Причини за аглутинация на еритроцитите, нейните видове и антиглобулинов тест. Болест на студов аглутинин (хъб)

Болести на кръвта

Студови аглутинини

Студените аглутинини или криопротеините са антитела, които взаимодействат с антигените на обвивката на еритроцитите. Това може да активира системата на комплемента, причинявайки автоимунна реакция, водеща до агрегация и разрушаване на червените кръвни клетки, но само при ниски температури. Тази патология се среща главно при пациенти на възраст над 50 години. Антителата могат да бъдат представени от IgM, IgG или IgA, в първия случай аглутинацията е изразена. Има лабораторни методи за диагностика на студените аглутинини и определяне на температурата, при която започва аглутинацията. Обикновено причината за студовите аглутинини е инфекция, най-често вирусна. Техният брой може постепенно да намалее, следователно, ако бъдат открити, е по-добре да се отложи операцията при условия на хипотермия и, ако е възможно, с използване на студена кардиоплегия. Можете също така да определите титрите на студените аглутинини при различни температури на кръвта и по време на перфузията избягвайте охлаждането до температура, при която може да настъпи аглутинация. Ако въпреки това е необходима по-дълбока хипотермия, е необходима плазмафереза, премахваща антителата, съдържащи се в серума. При високи титри на студови аглутинини, охлаждането може да доведе до сериозни усложнения: периоперативен МИ, бъбречна недостатъчност, хемолитична анемия и тромбоза. Планирането на операцията при такива пациенти трябва да бъде особено внимателно, насочено към избягване на охлаждане на пациента. Хемодилуцията с CPB до известна степен намалява риска от аглутинация, но този ефект не е достатъчно предвидим, поради което преди, по време и след CPB пациентът не трябва да се подлага на охлаждане. Препоръчително е да се използва нагрят воден матрак, IR трябва да се извършва при нормотермия, като предварително се загрява разтворът, запълващ системата. Ако еритроцитите се инжектират по време на CPB, те също трябва да бъдат предварително затоплени. Ако е необходима студена кардиоплегия, тя трябва да бъде кристалоидна, без кръв. В този случай те започват с въвеждането на 200-300 ml топъл разтвор, който промива кръвта от коронарните артерии, след което се инжектира студен разтвор. Температурата на студения кардиоплегичен разтвор е такава, че аглутинацията е почти сигурна, така че кардиоплегията, съдържаща кръв, трябва да се прилага само топла. Препоръчително е да инжектирате топъл кардиоплегичен разтвор непосредствено преди отстраняване на скобата от аортата, така че кръвта, навлизаща в коронарните артерии, да не се охлажда.

сърповидно-клетъчна анемия

Обикновено човешките еритроцити съдържат главно хемоглобин А, сърповидно-клетъчната анемия се дължи на съдържанието в еритроцитите на анормален хемоглобин S. При пациенти, хомозиготни по този признак, еритроцитите съдържат предимно хемоглобин S, клинично това се проявява със сърповидно-клетъчна анемия. При хетерозиготни пациенти хемоглобинът S е по-малко от 45% от общия, те са носители на гена на болестта. При сърповидноклетъчна анемия червените кръвни клетки имат характерна форма на сърп или полумесец, по-малко подвижни са, склонни са към агрегиране и по-бързо разпадане. Когато съдържанието на кислород е ниско, сърповидните червени кръвни клетки могат да се утаят. При пациенти със сърповидно-клетъчна анемия, в допълнение към самата анемия, се отбелязва вътресъдова тромбоза. При криза (или криза - не съм сигурен, не помня) се получава запушване на кръвоносни съдове, придружено с болка, задух и конвулсии.

