анаеробни микроби. Аеробни и анаеробни бактерии

1. Генетични и биохимични механизми на лекарствена резистентност. Начин за преодоляване на лекарствената резистентност на бактериите.
2. Разбиране за „инфекция“, „инфекциозен процес“, „инфекциозно заболяване“. Условия за възникване на инфекциозно заболяване.
1. Рационална антибиотична терапия. Странични ефекти на антибиотиците върху човешкия организъм и микроорганизмите. Образуване на антибиотик-резистентни и антибиотик-зависими форми на бактерии.
2. Реакция на утаяване и нейните разновидности. Механизъм и методи на настройка, практическо приложение.
1. Методи за определяне на чувствителността на бактериите към антибиотици. Определяне на концентрацията на антибиотици в урина, кръв.
2. Основните клетки на имунната система: t, b-лимфоцити, макрофаги, субпопулации на t-клетки, техните характеристики и функции.
1. Механизми на действие на антибиотиците върху микробната клетка. Бактерицидно действие и бактериостатично действие на антибиотиците. Мерни единици за антимикробната активност на антибиотик.
2. Реакция на имунен лизис като един от механизмите за унищожаване на микроби, компоненти на реакцията, практическо приложение.
3. Причинителят на сифилис, таксономия, характеристики на биологичните свойства, фактори на патогенност. Епидемология и патогенеза. Микробиологична диагностика.
1. Методи за култивиране на бактериофаги, тяхното титруване (според Grazia и Appelman).
2. Клетъчно сътрудничество между t, b-лимфоцити и макрофаги в процеса на хуморален и клетъчен имунен отговор.
1.Дишане на бактериите. Аеробни и анаеробни видове биологично окисление. Аероби, анаероби, факултативни анаероби, микроаерофили.
1. Действие върху микроорганизмите на биологични фактори. Антагонизъм в микробни биоценози, бактериоцини.
3. Бордетела. Таксономия, характеристика на биологичните свойства, фактори на патогенност. Заболявания, причинени от Bordetella. патогенеза на магарешка кашлица. Лабораторна диагностика, специфична профилактика.
1. Понятието бактерии. Автотрофи и хетеротрофи. Холофитен начин на хранене на бактерии. Механизми на пренос на хранителни вещества в бактериална клетка.
2. Антигенна структура на бактериална клетка. Основните свойства на микробните антигени са локализация, химичен състав и специфичност на антигени на бактерии, токсини, ензими.
1. Антибиотици. История на откритията. Класификация на антибиотиците според методите на получаване, произход, химична структура, механизъм на действие, спектър на антимикробно действие.
3. Грипни вируси, таксономия, обща характеристика, антигени, видове изменчивост. Епидемиология и патогенеза на грипа, лабораторна диагностика. Специфична профилактика и лечение на грип.
2. Серологичен метод за диагностика на инфекциозни заболявания, неговата оценка.
3. Диарейни ешерихии, техните разновидности, фактори на патогенност, заболявания, причинени от тях, лабораторна диагностика.
1. Обща характеристика на гъбите, тяхната класификация. роля в човешката патология. Приложни аспекти на изследването.
3. Ешерихии, тяхната роля като нормален обитател на червата. Санитарно-показателни стойности на Escherichia за вода и почва. Escherichia като етиологичен фактор на гнойно-възпалителни заболявания при хората.
1. Използването на бактериофаги в микробиологията и медицината за диагностика, профилактика и лечение на инфекциозни заболявания.
2. Токсини Бактерии: ендотоксин и екзотоксини. Класификация на екзотоксините, химичен състав, свойства, механизъм на действие. Разлики между ендотоксини и екзотоксини.
3. Микоплазми, таксономия, патогенни за човека видове. Характеристика на техните биологични свойства, фактори на патогенност. патогенеза и имунитет. Лабораторна диагностика. Профилактика и терапия.
1. Лабораторна диагностика на дисбиоза. Лекарства, използвани за профилактика и лечение на дисбактериоза.
2. Имунофлуоресценция в диагностиката на инфекциозни заболявания. Преки и косвени методи. Необходими лекарства.
3. Вирус на кърлежов енцефалит, таксономия, обща характеристика. Епидемиология и патогенеза, лабораторна диагностика, специфична профилактика на кърлежов енцефалит.
1. Характеристики на структурата на рикетсии, микоплазми и хламидии. Методи за тяхното отглеждане.
2. Биологични продукти, използвани за специфична профилактика и лечение на инфекциозни заболявания: ваксини.
3. Салмонела, таксономия. Причинител на коремен тиф и паратиф. Епидемиология на патогенезата на коремния тиф. Лабораторна диагностика. специфична профилактика.
2. Антигенна структура на токсини, вируси, ензими: тяхната локализация, химичен състав и специфичност. Анатоксини.
3. Вируси-причинители на остри респираторни заболявания. Парамиксовируси, обща характеристика на семейството, причинени заболявания. Патогенеза на морбили, специфична профилактика.
1. Възпроизвеждане на вируси (дизюнктивно размножаване). Основните етапи на взаимодействие на вируса с клетката гостоприемник при продуктивния тип инфекция. Характеристики на възпроизвеждането на ДНК и РНК-съдържащи вируси.
2. Понятие за раневи, дихателни, чревни, кръвни и урогенитални инфекции. Антропонози и зоонози. Механизми на предаване на инфекцията.
3. Clostridium tetanus, таксономия, характеристики на биологичните свойства, фактори на патогенност. Епидемиология и патогенеза на тетанус. Лабораторна диагностика, специфична терапия и профилактика.
1. Микрофлора на кожата, устната кухина на здрав човек. Микрофлора на лигавиците на дихателните пътища, пикочно-половия тракт и очите. Техният смисъл в живота.
2. Вътрематочни инфекции. Етиология, начини на предаване на инфекцията на плода. Лабораторна диагностика, превантивни мерки.
1. Видове взаимодействие на вируси с клетка: интегративно и автономно.
2. Система на комплемента, класически и алтернативен начин за активиране на комплемента. Методи за определяне на комплемента в кръвния серум.
3. Хранителна бактериална интоксикация от стафилококова природа. Патогенеза, характеристики на лабораторната диагностика.
1. Действие върху микроорганизмите на химичните фактори. Асептика и дезинфекция. Механизмът на действие на различни групи антисептици.
2. Ваксини живи убити, химически, анатоксини, синтетични, модерни. Принципи на получаване, механизми на създаден имунитет. адюванти във ваксините.
3. Klebsiela, таксономия, характеристики на биологичните свойства, фактори на патогенност, роля в човешката патология. Лабораторна диагностика.
1. Дисбактериоза, причини, фактори за нейното образуване. етапи на дисбактериоза. Лабораторна диагностика, специфична профилактика и терапия.
2. Ролята на неутрализирането на токсина от токсоид. Практическа употреба.
3. Пикорновируси, класификация, характеристика на полиомиелитните вируси. Епидемиология и патогенеза, имунитет. Лабораторна диагностика, специфична профилактика.
1. Видове изменчивост при бактериите: модификация и генотипна изменчивост. Мутации, видове мутации, механизми на мутациите, мутагени.
2. Локален противоинфекциозен имунитет. Ролята на секреторните антитела.
3. Хранителни бактериални токсични инфекции, причинени от Eschirichia, Proteus, Staphylococcus, анаеробни бактерии. Патогенеза, лабораторна диагностика.
2. Централни и периферни органи на имунната система. Възрастови характеристики на имунната система.
1. Цитоплазмената мембрана на бактериите, нейната структура, функции.
2. Неспецифични фактори на антивирусния имунитет: антивирусни инхибитори, интерферони (видове, механизъм на действие).
1. Протопласти, сферопласти, l-форми на бактерии.
2. Клетъчен имунен отговор при антиинфекциозна защита. Взаимодействие между Т-лимфоцити и макрофаги по време на имунния отговор. Начини за откриването му. Алергичен диагностичен метод.
3. Хепатит а вирус, таксономия, характеристика на биологичните свойства. Епидемиология и патогенеза на болестта на Botkin. Лабораторна диагностика. специфична профилактика.
2. Антитела, основни класове имуноглобулини, техните структурни и функционални особености. Защитна роля на антителата в антиинфекциозния имунитет.
3. Вируси на хепатит С и Е, таксономия, характеристика на биологичните свойства. Епидемиология и патогенеза, лабораторна диагностика.
1. Спори, капсули, власинки, флагели. Тяхната структура, химичен състав, функции, методи за откриване.
2. Пълни и непълни антитела, автоантитела. Концепцията за моноклонални антитела, хибридома.
1. Морфология на бактериите. Основни форми на бактерии. Структурата и химичният състав на различни структури на бактериална клетка: нуклеотид, мезозоми, рибозоми, цитоплазмени включвания, техните функции.
2. Патогенетични особености на вирусните инфекции. Инфекциозни свойства на вирусите. Остра и персистираща вирусна инфекция.
1. Прокариоти и еукариоти, техните различия в структурата, химичния състав и функция.
3. Тогавируси, тяхната класификация. Вирус на рубеола, неговите характеристики, патогенеза на заболяването при бременни жени. Лабораторна диагностика.
1. Бактериални плазмиди, видове плазмиди, тяхната роля в определянето на патогенните характеристики и лекарствената резистентност на бактериите.
2. Динамика на образуване на антитела, първичен и вторичен имунен отговор.
3. Candida дрожди, техните свойства, диференциращи характеристики, видове Candida гъбички. роля в човешката патология. Условия, благоприятстващи появата на кандидоза. Лабораторна диагностика.
1.Основни принципи на систематиката на микроорганизмите. Таксономични критерии: царство, отдел, семейство, родови видове. Концепцията за щам, клонинг, популация.
2. Понятието имунитет. Класификация на различни форми на имунитет.
3. Протей, таксономия, свойства на протея, фактори на патогенност. роля в човешката патология. Лабораторна диагностика. Специфична имунотерапия, фаготерапия.
1. Микрофлора на новородени, нейното формиране през първата година от живота. Влиянието на кърмата и изкуственото хранене върху състава на микрофлората на детето.
2. Интерфероните като фактори на антивирусния имунитет. Видове интерферони, методи за получаване на интерферони и практическо приложение.
3. Streptococcus pneumoniae (pneumococcus), таксономия, биологични свойства, фактори на патогенност, роля в човешката патология. Лабораторна диагностика.
1. Характеристики на структурата на актиномицети, спирохети. Методи за тяхното откриване.
2. Характеристики на антивирусния имунитет. Вроден и придобит имунитет. Клетъчни и хуморални механизми на вродения и придобит имунитет.
3. Ентеробактерии, класификация, обща характеристика на биологичните свойства. Антигенна структура, екология.
1. Методи за култивиране на вируси: в клетъчни култури, пилешки ембриони, в животни. Тяхната оценка.
2. Реакция на аглутинация при диагностика на инфекции. Механизми, диагностична стойност. Аглутиниращи серуми (комплексни и монорецепторни), диагностикуми. Реакции на натоварване на имунната система.
3. Campylobacter, таксономия, обща характеристика, причинени заболявания, тяхната патогенеза, епидемиология, лабораторна диагностика, профилактика.
1. Бактериологичен метод за диагностика на инфекциозни заболявания, етапи.
3. Онкогенни ДНК вируси. Обща характеристика. Вирогенетична теория за произхода на тумора L.A. Зилбер. Съвременна теория за канцерогенезата.
1. Основни принципи и методи за култивиране на бактерии. Хранителни среди и тяхната класификация. Колонии в различни видове бактерии, културни свойства.
2. Ензимен имуноанализ. Компоненти на реакцията, варианти на нейното използване в лабораторната диагностика на инфекциозни заболявания.
3. HIV вируси. История на откритията. Обща характеристика на вирусите. Епидемиология и патогенеза на заболяването, клиника. Методи за лабораторна диагностика. Проблемът е специфичната профилактика.
1. Организация на генетичния материал на бактериална клетка: бактериална хромозома, плазмиди, транспозони. Генотип и фенотип на бактериите.
2. Реакция на неутрализиране на вируса. Опции за неутрализиране на вируси, обхват.
3. Йерсиния, таксономия. Характеристика на патогена на чумата, фактори на патогенност. Епидемиология и патогенеза на чумата. Методи за лабораторна диагностика, специфична профилактика и терапия.
1. Растеж и размножаване на бактерии. Фази на размножаване на бактериални популации в течна хранителна среда при стационарни условия.
2. Серотерапия и серопрофилактика. Характеризиране на анатотоксични и антимикробни серуми, имуноглобулини. Тяхното приготвяне и титруване.
3. Ротавируси, класификация, обща характеристика на семейството. Ролята на ротавирусите в чревната патология на възрастни и деца. Патогенеза, лабораторна диагностика.
2. Реакция на свързване на комплемента при диагностика на инфекциозни заболявания. Реакционни компоненти, практическо приложение.
3. Вирус на хепатит b и d, делта вируси, таксономия. Обща характеристика на вирусите. Епидемиология и патогенеза на хепатит В и др. Лабораторна диагностика, специфична профилактика.
1. Генетични рекомбинации: трансформация, трансдукция, конюгация. От видовете и механизма.
2. Начини на проникване на микроби в организма. Критични дози микроби, които причиняват инфекциозно заболяване. Входна врата на инфекция. Начини на разпространение на микроби и токсини в тялото.
3. Вирус на бяс. Таксономия, обща характеристика. Епидемиология и патогенеза на вируса на бяс.
1. Микрофлора на човешкото тяло. Неговата роля в нормалните физиологични процеси и патология. Чревна микрофлора.
2. Индикация на микробни антигени в патологичен материал чрез имунологични реакции.
3. Пикорнавируси, таксономия, обща характеристика на семейството. Заболявания, причинени от вирусите Coxsackie и Echo. Лабораторна диагностика.
1. Микрофлора на атмосферния въздух, жилищни помещения и болници. Санитарно-показателни въздушни микроорганизми. Начини на проникване и оцеляване на микробите във въздуха.
2. Клетъчни неспецифични защитни фактори: нереактивност на клетките и тъканите, фагоцитоза, естествени килъри.
3. Yersinia pseudotuberculosis и ентероколит, таксономия, характеристики на биологичните свойства, фактори на патогенност. Епидемиология и патогенеза на псевдотръбата
1. Вируси: морфология и структура на вирусите, техния химичен състав. Принципи на класификация на вирусите, значение в човешката патология.
3. Leptospira, таксономия, характеристики на биологичните свойства, фактори на патогенност. Патогенезата на лептоспирозата. Лабораторна диагностика.
1. Умерени бактериофаги, тяхното взаимодействие с бактериална клетка. Явлението лизогения, фагово превръщане, значението на тези явления.

1.Дишане на бактериите. Аеробни и анаеробни видове биологично окисление. Аероби, анаероби, факултативни анаероби, микроаерофили.

Според видовете дишане се разделят на няколко групи

1) аероби, за които е необходим молекулярен кислород

2) облигатните аероби не са способни да растат при липса на кислород, тъй като го използват като акцептор на електрони.

