Una macchia un'impronta di una formazione della pelle è efficace? Ottenere ed elaborare materiale per l'esame citologico

Impronta

preparazione per la microscopia, preparata toccando un vetrino sul tessuto o sull'organo in studio, seguita da essiccazione, fissaggio e colorazione.

1. Piccola enciclopedia medica. - M.: Enciclopedia medica. 1991-96 2. Primo soccorso. - M.: Grande Enciclopedia Russa. 1994 3. Dizionario enciclopedico di termini medici. - M.: Enciclopedia sovietica. - 1982-1984.

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Per determinare in quale condizione si trova il paziente, di quale malattia è affetto, il medico può spesso utilizzare l'uso di uno striscio di impronte. Questo metodo è ampiamente utilizzato in vari campi della medicina. Dermatologi, ginecologi, urologi, oncologi: ci ricorrono tutti con frequenza diversa. Un esame di striscio consente di determinare rapidamente la patologia e di prescrivere un corso di trattamento competente.

Uno striscio di impronta è una preparazione medica, viene preparato per l'uso premendo i tessuti contro un vetrino. Un'impronta fissata in modo sicuro e colorata viene esaminata al microscopio.

La macchia di impronta viene utilizzata per risolvere una serie di problemi. Molto spesso viene utilizzato per:

Non esiste un modo generale per prendere i tamponi. Il metodo utilizzato dal medico sarà diverso a seconda del problema del paziente e dell'obiettivo che sarà fissato per lo studio.

Per uno striscio, è possibile utilizzare materiale biologico proveniente da diverse parti del corpo. Se stiamo parlando della diagnosi di cancro al seno, il telecomando per le impronte verrà prelevato dal medico dai capezzoli della paziente. Se viene rilevata un'infezione, il pus verrà prelevato per un tampone da quella parte del corpo che soffriva di infiammazione. Più spesso usato per spalmare le secrezioni dagli organi addominali.

L'area problematica può essere localizzata non solo sulla superficie della pelle, ma anche sotto di essa. Se il medico si trova di fronte a una situazione simile, per ottenere le impronte, dovrà aprire la pelle. Per prendere una macchia da luoghi difficili da raggiungere, vengono utilizzati dispositivi speciali: tamponi, spazzole. Lo scarico rimane su di loro e quindi distribuito con cura sul vetrino.

Impronta di striscio da un'ulcera sui genitali

Urologi, venereologi e ginecologi devono spesso prendere le impronte dai genitali dei loro pazienti. Di solito puoi giudicare la natura dell'infezione raschiando dall'uretra o dall'uretra. Se il paziente soffre di una malattia meno grave, questo può essere sufficiente. Tuttavia, l'infezione non colpisce sempre l'uretra.

Le malattie sessualmente trasmissibili, cioè le malattie acquisite sessualmente, in primo luogo, non colpiscono l'uretra, ma la mucosa. Questo è tipico per la sifilide e l'herpes genitale, nonché per una serie di malattie simili. In un paziente che soffre di problemi venerei, si formano ulcere sulla membrana mucosa del perineo e un'impronta viene prelevata direttamente da questa zona interessata.

Per esaminare uno striscio prelevato da un'ulcera, gli specialisti utilizzano la microscopia in campo oscuro. In alcuni casi, non sarà in grado di determinare la malattia con assoluta precisione. Tuttavia, se il treponema viene rilevato a seguito dello studio delle impronte, il medico, senza esitazione, diagnostica la sifilide nel paziente.

Inoltre, la microscopia in campo oscuro consente di distinguere le ulcere che si verificano con l'herpes da qualsiasi altra malattia.

Impronta della testa del pene

Come oggetto per una macchia in un uomo, viene spesso utilizzata la testa del suo pene. La ragione di ciò potrebbe essere la balanopostite, in cui la testa stessa o il prepuzio che la ricopre si infiamma.

Un tampone prelevato dalla testa consente di identificare una serie di problemi. Può rilevare cocchi, E. coli, infezioni fungine e una serie di altre malattie.

Se la balanopostite, sospettata da un medico, è di origine erpetica, verrà presa un'impronta non solo dalla testa, ma anche dalle vescicole che sono apparse sulla pelle. Se le cellule Tzank si trovano nelle vescicole, il paziente soffre di herpes genitale. Il materiale biologico risultante viene colorato durante lo studio. Questa procedura è possibile solo quando si verificano le vesciche.

Impronta di striscio per esame citologico

Un esame citologico delle impronte viene effettuato dagli oncologi al fine di rilevare cellule atipiche nel materiale biologico ottenuto dopo gli strisci, indicando che il paziente è affetto da cancro. In questo caso, una macchia di impronta viene prelevata da un tumore, che può essere localizzato non solo sui genitali, ma anche su altre aree della pelle.

