preferida da presente invenção, a composição farmacêutica contém NAC em uma dose de 230-3600 mg para administração em duas ou mais administrações por dia durante um período de pelo menos 2 meses, tal como pelo menos 3 meses. O tratamento inclui a administração das doses acima em pulsos ou intermitentemente, por exemplo, a cada dois dias ou durante três a quatro dias consecutivos a cada semana com um intervalo de quatro a três dias, respectivamente.

Composições farmacêuticas

A composição farmacêutica de acordo com a presente invenção pode ser preparada de uma maneira conhecida per se pelo especialista na área farmacêutica. A composição pode conter uma quantidade eficaz de NAC de acordo com a invenção, bem como um transportador ou excipiente adequado, que serve como meio de distribuição ou meio para o ingrediente ativo. Tais transportadores ou excipientes são conhecidos na técnica e incluem sólidos tais como ácido cítrico, citrato de sódio, carbonato de sódio (ácido) mais aromatizante. A composição farmacêutica é preferencialmente adaptada para administração oral. Tais composições podem ser administradas em várias formas, atualmente preferencialmente na forma de comprimidos. Outras formas também são possíveis, como cápsulas, supositórios, soluções, suspensões, xaropes ou similares.

A invenção requer uma avaliação rigorosa da qualidade farmacêutica da preparação de NAC para obter uma dose eficaz. Portanto, marcas ou medicamentos genéricos certificados devem ser usados. O NAC não é uma molécula estável, seu resíduo de tiol ativo pode ser facilmente oxidado por oxigênio, luz e outras radiações, de modo que uma dose eficaz pode não ser alcançada. A preparação é assim preferencialmente protegida da luz, em comprimidos solúveis, com bicarbonato de sódio que auxilia na remoção parcial do oxigênio da água durante a dissolução.

Foi observado que altas doses de NAC podem causar dor abdominal. Para superar isso, é possível oferecer NAC em uma composição protetora gástrica adequada para prevenir a liberação/solubilidade de NAC no estômago. Tais composições são bem conhecidas na técnica e podem ser usadas na presente invenção. Por exemplo, podem ser usados ​​revestimentos de comprimidos que são resistentes aos fluidos gástricos e permitem que o fármaco seja liberado apenas no intestino após ter passado pelo estômago. As composições comumente usadas incluem polímeros tais como derivados de celulose, copolímeros de metacrilato amino éster. O revestimento protege o núcleo do comprimido da degradação no ambiente ácido do estômago usando um polímero sensível ao pH que incha ou solubiliza após a passagem pelo estômago em resposta a um aumento no pH para liberar o fármaco.

Outra opção é reduzir a dose de NAC que entra na corrente sanguínea ao mesmo tempo. A introdução de NAC três ou mais vezes ao dia pode ser difícil para o paciente. Apesar disso, a administração repetida pode ser desejável para atingir uma concentração sérica de NAC quase constante. Para superar esses problemas, a administração uma ou duas vezes ao dia, por exemplo, de manhã e à noite, pode ser mais fácil para o paciente. Uma opção é oferecer NAC em uma formulação de liberação lenta (também conhecida como liberação sustentada ou liberação controlada). Essa composição permite administrar uma dose maior em intervalos mais longos, pois é capaz de reduzir a taxa de difusão e captação de NAC na corrente sanguínea. A dose é então distribuída no sangue durante um longo período de tempo em pequenas quantidades, por exemplo, dentro de 12+12 horas no caso de um regime de duas vezes ao dia. Muitas tecnologias e composições diferentes para liberação sustentada são conhecidas há muito tempo na técnica e podem ser usadas na presente invenção. Em tais tecnologias, a substância ativa é, por exemplo, encapsulada em um invólucro ou matriz que é insolúvel ou menos solúvel no fluido corporal no qual é administrada. As composições que possuem um efeito combinado de liberação lenta e proteção gástrica também são possíveis e podem ser usadas na presente invenção.

Usos/indicações médicas da presente invenção

A presente invenção demonstrou ser útil em muitos aspectos relacionados à endometriose e pode ser usada tanto para o tratamento da endometriose quanto para o tratamento de várias indicações associadas à endometriose. Sob o tratamento de várias indicações associadas à endometriose, entenda-se, por exemplo, o tratamento para aliviar os sintomas da doença, como dor e inflamação; tratamento para aumentar a chance de gravidez; pré-tratamento antes da cirurgia para facilitar a remoção de lesões endometriais e melhorar o resultado da operação; tratamento após a cirurgia para prevenir a recorrência das lesões; e tratamento profilático em caso de fatores de risco confirmados, avaliados ou presença de endometriose hereditária.

Demonstrou-se que o NAC da presente invenção reduz o tamanho da lesão e devolve o tecido proliferativo a um tecido normal mais diferenciado. Assim, em uma modalidade da presente invenção, a composição farmacêutica contém NAC para o tratamento da endometriose para reduzir - eventualmente desaparecendo - endometriomas, aderências, implantes peritoneais e lesões profundas localizadas no septo retovaginal ou em outro lugar.

O NAC da presente invenção também demonstrou aliviar os sintomas da dor causada pela endometriose. Assim, em outra modalidade da presente invenção, a composição farmacêutica contém NAC para aliviar a dor associada à endometriose.

Ainda em outra modalidade da presente invenção, a composição farmacêutica contém NAC para induzir uma gravidez desejada em uma paciente com endometriose.

Ainda em outra modalidade da presente invenção, a composição farmacêutica contém NAC para pré-tratamento antes da laparoscopia ou cirurgia em casos de endometriose, para facilitar a remoção de massa, reduzir o sangramento, tornar os tecidos mais compactos/menos frágeis.

Em outra modalidade da presente invenção, a composição farmacêutica contém NAC para prevenir a recorrência após laparoscopia ou cirurgia.

Em outra modalidade da presente invenção, a composição farmacêutica contém NAC para uso no caso de fatores de risco avaliados e confirmados para a prevenção da endometriose devido a uma doença hereditária.

