Ταξονομία, πνευμονιόκοκκος, εργαστηριακές μέθοδοι για τη γρίπη

ΥΠΟΥΡΓΕΙΟ ΥΓΕΙΑΣ ΤΗΣ ΡΩΣΙΚΗΣ ΟΜΟΣΠΟΝΔΙΑΣ ΚΡΑΤΙΚΟ ΙΑΤΡΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΑΖΑΝ ΤΜΗΜΑ ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΑΣ

ΠΝΕΥΜΟΚΟΚΚΟΣ

ΚΑΖΑΝ 1999

UDC 576.851.21(07)

Δημοσιεύθηκε με απόφαση του Κεντρικού Συντονιστικού και Μεθοδολογικού Συμβουλίου του Κρατικού Ιατρικού Πανεπιστημίου του Καζάν.

Συντάχθηκε από:

(Προϊστάμενος του Τμήματος Μικροβιολογίας, Διδάκτωρ Ιατρικών Επιστημών, Καθηγητής O.K. Pozdeev, Επίκουρος του Τμήματος Μικροβιολογίας, Υποψήφιος Ιατρικών Επιστημών, E.R. Fedorova.

Αξιολογητές:

Επικεφαλής του Τμήματος Επιδημιολογίας του Κρατικού Ιατρικού Πανεπιστημίου του Καζάν, Διδάκτωρ Ιατρικών Επιστημών, Αναπληρωτής Καθηγητής M.Sh. Shafeev, Επικεφαλής του Τμήματος Επιδημιολογίας της Κρατικής Ιατρικής Ακαδημίας του Καζάν, Διδάκτωρ Ιατρικών Επιστημών, Καθηγητής V.E. Γκριγκόριεφ.

Πνευμονιόκοκκοι /Ο.Κ. Pozdeev, E.R. Fedorov - Kazan: KSMU, 1999. - 14 δευτ.

Με την αντιγραφή, διανομή, δημοσίευση του κειμένου ή μέρους του στους πόρους σας, αποδέχεστε την ευθύνη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία.

Αποκλειστικά για χρήση του έργου για προσωπικούς σκοπούς (άρθρο 18, άρθρο 26 του νόμου της Ρωσικής Ομοσπονδίας «Περί πνευματικής ιδιοκτησίας και συγγενικών δικαιωμάτων»). Απαγορεύεται η εμπορική αναπαραγωγή.

Κρατικό Ιατρικό Πανεπιστήμιο του Καζάν, 1999

Ο πνευμονιόκοκκος (Streptococcus pneumoniae) απομονώθηκε για πρώτη φορά από τον Pasteur (1881) ενώ εργαζόταν σε ένα αντιλυσσικό εμβόλιο και αρχικά θεωρήθηκε ο αιτιολογικός παράγοντας της λύσσας. Ο αιτιολογικός ρόλος του μικροοργανισμού στην ανάπτυξη πνευμονίας στον άνθρωπο αποδείχθηκε από τους Frenkel και Weichselbaum (1884). Τα βακτήρια αποικίζουν ανθρώπινους και ζωικούς οργανισμούς και ανήκουν στην ομάδα των λεγόμενων «στοματικών» στρεπτόκοκκων. Είναι οι κύριοι αιτιολογικοί παράγοντες της πνευμονίας και μπορούν επίσης να προκαλέσουν πλευρίτιδα, μηνιγγίτιδα, έρποντα έλκη κερατοειδούς, πυώδη φλεγμονή του μέσου ωτός, σηπτικές παθήσεις και άλλες ασθένειες. Στην IX έκδοση του οδηγού Bergey για τα βακτήρια (1994), οι πνευμονιόκοκκοι περιλαμβάνονται στην ομάδα 17, «Gram-θετικοί κόκκοι».

Επιδημιολογία βλαβών. Ο πνευμονιόκοκκος είναι ένας από τους κύριους αιτιολογικούς παράγοντες της βακτηριακής πνευμονίας που καταγράφεται εκτός νοσοκομείων (2-4 περιπτώσεις ανά 1000 άτομα). Κάθε χρόνο, τουλάχιστον 500.000 περιπτώσεις πνευμονιοκοκκικής πνευμονίας παρατηρούνται στον κόσμο (η πραγματική τιμή είναι πολύ μεγαλύτερη). Τα παιδιά και οι ηλικιωμένοι είναι πιο ευαίσθητοι στη μόλυνση. Η δεξαμενή μόλυνσης είναι ασθενείς και φορείς (20-50% των παιδιών προσχολικής ηλικίας και 20-25% των ενηλίκων). η κύρια διαδρομή μετάδοσης είναι η επαφή. κατά τη διάρκεια των εστιών είναι επίσης αερομεταφερόμενος. Η κορυφαία επίπτωση εμφανίζεται την ψυχρή περίοδο. Στη συντριπτική πλειονότητα των περιπτώσεων, κλινικές μορφές λοίμωξης αναπτύσσονται όταν η αντίσταση του σώματος είναι μειωμένη (συμπεριλαμβανομένου του ψυχρού στρες), καθώς και στο πλαίσιο άλλων παθολογιών (δρεπανοκυτταρική αναιμία, νόσος Hodgkin, λοίμωξη HIV, μυέλωμα, σακχαρώδης διαβήτης , καταστάσεις μετά από σπληνεκτομή κ.λπ.) ή με αλκοολισμό. Οι επιλογές 1, 2 και 3 παίζουν τη μεγαλύτερη επιδημιολογική σημασία στην παθολογία σε ενήλικες. για παιδιά - 1, 2, 3 και 14 επιλογές. Η μολυσματικότητα των οροπαραγωγών σε φθίνουσα σειρά είναι οι παραλλαγές 3, 1, 2, 5, 7 και 8. Τα λευκά ποντίκια (εάν μολυνθούν, πεθαίνουν από σηψαιμία εντός 24 ωρών), τα μοσχάρια, τα αρνιά, τα χοιρίδια, οι σκύλοι και οι πίθηκοι είναι ευαίσθητα στον πνευμονιόκοκκο.

Μορφολογία. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι ακίνητοι, δεν σχηματίζουν σπόρια και έχουν ελαφρώς επίμηκες σχήμα, που θυμίζει το περίγραμμα μιας φλόγας κεριού. Σε επιχρίσματα κλινικού υλικού, διατάσσονται σε ζεύγη, καθένα από τα οποία περιβάλλεται από μια παχιά κάψουλα. Σε επιχρίσματα από μέσα καλλιέργειας, μπορεί να εντοπίζονται σε κοντές αλυσίδες και να είναι πιο στρογγυλεμένα. Σε απλά μέσα σχηματίζουν μια λεπτή κάψουλα. Η ανάπτυξή του διεγείρεται από την εισαγωγή αίματος, ορού ή ασκητικού υγρού. Ο σχηματισμός κάψουλας είναι πιο έντονος στα βακτήρια τύπου III. Όταν είναι διατεταγμένη σε αλυσίδες, η κάψουλα μπορεί να είναι κοινή.

Πολιτιστικές ιδιότητες. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι αερόβια ή προαιρετικά αναερόβια. Κατά την καλλιέργεια, προτιμώνται οι καπνοφιλικές συνθήκες (5-10% CO2). Είναι χημειοοργανογρόφια και αναπτύσσονται καλά σε μέσα αίματος ή ορού συμπληρωμένα με 0,1% γλυκόζη. Μπορούν να αναπτυχθούν στο εύρος θερμοκρασίας 28-42 °C, βέλτιστη - 37 °C. Βέλτιστο pH -7,6-7,8. Σε πυκνά μέσα σχηματίζουν λεπτές, ημιδιαφανείς, σαφώς καθορισμένες αποικίες με διάμετρο περίπου 1 mm. Μερικές φορές μπορεί να είναι επίπεδα με κεντρική κατάθλιψη. όπως και άλλοι στρεπτόκοκκοι, οι αποικίες δεν συγχωνεύονται ποτέ

μεταξύ τους. Στο άγαρ αίματος σχηματίζουν μικρές ημιδιαφανείς πρασινογκρίζες αποικίες. Το κέντρο των αποικιών είναι πιο σκούρο, η περιφέρεια είναι πιο ανοιχτόχρωμη. Κάτω από την αποικία και κατά μήκος της περιφέρειάς της, μια ζώνη α-αιμόλυσης είναι ορατή με τη μορφή μιας πρασινωπής αποχρωματισμένης ζώνης (η οποία οφείλεται στη μετάβαση της αιμοσφαιρίνης στη μεθαιμοσφαιρίνη). Οι αποικίες του πνευμονιόκοκκου τύπου III έχουν συχνά βλεννώδη σύσταση και έχουν μέγεθος έως 2 mm. Είναι λίγο θολά και μπορούν να συγχωνευθούν μεταξύ τους. Σχηματίζουν S- και R-μορφές αποικιών. Κατά τη μετάβαση από τη μορφή S στη μορφή R, χάνουν την ικανότητα να συνθέσουν την κάψουλα. Σε υγρά μέσα με ορό και 0,2% γλυκόζη δίνουν ομοιόμορφη θολότητα και μικρό κροκιδωτό ίζημα. Με παρατεταμένη καλλιέργεια, το ίζημα αυξάνεται.

Βιωσιμότητα. Οι πνευμονιόκοκκοι ανήκουν στην ομάδα των ασταθών μικροοργανισμών. Επιμένουν σε ξηρά πτύελα έως και δύο μήνες. Δυνατότητα αποθήκευσης για μεγάλο χρονικό διάστημα σε χαμηλές θερμοκρασίες. σε θερμοκρασία 60 °C πεθαίνουν μέσα σε 3-5 λεπτά. Ένα διάλυμα 3% καρβολικού οξέος τα σκοτώνει σε 1-2 λεπτά. Η οπτοχίνη (σε συγκέντρωση 1:100.000) και η χολή έχουν επιζήμια επίδραση στον πνευμονιόκοκκο, ο οποίος χρησιμοποιείται για την αναγνώριση βακτηρίων.

Οι πνευμονιόκοκκοι διαφέρουν από άλλους μικροοργανισμούς σε μια σειρά από ιδιότητες (Πίνακας 1).

Πίνακας 1 Βιοχημικές ιδιότητες του πνευμονιόκοκκου

Δοκιμαστικό υπόστρωμα	Αποτέλεσμα	Δοκιμαστικό υπόστρωμα	Αποτέλεσμα
Ανάπτυξη στους 100°C
		Ραφινόζη
Τετάρτη με 6,5% Ναδ
α-αιμόλυση
Β-αιμόλυση		Τρεχαλόζη
		Φωσφατάση
Ιππουράτης		β-γαλακτοσιδάση
Γλυκερίνη
Ονομασίες: "+" - 90% ή περισσότερα στελέχη είναι θετικά. (+) - 80-89% των στελεχών είναι θετικά. d - 21-79% των στελεχών είναι θετικά. (-) - 11-20% των στελεχών είναι θετικά. «- - 90% ή περισσότερα από τα στελέχη είναι αρνητικά.

Αντιγονική δομή. Αρκετοί τύποι αντιγόνων έχουν βρεθεί στους πνευμονιόκοκκους: πολυσακχαρίτης, 0-σωματικό αντιγόνο, που βρίσκεται στο κυτταρικό τοίχωμα. πολυσακχαριτικά καψικά Κ-αντιγόνα και Μ-πρωτεΐνη. Το σωματικό αντιγόνο πολυσακχαρίτη είναι παρόμοιο με την ουσία C άλλων στρεπτόκοκκων. Η σχέση καθορίζει την ομοιότητα στη χημική δομή των ριμπιτεϊχοϊκών οξέων που σχετίζονται με τη φωσφορική χολίνη. Τα αντιγόνα κάψουλας έχουν επίσης πολυσακχαριδική φύση, που αποτελούνται από μονοσακχαρίτες που επαναλαμβάνονται σε διάφορους συνδυασμούς: D-γλυκόζη, D-γαλακτόζη και L-ραμνόζη. Με βάση τη δομή των αντιγόνων της κάψας, οι πνευμονιόκοκκοι χωρίζονται σε 84 ορούς. Θα πρέπει να θυμόμαστε ότι τα καψικά αντιγόνα αντιδρούν διασταυρούμενα με αντιορούς σε αντιγόνα των στρεπτόκοκκων της ομάδας Α και Β, καθώς και με ορούς των αντιγόνων Klebsiella και Escherichia. Κατά τη μετάβαση από τη μορφή S στην R, τα καψικά αντιγόνα χάνονται. Για τον ορότυπο των πνευμονιόκοκκων, παράγονται ομαδικοί οροί, που ονομάζονται με λατινικά γράμματα (A, B, C, D, κ.λπ.) και οροί οροί που ορίζονται με λατινικούς αριθμούς. Ο ορός συγκόλλησης III δεν περιλαμβάνεται στα μείγματα ορού. Απελευθερώνεται χωριστά και δεν μπορεί να εκτραφεί. Στους ανθρώπους, οι πνευμονιόκοκκοι των οροπαραγόντων I, II και III απομονώνονται συχνότερα. Είναι τα πιο μολυσματικά για τον άνθρωπο, επομένως η δοκιμή συγκόλλησης πραγματοποιείται αρχικά με χρήση αντιορών σε αυτές τις παραλλαγές. Εάν το αποτέλεσμα είναι αρνητικό, η αντίδραση συγκόλλησης γίνεται με μείγμα ορών Α, Β, Γ κ.λπ. (μέχρι να ληφθεί θετικό αποτέλεσμα), και στη συνέχεια με ξεχωριστούς αντιορούς. Για την ταχύτερη αναγνώριση των οροπαραγωγών, χρησιμοποιείται η αντίδραση Neufeld (ανοσολογική διόγκωση κάψουλας). Η μέθοδος βασίζεται στην ικανότητα των πνευμονιοκοκκικών καψουλών να αυξάνουν τον όγκο τους παρουσία ομόλογου αντιορού, ο οποίος καταγράφεται με οπτικό μικροσκόπιο. Οι καψικοί πολυσακχαρίτες έχουν ευαισθητοποιητικές ιδιότητες, οι οποίες εκδηλώνονται με την ανάπτυξη αντίδρασης υπερευαισθησίας καθυστερημένου τύπου, που ανιχνεύεται με δερματικές δοκιμές.

Παράγοντες παθογένειας. Ο κύριος παράγοντας είναι η κάψουλα, η οποία προστατεύει τα βακτήρια από το μικροβιοκτόνο δυναμικό των φαγοκυττάρων και τα εκτρέπει από τη δράση των οψονινών. Τα μη ενθυλακωμένα στελέχη είναι πρακτικά μη λοιμώδη και είναι σπάνια. Η πλειονότητα της δεξαμενής των αντιπνευμονιοκοκκικών ΑΤ αποτελείται από κάψουλες AT σε Ag. Μια σημαντική λειτουργία της κάψουλας και της Μ-πρωτεΐνης είναι επίσης η διασφάλιση της προσκόλλησης στον βλεννογόνο. Η ουσία C είναι απαραίτητη, καθώς αλληλεπιδρά ειδικά με την C-αντιδρώσα πρωτεΐνη. Η συνέπεια μιας τέτοιας αντίδρασης είναι η ενεργοποίηση του συμπληρωματικού καταρράκτη και η απελευθέρωση μεσολαβητών της οξείας φάσης της φλεγμονής. Η συσσώρευσή τους στον πνευμονικό ιστό διεγείρει τη μετανάστευση των πολυμορφοπυρηνικών φαγοκυττάρων. Ο σχηματισμός ισχυρών φλεγμονωδών διηθημάτων συνοδεύεται από διαταραχή της ομοιόστασης του πνευμονικού ιστού και ηπατοποίησή του. Οι πνευμονιόκοκκοι παράγουν ενδοτοξίνη, α- και βήτα-αιμολυσίνες (πνευμονολυσίνες) και λευκοσιδίνη. Η α-πνευμονολυσίνη είναι μια θερμοευαίσθητη πρωτεΐνη ικανή να εξουδετερώνει την Ο-στρεπτολυσίνη,

ερυθρογενής ουσία, νευραμινιδάση. Οι πνευμονιόκοκκοι συνθέτουν επίσης έναν αριθμό ενζύμων που συμβάλλουν στην παθογένεση των βλαβών - μουραμιδάση, υαλουρονιδάση (προωθεί την εξάπλωση μικροοργανισμών στους ιστούς), πεπτιδάση (διασπά το IgA).

Παθογένεια βλαβών. Ο βιότοπος του πνευμονιόκοκκου είναι η ανώτερη αναπνευστική οδός. Η παθογένεση των περισσότερων πνευμονιών περιλαμβάνει αναρρόφηση σάλιου που περιέχει S. pneumoniae και διείσδυση βακτηρίων στους κατώτερους αεραγωγούς. Η παραβίαση των προστατευτικών μηχανισμών παροχέτευσης - ώθηση βήχα και κάθαρση του βλεννογόνου - είναι απαραίτητη. Στους ενήλικες παρατηρούνται συχνότερα λοβώδεις βλάβες του πνεύμονα· σε παιδιά και ηλικιωμένους κυριαρχούν οι περιβρογχικές ή εστιακές βλάβες. Ο σχηματισμός ισχυρών φλεγμονωδών διηθημάτων συνοδεύεται από διαταραχή της ομοιόστασης του πνευμονικού ιστού και ηπατοποίησή του. Οι λοιμώξεις με τον πιο μολυσματικό ορόβολο 3 μπορεί να συνοδεύονται από σχηματισμό κοιλοτήτων στο πνευμονικό παρέγχυμα. Από την κύρια εστίαση, το παθογόνο μπορεί να διεισδύσει στην υπεζωκοτική κοιλότητα και στο περικάρδιο ή να διαδοθεί αιματογενώς και να προκαλέσει μηνιγγίτιδα, ενδοκαρδίτιδα και βλάβες στις αρθρώσεις

Κλινικές ΕΚΔΗΛΩΣΕΙΣ. Η κλασική πνευμονιοκοκκική πνευμονία ξεκινά ξαφνικά. Σημειώνουν αύξηση της θερμοκρασίας του σώματος, παραγωγικό βήχα και πόνο στο στήθος. Σε εξασθενημένα άτομα και ηλικιωμένους, η νόσος αναπτύσσεται αργά, με ελαφρύ πυρετό, μειωμένη συνείδηση ​​και σημεία πνευμονικής καρδιακής ανεπάρκειας. Η στρεπτοκοκκική μηνιγγίτιδα καταγράφεται σε όλες τις ηλικιακές ομάδες. χαρακτηρίζονται από βίαιη έναρξη με αύξηση της θερμοκρασίας του σώματος, δυσκαμψία των μυών του αυχένα, πονοκέφαλο, ναυτία και έμετο. Οι βλάβες των αγγείων των μηνίγγων συχνά συνοδεύονται από απώλεια συνείδησης. μεταξύ των παιδιών και των ηλικιωμένων, η θνησιμότητα μπορεί να φτάσει το 80%. Αρκετά συχνά, αιματογενείς πνευμονιοκοκκικές βλάβες, καθώς και ιγμορίτιδα, μαστοειδίτιδα, μέση ωτίτιδα, ενδοκαρδίτιδα και περιτονίτιδα, σημειώνονται σε άτομα με ανοσοανεπάρκεια (για παράδειγμα, μολυσμένα με HIV) ή σε ασθενείς με σπληνεκτομή. Μετά από μια ασθένεια, αναπτύσσεται ασταθής ανοσία, η οποία είναι τυπο-ειδική και προκαλείται από την εμφάνιση αντισωμάτων κατά του τυπικού καψικού πολυσακχαρίτη.