In uno studio citologico viene valutata l'intera composizione cellulare: vengono misurate le dimensioni dei nuclei e delle cellule.

La tecnica consente di diagnosticare non solo il cancro, ma anche altri processi non correlati all'oncologia.

Prepararsi a prendere un'impronta

Il paziente non può venire in ospedale e sottoporsi immediatamente a questa procedura. Richiede una lunga preparazione. Se si sospetta un'infezione in un paziente, non dovrebbe assumere antisettici e antibiotici prima di eseguire uno striscio, poiché sono modi per distorcere il quadro clinico e persino mascherare l'infezione.

Il paziente non deve lavare il luogo da cui verrà prelevato lo striscio. Se ciò è necessario per motivi igienici, è possibile lavare l'ambiente con normale acqua corrente senza l'uso di sapone e altri prodotti per la pulizia.

Placca, vescicole e altre formazioni che sono apparse sulla pelle possono interferire con l'assunzione di uno striscio. In questo caso, prima di avviare la procedura, verranno cancellati.

Come viene studiata un'impronta di striscio?

È necessario un microscopio per esaminare il tampone prelevato. Il vetrino su cui è posto il materiale biologico deve essere assolutamente pulito e asciutto.

Il farmaco può essere riparato in vari modi. Di solito, per la fissazione vengono utilizzati calore, alcol etilico, metilico o sublimato al 95%, vapori di acido acetico. Il metodo scelto dipende dal laboratorio in cui verrà effettuato lo studio. Oggi per la fissazione vengono utilizzati attivamente preparati derivati ​​​​specialmente, che sono una miscela di una serie di sostanze chimiche.

Il fissatore è di importanza decisiva per l'efficacia dell'intera procedura. Se uno specialista utilizza una soluzione di qualità insufficiente, avrà un effetto dannoso sulla struttura delle cellule nello striscio ed è probabile che dia un risultato falso negativo. Sulla base dei risultati dell'analisi, il paziente verrà informato che è assolutamente sano, ma in realtà non è così. Solo una soluzione di fissazione di alta qualità è in grado di mantenere la posizione corretta di tutti gli strisci e di identificare le formazioni batteriche tra di loro.

Il materiale fisso è soggetto a colorazione, che può essere indicativa e differenziale.

Gli autori): Jan Rybnicek, MVDr, Diplomate European College of Veterinary Dermatology
Organizzazioni: Servizio di dermatologia e dermatologia, Repubblica Ceca
Rivista: №2 - 2013

La maggior parte delle malattie della pelle ha un quadro clinico simile, ma si possono distinguere nove gruppi principali di disturbi dermatologici caratteristici:

- alopecia

– desquamazione/crostatura/seborrea

– macule/papule/pustole esplosive

– nodi/tumori

- alterazioni della pigmentazione

Una volta che il medico inizia ad assegnare ogni paziente a una qualsiasi delle categorie sopra elencate, diventerà molto più facile per lui formare un elenco di diagnosi differenziali e sviluppare un piano diagnostico. Va ricordato che al momento il paziente potrebbe avere malattie concomitanti, che rendono difficile stabilire la diagnosi principale. .

La diagnosi rapida presenta spesso difficoltà significative per il medico, quindi di seguito parleremo dei metodi di ricerca di laboratorio disponibili che richiedono tempo e denaro minimi. I test diagnostici più semplici e veloci utilizzati nella pratica sono:

– Raschiamenti cutanei

– Tricoscopia

- Pettinatura con pettine o spazzola

– Prova scozzese

– Test per i dermatofiti

– Citologia cutanea

Raschiamenti della pelle

Questo studio deve essere effettuato in tutti i casi! Per il raschiamento della pelle sono necessari i seguenti materiali e attrezzature: olio minerale, vetrini, una lama da bisturi o una spatola (curette), un microscopio.

Lo studio ai raggi della lampada di Wood è estremamente aspecifico, tuttavia, quando viene rilevata la fluorescenza, i peli interessati vengono strappati e sottoposti a ulteriore esame (microscopia dopo il trattamento del preparato con una soluzione alcalina, semina per rilevare una coltura di dermatofiti). Una soluzione al 10% di KOH viene applicata su un vetrino, i peli rimossi vengono posti, riscaldati su una fiamma, viene eseguita la microscopia, precedentemente coperta con un vetrino coprioggetto, prima a basso ingrandimento (obiettivo 10x), poi ad alto ingrandimento (40x obbiettivo). La colorazione con clorolattofenolo può essere utilizzata per una migliore visualizzazione.

Prova scozzese

Per ottenere materiale per la citologia, è necessario tagliare brevemente la lana dall'area selezionata, premere saldamente una striscia di nastro adesivo, quindi viene alternativamente abbassata in soluzioni coloranti, incollata su un vetrino e viene eseguita la microscopia. Questo metodo rileva facilmente i funghi di lievito del genere Malassezia sotto forma di "matrioska", batteri del genere Simonsiella(indica l'ingresso di saliva durante la leccata), ecc.

