drobnoustroje beztlenowe. Bakterie tlenowe i beztlenowe

1. Genetyczne i biochemiczne mechanizmy lekooporności. Sposób na przezwyciężenie lekooporności bakterii.
2. Zrozumienie „infekcji”, „procesu zakaźnego”, „choroby zakaźnej”. Warunki wystąpienia choroby zakaźnej.
1. Racjonalna antybiotykoterapia. Skutki uboczne antybiotyków na organizm ludzki i mikroorganizmy. Powstawanie antybiotykoopornych i antybiotykozależnych form bakterii.
2. Reakcja opadowa i jej odmiany. Mechanizm i metody ustawiania, zastosowanie praktyczne.
1. Metody określania wrażliwości bakterii na antybiotyki. Oznaczanie stężenia antybiotyków w moczu, krwi.
2. Główne komórki układu odpornościowego: t, limfocyty b, makrofagi, subpopulacje komórek t, ich cechy i funkcje.
1. Mechanizmy działania antybiotyków na komórkę drobnoustroju. Działanie bakteriobójcze i bakteriostatyczne antybiotyków. Jednostki miary aktywności przeciwdrobnoustrojowej antybiotyku.
2. Reakcja immunolizy jako jeden z mechanizmów niszczenia drobnoustrojów, składniki reakcji, praktyczne zastosowanie.
3. Czynnik sprawczy kiły, taksonomia, charakterystyka właściwości biologicznych, czynniki chorobotwórczości. Epidemologia i patogeneza. Diagnostyka mikrobiologiczna.
1. Metody hodowli bakteriofagów, ich miareczkowanie (wg Grazia i Appelmana).
2. Współpraca komórkowa między limfocytami t, b i makrofagami w procesie humoralnej i komórkowej odpowiedzi immunologicznej.
1.Oddychanie bakterii. Rodzaje utleniania biologicznego tlenowego i beztlenowego. Aeroby, beztlenowce, fakultatywne beztlenowce, mikroaerofile.
1. Działanie na mikroorganizmy czynników biologicznych. Antagonizm w biocenozach drobnoustrojów, bakteriocyn.
3. Bordetella. Taksonomia, charakterystyka właściwości biologicznych, czynniki patogeniczności. Choroby wywołane przez Bordetella. patogeneza krztuśca. Diagnostyka laboratoryjna, profilaktyka swoista.
1. Pojęcie bakterii. Autotrofy i heterotrofy. Holofityczny sposób żywienia bakterii. Mechanizmy przenoszenia składników odżywczych w komórce bakteryjnej.
2. Struktura antygenowa komórki bakteryjnej. Główne właściwości antygenów drobnoustrojowych to lokalizacja, skład chemiczny i specyficzność antygenów bakterii, toksyn, enzymów.
1. Antybiotyki. Historia odkryć. Klasyfikacja antybiotyków ze względu na metody przygotowania, pochodzenie, budowę chemiczną, mechanizm działania, spektrum działania przeciwdrobnoustrojowego.
3. Wirusy grypy, taksonomia, ogólna charakterystyka, antygeny, rodzaje zmienności. Epidemiologia i patogeneza grypy, diagnostyka laboratoryjna. Specyficzna profilaktyka i terapia grypy.
2. Serologiczna metoda diagnozowania chorób zakaźnych, jej ocena.
3. Escherichia biegunkowe, ich odmiany, czynniki chorobotwórczości, choroby przez nie wywoływane, diagnostyka laboratoryjna.
1. Ogólna charakterystyka grzybów, ich klasyfikacja. rola w patologii człowieka. Zastosowane aspekty badania.
3. Escherichia, ich rola jako normalnego mieszkańca jelita. Sanitarno-indykatywne wartości Escherichia dla wody i gleby. Escherichia jako czynnik etiologiczny chorób ropno-zapalnych u ludzi.
1. Zastosowanie bakteriofagów w mikrobiologii i medycynie do diagnostyki, profilaktyki i leczenia chorób zakaźnych.
2. Toksyny Bakterie: endotoksyny i egzotoksyny. Klasyfikacja egzotoksyn, skład chemiczny, właściwości, mechanizm działania. Różnice między endotoksynami a egzotoksynami.
3. Mykoplazmy, taksonomia, gatunki chorobotwórcze dla człowieka. Charakterystyka ich właściwości biologicznych, czynniki chorobotwórczości. patogeneza i odporność. Diagnostyka laboratoryjna. Profilaktyka i terapia.
1. Diagnostyka laboratoryjna dysbiozy. Leki stosowane w profilaktyce i leczeniu dysbakteriozy.
2. Immunofluorescencja w diagnostyce chorób zakaźnych. Metody bezpośrednie i pośrednie. Wymagane leki.
3. Wirus kleszczowego zapalenia mózgu, taksonomia, ogólna charakterystyka. Epidemiologia i patogeneza, diagnostyka laboratoryjna, swoista profilaktyka kleszczowego zapalenia mózgu.
1. Cechy struktury riketsji, mykoplazm i chlamydii. Metody ich uprawy.
2. Produkty biologiczne stosowane w specyficznym zapobieganiu i leczeniu chorób zakaźnych: szczepionki.
3. Salmonella, taksonomia. Czynnik sprawczy tyfusu i paratyfusu. Epidemiologia patogenezy duru brzusznego. Diagnostyka laboratoryjna. specyficzna profilaktyka.
2. Struktura antygenowa toksyn, wirusów, enzymów: ich lokalizacja, skład chemiczny i specyficzność. Anatoksyny.
3. Wirusy wywołujące ostre choroby układu oddechowego. Paramyksowirusy, ogólna charakterystyka rodziny, wywoływane choroby. Patogeneza odry, specyficzna profilaktyka.
1. Reprodukcja wirusów (reprodukcja dysjunktywna). Główne etapy interakcji wirusa z komórką gospodarza w produktywnym typie infekcji. Cechy reprodukcji wirusów zawierających DNA i RNA.
2. Pojęcie infekcji ran, dróg oddechowych, jelit, krwi i układu moczowo-płciowego. Antroponozy i odzwierzęce. Mechanizmy przenoszenia infekcji.
3. Clostridium tężec, taksonomia, charakterystyka właściwości biologicznych, czynniki chorobotwórczości. Epidemiologia i patogeneza tężca. Diagnostyka laboratoryjna, swoista terapia i profilaktyka.
1. Mikroflora skóry, jama ustna osoby zdrowej. Mikroflora błon śluzowych dróg oddechowych, dróg moczowo-płciowych i oczu. Ich sens w życiu.
2. Infekcje wewnątrzmaciczne. Etiologia, sposoby przenoszenia infekcji na płód. Diagnostyka laboratoryjna, środki zapobiegawcze.
1. Rodzaje interakcji wirusów z komórką: integracyjne i autonomiczne.
2. Układ dopełniacza, klasyczny i alternatywny sposób aktywacji dopełniacza. Metody oznaczania dopełniacza w surowicy krwi.
3. Bakteryjne zatrucie pokarmowe o charakterze gronkowcowym. Patogeneza, cechy diagnostyki laboratoryjnej.
1. Działanie na mikroorganizmy czynników chemicznych. Aseptyka i dezynfekcja. Mechanizm działania różnych grup środków antyseptycznych.
2. Szczepionki żywe zabite, chemiczne, toksoidy, syntetyczne, nowoczesne. Zasady uzyskiwania, mechanizmy wytworzonej odporności. adiuwanty w szczepionkach.
3. Klebsiela, taksonomia, charakterystyka właściwości biologicznych, czynniki chorobotwórczości, rola w patologii człowieka. Diagnostyka laboratoryjna.
1. Dysbakterioza, przyczyny, czynniki jej powstawania. stadia dysbakteriozy. Diagnostyka laboratoryjna, swoista profilaktyka i terapia.
2. Rola neutralizacji toksyn przez toksoid. Praktyczne użycie.
3. Pikornowirusy, klasyfikacja, charakterystyka wirusów poliomyelitis. Epidemiologia i patogeneza, odporność. Diagnostyka laboratoryjna, profilaktyka swoista.
1. Rodzaje zmienności bakterii: modyfikacja i zmienność genotypowa. Mutacje, rodzaje mutacji, mechanizmy mutacji, mutageny.
2. Lokalna odporność przeciwinfekcyjna. Rola przeciwciał wydzielniczych.
3. Zakażenia bakteryjne przenoszone przez żywność wywołane przez Eschirichia, Proteus, Staphylococcus, bakterie beztlenowe. Patogeneza, diagnostyka laboratoryjna.
2. Narządy centralne i obwodowe układu odpornościowego. Cechy wieku układu odpornościowego.
1. Błona cytoplazmatyczna bakterii, jej budowa, funkcje.
2. Niespecyficzne czynniki odporności przeciwwirusowej: inhibitory przeciwwirusowe, interferony (rodzaje, mechanizm działania).
1. Protoplasty, sferoplasty, l-formy bakterii.
2. Komórkowa odpowiedź immunologiczna w obronie przeciwinfekcyjnej. Interakcja między limfocytami T i makrofagami podczas odpowiedzi immunologicznej. Sposoby na wykrycie tego. Alergiczna metoda diagnostyczna.
3. Wirus zapalenia wątroby, taksonomia, charakterystyka właściwości biologicznych. Epidemiologia i patogeneza choroby Botkina. Diagnostyka laboratoryjna. specyficzna profilaktyka.
2. Przeciwciała, główne klasy immunoglobulin, ich cechy strukturalne i funkcjonalne. Ochronna rola przeciwciał w odporności przeciwinfekcyjnej.
3. Wirusy zapalenia wątroby typu C i E, taksonomia, charakterystyka właściwości biologicznych. Epidemiologia i patogeneza, diagnostyka laboratoryjna.
1. Zarodniki, kapsułki, kosmki, wici. Ich budowa, skład chemiczny, funkcje, metody wykrywania.
2. Kompletne i niekompletne przeciwciała, autoprzeciwciała. Pojęcie przeciwciał monoklonalnych, hybrydoma.
1. Morfologia bakterii. Podstawowe formy bakterii. Budowa i skład chemiczny różnych struktur komórki bakteryjnej: nukleotyd, mezosomy, rybosomy, wtrącenia cytoplazmatyczne, ich funkcje.
2. Patogenetyczne cechy infekcji wirusowych. Zakaźne właściwości wirusów. Ostra i uporczywa infekcja wirusowa.
1. Prokarionty i eukarionty, różnice w budowie, składzie chemicznym i funkcji.
3. Togawirusy, ich klasyfikacja. Wirus różyczki, jego charakterystyka, patogeneza choroby u kobiet w ciąży. Diagnostyka laboratoryjna.
1. Plazmidy bakterii, rodzaje plazmidów, ich rola w określaniu cech patogennych i lekooporności bakterii.
2. Dynamika powstawania przeciwciał, pierwotna i wtórna odpowiedź immunologiczna.
3. Grzyby drożdżopodobne Candida, ich właściwości, cechy różnicujące, rodzaje grzybów Candida. rola w patologii człowieka. Warunki sprzyjające występowaniu kandydozy. Diagnostyka laboratoryjna.
1.Podstawowe zasady systematyki mikroorganizmów. Kryteria taksonomiczne: królestwo, podział, rodzina, rodzaj gatunku. Pojęcie szczepu, klonu, populacji.
2. Pojęcie odporności. Klasyfikacja różnych form odporności.
3. Proteus, taksonomia, właściwości proteusa, czynniki patogeniczności. rola w patologii człowieka. Diagnostyka laboratoryjna. Immunoterapia swoista, terapia fagowa.
1. Mikroflora noworodków, jej powstawanie w pierwszym roku życia. Wpływ karmienia piersią i sztucznego na skład mikroflory dziecka.
2. Interferony jako czynniki odporności przeciwwirusowej. Rodzaje interferonów, metody otrzymywania interferonów i praktyczne zastosowanie.
3. Streptococcus pneumoniae (pneumokoki), taksonomia, właściwości biologiczne, czynniki patogeniczności, rola w patologii człowieka. Diagnostyka laboratoryjna.
1. Cechy budowy promieniowców, krętków. Metody ich wykrywania.
2. Cechy odporności przeciwwirusowej. Odporność wrodzona i nabyta. Komórkowe i humoralne mechanizmy odporności wrodzonej i nabytej.
3. Enterobakterie, klasyfikacja, ogólna charakterystyka właściwości biologicznych. Struktura antygenowa, ekologia.
1. Metody hodowli wirusów: w hodowlach komórkowych, zarodkach kurzych, na zwierzętach. Ich ocena.
2. Reakcja aglutynacyjna w diagnostyce infekcji. Mechanizmy, wartość diagnostyczna. Surowice aglutynacyjne (złożone i monoreceptorowe), diagnostyka. Reakcje obciążenia układu odpornościowego.
3. Campylobacter, taksonomia, ogólna charakterystyka, choroby wywołane, ich patogeneza, epidemiologia, diagnostyka laboratoryjna, profilaktyka.
1. Bakteriologiczna metoda diagnozowania chorób zakaźnych, etapy.
3. Onkogenne wirusy DNA. Ogólna charakterystyka. Teoria wirogenetyczna pochodzenia guza L.A. Zilber. Współczesna teoria kancerogenezy.
1. Podstawowe zasady i metody hodowli bakterii. Pożywki i ich klasyfikacja. Kolonie w różnych typach bakterii, właściwości kulturowe.
2. Test immunoenzymatyczny. Składniki reakcji, warianty jej zastosowania w diagnostyce laboratoryjnej chorób zakaźnych.
3. Wirusy HIV. Historia odkryć. Ogólna charakterystyka wirusów. Epidemiologia i patogeneza choroby, klinika. Metody diagnostyki laboratoryjnej. Problemem jest specyficzna profilaktyka.
1. Organizacja materiału genetycznego komórki bakteryjnej: chromosom bakteryjny, plazmidy, transpozony. Genotyp i fenotyp bakterii.
2. Reakcja neutralizacji wirusa. Opcje neutralizacji wirusów, zakres.
3. Yersinia, taksonomia. Charakterystyka patogenu dżumy, czynniki chorobotwórczości. Epidemiologia i patogeneza dżumy. Metody diagnostyki laboratoryjnej, swoista profilaktyka i terapia.
1. Wzrost i reprodukcja bakterii. Fazy reprodukcji populacji bakterii w pożywce płynnej w warunkach stacjonarnych.
2. Seroterapia i seroprofilaktyka. Charakterystyka surowic anatotoksycznych i przeciwdrobnoustrojowych, immunoglobuliny. Ich przygotowanie i miareczkowanie.
3. Rotawirusy, klasyfikacja, ogólna charakterystyka rodziny. Rola rotawirusów w patologii jelitowej dorosłych i dzieci. Patogeneza, diagnostyka laboratoryjna.
2. Reakcja fiksacji dopełniacza w diagnostyce chorób zakaźnych. Składniki reakcji, praktyczne zastosowanie.
3. Wirusy zapalenia wątroby typu b i d, wirusy delta, taksonomia. Ogólna charakterystyka wirusów. Epidemiologia i patogeneza WZW typu B itp. Diagnostyka laboratoryjna, profilaktyka swoista.
1. Rekombinacje genetyczne: transformacja, transdukcja, koniugacja. Rodzajów i mechanizmu.
2. Sposoby przenikania drobnoustrojów do organizmu. Krytyczne dawki drobnoustrojów wywołujących chorobę zakaźną. Brama wejściowa infekcji. Sposoby dystrybucji drobnoustrojów i toksyn w organizmie.
3. Wirus wścieklizny. Taksonomia, ogólna charakterystyka. Epidemiologia i patogeneza wirusa wścieklizny.
1. Mikroflora ludzkiego ciała. Jego rola w normalnych procesach fizjologicznych i patologii. Mikroflora jelitowa.
2. Wskazanie antygenów drobnoustrojów w materiale patologicznym za pomocą reakcji immunologicznych.
3. Pikornawirusy, taksonomia, ogólna charakterystyka rodziny. Choroby wywoływane przez wirusy Coxsackie i Echo. Diagnostyka laboratoryjna.
1. Mikroflora powietrza atmosferycznego, pomieszczeń mieszkalnych i szpitali. Mikroorganizmy powietrza o charakterze sanitarno-indykatywnym. Drogi wnikania i przetrwania drobnoustrojów w powietrzu.
2. Komórkowe nieswoiste czynniki ochronne: brak reaktywności komórek i tkanek, fagocytoza, naturalni zabójcy.
3. Yersinia pseudotuberculosis i enterocolitis, taksonomia, charakterystyka właściwości biologicznych, czynniki patogeniczności. Epidemiologia i patogeneza pseudotuby
1. Wirusy: morfologia i budowa wirusów, ich skład chemiczny. Zasady klasyfikacji wirusów, znaczenie w patologii człowieka.
3. Leptospira, taksonomia, charakterystyka właściwości biologicznych, czynniki patogeniczności. Patogeneza leptospirozy. Diagnostyka laboratoryjna.
1. Umiarkowane bakteriofagi, ich interakcja z komórką bakteryjną. Zjawisko lizogenii, konwersja fagów, znaczenie tych zjawisk.

1.Oddychanie bakterii. Rodzaje utleniania biologicznego tlenowego i beztlenowego. Aeroby, beztlenowce, fakultatywne beztlenowce, mikroaerofile.

W zależności od rodzajów oddychania dzielą się na kilka grup

1) tlenowce, dla których potrzebny jest tlen cząsteczkowy

2) bezwzględne tlenowce nie są zdolne do wzrostu bez tlenu, ponieważ wykorzystują go jako akceptor elektronów.