Тактиката на перфузията трябва да е насочена към избягване на криза с всичките й последствия. Необходимо е да се поддържа високо ниво на насищане с кислород и да не се охлажда пациента. При пациенти с преобладаващо съдържание на хемоглобин S, насищането на еритроцитите с кислород трябва да бъде най-малко 85%, при пациенти с частично съдържание на хемоглобин S - най-малко 40%. Пациентите с частичен хемоглобин S по време на CPB трябва да поддържат високо ниво на насищане с кислород и да избягват ацидоза, която допринася за разрушаването на сърповидните клетки. При спазване на тези правила усложненията обикновено могат да бъдат избегнати. Охлаждането също допринася за дисфункцията на сърповидните клетки, така че охлаждането е най-добре да се избягва, като се използва топла или кристалоидна кардиоплегия по същия начин, както при студените аглутинини. Хемодилуцията по време на перфузия също играе положителна роля. За предотвратяване на съдова проходимост трябва да се използват вазодилататори.

Лабораторно изследване, насочено към идентифициране на автоантитела, които причиняват аглутинация и хемолиза на еритроцитите при ниски температури.

Руски синоними

Студови аглутинини, изследване на пълни студени аглутинини.

английски синоними

Кръвен тест за студени аглутинини, студови автоантитела, студено-реагиращи антитела.

Изследователски метод

Реакция на аглутинация.

Какъв биоматериал може да се използва за изследване?

Венозна кръв.

Как правилно да се подготвим за изследване?

• Не пушете 30 минути преди изследването.

Обща информация за изследването

Автоимунните хемолитични анемии (AIHA) възникват в резултат на срив поради редица причини за имунологичен толеранс и производството на антитела срещу собствените червени кръвни клетки. Има топли и студени автоантитела. Термичните най-ефективно се свързват с еритроцитните антигени при температура 37 °C, а студените при 4-18 °C. В зависимост от ефекта, който автоантителата имат върху червените кръвни клетки в епруветка, се освобождават хемолизини (унищожават клетките) и аглутинини (причиняват слепването на червените кръвни клетки).

Автоимунната хемолитична анемия със студени аглутинини е сравнително рядка форма на имунна хемолитична анемия (според някои доклади, 20% от всички случаи на AIHA). То може да бъде идиопатично (неизвестна причина) или симптоматично. Идиопатичният вариант е по-често при хора в напреднала и сенилна възраст (60-80 години), докато симптоматичният вариант може да се появи в детството и юношеството, усложнявайки хода на микоплазмена пневмония, инфекциозна мононуклеоза, легионелоза, както и системни автоимунни заболявания (системен лупус). еритематозус, ревматоиден артрит). При възрастните хора AIHA със студови аглутинини често се свързва с лимфопролиферативни заболявания като хронична лимфоцитна левкемия и макроглобулинемия на Waldenström.

Студените аглутинини са най-често IgM, по-рядко са представени от смес от имуноглобулини от различни класове. Те се свързват с мембраната на червените кръвни клетки при ниски температури и прикрепят комплемент, семейство от серумни протеини, които унищожават маркирани с антитела клетки. След добавянето на комплемента върху еритроцитната мембрана се образува мембранно-увреждащ комплекс, образуването на който води до образуването на голям брой пори в клетъчната мембрана, нейното подуване и разрушаване.

Като лабораторен маркер за автоимунна хемолиза, причинена от студови аглутинини, е препоръчително да се използва откриването в кръвния серум на пациента на антитела, водещи до аглутинация на еритроцитите по време на инкубация при ниски температури.

Модерен метод за изследване на студените аглутинини е гел аглутинационният тест. Суспензия от донорни еритроцити се добавя към микроепруветки, съдържащи неутрален гел. След това добавете изследвания серум и инкубирайте при температура 2-8 °C. При наличие на студени аглутинини в изследвания серум по време на инкубация при ниски температури, те се свързват с еритроцитите и предизвикват тяхната аглутинация. Резултатът от изследването се оценява след центрофугиране, при което се разделят аглутинираните и неаглутинираните еритроцити. Неаглутинираните еритроцити имат размер, сравним с размера на частиците на гела, и свободно преминават през тях под действието на центробежна сила, образувайки компактна червена утайка на дъното на микроепруветката, а аглутинираните еритроцити, поради големия си размер, остават върху повърхността на гела или в неговата дебелина.