A seguir, a invenção será descrita e ilustrada com mais detalhes por meio dos exemplos que se seguem. Deve-se notar, no entanto, que estes exemplos não devem ser interpretados como limitando a invenção de forma alguma.

Exemplo 1 Efeito de NAC em um modelo de camundongo de endometriose

Materiais e métodos

Substâncias. Salvo indicação em contrário, todos os produtos químicos eram da Sigma-Aldrich, Milão, Itália.

Animais. 36 camundongos BALB/C fêmeas com 6-8 semanas de idade foram adquiridos de Charles River Italia (Calco, Itália). Pellets (dieta padrão enriquecida; Mucedola, Milão, Itália) e água foram fornecidos ad libitum. Os animais foram mantidos em um ciclo claro/escuro de 16/8 horas sob condições controladas. Antes de qualquer procedimento invasivo, os camundongos foram anestesiados por injeção intraperitoneal de 0,4 ml de solução salina contendo 2,5% de Avertin.

indução de endometriose. A indução da endometriose foi realizada seguindo o método descrito em Somigliana et al, Hum Reprod 1999 Dec;14(12):2944-50. As intervenções cirúrgicas foram realizadas em condições limpas. Resumidamente, os cornos uterinos de camundongos singênicos foram removidos através de uma pequena incisão mediana no abdômen logo abaixo do umbigo e colocados em uma placa de Petri contendo solução salina tamponada com fosfato (PBS). Fragmentos do endométrio foram obtidos por esmagamento fino dos cornos uterinos com lâmina de barbear. Os fragmentos foram suspensos em 0,6 ml de PBS e rapidamente inoculados na cavidade abdominal dos camundongos receptores na proporção de um doador para dois receptores. Camundongos com endometriose induzida foram divididos aleatoriamente em dois grupos de 12 camundongos cada: controle e tratamento com NAC.

Processamento NAC. Um dia após a implantação do endométrio de camundongos do grupo de tratamento foram submetidos a alimentação por sonda com 100 μl de 10 mg/ml de solução estoque de NAC em água. O grupo controle recebeu apenas água. A introdução de NAC continuou diariamente por 21 dias. Considerando um peso corporal médio de camundongo de 22,5±0,7, uma dose de NAC de 1 mg/camundongo corresponde a 44 mg/kg/dia. Não houve sinais de toxicidade da dose com base no peso corporal - inalterado no final do tratamento - em relação à ingestão de alimentos, higiene ou níveis de atividade em comparação com os controles. Ao final do tratamento, os camundongos foram mortos por deslocamento das vértebras cervicais.

coleção de endometriomas. Ao final do tratamento, os animais foram sacrificados e as lesões endometrióides foram cuidadosamente extirpadas do tecido circundante, e seu peso e número total foram avaliados. Os cistos foram imediatamente fixados em formol a 10% ou congelados em nitrogênio líquido e armazenados a -80°C.

Histologia e imunohistoquímica. Espécimes fixados em formalina foram incluídos em parafina e cortes de tecido (5 µm de espessura) foram corados com hematoxilina-eosina. Todas as lâminas foram avaliadas por um patologista experiente que agiu de forma cega ao estudo, e o diagnóstico histológico de endometriose foi baseado na identificação morfológica do tecido glandular endometrial e do estroma.

Para imunohistoquímica, os cortes foram desparafinizados e reidratados em etanol de marca. Para a recuperação do antígeno, as seções foram colocadas em micro-ondas por 6 min em tampão citrato 0,1 M (pH 6,0) e a atividade da peroxidase endógena foi bloqueada por incubação por 20 min em 3% H 2 O 2 /metanol. As seções foram lavadas em PBS/TritonX-100, imersas por 15 min em 1% de PBS-albumina de soro bovino (BSA) para bloquear sítios de ligação não específicos e, em seguida, incubadas com o anticorpo primário selecionado diluído em 1% de PBS-BSA. Para imunoensaio de ciclooxigenase (COX)-2 (policlonal de coelho para camundongo, Cayman Chemical, Milão, Itália), Ki-67 (policlonal de coelho para humano, Monosan Xtra, DBA Italia, Segrate, Itália) e E-caderina (BD Biosciences, Milão, Itália) foi realizada durante a noite a 4°C e as diluições foram 1:100, 1:600, 1:200, respectivamente. A coloração imuno-histoquímica foi continuada usando DAKO Cytomation LSAB2 System-HRP (Dako Italia, Milão, Itália) e os locais de ligação do anticorpo foram visualizados com solução de coelho anti-estreptococo humano de anticorpos policlonais do complexo avidina-biotina peroxidase usando diaminobenzidina como cromógeno. Os cortes foram contracorados com hematoxilina, desidratados, colocados em bálsamo canadense e então visualizados em microscópio Leica. A expressão do Ki-67 foi quantificada de forma cega com dois observadores independentes; cada observador contou pelo menos 200 células em mais de 10 campos selecionados aleatoriamente para cada amostra, e o índice de marcação Ki-67 foi expresso em porcentagem.

Extração de RNA, RT-PCR semiquantitativo (reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa) e qRT-PCR (RT-PCR quantitativo). O RNA total foi isolado por lise de cistos endometriais congelados com TissueLyser (QIAGEN, Milão, Itália) usando o reagente Trizol (Invitrogen, Milão, Itália) de acordo com as instruções do fabricante. Um micrograma de RNA total de cada amostra foi digerido com 1 U de DNase I (Invitrogen) e transcrita reversa com 200 U de transcriptase reversa Superscript III (Invitrogen) usando 250 ng de primers selecionados aleatoriamente em um volume final de 20 µl. O mesmo produto de cDNA obtido de cada amostra foi usado para amplificação por PCR subsequente com conjuntos de primers obtidos para os genes alvo. O gene constitutivo de RNA 18S foi usado como controle interno. As amostras de controle negativo consistiram na mistura de reação e primers sem molde de cDNA. As sequências de primers (Tabela 1) foram geradas usando o software Primer-BLAST disponível online em: http://www.ncdi.nlm.nih.gov/