3) mikroaerofile - zdolne do wzrostu w obecności małego stężenia O2 (do 2%) 4) beztlenowce nie potrzebują wolnego tlenu, niezbędne E są uzyskiwane przez rozszczepienie in-in, zawierające dużą podaż utajonego mi

5) beztlenowce obligatoryjne – nie tolerują nawet niewielkiej ilości tlenu (klostridium)

6) beztlenowce fakultatywne - przystosowały się do życia zarówno w warunkach tlenowych, jak i beztlenowych. Proces oddychania u drobnoustrojów to fosforylacja lub fermentacja substratu: glikoliza, szlak fosfoglikonianowy i szlak ketodeoksyfosfoglikonianowy. Rodzaje fermentacji: kwas mlekowy (bifidobakterie), kwas mrówkowy (enterobakterie), kwas masłowy (clostridia), kwas propionowy (propionobakterie),

2. Antygeny, definicja, warunki antygenowości. Determinanty antygenowe, ich budowa. Specyficzność immunochemiczna antygenów: gatunek, grupa, typ, narząd, heterospecyficzny. Kompletne antygeny, hapteny, ich właściwości.

Antygeny są związkami o dużej masie cząsteczkowej.

Po spożyciu wywołują reakcję immunologiczną i wchodzą w interakcję z produktami tej reakcji.

Kasyfikacja antygenów. 1. Według pochodzenia:

naturalne (białka, węglowodany, kwasy nukleinowe, bakteryjne egzo- i endotoksyny, antygeny tkanek i krwinek);

sztuczne (dinitrofenylowe białka i węglowodany);

syntetyczny (syntetyzowane poliaminokwasy).

2. Ze względu na charakter chemiczny:

białka (hormony, enzymy itp.);

węglowodany (dekstran);

kwasy nukleinowe (DNA, RNA);

sprzężone antygeny;

polipeptydy (polimery α-aminokwasów);

lipidy (cholesterol, lecytyna).

3. Według relacji genetycznej:

autoantygeny (z tkanek własnego ciała);

izoantygeny (od genetycznie identycznego dawcy);

alloantygeny od niespokrewnionego dawcy tego samego gatunku)

4. Ze względu na charakter odpowiedzi immunologicznej:

1) ksenoantygeny (od dawcy innego gatunku). antygeny zależne od grasicy;

2) antygeny niezależne od grasicy.

Istnieje również:

antygeny zewnętrzne (wchodzą do organizmu z zewnątrz);

antygeny wewnętrzne; powstają z uszkodzonych cząsteczek ciała, które są rozpoznawane jako obce

ukryte antygeny - specyficzne antygeny

(np. tkanka nerwowa, białka soczewki i plemniki); anatomicznie oddzielone od układu odpornościowego przez bariery histohematyczne podczas embriogenezy.

Hapteny to substancje o niskiej masie cząsteczkowej, które w normalnych warunkach nie wywołują odpowiedzi immunologicznej, ale po związaniu z cząsteczkami o wysokiej masie cząsteczkowej stają się immunogenne.

Antygeny zakaźne to antygeny bakterii, wirusów, grzybów, proteów.

Odmiany antygenów bakteryjnych:

specyficzne dla grupy;

specyficzne dla gatunku;

specyficzne dla typu.

Zgodnie z lokalizacją w komórce bakteryjnej rozróżniają:

O - AG - polisacharyd (część ściany komórkowej bakterii);

lipidA - heterodimer; zawiera glukozaminę i kwasy tłuszczowe;

H - AG; jest częścią wici bakteryjnej;

K - AG - heterogeniczna grupa powierzchniowych, otoczkowych antygenów bakterii;

toksyny, nukleoproteiny, rybosomy i enzymy bakteryjne.

3. Paciorkowce, taksonomia, klasyfikacja według Lanefielda. Charakterystyka właściwości biologicznych, czynniki patogeniczności paciorkowców. Rola paciorkowców grupy A w patologii człowieka. Cechy odporności. Diagnostyka laboratoryjna infekcji paciorkowcami.

Paciorkowce rodzinne

Rodzaj Streptococcus

Według Lesfielda (klasa opiera się na różnych typach hemolizy): grupa A (Str. Pyogenes) grupa B (Str. Agalactiae-infekcje poporodowe i moczowo-płciowe, zapalenie sutka, zapalenie pochwy, posocznica i zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych u noworodków), grupa C (Str. Equisimilis), grupa D (Enterococcus, Str. Fecalis). Gr.A - ostry proces zakaźny ze składnikiem alergicznym (szkarlatyna, róża, zapalenie mięśnia sercowego), grB - główny patogen u zwierząt, powoduje posocznicę u dzieci. GrS-har-n in-hemoliza (powodująca patologię układu naprawczego) GrD-obv. wszystkie rodzaje hemolizy, będąc normalnym mieszkańcem ludzkiego jelita. Są to kuliste komórki ułożone parami gr+, chemoorganotrofy, wymagające odżywiania. Środy, razm-Xia na krwi lub sah. agarze, na podłożu stałym tworzą się małe kolonie, na podłożu płynnym wzrost przydenny, pozostawiając podłoże przezroczyste. Za pomocą wzrost har-ru na agarze z krwią: hemoliza alfa (niewielki obszar hemolizy o zielono-szarej barwie), beta-hem (przezroczysty), niehemol. Aeroby nie tworzą katalazy.

Koszulka F-ry 1) klasa ściana - niektóre mają kapsułę.

2) f-r adhezja-teihoy do ciebie

3) białko M-ochronne, zapobiega fagocytozie

4) szereg toksyn: erytrogenna-szkarlatyna, O-streptolizyna = hemolizyna, leukocydyna 5) cytotoksyny.

Diagnozuj: 1) b / l: ropa, śluz z gardła - siew na dachu. agar (obecność / brak strefy hemolizy), identyfikacja przez Ag sv-you 2)b / s - rozmazy zgodnie z Gram 3) s / l - szukaj Ab do O-streptolizyny w precyzji RSK lub r-ii

Leczenie:β-laktam a/b. Gr.A powodując ropne zapalenie, stan zapalny, któremu towarzyszy obfite tworzenie ropne, posocznica.

Beztlenowce(grecki ujemny prefiks an- + aē r powietrze + b życie) - mikroorganizmy, które rozwijają się przy braku wolnego tlenu w swoim środowisku. Występują w prawie wszystkich próbkach materiału patologicznego w różnych chorobach ropno-zapalnych, są warunkowo patogenne, czasem patogenne. Rozróżnij fakultatywne i obligatoryjne A. Fakultatywne A. potrafią istnieć i rozmnażać się zarówno w środowisku tlenowym, jak i beztlenowym. Należą do nich E. coli, Yersinia i Streptococcus, Shigella i inne bakteria.

Obowiązek A. umiera w obecności wolnego tlenu w środowisku. Dzieli się je na dwie grupy: bakterie, które tworzą zarodniki, czyli Clostridia, oraz bakterie, które nie tworzą zarodników, czyli tak zwane beztlenowce niebędące Clostridium. Wśród Clostridia wyróżnia się patogeny beztlenowych infekcji Clostridium - a, zakażenie rany Clostridium, a. A. inne niż Clostridium obejmują bakterie Gram-ujemne i Gram-dodatnie w kształcie pałeczek lub kulistych: bakteroidy, fusobakterie, veillonella, peptokoki, peptostreptokoki, propionibakterie, eubakterie itp. ludzie i zwierzęta, ale jednocześnie odgrywają dużą rolę w rozwoju takich procesów ropno-zapalnych, jak zapalenie otrzewnej, płuca i mózg, opłucna, ropowica okolicy szczękowo-twarzowej itp. Większość infekcje beztlenowe, wywołane przez beztlenowce inne niż Clostridium, odnosi się do endogennych i rozwija się głównie wraz ze spadkiem odporności organizmu w wyniku urazu, operacji, ochłodzenia, upośledzenia odporności.

Główną część klinicznie istotnych A. stanowią bakterioidy i fusobakterie, peptostreptococci i zarodnikowe pałeczki Gram-dodatnie. Bakterie stanowią około połowy procesów ropno-zapalnych wywoływanych przez bakterie beztlenowe.

Bacteroides (Bacteroides) - rodzaj Gram-ujemnych bezwzględnych bakterii beztlenowych z rodziny Bacteroidaceae, pałeczki z dwubiegunowym barwieniem, wielkość 0,5-1,5´ 1-15 mikron, nieruchome lub poruszające się za pomocą wici okostnej, często mają otoczkę polisacharydową, która jest czynnikiem wirulencji. Wytwarzają różne toksyny i enzymy, które działają jako czynniki zjadliwości. Są niejednorodne pod względem wrażliwości na antybiotyki: bakterioidy, na przykład grupa B. fragilis, są oporne na penicylinę benzylową. Bakterie oporne na antybiotyki β-laktamowe wytwarzają β-laktamazy (penicylinazy i cefalosporynazy), które niszczą penicylinę i cefalosporyny. Bakteroidy są wrażliwe na niektóre pochodne imidazolu – metronidazol (trichopolum,

flagil), tynidazol, ornidazol - leki skuteczne przeciwko różnym grupom bakterii beztlenowych, a także chloramfenikolowi i erytromycynie. Bakteroidy są oporne na aminoglikozydy - gentamycynę, kanamycynę, streptomycynę, polimyksynę, oleandomycynę. Znaczna część bakterioidów jest odporna na tetracykliny.

Fusobacteria (Fusobacterium) - rodzaj Gram-ujemnych bezwzględnych bakterii beztlenowych w kształcie pałeczki; żyją na błonie śluzowej jamy ustnej i jelit, są nieruchome lub ruchliwe, zawierają silną endotoksynę. Najczęściej w materiale patologicznym stwierdza się F. nucleatum i F. necrophorum. Większość fusobakterii jest wrażliwa na antybiotyki β-laktamowe, ale istnieją szczepy oporne na penicylinę. Fusobacteria, z wyjątkiem F. varium, są wrażliwe na klindamycynę.

Peptostreptococcus (Peptostreptococcus) to rodzaj kulistych bakterii Gram-dodatnich; ułożone w pary, tetrady, w postaci nieregularnych skupisk lub łańcuchów. Nie mają wici, nie tworzą zarodników. Wrażliwy na penicylinę, karbenicylinę, cefalosporyny, chloramfenikol, oporny na metronidazol.

Peptococcus (Peptococcus) to rodzaj gram-dodatnich bakterii kulistych, reprezentowany przez pojedynczy gatunek P. niger. Występują pojedynczo, parami, czasem w skupiskach. Nie tworzą się wici i zarodniki.

Wrażliwe na penicylinę, karbenicylinę, erytromycynę, klindamycynę, chloramfenikol. Stosunkowo odporny na metronidazol.

Veillonella - rodzaj gram-ujemnych diplokoków beztlenowych; ułożone w krótkie łańcuchy, nieruchome, nie tworzą zarodników. Wrażliwy na penicylinę, chloramfenikol, tetracyklinę, polimyksynę, erytromycynę, oporny na streptomycynę, neomycynę, wankomycynę.

Spośród innych bakterii beztlenowych innych niż Clostridium izolowanych z materiału patologicznego pacjentów należy wymienić Gram-dodatnie bakterie propionowe, Gram-ujemne volinella i inne, których znaczenie jest mniej zbadane.

Clostridium to rodzaj bakterii beztlenowych Gram-dodatnich, w kształcie pałeczki, tworzących przetrwalniki. Clostridia są szeroko rozpowszechnione w przyrodzie, zwłaszcza w glebie, żyją również w przewodzie pokarmowym ludzi i zwierząt. Około dziesięć gatunków Clostridia jest patogennych dla ludzi i zwierząt: C. perfringens, C. novyii, C. septicum, C. ramosum, C. botulirnim, C. tetani, C. difficile itd. Bakterie te tworzą egzotoksyny specyficzne dla każdego gatunku o wysokiej aktywności biologicznej, na którą wrażliwi są ludzie i wiele gatunków zwierząt. C. difficile to bakterie ruchliwe z wiciami okostnymi. Według wielu badaczy bakterie te, po nieracjonalnym leczeniu przeciwdrobnoustrojowym, namnażają się, mogą powodować rzekomobłoniaste. C. difficile są wrażliwe na penicylinę, ampicylinę, wankomycynę, ryfampicynę,

metronidazol; odporny na aminoglikozydy.

Czynnikiem wywołującym infekcję beztlenową może być dowolny rodzaj bakterii, ale częściej infekcje te są powodowane przez różne związki drobnoustrojów: beztlenowo-beztlenowe (bakteroidy i fusobakterie); beztlenowo-tlenowe (bakteroidy i

Bakterie są obecne na całym świecie. Są wszędzie i wszędzie, a ilość ich odmian jest po prostu niesamowita.

W zależności od potrzeby obecności tlenu w pożywce w celu realizacji czynności życiowych mikroorganizmy dzieli się na następujące typy.

Obowiązkowe bakterie tlenowe, które gromadzą się w górnej części pożywki, flora zawierała maksymalną ilość tlenu.
Obowiązkowe bakterie beztlenowe, które znajdują się w dolnej części środowiska, jak najdalej od tlenu.
Bakterie fakultatywne żyją głównie w górnej części, ale mogą być rozprzestrzenione w całym środowisku, ponieważ nie są zależne od tlenu.
Mikroaerofile preferują niskie stężenie tlenu, chociaż gromadzą się w górnej części środowiska.
Beztlenowce tolerujące powietrze są równomiernie rozmieszczone w pożywce, niewrażliwe na obecność lub brak tlenu.

Pojęcie bakterii beztlenowych i ich klasyfikacja

Termin „beztlenowce” pojawił się w 1861 roku dzięki pracy Ludwika Pasteura.

Bakterie beztlenowe to mikroorganizmy, które rozwijają się niezależnie od obecności tlenu w pożywce. Dostają energię przez fosforylację substratu. Istnieją aeroby fakultatywne i obowiązkowe, a także inne.

Najważniejszymi beztlenowcami są bakterioidy

Najważniejszymi aerobami są bakterioidy. O pięćdziesiąt procent wszystkich procesów ropno-zapalnych, których przyczyną mogą być bakterie beztlenowe, to bakterioidy.

Bacteroides to rodzaj Gram-ujemnych bezwzględnie beztlenowych bakterii. Są to pręty o bipolarnym zabarwieniu, których wielkość nie przekracza 0,5-1,5 na 15 mikronów. Wytwarzają toksyny i enzymy, które mogą powodować zjadliwość. Różne bakterioidy mają różną odporność na antybiotyki: są zarówno oporne, jak i podatne na antybiotyki.

Produkcja energii w tkankach ludzkich

Niektóre tkanki organizmów żywych mają zwiększoną odporność na niską zawartość tlenu. W standardowych warunkach synteza adenozynotrójfosforanu zachodzi w warunkach tlenowych, jednak przy wzmożonym wysiłku fizycznym i reakcjach zapalnych na pierwszy plan wysuwa się mechanizm beztlenowy.

Trójfosforan adenozyny (ATP) Jest kwasem, który odgrywa ważną rolę w produkcji energii przez organizm. Istnieje kilka opcji syntezy tej substancji: jedna tlenowa i aż trzy beztlenowe.

Beztlenowe mechanizmy syntezy ATP obejmują:

refosforylacja między fosforanem kreatyny i ADP;
reakcja transfosforylacji dwóch cząsteczek ADP;
beztlenowy rozkład zapasów glukozy lub glikogenu we krwi.

Hodowla organizmów beztlenowych

Istnieją specjalne metody uprawy beztlenowców. Polegają na zastąpieniu powietrza mieszankami gazowymi w szczelnych termostatach.

Innym sposobem jest hodowla mikroorganizmów w pożywce, do której dodawane są substancje redukujące.

Pożywki dla organizmów beztlenowych

Istnieją wspólne pożywki i pożywki do diagnostyki różnicowej. Popularne to pożywka Wilsona-Blaira i pożywka Kitt-Tarozzi. Do diagnostyki różnicowej - pożywka Hiss, pożywka Ressel, pożywka Endo, pożywka Ploskirev i agar bizmuto-siarczynowy.

Podstawą podłoża Wilsona-Blaira jest agar-agar z dodatkiem glukozy, siarczynu sodu i dichlorku żelaza. Czarne kolonie beztlenowców powstają głównie w głębi kolumny agarowej.

Pożywka Ressela (Russella) jest wykorzystywana do badania właściwości biochemicznych bakterii takich jak Shigella i Salmonella. Zawiera również agar-agar i glukozę.

Środa Płoskirew hamuje rozwój wielu drobnoustrojów, dlatego jest wykorzystywany do celów diagnostyki różnicowej. W takim środowisku dobrze rozwijają się patogeny duru brzusznego, czerwonki i innych bakterii chorobotwórczych.

Głównym celem agaru bizmutosiarczynowego jest izolacja salmonelli w czystej postaci. To środowisko opiera się na zdolności Salmonelli do wytwarzania siarkowodoru. Ta pożywka jest podobna do pożywki Wilsona-Blair w stosowanej technice.

Infekcje beztlenowe

Większość bakterii beztlenowych żyjących w ciele ludzkim lub zwierzęcym może powodować różne infekcje. Z reguły infekcja występuje w okresie osłabionej odporności lub naruszenia ogólnej mikroflory organizmu. Istnieje również możliwość zakażenia patogenami ze środowiska zewnętrznego, zwłaszcza późną jesienią i zimą.

Zakażenia wywołane przez bakterie beztlenowe są zwykle związane z florą błon śluzowych człowieka, czyli z głównymi siedliskami beztlenowców. Zazwyczaj te infekcje wiele wyzwalaczy jednocześnie(do 10).

Dokładna liczba chorób wywołanych przez beztlenowce jest prawie niemożliwa do ustalenia ze względu na trudności w pobieraniu materiałów do analizy, transporcie próbek i hodowli samych bakterii. Najczęściej ten typ bakterii występuje w chorobach przewlekłych.

Infekcje beztlenowe dotykają ludzi w każdym wieku. Jednocześnie poziom chorób zakaźnych u dzieci jest wyższy.

