Mikozne metode mikrobiološke dijagnostike mikoza. Laboratorijska dijagnostika gljivičnih bolesti

Laboratorijska dijagnostika gljivičnih bolesti temelji se na otkrivanju gljivice i određivanju njezina roda i vrste. Sastoji se od dvije glavne faze: mikroskopske i kulturalne studije.

Mikroskopski pregled

Mikroskopski pregled je prva i važna karika u potvrdi preliminarne dijagnoze.

Uspjeh mikroskopskog pregleda uvelike ovisi o pravilnom prikupljanju patološkog materijala. Za mikroskopski pregled potrebno je odabrati dlaku koja ima vidljive znakove gljivičnog oštećenja (tupa, slomljena, zadebljana). Dlačice koje su promijenile izgled uklanjaju se epilacijskom pincetom. Da biste otkrili pojedinačne zahvaćene dlake s mikrosporijom, možete koristiti fluorescentnu svjetiljku s Wood filtrom (zelenkasto-plavi sjaj).

Pri odabiru zahvaćene kose mogu se koristiti brojne dodatne karakteristike. Dlaka zahvaćena mikrosporumima ima sivi omotač spora smještenih izvana pri dnu. U slučaju kronične trichophytosis, kratke sijede zahvaćene dlake, zakrivljene u obliku "zareza" i "upitnika", kao i "crne točkice" (zadebljane crne zahvaćene dlake odlomljene na ušću folikula) nalaze se u debljina ljuski. U slučaju infiltrativno-gnojne trihofitoze, za mikroskopski pregled, osim zahvaćene kose, možete koristiti gnoj i kore iz lezije.

S kožnih lezija s mikrosporijom, trihofitozom i mikozom ingvinalnih nabora potrebno je ostrugati ljuske s periferne zone lezije, gdje se gljivica nalazi u većim količinama. Velus dlaka se sastruže zajedno s ljuskicama kože.

Prilikom pregleda zahvaćene kose s mikrosporijom i trihofitozom, pozornost se posvećuje položaju spora (unutar ili izvan kose) i njihovoj veličini. Ovi podaci omogućuju u nekim slučajevima razjašnjenje dijagnoze, kliničkog oblika mikoze i epidemiologije.

Kod interdigitalnog oblika mikoze stopala za mikroskopski pregled koriste se ljuskice kože i ostaci maceriranog rožnatog sloja. Područje nokta koje je potrebno uzeti za mikroskopski pregled ovisi o obliku onihomikoze. S površinskim oblikom potrebno je ostrugati površinu ploče nokta.

U najčešćem distalno-lateralnom obliku koristi se struganje s ležišta nokta, ispod ploče (subungvalna hiperkeratoza) s dijelom odsječenog promijenjenog lista nokta. Za proksimalni subungualni oblik koriste se posebne metode prikupljanja materijala (bušenje prozora bušilicom, biopsija nokta).

Kod skvamozno-hiperkeratotičnog oblika mikoze stopala, ljuskice se stružu s površine tabana. U dishidrotičnom obliku mikoze stopala, poklopci mjehurića su odrezani za pregled.

Tehnika pripreme materijala za mikroskopsko ispitivanje kose . Mala kap od 30% KOH nanese se na predmetno staklo i u njega se stavi zahvaćena dlaka iglom za disekciju. Kapljica s kosom lagano se zagrijava na plamenu alkoholne svjetiljke sve dok se para ne pojavi iznad površine tekućine ili rub kristala ne ispadne duž ruba kapi lužine. Nakon prekrivanja pokrovnim stakalcem, višak lužine se ukloni filter papirom. Lijek se ispituje prvo pod malim, a zatim pod velikim (x 400) povećanjem mikroskopa.

Ljuskice kože i noktiju . Tanke ljuskice nokta za mikroskopski pregled stavljaju se na predmetno staklo u kap 30% KOH i zagrijavaju, dodajući lužinu kako isparava. Ohlađeni, neobojeni uzorak se pokrije pokrovnim stakalcem i pregleda pod mikroskopom.

Debele ljuskice kože i noktiju stave se u epruvetu za centrifugu i napune s nekoliko kapi 30% KOH. Epruveta se zagrije do vrenja i ostavi 20-30 minuta. Dio omekšanog materijala se staklenim štapićem prenosi na predmetno staklo, pritišće šibicom dok se ne pojavi “oblak”, nakon čega se ispituje pod mikroskopom.

Gnoj . Kap gnoja se pomiješa s kapi alkohola i pola-pola glicerina i pregleda u nativnom preparatu.

Kulturološka dijagnostika

Kulturalna dijagnostika provodi se radi definitivnog razjašnjenja dijagnoze i razjašnjenja epidemiologije. Uključuje dobivanje kulture gljivice nakon čega slijedi mikroskopski pregled.

Zahvaćena kosa, ljuskice (koža i nokat), mjehurići ili gnoj se cijepe na umjetnu hranjivu podlogu. Po izgledu divovskih kolonija na Petrijevim zdjelicama može se steći predodžba o rodu uzročnika (Microsporum, Trichophyton, Epidermophyton), njegovom tipu (L. canis ili ferrugineum, T. violaceum, verrucosum ili gypseum). Konačno razjašnjenje roda i vrste gljive moguće je samo na temelju mikroskopskog pregleda dobivene kulture.