Primeiro, a razão entre a amostra e o gene constitutivo foi calculada por amplificação síncrona de mRNA específico do gene e RNA 18S em um tubo de reação. Uma vez que este procedimento não foi bem sucedido para todas as amostras - talvez devido ao número relativamente pequeno de transcritos específicos e, portanto, a amplificação preferencial do mRNA 18S - para evitar imprecisões quantitativas resultantes de efeitos competitivos, genes alvo e cDNA 18S criados em um e o mesma reação de RT foram amplificados em tubos separados. Para documentar a amplificação exponencial, um gráfico de amplificação para RNA 18S foi gerado e o número apropriado de ciclos selecionado. A PCR semiquantitativa foi realizada em um volume de reação de 25 μl com 1 μl de cDNA, 2 mM MgCl 2 , 0,2 mM dNTP, 0,5 μM cada primer e 1,25 U Hotstart Taq polimerase (QIAGEN). A amplificação por PCR foi realizada usando iCycler (Bio-Rad, Milão, Itália). Em seguida, os produtos da PCR foram separados eletroforeticamente em gel de agarose 1,5% e corados com brometo de etídio. Os níveis de mRNA alvo foram avaliados por varredura densitométrica e normalizados contra controles carregados com 18S. As análises densitométricas dos produtos de PCR foram realizadas usando o software de imagem Quantity One (VersaDOC, Bio-Rad).

tabela 1
Sequência de primer, use para qRT-PCR semiquantitativo
mRNA alvo	Primários	Subsequência	Recozimento (por 30 segundos)	Número de ciclos	Produto de PCR (pb)
RNA 18S NR_003278.1	reverso direto	CGCGGTTCTATTTTGTTGGT	60°C	18-24	219
AGTCGGCATCGTTTATGGTC
SOH-2 NM_011198.3	reverso direto	CCCCACAGTCAAAGACACT	60°C	35	196
AGTTGCTCATCACCCCACTC
MMP-9 NM_013599.2	reverso direto	TGAATCAGCTGGCTTTTGTG	60°C	35	242
GTGGATAGCTCGGTGGTGTT
P21 (cdknla) NM_007669.4	reverso direto	TCCACAGCGATATCCAGACA	60°C	35	196
ACGAAGTCAAAGTTCCACCG

resultados

Efeito do tratamento com NAC no crescimento de lesões endometrióticas. Vinte e um dias após a indução da endometriose, todos os camundongos experimentais foram sacrificados e seus endometriomas foram removidos e colhidos. Dos 12 camundongos controle, um morreu e um não desenvolveu endometriomas. Dos 12 camundongos tratados com NAC, dois não desenvolveram endometriomas. Morfologicamente, as lesões ectópicas eram grandes, císticas e vascularizadas: consistiam em cistos cheios de líquido, de cor branca, vermelha ou ocasionalmente marrom, localizados preferencialmente no peritônio da cavidade abdominopélvica. Nas inserções da Figura 1.1, apresentamos imagens representativas de cistos de animais de controle (A) e tratados com NAC (B). Em média, foi observada uma redução significativa no peso no grupo de tratamento (n=10) em relação aos controles (n=10) (Figura 1).

O NAC reduz a expressão de COX-2 e MMP-9 e desativa a proliferação. A análise de RT-PCR mostrou que, em relação aos cistos de camundongos de controle (n = 5), o tratamento com NAC (n = 5) induziu uma diminuição significativa nos níveis de mRNA de COX-2 (-32%) e MMP-9 (-34%) , co significância p<0,01, которые нормализовали к экспрессии 18S (Фиг.2А и В). Ген Р21, обычно экспрессирующийся только, когда цикл пролиферации блокирован, ни разу не экспрессировался в 5 контролях, хотя он экспрессировался в 3 из 5 изучаемых NAC-обработанных образцах (типичный пример на Фиг.2А).

NAC põe em movimento a relocalização da E-caderina. A detecção imuno-histoquímica da E-caderina foi positiva em 100% dos casos estudados. A marcação foi limitada às células epiteliais glandulares, enquanto nenhuma das amostras apresentou coloração estromal. No nível celular, em cistos de camundongos de controle, os inventores descobriram que a coloração de E-caderina estava espalhada por todo o citoplasma da célula, enquanto em cistos de camundongos tratados com NAC, a E-caderina foi encontrada principalmente ao longo das junções intercelulares (Figura 3). A E-caderina faz parte de um complexo de adesão multiproteica; portanto, sua presença aumentada nos limites celulares indica um aumento nas adesões intercelulares. Além disso, e consistente com a expressão de P21 descrita acima, esta realocação é consistente com a perda de comportamento proliferativo em células comutadas para diferenciação terminal (Conacci-Sorrell et al, J. Clin. Invest. 2002, 109: 987-991; Parasassi et ai, Cell Death Differ 2005, 12: 1285-1296).

O tratamento com NAC reduz a quantidade de Cox-2 em endometriomas. A detecção imuno-histoquímica da proteína Cox-2 associada à inflamação mostrou que, em relação aos cistos de camundongos de controle, as amostras coletadas de camundongos tratados com NAC mostraram coloração bastante fraca, que em alguns casos estava completamente ausente (Figura 4).

NAC reduz o número de células em proliferação. O antígeno Ki-67 (Ki-67) é um marcador clássico de proliferação celular em células quiescentes, em fase de repouso, que carecem completamente de expressão de Ki-67. Quando usado para corar os cistos de camundongos de controle, várias células marcadas podem ser detectadas (setas nos painéis A-C na Figura 5). Em vez disso, muito poucas células marcadas foram encontradas nos cistos de camundongos tratados com NAC (setas nos painéis D-F na Figura 5). A avaliação estatística realizada em 8 animais em cada grupo (10 imagens/200 células de camundongo) proporcionou uma redução de 54% nas células em proliferação (Tabela II).

Discussão

Um modelo animal de endometriose tem sido eficaz na indução de implantes endometriais ectópicos. Apenas um animal no grupo controle e dois no grupo tratado com NAC não apresentaram endometriomas.