3). микроаерофили - способни да растат в присъствието на малка концентрация на О2 (до 2%) 4) анаеробите не се нуждаят от свободен кислород, необходимите Е те се получават чрез разделяне в-в, съдържащ голям запас от латентни д

5) задължителни анаероби - не понасят дори малко количество кислород (клостридиални)

6) факултативни анаероби - адаптирали са се към съществуване както в кислородсъдържащи, така и в аноксични условия. Процесът на дишане при микробите е субстратно фосфорилиране или ферментация: гликолиза, фосфогликонатен път и кетодеоксифосфогликонатен път. Видове ферментация: млечна киселина (бифидобактерии), мравчена киселина (ентеробактерии), маслена киселина (клостридии), пропионова киселина (пропионобактерии),

2. Антигени, определение, условия за антигенност. Антигенни детерминанти, тяхната структура. Имунохимична специфичност на антигените: вид, група, тип, орган, хетероспецифични. Пълни антигени, хаптени, техните свойства.

Антигените са съединения с високо молекулно тегло.

При поглъщане те предизвикват имунна реакция и взаимодействат с продуктите на тази реакция.

Касификация на антигени. 1. По произход:

естествени (протеини, въглехидрати, нуклеинови киселини, бактериални екзо- и ендотоксини, антигени на тъкани и кръвни клетки);

изкуствени (динитрофенилирани протеини и въглехидрати);

синтетични (синтезирани полиаминокиселини).

2. По химическа природа:

протеини (хормони, ензими и др.);

въглехидрати (декстран);

нуклеинови киселини (ДНК, РНК);

конюгирани антигени;

полипептиди (полимери на а-аминокиселини);

липиди (холестерол, лецитин).

3. По генетична връзка:

автоантигени (от тъканите на собственото тяло);

изоантигени (от генетично идентичен донор);

алоантигени от несвързан донор от същия вид)

4. По естеството на имунния отговор:

1) ксеноантигени (от донор от друг вид). тимус-зависими антигени;

2) тимус-независими антигени.

Също така има:

външни антигени (влизат в тялото отвън);

вътрешни антигени; възникват от увредени телесни молекули, които се разпознават като чужди

скрити антигени - специфични антигени

(напр. нервна тъкан, протеини на лещата и сперматозоиди); анатомично отделени от имунната система чрез хистохематични бариери по време на ембриогенезата.

Хаптените са субстанции с ниско молекулно тегло, които не предизвикват имунен отговор при нормални условия, но когато се свържат с молекули с високо молекулно тегло, стават имуногенни.

Инфекциозните антигени са антигени на бактерии, вируси, гъбички, протеи.

Разновидности на бактериални антигени:

специфични за групата;

видово специфични;

специфични за типа.

Според локализацията в бактериалната клетка те разграничават:

O - AG - полизахарид (част от клетъчната стена на бактериите);

липидА - хетеродимер; съдържа глюкозамин и мастни киселини;

H - AG; е част от бактериалните флагели;

K - AG - хетерогенна група от повърхностни, капсулни антигени на бактерии;

токсини, нуклеопротеини, рибозоми и бактериални ензими.

3. Стрептококи, таксономия, класификация по Lanefield. Характеристика на биологичните свойства, факторите на патогенност на стрептококите. Ролята на стрептококите от група А в човешката патология. Характеристики на имунитета. Лабораторна диагностика на стрептококова инфекция.

Семейство Streptococcacea

Род Streptococcus

Според Lesfield (класът е базиран на различни видове хемолиза): гр. A (Str. Pyogenes) гр. B (Str. Agalactiae-следродилни и урогенитални инфекции, мастит, вагинит, сепсис и менингит при новородени.), група C (Str. Equisimilis), група D (Enterococcus, Str. Fecalis). Gr.A - остър инфекциозен процес с алергичен компонент (скарлатина, еризипел, миокардит), grB - основният патоген при животните, причинява сепсис при деца. GrS-har-n ин-хемолиза (причиняваща патология на възстановителния тракт) GrD-поз. всички видове хемолиза, които са нормални жители на човешкото черво. Това са сферични клетки, подредени по двойки gr +, хемоорганотрофи, взискателни към храненето. Сряда, разм-ся на кръв или сах. агар, малки колонии се образуват върху твърда среда, растеж близо до дъното върху течност, оставяйки средата прозрачна. от хар-ру растеж върху кръвен агар: алфа хемолиза (малка област на хемолиза със зелено-сив цвят), бета-хем (прозрачен), нехемолен. Аеробите не образуват каталаза.

F-ry pat-tee 1)клас стена - някои имат капсула.

2) f-r адхезия-teihoy към-ти

3) протеин М-защитен, предотвратява фагоцитозата

4) редица токсини: еритрогенно-скарлатина, О-стрептолизин = хемолизин, левкоцидин 5) цитотоксини.

диагностика: 1) b / l: гной, слуз от фаринкса - сеитба на покрива. агар (наличие / отсъствие на зона на хемолиза), идентификация чрез Ag sv-you 2)b / s - намазки според Грам 3) s / l - потърсете Ab към O-стрептолизин в RSK или r-ii прецизно

Лечение:ин-лактам.а/б. Гр.А причиняващи гнойно възпаление, възпаление, придружено с обилно гнойно образуване, сепсис.

Анаероби(Гръцки отрицателен префикс an- + aē r въздух + b живот) - микроорганизми, които се развиват при липса на свободен кислород в тяхната среда. Те се намират в почти всички проби от патологичен материал при различни гнойно-възпалителни заболявания, те са условно патогенни, понякога патогенни. Разграничете факултативните и задължителните А. Факултативните А. могат да съществуват и да се размножават както в кислородна, така и в безкислородна среда. Те включват E. coli, Yersinia и Streptococcus, Shigella и други бактерии.

Задължителните А. умират в присъствието на свободен кислород в околната среда. Те се делят на две групи: бактерии, които образуват спори, или клостридии, и бактерии, които не образуват спори, или така наречените неклостридиални анаероби. Сред клостридиите се разграничават патогени на анаеробни клостридиални инфекции - a, клостридиална инфекция на рани, a. Неклостридиалните А. включват грам-отрицателни и грам-положителни пръчковидни или сферични бактерии: бактероиди, фузобактерии, вейлонела, пептококи, пептострептококи, пропионибактерии, еубактерии и др. Неклостридиалните А. са неразделна част от нормалната микрофлора на хора и животни, но в същото време играят важна роля в развитието на такива гнойно-възпалителни процеси като перитонит, белите дробове и мозъка, плеврата, флегмон на лицево-челюстната област и др. анаеробни инфекции, причинена от неклостридиални анаероби, се отнася до ендогенна и се развива главно с намаляване на съпротивителните сили на организма в резултат на травма, операция, охлаждане, нарушен имунитет.

Основната част от клинично значимите A. са бактероиди и фузобактерии, пептострептококи и спорови грам-положителни пръчици. Бактероидите представляват около половината от гнойно-възпалителните процеси, причинени от анаеробни бактерии.

Bacteroides (Bacteroides) - род грам-отрицателни облигатни анаеробни бактерии от семейство Bacteroidaceae, пръчици с биполярно оцветяване, размер 0,5-1,5´ 1-15 микрон, неподвижни или движещи се с помощта на перитрихични флагели, често имат полизахаридна капсула, която е вирулентен фактор. Те произвеждат различни токсини и ензими, които действат като вирулентни фактори. Те са хетерогенни по чувствителност към антибиотици: бактероидите, например групата B. fragilis, са устойчиви на бензилпеницилин. Бактероидите, устойчиви на b-лактамни антибиотици, произвеждат b-лактамази (пеницилинази и цефалоспоринази), които разрушават пеницилина и цефалоспорините. Бактероидите са чувствителни към някои имидазолови производни - метронидазол (трихопол,

flagil), тинидазол, орнидазол - лекарства, ефективни срещу различни групи анаеробни бактерии, както и хлорамфеникол и еритромицин. Бактероидите са устойчиви на аминогликозиди - гентамицин, канамицин, стрептомицин, полимиксин, олеандомицин. Значителна част от бактероидите са устойчиви на тетрациклини.

Fusobacteria (Fusobacterium) - род грам-отрицателни пръчковидни задължителни анаеробни бактерии; живеят върху лигавицата на устата и червата, неподвижни или подвижни, съдържат мощен ендотоксин. Най-често в патологичния материал се откриват F. nucleatum и F. necrophorum. Повечето фузобактерии са чувствителни към b-лактамни антибиотици, но има щамове, устойчиви на пеницилин. Fusobacteria, с изключение на F. varium, са чувствителни към клиндамицин.

Peptostreptococcus (Peptostreptococcus) е род Грам-положителни сферични бактерии; подредени по двойки, тетради, под формата на неправилни клъстери или вериги. Те нямат флагели, не образуват спори. Чувствителен към пеницилин, карбеницилин, цефалоспорини, хлорамфеникол, резистентен към метронидазол.

Peptococcus (Peptococcus) е род грам-положителни сферични бактерии, представен от един вид P. niger. Срещат се поединично, по двойки, понякога на гроздове. Камшичета и спори не се образуват.

Чувствителен към пеницилин, карбеницилин, еритромицин, клиндамицин, хлорамфеникол. Относително устойчив на метронидазол.

Veillonella - род грам-отрицателни анаеробни диплококи; подредени в къси вериги, неподвижни, не образуват спори. Чувствителен към пеницилин, хлорамфеникол, тетрациклин, полимиксин, еритромицин, резистентен към стрептомицин, неомицин, ванкомицин.

От другите неклостридиални анаеробни бактерии, изолирани от патологичния материал на пациенти, трябва да споменем грам-положителните пропионови бактерии, грам-отрицателната волинела и други, чието значение е по-малко проучено.

Clostridium е род грам-положителни анаеробни бактерии с форма на пръчка, образуващи спори. Клостридиите са широко разпространени в природата, особено в почвата, живеят и в стомашно-чревния тракт на хора и животни. Около десет вида клостридии са патогенни за хората и животните: C. perfringens, C. novyii, C. septicum, C. ramosum, C. botulirnim, C. tetani, C. difficile и др. Тези бактерии образуват екзотоксини, специфични за всеки вид с висока биологична активност, към която хората и много животински видове са чувствителни. C. difficile - подвижни, имащи перитрихални флагели, бактерии. Според редица изследователи тези бактерии, след нерационална антимикробна терапия, размножавайки се, могат да причинят псевдомембранозен. C. difficile са чувствителни към пеницилин, ампицилин, ванкомицин, рифампицин,

метронидазол; устойчиви на аминогликозиди.

Причинителят на анаеробна инфекция може да бъде всеки един вид бактерии, но по-често тези инфекции се причиняват от различни асоциации на микроби: анаеробно-анаеробни (бактероиди и фузобактерии); анаеробно-аеробни (бактероиди и

Бактериите присъстват навсякъде в нашия свят. Те са навсякъде и навсякъде, а броят на техните разновидности е просто невероятен.

В зависимост от необходимостта от наличие на кислород в хранителната среда за осъществяване на жизнената дейност микроорганизмите се класифицират в следните видове.

Задължителните аеробни бактерии, които се събират в горната част на хранителната среда, флората съдържат максимално количество кислород.
Облигатни анаеробни бактерии, които се намират в долната част на околната среда, възможно най-далече от кислорода.
Факултативните бактерии живеят главно в горната част, но могат да бъдат разпространени в околната среда, тъй като не зависят от кислорода.
Микроаерофилите предпочитат ниска концентрация на кислород, въпреки че се събират в горната част на околната среда.
Аеротолерантните анаероби са равномерно разпределени в хранителната среда, нечувствителни към наличието или отсъствието на кислород.

Концепцията за анаеробни бактерии и тяхната класификация

Терминът "анаероби" се появява през 1861 г. благодарение на работата на Луи Пастьор.

Анаеробните бактерии са микроорганизми, които се развиват независимо от наличието на кислород в хранителната среда. Те получават енергия чрез субстратно фосфорилиране. Има факултативни и облигатни аероби, както и други видове.

Най-важните анаероби са бактероидите

Най-важните аероби са бактероидите. Приблизително петдесет процента от всички гнойно-възпалителни процеси, чиито причинители могат да бъдат анаеробни бактерии, са бактероиди.

Bacteroides са род Грам-отрицателни облигатни анаеробни бактерии. Това са пръчки с биполярно оцветяване, чийто размер не надвишава 0,5-1,5 на 15 микрона. Те произвеждат токсини и ензими, които могат да причинят вирулентност. Различните бактероиди имат различна резистентност към антибиотици: има както резистентни, така и чувствителни към антибиотици.

Производство на енергия в човешките тъкани

Някои тъкани на живи организми имат повишена устойчивост на ниско съдържание на кислород. При стандартни условия синтезът на аденозинтрифосфат се извършва аеробно, но при повишено физическо натоварване и възпалителни реакции анаеробният механизъм излиза на преден план.

Аденозин трифосфат (АТФ)Това е киселина, която играе важна роля в производството на енергия в тялото. Има няколко варианта за синтез на това вещество: един аеробен и до три анаеробни.

Анаеробните механизми на синтеза на АТФ включват:

повторно фосфорилиране между креатин фосфат и ADP;
реакция на трансфосфорилиране на две ADP молекули;
анаеробно разграждане на запасите от кръвна глюкоза или гликоген.

Култивиране на анаеробни организми

Има специални методи за отглеждане на анаероби. Те се състоят в замяна на въздуха с газови смеси в запечатани термостати.

Друг начин е отглеждането на микроорганизми в хранителна среда, към която се добавят редуциращи вещества.

Хранителни среди за анаеробни организми

Има общи хранителни среди и диференциално диагностични хранителни среди. Често срещаните включват средата на Уилсън-Блеър и средата на Кит-Тароци. За диференциална диагностика - среда на Hiss, среда Ressel, среда Endo, среда Ploskirev и бисмут-сулфитен агар.

Основата за средата на Wilson-Blair е агар-агар с добавка на глюкоза, натриев сулфит и железен дихлорид. Черните колонии от анаероби се образуват главно в дълбочината на агаровата колона.

Средата на Ressel (Russell) се използва при изследване на биохимичните свойства на бактерии като Shigella и Salmonella. Съдържа още агар-агар и глюкоза.

Сряда Плоскиревинхибира растежа на много микроорганизми, така че се използва за диференциално диагностични цели. В такава среда патогените на коремен тиф, дизентерия и други патогенни бактерии се развиват добре.

Основната цел на бисмутовия сулфитен агар е изолирането на салмонела в чист вид. Тази среда се основава на способността на Salmonella да произвежда сероводород. Тази среда е подобна на средата на Уилсън-Блеър по използваната техника.

Анаеробни инфекции

Повечето анаеробни бактерии, живеещи в човешкото или животинското тяло, могат да причинят различни инфекции. По правило инфекцията възниква в период на отслабен имунитет или нарушение на общата микрофлора на тялото. Съществува и възможност за заразяване с патогени от външната среда, особено през късната есен и зимата.

Инфекциите, причинени от анаеробни бактерии, обикновено се свързват с флората на човешките лигавици, т.е. с основните местообитания на анаеробите. Обикновено тези инфекции няколко тригера наведнъж(до 10).

Точният брой на заболяванията, причинени от анаероби, е почти невъзможно да се определи поради трудността при събирането на материали за анализ, транспортирането на проби и култивирането на самите бактерии. Най-често този вид бактерии се срещат при хронични заболявания.