Laboratorijska dijagnostika površinske kandidijaze

Za laboratorijsko ispitivanje gljivica sličnih kvascima potreban je svjež materijal. Za mikroskopski pregled, ovisno o kliničkim manifestacijama i lokalizaciji lezija, ljuskice kože, strugotine s noktiju, kapljica gnoja ispod nokta, bjelkaste naslage sa zahvaćenih područja sluznice usne šupljine i vanjskog spolovila, stijenki rodnice, mogu se uzeti strugotine sa sluznice membrane uretre, kao i ispiranje s crvenog ruba usana, zahvaćena područja kože velikih i malih nabora.

Ovisno o mjestu lezije i prirodi kliničkih manifestacija, materijal za istraživanje uzima se pamučnim štapićem, skalpelom, petljom itd. Ljuskice kože i noktiju, ostaci epidermisa i strugotine sluznice su pre- tretiran sa 30% KOH. Patološki materijal se ispituje u neobojenim ili obojenim preparatima.

U prvom slučaju, materijal se pomiješa s jednakom količinom alkohola i glicerina. Kada se boje po Gramu, stanice kvasca i pseudomicelij izgledaju tamnoljubičasto, po Ziehl-Neelsenu - plavo, a po Romanovsky-Giemsa - ružičasto-ljubičasto. U ovom slučaju, posebnost stanice kvasca je pupanje - otkrivanje figure "pješčanog sata". Uzimanje materijala sa sluznice usne šupljine, genitalija, s kože crvenog ruba usana, iz kutova usta, s kože velikih i malih nabora provodi se sterilnim tupferom. Nakon uzimanja materijala, bris se stavlja u drugu sterilnu epruvetu s tekućom sladovinom. Epruveta s brisom šalje se u mikrobiološki laboratorij. Izolacija čiste kulture gljivica sličnih kvascima iz roda Candida provodi se prema općeprihvaćenim mikrobiološkim metodama.

Prvi termin

Na imenovanju, mikolog provodi pregled i također propisuje sveobuhvatan pregled.

Laboratorijska dijagnostika

Najučinkovitije metode za dijagnosticiranje mikoza kože su različiti laboratorijski testovi koji mogu identificirati uzročnika i pomoći u odabiru režima liječenja. Da bi se identificirao uzročnik mikoze, propisani su sljedeći laboratorijski testovi:

• histološka analiza;
• bakteriološka kultura;
• imunološka istraživanja;
• PCR dijagnostika;
• kulturno ispitivanje;
• mikrobiološka istraživanja.

Mikrobiološka dijagnostika pomaže u otkrivanju gljivice i određivanju njezinog roda i vrste.

Mikrobiološka dijagnostika najčešća je i najjednostavnija metoda otkrivanja mikoza u krvi i koži. Da biste utvrdili točnu dijagnozu, trebali biste znati kako pravilno prikupiti materijal koji je potreban za studiju. Zahvaćenu dlaku potrebno je sakupiti pincetom. Ako je koža inficirana, potrebno je ostrugati kožu s oštećenog područja za mikroskopiranje. Sav prikupljeni materijal se stavi u 30% otopinu kalijevog hidroksida, a zatim na predmetno staklo. Mikrobiološkom dijagnostikom može se točno utvrditi gdje se gljivica nalazi (unutar ili izvan dlake, kože) i njezinu veličinu.

Kako bi se spriječila pogrešna dijagnoza mikoze, potrebno je ispravno i kompetentno prikupiti materijal za mikrobiološki pregled.

U medicini postoje sljedeće mikrobiološke dijagnostičke metode:

• Mikroskopiranje nativnim ili neobojenim preparatima. Da bi se to postiglo, materijal se bistri pomoću 10-30% otopine kalijevog ili natrijevog hidroksida. Zatim se obrađeni materijal stavlja na laboratorijsko staklo u koje je prethodno nakapano malo glicerina. Gornji dio je prekriven staklenom pločom i provodi se analiza.
• Mikroskopiranje obojenih preparata provodi se na nekoliko načina koji identificiraju bakterije, razlikuju različite bakterije i identificiraju različite gljivice.

Bakteriološka kultura

Bakteriološka kultura jedna je od najučinkovitijih metoda dijagnostike.

Prikupljanje bakteriološke kulture na hranjivom mediju točan je način dijagnosticiranja mikoze. Uzimajući u obzir izgled i karakteristike uzgojene gljivične kolonije, dermatolog određuje vrstu patogena koji je izazvao mikozu. Jedina mana istraživanja je da je potrebno puno vremena za uzgoj kolonije. U prosjeku je potrebno oko 3 tjedna da se otkrije soj patogena. U nekim slučajevima metoda ne donosi očekivane rezultate.

PCR dijagnostika

Dijagnostička metoda PCR uključuje identifikaciju uzročnika mikoze pomoću lančane reakcije polimeraze. Tijekom ispitivanja povećava se osjetljivost hibridizacije, što povećava sadržaj virusne DNA u ispitivanom materijalu. Ova metoda pregleda je nova i zahtijeva nekoliko testova od pacijenta. Vjeruje se da je ova vrsta dijagnoze prilično skupa, ali daje točne rezultate.

Ispitivanje kulture

Mjere kulturološke dijagnostike preporučuju se u završnoj fazi dijagnoze. Metoda se sastoji u dobivanju kulture gljivice, koja se zatim šalje na ispitivanje pomoću mikroskopa. Dobiveni materijal stavlja se na umjetno stvorenu hranjivu podlogu i utvrđuje se vrsta patogena, izgled i veličina. Nakon čega je indiciran poseban tretman, koji je usmjeren na borbu protiv određene vrste patogena mikoze.