За какво се използват изследванията?

• За откриване на антиеритроцитни антитела в кръвния серум на пациента, които причиняват хемолиза при ниски температури.

Кога е насрочено изследването?

• Ако се подозира автоимунна хемолитична анемия със студови аглутинини: характерна черта на заболяването е лошата студена толерантност, когато се появят основните симптоми.

Какво означават резултатите?

Референтни стойности:не е открит.

• Отрицателен резултат - клетките образуват компактна утайка на дъното на микроепруветката - показва липсата на студени аглутинини в тестовия серум.
• Положителен резултат - аглутинираните клетки образуват червен слой на повърхността или в дебелината на гела - показва наличието на студени антитела в тестовия серум.

Какво може да повлияе на резултата?

• В ниски титри студовите аглутинини могат да се открият и при здрави хора.



Важни бележки

• При автоимунна хемолитична анемия със студени аглутинини се получава автоаглутинация на еритроцитите при стайна температура, което създава проблеми и води до неправилни резултати при определяне на кръвната група и изчисляване на параметрите на периферната кръв (брой на еритроцитите и еритроцитни индекси). Тази аглутинация е обратима при 37 ° C, така че когато кръвта се нагрее до телесна температура, проблемите по време на изследването се елиминират.

RBC аглутинацията е биохимичен процес на агрегация, адхезия и утаяване на червени кръвни клетки, протичащ in vitro или in vivo.

Терминът "аглутинация" в превод от латински "agglutinatio" означава "залепване". В биологичните системи или лабораторния анализ това е свързването и агрегацията на органични частици (бактерии, сперматозоиди, кръвни клетки), които имат аглутиногенни антигени на повърхността си, когато взаимодействат със специфични аглутининови антитела. Полученият агломерат се нарича аглутинат.

Дори обикновено антитела и антигени, които не причиняват залепване, могат да присъстват в човешката кръв. Това са компоненти на антигенната система ABO, които съответстват на кръвната група, антитела, които се появяват като имунен отговор, когато определени бактерии или други патогени на инфекциозни заболявания (дизентерия, коремен тиф) навлизат в тялото.

RBC аглутинация

Реакцията на аглутинация според механизма е пряка (активна) и индиректна (пасивна). Ефектът на директната аглутинация се проявява в тялото или пробата, когато антигените на структурната мембрана на еритроцитите започват да взаимодействат със собствените антитела на плазмата или компонентите на бактериалните клетки.

Директната аглутинация се използва при клинични изследвания, определяне на кръвната група или наличието на Rh фактор. Ефектът на пасивното свързване се използва широко за диагностициране на инфекциозни заболявания (бактериални, вирусни).

Защо възниква аглутинация на еритроцитите?

Аглутинацията на еритроцитната маса става следствие от биохимичното взаимодействие на антигенни молекули, локализирани в структурата на мембраната на кръвните клетки, с антитела в плазмата. Това намалява естествения отрицателен заряд на еритроцитите, настъпва тяхната конвергенция. Молекули аглутинин, които не отговарят на кръвната група, могат да образуват "мостове" между червените кръвни клетки. В резултат на това се образува тромб, развива се хемолитична болест, до фатален изход.