Como esperado, a massa - em proporção ao tamanho - de cistos foi menor em camundongos tratados com NAC. Isso pode ser explicado pelo efeito antiproliferativo do NAC (Parasassi et al, Cell Death Differ. 2005, 12: 1285-1296), que é amplamente ilustrado aqui por análise de expressão gênica e imuno-histoquímica. De fato, P21, um gene expresso apenas em células não proliferativas em diferenciação, foi observado em 60% dos animais tratados com NAC, enquanto não foi expresso em controles. Em contraste, a proteína Ki-67, que é expressa apenas em células em proliferação, mostrou uma redução de 54% nos ratos tratados com NAC em relação aos camundongos controle.

Proteínas relevantes na endometriose, como MMP-9 (Collette et al., Hum Reprod 2006; 21:3059-3067) e Cox-2 (Carli et al, Endocrinology 2009; 150: 3128-3137) mostraram uma diminuição após o tratamento com NAC. A MMP-9 é considerada essencial para o movimento celular e comportamento invasivo, enquanto a Cox-2 é uma enzima associada à inflamação. Ambos os genes relacionados mostraram uma diminuição de cerca de 30% após o tratamento com NAC. Além disso, a quantidade de Cox-2 também foi estudada por coloração histoquímica nos cistos, e os resultados mostraram uma atenuação de coloração relevante.

Com base no conceito amplamente aceito que considera a E-caderina citoplasmática como um marcador do comportamento proliferativo celular, enquanto sua presença no complexo de adesão intercelular, ao contrário, é considerada tanto como marcador quanto como indutor de diferenciação, os inventores também estudaram a localização da E-caderina em cistos de camundongos controle e tratados com NAC. Os resultados estão em perfeita concordância com dados anteriores obtidos pelos inventores sobre células de adenocarcinoma (Parasassi et al., Cell Death Differ. 2005,12: 1285-1296), indicando o movimento da E-caderina do citoplasma da célula para as bordas da célula após o tratamento com NAC. Esta associação de E-caderina com o complexo de adesão também é consistente com um comportamento celular menos móvel e menos invasivo.

Em conclusão, em todos os aspectos considerados, o NAC pode representar um tratamento ideal para a endometriose. Quando transferido para o tratamento de mulheres, esse medicamento apresenta uma vantagem significativa, praticamente não apresentando efeitos colaterais em relação à magnitude dos efeitos adversos com o tratamento hormonal. Portanto, o NAC pode ser usado para reduzir o tamanho dos cistos, reduzir a inflamação local e a dor crônica associada e reduzir a recorrência após a cirurgia. Este último ponto é devido à proliferação reduzida e motilidade celular reduzida.

Exemplo 2 Estudo clínico preliminar do efeito de NAC no tratamento da endometriose.

Propósito do estudo. Este ensaio clínico piloto foi projetado para tratar mulheres com endometriose usando NAC em vez de outros tratamentos. O único tratamento adicional possível foi analgésico para aliviar a dor quando necessário.

Critérios de Inclusão de Pacientes. Foram incluídas neste estudo mulheres com diagnóstico inicial de endometriose baseado na dor e confirmação da doença por ultrassonografia ovariana e pacientes com recorrência da dor e/ou endometrioma ovariano após tratamento laparoscópico.

Antes do tratamento, a intensidade dos sintomas de dor foi medida usando uma escala analógica visual de 10 pontos (VAS) e as características dos endometriomas ovarianos por ultra-som transvaginal. Durante o tratamento com NAC, outros tratamentos foram excluídos, com exceção de analgésico para controle da dor quando necessário.

Pacientes. De fevereiro de 2008 a julho de 2010, 64 mulheres com idade média de 35±7 anos (±DP) com endometriose ovariana diagnosticada foram incluídas no estudo, 33 das quais receberam tratamento com NAC (idade média: 37±6 anos), enquanto ambos os 31 não seguiram NAC- ou qualquer outro tratamento e foram considerados controles (idade média: 33±8 anos). Todas apresentavam um ou mais cistos em um ou ambos os ovários.

Tratamento. A dose prescrita de NAC foi próxima à utilizada no estudo animal, 30 mg/kg/dia. Na prática, para um peso corporal médio de 60 kg, três doses orais de 600 mg de NAC três vezes ao dia por três dias consecutivos a cada semana com quatro dias de folga foram prescritas para todos os pacientes registrados. O resultado foi 1,8 g de NAC por dia, 5,4 g por semana, 21,6 g por mês. Esses tratamentos precisos foram baseados nas seguintes considerações: 1) uma dose de 1,8 g de NAC por dia está de acordo com outros tratamentos clínicos atuais e é considerada livre de efeitos colaterais indesejáveis; 2) parâmetros farmacocinéticos estabelecidos do NAC, três doses diárias de 0,6 mg aproximam-se dos níveis plasmáticos quase constantes sem desconforto para os pacientes durante o tratamento complexo; 3) diminuição relatada estabelecida nos níveis plasmáticos de NAC após tratamentos prolongados (Pendyala L, Creaven PJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1995; 4:245-51), interromper o tratamento por cerca de metade de cada semana fornece uma resposta biológica ideal em longo prazo tratamento, por exemplo dois a seis meses ou mais.

Ao controle. A intensidade dos sintomas de dor (escala de dor EVA) e o tamanho dos endometriomas ovarianos (exame clínico e US) foram avaliados após os primeiros três meses de tratamento. Se necessário, o tratamento laparoscópico foi realizado após 3 meses.

resultados

Os dados após o primeiro período de acompanhamento de três meses estão descritos abaixo.

A mudança no tamanho do cisto (inalterado, aumentado ou reduzido) após três meses de tratamento com NAC, medido por ultra-som como o diâmetro máximo, é mostrado na Figura 7A (número absoluto de cistos) e Figura 7B (porcentagem de cistos). As figuras mostram uma comparação de cistos em pacientes tratados com NAC e cistos em controles não tratados. Em porcentagem (FIG. 7B), a redução do tamanho do cisto foi observada em 38% dos casos, enquanto nos controles, apenas menos de 10% dos casos apresentaram redução espontânea. Dada a redução no tamanho dos endometriomas, vários (21 de 33) pacientes decidiram cancelar ou adiar a laparoscopia planejada.