Precizna dijagnostika invazivnih mikoza Nije lako. To se objašnjava ne samo poteškoćama u dobivanju kulture gljiva, već iu tumačenju rezultata istraživanja, budući da gljive, i kvasce i filamentoze, mogu kolonizirati sluznice i kontaminirati proučavane uzorke. U tom smislu, dijagnoza invazivnih mikoza temelji se na integriranom pristupu, uključujući ne samo rezultate mikoloških (kulturalnih) i seroloških (određivanje gljivičnog antigena) studija, već i kliničkih simptoma gljivične infekcije, podataka iz pomoćnih istraživačkih metoda ( kompjuterska ili magnetska rezonancija, ultrazvuk).

Europsko-američka skupina za suradnju za proučavanje invazivnih mikoza Kriteriji za dijagnosticiranje invazivnih mikoza razvijeni su u imunokompromitiranih bolesnika. Predstavljeni su 2001. na Međunarodnoj konferenciji o antimikrobnim lijekovima i kemoterapiji (ICAAC, Chicago), a 2002. u tisku. Definirani su kriteriji za dokazanu, vjerojatnu i moguću invazivnu mikozu koji se preporučuju za korištenje u kliničkim i epidemiološkim studijama.

Dokazana invazivna mikoza uzrokovana filamentoznim gljivama: otkrivanje gljivičnog micelija u biopsijama ili aspiratima tijekom histološkog ili citološkog pregleda ili izolacija kulture iz uzoraka dobivenih u aseptičkim uvjetima iz normalno sterilne lezije, što je, prema rezultatima kliničkih i radioloških studija, povezano s infekcijom, s izuzetak su studije urina i sluznice.

Dokazana invazivna mikoza uzrokovana kvasnim gljivicama: otkrivanje stanica kvasca (gljivice roda Candida mogu tvoriti pseudomicelij ili pravi micelij) u biopsijama ili aspiratima, s iznimkom uzoraka sa sluznica, ili izolacija kulture iz uzoraka dobivenih u aseptičnim uvjetima iz normalno sterilne lezije, koja prema na rezultate kliničkog i radiološkog pregleda povezanog s infekcijom, s iznimkom urina, uzoraka iz sinusa i sluznice, ili otkrivanje mikroskopijom i specifičnim bojenjem (u kapi indijske tinte, mucikarminom) stanica kvasca ili pozitivan antigen Cryptococcus spp. u cerebrospinalnoj tekućini.

Fungemija uzrokovana filamentoznim gljivama: izolacija hemokulture gljivica, s izuzetkom Aspergillus spp. i Penicillium spp., uključujući Penicillium marneffei, u kombinaciji s kliničkim simptomima infektivnog procesa kompatibilnog s izoliranim patogenom.

Fungemija uzrokovana kvasnim gljivicama: izolacija iz hemokulture Candide ili drugih gljivica kvasca iz bolesnika s kliničkim znakovima infekcije povezane s ovim patogenom.

Kompleks dijagnostičkih studija za invazivne mikoze

Biomaterijal koji se proučava	Indikacije, medij koji se koristi, značenje
Krv	Indikacije: trajna groznica (4-5 dana ili više) tijekom terapije antibioticima širokog spektra; drugi "val" vrućice tijekom terapije antibioticima Prikupljanje krvi iz vene u bočice za aerobne bakterije* ili u selektivnu podlogu za gljivice, ponavljano (2-3 puta dnevno u razmaku od 1 sat) Dijagnostički značaj: izolacija kvasnih gljiva, pažljiva interpretacija kod izolacije filamentoznih gljiva, s izuzetkom Fusarium spp.
Venski kateter	Indikacije: izolacija kvasnih gljivica iz krvi Središnji ili periferni venski kateter uklanja se u svim slučajevima izolacije gljivica iz krvi Za mikološka istraživanja koristi se aseptički uklonjeni distalni dio katetera duljine 5-6 cm. Studija se provodi polukvantitativno (Maki metoda) ili kvantitativno na Sabouraudovom mediju. Dijagnostički značaj: izolacija gljivica kvasca u polukvantitativnoj studiji od 15 CFU ili više, u kvantitativnoj studiji - 103 CFU/ml ili više za potvrdu dijagnoze infekcije povezane s kateterom ili infekcije katetera
Iscjedak iz gornjeg respiratornog trakta, ispljuvak, ispiranje iz dušnika, bronhija, bronhoalveolarna tekućina za ispiranje	Indikacije: sumnja na mikoze uzrokovane filamentoznim gljivama ili Cryptococcus neoformans; dugotrajna vrućica tijekom terapije antibioticima širokog spektra i neutropenija Mikroskopiranje uzoraka s calcofluor bijelim (detekcija micelija ili pseudomicelija); sjetva na Sabouraudovu podlogu; određivanje Aspergillus antigena u tekućini bronhoalveolarnog ispiranja u prisutnosti lezija u plućima karakterističnih za invazivnu aspergilozu Dijagnostički značaj: izolacija filamentoznih gljiva ili Cryptococcus neoformans
Cerebrospinalna tekućina	Indikacije: simptomi meningitisa; otkrivanje lezije(a) u mozgu korištenjem kompjutorizirane tomografije ili magnetske rezonancije; "moždani" simptomi zbog vrućice i neutropenije Mikroskopija s kalkofluor bijelim, u kapi tinte; određivanje antigena Aspergillus, Cryptococcus; sjetva na Sabouraudovu srijedu Dijagnostički značaj: detekcija gljivica, kako kvasnih tako i filamentnih; pozitivan antigen
Biopsije, aspirati, peritonealna tekućina, pleuralna tekućina	Indikacije: klinički i/ili radiološki znakovi invazivne mikoze; groznica tijekom terapije antibioticima širokog spektra. Mikroskopija s calcofluor white, kultura na Sabouraudovom mediju Dijagnostički značaj: otkrivanje gljivica, kako kvasnih tako i filamentnih

* Učestalost izolacije gljivica iz krvi bila je identična kada je početna krv uzeta u obje bočice s medijem za kulturu bakterija i sa selektivnim medijem za gljivice. Istraživanje je provedeno bakteriološkim analizatorom VASTES 9240.

