पैरों के माइकोसिस के लक्षण। फंगल त्वचा रोगों का प्रयोगशाला निदान सतही मायकोसेस के निदान में उपयोग नहीं किया जाता है

तराजू या बालों को कांच की स्लाइड पर रखा जाता है (कांच को चिकना किया जाना चाहिए) और कास्टिक पोटेशियम या कास्टिक सोडा के 30% घोल की एक, दो या तीन बूंदों से भरा जाता है और कवरस्लिप से ढक दिया जाता है। 2-3 मिनट के लिए, अल्कोहल बर्नर की लौ पर हल्का गर्म करके, ढक्कन वाले गिलास से तैयारी को हल्के से दबाएं जब तक
तराजू की जांच करते समय ग्रे बादल। बालों को नष्ट नहीं करना चाहिए, ऐसी गर्मी से वे केवल सूजते हैं। गहरे रंग के डायाफ्राम के साथ सूक्ष्म परीक्षण (100-200 गुना आवर्धन) से कवक तत्वों - बीजाणु या माइसेलियम धागे का पता चलता है। सूक्ष्म परीक्षण की सफलता के लिए एक आवश्यक शर्त तराजू और बाल प्राप्त करने की संपूर्णता है, जिसे विशेष चिमटी (बरौनी चिमटी) के साथ प्रभावित क्षेत्रों से लिया जाना चाहिए। न केवल स्पष्ट रूप से दिखाई देने वाले बालों, पपड़ी और तराजू पर ध्यान देना आवश्यक है, बल्कि बमुश्किल ध्यान देने योग्य बाल अवशेष (तथाकथित स्टंप) और ब्लैकहेड्स पर भी ध्यान देना आवश्यक है, जिन्हें स्केलपेल या हिस्टोलॉजिकल सुई से हटा दिया जाता है। आपको रोगी को प्रभावित क्षेत्रों की ओर इशारा करके कभी भी संतुष्ट नहीं होना चाहिए; डॉक्टर को स्वयं पूरी खोपड़ी की सावधानीपूर्वक जांच करनी चाहिए।

ट्राइकोफाइटोसिस से प्रभावित बालों में फंगल बीजाणु एक श्रृंखला में व्यवस्थित होते हैं। माइक्रोस्पोरिया में, बीजाणु दाद की तुलना में बहुत छोटे होते हैं, चेन नहीं बनाते हैं और बालों के बाहर स्थित होते हैं। बालों के अंदर सेप्टेट मायसेलियम की डोरियाँ चलती हैं। बाल तो मानो आवरण ओढ़े हुए विवादग्रस्त हैं। पपड़ी के साथ, बहुरूपी बीजाणु, मोटे, विविध धागे और आमतौर पर हवा के बुलबुले देखे जाते हैं (चित्र 48)।

इस मामले में, कवक पूरे बालों को पूरी तरह से प्रभावित नहीं करता है, लेकिन अप्रभावित क्षेत्र बने रहते हैं।
चिकनी त्वचा से सामग्री प्राप्त करने के लिए, शल्कों को खुरच कर निकाला जाता है। घाव के परिधीय क्षेत्रों को एक तेज चम्मच या स्केलपेल से साफ करें। तेज मेडिकल चाकू (स्केलपेल) से नाखूनों को खुरचना, नाखून प्लेट की भीतरी सतह से छोटे लेकिन गहरे हिस्सों को हटाना या नाखून की सींगदार प्लेटों से पिट्रियासिस पाउडर को खुरचना अधिक सुविधाजनक है।
आरंभिक सामग्री को एक परखनली में क्षार के साथ उबाला जाता है और फिर 12-20 घंटों के लिए इस परखनली में छोड़ दिया जाता है।
इसके बाद, सामग्री को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है और तलछट की जांच माइक्रोस्कोप (एन.ए. चेर्नोगुबोव की विधि) के तहत की जाती है।
कवक कार्बोहाइड्रेट और प्रोटीन पदार्थों वाले कृत्रिम पोषक माध्यम पर अच्छी तरह से विकसित होते हैं। विशेष रूप से आम तथाकथित मूल सबाउरौड माध्यम, बियर वोर्ट, अगर और सब्जियां हैं।

2. पैथोलॉजिकल सामग्री की प्रयोगशाला जांच

2.1. सूक्ष्म अध्ययन

कवक के रूपात्मक तत्वों का पता लगाने के लिए - यीस्ट कोशिकाएं, स्यूडोमाइसीलियम, मायसेलियम, कोनिडियोफोरस, कोनिडिया, गहरे मायकोसेस के ऊतक रूप - देशी और दागदार तैयारी में रोग संबंधी सामग्री की जांच की जाती है।

तरल पैथोलॉजिकल सामग्री की जांच बिना दाग वाली अवस्था में निम्नलिखित साफ़ करने वाले तरल पदार्थों में की जाती है: ग्लिसरीन के साथ अल्कोहल का मिश्रण (एथिल अल्कोहल 1 भाग, ग्लिसरीन 2 भाग, आसुत जल 2 भाग), लूगोल का घोल (1 ग्राम क्रिस्टलीय आयोडीन, 2 ग्राम पोटेशियम आयोडाइड, 150 मिली पानी), साथ ही पानी या खारा में। देशी तैयारी तैयार करने के लिए, सामग्री की एक बूंद को लूप या पिपेट का उपयोग करके कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है, फिर समाशोधन तरल की 1-2 बूंदें लगाई जाती हैं, एक कवर ग्लास से ढक दिया जाता है और 1:80 (10x ऐपिस) के कम आवर्धन पर माइक्रोस्कोप किया जाता है और 8x उद्देश्य), जिस पर आप खमीर कोशिकाओं और स्यूडोमाइसीलियम, मायसेलियम और मशरूम के अन्य तत्वों के समूह देख सकते हैं। 1:400 के उच्च आवर्धन पर, व्यक्तिगत कोशिकाओं को चित्रित किया जा सकता है।

सघन पैथोलॉजिकल सामग्री (त्वचा, नाखून के छिलके) को 10-20% KOH घोल की एक बूंद में रखा जाता है, बर्नर की लौ पर थोड़ा गर्म किया जाता है (बेहतर मैक्रेशन के लिए) जब तक कि बूंद की परिधि के आसपास क्षार क्रिस्टल दिखाई न दें। फिर बूंद को एक कवर स्लिप से ढक दिया जाता है, उस पर हल्के से दबाया जाता है और सूक्ष्मदर्शी रूप से जांच की जाती है, स्केल खोजने के लिए पहले कम आवर्धन के तहत, फिर उच्च आवर्धन पर।

बाल सामग्री में, बालों के चारों ओर बीजाणुओं का आवरण (एक्टोथ्रिक्स) या बालों के भीतर (एंडोथ्रिक्स) कवक तत्व आमतौर पर बहुत स्पष्ट रूप से दिखाई देते हैं। बालों के घाव, साथ ही बीजाणुओं का आकार, विभिन्न प्रकार के डर्माटोफाइट्स के लिए विशिष्ट होते हैं। कवक संरचनाओं और कलाकृतियों के बीच विभेदक निदान आवश्यक है। गलत-सकारात्मक परिणामों के संभावित स्रोतों में लिपिड बूंदें, हवा के बुलबुले, कपड़ा फाइबर और तथाकथित "मोज़ेक मशरूम" शामिल हैं। लिपिड की बूंदें यीस्ट कोशिकाओं से मिलती-जुलती हो सकती हैं, जो कि खराब तरीके से साफ की गई सामग्री में सबसे आम पाई जाती है। कपड़ा फाइबर आमतौर पर एपिडर्मिस, बाल या नाखून की सामग्री से अलग होते हैं। वे कवक हाइपहे से बड़े होते हैं, उनकी मोटाई असमान होती है और उनमें सेप्टा नहीं होता है। "मोज़ेक मशरूम" तैयारियों के अत्यधिक ताप के कारण KOH के क्रिस्टलीकरण के दौरान प्राप्त एक कलाकृति है। कवक के विपरीत, कोशिकाओं में कोई स्पष्ट विभाजन नहीं होता है।

फंगल संक्रमण के निदान में एक महत्वपूर्ण कदम रंगीन तैयारी तैयार करना है। किसी भी पैथोलॉजिकल सामग्री (स्मीयर तैयारी, अंग प्रिंट, सेंट्रीफ्यूगेट्स और निश्चित रूप से, हिस्टोलॉजिकल अनुभाग) को तीन मुख्य प्रकार के प्रसंस्करण से गुजरना होगा: 1) वास्तविक कवक - यूमाइसेट्स की पहचान करने के लिए पीएएस विधि का उपयोग करके धुंधला हो जाना; 2) ग्राम विधि के अनुसार या ग्राम-वीगर्ट के अनुसार संशोधनों में, बोगोलेपोव के अनुसार, ब्राउन-ब्रेना के अनुसार धुंधला हो जाना - सहवर्ती बैक्टीरियल माइक्रोबायोटा की पहचान करने के लिए, एक्टिनोमाइसेट्स और नोकार्डिया की पहचान करने के लिए; 3) ज़ीहल-नील्सन विधि के अनुसार धुंधलापन या किन्योन विधि के अनुसार संशोधन - एसिड-प्रतिरोधी सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए, मुख्य रूप से माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस के साथ संकेत और भेदभाव के लिए, कुष्ठ रोग, नोकार्डिया और बीजाणु बनाने वाले यीस्ट के प्रेरक एजेंटों का पता लगाने के लिए।

पीएएस विधि (पियोडिक एसिड शिफ) में सूक्ष्मजीवों की दीवारों में तटस्थ पॉलीसेकेराइड की पहचान करना शामिल है। अधिकांश यूमाइसेट्स की दीवारों में अलग-अलग सांद्रता में ग्लूकन-मैनन कॉम्प्लेक्स होता है, जिसके कारण रंग होता है।

प्रोकैरियोट्स (बैक्टीरिया) पीएएस-नकारात्मक हो जाते हैं, जिसमें माइकोलॉजिस्ट की रुचि वाले एक्टिनोमाइसेट्स और नोकार्डिया भी शामिल हैं। हालाँकि, एक्टिनोमाइकोटिक ड्रूसन के निर्माण के दौरान, एक तथाकथित "सीमेंट" बनता है, जो वनस्पति एक्टिनोमाइकोटिक मायसेलियम को एक दाने में चिपका देता है, जो एक पीएएस-पॉजिटिव दाग भी देता है। इस संबंध में, यह विधि एक्टिनोमायकोसिस के निदान में भी लागू होती है।

फंगल संक्रमण के ऊतक रूपों के निदान के लिए पीएएस प्रतिक्रिया (और इसका संशोधन) सबसे महत्वपूर्ण तरीका है। यह विधि आवधिक या क्रोमिक एसिड के साथ कार्बोहाइड्रेट के ग्लाइकोलिक समूहों के ऑक्सीकरण पर आधारित है। आवधिक एसिड 1,2 और 1,4 ग्लाइकोल को एल्डिहाइड में ऑक्सीकरण करता है और हाइड्रॉक्सिल समूहों वाले कार्बन परमाणुओं के बीच के बंधन को तोड़ देता है। एल्डिहाइड शिफ़ अभिकर्मक का उपयोग करके एल्डिहाइड समूहों का भी पता लगाया जा सकता है। स्वस्थानी में, कवक की दीवारों में, हेटरोपॉलीसेकेराइड कॉम्प्लेक्स तीव्रता से बैंगनी-लाल रंग का हो जाता है (पद्धति - परिशिष्ट देखें)।

आसपास के ऊतकों के रंग को दबाने के लिए, हल्के हरे, मेथेनिल पीले, आदि के साथ उपचार ("काउंटरकलर") का उपयोग किया जाता है। इस मामले में, केवल कवक कोशिकाओं का पता लगाया जाता है, जो ऊतकों में या स्मीयर तैयारियों में रोगज़नक़ को इंगित करने के चरण में बहुत उपयोगी होता है। साथ ही, ऐसी दवाओं के प्रति शरीर की प्रतिक्रिया और ऊतक परिवर्तन का आकलन करना संभव नहीं है। हेमटॉक्सिलिन के साथ अतिरिक्त धुंधलापन के साथ पीएएस विधि का उपयोग करके समानांतर तैयारी का रंगाई करना हमेशा आवश्यक होता है।

व्यवहार में, न केवल शास्त्रीय संस्करण में पीएएस विधि का उपयोग किया जाता है, बल्कि इसके विभिन्न संशोधनों का भी उपयोग किया जाता है: क्रोमिक एसिड के साथ ऑक्सीकरण (आयोडिक एसिड के बजाय) - यह बाउर प्रतिक्रिया, ग्रिडली धुंधला हो जाना, गोमोरी-ग्रोकॉट का उपयोग करके मिथेनमाइन सिल्वर के साथ संसेचन है। तरीका। इन सभी का उपयोग कवक के ऊतक रूपों का पता लगाने के लिए सफलतापूर्वक किया जाता है, और वे एक ही सिद्धांत (तकनीक - परिशिष्ट देखें) पर आधारित हैं। टेबल तीन।

टेबल तीन

मशरूम के ऊतक रूपों के टिंक्टोरियल गुण

(पैथोलॉजिकल सामग्री में, हिस्टोलॉजिकल अनुभागों में)

अवसरवादी मायकोसेस	पता लगाने के तरीके
कैंडिडिआसिस	पीएएस या ग्रिडली धुंधलापन
एस्परगिलोसिस	हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन, गोमोरी-ग्रोकॉट संसेचन
जाइगोमाइकोसिस	हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन
क्रिप्टोकॉकोसिस	अल्शियन नीला (माउरी विधि के अनुसार) + पीएएस प्रतिक्रिया + हेमेटोक्सिलिन
न्यूमोसिस्टिस	बाउर विधि के अनुसार धुंधलापन, गोमोरी-ग्रोकॉट के अनुसार संसेचन, थिओनिन के साथ धुंधलापन
फुसैरियम	रोमानोव्स्की-गिमेसा विधि के अनुसार धुंधलापन, राइट विधि के अनुसार
सिडोस्पोरियासिस
ट्राइकोस्पोरोसिस	हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन, रोमानोव्स्की-गिम्सा धुंधलापन
फियोहाइफोमाइकोसिस और क्रोमोमाइकोसिस	हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन
प्राथमिक रोगजनक मायकोसेस:	पता लगाने के तरीके
कोक्सीडिओइडोसिस	पीएएस प्रतिक्रिया + हेमेटोक्सिलिन
हिस्टोप्लाज्मोसिस	गोमोरी-ग्रोकॉट के अनुसार संसेचन, बाउर विधि का उपयोग करके धुंधलापन, रोमानोव्स्की-गिम्सा विधि का उपयोग करके धुंधलापन
उत्तर अमेरिकी ब्लास्टोमाइकोसिस
पैराकोसिडियोसिस	पीएएस प्रतिक्रिया, गोमोरी-ग्रोकॉट के अनुसार संसेचन
एडियास्पिरोमाइकोसिस	हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन, आरएएस प्रतिक्रिया
स्यूडोमाइकोसिस:	पता लगाने के तरीके
किरणकवकमयता	हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन, ग्राम-वीगर्ट दाग
नोकार्डियोसिस	ज़ीहल-नील्सन विधि के अनुसार धुंधलापन, किन्योन विधि के अनुसार, ग्राम विधि के अनुसार।

