हेल्मिंथोलॉजिकल तरीके। प्रोटोजोआ के लिए बुनियादी अनुसंधान विधियां

सबसे सरल को 4 वर्गों में विभाजित किया गया है:

जब इन्सिस्टेड किया जाता है, तो सूक्ष्मजीव एक गोल आकार प्राप्त कर लेता है और एक सुरक्षात्मक खोल से ढक जाता है। एक पुटी के रूप में, प्रोटोजोआ प्रतिकूल पर्यावरणीय कारकों के प्रति कम संवेदनशील हो जाते हैं।

अनुसंधान में शामिल हो सकते हैं:

टिप्पणी:निदान की कई किस्में हैं, हम उन प्रकारों पर विचार करेंगे जो नैदानिक ​​प्रयोगशाला अभ्यास में सबसे आम हैं।

निजी प्रकार के निदान

प्रत्येक विशिष्ट मामले में, प्रयोगशाला सहायक को एक विशिष्ट रोगज़नक़ खोजने का काम सौंपा जाता है, कभी-कभी अन्य मुख्य के साथ पाए जाते हैं।

मानव आंत में रहने में सक्षम इस सूक्ष्मजीव की 6 प्रजातियां हैं। केवल पेचिश अमीबा, जो वानस्पतिक रूप में और अल्सर के रूप में होता है, नैदानिक ​​महत्व का है।

इसके अतिरिक्त, प्रतिरक्षाविज्ञानी विधियों का उपयोग किया जाता है:

• अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस;
• अप्रत्यक्ष समूहन (पीएचए);
• रेडियल इम्यूनोडिफ्यूजन।

टिप्पणी: सीरोलॉजिकल तरीके सूचनात्मक नहीं हैं और केवल संदिग्ध मामलों में मुख्य के अतिरिक्त के रूप में उपयोग किए जाते हैं।

सिलिअरी का निदान (सिलियेट्स)

इस जीनस के सूक्ष्मजीवों का रोगजनक रूप बैलेंटीडिया है। यह एक सूक्ष्म जीव है जो बैलेंटिडायसिस का कारण बनता है - एक बीमारी जिसमें बड़ी आंत की अल्सरेटिव प्रक्रिया होती है। प्रेरक एजेंट एक देशी स्मीयर में एक वनस्पति रूप और एक पुटी के रूप में पाया जाता है। स्मीयर (मल और बलगम) के लिए सामग्री को सिग्मोइडोस्कोपी परीक्षा के दौरान लिया जाता है और विशेष मीडिया पर बोया जाता है।

फ्लैगेलेट्स का निदान (लीशमैनिया, जिआर्डिया, ट्रिपैनोसोम, ट्राइकोमोनैड्स)

लीशमैनिया, ट्रिपैनोसोमा, जिआर्डिया, ट्राइकोमोनैड इंसानों के लिए खतरनाक हैं।

लीशमैनिया- लीशमैनियासिस का कारण बनने वाले रोगाणुओं की जांच रक्त स्मीयर, अस्थि मज्जा सामग्री, त्वचा की घुसपैठ से स्क्रैपिंग में की जाती है। कुछ मामलों में, लीशमैनिया के निदान में, पोषक माध्यम पर बुवाई का उपयोग किया जाता है।

ट्रिपैनोसोम- नींद की बीमारी के कारक एजेंट (अमेरिकी / अफ्रीकी ट्रिपैनोसोमियासिस, या चागास रोग)।

परिधीय रक्त के अध्ययन में प्रारंभिक अवधि में अफ्रीकी संस्करण निर्धारित किया जाता है। रोग की प्रगति के दौरान पैथोलॉजिकल रोगाणु लिम्फ नोड्स के पंचर की सामग्री में पाए जाते हैं, उन्नत चरणों में - मस्तिष्कमेरु द्रव में।

संदिग्ध चगास रोग के मामले में ट्रिपैनोसोम का निदान करने के लिए, कम आवर्धन पर एक माइक्रोस्कोप के तहत परीक्षण सामग्री की जांच की जाती है। इस मामले में, स्मीयर और एक मोटी बूंद पूर्व-दागदार होती है।

ट्रायकॉमोनास(आंतों, मौखिक,) प्रभावित श्लेष्मा झिल्ली से ली गई सामग्री की माइक्रोस्कोपी द्वारा पता लगाया जाता है।

स्पोरोज़ोअन्स (मलेरिया प्लास्मोडियम, कोकिडोसिस का प्रेरक एजेंट, आदि) की पहचान

मनुष्यों के लिए सबसे आम और खतरनाक प्रजाति मलेरिया प्लास्मोडियम है, जिसमें रोगज़नक़ों की 4 मुख्य किस्में हैं: तीन दिवसीय मलेरिया, चार दिवसीय मलेरिया, उष्णकटिबंधीय मलेरिया और अंडाकार मलेरिया का प्रेरक एजेंट।

प्लाज्मोडियम (स्पोरोगनी) का यौन विकास एनोफिलीज मच्छरों में होता है। अलैंगिक (ऊतक और एरिथ्रोसाइट सिज़ोगोनी) - यकृत ऊतक और मानव एरिथ्रोसाइट्स में। मलेरिया प्लास्मोडियम का निदान करते समय जीवन चक्र की इन विशेषताओं को ध्यान में रखा जाना चाहिए।

तो, एक नए बीमार रोगी के रक्त में, स्पोरोगनी चक्र की रोगाणु कोशिकाएं पाई जा सकती हैं। लेकिन जब मलेरिया का हमला चरम पर होता है, तब रक्त में बड़ी संख्या में स्किज़ोंट दिखाई देते हैं।

इसके अलावा, मलेरिया बुखार के विभिन्न चरणों में, प्लास्मोडियम के विभिन्न रूप दिखाई देते हैं:

• ठंड की अवधि के दौरान, रक्त मेरोजोइट्स से भर जाता है, एक प्रकार का विक्षिप्तता;
• तापमान की ऊंचाई पर, अंगूठी के आकार के ट्रोफोज़ोइट्स एरिथ्रोसाइट्स में जमा होते हैं;
• तापमान में कमी अमीबिड ट्रोफोज़ोइट्स की प्रबलता की विशेषता है;
• सामान्य स्थिति की अवधि के दौरान, रक्त में स्किज़ोंट्स के वयस्क रूप होते हैं।

मलेरिया के प्रेरक कारक (मलेरिया प्लास्मोडियम) का अध्ययन एक स्मीयर और एक मोटी बूंद में किया जाता है।

टिप्पणी:स्मीयर और थिक ब्लड ड्रॉप्स के अध्ययन में मलेरिया का निदान कभी-कभी गलत होता है। कुछ मामलों में रक्त प्लेटलेट्स को गलती से मलेरिया रोगज़नक़ के रूप में वर्गीकृत किया जा सकता है। इसके अलावा, ल्यूकोसाइट्स और अन्य कोशिकाओं के टुकड़े कभी-कभी प्लास्मोडियम का अनुकरण करते हैं।

प्रोटोजोआ के लिए बुनियादी अनुसंधान विधियां

आइए प्रोटोजोआ की उपस्थिति के लिए सबसे आम शोध विधियों पर एक संक्षिप्त नज़र डालें।

देशी स्मीयर और लुगोल के घोल (मल में) से सना हुआ स्मीयर का उपयोग करके प्रोटोजोआ का निदान