Bakterie beztlenowe mogą powodować różne choroby wewnątrzczaszkowe (zapalenie opon mózgowych, ropnie i inne). Dystrybucja z reguły odbywa się wraz z krwią. W chorobach przewlekłych beztlenowce mogą powodować patologie głowy i szyi: zapalenie ucha środkowego, zapalenie węzłów chłonnych, ropnie. Bakterie te są niebezpieczne zarówno dla przewodu pokarmowego, jak i płuc. Przy różnych chorobach żeńskiego układu moczowo-płciowego istnieje również ryzyko rozwoju infekcji beztlenowych. Różne choroby stawów i skóry mogą być wynikiem rozwoju bakterii beztlenowych.

Przyczyny infekcji beztlenowych i ich objawy

Zakażenia są powodowane przez wszystkie procesy, podczas których do tkanek dostają się aktywne bakterie beztlenowe. Ponadto rozwój infekcji może powodować upośledzenie ukrwienia i martwicę tkanek (różne urazy, guzy, obrzęki, choroby naczyniowe). Infekcje jamy ustnej, ukąszenia zwierząt, choroby płuc, choroby zapalne miednicy i wiele innych chorób mogą być również spowodowane przez beztlenowce.

W różnych organizmach infekcja rozwija się na różne sposoby. Wpływa na to rodzaj patogenu i stan zdrowia człowieka. Ze względu na trudności związane z diagnozowaniem infekcji beztlenowych wnioski często opierają się na założeniach. Różnią się niektórymi cechami infekcji spowodowanej przez beztlenowce inne niż Clostridium.

Pierwsze oznaki infekcji tkanek tlenem to ropienie, zakrzepowe zapalenie żył, tworzenie się gazu. Niektórym nowotworom i nowotworom (jelitowym, macicy i innych) towarzyszy również rozwój mikroorganizmów beztlenowych. Przy infekcjach beztlenowych może pojawić się nieprzyjemny zapach, jednak jego brak nie wyklucza beztlenowców jako czynnika wywołującego infekcję.

Cechy pozyskiwania i transportu próbek

Pierwszym badaniem określającym infekcje wywołane przez beztlenowce jest oględziny. Częstym powikłaniem są różne zmiany skórne. Dowodem na żywotną aktywność bakterii będzie również obecność gazu w zakażonych tkankach.

Do badań laboratoryjnych i ustalenia dokładnej diagnozy konieczne jest przede wszystkim kompetentne pobierz próbkę materii z dotkniętego obszaru. W tym celu stosuje się specjalną technikę, dzięki której normalna flora nie dostaje się do próbek. Najlepszą metodą jest aspiracja prostą igłą. Pozyskiwanie materiału laboratoryjnego przez rozmazy nie jest zalecane, ale możliwe.

Próbki nienadające się do dalszej analizy obejmują:

plwocina uzyskana przez samo wydalenie;
próbki uzyskane podczas bronchoskopii;
rozmazy ze sklepień pochwy;
mocz z bezpłatnym oddawaniem moczu;
kał.

Do badań można wykorzystać:

krew;
płyn opłucnowy;
aspiraty przeztchawicze;
ropa uzyskana z jamy ropnia;
płyn mózgowo-rdzeniowy;
nakłucia płuc.

Próbki transportowe jest to konieczne jak najszybciej w specjalnym pojemniku lub plastikowej torbie w warunkach beztlenowych, ponieważ nawet krótkotrwała interakcja z tlenem może spowodować śmierć bakterii. Próbki płynne są transportowane w probówce lub w strzykawkach. Wymazy z próbkami są transportowane w probówkach z dwutlenkiem węgla lub wstępnie przygotowanym podłożem.

Leczenie infekcji beztlenowych

W przypadku rozpoznania infekcji beztlenowej w celu odpowiedniego leczenia konieczne jest przestrzeganie następujących zasad:

toksyny wytwarzane przez beztlenowce muszą zostać zneutralizowane;
należy zmienić siedlisko bakterii;
rozprzestrzenianie się beztlenowców musi być zlokalizowane.

Aby przestrzegać tych zasad w leczeniu stosuje się antybiotyki, które wpływają zarówno na organizmy beztlenowe, jak i na organizmy tlenowe, ponieważ często flora w infekcjach beztlenowych jest mieszana. Jednocześnie, przepisując leki, lekarz musi ocenić skład jakościowy i ilościowy mikroflory. Do środków działających na patogeny beztlenowe należą: penicyliny, cefalosporyny, chamfenikol, fluorochinolo, metranidazol, karbapenemy i inne. Niektóre leki mają ograniczony efekt.

Aby kontrolować siedlisko bakterii, w większości przypadków stosuje się interwencję chirurgiczną, która wyraża się w leczeniu dotkniętych tkanek, drenażu ropni i zapewnieniu prawidłowego krążenia krwi. Metody chirurgiczne nie powinny być ignorowane ze względu na ryzyko powikłań zagrażających życiu.

Czasami używany terapie pomocnicze, a także ze względu na trudności związane z dokładnym określeniem czynnika sprawczego infekcji stosuje się leczenie empiryczne.

Wraz z rozwojem infekcji beztlenowych w jamie ustnej zaleca się również włączenie do diety jak największej ilości świeżych owoców i warzyw. Najbardziej przydatne są jabłka i pomarańcze. Ograniczeniu podlega żywność mięsna i fast food.

infekcja beztlenowa

Etiologia, patogeneza, antybiotykoterapia.

Przedmowa ................................................. ................................................... .. jeden

Wprowadzenie ............................................... . .............................................. 2

1.1 Definicja i charakterystyka ............................................. ............ .... 2

1.2 Skład mikroflory głównych biotopów człowieka .......... 5

2. Czynniki patogeniczności mikroorganizmów beztlenowych .......... 6

2.1. Rola beztlenowej mikroflory endogennej w patologii

osoba ................................................. .................................................… ……. osiem

3. Główne formy infekcji beztlenowych .................................................................. 10

3.1. Zakażenie opłucnej ................................................ .............. ......….. dziesięć

3.2. Zakażenie stopy cukrzycowej ............................................. .............................. . dziesięć

3.3. Bakteriemia i posocznica ............................................. ............... ................. jedenaście

3.4. Tężec................................................. .................................... jedenaście

3.5. Biegunka................................................. ................................... 12

3.6. Infekcja chirurgiczna ran i tkanek miękkich .............................. 12

3.7. Infekcja tkanek miękkich wytwarzająca gaz ........................................... ... 12

3.8. Martwica mięśni Clostridium ................................................ .............................. ... 12

3.9. Powoli rozwijająca się martwicza infekcja rany…13

3.10. Zakażenie śródotrzewnowe ...............................................… ………….. 13

3.11. Charakterystyka doświadczalnych ropni beztlenowych ..... 13

3.12. Rzekomobłoniaste zapalenie okrężnicy............................................. .................... ..........czternaście

3.13. Infekcja położnicza i ginekologiczna ............................................. .........14

3.14. Infekcja beztlenowa u chorych na nowotwory…………………..15

4. Diagnostyka laboratoryjna............................................. ..................piętnaście

4.1. Materiał badawczy ................................................ ...................................... piętnaście

4.2. Etapy badań materiałowych w laboratorium ................................................ ....16

4.3. Bezpośrednie badanie materiału ............................................. ......................16

4.4. Metody i systemy do tworzenia warunków beztlenowych ..................................16

4.5. Pożywki i uprawa ............................................. 17

5. Antybiotykoterapia w przypadku infekcji beztlenowych ........................................... ...21

5.1. Charakterystyka głównych leków przeciwdrobnoustrojowych,

stosowany w leczeniu infekcji beztlenowych ...........................................21

5.2. Połączenie leków beta-laktamowych i inhibitorów

beta-laktamazy ............................................. ............... .................................. ..24

5.3. Znaczenie kliniczne testów wrażliwości beztlenowej

drobnoustroje do leków przeciwdrobnoustrojowych ......................................24

6. Korekta mikroflory jelitowej ............................................................26

Wniosek................................................. ...................................................27
Autorzy……………………………………………………………….27

Przedmowa

Ostatnie lata charakteryzowały się przyspieszonym rozwojem wielu dziedzin mikrobiologii ogólnej i klinicznej, co prawdopodobnie wynika zarówno z naszego bardziej adekwatnego zrozumienia roli drobnoustrojów w rozwoju chorób, jak i konieczności ciągłego wykorzystywania przez lekarzy informacji o etiologii. chorób, właściwości patogenów w celu skutecznego leczenia pacjentów i uzyskania zadowalających wyników chemioterapii lub chemioprofilaktyki. Jednym z tak szybko rozwijających się obszarów mikrobiologii jest kliniczna bakteriologia beztlenowa. W wielu krajach świata tej części mikrobiologii poświęca się dużo uwagi. Sekcje poświęcone beztlenowcom i infekcjom beztlenowym znajdują się w programach szkoleniowych dla lekarzy różnych specjalności. Niestety w naszym kraju tej części mikrobiologii, zarówno pod względem szkolenia specjalistów, jak i diagnostycznego aspektu pracy laboratoriów bakteriologicznych, poświęcono zbyt mało uwagi. Podręcznik metodologiczny „Zakażenie beztlenowe” obejmuje główne sekcje tego problemu - definicję i klasyfikację, charakterystykę mikroorganizmów beztlenowych, główne biotopy beztlenowców w organizmie, charakterystykę postaci infekcji beztlenowych, kierunki i metody laboratoryjne diagnostyka, a także kompleks antybakteryjny -rapia (środki przeciwdrobnoustrojowe, oporność/podatność drobnoustrojów, metody jej oznaczania i przezwyciężania). Oczywiście celem podręcznika nie jest udzielanie szczegółowych odpowiedzi na wszystkie aspekty infekcji beztlenowych. Nie ulega wątpliwości, że mikrobiolodzy chcący pracować w dziedzinie bakteriologii beztlenowej muszą przejść specjalny cykl szkoleniowy, pełniejsze opanowanie zagadnień z zakresu mikrobiologii, sprzętu laboratoryjnego, metod oznaczania, hodowli i identyfikacji beztlenowców. Ponadto dobre doświadczenie zdobywa się uczestnicząc w specjalnych seminariach i sympozjach dotyczących infekcji beztlenowych na poziomie krajowym i międzynarodowym. Niniejsze zalecenia metodyczne skierowane są do bakteriologów, lekarzy różnych specjalności (chirurgów, terapeutów, endokrynologów, położników-ginekologów, pediatrów), studentów kierunków medycznych i biologicznych, nauczycieli uczelni medycznych i uczelni medycznych.

Wstęp

Pierwsze pomysły na temat roli mikroorganizmów beztlenowych w patologii człowieka pojawiły się wiele wieków temu. Już w IV wieku pne Hipokrates szczegółowo opisał klinikę tężca, a w IV wieku naszej ery Ksenofont opisał przypadki ostrego martwiczego, wrzodziejącego zapalenia dziąseł u greckich żołnierzy. Obraz kliniczny promienicy opisał Langenbeck w 1845 roku. Jednak w tym czasie nie było jasne, jakie mikroorganizmy powodują te choroby, jakie są ich właściwości, podobnie jak pojęcie beztlenowca było nieobecne do 1861 roku, kiedy Ludwik Pasteur opublikował klasyczną pracę na temat badania Vibrio. butyrygue i nazwał organizmy żyjące bez powietrza „beztlenowcami” (17). Następnie Louis Pasteur (1877) wyizolował i wyhodował Clostridium septicum , i Izrael w 1878 opisał promieniowce. Czynnikiem sprawczym tężca jest Clostridium tetani - zidentyfikowany w 1883 r. przez N.D. Monastyrsky'ego, a w 1884 r. przez A. Nikolayera. Pierwsze badania pacjentów z kliniczną infekcją beztlenową przeprowadził Levy w 1891 roku. Rolę beztlenowców w rozwoju różnych patologii medycznych po raz pierwszy opisał i argumentował Veiloon. i Zuber w latach 1893-1898. Opisali różne rodzaje ciężkich zakażeń wywołanych przez mikroorganizmy beztlenowe (zgorzelina płuc, zapalenie wyrostka robaczkowego, ropnie płuca, mózgu, miednicy, zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych, zapalenie wyrostka sutkowatego, przewlekłe zapalenie ucha środkowego, bakteriemia, przymacicze, bartholinitis, ropne zapalenie stawów). Ponadto opracowali wiele metodologicznych podejść do izolacji i hodowli beztlenowców (14). W ten sposób na początku XX wieku poznano wiele drobnoustrojów beztlenowych, powstała idea ich znaczenia klinicznego i stworzono odpowiednią technikę hodowli i izolacji drobnoustrojów beztlenowych. Od lat 60. do chwili obecnej pilność problemu infekcji beztlenowych stale rośnie. Wynika to zarówno z etiologicznej roli drobnoustrojów beztlenowych w patogenezie chorób i rozwoju oporności na szeroko stosowane leki przeciwbakteryjne, jak i ciężkiego przebiegu i wysokiej śmiertelności wywoływanych przez nie chorób.

1.1. Definicja i charakterystyka

W mikrobiologii klinicznej mikroorganizmy są powszechnie klasyfikowane na podstawie ich związku z tlenem atmosferycznym i dwutlenkiem węgla. Łatwo to zweryfikować inkubując mikroorganizmy na agarze z krwią w różnych warunkach: a) w normalnym powietrzu (21% tlenu); b) w warunkach inkubatora CO2 (15% tlenu); c) w warunkach mikroaerofilnych (5% tlenu) d) w warunkach beztlenowych (0% tlenu). Stosując to podejście, bakterie można podzielić na 6 grup: beztlenowce bezwzględnie, beztlenowce mikroaerofilne, beztlenowce fakultatywne, beztlenowce tolerujące aerobę, beztlenowce mikroaerotolerancyjne, beztlenowce obligatoryjne. Informacje te są przydatne do podstawowej identyfikacji zarówno tlenowych, jak i beztlenowych.

Aeroby. Do wzrostu i rozmnażania bezwzględne tlenowce potrzebują atmosfery zawierającej tlen cząsteczkowy w stężeniu 15-21% lub CO; inkubator. Mycobacteria, Vibrio cholerae i niektóre grzyby to przykłady bezwzględnych tlenowców. Mikroorganizmy te pozyskują większość swojej energii w procesie oddychania.

mikroaerofile(tlenowe mikroaerofilne). Do rozmnażania potrzebują również tlenu, ale w stężeniach niższych niż obecne w atmosferze pomieszczenia. Gonococci i Campylobacter są przykładami bakterii mikroaerofilnych i preferują atmosferę o zawartości O2 około 5%.

beztlenowce mikroaerofilne. Bakterie zdolne do wzrostu w warunkach beztlenowych i mikroaerofilnych, ale niezdolne do wzrostu w inkubatorze CO2 lub powietrzu.

Beztlenowce. Beztlenowce to mikroorganizmy, które nie potrzebują tlenu do życia i reprodukcji. Beztlenowce obowiązkowe to bakterie, które rozwijają się tylko w warunkach beztlenowych, tj. w atmosferze beztlenowej.

Mikroorganizmy tolerujące powietrze. Mogą rosnąć w atmosferze zawierającej tlen cząsteczkowy (powietrze, inkubator CO2), ale najlepiej rosną w warunkach beztlenowych.

Beztlenowce fakultatywne(fakultatywne aeroby). Zdolny do przeżycia w obecności lub braku tlenu. Wiele bakterii izolowanych od pacjentów to fakultatywne beztlenowce (enterobakterie, paciorkowce, gronkowce).

kapnofile. Szereg bakterii, które lepiej rosną w obecności podwyższonego stężenia CO 2 nosi nazwę kapnofilów lub organizmów kapnofilnych. Bacteroides, fusobakterie, bakterie hemoglobinofilowe są kapnofilami, ponieważ lepiej rosną w atmosferze zawierającej 3-5% CO 2 (2,

19,21,26,27,32,36).

Główne grupy drobnoustrojów beztlenowych przedstawiono w tabeli 1. (42, 43,44).

StółI. Najważniejsze mikroorganizmy beztlenowe

Rodzaj	Rodzaje		krótki opis
*Bakteroidy*	W. kruchy W. vulgatus W. distansonis W. jajko		Zarodniki Gram-ujemne, nie tworzące pręcików
*Prevotella*	P. melaninogenicus P. biwia P. buccalis P. denticola P. pośrednie
*Porfiromonas*	P. asaccharolyticum P. endodontalis P. gingivalis			Zarodniki Gram-ujemne, nie tworzące pręcików
*Ctostridium*	C. perfringens C. ramosum C. septicum C. novyi C. sporogenes C. sordelii C. tetani C. botulinum C. difficile		Gram-dodatnie, tworzące zarodniki pałeczki lub pałeczki
*promieniowce*	ALE. Izrael A. bovis
*Pseudoramibakteria* *	P. laktolyticum		Gram-dodatnie, nie tworzące zarodników pałeczki
		E. lentum E.rectale E. limosum	Gram-dodatnie, nie tworzące zarodników pałeczki
*Bifidobakteria*		B. eriksonii B. adolescentis B.breve	Pałeczki Gram-dodatnie
*Propionobakteria*		P. acnes P. avidum P. granulosum P. propionica**	Gram-dodatni. pręciki nie tworzące zarodników
*Lactobacillus*		L. catenaforme L. acidophilus	Pałeczki Gram-dodatnie
*Peptococcus*		P. magnus P. saccharolyticus P. asaccharolyticus
*Peptostreptokoki*		P. anaerobius P. intermedius P.mikro P. productus	Gram-dodatnie ziarniaki nie tworzące przetrwalników
*Weilonella*		V. parwula	Gram-ujemne, nieprzetrwalnikujące ziarniaki
*Fusobacterium*		F. nucleatum F. necrophorum F. wariacja F. mortiferum	Wrzecionowaty kije
*kampylobakterie*		C. płód C.jejuni	Gram-ujemne, cienkie, spiralne, nie tworzące zarodników pałeczki

* Eubakteria alaklolyticum przeklasyfikowany jako Pseudoramibakteria laktolyticum (43,44)

** poprzednio Arachnia propionika (44)

*** synonimy F. pseudonekroforum, F. nekrofora biowar Z(42,44)

1.2. Skład mikroflory głównych biotopów człowieka

Etiologia chorób zakaźnych uległa w ostatnich dziesięcioleciach znaczącym zmianom. Jak wiadomo, wcześniej głównym zagrożeniem dla zdrowia człowieka były infekcje ostro zakaźne: dur brzuszny, czerwonka, salmonelloza, gruźlica i wiele innych, przenoszonych głównie drogą egzogenną. Chociaż infekcje te nadal pozostają ważne społecznie, a ich znaczenie medyczne ponownie wzrasta, generalnie ich rola znacznie się zmniejszyła. Jednocześnie wzrasta rola mikroorganizmów oportunistycznych, przedstawicieli normalnej mikroflory ludzkiego ciała. Skład normalnej ludzkiej mikroflory obejmuje ponad 500 gatunków mikroorganizmów. Normalna mikroflora żyjąca w ludzkim ciele jest w dużej mierze reprezentowana przez beztlenowce (tab. 2).