यदि क्रिप्टोकॉकोसिस का निदान मान लिया गया है, तो कैप्सुलर सामग्री की विशिष्ट पहचान के लिए तरीकों का उपयोग करने की सलाह दी जाती है Cr.neoformansग्लाइकोसामिनोग्लाइकन्स (अम्लीय पॉलीसेकेराइड) युक्त। इस प्रयोजन के लिए, अल्सियन ब्लू (माउरी विधि के अनुसार), बेसिक ब्राउन (शुबिच विधि के अनुसार), और म्यूसीकारमाइन स्टेनिंग का उपयोग किया जाता है। ट्रिपल स्टेनिंग बहुत उपयोगी है: पीएएस प्रतिक्रिया, फिर अल्शियन ब्लू के साथ उपचार, फिर हेमेटोक्सिलिन। इस मामले में, क्रिप्टोकॉसी और समान आकारिकी वाले अन्य कवक के ऊतक रूपों के बीच अंतर संभव हो जाता है।

पैथोलॉजिकल सामग्री (हिस्टोलॉजिकल तैयारी) के विवरण में कवक के ऊतक रूपों की आकृति विज्ञान और आकार, उनकी टिनक्टोरियल विशेषताओं, मेजबान ऊतकों से संबंध, फागोसाइटोसिस की उपस्थिति और साथ में माइक्रोबायोटा के निर्धारण पर डेटा शामिल है।

2.2. यीस्ट कवक के कारण होने वाले मायकोसेस में पैथोलॉजिकल सामग्री की बुआई और कोशिकाओं की मात्रात्मक गिनती

कवक की पहचान करने और ऐंटिफंगल दवाओं के प्रति संवेदनशीलता के निर्धारण के लिए कवक के कल्चर प्राप्त करना आवश्यक है।

जांच से पहले, थूक को बाँझ मोतियों से हिलाकर 5-10 मिनट के लिए समरूप बनाया जाता है। यदि थूक में बहुत अधिक बलगम है और खराब रूप से समरूप है, तो इसमें 1-2 मिलीलीटर बाँझ खारा घोल मिलाया जा सकता है। देशी या दागदार तैयारियों में थूक की सूक्ष्म जांच की जाती है। यदि उच्च आवर्धन के साथ थूक की माइक्रोस्कोपी देखने के क्षेत्र में फंगल तत्वों को दिखाती है, तो इसे 1:10, 1:100, 1:1000 के तनुकरण में बोया जाना चाहिए; यदि फंगल तत्वों का पता नहीं चलता है, तो बलगम को बिना पतला किए बोया जाना चाहिए। द्रवीकरण एक तरल पोषक माध्यम (वॉर्ट, सबाउरॉड, 1% पेप्टोन पानी) या बाँझ खारा में तैयार किया जाता है। प्रत्येक तनुकरण से, 0.1 मिलीलीटर को जीवाणुरोधी एंटीबायोटिक दवाओं - पेनिसिलिन और स्ट्रेप्टोमाइसिन, बायोमाइसिन (100-200 यूनिट/एमएल माध्यम) के साथ 2 कप वोर्ट अगर, सबाउरॉड अगर या एमपीए पर एक स्पैटुला का उपयोग करके टीका लगाया जाता है। पोषक तत्व माध्यम को थर्मोस्टेट में +37 C पर पहले से सुखाया जाता है, क्योंकि संघनन की उपस्थिति में, कालोनियों का विकास संगमपूर्ण हो सकता है। फसलों को 48 घंटों के लिए +37 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है। फिर, यदि एक ही प्रकार की खमीर कालोनियों की वृद्धि होती है, तो उन्हें मात्रात्मक रूप से गिना जाता है। परीक्षण सामग्री के 1 मिलीलीटर या 1 ग्राम में खमीर कोशिकाओं (एन) की संख्या की गणना सूत्र एन = авс के अनुसार की जाती है, जहां एक पेट्री डिश पर कॉलोनियों की औसत संख्या है, मात्रा के साथ बी = 10 0.1 मिली के इनोकुलम का, सी मल के तनुकरण की डिग्री (10,100,1000) है।

गणना उदाहरण: 1:1000 के तनुकरण वाले व्यंजनों पर, औसतन 60 कॉलोनियां बढ़ीं, जबकि अध्ययन के तहत मल के 1 मिलीलीटर में 60 x 10 x 1000 = 600,000 खमीर कोशिकाएं होती हैं।

बाल, ब्रांकाई के वाशिंग तरल पदार्थ, मैक्सिलरी गुहाएं, पित्त (भाग ए, बी, सी), गैस्ट्रिक रस, ग्रहणी सामग्री, मूत्र को अपकेंद्रित्र ट्यूबों में स्थानांतरित किया जाता है और 10-15 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है, जिसके बाद सतह पर तैरनेवाला तरल जल्दी से निकल जाता है। माइक्रोस्कोपी के लिए देशी तैयारियां तलछट से तैयार की जाती हैं। यदि माइक्रोस्कोपी दृश्य के प्रत्येक क्षेत्र में खमीर कोशिकाओं को प्रकट करती है, तो बुआई 1:100 और 1:1000, 0.1 मिलीलीटर प्रत्येक के घोल में ठोस पोषक मीडिया पर की जाती है और 48 घंटों के लिए 37 सी पर ऊष्मायन किया जाता है। यदि तलछट की माइक्रोस्कोपी होती है खमीर कोशिकाओं को प्रकट न करें, तनुकरण के बिना बोई गई तलछट। यीस्ट फ्लोरा की मात्रा की गणना प्रति 1 मिली पैथोलॉजिकल सामग्री में की जाती है।

मल को 0.2 ग्राम की मात्रा में मापने वाले चम्मच से लिया जाता है, 1.8 मिलीलीटर तरल वोर्ट में रखा जाता है और कांच की छड़ से अच्छी तरह हिलाया जाता है। परिणामी तनुकरण (1:10) को 5-10 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है, 1:100, 1:1000 का तनुकरण तैयार किया जाता है और अगर माध्यम के साथ 2 पेट्री डिश पर 0.1 मिलीलीटर की मात्रा में टीका लगाया जाता है। यीस्ट फ्लोरा की मात्रा प्रति 1 ग्राम मल में दर्ज की जाती है।

मस्तिष्कमेरु द्रव। इसके स्वरूप को चिह्नित करें (पारदर्शी या बादलदार, रंगहीन या रंगीन, रक्त की उपस्थिति, तलछट)। अपकेंद्रित्र के बाद मस्तिष्कमेरु द्रव तलछट से माइक्रोस्कोपी स्मीयर। तीन तैयारियां तैयार की जाती हैं: देशी - बाँझ खारा की एक बूंद में; देशी - स्याही की एक बूंद में और पीएएस विधि का उपयोग करके धुंधला करने के लिए एक धब्बा, मोवरी के अनुसार ग्राम और अल्शियन नीला।

माइक्रोस्कोपी मस्तिष्कमेरु द्रवदेशी और रंगीन तैयारियों में, यह हमें नवोदित खमीर कोशिकाओं और फंगल मायसेलियम के टुकड़ों, या बैक्टीरिया की उपस्थिति निर्धारित करने की अनुमति देता है जो प्युलुलेंट मेनिनजाइटिस (मेनिंगोकोकस, न्यूमोकोकस, हेमोफिलस इन्फ्लुएंजा, आदि) का कारण बनते हैं। स्याही की तैयारी में एक कैप्सुलर फंगस का पता लगाया जा सकता है। क्रिप्टोकोकस नियोफ़ॉर्मन्स।उसी समय, स्याही की ग्रे पृष्ठभूमि पर नवोदित खमीर कोशिकाएं दिखाई देती हैं, जो कैप्सूल के हल्के प्रभामंडल से घिरी होती हैं। स्याही की तैयारी में खमीर के रूप भी शामिल हो सकते हैं कैनडीडा अल्बिकन्सजिसमें कोशिका के चारों ओर कैप्सूल का हल्का प्रभामंडल नहीं होता है।

करोड़। नियोफ़ॉर्मन्सएल्शियन ब्लू स्टेनिंग (मोवरी) का उपयोग करके भी इसका पता लगाया जा सकता है। रंग कैप्सुलर हेटरोपॉलीसेकेराइड विशेषता के चयनात्मक पता लगाने के कारण होता है Cr.neoformans. यदि ग्राम-स्टैन्ड तैयारी में जीवाणु वनस्पति का पता लगाया जाता है, तो उचित बैक्टीरियोलॉजिकल तरीकों का उपयोग करके मस्तिष्कमेरु द्रव की आगे की जांच की जाती है। तलछट की माइक्रोस्कोपी के बाद, तरल को 3 कप ताजा तैयार, सूखे वोर्ट अगर या सबाउरॉड अगर के साथ-साथ तरल वोर्ट या तरल सबाउरॉड माध्यम पर टीका लगाया जाता है। कप 1 और 2 के पोषक तत्व अगर की सतह पर तरल तलछट की 2-3 बूंदें लगाएं और इसे एक स्पैटुला के साथ अच्छी तरह से रगड़ें, और फिलामेंटस कवक का पता लगाने के लिए कप 3 के अगर की सतह पर तीन बिंदुओं पर 1 बूंद डालें। शेष तरल को 5 मिलीलीटर तरल वोर्ट या सबौरौड अगर में स्थानांतरित किया जाता है। फसलें दो तापमान स्थितियों पर उगाई जाती हैं: कप 1 - +37 डिग्री सेल्सियस पर, और कप 2 और 3 और तरल माध्यम में बुआई - +28 डिग्री सेल्सियस - +30 डिग्री सेल्सियस पर। +37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर फसलें देखी जाती हैं 2 और 5वें दिन, और 28 - 30 बजे - वृद्धि के 4वें, 7वें, 10वें दिन। यदि 5वें दिन +37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर और 10वें दिन 28-30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर कोई वृद्धि नहीं होती है, तो तरल पोषक माध्यम से वोर्ट या सबौरौड अगर के साथ प्लेटों पर बोएं। यदि यीस्ट वनस्पतियों की वृद्धि नहीं होती है, तो तरल को टीका लगाने का परिणाम नकारात्मक दर्ज किया जाता है।

भगन्दर का स्राव. अध्ययन देशी या दागदार तैयारियों में सामग्री की माइक्रोस्कोपी से शुरू होता है। फिर सामग्री को एक अगर माध्यम (वॉर्ट या सबाउरॉड) पर टीका लगाया जाता है, जिसके लिए डिस्चार्ज की 2-3 बूंदें एक कप पर लगाई जाती हैं और एक स्पैटुला के साथ अगर की सतह पर फैला दी जाती हैं। फसलों को +37 डिग्री सेल्सियस पर 48 घंटों के लिए ऊष्मायन किया जाता है।

श्लेष्मा झिल्ली का स्राव.

1. टैम्पोन को 2 मिलीलीटर तरल माध्यम (वॉर्ट, सबाउरॉड मीडियम या एमपीबी) के साथ एक टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है और स्टॉपर को भिगोए बिना 5-7 मिनट तक हिलाया जाता है। 1:10, 1:100 का पतलापन तैयार करें और प्रत्येक तनुकरण के 0.1 मिलीलीटर को दो कप वोर्ट अगर, सबाउरौड अगर या एमपीए पर डालें। ठोस मीडिया और एक टेस्ट ट्यूब पर एक तरल माध्यम के साथ एक स्वाब (संवर्द्धन के लिए) पर टीकाकरण +37 सी के तापमान पर किया जाता है। 48 घंटों के बाद, कालोनियों की संख्या गिना जाता है और एक स्वाब के साथ ली गई खमीर कोशिकाओं की संख्या होती है लगभग निर्धारित। ऐसा करने के लिए, विकसित खमीर कालोनियों की संख्या को 20 से गुणा किया जाता है और पतला किया जाता है। यदि प्लेटों पर कालोनियों की कोई वृद्धि नहीं होती है, तो लिए गए तनुकरण को संवर्धन माध्यम से वोर्ट अगर के साथ एक प्लेट पर फिर से बोया जाता है।

2. पोषक माध्यम की सतह पर स्वैब को घुमाकर घुमाकर बुआई की जा सकती है। इस मामले में, खमीर कालोनियों की संख्या को ध्यान में नहीं रखा जाता है, लेकिन केवल वृद्धि की उपस्थिति और तीव्रता को नोट किया जाता है: एकल कालोनियां, महत्वपूर्ण या निरंतर वृद्धि, माइक्रोबायोटा विकास की कमी।

खून। रक्त संवर्धन के लिए शिरापरक रक्त के नमूनों को संवर्धन माध्यम से कम से कम 1:5 तक पतला किया जाना चाहिए ताकि रक्त के जीवाणुनाशक गुण फंगल विकास को बाधित न करें। ताजा निकाले गए रक्त के 5-10 मिलीलीटर को क्रमशः 50-100 मिलीलीटर पोषक माध्यम (2% ग्लूकोज के साथ तरल सबौरॉड या इसके पुनर्जनन के बाद किट-टारोजी माध्यम) में डालें। कल्चर के लिए, आप एक थक्कारोधी (1:10 5% सोडियम साइट्रेट घोल) के साथ रक्त ले सकते हैं। फसलें 10 दिनों के लिए +37 डिग्री सेल्सियस पर उगाई जाती हैं और 5 और 10 दिन पर नियंत्रण बुआई की जाती है। एक बाँझ पिपेट का उपयोग करके, तलछट लें, जिनमें से 3 बूँदें एक बैक्टीरियोलॉजिकल लूप के साथ वोर्ट अगर की सतह पर पेट्री डिश में बिखरी हुई हैं। बीज वाले कपों को 2-5 दिनों के लिए +37 o C के तापमान पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है। यीस्ट वनस्पतियों की वृद्धि के मामले में, रक्त में कवक की उपस्थिति के बारे में प्रारंभिक उत्तर दिया जाता है, और संस्कृति जीनस और प्रजातियों के अनुसार निर्धारित की जाती है।

माइकोफ्लोरा के लिए रक्त संवर्धन की एक अन्य विधि का वर्णन किया गया है (एच. रीथ)। इस मामले में, 5-10 मिलीलीटर रक्त को बूंदों में डाला जाता है। एक बाँझ पिपेट के साथ पेट्री डिश में घने पोषक माध्यम की सतह पर रक्त की 40-50 बूंदें, बूंदों के बीच 0.5 सेमी की दूरी पर लगाएं। टीकाकरण दो पेट्री डिश पर किया जाता है, एक डिश में +37 o C के तापमान पर और दूसरे में कमरे के तापमान पर 2-5 दिनों के लिए इनक्यूबेट किया जाता है।

अंग ऊतक के टुकड़े. पेट्री डिश में घने पोषक माध्यम की सतह पर ऊतक के परीक्षण टुकड़े के साथ एक छाप बनाई जाती है, फिर एक लूप के साथ छानने का काम किया जाता है। ऊतक का एक ही टुकड़ा 50 मिलीलीटर तरल पोषक माध्यम (वॉर्ट, सबाउरॉड माध्यम) में रखा जाता है। फसलों को 5 दिनों के लिए +37 o C के तापमान पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है।

त्वचा और नाखून की शल्कें। माइक्रोस्कोपी परिणामों की परवाह किए बिना तराजू की बुआई की जाती है। ऐसा करने के लिए, माध्यम के कंडेनसेट में सिक्त एक बाँझ माइकोलॉजिकल स्पैटुला का उपयोग करके, तराजू को 2-3 बिंदुओं पर तिरछे वोर्ट एगर पर एक टेस्ट ट्यूब में स्थानांतरित किया जाता है, उन्हें माध्यम की सतह पर दबाया जाता है। अनुसंधान के लिए प्राप्त सामग्री की मात्रा के आधार पर, टीकाकरण 2-3 परीक्षण ट्यूबों में किया जाता है। फसलों को 5 दिनों तक 28-37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है।

तीव्र पहचान विधियों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है सी.एल्बिकन्स. यह प्रजाति रक्त सीरम, अंडे की सफेदी, ईगल मीडियम, 199 मीडियम आदि पर कई घंटों (37 डिग्री सेल्सियस पर 2-4 घंटे) के भीतर जर्म ट्यूब और स्यूडोमाइसीलियम के छोटे फिलामेंट्स बनाने में सक्षम है। व्यवहार में, प्रयोगशालाएं मानव सीरम (सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं से अवशेष) का उपयोग करती हैं, जहां रोगाणु ट्यूब 37 डिग्री सेल्सियस पर बनते हैं, और 24 घंटों के बाद स्यूडोमाइसीलियम की उलझनें बनती हैं। दिखावे की खातिर सी.एल्बिकन्सयह घटना 90% मामलों में विशिष्ट है। अंकुर कम बार बनते हैं सी. ट्रॉपिकलिस.