Анаеробните инфекции засягат хора от всички възрасти. В същото време нивото на инфекциозни заболявания при децата е по-високо.

Анаеробните бактерии могат да причинят различни интракраниални заболявания (менингит, абсцеси и други). Разпределението, като правило, става с кръвния поток. При хронични заболявания анаеробите могат да причинят патологии на главата и шията: среден отит, лимфаденит, абсцеси. Тези бактерии са опасни както за стомашно-чревния тракт, така и за белите дробове. При различни заболявания на урогениталната женска система също съществува риск от развитие на анаеробни инфекции. Различни заболявания на ставите и кожата могат да бъдат резултат от развитието на анаеробни бактерии.

Причини за анаеробни инфекции и техните симптоми

Инфекциите се причиняват от всички процеси, при които активни анаеробни бактерии навлизат в тъканите. Също така, развитието на инфекции може да причини нарушено кръвоснабдяване и тъканна некроза (различни наранявания, тумори, оток, съдови заболявания). Инфекции в устата, ухапвания от животни, белодробни заболявания, възпалителни заболявания на таза и много други заболявания също могат да бъдат причинени от анаероби.

В различните организми инфекцията се развива по различен начин. Това се влияе от вида на патогена и състоянието на човешкото здраве. Поради трудностите, свързани с диагностицирането на анаеробни инфекции, заключението често се основава на предположения. Те се различават по някои характеристики на инфекцията, причинена от неклостридиални анаероби.

Първите признаци на инфекция на тъканите с аероби са нагнояване, тромбофлебит, образуване на газове. Някои тумори и неоплазми (чревни, маточни и други) също са придружени от развитието на анаеробни микроорганизми. При анаеробни инфекции може да се появи неприятна миризма, но липсата му не изключва анаеробите като причинител на инфекцията.

Характеристики на получаване и транспортиране на проби

Първото изследване за определяне на инфекции, причинени от анаероби, е визуална проверка. Често усложнение са различни кожни лезии. Също така доказателство за жизнената активност на бактериите ще бъде наличието на газ в заразените тъкани.

За лабораторни изследвания и установяване на точна диагноза, на първо място, е необходимо компетентно вземете проба от материятаот засегнатата зона. За това се използва специална техника, благодарение на която нормалната флора не попада в пробите. Най-добрият метод е аспирация с права игла. Получаването на лабораторен материал чрез цитонамазка не се препоръчва, но е възможно.

Пробите, които не са подходящи за допълнителен анализ, включват:

храчки, получени чрез самоотделяне;
проби, получени по време на бронхоскопия;
намазки от влагалищните сводове;
урина със свободно уриниране;
изпражнения.

За изследване може да се използва:

кръв;
плеврална течност;
транстрахеални аспирати;
гной, получен от абсцесната кухина;
гръбначно-мозъчна течност;
белодробни пункции.

Транспортни пробинеобходимо е възможно най-скоро в специален контейнер или найлонов плик с анаеробни условия, тъй като дори краткотрайно взаимодействие с кислород може да причини смъртта на бактериите. Течните проби се транспортират в епруветка или в спринцовки. Тампоните с проби се транспортират в епруветки с въглероден диоксид или предварително приготвена среда.

Лечение на анаеробна инфекция

В случай на диагностициране на анаеробна инфекция за адекватно лечение е необходимо да се спазват следните принципи:

токсините, произведени от анаероби, трябва да бъдат неутрализирани;
трябва да се промени местообитанието на бактериите;
разпространението на анаероби трябва да бъде локализирано.

За спазване на тези принципи при лечението се използват антибиотици, които засягат както анаероби, така и аеробни организми, тъй като често флората при анаеробни инфекции е смесена. В същото време, когато предписва лекарства, лекарят трябва да оцени качествения и количествения състав на микрофлората. Средствата, които са активни срещу анаеробни патогени, включват: пеницилини, цефалоспорини, шамфеникол, флуорохиноло, метранидазол, карбапенеми и др. Някои лекарства имат ограничен ефект.

За контролиране на местообитанието на бактериите в повечето случаи се използва хирургична интервенция, която се изразява в лечение на засегнатите тъкани, дрениране на абсцеси и осигуряване на нормално кръвообращение. Хирургичните методи не трябва да се пренебрегват поради опасност от животозастрашаващи усложнения.

Понякога се използва спомагателни терапии, а също и поради трудностите, свързани с точното определяне на причинителя на инфекцията, се използва емпирично лечение.

С развитието на анаеробни инфекции в устната кухина също се препоръчва да се добавят възможно най-много пресни плодове и зеленчуци към диетата. Най-полезни са ябълките и портокалите. Ограничението е подложено на месни храни и бързо хранене.

анаеробна инфекция

Етиология, патогенеза, антибиотична терапия.

Предговор ................................................. ............... ................................. .. 1

Въведение ................................................. .............................................. 2

1.1 Дефиниция и характеристика ................................................. ............ .... 2

1.2 Състав на микрофлората на основните човешки биотопи .......... 5

2. Фактори на патогенност на анаеробните микроорганизми .......... 6

2.1. Ролята на анаеробната ендогенна микрофлора в патологията

човек ................................................ .................................................… ……. 8

3. Основните форми на анаеробна инфекция .................................. 10

3.1. Плевропулмонална инфекция ................................................. ............ 10

3.2. Инфекция на диабетно стъпало ................................................. ............................... . 10

3.3. Бактериемия и сепсис ................................................. ................ ................. единадесет

3.4. Тетанус ................................................. .................................. единадесет

3.5. Диария.................................................. ......................................... 12

3.6. Хирургична инфекция на рани и меки тъкани .................. 12

3.7. Газообразуваща инфекция на меките тъкани .................................. ... 12

3.8. Клостридиална мионекроза ................................................. .................. ... 12

3.9. Бавно развиваща се инфекция на некротична рана…13

3.10. Интраперитонеална инфекция ..................................................... ………….. 13

3.11. Характеристики на експерименталните анаеробни абсцеси ..... 13

3.12. Псевдомембранозен колит..................................................... .................. ..........14

3.13. Акушерска и гинекологична инфекция ............................................... .........14

3.14. Анаеробна инфекция при пациенти с рак……………..15

4. Лабораторна диагностика............................................. ................. ................15

4.1. Изследователски материал ................................................. .................. 15

4.2. Етапи на изследване на материала в лабораторията..................................... ....16

4.3. Пряко изучаване на материала ............................................. ................. 16

4.4. Методи и системи за създаване на анаеробни условия.....................................16

4.5. Хранителни среди и култивиране .............................................. 17

5. Антибиотична терапия при анаеробна инфекция .................................................. ... 21

5.1. Характеристики на основните антимикробни лекарства,

използвани за лечение на анаеробни инфекции .................................................21

5.2. Комбинация от бета-лактамни лекарства и инхибитори

бета-лактамази ................................................. ................ ................................. ..24

5.3. Клинично значение на теста за анаеробна чувствителност

микроорганизми към антимикробни лекарства.......…………...24

6. Корекция на чревната микрофлора .................................................................26

Заключение..................................................... ............................................27
Автори……………………………………………………………….27

Предговор

Последните години се характеризират с ускорено развитие на много области на общата и клинична микробиология, което вероятно се дължи както на по-адекватното ни разбиране за ролята на микроорганизмите в развитието на заболяванията, така и на необходимостта лекарите постоянно да използват информация за етиологията на заболяванията, свойствата на патогените с цел успешно лечение на пациентите и получаване на задоволителни резултати от химиотерапия или химиопрофилактика. Една от тези бързо развиващи се области на микробиологията е клиничната анаеробна бактериология. В много страни по света на този раздел от микробиологията се обръща значително внимание. Раздели, посветени на анаероби и анаеробни инфекции, са включени в програмите за обучение на лекари от различни специалности. За съжаление в нашата страна на този раздел от микробиологията, както по отношение на обучението на специалисти, така и в диагностичния аспект на работата на бактериологичните лаборатории, не се обръща достатъчно внимание. Методическото ръководство "Анаеробна инфекция" обхваща основните раздели на този проблем - дефиницията и класификацията, характеристиките на анаеробните микроорганизми, основните биотопи на анаеробите в организма, характеристиките на формите на анаеробната инфекция, насоките и методите на лабораторни изследвания. диагностика, както и комплексната антибактериална терапия (антимикробни средства, микробна резистентност/чувствителност, методи за нейното определяне и преодоляване). Разбира се, ръководството няма за цел да даде подробни отговори на всички аспекти на анаеробната инфекция. Съвсем ясно е, че микробиолозите, желаещи да работят в областта на анаеробната бактериология, трябва да преминат през специален цикъл на обучение, по-пълно да овладеят въпросите на микробиологията, лабораторното оборудване, методите за индикация, култивиране и идентифициране на анаероби. Освен това се натрупва добър опит при участие в специални семинари и симпозиуми по анаеробни инфекции на национално и международно ниво. Тези методически препоръки са адресирани до бактериолози, лекари от различни специалности (хирурзи, терапевти, ендокринолози, акушер-гинеколози, педиатри), студенти от медицински и биологични факултети, преподаватели в медицински университети и медицински училища.

Въведение

Първите идеи за ролята на анаеробните микроорганизми в човешката патология се появяват преди много векове. Още през 4 век пр. н. е. Хипократ описва подробно клиниката на тетануса, а през 4 век сл. н. е. Ксенофонт описва случаи на остър некротизиращ язвен гингивит при гръцки войници. Клиничната картина на актиномикозата е описана от Langenbeck през 1845 г. По това време обаче не беше ясно кои микроорганизми причиняват тези заболявания, какви са техните свойства, точно както концепцията за анаеробиоза отсъства до 1861 г., когато Луи Пастьор публикува класическата работа за изследване на Vibrio бутириг и нарича организмите, живеещи в отсъствие на въздух, „анаероби“ (17). Впоследствие Луи Пастьор (1877) изолира и култивира Clostridium septicum , и Израел през 1878 г. той описва актиномицети. Причинителят на тетануса е Clostridium tetani - идентифициран през 1883 г. от Н. Д. Монастирски и през 1884 г. от А. Николаер. Първите изследвания на пациенти с клинична анаеробна инфекция са извършени от Леви през 1891 г. Ролята на анаеробите в развитието на различни медицински патологии е описана и аргументирана за първи път от Veiloon. и Зубер през 1893-1898г. Те описват различни видове тежки инфекции, причинени от анаеробни микроорганизми (гангрена на белия дроб, апендицит, абсцеси на белия дроб, мозъка, таза, менингит, мастоидит, хроничен среден отит, бактериемия, параметрит, бартолинит, гноен артрит). В допълнение, те са разработили много методологични подходи за изолиране и култивиране на анаероби (14). Така до началото на 20-ти век много от анаеробните микроорганизми стават известни, формира се представа за клиничното им значение и се създава подходяща техника за култивиране и изолиране на анаеробни микроорганизми. От 60-те години до днес актуалността на проблема с анаеробните инфекции продължава да расте. Това се дължи както на етиологичната роля на анаеробните микроорганизми в патогенезата на заболяванията и развитието на резистентност към широко използвани антибактериални лекарства, така и на тежкото протичане и високата смъртност на заболяванията, които причиняват.

1.1. Определение и характеристика

В клиничната микробиология микроорганизмите обикновено се класифицират въз основа на връзката им с атмосферния кислород и въглеродния диоксид. Това е лесно да се провери при инкубиране на микроорганизми върху кръвен агар при различни условия: а) на нормален въздух (21% кислород); б) при условия на CO 2 инкубатор (15% кислород); в) при микроаерофилни условия (5% кислород) г) анаеробни условия (0% кислород). Използвайки този подход, бактериите могат да бъдат разделени на 6 групи: облигатни аероби, микроаерофилни аероби, факултативни анаероби, аеротолерантни анаероби, микроаеротолерантни анаероби, облигатни анаероби. Тази информация е полезна за първичната идентификация както на аероби, така и на анаероби.

Аероби. За растеж и размножаване облигатните аероби се нуждаят от атмосфера, съдържаща молекулярен кислород в концентрация от 15-21% или CO; инкубатор. Mycobacteria, Vibrio cholerae и някои гъби са примери за облигатни аероби. Тези микроорганизми получават по-голямата част от енергията си чрез процеса на дишане.

микроаерофили(микроаерофилни аероби). Те също се нуждаят от кислород, за да се размножават, но в концентрации, по-ниски от присъстващите в атмосферата на помещението. Gonococci и Campylobacter са примери за микроаерофилни бактерии и предпочитат атмосфера със съдържание на O2 около 5%.

микроаерофилни анаероби. Бактерии, способни да растат при анаеробни и микроаерофилни условия, но не могат да растат в CO2 инкубатор или въздух.

Анаероби. Анаеробите са микроорганизми, които не се нуждаят от кислород, за да живеят и да се размножават. Облигатните анаероби са бактерии, които растат само при анаеробни условия, т.е. в безкислородна атмосфера.

Аеротолерантни микроорганизми. Способни да растат в атмосфера, съдържаща молекулярен кислород (въздух, CO2 инкубатор), но растат най-добре в анаеробни условия.

Факултативни анаероби(факултативни аероби). Способен да оцелее в присъствието или отсъствието на кислород. Много бактерии, изолирани от пациенти, са факултативни анаероби (ентеробактерии, стрептококи, стафилококи).

капнофили. Редица бактерии, които растат по-добре в присъствието на повишени концентрации на CO 2, се наричат капнофили или капнофилни организми. Бактероидите, фузобактериите, хемоглобинофилните бактерии са капнофили, тъй като растат по-добре в атмосфера, съдържаща 3-5% CO 2 (2,

19,21,26,27,32,36).

Основните групи анаеробни микроорганизми са представени в таблица 1. (42, 43, 44).