Θεραπεία. Η βάση της θεραπείας για τη λοίμωξη από πνευμονιόκοκκο είναι τα αντιβιοτικά - πενικιλλίνη, τετρακυκλίνη, χλωραμφενικόλη, βανκομυκίνη, ριφαμπικίνη, κεφτριαξόνη.

Πρόληψη. Η μη ειδική πρόληψη των πνευμονιοκοκκικών λοιμώξεων στοχεύει στον εντοπισμό ασθενών και φορέων με την επακόλουθη θεραπεία τους. Για ειδική πρόληψη της λοίμωξης, παιδιά άνω των δύο ετών, ενήλικες σε κίνδυνο, καθώς και υγιή άτομα κατά τη διάρκεια εκδήλωσης της νόσου εμβολιάζονται με το πολυδύναμο πολυσακχαριδικό εμβόλιο «Pneumovex 23». Το φάρμακο περιέχει 23 καψικά πολυσακχαριδικά αντιγόνα των πνευμονιόκοκκων (1, 2, 3, 4, 5, 6B 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A,2F, , 22F, 23F, 33F). Αντιγόνα

Οι πνευμονιόκοκκοι ελήφθησαν από το 90% των στελεχών που απομονώθηκαν από το αίμα ασθενών με διεισδυτική πνευμονιοκοκκική λοίμωξη στις ΗΠΑ και αντιστοιχούν στα στελέχη που βρέθηκαν στη Ρωσία. Η ανοσοποίηση πραγματοποιείται δύο φορές με μεσοδιάστημα 5-8 ετών.

Μετά τον εμβολιασμό δημιουργείται τεχνητή, ενεργή, τυποειδική ανοσία.

Εργαστηριακή διάγνωση. Το «χρυσό πρότυπο» είναι η απομόνωση παθογόνων. Θα πρέπει να θυμόμαστε ότι το υλικό πρέπει να εξεταστεί γρήγορα, γιατί Τα βακτήρια είναι επιρρεπή σε ταχεία αυτόλυση λόγω της δραστηριότητας των ενδοκυτταρικών ενζύμων. Το υλικό για τη μελέτη είναι πτύελα, υπεζωκοτική συλλογή και άλλα εκκρίματα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, αίμα, βλέννα από τη μύτη και το φάρυγγα, έκκριμα από έλκη στα μάτια, έκκριμα από το αυτί, ούρα, κομμάτια οργάνων (σε περίπτωση θανάτου του ασθενούς) . Μια απάντηση σήματος σε πνευμονιοκοκκική λοίμωξη μπορεί να εκδοθεί όταν ανιχνευθούν ουδετερόφιλα και θετικοί κατά Gram λογχοειδή διπλόκοκκοι (τουλάχιστον 10 ανά οπτικό πεδίο) σε επιχρίσματα πτυέλων. Διαφορετικά, καταφεύγουν στην απομόνωση του παθογόνου.

Το πρώτο στάδιο της μελέτης.Το παθολογικό υλικό υποβάλλεται σε προκαταρκτική βακτηριοσκόπηση (εκτός αίματος). Τα πτύελα τοποθετούνται σε αποστειρωμένο τρυβλίο Petri, πλένονται, ένα πυώδες βλεννώδες κομμάτι συλλαμβάνεται με βρόχο, αλέθεται σε γυάλινη πλάκα, ξηραίνεται και βάφεται με χρώση Gram. Το επίχρισμα αποκαλύπτει θετικούς κατά Gram κόκκους σε σχήμα νυστέρι ή οβάλ που περιβάλλονται από κάψουλα (σχηματισμός κάψουλας παρατηρείται μόνο σε πνευμονιόκοκκους που έχουν απομονωθεί από άρρωστα και μολυσμένα ζώα). Η ανίχνευση των πνευμονιοκοκκικών καψουλών μπορεί να πραγματοποιηθεί χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Burri-Gins. Ο εμβολιασμός του παθολογικού υλικού πραγματοποιείται σε 5-10% άγαρ αίματος ή ορού και σε μέσο εμπλουτισμού (8-10% ζωμό ορού γάλακτος). Εάν υπάρχει υποψία σήψης πνευμονιοκοκκικής φύσης, 5-10 ml αίματος του ασθενούς εμβολιάζονται σε 45-90 ml ζωμού ορού γάλακτος. Το εγκεφαλονωτιαίο υγρό, εάν είναι διαυγές, φυγοκεντρείται και μερικές σταγόνες από το ίζημα εμβολιάζονται σε θρεπτικά μέσα. Ως μέσο εμπλουτισμού χρησιμοποιείται ημιστερεό άγαρ ορού γάλακτος. Οι καλλιέργειες επωάζονται στους 37 °C για 24 ώρες. Η καλύτερη μέθοδος για την απομόνωση μιας καθαρής καλλιέργειας πνευμονιόκοκκων είναι η μόλυνση λευκών ποντικών με παθολογικό υλικό. Τα πτύελα, πλυμένα σε τρυβλίο Petri με αποστειρωμένο φυσιολογικό ορό, αλέθονται σε αποστειρωμένο γουδί με αποστειρωμένο γουδοχέρι ή σπασμένο γυαλί ενώ προσθέτουμε φυσιολογικό ορό σε αναλογία 1:2-1:5. Το εναιώρημα κατακάθεται, το υπερκείμενο υγρό σε ποσότητα 0,5-1 ml χορηγείται ενδοπεριτοναϊκά σε λευκά ποντίκια. Εάν υπάρχουν πνευμονιόκοκκοι στο υλικό, τα ποντίκια πεθαίνουν μέσα σε 72 ώρες. Τυπικοί πνευμονιόκοκκοι βρίσκονται σε επιχρίσματα από όργανα και αίμα. Τα όργανα και το αίμα καλλιεργούνται επίσης σε ζωμό ορού γάλακτος και σε τρυβλία Petri με αίμα ή άγαρ ορού.

Δεύτερο στάδιο της μελέτης.Μελετάται το μοτίβο ανάπτυξης σε θρεπτικά μέσα. Στο άγαρ αίματος, οι αποικίες των πνευμονόκοκκων είναι μικρές, στρογγυλές, με λείες

άκρες, τρυφερές, που περιβάλλονται από μια ζώνη πρασίνισης του μέσου (που θυμίζει πολύ την ανάπτυξη των στρεπτόκοκκων viridans). Στο άγαρ ορού, οι αποικίες είναι ευαίσθητες, ημιδιαφανείς και διαφανείς. Κατά τη βακτηριοσκόπηση επιχρισμάτων βαμμένων με Gram. Ανιχνεύονται θετικοί κατά Gram διπλόκοκκοι χωρίς κάψουλες. Μετά τη βακτηριοσκόπηση, οι αποικίες για τις οποίες υπάρχει υποψία για πνευμονιόκοκκο υποκαλλιεργούνται σε λοξό ορό ή αιματογενή άγαρ ή σε ζωμό ορού γάλακτος. Κατά τη μικροσκόπηση των επιχρισμάτων από το μέσο εμπλουτισμού, μαζί με διάφορες μικροχλωρίδες, μπορούν να ανιχνευθούν θετικοί κατά gram κόκκοι, διατεταγμένοι σε ζεύγη ή κοντές αλυσίδες. Το υλικό από το μέσο εμπλουτισμού μεταφέρεται σε στερεά θρεπτικά μέσα. Οι καλλιέργειες επωάζονται στους 37°C για 24 ώρες.

Το τρίτο στάδιο της μελέτης.Στις κεκλιμένες πλευρές του αιματού άγαρ, οι πνευμονιόκοκκοι σχηματίζουν μια λεπτή, λεπτή, ημιδιαφανή επικάλυψη. Στο ζωμό ορού γάλακτος, οι πνευμονιόκοκκοι προκαλούν θολότητα και ένα ελαφρύ ίζημα. Σε επιχρίσματα από στερεά μέσα καλλιέργειας, οι πνευμονιόκοκκοι μπορεί να έχουν διαφορετική εμφάνιση. Μαζί με διπλόκοκκους επιμήκους σχήματος με μυτερά εξωτερικά άκρα, που θυμίζουν φλόγα κεριού, υπάρχουν κύτταρα κανονικού οβάλ και στρογγυλού σχήματος. Στην καλλιέργεια ζωμού, οι πνευμονιόκοκκοι είναι συχνά διατεταγμένοι σε αλυσίδες. Με βάση τις μορφολογικές και πολιτισμικές ιδιότητες των πνευμονόκοκκων, είναι δύσκολο να γίνει διάκριση από τους στρεπτόκοκκους viridans, επομένως έχει προταθεί ένα σύνολο ειδικών δοκιμών για τη διαφοροποίησή τους:

Διαλυτότητα στη χολή (δοκιμή δεοξυχολικών).

Ικανότητα αποσύνθεσης ινουλίνης.

Ευαισθησία στην οπτοχίνη.

Αντίδραση συγκόλλησης με συγκεκριμένους αντιπνευμονιοκοκκικούς ορούς.

Η ικανότητα αποσύνθεσης γλυκόζης, μαλτόζης, σακχαρόζης, λακτόζης, μαννιτόλης, σορβιτόλης και σαλικίνης.

Οι πιο προσιτές μέθοδοι για τη διαφοροποίηση των πνευμονιόκοκκων από άλλους στρεπτόκοκκους είναι μια δοκιμή με οπτοχίνη (αναστέλλει την ανάπτυξή τους). Διακρίνονται από τους στρεπτόκοκκους viridans από την ικανότητά τους να ζυμώνουν την ινουλίνη, καθώς και από την ευαισθησία τους στη χολή.

Δοκιμή δεοξυχολικού. Μετά από προκαταρκτική βακτηριοσκόπηση, 10 σταγόνες απομονωμένης καθαρής καλλιέργειας (κατά προτίμηση ζωμός) προστίθενται σε δοκιμαστικό σωλήνα με 5 σταγόνες αποστειρωμένης χολής βοοειδών. Ο έλεγχος είναι μια καλλιέργεια που προστίθεται σε δοκιμαστικό σωλήνα με 5 σταγόνες αλατούχου διαλύματος. Μετά από 30-60 λεπτά επώασης στους 37 °C, παρατηρείται πλήρης λύση της καλλιέργειας με τη μορφή καθαρισμού στο δοκιμαστικό σωλήνα με χολή· στον σωλήνα ελέγχου το μείγμα παραμένει θολό. Θα πρέπει να θυμόμαστε ότι οι μη λοιμώδεις καλλιέργειες πνευμονιόκοκκου είναι ανθεκτικές στη χολή.

Η αντοχή στη χολή μπορεί επίσης να ελεγχθεί με καλλιέργεια σε ζωμό χολής 10%. Το υλικό δοκιμής προστίθεται στο μέσο και ο ζωμός γίνεται θολό. Μετά από 24 ώρες επώασης στους 37 °C, η παρουσία πνευμονιόκοκκων θα υποδειχθεί με καθαρισμό του ζωμού ως αποτέλεσμα λύσης βακτηρίων.

Μπορείτε επίσης να χρησιμοποιήσετε δίσκους εμποτισμένους σε διάλυμα χολής 20%. Οι δίσκοι τοποθετούνται στην αναπτυσσόμενη καλλιέργεια σε ένα τρυβλίο και επωάζονται για 1-2 ώρες στους 37 °C. Παρουσία πνευμονιόκοκκων, οι αποικίες λύονται γύρω από τον δίσκο σε απόσταση 1-2 mm.

Δοκιμή για ινουλίνη. Η πνευμονιοκοκκική καλλιέργεια ενοφθαλμίζεται σε ένα μέσο με ινουλίνη. Για να γίνει αυτό, προσθέστε 200 ml αποστειρωμένου απεσταγμένου νερού, 18 ml βάμματος λακκούβας και 3 g ινουλίνης σε 100 ml βόειου ορού που έχει θερμανθεί στους 56 °C για 30 λεπτά και αποστειρώστε με τρεχούμενο ατμό για 30 λεπτά. Οι καλλιέργειες επωάζονται στους 37 °C για 24 ώρες. Ο πνευμονιόκοκκος αποσυνθέτει την ινουλίνη, με αποτέλεσμα το μέσο να γίνει κόκκινο. Ο στρεπτόκοκκος Viridans δεν προκαλεί ερυθρότητα του περιβάλλοντος.

Δοκιμή με οπτοχίνη. Η δοκιμαστική πνευμονιοκοκκική καλλιέργεια εμβολιάζεται σε ζωμό ορού γάλακτος με οπτοχίνη σε αραίωση 1:100.000 ή 1:200.000. Ο πνευμονιόκοκκος δεν αναπτύσσεται σε τέτοιο μέσο. Μπορείτε επίσης να προσδιορίσετε την ευαισθησία στην οπτοχίνη τοποθετώντας σε επιμετάλλωση σε 10% αιματολογικό άγαρ που περιέχει οπτοχίνη σε αραίωση 1:50.000. Ο έλεγχος είναι ο εμβολιασμός της καλλιέργειας σε άγαρ αίματος. Οι πνευμονιόκοκκοι δεν αναπτύσσονται στο μέσο με οπτοχίνη· η ανάπτυξη πνευμονόκοκκων παρατηρείται στο μέσο ελέγχου. Μπορείτε να χρησιμοποιήσετε δίσκους εμποτισμένους σε 6 μg οπτοχίνης, οι οποίοι εφαρμόζονται στην επιφάνεια του μέσου μετά τον ενοφθαλμισμό. Στους πνευμονιόκοκκους, γύρω από τον δίσκο σχηματίζεται μια ζώνη αναστολής ανάπτυξης διαμέτρου τουλάχιστον 18 mm.

Τεστ μολυσματικότητας. Μια καθημερινή καλλιέργεια πνευμονιόκοκκου που αναπτύσσεται σε ζωμό ορού γάλακτος αραιώνεται με 1% αποστειρωμένο νερό πεπτόνης (pH - 7,6) ή ελαφρώς αλκαλικό ζωμό μέχρι 1:10. Η αραιωμένη καλλιέργεια χορηγείται ενδοπεριτοναϊκά σε λευκά ποντίκια βάρους 16-20 g σε όγκο 0,5 ml και παρατηρείται για 72 ώρες. Τα όργανα ενός νεκρού ποντικού εμβολιάζονται σε θρεπτικά μέσα και τα επιχρίσματα δακτυλικών αποτυπωμάτων εξετάζονται μικροσκοπικά. Οι καλλιέργειες υψηλής μολυσματικής δράσης περιλαμβάνουν πνευμονιόκοκκους, οι οποίοι προκαλούν το θάνατο ποντικών μετά την εισαγωγή μιας καλλιέργειας σε αραίωση 1:10. Οι μη λοιμώδεις καλλιέργειες δεν προκαλούν θάνατο σε ποντίκια.

Οροτυποποίηση πνευμονιόκοκκων. Η καλλιέργεια 18 ωρών ελέγχεται στην αντίδραση μικροσυγκόλλησης Sabin. 4 σταγόνες πνευμονιοκοκκικής καλλιέργειας εφαρμόζονται σε μια γυάλινη πλάκα. Σε 1 σταγόνα προσθέστε μια σταγόνα αντιπνευμονιοκοκκικού ορού τύπου 1, στον 2ο - ορό τύπου II, στην 3η - ορό - 111, στην 4η - μια σταγόνα φυσιολογικού ορού. Τα μείγματα σε γυαλί αναμιγνύονται με βρόχο και εξετάζονται κάτω από μεγεθυντικό φακό ή μικροσκόπιο σε χαμηλή μεγέθυνση. Σε θετική περίπτωση, η συγκόλληση παρατηρείται σε μία από τις τρεις πρώτες σταγόνες. Ο τύπος του πνευμονιόκοκκου προσδιορίζεται με μια αντίδραση συγκόλλησης με συγκεκριμένους ορούς συγκόλλησης των τριών πρώτων σταθερών τύπων. Οι καλλιέργειες που δεν συγκολλούνται από αυτούς τους τύπους ορών ταξινομούνται ως Χ-ομάδα. Η αντίδραση ρυθμίζεται ως εξής. Ρίξτε 0,5 ml καλλιέργειας ζωμού 18 ωρών σε δοκιμαστικούς σωλήνες. Στη συνέχεια προστίθεται ίσος όγκος ορού, αραιωμένος με φυσιολογικό ορό σε αναλογία 1:5. Οι έλεγχοι είναι 2 δοκιμαστικοί σωλήνες, ο ένας από τους οποίους περιέχει τη δοκιμαστική καλλιέργεια αναμεμειγμένη με

κανονικό ορό κουνελιού, και το άλλο - μόνο η καλλιέργεια δοκιμής. Τα περιεχόμενα των σωλήνων ανακινούνται καλά και τοποθετούνται σε θερμοστάτη στους 37 °C για 2 ώρες, μετά την οποία πραγματοποιείται ένας προκαταρκτικός υπολογισμός της αντίδρασης. Τα τελικά αποτελέσματα σημειώνονται μετά από επιπλέον αποθήκευση σε θερμοκρασία δωματίου για 20 ώρες. Η συγκόλληση αξιολογείται ως τέσσερα πλεονεκτήματα εάν τα περιεχόμενα των σωληναρίων έχουν καθαριστεί πλήρως και η καλλιέργεια συγκόλλησης είναι ένα πυκνό φιλμ που δεν σπάει όταν ανακινείται. τρία πλεονεκτήματα εάν, όταν το περιεχόμενο του σωλήνα καθαριστεί πλήρως, η συγκολλητική καλλιέργεια σπάσει εύκολα σε μέρη. δύο πλεονεκτήματα - εάν δεν συμβεί καθαρισμός, τα σωματίδια της συγκολλημένης καλλιέργειας είναι καθαρά ορατά με γυμνό μάτι στο θολό περιεχόμενο του δοκιμαστικού σωλήνα. με συγκόλληση για ένα συν, ένα λεπτόκοκκο μείγμα κολλημένου πνευμονιόκοκκου βρίσκεται στον δοκιμαστικό σωλήνα. Σε περίπτωση αρνητικής αντίδρασης ορατής στο μάτι, δεν παρατηρείται συγκόλληση.