Свързването на еритроцитите (реакция на хемаглутинация - RHA) се дължи на различни фактори, които зависят от естеството на аглутиниращия агент на повърхността на единния елемент или в плазмата:

• Студови аглутинини. Те могат да бъдат намерени в кръвта при заболявания, причинени от вируси и бактерии, някои неоплазми и хипотермия, причинявайки симптоми на интраваскуларна хемолиза. В нисък титър студените аглутинини могат да се открият и при здрави хора, без да причиняват забележими хемолитични прояви. По химическа природа това са, като правило, имуноглобулинови протеини (най-често IgM). Те се активират, когато температурата падне под 37 ° C, например, когато кръвта навлезе в горните или долните крайници или други части на тялото, които са склонни към хипотермия. Студените аглутинини, в зависимост от вида, могат да бъдат активни и локализирани по различни начини: да действат в широк или тесен температурен диапазон, да останат фиксирани върху повърхността на еритроцита, когато температурата се възстанови, или да бъдат в плазмата.
• еритроцитни антигени. Днес са идентифицирани повече от 400 антигенни системи, чиято комбинация е индивидуална за човек. Повечето от тях имат слаби антигенни свойства и не предизвикват забележима аглутинация на еритроцитите. Най-критичните при кръвопреливане са ABO системите и Rh аксесоарите, чиято несъвместимост може да доведе до слепване на кръвни клетки с последващ хемотрансфузионен шок.
• Хемаглутиногени, които определят кръвната група. В структурата на еритроцитните мембрани има специфични маркери-антигени с гликопротеинова природа (аглутиногени А и В), а в плазмата има специфични имуноглобулинови вещества-антитела (аглутинини алфа и бета). Една от четири възможни комбинации от тези антигени и антитела определя кръвната група, която е генетично обусловена и не може да се променя през целия живот. Аглутиногените и едноименните аглутинини не могат да присъстват в човешкото тяло едновременно, в противен случай еритроцитите се слепват заедно с последваща хемолиза. Това е една от генетично развитите реакции на организма, насочени към запазване на антигенната индивидуалност и основния принцип на кръвопреливането.

• Антигени на системата резус . Rh антигените (Rh) по химическа природа са липопротеини. Антигените на Rh-системата са представени от няколко типа (C, E, D), като най-силният от тях е D-тип. Хората, които имат такъв антиген, се наричат ​​Rh-положителни, останалите съответно са Rh-отрицателни. Плазмата обикновено не съдържа антитела срещу Rh антигени. Те се появяват поради нарушение на правилата за кръвопреливане и в случай на резус конфликт по време на бременност.
• Вирусна и бактериална аглутинация на еритроцитите. Агрегацията на червени кръвни клетки при определени вирусни или бактериални заболявания може да се дължи на директното взаимодействие на вируса или бактериите с повърхностните структурни молекули на червените кръвни клетки или поради реакцията с титъра на имунизирания серум на червените кръвни клетки, специално сенсибилизирани с желания антиген (ин витро). Аглутинацията на кръвните клетки възниква след адсорбцията на вируса върху повърхността на еритроцита. При повечето вируси хемаглутининът е структурен компонент на вириона.

Специфични маркери антигени от гликопротеинова природа (аглутиногени А и В)

Лабораторни методи, базирани на реакции на аглутинация

Реакциите на аглутинация имат диагностична стойност. Това са серологични методи за откриване и изследване на антитела или антигени, присъстващи в титъра на серума на пациента, въз основа на имунологични реакции, идентифициране на антигенни маркери на бактерии и вируси и определяне на антигенната структура на микробен патоген.

Реакциите на непряка или пасивна хемаглутинация (IPHA или RNHA) са в основата на методите за идентифициране на определени антигени или антитела в кръвта на пациента. Този метод се използва за идентифициране на причинителя на инфекциозно заболяване, качествено и количествено определяне на гонадотропен хормон в случай на съмнение за бременност. От оборудването се използват предметни стъкла, стерилни епруветки, пластмасови плаки с ямки-клетки.

Основният реагент е така нареченият еритроцитен диагностикум (ЕД), който може да се направи по два принципа:

• антигенна ЕД (използвана по-често);
• антитяло ED.