Tricoscopia

Con la microscopia si presta attenzione alla struttura e alla pigmentazione dei fusti piliferi, si esaminano le punte dei capelli, si valuta il tricogramma (rapporto dei capelli nelle diverse fasi del ciclo follicolare: anagen/telogen). Anagen: la fase di crescita, la radice dei peli rimossi è morbida, acquisisce una forma arrotondata ("maniglie dell'ombrello"). Catagen - una fase intermedia, la crescita dei capelli si interrompe, la radice ha la forma di una spazzola circondata da una membrana vitrea. Telogen - la fase di riposo del follicolo pilifero, la radice dei capelli perde pigmento, si restringe verso la fine sotto forma di "pennello artistico", assume la forma di una "lancia". Distinguere tra capelli primari e secondari (normali). La perdita dei capelli primari può essere uno dei criteri diagnostici per alcune alopecia (p. es., alopecia X). I fusti dei capelli primari hanno un diametro maggiore, il midollo è sempre più spesso della corticale. Peli secondari di diametro inferiore, spesso ondulati, midollo più sottile della corticale.

Non ci sono regole rigide per il tricogramma, ma ci sono osservazioni che descrivono il rapporto anagen/telogen 1:9 in inverno e 1:1 in estate in alcuni cani. Ci sono caratteristiche della razza: nei cani con peli in costante crescita (ad esempio barboncini), i follicoli nella fase anagen predominano indipendentemente dalla stagione e nei cani delle razze settentrionali si può osservare una pronunciata telogenizzazione dei bulbi.

La presenza di tutti i capelli al 100% nella fase telogen nella maggior parte dei casi non è la norma, può essere dovuta a campionamento improprio, disturbi ormonali, alopecia X, telogen effluvium. I fattori ormonali influenzano il ciclo del follicolo pilifero e sono accompagnati dalla telogenizzazione, a causa del ritardo nel ciclo del follicolo pilifero, i capelli subiscono gradualmente il processo di invecchiamento (i capelli neri diventano rossastri, i capelli rossi si scoloriscono, le punte possono spaccarsi). I peli primari scompaiono, il sottopelo ritardato sembra pelo di cucciolo. Le cause endocrine di tale alopecia possono essere ipotiroidismo, iperestrogenismo, ipercortisolismo. La causa non endocrina è la sincronizzazione di tutti i peli nel telogen causata da una grave malattia o stress. Non appena i capelli riprendono la loro crescita, la remissione avviene in 1-2 mesi. L'alopecia X è una malattia con un'eziologia inspiegabile.

I disturbi strutturali delle radici dei capelli si verificano a causa di distrofia o displasia follicolare. In rari casi, ciò può essere dovuto a danni ai granuli di pigmento. Inoltre, le radici dei capelli sono danneggiate dall'alopecia areata e dall'esposizione a farmaci citotossici (raramente).

Prestare attenzione alle punte dei capelli: normalmente hanno una forma appuntita, e con l'alopecia dovuta alla leccatura, ci sono segni di trauma alle punte dei capelli (potrebbero essere spezzate). Le punte dei capelli possono essere danneggiate a causa dell'aumentata fragilità causata dai cambiamenti strutturali. Ad esempio, è stata notata la comparsa di capelli biforcati che terminano con tricofitosi nei Golden Retriever. I cambiamenti patologici nelle punte dei capelli possono essere il risultato di un lavaggio e una pettinatura estremamente aggressivi del mantello, nonché di danni meccanici nei punti di maggiore attrito.

Quando si valuta il fusto del capello, è possibile rilevare le spore di dermatofiti. Se eseguita correttamente, la tricoscopia dà un risultato positivo nel 60-70% dei casi di dermatofitosi. È preferibile esaminare i capelli fluorescenti nei raggi della lampada Woods. La struttura del fusto del capello è disturbata non solo nella dermatofitosi, ma anche in numerosi altri casi, ad esempio chemioterapia (raramente), traumi meccanici e chimici (cure aggressive), carenze nutrizionali, malattie ereditarie (tricoressia nodosa, ecc. ). Cambiamenti caratteristici nella struttura del fusto del pelo si osservano con la tricomalacia midollare dei pastori tedeschi, che si manifesta nei cani adulti. Il mantello appare rifinito sul corpo, coda, regione spalla-scapolare. Con la tricoscopia, si osservano crepe e rotture longitudinali nei fusti dei capelli. I cambiamenti caratteristici si notano nell'alopecia associata a una violazione della produzione di melanina - colore "indebolito" dell'alopecia e displasia follicolare dei capelli neri. Lo "scolorimento dell'alopecia" colpisce i cani blu e marrone chiaro. Con questa malattia, nei capelli si trovano grandi granuli di pigmento con un colore indebolito, che causano una maggiore fragilità dei capelli, che porta all'alopecia. La displasia follicolare dei capelli neri è stata osservata nei cani bicolore e tricolore, con solo i follicoli piliferi neri interessati. I cuccioli nascono normali, ma successivamente le zone di pelo scuro vanno incontro a alopecia. La tricoscopia rivela grumi anormali di melanina nel fusto del capello.