दवा एक आइसोटोनिक समाधान में मल के पायस से तैयार की जाती है। सोडियम क्लोराइड और लुगोल के घोल की दो बूंदों को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है। परीक्षण सामग्री को लकड़ी की छड़ी के साथ दोनों रचनाओं में जोड़ा जाता है और कांच से ढकने के बाद, माइक्रोस्कोप के विभिन्न प्रस्तावों पर देखा जाता है।

कुछ संकेतों के अनुसार, पाए गए प्रोटोजोआ पंजीकृत हैं। सटीकता के लिए, एक सामग्री से 2-3 तैयारी तैयार की जाती है। संदिग्ध मामलों में, विश्लेषण 2-3 सप्ताह में कई बार दोहराया जाता है।

विधि वनस्पति और सिस्टिक रूपों का पता लगा सकती है:

• लैम्ब्लिया;
• बैलेंटीडिया;
• पेचिश अमीबा।

रोगजनक रूपों के साथ, गैर-रोगजनक प्रोटोजोआ भी निर्धारित किए जाते हैं। स्वस्थ वाहकों में ल्यूमिनल और सिस्टिक रूप भी होते हैं।

महत्वपूर्ण:अशुद्धियों और त्रुटियों से बचने के लिए अनुसंधान बार-बार किया जाना चाहिए।

देशी और दागदार स्मीयर की विधि द्वारा प्रोटोजोआ के निदान के परिणाम में रोगज़नक़ (पारभासी, पुटी, ऊतक) के रूप का विवरण होना चाहिए।

अनुसंधान आवश्यकताएँ:

• विश्लेषण के लिए ली गई सामग्री (तरल मल) की जांच शौच के 30 मिनट बाद नहीं की जाती है;
• शौच के 2 घंटे के भीतर गठित मल का निदान किया जाना चाहिए;
• सामग्री में अशुद्धियाँ (कीटाणुनाशक, पानी, मूत्र) नहीं होनी चाहिए;
• सामग्री के साथ काम करने के लिए केवल लकड़ी की छड़ियों का उपयोग किया जाता है, बलगम के फिसलने के कारण कांच उपयुक्त नहीं होते हैं;
• उपयोग के तुरंत बाद लाठी को जला देना चाहिए।

प्रोटोजोआ के निदान में संरक्षण विधि (मल की जांच)

एक परिरक्षक के साथ प्रोटोजोआ को ठीक करके अध्ययन किया जाता है। इस विधि और पिछली विधि के बीच का अंतर यह है कि परिरक्षक आपको लंबे समय तक दवा को बचाने की अनुमति देते हैं।

प्रयुक्त संरक्षक:

• बैरो। परिरक्षक तत्व शामिल हैं: 0.7 मिली सोडियम क्लोराइड, 5 मिली फॉर्मेलिन, 12.5 मिली 96% अल्कोहल, 2 ग्राम फिनोल और 100 मिली डिस्टिल्ड वॉटर। रंग संरचना: थियोनीन (नीला) का 0.01% समाधान।
• Safarliev का समाधान। रचना: 1.65 ग्राम जिंक सल्फेट, 10 मिली फॉर्मेलिन, 2.5 ग्राम क्रिस्टलीय फिनोल, 5 मिली एसिटिक एसिड, 0.2 ग्राम मेथिलीन ब्लू, 100 मिली पानी। इस परिरक्षक का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां सामग्री को एक महीने से अधिक समय तक संग्रहीत किया जाना चाहिए।

खाली बोतलों को एक परिरक्षक से भर दिया जाता है, सामग्री को उनमें स्थानांतरित कर दिया जाता है, 3: 1 के अनुपात में, यदि आवश्यक हो, तो एक डाई जोड़ा जाता है। परिणामों का मूल्यांकन 2-3 दवाओं के अध्ययन में किया जाता है।

औपचारिक-ईथर संवर्धन विधि (मल में प्रोटोजोआ की उपस्थिति के लिए विश्लेषण)

यह निदान पद्धति आपको प्रोटोजोअन सिस्ट को अलग करने और ध्यान केंद्रित करने की अनुमति देती है। विश्लेषण के लिए निम्नलिखित अवयवों की आवश्यकता होती है: फॉर्मेलिन (10 मिली), आइसोटोनिक घोल का 0.85 ग्राम, आसुत जल, सल्फ्यूरिक ईथर, लुगोल का घोल।

सूचीबद्ध तरल पदार्थों के साथ बायोमटेरियल का मिश्रण मिश्रित और सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। ट्यूब के तल पर प्राप्त अवक्षेप को लुगोल के घोल से दाग दिया जाता है और अल्सर और वनस्पति रूपों की उपस्थिति के लिए जांच की जाती है।

लीशमैनिया डिटेक्शन मेथड (बोन मैरो स्मीयर)

लीशमैनियासिस के निदान के लिए, अभिकर्मकों का उपयोग किया जाता है: रोमनोवस्की के अनुसार निकिफोरोव (सल्फ्यूरिक ईथर और एथिल अल्कोहल), फॉस्फेट बफर, अज़ूर-एओसिन का मिश्रण।

अस्थि मज्जा पदार्थ को विशेष तैयारी के बाद कांच की स्लाइड पर बहुत सावधानी से रखा जाता है। एक विसर्जन प्रणाली के साथ एक माइक्रोस्कोप का उपयोग किया जाता है।

रोग की तीव्र अवधि में, पंचर में बड़ी संख्या में लीशमैनिया पाए जाते हैं।

टिप्पणी:कभी-कभी रक्त कोशिकाएं उपचारित लीशमैनिया से मिलती-जुलती हो सकती हैं, इसलिए प्रयोगशाला तकनीशियन के लिए चौकस रहना और स्वतंत्र रूप से अध्ययन करने के लिए पर्याप्त अनुभव होना बहुत महत्वपूर्ण है।

एक त्वचा घुसपैठ से एक धब्बा में लीशमैनिया का पता लगाने की विधि

आवश्यक अभिकर्मक पिछले परख के समान हैं।

परीक्षण सामग्री मौजूदा ट्यूबरकल या अल्सरेटिव सामग्री से प्राप्त की जाती है। लीशमैनियासिस के संदेह के साथ स्क्रैपिंग रक्त के बिना, एक स्केलपेल के साथ बहुत सावधानी से किया जाता है। फिर कांच पर तैयारी तैयार की जाती है। प्राप्त परिणामों की सटीकता के लिए, कई तैयारियों की एक साथ जांच की जाती है।

एक रोग की उपस्थिति में, परीक्षण सामग्री में मौजूद मैक्रोफेज, फाइब्रोब्लास्ट और लिम्फोइड कोशिकाओं के बीच, लीशमैनिया भी निर्धारित किया जाता है।

पैथोलॉजिकल ऊतकों को स्क्रैप करके प्राप्त लीशमैनिया की शुद्ध संस्कृति को अलग करने की विधि

निदान की इस पद्धति के साथ सबसे सरल ऊतक स्क्रैपिंग को एक विशेष पोषक माध्यम में रखा जाता है जिसमें लीशमैनिया सक्रिय रूप से प्रजनन करता है।