Moguća invazivna mikoza dijagnosticira se na temelju kombinacije sljedećih kriterija:
jedan znak iz kategorije mikrobioloških kriterija;
jedan znak iz kategorije "značajnih" ili dva iz skupine "manje značajnih" kliničkih simptoma infektivnog procesa.

Moguća invazivna mikoza dijagnosticira se na temelju kombinacije sljedećih kriterija:
prisutnost barem jednog čimbenika rizika koji potiče razvoj invazivne mikoze;
jedan znak iz kategorije mikrobioloških kriterija ili jedan znak iz kategorije "značajnih" (dva iz skupine "manje značajnih") kliničkih simptoma infektivnog procesa.

Koncept " moguća invazivna mikoza» Ne preporučuje se za korištenje u kliničkim ispitivanjima koja proučavaju učinkovitost antifungalnih lijekova. Ovaj izraz možete koristiti kada analizirate empirijsku terapiju protiv gljivica, epidemiološke studije i proučavate farmakoekonomiju.

Na mikološka istraživanja sterilni aspirati ili biopsije uzimaju u obzir ne samo izolaciju gljivičnih kultura, već i detekciju micelija ili pseudomicelija mikroskopijom. U histološkim preparatima Aspergillus je teško razlikovati od Fusarium spp., Sceclosporium apiospermum i nekih drugih filamentoznih gljiva. Za diferencijalnu dijagnozu potrebno je provesti imunohistokemijsku studiju s protutijelima na Aspergillus.

Izolacija gljivica kvasca iz krvi u barem jednoj studiji spada u kategoriju “dokazanih” invazivnih mikoza i apsolutna je indikacija za propisivanje sistemskih antimikotika u bolesnika s neutropenijom. Učestalost otkrivanja kvasnih gljivica iz krvi je niska, čak i kod diseminirane kandidijaze iznosi 35-50%.
Izvođenje ponovljene hemokulture povećava vjerojatnost dobivanja pozitivnih rezultata.

ostalo tumačenje rezultati u slučaju otkrivanja filamentoznih gljiva u krvi. Visoka učestalost izolacije filamentoznih gljiva karakteristična je za Fusarium spp. i iznosi 40-60%. Aspergillus se otkriva iznimno rijetko, u većini slučajeva se smatra kontaminacijom, s izuzetkom Aspergillus terreusa.

Izbor Aspergillus terreus iz krvi bolesnika s hemoblastozama može ukazivati ​​na pravu aspergilemiju, a u prisutnosti kliničkih simptoma infekcije temelj je za propisivanje antimikotika.

Kriteriji za invazivne mikoze

Indeks	Kriteriji
Čimbenici koji potiču nastanak invazivne mikoze (makroorganizam)	neutropenija (< 0,5*109/л в течение 10 дней) Perzistentna vrućica dulja od 96 sati tijekom terapije antibioticima širokog spektra Tjelesna temperatura iznad 38 °C ili ispod 36 °C i bilo koji od sljedećih predisponirajućih znakova: produljena neutropenija (više od 10 dana) tijekom prethodnih 60 dana, intenzivna imunosupresivna terapija u zadnjih 30 dana, dokazana ili vjerojatna invazivna mikoza u prethodnom menstrualna neutropenija ili AIDS Prisutnost simptoma GVHD-a, prvenstveno slučajeva teškog tijeka (II stupanj) ili opsežnog tijeka kronične bolesti Dugotrajna (više od 3 tjedna) primjena glukokortikoida u zadnjih 60 dana
Mikrobiološki znakovi	Izolacija kulture filamentoznih gljivica (uključujući Aspergillus spp., Fusaruim spp., Sceclosporium spp. i zygomycetes) i Cryptococcus neqformans iz sputuma ili bronhoalveolarne tekućine za ispiranje Pozitivni rezultati kulture ili citološke pretrage (izravna mikroskopija) za otkrivanje filamentoznih gljivica iz aspirata paranazalnih sinusa Detekcija filamentoznih gljivica ili Cryptococcus neoformans citološkim/izravnim mikroskopom iz sputuma ili bronhoalveolarne tekućine za ispiranje Pozitivan Aspergillus antigen u uzorcima bronhoalveolarne lavage, cerebrospinalne tekućine i krvi (najmanje dva) Pozitivan kriptokokni antigen u uzorcima krvi Detekcija gljivičnih elemenata citološkim pregledom ili izravnom mikroskopijom u uzorcima normalno sterilnih tekućina (na primjer, Cryptococcus spp. u cerebrospinalnoj tekućini) Dva pozitivna rezultata studija o otkrivanju kultura kvasca u urinu u nedostatku urinarnog katetera Kristali kandide u urinu bez urinarnog katetera Izolacija Candide spp. iz hemokultura
Klinički znakovi Donji respiratorni trakt	Mora biti povezan s mjestom iz kojeg se uzimaju uzorci za mikrobiološka istraživanja Bilo koji od sljedećih tipova novih plućnih infiltrata prema CT-u: znak aureole, znak polumjeseca, šupljina s područjima konsolidacije* Simptomi infekcije donjih dišnih putova (kašalj, bol u prsima, hemoptiza, dispneja), trenje pleure, svaka nova infiltracija koja nije uključena u znakove visokog značaja; pleuralni izljev
Gornji respiratorni trakt Znakovi visokog značaja Znakovi manjeg značaja	Radiološki znakovi invazivne infekcije u nosnim sinusima (erozija stijenke ili širenje infekcije na susjedne strukture, opsežna destrukcija kostiju lubanje) Curenje iz nosa, nazalna kongestija, nazalna ulceracija, epistaksa, periorbitalni edem, bol u gornjoj čeljusti, crna nekrotična ulceracija ili perforacija tvrdog nepca
središnji živčani sustav Znakovi visokog značaja Znakovi manjeg značaja	Radiološki znakovi sumnje na infekciju CNS-a (mastoiditis ili drugo parameningealno žarište, ekstraduralni empijem, višestruke lezije u supstanci mozga ili leđne moždine) Žarišni neurološki simptomi i znakovi, uključujući žarišne napadaje, hemiparezu; poremećaji svijesti, meningealni simptomi, poremećaji biokemijskog sastava cerebrospinalne tekućine i njezinog staničnog sastava (u odsutnosti drugih uzročnika, prema kulturi i mikroskopiji, u odsutnosti tumorskih stanica)