Con la tricoscopia, gli aggregati di cheratina possono essere facilmente rilevati sotto forma di calchi di follicoli piliferi sul fusto del capello. Si verificano a causa di difetti di cheratinizzazione (seborrea primaria dei cocker spaniel, dermatosi con carenza di vitamina A, adenite delle ghiandole sebacee, leishmaniosi, demodicosi), nonché altre malattie follicolari, come la follicolite batterica.

citologia cutanea

La citologia cutanea è un metodo rapido, non invasivo di grande valore diagnostico. Questo tipo di studio è particolarmente prezioso per la diagnosi di lesioni nodulari, essudative, pustolose, con formazione di croste e seborrea, nonché con otite media. In caso di lesioni nodulari, è preferibile ottenere il materiale mediante aspirazione con ago sottile utilizzando una siringa da 10 ml con aghi 21G, 24G. Con lesioni piangenti, è possibile esaminare le impronte. Anche i preparati scozzesi sono sottoposti a esame citologico e, naturalmente, a raschiature profonde. I preparati vengono essiccati all'aria, può essere utilizzata la fissazione con metanolo. Uso il colorante modificato di Wright (Diff-Qick), nei laboratori si colorano anche con coloranti speciali, immunocitochimica. La visualizzazione delle preparazioni viene eseguita in sequenza utilizzando obiettivi 4x, 10x, 40x, 100x (con olio per immersione).

La raschiatura dalla pelle normale è dominata dai corneociti, ci sono anche altri cheratinociti, singoli fibroblasti. Durante l'esame citologico di materiale da aree infiammate, si presta attenzione alle seguenti cellule:

– Neutrofili (degenerativi e non degenerativi);

– Macrofagi;

– Linfociti/plasmacellule;

– Eosinofili e mastociti;

– Cellule acantolitiche (cheratinociti rotondi, privi di processi);

- Cellule neoplastiche.

Puoi anche rilevare i microrganismi (bastoncini, cocchi, malassezia, altri funghi, leishmania, ecc.).

Uso i seguenti criteri di base per la diagnosi differenziale citologica:

– Batteri e cellule epiteliali – proliferazione batterica;

– Neutrofili e batteri degenerativi – piodermite;

- Neutrofili non degenerativi in ​​gran numero + cellule acantolitiche - pemfigo foliaceo, pemfigo eritematoso, ecc. (in aggiunta + istopatologia);

– Neutrofili + macrofagi – piogranuloma/granuloma (infezione batterica fungina, atipica);

– Linfociti, plasmacellule – infiammazione cronica, pododermatite plasmacitica, linfoma (in aggiunta + linfoblasti);

– Malassezia sp. e cellule epiteliali - dermatite da Malassezia.

Quando si valuta la morfologia cellulare, è consuetudine valutare i seguenti segni di malignità:

– Criteri citoplasmatici (anisocitosi, macrocitosi, diversa intensità di colorazione (grado di basofilia), inclusioni/vacuolizzazione atipiche, assenza di granuli specifici, ampio rapporto nucleo-citoplasma, nonché presenza nella preparazione di cellule che differiscono significativamente in questo parametro) ;

– Criteri nucleari (anisocarios, macrocariosi, alterazione della forma dei nuclei, cromatina sparsa o ipercromasia, anisocromasia, alto indice mitotico, mitosi irregolari, nucleoli multipli, nucleoli giganti, forma patologica dei nucleoli).

Quando si esaminano i preparati citologici delle lesioni nodulari, è necessario rispondere alle seguenti domande:

– Infiammazione/gonfiore;

– Neoplasia – benigna/maligna;

– Fonte di neoplasia;

– Origine tissutale: tumori epiteliali, mesenchimali, ematopoietici (a cellule rotonde).

Le diagnosi differenziali citologiche più comuni delle lesioni cutanee tumorali in pratica sono:

– Tumori epiteliali (cheratoacantoma, carcinoma a cellule squamose e altri);

– Tumori mesenchimali (fibrosarcoma, melanoma, ecc.);

– Tumori a cellule rotonde (mastocitoma, istiocitoma, linfoma);

A causa della crescente disponibilità di istopatologia negli ultimi anni, la capacità di diagnosticare varie patologie dermatologiche è cresciuta in modo significativo. Nonostante ciò, finora ricorrono raramente al prelievo di campioni istobioptici a causa della possibilità di ottenere risultati non informativi. Pertanto, ulteriori informazioni sono dedicate alla valutazione della necessità di eseguire un'istobiopsia cutanea, alla corretta scelta dell'area cutanea per l'esame istologico, al corretto campionamento, alla scelta di un patologo e all'interpretazione della conclusione istologica. Solo in tutte queste condizioni è possibile ottenere una diagnosi accurata.