Таблицааз. Най-важните анаеробни микроорганизми

Род	Видове		кратко описание на
*Бактероиди*	IN. чуплива IN. вулгатус IN. distansonis IN. eggerthii		Грам-отрицателни спори, които не образуват пръчки
*Превотела*	P. melaninogenicus P. bivia P. buccalis P. denticola P. intermedia
*Porphyromonas*	P. asaccharolyticum P. endodontalis P. gingivalis			Грам-отрицателни спори, които не образуват пръчки
*Ctostridium*	C. perfringens C. ramosum C. septicum C. novyi C. sporogenes C. sordelii C. тетани C. botulinum C. difficile		Грам-положителни, спорообразуващи пръчици или бацили
*Актиномицети*	А. Израел A. bovis
*Pseudoramibacter* *	П. alactolyticum		Грам-положителни, неспорообразуващи пръчици
		E. lentum E.rectale E. limosum	Грам-положителни, неспорообразуващи пръчици
*Бифидобактерия*		B. eriksonii B. adolescentis B.breve	Грам-положителни пръчици
*Пропионобактерия*		П. акне P. avidum P. granulosum P. propionica**	Грам-положителен. неспорообразуващи пръчици
*Лактобацилус*		L. catenaforme L. ацидофилус	Грам-положителни пръчици
*Пептококи*		P. magnus P. saccharolyticus P. asaccharolyticus
*Пептострептокок*		P. anaerobius P. intermedius P.micros P. productus	Грам-положителни, неспорообразуващи коки
*Вейлонела*		V. парвула	Грам-отрицателни, неспорообразуващи коки
*Fusobacterium*		F. nucleatum F. necrophorum F. varium F. mortiferum	Веретенообразен пръчици
*кампилобактер*		В. плод C.jejuni	Грам-отрицателни, тънки, спирални, необразуващи спори пръчици

* Eubacterium alaclolyticum прекласифициран като Pseudoramibacter alactolyticum (43,44)

** преди това Арахния пропионова (44)

*** синоними Е. псевдонекрофорум, Е. некрофорум биовар СЪС(42,44)

1.2. Съставът на микрофлората на основните човешки биотопи

Етиологията на инфекциозните заболявания претърпя значителни промени през последните десетилетия. Както е известно, по-рано основната опасност за човешкото здраве бяха остро заразните инфекции: коремен тиф, дизентерия, салмонелоза, туберкулоза и много други, които се предаваха главно по екзогенен път. Въпреки че тези инфекции все още остават социално значими и сега медицинската им значимост отново нараства, като цяло тяхната роля е значително намалена. В същото време се увеличава ролята на опортюнистични микроорганизми, представители на нормалната микрофлора на човешкото тяло. Съставът на нормалната човешка микрофлора включва повече от 500 вида микроорганизми. Нормалната микрофлора, живееща в човешкото тяло, е представена предимно от анаероби (Таблица 2).

Анаеробните бактерии, обитаващи човешката кожа и лигавици, извършвайки микробна трансформация на субстрати от екзогенен и ендогенен произход, произвеждат широк спектър от различни ензими, токсини, хормони и други биологично активни съединения, които се абсорбират и свързват с комплементарни рецептори и влияят на функцията на клетките и органите. Познаването на състава на специфичната нормална микрофлора на определени анатомични области е полезно за разбиране на етиологията на инфекциозните процеси. Съвкупността от видове микроорганизми, които обитават определена анатомична област, се нарича местна микрофлора. Освен това откриването на специфични микроорганизми в значително количество от разстояние или на необичайно място за обитаване само подчертава участието им в развитието на инфекциозния процес (11, 17, 18, 38).

Респираторен тракт. Микрофлората на горните дихателни пътища е много разнообразна и включва повече от 200 вида микроорганизми, които са част от 21 рода. 90% от слюнчените бактерии са анаероби (10, 23). Повечето от тези микроорганизми не са класифицирани от съвременните методи на таксономия и не са значими за патологията. Дихателните пътища на здрави хора най-често се колонизират от следните микроорганизми: Стрептокок pneumoniae- 25-70%; з аемофилус инфлуенца- 25-85%; Стрептокок pyogenes- 5-10%; Нейсерия менингитид- 5-15%. Анаеробни микроорганизми като Fusobacterium, Бактероиди spiralis, Пептострептокок, Пептококи, Вейлонела и някои видове Актиномицети среща се при почти всички здрави хора. Колиформните бактерии се откриват в дихателните пътища при 3-10% от здравите хора. Повишена колонизация на дихателните пътища от тези микроорганизми се установява при алкохолици, лица с тежко протичане на заболяването, при пациенти, получаващи антибактериална терапия, която потиска нормалната микрофлора, както и при лица с нарушена функция на имунната система.

Таблица 2. Количествено съдържание на микроорганизми в биотопи

нормално човешко тяло

Популациите от микроорганизми в дихателните пътища се адаптират към определени екологични ниши (нос, фаринкс, език, гингивални фисури). Адаптирането на микроорганизмите към тези биотопи се определя от афинитета на бактериите към определени видове клетки или повърхности, тоест се определя от клетъчен или тъканен тропизъм. Например, Стрептокок слюнка добре прикрепена към епитела на бузата и доминира в състава на букалната лигавица. адхезионна бактерия

riy може също да обясни патогенезата на някои заболявания. Стрептокок pyogenes прилепва добре към епитела на фаринкса и често причинява фарингит, E. coli има афинитет към епитела на пикочния мехур и следователно причинява цистит.

Кожа. Местната микрофлора на кожата е представена от бактерии предимно от следните родове: Стафилококи, Микрокок, Coринобактерия, Пропионобактерия, Brevibacterium И Acinetobacter. Също така често присъстват дрожди от род Pityrosporium. Анаеробите са представени предимно от грам-положителни бактерии от рода пропи- onobacterium (обикновено Пропионобактерия акне). Грам-положителни коки (Пептострептокок spp.) ИГрам-положителни бактерии от рода Eubacterium присъства в някои индивиди.

Пикочен канал. Бактериите, които колонизират дисталната уретра, са стафилококи, нехемолитични стрептококи, дифтероиди и в малък брой случаи различни членове на семейство Enterobacteriaceae. Анаеробите са представени в по-голяма степен от грам-отрицателни бактерии - БактероидиИFusobacterium spp..

Вагина.Около 50% от бактериите от секрета на шийката на матката и влагалището са анаероби. Повечето от анаеробите са представени от лактобацили и пептострептококи. Често се срещат предварителни разкази - П. бивия И П. disiens. В допълнение, Грам-положителните бактерии от рода Мобилункус И Clostridium.

червата. От 500 вида, които обитават човешкото тяло, приблизително 300 до 400 вида живеят в червата. Следните анаеробни бактерии се намират в най-голям брой в червата - Бактероиди, Бифидобактерия, Clostridium, Eubacterium, ЛактобацилусИПептострепто- кокус. Бактероидите са доминиращите микроорганизми. Установено е, че за една клетка на Escherichia coli има хиляда клетки бактероиди.

2. Фактори на патогенност на анаеробните микроорганизми

Патогенността на микроорганизмите означава тяхната потенциална способност да причиняват заболяване. Появата на патогенност при микробите е свързана с придобиването от тях на редица свойства, които осигуряват способността да се прикрепват, проникват и разпространяват в тялото на гостоприемника, да се съпротивляват на защитните му механизми и да причиняват увреждане на жизненоважни органи и системи. В същото време е известно, че вирулентността на микроорганизмите е полидетерминирано свойство, което се реализира напълно само в организма на гостоприемник, чувствителен към патогена.

В момента се разграничават няколко групи фактори на патогенност:

а) адхезини или фактори на прикрепване;

б) адаптационни фактори;

в) инвазивни или фактори на проникване

г) капсула;

д) цитотоксини;

е) ендотоксини;

g) екзотоксини;

з) ензими токсини;

i) фактори, модулиращи имунната система;

j) суперантигени;

k) протеини на топлинен шок (2, 8, 15, 26, 30).

Етапите и механизмите, наборът от реакции, взаимодействия и взаимоотношения на молекулярно, клетъчно и организмово ниво между микроорганизмите и организма гостоприемник са много сложни и разнообразни. Познаването на факторите на патогенност на анаеробните микроорганизми и тяхното практическо използване за профилактика на заболявания все още не е достатъчно. Таблица 3 показва основните групи патогенни фактори на анаеробните бактерии.

Таблица 3. Фактори на патогенност на анаеробни микроорганизми

Етап на взаимодействие		Фактор		Видове
Адхезия		Фимбриални капсулни полизахариди Хемаглутинини
Нашествие		Фосфолипаза С Протеази
Щета тъкани	Екзотоксини Хемолизини Протеази колагеназа фибринолизин Невраминидаза Хепариназа Хондриитин сулфат глюкуронидаза N-ацетил-глюкозаминидаза Цитотоксини Ентеротоксини невротоксини		P. melaninogenica P. melaninogenica
Фактори, които потискат имунната система	Метаболитни продукти Липополизахариди (О-антиген) Имуноглобулинови протеази (G, A, M) C3 и C5 конвертаза Протеаза а 2-микроглобулин Метаболитни продукти Мастни киселини на анаероби Серни съединения Оксидоредуктаза Бета-лактамази		Повечето анаероби
Активатори на фактора на увреждане	Липополизахариди (О-антиген) Повърхностни структури

Сега е установено, че факторите на патогенност на анаеробните микроорганизми са генетично определени. Идентифицирани са хромозомни и плазмидни гени, както и транспозони, кодиращи различни фактори на патогенност. Изследването на функциите на тези гени, механизмите и моделите на експресия, предаване и циркулация в популация от микроорганизми е много важен проблем.

2.1. Ролята на анаеробната ендогенна микрофлора в човешката патология

Анаеробните микроорганизми от нормалната микрофлора много често стават причинители на инфекциозни процеси, локализирани в различни анатомични части на тялото. Таблица 4 показва честотата на анаеробната микрофлора в развитието на патологията. (2, 7, 11, 12, 18, 24, 27).

Възможно е да се формулират редица важни обобщения относно етиологията и патогенезата на повечето видове анаеробни инфекции: 1) източникът на анаеробни микроорганизми е нормалната микрофлора на пациентите от собствения им стомашно-чревен, респираторен или урогенитален тракт; 2) промените в тъканните свойства поради травма и/или хипоксия осигуряват подходящи условия за развитие на вторична или опортюнистична анаеробна инфекция; 3) анаеробните инфекции като правило са полимикробни и често се причиняват от смес от няколко вида анаеробни и аеробни микроорганизми, синергично упражняващи увреждащ ефект; 4) инфекцията е придружена от образуване и освобождаване на силна миризма в около 50% от случаите (неспорообразуващите анаероби синтезират летливи мастни киселини, които причиняват тази миризма); 5) инфекцията се характеризира с образуване на газове, тъканна некроза, развитие на абсцеси и гангрена; 6) инфекцията се развива на фона на лечение с аминогликозидни антибиотици (бактероидите са устойчиви на тях); 7) наблюдава се черно оцветяване на ексудата (porphyromonas и prevotella произвеждат тъмнокафяв или черен пигмент); 8) инфекцията има продължителен, бавен, често субклиничен курс; 9) има обширни некротични промени в тъканите, несъответствие между тежестта на клиничните симптоми и обема на деструктивните промени, слабо кървене на разреза.

Въпреки че анаеробните бактерии могат да причинят сериозни и фатални инфекции, началото на инфекцията обикновено зависи от състоянието на защитните фактори на организма, т.е. функции на имунната система (2, 5, 11). Принципите на лечение на такива инфекции включват отстраняване на мъртва тъкан, дренаж, възстановяване на адекватно кръвообращение, отстраняване на чужди вещества и използване на активна антимикробна терапия, подходяща за патогена, в адекватна доза и продължителност.

Таблица 4. Етиологична роля на анаеробната микрофлора

в развитие заболявания

Заболявания	Брой прегледани	Честота на изолиране на анаероби
Глава и шия Нетравматични абсцеси на главата Хроничен синузит Инфекции на перимандибуларното пространство
Гръден кош Аспирационна пневмония белодробен абсцес
Корем Абсцеси или перитонит Апендицит чернодробен абсцес
женски генитален тракт смесени типове Тазови абсцеси Възпалителни процеси			33 (100%) 22 (88%)
меки тъкани инфекция на раната Кожни абсцеси Диабетни язви на крайниците Неклостридиален целулит
бактериемия Всички култури Интраабдоминален сепсис Септичен аборт

3. Основни форми на анаеробна инфекция

3.1. Плевропулмонална инфекция

Етиологично значимите анаеробни микроорганизми при тази патология са представители на нормалната микрофлора на устната кухина и горните дихателни пътища. Те са причинители на различни инфекции, включително аспирационна пневмония, некротизираща пневмония, актиномикоза и белодробен абсцес. Основните причинители на плевропулмоналните заболявания са представени в таблица 5.

Таблица 5. Анаеробни бактерии, причиняващи

плевропулмонарен инфекция

Факторите, които допринасят за развитието на анаеробна плевропулмонална инфекция при пациент, включват аспирация на нормална микрофлора (в резултат на загуба на съзнание, дисфагия, наличие на механични предмети, обструкция, лоша орална хигиена, некротизираща белодробна тъкан) и хематогенно разпространение на микроорганизми. Както може да се види от таблица 5, аспирационната пневмония най-често се причинява от организми, наричани по-рано като видове "орални бактероиди" (понастоящем видове Prevotella и Porphyromonas), Fusobacterium и Peptostreptococcus. Спектърът на бактериите, изолирани от анаеробен емпием и белодробен абсцес, е почти еднакъв.

3.2. Инфекция на диабетно стъпало

Сред повече от 14 милиона диабетици в Съединените щати миризмата на краката е най-честата инфекциозна причина за хоспитализация. Този вид инфекция често се игнорира от пациентите в началния стадий, а понякога и неадекватно лекувана от лекарите. Като цяло пациентите не се стремят внимателно и редовно да преглеждат долните крайници и не спазват препоръките на лекарите за грижи и режим на разходка. Ролята на анаеробите в развитието на инфекции на краката при диабетици е установена преди много години. Основните видове микроорганизми, които причиняват този вид инфекция, са представени в таблица 6.

Таблица 6. Аеробни и анаеробни микроорганизми, които причиняват

инфекция на краката при диабетици

Аероби	Анаероби
Proteus mirabili	Bacteroides fragilis
Pseudomonas aeruginosa	други видове от групата B. fragilis
Enterobacter aerogenes	Prevotella melaninogenica
Ешерихия коли	други видове Prevotella\ Porphyromonas
Klebsiella пневмония	Fusobacterium nucleatum
	други фузобактерии
	Пептострептокок
Стафилококус ауреус	други видове клостридии

Установено е, че 18-20% от пациентите с диабет имат смесена аеробно-анаеробна инфекция. Средно при един пациент са открити 3,2 аеробни и 2,6 анаеробни вида микроорганизми, като от анаеробните бактерии преобладават пептострептококите. Често се откриват и бактероиди, превотела и клостридии. От дълбоки рани в 78% от случаите е изолирана асоциация на бактерии. Грам-положителната аеробна микрофлора (стафилококи и стрептококи) се открива при 25% от пациентите, а грам-отрицателната пръчковидна аеробна микрофлора се открива при приблизително 25% от пациентите. Около 50% от анаеробните инфекции са смесени. Тези инфекции са по-тежки и най-често изискват ампутация на засегнатия крайник.

3.3. бактериемия и сепсис

Делът на анаеробните микроорганизми в развитието на бактериемия варира от 10 до 25%. Повечето проучвания показват това IN.чуплива и други видове от тази група, както и Бактероиди тетаиотаомикрон са най-честата причина за бактериемия. Клостридиите са следващите по честота (особено Clostridium perfringens) и пептострептококи. Те често са изолирани в чиста култура или в асоциации. През последните десетилетия в много страни по света се наблюдава увеличение на честотата на анаеробния сепсис (от 0,67 до 1,25 случая на 1000 приети в болницата). Смъртността при пациенти със сепсис, причинен от анаеробни микроорганизми, е 38-50%.