*U nedostatku infekcije uzrokovane mikroorganizmima koji mogu uzrokovati sličnu radiološku sliku, uključujući stvaranje šupljina (Mycobacterium spp., Legionella spp., Nocardia spp.).

Na otkrivanje u krvi ili drugih sterilnih biosupstrata gljivica kvasca, potrebno je izvršiti identifikaciju na vrstu i odrediti osjetljivost na antifungalne lijekove; kod izolacije filamentoznih (plijesni) gljiva samo identifikacija na vrstu, osjetljivost se ne utvrđuje.

U kliničkom praksa Osjetljivost filamentoznih gljiva nije proučavana zbog nesavršenih standarda za određivanje osjetljivosti takvih gljiva na antimikotike. Štoviše, samo je jedna studija pokazala korelaciju između osjetljivosti Aspergillus spp. te rezultati liječenja invazivne aspergiloze u bolesnika s hematološkim zloćudnim bolestima. Niti jedna od kasnijih studija nije pronašla slične rezultate.

Nedavno su se počela pojavljivati ​​izolirana izvješća o stvaranju stečene rezistencije gljivica A. fumigatus na itrakonazol i vorikonazol.

Određivanje vrsta gljiva, posebice onih dobivenih iz sterilnih lokusa, nužna je prvenstveno za izbor antimikotika i provođenje adekvatne antifungalne terapije. Dakle, Candida krusei je otporna na flukonazol i manje osjetljiva od drugih vrsta kvasca na amfotericin B; Aspergillus terreus, Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boydii), Trichosporon beigelii, Scopulariopsis spp. otporan na amfotericin B; Mucorales su rezistentne na itrakonazol, vorikonazol, Candida glabrata pokazuje dozno ovisnu osjetljivost na flukonazol, a kod izoliranja ove vrste gljivica, čak i osjetljivih sojeva, potrebno je povećati dozu flukonazola (odraslima se propisuje 800 mg umjesto 400 mg); Candida lusitaniae je otporna na amfotericin B.

Određivanje vrsta gljiva važno je i za provođenje epidemiološke analize u bolnici - utvrđivanje uzročnika izbijanja infekcije i, ako je moguće, izvora infekcije. Opisani su izbijanja infekcija uzrokovanih tako rijetkim gljivama kao što su C. lusitaniae, C. krusei, C. lipolytica.

Na temelju identifikacija vrsta gljiva Može se pretpostaviti invazivna mikoza ili gljivična kolonizacija sluznice. Na primjer, znatno je manja vjerojatnost da će Aspergillus niger od Aspergillus fumigatus izazvati invazivnu aspergilozu kod pacijenata s akutnom leukemijom. Izolacija Aspergillus niger iz tekućine bronhoalveolarnog lavaža najčešće se smatra kolonizacijom respiratornog trakta, a iz sputuma kontaminacijom iz zraka te zahtijeva dodatna istraživanja pri potvrdi dijagnoze invazivne aspergiloze.

Na temelju izlučevine nitastih gljiva iz sputuma, bronhoalveolarne tekućine i aspirata paranazalnih sinusa, može se samo pretpostaviti invazivna mikoza, bez uključivanja u kategoriju "dokazanih". Međutim, uvijek treba uzeti u obzir otkrivanje Aspergillus u sputumu, osobito Aspergillus fumigatus ili Aspergillus flavus, u bolesnika s neutropenijom koji primaju alogenu koštanu srž. To zahtijeva ponovni mikološki pregled i kompjutoriziranu tomografiju pluća. Dakle, s neutropenijom, vjerojatnost otkrivanja invazivne aspergiloze u slučaju pozitivne kulture Aspergillus spp. u sputumu je 80%.