Το περιεχόμενο των δοκιμαστικών σωλήνων μετά την ανακίνηση είναι ομοιόμορφα θολό.

Ο τύπος των πνευμονιόκοκκων της ομάδας Χ πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας ομάδα

ορούς που περιέχουν ένα μείγμα τυπικών ορών συγκόλλησης που λαμβάνονται

σε ίσους όγκους. Προετοιμάστε τους ακόλουθους ορούς ομάδας από

ανάμιξη ίσων όγκων μη αραιωμένου τυπικού διαγνωστικού

οροί (Lund, I960):

A -1, II, IV, V, XVIII οροί.

B - VI, VIII, XIX ορόοι.

C - VII, XX. XXIV, XXXI, XL οροί.

Δ - IX, XI, XVI, XXXVI. Οροί XXXVII;

Ε - Χ, ΧΧΙ. Οροί XXXIII, XXXIX.

F - XII. XVII. Οροί XXII, XXXVII, XXXII, XLI.

G - XIII, XXV. Οροί XXIX, XXXIV, XXXV, XXXVIII, XLII, XLVII.

J - XLIII. Ορομετρητές XLIV, XLV, XLVI.

Ο ορός συγκόλλησης τύπου III χρησιμοποιείται από μόνος του (χωρίς ανάμειξη με άλλους τυπικούς ορούς) λόγω της δυσκολίας λήψης του σε επαρκώς υψηλό τίτλο. Η τυποποίηση πραγματοποιείται σε δύο στάδια: πρώτα με τη βοήθεια ομαδικών ορών και στη συνέχεια με μεμονωμένους ορούς της ομάδας με την οποία ελήφθη θετική αντίδραση. Ο ορότυπος των πνευμονιόκοκκων χρησιμοποιείται κυρίως για επιδημιολογικές μελέτες των αποτελεσμάτων ειδικής οροθεραπείας και οροπροφύλαξης.

Η μικροσυγκόλληση των πνευμονιόκοκκων με τη χρήση της μεθόδου Sabin μπορεί να επιτευχθεί με ανάμειξη αντιπνευμονιοκοκκικών ορών με εξίδρωμα από την κοιλιακή κοιλότητα ενός ποντικού που έχει μολυνθεί με τα πτύελα ενός ασθενούς. Ήδη τέσσερις ώρες μετά τη μόλυνση, ανιχνεύεται καθαρή καλλιέργεια πνευμονιόκοκκου στο εξίδρωμα, δίνοντας θετική συγκόλληση Sabin.

Επιταχυνόμενες μέθοδοι ανίχνευσης και τυποποίησης πνευμονιόκοκκων. 1. Η μέθοδος Neufeld ή το φαινόμενο της διόγκωσης της πνευμονιοκοκκικής κάψας. Ένα κομμάτι φρεσκοεκκριθέντων πτυέλων του ασθενούς εφαρμόζεται σε τρία

καλυπτρίδες, σε καθένα από αυτά προσθέστε μια σταγόνα μη αραιωμένου ειδικού αντιπνευμονιοκοκκικού ορού (τύποι 1, II, III) και μια σταγόνα Loeffler's blue. Οι σταγόνες αναμειγνύονται καλά και καλύπτονται με μια γυάλινη πλάκα με ένα καλά αλειμμένο γύρω από τις άκρες με βαζελίνη. Μετά από δύο λεπτά, οι κρεμαστές σταγόνες εξετάζονται σε μικροσκόπιο με σύστημα εμβάπτισης. Σε μια θετική περίπτωση, είναι ορατή μια απότομη αύξηση στις πνευμονιοκοκκικές κάψουλες. Εάν το αποτέλεσμα είναι αρνητικό, οι κάψουλες δεν εκτιμώνται σχεδόν καθόλου. Η αντίδραση διόγκωσης είναι ειδική και δεν δίνει θετικό αποτέλεσμα με άλλα καψικά βακτήρια. Δεν το χρησιμοποιώ για την εξέταση των πτυέλων από ασθενείς που λαμβάνουν θεραπεία με σουλφοναμίδια και αντιβιοτικά, επειδή Στην περίπτωση αυτή, μπορούν να απομονωθούν μη καψικοί πνευμονιόκοκκοι.

2. Μέθοδος καθίζησης. 5-10 ml πτυέλων βράζονται σε υδατόλουτρο μέχρι να δημιουργηθεί ένας πυκνός θρόμβος. Ο θρόμβος αλέθεται και προστίθεται μικρή ποσότητα φυσιολογικού ορού και βράζεται ξανά για αρκετά λεπτά για να εξαχθεί ο συγκεκριμένος πολυσακχαρίτης από τους πνευμονιόκοκκους. Το εναιώρημα φυγοκεντρείται και πραγματοποιείται αντίδραση κατακρήμνισης δακτυλίου με το προκύπτον διαυγές υγρό και συγκεκριμένους τυπικούς ορούς σε σωλήνες καθίζησης. Η εμφάνιση ενός δακτυλίου στη διεπιφάνεια μεταξύ των υγρών υποδηλώνει θετικό αποτέλεσμα.

3. Προσδιορισμός πνευμονιοκοκκικών καψουλών κατά Burri. Μια σταγόνα του υλικού δοκιμής και μια σταγόνα μελάνης εφαρμόζονται στο άκρο της αντικειμενοφόρου πλάκας. Το μείγμα αναμειγνύεται και γίνεται ένα επίχρισμα, ξηραίνεται στον αέρα και, χωρίς στερέωση, εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Το υπόβαθρο του παρασκευάσματος είναι σκούρο καπνό· τα μικροβιακά σώματα και οι κάψουλές τους δεν λεκιάζονται. Το παρασκεύασμα που παρασκευάζεται σύμφωνα με το Burri μπορεί να στερεωθεί με το μείγμα του Nikiforov, να ξεπλυθεί με νερό και να χρωματιστεί με Ziel fuchsin αραιωμένο 1:3 για 3-5 λεπτά. Στο σκούρο φόντο του επιχρίσματος ξεχωρίζουν άβαφες κάψουλες, στο εσωτερικό των οποίων υπάρχουν βακτήρια φωτεινού βυσσινί χρώματος (μέθοδος Hins).

Οστρακιάπροκαλούν διάφορους ορότυπους βήτα-αιμολυτικού στρεπτόκοκκου που έχουν Μ-αντιγόνο και παράγουν ερυθρογενίνη (τοξιγονικοί στρεπτόκοκκοι της οροομάδας Α) - (Streptococcus pyogenes). Ελλείψει αντιτοξικής ανοσίας, εμφανίζεται οστρακιά και παρουσία πονόλαιμου.

Κλινική εικόνα

 Μέθη - πυρετός, γενική κακουχία, πονοκέφαλοι.

 Το εξάνθημα με οστρακιά είναι ακριβές, με μέτρια πίεση με γυάλινη σπάτουλα οι κηλίδες είναι πιο ευδιάκριτες. Όταν πιέζεται περισσότερο, το εξάνθημα δίνει τη θέση του σε μια χρυσοκίτρινη απόχρωση στο δέρμα. Εμφανίζεται τις ημέρες 1-3 της νόσου και εντοπίζεται κυρίως στα μάγουλα, στη βουβωνική χώρα και στα πλευρά του σώματος. Το δέρμα του ρινοχειλικού τριγώνου παραμένει χλωμό και απαλλαγμένο από εξανθήματα. Το εξάνθημα διαρκεί συνήθως 3-7 ημέρες, στη συνέχεια εξαφανίζεται, χωρίς να αφήνει μελάγχρωση. Το εξάνθημα πυκνώνει στις κάμψεις των άκρων - μασχαλιαίες, αγκώνες, ιγνυακές περιοχές.

 Κόκκινη γλώσσα - τη 2-4η ημέρα της ασθένειας, η γλώσσα του ασθενούς γίνεται ευδιάκριτα κοκκώδης, σε έντονο κόκκινο χρώμα, η λεγόμενη γλώσσα «βατόμουρου».

 Ο πονόλαιμος είναι μόνιμο σύμπτωμα της οστρακιάς. Μπορεί να είναι πιο σοβαρός από τον συνηθισμένο πονόλαιμο.

 Απολέπιση του δέρματος - εμφανίζεται μετά την εξαφάνιση του εξανθήματος (14 ημέρες από την έναρξη της νόσου): στην περιοχή των παλάμες και τα πόδια είναι μεγάλη, ξεκινώντας από τις άκρες των δακτύλων. Υπάρχει ξεφλούδισμα που μοιάζει με πιτυρίαση στο σώμα, το λαιμό και τα αυτιά.

Πνευμονιόκοκκοι, ταξινόμηση. Ιδιότητες. Ορολογικές ομάδες. Διακριτικά χαρακτηριστικά από άλλους στρεπτόκοκκους. Προκαλούμενες ασθένειες. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης.

Μορφολογία και βιολογικές ιδιότητες. Οι πνευμονιόκοκκοι (Streptococcus pneumoniae) είναι ωοειδείς, ελαφρώς επιμήκεις, λογχοειδής κόκκοι διατεταγμένοι σε ζευγάρια, που μοιάζουν με φλόγα κεριού. Μπορούν επίσης να βρίσκονται σε κοντές αλυσίδες, που μοιάζουν με στρεπτόκοκκους. Κινητό, δεν σχηματίζει σπόρια, gram-θετικά.
Αναπτύσσονται σε μέσα με προσθήκη πρωτεΐνης: αίμα, ορό και ασκητικό υγρό. Στο άγαρ αίματος, οι αποικίες των πνευμονιόκοκκων είναι μικρές, μοιάζουν με σταγόνες δροσιάς, διαφανείς στο μεταδιδόμενο φως, με συμπιεσμένο κέντρο, που περιβάλλεται από μια ζώνη ατελούς αιμόλυσης, πρασινωπό χρώμα, παρόμοια με τις αποικίες του στρεπτόκοκκου viridans. Σε υγρά μέσα παράγουν μια ελαφρά θολότητα, μερικές φορές σχηματίζοντας ένα ίζημα. Βιοχημικά είναι αρκετά ενεργά: αποσυνθέτουν τη γλυκόζη, τη λακτόζη, τη μαλτόζη, την ινουλίνη και άλλους υδατάνθρακες για να σχηματίσουν οξύ, δεν υγροποιούν τη ζελατίνη και δεν σχηματίζουν ινδόλη. Η διάσπαση της ινουλίνης είναι ένα διαφορικό διαγνωστικό χαρακτηριστικό που βοηθά στη διάκριση του πνευμονιόκοκκου από τους στρεπτόκοκκους, οι οποίοι δεν αποικοδομούν την ινουλίνη. Ένα σημαντικό χαρακτηριστικό γνώρισμα είναι η ικανότητα των πνευμονόκοκκων να διαλύονται στη χολή, ενώ οι στρεπτόκοκκοι διατηρούνται καλά σε αυτήν.

Παθογένεια και κλινική. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι οι αιτιολογικοί παράγοντες της λοβιακής πνευμονίας στον άνθρωπο. Μπορούν επίσης να προκαλέσουν έρποντα έλκη κερατοειδούς, καταρροή της ανώτερης αναπνευστικής οδού, μηνιγγίτιδα, ενδοκαρδίτιδα, βλάβες στις αρθρώσεις και άλλες ασθένειες.

Μετά από μια ασθένεια, η ανοσία είναι χαμηλής έντασης, βραχυπρόθεσμης και συγκεκριμένης τύπου.
Μικροβιολογική διάγνωση. Τα υλικά για τη μελέτη είναι τα πτύελα, το αίμα, το στυλεό λαιμού και το εγκεφαλονωτιαίο υγρό. Λόγω του γεγονότος ότι ο πνευμονιόκοκκος πεθαίνει γρήγορα, το παθολογικό υλικό πρέπει να παραδοθεί στο εργαστήριο για εξέταση το συντομότερο δυνατό.

Μηνιγγιτιδόκοκκοι. Ταξονομία, ιδιότητες. Αντιγονική δομή μηνιγγιτιδόκοκκων, ταξινόμηση. Παθογένεια μηνιγγιτιδοκοκκικής λοίμωξης, κλινικές εκδηλώσεις. Αρχές και μέθοδοι μικροβιολογικής διάγνωσης. Διαφοροποίηση του αιτιολογικού παράγοντα της μηνιγγιτιδοκοκκικής λοίμωξης και άλλων μηνιγγιτιδόκοκκων. Ειδική πρόληψη.

N.meningitidis (μηνιγγιτιδόκοκκοι).

Ο μηνιγγιτιδόκοκκος είναι ο αιτιολογικός παράγοντας της μηνιγγιτιδοκοκκικής λοίμωξης - αυστηρής ανθρωπόπτωσης με αερομεταφερόμενη μετάδοση του παθογόνου. Η κύρια πηγή είναι τα μέσα ενημέρωσης. Η φυσική δεξαμενή είναι ο ανθρώπινος ρινοφάρυγγας. Μορφολογικές, πολιτιστικές και βιοχημικές ιδιότητες είναι παρόμοιες με τον γονόκοκκο. Διαφορές - ζυμώνουν όχι μόνο τη γλυκόζη, αλλά και τη μαλτόζη και παράγουν αιμολυσίνη.Έχουν μια κάψουλα που είναι μεγαλύτερη σε μέγεθος και έχει διαφορετική δομή από αυτή του γονόκοκκου.

Αντιγονική σύνθεση.Έχουν τέσσερα κύρια αντιγονικά συστήματα.

1. Αντιγόνα πολυσακχαριτών ειδικών για την καψική ομάδα. Τα στελέχη της οροομάδας Α προκαλούν συχνότερα επιδημικά ξεσπάσματα.

2. Πρωτεϊνικά αντιγόνα της εξωτερικής μεμβράνης. Με βάση αυτά τα αντιγόνα, οι μηνιγγιτιδόκοκκοι των οροομάδων Β και Γ χωρίζονται σε τάξεις και ορότυπους.

3. Αντιγόνα ειδικά για το γένος και το είδος.

4. Λιποπολυσακχαριτικά αντιγόνα (8 τύποι). Έχουν υψηλή τοξικότητα και προκαλούν πυρετογόνα αποτελέσματα.

Παράγοντες παθογένειας.Παράγοντες προσκόλλησης και αποικισμός - πυλώνες και πρωτεΐνες εξωτερικής μεμβράνης. Παράγοντες εισβολής είναι η υαλουρονιδάση και άλλα παραγόμενα ένζυμα (νεουραμινιδάση, πρωτεάσες, ινωδολυσίνη). Τα καψικά πολυσακχαριδικά αντιγόνα που προστατεύουν τους μικροοργανισμούς από τη φαγοκυττάρωση έχουν μεγάλη σημασία.

Ασυλία, ανοσίαανθεκτικό, αντιμικροβιακό.

Εργαστηριακή διάγνωσημε βάση τη βακτηριοσκόπηση, την απομόνωση καλλιέργειας και τη βιοχημική ταυτοποίησή της, ορολογικές διαγνωστικές μεθόδους. Το υλικό ενοφθαλμίζεται σε στερεά και ημι-υγρά θρεπτικά μέσα που περιέχουν αίμα, ασκιτικό υγρό και ορό αίματος.

Οι θετικές στην οξειδάση καλλιέργειες θεωρούνται ότι ανήκουν στο γένος Neisseria. Ο μηνιγγιτιδόκοκκος χαρακτηρίζεται από ζύμωση γλυκόζης και μαλτόζης. Το ότι ανήκει σε μια οροομάδα προσδιορίζεται με μια δοκιμή συγκόλλησης (RA).

Γονοκόκκοι. Ταξινόμηση, ιδιότητες. Παθογένεση γονοκοκκικής λοίμωξης, χαρακτηριστικά ανοσίας. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης οξείας και χρόνιας γονόρροιας, βλενόρροιας. RSK Bordet-Gengou, σκοπός, μηχανισμός, λογιστική αντίδρασης. Πρόληψη της βλενόρροιας στα νεογνά. Πρόληψη και θεραπεία γονόρροιας. Ειδική θεραπεία.

N.gonorrheae (γονόκοκκος).

Ο γονόκοκκος είναι ο αιτιολογικός παράγοντας της γονόρροιας, μιας σεξουαλικά μεταδιδόμενης ασθένειας με φλεγμονώδεις εκδηλώσεις στο ουρογεννητικό σύστημα. Το υπόστρωμα για τον αποικισμό είναι το επιθήλιο της ουρήθρας, του ορθού, του επιπεφυκότα του οφθαλμού, του φάρυγγα, του τραχήλου της μήτρας, των σαλπίγγων και της ωοθήκης.

Οι διπλόκοκκοι, που βάφονται εύκολα με μπλε του μεθυλενίου και άλλες βαφές ανιλίνης, είναι πλειόμορφοι (πολυμορφισμός). Είναι πολύ επιλεκτικοί όσον αφορά τις συνθήκες καλλιέργειας και τα θρεπτικά μέσα. Από τους υδατάνθρακες ζυμώνεται μόνο η γλυκόζη.

Αντιγονική δομήπολύ μεταβλητή - χαρακτηρίζεται από διακυμάνσεις φάσης (εξαφάνιση αντιγονικών καθοριστικών παραγόντων) και αντιγονικές παραλλαγές (αλλαγές στους αντιγονικούς καθοριστικούς παράγοντες).

Παράγοντες παθογένειας.Οι κύριοι παράγοντες είναι έπινε, με τη βοήθεια των οποίων οι γονόκοκκοι πραγματοποιούν προσκόλληση και αποικισμό των επιθηλιακών κυττάρων της βλεννογόνου μεμβράνης του ουρογεννητικού συστήματος και λιποπολυσακχαρίτης(ενδοτοξίνη που απελευθερώνεται όταν οι γονόκοκκοι καταστρέφονται). Οι γονόκοκκοι συνθέτουν πρωτεάση IgAI, η οποία διασπά την IgA.

Εργαστηριακή διάγνωση.Η βακτηριοσκοπική διάγνωση περιλαμβάνει χρώση Gram και μπλε του μεθυλενίου. Τυπικά σημεία του γονόκοκκου είναι η gram-αρνητική χρώση, οι διπλόκοκκοι σε σχήμα φασολιού, ο ενδοκυτταρικός εντοπισμός.