A dor após o tratamento com NAC também mudou. A dor foi avaliada antes e após três meses de tratamento, em uma escala visual analógica (VAS) de 10 pontos, onde zero representava ausência de dor e 10 representava a pior dor imaginável. A intensidade dos sintomas foi classificada em ausente (0), leve (1-4), moderada (5-7) ou grave (8-10). Os pacientes tratados com NAC relataram uma redução média da dor de 7,6±0,3 a 5,1±0,8 (p<0,01) после трех месяцев лечения.

Não foram relatados efeitos colaterais prejudiciais.

Embora os inventores não tenham avaliado se as pacientes desejavam uma gravidez e, portanto, não podem caracterizar a significância estatística das descobertas, os inventores também relatam três gestações aparentemente impossíveis com as terapias de endometriose atualmente usadas destinadas a suprimir a função ovariana.

Notável foi a observação, descrita por um cirurgião experiente, de que na laparoscopia após o tratamento do CAP o endometrioma era mais regular e compacto e mais facilmente removido, portanto associado a uma redução significativa do sangramento durante a laparoscopia.

Em outro caso, o nódulo no septo retovaginal desapareceu, sugerindo a eficácia do NAC fora dos endometriomas ovarianos.

Exemplo 3 Efeitos do tratamento com NAC pulsado, intermitente e diário na endometriose induzida experimentalmente: hipersensibilidade vaginal de rato como um sinal de dor - estudo piloto

Materiais e métodos

Animais. Foram utilizadas 16 ratas Sprague-Dawley fêmeas adultas não fertilizadas. Eles pesavam 200-230 g no início do estudo e foram mantidos individualmente em uma sala com temperatura controlada em gaiolas plásticas forradas de cama. Os ratos tiveram livre acesso a água e ração e foram mantidos em ciclo claro/escuro de 12 horas com luzes acesas às 07:00. O estado reprodutivo (pré-estro, estro, pós-estro e diestro) foi determinado por lavagem vaginal diária.

Modelo experimental e treinamento pré-cirúrgico. Antes da indução da endometriose, as ratas foram treinadas para realizar uma resposta de esquiva para interromper a expansão da vagina produzida por um balão inflável de látex. Um pequeno balão de látex não inflado foi conectado a um cateter fino lubrificado antes da inserção no meio do canal vaginal. Inflar o balão com diferentes volumes de ar esticou o canal vaginal. A pressão produzida por cada volume expansível foi medida para controle por meio de um transdutor de pressão de pequeno volume. O aparato de teste era uma pequena câmara cilíndrica de plexiglass projetada para segurar o rato de forma a evitar que ele girasse. A abertura da parte de trás da câmara permitiu que um cateter ligado a um estimulador vaginal fosse conectado a um aparelho de estimulação. O elemento fotossensível determinou a posição do rato na câmara. Se o rato se estica como parte de uma resposta de evitação, o feixe de luz é interrompido e a exposição é interrompida. Os ratos foram deixados assentar na câmara de teste colocando-os na câmara durante 15 minutos diariamente durante 5 dias. Os ratos foram então treinados durante as sessões de treinamento para sofrer uma resposta mecânica de evitação para reduzir a distensão vaginal, que envolveu puxar a cabeça do rato para interromper o feixe de luz. Todos os ratos foram treinados em reações de esquiva em 4 sessões. Após o treinamento, iniciou-se a sessão de testes.

As sessões de teste foram realizadas 3 vezes/semana em dias não consecutivos. Cada sessão de teste incluiu uma série de testes de evasão controlados. Cada tentativa consistiu em inflar rapidamente o balão (1 ml/s) até um volume fixo, que foi mantido até que o rato realizasse uma resposta de esquiva ou por 15 segundos, e o balão foi esvaziado rapidamente. Diferentes volumes de expansão, incluindo um volume de controle (0,01 ml), foram injetados três vezes ao acaso. Foi considerado um período de espera máximo de 15 segundos sem resposta.

O tempo de resposta e as reações de esquiva foram medidos em função do volume de expansão para cada sessão, conforme descrito em Cason AM et al (Horm Behav. (2003), Vol. 44, páginas 123-31). Quanto menor o tempo de resposta e quanto menor o volume de resposta, mais forte a reação de evitação no rato. Para cada rato, as respostas de evitação e pressão/volumes para todas as sessões em um determinado rato (pelo menos 12 sessões) foram agrupadas e os valores médios foram calculados. Todos os quatro grupos experimentais (veja abaixo) descobriram que as respostas de prevenção à distensão vaginal antes da cirurgia para endometriose foram muito semelhantes.

indução de endometriose. A endometriose em ratas pode ser induzida experimentalmente por autotransplante de peças uterinas. A cirurgia para endometriose foi realizada seguindo o protocolo originalmente desenvolvido por Vernon e Wilson 1985 (Fertility and Sterility, 1985, Vol. 44, páginas 684-694). Os ratos em diestro foram anestesiados, colocados em uma almofada de aquecimento para manter a temperatura corporal e a cirurgia foi realizada. Uma incisão foi feita na linha média da cavidade abdominal para abrir o útero. Quatro pedaços de corno uterino foram suturados em torno de uma cascata alternada de artérias mesentéricas que alimentam o intestino delgado caudal. A recuperação pós-operatória foi suave e os ciclos regulares de estro foram retomados em todas as ratas dentro de uma semana.

Tratamento NAC.

Todos os ratos foram tratados com NAC na dose de 60 mg/kg/dia (quando aplicável, no dia da administração) ou placebo por 8 semanas após a cirurgia. Os ratos foram divididos em quatro grupos experimentais:

O primeiro grupo recebeu tratamento com NAC pulsado, ou seja, tratamento em dias alternados.