Izbor Cryptococcus neoformans u imunokompromitiranih bolesnika iz respiratornog trakta (ispiranje, ispiranje) dijagnostički je značajan. Ako identifikacija kvasnih gljivica iz tekućina dobivenih iz respiratornog trakta (traheja, bronhijalni ispirci, bronhoalveolarni ispirci) imunokompromitiranih pacijenata nije potrebno istraživanje, tada je potreban probir za identifikaciju Cryptococcus neoformans iz tih uzoraka.

Otkrivanje kandide u urinu u bolesnika s neutropenijom i vrućicom obično se smatra manifestacijom diseminirane infekcije kandidom.

Pravovremeno dijagnostika invazivne uspješno koriste komercijalni test za otkrivanje cirkulacije specifičnog antigena Aspergillus spp. galactomann (polisaharidna vodotopljiva komponenta stanične stijenke gljive).

Galactomann može se odrediti dvjema metodama: metodom lateks aglutinacije (Pastorex Aspergillus, BioRAD) i metodom enzimskog imunološkog testa (Platelia Aspergillus, BioRAD).

Prednost enzimska imunološka metoda je donji prag osjetljivosti za određivanje razine galaktomana u krvi - 1 ng/ml ili manje, a lateks aglutinacijom - 15 ng/ml. Dijagnostičku vrijednost ima određivanje galaktomana u krvi (najmanje 2 uzorka), cerebrospinalnoj tekućini i bronhoalveolarnom lavažu. Osjetljivost metode enzimske imunološke analize je oko 90%, specifičnost je 90-99%, u primatelja alogene koštane srži ti su pokazatelji niži i jednaki su 60-70%, odnosno 80-90%, zbog profilaktičke uporaba antifungalnih lijekova (antimikotici smanjuju razinu praga galaktomana).

U 40% slučajeva otkrivanje galactomann u krvi ispred manifestacija invazivne aspergiloze, utvrđenih kompjutorskim pregledom pluća, a u 70% ispred kliničkih simptoma infekcije.

Dijagnostička vrijednost testa za otkrivanje antigena Aspergillus je slučaj ako se studija provodi više puta. Određivanje Aspergillus antigena u krvi treba provesti tijekom vrućice tijekom liječenja antibioticima širokog spektra u bolesnika s neutropenijom 2 puta tjedno; za upalu pluća koja se javlja ili traje tijekom antibakterijske terapije; kada se otkriju lezije u plućnom tkivu (kompjuterizirana tomografija).

Bolesti uzrokovane gljivicama ili mikozama čest su problem. Postoji nevjerojatan broj patogena koji uzrokuju mikoze.

Svake godine znanstvenici otkrivaju i opisuju nove vrste gljiva. Unatoč tome, dijagnoza i liječenje mikoza je odavno uspostavljen i jasan mehanizam.

Vrste gljivičnih bolesti

Kod ljudi većina gljivica utječe na sluznicu i kožu.

Bolesti kod kojih su gljivice uzročnici bolesti uključuju:

• lišajevi
• kandidijaza
• onihomikoza
• šareni ili pityriasis versicolor
• crni lišaj
• seboreja
• aspergiloza

Metode dijagnosticiranja mikoza

Jedna od najpopularnijih metoda je mikrobiološka dijagnostika mikoza.

Suvremene dijagnostičke metode omogućuju točno određivanje koja je gljiva bila uzročnik bolesti. U budućnosti to omogućuje odabir optimalnog tijeka liječenja. Trenutno postoje tri glavne metode laboratorijske dijagnoze mikoza.

To uključuje:

• mikroskopski
• kulturni
• serološki

Svaka metoda ima svoje prednosti. Kulturalna dijagnoza mikoza omogućuje određivanje vrste gljivica. U ovom slučaju moguće je procijeniti osjetljivost kolonija na različite lijekove.

Ova metoda će vam omogućiti odabir učinkovitog lijeka. Ova metoda zahtijeva dosta vremena za sjetvu i uzgoj kolonija.

Mikroskopske i serološke metode za dijagnosticiranje mikoza zahtijevaju manje vremena. Kada ih koristite, također se određuje vrsta patogena, ali je nemoguće provjeriti njegovu osjetljivost na lijekove. U nekim slučajevima moguće je koristiti luminiscentnu dijagnostičku metodu. Ova metoda je manje uobičajena zbog svoje složenosti.

Luminescentna metoda može se koristiti samo kada je kosa zahvaćena gljivicama. Metoda je neučinkovita za dijagnozu u ranim fazama. To je zbog činjenice da će se učinak sjaja pojaviti samo ako je kosa jako oštećena gljivicama.

Dijagnoza mikoze stopala

Mikoza stopala jedna je od najčešćih dermatomikoza.

Ovaj pojam se obično podrazumijeva kao gljivična infekcija kože stopala i noktiju.

Zapamtiti! Bolest ima relapsni tijek.

Kod dijagnosticiranja mikoze stopala potrebno ju je razlikovati od niza drugih bolesti. Dijagnoza mikoze stopala temelji se na kliničkim manifestacijama i mikroskopskom pregledu. Moguće je koristiti kulturnu metodu.

Liječenje mikoza

Antifungalni lijekovi lokalnog i sustavnog djelovanja imaju vodeću ulogu u liječenju mikoza.

Liječenje lokalnim antimikoticima usmjereno je izravno na izvor bolesti. Istodobno, negativan utjecaj na tijelo u cjelini je minimalan.