Ο εμβολιασμός πραγματοποιείται σε ειδικά μέσα (KDS-MPA από κρέας κουνελιού ή καρδιά βοοειδών με ορό, ασκίτη-άγαρ, άγαρ αίματος).

Αιτιακοί παράγοντες αναερόβιας μόλυνσης από αέρια. Ταξονομία. Ιδιότητες. Χαρακτηριστικά των τοξινών. Παθογένεση, κλινικές μορφές. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης, φάρμακα ειδικής πρόληψης και θεραπείας.

Η αέρια γάγγραινα είναι μια αναερόβια πολυκλωστριδιακή (δηλαδή που προκαλείται από διάφορους τύπους κλωστριδίων) τραύμα (τραυματική) λοίμωξη. Η κύρια σημασία είναι το C.perfringens, λιγότερο συχνά - το C.novyi, καθώς και άλλοι τύποι κλωστριδίων σε επίμονες συσχετίσεις μεταξύ τους, αερόβιοι πυογόνοι κόκκοι και σήψη αναερόβια βακτήρια.

Το C.perfringens είναι κανονικός κάτοικος των εντέρων των ανθρώπων και των ζώων· εισέρχεται στο έδαφος με τα κόπρανα. Είναι ένας αιτιολογικός παράγοντας μόλυνσης του τραύματος - προκαλεί ασθένεια όταν το παθογόνο εισέρχεται στις πληγές υπό αναερόβιες συνθήκες. Είναι ιδιαίτερα επεμβατικό και τοξικογόνο. Η επεμβατικότητα σχετίζεται με την παραγωγή υαλουρονιδάσης και άλλων ενζύμων που έχουν καταστροφική επίδραση στους μυς και στο συνδετικό ιστό. Κύριος παράγοντας παθογένειας - εξωτοξίνη, το οποίο έχει αιμο-, νεκρο-, νευρο-, λευκοτοξικές και θανατηφόρες επιδράσεις. Σύμφωνα με την αντιγονική ειδικότητα των εξωτοξινών, απομονώνονται ορότυπουςπαθογόνο. Μαζί με την αέρια γάγγραινα, το C. perfringens προκαλεί τροφιμογενείς τοξικές λοιμώξεις (βασίζονται στη δράση των εντεροτοξινών και των νεκροτοξινών).

Χαρακτηριστικά της παθογένειας.Σε αντίθεση με τις πυώδεις ασθένειες που προκαλούνται από αερόβια, με αναερόβια μόλυνση δεν κυριαρχεί η φλεγμονή, αλλά νέκρωση, οίδημα, σχηματισμός αερίων στους ιστούς, δηλητηρίαση με τοξίνες και προϊόντα διάσπασης ιστών.

Ασυλία, ανοσία- κυρίως αντιτοξικό.

Εργαστηριακή διάγνωσηπεριλαμβάνει βακτηριοσκόπηση της έκκρισης του τραύματος, απομόνωση και ταυτοποίηση του παθογόνου, ανίχνευση και ταυτοποίηση της τοξίνης σε βιολογικά δείγματα χρησιμοποιώντας αντίδραση εξουδετέρωσης με ειδικά αντιτοξικά αντισώματα.

Πρόληψη και θεραπεία.Η βάση για την πρόληψη της αέριας γάγγραινας είναι η έγκαιρη και σωστή χειρουργική αντιμετώπιση των πληγών. Σε περίπτωση σοβαρών τραυμάτων, χορηγούνται αντιτοξικοί οροί έναντι των κύριων τύπων κλωστριδίων, 10 χιλιάδες IU έκαστος, για ιατρικούς σκοπούς - 50 χιλιάδες IU.

Clostridia tetanus. Ταξονομία. Ιδιότητες, χαρακτηριστικά τοξινών. Παθογένεια της νόσου. Φθίνουσα τέτανος. Κλινική. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης. Σκοπός της βακτηριολογικής έρευνας, φάρμακα για ειδική πρόληψη και θεραπεία.

Ο τέτανος είναι μια οξεία λοίμωξη του τραύματος που χαρακτηρίζεται από βλάβες νευροτοξίνηκινητικά κύτταρα του νωτιαίου μυελού και του εγκεφάλου, που εκδηλώνεται με τη μορφή σπασμών των γραμμωτών μυών. Οι άνθρωποι και τα ζώα της φάρμας αρρωσταίνουν. Το έδαφος, ιδιαίτερα μολυσμένο με περιττώματα ανθρώπων και ζώων, αποτελεί σταθερή πηγή μόλυνσης από τον τέτανο.

Ο αιτιολογικός παράγοντας είναι το C.tetani - μια μεγάλη γραμ-θετική ράβδος που σχηματίζει σπόρους. Τα σπόρια βρίσκονται τερματικά (τύπος τυμπάνου), και είναι κινητά λόγω μαστιγίων - περιτριχίων. Υποχρεωτικό αναερόβιο. Τα σπόρια είναι πολύ ανθεκτικά.

Αντιγονικές ιδιότητες.Το παθογόνο έχει Ο- και Η-αντιγόνα.

Παράγοντες παθογένειας.Ο κύριος παράγοντας είναι η ισχυρότερη εξωτοξίνη. Υπάρχουν δύο κύρια κλάσματα του: η τετανοσπασμίνη (νευροτοξίνη) και η τετανολυσίνη (αιμολυσίνη). Η νευροτοξίνη εισέρχεται στο κεντρικό νευρικό σύστημα στις περιοχές των μυονευρικών συνάψεων, μεταδίδεται από νευρώνα σε νευρώνα στην περιοχή των συνάψεων, συσσωρεύεται στις κινητικές περιοχές του νωτιαίου μυελού και του εγκεφάλου και εμποδίζει τη συναπτική μετάδοση. Ο θάνατος επέρχεται από παράλυση του αναπνευστικού κέντρου, ασφυξία (βλάβη των μυών του λάρυγγα, του διαφράγματος, των μεσοπλεύριων μυών) ή παράλυση της καρδιάς.

Εργαστηριακή διάγνωση.Η μικροβιολογική διάγνωση περιλαμβάνει βακτηριοσκόπηση πρώτων υλών, καλλιέργεια για την απομόνωση του παθογόνου και την ταυτοποίησή του και ανίχνευση τοξίνης τετάνου.

Η απομόνωση του παθογόνου πραγματοποιείται σύμφωνα με το τυπικό σχήμα για τα αναερόβια, χρησιμοποιώντας διάφορα στερεά και υγρά (μέσο Kitt-Tarozzi) μέσα, ταυτοποίηση με βάση μορφολογικές, πολιτιστικές, βιοχημικές και τοξικογόνες ιδιότητες.

Η απλούστερη και πιο αποτελεσματική μέθοδος μικροβιολογικής διάγνωσης είναι η βιοδοκιμασία σε λευκά ποντίκια. Η μία ομάδα μολύνεται με το υλικό δοκιμής, η δεύτερη (μάρτυρας) - μετά την ανάμειξη των δειγμάτων με αντιτοξικό ορό τετάνου. Παρουσία της τοξίνης του τετάνου, η πειραματική ομάδα των ποντικών πεθαίνει, ενώ η ομάδα ελέγχου παραμένει ζωντανή.

Θεραπεία και πρόληψη έκτακτης ανάγκης.Χρησιμοποιείται ανοσοσφαιρίνη τετάνου (αντιτοξίνη), αντιτοξικός ορός (350 IU/kg), αντιβιοτικά (πενικιλίνες, κεφαλοσπορίνες). Για τη δημιουργία ανοσίας του εμβολίου, χρησιμοποιείται τοξοειδές τετάνου, πιο συχνά ως μέρος των εμβολίων DTP (τοξοειδή τετάνου, διφθερίτιδα και σκοτωμένοι βάκιλοι του κοκκύτη).

αλλαντίαση Clostridium. Ταξονομία. Ιδιότητες. Χαρακτηριστικά των τοξινών, διαφορά από τις εξωτοξίνες παθογόνων άλλων λοιμώξεων τροφίμων. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης. Φάρμακα για ειδική πρόληψη και θεραπεία.

Η αλλαντίαση είναι μια σοβαρή τροφική δηλητηρίαση που σχετίζεται με την κατανάλωση προϊόντων μολυσμένων με C.botulinum και χαρακτηρίζεται από ειδική βλάβη στο κεντρικό νευρικό σύστημα. Πήρε το όνομά του από το Λατ. αλλαντίαση - λουκάνικο.

Ιδιότητες του παθογόνου.Μεγάλες πολυμορφικές gram-θετικές ράβδοι, κινητές, έχουν περιτριχώδη μαστίγια. Τα σπόρια είναι ωοειδή και βρίσκονται υποκείμενα (ρακέτα τένις). Παράγουν οκτώ τύπους τοξινών, που διαφέρουν ως προς την αντιγονική εξειδίκευση και, κατά συνέπεια, διακρίνονται 8 τύποι παθογόνων. Μεταξύ των σημαντικότερων χαρακτηριστικών είναι η παρουσία ή απουσία πρωτεολυτικών ιδιοτήτων (υδρόλυση καζεΐνης, παραγωγή υδρόθειου).

Η τοξίνη έχει νευροτοξική δράση. Η τοξίνη εισέρχεται στο σώμα με την τροφή, αν και πιθανότατα μπορεί να συσσωρευτεί όταν το παθογόνο πολλαπλασιάζεται στους ιστούς του σώματος. Η τοξίνη είναι ασταθής στη θερμότητα, αν και ο βρασμός για έως και 20 λεπτά είναι απαραίτητος για την πλήρη αδρανοποίηση. Η τοξίνη απορροφάται γρήγορα στο γαστρεντερικό σωλήνα, διεισδύει στο αίμα, δρα επιλεκτικά στους πυρήνες του προμήκη μυελού και στα γαγγλιακά κύτταρα του νωτιαίου μυελού. Αναπτύσσονται νευροπαραλυτικά φαινόμενα - διαταραχές κατάποσης, αφωνία, δυσφαγία, οφθαλμοπληγικό σύνδρομο (στριβισμός, διπλή όραση, πτώση βλεφάρων), παράλυση και πάρεση των μυών του φάρυγγα και του λάρυγγα, διακοπή της αναπνοής και της καρδιακής δραστηριότητας.

Εργαστηριακή διάγνωση.Οι αρχές είναι κοινές στα κλωστρίδια.

Θεραπεία και πρόληψη.Βασίζεται στην πρώιμη χρήση αντιτοξικών ορών (πολυσθενών ή, όταν διαπιστωθεί ο τύπος, ομόλογων). Η πρόληψη βασίζεται σε καθεστώς υγιεινής και υγιεινής κατά την επεξεργασία των προϊόντων διατροφής. Τα σπιτικά μανιτάρια σε κονσέρβα και άλλα προϊόντα που αποθηκεύονται σε αναερόβιες συνθήκες είναι ιδιαίτερα επικίνδυνα.

11. Pseudomonas aeruginosa. Ταξονομία. Ιδιότητες. Προκαλούμενες ασθένειες.
Ρόλος στις νοσοκομειακές λοιμώξεις. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης.

Το γένος pseudomonas, P. aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa) είναι ένας από τους κύριους αιτιολογικούς παράγοντες των τοπικών και συστηματικών πυωδών-φλεγμονωδών διεργασιών στα ιατρικά νοσοκομεία.

Το παθογόνο κατανέμεται παντού (νερό, έδαφος, φυτά, ζώα) και βρίσκεται φυσιολογικά στον άνθρωπο (συχνότερα στα έντερα, στο δέρμα και στους βλεννογόνους). Μορφολογία- Gram-αρνητική ευθεία ή ελαφρώς κυρτή ράβδος, κινητή, τοποθετημένη μεμονωμένα, ανά ζευγάρια ή σε κοντές αλυσίδες σε κηλίδες. Συνθέτει βλέννα (καψική ουσία), ιδιαίτερα τα πιο λοιμώδη βλεννοειδή στελέχη.

Πολιτιστικές ιδιότητες.Είναι αερόβιο και έχει ένα σύνολο ενζύμων που αντιστοιχούν στον τύπο της αναπνοής (κυτοχρώματα, οξειδάση κυτοχρώματος, αφυδράσες. Σε υγρά μέσα σχηματίζει ένα γκριζωπό-ασημί φιλμ. Σε στερεά μέσα παρατηρείται συχνά το φαινόμενο της λύσης του ουράνιου τόξου. Στο τέλος της ημέρας λόγω της σύνθεσης χρωστικής πυοκυανίνηΈνα μπλε-πράσινο χρώμα εμφανίζεται στον πολιτισμό.

Βιοχημικές ιδιότητες.Το Pseudomonas aeruginosa χαρακτηρίζεται από χαμηλή σακχαρολυτική δράση (οξειδώνει μόνο τη γλυκόζη), υψηλή πρωτεολυτική δραστηριότητα και σχηματισμό ζώνης βήτα-αιμόλυσης στο άγαρ αίματος. Συνθέτει τριμεθυλαμίνη, η οποία δίνει στις καλλιέργειες ένα ευχάριστο άρωμα γιασεμιού. Παράγει την παραγωγή βακτηριοκινών - πυοκίνες.

Αντιγονικές και παθογόνες ιδιότητες.Τα κύρια αντιγόνα του Pseudomonas aeruginosa είναι το ειδικό για την ομάδα σωματικό Ο-αντιγόνο και το τυποειδικό μαστιγιακό Η-αντιγόνο. Ο-αντιγονικό σύμπλεγμα - ένα συσσωμάτωμα LPS με πρωτεΐνες και λιπίδια του κυτταρικού τοιχώματος, έχει ιδιότητες ενδοτοξίνης και είναι ένας από τους κύριους παράγοντες παθογένειας. Το Pseudomonas aeruginosa έχει ένα μεγάλο σύνολο παραγόντων παθογένειας - ενδοτοξίνη (LPS, παρόμοια με άλλα gram-αρνητικά βακτήρια), μια σειρά από εξωτοξίνες - κυτταροτοξίνη, εξωένζυμο S, αιμολυσίνες, εξωτοξίνη Α (η πιο σημαντική, που θυμίζει εξωτοξίνη διφθερίτιδας), ένζυμα ( κολλαγενάση, νευραμινιδάση, πρωτεάσες).

Εργαστηριακή διάγνωση.Το P.aeruginisa έλαβε το όνομά του για τον γαλαζοπράσινο χρωματισμό του εκκρίματος του τραύματος και του υλικού επιδέσμου. Η κύρια διαγνωστική μέθοδος είναι βακτηριολογική. Η ανίχνευση της χρωστικής πυοκυανίνης είναι σημαντική. Θεραπεία και ειδική πρόληψη.Δεν υπάρχει συγκεκριμένη πρόληψη. Για τροφικές τοξικές λοιμώξεις και εντερική δυσβίωση που προκαλείται από Pseudomonas aeruginosa, είναι αποτελεσματικός ένας σύνθετος βακτηριοφάγος του εντέρου, ο οποίος περιλαμβάνει έναν φάγο ψευδομονάδας. Μεταξύ των αντιβακτηριακών φαρμάκων, οι αμινογλυκοσίδες, οι κεφαλοσπορίνες και οι κινολόνες χρησιμοποιούνται συχνότερα.

Ευκαιριακά gram-αρνητικά βακτήρια - αιτιολογικοί παράγοντες πυοφλεγμονωδών διεργασιών (Proteus, Klebsiella, θαυματουργός βάκιλλος κ.λπ.), ταξινόμηση. Γενικά χαρακτηριστικά των εντεροβακτηρίων. Αρχές και μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης.

Γένος Klebsiella.

Το γένος Klebsiella ανήκει στην οικογένεια των Enterobacteriaceae. Ένα χαρακτηριστικό των εκπροσώπων του γένους είναι η ικανότητα σχηματισμού κάψουλας. Το κύριο είδος είναι το K. pneumoniae. Προκαλούν ευκαιριακές βλάβες - νοσοκομειακή πνευμονία, ουρολοιμώξεις, διάρροια στα νεογνά. Η Klebsiella προκαλεί μαστίτιδα, σηψαιμία και πνευμονία στα ζώα και εντοπίζεται συνεχώς στο δέρμα και τους βλεννογόνους του ανθρώπου και των ζώων. Οι Klebsiella είναι ίσιες, ακίνητες ράβδοι διαφόρων μεγεθών. Προαιρετικά αναερόβια. Οξειδάση - αρνητική, καταλάση - θετική.

Παράγοντες παθογένειας.Αυτά περιλαμβάνουν μια κάψουλα πολυσακχαρίτη (Κ-αντιγόνο), ενδοτοξίνη, κροσσοί, σύστημα σιδηροφόρων (δεσμεύει ιόντα σιδήρου και μειώνει την περιεκτικότητά τους στους ιστούς), θερμοαστάθετες και θερμοσταθερές εξωτοξίνες.

Κλινικές ΕΚΔΗΛΩΣΕΙΣ.Το K.pneumoniae (subsp. pneumoniae) χαρακτηρίζεται από νοσοκομειακή βρογχίτιδα και βρογχοπνευμονία, λοβιακή πνευμονία, ουρολοιμώξεις, βλάβες των μηνίγγων, των αρθρώσεων, της σπονδυλικής στήλης, των ματιών, καθώς και βακτηριαιμία και σηψαιμία. Το υποείδος ozaenae προκαλεί μια ειδική μορφή χρόνιας ατροφικής ρινίτιδας - οζέν.

Εργαστηριακή διάγνωση.Η κύρια μέθοδος είναι βακτηριολογική. Θεραπεία.Ένα από τα χαρακτηριστικά της Klebsiella είναι η αντοχή τους σε πολλά φάρμακα και η ανάπτυξη βλαβών σε φόντο μείωσης της αντίστασης του σώματος. Τα αντιβιοτικά χρησιμοποιούνται για γενικευμένες και υποτονικές χρόνιες μορφές της κλεμπσιέλας, συνήθως σε συνδυασμό με φάρμακα που διεγείρουν το ανοσοποιητικό σύστημα.

Γένος Πρωτεύς.

Το γένος Proteus ανήκει στην οικογένεια των Enterobacteriaceae. Το γένος πήρε το όνομά του από τον γιο του Ποσειδώνα Πρωτέα, ο οποίος κατάφερε να αλλάξει την εμφάνισή του. Οι εκπρόσωποι του γένους είναι ικανοί να αλλάξουν τις εξωτερικές εκδηλώσεις ανάπτυξης σε στερεά θρεπτικά μέσα και διακρίνονται επίσης από τον μεγαλύτερο πλειομορφισμό (μεταβλητότητα μορφολογίας) σε σύγκριση με άλλα εντεροβακτήρια.