Bakterie beztlenowe zasiedlające ludzką skórę i błony śluzowe, dokonując transformacji mikrobiologicznej substratów pochodzenia egzogennego i endogennego, wytwarzają szeroką gamę różnych enzymów, toksyn, hormonów i innych związków biologicznie czynnych, które są wchłaniane i wiążą się z komplementarnymi receptorami i wpływają na funkcja komórek i narządów. Znajomość składu specyficznej normalnej mikroflory niektórych regionów anatomicznych jest przydatna do zrozumienia etiologii procesów zakaźnych. Całość gatunków drobnoustrojów zamieszkujących pewien region anatomiczny nazywana jest mikroflorą rodzimą. Co więcej, wykrycie określonych drobnoustrojów w znacznej ilości na odległość lub w nietypowym miejscu do zamieszkania tylko podkreśla ich udział w rozwoju procesu zakaźnego (11, 17, 18, 38).

Drogi oddechowe. Mikroflora górnych dróg oddechowych jest bardzo zróżnicowana i obejmuje ponad 200 gatunków mikroorganizmów należących do 21 rodzajów. 90% bakterii śliny to beztlenowce (10, 23). Większość z tych mikroorganizmów nie jest klasyfikowana nowoczesnymi metodami taksonomii i nie ma znaczenia dla patologii. Drogi oddechowe zdrowych ludzi są najczęściej zasiedlane przez następujące mikroorganizmy: Paciorkowiec zapalenie płuc- 25-70%; H aemophilus grypy- 25-85%; Paciorkowiec pyogenes- 5-10%; Neisseria meningitidis- 5-15%. Mikroorganizmy beztlenowe, takie jak Fusobacterium, Bakteroidy spirali, Peptostreptokoki, Peptococcus, Weilonella i niektóre typy promieniowce występuje u prawie wszystkich zdrowych ludzi. Bakterie z grupy coli występują w drogach oddechowych u 3-10% zdrowych osób. Zwiększoną kolonizację dróg oddechowych przez te drobnoustroje stwierdzono u alkoholików, osób z ciężkim przebiegiem choroby, u pacjentów otrzymujących terapię przeciwbakteryjną hamującą prawidłową mikroflorę, a także u osób z upośledzeniem funkcji układu odpornościowego.

Tabela 2. Ilościowa zawartość mikroorganizmów w biotopach

normalne ludzkie ciało

Populacje drobnoustrojów w drogach oddechowych przystosowują się do pewnych nisz ekologicznych (nos, gardło, język, szczeliny dziąsłowe). Adaptacja drobnoustrojów do tych biotopów jest zdeterminowana powinowactwem bakterii do pewnych typów komórek lub powierzchni, czyli jest zdeterminowana przez tropizm komórkowy lub tkankowy. Na przykład, Paciorkowiec ślina dobrze przylega do nabłonka policzka i dominuje w składzie błony śluzowej policzka. środek adhezyjny-

riy może również wyjaśnić patogenezę niektórych chorób. Paciorkowiec pyogenes dobrze przylega do nabłonka gardła i często powoduje zapalenie gardła, E. coli ma powinowactwo do nabłonka pęcherza i dlatego powoduje zapalenie pęcherza moczowego.

Skóra. Rdzenna mikroflora skóry jest reprezentowana przez bakterie głównie z następujących rodzajów: Staphylococcus, Mikrokok, Corynobakterie, Propionobakteria, Brevibacterium oraz Acinetobacter. Często obecne są również drożdże z rodzaju Pityrosporium. Beztlenowce są reprezentowane głównie przez gram-dodatnie bakterie z rodzaju propi- onobakteria (zwykle Propionobakteria trądzik). Cocci Gram-dodatnie (Peptostreptokoki spp.) oraz Bakterie Gram-dodatnie z rodzaju Eubakteria obecne u niektórych osób.

Cewka moczowa. Bakterie kolonizujące dalszą część cewki moczowej to gronkowce, niehemolityczne paciorkowce, błonicy oraz w niewielkiej liczbie przypadków różni członkowie rodziny Enterobacteriaceae. Beztlenowce są w większym stopniu reprezentowane przez bakterie Gram-ujemne - BakteroidyorazFusobacterium spp..

Pochwa. Około 50% bakterii z sekretu szyjki macicy i pochwy to beztlenowce. Większość beztlenowców reprezentowana jest przez lactobacilli i peptostreptococci. Prevo-tele są często spotykane - P. biwia oraz P. disiens. Ponadto bakterie Gram-dodatnie z rodzaju Mobiluncus oraz Clostridium.

Jelita. Spośród 500 gatunków zamieszkujących ludzkie ciało około 300 do 400 gatunków żyje w jelitach. Następujące bakterie beztlenowe występują w największej liczbie w jelicie: Bakteroidy, Bifidobakteria, Clostridium, Eubakteria, LactobacillusorazPeptostrepto- kokus. Bakteroidy są dominującymi mikroorganizmami. Ustalono, że na jedną komórkę Escherichia coli przypada tysiąc komórek bakterioidów.

2. Czynniki patogeniczności mikroorganizmów beztlenowych

Patogeniczność mikroorganizmów oznacza ich potencjalną zdolność do wywoływania chorób. Pojawienie się patogenności u drobnoustrojów wiąże się z nabyciem przez nie szeregu właściwości, które zapewniają zdolność przyczepiania się, przenikania i rozprzestrzeniania się w ciele gospodarza, opierania się jego mechanizmom obronnym oraz powodowania uszkodzeń ważnych narządów i układów. Jednocześnie wiadomo, że zjadliwość drobnoustrojów jest właściwością polideterminowaną, która jest w pełni realizowana tylko w organizmie żywiciela wrażliwego na patogen.

Obecnie wyróżnia się kilka grup czynników patogenności:

a) adhezyny lub czynniki przywiązania;

b) czynniki adaptacyjne;

c) inwazyjne, czyli czynniki penetracyjne

d) kapsułka;

e) cytotoksyny;

f) endotoksyny;

g) egzotoksyny;

h) toksyny enzymów;

i) czynniki modulujące układ odpornościowy;

j) superantygeny;

k) białka szoku cieplnego (2, 8, 15, 26, 30).

Etapy i mechanizmy, zakres reakcji, interakcji i zależności na poziomie molekularnym, komórkowym i organizmowym między mikroorganizmami a organizmem gospodarza są bardzo złożone i różnorodne. Znajomość czynników patogenności mikroorganizmów beztlenowych i ich praktycznego wykorzystania w profilaktyce chorób nie jest jeszcze wystarczająca. W tabeli 3 przedstawiono główne grupy czynników chorobotwórczych bakterii beztlenowych.

Tabela 3. Czynniki patogeniczności drobnoustrojów beztlenowych

Etap interakcji		Czynnik		Rodzaje
Przyczepność		Polisacharydy otoczkowe fimbrii Hemaglutyniny
Inwazja		Fosfolipaza C Proteazy
Szkoda tekstylia	Egzotoksyny Hemolizyny Proteazy kolagenaza fibrynolizyna Neuraminidaza Heparynaza Glukuronidaza siarczanu chondriityny Cytotoksyny N-acetylo-glukozaminidazy Enterotoksyny neurotoksyny		P. melaninogenica P. melaninogenica
Czynniki hamujące układ odpornościowy	Produkty metaboliczne Lipopolisacharydy (O-antygen) Proteazy immunoglobulinowe (G, A, M) Konwertaza C3 i C5 Proteaza a 2-mikroglobulina Produkty przemiany materii Kwasy tłuszczowe beztlenowców Związki siarki Oksydoreduktaza Beta-laktamazy		Większość beztlenowców
Aktywatory czynników uszkodzeń	Lipopolisacharydy (O-antygen) Struktury powierzchni

Obecnie ustalono, że czynniki patogeniczności mikroorganizmów beztlenowych są determinowane genetycznie. Zidentyfikowano geny chromosomowe i plazmidowe oraz transpozony kodujące różne czynniki patogeniczności. Bardzo ważnym problemem jest badanie funkcji tych genów, mechanizmów i wzorców ekspresji, transmisji i krążenia w populacji mikroorganizmów.

2.1. Rola endogennej mikroflory beztlenowej w patologii człowieka

Mikroorganizmy beztlenowe normalnej mikroflory bardzo często stają się czynnikami sprawczymi procesów zakaźnych zlokalizowanych w różnych częściach anatomicznych ciała. Tabela 4 pokazuje częstotliwość mikroflory beztlenowej w rozwoju patologii. (2, 7, 11, 12, 18, 24, 27).

Można sformułować szereg ważnych uogólnień dotyczących etiologii i patogenezy większości typów zakażeń beztlenowych: 1) źródłem drobnoustrojów beztlenowych jest normalna mikroflora pacjentów z własnego przewodu pokarmowego, oddechowego lub moczowo-płciowego; 2) zmiany właściwości tkanek spowodowane urazem i/lub niedotlenieniem stwarzają odpowiednie warunki do rozwoju wtórnej lub oportunistycznej infekcji beztlenowej; 3) infekcje beztlenowe, z reguły, są wielodrobnoustrojowe i często są powodowane przez mieszaninę kilku rodzajów mikroorganizmów beztlenowych i tlenowych, synergistycznie działających uszkadzająco; 4) infekcji towarzyszy powstawanie i uwalnianie silnego zapachu w około 50% przypadków (beztlenowce bezprzetrwalnikowe syntetyzują lotne kwasy tłuszczowe, które powodują ten zapach); 5) infekcja charakteryzuje się tworzeniem gazów, martwicą tkanek, rozwojem ropni i zgorzeli; 6) infekcja rozwija się podczas leczenia antybiotykami aminoglikozydowymi (bakteroidy są na nie oporne); 7) obserwuje się czarne zabarwienie wysięku (porphyromonas i prevotella wytwarzają ciemnobrązowy lub czarny pigment); 8) infekcja ma przewlekły, powolny, często podkliniczny przebieg; 9) występują rozległe zmiany martwicze tkanek, rozbieżność między nasileniem objawów klinicznych a objętością zmian destrukcyjnych, niewielkie krwawienie w nacięciu.

Chociaż bakterie beztlenowe mogą powodować poważne i śmiertelne infekcje, rozpoczęcie infekcji generalnie zależy od stanu czynników obronnych organizmu, tj. funkcje układu odpornościowego (2, 5, 11). Zasady leczenia takich infekcji obejmują usunięcie martwej tkanki, drenaż, przywrócenie prawidłowego krążenia krwi, usunięcie obcych substancji oraz zastosowanie aktywnej terapii przeciwdrobnoustrojowej odpowiedniej dla patogenu, w odpowiedniej dawce i czasie trwania.

Tabela 4. Etiologiczna rola mikroflory beztlenowej

w rozwoju choroby

Choroby	Liczba przebadanych	Częstotliwość izolacji beztlenowców
Głowa i szyja Nieurazowe ropnie głowy Przewlekłe zapalenie zatok Infekcje przestrzeni okołożuchwowej
Klatka piersiowa Aspiracyjne zapalenie płuc ropień płucny
Brzuch Ropnie lub zapalenie otrzewnej Zapalenie wyrostka robaczkowego ropień wątroby
żeńskie narządy płciowe mieszane typy Ropnie miednicy Procesy zapalne			33 (100%) 22 (88%)
miękkie chusteczki infekcja rany Ropnie skórne Cukrzycowe owrzodzenia kończyn
bakteriemia Wszystkie kultury Sepsa wewnątrzbrzuszna Poronienie septyczne

3. Główne formy infekcji beztlenowych

3.1. Zakażenie opłucnej

Etiologicznie istotne mikroorganizmy beztlenowe w tej patologii są przedstawicielami prawidłowej mikroflory jamy ustnej i górnych dróg oddechowych. Są czynnikami wywołującymi różne infekcje, w tym zachłystowe zapalenie płuc, martwicze zapalenie płuc, promienicę i ropień płuca. Główne czynniki sprawcze chorób opłucnej przedstawiono w tabeli 5.

Tabela 5. Bakterie beztlenowe powodujące

opłucnej infekcja

Czynnikami, które przyczyniają się do rozwoju beztlenowej infekcji opłucnej u pacjenta, są aspiracja prawidłowej mikroflory (w wyniku utraty przytomności, dysfagii, obecności obiektów mechanicznych, niedrożności, złej higieny jamy ustnej, martwicy tkanki płucnej) oraz rozprzestrzeniania krwiopochodnego mikroorganizmów. Jak widać z Tabeli 5, zachłystowe zapalenie płuc jest najczęściej powodowane przez organizmy poprzednio określane jako gatunki „bakteroidów jamy ustnej” (obecnie gatunki Prevotella i Porphyromonas), Fusobacterium i Peptostreptococcus. Spektrum bakterii izolowanych z ropniaka beztlenowego i ropnia płuca jest prawie takie samo.

3.2. Zakażenie stopy cukrzycowej

Wśród ponad 14 milionów cukrzyków w Stanach Zjednoczonych przykry zapach stóp jest najczęstszą zakaźną przyczyną hospitalizacji. Ten rodzaj infekcji jest często ignorowany przez pacjentów w początkowej fazie, a czasem nieodpowiednio leczony przez lekarzy. Ogólnie rzecz biorąc, pacjenci nie starają się dokładnie i regularnie badać kończyn dolnych i nie stosują się do zaleceń lekarzy dotyczących schematu opieki i chodzenia. Rola beztlenowców w rozwoju infekcji stóp u diabetyków została ustalona wiele lat temu. Główne typy drobnoustrojów wywołujących ten rodzaj infekcji przedstawiono w tabeli 6.

Tabela 6. Mikroorganizmy tlenowe i beztlenowe, które powodują

infekcja stóp u diabetyków

Aeroby	Beztlenowce
Proteus mirabili	Bacteroides fragilis
Pseudomonas aeruginosa	inne gatunki z grupy B. fragilis
Enterobacter aerogenes	Prevotella melaninogenica
Escherichia coli	inne gatunki Prevotella\ Porphyromonas
Klebsiella zapalenie płuc	Fusobacterium nucleatum
	inne fusobakterie
	Peptostreptokoki
Staphylococcus aureus	inne rodzaje Clostridia

Ustalono, że 18-20% pacjentów z cukrzycą ma mieszaną infekcję tlenową/beztlenową. U jednego chorego wykryto średnio 3,2 tlenowych i 2,6 beztlenowych gatunków drobnoustrojów, wśród których dominowały peptostreptokoki. Często wykrywano również bakterioidy, prevotella i clostridia. Z głębokich ran asocjacja bakterii została wyizolowana w 78% przypadków. Gram-dodatnią mikroflorę tlenową (gronkowce i paciorkowce) wykryto u 25% pacjentów, a gram-ujemną mikroflorę tlenową w kształcie pręcików u około 25% pacjentów. Około 50% infekcji beztlenowych ma charakter mieszany. Infekcje te są cięższe i najczęściej wymagają amputacji zajętej kończyny.

3.3. bakteriemia i sepsa

Udział mikroorganizmów beztlenowych w rozwoju bakteriemii waha się od 10 do 25%. Większość badań pokazuje, że W.kruchy i inne gatunki z tej grupy, a także Bakteroidy thetaiotaomicron są najczęstszą przyczyną bakteriemii. Clostridia są następną częstotliwością (zwłaszcza Clostridium perfringens) i peptostreptococci. Często są izolowane w czystej kulturze lub w stowarzyszeniach. W ostatnich dziesięcioleciach w wielu krajach świata obserwuje się wzrost częstości występowania sepsy beztlenowej (z 0,67 do 1,25 przypadków na 1000 przyjętych do szpitala). Śmiertelność u pacjentów z sepsą wywołaną przez mikroorganizmy beztlenowe wynosi 38-50%.

3.4. Tężec

Tężec jest dobrze znaną poważną i często śmiertelną infekcją od czasów Hipokratesa. Od wieków choroba ta jest palącym problemem związanym z ranami postrzałowymi, oparzeniami i urazami. spór Clostridium tetani znajdują się w odchodach ludzi i zwierząt i są szeroko rozpowszechnione w środowisku. Ramon i współpracownicy w 1927 roku z powodzeniem zaproponowali immunizację toksoidem w celu zapobiegania tężcowi. Ryzyko zachorowania na tężec jest wyższe u osób po 60. roku życia ze względu na zmniejszenie skuteczności/utratę ochronnej odporności antytoksycznej po szczepieniu. Terapia obejmuje podawanie immunoglobulin, oczyszczanie rany, terapię przeciwbakteryjną i antytoksyczną, stałą opiekę pielęgniarską, środki uspokajające i przeciwbólowe. Szczególną uwagę poświęca się obecnie tężcowi noworodkowemu.