स्क्रैपिंग लेने से पहले, त्वचा को अल्कोहल से सावधानीपूर्वक उपचारित किया जाता है, फिर ट्यूबरकल में एक चीरा लगाया जाता है, जिसके नीचे से सामग्री को हटाकर माध्यम के साथ एक टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है। सामग्री को कई बार लिया जाता है, जिसके बाद इसे अलग-अलग टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है। फिर थर्मोस्टेट में 22-24 डिग्री के तापमान पर खेती होती है। परिणामों का मूल्यांकन एक माइक्रोस्कोप के तहत किया जाता है। इस पद्धति का उपयोग तब किया जाता है जब प्रोटोजोआ के निदान के अन्य, सस्ते और तेज तरीके अप्रभावी होते हैं।

आप एक वीडियो समीक्षा देखकर देख सकते हैं कि रक्त की एक बूंद से प्रोटोजोआ की उपस्थिति के परीक्षण को व्यवहार में कैसे समझा जाता है:

लोटिन अलेक्जेंडर, चिकित्सा स्तंभकार

मल की दो तरह से जांच की जाती है:

1. मैक्रोस्कोपिक - हेल्मिंथ, उनके सिर, खंड, स्ट्रोबिली के स्क्रैप खोजें। मल के छोटे हिस्से को एक फ्लैट स्नान या पेट्री डिश में पानी के साथ मिलाया जाता है और यदि आवश्यक हो तो एक आवर्धक कांच का उपयोग करके एक अंधेरे पृष्ठभूमि के खिलाफ अच्छी रोशनी में देखा जाता है। सभी संदिग्ध संरचनाओं को चिमटी के साथ दूसरे कप पानी में या एक गिलास स्लाइड पर पतला ग्लिसरीन की एक बूंद में स्थानांतरित किया जाता है।

विधि के साथ कायम रखनेमल के जांचे गए हिस्से को एक गिलास सिलेंडर में पानी से हिलाया जाता है, जमने के बाद पानी की ऊपरी परत निकल जाती है। यह कई बार दोहराया जाता है। जब तरल पारदर्शी हो जाता है, तो इसे निकाल दिया जाता है, और तलछट को पेट्री डिश में देखा जाता है।

2. माइक्रोस्कोपिक - हेल्मिंथ के अंडे और लार्वा का पता लगाने के लिए। कई शोध विधियां हैं।

एक)। देशी धब्बा - सबसे आम और तकनीकी रूप से उपलब्ध शोध पद्धति। आप सभी कृमि के अंडे और लार्वा पा सकते हैं। हालांकि, अंडे की एक छोटी संख्या के साथ, वे हमेशा नहीं पाए जाते हैं। इसलिए, संवर्धन विधि का उपयोग किया जाता है।

एक)। फुलबॉर्ग विधि - यह संवर्धन की एक विधि है, जो NaCl (1.2 - घनत्व; 400 ग्राम NaCl प्रति 1 लीटर पानी; 40% NaCl घोल) के संतृप्त घोल में हेल्मिंथियासिस अंडे के उद्भव पर आधारित है। देशी स्मीयर की तुलना में विधि अधिक प्रभावी है। 2-5 ग्राम मल को कांच के जार में रखा जाता है और NaCl घोल से भर दिया जाता है, हिलाया जाता है, और 45 मिनट के बाद गठित फिल्म को धातु के लूप से हटा दिया जाता है, ग्लिसरीन की एक बूंद को कांच की स्लाइड पर रखा जाता है। माइक्रोस्कोप के तहत जांच करें। विधि का नुकसान विभिन्न कृमि, बौना टैपवार्म के अंडों की देरी से उभरना है - 15-20 मिनट के बाद, राउंडवॉर्म - 1.5 घंटे, व्हिपवर्म - 2-3 घंटे।

2) कलंतरायण विधि - एक संवर्धन विधि भी है, लेकिन NaNO 3 (1.38 घनत्व) के संतृप्त घोल का उपयोग किया जाता है। अधिकांश अंडे तैरते हैं, तलछट की जांच की आवश्यकता नहीं होती है। नुकसान यह है कि अंडों को लंबे समय तक घोल में रखा जाता है, जिससे यह तथ्य सामने आता है कि कुछ अंडे सतह की फिल्म से गायब होकर नीचे की ओर सूजने और जमने लगते हैं।

3. गोरीचेव की विधि - अंडे के जमाव के सिद्धांत पर आधारित, छोटे कंपकंपी वाले अंडों का पता लगाना। NaCl के एक संतृप्त घोल का उपयोग घोल के रूप में किया जाता है और 3-4 मिली मल के घोल को ध्यान से शीर्ष पर रखा जाता है। 15-20 घंटों के बाद, कंपकंपी के अंडे नीचे की ओर बैठ जाते हैं। तरल निकाला जाता है, एक कांच की स्लाइड पर और एक माइक्रोस्कोप के नीचे तलछट।

4. शुलमैन घुमा विधि – मल में कृमि लार्वा का पता लगाने के लिए। केवल ताजा पृथक मल की जांच करें। 2-3 ग्राम को कांच के जार में रखा जाता है और 5 गुना पानी डाला जाता है, जल्दी से एक छड़ी से हिलाया जाता है, जार की दीवारों को छुए बिना - 20-30 मिनट, फिर छड़ी को जल्दी से हटा दिया जाता है, और एक बूंद अंत में तरल को कांच की स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है और सूक्ष्मदर्शी किया जाता है।

5. बर्मन विधि - हेल्मिंथ लार्वा की गर्मी की ओर पलायन करने की क्षमता के आधार पर, और मल में उनकी पहचान करने का कार्य करता है।

6. हरदा और मोरी की विधि (लार्वा उगाने की विधि) और एंकिलोस्टोमियासिस के परीक्षण के लिए सिफारिश की जाती है। विधि इस तथ्य पर आधारित है कि गर्मी में और नम फ़िल्टर्ड पेपर पर, हुकवर्म अंडे फाइलेरिफॉर्म लार्वा में विकसित होते हैं, जिन्हें आसानी से पहचाना जा सकता है। फ़िल्टर्ड पेपर की एक पट्टी के बीच में 15 ग्राम मल लगाया जाता है, मल के साथ कागज को एक जार में रखा जाता है, ताकि निचला सिरा पानी में डूब जाए, और ऊपरी छोर एक कॉर्क के साथ तय हो। जार को थर्मोस्टैट में 28 0 C पर 5-6 दिनों के लिए रखा जाता है। इस दौरान फाइलेरिफॉर्म लार्वा विकसित होते हैं और पानी में उतर जाते हैं। एक आवर्धक कांच के नीचे तरल की जांच की जाती है। यदि यह पता लगाना मुश्किल है, तो तरल को अपकेंद्रित किया जाता है, लार्वा को 60 0 तक गर्म करके मार दिया जाता है। प्रयोगशाला तकनीशियन को दस्ताने पहनना चाहिए।