В зависимост от вида на диагностикума, на повърхността на еритроцитната клетка се адсорбира идентифициран антиген или антитяло, което при последваща реакция със съответните антитела или антигени на кръвния серум на пациента провокира адхезията на униформени елементи и образуването на седимент, подобен на миди, който равномерно покрива дъното на тръбата или клетката. Ако пробата е отрицателна, тогава утайката на дъното на епруветката ще бъде от различен тип.

За RPHA се прави диагностикум на базата на човешки или животински кръвни клетки (заек, овен, плъх, кон), които са третирани с формалдехид или други реактиви за консервиране. Самите еритроцити се сенсибилизират със специални препарати (танин, хромен хлорид, риванол) за повишаване на адсорбционната им способност.

Обратният процес е реакцията на инхибиране на хемаглутинацията

Някои вируси (грип, рубеола, морбили, аденовируси, чума по говедата) могат да провокират аглутинация на образуваните елементи. Методите за диагностициране на такива вирусни заболявания се основават на реакции, които спират този процес. Антивирусните антитела на предварително имунизирания серум противодействат на вирусите, като ги карат да загубят способността си да предизвикват слепване на еритроцитите.

Антиглобулинов тест - реакция на Кумбс

Тестът на Coombs се провежда за идентифициране на непълни антитела, които са локализирани в структурата на мембраната на еритроцитите и причиняват аглутинация, когато се добави специален антиглобулинов серум. Има директни и косвени реакции на Кумбс. Извършва се директен антиглобулинов тест, ако се подозира наличието на такива непълни антитела върху повърхността на червените кръвни клетки.

Провежда се индиректен тест на Coombs, като първо се сенсибилизира еритроцита с подходящо антитяло и след това се инжектира антиглобулиновата съставка. Извършва се при диагностициране на хемолитично заболяване с автоимунен курс или при новородени, за да се установи Rh конфликт между майка (Rh-отрицателен) и дете (Rh-положителен).

Индиректната реакция на Coombs се използва широко от трансфузиолозите, тъй като позволява да се определи с висока точност съвместимостта на донорния материал с кръвта на реципиента чрез еритроцитни антигени.

Повече ▼:

Назначаване на имуноглобулин при Rh конфликт, показания и противопоказания

Има две форми на това заболяване: студова аглутинова болест и пароксизмална студова хемоглобинурия. И при двете вътресъдовата имунна хемолиза може да бъде първична или вторична. В последния случай се развива на фона на вирусни инфекции (например инфекциозна мононуклеоза), малария, микоплазмена пневмония, хемобластоза или колагеноза. Автоимунната хемолитична анемия, причинена от първична интраваскуларна хемолиза, обикновено е хронична.

3. Студова аглутинова болест, дължаща се на вторична интраваскуларна хемолизаВъзниква при много заболявания: инфекции (микоплазмална пневмония, инфекциозна мононуклеоза, морбили, паротит и други вирусни инфекции, трипаносомоза и малария), колагенози (рядко), хемобластози (не-ходжкинни лимфоми Саркома. Трябва да се подчертае, че при тези заболявания студените аглутинини се откриват много по-често, отколкото се наблюдава хемолиза. Във всички тези случаи първо се лекува основното заболяване. В противен случай лечението е същото като при болестта на студовия аглутинин, причинена от първична интраваскуларна хемолиза.

4. Пароксизмална студена хемоглобинурия- рядка форма на автоимунна хемолитична анемия. Хемолизата при това заболяване възниква в резултат на двуфазна реакция, включваща IgG, които се наричат ​​антитела на Donath-Landsteiner. В първата фаза IgG се свързва с еритроцитите при ниска температура и фиксира комплемента. Във втората фаза при температура 37°С настъпва активиране на комплемента, което води до хемолиза. Антителата на Donat-Landsteiner са специфични за P-антигена на еритроцитите.