O segundo grupo recebeu tratamento intermitente com NAC, ou seja, tratamento diário por 5 dias e 2 dias de folga (ou seja, 2 dias sem tratamento).

O terceiro grupo recebeu tratamento diário com NAC.

O quarto grupo recebeu um tratamento simulado, ou seja, um tratamento placebo.

A resposta de prevenção à cessação da distensão vaginal, conforme descrito acima, foi avaliada após 8 semanas.

resultados

Os resultados mostram que a hiperalgesia vaginal (aumento da sensibilidade à dor) foi induzida em ratas após cirurgia uterina.

A resposta de evitação (ou seja, tempo para resposta e número de respostas em 15 segundos para uma determinada quantidade de alongamento em comparação com o grupo controle) e a pressão vaginal foram determinadas para diferentes volumes de alongamento do canal vaginal. Os resultados para quatro grupos experimentais diferentes são mostrados (os valores para o grupo de tratamento simulado foram usados ​​como valores basais).

A redução relativa na resposta de evitação no volume de alongamento de 0,5 ml em relação ao grupo de tratamento simulado foi:

1. Para o grupo de tratamento pulsado NAC: redução de 32% na resposta de evasão;

2. Para o grupo de tratamento intermitente NAC: redução de 28% na resposta de evitação;

3. Para o grupo de tratamento diário com NAC: redução de 18% na resposta de evasão.

Notavelmente, os resultados mostram que o efeito de redução da dor induzido pelo tratamento com NAC foi mais pronunciado no grupo de tratamento pulsado e no grupo de tratamento intermitente em comparação com o grupo de tratamento diário.

1. Método de tratamento de um mamífero com endometriose, compreendendo administração oral pulsada ou intermitente por 3-5 dias consecutivos seguido de um intervalo de 2-4 dias, ou por 1-3 dias consecutivos seguido de um intervalo de 1-2 dias de um medicamento composição contendo N-acetil-L-cisteína, por um período de tempo de pelo menos dois meses, onde a N-acetil-L-cisteína é administrada na dose de 20 a 90 mg/kg/dia por dia de administração.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a N-acetil-L-cisteína é administrada na dose de 30 a 60 mg/kg/dia no dia da administração.

3. Método, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que a N-acetil-L-cisteína é administrada na dose de 30 a 45 mg/kg/dia no dia da administração.

4. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição farmacêutica compreendendo N-acetil-L-cisteína é protegida da luz.

5. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição farmacêutica compreendendo N-acetil-L-cisteína é um comprimido solúvel em água.

6. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição farmacêutica contendo N-acetil-L-cisteína contém bicarbonato de sódio.

7. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição farmacêutica compreendendo N-acetil-L-cisteína compreende um revestimento de comprimido polimérico à base de derivados de celulose ou copolímeros de metacrilato amino éster que proporcionam liberação intestinal do fármaco.

8. Método de acordo com a reivindicação 1, que é utilizado no tratamento da dor causada pela endometriose.

SUBSTÂNCIA: grupo de invenções refere-se a medicamento e diz respeito a uma composição estável de sildenafil nanoestruturado que inibe a fosfodiesterase tipo 5 específica de cGMP (PDEV), contendo base de sildenafil nanoestruturada ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis, com um tamanho médio de partícula inferior a cerca de 500 nm, um estabilizador, onde a composição é obtida em fluxo, um reator contínuo baseado em tecnologia microfluídica e onde a composição tem uma estrutura semi-amorfa.(57) A invenção refere-se ao campo da medicina e destina-se a influenciar a microcirculação no tecido ósseo na osteoporose experimental e nas fraturas a ela associadas. // 2540481

A invenção refere-se à indústria farmacêutica e é uma solução oftálmica contendo riboflavina e vitamina E para proteger as estruturas internas do globo ocular dos raios UV-A ou para tratar o ceratocone por reticulação transepitelial.

A invenção refere-se à indústria farmacêutica e é uma solução de infusão balanceada contendo cloretos de sódio, potássio e magnésio, um solvente e succinato de L-arginina de sódio da fórmula: , e os componentes da solução estão em uma determinada proporção em peso. EFEITO: a invenção proporciona maior atividade desintoxicante, baixa toxicidade e ampla área de aplicação clínica. 11 tab., 6 ex.

A invenção refere-se a um método para tratar um mamífero com endometriose. Este método inclui administração oral pulsada ou intermitente por 3-5 dias consecutivos seguido de um intervalo de 2-4 dias ou por 1-3 dias consecutivos seguido de um intervalo de 1-2 dias de uma composição farmacêutica contendo N-acetil-L-cisteína, em um período de pelo menos dois meses. N-acetil-L-cisteína neste método é administrado na dose de 20 a 90 mg/dia. O método reivindicado fornece um efeito mais significativo sobre os sintomas da endometriose em comparação com a administração diária tradicional de N-acetil-L-cisteína. 10 z.p. f-ly, 7 il., 2 mesas, 3 pr.

Composição e forma de liberação do fármaco

200 mg - saquetas (20) - embalagens de cartão.
200 mg - saquetas (30) - embalagens de cartão.

efeito farmacológico

Agente mucolítico, é um derivado do aminoácido cisteína. Tem um efeito mucolítico, aumenta o volume do escarro, facilita sua descarga devido a um efeito direto nas propriedades reológicas do escarro. A ação da acetilcisteína está associada à capacidade de seus grupos sulfidrila de quebrar as ligações dissulfeto intra e intermoleculares dos mucopolissacarídeos ácidos do escarro, o que leva à despolarização das mucoproteínas e à diminuição da viscosidade do escarro.

Reduz a hiperplasia induzida de células mucóides, aumenta a produção de compostos tensoativos estimulando os pneumócitos tipo II, estimula a atividade mucociliar, o que leva a uma melhor depuração mucociliar.

Mantém a atividade na presença de expectoração purulenta, mucopurulenta e mucosa.

Aumenta a secreção de sialomucinas menos viscosas pelas células caliciformes, reduz a adesão de bactérias às células epiteliais da mucosa brônquica. Estimula as células mucosas dos brônquios, cujo segredo lisa a fibrina. Tem um efeito semelhante no segredo formado em doenças inflamatórias do trato respiratório superior.