7. एंटरोबियासिस के लिए तरीके - पिनवॉर्म अंडे और गोजातीय टैपवार्म की पहचान।

ए) पेरिअनल फोल्ड से स्क्रैपिंग - एक कपास झाड़ू के साथ लकड़ी की छड़ी पर कसकर घाव करें और 50% ग्लिसरीन के घोल से सिक्त करें। प्रयोगशाला में, ग्लिसरॉल के 50% जलीय घोल की 1-2 बूंदों से स्वाब को धोया जाता है।

b) स्टिकी माइट मेथड (ग्राहम मेथड)

चिपकने वाला टेप पेरिअनल सिलवटों पर लगाया जाता है, फिर कांच की स्लाइड पर एक चिपचिपी परत के साथ और सूक्ष्मदर्शी किया जाता है।

सी) आई स्टिक (राबिनोविच की विधि) की मदद से स्क्रैप करना। पेरिअनल स्क्रैपिंग के लिए, कांच की आई स्टिक का उपयोग किया जाता है, जिसका सबसे चौड़ा हिस्सा एक विशेष गोंद से ढका होता है, जिससे पिनवॉर्म अंडे रखना संभव हो जाता है।

रक्त, पित्त, थूक और मांसपेशियों की जांच

रक्त माइक्रोस्कोपी - फाइलेरिया लार्वा का पता लगाया जाता है।

थूक की जांच - पैरागनिम अंडे, राउंडवॉर्म लार्वा, नेकेटर, स्ट्रॉन्ग्लॉइड, इचिनोकोकल ब्लैडर के तत्व।

मांसपेशियों की जांच - यदि ट्राइकिनोसिस का संदेह है, तो रोगी या लाश की मांसपेशियों के साथ-साथ उस मांस की भी जांच की जाती है जो कथित तौर पर व्यक्ति के संक्रमण का कारण बनता है। ट्राइचिनोस्कोपी के प्रयोजन के लिए, मांसपेशियों को छोटे टुकड़ों में काटकर कंप्रेशर्स में रखा जाता है, ये दो चौड़े, मोटे ग्लास होते हैं जो मांसपेशियों को कुचलते हैं और त्रिचिनेला लार्वा कैप्सूल के रूप में पाए जाते हैं - संपीड़न विधि।

पाचन विधि - मांसपेशियों को कृत्रिम गैस्ट्रिक जूस (हाइड्रोक्लोरिक एसिड घोल और पेप्सिन) के साथ डाला जाता है। मांसपेशियां पच जाती हैं और लार्वा का आसानी से पता चल जाता है। आक्रमण की तीव्रता का निर्धारण: लार्वा की संख्या 200 प्रति 1 ग्राम मांसपेशी ऊतक - आक्रमण की मध्यम तीव्रता; 500 तक - गहन; 500 से अधिक - अति गहन आक्रमण।

सीरोलॉजिकल तरीके

हेल्मिन्थोलॉजिकल अनुसंधान के तरीके. हेल्मिन्थेसिस के निदान के तरीकों को प्रत्यक्ष रूप से विभाजित किया जाता है, जो स्वयं या उनके टुकड़ों के साथ-साथ लार्वा और हेलमन्थ्स के अंडे (मल, मूत्र, पित्त और ग्रहणी सामग्री, थूक, रक्त और ऊतकों की जांच करने के तरीके) के प्रत्यक्ष पता लगाने के आधार पर होते हैं। पेरिअनल क्षेत्र और उपनगरीय रिक्त स्थान से स्क्रैपिंग द्वारा प्राप्त सामग्री), और अप्रत्यक्ष, जो मानव शरीर में होने वाले माध्यमिक परिवर्तनों को प्रकट करता है जो कि हेलमिन्थ्स की गतिविधि के परिणामस्वरूप होता है (रक्त की रूपात्मक संरचना का अध्ययन, हेल्मिंथियासिस के निदान के लिए प्रतिरक्षाविज्ञानी तरीके, एक्स-रे अध्ययन, आदि)। प्रत्यक्ष तरीकों में से, सबसे आम कॉप्रोलॉजिकल हैं, जिन्हें मैक्रो- और माइक्रोहेल्मिन्थोस्कोपी में विभाजित किया गया है। कुछ मामलों में, विशेष तरीकों का उपयोग किया जाता है।

मैक्रोजेल्मिटोस्कोपी अनुसंधान के तरीकेहेलमिन्थ्स या उनके टुकड़ों (स्कोलेक्स, सेगमेंट, सेस्टोड के स्ट्रोबिला के कुछ हिस्सों) की खोज के उद्देश्य से। उनका उपयोग उन हेलमनिथेसिस का निदान करने के लिए किया जाता है जिसमें अंडे रोगी के मलमूत्र के साथ उत्सर्जित नहीं होते हैं या थोड़ी मात्रा में उत्सर्जित होते हैं और हमेशा नहीं (उदाहरण के लिए, एंटरोबियासिस के साथ, पिनवॉर्म मल में पाए जाते हैं, टेनिडोज़, सेगमेंट के साथ)।

मल में पिनवॉर्म या सेस्टोड के खंडों का पता लगाने के लिए, मल को नग्न आंखों से देखा जाता है। टेनिडोज के विभेदक निदान के लिए, काले फोटोग्राफिक क्यूवेट्स में या पेट्री डिश में एक गहरे रंग की पृष्ठभूमि के खिलाफ अलग-अलग छोटे भागों में पानी से पतला मल देखने की सिफारिश की जाती है। दो कांच की स्लाइडों के बीच एक आवर्धक कांच के नीचे हेलमिन्थ के टुकड़ों की संदिग्ध बड़ी संरचनाओं की जांच की जाती है। यदि, नैदानिक ​​​​संकेतों के अनुसार, उपचार के बाद छोटे कृमि या सेस्टोड सिर का पता लगाने का सुझाव दिया जाता है, तो संदिग्ध कणों की जांच एक आवर्धक कांच के नीचे ग्लिसरॉल की एक बूंद में की जाती है, और यदि आवश्यक हो, तो एक माइक्रोस्कोप के तहत की जाती है।

माइक्रोहेल्मिन्थोस्कोपी अनुसंधान के तरीके(गुणात्मक) का उद्देश्य हेल्मिन्थ के अंडे और लार्वा की पहचान करना है। काटो के अनुसार सिलोफ़न कवर प्लेट के साथ थिक स्मीयर विधि लागू करें। काटो मिश्रण में 6 . होते हैं एमएलमैलाकाइट ग्रीन का 3% जलीय घोल, 500 एमएलग्लिसरीन और 500 एमएल 6% फिनोल समाधान। काटो प्लेट्स (हाइड्रोफिलिक सिलोफ़न 20´ 40 . टुकड़ों में कटा हुआ) मिमी) 24 . पर डूबे हुए हैं एचकाटो मिश्रण में डालें ताकि वे एक दूसरे के निकट हों (3-5 .) एमएल 100 प्लेटों के लिए काटो का घोल)। 100 मिलीग्राममल को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है, काटो के अनुसार सिलोफ़न कवर प्लेट के साथ कवर किया जाता है और नीचे दबाया जाता है ताकि सिलोफ़न प्लेट के भीतर कांच की स्लाइड पर मल को लिप्त किया जाए। स्मीयर को कमरे के तापमान पर 40-50 . तक स्पष्टीकरण के लिए छोड़ दिया जाता है मिनट,और फिर माइक्रोस्कोप के नीचे देखा। गर्म मौसम में, तैयारी को सूखने से बचाने के लिए, तैयार तैयारी की प्लेट पर एक नम स्पंज रखा जाता है।