3.5. Biegunka

Istnieje wiele bakterii beztlenowych, które powodują biegunkę. Anaerobiospirillum producenci bursztynu- ruchliwe bakterie w kształcie spirali z bipolarną wicią. Czynnik sprawczy jest wydalany z kałem psów i kotów z bezobjawowymi infekcjami, a także osób z biegunką. Enterotoksygenne szczepy W.kruchy. W 1984 roku Mayer wykazał rolę szczepów wytwarzających toksyny W.kruchy w patogenezie biegunki. Toksynogenne szczepy tego patogenu są izolowane z biegunki u ludzi i zwierząt. Nie można ich odróżnić od zwykłych szczepów metodami biochemicznymi i serologicznymi. W eksperymencie powodują biegunkę i charakterystyczne zmiany jelita grubego i dystalnego jelita cienkiego z przerostem krypt. Enterotoksyna ma masę cząsteczkową 19,5 kD i jest termolabilna. Patogeneza, spektrum i częstotliwość zachorowalności, a także optymalna terapia nie zostały jeszcze wystarczająco rozwinięte.

3.6. Chirurgiczna infekcja beztlenowa ran i tkanek miękkich

Czynniki zakaźne izolowane z ran chirurgicznych w dużej mierze zależą od rodzaju interwencji chirurgicznej. Przyczyną ropienia w czystych interwencjach chirurgicznych, którym nie towarzyszy otwarcie przewodu żołądkowo-jelitowego, moczowo-płciowego lub oddechowego, jest z reguły St. aureus. W innych typach ropienia ran (czysto skażonych, skażonych i brudnych) najczęściej izolowana jest mieszana mikroflora wielodrobnoustrojowa narządów wyciętych chirurgicznie. W ostatnich latach obserwuje się wzrost roli mikroflory oportunistycznej w rozwoju takich powikłań. Większość ran powierzchownych diagnozuje się później, między ósmym a dziewiątym dniem po zabiegu. Jeśli infekcja rozwinie się wcześniej - w ciągu pierwszych 48 godzin po zabiegu, jest to typowe dla infekcji zgorzelinowej wywołanej przez niektóre gatunki Clostridia lub paciorkowce beta-hemolizujące. W tych sprawy następuje dramatyczny wzrost ciężkości choroby, wyraźna toksykoza, szybki lokalny rozwój infekcji z udziałem wszystkich warstw tkanek ciała w procesie.

3.7. Wytwarzanie gazu infekcja tkanek miękkich

Obecność gazu w zakażonych tkankach jest złowieszczym objawem klinicznym, aw przeszłości zakażenie to było najczęściej kojarzone przez lekarzy z obecnością patogenów zgorzeli gazowej Clostridium. Obecnie wiadomo, że infekcja wytwarzająca gazy u pacjentów chirurgicznych jest spowodowana mieszaniną mikroorganizmów beztlenowych, takich jak Clostridium, Peptostreptokoki lub Bakteroidy, lub jeden z rodzajów tlenowych bakterii z grupy coli. Czynnikami predysponującymi do rozwoju tej formy infekcji są choroby naczyniowe kończyn dolnych, cukrzyca, urazy.

3.8. Martwica mięśni Clostridium

Zgorzel gazowa jest procesem niszczącym tkankę mięśniową, związanym z miejscowym trzeszczeniem, ciężkim ogólnoustrojowym zatruciem wywołanym przez beztlenowe Clostridia wytwarzające gaz Clostridia są Gram-dodatnimi bezwzględnymi beztlenowcami, które są szeroko rozpowszechnione w glebie skażonej wydalinami zwierzęcymi. U ludzi są zwykle mieszkańcami przewodu pokarmowego i żeńskich narządów płciowych. Czasami można je znaleźć na skórze oraz w jamie ustnej. Najważniejszym gatunkiem z 60 znanych jest Clostridium perfringens. Ten mikroorganizm jest bardziej tolerancyjny na tlen atmosferyczny i szybko się rozwija. Jest to toksyna alfa, fosfolipaza C (lecytynaza), która rozkłada lecytynę na fosforylocholinę i diglicerydy oraz kolagenazy i proteazy, które powodują destrukcję tkanek. Produkcja toksyn alfa wiąże się z wysoką śmiertelnością w zgorzeli gazowej. Ma właściwości hemolityczne, niszczy płytki krwi, powoduje intensywne uszkodzenia naczyń włosowatych i wtórne zniszczenie tkanek. W 80% przypadków dochodzi do martwicy mięśni Z.perfringens. Ponadto w grę wchodzi etiologia tej choroby Z.nowy, Z. posocznica, Z.bifer- mentas. Inne rodzaje Clostridium C. histoliticum, Z.sporogeny, Z.Fallax, Z.tercja mają niewielkie znaczenie etiologiczne.

3.9. Powoli rozwijająca się martwicza infekcja rany

Agresywne, zagrażające życiu zakażenie rany Może wystąpić do 2 tygodni po zakażeniu, szczególnie u pacjentów z cukrzycą

chory. Zwykle są to mieszane lub monobakteryjne infekcje powięzi. Zakażenia monobakteryjne są stosunkowo rzadkie. w około 10% przypadków i zwykle obserwuje się je u dzieci. Czynnikami sprawczymi są paciorkowce grupy A, Staphylococcus aureus i paciorkowce beztlenowe (Peptostreptococci). Gronkowce i paciorkowce hemolityczne są izolowane z taką samą częstotliwością u około 30% pacjentów. Większość z nich jest zarażona poza szpitalem. Większość dorosłych ma martwicze zapalenie powięzi kończyn (w 2/3 przypadków dotyczy to kończyn). U dzieci częściej dochodzi do zajęcia tułowia i pachwiny. Zakażenie wielodrobnoustrojowe obejmuje szereg procesów wywoływanych przez mikroflorę beztlenową. Średnio od ran odróżnia się około 5 głównych typów. Śmiertelność w takich chorobach utrzymuje się na wysokim poziomie (około 50% wśród pacjentów z ciężkimi postaciami). Starsi ludzie mają zwykle złe rokowania. Śmiertelność osób po 50. roku życia wynosi ponad 50%, a chorych na cukrzycę ponad 80%.

3.10. zakażenie dootrzewnowe

Infekcje w obrębie jamy brzusznej są najtrudniejsze do wczesnej diagnozy i skutecznego leczenia. Pomyślny wynik zależy przede wszystkim od wczesnej diagnozy, szybkiej i odpowiedniej interwencji chirurgicznej oraz zastosowania skutecznego schematu przeciwdrobnoustrojowego. Wielodrobnoustrojowy charakter mikroflory bakteryjnej zaangażowanej w rozwój zapalenia otrzewnej w wyniku perforacji w ostrym zapaleniu wyrostka robaczkowego po raz pierwszy wykazano w 1938 r. Altemeier. Liczba mikroorganizmów tlenowych i beztlenowych wyizolowanych z miejsc posocznicy wewnątrzbrzusznej zależy od rodzaju mikroflory lub uszkodzonego narządu. Uogólnione dane wskazują, że średnia liczba gatunków bakterii izolowanych z ogniska infekcji wynosi od 2,5 do 5. W przypadku mikroorganizmów tlenowych dane te wynoszą 1,4–2,0 gatunków i 2,4–3,0 gatunków mikroorganizmów beztlenowych. Co najmniej 1 rodzaj beztlenowców wykryto u 65-94% pacjentów. Spośród mikroorganizmów tlenowych najczęściej wykrywa się Escherichia coli, Klebsiella, Streptococcus, Proteus, Enterobacter, a z mikroorganizmów beztlenowych - Bacteroides, Peptostreptococci, Clostridia. Bacteroides stanowią 30% do 60% wszystkich izolowanych szczepów mikroorganizmów beztlenowych. Zgodnie z wynikami licznych badań, 15% infekcji jest spowodowanych przez mikroflorę beztlenową, a 10% przez tlenową, a zatem 75% jest spowodowanych skojarzeniami. Najważniejszy z nich- MI.coli oraz W.kruchy. Według N. S. Bogomolovej i L. V. Bolshakova (1996), infekcja beztlenowa

było przyczyną rozwoju chorób zębopochodnych w 72,2% przypadków, wyrostkowego zapalenia otrzewnej - w 62,92% przypadków, zapalenia otrzewnej z powodu chorób ginekologicznych - w 45,45% przypadków, zapalenia dróg żółciowych - w 70,2%. Mikroflora beztlenowa była najczęściej izolowana w ciężkim zapaleniu otrzewnej w toksycznych i terminalnych stadiach choroby.

3.11. Charakterystyka doświadczalnych ropni beztlenowych

W eksperymencie W.kruchy inicjuje rozwój ropnia podskórnego. Pierwszymi zdarzeniami są migracja leukocytów wielojądrzastych i rozwój obrzęku tkanek. Po 6 dniach wyraźnie identyfikuje się 3 strefy: wewnętrzna - składa się z mas martwiczych i zmienionych zwyrodnieniowo komórek zapalnych i bakterii; środkowa jest utworzona z trzonu leukocytów, a strefa zewnętrzna jest reprezentowana przez warstwę kolagenu i tkanki włóknistej. Stężenie bakterii waha się od 108 do 109 w 1 ml ropy. Ropień charakteryzuje się niskim potencjałem redoks. Jest bardzo trudna do leczenia, ponieważ następuje niszczenie leków przeciwdrobnoustrojowych przez bakterie, a także ucieczka przed czynnikami obronnymi gospodarza.

3.12. Rzekomobłoniaste zapalenie jelita grubego

Rzekomobłoniaste zapalenie jelita grubego (PMC) jest poważną chorobą przewodu pokarmowego charakteryzującą się wysiękiem na błonie śluzowej okrężnicy. Choroba ta została po raz pierwszy opisana w 1893 roku, na długo przed pojawieniem się środków przeciwdrobnoustrojowych i ich zastosowania w celach leczniczych. Obecnie ustalono, że czynnikiem etiologicznym tej choroby jest Clostridium trudność. Naruszenie mikroekologii jelita przez stosowanie antybiotyków jest przyczyną rozwoju MVP i szerokiego rozprzestrzeniania się infekcji wywołanych przez Z.trudność, spektrum kliniczne objawów jest bardzo zróżnicowane - od nosicielstwa i krótkotrwałej, samoistnie przechodzącej biegunki do rozwoju MVP. Liczba pacjentów z zapaleniem jelita grubego wywołanym przez C. trudność, wśród pacjentów ambulatoryjnych 1-3 na 100 000, a wśród hospitalizowanych 1 na 100-1000.

Patogeneza. Kolonizacja jelita człowieka szczepami toksynogennymi Z,trudność jest ważnym czynnikiem rozwoju PMC. Jednak nosicielstwo bezobjawowe występuje u około 3-6% dorosłych i 14-15% dzieci. Prawidłowa mikroflora jelitowa stanowi niezawodną barierę dla kolonizacji przez drobnoustroje chorobotwórcze. Jest łatwo zaburzony przez antybiotyki i bardzo trudny do wyzdrowienia. Najbardziej wyraźny wpływ na mikroflorę beztlenową mają cefalosporyny III generacji, klindamycyna (grupa linkomycyny) i ampicylina. Z reguły wszyscy pacjenci z MVP cierpią na biegunkę. Jednocześnie stolec jest płynny z zanieczyszczeniami krwi i śluzu. Występuje przekrwienie i obrzęk błony śluzowej jelit. Często obserwuje się wrzodziejące zapalenie jelita grubego lub zapalenie odbytnicy, charakteryzujące się ziarninowaniem, krwotoczną błoną śluzową. Większość pacjentów z tą chorobą ma gorączkę, leukocytozę i napięcie brzucha. Następnie mogą rozwinąć się poważne powikłania, w tym ogólne i miejscowe zatrucie, hipoalbuminemia. Objawy biegunki związanej z antybiotykami zaczynają się w 4-5 dniu antybiotykoterapii. W stolcu takich pacjentów S. trudność w 94% przypadków, podczas gdy u zdrowych dorosłych mikroorganizm ten jest izolowany tylko w 0,3% przypadków.

Z.trudność wytwarza dwa rodzaje wysoce aktywnych egzotoksyn - A i B. Toksyna A jest enterotoksyną, która powoduje nadmierne wydzielanie i gromadzenie płynu w jelicie, a także reakcję zapalną z zespołem krwotocznym. Toksyna B jest cytotoksyną. Jest neutralizowany przez poliwalentną surowicę przeciwzgorzelinową. Ta cytotoksyna występuje u około 50% pacjentów z zapaleniem jelita grubego związanym z antybiotykami bez tworzenia rzekomobłoniastego oraz u 15% pacjentów z biegunką związaną z antybiotykami z prawidłowymi wynikami sigmoidoskopii. Jego działanie cytotoksyczne opiera się na depolimeryzacji aktyny mikrofilamentowej i uszkodzeniu cytoszkieletu enterocytów. Ostatnio coraz więcej danych pojawia się na Z.trudność jako szpitalny czynnik zakaźny. W związku z tym pożądane jest izolowanie pacjentów chirurgicznych, nosicieli tego drobnoustroju, aby uniknąć rozprzestrzeniania się infekcji w szpitalu. Z.trudność najbardziej wrażliwy na wankomycynę, metronidazol i bacytracynę. Tak więc obserwacje te potwierdzają, że szczepy wytwarzające toksyny Z.trudność powodują szereg chorób, w tym biegunkę, zapalenie okrężnicy i MVP.

3.13. Zakażenia położniczo-ginekologiczne

Zrozumienie wzorców rozwoju infekcji żeńskich narządów płciowych jest możliwe na podstawie dogłębnych badań mikrobiocenozy pochwy. Prawidłową mikroflorę pochwy należy rozpatrywać pod kątem bariery ochronnej przed najczęstszymi patogenami.

Procesy dysbiotyczne przyczyniają się do powstawania bakteryjnego zapalenia pochwy (BV). BV wiąże się z rozwojem takich powikłań jak beztlenowe pooperacyjne infekcje tkanek miękkich, poporodowe i poaborcyjne zapalenie błony śluzowej macicy, przedwczesne poronienie, zakażenie wewnątrzowodniowe (10). Infekcja położniczo-ginekologiczna ma charakter wielodrobnoustrojowy. Przede wszystkim chciałbym zwrócić uwagę na rosnącą rolę beztlenowców w rozwoju ostrych procesów zapalnych narządów miednicy - ostre zapalenie przydatków macicy, poporodowe zapalenie błony śluzowej macicy, zwłaszcza po porodzie operacyjnym, powikłania pooperacyjne w ginekologii (zapalenie okołokulistyczne, ropnie, zakażenie rany) (5). Do drobnoustrojów najczęściej izolowanych z infekcji żeńskich narządów płciowych należą: Baktemidy kruchy, jak również typy Peptococcus oraz Peptostreptokoki. Paciorkowce grupy A nie są często spotykane w zakażeniach miednicy mniejszej. Paciorkowce grupy B często powodują sepsę u pacjentek położniczych, których bramą wejściową jest narząd płciowy. W ostatnich latach przy infekcjach położniczych i ginekologicznych coraz więcej jest przydzielanych Z.trachomatis. Do najczęstszych procesów infekcyjnych układu moczowo-płciowego należą zapalenie miedniczki otrzewnej, zapalenie błony śluzowej macicy po cięciu cesarskim, infekcje mankietu pochwy po histerektomii, infekcje miednicy po poronieniu septycznym. Skuteczność klindamycyny w tych infekcjach waha się od 87% do 100% (10).

3.14. Infekcja beztlenowa u chorych na raka

Ryzyko infekcji u pacjentów onkologicznych jest nieporównywalnie wyższe niż u innych pacjentów chirurgicznych. Cechę tę tłumaczy szereg czynników - ciężkość choroby podstawowej, niedobór odporności, duża liczba inwazyjnych procedur diagnostycznych i terapeutycznych, duża objętość i traumatyzm interwencji chirurgicznych, stosowanie bardzo agresywnych metod leczenia - radio i chemioterapia . U chorych operowanych z powodu guzów przewodu pokarmowego w okresie pooperacyjnym rozwijają się ropnie podprzeponowe, podwątrobowe i śródotrzewnowe o etiologii beztlenowej. Dominujące patogeny Bakteroidy kruchy- lis, Prevotella spp.. Fusobacterium spp., ziarniaki Gram-dodatnie. W ostatnich latach pojawia się coraz więcej doniesień o istotnej roli niesporogennych beztlenowców w rozwoju stanów septycznych oraz o ich izolacji z krwi w przebiegu bakteriemii (3).

4. Diagnostyka laboratoryjna

4.1. Badany materiał

Diagnostyka laboratoryjna infekcji beztlenowej jest dość trudnym zadaniem. Czas badania od momentu dostarczenia materiału patologicznego z kliniki do laboratorium mikrobiologicznego do uzyskania pełnej szczegółowej odpowiedzi wynosi od 7 do 10 dni, co nie może zadowolić klinicystów. Często wynik analizy bakteriologicznej staje się znany przed wypisem pacjenta. Na wstępie należy odpowiedzieć na pytanie: czy w materiale obecne są beztlenowce. Należy pamiętać, że beztlenowce są głównym składnikiem lokalnej mikroflory skóry i błon śluzowych, a ponadto ich izolacja i identyfikacja musi odbywać się w odpowiednich warunkach. Pomyślne rozpoczęcie badań w mikrobiologii klinicznej infekcji beztlenowych zależy od prawidłowego pobrania odpowiedniego materiału klinicznego.