Tem um efeito antioxidante devido à capacidade de seus grupos sulfidrila reativos (grupos SH) se ligarem aos radicais oxidantes e, assim, neutralizá-los.

A acetilcisteína penetra facilmente na célula, desacetilada em L-cisteína, a partir da qual a glutationa intracelular é sintetizada. A glutationa é um tripeptídeo altamente reativo, um poderoso antioxidante e citoprotetor que neutraliza radicais livres e toxinas endógenas e exógenas. A acetilcisteína previne a depleção e promove um aumento na síntese de glutationa intracelular, que está envolvida nos processos redox das células, contribuindo para a desintoxicação de substâncias nocivas. Isso explica a ação da acetilcisteína como antídoto para envenenamento.

Protege a alfa1-antitripsina (um inibidor da elastase) do efeito inativador do HOCl, um agente oxidante produzido pela mieloperoxidase de fagócitos ativos. Também tem um efeito anti-inflamatório (devido à supressão da formação de radicais livres e substâncias ativas contendo oxigênio responsáveis ​​​​pelo desenvolvimento de inflamação no tecido pulmonar).

Farmacocinética

Quando tomado por via oral, é bem absorvido pelo trato gastrointestinal. Sofre significativamente o efeito de "primeira passagem" pelo fígado, o que leva a uma diminuição da biodisponibilidade. Ligação às proteínas do sangue até 50% (4 horas após a ingestão). Metabolizado no fígado e possivelmente na parede intestinal. No plasma, é determinado inalterado, bem como na forma de metabólitos - N-acetilcisteína, N,N-diacetilcisteína e éster de cisteína.

A depuração renal é 30% da depuração total.

Indicações

Doenças e condições respiratórias acompanhadas pela formação de expectoração viscosa e mucopurulenta: bronquite aguda e crônica, traqueíte devido a infecção bacteriana e / ou viral, pneumonia, bronquiectasia, asma brônquica, atelectasia devido ao bloqueio dos brônquios por um tampão mucoso, sinusite ( para facilitar a descarga de secreções ), fibrose cística (como parte da terapia combinada).

Preparação para broncoscopia, broncografia, drenagem aspirativa.

Remoção de segredo viscoso do trato respiratório em condições pós-traumáticas e pós-operatórias.

Para lavagem de abscessos, fossas nasais, seios maxilares, ouvido médio, tratamento de fístulas, campo cirúrgico durante operações na cavidade nasal e processo mastóide.

Contra-indicações

Úlcera péptica do estômago e duodeno na fase aguda, hemoptise, hemorragia pulmonar, lactação (amamentação), crianças menores de 2 anos, hipersensibilidade à acetilcisteína.

As contraindicações para uso em crianças menores de 14 anos dependem da forma farmacêutica e são indicadas nas instruções de uso do medicamento utilizado.

Dosagem

Dentro de adultos e crianças com mais de 6 anos - 200 mg 2-3 vezes / dia; crianças de 2 a 6 anos - 200 mg 2 vezes / dia ou 100 mg 3 vezes / dia.

Para uso inalatório e intratraqueal, a dose, a frequência de uso e a duração do curso são definidas individualmente.

Localmente - instilado no canal auditivo externo e nas fossas nasais 150-300 mg por 1 procedimento.

Efeitos colaterais

Reações alérgicas: urticária, erupção cutânea, comichão, angioedema, reacções anafilácticas, inchaço da face.

Do sistema nervoso: dor de cabeça.

Do órgão da audição e equilíbrio: barulho nos ouvidos.

Do lado do sistema cardiovascular: taquicardia, hipotensão, sangramento

Do sistema respiratório: broncoespasmo, dispnéia.

Do sistema digestivo: vómitos, diarreia, estomatite, náuseas, dispepsia.

Reações gerais: pirexia.

interação medicamentosa

O uso simultâneo de acetilcisteína com antitússicos pode aumentar a estagnação do escarro devido à supressão do reflexo da tosse.

Com o uso simultâneo com antibióticos (incluindo ampicilina, anfotericina B), é possível sua interação com o grupo tiol da acetilcisteína.

A administração simultânea de acetilcisteína e nitroglicerina pode causar uma diminuição pronunciada da pressão arterial e dor de cabeça.

Uso simultâneo de acetilcisteína e pode ser acompanhado por uma diminuição na concentração de carbamazepina para um nível subterapêutico.

A acetilcisteína elimina os efeitos tóxicos do paracetamol.

A acetilcisteína pode interferir na determinação colorimétrica de salicilatos.

A acetilcisteína pode interferir nos resultados de um teste de cetona na urina.

Instruções Especiais

Use com cautela nas seguintes doenças e condições: úlcera péptica do estômago e duodeno na história; asma brônquica, insuficiência hepática e/ou renal; intolerância à histamina (o uso prolongado deve ser evitado, pois a acetilcisteína afeta o metabolismo da histamina e pode levar a sinais de intolerância, como dor de cabeça, rinite vasomotora, coceira); esôfago doenças das glândulas supra-renais; hipertensão arterial.

Ao usar acetilcisteína em pacientes com asma brônquica, é necessário garantir a drenagem do escarro.

Entre tomar acetilcisteína e antibióticos, deve ser observado um intervalo de 1-2 horas.

A conformidade com a via de administração e a forma farmacêutica utilizada deve ser rigorosamente observada.

Gravidez e lactação

Se necessário, o uso durante a gravidez deve pesar cuidadosamente o benefício esperado da terapia para a mãe e o possível risco para o feto.

O uso durante a lactação (amamentação) é contra-indicado.

Aplicação na infância

Ao usar acetilcisteína em pacientes com asma brônquica, é necessário garantir a drenagem do escarro. Em recém-nascidos, é usado apenas por motivos de saúde na dose de 10 mg / kg sob estrita supervisão de um médico.