सभी प्रकार के कृमि का पूर्ण रूप से पता लगाने के लिए, काटो सिलोफ़न कवर प्लेट थिक स्मीयर विधि का उपयोग संवर्धन विधियों में से एक के साथ संयोजन में किया जाना चाहिए। इनमें से सबसे आम हैं कलंतरीयन विधि और फुलबॉर्न विधि।

कलंतरीयन विधि: 100 . की चौड़ी गर्दन वाले फ्लास्क में एमएलकांच की छड़ से अच्छी तरह हिलाएं 5 जीमल, धीरे-धीरे सोडियम नाइट्रेट का एक संतृप्त समाधान जोड़ना (1 किलोग्रामसोडियम नाइट्रेट प्रति 1 मैंपानी उबालते समय) गिलास के रिम तक। सतह पर तैरने वाले बड़े कणों को पेपर स्कूप से हटा दिया जाता है। खारा घोल की सतह पर एक कांच की स्लाइड लगाई जाती है (खारा घोल तब तक मिलाया जाता है जब तक कि मिश्रण कांच की स्लाइड के पूर्ण संपर्क में न हो जाए)। 20-30 . के बाद मिनटकांच की स्लाइड को हटा दिया जाता है और फिल्म को माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है। इस नमक की अनुपस्थिति में, आप फोलेबॉर्न (400 .) के अनुसार टेबल नमक के संतृप्त घोल का उपयोग कर सकते हैं जी 1 . में नमक मैंउबलता पानी)।

इस तथ्य के कारण कि एक बड़े विशिष्ट गुरुत्व वाले अंडे (एस्केरिड्स के निषेचित अंडे, कंपकंपी के अंडे और बड़े सेस्टोड) तैरते नहीं हैं, तरल की सतह परत की जांच करने के अलावा, फुलबॉर्न विधि का उपयोग करते समय, यह देखना आवश्यक है माइक्रोस्कोप के तहत तलछट से 2-4 तैयारी।

विभिन्न हेलमनिथेसिस के लिए विशेष प्रयोगशाला अनुसंधान विधियां।

कीड़े के टुकड़ों का पता लगाने के लिए, मल को नग्न देखा जाता है, फिर पानी के साथ मिलाया जाता है और एक गहरे रंग की पृष्ठभूमि के खिलाफ पेट्री डिश में छोटे भागों में जांच की जाती है। सभी संदिग्ध कणों को पानी की एक बूंद में कांच की स्लाइड पर रखा जाता है और एक आवर्धक कांच के नीचे जांच की जाती है। आप दैनिक भाग को पानी की मात्रा का 5-10 गुना मिला कर एक सिलेंडर में रख सकते हैं। सरगर्मी के बाद, बर्तन को निलंबित कणों के पूर्ण अवसादन तक छोड़ दिया जाता है। तरल की सतह परत निकल जाती है और साफ पानी डाला जाता है। धुले हुए अवक्षेप को छोटे भागों में नग्न आंखों से या आवर्धक कांच के नीचे देखा जाता है। अंडों का पता लगाने के लिए सूक्ष्म जांच विधियों का उपयोग किया जाता है।

देशी स्मीयर विधि। परीक्षण भाग के विभिन्न स्थानों से मल की एक छोटी मात्रा को 50% ग्लिसरॉल घोल, आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड घोल या पानी की एक बूंद में कांच की स्लाइड पर ट्रिट्यूरेट किया जाता है। मिश्रण को एक कवरस्लिप के साथ कवर किया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है।

फुलबॉर्न की फ्लोटिंग विधि। मल के एक भाग को 20 भागों में संतृप्त सोडियम क्लोराइड घोल (विशिष्ट गुरुत्व 1.18) के साथ मिलाया जाता है, छोटे भागों में मिलाया जाता है। सतह पर तैरने वाले बड़े कण तुरंत हटा दिए जाते हैं, और मिश्रण को 45 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है। इस समय के दौरान, हेल्मिंथ अंडे, सोडियम क्लोराइड के घोल की तुलना में कम विशिष्ट गुरुत्व वाले होते हैं, सतह पर तैरते हैं। सतह की फिल्म को लगभग 1 सेमी व्यास के तार के लूप से हटा दिया जाता है और माइक्रोस्कोप के तहत जांच के लिए कांच की स्लाइड में स्थानांतरित कर दिया जाता है।

कलंतरायण विधि। सोडियम क्लोराइड को सोडियम नाइट्रेट के संतृप्त घोल से बदलकर तैरने की विधि की दक्षता बढ़ जाती है। ऐसे में मिश्रण को 10-15 मिनट के लिए रख दें।

सोडियम क्लोराइड या सोडियम नाइट्रेट के घोल के साथ मल के मिश्रण को जमने के बाद बनने वाली सतह की फिल्म को कांच की स्लाइड से भी हटाया जा सकता है। इस प्रयोजन के लिए, नमक के घोल के साथ मल के मिश्रण से भरे जार को कांच की स्लाइड से ढक दिया जाता है ताकि इसकी निचली सतह तरल के संपर्क में रहे। बसने के बाद, कांच हटा दिया जाता है और, जिस सतह पर फिल्म स्थित है, उसे जल्दी से एक माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है।

शौचालय बनाने से पहले सुबह के समय स्पेरिएनल फोल्ड (पिनवॉर्म के अंडे और गोजातीय टैपवार्म के ओंकोस्फीयर की पहचान करने के लिए) को स्क्रैप किया जाता है। एक लकड़ी के स्पैटुला को पानी में डुबोया जाता है या 50% ग्लिसरीन के घोल का उपयोग गुदा के चारों ओर खुरचने के लिए किया जाता है। परिणामी सामग्री को पानी की एक बूंद या 50% ग्लिसरॉल घोल में कांच की स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है और माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है। स्पैटुला को एक नम कपास झाड़ू से बदला जा सकता है, जिसका उपयोग पेरिअनल क्षेत्र को पोंछने के लिए किया जाता है, फिर पानी में अच्छी तरह से कुल्ला करें। पानी को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के तहत अवक्षेप की जांच की जाती है।

बर्मन की विधि (लार्वा का पता लगाने के लिए)। एक स्टैंड में डाली गई ग्लास फ़नल पर 5-6 ग्राम मल के साथ लेपित धातु की जाली लगाई जाती है। कीप के निचले सिरे पर एक क्लैंप के साथ एक रबर ट्यूब लगाई जाती है। फ़नल को t ° 50 ° तक गर्म पानी से भर दिया जाता है, ताकि मल के साथ जाल का निचला हिस्सा पानी के संपर्क में आ जाए। लार्वा सक्रिय रूप से पानी में चले जाते हैं और रबर ट्यूब के निचले हिस्से में जमा हो जाते हैं। 4 घंटे के बाद, तरल को अपकेंद्रित्र ट्यूबों में उतारा जाता है, सेंट्रीफ्यूज किया जाता है, और एक माइक्रोस्कोप के तहत अवक्षेप की जांच की जाती है।