3.4. Тетанус

Тетанусът е добре известна сериозна и често фатална инфекция още от времето на Хипократ. От векове това заболяване е неотложен проблем, свързан с огнестрелни, изгаряния и травматични рани. полемика Clostridium тетани намират се в човешки и животински изпражнения и са широко разпространени в околната среда. Рамон и колеги през 1927 г. успешно предлагат имунизация с токсоид за превенция на тетанус. Рискът от развитие на тетанус е по-висок при хора над 60-годишна възраст поради намаляване на ефективността / загуба на защитен пост-ваксинален антитоксичен имунитет. Терапията включва прилагане на имуноглобулини, дебридман на рани, антимикробна и антитоксична терапия, постоянни сестрински грижи, седативи и аналгетици. В момента се обръща особено внимание на неонаталния тетанус.

3.5. диария

Има редица анаеробни бактерии, които причиняват диария. Анаеробиоспирилум янтарни производители- подвижни спираловидни бактерии с биполярни флагели. Причинителят се екскретира с изпражненията на кучета и котки с безсимптомни инфекции, както и от хора с диария. Ентеротоксигенни щамове IN.чуплива. През 1984 г. Mayer показа ролята на щамовете, произвеждащи токсини IN.чуплива в патогенезата на диарията. Токсигенните щамове на този патоген са изолирани от диария при хора и животни. Те не могат да бъдат разграничени от обикновените щамове чрез биохимични и серологични методи. В експеримента те причиняват диария и характерни лезии на дебелото черво и дисталното тънко черво с хиперплазия на криптата. Ентеротоксинът има молекулно тегло 19,5 kD и е термолабилен. Патогенезата, спектърът и честотата на заболеваемост, както и оптималната терапия, все още не са достатъчно разработени.

3.6. Хирургична анаеробна инфекция на рани и меки тъкани

Инфекциозните агенти, изолирани от хирургични рани, до голяма степен зависят от вида на хирургическата интервенция. Причината за нагнояване при чисти хирургични интервенции, които не са придружени от отваряне на стомашно-чревния, урогениталния или дихателния тракт, като правило е Св. ауреус. При други видове нагнояване на рани (чисто замърсени, замърсени и мръсни) най-често се изолира смесена полимикробна микрофлора от хирургично резецирани органи. През последните години се наблюдава увеличаване на ролята на опортюнистичната микрофлора в развитието на такива усложнения. Повечето повърхностни рани се диагностицират на по-късна дата между осмия и деветия ден след операцията. Ако инфекцията се развие по-рано - през първите 48 часа след операцията, това е типично за гангренозна инфекция, причинена от определени видове клостридии или бета-хемолитичен стрептокок. В тези случаиима драматично увеличаване на тежестта на заболяването, изразена токсикоза, бързо локално развитие на инфекция с участието на всички слоеве на телесните тъкани в процеса.

3.7. Генериране на газ инфекция на меките тъкани

Наличието на газ в заразените тъкани е зловещ клиничен признак и в миналото тази инфекция най-често се свързваше от лекарите с наличието на патогени на клостридиална газова гангрена. Сега е известно, че инфекцията, произвеждаща газове при хирургични пациенти, се причинява от смес от анаеробни микроорганизми като напр. Clostridium, Пептострептокок или Бактероиди, или един от видовете аеробни колиформни бактерии. Предразполагащи фактори за развитието на тази форма на инфекция са съдови заболявания на долните крайници, диабет, травма.

3.8. Клостридиална мионекроза

Газовата гангрена е разрушителен процес на мускулната тъкан, свързан с локален крепитус, тежка системна интоксикация, причинена от анаеробни газообразуващи клостридии Клостридиите са грам-положителни облигатни анаероби, които са широко разпространени в почвата, замърсена с животински екскременти. При хората те обикновено са обитатели на стомашно-чревния и женския полов тракт. Понякога те могат да бъдат открити по кожата и в устната кухина. Най-значимият вид от 60-те известни е Clostridium perfringens. Този микроорганизъм е по-толерантен към атмосферния кислород и се развива бързо. Това е алфа токсин, фосфолипаза С (лецитиназа), който разгражда лецитина до фосфорилхолин и диглицериди, както и колагеназа и протеази, които причиняват разрушаване на тъканите. Производството на алфа-токсин е свързано с висока смъртност при газова гангрена. Има хемолитични свойства, разрушава тромбоцитите, причинява интензивно увреждане на капилярите и вторична тъканна деструкция. В 80% от случаите се причинява мионекроза СЪС.perfringens. Освен това е включена етиологията на това заболяване СЪС.novyi, СЪС. септикум, СЪС.бифер- mentas. Други видове Clostridium C. histolithicum, СЪС.sporogenes, СЪС.фалакс, СЪС.терций са с ниско етиологично значение.

3.9. Бавно развиваща се некротична инфекция на рани

Агресивна животозастрашаваща инфекция на раната може да се появи до 2 седмици след инфекцията, особено при пациенти с диабет

болен. Обикновено това са смесени или мономикробни фасциални инфекции. Мономикробните инфекции са относително редки. в около 10% от случаите и обикновено се наблюдават при деца. Причинителите са стрептококи от група А, Staphylococcus aureus и анаеробни стрептококи (Peptostreptococci). При около 30% от пациентите със същата честота се изолират стафилококи и хемолитични стрептококи. Повечето от тях са заразени извън болницата. Повечето възрастни имат некротизиращ фасцилит на крайниците (при 2/3 от случаите крайниците са засегнати). При децата по-често се засягат тялото и слабините. Полимикробната инфекция включва редица процеси, причинени от анаеробна микрофлора. От раните се разграничават средно около 5 основни вида. Смъртността при такива заболявания остава висока (около 50% сред пациентите с тежки форми). Възрастните хора са склонни да имат лоша прогноза. Смъртността при хората над 50 години е над 50%, а при пациентите с диабет – над 80%.

3.10. интраперитонеална инфекция

Най-трудни за ранна диагностика и ефективно лечение са интраабдоминалните инфекции. Успешният изход зависи преди всичко от ранната диагноза, бързата и адекватна хирургична интервенция и използването на ефективен антимикробен режим. Полимикробната природа на бактериалната микрофлора, участваща в развитието на перитонит в резултат на перфорация при остър апендицит, е показана за първи път през 1938 г. Алтемайер. Броят на аеробните и анаеробните микроорганизми, изолирани от местата на интраабдоминалния сепсис, зависи от естеството на микрофлората или увредения орган. Обобщените данни показват, че средният брой бактериални видове, изолирани от фокуса на инфекцията, варира от 2,5 до 5. За аеробните микроорганизми тези данни са 1,4–2,0 вида и 2,4–3,0 вида анаеробни микроорганизми. Най-малко 1 вид анаероби се открива при 65-94% от пациентите. От аеробните микроорганизми най-често се откриват Escherichia coli, Klebsiella, Streptococcus, Proteus, Enterobacter, а от анаеробните микроорганизми - Bacteroides, Peptostreptococci, Clostridia. Bacteroides представляват 30% до 60% от всички изолирани щамове анаеробни микроорганизми. Според резултатите от многобройни проучвания 15% от инфекциите са причинени от анаеробна и 10% от аеробна микрофлора и съответно 75% са причинени от асоциации. Най-значимият от тях - д.коли И IN.чуплива. Според Н. С. Богомолова и Л. В. Болшаков (1996), анаеробна инфекция

е причина за развитието на одонтогенни заболявания в 72,2% от случаите, апендикуларен перитонит - в 62,92% от случаите, перитонит поради гинекологични заболявания - в 45,45% от пациентите, холангит - в 70,2%. Анаеробната микрофлора най-често се изолира при тежък перитонит в токсичния и терминалния стадий на заболяването.

3.11. Характеристика на експериментални анаеробни абсцеси

В експеримент IN.чуплива инициира развитието на подкожен абсцес. Първоначалните събития са миграция на полиморфонуклеарни левкоцити и развитие на тъканен оток. След 6 дни ясно се идентифицират 3 зони: вътрешна - състои се от некротични маси и дегенеративно променени възпалителни клетки и бактерии; средната се образува от левкоцитния вал, а външната зона е представена от слой колаген и фиброзна тъкан. Концентрацията на бактериите варира от 10 8 до 10 9 в 1 ml гной. Абсцесът се характеризира с нисък редокс потенциал. Много е трудно за лечение, тъй като има разрушаване на антимикробните лекарства от бактерии, както и бягство от защитните фактори на гостоприемника.

3.12. Псевдомембранозен колит

Псевдомембранозният колит (PMC) е сериозно стомашно-чревно заболяване, характеризиращо се с ексудативни плаки върху лигавицата на дебелото черво. Това заболяване е описано за първи път през 1893 г., много преди появата на антимикробните средства и използването им за медицински цели. Сега е установено, че етиологичният фактор на това заболяване е Clostridium труден. Нарушаването на микроекологията на червата поради употребата на антибиотици е причина за развитието на MVP и широкото разпространение на инфекции, причинени от СЪС.труден, чийто клиничен спектър от прояви варира в широки граници - от носителство и краткотрайна, спонтанно преминаваща диария до развитие на MVP. Броят на пациентите с колит, причинен от C. труден, сред амбулаторните пациенти 1-3 на 100 000, а сред хоспитализираните пациенти 1 на 100-1000.

Патогенеза.Колонизация на човешкото черво с токсигенни щамове С,труден е важен фактор за развитието на PMC. Безсимптомно носителство обаче се среща при приблизително 3-6% от възрастните и 14-15% от децата. Нормалната чревна микрофлора служи като надеждна бариера за колонизирането на патогенни микроорганизми. Лесно се нарушава от антибиотици и много трудно се възстановява. Най-изразен ефект върху анаеробната микрофлора имат цефалоспорини от 3-то поколение, клиндамицин (група на линкомицин) и ампицилин. По правило всички пациенти с MVP страдат от диария. В същото време изпражненията са течни с примеси на кръв и слуз. Има хиперемия и подуване на чревната лигавица. Често се отбелязва улцерозен колит или проктит, характеризиращ се с гранулации, хеморагична лигавица. Повечето пациенти с това заболяване имат треска, левкоцитоза и напрежение в корема. Впоследствие могат да се развият сериозни усложнения, включително обща и локална интоксикация, хипоалбуминемия. Симптомите на диария, свързана с антибиотици, започват на 4-5-ия ден от антибиотичната терапия. В изпражненията на такива пациенти S. труден в 94% от случаите, докато при здрави възрастни този микроорганизъм се изолира само в 0,3% от случаите.

СЪС.труден произвежда два вида високоактивни екзотоксини - А и В. Токсин А е ентеротоксин, който причинява хиперсекреция и натрупване на течност в червата, както и възпалителна реакция с хеморагичен синдром. Токсин В е цитотоксин. Неутрализира се от поливалентен антигангренозен серум. Този цитотоксин се открива при приблизително 50% от пациентите с антибиотично-асоцииран колит без псевдомембранозна формация и при 15% от пациентите с антибиотично-асоциирана диария с нормални сигмоидоскопски находки. Неговото цитотоксично действие се основава на деполимеризацията на микрофиламентния актин и увреждане на цитоскелета на ентероцитите. Напоследък се появяват все повече данни за СЪС.труден като нозокомиален инфекциозен агент. В тази връзка е желателно да се изолират хирургически пациенти, носители на този микроорганизъм, за да се избегне разпространението на инфекцията в болницата. СЪС.труден най-чувствителни към ванкомицин, метронидазол и бацитрацин. По този начин тези наблюдения потвърждават, че щамовете, произвеждащи токсини СЪС.труден причиняват широк спектър от заболявания, включително диария, колит и MVP.

3.13. Акушерско-гинекологични инфекции

Разбирането на моделите на развитие на инфекции на женските полови органи е възможно въз основа на задълбочено изследване на микробиоценозата на влагалището. Нормалната микрофлора на влагалището трябва да се разглежда като защитна бариера срещу най-честите патогени.

Дисбиотичните процеси допринасят за образуването на бактериална вагиноза (BV). BV се свързва с развитието на такива усложнения като анаеробни следоперативни инфекции на меките тъкани, следродилен и следабортен ендометрит, преждевременен аборт, интраамниотична инфекция (10). Акушерско-гинекологичната инфекция има полимикробен характер. На първо място бих искал да отбележа нарастващата роля на анаеробите в развитието на остри възпалителни процеси на тазовите органи - остро възпаление на маточните придатъци, следродилен ендометрит, особено след оперативно раждане, следоперативни усложнения в гинекологията (перикултит, абсцеси, инфекция на раната) (5). Микроорганизмите, които най-често се изолират от инфекции на женските генитални пътища, включват бактемиди чуплива, както и видове Пептококи И Пептострептокок. Стрептококи от група А не се срещат често при тазови инфекции. Стрептококите от група В често причиняват сепсис при акушерски пациенти, чиято входна врата е гениталния тракт. През последните години с акушерски и гинекологични инфекции се отделя все повече СЪС.трахоматис. Сред най-честите инфекциозни процеси на урогениталния тракт са пелвиоперитонитът, ендометритът след цезарово сечение, инфекциите на влагалищния маншет след хистеректомия, инфекциите на таза след септичен аборт. Ефективността на клиндамицин при тези инфекции варира от 87% до 100% (10).

3.14. Анаеробна инфекция при пациенти с рак

Рискът от инфекция при пациенти с рак е несравнимо по-висок, отколкото при други хирургични пациенти. Тази особеност се обяснява с редица фактори - тежестта на основното заболяване, имунодефицит, голям брой инвазивни диагностични и терапевтични процедури, големият обем и травматичност на оперативните интервенции, използването на много агресивни методи на лечение - радио- и химиотерапия. . При пациенти, оперирани за тумори на стомашно-чревния тракт, в следоперативния период се развиват субдиафрагмални, субхепатални и интраперитонеални абсцеси с анаеробна етиология. Доминиращите патогени Бактероиди fragi- лис, Превотела spp.. Fusobacterium spp., грам положителни коки. През последните години има все повече съобщения за важната роля на неспорогенните анаероби в развитието на септични състояния и за тяхното изолиране от кръвта по време на бактериемия (3).

4. Лабораторна диагностика

4.1. Проучван материал

Лабораторната диагностика на анаеробна инфекция е доста трудна задача. Времето за изследване от момента на доставяне на патологичния материал от клиниката до микробиологичната лаборатория и до получаване на пълен детайлизиран отговор е от 7 до 10 дни, което не може да задоволи клиницистите. Често резултатът от бактериологичния анализ става известен до момента на изписване на пациента. Първоначално трябва да се отговори на въпроса: има ли анаероби в материала. Важно е да се помни, че анаеробите са основният компонент на локалната микрофлора на кожата и лигавиците и освен това тяхното изолиране и идентифициране трябва да се извършва при подходящи условия. Успешното начало на изследванията в клиничната микробиология на анаеробната инфекция зависи от правилното събиране на подходящ клиничен материал.

В нормалната лабораторна практика най-често се използват следните материали: 1) инфектирани лезии от стомашно-чревния тракт или женския полов тракт; 2) материал от коремната кухина с перитонит и абсцеси; 3) кръв от септични пациенти; 4) отделяне при хронични възпалителни заболявания на дихателните пътища (синузит, отит, мастоидит); 5) материал от долните отдели на дихателните пътища при аспирационна пневмония; 6) цереброспинална течност при менингит; 7) съдържанието на мозъчния абсцес; 8) местен материал за зъбни заболявания; 9) съдържание на повърхностни абсцеси: 10) съдържание на повърхностни рани; 11) материал от инфектирани рани (хирургични и травматични); 12) биопсии (19, 21, 29, 31, 32, 36, 38).