1) L'istobiopsia non viene utilizzata di routine per la diagnosi nei cani con prurito cronico. Nella maggior parte dei casi, i risultati di una biopsia non forniranno le informazioni che un dermatologo può ottenere da un esame clinico.

2) L'istobiopsia cutanea può essere utile nei seguenti casi:

– Alopecia quando non è possibile effettuare una diagnosi con metodi diagnostici “rapidi” (es. tricoscopia, raschiamento cutaneo, citologia…)

– Peeling quando non è possibile effettuare una diagnosi con test “rapidi”.

– Macchie, papule, pustole rotte quando la diagnosi non può essere fatta con i test “rapidi”.

– Erosioni non cicatrizzanti, ulcere, fistole

– Nodi, sigilli, tumori di lunga durata

– Depigmentazione e iperpigmentazione insolita

– Sospetto di malattie autoimmuni

– Sospetto di malattie della pelle, in cui la conferma della diagnosi è possibile solo istologicamente (ad esempio adenite delle ghiandole sebacee)

– Casi in cui si sospetta una diagnosi pericolosa per la vita (dermatomiosite, ecc.)

– Casi in cui non c'è risposta a un trattamento completamente razionale

Come ottenere campioni di istobiopsia cutanea di alta qualità

Per ottenere una diagnosi istologica comprensibile e corretta, è necessario seguire i seguenti passaggi:

1) Selezione di un sito di biopsia

I campioni appropriati devono essere presentati al patologo, quindi il medico deve prestare attenzione alla selezione dell'area cutanea desiderata. Nella maggior parte dei casi, dovrebbero essere prelevati almeno 3-5 campioni di pelle per paziente per avere maggiori probabilità di ottenere una diagnosi corretta. La scelta del sito della biopsia dipende dal tipo di lesioni riscontrate:

– Alopecia: I campioni bioptici devono essere prelevati da un'area di pelle completamente calva (preferibilmente 2), al confine tra cute normale e alopecia (1) e da cute ricoperta di pelo normale (se presente), in modo che il patologo possa confrontare i capelli fisiologici follicoli e follicoli dall'area del processo patologico questo paziente.

– Lesioni squamose (pelle "seborroica"): Vengono prelevate 2-3 biopsie dall'area interessata e un campione di pelle normale (1) per poter confrontare l'epidermide, in particolare lo strato corneo in queste aree. Un ago per biopsia può essere utilizzato per ottenere campioni.

– Macule, papule, pustole: La biopsia dovrebbe portare a campioni provenienti da almeno tre siti di lesioni primarie, che dovrebbero trovarsi al centro della biopsia. Un ago per biopsia può essere utilizzato per ottenere campioni.

– Aree ulcerate: questo è il tipo più difficile di lesione da biopsia. L'errore principale è inviare un campione bioptico dal centro dell'ulcera al patologo e quindi ricevere la risposta "ulcera" senza alcuna diagnosi specifica. In una situazione in cui il materiale è ottenuto dal centro di una grande ulcera, il quadro istologico sarà caratteristico del processo infettivo. È inoltre necessario prelevare diversi campioni in modo che il patologo possa collegare i processi che si verificano nell'ulcera e nella pelle normale. Se sono presenti piccole ulcere, l'intera area, compreso il bordo del tessuto sano, può essere inviata per l'esame.

– fistole: di solito il processo patologico si trova in profondità nel derma e spesso sotto la pelle, quindi è necessaria una biopsia molto profonda per determinare la natura del processo patologico. In questi casi, un campione bioptico a forma di cuneo viene asportato con una lama di bisturi; è impossibile ottenere un campione informativo con un ago da biopsia con questo tipo di lesione. Allo stesso tempo, ha senso inviare il materiale bioptico per l'esame batteriologico e micologico.

– Sigilli e nodi: ancora una volta, l'asportazione chirurgica dell'intero nodo con tessuto normale adiacente è il metodo di scelta. Secondo le regole stabilite, questa procedura può essere eseguita solo dopo l'esclusione del mastocitoma mediante aspirazione con ago sottile ed esame citologico.

– Depigmentazione: i campioni di istobiopsia sono ottenuti da aree completamente depigmentate (minimo 2), dalla zona di confine tra pelle normale e depigmentata (1), nonché un campione da pelle normale.

– Iperpigmentazione: i campioni di istobiopsia sono ottenuti da aree pigmentate (minimo 2), così come un campione di pelle normale.