फेफड़े के फ्लूक पैरागोनिमस, एस्केरिस और हुकवर्म लार्वा, पिनवॉर्म अंडे, इचिनोकोकल मूत्राशय के टुकड़ों के अंडों का पता लगाने के लिए थूक, नाक के बलगम और योनि स्राव का विश्लेषण। बलगम (स्राव) के जांचे गए हिस्से को कांच पर लिप्त किया जाता है और एक काले और सफेद पृष्ठभूमि पर मैक्रोस्कोपिक रूप से देखा जाता है, और फिर एक माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है। आप परीक्षण सामग्री में एंटीफॉर्मिन का 25% घोल मिला सकते हैं, अच्छी तरह से हिला सकते हैं और बलगम को भंग करने के लिए 1-1.5 घंटे तक पकड़ सकते हैं। मिश्रण को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के तहत अवक्षेप की जांच की जाती है।

लीवर फ्लूक अंडे, हुकवर्म, स्ट्रांगाइलोइड्स लार्वा का पता लगाने के लिए ग्रहणी और गैस्ट्रिक रस का विश्लेषण। ग्रहणी की सामग्री के सभी तीन भागों को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के तहत तलछट की जांच की जाती है। साथ ही अन्वेषण करें और।

ऊतकों का अध्ययन। ट्रिचिनेला लार्वा की पहचान करने के लिए, बायोप्सीड पेशी के टुकड़ों को सावधानी से तंतुओं में विभाजित किया जाता है, कंप्रेसर ग्लास (शिकंजा के साथ मोटा चश्मा) के बीच निचोड़ा जाता है और छायांकित प्रकाश के साथ एक माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। सिस्टिकेरसी की पहचान करने के लिए, मांसपेशियों को विदारक सुइयों से स्तरीकृत किया जाता है, पृथक पुटिका को आसपास के ऊतक से साफ किया जाता है, दो कांच की स्लाइडों के बीच निचोड़ा जाता है और एक आवर्धक कांच के नीचे जांच की जाती है।

रक्त परीक्षण (फाइलेरिया लार्वा का पता लगाने के लिए)। वैसलीन के किनारे वाली कवर स्लिप पर लटकती हुई बूंद की जांच की जाती है। आप 3% घोल की मात्रा के 10 गुना के साथ 0.3 मिली रक्त मिला सकते हैं। मिश्रण को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के तहत अवक्षेप की जांच की जाती है। तैयारी को समृद्ध करने के लिए, 2% फॉर्मेलिन समाधान के 3 मिलीलीटर या 5% फॉर्मेलिन समाधान के 95 मिलीलीटर, एसिटिक एसिड के 5 मिलीलीटर और हेमेटोक्सिलिन के केंद्रित अल्कोहल समाधान के 2 मिलीलीटर युक्त तरल की 5 गुना मात्रा को जोड़ा जाता है। शिरापरक रक्त के 1 मिलीलीटर तक। मिश्रण को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है, अवक्षेप को आसुत जल से धोया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। विभिन्न प्रकार के फाइलेरिया में अंतर करने के लिए, गिमेसा-रोमानोव्स्की पद्धति के अनुसार दाग वाले स्मीयर की जांच की जाती है।

इम्यूनोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स के तरीके। लागू करें (एग्लूटिनेशन, पूरक निर्धारण) और एलर्जी निदान परीक्षण (देखें) इसी प्रकार के हेलमिन्थ से।

हेल्मिन्थोलॉजिकल अनुसंधान के तरीके। चावल। हेल्मिंथ अंडे। 1-10 - राउंडवॉर्म के अंडे (नेमाटोड): 1 - 3 - राउंडवॉर्म (1 - एक निषेचित अंडा, 2 - एक प्रोटीन कोट के बिना एक निषेचित अंडा, 3 - एक अनफर्टिलाइज्ड अंडा); 4 - बिल्ली के समान राउंडवॉर्म; 5 - राउंडवॉर्म मांसाहारी; 5 - पिनवर्म; 7 - व्हिपलैश; 8 - टोमिनक्स; 9 - हुकवर्म; 10 - ट्राइको-स्ट्रॉन्गिलिड। 11-15 - टैपवार्म के अंडे (सेस्टोड): 11 - गोजातीय टैपवार्म; 12 - टैपवार्म बौना; 13 - चूहा टैपवार्म; 14 - लौकी टैपवार्म; 15 - चौड़ा रिबन। 16 - 24 - फ्लुक्स के अंडे (कंपकंपी): 16 - कंपकंपी (स्किस्टोसोम) जापानी; 17 - कंपकंपी (स्किस्टोसोम) मूत्र - यौन; 18 - कंपकंपी (शिस्टोसोम) मुनसन; 19 - कंपकंपी (पैरोगोनिमस) फुफ्फुसीय; 20 - कंपकंपी (opisthorchis) साइबेरियाई (बिल्ली के समान); 21 - कंपकंपी (क्लोनोर्चिस) चीनी; 22 - आंतों का कांपना (मेटागोनिमस); 23 - जिगर के कंपकंपी (फासीओलास); 24 - कंपकंपी (डाइक्रोसेलियम) लांसोलेट।

कृमिविज्ञान अनुसंधान का एक प्रभावी और सुविधाजनक तरीका है काटो के अनुसार एक मोटी धुंध का अध्ययन, जिसका सार मल की एक मोटी धुंध में हेल्मिंथ अंडे का पता लगाना है, ग्लिसरीन के साथ स्पष्ट किया गया है और मैलाकाइट हरे रंग से रंगा हुआ है। काटो मिश्रण की संरचना मैलाकाइट ग्रीन के 3% जलीय घोल का 6 मिली, ग्लिसरीन का 500 मिली, 6% फिनोल घोल का 500 मिली। समाधान स्थिर है और कमरे के तापमान पर संग्रहीत किया जा सकता है। तैयारी तैयार करने के लिए, मटर के आकार के मल के टुकड़ों को एक कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है, जिसे काटो मिश्रण में 24 घंटे के लिए हाइड्रोफिलिक सिलोफ़न की एक फिल्म के साथ कवर किया जाता है, और सामग्री को समान रूप से वितरित करने के लिए कांच के खिलाफ दबाया जाता है। 40-60 मिनट के लिए स्पष्ट किए गए स्मीयर की सूक्ष्म जांच की जाती है। खोजे गए कृमि के अंडों की गिनती की जाती है और उनकी प्रजातियों की संबद्धता रूपात्मक विशेषताओं द्वारा निर्धारित की जाती है। विधि एस्केरिस, व्हिपवर्म, सेस्टोड, कंपकंपी के अंडों को कुछ हद तक प्रकट करने की अनुमति देती है - हुकवर्म और पाइग्मी टैपवार्म।