2.3. फफूंद के कारण होने वाले संदिग्ध मायकोसेस के लिए पैथोलॉजिकल सामग्री की सूक्ष्म जांच और संस्कृति

पैथोलॉजिकल सामग्री की जांच देशी और दागदार तैयारियों में की जा सकती है। माइक्रोस्लाइड्स की तैयारी के लिए इच्छित स्लाइड और कवर ग्लास को माइकोबायोटा के साथ हवा के प्रदूषण से बचने के लिए अल्कोहल और ईथर (1: 1) के मिश्रण में संग्रहित किया जाना चाहिए। उपयोग से पहले, स्लाइड और कवरस्लिप को बर्नर की लौ पर निष्फल किया जाता है।

सामग्री की माइक्रोस्कोपी

थूक की माइक्रोस्कोपी. देशी तैयारी तैयार करने के लिए, थूक को एक बाँझ पेट्री डिश में स्थानांतरित किया जाता है और छोटे कणों (गांठों) का पता लगाने के लिए एक काली पृष्ठभूमि के खिलाफ जांच की जाती है। गांठें प्यूरुलेंट, प्यूरुलेंट-श्लेष्म, प्यूरुलेंट-खूनी हो सकती हैं। गांठों का आकार 0.3-3 मिमी व्यास के भीतर भिन्न होता है, उनका रंग भूरा, पीला, हरा हो सकता है। देशी माइक्रोस्लाइड्स तैयार करने के लिए, अलग-अलग गांठों को विच्छेदन सुइयों या बैक्टीरियोलॉजिकल लूप के साथ ग्लिसरीन के साथ अल्कोहल की एक बूंद में या 10% KOH समाधान की एक बूंद में स्थानांतरित किया जाता है। कवर ग्लास से ढकें, विच्छेदन सुई और माइक्रोस्कोप से कम (1:80, 10x ऐपिस और 8x ऑब्जेक्टिव) और उच्च (1:400, 10x ऐपिस और 40x ऑब्जेक्टिव) माइक्रोस्कोप आवर्धन पर हल्का दबाव डालें।

धोने के पानी, एक्सयूडेट, साथ ही पित्त, मूत्र, गैस्ट्रिक रस और शराब की तैयारी देशी तलछट से या सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा प्राप्त तलछट से (5 मिनट के लिए 1500 आरपीएम पर) तैयार की जाती है। तलछट को एक लूप या पाश्चर पिपेट के साथ एक ग्लास स्लाइड पर 10% KOH समाधान की एक बूंद में स्थानांतरित किया जाता है, एक कवरस्लिप के साथ कवर किया जाता है और माइक्रोस्कोप के कम और उच्च आवर्धन पर जांच की जाती है।

दागदार तैयारी तैयार करने के लिए, जांच की जाने वाली तलछट की गांठों या बूंदों को विच्छेदन सुइयों या बाँझ स्लाइड की सतह पर एक छोटी स्लाइड के साथ समान रूप से वितरित किया जाता है जब तक कि एक पतला धब्बा प्राप्त न हो जाए। परिणामी स्मीयर को हवा में सुखाया जाता है, मिथाइल अल्कोहल या निकिफोरोव के मिश्रण (96% एथिल अल्कोहल और ईथर के बराबर भागों) के साथ 3-5 मिनट के लिए तय किया जाता है, या इसे बर्नर लौ पर तीन बार जलाकर। स्थिर स्मीयर को ग्राम विधि, पीएएस विधि और कैल्कोफ्लोर सफेद का उपयोग करके दाग दिया जाता है। दाग वाले नमूने को एक विसर्जन माइक्रोस्कोप प्रणाली (1:900, 10x ऐपिस, 90x उद्देश्य) का उपयोग करके सूक्ष्मदर्शी किया जाता है।

बुआई सामग्री

फिलामेंटस कवक के लिए किसी भी पैथोलॉजिकल सामग्री की जांच करते समय, इसे पेनिसिलिन और स्ट्रेप्टोमाइसिन (100-200 यूनिट / एमएल माध्यम) के साथ ठोस सबाउरॉड माध्यम या पौधा पर टीका लगाया जाता है। फिलामेंटस कवक (+37 डिग्री सेल्सियस और +28 डिग्री सेल्सियस) बढ़ने के लिए अलग-अलग तापमान स्थितियों को ध्यान में रखते हुए, बुआई दो पुनरावृत्तियों में की जाती है, हमेशा कप के केंद्र में 3 बिंदुओं पर। ऊष्मायन समय 4-5 दिन है।

थूक (चयनित गांठ) को बैक्टीरियोलॉजिकल लूप या पाश्चर पिपेट के साथ सबाउरॉड के माध्यम या पौधा की सतह पर स्थानांतरित किया जाता है। बीजारोपण स्थल को पेट्री डिश के निचले भाग के पीछे एक पेंसिल से चिह्नित किया गया है। बीजयुक्त पेट्री डिश को ढक्कन ऊपर की ओर करके थर्मोस्टेट में रखा जाता है।

ऊष्मायन की एक निश्चित अवधि के बाद, बीज वाले व्यंजनों की जांच की जाती है और यदि स्पोरुलेशन का पता लगाया जाता है, तो कवक संस्कृति का निर्धारण किया जाता है। यदि कोई स्पोरुलेशन नहीं है, तो आगे की पहचान के लिए कवक को ज़ेपेक के विभेदक माध्यम पर उपसंस्कृत किया जाता है।

ब्रांकाई, मैक्सिलरी गुहाओं, एक्सयूडेट, मूत्र, गैस्ट्रिक रस (देशी या सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद) के धोने के पानी की तलछट को एक पिपेट के साथ लिया जाता है और 0.1 मिलीलीटर की मात्रा में टीका लगाया जाता है। मल को 1:10 (1 ग्राम मल और 9 मिली तरल) को सबाउरॉड के तरल माध्यम या तरल बाँझ आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड घोल में पतला किया जाता है, इमल्सीफाइड किया जाता है, बड़े कणों को तलछट करने के लिए 10 मिनट के लिए व्यवस्थित होने दिया जाता है, और सतह पर तैरनेवाला को एक मात्रा में टीका लगाया जाता है 0.1 मि.ली. का. बाहरी श्रवण नहर और ग्रसनी से स्राव, एक स्वाब के साथ लिया जाता है, स्वाब के प्रत्येक पक्ष को पोषक माध्यम की सतह पर सावधानीपूर्वक पारित करके टीका लगाया जाता है। स्वाब से टीका लगाया जा सकता है। ऐसा करने के लिए, टैम्पोन को कांच के मोतियों के साथ 10 मिलीलीटर तरल सबाउरॉड माध्यम या तरल वोर्ट में रखा जाता है और 10 मिनट के लिए इमल्सीफाइड किया जाता है, एक लॉन के साथ 0.1 मिलीलीटर स्वैब वॉशआउट के साथ टीका लगाया जाता है (लेशचेंको वी.एम., 1973 के अनुसार), या तीन बिंदुओं पर।

त्वचा और नाखून के शल्कों को पोषक माध्यम की सतह पर ध्यान से दबाते हुए रखा जाता है।

मस्तिष्कमेरु द्रव तलछट (5 मिनट के लिए 1500 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज) को दो 0.1 मिलीलीटर कप माध्यम में टीका लगाया जाता है, और शेष को एक संवर्धन माध्यम (सबौरौड तरल माध्यम या तरल पौधा) में टीका लगाया जाता है, 5 मिलीलीटर ट्यूबों में डाला जाता है। टीका लगाए गए व्यंजनों को हमेशा की तरह ऊष्मायन किया जाता है, और संवर्धन माध्यम पर टीका लगाए गए ट्यूबों को 10 दिनों के लिए + 28 C पर ऊष्मायन किया जाता है।

यदि ठोस मीडिया पर फिलामेंटस कवक की वृद्धि होती है, तो इसकी संस्कृति इस टीकाकरण से निर्धारित की जाती है; यदि सबाउरॉड अगर या वोर्ट अगर पर कोई वृद्धि नहीं होती है, तो संवर्धन माध्यम से कवक का अध्ययन किया जाता है। ऐसा करने के लिए, फंगल कल्चर को ज़ेपेक के विभेदक घने माध्यम पर फिर से उपसंस्कृत किया जाता है और बाद में पहचाना जाता है।

अंग ऊतक (बायोप्सी, शव परीक्षण) के एक टुकड़े से, एक ठोस माध्यम की सतह पर एक छाप बनाई जाती है, जिसमें टुकड़े के कटे हुए हिस्से की तीन बिंदुओं पर जांच की जाती है। उसी समय, ऊतक के टुकड़ों को 50 मिलीलीटर तरल पोषक माध्यम (सबुरो, पौधा) में रखा जाता है।

यदि फंगमेमिया का संदेह हो, तो दो से तीन बार में रक्त की जांच की जाती है। 2% ग्लूकोज के साथ 50 या 100 मिलीलीटर सबाउरॉड तरल माध्यम में क्रमशः 5 या 10 मिलीलीटर रक्त का टीका लगाएं। फसलें 10 दिनों के लिए +37 C और +28 C पर उगाई जाती हैं। फसलों का पहला निरीक्षण 5 दिन बाद, दूसरा 10 दिन बाद किया जाता है। पांचवें दिन, आप तल पर एक गांठ और सतह पर एक फिल्म के रूप में फिलामेंटस कवक की वृद्धि देख सकते हैं। कवक के जीनस और प्रकार को निर्धारित करने के लिए मायसेलियम को ज़ेपेक के विभेदक माध्यम पर उपसंस्कृत किया जाता है। यदि 5वें दिन कोई कवक वृद्धि नहीं देखी जाती है, तो फसल को 10 दिनों तक रखा जाता है और यदि कोई वृद्धि नहीं होती है, तो परीक्षण के परिणाम नकारात्मक के रूप में दर्ज किए जाते हैं।

जब तीन बिंदुओं पर बुआई की जाती है, तो दो और तीन बिंदुओं पर कवक की वृद्धि को नैदानिक ​​​​रूप से महत्वपूर्ण, एक बिंदु पर - यादृच्छिक के रूप में परिभाषित किया जाता है। यदि आवश्यक हो तो पुनः बीजारोपण संभव है।

पृथक साँचे की संस्कृतियों की पहचान

संस्कृति को अलग करने के बाद, सामान्य और, यदि संभव हो तो, प्रजाति निर्धारण के लिए फिलामेंटस कवक को ज़ेपेक के विभेदक माध्यम पर उपसंस्कृत किया जाता है।

नैदानिक ​​​​प्रयोगशालाओं के अभ्यास में, एक नियम के रूप में, वे सांस्कृतिक और रूपात्मक पहचान मानदंडों का उपयोग करते हैं: वे अगर मीडिया (सांस्कृतिक निदान, मैक्रोमॉर्फोलॉजी) और कवक की सूक्ष्म आकृति विज्ञान पर एक कवक संस्कृति के विकास पैटर्न का मूल्यांकन करते हैं।

कठिन मामलों में, अतिरिक्त निदान विधियों का उपयोग किया जाता है (एंजाइमी गतिविधि का अध्ययन, कुछ साँचे की वृद्धि की तापमान विशेषताएँ)।

मैक्रोमॉर्फोलॉजी (सांस्कृतिक विशेषताओं) की अवधारणा में कॉलोनी की संरचना (फूलदार, महसूस की गई, मखमली, मकड़ी जैसी, ऊनी, फटी हुई, मैली, आदि), सतह (सपाट, मुड़ी हुई, ऊबड़-खाबड़, गुंबद के आकार की, कोर के आकार की, आंचलिक) शामिल है , आदि), कवक कॉलोनी और सब्सट्रेट का रंजकता (हरे, नीले, बैंगनी, काले, भूरे, आदि के विभिन्न रंग), कॉलोनी की सतह पर एक्सयूडेट की उपस्थिति।

किसी संस्कृति से कवक की सूक्ष्म आकृति विज्ञान का अध्ययन तैयारियों का उपयोग करके किया जाता है, जो कवक के जीनस के आधार पर निम्नानुसार तैयार की जाती हैं: तैयारी तैयार करने के लिए तरल की एक बूंद (शराब, ग्लिसरीन और पानी के बराबर भागों) को एक गिलास में डाला जाता है फिसलना; माइसेलियम का एक टुकड़ा इसमें रखा जाता है, एक त्रिकोण के रूप में कॉलोनी से एक माइकोलॉजिकल स्पैटुला के साथ काटा जाता है, केंद्रीय और परिधीय भागों को पकड़ लिया जाता है, और हवा के बुलबुले के गठन से बचने के लिए देखभाल के साथ कटे हुए टुकड़े को दो विच्छेदन सुइयों के साथ सीधा किया जाता है। . कुछ मामलों में (म्यूकर और राइजोपस), दवा तैयार करते समय, माइसेलियम को सूखी कांच की स्लाइड पर फैलाया जाता है, उस पर तरल की एक बूंद लगाई जाती है और कवरस्लिप से ढक दिया जाता है। तैयारियों को माइक्रोस्कोप के नीचे कम और उच्च आवर्धन पर देखा जाता है। सब्सट्रेट और एरियल मायसेलियम का अध्ययन किया जाता है, सेप्टा (सेप्टा) की उपस्थिति या अनुपस्थिति को नोट किया जाता है, और स्पोरुलेशन की प्रकृति पर ध्यान दिया जाता है: कोनिडिया के साथ कोनिडियोफोरस और स्पोरैंगिस्पोर्स के साथ स्पोरैंगिया।