W normalnej praktyce laboratoryjnej najczęściej stosuje się następujące materiały: 1) zakażone zmiany z przewodu pokarmowego lub żeńskich narządów płciowych; 2) materiał z jamy brzusznej z zapaleniem otrzewnej i ropniami; 3) krew od pacjentów septycznych; 4) wydzielina w przewlekłych chorobach zapalnych dróg oddechowych (zapalenie zatok, zapalenie ucha środkowego, zapalenie wyrostka sutkowatego); 5) materiał z dolnych partii dróg oddechowych w przypadku zachłystowego zapalenia płuc; 6) płyn mózgowo-rdzeniowy w zapaleniu opon mózgowych; 7) zawartość ropnia mózgu; 8) miejscowy materiał na choroby zębów; 9) zawartość ropni powierzchownych: 10) zawartość ran powierzchownych; 11) materiał ran zakażonych (chirurgicznych i urazowych); 12) biopsje (19, 21, 29, 31, 32, 36, 38).

4.2. Etapy badań materiałowych w laboratorium

Pomyślne rozpoznanie i leczenie infekcji beztlenowej jest możliwe tylko przy zainteresowanych współpracą mikrobiologów i klinicystów o odpowiednim profilu. Uzyskanie odpowiednich próbek do badań mikrobiologicznych ma kluczowe znaczenie. Metody pobierania materiału zależą od lokalizacji i rodzaju procesu patologicznego. Badania laboratoryjne polegają na wskazaniu i późniejszej identyfikacji gatunkowej drobnoustrojów beztlenowych i tlenowych zawartych w badanym materiale metodami tradycyjnymi i ekspresowymi, a także na określeniu wrażliwości izolowanych drobnoustrojów na przeciwdrobnoustrojowe leki chemioterapeutyczne (2).

4.3. Bezpośrednie badanie materiału

Istnieje wiele szybkich testów bezpośrednich, które silnie wskazują na obecność dużych ilości beztlenowców w badanym materiale. Niektóre z nich są dość proste i tanie, a zatem mają przewagę nad wieloma drogimi testami laboratoryjnymi.

1. 3 a p ax. Cuchnące materiały zawsze zawierają beztlenowce, tylko kilka z nich jest bezwonnych.

2. Chromatografia gazowo-cieczowa (GLC). Odnosi się do liczby ekspresowych metod diagnostycznych. GLC pozwala określić w ropie krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe (octowy, propionowy, izowalerianowy, izokapronowy, kapronowy), które powodują zapach. Za pomocą GLC, zgodnie ze spektrum lotnych kwasów tłuszczowych, można przeprowadzić identyfikację gatunkową obecnych w niej mikroorganizmów.

3. Fluorescencja. Badanie materiałów (ropa, tkanki) w świetle ultrafioletowym o długości fali 365 nm ujawnia intensywną czerwoną fluorescencję, co tłumaczy się obecnością bakterii pigmentowanych na czarno, należących do grup Basteroides i Porphyromonas, co wskazuje na obecność beztlenowców.

4. Bakterioskopia. W badaniu wielu preparatów barwionych metodą Grama w rozmazie stwierdzono obecność komórek ogniska zapalnego, drobnoustrojów, zwłaszcza polimorficznych pałeczek Gram-ujemnych, małych ziarenkowców Gram-dodatnich lub pałeczek Gram-dodatnich.

5. Immunofluorescencja. Immunofluorescencja bezpośrednia i pośrednia są metodami ekspresowymi i umożliwiają wykrycie drobnoustrojów beztlenowych w badanym materiale.

6. Metoda ELISA. ELISA pozwala na określenie obecności antygenów strukturalnych lub egzotoksyn mikroorganizmów beztlenowych.

7. Metody biologii molekularnej. Największy rozkład, czułość i swoistość w ostatnich latach wykazała reakcja łańcuchowa polimerazy (CPR). Służy zarówno do wykrywania bakterii bezpośrednio w materiale, jak i do identyfikacji.

4.4. Metody i systemy tworzenia warunków beztlenowych

Materiał pobrany z odpowiednich źródeł iw odpowiednich pojemnikach lub medium transportowym w tym celu należy niezwłocznie dostarczyć do laboratorium. Jednakże istnieją dowody na to, że klinicznie istotne beztlenowce w dużych objętościach ropy lub w beztlenowym medium transportowym przeżywają przez 24 godziny. Ważne jest, aby zaszczepiona pożywka była inkubowana w warunkach beztlenowych lub umieszczona w naczyniu wypełnionym CO2 i przechowywana do momentu przeniesienia do specjalnego systemu inkubacji. Istnieją trzy rodzaje systemów beztlenowych powszechnie stosowanych w laboratoriach klinicznych. Coraz szerzej stosowanymi systemami są mikroanaerostaty typu (GasPark, BBL, Cockeysville), które od wielu lat są stosowane w laboratoriach, zwłaszcza w małych laboratoriach i dają zadowalające wyniki. Szalki Petriego z zaszczepionymi bakteriami beztlenowymi umieszcza się wewnątrz naczynia jednocześnie ze specjalnym woreczkiem wytwarzającym gaz i wskaźnikiem. Do worka dodaje się wodę, naczynie zamyka się hermetycznie, z worka uwalnia się CO2 i H2 w obecności katalizatora (najczęściej palladu). W obecności katalizatora H2 reaguje z O2 tworząc wodę. CO2 jest niezbędny do wzrostu beztlenowców, ponieważ są one kapnofilami. Błękit metylenowy jest dodawany jako wskaźnik warunków beztlenowych. Jeśli układ generujący gaz i katalizator działają skutecznie, wskaźnik ulegnie przebarwieniu. Większość beztlenowców wymaga co najmniej 48 godzin hodowli. Następnie komora jest otwierana i kubki są badane po raz pierwszy, co nie jest zbyt wygodne, ponieważ beztlenowce są wrażliwe na tlen i szybko tracą swoją żywotność.

Ostatnio weszły w życie prostsze systemy beztlenowe - worki beztlenowe. Jedna lub dwie szalki do posiewu z workiem wytwarzającym gaz umieszcza się w przezroczystym, hermetycznie zamkniętym worku polietylenowym i inkubuje w warunkach termostatycznych. Przezroczystość worków polietylenowych ułatwia prowadzenie okresowej kontroli rozwoju mikroorganizmów.

Trzeci system do hodowli mikroorganizmów beztlenowych to automatycznie zamykana komora ze szklaną ścianą przednią (stacja beztlenowa) z gumowymi rękawiczkami i automatycznym doprowadzeniem beztlenowej mieszanki gazów (N2, H2, CO2). Materiały, kubki, probówki, tabletki do identyfikacji biochemicznej i wrażliwości na antybiotyki będą umieszczane w tej szafce przez specjalny właz. Wszystkie manipulacje wykonywane są przez bakteriologa w gumowych rękawiczkach. Materiał i naczynia w tym systemie można oglądać codziennie, a uprawy można inkubować od 7-10 dni.

Te trzy systemy mają swoje zalety i wady, ale są skuteczne w izolowaniu beztlenowców i powinny znaleźć się w każdym laboratorium bakteriologicznym. Często stosuje się je jednocześnie, choć największą niezawodność należy do metody uprawy w stacji beztlenowej.

4.5. Pożywki i uprawa

Badanie mikroorganizmów beztlenowych odbywa się w kilku etapach. Ogólny schemat izolacji i identyfikacji beztlenowców przedstawiono na rysunku 1.

Ważnym czynnikiem w rozwoju bakteriologii beztlenowej jest dostępność kolekcji typowych szczepów bakteryjnych, w tym szczepów referencyjnych z kolekcji ATCC, CDC i VPI. Jest to szczególnie ważne przy monitorowaniu pożywek, biochemicznej identyfikacji czystych kultur i ocenie aktywności leków przeciwbakteryjnych. Istnieje szeroka gama podstawowych pożywek, które są używane do przygotowania specjalnych pożywek beztlenowych.

Pożywki dla beztlenowców muszą spełniać następujące podstawowe wymagania: 1) zaspokajać potrzeby żywieniowe; 2) zapewnić szybki wzrost mikroorganizmów; 3) być odpowiednio zredukowane. Pierwotną inokulację materiału przeprowadza się na płytkach agarowych z krwią lub pożywkach elektywnych przedstawionych w Tabeli 7.

Coraz częściej izolację bezwzględnych beztlenowców z materiału klinicznego prowadzi się na podłożach zawierających czynniki selektywne w określonym stężeniu, pozwalających na izolację określonych grup beztlenowców (20, 23) (tab. 8).

Czas trwania inkubacji i częstotliwość badania posianych płytek zależy od badanego materiału i składu mikroflory (tabela 9).

Badany materiał

odpinane rany,

treść ropnia,

Aspirat tchawiczo-oskrzelowy itp.

Transport do laboratorium: w cyprysie, w specjalnym medium transportowym (natychmiastowe umieszczenie materiału w medium)

Mikroskopia materiałowa

Plama Grama

Uprawa i izolacja

czysta kultura

Kubki aerobowe dla

35±2°C w porównaniu z

18-28 godzin beztlenowce

5-10% С0 2

1. agar z krwią mikroaerostat

Gaz-Pak

(H 2 + C0 2)

35±2°С

od 48 godzin do 7 dni

2. Agar z krwią Schaedlera

35±2°С

od 48 godzin do 7 dni

3. Selektywne medium do identyfikacji

beztlenowce

od 48 godzin do 2 tygodni

4. Medium płynne (tioglikol)

Identyfikacja. Czyste kultury z izolowanych kolonii

1. Barwienie Grama i Orzeszko w celu wykrycia zarodników

2. Morfologia kolonii

3. Związek typu kolonii z tlenem

4. Wstępne różnicowanie według wrażliwości na leki przeciwdrobnoustrojowe

5. Testy biochemiczne

Oznaczanie wrażliwości na antybiotyki

1. Sposób rozcieńczenia w agarze lub bulionie

2. Metoda krążków papierowych (dyfuzja)

Ryż. 1. Izolacja i identyfikacja mikroorganizmów beztlenowych

mikroorganizmy beztlenowe

Środa	Zamiar
Agar z krwią Brucella (agar z krwią beztlenową CDC, agar z krwią Shadlera) (agar BRU)	Nieselektywny, do izolacji bakterii beztlenowych obecnych w materiale
Agar z żółcią i eskuliną dla bakterioidów(agar WWE)	Selektywna i różnicowa; do izolacji bakterii z grupy Bacteroides fragilis
Agar z krwią z kanamycyną i wankomycyną(KVLB)	Selektywne dla większości nie tworzących przetrwalników Bakterie Gram-ujemne
Agar fenyloetylowy(GROSZEK)	Hamuje wzrost Proteus i innych enterobakterii; stymuluje wzrost bakterii beztlenowych Gram-dodatnich i Gram-ujemnych
Bulion tioglikolowy(THIO)	W szczególnych sytuacjach
Agar żółtkowy(OKO)	Aby wyizolować Clostridia
Agar cykloseryna-cefoksytyna-fruktoza(CCFA) lub agar z mannitem cykloseryny (CMA) lub agar z cykloseryną mannitu (CMBA)	Selektywne dla C. difficile
Kryształowo-fioletowo-erytromycyna-nowy agar(CVEB)	Do izolacji Fusobacterium nucleatum i Leptotrichia buccalis
Bakteroid gingivalis agar(BGA)	Do izolacji Porphyromonas gingivalis

Tabela 8. Selektywne czynniki dla bezwzględnych beztlenowców

organizmy	Selektywni agenci
Obowiązkowe beztlenowce z materiału klinicznego	neomycyna (70mg/l) kwas nalidyksowy (10 mg/l)
Actinomyces spp.	metronidazol (5 mg/l)
Bacteroides spp. Fusobacterium spp.	kwas nalidyksowy (10 mg/l) + wankomycyna (2,5 mg/l)
Bacteroides urealytica	kwas nalidyksowy (10 mg/l) teikoplanina (20 mg/l)
Clostridium difficile	cykloseryna (250 mg/l) cefoksytyna (8 mg/l)
Fusobacterium	ryfampicyna (50 mg/l) neomycyna (100 mg/l) wankomycyna (5 mg/l)

Rozliczenie wyników odbywa się poprzez opisanie właściwości kulturowych wyhodowanych mikroorganizmów, pigmentacji kolonii, fluorescencji, hemolizy. Następnie z kolonii przygotowuje się rozmaz barwiony metodą Grama i w ten sposób wykrywa się bakterie Gram-ujemne i Gram-dodatnie, opisuje właściwości mikroskopowe i morfologiczne. Następnie drobnoustroje z każdego typu kolonii są przeszczepiane i hodowane w bulionie tioglikolowym z dodatkiem heminy i witaminy K. Morfologia kolonii, obecność barwnika, właściwości hemolityczne oraz charakterystyka bakterii w barwieniu metodą Grama umożliwiają wstępnie zidentyfikować i rozróżnić beztlenowce. W rezultacie wszystkie mikroorganizmy beztlenowe można podzielić na 4 grupy: 1) Gr + cocci; 2) pałeczki Gr+ lub coccobacilli: 3) Gr-cocci; 4) Gr-bacilli lub coccobacilli (20, 22, 32).

Tabela 9. Czas trwania inkubacji i częstotliwość badań

kultury bakterii beztlenowych

Rodzaj upraw	Czas inkubacji*	Częstotliwość badań
Krew		Codziennie do 7 i po 14
Płyny		Codzienny
Ropnie, rany		Codzienny
Drogi lotnicze Aspirat przeztchawiczy plwociny Wydzielina z oskrzeli		Codzienny raz Codzienny Codzienny
Układ moczowo-płciowy Pochwa, macica Prostata		Codzienny Codzienny Codzienny raz
Kał		Codzienny
Beztlenowce Brucella promieniowce		Codzienny 3 razy w tygodniu 1 raz w tygodniu

*do czasu uzyskania wyniku negatywnego

Na trzecim etapie badań przeprowadzana jest dłuższa identyfikacja. Ostateczna identyfikacja opiera się na określeniu właściwości biochemicznych, cech fizjologicznych i genetycznych, czynników patogeniczności w teście neutralizacji toksyn. Chociaż kompletność identyfikacji beztlenowców może się znacznie różnić, niektóre proste testy z dużym prawdopodobieństwem pozwalają na identyfikację czystych kultur bakterii beztlenowych - barwienie Grama, ruchliwość, wrażliwość na niektóre antybiotyki przy użyciu krążków papierowych i właściwości biochemicznych.

5. Terapia antybakteryjna w przypadku infekcji beztlenowych

Szczepy drobnoustrojów opornych na antybiotyki powstały i zaczęły się rozprzestrzeniać natychmiast po powszechnym wprowadzeniu antybiotyków do praktyki klinicznej. Mechanizmy powstawania oporności drobnoustrojów na antybiotyki są złożone i różnorodne. Są one podzielone na podstawowe i nabyte. Nabyta odporność powstaje pod wpływem leków. Głównymi sposobami jego powstawania są: a) inaktywacja i modyfikacja leku przez układy enzymatyczne bakterii i jego przeniesienie do postaci nieaktywnej; b) zmniejszenie przepuszczalności struktur powierzchniowych komórki bakteryjnej; c) naruszenie mechanizmów transportu do komórki; d) zmiana funkcjonalnego znaczenia celu dla leku. Mechanizmy nabytej oporności drobnoustrojów związane są ze zmianami na poziomie genetycznym: 1) mutacjami; 2) rekombinacje genetyczne. Niezwykle istotną rolę odgrywają mechanizmy wewnątrz- i międzygatunkowego przenoszenia pozachromosomalnych czynników dziedziczności – plazmidów i transpozonów, które kontrolują oporność drobnoustrojów na antybiotyki i inne leki chemioterapeutyczne (13, 20, 23, 33, 39). Informacje na temat oporności na antybiotyki u mikroorganizmów beztlenowych uzyskano zarówno z badań epidemiologicznych, jak i genetycznych/molekularnych. Dane epidemiologiczne wskazują, że od około 1977 roku nastąpił wzrost oporności bakterii beztlenowych na kilka antybiotyków: tetracyklinę, erytromycynę, penicylinę, ampicylinę, amoksycylinę, tikarcylinę, imipenem, metronidazol, chloramfenikol itp. Około 50% bakterioidów jest opornych na penicylina G i tetracyklina.

Przepisując antybiotykoterapię mieszaną infekcję tlenowo-beztlenową należy odpowiedzieć na szereg pytań: a) gdzie zlokalizowana jest infekcja?; b) jakie drobnoustroje najczęściej wywołują infekcje w tym obszarze?; c) jakie jest nasilenie choroby?; d) jakie są wskazania kliniczne do stosowania antybiotyków?; e) jakie jest bezpieczeństwo stosowania tego antybiotyku?; e) jaki jest jego koszt?; g) jakie są jego właściwości antybakteryjne?; h) jaki jest średni czas zażywania narkotyków do wyleczenia?; i) czy przekracza barierę krew-mózg?; j) jak wpływa na prawidłową mikroflorę?; k) Czy do leczenia tego procesu potrzebne są dodatkowe środki przeciwdrobnoustrojowe?

5.1. Charakterystyka głównych środków przeciwdrobnoustrojowych stosowanych w leczeniu infekcji beztlenowych

P e n i c l l i n s. Historycznie penicylina G była szeroko stosowana w leczeniu zakażeń mieszanych. Jednak beztlenowce, zwłaszcza bakterie z grupy Bacteroides fragilis, mają zdolność wytwarzania beta-laktamazy i niszczenia penicyliny, co zmniejsza jej skuteczność terapeutyczną. Ma niską lub umiarkowaną toksyczność, niewielki wpływ na normalną mikroflorę, ale ma niewielką aktywność wobec beztlenowców wytwarzających beta-laktamazę i jest ograniczona wobec mikroorganizmów tlenowych. Półsyntetyczne penicyliny (naflacyna, oksacylina, kloksacylina i dikloksacylina) są mniej aktywne i nie nadają się do leczenia infekcji beztlenowych. Porównawcze randomizowane badanie skuteczności klinicznej penicyliny i klindamycyny w leczeniu ropni płuc wykazało, że stosowanie klindamycyny u pacjentów skróciło okres gorączki i wytwarzania plwociny odpowiednio do 4,4 w porównaniu z 7,6 dnia i do 4,2 w porównaniu z 8 dniami. Średnio 8 (53%) z 15 pacjentów leczonych penicyliną zostało wyleczonych, podczas gdy wszystkich 13 pacjentów (100%) leczonych klindamycyną zostało wyleczonych. Klindamycyna jest skuteczniejsza niż penicylina w leczeniu pacjentów z beztlenowym ropniem płuca. Średnio skuteczność penicyliny wynosiła około 50-55%, a klindamycyny 94-95%. Jednocześnie w materiale stwierdzono obecność drobnoustrojów opornych na penicylinę, co było częstym powodem nieskuteczności penicyliny i jednocześnie wskazywało, że klindamycyna jest lekiem z wyboru na początku leczenia.