Sustavni antimikotici propisuju se ako:

• lokalni antifungalni lijekovi su neučinkoviti
• bolest je sistemske prirode

Lijekovi za desenzibilizaciju i antihistaminike propisuju se kada mikoze prate upalni proces ili alergijske reakcije. Ako je sekundarna infekcija povezana s mikozama, mogu se propisati antibakterijski lijekovi.

Važno je započeti liječenje gljivičnih bolesti u ranim fazama bolesti. Ako je proces star, liječenje može trajati duže.

Kada se pojave prvi simptomi, odmah potražite pomoć našeg liječnika.

Prema znanstvenicima, 70% svjetske populacije ima simptome mikoze stopala. Ova bolest zahvaća interdigitalne nabore i kožu na tabanima. Uzročnik bolesti je gljiva koja je isprva pronađena samo u ograničenim područjima jugoistočne Azije i Afrike. Prvi svjetski rat, uzrokujući masovnu migraciju ljudi i pogoršanje sanitarnih uvjeta, doveo je do širenja bolesti po cijelom svijetu.

Što uzrokuje mikozu stopala

Glavni uzročnik bolesti je Trichophyton rubrum. Infekciju mogu uzrokovati T. mentagrophytes i Epidermophyton floccosum. Gljivice roda Candida i mikroorganizmi plijesni mnogo rjeđe mogu postati patogeni mikrobi.

Najznačajniji čimbenici rizika za nastanak bolesti:

• dijabetes;
• stanje imunodeficijencije (AIDS);
• ravna stopala;
• ateroskleroza perifernih arterija;
• proširene vene donjih ekstremiteta.

Vanjski uvjeti koji pogoduju razvoju infekcije:

• zatvorene neupijajuće cipele;
• ozljede stopala (žuljevi, abrazije);
• bavljenje sportom.

Simptomi atletskog stopala najčešće se javljaju kod odraslih muškaraca. Djeca rijetko obolijevaju.

Simptomi mikoze stopala

Kako se bolest razvija, pojavljuje se ljuštenje i suha koža, svrbež i peckanje, osobito u međuprostorima između prstiju, te pojava bolnih pukotina ispod prstiju. Ponekad su prvi simptomi mikoze stopala mjehurići koji pucaju s stvaranjem erozija. Često se bolest javlja u izbrisanom obliku, očituje se samo blagim ljuštenjem, koje podsjeća na brašno, u naborima između prstiju.

Postoje 4 klinička oblika bolesti.

Interdigitalna ili intertriginozna varijanta je najčešća. Koža između prstiju pocrveni, puca, površinski sloj se vlaži i ljušti. Ovi se znakovi protežu do tabana i praćeni su jakim svrbežom i pečenjem. Često je pridružena bakterijska upala.

Skvamozno-hiperkeratozna varijanta povezana je s jakim zadebljanjem i pucanjem kože. Potplat pocrveni i ljušti se. U predjelu pete pojavljuju se duboke, bolne pukotine, svrbež je obično nekarakterističan. Ovo je često bilateralna lezija i također se naziva "mokasinovo stopalo".

Dishidrotična varijanta popraćena je pojavom više malih, svrbežnih, bolnih mjehurića. Oni se spajaju jedni s drugima, tvoreći velike mjehuriće. Poklopci mjehurića pucaju, otkrivajući sjajnu, ranjivu, bolnu površinu - eroziju. Vanjske manifestacije nalikuju ekcemu.

Mikrobna upala često je povezana s povećanjem ingvinalnih limfnih čvorova, vrućicom, bolovima u nozi, mučninom, glavoboljom i drugim znakovima intoksikacije. Kod dishidrotičnog oblika često se javlja alergija na gljivice - mikotični ekcem. Prati ga osip na područjima tijela koja nisu zaražena gljivicama, na primjer, na rukama.

Izbrisana verzija obično prolazi nezapaženo. Prati ga lagano ljuštenje kože između velikog i kažiprsta i/ili domalog i malog prsta na stopalu. Nema svrbeža.

Znakovi mikoze stopala

Različite vrste mikoza stopala mogu biti neovisne bolesti ili se javljaju kao dio opće gljivične infekcije tijela. Ponekad se znak "dvije noge - jedna ruka" javlja s uključenošću ovih organa. Može se pojaviti onihomikoza, gljivična destrukcija nokta. Ponekad su istovremeno zahvaćeni i ingvinalni nabori.

Glavni simptomi i liječenje mikoze stopala prikazani su na fotografiji:

Ljuštenje kože

Suha i ispucala koža

Mjehurići i erozije

Dijagnostika

Iskusni dermatolog već pri prvom pregledu može prepoznati različite vrste mikoza stopala. Međutim, za potvrdu dijagnoze potreban je mikroskopski pregled. Za to se koriste ljuske iz lezije, ostrugane lopaticom i tretirane otopinom lužine. Dobiveni materijal se ispituje pod mikroskopom i otkrivaju se patogeni.

Izravna mikroskopija je brza, jeftina i jednostavna za izvođenje, ali ne može odrediti koja vrsta gljivica uzrokuje bolest. Stoga se materijal inokulira na hranjivu podlogu, nakon čega slijedi kulturalni pregled dobivenog materijala. Međutim, moguće je dobiti kulturu gljivice nakon otkrivanja pod mikroskopom samo u 20-6% slučajeva.

Vrste liječenja mikoze stopala

Lijekove za liječenje gljivičnih bolesti treba propisati dermatolog. Obično se liječenje mikoze stopala provodi vanjskim sredstvima.