4.2. Етапи на изследване на материала в лабораторията

Успешното диагностициране и лечение на анаеробна инфекция е възможно само при заинтересованото сътрудничество на микробиолози и клиницисти от съответния профил. Получаването на подходящи проби за микробиологично изследване е от решаващо значение. Методите за вземане на материал зависят от локализацията и вида на патологичния процес. Лабораторните изследвания се основават на индикацията и последващата видова идентификация на анаеробни и аеробни микроорганизми, съдържащи се в тестовия материал, по традиционни и експресни методи, както и на определяне на чувствителността на изолирани микроорганизми към антимикробни химиотерапевтични лекарства (2).

4.3. Директно изследване на материала

Има много бързи директни тестове, които категорично показват наличието на анаероби в големи количества в тестовия материал. Някои от тях са доста прости и евтини и затова имат предимства пред много скъпи лабораторни тестове.

1. 3 a p a x. Вонящите материали винаги съдържат анаероби, само няколко от тях са без мирис.

2. Газотечна хроматография (GLC). Отнася се до броя на експресните диагностични методи. GLC ви позволява да определите в гнойта късоверижни мастни киселини (оцетна, пропионова, изовалерианова, изокапронова, капронова), които причиняват миризмата. С помощта на GLC, според спектъра на летливите мастни киселини, е възможно да се извърши видовата идентификация на присъстващите в него микроорганизми.

3. Флуоресценция. Изследването на материали (гной, тъкани) в ултравиолетова светлина при дължина на вълната 365 nm разкрива интензивна червена флуоресценция, която се обяснява с наличието на черни пигментирани бактерии, принадлежащи към групите Basteroides и Porphyromonas, и което показва наличието на анаероби.

4. Бактериоскопия. При изследване на много препарати, оцветени по метода на Грам, намазката разкрива наличието на клетки от възпалителния фокус, микроорганизми, особено полиморфни грам-отрицателни пръчки, малки грам-положителни коки или грам-положителни бацили.

5. Имунофлуоресценция. Директната и индиректната имунофлуоресценция са експресни методи и дават възможност за откриване на анаеробни микроорганизми в изследвания материал.

6. ELISA метод. ELISA позволява да се определи наличието на структурни антигени или екзотоксини на анаеробни микроорганизми.

7. Молекулярно-биологични методи. Най-голямо разпространение, чувствителност и специфичност през последните години показва полимеразната верижна реакция (CPR). Използва се както за откриване на бактерии директно в материала, така и за идентификация.

4.4. Методи и системи за създаване на анаеробни условия

Материалът, взет от подходящи източници и в подходящи контейнери или транспортна среда за тази цел, трябва да бъде доставен незабавно в лабораторията. Въпреки това има доказателства, че клинично значими анаероби в големи обеми гной или в анаеробна транспортна среда оцеляват 24 часа. Важно е инокулираната среда да се инкубира при анаеробни условия или да се постави в съд, пълен с CO2, и да се съхранява до прехвърляне в специална инкубационна система. Има три вида анаеробни системи, които обикновено се използват в клиничните лаборатории. Микроанаеростатните системи от типа (GasPark, BBL, Cockeysville), които се използват в лабораториите от много години, особено в малки лаборатории, са по-широко използвани и осигуряват задоволителни резултати. Петри с инокулация на анаеробни бактерии се поставят в съда едновременно със специална газогенерираща торба и индикатор. В торбата се добавя вода, съдът се затваря херметически, CO2 и H2 се освобождават от торбата в присъствието на катализатор (обикновено паладий). В присъствието на катализатор Н2 реагира с О2, за да образува вода. CO2 е от съществено значение за растежа на анаеробите, тъй като те са капнофили. Добавя се метиленово синьо като индикатор за анаеробни условия. Ако системата за генериране на газ и катализаторът работят ефективно, тогава индикаторът ще се обезцвети. Повечето анаероби изискват поне 48 часа култивиране. След това камерата се отваря и чашите се изследват за първи път, което не е много удобно, тъй като анаеробите са чувствителни към кислорода и бързо губят своята жизнеспособност.

Напоследък в практиката навлязоха по-прости анаеробни системи - анаеробни торбички. Една или две посявки с торбичка за генериране на газ се поставят в прозрачен, херметически затворен полиетиленов плик и се инкубират при термостатни условия. Прозрачността на полиетиленовите торби улеснява извършването на периодичен мониторинг на растежа на микроорганизмите.

Третата система за култивиране на анаеробни микроорганизми е автоматично затворена камера със стъклена предна стена (анаеробна станция) с гумени ръкавици и автоматично подаване на безкислородна смес от газове (N2, H2, CO2). В този шкаф през специален люк ще се поставят материали, чаши, епруветки, таблетки за биохимична идентификация и антибиотична чувствителност. Всички манипулации се извършват от бактериолог в гумени ръкавици. Материалът и съдовете в тази система могат да се разглеждат ежедневно, а посевите могат да се инкубират от 7-10 дни.

Тези три системи имат своите предимства и недостатъци, но те са ефективни за изолиране на анаероби и трябва да бъдат във всяка бактериологична лаборатория. Често те се използват едновременно, въпреки че най-голяма надеждност принадлежи на метода на култивиране в анаеробна станция.

4.5. Хранителни среди и култивиране

Изследването на анаеробните микроорганизми се извършва на няколко етапа. Общата схема за изолиране и идентифициране на анаероби е показана на фигура 1.

Важен фактор за развитието на анаеробната бактериология е наличието на колекция от типични бактериални щамове, включително референтни щамове от колекциите ATCC, CDC и VPI. Това е особено важно за наблюдение на хранителни среди, за биохимична идентификация на чисти култури и за оценка на активността на антибактериалните лекарства. Съществува широка гама от основни среди, които се използват за приготвяне на специална анаеробна хранителна среда.

Хранителните среди за анаероби трябва да отговарят на следните основни изисквания: 1) да отговарят на хранителните нужди; 2) осигуряват бърз растеж на микроорганизми; 3) да бъдат адекватно намалени. Първичното инокулиране на материала се извършва върху плочки с кръвен агар или избрани среди, показани в таблица 7.

Все по-често изолирането на облигатни анаероби от клиничен материал се извършва върху среди, които включват селективни агенти в определена концентрация, позволяваща изолирането на определени групи анаероби (20, 23) (Таблица 8).

Продължителността на инкубацията и честотата на изследване на инокулираните петрита зависи от тестовия материал и състава на микрофлората (таблица 9).

Проучван материал

отделящи се рани,

съдържание на абсцес,

Трахеобронхонален аспират и др.

Транспортиране до лабораторията: в кипарис, в специална транспортна среда (незабавно поставяне на материала в средата)

Микроскопия на материала

Оцветяване по Грам

Култивиране и изолиране

чиста култура

Аеробни чаши за

35±2°C в сравнение с

18-28 часаанаероби

5-10% С0 2

1. кръвен агармикроаеростат

газ-пак

(H 2 + C0 2)

35±2°C

от 48 часа до 7 дни

2. Кръвен агар на Schaedler

35±2°C

от 48 часа до 7 дни

3. Селективна среда за идентификация

анаероби

от 48 часа до 2 седмици

4. Течна среда (тиогликол)

Идентификация.Чисти култури от изолирани колонии

1. Оцветяване по Грам и Ожешко за откриване на спори

2. Морфология на колониите

3. Връзка на вида на колонията с кислорода

4. Предварителна диференциация по чувствителност към антимикробни лекарства

5.Биохимични изследвания

Определяне на чувствителност към антибиотици

1. Метод на разреждане в агар или бульон

2. Метод на хартиен диск (дифузия)

Ориз. 1. Изолиране и идентифициране на анаеробни микроорганизми

анаеробни микроорганизми

сряда	Предназначение
Brucella кръвен агар (CDC анаеробен кръвен агар, Shadler кръвен агар) (BRU агар)	Неселективен, за изолиране на анаероби, присъстващи в материала
Жлъчен ескулин агар за бактероиди(WWE агар)	Селективни и диференциални; за изолиране на бактерии от групата на Bacteroides fragilis
Канамицин-ванкомицин кръвен агар(KVLB)	Селективен за повечето неспорообразуващи Грам-отрицателни бактерии
Фенил етил агар(PEA)	Инхибира растежа на Proteus и други ентеробактерии; стимулира растежа на грам-положителни и грам-отрицателни анаероби
Тиогликолов бульон(THIO)	За специални ситуации
Жълтъчен агар(ЕЯ)	За изолиране на клостридии
Циклосерин-цефокситин-фруктозен агар(CCFA) или циклосерин манит агар (CMA) или циклосерин манит кръвен агар (CMBA)	Селективен за C. difficile
Кристално-виолетов-еритромицин-нов агар(CVEB)	За изолиране на Fusobacterium nucleatum и Leptotrichia buccalis
Бактероиден гингивален агар(BGA)	За изолиране на Porphyromonas gingivalis

Таблица 8. Селективни агенти за облигатни анаероби

организми	Селективни агенти
Облигатни анаероби от клиничен материал	неомицин (70 mg/l) налидиксова киселина (10 mg/l)
Actinomyces spp.	метронидазол (5 mg/l)
Bacteroides spp. Fusobacterium spp.	налидиксова киселина (10 mg/l) + ванкомицин (2,5 mg/l)
Bacteroides urealytica	налидиксова киселина (10 mg/l) тейкопланин (20 mg/l)
Clostridium difficile	циклосерин (250 mg/l) цефокситин (8 mg/l)
Fusobacterium	рифампицин (50 mg/l) неомицин (100 mg/l) ванкомицин (5 mg/l)

Отчитането на резултатите се извършва чрез описание на културните свойства на отглежданите микроорганизми, пигментация на колонии, флуоресценция, хемолиза. След това се приготвя цитонамазка от колониите, оцветява се по Грам и по този начин се откриват Грам-отрицателни и Грам-положителни бактерии, микроскопски и се описват морфологични свойства. Впоследствие микроорганизмите от всеки тип колонии се субкултивират и култивират в тиогликолов бульон с добавяне на хемин и витамин К. Морфологията на колониите, наличието на пигмент, хемолитичните свойства и характеристиките на бактериите в оцветяването по Грам позволяват да се предварително идентифициране и диференциране на анаероби. В резултат на това всички анаеробни микроорганизми могат да бъдат разделени на 4 групи: 1) Gr + коки; 2) Gr+ бацили или кокобацили: 3) Gr- cocci; 4) Gr-бацили или кокобацили (20, 22, 32).

Таблица 9. Продължителност на инкубацията и честота на изследването

култури от анаеробни бактерии

Вид култури	Инкубационно време*	Честота на изследване
Кръв		Ежедневно до 7-ми и след 14-ти
Течности		Ежедневно
Абсцеси, рани		Ежедневно
Въздушни пътища Храчки Транстрахеален аспират Бронхиален секрет		Ежедневно веднъж Ежедневно Ежедневно
Урогенитален тракт Вагина, матка, простата		Ежедневно Ежедневно Ежедневно веднъж
Изпражнения		Ежедневно
Анаероби Бруцела актиномицети		Ежедневно 3 пъти седмично 1 път седмично

*до получаване на отрицателен резултат

На третия етап от изследването се извършва по-продължителна идентификация. Окончателната идентификация се основава на определянето на биохимични свойства, физиологични и генетични характеристики, фактори на патогенност в теста за неутрализация на токсина. Въпреки че пълнотата на идентифициране на анаеробите може да варира значително, някои прости тестове с голяма вероятност позволяват идентифицирането на чисти култури от анаеробни бактерии - оцветяване по Грам, подвижност, чувствителност към определени антибиотици с помощта на хартиени дискове и биохимични свойства.

5. Антибактериална терапия при анаеробна инфекция

Резистентните на антибиотици щамове микроорганизми възникват и започват да се разпространяват веднага след широкото въвеждане на антибиотиците в клиничната практика. Механизмите на формиране на резистентност на микроорганизмите към антибиотици са сложни и разнообразни. Те се класифицират на първични и придобити. Придобитата резистентност се формира под въздействието на лекарства. Основните начини за образуването му са следните: а) инактивиране и модифициране на лекарството от ензимни системи на бактерии и прехвърлянето му в неактивна форма; б) намаляване на пропускливостта на повърхностните структури на бактериалната клетка; в) нарушение на механизмите за транспорт в клетката; г) промяна във функционалната значимост на мишената за лекарството. Механизмите на придобита резистентност на микроорганизмите са свързани с промени на генетично ниво: 1) мутации; 2) генетични рекомбинации. Изключително важна роля играят механизмите на вътрешно- и междувидово предаване на екстрахромозомни фактори на наследствеността - плазмиди и транспозони, които контролират устойчивостта на микроорганизмите към антибиотици и други химиотерапевтични лекарства (13, 20, 23, 33, 39). Информация за антибиотична резистентност при анаеробни микроорганизми е получена както от епидемиологични, така и от генетични/молекулярни изследвания. Епидемиологичните данни показват, че от около 1977 г. насам има повишаване на резистентността на анаеробните бактерии към няколко антибиотици: тетрациклин, еритромицин, пеницилин, ампицилин, амоксицилин, тикарцилин, имипенем, метронидазол, хлорамфеникол и др. Приблизително 50% от бактероидите са резистентни към пеницилин G и тетрациклин.

При предписване на антибиотична терапия за смесена аеробно-анаеробна инфекция е необходимо да се отговори на редица въпроси: а) къде е локализирана инфекцията?; б) какви микроорганизми най-често причиняват инфекции в тази област?; в) каква е тежестта на заболяването?; г) какви са клиничните показания за приложение на антибиотици?; д) каква е безопасността при употребата на този антибиотик?; д) каква е цената му?; ж) каква е неговата антибактериална характеристика?; з) каква е средната продължителност на употребата на лекарството за постигане на излекуване?; и) преминава ли кръвно-мозъчната бариера?; к) как влияе на нормалната микрофлора?; k) Необходими ли са допълнителни антимикробни средства за лечение на този процес?

5.1. Характеристика на основните антимикробни средства, използвани при лечението на анаеробни инфекции

П е н и ч и л и н с. В исторически план пеницилин G е бил широко използван за лечение на смесени инфекции. Въпреки това, анаеробите, особено бактериите от групата на Bacteroides fragilis, имат способността да произвеждат бета-лактамаза и да разрушават пеницилина, което намалява неговата терапевтична ефикасност. Той има ниска до умерена токсичност, слаб ефект върху нормалната микрофлора, но има слаба активност срещу анаероби, произвеждащи бета-лактамаза, и е ограничен срещу аеробни микроорганизми. Полусинтетичните пеницилини (нафлацин, оксацилин, клоксацилин и диклоксацилин) са по-слабо активни и не са подходящи за лечение на анаеробни инфекции. Сравнително рандомизирано проучване на клиничната ефикасност на пеницилин и клиндамицин за лечение на белодробни абсцеси показва, че употребата на клиндамицин при пациенти намалява периода на треска и отделяне на храчки съответно до 4,4 срещу 7,6 дни и до 4,2 спрямо 8 дни. Средно 8 (53%) от 15 пациенти, лекувани с пеницилин, са излекувани, докато всички 13 пациенти (100%), лекувани с клиндамицин, са излекувани. Клиндамицинът е по-ефективен от пеницилина при лечението на пациенти с анаеробен белодробен абсцес. Средно ефективността на пеницилина е около 50-55%, а на клиндамицина - 94-95%. В същото време в материала е отбелязано наличието на микроорганизми, резистентни към пеницилин, което е причина за честа причина за неефективността на пеницилина и в същото време показва, че клиндамицин е лекарството на избор за терапия в началото на лечението.