Οι πρωτεΐνες διασπούν την τυροσίνη, μειώνουν τα νιτρικά, η οξειδάση είναι αρνητική, η καταλάση είναι θετική. Ζουν στα έντερα πολλών ειδών σπονδυλωτών και ασπόνδυλων ζώων, στο έδαφος, στα λύματα και στην οργανική ύλη σε αποσύνθεση. Μπορεί να προκαλέσει λοιμώξεις του ουροποιητικού συστήματος στον άνθρωπο, καθώς και σηπτικές βλάβες σε ασθενείς με εγκαύματα και μετά από χειρουργική επέμβαση. Αρκετά συχνά προκαλούν και τροφική δηλητηρίαση. Οι P.vulgaris και P.mirabilis παίζουν πιο συχνά ρόλο στην παθολογία.

Πολιτιστικές ιδιότητες.Οι πρωτεΐνες αναπτύσσονται σε απλά μέσα σε ένα ευρύ φάσμα θερμοκρασιών. Το βέλτιστο pH είναι 7,2-7,4, η θερμοκρασία είναι από +35 έως 37 βαθμούς Κελσίου. Οι αποικίες πρωτεϊνών σε μορφή Ο είναι στρογγυλές, ημιψηφιακές και κυρτές, ενώ οι μορφές Η δίνουν συνεχή ανάπτυξη. Η ανάπτυξη των πρωτεϊνών συνοδεύεται από μια σάπια οσμή. Το φαινόμενο του σμήνος είναι χαρακτηριστικό· οι μορφές Η δίνουν χαρακτηριστική ερπυστική ανάπτυξη στο MPA με τη μορφή ενός γαλαζωπό-καπνού λεπτού πέπλου. Κατά τη σπορά σύμφωνα με τη μέθοδο Shushkevich στην υγρασία συμπύκνωσης του φρεσκοκομμένου MPA, η καλλιέργεια ανεβαίνει σταδιακά με τη μορφή πέπλου επάνω στην επιφάνεια του άγαρ. Στο MPB, σημειώνεται διάχυτη θολότητα του μέσου με παχύρρευστο λευκό ίζημα στο κάτω μέρος.

Παράγοντες παθογένειας.Αυτά περιλαμβάνουν το LPS του κυτταρικού τοιχώματος, την ικανότητα «σμήνους», κροσσούς, πρωτεάσες και ουρεάση, αιμολυσίνες και αιμοσυγκολλητίνες.

Εργαστηριακή διάγνωση.Η κύρια μέθοδος είναι βακτηριολογική. Χρησιμοποιούνται διαφορικά διαγνωστικά μέσα (Ploskirev), μέσα εμπλουτισμού και MPA σύμφωνα με τη μέθοδο Shushkevich. Θεραπεία. Για εντερική δυσβακτηρίωση που σχετίζεται με τον Πρωτέα (κολίτιδα), μπορείτε να χρησιμοποιήσετε τον φάγο Proteus και φάρμακα που τον περιέχουν (εντεροφάγος, βακτηριοφάγος coliproteus).

"Υπέροχο ραβδί" (Serratia marcescens), ένας τύπος βακτηρίων από μικροοργανισμούς χρωστικών. Gram-αρνητικές κινητές (περιτριχώδεις) μη σποριοφόροι ράβδοι. Ανά τύπο μεταβολισμού - προαιρετικό αναερόβιο. Στην επιφάνεια του άγαρ σχηματίζει λείες ή κοκκώδεις σκούρες και φωτεινές κόκκινες αποικίες με μεταλλική γυαλάδα. Ζει στο έδαφος, το νερό και τα τρόφιμα. Αναπτύσσεται στο ψωμί (σε υψηλή υγρασία), στο γάλα, τα χρωματίζει κόκκινο. τέτοια προϊόντα δεν επιτρέπονται προς πώληση. Υπό όρους παθογόνο για ζώα και ανθρώπους. μπορεί να προκαλέσει εξίδρωση.

13. Escherichia. Ταξονομία. Ασθένειες που προκαλούνται από Escherichia coli. Παθογόνες παραλλαγές της διαρροϊκής Escherichia. Αντιγονική δομή, ταξινόμηση. Χαρακτηριστικά της μικροβιολογικής διάγνωσης. Διαφοροποίηση της διαρροϊκής Escherichia από τις ευκαιριακές.

Η Escherichia είναι το πιο κοινό αερόβιο εντερικό βακτήριο που, υπό ορισμένες συνθήκες, μπορεί να προκαλέσει μια ευρεία ομάδα ανθρώπινων ασθενειών, τόσο εντερική (διάρροια) όσο και εξωεντερική (βακτηριαιμία, ουρολοιμώξεις κ.λπ.). Το κύριο είδος είναι το E. coli (Escherichia coli) - ο πιο κοινός αιτιολογικός παράγοντας μολυσματικών ασθενειών που προκαλούνται από εντεροβακτήρια. Αυτό το παθογόνο είναι δείκτης μόλυνσης με κόπρανα, ειδικά στο νερό.

Πολιτιστικές ιδιότητες.Σε υγρά μέσα, το E. coli παράγει διάχυτη θολότητα· σε στερεά μέσα, σχηματίζει αποικίες μορφής S και R. Στο Endo, το κύριο μέσο για την Escherichia, το E. coli που ζυμώνει λακτόζη σχηματίζει έντονα κόκκινες αποικίες με μεταλλική γυαλάδα· οι μη ζυμωτικές αποικίες σχηματίζουν ανοιχτό ροζ ή άχρωμες αποικίες με πιο σκούρο κέντρο· στο μέσο του Ploskirev είναι κόκκινες με κιτρινωπή απόχρωση. στο μέσο του Levin είναι σκούρο μπλε με μεταλλική λάμψη. .

Βιοχημικές ιδιότητες.Στις περισσότερες περιπτώσεις, το E. coli ζυμώνει υδατάνθρακες (γλυκόζη, λακτόζη, μαννιτόλη, αραβινόζη, γαλακτόζη κ.λπ.) με το σχηματισμό οξέος και αερίου, παράγει ινδόλη, αλλά δεν σχηματίζει υδρόθειο και δεν υγροποιεί τη ζελατίνη.

Οι κύριοι παράγοντες παθογένειας του διαρροϊκού E.coli.

1. Παράγοντες προσκόλλησης, αποικισμού και εισβολής που σχετίζονται με πασσάλους, δομές κροσσών και πρωτεΐνες της εξωτερικής μεμβράνης. Κωδικοποιούνται από πλασμιδικά γονίδια και προάγουν τον αποικισμό του κατώτερου λεπτού εντέρου.

2. Εξωτοξίνες: κυτοτονίνες (διεγείρουν την υπερέκκριση υγρού από τα κύτταρα του εντέρου, διαταράσσουν τον μεταβολισμό του νερού-αλατιού και προάγουν την ανάπτυξη διάρροιας) και εντεροκυτταροτοξίνες (δρούν στα κύτταρα του εντερικού τοιχώματος και του τριχοειδούς ενδοθηλίου).

3. Ενδοτοξίνη (λιποπολυσακχαρίτης).

Ανάλογα με την παρουσία διαφόρων παραγόντων παθογένειας, το διαρροϊκό E. coli χωρίζεται σε πέντε κύριους τύπους: εντεροτοξιγονικό, εντεροδιηθητικό, εντεροπαθογόνο, εντεροαιμορραγικό, εντεροσυγκολλητικό.

4. Τα παθογόνα E. coli χαρακτηρίζονται από την παραγωγή βακτηριοσινών (κολικινών).

Εντεροτοξιγονικό E.coliέχουν μια υψηλής μοριακής θερμότητας τοξίνη, παρόμοια σε δράση με τη χολέρα, που προκαλεί διάρροια που μοιάζει με χολέρα (γαστρεντερίτιδα σε μικρά παιδιά, διάρροια ταξιδιωτών κ.λπ.).

Εντεροδιηθητικό Escherichia coliικανό να διεισδύσει και να πολλαπλασιαστεί στα επιθηλιακά κύτταρα του εντέρου. Προκαλούν άφθονη διάρροια αναμεμειγμένη με αίμα και μεγάλο αριθμό λευκοκυττάρων (δείκτης μιας επεμβατικής διαδικασίας) στα κόπρανα. Κλινικά μοιάζει με δυσεντερία. Τα στελέχη έχουν κάποιες ομοιότητες με το Shigella (στάσιμα, δεν ζυμώνουν τη λακτόζη και έχουν υψηλές εντεροεπεμβατικές ιδιότητες).

Εντεροπαθογόνο E.coli- οι κύριοι αιτιολογικοί παράγοντες της διάρροιας στα παιδιά. Οι βλάβες βασίζονται στην προσκόλληση βακτηρίων στο εντερικό επιθήλιο με βλάβη στις μικρολάχνες. Χαρακτηρίζεται από υδαρή διάρροια και σοβαρή αφυδάτωση.

Εντεροαιμορραγική Escherichia coliπροκαλούν διάρροια ανάμικτη με αίμα (αιμορραγική κολίτιδα), αιμολυτικό-ουραιμικό σύνδρομο (αιμολυτική αναιμία σε συνδυασμό με νεφρική ανεπάρκεια). Ο πιο κοινός ορότυπος της εντεροαιμορραγικής Escherichia coli είναι ο O157:H7.

Εντεροσυγκολλητικό E. coliδεν σχηματίζουν κυτταροτοξίνες, ελάχιστα μελετημένες.

Εργαστηριακή διάγνωση.Η κύρια προσέγγιση είναι η απομόνωση μιας καθαρής καλλιέργειας σε διαφορικά διαγνωστικά μέσα και η αναγνώρισή της με αντιγονικές ιδιότητες. Η ΡΑ διαγιγνώσκεται με ένα σύνολο πολυσθενών ορών ΟΚ (προς Ο- και Κ-αντιγόνα).

Μεταξύ των παθογόνων στρεπτόκοκκων ιδιαίτερη θέση κατέχει ο S.pneumoniae (πνευμονόκοκκος). Παίζει πολύ σημαντικό ρόλο στην ανθρώπινη λοιμώδη παθολογία. Αυτό το είδος είναι ένας από τους κύριους αιτιολογικούς παράγοντες της λοβιακής πνευμονίας. Σύμφωνα με πολύ από πλήρη στοιχεία, κάθε χρόνο στον κόσμο υπάρχουν περισσότερες από 500 χιλιάδες πνευμονίες που προκαλούνται από πνευμονιόκοκκους, ιδιαίτερα συχνά σε παιδιά και ηλικιωμένους. Εκτός από την πνευμονία, αυτό το μικρόβιο προκαλεί μηνιγγίτιδα, ενδοκαρδίτιδα, περιτονίτιδα, μέση ωτίτιδα, ρινίτιδα, ιγμορίτιδα, σηψαιμία, έρποντα έλκη κερατοειδούς και μια σειρά από άλλες ασθένειες. Για τη διεξαγωγή εργαστηριακής διάγνωσης, χρησιμοποιούνται βακτηριοσκοπικές, βακτηριολογικές και βιολογικές μέθοδοι. Το υλικό για εξέταση είναι πτύελα, πύον, αίμα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, βλέννα από το στόμα και τον ρινοφάρυγγα, έκκριμα από τον άνω γνάθο κόλπο, τα μάτια και τα αυτιά. Είναι σημαντικό να στείλετε αμέσως το υλικό στο εργαστήριο και να το εξετάσετε πολύ γρήγορα, αφού οι πνευμονιόκοκκοι είναι ευαίσθητοι σε αυτόλυση.

Βακτηριοσκοπική εξέταση

Η βακτηριοσκοπική εξέταση του υλικού (εκτός του αίματος) καταλήγει σε δύο επιχρίσματα. Ένα από αυτά είναι χρωματισμένο με Gram, το δεύτερο με Burri-Gins, γεγονός που καθιστά δυνατή την αναγνώριση της κάψουλας. Οι πνευμονιόκοκκοι εντοπίζονται με τη μορφή λογχοειδή διπλόκοκκων, που περιβάλλονται από μια κοινή κάψουλα. Εάν ανιχνευθούν 10 ή περισσότεροι τυπικοί διπλόκοκκοι στο οπτικό πεδίο, είναι πολύ πιθανό να συμπεράνουμε ότι υπάρχει S. pneumoniae. Ωστόσο, η πρωτογενής μικροσκόπηση δεν δίνει το δικαίωμα τελικής διάγνωσης, καθώς τα επιχρίσματα μπορεί να περιέχουν καψικούς μη παθογόνους διπλόκοκκους - εκπροσώπους της φυσιολογικής μικροχλωρίδας. Επομένως, είναι απαραίτητος ο εμβολιασμός κλινικού υλικού και η απομόνωση μιας καθαρής καλλιέργειας.

Βακτηριολογική έρευνα

Για σήψη στο κρεβάτι του ασθενούς, ενοφθαλμίστε 10 ml αίματος σε ένα φιαλίδιο που περιέχει 100 ml ζωμό ορού γάλακτος ή ζάχαρης, επωάστε για 18-20 ώρες στους 37 °C, στη συνέχεια εμβολιάστε σε άγαρ αίματος, απομονώστε και αναγνωρίστε μια καθαρή καλλιέργεια. Για μηνιγγίτιδα, το εγκεφαλονωτιαίο υγρό φυγοκεντρείται και το ίζημα ενοφθαλμίζεται σε άγαρ αίματος. Σε αυτό, οι πνευμονιόκοκκοι αναπτύσσονται με τη μορφή μικρών στρογγυλών αποικιών, που περιβάλλονται από μια πράσινη ζώνη· μια χαρακτηριστική κοιλότητα είναι ορατή στο κέντρο της αποικίας. Δεν συνιστάται η καλλιέργεια πτυέλων ή πύου σε θρεπτικά μέσα, καθώς η παρουσία σαπροφυτικής μικροχλωρίδας καταστέλλει την ανάπτυξη του S. pneumoniae. Είναι καλύτερα να εισάγετε το υλικό δοκιμής στην κοιλιακή κοιλότητα των λευκών ποντικών. Η βιοδοκιμασία είναι μια γρήγορη, αξιόπιστη και ακριβής μέθοδος για την απομόνωση μιας καθαρής καλλιέργειας πνευμονιόκοκκων. Τα λευκά ποντίκια είναι πολύ ευαίσθητα σε αυτά τα βακτήρια και μέσα σε 10-12 ώρες μετά τη μόλυνση, οι πνευμονιόκοκκοι διεισδύουν στο αίμα και στα παρεγχυματικά όργανα, προκαλώντας σήψη. Η καλλιέργεια αίματος από την καρδιά ή κομμάτια εσωτερικών οργάνων κατά τη διάρκεια αυτοψίας ζώων επιτρέπει σε κάποιον να απομονώσει μια καθαρή καλλιέργεια του παθογόνου. Για τον εντοπισμό των πνευμονιόκοκκων, χρησιμοποιούνται οι ιδιότητές τους. Σε αντίθεση με άλλους τύπους στρεπτόκοκκων, ο S.pneumoniae δεν αναπτύσσεται σε μέσο με οπτοχίνη, η ινουλίνη ζυμώνεται και είναι πολύ ευαίσθητη στη δράση της χολής (δοκιμή δεοξυχολικού). Η ταχεία λύση των πνευμονιόκοκκων από τη χολή μπορεί να ανιχνευθεί εάν προστεθούν 0,5 ml χολής σε 1 ml καλλιέργειας ζωμού. Μετά από 15-20 λεπτά στον θερμοστάτη, λαμβάνει χώρα πλήρης λύση των βακτηριακών κυττάρων. Για τον προσδιορισμό των πνευμονιοκοκκικών οροειδών (επί του παρόντος υπάρχουν 85 από αυτούς), χρησιμοποιείται η αντίδραση συγκόλλησης γυαλιού με τυπικούς ορούς ή το φαινόμενο της «διογκώσεως κάψουλας». Παρουσία ομόλογου ορού, η πνευμονιοκοκκική κάψουλα διογκώνεται πολύ. Είναι ακόμη καλύτερο να γίνεται οροτυποποίηση χρησιμοποιώντας αντιδραστήρια του εμπορίου σε αντιδράσεις συγκόλλησης ή πήξης λατέξ, μέσω των οποίων αποκαλύπτονται τα καψικά αντιγόνα. Μεταξύ των στρεπτόκοκκων σημαντικό είναι και το γένος Enterococcus, τα πιο σημαντικά είδη του οποίου είναι τα E.faecalis, E.faecium και E.durans. Είναι αρκετά διαδεδομένα στη φύση. Η κύρια οικολογική τους θέση είναι τα έντερα των ανθρώπων και των ζώων, αλλά βρίσκονται επίσης ως μέρος της φυσιολογικής μικροχλωρίδας του δέρματος του περίνεου, των ουρογεννητικών οργάνων, του στοματοφάρυγγα και του ρινοφάρυγγα. Μπορούν να προκαλέσουν διαπύηση τραυμάτων, βακτηριαιμία, βλάβες στο ουρογεννητικό σύστημα, ειδικά σε ασθενείς με μακροχρόνια λειτουργία καθετήρες, τροφιμογενείς τοξικές λοιμώξεις, δυσβακτηρίωση του εντερικού σωλήνα και, λιγότερο συχνά, ενδοκαρδίτιδα. Σε επιχρίσματα από το υλικό δοκιμής, οι εντερόκοκκοι εντοπίζονται ανά ζεύγη, κοντές αλυσίδες ή με τη μορφή συστάδων, θετικών κατά Gram. Η βακτηριολογική διάγνωση των εντεροκοκκικών λοιμώξεων πραγματοποιείται χωρίς δυσκολίες, καθώς αυτά τα βακτήρια αναπτύσσονται καλά σε απλά μέσα. Το άγαρ dif-3 είναι εκλεκτικό για αυτά (έως 600 ml 3% MPA, προσθέστε 400 ml χολής 40%). Μετά από 24 ώρες επώασης, οι αποικίες που έχουν αναπτυχθεί έχουν μέγεθος 0,4-1,0 mm και έχουν γκριζωπό χρώμα. Στο άγαρ αίματος, λαμβάνει χώρα ατελής ή πλήρης αιμόλυση γύρω από τις αποικίες. Σε αντίθεση με τους στρεπτόκοκκους viridans, οι εντερόκοκκοι μπορούν να αναπτυχθούν σε MPA με 6,5% NaCl, μειώνοντας το γάλα με μπλε του μεθυλενίου στους 37 ° C μετά από 4-6 ώρες. Η αναγνώριση των απομονωμένων καλλιεργειών πραγματοποιείται σύμφωνα με μορφολογικά, πολιτιστικά και βιοχημικά χαρακτηριστικά.