А.клинична картина.Пароксизмалната студена хемоглобинурия често се среща при пациенти със сифилис, особено вроден, може да усложни вирусни инфекции (морбили, паротит, варицела, инфекциозна мононуклеоза, грип), понякога е първичен. Интраваскуларната хемолиза се развива, когато пациентът се затопли след хипотермия. Прогнозата е благоприятна. Обикновено пациентите се възстановяват сами. Понякога заболяването протича дълго време с периодични хемолитични кризи.

b.Лабораторни изследвания.Лабораторната диагноза на пароксизмална студова хемоглобинурия се основава на откриването на антитела на Donat-Landsteiner. За да направите това, 1) серумът на пациента се смесва с нормални еритроцити от група 0; 2) инкубирани за 30 минути при 4°C (за фиксиране на антитела и комплемент върху еритроцитите); 3) инкубирани за 30 минути при 37°C (за активиране на комплемента). Като отрицателна контрола използвайте: 1) проба с топлинно инактивиран (за отстраняване на комплемента) серум на пациента; 2) проба със серум на пациент, инкубиран с еритроцити от група 0 в обратен ред (първо при 37°C, след това при 4°C).

V.Лечение. Пациентите трябва да избягват хипотермия.Кортикостероидите и спленектомията са неефективни. Ако е необходимо преливане на червени кръвни клетки, те се затоплят. Не забравяйте да лекувате основното заболяване.

Тестът за студен аглутинин е кръвен тест, който измерва количеството на тези антитела в тялото. Студовите аглутинини се произвеждат от телата ни в отговор на инфекция. Те карат червените кръвни клетки да се слепват при ниски температури. Здравите хора са склонни да имат ниски нива на студени антитела в кръвта си. Но лимфомът и някои инфекции (ТОРС) повишават нивата на студов аглутинин.

Леко повишените нива на студови аглутинини обикновено не причиняват сериозни проблеми. Понякога студените аглутинини събират червени кръвни клетки в групи, които се забиват в съдове, разположени близо до охладената кожа. Това може да доведе до побеляване на кожата и изтръпване. В напреднали случаи (при изключително продължителна хипотермия) това може да доведе до гангрена.

Защо да измерваме студените аглутинини?

Тестът за студен аглутинин се извършва за:

• Разберете дали студовите антитела са причина за автоимунна хемолитична анемия;
• Диагностицирайте ТОРС.

Нашата клиника разполага със специалисти в тази област.

(4 специалисти)

2. Как се подготвя и как се извършва анализът?

Как да се подготвя за тест за студен аглутинин?

Не е необходима подготовка преди изследването за антитела срещу настинка.

Как се извършва тестът за студен аглутинин?

Нивото на студовите антитела се измерва след вземане на кръв от вената. Вземането на кръв се извършва по стандартната процедура.

3. Какви са рисковете и какво може да повлияе на анализа?

Какви са рисковете от теста за студен аглутинин?

Възможните рискове от кръвен тест за студови антитела могат да бъдат свързани само със самото вземане на кръвна проба. По-специално, синини на мястото на пункцията и възпаление на вената (флебит). Топлите компреси няколко пъти на ден ще ви избавят от флебита. Ако приемате лекарства за разреждане на кръвта, може да получите кървене на мястото на пункцията.

Какво може да попречи на теста за студен аглутинин?

Резултатът от теста за студов аглутинин няма да бъде точен, ако приемате антибиотици, особено пеницилини и цефалоспорини.

Какво си струва да знаете?

Повече от половината от хората, които страдат от ТОРС, имат високи нива на студови антитела. Други, по-надеждни тестове обаче се използват по-често за диагностициране на SARS.

Ако по време на пълна кръвна картина се открият свързани червени кръвни клетки, лекарят може да изиска тест за студен аглутинин.

Кръвната група е по-трудна за определяне при високо ниво на аглутинин.

Ако човек има високо съдържание на студени аглутинини, докато не е бил изложен на ниски температури, тогава той трябва да се затопли. Високите нива на студови аглутинини могат да доведат до анемия, измръзване или болест на Рейно.