T e tra c i klin y. Tetracykliny charakteryzują się również niskim

która toksyczność i minimalny wpływ na normalną mikroflorę. Tetracykliny również były wcześniej lekami z wyboru, ponieważ prawie wszystkie beztlenowce były na nie wrażliwe, ale od 1955 r. nastąpił wzrost oporności na nie. Bardziej aktywne z nich są doksycyklina i monocyklina, ale również znaczna liczba beztlenowców jest na nie oporna.

Chl o r a m e n i c z o l. Chloramfenikol ma znaczący wpływ na prawidłową mikroflorę. Lek ten jest niezwykle skuteczny wobec bakterii z grupy B. fragilis, dobrze przenika do płynów ustrojowych i tkanek oraz wykazuje średnią aktywność wobec innych beztlenowców. W związku z tym został wykorzystany jako lek z wyboru w leczeniu chorób zagrażających życiu, zwłaszcza tych dotyczących ośrodkowego układu nerwowego, ponieważ łatwo przenika przez barierę krew-mózg. Niestety chloramfenikol ma szereg wad (zależne od dawki hamowanie hematopoezy). Ponadto może powodować idiosenkratyczną, niezależną od dawki niedokrwistość aplastyczną. Niektóre szczepy C. perfringens i B. fragilis są zdolne do redukcji grupy p-nitro chloramfenikolu i selektywnej inaktywacji jej. Niektóre szczepy B. fragilis są wysoce odporne na chloramfenikol, ponieważ wytwarzają acetylotransferazę. Obecnie stosowanie chloramfenikolu w leczeniu infekcji beztlenowych znacznie spadło zarówno ze względu na obawę przed wystąpieniem ubocznych skutków hematologicznych, jak i pojawienie się wielu nowych, skutecznych leków.

K l i n d a m i c i n. Klindamycyna jest 7(S)-chloro-7-dezoksypochodną linkomycyny. Chemiczna modyfikacja cząsteczki linkomycyny przyniosła kilka korzyści: lepsze wchłanianie z przewodu pokarmowego, ośmiokrotny wzrost aktywności wobec tlenowych ziarniaków Gram-dodatnich, rozszerzenie spektrum działania wobec wielu Gram-dodatnich i Gram-ujemnych bakterii beztlenowych, jak jak również pierwotniaki (Toxoplasma i Plasmodium). Wskazania terapeutyczne do stosowania klindamycyny są dość szerokie (tab. 10).

Bakterie Gram-dodatnie. Wzrost ponad 90% szczepów S. aureus jest hamowany w obecności klindamycyny w stężeniu 0,1 µg/ml. W stężeniach, które można łatwo osiągnąć w surowicy, klindamycyna jest aktywna przeciwko Str. pyogenes, ul. zapalenie płuc, ul. viridany. Większość szczepów Bacillus błonicy jest również wrażliwa na klindamycynę. W odniesieniu do Gram-ujemnych bakterii tlenowych Klebsiella, Escherichia coli, Proteus, Enterobacter, Shigella, Serratia, Pseudomonas antybiotyk ten jest nieaktywny. Gram-dodatnie ziarniaki beztlenowe, w tym wszystkie rodzaje peptokoków, peptostreptococci, a także propionobakterie, bifidumbacteria i lactobacilli, są na ogół bardzo wrażliwe na klindamycynę. Klinicznie istotne Clostridia są również na nią wrażliwe - C. perfringens, C. tetani, a także inne Clostridia, często spotykane w zakażeniach śródotrzewnowych i miednicy mniejszej.

Tabela 10. Wskazania do stosowania klindamycyny

Biotop	Choroba
górne drogi oddechowe	Zapalenie migdałków, gardła, zatok, ucha środkowego, szkarlatyna
dolne drogi oddechowe	Zapalenie oskrzeli, zapalenie płuc, ropniak, ropień płuca
Skóra i tkanka miękka	Pioderma, czyraki, cellulit, liszajec, ropnie, rany
Kości i stawy	Zapalenie kości i szpiku, septyczne zapalenie stawów
Narządy miednicy	Zapalenie błony śluzowej macicy, zapalenie tkanki łącznej, infekcje mankietu pochwy, ropnie jajowo-jajnikowe
Jama ustna	ropień przyzębia, paradontoza
Posocznica, zapalenie wsierdzia

Beztlenowce Gram-ujemne – bakterioidy, fusobakterie i veillonella – są bardzo wrażliwe na klindamycynę. Jest dobrze rozprowadzany w wielu tkankach i płynach biologicznych, dzięki czemu w większości z nich osiągane są znaczne stężenia terapeutyczne, ale nie przenika przez barierę krew-mózg. Szczególnie interesujące są stężenia leku w migdałkach, tkance płucnej, wyrostku robaczkowym, jajowodach, mięśniach, skórze, kościach, mazi stawowej. Klindamycyna jest skoncentrowana w neutrofilach i makrofagach. Makrofagi pęcherzykowe koncentrują klindamycynę wewnątrzkomórkowo (30 minut po podaniu stężenie przekracza 50-krotnie stężenie zewnątrzkomórkowe). Zwiększa aktywność fagocytarną neutrofili i makrofagów, stymuluje chemotaksję, hamuje produkcję niektórych toksyn bakteryjnych.

M e t r o n i d a z o l. Ten chemioterapeutyk charakteryzuje się bardzo niską toksycznością, działa bakteriobójczo na beztlenowce i nie jest inaktywowany przez bakterioidowe beta-laktamazy. Bacteroides są na niego bardzo wrażliwe, ale niektóre ziarniaki beztlenowe i beztlenowe pałeczki Gram-dodatnie mogą być oporne. Metronidazol jest nieaktywny wobec mikroflory tlenowej iw leczeniu posocznicy wewnątrzbrzusznej należy go łączyć z gentamycyną lub niektórymi aminoglikozydami. Może powodować przejściową neutropenię. Skojarzenia metronidazol-gentamycyna i klindamycyna-gentamycyna nie różnią się skutecznością w leczeniu ciężkich zakażeń w obrębie jamy brzusznej.

C e f o k s t i n. Ten antybiotyk należy do cefalosporyn, ma niską i umiarkowaną toksyczność i z reguły nie jest inaktywowany przez bakterioidową beta-laktamazę. Chociaż istnieją doniesienia o przypadkach izolacji opornych szczepów bakterii beztlenowych ze względu na obecność białek wiążących antybiotyki, które ograniczają transport leku do komórki bakteryjnej. Odporność bakterii B. fragilis na cefoksytynę waha się od 2 do 13%. Polecany jest w leczeniu umiarkowanych infekcji jamy brzusznej.

C e fo t e t a n. Lek ten jest bardziej aktywny wobec Gram-ujemnych mikroorganizmów beztlenowych w porównaniu z cefoksytyną. Stwierdzono jednak, że około 8% do 25% szczepów B. fragilis jest na nią opornych. Jest skuteczny w leczeniu infekcji ginekologicznych i brzusznych (ropnie, zapalenie wyrostka robaczkowego).

C e f met a z o l. Jest podobny w spektrum do cefoksytyny i cefotetanu (bardziej aktywny niż cefoksytyna, ale mniej aktywny niż cefotetan). Może być stosowany w leczeniu łagodnych do umiarkowanych infekcji.

C e f a pera z o n. Charakteryzuje się niską toksycznością, wyższą aktywnością w porównaniu z powyższymi trzema lekami, ale zidentyfikowano do niego od 15 do 28% opornych szczepów bakterii beztlenowych. Oczywiste jest, że nie jest to lek z wyboru w leczeniu infekcji beztlenowych.

C e f t i z o k c ja m. Jest bezpiecznym i skutecznym lekiem w leczeniu infekcji nóg u pacjentów z cukrzycą, urazowym zapaleniem otrzewnej, zapaleniem wyrostka robaczkowego.

M e r o p e n e m. Meropenem, nowy karbapenem metylowany w pozycji 1, jest odporny na działanie dehydrogenazy nerkowej 1, która go rozkłada. Jest około 2-4 razy bardziej aktywny niż imipenem na tlenowe drobnoustroje Gram-ujemne, w tym na przedstawicieli enterobakterii, hemofilii, Pseudomonas, Neisseria, ale nieco słabiej na gronkowce, niektóre paciorkowce i enterokoki. Jego działanie na gram-dodatnie bakterie beztlenowe jest podobne do działania imipenemu.

5.2. Kombinacje leków beta-laktamowych i inhibitorów beta-laktamaz

Rozwój inhibitorów beta-laktamaz (klawulanian, sulbaktam, tazobaktam) jest obiecującym kierunkiem i pozwala na zastosowanie nowych środków beta-laktamowych zabezpieczonych przed hydrolizą z ich równoczesnym podawaniem: a) amoksycylina – kwas klawulanowy – ma szersze spektrum działania przeciwdrobnoustrojowego niż sama amoksycylina i jest zbliżona skutecznością do kombinacji antybiotyków - penicyliny z kloksacyliną; b) tikarcylina-kwas klawulanowy – rozszerza spektrum działania przeciwdrobnoustrojowego antybiotyku na bakterie wytwarzające beta-lakgamazę, takie jak gronkowce, hemofilia, Klebsiella i bakterie beztlenowe, w tym bakterioidy. Minimalne stężenie hamujące tej mieszaniny było 16 razy niższe niż tikarcyliny; c) ampicylina-sulbaktam - w połączeniu w stosunku 1: 2 ich spektrum znacznie się rozszerza i obejmuje gronkowce, hemofilię, Klebsiella i większość bakterii beztlenowych. Tylko 1% bakterioidów jest odpornych na tę kombinację; d) cefaperazon-sulbaktam – w stosunku 1:2 również znacząco rozszerza spektrum działania przeciwbakteryjnego; e) piperacylina-tazobaktam. Tazobaktam jest nowym inhibitorem beta-laktamów, który działa na wiele beta-laktamaz. Jest bardziej stabilny niż kwas klawulanowy. Ta kombinacja może być uważana za lek do empirycznej monoterapii ciężkich zakażeń wielobakteryjnych, takich jak zapalenie płuc, posocznica wewnątrzbrzuszna, martwicze zakażenie tkanek miękkich, zakażenia ginekologiczne; f) imipenem-cylastatyna - imipenem należy do nowej klasy antybiotyków znanych jako karbapenemy. Stosuje się go w połączeniu z cylastatyną w stosunku 1:1. Ich skuteczność jest podobna do klindamycyny-aminoglikozydów w leczeniu mieszanych beztlenowych zakażeń chirurgicznych.

5.3. Znaczenie kliniczne określenia wrażliwości drobnoustrojów beztlenowych na leki przeciwdrobnoustrojowe

Rosnąca oporność wielu bakterii beztlenowych na środki przeciwdrobnoustrojowe rodzi pytanie, jak i kiedy uzasadnione jest określenie wrażliwości na antybiotyki. Koszt tych testów i czas potrzebny do uzyskania ostatecznego wyniku jeszcze bardziej podnoszą wagę tej kwestii. Oczywiste jest, że początkowa terapia infekcji beztlenowych i mieszanych powinna być empiryczna. Opiera się na specyfice infekcji i określonym spektrum mikroflory bakteryjnej w danej infekcji. Należy wziąć pod uwagę stan patofizjologiczny i wcześniejsze stosowanie środków przeciwdrobnoustrojowych, które mogą mieć zmodyfikowaną mikroflorę prawidłową i uszkodzoną, a także wyniki barwienia metodą Grama. Kolejnym krokiem powinna być wczesna identyfikacja dominującej mikroflory. Informacja o spektrum specyficznej wrażliwości przeciwbakteryjnej dominującej mikroflory. Informacja o spektrum gatunkowej wrażliwości przeciwbakteryjnej dominującej mikroflory pozwoli nam ocenić adekwatność wstępnie wybranego schematu leczenia. W leczeniu, jeśli przebieg zakażenia jest niekorzystny, konieczne jest zastosowanie oznaczenia wrażliwości czystej kultury na antybiotyki. W 1988 roku grupa robocza ad hoc ds. beztlenowców dokonała przeglądu zaleceń i wskazań do badania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe u beztlenowców.

Oznaczenie wrażliwości bakterii beztlenowych jest zalecane w następujących przypadkach: a) konieczne jest ustalenie zmian wrażliwości bakterii beztlenowych na niektóre leki; b) konieczność określenia spektrum działania nowych leków; c) w przypadkach zapewnienia monitoringu bakteriologicznego indywidualnego pacjenta. Ponadto pewne sytuacje kliniczne mogą również dyktować potrzebę jego wdrożenia: 1) w przypadku nieskutecznie wybranego początkowego schematu leczenia przeciwdrobnoustrojowego i utrzymywania się infekcji; 2) gdy wybór skutecznego leku przeciwdrobnoustrojowego odgrywa kluczową rolę w przebiegu choroby; .3) gdy wybór leku w tym konkretnym przypadku jest trudny.

Należy pamiętać, że z klinicznego punktu widzenia istnieją inne punkty: a) zwiększenie oporności bakterii beztlenowych na leki przeciwdrobnoustrojowe jest dużym problemem klinicznym; b) istnieje spór wśród klinicystów co do klinicznej skuteczności niektórych leków przeciwko infekcjom beztlenowym; c) istnieją rozbieżności w wynikach wrażliwości drobnoustrojów na leki in vitro i ich skuteczności in vivo; r) Interpretacja wyników, która jest akceptowalna dla tlenowców, nie zawsze może mieć zastosowanie do beztlenowców. Obserwacja wrażliwości/odporności 1200 szczepów bakteryjnych wyizolowanych z różnych biotopów wykazała, że znaczna ich część jest wysoce oporna na najczęściej stosowane leki (tab. 11).

Tabela 11. Odporność bakterii beztlenowych na

powszechnie stosowane antybiotyki

bakteria	Antybiotyki	Procent form odpornych
Peptostreptokoki	Penicylina Erytromycyna Klindamycyna
Clostridium perfringens	Penicylina Cefoksytyna Metronidazol Erytromycyna Klindamycyna
Bacteroides fragilis	Cefoksytyna Metronidazol Erytromycyna Klindamycyna
Weilonella	Penicylina Metronidazol Erytromycyna

Jednocześnie w licznych badaniach ustalono minimalne stężenia hamujące najczęściej stosowanych leków, które są odpowiednie do leczenia infekcji beztlenowych (tab. 12).

Tabela 12 Minimalne stężenia hamujące

antybiotyki na mikroorganizmy beztlenowe

Minimalne stężenie hamujące (MIC) to najniższe stężenie antybiotyku, które całkowicie hamuje rozwój drobnoustrojów. Bardzo ważnym problemem jest standaryzacja i kontrola jakości oznaczania wrażliwości drobnoustrojów na antybiotyki (stosowane testy, ich standaryzacja, przygotowanie pożywek, odczynników, przeszkolenie personelu wykonującego ten test, użycie kultur referencyjnych: B. fragilis-ATCC 25285; B. thetaiotaomicron - ATCC 29741; C. perfringens-ATCC 13124; E. lentum-ATCC 43055).

W położnictwie i ginekologii do leczenia infekcji beztlenowych stosuje się penicylinę, niektóre cefalosporyny 3-4 generacji, linkomycynę, chloramfenikol. Jednak najskuteczniejszymi lekami przeciwtlenowymi są przedstawiciele grupy 5-nitroimidazolu - metronidazol, tinidazol, ornidazol i klindamycyna. Skuteczność leczenia samym metronidazolem wynosi w zależności od choroby 76-87%, a tinidazolem 78-91%. Połączenie imidazoli z aminoglikozydami, cefalosporynami I-II generacji zwiększa skuteczność leczenia do 90-95%. Istotną rolę w leczeniu infekcji beztlenowych odgrywa klindamycyna. Połączenie klindamycyny z gentamycyną jest referencyjną metodą leczenia chorób ropno-zapalnych żeńskich narządów płciowych, zwłaszcza w przypadku infekcji mieszanych.

6. Korekta mikroflory jelitowej

W ciągu ostatniego stulecia normalna mikroflora jelitowa człowieka była przedmiotem aktywnych badań. Liczne badania wykazały, że rodzima mikroflora przewodu pokarmowego odgrywa istotną rolę w zapewnieniu zdrowia organizmu żywiciela, odgrywając ważną rolę w dojrzewaniu i utrzymaniu funkcji układu odpornościowego, a także w zapewnieniu szeregu procesy metaboliczne. Punktem wyjścia do rozwoju objawów dysbiotycznych w jelicie jest supresja rodzimej mikroflory beztlenowej – bifidobakterii i pałeczek kwasu mlekowego, a także stymulacja rozmnażania się mikroflory oportunistycznej – enterobakterii, gronkowców, paciorkowców, clostridia, candida. I. I. Miecznikow sformułował główne zapisy naukowe dotyczące roli rodzimej mikroflory jelita, jej ekologii i przedstawił ideę zastąpienia szkodliwej mikroflory korzystną w celu zmniejszenia zatrucia organizmu i przedłużenia życia człowieka. Pomysł I. I. Miecznikowa został dalej rozwinięty przy opracowywaniu szeregu preparatów bakteryjnych stosowanych do korygowania lub „normalizacji” ludzkiej mikroflory. Nazywane są „eubiotykami” lub „probiotykami” i zawierają żywe lub

suszone bakterie z rodzajów Bifidobacterium i Lactobacillus. Wykazano działanie immunomodulacyjne szeregu eubiotyków (odnotowano stymulację wytwarzania przeciwciał, aktywność makrofagów otrzewnowych). Ważne jest również to, że szczepy bakterii eubiotycznych wykazują oporność chromosomową na antybiotyki, a ich łączne podawanie zwiększa przeżywalność zwierząt. Najbardziej rozpowszechnione formy laktobakterii i bifidumbakterii z mleka fermentowanego (4).