Σελίδα 40 από 91

Ο αιτιολογικός παράγοντας της λοβιακής πνευμονίας (πνευμονία) είναι ο πνευμονιόκοκκος - Diplococcus pneumoniae, που ανακαλύφθηκε για πρώτη φορά από τον Παστέρ στο σάλιο ενός ατόμου που πέθανε από λύσσα (1881).
Μορφολογία και χρωστικές ιδιότητες. Οι πνευμονιόκοκκοι (Εικ. 67 και 68 στο ένθετο) είναι ζευγαρωμένοι κόκκοι με ένα επίμηκες σχήμα που μοιάζει με νυστέρι. Ως εκ τούτου, ονομάζονται αλλιώς λογχοειδή διπλόκοκκοι. Σχηματίζοντας κοντές αλυσίδες, οι πνευμονιόκοκκοι γίνονται παρόμοιοι με τους στρεπτόκοκκους, και επομένως II. Ο F. Gamaleya τους ονόμασε Streptococcus lanceolatus. Το μέγεθος της κυψέλης κυμαίνεται από 0,5Χ0,75 έως 1Χ1,5 μm. Δεν έχουν σπόρια ή μαστίγια. Ένα χαρακτηριστικό γνώρισμα του πνευμονιόκοκκου είναι ο σχηματισμός μιας κάψουλας, η οποία μπορεί να εκφραστεί σαφώς σε παθολογικά υλικά (πτύελα, αίμα κ.λπ.). Όταν καλλιεργείται σε θρεπτικά μέσα, η κάψουλα χάνεται. Οι πνευμονιόκοκκοι δέχονται εύκολα βαφές ανιλίνης και βάφονται θετικά στο Gram.
Πολιτιστικές και βιοχημικές ιδιότητες.

Ρύζι. 68. Πνευμονιόκοκκοι σε επίχρισμα πτυέλων.

Οι πνευμονιόκοκκοι είναι αερόβιοι και προαιρετικοί αναερόβιοι. Η βέλτιστη θερμοκρασία είναι περίπου 37°. Αναπτύσσονται σε μέσα που περιέχουν ζωική πρωτεΐνη (άγαρ αίματος ή ορού, ασκιτάγαρ).
Μετά από 24 ώρες σχηματίζονται μικρές αποικίες στην επιφάνεια του άγαρ, που θυμίζουν στρεπτοκοκκικές αποικίες, αλλά μικρότερες και πιο διαφανείς.
Σε λοξό άγαρ, με άφθονο ενοφθαλμισμό, λαμβάνεται μια πολύ λεπτή διαφανής επικάλυψη, που αποτελείται από μικροσκοπικές αποικίες που δεν συγχωνεύονται· στον ζωμό, υπάρχει ελαφρά θολότητα και ένα μικρό νιφάδες ίζημα.
Τα πρόσφατα απομονωμένα στελέχη δεν αναπτύσσονται στη ζελατίνη. Παλιά εργαστηριακά στελέχη πνευμονιόκοκκων μπορούν να παράγουν μικρές υπόλευκες αποικίες ήδη στους 18-22°. Η ζελατίνη δεν υγροποιείται.
Αναπτύσσονται καλά στο γάλα, πήζοντάς το για να σχηματίσουν οξύ.
Στο άγαρ αίματος, γύρω από τις αποικίες σχηματίζεται μια ζώνη ατελούς αιμόλυσης με πρασινωπό-καφέ χρωματισμό του μέσου.

Ρύζι. 67. Πνευμονιόκοκκοι σε καθαρή καλλιέργεια από ζωμό.

Οι πνευμονιόκοκκοι αποικοδομούν τη σακχαρόζη, τη ραφινόζη και τη λακτόζη. Το πιο σημαντικό χαρακτηριστικό είναι η αποσύνθεση της ινουλίνης. Οι περισσότεροι στρεπτόκοκκοι δεν έχουν αυτή την ιδιότητα. Οι παθογόνοι πνευμονόκοκκοι είναι χοληδιαλυτοί.
Αντιγονική δομή και ορολογικοί τύποι πνευμονιόκοκκων. Το κυτταρόπλασμα του πνευμονιόκοκκου περιέχει ένα πρωτεϊνικό αντιγόνο κοινό σε όλους τους πνευμονιόκοκκους. Αυτό το αντιγόνο καθορίζει την ειδικότητα του είδους τους. Η κάψουλα περιέχει ειδικά πολυσακχαριδικά αντιγόνα (hapten), τα οποία διαφέρουν ως προς τη χημική τους σύνθεση μεταξύ διαφορετικών πνευμονιόκοκκων (αντιγόνα τύπου). Με βάση αυτά τα τυπικά αντιγόνα, χρησιμοποιώντας την αντίδραση συγκόλλησης και καθίζησης, όλοι οι πνευμονιόκοκκοι χωρίζονται σε τρεις κύριες ομάδες (I, II, III) και σε μια τέταρτη ομάδα (Χ-ομάδα). Το X-group περιλαμβάνει περισσότερους από 70 τύπους.
Αντίσταση. Σε τεχνητά θρεπτικά μέσα, οι πνευμονιόκοκκοι πεθαίνουν γρήγορα (4-7 ημέρες). Κάτω από ένα στρώμα βαζελίνης σε υγρό και ημί-υγρό μέσο που περιέχει πρωτεΐνη, παραμένουν βιώσιμα για 3-12 μήνες.
Οι πνευμονιόκοκκοι ανέχονται καλά το στέγνωμα: επιμένουν σε ξηρά πτύελα σε διάχυτο φως για έως και 2 μήνες. Όταν θερμαίνονται στους 52-55° πεθαίνουν σε 10 λεπτά, στους 60° πεθαίνουν ακόμα πιο γρήγορα. Σε διάλυμα καρβολικού οξέος (3%), οι πνευμονιόκοκκοι πεθαίνουν μέσα σε 1-2 λεπτά.
Οι πνευμονιόκοκκοι είναι ιδιαίτερα ευαίσθητοι στην οπτοχίνη. Υπό την επίδραση του τελευταίου, πεθαίνουν σε συγκέντρωση 1: 1.000.000.
Σχηματισμός τοξινών και παθογένεια για τα ζώα. Το δηλητήριο του πνευμονιόκοκκου είναι μια ενδοτοξίνη. Μεταξύ των εργαστηριακών ζώων, τα λευκά ποντίκια και τα κουνέλια είναι πιο ευαίσθητα στον πνευμονιόκοκκο. Η παρεντερική χορήγηση λοιμογόνου πνευμονιόκοκκου μετά από 24-48 ώρες προκαλεί το θάνατο ζώων με συμπτώματα σήψης. Κατά την αυτοψία, εντοπίζεται ινώδες εξίδρωμα στο σημείο της ένεσης, ο σπλήνας είναι διογκωμένος και υπεραιμικός.
Παθογένεση και ασθένειες στον άνθρωπο. Το σημείο εισόδου για μόλυνση είναι συνήθως η βλεννογόνος μεμβράνη του φάρυγγα. Η εισαγωγή πνευμονιόκοκκων στο σώμα και η διείσδυσή τους στον πνευμονικό ιστό μπορεί προφανώς να συμβεί τόσο μέσω του λεμφικού και του κυκλοφορικού συστήματος όσο και απευθείας μέσω των κλάδων των βρόγχων. Η πιο κοινή ασθένεια είναι η λοβιακή πνευμονία, η οποία χαρακτηρίζεται από ξαφνική έναρξη, υψηλό πυρετό, μερικές φορές με ρίγη, πόνο στο πλάι κατά την αναπνοή, πονοκέφαλο, μερικές φορές απώλεια συνείδησης, παραλήρημα και έντονη διέγερση. Στη συνέχεια εμφανίζεται βήχας με χαρακτηριστικά σκουριασμένα-κόκκινα πτύελα. Στους πνεύμονες, παρατηρείται μια διαδικασία που συχνά περιλαμβάνει έναν, λιγότερο συχνά δύο ή τρεις λοβούς.
Οι πηγές μόλυνσης είναι ο άρρωστος και ο φορέας των βακτηρίων. Η μόλυνση από το εξωτερικό συμβαίνει τόσο αερογενώς - με σταγονίδια από τον φορέα, όσο και μέσω μόλυνσης από σκόνη. Οι πνευμονιόκοκκοι μπορούν να επιμείνουν στα αποξηραμένα πτύελα για μεγάλο χρονικό διάστημα (περίπου 2 μήνες) και να εισέλθουν στον αέρα με σκόνη.
Κατά την εξέταση υγιών ατόμων, συχνά εντοπίζονται παθογόνοι πνευμονιόκοκκοι στο ρινοφάρυγγα, επομένως η πιθανότητα αυτομόλυνσης δεν μπορεί να αποκλειστεί και παράγοντες που αποδυναμώνουν την αντίσταση του σώματος, όπως η υποθερμία, παίζουν σημαντικό ρόλο.
Εκτός από τη λοβιακή πνευμονία, οι πνευμονιόκοκκοι προκαλούν φλεγμονή του μέσου ωτός, των μηνιγγίων (μηνιγγίτιδα), καθώς και του βλεννογόνου της μύτης και των αέριων κόλπων, αμυγδαλίτιδα, έρποντα έλκη κερατοειδούς και φλεγμονή του δακρυϊκού σάκου.
Ασυλία, ανοσία. Η πνευμονία δεν παρέχει ανοσία. Η ασθένεια μπορεί να υποτροπιάσει αρκετές φορές. Αυτό εξηγείται από την παρουσία πολλών τύπων πνευμονιόκοκκων και το γεγονός ότι η πνευμονία στο παρελθόν αυξάνει την ευαισθησία του οργανισμού στους πνευμονιόκοκκους.
Ο ορός όσων έχουν αναρρώσει περιέχει αντισώματα (συγκολλητίνες κ.λπ.).
Μέχρι τη στιγμή της κρίσης με πνευμονία, η συγκέντρωση των αντισωμάτων στο αίμα φτάνει σε σημαντικό τίτλο και η φαγοκυττάρωση αυξάνεται απότομα (I. Ya. Chistovich). Με βάση αυτά τα δεδομένα, η ανοσία στην πνευμονία θα πρέπει να θεωρείται κυρίως ως φαγοκυτταρική, στην οποία τα αντισώματα (βακτηριοτροπίνες) παίζουν σημαντικό ρόλο.
Μικροβιολογική διάγνωση. Τα υλικά για την έρευνα στις πνευμονιοκοκκικές παθήσεις είναι τα πτύελα, το αίμα και το πύον που λαμβάνονται από διάφορες βλάβες και λιγότερο συχνά το εγκεφαλονωτιαίο υγρό.
Το παθολογικό υλικό (εκτός του αίματος) εξετάζεται βακτηριοσκοπικά, βακτηριολογικά και με μόλυνση λευκών ποντικών. Πρέπει να καταφύγουμε στην τελευταία μέθοδο επειδή το αρχικό υλικό, ειδικά τα πτύελα, περιέχει συνήθως άφθονη ξένη μικροχλωρίδα, η οποία, όταν εμβολιάζεται απευθείας το υλικό σε θρεπτικά μέσα, καθιστά δύσκολη την απομόνωση του πνευμονιόκοκκου.
Τα επιχρίσματα από πτύελα, πύον κ.λπ. χρωματίζονται κατά Gram. Κάτω από ένα μικροσκόπιο, εντοπίζονται λογχοειδή διπλόκοκκοι που περιβάλλονται από κάψουλα, με θετική χρώση κατά Gram.
Για να απομονώσετε τις καλλιέργειες, ενοφθαλμίστε τις σε άγαρ αίματος ή άγαρ ασκίγκ. Μετά από 24-48 ώρες ανάπτυξης στους 37°C, παρουσία πνευμονιόκοκκου, εμφανίζονται χαρακτηριστικές αποικίες. Οι αποικίες σπέρνονται σε πλαγιές από ορό γάλακτος ή άγαρ ασκίτη και η απομονωμένη καλλιέργεια ελέγχεται για διαλυτότητα στη χολή και την ικανότητα αποσύνθεσης της ινουλίνης.
Η μόλυνση ενός λευκού ποντικιού είναι ο πιο αξιόπιστος τρόπος για να απομονωθεί μια καλλιέργεια πνευμονιόκοκκου. Υλικό από ασθενή ή πτώμα (πτύελα, πύον, κομμάτι οργάνου κ.λπ.) τοποθετείται σε ένα αποστειρωμένο κύπελλο, στη συνέχεια αλέθεται σε αποστειρωμένο γουδί, με 1-2 ml αποστειρωμένου ζωμού και 0,5 ml αυτού του εναιωρήματος εγχέεται ενδοπεριτοναϊκά. σε ένα λευκό ποντίκι. Μετά τον θάνατο του ποντικιού, ο οποίος επέρχεται εντός 12-48 ωρών, λαμβάνονται αιμοκαλλιέργειες από την καρδιά και σχεδόν σε όλες τις περιπτώσεις λαμβάνεται καθαρή καλλιέργεια πνευμονιόκοκκου.
Εάν υπάρχει υποψία σήψης, 10-20 ml αίματος εμβολιάζονται σε ζωμό ασκιτικού ή ορού. Μετά τον εμπλουτισμό, ο ζωμός εμβολιάζεται σε άγαρ αίματος και η απομονωμένη καθαρή καλλιέργεια αναγνωρίζεται από μορφολογικά και βιοχημικά χαρακτηριστικά.
Ειδική θεραπεία και χημειοθεραπεία. Επί του παρόντος, τα σουλφοναμιδικά φάρμακα και τα αντιβιοτικά (πενικιλλίνη, βιομυκίνη, τετρακυκλίνη κ.λπ.) χρησιμοποιούνται με μεγάλη επιτυχία για τη θεραπεία της λοβιακής πνευμονίας.

Το γένος Streptococcus περιλαμβάνει: Streptococcus pyogenes (αιμολυτικό) και Streptococcus pneumoniae (πνευμονιόκοκκος). Οι στρεπτόκοκκοι ανακαλύφθηκαν για πρώτη φορά από τους Billroth (1874) και L. Pasteur (1879). Μελετήθηκαν από τον E. Rosenbach (1884).

Streptococcus pyogenes (αιμολυτικό)

Μορφολογία. Οι στρεπτόκοκκοι είναι κόκκοι που έχουν σφαιρικό σχήμα. Η διάμετρος κάθε κόκκου είναι κατά μέσο όρο 0,6-1 microns, αλλά χαρακτηρίζονται από πολυμορφισμό: υπάρχουν μικροί και μεγάλοι κόκκοι, αυστηρά σφαιρικοί και οβάλ. Οι στρεπτόκοκκοι είναι διατεταγμένοι σε μια αλυσίδα, η οποία είναι το αποτέλεσμα της διαίρεσης τους στο ίδιο επίπεδο. Το μήκος των αλυσίδων είναι διαφορετικό. Σε ένα στερεό θρεπτικό υλικό οι αλυσίδες είναι συνήθως μικρές, σε ένα υγρό είναι μακριές. Οι στρεπτόκοκκοι είναι ακίνητοι και δεν έχουν σπόρια (βλ. Εικ. 4) Οι πρόσφατα απομονωμένες καλλιέργειες σχηματίζουν μερικές φορές μια κάψουλα. Σε εξαιρετικά λεπτές τομές, είναι ορατή μια μικροκάψουλα, κάτω από την οποία υπάρχει ένα κυτταρικό τοίχωμα τριών στρωμάτων και μια κυτταροπλασματική μεμβράνη τριών στρωμάτων. Gram θετικό.

Καλλιέργεια. Οι στρεπτόκοκκοι είναι προαιρετικά αναερόβια. Αναπτύσσονται σε θερμοκρασία 37° C και pH 7,6-7,8. Τα βέλτιστα μέσα για την ανάπτυξή τους είναι μέσα που περιέχουν αίμα ή ορό αίματος. Σε στερεά θρεπτικά μέσα, οι αποικίες στρεπτόκοκκων είναι μικρές, επίπεδες, θολό και γκριζωπό χρώμα. Ορισμένα είδη στρεπτόκοκκων σχηματίζουν αιμόλυση σε άγαρ αίματος. Οι β-αιμολυτικοί στρεπτόκοκκοι σχηματίζουν μια καθαρή ζώνη αιμόλυσης, οι α-αιμολυτικοί στρεπτόκοκκοι σχηματίζουν μια μικρή πρασινωπή ζώνη (το αποτέλεσμα της μετάβασης της αιμοσφαιρίνης στη μεθαιμοσφαιρίνη). Υπάρχουν στρεπτόκοκκοι που δεν προκαλούν αιμόλυση.

Στο ζωμό ζάχαρης, οι στρεπτόκοκκοι αναπτύσσονται με το σχηματισμό λεπτόκοκκου ιζήματος κοντά στο τοίχωμα και στον πυθμένα, ενώ ο ζωμός παραμένει διαφανής.

Ενζυματικές ιδιότητες. Οι στρεπτόκοκκοι έχουν σακχαρολυτικές ιδιότητες. Διασπούν τη γλυκόζη, τη λακτόζη, τη σακχαρόζη, τη μαννιτόλη (όχι πάντα) και τη μαλτόζη για να σχηματίσουν οξύ. Οι πρωτεολυτικές τους ιδιότητες εκφράζονται ασθενώς. Πηγάζουν το γάλα, αλλά δεν υγροποιούν τη ζελατίνη.

Σχηματισμός τοξινών. Οι στρεπτόκοκκοι παράγουν έναν αριθμό εξωτοξινών: 1) στρεπτολυσίνες - καταστρέφουν τα ερυθρά αιμοσφαίρια (Η Ο-στρεπτολυσίνη έχει καρδιοτοξική δράση). 2) λευκοσιδίνη - καταστρέφει τα λευκοκύτταρα (που σχηματίζονται από στελέχη με υψηλή μολυσματικότητα). 3) ερυθρογενής (οστρακιά) τοξίνη - καθορίζει την κλινική εικόνα της οστρακιάς - δηλητηρίαση, αγγειακές αντιδράσεις, εξάνθημα κ.λπ. Η σύνθεση της ερυθρογενούς τοξίνης καθορίζεται από τον προφάγο. 4) κυτταροτοξίνες - έχουν την ικανότητα να προκαλούν σπειραματονεφρίτιδα.

Στους στρεπτόκοκκους έχουν βρεθεί διάφορα αντιγόνα. Το κυτταρόπλασμα του κυττάρου περιέχει ένα συγκεκριμένο αντιγόνο νουκλεοπρωτεϊνικής φύσης - το ίδιο για όλους τους στρεπτόκοκκους. Τα αντιγόνα τύπου πρωτεΐνης βρίσκονται στην επιφάνεια του κυτταρικού τοιχώματος. Στο κυτταρικό τοίχωμα των στρεπτόκοκκων βρέθηκε αντιγόνο ομάδας πολυσακχαρίτη.