इसके अलावा व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है संवर्धन के तरीके. प्लवनशीलता विधियों का सिद्धांत एक खारा समाधान में मल को निलंबित करना है, जिसमें हेल्मिन्थ अंडे की तुलना में उच्च सापेक्ष घनत्व होता है, जिसके परिणामस्वरूप वे सतह पर तैरते हैं। सतह फिल्म की सामग्री की जांच एक माइक्रोस्कोप के तहत की जाती है। समृद्ध मिश्रण के रूप में, समाधान का उपयोग किया जाता है: टेबल नमक - 1 लीटर पानी में 400 ग्राम (फुलेबोर्न -1.18 के अनुसार सापेक्ष घनत्व); सोडियम नाइट्रेट - 1 लीटर पानी में 1 किलो (कलंतरीयन-1.38) के अनुसार सापेक्ष घनत्व; सोडियम नाइट्रेट - 900 ग्राम और पोटेशियम नाइट्रेट - 1 लीटर पानी में 400 ग्राम (ब्रुदास्तोव और क्रास्नोनोस -1.48 के अनुसार सापेक्ष घनत्व)। समाधान हैं उबला हुआ और ठंडा।
शोध के लिए, एक गिलास या फ़ाइनेस ग्लास में 5-10 ग्राम मल मिलाया जाता है, इसमें 100-200 मिलीलीटर खारा घोल डाला जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है। फिर, जो बड़े कण सामने आए हैं, उन्हें लकड़ी के स्पैटुला या कागज या कार्डबोर्ड से बने स्कूप से हटा दिया जाता है, और एक चौड़ी कांच की स्लाइड को तुरंत सतह फिल्म पर लगाया जाता है ताकि खारा घोल और कांच की स्लाइड पूरी तरह से संपर्क में रहे। मिश्रण को जमने के 30-40 मिनट के बाद, कांच की स्लाइड को हटा दिया जाता है, फिल्म के साथ माइक्रोस्कोप के नीचे रखा जाता है और पूरी सतह की सावधानीपूर्वक जांच की जाती है। सूखने से बचाने के लिए, आप 50% ग्लिसरीन के घोल की 2-3 बूंदें मिला सकते हैं। सतह की फिल्म को वायर लूप से भी हटाया जा सकता है। नमक के घोल का आपेक्षिक घनत्व बढ़ने पर प्लवनशीलता विधियों की दक्षता बढ़ जाती है। इन विधियों का उपयोग करके सूत्रकृमि, सेस्टोड और थरमाटोड के अंडों का पता लगाना संभव है।

मल में अंडे का पता लगाने के लिए, कसीसिलनिकोव अवसादन विधि का उपयोग किया जाता है।. एक निलंबन बनने तक मल को 1:10 के अनुपात में 1% डिटर्जेंट घोल (लोटोस वाशिंग पाउडर, आदि) के साथ मिलाया जाता है। डिटर्जेंट के प्रभाव में, मल के विभिन्न घटक (प्रोटीन, वसा, ऊतक तत्व) भंग हो जाते हैं। 30 मिनट के बाद, ट्यूब की सामग्री को 1-2 मिनट के लिए हिलाया जाता है, जिसके बाद उन्हें 5 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। तलछट से तैयारियां तैयार की जाती हैं और माइक्रोस्कोप के नीचे देखी जाती हैं।
खेत की स्थितियों में, साथ ही कृमि संक्रमण के लिए आबादी के बड़े पैमाने पर सर्वेक्षण के दौरान, काटो मोटी स्मीयर विधि का उपयोग करना सुविधाजनक होता है। स्थिर स्थितियों में, रोगियों की जांच करते समय, सबसे प्रभावी प्लवनशीलता विधियों का उपयोग करना बेहतर होता है। माइक्रोस्कोपी के दौरान इन विधियों का उपयोग करते समय, तैयारी में पाए जाने वाले अंडों को गिनने की सलाह दी जाती है। मल के अध्ययन के लिए लिए गए मानक वजन या मात्रा (उदाहरण के लिए, 1 चम्मच या बड़ा चम्मच), और खारा समाधान की एक निरंतर एकल मात्रा के अधीन, कोई मोटे तौर पर आक्रमण की तीव्रता का न्याय कर सकता है। यह मात्रात्मक रिकॉर्ड निर्धारित उपचार को प्रमाणित करने और डीवर्मिंग की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने में उपयोगी हो सकता है। इसके अलावा, संक्रमण की तीव्रता को स्थापित करने के लिए अन्य अधिक सटीक मात्रात्मक तरीकों, विशेष रूप से स्टोल विधि का उपयोग किया जा सकता है।

टेनियारिन्कोसिस और एंटरोबियासिस के निदान के लिएपेरिअनल-रेक्टल स्क्रैपिंग के शोध के तरीके को लागू करें। 50% ग्लिसरॉल के घोल में भिगोए हुए लकड़ी के स्पैटुला का उपयोग गुदा और निचले मलाशय के आसपास शौच करने से पहले सुबह के समय पेरिअनल सिलवटों को खुरचने के लिए किया जाता है। परिणामी सामग्री, कवर स्लिप के किनारे से एक स्पैटुला से साफ की जाती है, 50% ग्लिसरॉल घोल की एक बूंद में कांच की स्लाइड पर रखी जाती है, एक कवर स्लिप से ढकी होती है और एक माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। आप सेल्यूलोज टेप की एक पट्टी की भी जांच कर सकते हैं, जिसे पहले एक चिपकने वाले पक्ष के साथ pernanal सिलवटों से दबाया जाता है, फिर एक कांच की स्लाइड पर रखा जाता है और सूक्ष्मदर्शी किया जाता है।

बर्मन विधि द्वारा मल में निमेटोड लार्वा का पता लगाना. विधि लार्वा की थर्मोट्रोपिक संपत्ति पर आधारित है। शोध के लिए, 1 बड़ा चम्मच मल लिया जाता है, एक धातु की जाली में रखा जाता है या एक तार के फ्रेम पर धुंध की कई परतों की जाली लगाई जाती है। ग्रिड एक तिपाई में तय कीप में स्थापित है। क्लैंप के साथ एक रबर ट्यूब फ़नल से जुड़ती है। जाल को ऊपर उठाकर कीप को पानी (तापमान +40°...+50°C) से भर दिया जाता है ताकि जाली का निचला हिस्सा पानी में डूब जाए। मल से लार्वा सक्रिय रूप से गर्म पानी में चले जाते हैं और फ़नल के निचले हिस्से में जमा हो जाते हैं। 2-4 घंटों के बाद, क्लैंप खोला जाता है, पानी को एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में उतारा जाता है और 2-3 मिनट के लिए अपकेंद्रित्र किया जाता है। फिर सतह पर तैरनेवाला निकाला जाता है, तलछट को एक कांच की स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है, जहां स्ट्रॉन्गिलोडायसिस रोगज़नक़ के मोबाइल लार्वा पाए जाते हैं।

हरड़ विधि और मोरी हुकवर्म और नेकेटर्स के लार्वा में अंतर करने की अनुमति देता है। हुकवर्म के लार्वा फिल्टर पेपर पर सुसंस्कृत होते हैं। इस प्रयोजन के लिए, रोगी से लिए गए ताजा मल के 0.5 ग्राम को शौच के 1 घंटे के बाद नहीं, 12X1.5 सेमी आकार के फिल्टर पेपर स्ट्रिप्स पर लगाया जाता है, जिससे पट्टी के दोनों सिरे साफ हो जाते हैं। पट्टी का एक सिरा एक परखनली में डुबोया जाता है, जिसका चौथा भाग पानी से भरा होता है, और दूसरा भाग कॉर्क से जकड़ा होता है। ट्यूबों को थर्मोस्टैट में +26 ... + 28 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर रखा जाता है। अंडों से विकसित होने वाले लार्वा फिल्टर पेपर के साथ उतरते हैं और टेस्ट ट्यूब के नीचे बस जाते हैं। 5-6 दिनों के बाद, कागज की पट्टी को हटा दिया जाता है, और परखनली में शेष तरल की जांच एक आवर्धक कांच या सेंट्रीफ्यूज के तहत की जाती है। सेंट्रीफ्यूजेशन के दौरान बनने वाले अवक्षेप की जांच एक प्रकाश सूक्ष्मदर्शी से की जाती है। टेस्ट ट्यूब टेट्राहेड्रल ग्लास जार (आकार 15XYX7 सेमी) के बजाय उपयोग करते समय, जिसकी दीवारों पर 4 पेपर स्ट्रिप्स जुड़े होते हैं, विश्लेषण की दक्षता बढ़ जाती है (जीएम मारुशविली एट अल।, 1966)।