7. Wnioski

Infekcja beztlenowa to jeden z nierozwiązanych problemów współczesnej medycyny (zwłaszcza chirurgii, ginekologii, terapii, stomatologii). Trudności diagnostyczne, nieprawidłowa ocena danych klinicznych, błędy w leczeniu, antybiotykoterapii itp. prowadzą do wysokiej śmiertelności u pacjentów z infekcjami beztlenowymi i mieszanymi. Wszystko to wskazuje na konieczność szybkiego wyeliminowania zarówno istniejącego braku wiedzy w tym obszarze bakteriologii, jak i znaczących niedociągnięć w diagnostyce i terapii.

organizmy beztlenowe

Bakterie tlenowe i beztlenowe są wstępnie identyfikowane w pożywce płynnej za pomocą gradientu stężenia O 2 :
1. Obowiązkowy aerobik(wymagające tlenu) bakterie przeważnie zebrane w górnej części rurki, aby wchłonąć maksymalną ilość tlenu. (Wyjątek: prątki - wzrost filmu na powierzchni dzięki błonie woskowo-lipidowej.)
2. Obowiązkowy beztlenowy bakterie gromadzą się na dnie, aby uniknąć tlenu (lub nie rosnąć).
3. Opcjonalne bakterie gromadzą się głównie w górnej części (co jest korzystniejsze niż glikoliza), ale można je znaleźć w całej pożywce, ponieważ nie są zależne od O 2 .
4. Mikroaerofile gromadzą się w górnej części rurki, ale ich optimum to niskie stężenie tlenu.
5. Aerotolerancja beztlenowce nie reagują na stężenia tlenu i są równomiernie rozmieszczone w probówce.

Beztlenowce- organizmy, które otrzymują energię przy braku dostępu tlenu przez fosforylację substratu, końcowe produkty niepełnego utleniania substratu mogą zostać utlenione w celu wytworzenia większej ilości energii w postaci ATP w obecności końcowego akceptora protonów przez organizmy, które przeprowadzają utlenianie fosforylacja.

Beztlenowce to rozległa grupa organizmów, zarówno na poziomie mikro, jak i makro:

mikroorganizmy beztlenowe- rozległa grupa prokariontów i kilka pierwotniaków.
makroorganizmy - grzyby, glony, rośliny i niektóre zwierzęta (klasa otwornic, większość robaków pasożytniczych (klasa przywr, tasiemce, glisty (na przykład ascaris)).

Ponadto beztlenowe utlenianie glukozy odgrywa ważną rolę w pracy mięśni poprzecznie prążkowanych zwierząt i ludzi (szczególnie w stanie niedotlenienia tkanek).

Klasyfikacja beztlenowców

Zgodnie z klasyfikacją ustaloną w mikrobiologii wyróżnia się:

Beztlenowce fakultatywne
Beztlenowce kapneistyczne i mikroaerofile
Beztlenowce tolerujące aerodynamikę
Umiarkowanie surowe beztlenowce
obowiązkowe beztlenowce

Jeśli organizm jest w stanie przełączyć się z jednego szlaku metabolicznego na inny (na przykład z oddychania beztlenowego na oddychanie tlenowe i odwrotnie), to jest on warunkowo określany jako fakultatywne beztlenowce .

Do 1991 roku wyróżniano klasę mikrobiologii beztlenowce kapneistyczne, wymagające niskiego stężenia tlenu i podwyższonego stężenia dwutlenku węgla (typ bydlęcy Brucella - B. poronienie)

Umiarkowanie ścisły organizm beztlenowy przeżywa w środowisku z cząsteczkowym O 2 , ale nie rozmnaża się. Mikroaerofile są w stanie przetrwać i namnażać się w środowisku o niskim ciśnieniu parcjalnym O 2 .

Jeśli organizm nie jest w stanie „przestawić się” z oddychania beztlenowego na tlenowy, ale nie umiera w obecności tlenu cząsteczkowego, to należy do grupy beztlenowce tolerujące aerodynamikę. Na przykład kwas mlekowy i wiele bakterii masłowych

konieczny beztlenowce w obecności tlenu cząsteczkowego O 2 giną - np. przedstawiciele rodzaju bakterii i archeonów: Bakteroidy, Fusobacterium, Butyrivibrio, Metanobakteria). Takie beztlenowce stale żyją w środowisku pozbawionym tlenu. Beztlenowce obowiązkowe obejmują niektóre bakterie, drożdże, wiciowce i orzęski.

Toksyczność tlenu i jego form dla organizmów beztlenowych

Środowisko bogate w tlen jest agresywne w stosunku do organicznych form życia. Wynika to z powstawania reaktywnych form tlenu w ciągu życia lub pod wpływem różnych form promieniowania jonizującego, które są znacznie bardziej toksyczne niż tlen cząsteczkowy O 2 . Czynnikiem decydującym o żywotności organizmu w środowisku tlenowym jest obecność funkcjonalnego układu antyoksydacyjnego zdolnego do eliminowania: anionu ponadtlenkowego (O 2 -), nadtlenku wodoru (H 2 O 2), tlenu singletowego (O .) oraz także tlen cząsteczkowy ( O 2) z wewnętrznego środowiska organizmu. Najczęściej taką ochronę zapewnia jeden lub więcej enzymów:

dysmutaza ponadtlenkowa eliminująca anion ponadtlenkowy (O 2 -) bez korzyści energetycznych dla organizmu
katalaza, eliminująca nadtlenek wodoru (H 2 O 2) bez korzyści energetycznych dla organizmu
cytochrom- enzym odpowiedzialny za przenoszenie elektronów z NAD H do O 2. Proces ten zapewnia organizmowi znaczną korzyść energetyczną.

Organizmy tlenowe zawierają najczęściej trzy cytochromy, fakultatywne beztlenowce - jeden lub dwa, bezwzględne beztlenowce nie zawierają cytochromów.

Mikroorganizmy beztlenowe mogą aktywnie oddziaływać na środowisko, tworząc odpowiedni potencjał redox środowiska (np. Cl.perfringens). Niektóre wysiewane kultury mikroorganizmów beztlenowych, zanim zaczną się namnażać, obniżają pH 2 0 z wartości do , chroniąc się barierą redukcyjną, inne - aerotolerancyjne - wytwarzają nadtlenek wodoru podczas swojej aktywności życiowej, zwiększając pH 2 0.

Jednocześnie glikoliza jest charakterystyczna tylko dla beztlenowców, które w zależności od końcowych produktów reakcji dzieli się na kilka rodzajów fermentacji:

fermentacja kwasu mlekowego Lactobacillus ,Paciorkowiec , Bifidobakteria, a także niektóre tkanki zwierząt wielokomórkowych i ludzi.
fermentacja alkoholowa - saccharomycetes, candida (organizmy z królestwa grzybów)
kwas mrówkowy – rodzina enterobakterii
masłowy - niektóre rodzaje Clostridia
kwas propionowy - propionobakterie (na przykład Propionibacterium acnes)
fermentacja z uwolnieniem wodoru cząsteczkowego - niektóre gatunki Clostridium, fermentacja Stickland
fermentacja metanowa - np. Metanobakteria

W wyniku rozpadu glukozy zużywane są 2 cząsteczki i syntetyzowane są 4 cząsteczki ATP. Zatem całkowita wydajność ATP wynosi 2 cząsteczki ATP i 2 cząsteczki NAD·H2. Otrzymany podczas reakcji pirogronian jest wykorzystywany przez komórkę w różny sposób, w zależności od rodzaju fermentacji.

Antagonizm fermentacji i rozpadu

W procesie ewolucji ukształtował się i utrwalił biologiczny antagonizm mikroflory fermentacyjnej i gnilnej:

Rozpadowi węglowodanów przez mikroorganizmy towarzyszy znaczny spadek w środowisku, natomiast rozkładowi białek i aminokwasów towarzyszy wzrost (alkalizacja). Adaptacja każdego z organizmów do określonej reakcji środowiska odgrywa ważną rolę w przyrodzie i życiu człowieka, np. dzięki procesom fermentacyjnym zapobiega się gniciu kiszonki, sfermentowanych warzyw i produktów mlecznych.

Hodowla organizmów beztlenowych

Schematyczna izolacja czystej kultury beztlenowców

Hodowla organizmów beztlenowych to głównie zadanie mikrobiologii.

Do uprawy beztlenowców stosuje się specjalne metody, których istotą jest usunięcie powietrza lub zastąpienie go specjalistyczną mieszanką gazów (lub gazów obojętnych) w szczelnych termostatach. - anaerostaty .

Innym sposobem hodowli beztlenowców (najczęściej mikroorganizmów) na pożywkach jest dodanie substancji redukujących (glukoza, kwas mrówkowy sodu itp.), które zmniejszają potencjał redoks.

Powszechne podłoża wzrostowe dla organizmów beztlenowych

Dla środowiska ogólnego Wilson - Blair bazą jest agar-agar z dodatkiem glukozy, siarczynu sodu i chlorku żelaza. Clostridia tworzą na tym podłożu czarne kolonie, redukując anion siarczynowy do anionu siarczkowego, który łączy się z kationami żelaza (II), tworząc czarną sól. Z reguły na głębokości kolumny agarowej na tym podłożu pojawiają się czarne kolonie.

Środa Kitta - Tarozzi składa się z bulionu mięsno-peptonowego, 0,5% glukozy oraz kawałków wątroby lub mięsa mielonego, które pochłaniają tlen z otoczenia. Przed wysiewem pożywkę ogrzewa się we wrzącej łaźni wodnej przez 20-30 minut w celu usunięcia powietrza z pożywki. Po wysiewie pożywkę natychmiast wypełnia się warstwą parafiny lub oleju parafinowego, aby odizolować ją od dostępu tlenu.

Ogólne metody hodowli organizmów beztlenowych

Paczka gazowa- system chemicznie zapewnia stałość mieszaniny gazów akceptowalnej dla wzrostu większości mikroorganizmów beztlenowych. W zamkniętym pojemniku woda reaguje z tabletkami borowodorku sodu i wodorowęglanu sodu, tworząc wodór i dwutlenek węgla. Wodór reaguje następnie z tlenem z mieszaniny gazów na katalizatorze palladowym, tworząc wodę, która już ponownie reaguje z hydrolizą borowodorku.

Ta metoda została zaproponowana przez Brewera i Olgaera w 1965 roku. Twórcy wprowadzili jednorazową saszetkę wytwarzającą wodór, która została później ulepszona do saszetek wytwarzających dwutlenek węgla zawierających wewnętrzny katalizator.

Metoda Zeisslera służy do izolowania czystych kultur beztlenowców tworzących zarodniki. Aby to zrobić, zaszczepić podłoże Kitt-Tarozzi, podgrzewać przez 20 minut w 80 ° C (aby zniszczyć formę wegetatywną), napełnić podłoże olejem wazelinowym i inkubować przez 24 godziny w termostacie. Następnie przeprowadza się wysiew na agarze z krwią cukrową w celu uzyskania czystych kultur. Po 24-godzinnej hodowli badane są kolonie będące przedmiotem zainteresowania - przesiewa się je na pożywce Kitt-Tarozzi (z późniejszą kontrolą czystości wyizolowanej kultury).

Metoda Fortnera

Metoda Fortnera- posiewy wykonuje się na szalce Petriego z pogrubioną warstwą podłoża, podzieloną na pół wąskim rowkiem wyciętym w agarze. Jedną połowę zaszczepia się kulturą bakterii tlenowych, drugą połowę zaszczepia się bakteriami beztlenowymi. Krawędzie kubka wypełnia się parafiną i inkubuje w termostacie. Początkowo obserwuje się wzrost mikroflory tlenowej, a następnie (po wchłonięciu tlenu) wzrost mikroflory tlenowej gwałtownie się zatrzymuje i rozpoczyna się wzrost mikroflory beztlenowej.

Metoda Weinberga służy do uzyskiwania czystych kultur beztlenowców bezwzględnych. Kultury wyhodowane na podłożu Kitta-Tarozzi przenosi się do bulionu cukrowego. Następnie za pomocą jednorazowej pipety Pasteura materiał przenosi się do wąskich probówek (probówek Vignal) z cukrowym agarem mięsno-peptonowym, zanurzając pipetę na dnie probówki. Zaszczepione probówki są szybko schładzane, co umożliwia utrwalenie materiału bakteryjnego na grubości utwardzonego agaru. Probówki są inkubowane w termostacie, a następnie badane są wyrosłe kolonie. Po znalezieniu interesującej kolonii, w jej miejscu wykonuje się nacięcie, materiał jest szybko pobierany i zaszczepiany na pożywce Kitta-Tarozzi (z późniejszą kontrolą czystości wyizolowanej kultury).

Metoda Pereca

Metoda Pereca- kulturę bakterii wprowadza się do roztopionego i schłodzonego agaru cukrowego i wylewa pod szkłem umieszczonym na patyczkach korkowych (lub fragmentach zapałek) na szalce Petriego. Metoda jest najmniej niezawodna ze wszystkich, ale jest dość prosta w użyciu.

Pożywka różnicowa - diagnostyczne pożywki

środowiska gissa("wiersz różnorodny")
Środa Odsprzedaj(Russell)
Środa Płoskirewa lub Baktoagar "Ż"
Agar bizmutu z siarczynem

Syk mediów: Do 1% wody peptonowej dodać 0,5% roztwór określonego węglowodanu (glukoza, laktoza, maltoza, mannitol, sacharoza itp.) i wskaźnik kwasowo-zasadowy Andrede, wlać do probówek, w których umieszcza się pływak do wychwytywania gazów produkty powstające podczas rozkładu węglowodorów.

Ressel środa(Russell) służy do badania właściwości biochemicznych enterobakterii (Shigella, Salmonella). Zawiera odżywczy agar-agar, laktozę, glukozę i wskaźnik (błękit bromotymolowy). Kolor podłoża jest trawiasto zielony. Zwykle przygotowywany w probówkach 5 ml ze ściętą powierzchnią. Siew odbywa się poprzez wstrzyknięcie w głąb kolumny i pociągnięcie wzdłuż ukośnej powierzchni.

Środa Płoskirew(Bactoagar Zh) jest zróżnicowanym podłożem diagnostycznym i selektywnym, ponieważ hamuje wzrost wielu mikroorganizmów i sprzyja rozwojowi bakterii chorobotwórczych (czynniki wywołujące dur brzuszny, dur brzuszny, czerwonkę). Bakterie laktozo-ujemne tworzą na tym podłożu bezbarwne kolonie, podczas gdy bakterie laktozo-dodatnie tworzą kolonie czerwone. Podłoże zawiera agar, laktozę, zieleń brylantową, sole żółciowe, sole mineralne, wskaźnik (czerwień neutralna).

Agar bizmutu z siarczynem Jest przeznaczony do izolowania salmonelli w czystej postaci z zakażonego materiału. Zawiera trawienie trypsyną, glukozę, czynniki wzrostu salmonelli, zieleń brylantową i agar. Zróżnicowane właściwości podłoża opierają się na zdolności Salmonelli do wytwarzania siarkowodoru, na ich odporności na obecność siarczku, zieleni brylantowej i cytrynianu bizmutu. Kolonie są oznaczone czarnym kolorem siarczku bizmutu (technika podobna do podłoża) Wilson - Blair).

Metabolizm organizmów beztlenowych

Metabolizm organizmów beztlenowych ma kilka odrębnych podgrup:

Beztlenowy metabolizm energetyczny w tkankach człowiek oraz Zwierząt

Produkcja energii beztlenowej i tlenowej w tkankach ludzkich

Niektóre tkanki zwierząt i ludzi charakteryzują się zwiększoną odpornością na hipoksję (zwłaszcza tkanka mięśniowa). W normalnych warunkach synteza ATP zachodzi w warunkach tlenowych, a podczas intensywnej aktywności mięśniowej, gdy dostarczanie tlenu do mięśni jest utrudnione, w stanie niedotlenienia, a także podczas reakcji zapalnych w tkankach, dominują beztlenowe mechanizmy regeneracji ATP. W mięśniach szkieletowych zidentyfikowano 3 rodzaje beztlenowych i tylko jeden tlenowy szlak regeneracji ATP.

3 rodzaje beztlenowych szlaków syntezy ATP

Anaerobowe obejmują:

Mechanizm fosfatazy kreatynowej (fosfogenicznej lub mleczanowej) - refosforylacja między fosforanem kreatyny a ADP
Miokinaza - synteza (w przeciwnym razie resynteza) ATP w reakcji transfosforylacji 2 cząsteczek ADP (cyklazy adenylanowej)
Glikolityczny - beztlenowy rozkład zapasów glukozy lub glikogenu we krwi, kończący się tworzeniem

KATEGORIE

USG klatki piersiowej

POPULARNE ARTYKUŁY

	Dziesięć znaków miłości mężczyzny do kobiety - Zachowanie kochanka
	Cztery etapy życia i śmierci w Ajurwedzie
	Najbardziej romantyczne i kochające znaki zodiaku
	Jak zrozumieć, że kobieta cię nie kocha (znaczniki, że czas poszukać nowej)?
	„Biały Szum” i negocjacje ze światem umarłych

2022 „kingad.ru” - badanie ultrasonograficzne narządów ludzkich