2) Interpretazione della conclusione istologica

In genere, un dermatoistopatologo emette una conclusione, che dovrebbe contenere le seguenti sezioni:

1. Descrizione del campione di tessuto

2. Diagnosi morfologica

3. Diagnosi eziologica (se la causa può essere determinata)

4. Commenti

La descrizione istologica è l'informazione che il patologo vede nei preparati. La descrizione istologica contiene informazioni preziose utilizzando una varietà di termini, che è di grande importanza nella diagnosi. Tuttavia, è necessaria una notevole esperienza per spiegare questi cambiamenti osservati, quindi non ci si dovrebbe sempre fidare del medico per interpretare il referto del patologo. La conoscenza della terminologia di base è essenziale per la corretta interpretazione dei risultati del laboratorio. Sfortunatamente, la maggior parte dei medici non legge affatto la narrazione.

La diagnosi morfologica è un riassunto in una frase delle alterazioni patologiche del campione istologico (qualcosa di simile: iperplasia marcata con croste e infiltrazione eosinofila perivascolare con acari della scabbia nello strato corneo). La diagnosi morfologica si basa sui termini utilizzati nella descrizione del campione istopatologico.

Una diagnosi eziologica è possibile quando l'istopatologia è specifica per una malattia. Ad esempio, nel caso sopra descritto, la diagnosi eziologica è "rogna sarcoptica". Se non è possibile stabilire una diagnosi eziologica, il patologo offre un elenco di diagnosi differenziali e possibilmente raccomandazioni per un'ulteriore diagnosi.

Il medico non dovrebbe mai basarsi ciecamente sulla conclusione, è molto importante che il medico leghi insieme il quadro clinico e le informazioni istopatologiche. Ci sono un gran numero di malattie che possono essere diagnosticate istologicamente, ma molte di esse possono essere sospettate da caratteristiche.

I reperti istopatologici più comuni saranno elencati di seguito.

Disturbi dell'epidermide

2. Iperplasia- questa è una risposta aspecifica dell'epidermide a infiammazioni o lesioni croniche, osservata in molti processi infiammatori accompagnati da prurito.

3. Pustole sottocorneali ed intraepidermiche- di solito si trova nella piodermite superficiale, così come nel pemfigo foliaceo e in alcune rare malattie pustolose sterili.

4. Pustole e vescicole subepidermiche- questo è un segno molto raro, si verifica nelle malattie ereditarie e autoimmuni, ad esempio nel pemfigo volgare.

5. Necrosi e ulcere- di solito visto con ustioni, dermatite da contatto, dermatite piotraumatica ("punti caldi"), sindrome pruriginosa alla testa e al collo nei gatti, complesso eosinofilo nei gatti. Cause più rare sono la sindrome epatocutanea, l'eritema multiforme/necrolisi epidermica tossica, alcune reazioni ai farmaci, le malattie virali del gatto (virus della vaccinazione, virus dell'herpes), il timoma del gatto. Le ulcere possono essere lesioni secondarie dovute a gravi condizioni della pelle come la vasculite.

Lesioni cutanee

1. Lesioni superficiali del derma- abbastanza raro, si osserva con piodermite delle zone mucocutanee, lupus, eritema multiforme, linfoma epiteliotropico, timoma (nei gatti), dermatomiosite.

3. Follicolite/foruncolosi- nella maggior parte dei casi indica una lesione cutanea di natura infettiva, causata, ad esempio, da stafilococchi, dermatofiti o demodex. Altre cause possono essere la foruncolosi eosinofila, il pemfigo foliaceo, il linfoma epiteliotropico.

5. pannicolite- questo sintomo può essere osservato con infezioni batteriche, micobatteriche e fungine sottocutanee profonde, con pannicolite sterile nodulare, idiopatica, pansteatite, lupus, nonché con reazioni locali a iniezioni, lesioni. Può essere dovuto a pancreatite.

6. Vasculite- questo segno indica un danno diretto ai vasi sanguigni. La vasculite può essere presente in un'ampia varietà di processi, come la vasculite settica, le malattie immuno-mediate e l'esposizione a farmaci.

7. Atrofia- osservata nelle malattie endocrine, alcune alopecie specifiche, come l'alopecia stagionale della superficie laterale del corpo, la sindrome paraneoplastica e la dermatopatia ischemica.

Riassumendo, se negli animali con segni di alopecia, desquamazione e croste, macule, papule, pustole, non riesco a stabilire una diagnosi attraverso tutti i test rapidi di cui sopra, ricorro all'istobiopsia. Va ricordato che in alcuni casi l'esame istologico non è molto informativo (ad esempio negli animali con prurito cronico), quindi voglio sottolineare l'estrema importanza dei test rapidi in questi pazienti, nonché la necessità di valutazione clinica e un'attenta analisi dei dati anamnestici da parte di uno specialista veterinario.

Letteratura

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4. Taylor SM Tecniche cliniche per piccoli animali, Saunders Elsevier, 2010.