T e tra c и c lin y.Тетрациклините също се характеризират с ниска

която токсичност и минимален ефект върху нормалната микрофлора. Преди това тетрациклините са били лекарства на избор, тъй като почти всички анаероби са били чувствителни към тях, но от 1955 г. насам се наблюдава повишаване на резистентността към тях. Доксициклинът и моноциклинът са по-активните от тях, но значителен брой анаероби също са резистентни към тях.

Chl o r a m f e n i c o l.Хлорамфениколът има значителен ефект върху нормалната микрофлора. Това лекарство е изключително ефективно срещу бактерии от групата B. fragilis, прониква добре в телесните течности и тъкани и има средна активност срещу други анаероби. В тази връзка той се използва като лекарство на избор за лечение на животозастрашаващи заболявания, особено тези, засягащи централната нервна система, тъй като лесно прониква през кръвно-мозъчната бариера. За съжаление, хлорамфениколът има редица недостатъци (дозозависимо инхибиране на хемопоезата). В допълнение, той може да причини идиосенкратична, независима от дозата апластична анемия. Някои щамове на C. perfringens и B. fragilis са способни да редуцират р-нитро групата на хлорамфеникола и селективно да я инактивират. Някои щамове на B. fragilis са силно резистентни към хлорамфеникол, тъй като произвеждат ацетилтрансфераза. Понастоящем употребата на хлорамфеникол за лечение на анаеробни инфекции е значително намаляла поради страха от развитие на странични хематологични ефекти и появата на много нови, ефективни лекарства.

К л и н д а м и ц и н. Клиндамицин е 7(S)-хлоро-7-дезокси производно на линкомицин. Химическата модификация на молекулата на линкомицин води до няколко предимства: по-добро усвояване от стомашно-чревния тракт, осемкратно увеличение на активността срещу аеробни грам-положителни коки, разширяване на спектъра на действие срещу много грам-положителни и грам-отрицателни анаеробни бактерии, т.к. както и протозои (Toxoplasma и Plasmodium). Терапевтичните показания за употребата на клиндамицин са доста широки (Таблица 10).

Грам-положителни бактерии. Растежът на повече от 90% от щамовете на S. aureus се инхибира в присъствието на клиндамицин в концентрация от 0,1 µg/ml. При концентрации, които лесно могат да бъдат постигнати в серума, клиндамицинът е активен срещу Str. pyogenes, Str. пневмония, ул. вириданс. Повечето щамове на дифтериен бацил също са чувствителни към клиндамицин. По отношение на грам-отрицателни аеробни бактерии Klebsiella, Escherichia coli, Proteus, Enterobacter, Shigella, Serratia, Pseudomonas, този антибиотик е неактивен. Грам-положителните анаеробни коки, включително всички видове пептококи, пептострептококи, както и пропионобактерии, бифидумбактерии и лактобацили, обикновено са силно чувствителни към клиндамицин. Към него са чувствителни и клинично значими клостридии - C. perfringens, C. tetani, както и други клостридии, често срещани при интраперитонеални и тазови инфекции.

Таблица 10. Показания за употреба на клиндамицин

Биотоп	болест
горните дихателни пътища	Тонзилит, фарингит, синузит, отит на средното ухо, скарлатина
долните дихателни пътища	Бронхит, пневмония, емпием, белодробен абсцес
Кожа и меки тъкани	Пиодермия, циреи, целулит, импетиго, абсцеси, рани
Кости и стави	Остеомиелит, септичен артрит
Тазовите органи	Ендометрит, целулит, инфекции на вагиналния маншет, тубоовариални абсцеси
Устна кухина	пародонтален абсцес, пародонтит
Септицемия, ендокардит

Грам-отрицателните анаероби - бактероиди, фузобактерии и veillonella - са силно чувствителни към клиндамицин. Той се разпределя добре в много тъкани и биологични течности, така че в повечето от тях се постигат значителни терапевтични концентрации, но не преминава кръвно-мозъчната бариера. Особен интерес представляват концентрациите на лекарството в сливиците, белодробната тъкан, апендикса, фалопиевите тръби, мускулите, кожата, костите, синовиалната течност. Клиндамицинът се концентрира в неутрофили и макрофаги. Алвеоларните макрофаги концентрират клиндамицин вътреклетъчно (30 минути след приложение, концентрацията надвишава екстрацелуларната концентрация 50 пъти). Повишава фагоцитната активност на неутрофилите и макрофагите, стимулира хемотаксиса, инхибира производството на някои бактериални токсини.

М е т р о н и д аз о л.Това химиотерапевтично лекарство се характеризира с много ниска токсичност, има бактерицидно действие срещу анаероби и не се инактивира от бактероидни бета-лактамази. Bacteroides са силно чувствителни към него, но някои анаеробни коки и анаеробни грам-положителни бацили могат да бъдат резистентни. Метронидазолът е неактивен спрямо аеробната микрофлора и при лечение на интраабдоминален сепсис трябва да се комбинира с гентамицин или някои аминогликозиди. Може да причини преходна неутропения. Комбинациите от метронидазол-гентамицин и клиндамицин-гентамицин не се различават по ефикасност при лечението на сериозни интраабдоминални инфекции.

C e f o k s i t и n.Този антибиотик принадлежи към цефалоспорините, има ниска и умерена токсичност и като правило не се инактивира от бактероидна бета-лактамаза. Въпреки че има съобщения за случаи на изолиране на резистентни щамове на анаеробни бактерии поради наличието на антибиотик-свързващи протеини, които намаляват транспортирането на лекарството в бактериалната клетка. Устойчивостта на бактериите B. fragilis към цефокситин варира от 2 до 13%. Препоръчва се за лечение на умерени коремни инфекции.

C e f o t e t a n. Това лекарство е по-активно срещу грам-отрицателни анаеробни микроорганизми в сравнение с цефокситин. Въпреки това е установено, че приблизително 8% до 25% от щамовете на B. fragilis са резистентни към него. Ефективен е при гинекологични и коремни инфекции (абсцеси, апендицит).

C e f met a z o l. По спектър е подобен на цефокситин и цефотетан (по-активен от цефокситин, но по-малко активен от цефотетан). Може да се използва за лечение на леки до умерени инфекции.

C e f a pera z o n. Характеризира се с ниска токсичност, по-висока активност в сравнение с горните три лекарства, но към него са идентифицирани от 15 до 28% резистентни щамове анаеробни бактерии. Ясно е, че не е лекарство на избор за лечение на анаеробна инфекция.

C e f t i z o k c i m. Той е безопасно и ефективно лекарство при лечение на инфекции на краката при пациенти с диабет, травматичен перитонит, апендицит.

М е р о п е н е м. Меропенем, нов карбапенем, метилиран в позиция 1, е резистентен на действието на бъбречна дехидрогеназа 1, която го разгражда. Той е около 2-4 пъти по-активен от имипенем срещу аеробни грам-отрицателни микроорганизми, включително представители на enterobacteria, hemophilus, pseudomonas, neisseria, но има малко по-малка активност срещу стафилококи, някои стрептококи и ентерококи. Неговата активност срещу грам-положителни анаеробни бактерии е подобна на тази на имипенем.

5.2. Комбинации от бета-лактамни лекарства и бета-лактамазни инхибитори

Развитието на бета-лактамазни инхибитори (клавуланат, сулбактам, тазобактам) е обещаващо направление и позволява използването на нови бета-лактамни агенти, защитени от хидролиза при едновременното им приложение: а) амоксицилин - клавуланова киселина - има по-голям спектър на антимикробна активност отколкото самостоятелно амоксицилин и се доближава по ефективност до комбинация от антибиотици - пеницилин-клоксацилин; б) тикарцилин-клавуланова киселина - разширява спектъра на антимикробната активност на антибиотика срещу бактерии, продуциращи бета-лакгамаза, като стафилококи, хемофилус, клебсиела и анаероби, включително бактероиди. Минималната инхибираща концентрация на тази смес е 16 пъти по-ниска от тази на тикарцилин; в) ампицилин-сулбактам - когато се комбинират в съотношение 1:2, спектърът им се разширява значително и включва стафилококи, хемофилус, клебсиела и повечето анаеробни бактерии. Само 1% от бактероидите са устойчиви на тази комбинация; г) цефаперазон-сулбактам - в съотношение 1:2 също значително разширява спектъра на антибактериална активност; д) пиперацилин-тазобактам. Тазобактам е нов бета-лактамен инхибитор, който действа върху много бета-лактамази. Той е по-стабилен от клавулановата киселина. Тази комбинация може да се разглежда като лекарство за емпирична монотерапия на тежки полимикробни инфекции като пневмония, интраабдоминален сепсис, некротизираща инфекция на меките тъкани, гинекологични инфекции; е) имипенем-циластатин - имипенемът е член на нов клас антибиотици, известни като карбапенеми. Прилага се в комбинация с циластатин в съотношение 1:1. Тяхната ефикасност е подобна на клиндамицин-аминогликозидите при лечението на смесена анаеробна хирургична инфекция.

5.3. Клинично значение на определянето на чувствителността на анаеробните микроорганизми към антимикробни лекарства

Нарастващата резистентност на много анаеробни бактерии към антимикробни агенти повдига въпроса как и кога е оправдано определянето на чувствителността към антибиотици. Цената на това тестване и времето, необходимо за получаване на крайния резултат, допълнително повишават важността на този проблем. Ясно е, че първоначалната терапия за анаеробни и смесени инфекции трябва да бъде емпирична. Основава се на специфичния характер на инфекциите и определен спектър от бактериална микрофлора при дадена инфекция. Трябва да се вземе предвид патофизиологичното състояние и предишната употреба на антимикробни средства, които може да са променили нормалната микробиота и лезията, както и резултатите от оцветяването по Грам. Следващата стъпка трябва да бъде ранното идентифициране на доминиращата микрофлора. Информация за спектъра на специфичната антибактериална чувствителност на доминиращата микрофлора. Информацията за спектъра на видовата антибактериална чувствителност на доминиращата микрофлора ще ни позволи да оценим адекватността на първоначално избрания режим на лечение. При лечение, ако протичането на инфекцията е неблагоприятно, е необходимо да се използва определянето на чувствителността на чиста култура към антибиотици. През 1988 г. ad hoc работна група за анаероби прегледа препоръките и показанията за тестване за антимикробна чувствителност при анаероби.

Определянето на чувствителността на анаеробите се препоръчва в следните случаи: а) е необходимо да се установят промени в чувствителността на анаеробите към определени лекарства; б) необходимостта от определяне на спектъра на действие на нови лекарства; в) при осигуряване на бактериологично наблюдение на отделен пациент. В допълнение, някои клинични ситуации също могат да диктуват необходимостта от неговото прилагане: 1) в случай на неуспешно избран начален антимикробен режим и персистиране на инфекцията; 2) когато изборът на ефективно антимикробно лекарство играе ключова роля в изхода на заболяването; .3) когато изборът на лекарството в конкретния случай е затруднен.

Трябва да се има предвид, че от клинична гледна точка има и други точки: а) повишаването на резистентността на анаеробните бактерии към антимикробни лекарства е голям клиничен проблем; б) има разногласия сред клиницистите относно клиничната ефикасност на някои лекарства срещу анаеробни инфекции; в) има несъответствия в резултатите от чувствителността на микроорганизмите към лекарства in vitro и тяхната ефективност in vivo; r) Тълкуването на резултатите, което е приемливо за аероби, може не винаги да се отнася за анаероби. Наблюдението на чувствителността/резистентността на 1200 бактериални щама, изолирани от различни биотопи, показва, че значителна част от тях са силно резистентни към най-широко използваните лекарства (Таблица 11).

Таблица 11. Устойчивост на анаеробни бактерии към

често използвани антибиотици

бактерии	антибиотици	Процент на резистентни форми
Пептострептокок	Пеницилин Еритромицин Клиндамицин
Clostridium perfringens	Пеницилин Цефокситин Метронидазол Еритромицин Клиндамицин
Bacteroides fragilis	цефокситин метронидазол еритромицин клиндамицин
Вейлонела	Пеницилин Метронидазол Еритромицин

В същото време множество проучвания са установили минималните инхибиторни концентрации на най-разпространените лекарства, които са адекватни за лечение на анаеробни инфекции (Таблица 12).

Таблица 12 Минимални инхибиторни концентрации

антибиотици за анаеробни микроорганизми

Минималната инхибираща концентрация (MIC) е най-ниската концентрация на антибиотик, която напълно инхибира растежа на микроорганизмите. Много важен проблем е стандартизацията и контрола на качеството на определяне на чувствителността на микроорганизмите към антибиотици (използвани тестове, тяхната стандартизация, подготовка на среди, реактиви, обучение на персонала, който извършва този тест, използване на референтни култури: B. fragilis-ATCC 25285; B. thetaiotaomicron - ATCC 29741; C. perfringens-ATCC 13124; E. lentum-ATCC 43055).

В акушерството и гинекологията за лечение на анаеробни инфекции се използват пеницилин, някои цефалоспорини от 3-4 поколение, линкомицин, хлорамфеникол. Най-ефективните антианаеробни лекарства обаче са представители на групата на 5-нитроимидазолите - метронидазол, тинидазол, орнидазол и клиндамицин. Ефективността на лечението само с метронидазол е 76-87% в зависимост от заболяването, а с тинидазол 78-91%. Комбинацията от имидазоли с аминогликозиди, цефалоспорини от 1-2 поколение повишава успеваемостта на лечението до 90-95%. Значителна роля в лечението на анаеробни инфекции принадлежи на клиндамицин. Комбинацията от клиндамицин с гентамицин е референтен метод за лечение на гнойно-възпалителни заболявания на женските полови органи, особено при смесени инфекции.

6. Корекция на чревната микрофлора

През миналия век нормалната чревна микрофлора на човека е била обект на активни изследвания. Многобройни изследвания са установили, че местната микрофлора на стомашно-чревния тракт играе важна роля в осигуряването на здравето на организма гостоприемник, играейки важна роля в съзряването и поддържането на функцията на имунната система, както и в осигуряването на редица метаболитни процеси. Отправна точка за развитие на дисбиотични прояви в червата е потискането на местната анаеробна микрофлора - бифидобактерии и лактобацили, както и стимулирането на възпроизводството на опортюнистична микрофлора - ентеробактерии, стафилококи, стрептококи, клостридии, кандида. И. И. Мечников формулира основните научни положения относно ролята на местната микрофлора на червата, нейната екология и изложи идеята за замяна на вредната микрофлора с полезна, за да се намали интоксикацията на тялото и да се удължи човешкият живот. Идеята на И. И. Мечников е доразвита в разработването на редица бактериални препарати, използвани за коригиране или „нормализиране“ на човешката микрофлора. Те се наричат „еубиотици“ или „пробиотици“ и съдържат живи или

изсушени бактерии от родовете Bifidobacterium и Lactobacillus. Показана е имуномодулиращата активност на редица еубиотици (отбелязва се стимулиране на производството на антитела, активността на перитонеалните макрофаги). Важно е също така, че щамовете на еубиотичните бактерии имат хромозомна резистентност към антибиотици и тяхното комбинирано приложение повишава степента на преживяемост на животните. Най-разпространените ферментирали млечни форми на лактобактерин и бифидумбактерин (4).