Jedan od učinkovitih lijekova za ovu bolest je klotrimazol. U našoj trgovini možete ga kupiti po niskoj cijeni. Lijek u obliku losiona Klotrimazol za nokte i kožu suzbija razmnožavanje gljivica u debljini stratum corneuma epitela. Ako su zahvaćeni interdigitalni nabori, losion se nanosi svakodnevno na čistu, suhu kožu stopala tjedan dana, po potrebi i duže.

U slučaju jakog orožnjavanja i pucanja kože potrebno je najprije ukloniti mrtve naslage kože. To zahtijeva korištenje lijekova za piling. Na primjer, propisana je salicilna mast, kreme s mliječnom kiselinom ili ureom. Nakon uklanjanja rožnatih naslaga losion se koristi 1 – 2 puta dnevno.

U dishidrotičnoj varijanti, prvi korak je smanjiti plač. Za to se koriste losioni s taninom ili bornom kiselinom. U teškim slučajevima liječenju se dodaju glukokortikoidi. Zatim nanesite Clotrimazole losion prema uobičajenom režimu.

Ako je stopalo istrošeno, tretirajte ga losionom jednom dnevno tijekom 7-10 dana, ali trajanje tečaja je individualno i određuje ga liječnik.

Sustavna terapija

Dugotrajno ili rekurentno atletsko stopalo može zahtijevati oralne antifungalne lijekove. Iz probavnog trakta prelaze u krvotok, a zatim u kožu, gdje uništavaju gljivice. Koriste se tri glavna lijeka:

• flukonazol;
• itrakonazol;
• terbinafin

Trajanje uzimanja ovih lijekova je najmanje mjesec dana. Cijena im je prilično visoka. Stoga je spriječiti mikozu stopala uvijek lakše i isplativije nego liječiti.

Sustavni lijekovi se posebno često propisuju ako je gljiva zahvatila ne samo kožu, već i nokte. U tom slučaju, lijekovi se nakupljaju u rastućem dijelu ploče nokta, a zdravi nokat postupno izrasta. Kako bi se poboljšao učinak, nokat se može potpuno ukloniti kirurški, nakon čega se obnavlja bez gljivica.

U starijih bolesnika često je potrebna kombinacija uklanjanja nokta te sistemske i lokalne antifungalne terapije. U ovoj skupini bolesnika nokti često sporo rastu, prokrvljenost stopala je poremećena, pa je za postizanje učinka potrebna velika doza lijekova i dugotrajno liječenje.

Liječenje narodnim lijekovima

Korištenje samo recepata tradicionalne medicine neće pomoći da se riješite gljivica. Međutim, takav dodatak konvencionalnoj terapiji skraćuje tijek liječenja i ubrzava oporavak.

Korisno je svake večeri napraviti tople kupke za stopala u trajanju od 10 minuta, zatim stopala temeljito potapkati ručnikom, posebno između prstiju, te namazati ljekovitim losionom za nokte i kožu Clotrimazole. Korisni sastojci za kupku koji ublažavaju upalu i smanjuju svrbež:

• biljka celandin i gospina trava;
• korijenje čička;
• trava pelina;
• lišće eukaliptusa;
• iglice jele;
• svježi talog od kuhane mljevene kave;
• sol;
• mješavina ribanog sapuna za pranje rublja, sode bikarbone, kalijevog permanganata i senfa u prahu.

Zahvaćena područja mogu se mazati brezovim katranom ili samostalno pripremljenom mašću od 100 grama maslaca pomiješanog sa zgnječenom glavicom češnjaka. Koristan je i propolis kojim se mogu priviti bolni nokti.

Korisno je napraviti obloge od prirodnih lijekova. Najprije se ostave 1 do 2 sata, a ako podnose i preko noći. Koriste se sljedeći sastojci:

• pulpa bundeve;
• zgnječeno sjeme crne rotkve;
• paprena metvica, mljevena sa soli;
• lišće čička ili rowan, malo omekšano valjkom.

Učinkovito je mazanje oboljelih mjesta sokovima nekih biljaka i drugim prirodnim lijekovima:

• alkoholna otopina propolisa;
• sok od luka ili češnjaka;
• sok od celandina;
• ulje čajevca.

Sprječavanje bolesti

Kako bi se izbjegla mikoza ili spriječio njezin povratak, potrebna je jednostavna, ali stalna prevencija:

• ljeti nosite prozračne cipele od prirodnog materijala;
• kada posjećujete bazene, kupke, javne tuševe, nosite pojedinačne gumene papuče;
• nemojte nositi tuđe cipele, na primjer, u posjeti;
• koristite samo vlastitu higijensku opremu - škare, plovućac, turpiju za nokte.

Kako bi se izbjegla ponovna infekcija, uloške i unutarnje površine cipela treba redovito tretirati dezinficijensom. Poznati narodni recept je otopina octene esencije, ali ima oštar, neugodan miris.

Liječnici preporučuju korištenje lijeka Mikospray, koji ima ne samo antifungalni, već i antibakterijski učinak. Mycospray je odličan ne samo za tretiranje cipela, već i za nanošenje na stopala prije posjeta javnim mjestima za zaštitu stopala.

Stanovnici Moskve i regije mogu kupiti lijekove za liječenje mikoze stopala i za njegovu prevenciju u našoj internetskoj trgovini. Imaju dokazanu učinkovitost i sigurnost. Njihova uporaba preporuča se svima koji se ne žele zaraziti gljivicama stopala ili ih se brzo riješiti.