कोनिडियोफोर्स की संरचना अलग-अलग होती है: सरल एकल बीजाणु युक्त हाइपहे से लेकर शाखित वृक्ष जैसी संरचनाओं तक। कोनिडियोफोर्स अकेले या समूहों में स्थित होते हैं; वे मायसेलियम के वानस्पतिक हाइफ़े से स्पष्ट रूप से भिन्न होते हैं, रंगहीन या रंगीन, आरोही, सीधा, कैस्केडिंग, रेंगते हुए। उनमें एक कोशिका और विभिन्न आकृतियों और आकारों की बड़ी संख्या में कोशिकाएँ शामिल हो सकती हैं, जिनमें से प्रत्येक का अपना नाम होता है। उदाहरण के लिए, जीनस एस्परगिलस में, कोनिडियोफोर में निम्नलिखित कोशिकाएँ होती हैं: डंठल, वेसिकुलर सूजन, स्टेरिग्माटा, कोनिडिया की श्रृंखलाएँ। जीनस पेनिसिलियम में, कोनिडियोफोर में सरल या जटिल ब्रश का रूप होता है, जिसमें विभिन्न कोशिकाएं भी शामिल होती हैं: रेमी शाखाएं, मेटुला, फियालिड्स, कोनिडिया की श्रृंखलाएं।

फफूंद फफूंद म्यूकर और राइजोपस एंडोस्पोरांजियोस्पोर के साथ स्पोरैंगिया के रूप में विकसित होते हैं। स्पोरैन्जियम स्पोरैंगियोफोर के अंत में स्थित होता है। स्पोरैंगिया गोलाकार या नाशपाती के आकार के होते हैं, अधिकांश एक विशेष स्तंभ के साथ होते हैं, जो स्पोरैंगियम के अंदर स्पोरैंगियोफोर की निरंतरता है। स्पोरैंगियोस्पोर गोल, रंगहीन या रंगीन होते हैं।

फफूंदी के कोनिडिया (बीजाणु) बहुरूपी (बेलनाकार, गोलाकार, अंडाकार, दीर्घवृत्ताकार, अंडाकार, नाशपाती के आकार के, क्लब के आकार के), एकल और बहुकोशिकीय होते हैं, आकार और रंग में भिन्न होते हैं, एकल, जंजीरों में या सिरों में एकत्रित और व्यवस्थित होते हैं समूहों में. कोनिडिया की सतह चिकनी, खुरदरी, कांटेदार, मस्से जैसी, बालदार आदि हो सकती है।

डिमोर्फिक कवक के कारण होने वाले मायकोसेस के लिए पैथोलॉजिकल सामग्री की सूक्ष्म जांच और संस्कृति

इन मायकोसेस के साथ, रोगजनकों की द्विरूपता को ध्यान में रखना आवश्यक है।

प्राथमिक रोगजनक मायकोटिक संक्रमण (कोक्सीडियोइडोसिस, हिस्टोप्लास्मोसिस, पैराकोसिडिओइडोसिस, उत्तरी अमेरिकी ब्लास्टोमाइकोसिस) के लिए पैथोलॉजिकल सामग्री, साथ ही क्रोमोमाइकोसिस, स्पोरोट्रीकोसिस और मायसेटोमास में मवाद, थूक, त्वचा और श्लेष्म झिल्ली पर अल्सरेटिव घावों से स्क्रैपिंग, मस्तिष्कमेरु द्रव, रक्त, हो सकता है। घावों से बायोप्सी किए गए टुकड़े।

इन मायकोसेस के प्रेरक एजेंटों की पहचान करने में कठिनाई यह है कि उनके द्विरूपता के कारण, पैथोलॉजिकल सामग्री की माइक्रोस्कोपी से कवक के ऊतक रूपों का पता चलेगा, अक्सर विभिन्न आकारिकी के खमीर कोशिकाएं या एंडोस्पोर वाले गोलाकार, उसी के तत्वों से पूरी तरह से अलग होते हैं। इसके कल्चर से निकाला गया कवक नियमित सबौरॉड एगेव पर +28 - +30 ओ सी के तापमान पर उगाया जाता है, जिसका पीएच मान अम्लीय के करीब होता है। हालाँकि, यह ध्यान में रखना चाहिए कि कुछ डिमॉर्फिक कवक में, संस्कृति में फंगल विकास का एक खमीर चरण प्राप्त करना संभव है, जो अक्सर इसके ऊतक रूप की याद दिलाता है, लेकिन जब थोड़ा क्षारीय प्रतिक्रिया (पीएच) के साथ प्रोटीन से समृद्ध मीडिया में उगाया जाता है = 7.6 - 7.8 ), 37 o C के तापमान पर।

उपरोक्त मशरूम पर लागू होता है: हिस्टोप्लाज्मा कैप्सूलटम, ब्लास्टोमाइसेस डर्मेटिटिडिस, पैराकोकिडियोइड्स ब्रासिलिएन्सिस, कोक्सीडियोइड्स इमिटिसऔर स्पोरोथ्रिक्स शेंकी।

यहां उल्लिखित कवक के कारण होने वाले मायकोसेस का प्रयोगशाला निदान माइक्रोस्कोपी द्वारा रोग संबंधी सामग्री में ऊतक रूपों का पता लगाने, रोगज़नक़ संस्कृति के अलगाव और सांस्कृतिक और रूपात्मक विशेषताओं द्वारा इसकी पहचान पर आधारित है।

कास्टिक क्षार के 10% घोल की एक बूंद या समान मात्रा में अल्कोहल और ग्लिसरीन के मिश्रण में या दाग वाले स्मीयर (तालिका 3) में कांच की स्लाइड पर बिना दाग वाली तैयारी में सूक्ष्म परीक्षण किया जाता है।

आम तौर पर स्वीकृत विधि के अनुसार बैक्टीरियोलॉजिकल स्पैटुला का उपयोग करके पेट्री डिश में उपर्युक्त पोषक तत्व मीडिया पर पैथोलॉजिकल सामग्री का टीकाकरण किया जाता है।

2.5. डर्माटोमाइकोसिस (केराटोमाइकोसिस और डर्माटोफाइटिस) के लिए पैथोलॉजिकल सामग्री की सूक्ष्म जांच और संस्कृति।

अध्ययन का उद्देश्य सतही मायकोसेस है, जो केवल एपिडर्मिस की केराटिन परत को प्रभावित करता है, और डर्माटोफाइट्स, त्वचा और उसके उपांगों (बाल, नाखून) को प्रभावित करता है, जिसके प्रेरक कारक जीनस से संबंधित कवक हैं ट्राइकोफाइटन, माइक्रोस्पोरम और एपिडर्मोफाइटन।

प्रयोगशाला माइकोलॉजिकल अनुसंधान में अन्य माइकोसेस के समान चरण शामिल हैं: सामग्री की माइक्रोस्कोपी और इसे बोते समय शुद्ध संस्कृति प्राप्त करना। सामग्री का उचित संग्रह माइक्रोस्कोपी और संस्कृति अधिग्रहण की सफलता को बहुत प्रभावित करता है।

संग्रह के बाद जितनी जल्दी हो सके पैथोलॉजिकल सामग्री की जांच की जाती है। इसे पहले तीन भागों में बांटा गया है: माइक्रोस्कोपी, कल्टीवेशन और दोबारा जांच के लिए। ऊतकों में कवक की उपस्थिति स्थापित करने के लिए पैथोलॉजिकल सामग्री की माइक्रोस्कोपी सबसे सरल और तेज़ विधि है। कुचली हुई सामग्री को 10-20% KOH घोल की एक बूंद में एक ग्लास स्लाइड के बीच में रखा जाता है और एक अल्कोहल लैंप की लौ पर थोड़ा गर्म किया जाता है जब तक कि बूंद के किनारे पर एक सफेद रिम प्राप्त न हो जाए, एक कवर ग्लास से ढक दिया जाए और 5-10 मिनट (बाल, त्वचा की पपड़ी) और 30 - 40 मिनट (नाखून) के लिए छोड़ दिया जाता है - धब्बों और स्पष्टीकरण के लिए; सामग्री को बिना गर्म किए संसाधित किया जा सकता है; इसके लिए, तैयारी को 20% KOH समाधान में 30-60 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है।

माइक्रोस्कोपी पहले निम्न, फिर उच्च आवर्धन माइक्रोस्कोप के तहत।

रोगज़नक़ को अलग करने और पहचानने के लिए संस्कृति आवश्यक है। टीकाकरण सामग्री को यथासंभव कुचल दिया जाता है और 1-2 सेमी की दूरी पर 2-3 बिंदुओं पर परीक्षण ट्यूबों में तिरछी अगर पर न्यूनतम मात्रा में टीका लगाया जाता है। कम से कम 2-3 परीक्षण ट्यूब (बाल) और 4-5 परीक्षण ट्यूब (त्वचा और नाखून के तराजू) को एक नमूने की सामग्री से टीका लगाया जाता है। डर्माटोफाइट्स के प्राथमिक अलगाव के लिए, 2-4% ग्लूकोज या वॉर्ट एगर युक्त मानक सबाउरॉड अगर माध्यम का उपयोग करना सबसे अच्छा है जिसमें जीवाणुरोधी एंटीबायोटिक्स (पेनिसिलिन 50 μg/एमएल + स्ट्रेप्टोमाइसिन 50 μg/एमएल या बायोमाइसिन 200 यूनिट/एमएल) और एंटी- मोल्ड एंटीबायोटिक एक्टिडियोन (साइक्लोहेक्सिमाइड) 0.1 - 0.5 मिलीग्राम/एमएल। एक्टिडियोन डर्माटोफाइट्स के विकास को प्रभावित नहीं करता है और कई फफूंदों, साथ ही कैंडिडा और क्रिप्टोकोकस प्रजातियों को रोकता है।

फसलें 22-30 डिग्री सेल्सियस (सर्वोत्तम 28 डिग्री सेल्सियस) पर उगाई जाती हैं। लागू सामग्री के किनारों के साथ बुवाई बिंदुओं पर ऊष्मायन के 4 वें से 12 वें दिन तक डर्माटोफाइट वृद्धि की उपस्थिति देखी जाती है। यदि 30 दिनों के भीतर कोई वृद्धि नहीं होती है, तो संस्कृति के परिणाम नकारात्मक माने जाते हैं। इष्टतम परिस्थितियों में, कई डर्माटोफाइट्स की प्राथमिक संस्कृतियों को बुवाई के 7-10 दिनों के बाद पहचाना जा सकता है, लेकिन फसलों की निगरानी 20-30 दिनों तक की जानी चाहिए। प्राथमिक संस्कृतियाँ अपेक्षाकृत धीमी गति से बढ़ती हैं और जब एंटीबायोटिक दवाओं के बिना मीडिया का उपयोग किया जाता है, तो तेजी से बढ़ने वाले बैक्टीरिया या फफूंद द्वारा डर्माटोफाइट्स को दबाया जा सकता है। जब प्राथमिक बीजारोपण में वृद्धि दिखाई देती है, तो शुद्ध कल्चर प्राप्त करने के लिए कॉलोनी के किनारे से एक ताजा अंतर माध्यम पर छांटना आवश्यक होता है, जो पृथक डर्माटोफाइट की पहचान के लिए सामग्री के रूप में काम करेगा।

2.6. मायकोसेस के निदान के लिए सीरोलॉजिकल तरीके

सीरोलॉजिकल तरीकों का महत्व मुख्य रूप से निम्नलिखित में शामिल है: संभावित आक्रामक मायकोसेस वाले रोगियों की पहचान; एलर्जी संबंधी रोगों की माइकोटिक प्रकृति की पुष्टि; माइकोसेस विकसित होने के जोखिम वाले समूहों की स्क्रीनिंग परीक्षा।

माइकोकैरिज के साथ और फंगल एंटीजन के प्रति संवेदनशील स्वस्थ लोगों में सीरोलॉजिकल परीक्षणों के गलत सकारात्मक परिणाम संभव हैं; चल रहे आक्रामक माइकोसिस की पृष्ठभूमि के खिलाफ भी प्रतिरक्षाविहीनता में नकारात्मक परीक्षण हो सकते हैं।

माइकोसेस के सीरोलॉजिकल निदान के लिए नियमित आम तौर पर स्वीकृत तरीके
पर्याप्त विवरण में वर्णित / पी.एन. काश्किन, वी.वी. लिसिन। "व्यावहारिक
गाइड टू मेडिकल माइकोलॉजी", मेडिसिन, 1983/। हालाँकि, हाल के दिनों में
दशकों से कार्यप्रणाली दृष्टिकोण में ध्यान देने योग्य बदलाव हुए हैं /एलिनोव एन.पी.,
2001/. एंटीजन और एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए मूल प्रक्रियाएं प्रस्तावित की गईं
कवक कोशिकाओं के कुछ मेटाबोलाइट्स; विशेष नैदानिक ​​परीक्षण बनाए गए हैं
किट ("व्हेल"), उदाहरण के लिए पास्टरेक्स® कैंडिडा, निर्धारण के लिए
एंटीजेनिक के ऑलिगोमैनोज एपिटोप्स को दोहराने की "लेटेक्स एग्लूटिनेशन" प्रतिक्रियाएं
बड़ी संख्या में मैक्रोमोलेक्यूल्स पर संरचनाएं/अभिव्यक्त
मशरूम; कैंडिडा मन्नान एंटीजन के निर्धारण के लिए, उदा.
कैंडिडिमिया वाले रोगी के सीरम के लिए, आप प्लेटेलिया® कैंडिडा किट का उपयोग कर सकते हैं।
पहले सेट का उपयोग करते हुए, एंटीजेनिक संरचनाओं को निर्धारित करने की सीमा 2.5 एनजी/एमएल है, दूसरे का उपयोग _____________ विधि के साथ संयोजन में, निर्धारण की सीमा है - 0.5 एनजी/एमएल.