Με βάση τη σύσταση του κλάσματος αντιγόνου ειδικού για την ομάδα πολυσακχαρίτη, όλοι οι στρεπτόκοκκοι χωρίζονται σε ομάδες, που ορίζονται με κεφαλαία γράμματα A, B, C, D κ.λπ. σε S. Εκτός από τις ομάδες, οι στρεπτόκοκκοι χωρίζονται σε ορολογικούς τύπους, που χαρακτηρίζονται με αραβικούς αριθμούς.

Η ομάδα Α περιλαμβάνει 70 τύπους. Αυτή η ομάδα περιλαμβάνει τους περισσότερους στρεπτόκοκκους που προκαλούν διάφορες ασθένειες στον άνθρωπο. Η ομάδα Β περιλαμβάνει κυρίως στρεπτόκοκκους που είναι ευκαιριακά για τον άνθρωπο. Η ομάδα Γ περιλαμβάνει στρεπτόκοκκους παθογόνους για ανθρώπους και ζώα. Η ομάδα Δ αποτελείται από στρεπτόκοκκους που δεν είναι παθογόνοι για τον άνθρωπο, αλλά αυτή η ομάδα περιλαμβάνει και εντερόκοκκους, που είναι κάτοικοι του εντερικού σωλήνα των ανθρώπων και των ζώων. Μπαίνοντας σε άλλα όργανα, προκαλούν φλεγμονώδεις διεργασίες: χολοκυστίτιδα, πυελίτιδα κ.λπ. Έτσι, μπορούν να ταξινομηθούν ως ευκαιριακά μικρόβια.

Η αναγωγή των απομονωμένων καλλιεργειών σε μία από τις ορολογικές ομάδες προσδιορίζεται χρησιμοποιώντας μια αντίδραση καταβύθισης με ορούς ομάδας. Για τον προσδιορισμό των ορολογικών τύπων, χρησιμοποιείται μια αντίδραση συγκόλλησης με τυποειδικούς ορούς.

Οι στρεπτόκοκκοι είναι αρκετά σταθεροί στο περιβάλλον. Σε θερμοκρασία 60°C πεθαίνουν μετά από 30 λεπτά.

Παραμένουν σε ξεραμένο πύον και πτύελα για μήνες. Οι κανονικές συγκεντρώσεις απολυμαντικών τα καταστρέφουν σε 15-20 λεπτά. Οι εντερόκοκκοι είναι πολύ πιο ανθεκτικοί· τα απολυμαντικά διαλύματα τους σκοτώνουν μόνο μετά από 50-60 λεπτά.

Ευαισθησία των ζώων. Τα βοοειδή, τα άλογα, οι σκύλοι και τα πτηνά είναι ευαίσθητα στους παθογόνους στρεπτόκοκκους. Από τα πειραματόζωα, τα κουνέλια και τα λευκά ποντίκια είναι ευαίσθητα. Ωστόσο, οι στρεπτόκοκκοι που είναι παθογόνοι για τον άνθρωπο δεν είναι πάντα παθογόνοι για τα πειραματόζωα.

Πηγές μόλυνσης. Άτομα (ασθενείς και φορείς), λιγότερο συχνά ζώα ή μολυσμένα προϊόντα.

Διαδρομές μετάδοσης. Αερομεταφερόμενη και αερομεταφερόμενη σκόνη, μερικές φορές τροφιμογενής, πιθανώς οικιακή επαφή.

Οι ασθένειες μπορεί να εμφανιστούν ως αποτέλεσμα εξωγενούς μόλυνσης, καθώς και ενδογενώς - με την ενεργοποίηση ευκαιριακών στρεπτόκοκκων που ζουν στους βλεννογόνους του φάρυγγα, του ρινοφάρυγγα και του κόλπου. Η μείωση της αντίστασης του οργανισμού (ψύξη, νηστεία, υπερκόπωση κ.λπ.) μπορεί να οδηγήσει σε αυτολοιμώξεις.

Η προευαισθητοποίηση έχει μεγάλη σημασία στην παθογένεση των στρεπτοκοκκικών λοιμώξεων - ως συνέπεια μιας πάθησης που είχε υποστεί προηγουμένως στρεπτοκοκκικής αιτιολογίας.

Όταν οι στρεπτόκοκκοι διεισδύουν στην κυκλοφορία του αίματος, προκαλούν μια σοβαρή σηπτική διαδικασία.

Ασθένειες στον άνθρωποΣυχνότερα προκαλούνται από β-αιμολυτικούς στρεπτόκοκκους της ορολογικής ομάδας Α. Παράγουν ένζυμα παθογένειας: υαλουρονιδάση, ινωδολυσίνη (στρεπτοκινάση), δεοξυριβονουκλεάση, κ.λπ. Επιπλέον, οι στρεπτόκοκκοι έχουν κάψουλα και Μ-πρωτεΐνη, που έχουν αντιφαγοκυτταρικές ιδιότητες.

Οι στρεπτόκοκκοι προκαλούν διάφορες οξείες και χρόνιες λοιμώξεις στον άνθρωπο, τόσο με το σχηματισμό πύου όσο και με μη πυώδεις, που διαφέρουν ως προς την κλινική εικόνα και την παθογένεια. Πυώδεις - φλέγματα, αποστήματα, λοιμώξεις τραυμάτων, μη πυώδεις - οξείες λοιμώξεις του ανώτερου αναπνευστικού, ερυσίπελας, οστρακιά, ρευματισμοί κ.λπ.

Οι στρεπτόκοκκοι συχνά προκαλούν δευτερογενείς λοιμώξεις στη γρίπη, την ιλαρά, τον κοκκύτη και άλλες ασθένειες και συχνά περιπλέκουν τις μολύνσεις του τραύματος.

Ασυλία, ανοσία. Η φύση της ανοσίας είναι αντιτοξική και αντιβακτηριδιακή. Η μετα-λοιμώδης αντιμικροβιακή ανοσία είναι χαμηλής ισχύος. Αυτό εξηγείται από την ασθενή ανοσογονικότητα των στρεπτόκοκκων και τον μεγάλο αριθμό οροειδών που δεν παρέχουν διασταυρούμενη ανοσία. Επιπλέον, με στρεπτοκοκκικές ασθένειες, παρατηρείται αλλεργία του σώματος, γεγονός που εξηγεί την τάση για υποτροπή.

Πρόληψη. Ανήκει σε μέτρα υγιεινής και υγιεινής, ενισχύοντας τη συνολική αντίσταση του σώματος. Δεν έχει αναπτυχθεί ειδική πρόληψη.

Θεραπεία. Χρησιμοποιούνται αντιβιοτικά. Συχνά χρησιμοποιείται πενικιλλίνη, στην οποία οι στρεπτόκοκκοι δεν έχουν γίνει ανθεκτικοί, καθώς και ερυθρομυκίνη και τετρακυκλίνη.

Η σημασία του στρεπτόκοκκου στην αιτιολογία της ρευματικής καρδίτιδας. Η παθογένεια της ρευματικής καρδίτιδας δεν έχει μελετηθεί αρκετά. Αλλά μια σειρά από γεγονότα μιλούν υπέρ του ρόλου του στρεπτόκοκκου στην ανάπτυξη αυτής της ασθένειας:

1. Σε ασθενείς με ρευματική καρδίτιδα, ο Β-αιμολυτικός στρεπτόκοκκος καλλιεργείται από το λαιμό.

2. Οι ρευματισμοί εμφανίζονται συχνά αφού πάσχουμε από αμυγδαλίτιδα, αμυγδαλίτιδα, φαρυγγίτιδα, που ευαισθητοποιούν τον οργανισμό.

3. Στον ορό του αίματος των ασθενών, ανιχνεύονται αντιστρεπτολυσίνη και αντιστρεπτοϋαλουρονιδάση - αντισώματα σε στρεπτοκοκκικά ένζυμα και τοξίνες.

4. Έμμεση επιβεβαίωση του ρόλου του στρεπτόκοκκου είναι η επιτυχημένη θεραπεία με πενικιλίνη.

Πρόσφατα, οι L-μορφές του στρεπτόκοκκου έχουν δοθεί σημασία στην εμφάνιση χρόνιων μορφών ρευματικής καρδίτιδας.

Η πρόληψη των παροξύνσεων της ρευματικής καρδίτιδας καταλήγει στην πρόληψη των στρεπτοκοκκικών ασθενειών (για παράδειγμα, την άνοιξη και το φθινόπωρο, χορηγείται προληπτική πορεία πενικιλίνης). Η θεραπεία καταλήγει στη χρήση αντιβακτηριακών φαρμάκων - πενικιλίνης.

Η σημασία του στρεπτόκοκκου στην αιτιολογία της οστρακιάς. Ο G.N. Gabrichevsky (1902) πρότεινε για πρώτη φορά ότι ο αιμολυτικός στρεπτόκοκκος είναι ο αιτιολογικός παράγοντας της οστρακιάς. Αλλά δεδομένου ότι οι στρεπτόκοκκοι που απομονώθηκαν σε άλλες ασθένειες δεν διέφεραν από τους αιτιολογικούς παράγοντες της οστρακιάς, αυτή η γνώμη δεν ήταν κοινή από όλους. Έχει πλέον διαπιστωθεί ότι η οστρακιά προκαλείται από στρεπτόκοκκους της ομάδας Α, οι οποίοι παράγουν μια ερυθρογενή τοξίνη.

Όσοι έχουν αναρρώσει από τη νόσο αναπτύσσουν ανοσία - σταθερή, αντιτοξική. Η έντασή του προσδιορίζεται με σταδιοποίηση της αντίδρασης Dick - ενδοδερμική ένεση μιας ερυθρογενούς τοξίνης. Σε όσους δεν είναι άρρωστοι, εμφανίζεται υπεραιμία και οίδημα γύρω από το σημείο της ένεσης, το οποίο χαρακτηρίζεται ως θετική αντίδραση (απουσία αντιτοξίνης στον ορό του αίματος). Σε όσους έχουν αναρρώσει από τη νόσο, μια τέτοια αντίδραση απουσιάζει, αφού η αντιτοξίνη που έχουν σχηματίσει εξουδετερώνει την ερυθρογενή τοξίνη.

Πρόληψη. Απομόνωση, νοσηλεία. Η γάμμα σφαιρίνη χορηγείται σε παιδιά επαφής, εξασθενημένα. Δεν έχει αναπτυχθεί ειδική πρόληψη.

Θεραπεία. Χρησιμοποιούνται πενικιλίνη και τετρακυκλίνη. Σε σοβαρές περιπτώσεις, χορηγείται αντιτοξικός ορός.

Σκοπός της μελέτης: ταυτοποίηση του στρεπτόκοκκου και προσδιορισμός του ορού του.

Υλικό για έρευνα

1. Βλέννη από το λαιμό (πονόλαιμος, οστρακιά).

2. Απόξεση από την πληγείσα περιοχή του δέρματος (ερυσίπελας, στρεπτόδερμα).

3. Πύον (απόστημα).

4. Ούρα (νεφρίτιδα).

5. Αίμα (υποψία σήψης, ενδοκαρδίτιδα).

Βασικές μέθοδοι έρευνας

1. Βακτηριολογικό.

2. Μικροσκοπικό.

Πρόοδος της μελέτης

Δεύτερη μέρα της μελέτης

Αφαιρέστε τα κύπελλα από τον θερμοστάτη και επιθεωρήστε. Εάν υπάρχουν ύποπτες αποικίες, γίνονται επιχρίσματα από ορισμένες από αυτές, βάφονται με Gram και εξετάζονται μικροσκοπικά. Εάν ανιχνευθούν στρεπτόκοκκοι στο επίχρισμα, μέρος της υπόλοιπης αποικίας υποκαλλιεργείται σε δοκιμαστικούς σωλήνες σε άγαρ με ορό για να απομονωθεί μια καθαρή καλλιέργεια και σε ζωμό με αίμα σε δοκιμαστικούς σωλήνες. Μέχρι το τέλος της ημέρας, μια καλλιέργεια 5-6 ωρών από ζωμό ή άγαρ υποκαλλιεργείται σε ζωμό Martin με 0,25% γλυκόζη για να προσδιοριστεί η ορολογική ομάδα στην αντίδραση κατακρήμνισης Lensfield. Οι δοκιμαστικοί σωλήνες και οι φιάλες τοποθετούνται σε θερμοστάτη και αφήνονται μέχρι την επόμενη μέρα.

Τρίτη μέρα μελέτης

Οι καλλιέργειες αφαιρούνται από τον θερμοστάτη, ελέγχεται η καθαρότητα της καλλιέργειας σε λοξό άγαρ, γίνονται επιχρίσματα, χρωματίζονται με Gram και εξετάζονται μικροσκοπικά. Εάν υπάρχει καθαρή καλλιέργεια στρεπτόκοκκου, ενοφθαλμίστε τα μέσα Hiss (λακτόζη, γλυκόζη, μαλτόζη, σακχαρόζη και μαννιτόλη), γάλα, ζελατίνη, 40% χολή και τοποθετήστε το σε θερμοστάτη.

Κοιτάζοντας το ζωμό του Μάρτιν. Παρουσία ειδικής ανάπτυξης, πραγματοποιείται αντίδραση κατακρήμνισης Lensfield για να προσδιοριστεί η ορολογική ομάδα.

Ρύθμιση της αντίδρασης καθίζησης σύμφωνα με το Lensfield. Μια καθημερινή καλλιέργεια που αναπτύσσεται σε ζωμό Martin χύνεται σε πολλούς σωλήνες φυγοκέντρησης και φυγοκεντρείται για 10-15 λεπτά (3000 rpm).

Το υπερκείμενο υγρό χύνεται σε βάζο με απολυμαντικό διάλυμα και το ίζημα γεμίζεται με στείρο ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου και φυγοκεντρείται ξανά. 0,4 ml υδροχλωρικού οξέος 0,2% προστίθενται στο ίζημα που συλλέγεται από όλους τους σωλήνες φυγοκέντρησης. Στη συνέχεια ο δοκιμαστικός σωλήνας τοποθετείται σε λουτρό νερού και βράζεται για 15 λεπτά, ανακινώντας περιστασιακά. Μετά τον βρασμό, το προκύπτον εναιώρημα φυγοκεντρείται ξανά. Το αντιγόνο εκχυλίζεται στο υπερκείμενο, το οποίο χύνεται σε καθαρό δοκιμαστικό σωλήνα και εξουδετερώνεται με διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου 0,2% σε ρΗ 7,0-7,2. Ως δείκτης προστίθεται μπλε βρωμοθυμόλης (0,01 ml διαλύματος 0,04%). Με αυτή την αντίδραση, το χρώμα αλλάζει από αχυροκίτρινο σε μπλε.

Στη συνέχεια, 0,5 ml ορών αντιστρεπτοκοκκικής ομάδας χύνονται σε 5 σωλήνες καθίζησης, οι οποίοι παρασκευάζονται με ανοσοποίηση κουνελιών (βλ. Κεφάλαιο 19). Ο ορός Α προστίθεται στον 1ο σωλήνα, ο ορός Β στο 2ο, ο ορός C στον 3ο, ο ορός D στον 4ο, το ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου (έλεγχος) στον 5ο. Μετά από αυτό, χρησιμοποιώντας μια πιπέτα Pasteur, στρώστε προσεκτικά το προκύπτον εκχύλισμα (αντιγόνο) σε όλους τους δοκιμαστικούς σωλήνες κατά μήκος του τοίχου.

Εάν η αντίδραση είναι θετική σε δοκιμαστικό σωλήνα με ομόλογο ορό, σχηματίζεται ένας λεπτός γαλακτώδες-λευκός δακτύλιος στο όριο του εκχυλίσματος με τον ορό (Εικ. 38).

Τέταρτη μέρα έρευνας

Τα αποτελέσματα καταγράφονται (Πίνακας 25).

Επί του παρόντος, προσδιορίζεται η δεοξυριβονουκλεάση, καθώς και η αντιστρεπτοϋαλουρονιδάση και η αντιστρεπτολυσίνη-Ο.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Ποιες βασικές εργαστηριακές μεθόδους ελέγχου για τον εντοπισμό στρεπτόκοκκων γνωρίζετε;

2. Γιατί να χρησιμοποιήσετε την αντίδραση κατακρήμνισης Lensfield;

3. Γιατί το αντιγόνο πρέπει να είναι διαφανές κατά την εκτέλεση αυτής της αντίδρασης; Περιγράψτε την τεχνική για τη σταδιοποίηση αυτής της αντίδρασης.

Προμηθευτείτε αντιστρεπτόκοκκους ορούς A, B, C, D και ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου από τον δάσκαλο. Ρυθμίστε την αντίδραση κατακρήμνισης, δείξτε τα αποτελέσματα στον δάσκαλο και σχεδιάστε τα.

Πολιτιστικά μέσα

Άγαρ αίματος(βλ. κεφάλαιο 7).

Άγαρ ορού(βλ. κεφάλαιο 7).

Hiss media(ξηρός).

Ζελατίνη πεπτόνης κρέατος (MPG). Σε 100 ml MPB προσθέστε 10-15 g ψιλοκομμένη ζελατίνη. Η ζελατίνη πρέπει να διογκωθεί όταν θερμαίνεται αργά σε λουτρό νερού (σε θερμοκρασία 40-50 ° C). Ένα διάλυμα ανθρακικού νατρίου 10% (μαγειρική σόδα) προστίθεται στη λιωμένη ζελατίνη και το pH ρυθμίζεται στο 7,0. Στη συνέχεια διηθήστε αμέσως μέσα από πτυχωτό φίλτρο. Το φιλτράρισμα είναι αργό. Για να επιταχυνθεί η διαδικασία, η διήθηση μπορεί να γίνει σε καυτό αυτόκλειστο. Το διηθημένο μέσο χύνεται σε σωληνάρια των 6-8 ml και αποστειρώνεται. Η αποστείρωση πραγματοποιείται είτε κλασματικά σε θερμοκρασία 100 ° C για 3 συνεχόμενες ημέρες, είτε ταυτόχρονα στους 110 ° C για 20 λεπτά σε αυτόκλειστο. Η ψύξη του μέσου πραγματοποιείται σε δοκιμαστικούς σωλήνες τοποθετημένους κάθετα.

Προετοιμασία γάλακτος. Το φρέσκο ​​γάλα φέρεται σε βρασμό, τοποθετείται σε δροσερό μέρος για μια μέρα, αφαιρείται από την κρέμα και βράζεται ξανά. Αφήστε για μια μέρα και αφαιρέστε το πάνω στρώμα. Το αποβουτυρωμένο γάλα διηθείται μέσω ενός στρώματος βαμβακιού, στη συνέχεια αλκαλοποιείται με διάλυμα ανθρακικού νατρίου 10% σε pH 7,2 και χύνεται σε δοκιμαστικούς σωλήνες των 5-6 ml.