शिस्टोसोमियासिस के लिए अनुसंधान के तरीके . मल की जांच - मल के एक हिस्से को 250 मिली पानी में मिलाया जाता है, धुंध की 3 परतों के माध्यम से एक शंक्वाकार बर्तन में फ़िल्टर किया जाता है, जिसे ऊपर से पानी से भर दिया जाता है। 30 मिनट के बाद, तरल परत को हटा दिया जाता है, पानी का एक ताजा हिस्सा अवक्षेप में जोड़ा जाता है। एक स्पष्ट सतह पर तैरनेवाला प्राप्त होने तक और सूक्ष्म रूप से जांच किए जाने तक अवक्षेप को धोया जाता है।

लार्वोस्कोपी की विधि - 20-25 ग्राम मल को एर्लेनमेयर फ्लास्क में रखा जाता है, जिसके किनारे पर एक कांच की ट्यूब होती है और नल के पानी से धोया जाता है। फिर फ्लास्क को काले कागज से ढक दिया जाता है, सोल्डरेड ग्लास ट्यूब को +25...+30°C के तापमान पर प्रकाश में छोड़ दिया जाता है। हैटेड मिरासिडिया पार्श्व ट्यूब में मेनिस्कस पर केंद्रित होते हैं, जहां उन्हें एक आवर्धक कांच या नग्न आंखों से देखा जा सकता है। मूत्र परीक्षण - सुबह 10 बजे से दोपहर 2 बजे के बीच 100 मिली मूत्र एकत्र किया जाता है, या दैनिक भाग का निपटान किया जाता है, और फिर 1500 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। परिणामी अवक्षेप * को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है और सूक्ष्मदर्शी किया जाता है। डब्ल्यूएचओ मूत्र के पूरे हिस्से को छानने के लिए एक विधि की सिफारिश करता है। निस्पंदन के बाद, फिल्टर को फॉर्मेलिन या गर्म (अंडे को मारने के लिए) के साथ इलाज किया जाता है और फिर निनहाइड्रिन के जलीय घोल से सिक्त किया जाता है। सूखे तैयारियों में, अंडे के भ्रूण बैंगनी रंग का हो जाता है।

इम्यूनोलॉजिकल का उपयोग शिस्टोसोमियासिस के निदान के लिए अनुसंधान विधियां कठिन हैं, क्योंकि वयस्क शिस्टोसोम और उनके अंडों में बड़ी संख्या में एंटीजन होते हैं जो प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का कारण बनते हैं जो प्रजाति-विशिष्ट नहीं हैं (डी। ब्रैडली, 1979)।

हमारे देश में, हेल्मिंथियासिस में प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं के निर्माण के लिए, कई मानक निदान तैयार किए जाते हैं। इचिनोकोकोसिस और एल्वोकॉकोसिस के लिए एलर्जी त्वचा परीक्षण, इचिनोकोकोसिस एंटीजन के साथ आरएलए, ठंड में आरएसके, विभिन्न संशोधनों में ठंड में वर्षा प्रतिक्रिया (रिंग वर्षा, टेस्ट ट्यूब या केशिकाओं में वर्षा, जो ट्राइकिनोसिस, सिस्टिसरकोसिस और माइग्रोस्कारियासिस एंटीजन के साथ रखी जाती है) व्यावहारिक है। आवेदन पत्र। उपरोक्त सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं को स्थापित करने के लिए मानक निदान बैक्टीरिया की तैयारी करने वाले उद्यमों द्वारा किए जाते हैं। निर्माता ने भंडारण के नियमों, दवा की समाप्ति तिथि और उत्पादित डायग्नोस्टिक्स के लिए प्रतिक्रिया तकनीक के साथ उपयुक्त एंटीजन के उपयोग पर निर्देशों पर विस्तृत निर्देश संलग्न किए हैं।

हाल के वर्षों में, हेल्मिंथियासिस के निदान के लिए उपयोग किए जाने वाले सीरोलॉजिकल परीक्षणों की सूची में काफी विस्तार हुआ है। इस प्रयोजन के लिए, निम्नलिखित प्रतिक्रियाओं का उपयोग किया जाता है: रीगा, अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस (आरआईएफ), जेल इम्यूनोडिफ्यूजन (आरआईडी), काउंटर इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस (वीआईईएफ), रीमा। इन प्रतिक्रियाओं का उपयोग एस्कारियासिस, टोक्सोकेरियासिस, ट्राइकिनोसिस, हुकवर्म संक्रमण, फाइलेरिया, इचिनोकोकोसिस और एल्वोकॉकोसिस, ओपिसथोरियासिस, शिस्टोसोमियासिस, पैरागोनिमियासिस के लिए किया जा सकता है। हालांकि, हमारे देश में इन प्रतिक्रियाओं के लिए, मानक निदान जारी नहीं किए जाते हैं और उनकी सेटिंग की तकनीक को विनियमित नहीं किया जाता है। अलग-अलग प्रयोगशालाएं, ज्यादातर वैज्ञानिक, अपने स्वयं के विशिष्ट एंटीजन तैयार करती हैं और विभिन्न संशोधनों में उनका उपयोग करती हैं। इन विधियों का विवरण साहित्य में व्यापक रूप से प्रस्तुत किया गया है और कड़ाई से एकीकृत नहीं है। प्रतिरक्षाविज्ञानी डेटा की व्याख्या प्रत्येक लागू सीरोलॉजिकल परीक्षण की विशिष्टता और संवेदनशीलता के स्तर को ध्यान में रखते हुए, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की गतिशीलता के अध्ययन पर आधारित होनी चाहिए। इसलिए, निदान करते समय, साथ ही आबादी के सेरोएपिडेमियोलॉजिकल सर्वेक्षणों के दौरान, कई सबसे संवेदनशील प्रतिक्रियाओं का उपयोग करने की सलाह दी जाती है। इन पदों से, VIEF और REMA प्रतिक्रियाओं ने खुद को अच्छी तरह से साबित कर दिया है, जो उच्च संवेदनशीलता और काफी उच्च विशिष्टता (पी। एम्ब्रोइज़-थॉमस, 1978; आई। हां। लिसेंको, 1978, आदि)। रीमा की प्रभावशीलता का परीक्षण अमीबियासिस, लीशमैनियासिस, ट्रिपैनोसोमियासिस और टोक्सोप्लाज्मोसिस (जीए एर्मोलिन, 1980) में किया गया है।