विभिन्न नैदानिक ​​सामग्रियों के प्रयोगशाला परीक्षण के दौरान अक्सर माइकोसेस के प्रेरक एजेंटों की पहचान की जाती है

खून

• Candida
• क्रिप्टोकोकस
• रक्त परीक्षणों को छोड़कर मायसेलियल रोगजनकों का शायद ही कभी पता लगाया जाता है फुसैरियम

मस्तिष्कमेरु द्रव

• Candida
• क्रिप्टोकोकस

फोड़े, अल्सर आदि से मवाद निकलना।

• Candida
• क्रिप्टोकोकस
• फुसैरियम
• एस्परजिलस
• स्पोरोट्रिक्स

श्वसन स्राव (थूक, बीएएल द्रव, ब्रोन्कियल ब्रश बायोप्सी, ट्रांसट्रैचियल एस्पिरेट)

• एस्परजिलस
• Candida
• क्रिप्टोकोकस
• म्यूकर
• स्केडोस्पोरियम
• राइजोपस
• स्पोरोट्रिक्स

घावों से स्राव, बायोप्सी सामग्री

• एस्परजिलस
• Candida
• फुसैरियम
• राइजोपस

अन्य जैव सब्सट्रेट्स

• Candida
• क्रिप्टोकोकस

छाती और पेट की गुहा से सामग्री; साइनोवियल द्रव

• एस्परजिलस
• Candida
• फुसैरियम

नेत्रकाचाभ द्रव

• Candida
• एस्परजिलस

चतुर्थ. प्रणालीगत मायकोसेस के निदान के लिए मानदंड: अंतिम निदान के नैदानिक ​​​​और प्रयोगशाला पैरामीटर

ग्रासनलीशोथ

• एसोफैगोस्कोपी के दौरान विशिष्ट परिवर्तनों की उपस्थिति
• बायोप्सी सामग्री की खेती के दौरान कवक की पहचान
• दागदार धब्बों में स्यूडोमाइसीलियम की उपस्थिति या बायोप्सी सामग्री में आक्रामक फंगल वृद्धि के संकेत

न्यूमोनिया

निमोनिया के कारण कैंडिडा एसपीपी.

• छाती के एक्स-रे में तीव्र घुसपैठ परिवर्तन, जो फंगल निमोनिया की नैदानिक ​​​​अभिव्यक्तियों के साथ मेल खाता है
• पहचान कैंडिडा एसपीपी.जब निचले श्वसन पथ से ट्रांसथोरेसिक बायोप्सी, ट्रांसब्रोनचियल बायोप्सी, फेफड़े की बायोप्सी निष्कर्ष, या थोरैकोस्कोपिक रूप से निर्देशित बायोप्सी से प्राप्त सामग्री का संवर्धन किया जाता है
• पर्याप्त रूप से सने हुए बायोप्सी सामग्री में स्यूडोमाइसीलियम की पहचान

निमोनिया के कारण एस्परगिलस एसपीपी., फ्यूसेरियम एसपीपी., सेडोस्पोरियम एपियोस्पर्मम

• ऊतकों और सकारात्मक संस्कृति में फंगल तत्वों की पहचान
• फेफड़ों में लगातार या प्रगतिशील घुसपैठ, एंटीबायोटिक चिकित्सा के प्रति प्रतिरोधी
• थूक या बीएएल कल्चर द्वारा इनमें से किसी एक रोगज़नक़ का पता लगाना
• निमोनिया के नैदानिक ​​लक्षण (खांसी, सांस की तकलीफ, "फुफ्फुस" दर्द, घरघराहट, फुफ्फुस घर्षण शोर)
• फेफड़ों के एक्स-रे या सीटी स्कैन पर विशिष्ट परिवर्तन:

उपनलीय घुसपैठ, गांठदार, तीव्र-कोण या गुफ़ा संबंधी परिवर्तन

फेफड़ों के सीटी स्कैन पर "हेलो" का लक्षण

गुहाओं के निर्माण और "सिकल" लक्षण की उपस्थिति के साथ घुसपैठ परिवर्तनों की प्रगति

• BAL द्रव का संवर्धन करते समय अन्य रोगजनकों की अनुपस्थिति जो फेफड़ों में प्रस्तुत परिवर्तनों का कारण बन सकती है

साइनसाइटिस

• तीव्र साइनसाइटिस के नैदानिक ​​और रेडियोलॉजिकल लक्षण
• एस्पिरेट या बायोप्सी सामग्री की जांच करते समय माइकोसिस के सूक्ष्म और सांस्कृतिक लक्षण

मूत्र पथ के संक्रमण

• उचित रूप से एकत्रित मूत्र के बार-बार संवर्धन से >1x10 सीएफयू/एमएल का पता लगाना

फफूंदी

• बढ़ते शरीर के तापमान> 38 डिग्री सेल्सियस की अवधि के दौरान रक्त संवर्धन के दौरान कवक का एकल पता लगाना

तीव्र प्रसारित माइकोसिस

• गहरे ऊतकों (चमड़े के नीचे के ऊतकों सहित) को नुकसान के सांस्कृतिक या हिस्टोलॉजिकल संकेतों के साथ संयोजन में फंगमेमिया या दो सामान्य रूप से बाँझ बायोसब्सट्रेट्स से रोगज़नक़ की पहचान

एंडोफथालमिटिस

• एंडोफथालमिटिस के नेत्र संबंधी लक्षण
• आंख, रक्त या प्रसार के अन्य केंद्रों से रोगज़नक़ की पहचान

फोड़ा या ऑस्टियोमाइलाइटिस

• ऑस्टियोमाइलाइटिस के रेडियोग्राफिक/सीटी/एमआरआई संकेत
• एस्पिरेट या बायोप्सी सामग्री में रोगज़नक़ की पहचान

मस्तिष्कावरण शोथ

• सूजन की उपस्थिति की पुष्टि करने वाले सीएसएफ परिवर्तनों का निर्धारण, और सीएसएफ माइक्रोस्कोपी द्वारा कवक का पता लगाना
• सीएसएफ के संवर्धन या एंटीजन के निर्धारण द्वारा कवक का पता लगाना Cr.neoformans, कैंडिडा और एस्परगिलससीएसएफ में

क्रोनिक प्रसारित (हेपेटोलिएनल) कैंडिडिआसिस

संभव

• लीवर, प्लीहा या गुर्दे की क्षति के लक्षण के साथ संयोजन में न्यूट्रोपेनिया की अवधि के अंत के बाद लगातार या रुक-रुक कर बुखार आना

सिद्ध किया हुआ।

• उपरोक्त बीजारोपण के साथ संयोजन में कैंडिडा एसपीपी.घावों से बायोप्सी सामग्री में जिगर, प्लीहा या गुर्दे को नुकसान के संकेत या कैंडिडिआसिस के सांस्कृतिक, हिस्टोलॉजिकल संकेतों की उपस्थिति से पहले रक्त से

V. फंगल संक्रमण के कारण

फंगल संक्रमण और उनके प्रेरक एजेंटों को वर्गीकृत करने के लिए अलग-अलग सिद्धांत हैं। हमें ऐसा लगता है कि रोगजनक कवक को 5 मुख्य समूहों में विभाजित करना व्यावहारिक रूप से सबसे सरल और समीचीन है:

1. सतही मायकोसेस के रोगजनक;

2. डर्माटोमाइकोसिस के रोगजनक;

3. चमड़े के नीचे के मायकोसेस के रोगजनक;

4. गहरे मायकोसेस के प्रेरक एजेंट (प्राथमिक रोगजनक माइक्रोमाइसेट्स, अवसरवादी संक्रमण के प्रेरक एजेंट)।

5. स्यूडोमाइकोसिस के रोगजनक।

* इस बात पर जोर दिया जाना चाहिए कि इम्यूनोसप्रेस्ड रोगियों में पहले तीन समूहों के रोगजनक कवक और कई अंग घावों का कारण बन सकते हैं।

निम्नलिखित अनुभागों में, हम एक ही योजना के अनुसार मायकोसेस के प्रेरक एजेंटों का विवरण देते हैं: स्वीकृत नामकरण के अनुसार इसका नाम, पर्यायवाची शब्दों की एक सूची, पोषक तत्व मीडिया पर कालोनियों की स्थूल विशेषताएं और एक के तहत दिखाई देने वाले फंगल तत्वों की सूक्ष्म विशेषताएं देशी तैयारियों में और कालोनियों से माइक्रोस्कोप। प्रकृति में कवक के वितरण पर डेटा भी प्रदान किया गया है और उनके कारण होने वाली बीमारियों को सूचीबद्ध किया गया है।

कवक रोगों का प्रयोगशाला निदान कवक का पता लगाने और उसके जीनस और प्रकार का निर्धारण करने पर आधारित है। इसमें दो मुख्य चरण होते हैं: सूक्ष्मदर्शी और सांस्कृतिक अध्ययन।

सूक्ष्मदर्शी द्वारा परीक्षण

प्रारंभिक निदान की पुष्टि के लिए सूक्ष्म परीक्षण पहली और महत्वपूर्ण कड़ी है।

सूक्ष्म परीक्षण की सफलता काफी हद तक रोग संबंधी सामग्री के सही संग्रह पर निर्भर करती है। सूक्ष्म परीक्षण के लिए, ऐसे बालों का चयन करना आवश्यक है जिनमें फंगल क्षति (सुस्त, टूटे, घने) के स्पष्ट लक्षण हों। जिन बालों का स्वरूप बदल गया है उन्हें एपिलेशन चिमटी से हटा दिया जाता है। माइक्रोस्पोरिया से प्रभावित एकल बालों का पता लगाने के लिए, आप लकड़ी के फिल्टर (हरी-नीली चमक) के साथ एक फ्लोरोसेंट लैंप का उपयोग कर सकते हैं।

प्रभावित बालों का चयन करते समय, कई अतिरिक्त विशेषताओं का उपयोग किया जा सकता है। माइक्रोस्पोरम से प्रभावित बालों के आधार पर बाहरी रूप से स्थित बीजाणुओं का एक भूरा आवरण होता है। क्रोनिक ट्राइकोफाइटोसिस के मामले में, छोटे भूरे प्रभावित बाल, "अल्पविराम" और "प्रश्न चिह्न" के रूप में घुमावदार, साथ ही "काले बिंदु" (कूप के मुंह पर टूटे हुए मोटे काले प्रभावित बाल) पाए जाते हैं। तराजू की मोटाई. घुसपैठ-सपूरेटिव ट्राइकोफाइटोसिस के मामले में, सूक्ष्म परीक्षण के लिए, प्रभावित बालों के अलावा, आप घाव से मवाद और पपड़ी का उपयोग कर सकते हैं।

माइक्रोस्पोरिया, ट्राइकोफाइटोसिस और वंक्षण सिलवटों के माइकोसिस के साथ त्वचा के घावों से, घाव के परिधीय क्षेत्र से तराजू को हटा दिया जाना चाहिए, जहां कवक बड़ी मात्रा में पाया जाता है। त्वचा के छिलकों के साथ-साथ मखमली बाल भी छिल जाते हैं।

माइक्रोस्पोरिया और ट्राइकोफाइटोसिस से प्रभावित बालों की जांच करते समय, बीजाणुओं के स्थान (बालों के अंदर या बाहर) और उनके आकार पर ध्यान दिया जाता है। ये डेटा कुछ मामलों में निदान, माइकोसिस के नैदानिक ​​रूप और महामारी विज्ञान को स्पष्ट करना संभव बनाता है।

पैरों के माइकोसिस के इंटरडिजिटल रूप में, त्वचा के तराजू और मैकेरेटेड स्ट्रेटम कॉर्नियम के स्क्रैप का उपयोग सूक्ष्म परीक्षण के लिए किया जाता है। सूक्ष्म परीक्षण के लिए नाखून का जिस क्षेत्र को ले जाने की आवश्यकता होती है वह ओनिकोमाइकोसिस के रूप पर निर्भर करता है। सतही रूप से, नाखून प्लेट की सतह को खुरचना आवश्यक है।

सबसे आम डिस्टल-लेटरल रूप में, कटे हुए परिवर्तित नाखून प्लेट के एक हिस्से के साथ, प्लेट के नीचे से, नाखून के बिस्तर से एक स्क्रैपिंग का उपयोग किया जाता है (सबंगुअल हाइपरकेराटोसिस)। समीपस्थ अवनंगुअल रूप के लिए, सामग्री एकत्र करने के लिए विशेष तरीकों का उपयोग किया जाता है (ड्रिल, नाखून बायोप्सी का उपयोग करके ड्रिलिंग खिड़कियां)।

पैरों के माइकोसिस के स्क्वैमस-हाइपरकेराटोटिक रूप में, तल की सतह से शल्क उखड़ जाते हैं। पैरों के माइकोसिस के डिहाइड्रोटिक रूप में, जांच के लिए छालों के आवरण काट दिए जाते हैं।

बालों की सूक्ष्म जांच के लिए सामग्री तैयार करने की तकनीक . 30% KOH की एक छोटी बूंद को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है और प्रभावित बालों को एक विच्छेदन सुई के साथ इसमें रखा जाता है। बालों के साथ बूंद को अल्कोहल लैंप की लौ पर थोड़ा गर्म किया जाता है जब तक कि वाष्प तरल की सतह के ऊपर दिखाई न दे या क्रिस्टल की एक रिम क्षार की बूंद के किनारे से बाहर न गिर जाए। कवरस्लिप से ढकने के बाद, अतिरिक्त क्षार को फिल्टर पेपर से हटा दिया जाता है। दवा की जांच पहले कम और फिर उच्च (x 400) माइक्रोस्कोप आवर्धन के तहत की जाती है।

त्वचा और नाखून की शल्कें . सूक्ष्म परीक्षण के लिए पतले नाखून के तराजू को 30% KOH की एक बूंद में कांच की स्लाइड पर रखा जाता है और गर्म किया जाता है, वाष्पित होने पर इसमें क्षार मिलाया जाता है। ठंडे, बिना दाग वाले नमूने को कवरस्लिप से ढक दिया जाता है और माइक्रोस्कोप के नीचे जांच की जाती है।

मोटी त्वचा और नाखून के शल्कों को एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में रखा जाता है और 30% KOH की कुछ बूंदों से भर दिया जाता है। टेस्ट ट्यूब को उबालने तक गर्म किया जाता है और 20-30 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है। नरम सामग्री का एक हिस्सा एक कांच की छड़ी के साथ एक कांच की स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है, एक माचिस से दबाया जाता है जब तक कि एक "बादल" दिखाई न दे, जिसके बाद एक माइक्रोस्कोप के तहत इसकी जांच की जाती है।

मवाद . मवाद की एक बूंद को शराब की एक बूंद और आधा-आधा ग्लिसरीन के साथ मिलाकर एक देशी दवा में जांचा जाता है।

सांस्कृतिक निदान

निदान को निश्चित रूप से स्पष्ट करने और महामारी विज्ञान को स्पष्ट करने के लिए सांस्कृतिक निदान किया जाता है। इसमें सूक्ष्म परीक्षण के बाद कवक का कल्चर प्राप्त करना शामिल है।

प्रभावित बाल, पपड़ी (त्वचा और नाखून), छाले या मवाद को कृत्रिम पोषक माध्यम पर टीका लगाया जाता है। पेट्री डिश पर विशाल कालोनियों की उपस्थिति से, रोगज़नक़ के जीनस (माइक्रोस्पोरम, ट्राइकोफाइटन, एपिडर्मोफाइटन), इसके प्रकार (एल. कैनिस या फेरुगिनम, टी. वायलेसियम, वेरुकोसम या जिप्सियम) का अंदाजा लगाया जा सकता है। कवक के जीनस और प्रजातियों का अंतिम स्पष्टीकरण परिणामी संस्कृति की सूक्ष्म जांच के आधार पर ही संभव है।