Broth Martin. Ίση ποσότητα πεπτόνης Martin (στομάχια χοιρινού κιμά εκτεθειμένα σε υδροχλωρικό οξύ) προστίθεται στο νερό του κρέατος. Το προκύπτον μίγμα βράζεται για 10 λεπτά, αλκαλοποιείται με διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου 10% σε ρΗ 8,0, προστίθεται 0,5 οξικό νάτριο, βράζεται ξανά και χύνεται σε αποστειρωμένα δοχεία. Στον ζωμό Martin προστίθεται 0,25% γλυκόζη.

Τετάρτη Kitta - Tarozzi(βλ. κεφάλαιο 34).

Streptococcus pneumoniae (πνευμονιόκοκκος)

Οι πνευμονιόκοκκοι περιγράφηκαν για πρώτη φορά από τον R. Koch (1871).

Μορφολογία. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι διπλόκοκκοι στους οποίους οι πλευρές των κυττάρων που βρίσκονται αντικριστά είναι πεπλατυσμένες και οι απέναντι πλευρές είναι επιμήκεις, οπότε έχουν λογχοειδή σχήμα, που θυμίζει φλόγα κεριού (βλ. Εικ. 4). Το μέγεθος των πνευμονιόκοκκων είναι 0,75-0,5 × 0,5-1 μικρά, βρίσκονται σε ζεύγη. Στα υγρά θρεπτικά μέσα σχηματίζουν συχνά κοντές αλυσίδες, που μοιάζουν με τους στρεπτόκοκκους. Οι πρυμόκοκκοι είναι ακίνητοι, δεν έχουν σπόρια και στο σώμα σχηματίζουν μια κάψουλα που περιβάλλει και τους δύο κόκκους. Η κάψουλα περιέχει μια ανθεκτική στη θερμότητα ουσία αντιφαγίνη (προστατεύει τον πνευμονιόκοκκο από την φαγοκυττάρωση και τη δράση των αντισωμάτων). Όταν αναπτύσσονται σε τεχνητά θρεπτικά μέσα, οι πνευμονιόκοκκοι χάνουν την κάψουλα τους. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι gram-θετικοί. Τα Gram-αρνητικά βακτήρια βρίσκονται σε παλαιότερες καλλιέργειες.

Καλλιέργεια. Οι πνευμονιόκοκκοι είναι προαιρετικά αναερόβια. Αναπτύσσονται σε θερμοκρασία 36-37° C και pH 7,2-7,4. Είναι απαιτητικά για τα μέσα, καθώς δεν μπορούν να συνθέσουν πολλά αμινοξέα, επομένως αναπτύσσονται μόνο σε μέσα με την προσθήκη φυσικής πρωτεΐνης (αίματος ή ορού). Στο άγαρ ορού σχηματίζουν μικρές, ευαίσθητες, μάλλον διαφανείς αποικίες. Στο άγαρ αίματος, αναπτύσσονται υγρές αποικίες πρασινογκρι χρώματος, που περιβάλλονται από μια πράσινη ζώνη, η οποία είναι το αποτέλεσμα της μετατροπής της αιμοσφαιρίνης σε μεθαιμοσφαιρίνη. Οι πνευμονιόκοκκοι αναπτύσσονται καλά σε ζωμό με προσθήκη 0,2% γλυκόζης και σε ζωμό με ορό γάλακτος. Η ανάπτυξη σε υγρά μέσα χαρακτηρίζεται από διάχυτη θολότητα και σκονισμένο ίζημα στο κάτω μέρος.

Ενζυματικές ιδιότητες. Οι πνευμονιόκοκκοι έχουν αρκετά έντονη σακχαρολυτική δράση. Διασπώνται: λακτόζη, γλυκόζη, σακχαρόζη, μαλτόζη, ινουλίνη για να σχηματίσουν οξύ. Η μαννιτόλη δεν ζυμώνεται. Οι πρωτεολυτικές τους ιδιότητες είναι ασθενώς εκφρασμένες: πήζουν το γάλα, δεν υγροποιούν τη ζελατίνη και δεν σχηματίζουν ινδόλη. Οι πνευμονιόκοκκοι διαλύονται στη χολή. Η διάσπαση της ινουλίνης και η διάλυση στη χολή είναι ένα σημαντικό διαγνωστικό χαρακτηριστικό που διακρίνει τον Streptococcus pneumoniae από τον Streptococcus pyogenes.

Παράγοντες παθογένειας. Οι πνευμονιόκοκκοι παράγουν υαλουρονιδάση, ινωδολυσίνη κ.λπ.

Σχηματισμός τοξινών. Οι πνευμονιόκοκκοι παράγουν ενδοτοξίνη, αιμολυσίνη και λευκοσιδίνη. Η μολυσματικότητα του πνευμονιόκοκκου σχετίζεται επίσης με την παρουσία αντιφαγίνης στην κάψουλα.

Αντιγονική δομή και ταξινόμηση. Στο κυτταρόπλασμα των πνευμονιόκοκκων υπάρχει ένα πρωτεϊνικό αντιγόνο κοινό για ολόκληρη την ομάδα και στην κάψουλα υπάρχει ένα πολυσακχαριδικό αντιγόνο. Με βάση το πολυσακχαριδικό αντιγόνο, όλοι οι πνευμονιόκοκκοι χωρίζονται σε 84 ορούς. Μεταξύ αυτών που είναι παθογόνα για τον άνθρωπο, οι οροί Ι, ΙΙ και ΙΙΙ είναι πιο συνηθισμένοι.

Αντοχή σε περιβαλλοντικούς παράγοντες. Οι πνευμονιόκοκκοι ανήκουν στην ομάδα των ασταθών μικροοργανισμών. Μια θερμοκρασία 60° C τα σκοτώνει σε 3-5 λεπτά. Είναι αρκετά ανθεκτικά στις χαμηλές θερμοκρασίες και στο στέγνωμα. Στα αποξηραμένα πτύελα παραμένουν βιώσιμα έως και 2 μήνες. Μπορούν να αποθηκευτούν σε θρεπτικό υλικό για όχι περισσότερο από 5-6 ημέρες. Επομένως, κατά την καλλιέργεια, είναι απαραίτητο να γίνεται επανασπορά κάθε 2-3 ημέρες. Συμβατικά διαλύματα απολυμαντικών: 3% φαινόλη, εξάχνωση σε αραίωση 1:1000 τα καταστρέφουν σε λίγα λεπτά.

Οι πνευμονιόκοκκοι είναι ιδιαίτερα ευαίσθητοι στην οπτοχίνη, η οποία τους σκοτώνει σε αραίωση 1:100.000.

Ευαισθησία των ζώων. Ο φυσικός ξενιστής του πνευμονιόκοκκου είναι ο άνθρωπος. Ωστόσο, ο πνευμονιόκοκκος μπορεί να προκαλέσει ασθένεια σε μοσχάρια, αρνιά, χοιρίδια, σκύλους και πιθήκους. Από τα πειραματόζωα, τα λευκά ποντίκια είναι ιδιαίτερα ευαίσθητα στον πνευμονιόκοκκο.

Πηγές μόλυνσης. Ένας άρρωστος και ένας φορέας βακτηρίων.

Διαδρομές μετάδοσης. Αερομεταφερόμενα σταγονίδια, ίσως αερομεταφερόμενη σκόνη.

Πύλη εισόδου. Βλεννογόνος της ανώτερης αναπνευστικής οδού, των ματιών και των αυτιών.

Ασθένειες στον άνθρωπο. Οι πνευμονιόκοκκοι μπορούν να προκαλέσουν πυώδεις-φλεγμονώδεις ασθένειες διαφόρων εντοπισμών. Ειδικά για τον πνευμονιόκοκκο είναι:

1) λοβιακή πνευμονία.

2) έρπον έλκος κερατοειδούς.

Η πιο κοινή ασθένεια είναι η λοβιακή πνευμονία, η οποία προσβάλλει έναν, λιγότερο συχνά δύο ή τρεις λοβούς του πνεύμονα. Η νόσος είναι οξεία, συνοδεύεται από υψηλό πυρετό και βήχα. Συνήθως τελειώνει κριτικά.

Ασυλία, ανοσία. Μετά την ασθένεια, παραμένει ασταθής ανοσία, αφού η πνευμονία χαρακτηρίζεται από υποτροπές.

Πρόληψη. Ανήκει σε υγειονομικά και προληπτικά μέτρα. Δεν έχει αναπτυχθεί ειδική πρόληψη.

Θεραπεία. Χρησιμοποιούνται αντιβιοτικά - πενικιλίνη, τετρακυκλίνη κ.λπ.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Μορφολογία πνευμονιόκοκκων. Καλλιεργητικές και ενζυματικές ιδιότητες.

2. Ποιοι παράγοντες καθορίζουν την παθογένεια των πνευμονόκοκκων και τι προστατεύει τους πνευμονιόκοκκους από τη φαγοκυττάρωση;

3. Ποιες είναι οι κύριες πύλες της πνευμονιοκοκκικής λοίμωξης. Τι ασθένειες προκαλούν οι πνευμονιόκοκκοι;

Μικροβιολογική εξέταση

Σκοπός της μελέτης: ταυτοποίηση πνευμονιόκοκκου.

Υλικό για έρευνα

1. Πτύελα (πνευμονία).

2. Βλέννη από το λαιμό (πονόλαιμος).

3. Έκκριση από έλκος (έρπουσα έλκος κερατοειδούς).

4. Έκκριση από το αυτί (μέση ωτίτιδα).

5. Πύον (απόστημα).

6. Υπεζωκοτική στίξη (πλευρίτιδα).

7. Αίμα (υποψία σήψης).

1 (Είναι προτιμότερο να παίρνετε πρωινά πτύελα (με συγκεκριμένη πνευμονία, τα πτύελα έχουν σκουριασμένο χρώμα).)

Βασικές μέθοδοι έρευνας

1. Μικροσκοπικό.

2. Μικροβιολογική.

3. Βιολογικά.

Πρόοδος της μελέτης

Βιολογικό δείγμα. Λίγο (3-5 ml πτυέλων) γαλακτωματοποιείται σε αποστειρωμένο ζωμό, 0,5 ml αυτού του μείγματος εγχέεται ενδοπεριτοναϊκά σε ένα λευκό ποντίκι. Μετά από 6-8 ώρες, το ποντίκι εμφανίζει σημάδια ασθένειας. Αυτή τη στιγμή, ο πνευμονιόκοκκος μπορεί ήδη να ανιχνευθεί στο εξίδρωμα της κοιλιακής κοιλότητας. Το εξίδρωμα λαμβάνεται με αποστειρωμένη σύριγγα. Γίνονται επιχρίσματα από αυτό, χρωματίζονται με Gram και εξετάζονται σε μικροσκόπιο. Για να απομονωθεί μια καθαρή καλλιέργεια, το εξίδρωμα εμβολιάζεται σε άγαρ ορού. Εάν το ποντίκι πεθάνει ή αρρωστήσει, το αίμα από την καρδιά καλλιεργείται σε άγαρ ορού για να απομονωθεί μια καθαρή καλλιέργεια. Οι καλλιέργειες τοποθετούνται σε θερμοστάτη.

Επιταχυνόμενη μέθοδος προσδιορισμού του τύπου του πνευμονιόκοκκου(αντίδραση μικροσυγκόλλησης). 4 σταγόνες εξιδρώματος από την κοιλιακή κοιλότητα ενός μολυσμένου ποντικού εφαρμόζονται σε μια γυάλινη πλάκα. Ο ορός συγκόλλησης τύπου Ι προστίθεται στην πρώτη σταγόνα, ορός τύπου II προστίθεται στη δεύτερη, ο τύπος III προστίθεται στην τρίτη και ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου (μάρτυρας) προστίθεται στην τέταρτη.

Οι οροί τύπου Ι και ΙΙ προ-αραιώνονται σε αναλογία 1:10 και ο ορός τύπου III - 1:5. Όλες οι σταγόνες αναδεύονται, ξηραίνονται, στερεώνονται και βάφονται με αραιωμένο φούξιν. Εάν το αποτέλεσμα είναι θετικό, σημειώνεται μικροβιακός συνωστισμός (συγκόλληση) σε μία από τις σταγόνες.

Δεύτερη μέρα της μελέτης

Οι καλλιέργειες αφαιρούνται από τον θερμοστάτη, εξετάζονται και γίνονται επιχρίσματα από ύποπτες αποικίες. Εάν υπάρχουν θετικοί κατά Gram λογχοειδή διπλόκοκκοι στα επιχρίσματα, απομονώνονται 2-3 αποικίες σε λοξό άγαρ ορού για να ληφθεί καθαρή καλλιέργεια. Οι καλλιέργειες τοποθετούνται σε θερμοστάτη. Γίνονται επιχρίσματα από τον ζωμό, βάφονται με Gram και εξετάζονται στο μικροσκόπιο.

Τρίτη μέρα μελέτης

Οι καλλιέργειες αφαιρούνται από τον θερμοστάτη. Ελέγχουν την καθαρότητα της καλλιέργειας - κάνουν επιχρίσματα, χρώση κατά Gram και μικροσκόπιο. Εάν υπάρχουν θετικοί κατά Gram λογχοειδή διπλόκοκκοι στην απομονωμένη καλλιέργεια, η απομονωμένη καλλιέργεια προσδιορίζεται με καλλιέργεια:

1) στα μέσα Hiss (λακτόζη, γλυκόζη, σακχαρόζη, μαλτόζη) η σπορά πραγματοποιείται με τον συνήθη τρόπο - με ένεση στο μέσο.

2) σε μέσο με ινουλίνη.

3) σε μέσο με οπτοχίνη.

4) κάντε τεστ χολής.

Τεστ ινουλίνης. Η υπό μελέτη καλλιέργεια σπέρνεται σε θρεπτικό μέσο που περιέχει ινουλίνη και βάμμα λακκούβας και τοποθετείται σε θερμοστάτη. Μετά από 18-24 ώρες, οι καλλιέργειες αφαιρούνται από τον θερμοστάτη. Με την παρουσία πνευμονιόκοκκων, το μέσο γίνεται κόκκινο (οι στρεπτόκοκκοι δεν αλλάζουν τη συνοχή και το χρώμα του μέσου).

Προσδιορισμός ευαισθησίας στην οπτοχίνη. Η απομονωμένη καλλιέργεια εμβολιάζεται σε άγαρ αίματος 10% που περιέχει οπτοχίνη 1:50000. Οι πνευμονιόκοκκοι, σε αντίθεση με τους στρεπτόκοκκους, δεν αναπτύσσονται σε μέσα που περιέχουν οπτοχίνη.

Τεστ χολής. 1 ml της καλλιέργειας ζωμού δοκιμής χύνεται σε σωλήνες συγκόλλησης. Σε ένα από αυτά προστίθεται μια σταγόνα χολής κουνελιού, ο δεύτερος σωλήνας χρησιμεύει ως έλεγχος. Και οι δύο δοκιμαστικοί σωλήνες τοποθετούνται σε θερμοστάτη. Μετά από 18-24 ώρες, λαμβάνει χώρα λύση των πνευμονιόκοκκων, η οποία εκφράζεται με το καθάρισμα ενός θολού ζωμού. Στο χειριστήριο η ανάρτηση παραμένει θολή.

Ένα δείγμα χολής μπορεί να πραγματοποιηθεί σε στερεό θρεπτικό μέσο. Για να γίνει αυτό, ένας κόκκος ξηρής χολής εφαρμόζεται σε μια αποικία πνευμονιόκοκκων που αναπτύσσεται σε πιάτα με άγαρ και ορό - η αποικία διαλύεται και εξαφανίζεται.

Τέταρτη μέρα έρευνας

Τα αποτελέσματα καταγράφονται (Πίνακας 26).

Σημείωση. j - διάσπαση των υδατανθράκων με το σχηματισμό οξέος.

Επί του παρόντος, οι μέθοδοι ορολογικής έρευνας (RSK και RIGA) χρησιμοποιούνται ευρέως για τον προσδιορισμό των στρεπτοκοκκικών αντισωμάτων. Ο προσδιορισμός της ομάδας και του ορού της απομονωμένης καλλιέργειας πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας φθορίζοντα αντισώματα.

Προσδιορισμός της πνευμονιοκοκκικής μολυσματικότητας. Μια ημερήσια καλλιέργεια ζωμού πνευμονιόκοκκου αραιώνεται με 1% πεπτονόνερο από 10 -2 έως 10 -8, 0,5 ml από κάθε αραίωση χορηγείται σε δύο λευκά ποντίκια. Η καλλιέργεια που προκάλεσε το θάνατο των ποντικών σε αραίωση 10 -7 αξιολογείται ως μολυσματική· σε αραίωση 10 -4 -10 -6 θεωρείται μετρίως λοιμογόνος. Μια κουλτούρα που δεν προκαλεί το θάνατο ποντικών είναι μη λοιμογόνος.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Ποιες μεθόδους απομόνωσης μιας καθαρής καλλιέργειας πνευμονιόκοκκων γνωρίζετε;

2. Ποιο ζώο είναι πιο ευαίσθητο στον πνευμονιόκοκκο;

3. Ποιες αντιδράσεις γίνονται με το εξίδρωμα ενός μολυσμένου ποντικού και για ποιο σκοπό;

4. Από ποιους εκπροσώπους των πυογόνων κόκκων πρέπει να διαφοροποιηθεί ο πνευμονιόκοκκος και με ποια εξέταση;

5. Πώς προσδιορίζεται η λοιμογόνος δύναμη του πνευμονιόκοκκου;

Ασκηση

Κάντε ένα διάγραμμα της εξέτασης των πτυέλων, υποδεικνύοντας τα στάδιά της ανά ημέρα.

Πολιτιστικά μέσα

Άγαρ ορού(βλ. κεφάλαιο 7).

Ζωμός ορού γάλακτος(βλ. κεφάλαιο 7).

Άγαρ αίματος(βλ. κεφάλαιο 7).

Hiss media(ξηρός).

Δείγμα μέσου με ινουλίνη. Σε 200 ml απεσταγμένου νερού προσθέστε 10 ml αδρανοποιημένου βόειου ορού, 18 ml βάμματος λακκούβας και 3 g ινουλίνης. Αποστειρώστε με ρέοντα ατμό στους 100° C για 3 συνεχόμενες ημέρες. Ζωμός χολής (βλ. Κεφάλαιο 7).