La preparazione di una preparazione colorata consiste nei seguenti passaggi:

1) preparazione di strisci;

2) asciugare lo striscio;

3) fissazione dello striscio;

colorazione a sbavatura.

Per preparare la preparazione, una goccia d'acqua o soluzione salina viene applicata su un vetrino sgrassato, in cui il materiale di prova viene introdotto con un'ansa e distribuito in uno strato sottile e uniforme sul vetro su un'area di circa 1 cm 2 . Se il materiale di prova si trova in un mezzo liquido, viene applicato direttamente con un'ansa su un vetrino e viene preparato uno striscio. Le macchie vengono asciugate all'aria o in un flusso di aria calda sulla fiamma di una lampada ad alcool, impedendo alla goccia di bollire.

Per riparare la macchia, un vetrino (striscio) viene fatto passare lentamente 3-4 volte attraverso la fiamma di una lampada ad alcool. I microrganismi muoiono durante la fissazione, sono saldamente attaccati alla superficie del vetro e non vengono lavati via durante l'ulteriore elaborazione. Un riscaldamento più lungo può causare la deformazione delle strutture cellulari.

Quando si fissano con prodotti chimici, vengono utilizzati composti di cromo, formalina, acido osmico, acetone. Uno dei metodi comuni di fissazione è il trattamento del preparato con alcol metilico o etilico o con una miscela di Nikiforov (volumi uguali di alcol etilico ed etere). In questo caso, il farmaco viene immerso per 5-20 minuti. nel liquido di fissaggio.

Metodi per la colorazione di strisci e coloranti utilizzati in microbiologia.

Esistere metodi di colorazione semplici e complessi . Per la colorazione semplice, viene utilizzato uno dei coloranti, ad esempio magenta d'acqua (1-2 min.), Blu di metilene (3-5 min.). Quando si colora uno striscio, il farmaco viene posizionato sul supporto del farmaco. Alcune gocce di colorante vengono applicate allo striscio. Trascorso il tempo di colorazione, la preparazione viene lavata con acqua, l'acqua in eccesso viene rimossa con carta da filtro, asciugata all'aria e sottoposta a microscopio.

Con una colorazione complessa, alcuni coloranti vengono applicati successivamente alla preparazione, che differiscono per composizione chimica e colore. Ciò consente di identificare determinate strutture cellulari e differenziare alcuni tipi di microrganismi da altri. Tali sono i metodi di colorazione secondo Gram, secondo Ziehl-Nielsen, colorazione delle spore secondo il metodo Orzeszki.

Vengono chiamati i coloranti in cui gli ioni idrogeno vengono rilasciati durante la dissociazione, conferendo al colorante un carattere acido acido. Colorano (sotto forma di anione) sostanze di natura basilare. I coloranti in cui gli ioni idrossido vengono rilasciati durante la dissociazione sono di base.

Nella pratica microbiologica vengono utilizzati coloranti acidi e basici sotto forma di sali, poiché sono in grado di reagire con acidi e basi. I coloranti di base sono più spesso usati sotto forma di sali di acido cloridrico, meno spesso acetico e solforico; coloranti acidi - sotto forma di sali di sodio o potassio.

Coloranti naturali di base

Rosso porpora

viola genziana rosso neutro

viola cristallo di pironina

safranina metil violetto

magenta verde metile

ematossilina malachite verde

Blu Marrone

Vittoria Vesivina

crisoidina blu di metilene.

Verde Nero

indulina verde janus

Coloranti di natura acida

Rosso e Rosa Nero Giallo

fucsina acida nigrosina congo

acido eritrosina picrico

fluoresceina

L'intensità della capacità colorante del colorante dipende dal pH del mezzo: i coloranti basici colorano l'oggetto più intensamente, più il mezzo è alcalino, coloranti acidi, più è acido.

I coloranti possono essere suddivisi in: positivo e negativo. I coloranti positivi colorano direttamente le cellule dei microrganismi. Colorano le cellule a temperatura ambiente per 30-60 secondi. I coloranti negativi colorano lo spazio che circonda le cellule dei microrganismi. Di conseguenza, le cellule sembrano sagome sullo sfondo del colorante.

Metodo di colorazione facile

Applicare alcune gocce di una soluzione acquosa di fucsina sullo striscio preparato e fissato. Colore 1-2 min. Risciacquare il colorante con acqua, tamponare il preparato con carta da filtro, asciugarlo all'aria e al microscopio.

Colorazione di Gram.

Su uno striscio fisso, applicare una soluzione di alcol fenico di violetta di genziana attraverso una striscia di carta da filtro. Dopo 1-2 minuti, rimuovere la carta e scolare il colorante.

Applicare la soluzione di Lugol per 1-2 minuti.

Decolorare con alcool etilico per 30-60 s fino a quando le strutture viola del colorante smettono di staccarsi.

Risciacquare con acqua.