सतही कैंडिडिआसिस का प्रयोगशाला निदान

खमीर जैसी कवक के प्रयोगशाला परीक्षण के लिए, ताजा सामग्री की आवश्यकता होती है। सूक्ष्म परीक्षण के लिए, घावों की नैदानिक ​​​​अभिव्यक्तियों और स्थानीयकरण के आधार पर, त्वचा के टुकड़े, नाखूनों से खरोंच, नाखून की तह के नीचे से मवाद की एक बूंद, मौखिक श्लेष्मा और बाहरी जननांग, योनि की दीवारों के प्रभावित क्षेत्रों से सफेद जमाव, श्लेष्म झिल्ली से स्क्रैपिंग ली जा सकती है। मूत्रमार्ग की झिल्ली, साथ ही होठों की लाल सीमा से धुलाई, बड़े और छोटे सिलवटों की त्वचा के प्रभावित क्षेत्र।

घाव के स्थान और नैदानिक ​​​​अभिव्यक्तियों की प्रकृति के आधार पर, अनुसंधान के लिए सामग्री एक कपास झाड़ू, स्केलपेल, लूप इत्यादि के साथ ली जाती है। त्वचा और नाखून के तराजू, एपिडर्मिस के स्क्रैप और श्लेष्म झिल्ली के स्क्रैपिंग पूर्व हैं- 30% KOH से उपचारित। पैथोलॉजिकल सामग्री की जांच बिना दाग वाली या दागदार तैयारियों में की जाती है।

पहले मामले में, सामग्री को समान मात्रा में अल्कोहल और ग्लिसरीन के साथ मिलाया जाता है। ग्रैम द्वारा रंगे जाने पर, यीस्ट कोशिकाएं और स्यूडोमाइसीलियम गहरे बैंगनी रंग में, ज़ीहल-नील्सन में नीले रंग में, और रोमानोव्स्की-गिम्सा में गुलाबी-बैंगनी रंग में दिखाई देते हैं। इस मामले में, यीस्ट कोशिका की एक विशिष्ट विशेषता नवोदित होती है - एक "घंटे का चश्मा" आकृति की खोज। मौखिक गुहा, जननांगों के श्लेष्म झिल्ली से, होठों की लाल सीमा की त्वचा से, मुंह के कोनों से, बड़े और छोटे सिलवटों की त्वचा से सामग्री लेना एक बाँझ झाड़ू के साथ किया जाता है। सामग्री लेने के बाद, स्वाब को तरल वोर्ट के साथ एक अन्य बाँझ ट्यूब में रखा जाता है। स्वाब के साथ टेस्ट ट्यूब को माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में भेजा जाता है। जीनस कैंडिडा के खमीर जैसी कवक की शुद्ध संस्कृति का अलगाव आम तौर पर स्वीकृत सूक्ष्मजीवविज्ञानी तरीकों के अनुसार किया जाता है।

वैज्ञानिकों के अनुसार, दुनिया की 70% आबादी में पैरों के माइकोसिस के लक्षण हैं। यह रोग इंटरडिजिटल सिलवटों और तलवों की त्वचा को प्रभावित करता है। इस बीमारी का कारण एक कवक है जो शुरुआत में केवल दक्षिण पूर्व एशिया और अफ्रीका के सीमित क्षेत्रों में पाया जाता था। प्रथम विश्व युद्ध के कारण बड़े पैमाने पर लोगों का पलायन हुआ और स्वच्छता की स्थिति बिगड़ गई, जिससे यह बीमारी पूरी दुनिया में फैल गई।

पैरों में माइकोसिस का कारण क्या है?

रोग का मुख्य प्रेरक एजेंट ट्राइकोफाइटन रूब्रम है। संक्रमण टी. मेंटाग्रोफाइट्स और एपिडर्मोफाइटन फ्लोकोसम के कारण हो सकता है। कैंडिडा जीनस के कवक और मोल्ड सूक्ष्मजीव बहुत कम बार रोगजनक रोगाणु बन सकते हैं।

रोग के लिए सबसे महत्वपूर्ण जोखिम कारक:

• मधुमेह;
• इम्युनोडेफिशिएंसी राज्य (एड्स);
• सपाट पैर;
• परिधीय धमनियों का एथेरोस्क्लेरोसिस;
• निचले छोरों की वैरिकाज़ नसें।

संक्रमण के विकास के लिए अनुकूल बाहरी परिस्थितियाँ:

• बंद गैर-शोषक जूते;
• पैर की चोटें (कॉलस, घर्षण);
• खेल खेलना।

एथलीट फुट के लक्षण अधिकतर वयस्क पुरुषों में होते हैं। बच्चे कम ही बीमार पड़ते हैं।

पैरों के माइकोसिस के लक्षण

जैसे-जैसे बीमारी बढ़ती है, त्वचा छिलने लगती है और शुष्क हो जाती है, खुजली और जलन दिखाई देने लगती है, विशेषकर उंगलियों के बीच की जगह में, और उंगलियों के नीचे दर्दनाक दरारें दिखाई देने लगती हैं। कभी-कभी पैर के माइकोसिस के पहले लक्षण छाले होते हैं जो कटाव के गठन के साथ फट जाते हैं। अक्सर यह रोग मिटे हुए रूप में होता है, केवल उंगलियों के बीच की सिलवटों में आटे की याद दिलाते हुए हल्के छिलके से प्रकट होता है।

रोग के 4 नैदानिक ​​रूप हैं।

इंटरडिजिटल, या इंटरट्रिजिनस, वैरिएंट सबसे आम है। उंगलियों के बीच की त्वचा लाल हो जाती है, फट जाती है, सतह की परत गीली हो जाती है और छिल जाती है। ये लक्षण तलवों तक फैलते हैं और गंभीर खुजली और जलन के साथ होते हैं। अक्सर बैक्टीरियल सूजन जुड़ी होती है।

स्क्वैमस-हाइपरकेराटोटिक वैरिएंट त्वचा के गंभीर रूप से मोटे होने और फटने से जुड़ा है। तलवा लाल हो जाता है और छिल जाता है। एड़ी क्षेत्र में गहरी, दर्दनाक दरारें दिखाई देती हैं, खुजली आमतौर पर अस्वाभाविक होती है। यह अक्सर द्विपक्षीय घाव होता है और इसे "मोकासिन फ़ुट" भी कहा जाता है।

डिहाइड्रोटिक वैरिएंट कई छोटे खुजली वाले, दर्दनाक फफोले की उपस्थिति के साथ होता है। वे एक-दूसरे में विलीन हो जाते हैं, जिससे बड़े बुलबुले बनते हैं। फफोले के आवरण फट जाते हैं, जिससे एक चमकदार, कमजोर, दर्दनाक सतह - कटाव प्रकट होता है। बाहरी अभिव्यक्तियाँ एक्जिमा से मिलती जुलती हैं।

माइक्रोबियल सूजन अक्सर बढ़े हुए वंक्षण लिम्फ नोड्स, बुखार, पैर में दर्द, मतली, सिरदर्द और नशे के अन्य लक्षणों से जुड़ी होती है। डिहाइड्रोटिक रूप के साथ, कवक से एलर्जी अक्सर होती है - माइकोटिक एक्जिमा। इसके साथ शरीर के उन हिस्सों पर चकत्ते पड़ जाते हैं जो फंगस से संक्रमित नहीं होते हैं, उदाहरण के लिए, हाथों पर।

मिटाया गया संस्करण आमतौर पर किसी का ध्यान नहीं जाता। इसके साथ ही पैर की बड़ी और तर्जनी और/या अनामिका और छोटी उंगलियों के बीच की त्वचा हल्की सी छिल जाती है। कोई खुजली नहीं होती.

पैरों के माइकोसिस के लक्षण

पैरों के विभिन्न प्रकार के माइकोसिस स्वतंत्र रोग हो सकते हैं या शरीर के सामान्य फंगल संक्रमण के हिस्से के रूप में हो सकते हैं। कभी-कभी "दो पैर - एक हाथ" का संकेत इन अंगों की भागीदारी के साथ होता है। ओनिकोमाइकोसिस, नाखून का एक फंगल विनाश, हो सकता है। कभी-कभी वंक्षण सिलवटें एक ही समय में प्रभावित होती हैं।

पैर के माइकोसिस के मुख्य लक्षण और उपचार फोटो में प्रस्तुत किए गए हैं:

त्वचा का छिलना

सूखी और फटी हुई त्वचा

बुलबुले और कटाव

निदान

एक अनुभवी त्वचा विशेषज्ञ पहली जांच के दौरान पैरों के विभिन्न प्रकार के माइकोसिस को पहचान सकता है। हालाँकि, निदान की पुष्टि के लिए सूक्ष्म परीक्षण आवश्यक है। इसके लिए, घाव से तराजू का उपयोग किया जाता है, एक स्पैटुला के साथ स्क्रैप किया जाता है और एक क्षार समाधान के साथ इलाज किया जाता है। परिणामी सामग्री की जांच माइक्रोस्कोप के तहत की जाती है और रोगजनकों का पता लगाया जाता है।

प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी तेज़, सस्ती और करने में आसान है, लेकिन यह निर्धारित नहीं कर सकती कि किस प्रकार का कवक रोग का कारण बन रहा है। इसलिए, सामग्री को पोषक माध्यम पर टीका लगाया जाता है, जिसके बाद परिणामी सामग्री की सांस्कृतिक जांच की जाती है। हालाँकि, केवल 20-6% मामलों में माइक्रोस्कोप के तहत कवक का पता लगाने के बाद उसका कल्चर प्राप्त करना संभव है।

पैरों के माइकोसिस के उपचार के प्रकार

फंगल रोगों के उपचार के लिए दवाएं त्वचा विशेषज्ञ द्वारा निर्धारित की जानी चाहिए। आमतौर पर, पैर के माइकोसिस का उपचार बाहरी साधनों का उपयोग करके किया जाता है।

इस बीमारी के लिए प्रभावी दवाओं में से एक क्लोट्रिमेज़ोल है। हमारे स्टोर में आप इसे कम कीमत पर खरीद सकते हैं। लोशन के रूप में एक दवा, नाखूनों और त्वचा के लिए क्लोट्रिमेज़ोल, उपकला के स्ट्रेटम कॉर्नियम की मोटाई में कवक के प्रसार को दबा देती है। यदि इंटरडिजिटल सिलवटें प्रभावित होती हैं, तो पैरों की साफ, सूखी त्वचा पर प्रतिदिन एक सप्ताह तक, यदि आवश्यक हो तो अधिक समय तक लोशन लगाया जाता है।

गंभीर केराटिनाइजेशन और त्वचा के फटने की स्थिति में, सबसे पहले मृत त्वचा जमाव को हटाना आवश्यक है। इसके लिए एक्सफ़ोलीएटिंग दवाओं के उपयोग की आवश्यकता होती है। उदाहरण के लिए, सैलिसिलिक मरहम, लैक्टिक एसिड या यूरिया वाली क्रीम निर्धारित हैं। सींगदार जमा को हटाने के बाद, लोशन का उपयोग दिन में 1 - 2 बार किया जाता है।

डिहाइड्रोटिक संस्करण में, पहला कदम रोना कम करना है। इसके लिए टैनिन या बोरिक एसिड वाले लोशन का उपयोग किया जाता है। गंभीर मामलों में, ग्लूकोकार्टोइकोड्स को उपचार में जोड़ा जाता है। फिर सामान्य नियम के अनुसार क्लोट्रिमेज़ोल लोशन लगाएं।

यदि पैर घिस गया है, तो 7-10 दिनों के लिए दिन में एक बार लोशन से इसका इलाज करें, लेकिन कोर्स की अवधि अलग-अलग होती है और डॉक्टर द्वारा निर्धारित की जाती है।

प्रणालीगत चिकित्सा

लंबे समय तक या आवर्ती एथलीट फुट के लिए मौखिक एंटीफंगल दवाओं की आवश्यकता हो सकती है। वे जठरांत्र संबंधी मार्ग से रक्तप्रवाह में और फिर त्वचा में चले जाते हैं, जहां वे कवक को नष्ट कर देते हैं। तीन मुख्य दवाओं का उपयोग किया जाता है:

• फ्लुकोनाज़ोल;
• इट्राकोनाजोल;
• Terbinafine

इन दवाओं को लेने की अवधि कम से कम एक महीना है। इनकी कीमत काफी ज्यादा है. इसलिए, पैर के माइकोसिस को ठीक करने की तुलना में इसे रोकना हमेशा आसान और अधिक लाभदायक होता है।

यदि कवक ने न केवल त्वचा, बल्कि नाखूनों को भी प्रभावित किया है तो प्रणालीगत दवाएं विशेष रूप से अक्सर निर्धारित की जाती हैं। इस मामले में, दवाएं नाखून प्लेट के बढ़ते हिस्से में जमा हो जाती हैं, और एक स्वस्थ नाखून धीरे-धीरे वापस बढ़ता है। प्रभाव को बेहतर बनाने के लिए, नाखून को शल्य चिकित्सा द्वारा पूरी तरह से हटाया जा सकता है, जिसके बाद इसे कवक के बिना बहाल किया जा सकता है।

बुजुर्ग रोगियों में नाखून हटाने और प्रणालीगत और स्थानीय एंटिफंगल थेरेपी का संयोजन अक्सर आवश्यक होता है। रोगियों के इस समूह में, नाखून अक्सर धीरे-धीरे बढ़ते हैं, पैरों में रक्त परिसंचरण ख़राब होता है, इसलिए प्रभाव प्राप्त करने के लिए दवाओं की एक बड़ी खुराक और उपचार के लंबे कोर्स की आवश्यकता होती है।

लोक उपचार से उपचार

केवल पारंपरिक चिकित्सा व्यंजनों का उपयोग करने से फंगस से छुटकारा पाने में मदद नहीं मिलेगी। हालाँकि, पारंपरिक चिकित्सा में इस तरह का जोड़ उपचार के पाठ्यक्रम को छोटा कर देता है और रिकवरी को तेज कर देता है।

हर शाम 10 मिनट के लिए गर्म पैर स्नान करना उपयोगी होता है, फिर अपने पैरों को तौलिए से अच्छी तरह थपथपाएं, खासकर पैर की उंगलियों के बीच, और नाखूनों और त्वचा के लिए क्लोट्रिमेज़ोल औषधीय लोशन लगाएं। उपयोगी स्नान सामग्री जो सूजन से राहत देती है और खुजली को कम करती है:

• जड़ी बूटी कलैंडिन और सेंट जॉन पौधा;
• बोझ जड़ें;
• वर्मवुड घास;
• युकलिप्टस की पत्तियाँ;
• देवदार की सुई;
• पीसा हुआ ग्राउंड कॉफी से ताजा ग्राउंड;
• नमक;
• कसा हुआ कपड़े धोने का साबुन, बेकिंग सोडा, पोटेशियम परमैंगनेट और सरसों पाउडर का मिश्रण।

प्रभावित क्षेत्रों को बर्च टार या लहसुन के कुचले हुए सिर के साथ मिश्रित 100 ग्राम मक्खन से बने स्व-तैयार मलहम के साथ चिकनाई किया जा सकता है। प्रोपोलिस, जिसे दुखते नाखूनों पर पट्टी बांधी जा सकती है, भी उपयोगी है।

प्राकृतिक नुस्खों से कंप्रेस बनाना उपयोगी है। सबसे पहले, उन्हें 1 से 2 घंटे के लिए छोड़ दिया जाता है, और यदि सहन किया जाता है, तो रात भर के लिए छोड़ दिया जाता है। निम्नलिखित सामग्रियों का उपयोग किया जाता है:

• कद्दू का गूदा;
• कुचले हुए काले मूली के बीज;
• पुदीना, नमक के साथ पिसा हुआ;
• बर्डॉक या रोवन के पत्ते, बेलन से थोड़ा नरम करें।

कुछ पौधों के रस और अन्य प्राकृतिक उपचारों से प्रभावित क्षेत्रों को चिकनाई देना प्रभावी है:

• प्रोपोलिस का अल्कोहल समाधान;
• प्याज या लहसुन का रस;
• कलैंडिन रस;
• चाय के पेड़ की तेल।

रोग प्रतिरक्षण

माइकोसिस से बचने या इसकी पुनरावृत्ति को रोकने के लिए, सरल लेकिन निरंतर रोकथाम की आवश्यकता है:

• गर्मियों में, प्राकृतिक सामग्री से बने सांस लेने योग्य जूते पहनें;
• स्विमिंग पूल, स्नानघर, सार्वजनिक शॉवर में जाते समय, व्यक्तिगत रबर की चप्पलें पहनें;
• किसी और के जूते न पहनें, उदाहरण के लिए, यात्रा करते समय;
• केवल अपने स्वयं के स्वच्छता उपकरण - कैंची, झांवा, नेल फाइल का उपयोग करें।

पुन: संक्रमण से बचने के लिए, जूतों के इनसोल और भीतरी सतहों को नियमित रूप से कीटाणुनाशक से उपचारित किया जाना चाहिए। एक प्रसिद्ध लोक नुस्खा सिरका सार का एक समाधान है, लेकिन इसमें एक तेज, अप्रिय गंध है।

डॉक्टर मिकोस्प्रे दवा का उपयोग करने की सलाह देते हैं, जिसमें न केवल एंटीफंगल बल्कि जीवाणुरोधी प्रभाव भी होता है। माइकोस्प्रे न केवल जूतों के उपचार के लिए, बल्कि पैरों की सुरक्षा के लिए सार्वजनिक स्थानों पर जाने से पहले पैरों पर लगाने के लिए भी बहुत अच्छा है।

मॉस्को और क्षेत्र के निवासी हमारे ऑनलाइन स्टोर में पैर के माइकोसिस के इलाज और इसकी रोकथाम के लिए दवाएं खरीद सकते हैं। उन्होंने प्रभावशीलता और सुरक्षा सिद्ध की है। उनके उपयोग की सिफारिश उन सभी लोगों के लिए की जाती है जो पैर के फंगस से संक्रमित नहीं होना चाहते हैं या जल्दी से इससे छुटकारा नहीं पाना चाहते हैं।

आक्रामक मायकोसेस का सटीक निदानआसान नहीं है। यह न केवल कवक की संस्कृति प्राप्त करने में कठिनाइयों से समझाया गया है, बल्कि अनुसंधान परिणामों की व्याख्या करने में भी है, क्योंकि कवक, खमीर और फिलामेंटस दोनों, श्लेष्म झिल्ली को उपनिवेशित कर सकते हैं और अध्ययन किए गए नमूनों को दूषित कर सकते हैं। इस संबंध में, आक्रामक मायकोसेस का निदान एक एकीकृत दृष्टिकोण पर आधारित है, जिसमें न केवल माइकोलॉजिकल (सांस्कृतिक) और सीरोलॉजिकल (फंगल एंटीजन का निर्धारण) अध्ययन के परिणाम शामिल हैं, बल्कि फंगल संक्रमण के नैदानिक ​​​​लक्षण, सहायक अनुसंधान विधियों से डेटा भी शामिल है ( कंप्यूटर या चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग, अल्ट्रासाउंड)।

यूरोपीय-अमेरिकी सहयोग समूह आक्रामक मायकोसेस के अध्ययन के लिएकमजोर प्रतिरक्षा वाले रोगियों में आक्रामक मायकोसेस के निदान के लिए मानदंड विकसित किए गए हैं। उन्हें 2001 में रोगाणुरोधी और कीमोथेरेपी पर अंतर्राष्ट्रीय सम्मेलन (आईसीएएसी, शिकागो) में और 2002 में प्रिंट में प्रस्तुत किया गया था। सिद्ध, संभावित और संभावित आक्रामक माइकोसिस के लिए मानदंड परिभाषित किए गए हैं, जिन्हें नैदानिक ​​और महामारी विज्ञान के अध्ययन में उपयोग के लिए अनुशंसित किया गया है।

फिलामेंटस कवक के कारण सिद्ध आक्रामक माइकोसिस: हिस्टोलॉजिकल या साइटोलॉजिकल परीक्षण के दौरान बायोप्सी या एस्पिरेट्स में फंगल मायसेलियम का पता लगाना या सामान्य रूप से बाँझ घाव से सड़न रोकनेवाला स्थितियों के तहत प्राप्त नमूनों से संस्कृति को अलग करना, जो नैदानिक ​​​​और रेडियोलॉजिकल अध्ययनों के परिणामों के अनुसार, संक्रमण से जुड़ा हुआ है। मूत्र और श्लेष्म झिल्ली के अध्ययन का अपवाद।

यीस्ट कवक के कारण सिद्ध आक्रामक माइकोसिस: बायोप्सी या एस्पिरेट्स में यीस्ट कोशिकाओं का पता लगाना (जीनस कैंडिडा का कवक स्यूडोमाइसीलियम या सच्चा मायसेलियम बना सकता है), श्लेष्म झिल्ली से नमूनों के अपवाद के साथ, या सामान्य रूप से बाँझ घाव से सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में प्राप्त नमूनों से संस्कृति को अलग करना, जो अनुसार संक्रमण से जुड़े नैदानिक ​​​​और रेडियोलॉजिकल परीक्षण के परिणामों के लिए, मूत्र के अपवाद के साथ, साइनस और श्लेष्म झिल्ली से नमूने, या माइक्रोस्कोपी द्वारा पता लगाना और खमीर कोशिकाओं के विशिष्ट धुंधलापन (भारत स्याही की एक बूंद में, म्यूसीकारमाइन दाग) या ए क्रिप्टोकोकस एसपीपी का सकारात्मक एंटीजन। मस्तिष्कमेरु द्रव में.

फिलामेंटस कवक के कारण होने वाला कवक: एस्परगिलस एसपीपी के अपवाद के साथ, कवक की रक्त संस्कृति का अलगाव। और पेनिसिलियम एसपीपी, पेनिसिलियम मार्नेफ़ेई सहित, पृथक रोगज़नक़ के साथ संगत एक संक्रामक प्रक्रिया के नैदानिक ​​लक्षणों के संयोजन में।

यीस्ट कवक के कारण होने वाला कवक: इस रोगज़नक़ से जुड़े संक्रमण के नैदानिक ​​लक्षणों वाले रोगियों से कैंडिडा या अन्य यीस्ट कवक का रक्त संस्कृति अलगाव।

आक्रामक मायकोसेस के लिए नैदानिक ​​अध्ययन का परिसर

अध्ययनाधीन जैव सामग्री	संकेत, प्रयुक्त मीडिया, अर्थ
खून	संकेत: ब्रॉड-स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक दवाओं के साथ उपचार के दौरान लगातार बुखार (4-5 दिन या अधिक); एंटीबायोटिक चिकित्सा के दौरान बुखार की दूसरी "लहर"। एरोबिक बैक्टीरिया के लिए शिरा से रक्त को शीशियों में एकत्रित करना* या कवक के लिए एक चयनात्मक माध्यम में, दोहराया (1 घंटे के अंतराल के साथ दिन में 2-3 बार) नैदानिक ​​महत्व: यीस्ट कवक का अलगाव, फ्यूसेरियम एसपीपी के अपवाद के साथ, फिलामेंटस कवक को अलग करते समय सावधानीपूर्वक व्याख्या।
शिरापरक कैथेटर	संकेत: रक्त से यीस्ट कवक का पृथक्करण रक्त से यीस्ट अलगाव के सभी मामलों में केंद्रीय या परिधीय शिरापरक कैथेटर हटा दिया जाता है माइकोलॉजिकल अनुसंधान के लिए, 5-6 सेमी लंबे कैथेटर के एक सड़न रोकनेवाला हटाए गए डिस्टल खंड का उपयोग किया जाता है। अध्ययन अर्ध-मात्रात्मक (माकी विधि) या सबाउरॉड के माध्यम पर मात्रात्मक विधि से किया जाता है नैदानिक ​​महत्व: 15 सीएफयू या अधिक के अर्ध-मात्रात्मक अध्ययन में यीस्ट कवक का अलगाव, एक मात्रात्मक अध्ययन में - कैथेटर से जुड़े संक्रमण या कैथेटर संक्रमण के निदान की पुष्टि करने के लिए 103 सीएफयू / एमएल या अधिक
ऊपरी श्वसन पथ से स्राव, थूक, श्वासनली, ब्रांकाई, ब्रोन्कोएल्वियोलर लैवेज द्रव से धुलाई	संकेत: फिलामेंटस कवक या क्रिप्टोकोकस नियोफॉर्मन्स के कारण होने वाले मायकोसेस का संदेह; ब्रॉड-स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक थेरेपी और न्यूट्रोपेनिया के दौरान लंबे समय तक बुखार रहना कैल्कोफ्लोर सफेद के साथ नमूनों की माइक्रोस्कोपी (माइसेलियम या स्यूडोमाइसेलियम का पता लगाना); सबाउरौड के माध्यम पर बुआई; आक्रामक एस्परगिलोसिस की विशेषता वाले फेफड़ों में घावों की उपस्थिति में ब्रोन्कोएल्वियोलर लैवेज द्रव में एस्परगिलस एंटीजन का निर्धारण नैदानिक ​​महत्व: फिलामेंटस कवक या क्रिप्टोकोकस नियोफ़ॉर्मन्स का अलगाव
मस्तिष्कमेरु द्रव	संकेत: मेनिनजाइटिस के लक्षण; कंप्यूटेड टोमोग्राफी या चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग का उपयोग करके मस्तिष्क में घाव का पता लगाना; बुखार और न्यूट्रोपेनिया के कारण "मस्तिष्क" लक्षण स्याही की एक बूंद में कैल्कोफ्लोर सफेद के साथ माइक्रोस्कोपी; एस्परगिलस, क्रिप्टोकोकस एंटीजन का निर्धारण; सबाउरौद बुधवार को बुआई नैदानिक ​​महत्व: यीस्ट और फिलामेंटस दोनों प्रकार के कवक का पता लगाना; सकारात्मक प्रतिजन
बायोप्सी, एस्पिरेट्स, पेरिटोनियल द्रव, फुफ्फुस द्रव	संकेत: आक्रामक माइकोसिस के नैदानिक ​​और/या रेडियोलॉजिकल संकेत; ब्रॉड-स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक दवाओं के साथ उपचार के दौरान बुखार। कैल्कोफ्लोर सफेद के साथ माइक्रोस्कोपी, सबौराड के माध्यम पर संस्कृति नैदानिक ​​महत्व: यीस्ट और फिलामेंटस दोनों प्रकार के कवक का पता लगाना

* रक्त से फंगल अलगाव की आवृत्ति समान थी जब प्रारंभिक रक्त को जीवाणु संवर्धन माध्यम और चयनात्मक फंगल माध्यम के साथ दोनों शीशियों में खींचा गया था। अध्ययन VASTES 9240 बैक्टीरियोलॉजिकल विश्लेषक का उपयोग करके किया गया था।

संभावित आक्रामक माइकोसिसनिम्नलिखित मानदंडों के संयोजन के आधार पर निदान किया गया:
सूक्ष्मजीवविज्ञानी मानदंड की श्रेणी से एक चिन्ह;
संक्रामक प्रक्रिया के "महत्वपूर्ण" श्रेणी से एक या "कम महत्वपूर्ण" नैदानिक ​​​​लक्षणों के समूह से दो संकेत।

संभावित आक्रामक माइकोसिसनिम्नलिखित मानदंडों के संयोजन के आधार पर निदान किया गया:
आक्रामक माइकोसिस के विकास को प्रेरित करने वाले कम से कम एक जोखिम कारक की उपस्थिति;
सूक्ष्मजीवविज्ञानी मानदंड की श्रेणी से एक संकेत या "महत्वपूर्ण" की श्रेणी से एक संकेत ("कम महत्वपूर्ण" के समूह से दो) संक्रामक प्रक्रिया के नैदानिक ​​​​लक्षण।

संकल्पना " संभावित आक्रामक माइकोसिस»ऐंटिफंगल दवाओं की प्रभावशीलता का अध्ययन करने वाले नैदानिक ​​परीक्षणों में उपयोग के लिए इसकी अनुशंसा नहीं की जाती है। आप इस शब्द का उपयोग अनुभवजन्य एंटिफंगल थेरेपी, महामारी विज्ञान अध्ययन और फार्माकोइकोनॉमिक्स का अध्ययन करते समय कर सकते हैं।

पर माइकोलॉजिकल अनुसंधानबाँझ एस्पिरेट्स या बायोप्सी न केवल फंगल संस्कृतियों के अलगाव को ध्यान में रखती है, बल्कि माइक्रोस्कोपी द्वारा मायसेलियम या स्यूडोमाइसीलियम का पता लगाने को भी ध्यान में रखती है। हिस्टोलॉजिकल तैयारियों में, एस्परगिलस को फ्यूसेरियम एसपीपी, सिक्लोस्पोरियम एपियोस्पर्मम और कुछ अन्य फिलामेंटस कवक से अलग करना मुश्किल है। विभेदक निदान के लिए, एस्परगिलस के प्रति एंटीबॉडी के साथ एक इम्यूनोहिस्टोकेमिकल अध्ययन किया जाना चाहिए।

यीस्ट कवक का अलगावकम से कम एक अध्ययन में रक्त से प्राप्त खुराक "सिद्ध" आक्रामक माइकोसिस की श्रेणी में आती है और न्यूट्रोपेनिया वाले रोगियों में प्रणालीगत एंटीमायोटिक दवाओं के नुस्खे के लिए एक पूर्ण संकेत है। रक्त से यीस्ट कवक का पता लगाने की आवृत्ति कम है, यहां तक ​​कि प्रसारित कैंडिडिआसिस के साथ भी यह 35-50% है।
बाहर ले जाना बार-बार रक्त संस्कृतियाँसकारात्मक परिणाम प्राप्त होने की संभावना बढ़ जाती है।

अन्य व्याख्यारक्त में फिलामेंटस कवक का पता लगाने के मामले में परिणाम। फिलामेंटस कवक के अलगाव की एक उच्च आवृत्ति फ्यूसेरियम एसपीपी की विशेषता है। और राशि 40-60% है। एस्परगिलस का पता बहुत कम ही चलता है, ज्यादातर मामलों में इसे संदूषण माना जाता है, एस्परगिलस टेरियस को छोड़कर।