7. Заключение

Анаеробната инфекция е един от нерешените проблеми на съвременната медицина (особено хирургия, гинекология, терапия, стоматология). Диагностичните затруднения, неправилната оценка на клиничните данни, грешките в лечението, антибиотичната терапия и др. водят до висока смъртност при пациенти с анаеробни и смесени инфекции. Всичко това показва необходимостта от бързо отстраняване както на съществуващата липса на познания в тази област на бактериологията, така и на значителни недостатъци в диагностиката и терапията.

анаеробни организми

Аеробните и анаеробните бактерии се идентифицират предварително в течна хранителна среда чрез градиента на концентрация на O 2:
1. Задължителна аеробика(изискващи кислород) бактерии предимносъбрани в горната част на тръбата, за да абсорбират максимално количество кислород. (Изключение: микобактерии - растеж на филм върху повърхността поради восъчно-липидната мембрана.)
2. Задължително анаеробнобактериите се събират на дъното, за да избегнат кислород (или да не растат).
3. По желаниебактериите се събират главно в горната част (което е по-изгодно от гликолизата), но те могат да бъдат намерени в цялата среда, тъй като не зависят от O 2 .
4. Микроаерофилисе събират в горната част на тръбата, но техният оптимум е ниска концентрация на кислород.
5. Аеротолерантенанаеробите не реагират на концентрациите на кислород и са равномерно разпределени в епруветката.

Анаероби- организми, които получават енергия при липса на достъп на кислород чрез фосфорилиране на субстрата, крайните продукти от непълно окисление на субстрата могат да бъдат окислени, за да произведат повече енергия под формата на АТФ в присъствието на крайния акцептор на протони от организми, които извършват окислително фосфорилиране.

Анаеробите са обширна група организми, както на микро, така и на макро ниво:

анаеробни микроорганизми- обширна група прокариоти и някои протозои.
макроорганизми - гъби, водорасли, растения и някои животни (клас фораминифери, повечето хелминти (клас метили, тении, кръгли червеи (например аскариди)).

В допълнение, анаеробното окисление на глюкозата играе важна роля в работата на набраздените мускули на животни и хора (особено в състояние на тъканна хипоксия).

Класификация на анаеробите

Според класификацията, установена в микробиологията, има:

Факултативни анаероби
Капнеистични анаероби и микроаерофили
Аеротолерантни анаероби
Умерено строги анаероби
облигатни анаероби

Ако един организъм е в състояние да превключва от един метаболитен път към друг (например от анаеробно дишане към аеробно дишане и обратно), тогава той условно се нарича факултативни анаероби .

До 1991 г. имаше паралелка по микробиология капнеистични анаероби, изискваща ниска концентрация на кислород и повишена концентрация на въглероден диоксид (Brucella bovine type - Б. аборт)

Умерено строг анаеробен организъм оцелява в среда с молекулярен O 2, но не се възпроизвежда. Микроаерофилите са в състояние да оцелеят и да се размножават в среда с ниско парциално налягане на O 2 .

Ако организмът не е в състояние да "превключи" от анаеробно към аеробно дишане, но не загива в присъствието на молекулярен кислород, тогава той принадлежи към групата аеротолерантни анаероби. Например, млечна киселина и много маслени бактерии

задължителенанаеробите в присъствието на молекулярен кислород O 2 умират - например представители на рода бактерии и археи: Бактероиди, Fusobacterium, Butyrivibrio, Метанобактерия). Такива анаероби постоянно живеят в среда, лишена от кислород. Облигатните анаероби включват някои бактерии, дрожди, флагелати и реснички.

Токсичност на кислорода и неговите форми за анаеробни организми

Богатата на кислород среда е агресивна към органичните форми на живот. Това се дължи на образуването на реактивни кислородни видове в хода на живота или под въздействието на различни форми на йонизиращо лъчение, които са много по-токсични от молекулярния кислород O 2 . Факторът, който определя жизнеспособността на организма в кислородна среда, е наличието на функционална антиоксидантна система, способна да елиминира: супероксиден анион (O 2 -), водороден пероксид (H 2 O 2), синглетен кислород (O .) и също и молекулярен кислород (O 2) от вътрешната среда на тялото. Най-често такава защита се осигурява от един или повече ензими:

супероксид дисмутаза елиминиращ супероксиден анион (O 2 -) без енергийни ползи за тялото
каталаза, елиминираща водороден пероксид (H 2 O 2) без енергийни ползи за тялото
цитохром- ензим, отговорен за преноса на електрони от NAD H към O 2. Този процес осигурява значителна енергийна полза за тялото.

Аеробните организми най-често съдържат три цитохрома, факултативните анаероби - един или два, задължителните анаероби не съдържат цитохроми.

Анаеробните микроорганизми могат активно да влияят на околната среда, създавайки подходящ редокс потенциал на средата (напр. Cl.perfringens). Някои засадени култури от анаеробни микроорганизми, преди да започнат да се размножават, понижават pH 2 0 от стойност до , защитавайки се с редукционна бариера, други - аеротолерантни - произвеждат водороден пероксид по време на жизнената си дейност, повишавайки pH 2 0.

В същото време гликолизата е характерна само за анаероби, които в зависимост от крайните продукти на реакцията се разделят на няколко вида ферментация:

млечнокисела ферментация Лактобацилус ,Стрептокок , Бифидобактерия, както и някои тъкани на многоклетъчни животни и хора.
алкохолна ферментация - захаромицети, кандида (организми от гъбното царство)
мравчена киселина - семейство ентеробактерии
маслена - някои видове клостридии
пропионова киселина - пропионобактерии (напр. Propionibacterium acnes)
ферментация с отделяне на молекулярен водород - някои видове Clostridium, Stickland ферментация
метанова ферментация - напр. Метанобактерия

В резултат на разграждането на глюкозата се изразходват 2 молекули и се синтезират 4 молекули АТФ. Така общият добив на АТФ е 2 молекули АТФ и 2 молекули NAD·H 2 . Пируватът, получен по време на реакцията, се използва от клетката по различни начини, в зависимост от това какъв тип ферментация следва.

Антагонизъм на ферментация и гниене

В процеса на еволюцията се формира и консолидира биологичният антагонизъм на ферментационната и гнилостната микрофлора:

Разграждането на въглехидратите от микроорганизми е придружено от значително намаляване на околната среда, докато разграждането на протеини и аминокиселини е придружено от увеличаване (алкализиране). Адаптирането на всеки от организмите към определена реакция на околната среда играе важна роля в природата и човешкия живот, например поради процесите на ферментация се предотвратява гниенето на силаж, ферментирали зеленчуци и млечни продукти.

Култивиране на анаеробни организми

Изолиране на чиста култура от анаероби схематично

Култивирането на анаеробни организми е основно задача на микробиологията.

За култивирането на анаероби се използват специални методи, чиято същност е да се отстрани въздухът или да се замени със специализирана газова смес (или инертни газове) в запечатани термостати. - анаеростати .

Друг начин за отглеждане на анаероби (най-често микроорганизми) върху хранителни среди е добавянето на редуциращи вещества (глюкоза, натриева мравчена киселина и др.), Които намаляват редокс потенциала.

Обичайна хранителна среда за анаеробни организми

За обща среда Уилсън - Блеъросновата е агар-агар с добавка на глюкоза, натриев сулфит и железен хлорид. Клостридиите образуват черни колонии върху тази среда чрез редуциране на сулфита до сулфиден анион, който се комбинира с железни (II) катиони, за да даде черна сол. По правило в тази среда в дълбочината на агарната колона се появяват черни колонии.

сряда Кита - Тароцисе състои от месо-пептонен бульон, 0,5% глюкоза и парчета черен дроб или мляно месо за абсорбиране на кислород от околната среда. Преди сеитба средата се нагрява във вряща водна баня за 20-30 минути, за да се отстрани въздухът от средата. След сеитбата хранителната среда веднага се напълва със слой парафин или парафиново масло, за да се изолира от достъпа на кислород.

Общокултурни методи за анаеробни организми

Газов пакет- системата химически осигурява постоянството на газовата смес, приемлива за развитието на повечето анаеробни микроорганизми. В запечатан контейнер водата реагира с таблетки натриев борохидрид и натриев бикарбонат, за да образува водород и въглероден диоксид. След това водородът реагира с кислорода на газовата смес върху паладиев катализатор, за да образува вода, която вече реагира повторно с хидролизата на борохидрида.

Този метод е предложен от Brewer и Olgaer през 1965 г. Разработчиците представиха саше за генериране на водород за еднократна употреба, което по-късно беше подобрено до сашета за генериране на въглероден диоксид, съдържащи вътрешен катализатор.

Метод на Цайслеризползвани за изолиране на чисти култури от спорообразуващи анаероби. За да направите това, инокулирайте върху средата Kitt-Tarozzi, загрейте я за 20 минути при 80 ° C (за унищожаване на вегетативната форма), напълнете средата с вазелиново масло и инкубирайте 24 часа в термостат. След това се извършва посяване върху захарно-кръвен агар за получаване на чисти култури. След 24-часово култивиране се изследват колониите, които представляват интерес - те се субкултивират върху среда Kitt-Tarozzi (с последващ контрол на чистотата на изолираната култура).

Метод на Fortner

Метод на Fortner- инокулациите се правят върху петриево блюдо с удебелен слой от средата, разделен наполовина от тясна бразда, изрязана в агара. Едната половина се посява с култура от аеробни бактерии, другата половина се инокулира с анаеробни бактерии. Ръбовете на чашата се пълнят с парафин и се инкубират в термостат. Първоначално се наблюдава растеж на аеробната микрофлора, а след това (след поглъщане на кислород) растежът на аеробната микрофлора рязко спира и започва растеж на анаеробната микрофлора.

Метод на Вайнбергизползвани за получаване на чисти култури от облигатни анаероби. Култури, отгледани върху среда Kitta-Tarozzi, се прехвърлят в захарен бульон. След това с еднократна пипета на Пастьор материалът се прехвърля в тесни епруветки (епруветки на Винял) със захарен месо-пептонен агар, като пипетата се потапя до дъното на епруветката. Инокулираните епруветки се охлаждат бързо, което прави възможно фиксирането на бактериалния материал в дебелината на втвърдения агар. Епруветките се инкубират в термостат и след това се изследват порасналите колонии. Когато се открие интересна колония, на нейно място се прави разрез, материалът бързо се взема и се инокулира върху средата Kitta-Tarozzi (с последващ контрол на чистотата на изолираната култура).

Метод на Перец

Метод на Перец- бактериална култура се въвежда в разтопения и охладен захарен агар-агар и се излива под стъкло, поставено върху коркови пръчици (или парчета кибрит) в петриево блюдо. Методът е най-малко надеждният от всички, но е доста лесен за използване.

Диференциално - диагностични хранителни среди

среди gissa("пъстър ред")
сряда Ресел(Ръсел)
сряда Плоскиреваили бактоагар "Ж"
Бисмутов сулфитен агар

Медиите му: Към 1% пептонна вода добавете 0,5% разтвор на определен въглехидрат (глюкоза, лактоза, малтоза, манитол, захароза и др.) и киселинно-алкалния индикатор на Андреде, изсипете в епруветки, в които е поставен поплавък за улавяне на газове продукти, образувани при разлагането на въглеводороди.

Ресел сряда(Russell) се използва за изследване на биохимичните свойства на ентеробактериите (Shigella, Salmonella). Съдържа хранителен агар-агар, лактоза, глюкоза и индикатор (бромотимолово синьо). Цветът на средата е тревисто зелен. Обикновено се приготвя в епруветки от 5 ml със скосена повърхност. Сеитбата се извършва чрез инжектиране в дълбочината на колоната и удар по скосената повърхност.

Сряда Плоскирев(Bactoagar Zh) е диференциално диагностична и селективна среда, тъй като инхибира растежа на много микроорганизми и насърчава растежа на патогенни бактерии (причинители на коремен тиф, паратиф, дизентерия). Лактоза-отрицателните бактерии образуват безцветни колонии върху тази среда, докато лактозо-позитивните бактерии образуват червени колонии. Средата съдържа агар, лактоза, брилянтно зелено, жлъчни соли, минерални соли, индикатор (неутрално червено).

Бисмутов сулфитен агарПредназначен е за изолиране на салмонела в чиста форма от заразен материал. Съдържа триптик, глюкоза, растежни фактори на салмонела, брилянтно зелено и агар. Различните свойства на средата се основават на способността на Salmonella да произвежда сероводород, на тяхната устойчивост към присъствието на сулфид, брилянтно зелено и бисмутов цитрат. Колониите са маркирани в черен цвят на бисмутов сулфид (техниката е подобна на средата Уилсън - Блеър).

Метаболизъм на анаеробни организми

Метаболизмът на анаеробните организми има няколко отделни подгрупи:

Анаеробен енергиен метаболизъм в тъканите човекИ животни

Анаеробно и аеробно производство на енергия в човешките тъкани

Някои тъкани на животни и хора се характеризират с повишена устойчивост на хипоксия (особено мускулна тъкан). При нормални условия синтезът на АТФ се извършва аеробно, а по време на интензивна мускулна активност, когато доставката на кислород до мускулите е затруднена, в състояние на хипоксия, както и по време на възпалителни реакции в тъканите, доминират анаеробните механизми на регенерация на АТФ. В скелетните мускули са идентифицирани 3 вида анаеробни и само един аеробен път на регенерация на АТФ.

3 вида анаеробен път на синтез на АТФ

Анаеробните включват:

Механизъм на креатин фосфатаза (фосфогенен или алактатен) - повторно фосфорилиране между креатин фосфат и ADP
Миокиназа - синтез (иначе ресинтез) ATP в реакцията на трансфосфорилиране на 2 молекули ADP (аденилат циклаза)
Гликолитично - анаеробно разграждане на запасите от кръвна глюкоза или гликоген, завършващо с образуването

КАТЕГОРИИ

Прожекция

Ултразвук на крайници

Видове ултразвук

ултразвук на корема

ултразвук на гръдния кош

ПОПУЛЯРНИ СТАТИИ

	Отрицанието не с глаголи (в лична форма, в инфинитив, под формата на герундий) се пише отделно: не вземай, не беше, без да знае, бавно
	Презентация, доклад основните характеристики на философията на Ренесанса
	Художествен стил
	Децата на земята Презентация ние сме децата на земята за градината
	Презентация по темата за бариерите в комуникацията, работата беше извършена от ученици. Без комуникация ние се затваряме в себе си.

2023 "kingad.ru" - ултразвуково изследване на човешки органи