Dentro de crianças com mais de 6 anos - 200 mg 2-3 vezes / dia; crianças de 2 a 6 anos - 200 mg 2 vezes / dia ou 100 mg 3 vezes / dia, até 2 anos - 100 mg 2 vezes / dia.

Para função renal comprometida

Use acetilcisteína com cautela em pacientes com doença renal.

Para função hepática prejudicada

Use acetilcisteína com cautela em pacientes com doença hepática.

4,7 de 5

A acetilcisteína, também conhecida como N-acetilcisteína ou N-acetil-L-cisteína, é um agente mucolítico projetado para aliviar o escarro viscoso e espesso em várias condições respiratórias. A acetilcisteína também é usada como tratamento para condições resultantes de uma overdose de paracetamol. Além disso, a substância Acetilcisteína faz parte do colírio.

A fórmula química da Acetilcisteína é: C5H9NO3S. É um pó cristalino de cor branca ou levemente amarelada, com odor específico e sutil. O pó é altamente solúvel em álcool e água.

A droga é produzida em muitos países, em várias formas de dosagem:

• na forma de solução injetável;
• na forma de um pó para a preparação de uma solução para administração oral;
• na forma de comprimidos efervescentes;
• na forma de soluções para inalação;
• na forma de soluções oculares.

De acordo com a forma de liberação, o uso de Acetilcisteína pode ser intravenoso (injeções), oral (interior), local (inalação, colírio).

Pós para a preparação de soluções orais e comprimidos efervescentes na maioria dos países, incluindo a Rússia, são vendidos em farmácias sem receita médica. As preparações para administração intravenosa e inalação são vendidas estritamente de acordo com as prescrições.

Mecanismo de ação da acetilcisteína

A acetilcisteína (ou N-acetilcisteína), devido à presença de um grupo sulfidrila em sua molécula, cliva ligações dissulfeto que ligam mucoproteínas - proteínas do muco. Sob a influência da droga, o escarro torna-se menos denso e aumenta de volume, é mais fácil expectorar. Como resultado de um aumento no volume de escarro e um aumento na taxa de sua descarga, o efeito de desintoxicação é aprimorado, pois o escarro contém uma quantidade significativa de resíduos tóxicos de patógenos.

O grupo sulfidrila da Acetilcisteína reage com alguns receptores intracelulares, estimulando a produção de glutationa. A glutationa, por sua vez, é capaz de suprimir certas reações de oxidação lipídica que levam ao dano celular. Assim, a acetilcisteína também possui propriedades antioxidantes.

A droga é rapidamente e bem absorvida no intestino. Sua concentração máxima no plasma sanguíneo é observada 2-4 horas após a ingestão. A acetilcisteína é metabolizada principalmente no fígado.

Indicações para o uso de acetilcisteína

As formas orais mais utilizadas de acetilcisteína como agente mucolítico facilitando a expectoração do escarro. De acordo com as instruções, a acetilcisteína é prescrita para as seguintes doenças:

• bronquite aguda e crônica;
• traqueíte de origem bacteriana ou viral;
• pneumonia;
• bronquiectasia;
• atelectasia (queda, perda de ar) do pulmão;
• asma brônquica;
• sinusite;
• fibrose cística (como parte do tratamento complexo).

Conforme indicado nas instruções, a acetilcisteína é contra-indicada em caso de hipersensibilidade de uma pessoa a esta droga, com sangramento pulmonar e hemoptise, com exacerbação da úlcera péptica.

As contra-indicações relativas para tomar acetilcisteína são insuficiência de função e danos graves ao fígado e aos rins.

Para crianças na infância, o medicamento geralmente não é prescrito.

As mulheres grávidas recebem acetilcisteína apenas se o benefício para a mãe supera em muito o risco de patologias do desenvolvimento para o feto. Durante a amamentação, é permitido tomar acetilcisteína.

Como efeitos colaterais, raramente são observados reações alérgicas, náuseas e vômitos, peso no estômago, estomatite e broncoespasmo.

Dosagem do medicamento

As dosagens do medicamento são calculadas pelo médico individualmente. Isso leva em consideração não apenas a gravidade das manifestações clínicas, mas também a idade e o peso corporal do paciente.

No entanto, existe um esquema geral que se parece com isso:

• crianças de 1 a 2 anos recebem o medicamento 100 mg, 1 vez por dia
• pacientes de 2 a 6 anos, de acordo com as instruções, a acetilcisteína é tomada duas vezes ao dia, 200 mg;
• crianças com mais de 6 anos de idade e adultos tomam o medicamento 2-3 vezes ao dia, 200 mg.

Em doenças agudas sem complicações, a duração do tratamento é geralmente de 5 a 7 dias. Em doenças crônicas, o medicamento é tomado por um longo tempo, em cursos. A duração do curso do tratamento é determinada pelo médico.

Uso de acetilcisteína em outras doenças

Em várias doenças, a acetilcisteína ou N-acetilcisteína é amplamente utilizada na forma de injeções intravenosas.. A N-acetilcisteína na forma de soluções para administração intravenosa tem sido usada com sucesso para tratar overdoses de paracetamol. Além disso, a droga é amplamente utilizada em psiquiatria para o tratamento de vários tipos de transtornos mentais, em particular, esquizofrenia, autismo, transtorno bipolar e várias manias. Além disso, a droga é usada no tratamento da dependência de certas drogas e jogo excessivo.

A N-acetilcisteína é eficaz no tratamento de lesões cerebrais traumáticas moderadas e leves, danos cerebrais após acidente vascular cerebral isquêmico. Nesses casos, o medicamento deve ser administrado o mais rápido possível após lesão ou diagnóstico de acidente vascular cerebral.

Interação da acetilcisteína com outras drogas

A acetilcisteína retarda a absorção de muitos antibióticos, portanto, este medicamento não deve ser tomado antes de 2 horas após tomar o antibiótico.

O uso de acetilcisteína reduz o efeito tóxico do paracetamol no fígado.

A acetilcisteína aumenta o efeito dos broncodilatadores. E também - o efeito vasodilatador da nitroglicerina.