चयन एस्परगिलस टेरियसहेमोब्लास्टोस वाले रोगियों के रक्त से वास्तविक एस्परगिलमिया का संकेत मिल सकता है, और संक्रमण के नैदानिक ​​​​लक्षणों की उपस्थिति में, यह एंटीमायोटिक दवाओं को निर्धारित करने का आधार है।

आक्रामक माइकोसिस के लिए मानदंड

अनुक्रमणिका	मानदंड
आक्रामक माइकोसिस (मैक्रोऑर्गेनिज्म) की घटना को प्रेरित करने वाले कारक	न्यूट्रोपेनिया (< 0,5*109/л в течение 10 дней) ब्रॉड-स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक थेरेपी के दौरान 96 घंटे से अधिक समय तक लगातार बुखार रहना शरीर का तापमान 38 डिग्री सेल्सियस से ऊपर या 36 डिग्री सेल्सियस से नीचे और निम्नलिखित में से कोई भी पूर्वसूचक संकेत: पिछले 60 दिनों के दौरान लंबे समय तक न्यूट्रोपेनिया (10 दिन से अधिक), पिछले 30 दिनों के भीतर गहन इम्यूनोस्प्रेसिव थेरेपी, पिछले में सिद्ध या संभावित आक्रामक माइकोसिस अवधि न्यूट्रोपेनिया या एड्स जीवीएचडी के लक्षणों की उपस्थिति, मुख्य रूप से गंभीर पाठ्यक्रम (द्वितीय डिग्री) या पुरानी बीमारी के व्यापक पाठ्यक्रम के मामले पिछले 60 दिनों के भीतर ग्लुकोकोर्टिकोइड्स का दीर्घकालिक (3 सप्ताह से अधिक) उपयोग
सूक्ष्मजीवविज्ञानी संकेत	फिलामेंटस कवक (एस्परगिलस एसपीपी, फुसारुइम एसपीपी, सिक्लोस्पोरियम एसपीपी और जाइगोमाइसेट्स सहित) और क्रिप्टोकोकस नेकफॉर्मन्स का थूक या ब्रोन्कोएल्वियोलर लैवेज द्रव से कल्चर अलगाव परानासल साइनस के एस्पिरेट्स से फिलामेंटस कवक का पता लगाने के लिए सांस्कृतिक या साइटोलॉजिकल परीक्षा (प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी) के सकारात्मक परिणाम थूक या ब्रोन्कोएल्वियोलर लैवेज द्रव से कोशिका विज्ञान/प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी द्वारा फिलामेंटस कवक या क्रिप्टोकोकस नियोफॉर्मन्स का पता लगाना ब्रोन्कोएल्वियोलर लैवेज द्रव, मस्तिष्कमेरु द्रव और रक्त के नमूनों में सकारात्मक एस्परगिलस एंटीजन (कम से कम दो) रक्त के नमूनों में सकारात्मक क्रिप्टोकोकल एंटीजन सामान्य रूप से बाँझ तरल पदार्थों के नमूनों में साइटोलॉजिकल परीक्षण या प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी द्वारा फंगल तत्वों का पता लगाना (उदाहरण के लिए, मस्तिष्कमेरु द्रव में क्रिप्टोकोकस एसपीपी) मूत्र कैथेटर की अनुपस्थिति में मूत्र में खमीर संस्कृतियों का पता लगाने पर अध्ययन के दो सकारात्मक परिणाम मूत्र कैथेटर के बिना मूत्र में कैंडिडा क्रिस्टल कैंडिडा एसपीपी का अलगाव। रक्त संस्कृतियों से
चिकत्सीय संकेत निचला श्वसन पथ	उस स्थान से संबद्ध होना चाहिए जहां से सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान के लिए नमूने लिए जाते हैं सीटी के अनुसार निम्न प्रकार के नए फुफ्फुसीय घुसपैठ में से कोई भी: हेलो चिह्न, अर्धचंद्र चिह्न, समेकन के क्षेत्रों के साथ गुहा* निचले श्वसन पथ के संक्रमण के लक्षण (खांसी, सीने में दर्द, हेमोप्टाइसिस, सांस की तकलीफ), फुफ्फुस घर्षण रगड़, कोई भी नई घुसपैठ जो उच्च महत्व के संकेतों में शामिल नहीं है; फुफ्फुस बहाव
ऊपरी श्वांस नलकी उच्च महत्व के लक्षण कम महत्व के लक्षण	नाक के साइनस में आक्रामक संक्रमण के रेडियोलॉजिकल संकेत (दीवार का क्षरण या आसन्न संरचनाओं में संक्रमण का प्रसार, खोपड़ी की हड्डियों का व्यापक विनाश) बहती नाक, नाक बंद होना, नाक में अल्सर होना, नाक से खून आना, पेरीऑर्बिटल एडिमा, ऊपरी जबड़े में दर्द, काला नेक्रोटिक अल्सरेशन या कठोर तालु में छेद होना
केंद्रीय तंत्रिका तंत्र उच्च महत्व के लक्षण कम महत्व के लक्षण	संदिग्ध सीएनएस संक्रमण के रेडियोलॉजिकल संकेत (मास्टोइडाइटिस या अन्य पैरामेनिंगियल फोकस, एक्स्ट्राड्यूरल एम्पाइमा, मस्तिष्क या रीढ़ की हड्डी के पदार्थ में कई घाव) फोकल न्यूरोलॉजिकल लक्षण और संकेत, जिनमें फोकल दौरे, हेमिपेरेसिस शामिल हैं; चेतना के विकार, मेनिन्जियल लक्षण, मस्तिष्कमेरु द्रव और इसकी सेलुलर संरचना की जैव रासायनिक संरचना में गड़बड़ी (अन्य रोगजनकों की अनुपस्थिति में, संस्कृति और माइक्रोस्कोपी के अनुसार, ट्यूमर कोशिकाओं की अनुपस्थिति में)

*सूक्ष्मजीवों के कारण होने वाले संक्रमण की अनुपस्थिति में, जो गुहाओं के गठन (माइकोबैक्टीरियम एसपीपी, लीजियोनेला एसपीपी, नोकार्डिया एसपीपी) सहित एक समान रेडियोलॉजिकल तस्वीर का कारण बन सकता है।

पर रक्त में पता लगानाया यीस्ट कवक के अन्य बाँझ बायोसब्सट्रेट्स, प्रजातियों की पहचान करना और एंटिफंगल दवाओं के प्रति संवेदनशीलता निर्धारित करना आवश्यक है; फिलामेंटस (मोल्ड) कवक को अलग करते समय, केवल प्रजातियों की पहचान की जाती है, संवेदनशीलता निर्धारित नहीं की जाती है।

क्लिनिकल में अभ्यासएंटीमाइकोटिक्स के प्रति ऐसे कवक की संवेदनशीलता निर्धारित करने के लिए अपूर्ण मानकों के कारण फिलामेंटस कवक की संवेदनशीलता का अध्ययन नहीं किया गया है। इसके अलावा, केवल एक अध्ययन ने एस्परगिलस एसपीपी की संवेदनशीलता के बीच संबंध प्रदर्शित किया है। और हेमटोलॉजिकल विकृतियों वाले रोगियों में आक्रामक एस्परगिलोसिस के उपचार के परिणाम। बाद के किसी भी अध्ययन में समान परिणाम नहीं मिले।

हाल ही में, इट्राकोनाज़ोल और वोरिकोनाज़ोल के प्रति ए. फ्यूमिगेटस कवक के अधिग्रहित प्रतिरोध के गठन के बारे में अलग-अलग रिपोर्टें सामने आने लगी हैं।

मशरूम की प्रजातियों की पहचान, विशेष रूप से बाँझ लोकी से प्राप्त, मुख्य रूप से एक एंटीमायोटिक चुनने और पर्याप्त एंटीफंगल थेरेपी आयोजित करने के लिए आवश्यक है। इस प्रकार, कैंडिडा क्रुसी फ्लुकोनाज़ोल के प्रति प्रतिरोधी है और एम्फोटेरिसिन बी के प्रति अन्य खमीर प्रजातियों की तुलना में कम संवेदनशील है; एस्परगिलस टेरियस, सेडोस्पोरियम एपियोस्पर्मम (स्यूडेल्सचेरिया बॉयडी), ट्राइकोस्पोरोन बेगेली, स्कोपुलरिओप्सिस एसपीपी। एम्फोटेरिसिन बी के प्रति प्रतिरोधी; म्यूकोरेल्स इट्राकोनाज़ोल, वोरिकोनाज़ोल के प्रति प्रतिरोधी हैं, कैंडिडा ग्लबराटा फ्लुकोनाज़ोल के प्रति खुराक पर निर्भर संवेदनशीलता प्रदर्शित करता है, और जब इस प्रकार के कवक को अलग किया जाता है, यहां तक ​​कि संवेदनशील उपभेदों को भी, फ्लुकोनाज़ोल की खुराक बढ़ाई जानी चाहिए (वयस्कों को 400 मिलीग्राम के बजाय 800 मिलीग्राम निर्धारित किया जाता है); कैंडिडा लुसिटानिया एम्फोटेरिसिन बी के प्रति प्रतिरोधी है।

मशरूम की प्रजातियों की पहचानअस्पताल में महामारी विज्ञान विश्लेषण करने के लिए भी महत्वपूर्ण है - संक्रमण के फैलने के प्रेरक एजेंटों की पहचान करना और, यदि संभव हो तो, संक्रमण के स्रोत की पहचान करना। सी. लुसिटानिया, सी. क्रूसी, सी. लिपोलिटिका जैसे दुर्लभ कवक के कारण होने वाले संक्रमण के प्रकोप का वर्णन किया गया है।

आधारित मशरूम प्रजाति की पहचानआक्रामक माइकोसिस या श्लेष्म झिल्ली के फंगल उपनिवेशण का अनुमान लगाया जा सकता है। उदाहरण के लिए, एस्परगिलस नाइजर में तीव्र ल्यूकेमिया वाले रोगियों में आक्रामक एस्परगिलोसिस होने की संभावना एस्परगिलस फ्यूमिगेटस की तुलना में काफी कम होती है। ब्रोन्कोएल्वियोलर लैवेज द्रव से एस्परगिलस नाइजर के अलगाव को अक्सर श्वसन पथ के उपनिवेशण के रूप में माना जाता है, और थूक से हवा से संदूषण के रूप में माना जाता है और आक्रामक एस्परगिलोसिस के निदान की पुष्टि करते समय अतिरिक्त शोध की आवश्यकता होती है।

आधारित फिलामेंटस कवक का स्रावथूक, ब्रोन्कोएल्वियोलर द्रव और परानासल साइनस के एस्पिरेट से, कोई केवल आक्रामक माइकोसिस मान सकता है, इसे "सिद्ध" श्रेणी में शामिल किए बिना। हालांकि, एलोजेनिक अस्थि मज्जा प्राप्त करने वाले न्यूट्रोपेनिक रोगियों में थूक में एस्परगिलस, विशेष रूप से एस्परगिलस फ्यूमिगेटस या एस्परगिलस फ्लेवस का पता लगाने को हमेशा ध्यान में रखा जाना चाहिए। इसके लिए बार-बार माइकोलॉजिकल परीक्षण और फेफड़ों की कंप्यूटेड टोमोग्राफी की आवश्यकता होती है। इस प्रकार, न्यूट्रोपेनिया के साथ, एस्परगिलस एसपीपी की सकारात्मक संस्कृति के मामले में आक्रामक एस्परगिलोसिस का पता लगाने की संभावना। थूक में 80% है.

चयन क्रिप्टोकोकस नियोफ़ॉर्मन्सश्वसन तंत्र से कमजोर प्रतिरक्षा वाले रोगियों में (धोना, पानी से धोना) नैदानिक ​​रूप से महत्वपूर्ण है। यदि प्रतिरक्षाविहीन रोगियों के श्वसन पथ (ट्रेकिअल, ब्रोन्कियल लैवेज, ब्रोन्कोएलेवोलर लैवेज) से प्राप्त तरल पदार्थों से यीस्ट कवक की पहचान के लिए शोध की आवश्यकता नहीं है, तो इन नमूनों से क्रिप्टोकोकस नियोफॉर्मन्स की पहचान करने के लिए स्क्रीनिंग आवश्यक है।

मूत्र में कैंडिडा का पता लगानान्यूट्रोपेनिया और बुखार के रोगियों में, इसे आमतौर पर प्रसारित कैंडिडल संक्रमण का प्रकटन माना जाता है।

एक समय पर तरीके से निदानआक्रामक एस्परगिलस एसपीपी के एक विशिष्ट एंटीजन के परिसंचरण का पता लगाने के लिए एक वाणिज्यिक परीक्षण का सफलतापूर्वक उपयोग करते हैं। गैलेक्टोमैन (कवक की कोशिका भित्ति का पॉलीसेकेराइड पानी में घुलनशील घटक)।

गैलेक्टोमैनदो तरीकों से निर्धारित किया जा सकता है: लेटेक्स एग्लूटिनेशन विधि (पास्टोरेक्स एस्परगिलस, बायोआरएडी) और एंजाइम इम्यूनोएसे विधि (प्लेटेलिया एस्परगिलस, बायोआरएडी)।

फ़ायदा एंजाइम इम्यूनोपरख विधिरक्त में गैलेक्टोमैन के स्तर को निर्धारित करने के लिए एक कम संवेदनशीलता सीमा है - 1 एनजी/एमएल या उससे कम, और लेटेक्स एग्लूटिनेशन का उपयोग करते हुए - 15 एनजी/एमएल। रक्त में गैलेक्टोमैन का निर्धारण (कम से कम 2 नमूने), मस्तिष्कमेरु द्रव, और ब्रोन्कोएल्वियोलर लैवेज नैदानिक ​​​​मूल्य का है। एंजाइम इम्यूनोएसे विधि की संवेदनशीलता लगभग 90% है, विशिष्टता 90-99% है, एलोजेनिक अस्थि मज्जा प्राप्तकर्ताओं में ये संकेतक कम हैं और रोगनिरोधी के कारण क्रमशः 60-70% और 80-90% के बराबर हैं। ऐंटिफंगल दवाओं का उपयोग (एंटीमायोटिक दवाएं गैलेक्टोमैन के थ्रेशोल्ड स्तर को कम करती हैं)।

40% मामलों में, पता लगाना गैलेक्टोमैनरक्त में यह फेफड़ों की कंप्यूटर जांच द्वारा निर्धारित आक्रामक एस्परगिलोसिस की अभिव्यक्तियों से आगे है, और 70% में यह संक्रमण के नैदानिक ​​लक्षणों से आगे है।

एंटीजन डिटेक्शन टेस्ट का नैदानिक ​​मूल्य एस्परजिलसयदि अध्ययन बार-बार किया जाता है तो यह मामला है। न्यूट्रोपेनिया वाले रोगियों में ब्रॉड-स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक दवाओं के साथ उपचार के दौरान बुखार के दौरान रक्त में एस्परगिलस एंटीजन का निर्धारण सप्ताह में 2 बार किया जाना चाहिए; निमोनिया के लिए जो जीवाणुरोधी चिकित्सा के दौरान होता है या बना रहता है; जब फेफड़े के ऊतकों (कंप्यूटेड टोमोग्राफी) में घावों का पता लगाया जाता है।