5. Terminare con una soluzione acquosa di fucsina per 1-2 minuti, risciacquare con acqua, asciugare con carta da filtro e all'aria e microscopio.

I batteri gram-positivi si colorano di viola scuro, i batteri gram-negativi si colorano di rosso.

Il rapporto tra i batteri e la colorazione di Gram è determinato dalla loro capacità di trattenere il complesso della violetta di genziana con lo iodio formatosi durante il processo di colorazione. Ciò dipende dalle differenze nella composizione chimica e nella permeabilità della parete cellulare dei batteri gram-positivi e gram-negativi; il peptidoglicano è multistrato, gli acidi teicoici sono associati ad esso.

Nei batteri gram-negativi, il peptidoglicano è a strato singolo, c'è una membrana esterna, che include fosfolipidi, lipoproteine, proteine ​​e un complesso mepopopolisaccaride (LPS). L'intera membrana esterna è permeata da proteine ​​- porine, che assicurano la diffusione di vari composti. In questo modo, ai batteri Gram-positivi vengono fornite condizioni ottimali per una forte fissazione del colorante e resistenza allo scolorimento dell'alcol.

I batteri gram-positivi includono starylococchi, streptococchi, corynebacterium diphtheria, mycobacterium tuberculosis, ecc., I batteri gram-negativi includono gonococchi, meningococchi, Escherichia coli, ecc. Sulla struttura della parete cellulare. Pertanto, per colorare, dovresti sempre prendere culture giovani di 1 giorno.

L'errore principale commesso durante la colorazione secondo Gram è lo "scolorimento" dello striscio con alcol etilico. I batteri gram-positivi possono perdere il loro colore originale di viola genziana e acquisire una colorazione rossa (caratteristica dei batteri gram-negativi) a seguito della successiva ridefinizione dello striscio con fucsina; i batteri gram-negativi, a loro volta, possono mantenere il colore blu- colore viola del viola di genziana. Per una corretta colorazione, la tecnica di sbiancamento deve essere rigorosamente osservata.

Normalmente, una donna al di fuori dell'allattamento non ha secrezioni dal seno. Il fluido (essudato) che scorre dalla ghiandola mammaria viene analizzato prelevando strisci di impronte. Viene anche esaminato il contenuto di cisti e ulcere cutanee.

Perché viene eseguita l'analisi: macchie dal seno

Usando questo metodo, viene determinata la malattia che ha causato la comparsa di secrezione dalle ghiandole mammarie. Viene eseguita un'analisi citologica del liquido per determinare la composizione cellulare. Nei tumori maligni, le cellule atipiche (cancerose) sono determinate nello striscio. Con l'aiuto di sbavature-impronte diagnosticare:

• cancro al seno
• mastopatia e mastite;
• galattorrea: la secrezione di latte dalle loro ghiandole, associata a insufficienza ormonale;
• tubercolosi delle ghiandole mammarie;
• formazioni benigne;
• blocco ed espansione dei condotti;
• contenuto di cisti e superfici della ferita

Come viene eseguito un esame del seno?

Lo scarico dai capezzoli e dalle ferite sulla pelle viene applicato sul vetro, asciugato e inviato al laboratorio.

Per esaminare il contenuto delle cisti, viene eseguita una puntura con campionamento del fluido. L'iniezione viene eseguita con un ago sottile, quindi non è necessaria l'anestesia. Dopo aver effettuato l'analisi, il paziente va a casa. A casa, una donna applica del ghiaccio sul sito della puntura. Il puntato viene applicato al vetro e inviato per la ricerca.

La procedura viene eseguita in regime ambulatoriale e non richiede il ricovero in ospedale. Prima di esso, non puoi assumere farmaci che cambiano la coagulazione del sangue. Il giorno dello studio è vietato applicare creme, spray, deodoranti al torace e alla regione ascellare.

Risultati dello striscio mammario

In laboratorio, il materiale viene colorato ed esaminato al microscopio:

• con lesioni e malattie non maligne delle ghiandole mammarie, nel fluido sono presenti sangue e leucociti. Possono essere rilevate cellule di tumori benigni. In questo caso, la donna viene esaminata in aggiunta;
• nel cancro al seno, le cellule atipiche (cancro) si trovano nella secrezione: grandi, di forma irregolare con diversi piccoli "nucleoli". La precisione dell'analisi si avvicina al 100%. Durante lo studio viene determinato il tipo di tumore maligno;
• nelle fasi iniziali del cancro al seno, le cellule alterate in uno striscio non sono sempre determinate. Nel 15%, il processo oncologico viene rilevato con altri metodi: ecografia Doppler, risonanza magnetica. Se il risultato è dubbio, la donna viene nuovamente esaminata.

Prendere impronte dalla ghiandola mammaria è un metodo poco traumatico e informativo per diagnosticare il cancro e altre patologie della ghiandola mammaria.